Nature.com ला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद. तुम्ही वापरत असलेल्या ब्राउझर आवृत्तीला मर्यादित CSS सपोर्ट आहे. सर्वोत्तम अनुभवासाठी, आम्ही शिफारस करतो की तुम्ही अपडेटेड ब्राउझर वापरा (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमध्ये कंपॅटिबिलिटी मोड अक्षम करा). दरम्यान, सतत सपोर्ट सुनिश्चित करण्यासाठी, आम्ही साइटला स्टाईल आणि जावास्क्रिप्टशिवाय रेंडर करू.
अनियंत्रित रक्तस्त्राव हे मृत्यूच्या प्रमुख कारणांपैकी एक आहे. लढाई, वाहतूक अपघात आणि मृत्यू कमी करण्याच्या ऑपरेशन्स दरम्यान प्रथमोपचार म्हणून जलद रक्तस्राव प्राप्त केल्याने व्यक्तीचे अस्तित्व सुनिश्चित होते. साध्या हेमोस्टॅटिक फिल्म-फॉर्मिंग कंपोझिशन (HFFC) पासून सतत टप्प्यात मिळवलेले नॅनोपोरस फायबर-रिइन्फोर्स्ड कंपोझिट स्कॅफोल्ड (NFRCS) हे हेमोस्टॅसिसला चालना देऊ शकते आणि वाढवू शकते. NFRCS चा विकास ड्रॅगनफ्लायच्या पंखाच्या डिझाइनवर आधारित आहे. ड्रॅगनफ्लायच्या पंखांच्या संरचनेत ट्रान्सव्हर्स आणि रेखांश पंख असतात आणि सूक्ष्म संरचनेची अखंडता राखण्यासाठी पंखांचे पडदे एकमेकांशी जोडलेले असतात. HFFC फायबरच्या पृष्ठभागावर नॅनोमीटर जाडीच्या फिल्मने एकसारखेपणाने लेप करते आणि यादृच्छिकपणे वितरित कापसाच्या जाडी (Ct) (विखुरलेला टप्पा) ला जोडून नॅनोपोरस रचना तयार करते. सतत आणि विखुरलेल्या टप्प्यांचे संयोजन व्यावसायिकरित्या उपलब्ध उत्पादनांच्या तुलनेत उत्पादनाची किंमत दहा पट कमी करते. सुधारित NFRCS (टॅम्पन्स किंवा रिस्टबँड) विविध बायोमेडिकल अनुप्रयोगांमध्ये वापरले जाऊ शकतात. इन व्हिव्हो अभ्यासातून असा निष्कर्ष निघाला आहे की विकसित Cp NFRCS वापराच्या ठिकाणी कोग्युलेशन प्रक्रिया सुरू करते आणि वाढवते. NFRCS सूक्ष्म पर्यावरणाचे नियमन करू शकते आणि त्याच्या नॅनोपोरस रचनेमुळे पेशीय पातळीवर कार्य करू शकते ज्यामुळे एक्सिजन जखमेच्या मॉडेलमध्ये जखमा चांगल्या प्रकारे बरे होतात.
लढाई, शस्त्रक्रियेदरम्यान आणि आपत्कालीन परिस्थितीत अनियंत्रित रक्तस्त्राव जखमींच्या जीवाला गंभीर धोका निर्माण करू शकतो1. या परिस्थितींमुळे परिधीय रक्तवहिन्यासंबंधी प्रतिकारशक्तीमध्ये एकूण वाढ होते, ज्यामुळे रक्तस्त्राव शॉक होतो. शस्त्रक्रियेदरम्यान आणि नंतर रक्तस्त्राव नियंत्रित करण्यासाठी योग्य उपाययोजना संभाव्यतः जीवघेण्या मानल्या जातात2,3. मोठ्या रक्तवाहिन्यांना झालेल्या नुकसानामुळे मोठ्या प्रमाणात रक्तस्त्राव होतो, परिणामी युद्धात मृत्युदर ≤ 50% आणि शस्त्रक्रियेदरम्यान 31% होतो1. मोठ्या प्रमाणात रक्तस्त्राव झाल्यामुळे शरीराचे प्रमाण कमी होते, ज्यामुळे हृदयाचे उत्पादन कमी होते. एकूण परिधीय रक्तवहिन्यासंबंधी प्रतिकार वाढणे आणि मायक्रोसर्कुलेशनमध्ये प्रगतीशील बिघाड झाल्यामुळे जीवन-समर्थक अवयवांमध्ये हायपोक्सिया होतो. प्रभावी हस्तक्षेपाशिवाय स्थिती चालू राहिल्यास रक्तस्त्राव धक्का येऊ शकतो1,4,5. इतर गुंतागुंतांमध्ये हायपोथर्मिया आणि मेटाबॉलिक अॅसिडोसिसची प्रगती तसेच रक्तस्त्राव प्रक्रियेत अडथळा आणणारा रक्तस्त्राव विकार यांचा समावेश आहे. गंभीर रक्तस्त्राव धक्का मृत्यूच्या उच्च जोखमीशी संबंधित आहे6,7,8. ग्रेड III (प्रोग्रेसिव्ह) शॉकमध्ये, शस्त्रक्रियेच्या दरम्यान आणि शस्त्रक्रियेनंतर रुग्णाच्या जीवित राहण्यासाठी आणि मृत्युदरात रक्त संक्रमण आवश्यक आहे. वरील सर्व जीवघेण्या परिस्थितींवर मात करण्यासाठी, आम्ही नॅनोपोरस फायबर-रिइन्फोर्स्ड कंपोझिट स्कॅफोल्ड (NFRCS) विकसित केले आहे जे पाण्यात विरघळणारे हेमोस्टॅटिक पॉलिमरच्या संयोजनाचा वापर करून किमान पॉलिमर एकाग्रता (0.5%) वापरते.
फायबर रीइन्फोर्समेंटच्या वापराने, किफायतशीर उत्पादने विकसित करता येतात. यादृच्छिकपणे मांडलेले तंतू ड्रॅगनफ्लायच्या पंखांच्या रचनेसारखे दिसतात, पंखांवरील आडव्या आणि उभ्या पट्ट्यांमुळे संतुलित होतात. पंखांच्या आडव्या आणि रेखांशाच्या शिरा पंखांच्या पडद्याशी संवाद साधतात (आकृती १). NFRCS मध्ये चांगल्या शारीरिक आणि यांत्रिक ताकदीसह स्कॅफोल्ड सिस्टम म्हणून प्रबलित Ct असते (आकृती १). परवडणारी क्षमता आणि कारागिरीमुळे, सर्जन ऑपरेशन्स आणि ड्रेसिंग दरम्यान कापसाच्या धाग्याचे गेज (Ct) वापरण्यास प्राधान्य देतात. म्हणूनच, त्याचे अनेक फायदे लक्षात घेता, ज्यामध्ये 90% पेक्षा जास्त क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टॅटिक क्रियाकलाप वाढविण्यात मदत करते) यांचा समावेश आहे, Ct चा वापर NFRCS9,10 च्या सांगाड्याच्या प्रणाली म्हणून केला गेला. म्हणूनच, त्याचे अनेक फायदे लक्षात घेता, ज्यामध्ये 90% पेक्षा जास्त क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टॅटिक क्रियाकलाप वाढविण्यात मदत करते) यांचा समावेश आहे, Ct चा वापर NFRCS9,10 च्या सांगाड्याच्या प्रणाली म्हणून केला गेला. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > ९०% кристаллической целюлозы (участвует в гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. म्हणून, त्याचे अनेक फायदे लक्षात घेता, ज्यामध्ये >९०% क्रिस्टलीय सेल्युलोज (वाढत्या रक्तस्थ क्रियाकलापात सामील) यांचा समावेश आहे, Ct चा वापर NFRCS कंकाल प्रणाली म्हणून केला गेला.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血活性）,Ct眫蔢血活性）,Ct眫10FR的骨架系统.因此,考虑到它的多重益处，包括> ९०%म्हणून, ९०% पेक्षा जास्त क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टॅटिक क्रियाकलाप वाढविण्यास मदत करते) यासह त्याचे अनेक फायदे लक्षात घेता, NFRCS9,10 साठी Ct चा वापर स्कॅफोल्ड म्हणून केला गेला.Ct वरवरचे लेपित होते (नॅनो-जाड फिल्म निर्मिती दिसून आली) आणि हेमोस्टॅटिक फिल्म-फॉर्मिंग कंपोझिशन (HFFC) द्वारे एकमेकांशी जोडलेले होते. HFFC मॅट्रिजेलसारखे काम करते, यादृच्छिकपणे ठेवलेल्या Ct ला एकत्र धरून ठेवते. विकसित डिझाइन विखुरलेल्या टप्प्यात (तंतूंना मजबुतीकरण) ताण प्रसारित करते. किमान पॉलिमर सांद्रता वापरून चांगल्या यांत्रिक शक्तीसह नॅनोपोरस संरचना मिळवणे कठीण आहे. याव्यतिरिक्त, वेगवेगळ्या बायोमेडिकल अनुप्रयोगांसाठी वेगवेगळे साचे सानुकूलित करणे सोपे नाही.
