សូមអរគុណសម្រាប់ការចូលមើលគេហទំព័រ Nature.com។ កំណែកម្មវិធីរុករកដែលអ្នកកំពុងប្រើមានការគាំទ្រ CSS មានកំណត់។ ដើម្បីទទួលបានបទពិសោធន៍ល្អបំផុត យើងសូមណែនាំឱ្យអ្នកប្រើកម្មវិធីរុករកដែលបានធ្វើបច្ចុប្បន្នភាព (ឬបិទរបៀបឆបគ្នានៅក្នុង Internet Explorer)។ ទន្ទឹមនឹងនេះ ដើម្បីធានាបាននូវការគាំទ្រជាបន្តបន្ទាប់ យើងនឹងបង្ហាញគេហទំព័រដោយគ្មានរចនាប័ទ្ម និង JavaScript។
អង់ហ្គូស្ទីហ្វូលីយូស លូពីន (NLL, Lupinus angustifolius L.) គឺជារុក្ខជាតិសណ្តែកមួយប្រភេទដែលប្រើសម្រាប់ផលិតចំណីអាហារ និងការកែលម្អដី។ ការពង្រីកសកលនៃ NLL ជាដំណាំបានទាក់ទាញផ្សិតបង្កជំងឺជាច្រើន រួមទាំងអង់ត្រាក់ណូស លូពីន ដែលបណ្តាលឱ្យមានជំងឺអង់ត្រាក់ណូសដ៏សាហាវ។ អាឡែលពីរគឺ Lanr1 និង AnMan ដែលផ្តល់ភាពធន់កើនឡើង ត្រូវបានគេប្រើប្រាស់ក្នុងការបង្កាត់ពូជ NLL ប៉ុន្តែយន្តការម៉ូលេគុលមូលដ្ឋាននៅតែមិនទាន់ដឹងនៅឡើយ។ នៅក្នុងការសិក្សានេះ សញ្ញាសម្គាល់ Lanr1 និង AnMan ត្រូវបានប្រើដើម្បីត្រួតពិនិត្យគំរូ NLL របស់អឺរ៉ុប។ ការធ្វើតេស្តវ៉ាក់សាំងនៅក្នុងបរិយាកាសដែលគ្រប់គ្រងបានបញ្ជាក់ពីប្រសិទ្ធភាពរបស់អ្នកបរិច្ចាគដែលធន់ទាំងពីរ។ ការវិភាគការបញ្ចេញហ្សែនឌីផេរ៉ង់ស្យែលត្រូវបានអនុវត្តលើខ្សែតំណាងដែលធន់ និងងាយរងគ្រោះ។ ភាពធន់នឹងអង់ត្រាក់ណូសត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការបញ្ចេញហ្សែនលើសលប់នៃពាក្យអុនតូឡូស៊ីហ្សែន “GO:0006952 Defense Response”, “GO:0055114 Redox Process” និង “GO:0015979 Photosynthesis”។ លើសពីនេះ ខ្សែ Lanr1(83A:476) បានបង្ហាញពីការបង្កើតកម្មវិធីឡើងវិញយ៉ាងសំខាន់យ៉ាងឆាប់រហ័សបន្ទាប់ពីការចាក់វ៉ាក់សាំង ខណៈពេលដែលខ្សែផ្សេងទៀតបានបង្ហាញពីភាពយឺតយ៉ាវក្នុងការឆ្លើយតបនេះប្រហែល 42 ម៉ោង។ ការឆ្លើយតបការពារត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងហ្សែន TIR-NBS, CC-NBS-LRR និង NBS-LRR ប្រូតេអ៊ីនចំនួន 10 ដែលពាក់ព័ន្ធនឹងរោគវិទ្យា ប្រូតេអ៊ីនផ្ទេរ lipid endoglucan-1,3-β-glucosidase ប្រូតេអ៊ីនជញ្ជាំងកោសិកាសម្បូរ glycine និងហ្សែនពីផ្លូវប្រតិកម្មនៃអុកស៊ីសែន។ ការឆ្លើយតបដំបូងចំពោះ 83A:476 រួមទាំងការបង្ក្រាបដោយប្រុងប្រយ័ត្ននៃហ្សែនដែលទាក់ទងនឹងរស្មីសំយោគ ស្របគ្នាជាមួយនឹងការការពារដោយជោគជ័យក្នុងដំណាក់កាលលូតលាស់រុក្ខជាតិនៃជីវវិទ្យាផ្សិត ដែលបង្ហាញថា effector បង្កឱ្យមានភាពស៊ាំ។ ប្រតិកម្ម Mandeloop ត្រូវបានថយចុះ ក៏ដូចជាការអូសផ្ដេកទាំងមូល។
រុក្ខជាតិលូពីនស្លឹកតូចចង្អៀត (NLL, Lupinus angustifolius L.) គឺជាធញ្ញជាតិដែលមានប្រូតេអ៊ីនខ្ពស់ ដែលមានប្រភពដើមនៅតំបន់មេឌីទែរ៉ាណេខាងលិច1,2។ បច្ចុប្បន្នវាត្រូវបានដាំដុះជាដំណាំអាហារសម្រាប់សត្វ និងមនុស្ស។ វាក៏ត្រូវបានចាត់ទុកថាជាជីស្រស់នៅក្នុងប្រព័ន្ធបង្វិលដំណាំ ដោយសារតែការជួសជុលអាសូតដោយបាក់តេរីជួសជុលអាសូតស៊ីមប៊ីយ៉ូទិក និងការកែលម្អរចនាសម្ព័ន្ធដីទាំងមូល។ រុក្ខជាតិលូពីនស្លឹកតូចចង្អៀតបានឆ្លងកាត់ដំណើរការចិញ្ចឹមយ៉ាងឆាប់រហ័សក្នុងសតវត្សចុងក្រោយនេះ ហើយនៅតែស្ថិតនៅក្រោមសម្ពាធបង្កាត់ពូជខ្ពស់3,4,5,6,7,8,9,10,11,12។ ជាមួយនឹងការដាំដុះ NLL យ៉ាងទូលំទូលាយ ជាបន្តបន្ទាប់នៃផ្សិតបង្កជំងឺបានបង្កើតទីផ្សារកសិកម្មថ្មីៗ និងបណ្តាលឱ្យមានជំងឺបំផ្លាញដំណាំថ្មីៗ។ អ្វីដែលគួរឱ្យកត់សម្គាល់បំផុតសម្រាប់កសិករ និងអ្នកបង្កាត់ពូជដំណាំលូពីន គឺការលេចឡើងនៃជំងឺអង់ត្រាក់ណូស ដែលបណ្តាលមកពីផ្សិតបង្កជំងឺ Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13។ អ្វីដែលគួរឱ្យកត់សម្គាល់បំផុតសម្រាប់កសិករ និងអ្នកបង្កាត់ពូជដំណាំលូពីន គឺការលេចឡើងនៃជំងឺអង់ត្រាក់ណូស ដែលបណ្តាលមកពីផ្សិតបង្កជំងឺ Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13។ Наиболее примечательным для фермеров и селекционеров люпина было появление антракноза, вызванного Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. អ្វីដែលគួរឱ្យកត់សម្គាល់បំផុតចំពោះកសិករ និងអ្នកបង្កាត់ពូជរុក្ខជាតិលូពីន គឺការលេចចេញនូវជំងឺអង់ត្រាក់ណូសដែលបណ្តាលមកពីផ្សិតបង្កជំងឺ Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13។对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真真菌olerei & Hagedorn13 引起的 ។对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真真菌up (Bondar)嵵 Haired.១ Наиболее поразительным для фермеров и селекционеров люпина является появление антракноза, вызываепам грибком Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. អ្វីដែលគួរឲ្យកត់សម្គាល់បំផុតសម្រាប់កសិករ និងអ្នកបង្កាត់ពូជរុក្ខជាតិលូពីន គឺការលេចចេញនូវជំងឺអង់ត្រាក់ណូសដែលបណ្តាលមកពីផ្សិតបង្កជំងឺ Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13។របាយការណ៍ដំបូងបំផុតនៃជំងឺនេះបានមកពីប្រទេសប្រេស៊ីល និងសហរដ្ឋអាមេរិក ដោយមានរោគសញ្ញាធម្មតាលេចឡើងនៅឆ្នាំ 1912 និង 1929 រៀងៗខ្លួន។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ បន្ទាប់ពីប្រហែល 30 ឆ្នាំ ភ្នាក់ងារបង្កជំងឺត្រូវបានកំណត់ថាជា Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz។ & Sacc., តេឡេអូម័រហ្វ Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld។ & Sacc., តេឡេអូម័រហ្វ Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld។ & Sacc., телеоморф Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld ។ & Sacc., តេឡេអូម័រហ្វនៃ Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld។ & Sacc., 有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld ។ & Sacc., 有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld ។ & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld в Целенаправленной морфологии ។ & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld ក្នុងសរីរវិទ្យាគោលដៅ។ និង អេច. ស្រេនក។ និង អេច. ស្រេនក។និង H. Schrenk។ & H.施伦克, ។ & H.施伦克, ។និង H. Schlenk, ។ការកំណត់ប្រភេទជំងឺបឋមដែលធ្វើឡើងនៅពាក់កណ្តាលសតវត្សរ៍ទី 20 បានបង្ហាញពីភាពធន់ខ្លះនៅក្នុង NLL និងពូជ lupine ពណ៌លឿង (L. luteus L.) ប៉ុន្តែពូជ lupine ពណ៌ស (L. albus L.) ទាំងអស់ដែលត្រូវបានសាកល្បងគឺងាយនឹងកើតជំងឺខ្ពស់15,16។ ការសិក្សាបានបង្ហាញថា ការវិវត្តនៃជំងឺ anthracnose ត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការកើនឡើងនៃទឹកភ្លៀង (សំណើមខ្យល់) និងសីតុណ្ហភាព (ក្នុងចន្លោះពី 12-28°C) ដែលនាំឱ្យមានការចុះខ្សោយនៃភាពធន់នៅសីតុណ្ហភាពខ្ពស់17,18។ តាមពិតទៅ ពេលវេលាដែលត្រូវការសម្រាប់ conidia ដើម្បីដុះពន្លក និងជំងឺចាប់ផ្តើមគឺខ្លីជាងបួនដងនៅសីតុណ្ហភាព 24°C (4 ម៉ោង) ជាងនៅសីតុណ្ហភាព 12°C (16 ម៉ោង) ក្រោមលក្ខខណ្ឌសំណើមខ្ពស់19។ ដូច្នេះ ការឡើងកំដៅផែនដីដែលកំពុងបន្តបាននាំឱ្យមានការរីករាលដាលនៃជំងឺ anthracnose។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ជំងឺនេះត្រូវបានសង្កេតឃើញនៅប្រទេសបារាំង (1982) និងអ៊ុយក្រែន (1983) ជាប្រផ្នូលនៃការគំរាមកំហែងដែលជិតមកដល់ ប៉ុន្តែជាក់ស្តែងត្រូវបានគេមិនអើពើដោយឧស្សាហកម្ម lupine នៅពេលនោះ20,21។ ពីរបីឆ្នាំក្រោយមក ជំងឺដ៏សាហាវនេះបានរីករាលដាលពាសពេញពិភពលោក ហើយក៏បានប៉ះពាល់ដល់ប្រទេសផលិតរុក្ខជាតិលូពីនសំខាន់ៗដូចជា អូស្ត្រាលី ប៉ូឡូញ និងអាល្លឺម៉ង់22,23,24។ បន្ទាប់ពីការផ្ទុះឡើងនៃជំងឺអង់ត្រាក់ណូសនៅពាក់កណ្តាលទសវត្សរ៍ឆ្នាំ 1990 ការត្រួតពិនិត្យយ៉ាងទូលំទូលាយបាននាំឱ្យមានការកំណត់អត្តសញ្ញាណអ្នកបរិច្ចាគដែលធន់នឹងជំងឺជាច្រើននៅក្នុងគំរូ NLL19។ ភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសរបស់ NLL ត្រូវបានគ្រប់គ្រងដោយអាឡែលលេចធ្លោពីរដាច់ដោយឡែកពីគ្នាដែលត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងប្រភពជីវសាស្ត្រផ្សេងៗគ្នា៖ Lanr1 នៅក្នុងពូជ Tanjil និង Wonga និង AnMan នៅក្នុងពូជ។ Mandalay 25, 26។ អាឡែលទាំងនេះបំពេញបន្ថែមសញ្ញាសម្គាល់ម៉ូលេគុលដែលគាំទ្រដល់ការជ្រើសរើសជីវសាស្ត្រដែលធន់នឹងជំងឺនៅក្នុងកម្មវិធីបង្កាត់ពូជ25,26,27,28,29,30។ ខ្សែពូជធន់នឹងជំងឺ 83A:476 ដែលមានអាឡែល Lanr1 ត្រូវបានបង្កាត់ជាមួយខ្សែព្រៃងាយរងគ្រោះ P27255 ដើម្បីទទួលបានចំនួនប្រជាជន RIL ដែលបំបែកសម្រាប់ភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស ដែលធ្វើឱ្យវាអាចកំណត់ទីតាំង Lanr1 ទៅក្រូម៉ូសូម NLL-1131, 32, 33។ ការតម្រឹមសញ្ញាសម្គាល់ផែនទីភ្ជាប់ពីទីតាំងធន់ទ្រាំចំហៀងទៅជំងឺអង់ត្រាក់ណូសជាមួយនឹងក្របខ័ណ្ឌហ្សែន NLL បានបង្ហាញទីតាំងនៃអាឡែលទាំងបីនៅលើក្រូម៉ូសូមដូចគ្នា (NLL-11) ប៉ុន្តែនៅក្នុងទីតាំងផ្សេងៗគ្នា 29, 34, 35។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ដោយសារតែចំនួន RILs តិចតួច និងចម្ងាយហ្សែនដ៏ធំរវាងសញ្ញាសម្គាល់ និងអាឡែលដែលត្រូវគ្នា គ្មានការសន្និដ្ឋានដែលអាចទុកចិត្តបានអំពីហ្សែនមូលដ្ឋានរបស់ពួកវាទេ។ ម្យ៉ាងវិញទៀត ការប្រើប្រាស់ហ្សែនបញ្ច្រាសនៅក្នុង lupins គឺពិបាកដោយសារតែសក្តានុពលនៃការបង្កើតឡើងវិញទាបបំផុតរបស់វា ដែលធ្វើឱ្យការរៀបចំហ្សែនមានការលំបាក 37។