आकृतीमध्ये ड्रॅगनफ्लायच्या पंखांच्या रचनेवर आधारित NFRCS डिझाइनचा आकृती दाखवण्यात आली आहे (A). ही प्रतिमा ड्रॅगनफ्लायच्या पंखांच्या रचनेची तुलनात्मक सादृश्यता दर्शवते (पंखांच्या छेदनबिंदू आणि रेखांशाच्या शिरा एकमेकांशी जोडलेल्या असतात) आणि Cp NFRCS (B) चा क्रॉस-सेक्शनल फोटोमायक्रोग्राफ. NFRCS चे योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व.
वरील मर्यादा दूर करण्यासाठी HFFC चा सततचा टप्पा म्हणून वापर करून NFRC विकसित करण्यात आले. HFFC मध्ये विविध फिल्म-फॉर्मिंग हेमोस्टॅटिक पॉलिमर असतात ज्यात चिटोसन (मुख्य हेमोस्टॅटिक पॉलिमर म्हणून) मिथाइलसेल्युलोज (MC), हायड्रॉक्सीप्रोपिल मिथाइलसेल्युलोज (HPMC 50 cp) आणि पॉलीव्हिनाइल अल्कोहोल (PVA)) (125 kDa) यांचा समावेश आहे जो थ्रोम्बस निर्मितीला प्रोत्साहन देणारा सपोर्ट पॉलिमर आहे. निर्मिती. पॉलीव्हिनाइलपायरोलिडाइन K30 (PVP K30) जोडल्याने NFRCS ची ओलावा शोषण क्षमता सुधारली. बाँडेड पॉलिमर मिश्रणांमध्ये पॉलिमर क्रॉसलिंकिंग सुधारण्यासाठी पॉलीथिलीन ग्लायकॉल 400 (PEG 400) जोडण्यात आले. तीन वेगवेगळ्या HFFC हेमोस्टॅटिक रचना (Cm HFFC, Ch HFFC आणि Cp HFFC), म्हणजे MC (Cm) सह चिटोसन, HPMC (Ch) सह चिटोसन आणि PVA (Cp) सह चिटोसन, Ct वर लागू केले गेले. विविध इन विट्रो आणि इन व्हिव्हो कॅरेक्टरायझेशन अभ्यासांनी NFRCS च्या हेमोस्टॅटिक आणि जखमा बरे करण्याच्या क्रियाकलापांची पुष्टी केली आहे. NFRCS द्वारे ऑफर केलेल्या संमिश्र साहित्याचा वापर विशिष्ट गरजा पूर्ण करण्यासाठी विविध प्रकारचे मचान सानुकूलित करण्यासाठी केला जाऊ शकतो.
याव्यतिरिक्त, NFRCS ला पट्टी किंवा रोल म्हणून बदलता येते जेणेकरून खालच्या अंगांच्या आणि शरीराच्या इतर भागांच्या संपूर्ण दुखापतीच्या क्षेत्राला झाकता येईल. विशेषतः लढाऊ अवयवांच्या दुखापतींसाठी, डिझाइन केलेले NFRCS डिझाइन अर्ध्या हाताने किंवा पूर्ण पायाने बदलता येते (पूरक आकृती S11). NFRCS ला टिश्यू ग्लूसह मनगटाच्या पट्ट्यात बनवता येते, ज्याचा वापर गंभीर आत्महत्येच्या मनगटाच्या दुखापतींमधून रक्तस्त्राव थांबवण्यासाठी केला जाऊ शकतो. आमचे मुख्य ध्येय शक्य तितके कमी पॉलिमर असलेले NFRCS विकसित करणे आहे जे मोठ्या लोकसंख्येला (दारिद्र्यरेषेखालील) पोहोचवता येईल आणि ते प्रथमोपचार किटमध्ये ठेवता येईल. डिझाइनमध्ये साधे, कार्यक्षम आणि किफायतशीर, NFRCS स्थानिक समुदायांना फायदा देते आणि जागतिक प्रभाव पाडू शकते.
चिटोसन (आण्विक वजन ८० केडीए) आणि राजगिरा मर्क, भारत येथून खरेदी केले गेले. हायड्रॉक्सीप्रोपिल मिथाइलसेल्युलोज ५० सीपी, पॉलीथिलीन ग्लायकॉल ४०० आणि मिथाइलसेल्युलोज मुंबई येथील लोबा केमी प्रायव्हेट एलएलसी येथून खरेदी केले गेले. पॉलीव्हिनाइल अल्कोहोल (आण्विक वजन १२५ केडीए) (८७-९०% हायड्रोलायझ्ड) गुजरात येथील नॅशनल केमिकल्स येथून खरेदी केले गेले. पॉलीव्हिनाइलपायरोलिडाइन के३० मुंबई येथील मोलिकेम येथून खरेदी केले गेले, निर्जंतुकीकरण केलेले स्वॅब रामराजू सर्जरी कॉटन मिल्स लिमिटेड, तामिळनाडू येथून खरेदी केले गेले, मिली क्यू वॉटर (डायरेक्ट-क्यू३ जल शुद्धीकरण प्रणाली, मर्क, भारत) वाहक म्हणून वापरला गेला.
NFRCS लायोफिलायझेशन पद्धती वापरून विकसित केले गेले11,12. सर्व HFFC रचना (तक्ता 1) यांत्रिक स्टिरर वापरून तयार केल्या गेल्या. यांत्रिक स्टिररवर 800 rpm वर सतत ढवळत पाण्यात 1% एसिटिक आम्ल वापरून चिटोसनचे 0.5% द्रावण तयार करा. तक्ता 1 मध्ये दर्शविलेल्या लोड केलेल्या पॉलिमरचे अचूक वजन चिटोसन द्रावणात जोडले गेले आणि स्पष्ट पॉलिमर द्रावण मिळेपर्यंत ढवळले गेले. तक्ता 1 मध्ये दर्शविलेल्या प्रमाणात परिणामी मिश्रणात PVP K30 आणि PEG 400 जोडले गेले आणि स्पष्ट चिकट पॉलिमर द्रावण मिळेपर्यंत ढवळत राहिले. पॉलिमर मिश्रणातून अडकलेले हवेचे बुडबुडे काढून टाकण्यासाठी परिणामी पॉलिमर द्रावणाचे बाथ 60 मिनिटांसाठी सोनिकेट केले गेले. पूरक आकृती S1(b) मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, Ct 5 मिली HFFC सह पूरक असलेल्या 6-वेल प्लेट (मोल्ड) च्या प्रत्येक विहिरीत समान रीतीने वितरित केले गेले.
सीटी नेटवर्कमध्ये एचएफएफसीचे एकसमान ओलेकरण आणि वितरण साध्य करण्यासाठी सहा-वेल प्लेटला 60 मिनिटांसाठी सोनिकेट केले गेले. नंतर सहा-वेल प्लेट -20°C वर 8-12 तासांसाठी गोठवा. NFRCS चे विविध फॉर्म्युलेशन मिळविण्यासाठी फ्रीझ प्लेट्सना 48 तासांसाठी लायोफिलायझ केले गेले. टॅम्पन्स किंवा दंडगोलाकार टॅम्पन्स किंवा वेगवेगळ्या अनुप्रयोगांसाठी इतर कोणताही आकार यासारखे वेगवेगळे आकार आणि रचना तयार करण्यासाठी समान प्रक्रिया वापरली जाते.
अचूक वजन केलेले चिटोसन (८० केडीए) (३%) हे चुंबकीय स्टिरर वापरून १% एसिटिक आम्लामध्ये विरघळवले जाते. चिटोसनच्या परिणामी द्रावणात १% पीईजी ४०० जोडले गेले आणि ३० मिनिटे ढवळले गेले. परिणामी द्रावण चौरस किंवा आयताकृती कंटेनरमध्ये ओता आणि -८०°C वर १२ तासांसाठी गोठवा. सच्छिद्र Cs१३ मिळविण्यासाठी गोठलेले नमुने ४८ तासांसाठी लायोफिलायझ केले गेले.