ការវិវឌ្ឍនៃប្លាស្មាហ្សែនចិញ្ចឹមដែលមានអាឡែលដែលចង់បានក្នុងស្ថានភាព homozygous ដូចជា 83A:476 (Lanr1) និង Mandelup (AnMan) បានបើកទ្វារឱ្យសិក្សាពីភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស នៅចំពោះមុខវត្តមាននៃការរួមបញ្ចូលគ្នានៃអាឡែលនៅក្នុងចំនួនប្រជាជនព្រៃ។ លទ្ធភាពនៃយន្តការម៉ូលេគុល។ ប្រៀបធៀបការឆ្លើយតបការពារដែលបង្កើតឡើងដោយហ្សែនជាក់លាក់។ ការសិក្សានេះបានវាយតម្លៃការឆ្លើយតបប្រតិចារិកដំបូងនៃ NLL ចំពោះការចាក់ថ្នាំបង្ការ C. lupini។ ដំបូង បន្ទះប្លាស្មាហ្សែន NLL អឺរ៉ុបដែលមានខ្សែចំនួន 215 ត្រូវបានត្រួតពិនិត្យដោយប្រើសញ្ញាសម្គាល់ម៉ូលេគុលដែលសម្គាល់អាឡែល Lanr1 និង AnMan។ ការកំណត់ប្រភេទអាន់ត្រាក់ណូសត្រូវបានអនុវត្តលើខ្សែ NLL ចំនួន 50 ដែលត្រូវបានជ្រើសរើសពីមុនសម្រាប់សញ្ញាសម្គាល់ម៉ូលេគុល ក្រោមលក្ខខណ្ឌដែលបានគ្រប់គ្រង។ ដោយផ្អែកលើការពិសោធន៍ទាំងនេះ ខ្សែចំនួនបួនដែលមានភាពខុសគ្នានៅក្នុងភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស និងសមាសធាតុអាឡែល Lanr1/AnMan ត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ទម្រង់ការបញ្ចេញហ្សែនការពារឌីផេរ៉ង់ស្យែលដោយប្រើវិធីសាស្រ្តបំពេញបន្ថែមពីរ៖ ការចាត់ថ្នាក់ RNA ដែលមានអត្រាខ្ពស់ និងការវាស់បរិមាណ PCR ពេលវេលាជាក់ស្តែង។
ការត្រួតពិនិត្យសំណុំនៃហ្សែន NLL (N = 215) ជាមួយនឹងសញ្ញាសម្គាល់ Lanr1 (Anseq3 និង Anseq4) និង AnMan (Anseq4) និង AnMan (AnManM1) បានបង្ហាញថា មានតែខ្សែមួយប៉ុណ្ណោះ (95726 ជិត Salamanca-b) ដែលពង្រីកអាឡែល "ធន់ទ្រាំ" សម្រាប់សញ្ញាសម្គាល់ទាំងអស់ ខណៈពេលដែល "វត្តមាននៃអាឡែល 'ងាយរងគ្រោះ'" បានរកឃើញសមាមាត្រនៃសញ្ញាសម្គាល់ទាំងអស់នៅក្នុងខ្សែចំនួន 158 (~73.5%)។ ខ្សែចំនួនដប់បីបានបង្កើតអាឡែល "ធន់ទ្រាំ" ពីរនៃសញ្ញាសម្គាល់ Lanr1 និងខ្សែចំនួន 8 បានបង្កើតអាឡែល "ធន់ទ្រាំ" នៃសញ្ញាសម្គាល់ Lanr1។ អាឡែល "ធន់ទ្រាំ" នៃសញ្ញាសម្គាល់ AnMan (តារាងបន្ថែម S1)។ ខ្សែពីរមានភាពខុសគ្នាសម្រាប់សញ្ញាសម្គាល់ Anseq3 និងមួយមានភាពខុសគ្នាសម្រាប់សញ្ញាសម្គាល់ AnManM1។ ខ្សែពូជចំនួន ៤២ (១៩.៥%) មានដំណាក់កាលផ្ទុយគ្នានៃអាឡែល Anseq3 និង Anseq4 ដែលបង្ហាញពីភាពញឹកញាប់ខ្ពស់នៃការរួមបញ្ចូលគ្នារវាងទីតាំងទាំងពីរនេះ។ លក្ខណៈជំងឺអង់ត្រាក់ណូសក្រោមលក្ខខណ្ឌដែលបានគ្រប់គ្រង (តារាងបន្ថែម S2) បានបង្ហាញពីភាពប្រែប្រួលនៃភាពធន់នៃហ្សែនដែលបានសាកល្បង ដែលត្រូវបានឆ្លុះបញ្ចាំងនៅក្នុងភាពធ្ងន់ធ្ងរនៃជំងឺអង់ត្រាក់ណូស។ ភាពខុសគ្នានៃពិន្ទុមធ្យមមានចាប់ពី 1.8 (ធន់មធ្យម) ដល់ 6.9 (ងាយនឹងកើតជំងឺ) និងភាពខុសគ្នានៃទម្ងន់រុក្ខជាតិមានចាប់ពី 0.62 (ងាយនឹងកើតជំងឺ) ដល់ 4.45 ក្រាម (ធន់នឹងជំងឺ)។ មានទំនាក់ទំនងគួរឱ្យកត់សម្គាល់រវាងតម្លៃដែលសង្កេតឃើញនៅក្នុងការចម្លងពីរនៃការពិសោធន៍ (0.51 សម្រាប់ពិន្ទុភាពធ្ងន់ធ្ងរនៃជំងឺ, P = 0.00017 និង 0.61 សម្រាប់ទម្ងន់រុក្ខជាតិ, P < 0.0001) ក៏ដូចជារវាងប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរនេះ (-0.59 និង -0.77, P < 0.0001)។ មានទំនាក់ទំនងគួរឱ្យកត់សម្គាល់រវាងតម្លៃដែលបានសង្កេតឃើញនៅក្នុងការចម្លងពីរនៃការពិសោធន៍ (0.51 សម្រាប់ពិន្ទុភាពធ្ងន់ធ្ងរនៃជំងឺ, P = 0.00017 និង 0.61 សម្រាប់ទម្ងន់រុក្ខជាតិ, P < 0.0001) ក៏ដូចជារវាងប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរនេះ (- 0.59 និង - 0.77, P < 0.0001)។ Выявлена достоверная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях экспериментляжта (0,5 болезни, P = 0,00017 и 0,61 для массы растения, P< 0,0001), а также между этими двумя параметрами (-0,0,597) 0,0001) ។ ទំនាក់ទំនងដ៏សំខាន់មួយត្រូវបានរកឃើញរវាងតម្លៃដែលបានសង្កេតឃើញនៅក្នុងការធ្វើម្តងទៀតពីរនៃការពិសោធន៍ (0.51 សម្រាប់ពិន្ទុភាពធ្ងន់ធ្ងរនៃជំងឺ, P = 0.00017 និង 0.61 សម្រាប់ទម្ងន់រុក្ខជាតិ, P < 0.0001) ក៏ដូចជារវាងប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរនេះ (- 0.59 និង -0.77, P < 0.0001) 0.0001)។在两次重复实验中观察到的值之间存在显着相关性（疾病严重程度评分为0.51，P = 0.00017，植物重量为0.61，P < 0.0001)以及这两个参数之间 (- 0.59和- 0.77, P < 0.0001) ។在两次重复实验中观察的值之间存在相关性（疾病严重程度评分为。 5 分为。 p=0.00017，植物为为 0.61，p<0.0001)以及两个参数之间（（（-0.59和–5.9–0.59和 5.9–0.59和០,៧៧, P < ០,០០០១)។ Наблюдалась значительная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях (оценка тя,0жест) 0,00017 и масса растения 0,61, P<0,0001), и между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,0001) 0,77, P <0.10, មានទំនាក់ទំនងគួរឱ្យកត់សម្គាល់រវាងតម្លៃដែលសង្កេតឃើញជាស្ទួន (ពិន្ទុភាពធ្ងន់ធ្ងរនៃជំងឺ 0.51, P = 0.00017 និងទម្ងន់រុក្ខជាតិ 0.61, P < 0.0001) និងរវាងប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរនេះ (-0.59 និង -0.0001) 0.77, P<0.0001។ ).រោគសញ្ញាធម្មតាដែលឃើញនៅក្នុងរុក្ខជាតិដែលងាយនឹងកើតជំងឺរួមមាន ការរមួល និងរមួលដើមដែលស្រដៀងនឹងរចនាសម្ព័ន្ធ "ធ្នូរបស់អ្នកគង្វាល" បន្ទាប់មកដោយដំបៅរាងពងក្រពើជាមួយស្ព័រហ្សូអ៊ីតពណ៌ទឹកក្រូច/ពណ៌ផ្កាឈូក (រូបភាពបន្ថែមទី 1)។ ពូជអូស្ត្រាលីដែលផ្ទុកហ្សែន Lanr1 (83A:476 និង Tanjil) និង AnMan (Mandelup) មានភាពធន់មធ្យម 0.0331 និង 0.0036)។ ខ្សែខ្លះដែលក៏មានអាឡែល Lanr1 និង/ឬ AnMan "ធន់នឹង" បង្ហាញរោគសញ្ញានៃជំងឺនេះ។
គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ណាស់ ខ្សែ NLL មួយចំនួនដែលខ្វះអាឡែលសម្គាល់ "ធន់នឹង" ណាមួយបានបង្ហាញពីកម្រិតខ្ពស់នៃភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស (អាចប្រៀបធៀប ឬខ្ពស់ជាងហ្សែន Lanr1 ឬ AnMan) ដូចជា Boregine (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរ) Bojar (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ពិន្ទុ និង 0.001 សម្រាប់ទម្ងន់រុក្ខជាតិ) និង Population B-549/79b (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ពិន្ទុ និងមិនសំខាន់សម្រាប់ទម្ងន់)។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ណាស់ ខ្សែ NLL មួយចំនួនដែលខ្វះអាឡែលសម្គាល់ "ធន់នឹង" ណាមួយបានបង្ហាញពីកម្រិតខ្ពស់នៃភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស (អាចប្រៀបធៀប ឬខ្ពស់ជាងហ្សែន Lanr1 ឬ AnMan) ដូចជា Boregine (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរ) Bojar (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ពិន្ទុ និង 0.001 សម្រាប់ទម្ងន់រុក្ខជាតិ) និង Population B-549/79b (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ពិន្ទុ និងមិនសំខាន់សម្រាប់ទម្ងន់)។ Интересно, что несколько линий NLL, лишенных какого-либо «резистентного» маркерного аллеля, показьрики устойчивости к антракнозу (сопоставимый или более высокий, чем для генотипов Lanr1 или AnMan), таких как 1 чалния ( обоих параметров), Bojar (значение P < 0,0001 для оценки и 0,001 для массы растения) и популяции B-549/79b (значение P <0,0001 для оценки и незначимо для массы). គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ណាស់ ខ្សែ NLL ជាច្រើនដែលខ្វះអាឡែលសម្គាល់ 'ធន់' ណាមួយបានបង្ហាញពីកម្រិតខ្ពស់នៃភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស (អាចប្រៀបធៀបទៅនឹង ឬខ្ពស់ជាងហ្សែន Lanr1 ឬ AnMan) ដូចជា Boregine (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរ) Bojar (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ការវាយតម្លៃ និង 0.001 សម្រាប់ទម្ងន់រុក្ខជាតិ) និងចំនួនប្រជាជន B-549/79b (តម្លៃ P < 0.0001 សម្រាប់ការវាយតម្លៃ និងមិនសំខាន់សម្រាប់ទម្ងន់)។有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL 系显示出高水平的炭疈病抗斧 អាន 1 អាន基因型相当或更高)，例如Boregine（两个参数的P值< 0.0001）、Bojar（P 值<得分为0.0001，植物重量为0.001)和种群B-549/79b (得分P值< 0.0001，重量不显着). វាគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ណាស់ដែលប្រព័ន្ធ NLL មួយចំនួនដែលមិនមានសញ្ញាសម្គាល់ "អង់ទីហ្សែន" ណាមួយបង្ហាញពីភាពធន់ផ្ដេកខ្ពស់ (ស្មើនឹងហ្សែន Lanr1 ឬ AnMan ឬខ្ពស់ជាងនេះ) ដូចជា Boregine (ប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរ P < 0.0001), Bojar (តម្លៃ P < 0.0001, ទម្ងន់រុក្ខជាតិ 0.001) និងពូជ B-549/79b (តម្លៃ P < 0.0001, ទម្ងន់មិនសំខាន់)។ Интересно, что некоторые линии NLL, лишенные каких-либо маркерных аллелей «резистентности», показалини высти устойчивости к антракнозу (сравнимые или выше, чем у генотипов Lanr1 или AnMan), такие как Boregine (значение P < дратретра) 00пратобора 00000 Bojar (значение P<0,0001, масса растения 0,001) និង популяция B-549/79b (оценка P-значение <0,0001, масса незначительна). គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ណាស់ ពូជ NLL មួយចំនួនដែលគ្មានអាឡែលសម្គាល់ 'ភាពធន់' ណាមួយបានបង្ហាញពីកម្រិតខ្ពស់នៃភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស (អាចប្រៀបធៀបទៅនឹង ឬខ្ពស់ជាងហ្សែន Lanr1 ឬ AnMan) ដូចជា Boregine (តម្លៃ P សម្រាប់ប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាំងពីរ <0.0001), Bojar (តម្លៃ P < 0.0001, ទម្ងន់រុក្ខជាតិ 0.001) និងចំនួនប្រជាជន B-549/79b (តម្លៃ P < 0.0001, ទម្ងន់មិនសំខាន់)។បាតុភូតនេះបង្ហាញពីលទ្ធភាពនៃប្រភពហ្សែនថ្មីនៃភាពធន់ ដោយពន្យល់ពីកង្វះទំនាក់ទំនងរវាងហ្សែនសម្គាល់ និងលក្ខណៈជំងឺ (តម្លៃ P ពី ~0.42 ដល់ ~0.98)។ ដូច្នេះ ការធ្វើតេស្ត Kolmogorov-Smirnov បានបង្ហាញថា ទិន្នន័យស្តីពីភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសត្រូវបានចែកចាយប្រហាក់ប្រហែលនឹងធម្មតាសម្រាប់ពិន្ទុ (តម្លៃ P 0.25 និង 0.11) និងម៉ាស់រុក្ខជាតិ (តម្លៃ P 0.47 និង 0.55) ដែលបង្ហាញថាខ្ញុំសន្និដ្ឋានថាមានអាឡែលច្រើនជាង Lanr1 និង AnMan ពាក់ព័ន្ធ។
ដោយផ្អែកលើលទ្ធផលនៃការត្រួតពិនិត្យភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស ខ្សែចំនួន ៤ ត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ការវិភាគប្រតិចារិក៖ 83A:476, Boregine, Mandelup និង Population 22660។ ខ្សែទាំងនេះត្រូវបានសាកល្បងឡើងវិញសម្រាប់ភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់នៅក្នុងការពិសោធន៍ចាក់វ៉ាក់សាំងដោយប្រើលំដាប់ RNA ដោយផ្តល់ថាវាដូចគ្នានឹងការធ្វើតេស្តមុន។ តម្លៃពិន្ទុមានដូចខាងក្រោម៖ Boregin (1.71 ± 1.39), 83A: 476 (2.09 ± 1.38), Mandelup (3.82 ± 1.42) និង population 22660 (6.11 ± 1.29)។
ពិធីការ Illumina NovaSeq 6000 សម្រេចបានជាមធ្យម 40.5 គូ Mread ក្នុងមួយគំរូ (29.7 ដល់ 54.4 Mreads) (តារាងបន្ថែម S3)។ ពិន្ទុតម្រឹមនៅក្នុងលំដាប់យោងមានចាប់ពី 75.5% ដល់ 88.6%។ សហសម្ព័ន្ធជាមធ្យមនៃទិន្នន័យរាប់អានរវាងវ៉ារ្យ៉ង់ពិសោធន៍រវាងការចម្លងជីវសាស្រ្តមានចាប់ពី 0.812 ដល់ 0.997 (មធ្យមភាគ 0.959)។ ក្នុងចំណោមហ្សែនចំនួន 35,170 ដែលត្រូវបានវិភាគ មានហ្សែនចំនួន 2917 មិនបានបង្ហាញពីការបញ្ចេញមតិទេ ហើយហ្សែនចំនួន 4785 ផ្សេងទៀតត្រូវបានបង្ហាញក្នុងកម្រិតមិនសំខាន់ (មធ្យមភាគមូលដ្ឋាន < 5)។ ក្នុងចំណោមហ្សែនចំនួន 35,170 ដែលត្រូវបានវិភាគ មានហ្សែនចំនួន 2917 មិនបានបង្ហាញពីការបញ្ចេញមតិទេ ហើយហ្សែនចំនួន 4785 ផ្សេងទៀតត្រូវបានបង្ហាញក្នុងកម្រិតមិនសំខាន់ (មធ្យមភាគមូលដ្ឋាន < 5)។ Из 35 170 проанализированных генов 2917 не проявляли экспрессии, а остальные 4785 генов экспрессированова незначительном уровне (базовое среднее <5). ក្នុងចំណោមហ្សែនចំនួន 35,170 ដែលត្រូវបានវិភាគ មានហ្សែនចំនួន 2917 មិនបានបង្ហាញការបញ្ចេញមតិទេ ហើយហ្សែនចំនួន 4785 ដែលនៅសល់ត្រូវបានបង្ហាញក្នុងកម្រិតមិនសំខាន់ (មធ្យមភាគមូលដ្ឋាន <5)។在分析的35.170 个基因中，2917 个没有表达，其他4785个基因的表达可以忽略不计（幇最5）៣៥,១៧០ Из 35 170 проанализированных генов 2917 не экспрессировались, а остальные 4785 генов имели неэзкьсит (базовое среднее значение <5). ក្នុងចំណោមហ្សែនចំនួន 35,170 ដែលត្រូវបានវិភាគ មានហ្សែនចំនួន 2917 មិនត្រូវបានបញ្ចេញមតិទេ ហើយហ្សែនចំនួន 4785 ដែលនៅសល់មានការបញ្ចេញមតិតិចតួច (មធ្យមភាគមូលដ្ឋាន <5)។ដូច្នេះ ចំនួនហ្សែនដែលត្រូវបានចាត់ទុកថាបានបង្ហាញ (មធ្យមភាគមូលដ្ឋាន ≥ 5) ក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍គឺ 27,468 (78.1%) (តារាងបន្ថែម S4)។
ចាប់ពីចំណុចពេលវេលាដំបូង ខ្សែ NLL ទាំងអស់បានឆ្លើយតបទៅនឹងការចម្លងមេរោគ C. lupini (ពូជ Col-08) ដោយការសរសេរកម្មវិធីឡើងវិញនូវ transcriptome (តារាងទី 1) ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ភាពខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញរវាងខ្សែ។ ដូច្នេះ ខ្សែធន់ទ្រាំ 83A:476 (ដែលមានហ្សែន Lanr1) បានបង្ហាញការសរសេរកម្មវិធីឡើងវិញនូវ transcriptome យ៉ាងសំខាន់នៅចំណុចពេលវេលាដំបូង (6 hpi) ជាមួយនឹងការកើនឡើង 31-69 ដងនៃចំនួនហ្សែនឡើងលើ និងចុះក្រោមដាច់ដោយឡែកបើប្រៀបធៀបទៅនឹងចំណុចពេលវេលាផ្សេងទៀតនៅចំណុចពេលវេលានេះ។ លើសពីនេះ កំពូលនេះមានរយៈពេលខ្លី ដោយសារការបញ្ចេញមតិរបស់ហ្សែនមួយចំនួនតូចប៉ុណ្ណោះដែលនៅតែផ្លាស់ប្តូរយ៉ាងសំខាន់នៅចំណុចពេលវេលាទីពីរ (12 hpi)។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ Boregine ដែលក៏បានបង្ហាញពីកម្រិតខ្ពស់នៃភាពធន់នៅក្នុងការធ្វើតេស្តផ្សាំ មិនបានឆ្លងកាត់ការសរសេរកម្មវិធីឡើងវិញនៃការចម្លងរោគដ៏ធំបែបនេះក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍នោះទេ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ចំនួនហ្សែនដែលបានបង្ហាញខុសគ្នា (DEG) គឺដូចគ្នាសម្រាប់ Boregine និង 83A:476 នៅ 12 HPI។ ទាំង Mandelup និង population 22660 បានបង្ហាញកំពូល DEG នៅចំណុចពេលវេលាចុងក្រោយ (48 លីត្រ/វិនាទី) ដែលបង្ហាញពីការពន្យារពេលទាក់ទងគ្នានៅក្នុងការឆ្លើយតបការពារ។
ដោយសារតែ 83A:476 បានឆ្លងកាត់ការសរសេរកម្មវិធីឡើងវិញនូវប្រតិចារិកយ៉ាងច្រើនដើម្បីឆ្លើយតបទៅនឹង C. lupini នៅ 6 HPI បើប្រៀបធៀបទៅនឹងខ្សែពូជដទៃទៀតទាំងអស់ ~91% នៃ DEGs ដែលសង្កេតឃើញនៅចំណុចពេលវេលានេះគឺជាក់លាក់តាមពូជពង្ស (រូបភាពទី 1)។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយ មានការត្រួតស៊ីគ្នាខ្លះនៅក្នុងការឆ្លើយតបដំបូងរវាងខ្សែពូជសិក្សា ដោយសារ 68.5%, 50.9% និង 52.6% DEG នៅក្នុង Boregine, Mandelup និងចំនួនប្រជាជន 22660 រៀងគ្នា ត្រួតស៊ីគ្នាជាមួយនឹងអ្វីដែលរកឃើញនៅក្នុង 83A:476 ក្នុងចំណុចជាក់លាក់ក្នុងពេលវេលា។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ DEGs ទាំងនេះមានចំនួនតិចតួចប៉ុណ្ណោះ (0.97–1.70%) នៃ DEGs ទាំងអស់ដែលត្រូវបានរកឃើញបច្ចុប្បន្នដោយប្រើ 83A:476។ លើសពីនេះ DEG ចំនួន 11 ពីខ្សែទាំងអស់គឺស៊ីសង្វាក់គ្នានៅពេលនេះ (តារាងបន្ថែម S4-S6) រួមទាំងសមាសធាតុទូទៅនៃការឆ្លើយតបការពាររុក្ខជាតិ៖ ប្រូតេអ៊ីនផ្ទេរជាតិខ្លាញ់ (TanjilG_32225) អង់ស៊ីម endoglucan-1,3-β-glucoside (TanjilG_23384) ប្រូតេអ៊ីនពីរដែលបង្កឡើងដោយភាពតានតឹងដូចជា SAM22 (TanjilG_31528 និង TanjilG_31531) ប្រូតេអ៊ីនឡាតិចមូលដ្ឋាន (TanjilG_32352) និងប្រូតេអ៊ីនជញ្ជាំងកោសិការចនាសម្ព័ន្ធសម្បូរគ្លីស៊ីនពីរ (TanjilG_19701 និង TanjilG_19702)។ វាក៏មានការត្រួតស៊ីគ្នាខ្ពស់ផងដែរនៅក្នុងការឆ្លើយតបប្រតិចារិករវាង 83A:476 និង Boregine នៅ 24 HPI (សរុប 16-38% DEG) និងរវាង Mandelup និង Population 22660 នៅ 48 HPI (សរុប 14-20% DEG)។
ដ្យាក្រាម Venn ដែលបង្ហាញពីចំនួនហ្សែនដែលបង្ហាញភាពខុសគ្នា (DEG) នៅក្នុងពូជ lupine ស្លឹកតូចចង្អៀត (NLL) ដែលត្រូវបានចាក់វ៉ាក់សាំងជាមួយ Colletotrichum lupini (ពូជ Col-08 ដែលទទួលបានពីចម្ការ lupine ក្នុង Wierzhenice ប្រទេសប៉ូឡូញ ឆ្នាំ 1999)។ ពូជ NLL ដែលត្រូវបានវិភាគគឺ៖ 83A:476 (ធន់នឹងជំងឺ មានអាឡែល Lanr1) Boregine (ធន់នឹងជំងឺ មិនស្គាល់ប្រវត្តិហ្សែន) Mandelup (ធន់នឹងជំងឺកម្រិតមធ្យម មានអាឡែល AnMan) និង population 22660 (ងាយនឹងឆ្លងខ្លាំង)។ អក្សរកាត់ hpi តំណាងឱ្យម៉ោងបន្ទាប់ពីការចាក់វ៉ាក់សាំង។ តម្លៃសូន្យត្រូវបានដកចេញដើម្បីធ្វើឱ្យក្រាហ្វសាមញ្ញ។
សំណុំហ្សែនដែលបង្ហាញការបញ្ចេញលើសកម្រិតនៅ 6 hpi ត្រូវបានវិភាគសម្រាប់វត្តមាននៃដែនហ្សែន R ធម្មតា (តារាងបន្ថែម S7)។ ការសិក្សានេះបានបង្ហាញពីការបង្កើតប្រតិចារិកនៃហ្សែនធន់នឹងជំងឺបុរាណដែលមានដែន NBS-LRR តែនៅ 83A:476 ប៉ុណ្ណោះ។ សំណុំនេះមានហ្សែន TIR-NBS-LRR មួយ (tanjilg_05042) ហ្សែន CC-NBS-LRR ចំនួនប្រាំ (tanjilg_06165, tanjilg_06162, tanjilg_22773, tanjilg_22640, និង tanjilg_16162) និង NBS-LR ចំនួនបួន, Tanjilg_16162) និង NBS-LRRE ចំនួនបួន (tanjilg_16162) ក៏ដូចជា NBS-Lrr ចំនួនបួន (tanjilg_16162) និង NBS-LRR ចំនួនបួន (TANJILG_16162)។ ហ្សែនទាំងអស់នេះមានដែនធម្មតាដែលរៀបចំតាមលំដាប់ដែលបានអភិរក្ស។ បន្ថែមពីលើហ្សែនដូមេន NBS-LRR គីណាស RLL ជាច្រើនត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្មនៅ 6 hpi ពោលគឺមួយនៅក្នុង Boregine (TanjilG_19877) ពីរនៅក្នុង Mandelup (TanjilG_07141 និង TanjilG_19877) និងក្នុងចំនួនប្រជាជន 22660 (TanjilG_09014 និង TanjilG_10361) និងពីរនៅក្នុង 83A 27:476។
ហ្សែនដែលមានការបញ្ចេញមតិបានផ្លាស់ប្តូរគួរឱ្យកត់សម្គាល់ក្នុងការឆ្លើយតបទៅនឹងការចម្លងមេរោគជាមួយ C. lupini (ពូជ Col-08) ត្រូវបានទទួលរងនូវការវិភាគបង្កើនហ្សែនអនតូឡូស៊ី (GO) (តារាងបន្ថែម S8)។ ពាក្យដំណើរការជីវសាស្ត្រដែលត្រូវបានតំណាងលើសកម្រិតញឹកញាប់បំផុតគឺ “ការឆ្លើយតបការពាររបស់ GO:0006952” ដែលបានបង្ហាញក្នុងការរួមបញ្ចូលគ្នា 6 ក្នុងចំណោម 16 (បន្ទាត់ពេលវេលា ×) ដែលមានសារៈសំខាន់ខ្ពស់ (តម្លៃ P < 0.001) (រូបភាពទី 2)។ ពាក្យដំណើរការជីវសាស្ត្រដែលត្រូវបានតំណាងលើសកម្រិតញឹកញាប់បំផុតគឺ “ការឆ្លើយតបការពាររបស់ GO:0006952” ដែលបានបង្ហាញក្នុងការរួមបញ្ចូលគ្នា 6 ក្នុងចំណោម 16 (បន្ទាត់ពេលវេលា ×) ដែលមានសារៈសំខាន់ខ្ពស់ (តម្លៃ P < 0.001) (រូបភាពទី 2)។ Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был « GO: 0006952 зый,ветный, появлялся в 6 из 16 (время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение P<0,001) (рис. 2). ពាក្យដំណើរការជីវសាស្ត្រដែលត្រូវបានតំណាងលើសកម្រិតញឹកញាប់បំផុតគឺ 'GO:0006952 defense response' ដែលបានបង្ហាញនៅក្នុង 6 នៃ 16 (ពេលវេលា × ពូជពង្ស) រួមបញ្ចូលគ្នាដែលមានសារៈសំខាន់ខ្ពស់ (តម្លៃ P < 0.001) (រូបភាពទី 2)។最常被过度代表的生物过程术语是“GO: 0006952 防御反应”，它出的现在16 个（时痴×琿）个中，具有高显着性（P 值< 0.001）（图2）។ ពាក្យដំណើរការជីវសាស្ត្រដែលតំណាងឲ្យបំផុតគឺ “ការឆ្លើយតបការពារខ្លួន GO:0006952” ដែលលេចឡើងក្នុងបន្សំ 6 ក្នុងចំណោម 16 (时间×线) ដែលមានសារៈសំខាន់ខ្ពស់ (តម្លៃ P < 0.001) (រូបភាពទី 2)។ Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был « GO: 0006952 ការឆ្លើយតបការពារជាតិ» в 6 кпляряы, из 16 комбинаций (время × линия) с высокой значимостью (значение P<0,001) (рис. 2). ពាក្យដំណើរការជីវសាស្ត្រដែលត្រូវបានតំណាងលើសកម្រិតញឹកញាប់បំផុតគឺ 'GO:0006952 Defense Response' ដែលបានបង្ហាញក្នុង 6 ក្នុងចំណោម 16 បន្សំ (បន្ទាត់ពេលវេលា ×) ដែលមានសារៈសំខាន់ខ្ពស់ (តម្លៃ P < 0.001) (រូបភាពទី 2)។ពាក្យនេះត្រូវបានតំណាងលើសកម្រិតនៅចំណុចពេលវេលាពីរនៅក្នុង 83A: 476 និង Boregine (6 និង 24 hpi) និងនៅចំណុចពេលវេលាមួយនៅក្នុង Mandelup និង Population 22660 (12 និង 6 hpi រៀងគ្នា)។ នេះគឺជាលទ្ធផលដែលរំពឹងទុក ដោយបង្ហាញពីការឆ្លើយតបប្រឆាំងនឹងផ្សិតនៃខ្សែដែលធន់។ លើសពីនេះ 83A:476 បានឆ្លើយតបទៅនឹង C. lupini ដោយការបង្កើតហ្សែនយ៉ាងឆាប់រហ័សដែលទាក់ទងនឹងការផ្ទុះអុកស៊ីតកម្មដែលតំណាងដោយពាក្យ "ដំណើរការ redox GO:0055114" ដែលបង្ហាញពីការឆ្លើយតបការពារជាក់លាក់ ខណៈពេលដែល Boregine បានបង្ហាញពីការឆ្លើយតបការពារជាក់លាក់ ដែលទាក់ទងនឹងពាក្យ 'GO'។ :0006950 ការឆ្លើយតបស្ត្រេស”។ ចំនួនប្រជាជន 22660 បានធ្វើឱ្យសកម្មនូវការឆ្លើយតបធន់ទ្រាំផ្ដេកដែលពាក់ព័ន្ធនឹងសារធាតុរំលាយអាហារបន្ទាប់បន្សំ ដោយបន្លិចចំនួនច្រើនហួសប្រមាណនៃពាក្យ “GO:0016104 ដំណើរការនៃជីវសំយោគទ្រីទឺប៉ែន” និង “GO:0006722 ដំណើរការនៃមេតាបូលីសទ្រីទឺប៉ែន” (ពាក្យទាំងពីរជាកម្មសិទ្ធិរបស់សំណុំហ្សែនដូចគ្នា) ដោយគិតគូរពីលទ្ធផលនៃការវិភាគការបង្កើនពាក្យ GO ស្ថេរភាពប្រតិកម្ម Mandelup គឺស្ថិតនៅចន្លោះ Boregine និងចំនួនប្រជាជន 22660។ លើសពីនេះ ប្រតិកម្មដំបូង 83A:476 (6 hpi) និងប្រតិកម្មយឺត Mandelup និងចំនួនប្រជាជន 22660 រួមមានពាក្យ GO:0015979 'រស្មីសំយោគ' និងដំណើរការជីវសាស្រ្តពាក់ព័ន្ធផ្សេងទៀត។
ពាក្យអុនតូឡូស៊ីហ្សែនដំណើរការជីវសាស្ត្រដែលបានជ្រើសរើសក្នុងចំណារពន្យល់នៃហ្សែនដែលបានបង្ហាញភាពខុសគ្នាអំឡុងពេលនៃការឆ្លើយតបប្រតិចារិកនៃរុក្ខជាតិលូពីនស្លឹកតូចចង្អៀត (NLL) ដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំងជាមួយនឹងជំងឺអង់ត្រាក់ លូពីន (ពូជ Col-08 ដែលទទួលបានពីវាលលូពីនក្នុង Wierzhenice ប្រទេសប៉ូឡូញ ក្នុងឆ្នាំ 1999) ត្រូវបានបំផ្លើសយ៉ាងខ្លាំង។ ខ្សែ NLL ដែលបានវិភាគគឺ៖ 83A:476 (ធន់ទ្រាំ ដែលមានអាឡែល Lanr1 ដែលមានលក្ខណៈស្រដៀងគ្នា) បូរីជីន (ធន់ទ្រាំ សាវតារហ្សែនដែលមិនស្គាល់) ម៉ាន់ដេលូប (ធន់ទ្រាំកម្រិតមធ្យម ដែលមានអាឡែល AnMan ដែលមានលក្ខណៈស្រដៀងគ្នា) និងប្រជាជន 22660 (ងាយនឹងកើតជំងឺ)។
ដោយសារតែការសិក្សានេះមានគោលបំណងកំណត់អត្តសញ្ញាណហ្សែនដែលរួមចំណែកដល់ភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស ហ្សែនដែលត្រូវបានចាត់ឱ្យប្រើពាក្យ GO “GO: 0006952 ការឆ្លើយតបការពារ” និង “GO: 0055114 ដំណើរការ Redox” ត្រូវបានវិភាគជាមួយនឹងការកាត់ផ្តាច់ចាប់តាំងពីមធ្យមភាគមូលដ្ឋាន ≥ 30 ជាមួយនឹងយ៉ាងហោចណាស់មួយបន្ទាត់។ × ចំណុចក្នុងពេលវេលារួមបញ្ចូលគ្នានូវតម្លៃសំខាន់ៗខាងស្ថិតិនៃ log2 (ការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់)។ ចំនួនហ្សែនដែលបំពេញតាមលក្ខណៈវិនិច្ឆ័យទាំងនេះគឺ 65 សម្រាប់ GO:0006952 និង 524 សម្រាប់ GO:0055114។