विकसित केलेल्या NFRCS वर फूरियर ट्रान्सफॉर्म इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (FTIR) (शिमाडझू 8400 s FTIR, टोकियो, जपान) वापरून इतर पॉलिमरसह चिटोसनची रासायनिक सुसंगतता पुष्टी करण्यासाठी प्रयोग करण्यात आले14,15. सर्व चाचणी केलेल्या नमुन्यांचे FTIR स्पेक्ट्रा (400 ते 4000 cm-1 पर्यंत वर्णक्रमीय श्रेणीची रुंदी) 32 स्कॅन करून प्राप्त करण्यात आले.
सर्व फॉर्म्युलेशनसाठी रक्त शोषण दर (BAR) चे मूल्यांकन चेन आणि इतरांनी वर्णन केलेल्या पद्धतीचा वापर करून केले गेले. 16 मध्ये थोडे बदल करून. सर्व रचनांचे विकसित NFRKs व्हॅक्यूम ओव्हनमध्ये रात्रभर 105°C वर वाळवले गेले जेणेकरून उर्वरित द्रावक काढून टाकता येईल. 30 mg NFRCS (प्रारंभिक नमुना वजन - W0) आणि 30 mg Ct (सकारात्मक नियंत्रण) 3.8% सोडियम सायट्रेटचे प्रीमिक्स असलेल्या वेगवेगळ्या डिशमध्ये ठेवण्यात आले. पूर्वनिर्धारित वेळेच्या अंतराने, म्हणजेच 5, 10, 20, 30, 40 आणि 60 सेकंदांनी, NFRCS काढून टाकण्यात आले आणि 30 सेकंदांसाठी Ct वर नमुने ठेवून त्यांच्या पृष्ठभागावर अवशोषित रक्त साफ केले गेले. प्रत्येक वेळी NFRCS 16 द्वारे शोषलेल्या रक्ताचे अंतिम वजन (W1) विचारात घेतले गेले. खालील सूत्र वापरून BAR टक्केवारीची गणना करा:
रक्त गोठण्याचा वेळ (BCT) वांग आणि इतरांनी नोंदवल्याप्रमाणे निश्चित केला. १७. संपूर्ण रक्त (उंदराचे रक्त ३.८% सोडियम सायट्रेटसह प्रीमिक्स केलेले) NFRCS च्या उपस्थितीत गोठण्यासाठी लागणारा वेळ चाचणी नमुन्याचा BCT म्हणून मोजला गेला. विविध NFRCS घटक (३० मिलीग्राम) १० मिली स्क्रू कॅपच्या कुपींमध्ये ठेवण्यात आले आणि ३७°C वर उष्मायन करण्यात आले. कुपीमध्ये रक्त (०.५ मिली) जोडले गेले आणि रक्त गोठणे सक्रिय करण्यासाठी ०.३ मिली ०.२ M CaCl2 जोडले गेले. शेवटी, घट्ट गुठळी तयार होईपर्यंत दर १५ सेकंदांनी (१८०° पर्यंत) कुपी उलटा करा. नमुन्याचा BCT फ्लिप व्हेलच्या संख्येवरून अंदाजे केला जातो १७,१८. BCT वर आधारित, पुढील वैशिष्ट्यीकरण अभ्यासासाठी NFRCS Cm, Ch आणि Cp मधील दोन इष्टतम रचना निवडल्या गेल्या.
ली आणि इतरांनी वर्णन केलेल्या पद्धतीचा वापर करून Ch NFRCS आणि Cp NFRCS रचनांचे BCT निश्चित केले गेले. 19. 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS आणि Cs (पॉझिटिव्ह कंट्रोल) वेगवेगळ्या पेट्री डिशमध्ये (37 °C) ठेवा. रक्त गोठण्याची प्रक्रिया सुरू करण्यासाठी 3.8% सोडियम सायट्रेट असलेले रक्त 0.2 M CaCl2 सह 10:1 आकारमानाच्या प्रमाणात मिसळले गेले. 0.2 M CaCl2 उंदराच्या रक्ताचे 20 µl नमुन्याच्या पृष्ठभागावर लावले गेले आणि रिकाम्या पेट्री डिशमध्ये ठेवले गेले. नियंत्रणासाठी Ct शिवाय रिकाम्या पेट्री डिशमध्ये रक्त ओतले गेले. 0, 3 आणि 5 मिनिटांच्या निश्चित अंतराने, गठ्ठ्याला त्रास न देता डिश असलेल्या नमुन्यात 10 मिली डिआयोनाइज्ड (DI) पाणी घालून गठ्ठा थांबवा. अगोलाकार एरिथ्रोसाइट्स (एरिथ्रोसाइट्स) विआयोनाइज्ड पाण्याच्या उपस्थितीत हेमोलिसिस करतात आणि हिमोग्लोबिन सोडतात. वेगवेगळ्या वेळेच्या बिंदूंवर (HA(t)) हिमोग्लोबिनचे मोजमाप UV-Vis स्पेक्ट्रोफोटोमीटर वापरून 540 nm (λmax हिमोग्लोबिन) केले गेले. 10 मिली विआयनीकृत पाण्यात 20 µl रक्ताच्या 0 मिनिटात हिमोग्लोबिनचे परिपूर्ण शोषण (AH(0)) हे संदर्भ मानक म्हणून घेतले गेले. रक्ताच्या समान तुकडी वापरून HA(t)/HA(0) या गुणोत्तरावरून जमा झालेल्या रक्ताचे सापेक्ष हिमोग्लोबिन अपटेक (RHA) मोजले गेले.
टेक्सचर अॅनालायझर (टेक्सचर प्रो सीटी व्ही१.३ बिल्ड १५, ब्रुकफील्ड, यूएसए) वापरून, खराब झालेल्या ऊतींना NFRK चे चिकटवण्याचे गुणधर्म निश्चित केले गेले. डुकराच्या त्वचेच्या आतील बाजूस (चरबीचा थर न लावता) उघड्या तळाच्या दंडगोलाकार डिश दाबा. डुकराच्या त्वचेला चिकटवण्यासाठी नमुने (Ch NFRCS आणि Cp NFRCS) कॅन्युलाद्वारे दंडगोलाकार साच्यात लावले गेले. खोलीच्या तापमानावर (RT) (२५° सेल्सिअस) ३ मिनिटांच्या उष्मायनानंतर, NFRCS चिकटवण्याची ताकद ०.५ मिमी/सेकंद या स्थिर दराने नोंदवली गेली.
सर्जिकल सीलंटचे मुख्य वैशिष्ट्य म्हणजे रक्त गोठणे वाढवणे आणि रक्तस्त्राव कमी करणे. NFRCS मध्ये लॉसलेस कोग्युलेशनचे मूल्यांकन पूर्वी प्रकाशित केलेल्या पद्धतीचा वापर करून थोडेसे बदल करून करण्यात आले 19. सेंट्रीफ्यूज ट्यूबच्या एका बाजूला 8 × 5 mm2 छिद्र असलेली मायक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूब (2 मिली) (आतील व्यास 10 मिमी) बनवा (खुल्या जखमेचे प्रतिनिधित्व करते). उघडणे बंद करण्यासाठी NFRCS चा वापर केला जातो आणि बाहेरील कडा सील करण्यासाठी टेप वापरला जातो. 3.8% सोडियम सायट्रेट प्रीमिक्स असलेल्या मायक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये 0.2 M CaCl2 चे 20 µl जोडा. 10 मिनिटांनंतर, मायक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूब डिशमधून काढून टाकण्यात आल्या आणि NFRK मधून रक्त बाहेर पडल्यामुळे डिशच्या वस्तुमानात वाढ निश्चित करण्यात आली (n = 3). रक्तस्त्राव Ch NFRCS आणि Cp NFRCS ची तुलना Cs शी करण्यात आली.
मिश्रा आणि चौधरी यांनी वर्णन केलेल्या पद्धतीनुसार NFRCS ची ओली अखंडता किरकोळ बदलांसह निश्चित करण्यात आली. NFRCS ला १०० मिली एर्लेनमेयर फ्लास्कमध्ये ५० मिली पाणी घालून ठेवा आणि वरचा भाग न बनवता ६० सेकंद फिरवा. संकलनावर आधारित भौतिक अखंडतेसाठी नमुन्यांची दृश्य तपासणी आणि प्राधान्यक्रम.