83A:476 បានបង្ហាញកំពូល DEG ពីរដែលមានកំណត់ចំណាំជាមួយពាក្យ GO:0006952 ដែលទីមួយនៅ 6 ហ្សែនក្នុងមួយអ៊ីញ (64 ហ្សែន ការគ្រប់គ្រងឡើងលើ និងចុះក្រោម) និងទីពីរនៅ 24 ហ្សែនក្នុងមួយអ៊ីញ (15 ហ្សែន ការគ្រប់គ្រងឡើងលើតែប៉ុណ្ណោះ)។ Boregine ក៏បានបង្ហាញផងដែរថា GO:0006952 បានឡើងដល់កំពូលនៅចំណុចពេលវេលាដូចគ្នា ប៉ុន្តែមាន DEG តិចជាង (11 និង 8) និងការធ្វើឱ្យសកម្មអនុគ្រោះ។ Mandeloop បានបង្ហាញកំពូលពីរនៃ GO:0006952 នៅ 12 និង 48 HPI ដែលទាំងពីរមានហ្សែនចំនួន 12 (ទីមួយមានហ្សែនធ្វើឱ្យសកម្ម និងទីពីរមានតែហ្សែនបង្ក្រាបប៉ុណ្ណោះ) ខណៈពេលដែលចំនួនប្រជាជន 22660 នៅ 6 HPI (13 ហ្សែន) មានការកើនឡើងនៃកំពូលបទប្បញ្ញត្តិ។ គួរកត់សម្គាល់ថា 96.4% នៃ GO:0006952 DEG នៅក្នុងកំពូលទាំងនេះមានប្រភេទនៃការឆ្លើយតបដូចគ្នា (ឡើងលើ ឬចុះក្រោម) ដែលបង្ហាញពីការត្រួតស៊ីគ្នាយ៉ាងសំខាន់នៅក្នុងការឆ្លើយតបការពារទោះបីជាមានភាពខុសគ្នានៃចំនួនហ្សែនដែលពាក់ព័ន្ធក៏ដោយ។ ក្រុមលំដាប់ធំបំផុតដែលទាក់ទងនឹងពាក្យ GO:0006952 អ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីនសារដែលទាក់ទងនឹងភាពតានតឹងដោយសារភាពអត់ឃ្លាន 22 (ដូច SAM22) ដែលជាកម្មសិទ្ធិរបស់ប្រូតេអ៊ីនថ្នាក់ទី 10 នៃប្រូតេអ៊ីនដែលទាក់ទងនឹងរោគវិទ្យា (PR-10) និងប្រូតេអ៊ីនស្នូល latex. ស្រដៀងគ្នា (ដូច MLP) (រូបភាពទី 3)។ ក្រុមទាំងពីរមានភាពខុសគ្នានៅក្នុងលក្ខណៈនៃការបញ្ចេញមតិ និងទិសដៅនៃការឆ្លើយតប។ ហ្សែនដែលអ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីនដែលស្រដៀងនឹង SAM22 បានបង្ហាញការបញ្ចូលដែលស៊ីសង្វាក់គ្នា និងសំខាន់នៅចំណុចពេលវេលាដំបូង (6 ឬ 12 hpi) ហើយជាទូទៅមិនឆ្លើយតបនៅចុងបញ្ចប់នៃការពិសោធន៍ (48 hpi) ខណៈពេលដែលប្រូតេអ៊ីនដែលស្រដៀងនឹង MLP បានបង្ហាញការសម្របសម្រួលនៅ 6 hpi. hpi. 83A:476 និង Mandelup នៅ 48 hp/in ចំណុចទិន្នន័យផ្សេងទៀតស្ទើរតែទាំងអស់មិនឆ្លើយតប។ លើសពីនេះ ភាពខុសគ្នានៃទម្រង់ការបញ្ចេញមតិនៃហ្សែនប្រូតេអ៊ីនដែលស្រដៀងនឹង SAM22 បានធ្វើតាមភាពប្រែប្រួលដែលសង្កេតឃើញនៅក្នុងភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស ដោយសារខ្សែដែលធន់ទ្រាំច្រើនមានចំណុចពេលវេលាច្រើនជាងដែលបង្កើតហ្សែនទាំងនេះយ៉ាងសំខាន់ជាងហ្សែនដែលងាយរងគ្រោះជាង។ ហ្សែន PR-10 ដែលស្រដៀងនឹង LlR18A/B មួយទៀតបានបង្ហាញគំរូនៃការបញ្ចេញមតិស្រដៀងគ្នាខ្លាំងទៅនឹងហ្សែនប្រូតេអ៊ីនដែលស្រដៀងនឹង SAM22។
សមាសធាតុសំខាន់ៗនៃពាក្យដំណើរការជីវសាស្រ្ត "GO:0006952 ការឆ្លើយតបការពារ" និងគំរូនៃការបញ្ចេញមតិនៃហ្សែនបេក្ខជននៃអាឡែល Lanr1 និង AnMan ត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណ។ មាត្រដ្ឋាន Log2 តំណាងឱ្យតម្លៃ log2 (ការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់) រវាងរុក្ខជាតិដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំង (Colletotrichum lupini, ពូជ Col-08, ដែលទទួលបានពីវាល lupine, Wizhenica, ប៉ូឡូញ, 1999) និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំងក្លែងក្លាយ) នៅចំណុចពេលវេលាដូចគ្នា។ ខ្សែ lupine ស្លឹកតូចចង្អៀតខាងក្រោមត្រូវបានវិភាគ៖ 83A:476 (ធន់នឹង ផ្ទុកអាឡែល Lanr1 ដូចគ្នា) Boregine (ធន់នឹង មិនស្គាល់ប្រវត្តិហ្សែន) Mandelup (ធន់នឹងមធ្យម ផ្ទុកអាឡែល AnMan ដូចគ្នា) និង Population 22660 (ងាយរងគ្រោះ)។
លើសពីនេះ ទម្រង់ការបញ្ចេញមតិនៃហ្សែនបេក្ខជន RNA-seq Lanr1 (TanjilG_05042) និង AnMan (TanjilG_12861) ត្រូវបានវាយតម្លៃ (រូបភាពទី 3)។ ហ្សែន TanjilG_05042 បានបង្ហាញពីការឆ្លើយតបយ៉ាងសំខាន់ (ការធ្វើឱ្យសកម្ម) នៅ 83A:476 តែនៅចំណុចពេលវេលាដំបូង (6 hpi) ប៉ុណ្ណោះ ខណៈពេលដែល TanjilG_12861 គឺមានសារៈសំខាន់នៅក្នុង Mandeloop តែនៅចំណុចពេលវេលាពីរប៉ុណ្ណោះ៖ 6 hpi (down regulation) និង 24 hpi (6 hpi)។ ជាមួយ។)។ អាចលៃតម្រូវបាន))។
ហ្សែនដែលបង្ហាញការបញ្ចេញមតិច្រើនពេកនៅក្នុងពាក្យ GO:0055114 “ដំណើរការ redox” គឺជាហ្សែនដែលអ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីន cytochrome P450 និង peroxidase (រូបភាពទី 4)។ ចំពោះគំរូដែលញែកចេញពី 83A:476 នៅ 6 HPI តម្លៃ log2 អតិបរមា ឬអប្បបរមា (ការផ្លាស់ប្តូរដង) (សម្រាប់ 86.6% នៃហ្សែន) ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញជាទូទៅរវាងរុក្ខជាតិដែលចាក់វ៉ាក់សាំង និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ ដែលបង្ហាញពីការឆ្លើយតបខ្ពស់នៃហ្សែននេះចំពោះការរួមភេទដែលចាក់វ៉ាក់សាំង។ 83A:476 បានបង្ហាញពី GO: 0055114 DEG សំខាន់បំផុតនៅ 6 hpi (ហ្សែន 503) ខណៈពេលដែលខ្សែដែលនៅសល់នៅ 48 hpi (Boregine, ហ្សែន 31; Mandelup, ហ្សែន 85; និង Population 22660, ហ្សែន 78))។ នៅក្នុងហ្សែនភាគច្រើននៃគ្រួសារ GO:0055114 ប្រភេទនៃការឆ្លើយតបពីរចំពោះការចាក់វ៉ាក់សាំង (ការធ្វើឱ្យសកម្ម និងការរារាំង) ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញ។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ រហូតដល់ 97.6% នៃ DEGs ដែលបានកំណត់អត្តសញ្ញាណសម្រាប់ពាក្យ GO: 0055114 នៅក្នុង Mandelupe នៅ 48 hp។ ការសង្កេតទាំងនេះបង្ហាញថា ទោះបីជាមាត្រដ្ឋានតូចជាងច្រើនក៏ដោយ (ឧ. ចំនួនហ្សែន redox ដែលបានផ្លាស់ប្តូរ 85 ទល់នឹង 503) គំរូនៃការឆ្លើយតប transcriptome ដែលពន្យារពេលនៃ mandeloup ទៅនឹង anthracnose គឺស្រដៀងគ្នាទៅនឹងការឆ្លើយតបដំបូងនៃ 83A:476។ នៅក្នុង Boregine និង Population 22660 ការបញ្ចូលគ្នានេះគឺទាបជាងនៅ 51.6% និង 75.6% រៀងគ្នា។
គំរូនៃការបញ្ចេញមតិនៃសមាសធាតុសំខាន់ៗនៃពាក្យនៃដំណើរការជីវសាស្រ្ត "ដំណើរការ Redox GO:0055114" ត្រូវបានបង្ហាញ។ មាត្រដ្ឋាន Log2 តំណាងឱ្យតម្លៃ log2 (ការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់) រវាងរុក្ខជាតិដែលបានទទួលការចាក់ថ្នាំ (Colletotrichum lupini, ពូជ Col-08, ដែលទទួលបានពីវាល lupine, Wizhenica, ប៉ូឡូញ, 1999) និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ដែលបានទទួលការចាក់ថ្នាំក្លែងក្លាយ) នៅចំណុចពេលវេលាដូចគ្នា។ ខ្សែ lupine ស្លឹកតូចចង្អៀតខាងក្រោមត្រូវបានវិភាគ៖ 83A:476 (ធន់នឹងការផ្ទុក allele Lanr1 homozygous), Boregine (ធន់នឹងការផ្ទុកប្រវត្តិហ្សែនមិនស្គាល់), Mandelup (ធន់នឹងការផ្ទុក allele AnMan homozygous), និង Population 22660 (ងាយនឹងឆ្លង)។
83A:476 ការឆ្លើយតបប្រតិចារិកទៅនឹងការចាក់ថ្នាំជាមួយ C. lupini (ពូជ Col-08) ក៏រួមបញ្ចូលទាំងការបិទសំឡេងហ្សែនដែលសម្របសម្រួលដោយសន្មតថាជាពាក្យ GO:0015979 "រស្មីសំយោគ" និងដំណើរការជីវសាស្រ្តពាក់ព័ន្ធផ្សេងទៀត (រូបភាពទី 5)។ សំណុំ GO:0015979 DEG នេះមានហ្សែនចំនួន 105 ដែលត្រូវបានបង្ក្រាបយ៉ាងសំខាន់នៅ 6 hpi នៅ 83A:476។ នៅក្នុងសំណុំរងនេះ ហ្សែនចំនួន 37 ក៏ត្រូវបានធ្វើឱ្យចុះខ្សោយនៅក្នុង Mandelup នៅ 48 HPI និង 35 នៅចំណុចពេលវេលាដូចគ្នានៅក្នុងចំនួនប្រជាជន 22660 រួមទាំង DEG ចំនួន 19 ដែលជារឿងធម្មតាចំពោះហ្សែនទាំងពីរ។ គ្មាន DEG ដែលទាក់ទងនឹងពាក្យ GO: 0015979 ត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្មយ៉ាងសំខាន់នៅក្នុងការរួមបញ្ចូលគ្នាណាមួយ (បន្ទាត់ x ពេលវេលា)។
គំរូនៃការបញ្ចេញមតិនៃសមាសធាតុសំខាន់ៗនៃពាក្យនៃដំណើរការជីវសាស្រ្ត "GO:0015979 រស្មីសំយោគ" ត្រូវបានបង្ហាញ។ មាត្រដ្ឋាន Log2 តំណាងឱ្យតម្លៃ log2 (ការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់) រវាងរុក្ខជាតិដែលបានទទួលការចាក់ថ្នាំ (Colletotrichum lupini, ពូជ Col-08, ដែលទទួលបានពីវាល lupine, Wizhenica, ប៉ូឡូញ, 1999) និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ដែលបានទទួលការចាក់ថ្នាំក្លែងក្លាយ) នៅចំណុចពេលវេលាដូចគ្នា។ ខ្សែ lupine ស្លឹកតូចចង្អៀតខាងក្រោមត្រូវបានវិភាគ៖ 83A:476 (ធន់នឹងជំងឺ, មានអាឡែល Lanr1 ដូចគ្នា), Boregine (ធន់នឹងជំងឺ, មិនស្គាល់ប្រវត្តិហ្សែន), Mandelup (ធន់នឹងជំងឺកម្រិតមធ្យម, មានអាឡែល AnMan ដូចគ្នា), និង Population 22660 (ងាយនឹងកើតជំងឺ)។
ដោយផ្អែកលើលទ្ធផលនៃការវិភាគការបញ្ចេញមតិឌីផេរ៉ង់ស្យែល និងទំនងជាពាក់ព័ន្ធនឹងការឆ្លើយតបការពារប្រឆាំងនឹងផ្សិតបង្កជំងឺ សំណុំហ្សែនទាំងប្រាំពីរនេះត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ការវាស់វែងបរិមាណនៃទម្រង់ការបញ្ចេញមតិដោយវិធីសាស្ត្រ PCR ពេលវេលាជាក់ស្តែង (តារាងបន្ថែម S9)។