पूर्वी प्रकाशित पद्धती वापरून किरकोळ बदलांसह HFFC ची Ct ला बांधण्याची ताकद अभ्यासण्यात आली. milliQ पाण्याच्या (Ct) उपस्थितीत NFRK ला ध्वनिक लहरींच्या (बाह्य उत्तेजनाच्या) संपर्कात आणून पृष्ठभागाच्या आवरणाच्या अखंडतेचे मूल्यांकन करण्यात आले. विकसित NFRCS Ch NFRCS आणि Cp NFRCS पाण्याने भरलेल्या बीकरमध्ये ठेवण्यात आले आणि अनुक्रमे 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 आणि 30 मिनिटांसाठी सोनिकेटेड केले गेले. कोरडे झाल्यानंतर, NFRCS च्या सुरुवातीच्या आणि अंतिम वजनातील टक्केवारीतील फरकाचा वापर मटेरियलच्या टक्केवारीच्या नुकसानाची (HFFC) गणना करण्यासाठी करण्यात आला. इन विट्रो BCT ने पृष्ठभागावरील मटेरियलच्या बंधन शक्ती किंवा नुकसानाला आणखी समर्थन दिले. Ct ला HFFC बंधनाची कार्यक्षमता रक्त गोठणे आणि Ct22 च्या पृष्ठभागावर एक लवचिक आवरण प्रदान करते.
विकसित NFRCS ची एकरूपता NFRCS च्या यादृच्छिकपणे निवडलेल्या सामान्य ठिकाणांमधून घेतलेल्या नमुन्यांच्या (30 mg) BCT द्वारे निश्चित केली गेली. NFRCS अनुपालन निश्चित करण्यासाठी पूर्वी नमूद केलेल्या BCT प्रक्रियेचे अनुसरण करा. पाचही नमुन्यांमधील समीपता एकसमान पृष्ठभाग कव्हरेज आणि Ct जाळीमध्ये HFFC जमा होण्याची खात्री देते.
पूर्वी नोंदवल्याप्रमाणे काही बदलांसह नाममात्र रक्त संपर्क क्षेत्र (NBCA) निश्चित केले गेले. Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS आणि Cs च्या दोन पृष्ठभागांमध्ये 20 µl रक्त क्लॅम्प करून रक्त गोठवा. 1 तासानंतर, स्टेंटचे दोन्ही भाग वेगळे केले गेले आणि गुठळ्याचे क्षेत्र मॅन्युअली मोजले गेले. तीन पुनरावृत्तींचे सरासरी मूल्य NBCA NFRCS19 मानले गेले.
बाह्य वातावरणातून किंवा गोठण्यास जबाबदार असलेल्या दुखापतीच्या ठिकाणाहून पाणी शोषण्यासाठी NFRCS च्या प्रभावीतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी डायनॅमिक व्हेपर सॉर्प्शन (DVS) विश्लेषणाचा वापर करण्यात आला. DVS ±0.1 µg च्या वस्तुमान रिझोल्यूशनसह अति-संवेदनशील संतुलनाचा वापर करून गुरुत्वाकर्षण पद्धतीने नमुन्यातील बाष्प शोषण आणि तोटा मूल्यांकन किंवा रेकॉर्ड करते. इलेक्ट्रॉनिक वस्तुमान प्रवाह नियंत्रकाद्वारे संतृप्त आणि कोरडे वाहक वायू मिसळून नमुन्याभोवती आंशिक बाष्प दाब (सापेक्ष आर्द्रता) निर्माण केला जातो. युरोपियन फार्माकोपिया मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार, नमुन्यांद्वारे घेतलेल्या आर्द्रतेच्या टक्केवारीवर आधारित, नमुने 4 श्रेणींमध्ये वर्गीकृत केले गेले (0–0.012% w/w− नॉन-हायग्रोस्कोपिक, 0.2–2% w/w किंचित हायग्रोस्कोपिक, 2–15% मध्यम हायग्रोस्कोपिक आणि > 15% खूप हायग्रोस्कोपिक)23. युरोपियन फार्माकोपिया मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार, नमुन्यांद्वारे घेतलेल्या आर्द्रतेच्या टक्केवारीवर आधारित, नमुने 4 श्रेणींमध्ये वर्गीकृत केले गेले (0–0.012% w/w− नॉन-हायग्रोस्कोपिक, 0.2–2% w/w किंचित हायग्रोस्कोपिक, 2–15% मध्यम हायग्रोस्कोपिक आणि > 15% खूप हायग्रोस्कोपिक)23.युरोपियन फार्माकोपियाच्या शिफारशींनुसार, नमुन्यांद्वारे ओलावा शोषण्याच्या टक्केवारीनुसार, नमुने 4 श्रेणींमध्ये विभागले गेले (0–0.012% w/w - नॉन-हायग्रोस्कोपिक, 0.2–2% w/w किंचित हायग्रोस्कोपिक, 2–15%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % मध्यम प्रमाणात हायग्रोस्कोपिक आणि > १५% खूप हायग्रोस्कोपिक)२३.根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w- 20% 湀湞典指南w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南, 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 类 %0-w.吸湿 性 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23.युरोपियन फार्माकोपियाच्या शिफारशींनुसार, नमुन्याने शोषलेल्या आर्द्रतेच्या टक्केवारीनुसार (वजनाने ०-०.०१२% - नॉन-हायग्रोस्कोपिक, वजनाने ०.२-२% किंचित हायग्रोस्कोपिक, वजनाने २-१५%) नमुने ४ वर्गांमध्ये विभागले जातात.% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % मध्यम प्रमाणात हायग्रोस्कोपिक, > १५% खूप हायग्रोस्कोपिक) २३.NFCS X NFCS आणि TsN NFCS ची हायग्रोस्कोपिक कार्यक्षमता DVS TA TGA Q5000 SA या विश्लेषकावर निश्चित करण्यात आली. या प्रक्रियेदरम्यान, रन टाइम, सापेक्ष आर्द्रता (RH) आणि 25°C24 वर रिअल-टाइम नमुना वजन प्राप्त झाले. खालील समीकरण वापरून अचूक NFRCS वस्तुमान विश्लेषणाद्वारे आर्द्रतेची गणना केली जाते:
MC म्हणजे NFRCS आर्द्रता. m1 – NSAIDs चे कोरडे वजन. m2 हे दिलेल्या RH वर रिअल-टाइम NFRCS वस्तुमान आहे.
२५°C वर १० तास (<७ × १०–३ टॉर) नमुने रिकामे केल्यानंतर द्रव नायट्रोजनसह नायट्रोजन शोषण प्रयोग वापरून एकूण पृष्ठभागाचे क्षेत्रफळ अंदाजित केले गेले. २५°C वर १० तास (<७ × १०–३ टॉर) नमुने रिकामे केल्यानंतर द्रव नायट्रोजनसह नायट्रोजन शोषण प्रयोग वापरून एकूण पृष्ठभागाचे क्षेत्रफळ अंदाजित केले गेले. Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом поверхности оценивалась течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). २५°C वर १० तासांसाठी (<७ × १०–३ टॉर) नमुने रिकामे केल्यानंतर द्रव नायट्रोजनसह नायट्रोजन शोषण प्रयोग वापरून एकूण पृष्ठभागाचे क्षेत्रफळ अंदाजित केले गेले.25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积.25°C वर Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом посенивалась опользованием течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). २५°C (<७ x १०-३ torr) तापमानावर १० तास नमुने रिकामे केल्यानंतर द्रव नायट्रोजनसह नायट्रोजन शोषण प्रयोग वापरून एकूण पृष्ठभागाचे क्षेत्रफळ अंदाजित केले गेले.RS 232 सॉफ्टवेअर वापरून ऑस्ट्रियातील NOVA 1000e येथील क्वांटाक्रोम वापरून एकूण पृष्ठभागाचे क्षेत्रफळ, छिद्रांचे आकारमान आणि NFRCS छिद्रांचा आकार निश्चित करण्यात आला.
संपूर्ण रक्तातून ५% लाल रक्तपेशी (सॅलाइन डायल्युएंट म्हणून) तयार करा. नंतर HFFC (०.२५ मिली) चा एक अंश ९६-वेल प्लेटमध्ये आणि ५% लाल रक्तपेशी वस्तुमान (०.१ मिली) मध्ये हलवा. मिश्रण ३७°C वर ४० मिनिटांसाठी उबवा. लाल रक्तपेशी आणि सीरमचे मिश्रण सकारात्मक नियंत्रण म्हणून मानले गेले आणि खारट आणि लाल रक्तपेशींचे मिश्रण नकारात्मक नियंत्रण म्हणून मानले गेले. स्टॅजित्स्की स्केलनुसार हेमॅग्लुटिनेशन निश्चित केले गेले. प्रस्तावित स्केल खालीलप्रमाणे आहेत: + + + दाट दाणेदार समुच्चय; + + + वक्र कडा असलेले गुळगुळीत तळाचे पॅड; + + फाटलेल्या कडा असलेले गुळगुळीत तळाचे पॅड; + गुळगुळीत पॅडच्या कडांभोवती अरुंद लाल रिंग्ज; – (ऋण) खालच्या विहिरीच्या मध्यभागी वेगळे लाल बटण १२.