ហ្សែនប្រូតេអ៊ីនដែលអាចសន្មត់បាន TanjilG_10657 ត្រូវបានបង្កឡើងយ៉ាងសំខាន់នៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ផលិតកម្ម និងចំណុចពេលវេលាទាំងអស់ដែលបានសិក្សា បើប្រៀបធៀបទៅនឹងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ធ្វើត្រាប់តាម) (តារាងបន្ថែម S10, S11)។ លើសពីនេះ ទម្រង់ការបញ្ចេញមតិរបស់ TanjilG_10657 បានបង្ហាញពីនិន្នាការកើនឡើងក្នុងអំឡុងពេលនៃការពិសោធន៍សម្រាប់ខ្សែសង្វាក់ផលិតកម្មទាំងអស់។ ចំនួនប្រជាជន 22660 បានបង្ហាញពីភាពរសើបខ្ពស់បំផុតរបស់ TanjilG_10657 ចំពោះការចាក់ថ្នាំជាមួយនឹងការធ្វើឱ្យសកម្ម 114 ដង និងកម្រិតការបញ្ចេញមតិដែលទាក់ទងខ្ពស់បំផុត (4.4 ± 0.4) នៅ 24 HPI (រូបភាពទី 6a)។ ហ្សែនប្រូតេអ៊ីន PR10 LlR18A TanjilG_27015 ក៏បានបង្ហាញពីការធ្វើឱ្យសកម្មនៅទូទាំងខ្សែសង្វាក់ផលិតកម្ម និងចំណុចពេលវេលាទាំងអស់ ដោយមានសារៈសំខាន់ខាងស្ថិតិនៅចំណុចទិន្នន័យភាគច្រើន (រូបភាពទី 6b)។ ស្រដៀងគ្នាទៅនឹង TanjilG_10657 កម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិទាក់ទងខ្ពស់បំផុតនៃ TanjilG_27015 ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងចំនួនប្រជាជនដែលបានឆ្លងមេរោគចំនួន 22660 នាក់ នៅ 24 HPI (19.5 ± 2.4)។ ហ្សែនអង់ដូឈីទីណាសអាស៊ីត TanjilG_04706 ត្រូវបានកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ទាំងអស់ និងនៅចំណុចពេលវេលាទាំងអស់ លើកលែងតែ Boregine 6 hpi (រូបភាពទី 6c)។ វាត្រូវបានបង្កឡើងយ៉ាងខ្លាំងនៅចំណុចពេលវេលាដំបូង (6 HPI) នៅ 83A:476 (10.5 ដង) និងកើនឡើងមធ្យមនៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ផ្សេងទៀត (6.6-7.5 ដង)។ ក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍ ការបញ្ចេញមតិរបស់ TanjilG_04706 នៅតែស្ថិតក្នុងកម្រិតស្រដៀងគ្នានៅក្នុង 83A:476 និង Boregine ខណៈពេលដែលនៅក្នុង Mandelup និង Population 22660 វាបានកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់ ដោយឈានដល់តម្លៃខ្ពស់ (5.9 ± 1.5 និង 6.2 ± 1.5 រៀងគ្នា)។ ហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង endoglucan-1,3-β-glucosidase គឺ TanjilG_23384 បានបង្ហាញពីភាពសកម្មខ្ពស់នៅចំណុចពេលវេលាពីរដំបូង (6 និង 12 hpi) នៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ទាំងអស់លើកលែងតែចំនួនប្រជាជន 22660 (រូបភាពទី 6d)។ កម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិដែលទាក់ទងខ្ពស់បំផុតនៃ TanjilG_23384 ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅចំណុចពេលវេលាទីពីរ (12 hpi) នៅក្នុង Mandelup (2.7 ± 0.3) និង 83A:476 (1.5 ± 0.1)។ នៅ 24 HPI ការបញ្ចេញមតិ TanjilG_23384 គឺទាបនៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ដែលបានសិក្សាទាំងអស់ (ពី 0.04 ± 0.009 ដល់ 0.44 ± 0.12)។
ទម្រង់ការបញ្ចេញមតិនៃហ្សែនដែលបានជ្រើសរើស (ag) ដែលបានបង្ហាញដោយ PCR បរិមាណ។ លេខ 6, 12 និង 24 តំណាងឱ្យម៉ោងបន្ទាប់ពីការចាក់វ៉ាក់សាំង។ ហ្សែន LanDExH7 និង LanTUB6 ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតា ហើយ LanTUB6 ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការក្រិតតាមខ្នាតអន្តរស៊េរី។ របារកំហុសតំណាងឱ្យគម្លាតស្តង់ដារដោយផ្អែកលើការចម្លងជីវសាស្រ្តចំនួនបី ដែលនីមួយៗជាមធ្យមនៃការចម្លងបច្ចេកទេសចំនួនបី។ សារៈសំខាន់ខាងស្ថិតិនៃភាពខុសគ្នានៃកម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិរវាងរុក្ខជាតិដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំង (Colletotrichum lupini, ពូជ Col-08, ដែលទទួលបានក្នុងឆ្នាំ 1999 ពីវាល lupine ក្នុង Wierzenica ប្រទេសប៉ូឡូញ) និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំងក្លែងក្លាយ) ត្រូវបានសម្គាល់ខាងលើចំណុចទិន្នន័យ (តម្លៃ *P < 0.05, តម្លៃ **P ≤ 0.01, តម្លៃ ***P ≤ 0.001)។ សារៈសំខាន់ខាងស្ថិតិនៃភាពខុសគ្នានៃកម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិរវាងរុក្ខជាតិដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំង (Colletotrichum lupini, ពូជ Col-08, ដែលទទួលបានក្នុងឆ្នាំ 1999 ពីវាល lupine ក្នុង Wierzenica ប្រទេសប៉ូឡូញ) និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំងក្លែងក្លាយ) ត្រូវបានសម្គាល់ខាងលើចំណុចទិន្នន័យ (តម្លៃ *P < 0.05, តម្លៃ **P ≤ 0.01, តម្លៃ ***P ≤ 0.001)។ Статистическая значимость различий в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-09, 19г. с поля люпина в Верженице, Польша) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечхена на дича*знми 0,05, **значение P ≤ 0,01, ***значение P ≤ 0,001)។ ភាពខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់ខាងស្ថិតិនៅក្នុងកម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិរវាងរុក្ខជាតិដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំង (Colletotrichum lupini, ពូជ Col-08, ដែលទទួលបានក្នុងឆ្នាំ 1999 ពីចម្ការ lupine ក្នុង Wierzhenice ប្រទេសប៉ូឡូញ) និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំងក្លែងក្លាយ) ត្រូវបានកត់សម្គាល់ខាងលើចំណុចទិន្នន័យ (តម្លៃ *P < 0.05, **តម្លៃ P ≤ 0.01, ***តម្លៃ P ≤ 0.001)។接种(Colletotrichum lupini,Col-08株,1999年从波兰Wierzenica的羽扇豆田获得和对照（模拟接种）植物之间表达水平差异的统计学显着性标记在数据点上方（*P 0.05, **P 值≤ 0.01, ***P 值≤ 0.001)។接种(colletotrichum lupini, color-08株, 1999年波兰波兰wierzenica的羽扇获得)和对照（接种植植植植差异的统计学显着性标记数据点 上方*p 值 <0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001)។ Статистически значимые различия в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08, люпина в Верженице, Польша, ក្នុងឆ្នាំ 1999 ឆ្នាំ) និង контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечены надынмечены над значение P < 0,05, ** P-значение ≤ 0,01, ***P-значение ≤ 0,001)។ ភាពខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់ខាងស្ថិតិនៅក្នុងកម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិរវាងរុក្ខជាតិដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំង (Colletotrichum lupini, ពូជ Col-08, ដែលទទួលបានពីចម្ការ lupine ក្នុង Verzhenice ប្រទេសប៉ូឡូញ ក្នុងឆ្នាំ 1999) និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំងក្លែងក្លាយ) ត្រូវបានកត់សម្គាល់ខាងលើចំណុចទិន្នន័យ (តម្លៃ *P < 0.05, **តម្លៃ P ≤ 0.01, ***តម្លៃ P ≤ 0.001)។ខ្សែ NLL ដែលត្រូវបានវិភាគរួមមាន៖ 83A:476 (ធន់នឹងមេរោគ មានផ្ទុកអាឡែល Lanr1 ដូចគ្នា) Mandelup (ធន់នឹងមេរោគកម្រិតមធ្យម មានផ្ទុកអាឡែល AnMan ដូចគ្នា) Boregine (ធន់នឹងមេរោគ មិនស្គាល់ប្រវត្តិហ្សែន) និងប្រជាជន 22660 (ងាយនឹងឆ្លងមេរោគ)។
ហ្សែនបេក្ខជន TanjilG_05042 នៅទីតាំង Lanr1 បានបង្ហាញពីគំរូនៃការបញ្ចេញមតិខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់ពីទម្រង់ដែលទទួលបានពីការសិក្សា RNA-seq (រូបភាពទី 6e)។ ការធ្វើឱ្យសកម្មគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃហ្សែននេះត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុង Mandelup និងចំនួនប្រជាជន 22660 (រហូតដល់ 39.7 និង 11.7 ដងរៀងគ្នា) ដែលបណ្តាលឱ្យមានកម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិខ្ពស់ (រហូតដល់ 1.4 ± 0.14 និង 7.2 ± 1.3 រៀងគ្នា)។ 83A:476 ក៏បានបង្ហាញពីការកើនឡើងមួយចំនួននៃហ្សែន TanjilG_05042 (រហូតដល់ 3.8 ដង) ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ កម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិដែលទាក់ទងគ្នាដែលសម្រេចបាន (0.044 ± 0.002) គឺទាបជាង 30 ដងជាងកម្រិតដែលសង្កេតឃើញនៅក្នុង Mandelup និងចំនួនប្រជាជន 22660។ វិភាគដោយ qPCR បានបង្ហាញពីភាពខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃកម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិរវាងហ្សែននៅក្នុងវ៉ារ្យ៉ង់ដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំងក្លែងក្លាយ (ក្រុមត្រួតពិនិត្យ) ដែលឈានដល់ភាពខុសគ្នា 58 ដងរវាងចំនួនប្រជាជន 22660 និង 83A:476 ក៏ដូចជារវាងចំនួនប្រជាជន 22660 និង 22660។ ភាពខុសគ្នាទ្វេដងត្រូវបានសម្រេចរវាង Boregine និង Mandalup។