इंटरनॅशनल ऑर्गनायझेशन फॉर स्टँडर्डायझेशन (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 च्या पद्धतीनुसार NFRCS ची रक्तसंगतता अभ्यासण्यात आली. सिंग आणि इतरांनी वर्णन केलेली गुरुत्वाकर्षण पद्धत. NFRCS च्या उपस्थितीत किंवा पृष्ठभागावर थ्रोम्बस निर्मितीचे मूल्यांकन करण्यासाठी किरकोळ बदल करण्यात आले. 500 मिलीग्राम Cs, Ch NFRCS आणि Cp NFRCS 37°C वर 24 तासांसाठी फॉस्फेट बफर सलाईन (PBS) मध्ये उबवले गेले. 24 तासांनंतर, PBS काढून टाकण्यात आले आणि NFRCS वर 3.8% सोडियम सायट्रेट असलेल्या 2 मिली रक्ताने उपचार करण्यात आले. NFRCS च्या पृष्ठभागावर, उबवलेल्या नमुन्यांमध्ये 0.1 M CaCl2 चे 0.04 मिली घाला. 45 मिनिटांनंतर, रक्त गोठणे थांबवण्यासाठी 5 मिली डिस्टिल्ड वॉटर जोडले गेले. NFRK च्या पृष्ठभागावरील रक्त गोठलेले 36-38% फॉर्मल्डिहाइड द्रावणाने उपचार करण्यात आले. फॉर्मल्डिहाइडने बसवलेल्या गुठळ्या वाळवल्या गेल्या आणि त्यांचे वजन केले गेले. रक्त आणि नमुना नसलेल्या काचेचे वजन (निगेटिव्ह नियंत्रण) आणि रक्त असलेल्या काचेचे वजन (पॉझिटिव्ह नियंत्रण) मोजून थ्रोम्बोसिसची टक्केवारी मोजण्यात आली.
सुरुवातीच्या पुष्टीकरणासाठी, HFFC पृष्ठभागाच्या आवरणाची क्षमता, Ct एकमेकांशी जोडलेले आणि Ct नेटवर्कची छिद्रे तयार करण्याची क्षमता समजून घेण्यासाठी नमुने ऑप्टिकल सूक्ष्मदर्शकाखाली दृश्यमान केले गेले. NFRCS मधील Ch आणि Cp चे पातळ भाग स्केलपेल ब्लेडने ट्रिम केले गेले. परिणामी भाग एका काचेच्या स्लाईडवर ठेवण्यात आला, कव्हरस्लिपने झाकण्यात आला आणि कडा गोंदाने निश्चित करण्यात आल्या. तयार केलेल्या स्लाईड ऑप्टिकल सूक्ष्मदर्शकाखाली पाहिल्या गेल्या आणि वेगवेगळ्या मॅग्निफिकेशनवर छायाचित्रे घेण्यात आली.
राईस एट अल.29 यांनी वर्णन केलेल्या पद्धतीवर आधारित फ्लोरोसेन्स मायक्रोस्कोपी वापरून Ct नेटवर्क्समधील पॉलिमर डिपॉझिशनचे दृश्यमानीकरण केले गेले. फॉर्म्युलेशनसाठी वापरलेली HFFC रचना फ्लोरोसेंट डाई (राजगिरा) मध्ये मिसळण्यात आली आणि आधी नमूद केलेल्या पद्धतीनुसार NFRCS (Ch & Cp) तयार करण्यात आली. फॉर्म्युलेशनसाठी वापरलेली HFFC रचना फ्लोरोसेंट डाई (राजगिरा) मध्ये मिसळण्यात आली आणि आधी नमूद केलेल्या पद्धतीनुसार NFRCS (Ch & Cp) तयार करण्यात आली.फॉर्म्युलेशनसाठी वापरलेली HFFC रचना फ्लोरोसेंट डाई (राजगिरा) मध्ये मिसळली गेली आणि पूर्वी नमूद केलेल्या पद्धतीनुसार NFRCS (Ch आणि Cp) मिळवले गेले.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。फॉर्म्युलेशनमध्ये वापरलेली HFFC रचना फ्लोरोसेंट डाई (अ‍ॅमॅरंथ) मध्ये मिसळली गेली आणि आधी सांगितल्याप्रमाणे NFRCS (Ch आणि Cp) प्राप्त झाली.मिळालेल्या नमुन्यांमधून NFRK चे पातळ भाग कापून काचेच्या स्लाईडवर ठेवण्यात आले आणि कव्हर स्लीपने झाकण्यात आले. हिरव्या फिल्टर (310-380 nm) वापरून फ्लोरोसेंट सूक्ष्मदर्शकाखाली तयार केलेल्या स्लाईडचे निरीक्षण करा. Ct संबंध आणि Ct नेटवर्कमधील अतिरिक्त पॉलिमर जमाव समजून घेण्यासाठी प्रतिमा 4x मॅग्निफिकेशनवर घेण्यात आल्या.
NFRCS Ch आणि Cp ची पृष्ठभागाची भूगोल टॅपिंग मोडमध्ये अल्ट्रा-शार्प TESP कॅन्टीलिव्हरसह अणु बल सूक्ष्मदर्शक (AFM) वापरून निश्चित केली गेली: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, ब्रुकर, तैवान. सॉफ्टवेअर (स्कॅनिंग प्रोब इमेज प्रोसेसर) वापरून रूट मीन स्क्वेअर (RMS) द्वारे पृष्ठभागाची खडबडीतता निश्चित केली गेली. पृष्ठभागाची एकरूपता तपासण्यासाठी 3D प्रतिमांवर विविध NFRCS स्थाने रेंडर केली गेली. दिलेल्या क्षेत्रासाठी स्कोअरचे मानक विचलन पृष्ठभागाची खडबडीतता म्हणून परिभाषित केले जाते. NFRCS31 च्या पृष्ठभागाची खडबडीतता मोजण्यासाठी RMS समीकरण वापरले गेले.
FESEM-आधारित अभ्यास FESEM, SU8000, HI-0876-0003, हिताची, टोकियो वापरून केले गेले, जेणेकरून Ch NFRCS आणि Cp NFRCS च्या पृष्ठभागाचे आकारविज्ञान समजून घेता येईल, ज्यामध्ये Cm NFRCS पेक्षा चांगले BCT दिसून आले. FESEM अभ्यास झाओ एट अल. 32 ने वर्णन केलेल्या पद्धतीनुसार किरकोळ बदलांसह केला गेला. NFRCS 20 ते 30 mg Ch NFRCS आणि Cp NFRCS उंदराच्या रक्तात प्रीमिक्स केलेल्या 3.8% सोडियम सायट्रेटच्या 20 μl सह प्रीमिक्स केले गेले. रक्त गोठण्यास सुरुवात करण्यासाठी रक्त-उपचारित नमुन्यांमध्ये 0.2 M CaCl2 चे 20 μl जोडले गेले आणि नमुने खोलीच्या तपमानावर 10 मिनिटांसाठी उष्मायन केले गेले. याव्यतिरिक्त, सलाईनने धुवून NFRCS पृष्ठभागावरून अतिरिक्त लाल रक्तपेशी काढून टाकल्या गेल्या.
त्यानंतरच्या नमुन्यांवर ०.१% ग्लूटारल्डिहाइडने प्रक्रिया करण्यात आली आणि नंतर ओलावा काढून टाकण्यासाठी ३७°C वर गरम हवेच्या ओव्हनमध्ये वाळवण्यात आली. वाळलेल्या नमुन्यांचे लेप लावण्यात आले आणि त्यांचे विश्लेषण करण्यात आले ३२. विश्लेषणादरम्यान मिळालेल्या इतर प्रतिमांमध्ये वैयक्तिक कापसाच्या तंतूंच्या पृष्ठभागावर गुठळ्या तयार होणे, Ct मधील पॉलिमर जमा होणे, लाल रक्तपेशींचे आकारविज्ञान (आकार), गुठळ्या अखंडता आणि NFRCS च्या उपस्थितीत लाल रक्तपेशींचे आकारविज्ञान यांचा समावेश होता. उपचार न केलेले NFRCS क्षेत्रे आणि रक्ताने उबवलेल्या Ch आणि Cp उपचारित NFRCS क्षेत्रांचे स्कॅनिंग मूलभूत आयनांसाठी केले गेले (सोडियम, पोटॅशियम, नायट्रोजन, कॅल्शियम, मॅग्नेशियम, जस्त, तांबे आणि सेलेनियम)३३. गुठळ्या तयार होण्यादरम्यान मूलभूत आयन संचय आणि गुठळ्या एकरूपता समजून घेण्यासाठी उपचार न केलेल्या आणि उपचार न केलेल्या नमुन्यांमधील मूलभूत आयन टक्केवारीची तुलना करा.
Ct पृष्ठभागावरील Cp HFFC पृष्ठभागाच्या कोटिंगची जाडी FESEM वापरून निश्चित केली गेली. Cp NFRCS चे क्रॉस सेक्शन फ्रेमवर्कमधून कापले गेले आणि स्पटर लेपित केले गेले. परिणामी स्पटर कोटिंगचे नमुने FESEM द्वारे पाहिले गेले आणि पृष्ठभागाच्या कोटिंगची जाडी 34, 35, 36 मोजली गेली.
एक्स-रे मायक्रो-सीटी उच्च-रिझोल्यूशन 3D नॉन-डिस्ट्रक्टिव्ह इमेजिंग प्रदान करते आणि तुम्हाला NFRK च्या अंतर्गत संरचनात्मक व्यवस्थेचा अभ्यास करण्यास अनुमती देते. मायक्रो-सीटी नमुन्यातील एक्स-रेच्या स्थानिक रेषीय क्षीणन गुणांकाची नोंद करण्यासाठी नमुन्यातून जाणारा एक्स-रे बीम वापरते, ज्यामुळे आकारिकीय माहिती मिळविण्यास मदत होते. NFRCS37,38,39 च्या उपस्थितीत शोषण कार्यक्षमता आणि रक्त गोठणे समजून घेण्यासाठी Cp NFRCS आणि रक्त-उपचारित Cp NFRCS मधील Ct चे अंतर्गत स्थान मायक्रो-सीटीद्वारे तपासले गेले. रक्त-उपचारित आणि उपचारित Cp NFRCS नमुन्यांच्या 3D संरचना मायक्रो-सीटी (V|tome|x S240, फिनिक्स, जर्मनी) वापरून पुनर्बांधणी करण्यात आल्या. VG STUDIO-MAX सॉफ्टवेअर आवृत्ती 2.2 वापरून, NFRCS साठी 3D प्रतिमा विकसित करण्यासाठी वेगवेगळ्या कोनातून (आदर्श 360° कव्हरेज) अनेक एक्स-रे प्रतिमा घेण्यात आल्या. संकलित प्रोजेक्शन डेटा संबंधित साध्या 3D स्कॅनआयपी शैक्षणिक सॉफ्टवेअर वापरून 3D व्हॉल्यूमेट्रिक प्रतिमांमध्ये पुनर्बांधणी करण्यात आला.
याव्यतिरिक्त, रक्त गोठण्याचे वितरण समजून घेण्यासाठी, रक्त गोठण्यास सुरुवात करण्यासाठी NFRCS मध्ये 20 µl प्रीमिक्स केलेले सायट्रेटेड रक्त आणि 0.2 M CaCl2 चे 20 µl जोडले गेले. तयार केलेले नमुने कडक होण्यासाठी सोडले जातात. NFRK पृष्ठभागावर 0.5% ग्लूटारल्डिहाइडने प्रक्रिया केली गेली आणि गरम हवेच्या ओव्हनमध्ये 30-40°C वर 30 मिनिटे वाळवले गेले. NFRCS वर तयार झालेल्या रक्त गोठाचे स्कॅनिंग करण्यात आले, पुनर्बांधणी करण्यात आली आणि रक्त गोठण्याची 3D प्रतिमा दृश्यमान करण्यात आली.
पूर्वी वर्णन केलेल्या पद्धतीचा वापर करून Cp NFRCS (Ch NFRCS च्या तुलनेत सर्वोत्तम) वर किरकोळ बदलांसह अँटीबॅक्टेरियल चाचण्या करण्यात आल्या. इनक्यूबेटरमध्ये पेट्री डिशमध्ये आगरवर वाढणारे तीन वेगवेगळ्या चाचणी सूक्ष्मजीव [S.aureus (ग्रॅम-पॉझिटिव्ह बॅक्टेरिया), E.coli (ग्रॅम-नकारात्मक बॅक्टेरिया) आणि पांढरे कॅन्डिडा (C.albicans)] वापरून Cp NFRCS आणि Cp HFFC ची अँटीबॅक्टेरियल क्रिया निश्चित करण्यात आली. आगर माध्यमावर १०५-१०६ CFU ml-१ च्या एकाग्रतेवर ५० मिली पातळ केलेले बॅक्टेरियल कल्चर सस्पेंशन एकसारखे टोचून घ्या. माध्यम पेट्री डिशमध्ये ओता आणि ते घट्ट होऊ द्या. HFFC ने भरण्यासाठी आगर प्लेटच्या पृष्ठभागावर विहिरी बनवल्या गेल्या (HFFC साठी ३ विहिरी आणि नकारात्मक नियंत्रणासाठी १). ३ विहिरींमध्ये २०० µl HFFC आणि चौथ्या विहिरीमध्ये २०० µl pH ७.४ PBS घाला. पेट्री डिशच्या दुसऱ्या बाजूला, घनरूप अगरवर १२ मिमी Cp NFRCS डिस्क ठेवा आणि PBS (pH ७.४) ने ओलावा. सिप्रोफ्लोक्सासिन, अँपिसिलिन आणि फ्लुकोनाझोल गोळ्या स्टॅफिलोकोकस ऑरियस, एस्चेरिचिया कोलाई आणि कॅन्डिडा अल्बिकन्ससाठी संदर्भ मानक मानल्या जातात. प्रतिबंध क्षेत्राचे मॅन्युअली मोजा आणि प्रतिबंध क्षेत्राची डिजिटल प्रतिमा घ्या.
संस्थात्मक नैतिक मंजुरीनंतर, हा अभ्यास दक्षिण भारतातील कर्नाटकातील मणिपाल येथील कस्तुरबा मेडिकल कॉलेज ऑफ एज्युकेशन अँड रिसर्च येथे करण्यात आला. कर्नाटकातील मणिपाल येथील कस्तुरबा मेडिकल कॉलेजच्या संस्थात्मक नीतिमत्ता समितीने (आयईसी: ६७४/२०२०) इन विट्रो टीईजी प्रायोगिक प्रोटोकॉलचे पुनरावलोकन केले आहे आणि त्याला मान्यता दिली आहे. रुग्णालयातील रक्तपेढीतून स्वयंसेवक रक्तदात्यांकडून (१८ ते ५५ वयोगटातील) विषयांची निवड करण्यात आली. याव्यतिरिक्त, रक्ताचे नमुने गोळा करण्यासाठी स्वयंसेवकांकडून एक माहितीपूर्ण संमती फॉर्म प्राप्त करण्यात आला. सोडियम सायट्रेटसह प्रीमिक्स केलेल्या संपूर्ण रक्तावर सीपी एचएफएफसी फॉर्म्युलेशनचा परिणाम अभ्यासण्यासाठी नेटिव्ह टीईजी (एन-टीईजी) वापरण्यात आला. पॉइंट-ऑफ-केअर पुनरुत्थानात एन-टीईजीची भूमिका व्यापकपणे ओळखली जाते, ज्यामुळे निकालांमध्ये वैद्यकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण विलंब होण्याची शक्यता असल्याने (नियमित कोग्युलेशन चाचण्या) डॉक्टरांसाठी समस्या निर्माण होतात. संपूर्ण रक्त वापरून एन-टीईजी विश्लेषण केले गेले. सर्व सहभागींकडून माहितीपूर्ण संमती आणि तपशीलवार वैद्यकीय इतिहास प्राप्त करण्यात आला. या अभ्यासात गर्भधारणा/प्रसूतीनंतर किंवा यकृत रोग यासारख्या रक्तस्थ किंवा थ्रोम्बोटिक गुंतागुंत असलेल्या सहभागींचा समावेश नव्हता. रक्त गोठण्याच्या कॅस्केडवर परिणाम करणारी औषधे घेणाऱ्या विषयांना देखील अभ्यासातून वगळण्यात आले. मानक प्रक्रियेनुसार सर्व सहभागींवर मूलभूत प्रयोगशाळेतील चाचण्या (हिमोग्लोबिन, प्रोथ्रोम्बिन वेळ, सक्रिय थ्रोम्बोप्लास्टिन आणि प्लेटलेट संख्या) करण्यात आल्या. N-TEG रक्त गोठण्याची व्हिस्कोइलास्टिसिटी, प्रारंभिक रक्त गोठण्याची रचना, कण परस्परसंवाद, रक्त गोठणे मजबूत करणे आणि रक्त गोठणे हे निर्धारित करते. N-TEG विश्लेषण अनेक पेशी घटक आणि प्लाझ्माच्या सामूहिक परिणामांवर ग्राफिकल आणि संख्यात्मक डेटा प्रदान करते. Cp HFFC (10 µl आणि 50 µl) च्या दोन वेगवेगळ्या खंडांवर N-TEG विश्लेषण करण्यात आले. परिणामी, Cp HFFC च्या 10 μl मध्ये सायट्रिक ऍसिड असलेले 1 मिली संपूर्ण रक्त जोडले गेले. 20 µl 0.2 M CaCl2 असलेल्या TEG डिशमध्ये 1 मिली (Cp HFFC + सायट्रेटेड रक्त), 340 µl मिश्रित रक्त घाला. त्यानंतर, Cp HFFC41 च्या उपस्थितीत रक्त नमुन्यांपैकी R, K, अल्फा अँगल, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% मोजण्यासाठी TEG डिशेस TEG® 5000, US मध्ये लोड करण्यात आल्या.