ហ្សែនបេក្ខជននៅទីតាំង AnMan គឺ TanjilG_12861 ត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្មជាការឆ្លើយតបទៅនឹងការចាក់វ៉ាក់សាំងនៅក្នុង 83A:476 និង Mandelup គឺអព្យាក្រឹតនៅក្នុងចំនួនប្រជាជន 22660 ហើយត្រូវបានធ្វើឱ្យថយចុះនៅក្នុង Boregine (រូបភាពទី 6f)។ ការបញ្ចេញមតិដែលទាក់ទងនៃហ្សែន TanjilG_12861 គឺខ្ពស់បំផុតនៅក្នុង 83A: 476 ដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំង (0.14±0.01)។ ហ្សែនប្រូតេអ៊ីនឆក់កំដៅថ្នាក់ទី I 17.4 kDa TanjilG_05080 HSP17.4 បានបង្ហាញកម្រិតការបញ្ចេញមតិដែលទាក់ទងទាបជាងនៅក្នុងពូជដែលបានសិក្សាទាំងអស់ និងចំណុចពេលវេលា (រូបភាពទី 6g)។ តម្លៃខ្ពស់បំផុតត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅ 24 HPI នៅក្នុងចំនួនប្រជាជន 22660 (0.14 ± 0.02 ដែលជាការកើនឡើងប្រាំបីដងនៃការឆ្លើយតបទៅនឹងការចាក់វ៉ាក់សាំង)។
ការប្រៀបធៀបទម្រង់ការបញ្ចេញហ្សែន (រូបភាពទី 7) បានបង្ហាញពីទំនាក់ទំនងខ្ពស់រវាង TanjilG_10657 និងហ្សែនបួនផ្សេងទៀត៖ TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.80), និង TanjilG_04706 (r = 0.79)។ លទ្ធផលបែបនេះអាចបង្ហាញពីការរួមផ្សំនៃហ្សែនទាំងនេះក្នុងអំឡុងពេលឆ្លើយតបការពារ។ ហ្សែន TanjilG_12861 និង TanjilG_23384 បានបង្ហាញទម្រង់ការបញ្ចេញមតិខុសៗគ្នាជាមួយនឹងតម្លៃមេគុណសហសម្ព័ន្ធ Pearson ទាបជាង (ពី 0.08 ដល់ 0.43 និង -0.19 ដល់ 0.28 រៀងគ្នា) បើប្រៀបធៀបទៅនឹងហ្សែនដទៃទៀត។
ទំនាក់ទំនងរវាងទម្រង់ការបញ្ចេញហ្សែនត្រូវបានរកឃើញដោយប្រើ PCR បរិមាណ។ ខ្សែពូជ lupine ស្លឹកតូចចង្អៀតខាងក្រោមត្រូវបានវិភាគ៖ 83A:476 (ធន់នឹងជំងឺ មានអាឡែល Lanr1 ដូចគ្នា) Mandelup (ធន់នឹងជំងឺមធ្យម មានអាឡែល AnMan ដូចគ្នា) Boregine (ធន់នឹងជំងឺ មិនស្គាល់ប្រវត្តិហ្សែន) និង Population 22660 (ងាយនឹងកើតជំងឺ)។ ចំណុចពេលវេលាបីត្រូវបានគណនា (6, 12 និង 24 ម៉ោងបន្ទាប់ពីឆ្លងជំងឺ) រួមទាំងរុក្ខជាតិដែលឆ្លងជំងឺ (Colletotrichum lupini, ពូជ Col-08, ដែលទទួលបានពីចម្ការ lupine នៅ Wierzhenice ប្រទេសប៉ូឡូញ ក្នុងឆ្នាំ 1999) និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ (ដែលឆ្លងជំងឺក្លែងក្លាយ)។ មាត្រដ្ឋានបង្ហាញពីតម្លៃនៃមេគុណសហសម្ព័ន្ធ Pearson។
ដោយផ្អែកលើទិន្នន័យដែលទទួលបានក្នុងកម្លាំង 6 សេះក្នុងមួយអ៊ីញ WGCNA ត្រូវបានអនុវត្តលើ 9981 DEG ដែលត្រូវបានកំណត់ដោយការប្រៀបធៀបរុក្ខជាតិដែលចាក់វ៉ាក់សាំង និងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ ដើម្បីផ្តោតលើការឆ្លើយតបការពារដំបូង (តារាងបន្ថែម S12)។ ម៉ូឌុលហ្សែនចំនួនម្ភៃពីរ (ចង្កោម) ត្រូវបានរកឃើញជាមួយនឹងទម្រង់ការបញ្ចេញមតិ (វិជ្ជមាន ឬអវិជ្ជមាន) ដែលទាក់ទងគ្នារវាងហ្សែនទីប និងវ៉ារ្យ៉ង់ពិសោធន៍។ ជាមធ្យម កម្រិតនៃការបញ្ចេញហ្សែនកំពុងធ្លាក់ចុះតាមលំដាប់ 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ នៅក្នុងវ៉ារ្យ៉ង់ទាំងពីរ និន្នាការនេះគឺខ្លាំងជាងនៅក្នុងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ)។ ជាមធ្យម កម្រិតនៃការបញ្ចេញហ្សែនកំពុងធ្លាក់ចុះតាមលំដាប់ 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ នៅក្នុងវ៉ារ្យ៉ង់ទាំងពីរ និន្នាការនេះគឺខ្លាំងជាងនៅក្នុងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ)។ В среднем уровни экспрессии генов снижались в порядке 83A:476 > Mandelup > Boregine > ចំនួនប្រជាជន 22660 (в обоих вариантах , однентах , однентах , однентах , однентах , однентах , однентке , была сильнее у контрольных растений). ជាមធ្យម កម្រិតនៃការបញ្ចេញហ្សែនបានថយចុះតាមលំដាប់ 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ នៅក្នុងវ៉ារ្យ៉ង់ទាំងពីរ និន្នាការនេះខ្លាំងជាងនៅក្នុងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ)។平均而言，基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > ចំនួនប្រជាជន 22660的顺序下降（然而，在两种变体中，这种趋势在对照植物中更强）។平均而言，基因水平按按 83a: 476> mandelup> boregine> ចំនួនប្រជាជន 22660 的 顺序下降（，在种丙翧，在种丙， ស្វែងយល់) …………………………………………….. В среднем уровни экспрессии генов снижались в ряду 83A:476 > Mandelup > Boregine > ចំនួនប្រជាជន 22660 (однако в обоих вариант ах сильнее у контрольных растений). ជាមធ្យម កម្រិតនៃការបញ្ចេញហ្សែនបានថយចុះនៅក្នុងស៊េរី 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ នៅក្នុងវ៉ារ្យ៉ង់ទាំងពីរ និន្នាការនេះខ្លាំងជាងនៅក្នុងរុក្ខជាតិត្រួតពិនិត្យ)។ការចាក់វ៉ាក់សាំងបានបណ្តាលឱ្យមានការកើនឡើងនៃការបញ្ចេញហ្សែន ជាពិសេសនៅក្នុងម៉ូឌុល 18, 19, 14, 6 និង 1 (តាមលំដាប់ចុះនៃឥទ្ធិពល) ការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន (ឧទាហរណ៍ ម៉ូឌុល 9 និង 20) ឬជាមួយនឹងឥទ្ធិពលអព្យាក្រឹត (ឧទាហរណ៍ ម៉ូឌុល 11, 22, 8 និង 13)។ ការវិភាគការបង្កើនរយៈពេល GO (តារាងបន្ថែម S13) បានបង្ហាញ “GO: 0006952 ការឆ្លើយតបការពារ” សម្រាប់ម៉ូឌុលដែលបានចាក់វ៉ាក់សាំង (18) ជាមួយនឹងការធ្វើឱ្យសកម្មអតិបរមា រួមទាំងហ្សែនដែលវិភាគដោយ qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 និង TanjilG_27015) ក៏ដូចជាម៉ូឌុលរស្មីសំយោគដែលត្រូវបានបង្ក្រាបច្រើនបំផុតដោយការចាក់វ៉ាក់សាំង (9)។ ឧបករណ៍ប្រមូលផ្តុំម៉ូឌុលទី 18 (រូបភាពទី 8) ត្រូវបានកំណត់ថាជាហ្សែន TanjilG_26536 ដែលអ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីន LlR18B ដែលស្រដៀងនឹង PR-10 ហើយឧបករណ៍ប្រមូលផ្តុំម៉ូឌុលទី 9 ត្រូវបានកំណត់ថាជាហ្សែន TanjilG_28955 ដែលអ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីន PsbQ ប្រព័ន្ធពន្លឺ II។ ហ្សែនធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស Lanr1 ដែលជាបេក្ខជនមួយគឺ TanjilG_05042 ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងម៉ូឌុលទី 22 (រូបភាពទី 9) ហើយត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងពាក្យ "GO:0044260 ដំណើរការមេតាបូលីសម៉ាក្រូម៉ូលេគុលកោសិកា" និង "GO:0006355 បទប្បញ្ញត្តិចម្លង ការធ្វើគំរូ DNA" ដែលមានមជ្ឈមណ្ឌល TanjilG_01212។ ហ្សែននេះអ៊ិនកូដកត្តាចម្លងភាពតានតឹងកំដៅ A-4a (HSFA4a)។
ការវិភាគបណ្តាញដែលមានទម្ងន់នៃការបញ្ចេញហ្សែនរួមគ្នានៃម៉ូឌុលជាមួយនឹងពាក្យដំណើរការជីវសាស្រ្តដែលតំណាងលើសកម្រិត "GO: 0006952 ការឆ្លើយតបការពារ"។ ការចងត្រូវបានធ្វើឱ្យសាមញ្ញដើម្បីបន្លិចហ្សែនទាំងបួនដែលបានវិភាគដោយ qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 និង TanjilG_27015)។
ការវិភាគបណ្តាញដែលមានទម្ងន់នៃសហការបញ្ចេញហ្សែននៃម៉ូឌុលដែលមានពាក្យដំណើរការជីវសាស្រ្តដែលតំណាងលើសកម្រិត “GO: 0006355: បទប្បញ្ញត្តិចម្លង ការធ្វើជាគំរូ DNA” និងមានហ្សែនធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស Lanr1 TanjilG_05042 ដែលជាបេក្ខជន។ ការចងត្រូវបានធ្វើឱ្យសាមញ្ញដើម្បីញែកហ្សែន TanjilG_05042 និងហ្សែន TanjilG_01212 កណ្តាល។
ការត្រួតពិនិត្យភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសដែលប្រមូលបាននៅប្រទេសអូស្ត្រាលីបានបង្ហាញថាពូជភាគច្រើនដែលចេញដំបូងគឺងាយនឹងកើតជំងឺ។ Kalya, Coromup និង Mandelup ត្រូវបានពិពណ៌នាថាមានភាពធន់នឹងជំងឺកម្រិតមធ្យម ខណៈពេលដែល Wonga, Tanjil និង 83A:476 ត្រូវបានពិពណ៌នាថាមានភាពធន់នឹងជំងឺខ្ពស់26,27,31។ មានអាឡែលធន់នឹងជំងឺដូចគ្នា ដែលត្រូវបានកំណត់ថា Lanr1 ហើយ Coromup និង Mandelup មានអាឡែលខុសគ្នា ដែលត្រូវបានកំណត់ថា AnMan10, 26, 39 ខណៈពេលដែល Kalya បានឆ្លងអាឡែលខុសគ្នា។ , Lanr2។ ការត្រួតពិនិត្យភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសនៅប្រទេសអាល្លឺម៉ង់បាននាំឱ្យមានការកំណត់អត្តសញ្ញាណខ្សែធន់ Bo7212 ជាមួយនឹងអាឡែលបេក្ខជនក្រៅពី Lanr1 ដែលត្រូវបានកំណត់ថា LanrBo36។