इन व्हिव्हो अभ्यास प्रोटोकॉलचे पुनरावलोकन आणि मान्यता संस्थात्मक प्राणी नीतिशास्त्र समिती (IAEC), कस्तुरबा स्कूल ऑफ मेडिसिन, मणिपाल उच्च शिक्षण संस्था, मणिपाल (IAEC/KMC/69/2020) यांनी केली. सर्व प्राण्यांवरील प्रयोग नियंत्रण आणि देखरेख समिती (CPCSEA) च्या शिफारशींनुसार केले गेले. सर्व इन व्हिव्हो NFRCS अभ्यास (2 × 2 cm2) मादी विस्टार उंदरांवर (200 ते 250 ग्रॅम वजनाच्या) केले गेले. सर्व प्राण्यांना 24-26°C तापमानात अनुकूल केले गेले, प्राण्यांना मानक अन्न आणि पाणी मोफत उपलब्ध होते. सर्व प्राण्यांना यादृच्छिकपणे वेगवेगळ्या गटांमध्ये विभागले गेले, प्रत्येक गटात तीन प्राणी होते. सर्व अभ्यास प्राणी अभ्यास: इन व्हिव्हो प्रयोगांचा अहवाल 43 नुसार केले गेले. अभ्यासापूर्वी, प्राण्यांना २०-५० मिलीग्राम केटामाइन (प्रति १ किलो शरीराच्या वजनासाठी) आणि २-१० मिलीग्राम झायलाझिन (प्रति १ किलो शरीराच्या वजनासाठी) यांचे मिश्रण इंट्रापेरिटोनियल (आयपी) देऊन भूल देण्यात आली. अभ्यासानंतर, नमुन्यांच्या सुरुवातीच्या आणि अंतिम वजनातील फरकाचे मूल्यांकन करून रक्तस्त्रावाचे प्रमाण मोजण्यात आले, तीन चाचण्यांमधून मिळालेले सरासरी मूल्य नमुन्याच्या रक्तस्त्रावाचे प्रमाण म्हणून घेतले गेले.
आघात, लढाई किंवा वाहतूक अपघातात रक्तस्त्राव नियंत्रित करण्यासाठी NFRCS ची क्षमता समजून घेण्यासाठी उंदराच्या शेपटीचे विच्छेदन मॉडेल लागू करण्यात आले (इजा मॉडेल). सामान्य रक्तस्त्राव सुनिश्चित करण्यासाठी शेपटीचा ५०% भाग स्केलपेल ब्लेडने कापून १५ सेकंद हवेत ठेवा. याव्यतिरिक्त, दाब देऊन उंदराच्या शेपटीवर चाचणी नमुने ठेवण्यात आले (Ct, Cs, Ch NFRCS आणि Cp NFRCS). चाचणी नमुन्यांसाठी रक्तस्त्राव आणि PCT नोंदवण्यात आले (n = 3)17,45.
लढाईत NFRCS दाब नियंत्रणाची प्रभावीता वरवरच्या फेमोरल धमनीच्या मॉडेलवर तपासण्यात आली. फेमोरल धमनी उघडी केली जाते, 24G ट्रोकारने छिद्र पाडली जाते आणि 15 सेकंदात रक्तस्त्राव होतो. अनियंत्रित रक्तस्त्राव दिसून आल्यानंतर, चाचणी नमुना दाब देऊन पंचर साइटवर ठेवला जातो. चाचणी नमुना लागू केल्यानंतर लगेच, रक्त गोठण्याचा वेळ नोंदवला गेला आणि पुढील 5 मिनिटांसाठी रक्त गोठण्याची कार्यक्षमता पाहिली गेली. Cs आणि Ct46 सह हीच प्रक्रिया पुन्हा करण्यात आली.
डोलिंग आणि इतर ४७ यांनी शस्त्रक्रियेच्या अंतर्गत रक्तस्त्रावाच्या संदर्भात हेमोस्टॅटिक पदार्थांच्या हेमोस्टॅटिक क्षमतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी यकृताच्या दुखापतीचे मॉडेल प्रस्तावित केले. Ct नमुने (निगेटिव्ह कंट्रोल), Cs फ्रेमवर्क (पॉझिटिव्ह कंट्रोल), Ch NFRCS नमुने आणि Cp NFRCS नमुन्यांसाठी BCT रेकॉर्ड केले गेले. मध्यवर्ती लॅपरोटॉमी करून उंदराचा सुप्राहेपॅटिक व्हेना कावा उघड करण्यात आला. त्यानंतर, डाव्या लोबचा दूरचा भाग कात्रीने कापला गेला. स्केलपेल ब्लेडने यकृतामध्ये एक चीरा बनवा आणि काही सेकंद रक्तस्त्राव होऊ द्या. कोणत्याही सकारात्मक दाबाशिवाय खराब झालेल्या पृष्ठभागावर अचूकपणे वजन केलेले Ch NFRCS आणि Cp NFRCS चाचणी नमुने ठेवण्यात आले आणि BCT रेकॉर्ड करण्यात आले. त्यानंतर नियंत्रण गटाने (Ct) दाब लागू केला आणि त्यानंतर Cs 30 s47 ने दुखापत न मोडता तपासणी केली.
विकसित पॉलिमर-आधारित NFRCS च्या जखमेच्या उपचार गुणधर्मांचे मूल्यांकन करण्यासाठी एक्सिजनल जखम मॉडेल वापरून इन व्हिव्हो जखमेच्या उपचारांचे परीक्षण केले गेले. एक्सिजनल जखमांचे मॉडेल निवडले गेले आणि किरकोळ बदलांसह पूर्वी प्रकाशित पद्धतींनुसार केले गेले 19,32,48. पूर्वी वर्णन केल्याप्रमाणे सर्व प्राण्यांना भूल देण्यात आली. पाठीच्या त्वचेत गोलाकार खोल चीरा करण्यासाठी बायोप्सी पंच (12 मिमी) वापरा. ​​तयार केलेल्या जखमेच्या ठिकाणी Cs (पॉझिटिव्ह कंट्रोल), Ct (कापसाचे पॅड बरे होण्यास अडथळा आणतात हे ओळखून), Ch NFRCS आणि Cp NFRCS (प्रायोगिक गट) आणि कोणत्याही उपचाराशिवाय नकारात्मक नियंत्रणाने ड्रेसिंग करण्यात आले. अभ्यासाच्या प्रत्येक दिवशी, सर्व उंदरांमध्ये जखमेचे क्षेत्र मोजण्यात आले. जखमेच्या क्षेत्राचा फोटो काढण्यासाठी आणि नवीन ड्रेसिंग घालण्यासाठी डिजिटल कॅमेरा वापरा. ​​जखमेच्या बंद होण्याचे प्रमाण खालील सूत्राद्वारे मोजले गेले:
अभ्यासाच्या १२ व्या दिवशी जखमा बंद होण्याच्या टक्केवारीच्या आधारे, सर्वोत्तम गटाच्या उंदराची कातडी ((Cp NFRCS) आणि नियंत्रण गटाच्या) काढून टाकण्यात आली आणि H&E स्टेनिंग आणि मॅसनच्या ट्रायक्रोम स्टेनिंगद्वारे त्याचा अभ्यास करण्यात आला. अभ्यासाच्या १२ व्या दिवशी जखमा बंद होण्याच्या टक्केवारीच्या आधारे, सर्वोत्तम गटाच्या उंदराची कातडी ((Cp NFRCS) आणि नियंत्रण गटाच्या) काढून टाकण्यात आली आणि H&E स्टेनिंग आणि मॅसनच्या ट्रायक्रोम स्टेनिंगद्वारे त्याचा अभ्यास करण्यात आला.अभ्यासाच्या १२ व्या दिवशी जखमा बंद होण्याच्या टक्केवारीच्या आधारे, सर्वोत्तम गट ((Cp NFRCS) आणि नियंत्रण गट) च्या उंदरांची त्वचा हेमॅटोक्सिलिन-इओसिन आणि मॅसन ट्रायक्रोमने रंगवून काढून तपासण्यात आली.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）अभ्यासाच्या १२ व्या दिवशी जखमेच्या टक्केवारीवर आधारित हेमॅटोक्सिलिन-इओसिन स्टेनिंग आणि मॅसनच्या ट्रायक्रोम स्टेनिंगसाठी सर्वोत्तम गट ((Cp NFRCS) आणि नियंत्रण गट) मधील उंदरांचे एक्साइजिंग करण्यात आले.अंमलात आणलेली रंगरंगोटी प्रक्रिया पूर्वी वर्णन केलेल्या पद्धतींनुसार पार पाडण्यात आली49,50. थोडक्यात, 10% फॉर्मेलिनमध्ये स्थिरीकरण केल्यानंतर, नमुने श्रेणीबद्ध अल्कोहोलच्या मालिकेचा वापर करून निर्जलीकरण केले गेले. काढलेल्या ऊतींचे पातळ भाग (5 µm जाड) मिळविण्यासाठी मायक्रोटोम वापरा. ​​हिस्टोपॅथॉलॉजिकल बदलांचा अभ्यास करण्यासाठी नियंत्रणे आणि Cp NFRCS च्या पातळ क्रमिक भागांवर हेमॅटोक्सिलिन आणि इओसिनने उपचार केले गेले. कोलेजन फायब्रिल्सची निर्मिती शोधण्यासाठी मॅसनच्या ट्रायक्रोम स्टेनचा वापर करण्यात आला. प्राप्त झालेल्या परिणामांचा पॅथॉलॉजिस्टनी आंधळेपणाने अभ्यास केला.
Cp NFRCS नमुन्यांची स्थिरता खोलीच्या तपमानावर (२५°C ± २°C/६०% RH ± ५%) १२ महिने अभ्यासण्यात आली. Cp NFRCS (पृष्ठभागाचा रंग बदलणे आणि सूक्ष्मजीव वाढ) वरील पद्धतींनुसार मटेरियल आणि मेथड्स विभागात वर्णन केलेल्या पद्धतींनुसार फोल्ड वेअर रेझिस्टन्स आणि BCT साठी दृश्यमानपणे तपासणी आणि चाचणी करण्यात आली.
१५×१५ सेमी२ आकाराचे Cp NFRCS तयार करून Cp NFRCS ची स्केलेबिलिटी आणि पुनरुत्पादनक्षमता तपासण्यात आली. याव्यतिरिक्त, विविध Cp NFRCS अपूर्णांकांमधून ३० मिलीग्राम नमुने (n = ५) काढून टाकण्यात आले आणि अभ्यासलेल्या नमुन्यांचे BCT मूल्यांकन पद्धती विभागात आधी वर्णन केल्याप्रमाणे करण्यात आले.
आम्ही विविध बायोमेडिकल अनुप्रयोगांसाठी Cp NFRCS रचना वापरून विविध आकार आणि रचना विकसित करण्याचा प्रयत्न केला आहे. अशा आकार किंवा संरचनांमध्ये नाकातून रक्तस्त्राव, दंत प्रक्रियांसाठी शंकूच्या आकाराचे स्वॅब आणि योनीतून रक्तस्त्राव होण्यासाठी दंडगोलाकार स्वॅब यांचा समावेश आहे.
सर्व डेटा संच सरासरी ± मानक विचलन म्हणून व्यक्त केले जातात आणि ANOVA द्वारे प्रिझम 5.03 (ग्राफपॅड, सॅन दिएगो, CA, USA) वापरून विश्लेषण केले गेले आणि त्यानंतर बोनफेरोनीची बहु-तुलना चाचणी (*p<0.05) केली गेली.
मानवी अभ्यासात केल्या जाणाऱ्या सर्व प्रक्रिया संस्था आणि राष्ट्रीय संशोधन परिषदेच्या मानकांनुसार, तसेच हेलसिंकीच्या १९६४ च्या घोषणापत्रानुसार आणि त्यानंतरच्या सुधारणांनुसार किंवा तत्सम नैतिक मानकांनुसार होत्या. सर्व सहभागींना अभ्यासाच्या वैशिष्ट्यांबद्दल आणि त्याच्या ऐच्छिक स्वरूपाबद्दल माहिती देण्यात आली. सहभागींचा डेटा गोळा केल्यानंतर तो गोपनीय राहतो. इन विट्रो टीईजी प्रायोगिक प्रोटोकॉलचे पुनरावलोकन केले गेले आहे आणि कर्नाटकातील मणिपाल येथील कस्तुरबा मेडिकल कॉलेजच्या संस्थात्मक नीतिशास्त्र समितीने (आयईसी: ६७४/२०२०) मंजूर केले आहे. स्वयंसेवकांनी रक्ताचे नमुने गोळा करण्यासाठी सूचित संमतीवर स्वाक्षरी केली.
प्राण्यांच्या अभ्यासात केलेल्या सर्व प्रक्रिया कस्तुबा फॅकल्टी ऑफ मेडिसिन, मणिपाल इन्स्टिट्यूट ऑफ हायर एज्युकेशन, मणिपाल (IAEC/KMC/69/2020) नुसार पार पाडल्या गेल्या. सर्व प्राण्यांवर केलेले प्रयोग प्राणी प्रयोग नियंत्रण आणि पर्यवेक्षण समिती (CPCSEA) च्या मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार केले गेले. सर्व लेखक ARRIVE मार्गदर्शक तत्त्वांचे पालन करतात.
सर्व NFRCS च्या FTIR स्पेक्ट्राचे विश्लेषण केले गेले आणि आकृती 2A मध्ये दर्शविलेल्या चिटोसन स्पेक्ट्रमशी तुलना केली गेली. चिटोसनचे वैशिष्ट्यपूर्ण वर्णक्रमीय शिखर (नोंदलेले) 3437 cm-1 (OH आणि NH स्ट्रेचिंग, ओव्हरलॅप), 2945 आणि 2897 cm-1 (CH स्ट्रेचिंग), 1660 cm-1 (NH2 स्ट्रेन), 1589 cm-1 (N–H बेंडिंग), 1157 cm-1 (ब्रिज स्ट्रेच O-), 1067 cm-1 (स्ट्रेच C–O, सेकंडरी हायड्रॉक्सिल), 993 cm-1 (स्ट्रेच CO, Bo-OH) 52.53.54. पूरक तक्ता S1 चिटोसन (रिपोर्टर), शुद्ध चिटोसन, Cm, Ch, आणि Cp साठी FTIR NFRCS शोषण स्पेक्ट्रम मूल्ये दर्शविते. सर्व NFRCS (Cm, Ch आणि Cp) च्या FTIR स्पेक्ट्रामध्ये कोणतेही महत्त्वपूर्ण बदल न होता शुद्ध चिटोसन सारखेच वैशिष्ट्यपूर्ण शोषण बँड दिसून आले (आकृती 2A). FTIR निकालांनी NFRCS विकसित करण्यासाठी वापरल्या जाणाऱ्या पॉलिमरमध्ये रासायनिक किंवा भौतिक परस्परसंवादाची अनुपस्थिती पुष्टी केली, जे दर्शवते की वापरलेले पॉलिमर निष्क्रिय आहेत.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS आणि Cs चे इन विट्रो कॅरेक्टरायझेशन. (A) हे कम्प्रेशन अंतर्गत chitosan आणि Cm NFRCS, Ch NFRCS आणि Cp NFRCS च्या रचनांचे एकत्रित FTIR स्पेक्ट्रा दर्शवते. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp आणि Cg चा संपूर्ण रक्त शोषण दर (n = 3); Ct नमुन्यांमध्ये जास्त BAR दिसून आला कारण कापसाच्या पुड्याची शोषण कार्यक्षमता जास्त असते; b) रक्तानंतर रक्त शोषण केलेल्या नमुन्याचे चित्रण. चाचणी नमुन्या C च्या BCT चे ग्राफिकल प्रतिनिधित्व (Cp NFRCS मध्ये सर्वोत्तम BCT (15 s, n = 3) होते). C, D, E आणि G मधील डेटा सरासरी ± SD म्हणून दर्शविला गेला आणि त्रुटी बार SD, ***p < 0.0001 दर्शवितात. C, D, E आणि G मधील डेटा सरासरी ± SD म्हणून दर्शविला गेला आणि त्रुटी बार SD, ***p < 0.0001 दर्शवितात. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют представляют стандавляют стандартное. <0,0001. C, D, E आणि G मधील डेटा सरासरी ± मानक विचलन म्हणून सादर केला जातो आणि त्रुटी बार मानक विचलन दर्शवतात, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001. Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стандоляют <0,0001. C, D, E आणि G मधील डेटा सरासरी ± मानक विचलन म्हणून दर्शविला आहे, त्रुटी बार मानक विचलन दर्शवितात, ***p<0.0001.