ការសិក្សារបស់យើងបានបង្ហាញពីភាពញឹកញាប់ទាបបំផុត (ប្រហែល 6%) នៃអាឡែល Lanr1 នៅក្នុងប្លាស្មាហ្សែនដែលបានសាកល្បង។ ការសង្កេតនេះគឺស្របនឹងលទ្ធផលនៃការត្រួតពិនិត្យប្លាស្មាហ្សែនអឺរ៉ុបខាងកើតដោយប្រើសញ្ញាសម្គាល់ Anseq3 និង Anseq4 ដែលបង្ហាញថាអាឡែល Lanr1 មានវត្តមាននៅក្នុងពូជបេឡារុស្សតែពីរប៉ុណ្ណោះ។ នេះបង្ហាញថាអាឡែល Lanr1 មិនទាន់ត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយដោយកម្មវិធីបង្កាត់ពូជក្នុងស្រុកនៅឡើយទេ មិនដូចនៅប្រទេសអូស្ត្រាលីទេ ដែលវាជាអាឡែលសំខាន់មួយសម្រាប់ការបង្កាត់ពូជដែលមានជំនួយពីសញ្ញាសម្គាល់។ នេះអាចបណ្តាលមកពីកម្រិតនៃភាពធន់ទាបដែលផ្តល់ដោយអាឡែល Lanr1 នៅក្នុងលក្ខខណ្ឌវាលអឺរ៉ុបបើប្រៀបធៀបទៅនឹងរបាយការណ៍អូស្ត្រាលី។ លើសពីនេះ ការសិក្សាអំពីជំងឺអង់ត្រាក់ណូសនៅក្នុងតំបន់ដែលមានភ្លៀងធ្លាក់ខ្លាំងនៅក្នុងប្រទេសអូស្ត្រាលីបានបង្ហាញថា ការឆ្លើយតបនៃភាពធន់ដែលសម្របសម្រួលដោយអាឡែល Lanr1 អាចមិនមានប្រសិទ្ធភាពនៅក្នុងលក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុដែលអំណោយផលដល់ការលូតលាស់ និងការអភិវឌ្ឍយ៉ាងឆាប់រហ័សនៃភ្នាក់ងារបង្ករោគ19,42។ តាមពិតទៅ នៅក្នុងការសិក្សាបច្ចុប្បន្ន រោគសញ្ញាមួយចំនួននៃជំងឺអង់ត្រាក់ណូសក៏ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងហ្សែនដែលផ្ទុកអាឡែល Lanr1 ដែលបង្ហាញថាភាពធន់អាចបាត់ទៅវិញក្រោមលក្ខខណ្ឌល្អបំផុតសម្រាប់ការអភិវឌ្ឍនៃ C. lupini។ លើសពីនេះ ការបកស្រាយវិជ្ជមានមិនពិតនៃវត្តមាននៃសញ្ញាសម្គាល់ Anseq3 និង Anseq4 ដែលមានចម្ងាយប្រហែល 1 cM ពីទីតាំង Lanr1 គឺអាចធ្វើទៅបាន 28, 30, 43។
ការសិក្សារបស់យើងបានបង្ហាញថា 83A:476 ដែលមានអាឡែល Lanr1 បានឆ្លើយតបទៅនឹងការចាក់វ៉ាក់សាំង C. lupini ជាមួយនឹងការសរសេរកម្មវិធីឡើងវិញនៃប្រតិចារិកទ្រង់ទ្រាយធំនៅចំណុចពេលវេលាដែលបានវិភាគលើកដំបូង (6 hpi) ខណៈពេលដែលនៅក្នុង Mandelup ដែលមានអាឡែល AnMan ការឆ្លើយតបប្រតិចារិកត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅពេលក្រោយ (ពី 24 ដល់ 48 hp)។ ការប្រែប្រួលបណ្ដោះអាសន្នទាំងនេះនៅក្នុងការឆ្លើយតបការពារត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងភាពខុសគ្នានៃរោគសញ្ញាជំងឺ ដែលបង្ហាញពីសារៈសំខាន់នៃការទទួលស្គាល់ភ្នាក់ងារបង្ករោគដំបូងសម្រាប់ការឆ្លើយតបដោយជោគជ័យចំពោះភាពធន់។ ដើម្បីឆ្លងដល់ជាលិការុក្ខជាតិ ស្ព័រអង់ត្រាក់ត្រូវតែឆ្លងកាត់ដំណាក់កាលអភិវឌ្ឍន៍ជាច្រើននៅលើផ្ទៃរបស់ម៉ាស៊ីន រួមទាំងដំណុះ ការបែងចែកកោសិកា និងការបង្កើត appressorium។ appendage គឺជារចនាសម្ព័ន្ធឆ្លងដែលភ្ជាប់ទៅនឹងផ្ទៃរបស់ម៉ាស៊ីន និងសម្រួលដល់ការជ្រៀតចូលទៅក្នុងជាលិការបស់ម៉ាស៊ីន។ ដូច្នេះ ស្ព័រនៃ C. gloeosporioides នៅក្នុងសារធាតុចម្រាញ់ពីសណ្តែកបានបង្ហាញពីការបែងចែកដំបូងនៃស្នូលបន្ទាប់ពីការភ្ញាស់រយៈពេល 75-90 នាទី ការបង្កើតបំពង់ដំណុះបន្ទាប់ពី 90-120 នាទី និងការបង្ក្រាបបន្ទាប់ពី 4 ម៉ោង 45។ ស្វាយ C. gloeosporioides បានបង្ហាញពីដំណុះ conidial ជាង 40% បន្ទាប់ពីការភ្ញាស់រយៈពេល 3 ម៉ោង និងការបង្កើត appresors ប្រហែល 20% បន្ទាប់ពី 4 ម៉ោង។ ហ្សែន CAP20 ដែលជាប់ទាក់ទងនឹងភាពសាហាវរបស់ C. gloeosporioides បានបង្ហាញពីសកម្មភាពចម្លងនៅក្នុង conidia បង្កើត epiphyte បន្ទាប់ពីការភ្ញាស់រយៈពេល 3.5 ម៉ោងនៅក្នុងក្រមួនផ្ទៃផ្លែបឺរជាមួយនឹងកំហាប់ខ្ពស់នៃប្រូតេអ៊ីន CAP20 បន្ទាប់ពី 4 ម៉ោង 46 នាទី។ ស្រដៀងគ្នានេះដែរ សកម្មភាពរបស់ហ្សែនជីវសំយោគមេឡានីននៅក្នុង C. trifolii ត្រូវបានបង្កើតឡើងក្នុងអំឡុងពេលភ្ញាស់រយៈពេល 2 ម៉ោង បន្ទាប់មកដោយការបង្កើត appressorium បន្ទាប់ពី 1 ម៉ោង។ ការសិក្សាលើជាលិកាស្លឹកបានបង្ហាញថា ផ្លែស្ត្របឺរីដែលចាក់វ៉ាក់សាំងជាមួយ C. acutatum មានការបង្ក្រាបលើកដំបូងនៅ 8 hpi ខណៈពេលដែលប៉េងប៉ោះដែលចាក់វ៉ាក់សាំងជាមួយ C. coccodes មានការបង្ក្រាបលើកដំបូងនៅ 4 hpi 48,49។ ភាគច្រើនស្របនឹងមាត្រដ្ឋានពេលវេលានៃដំណើរការឆ្លង Colletotrichum spp.។ ការឆ្លើយតបការពាររហ័សចំពោះ 83A:476 បង្ហាញពីការចូលរួមនៃភាពធន់នឹងរុក្ខជាតិ និងហ្សែនភាពស៊ាំដែលបង្កឡើងដោយឥទ្ធិពល (ETI) នៅក្នុងពូជនេះ ខណៈពេលដែលការឆ្លើយតបយឺតរបស់ Mandelup គាំទ្រសម្មតិកម្មភាពស៊ាំដែលបង្កឡើងដោយលំនាំម៉ូលេគុល (MTI) ដែលជាប់ទាក់ទងខ្នាតតូច 50. ការឆ្លើយតបដំបូងចំពោះ 83A:476 និង Mandelup។ ការត្រួតស៊ីគ្នាដោយផ្នែករវាងហ្សែនដែលគ្រប់គ្រងឡើងលើ ឬចុះក្រោមក្នុងការឆ្លើយតបយឺតក៏គាំទ្រគោលគំនិតនេះដែរ ព្រោះ ETI ត្រូវបានចាត់ទុកថាជាការឆ្លើយតប MTI ដែលបង្កើនល្បឿន និងប្រសើរឡើង ដែលឈានដល់ការស្លាប់កោសិកាដែលបានកំណត់កម្មវិធីនៅកន្លែងនៃការឆ្លងមេរោគ ដែលគេស្គាល់ថាជាការឆក់អាណាហ្វីឡាក់ទិច 51,52។
ហ្សែនភាគច្រើនដែលត្រូវបានសន្មតថាជាពាក្យដែលតំណាងលើសកម្រិត Gene Ontology GO:0006952 “ការឆ្លើយតបការពារ” គឺជា homologues ចំនួន 11 នៃប្រូតេអ៊ីន fasting message 22 ដែលបង្កឡើងដោយភាពតានតឹង (ស្រដៀងនឹង SAM22) និងប្រូតេអ៊ីន latex protein-like (MLPs) សំខាន់ៗចំនួនប្រាំពីរ 31, 34, 43 និង 423 បានបង្ហាញភាពស្រដៀងគ្នានៃលំដាប់។ ហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង SAM22 បានបង្ហាញការធ្វើឱ្យសកម្មគួរឱ្យកត់សម្គាល់ដែលមានរយៈពេលយូរជាងនេះ ដែលបង្ហាញពីកម្រិតកើនឡើងនៃភាពធន់នឹងជំងឺ anthracnose (83A:476 និង Boregine)។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង MLP ត្រូវបានធ្វើឱ្យថយចុះតែនៅក្នុងខ្សែដែលមានអាឡែលធន់នឹងបេក្ខជន (83A:476/Lanr1 នៅ 6 hpi និង Mandelup/AnMan នៅ 24 hpi)។ គួរកត់សម្គាល់ថា homologues ដែលស្រដៀងនឹង SAM22 ទាំងអស់ដែលបានកំណត់អត្តសញ្ញាណមានប្រភពមកពីចង្កោមហ្សែនដែលមានវិសាលភាពប្រហែល 105 kb ខណៈពេលដែលហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង MLP មានប្រភពមកពីតំបន់ដាច់ដោយឡែកនៃហ្សែន។ ការធ្វើឱ្យសកម្មសម្របសម្រួលនៃហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង SAM22 បែបនេះក៏ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងការសិក្សាពីមុនរបស់យើងអំពីភាពធន់នឹង NLL ចំពោះការចាក់វ៉ាក់សាំង Diaporthetoxica ដែលបង្ហាញថាពួកវាពាក់ព័ន្ធនឹងសមាសធាតុផ្ដេកនៃការឆ្លើយតបការពារ។ សេចក្តីសន្និដ្ឋាននេះក៏ត្រូវបានគាំទ្រដោយរបាយការណ៍នៃការឆ្លើយតបវិជ្ជមាននៃហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង SAM22 ចំពោះរបួស ឬការព្យាបាលជាមួយអាស៊ីត salicylic សារធាតុបង្កើតផ្សិត ឬអ៊ីដ្រូសែន peroxide។
ហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង MLP ត្រូវបានបង្ហាញថាឆ្លើយតបទៅនឹងភាពតានតឹងអសរីរាង្គ និងជីវសាស្រ្តផ្សេងៗ រួមទាំងការឆ្លងមេរោគផ្សិតបាក់តេរី វីរុស និងភ្នាក់ងារបង្កជំងឺនៅក្នុងប្រភេទរុក្ខជាតិជាច្រើន55។ ទិសដៅនៃការឆ្លើយតបទៅនឹងអន្តរកម្មជាក់លាក់រវាងរុក្ខជាតិ និងភ្នាក់ងារបង្កជំងឺមានចាប់ពីការកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំង (ឧ. ក្នុងអំឡុងពេលនៃការរាតត្បាតកប្បាសជាមួយ Verticillium dahliae) រហូតដល់ការថយចុះគួរឱ្យកត់សម្គាល់ (ឧ. បន្ទាប់ពីការឆ្លងមេរោគដើមផ្លែប៉ោមជាមួយ Alternaria spp.)56,57។ ការថយចុះគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង MLP 423 ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញក្នុងអំឡុងពេលការពារផ្លែបឺរចំពោះការឆ្លងមេរោគ F. niger និងក្នុងអំឡុងពេលនៃការឆ្លងមេរោគដើមផ្លែប៉ោម Botryosphaeria berengeriana f. cn. piricola និង Alternaria alternata គឺជារោគសាស្ត្រផ្លែប៉ោម58,59។ លើសពីនេះ ផ្លែប៉ោម calli ដែលបង្ហាញហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង MLP 423 ច្រើនពេកមានការបញ្ចេញហ្សែនដែលទាក់ទងនឹងភាពធន់ទាបជាង និងងាយនឹងឆ្លងមេរោគផ្សិត59។ បន្ទាប់ពី Fusarium oxysporum f ហ្សែនដែលស្រដៀងនឹង MLP 423 ក៏ត្រូវបានបង្ក្រាបនៅក្នុងហ្សែនសណ្តែកធម្មតាដែលធន់នឹងជំងឺផងដែរ។ cn. ការឆ្លងមេរោគសណ្តែក 60។
សមាជិកផ្សេងទៀតនៃគ្រួសារ PR-10 ដែលត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណនៅក្នុងការសិក្សា RNA-seq របស់យើងគឺហ្សែន LlR18A និង LlR18B ដែលជាការឆ្លើយតបទៅនឹងការកើនឡើងនៃបទប្បញ្ញត្តិ ក៏ដូចជាហ្សែនដែលបានកើនឡើង (ហ្សែន 1) ឬធ្លាក់ចុះ (ហ្សែន 3) សម្រាប់ប្រូតេអ៊ីនផ្ទេរជាតិខ្លាញ់ DIR1។ លើសពីនេះ WGCNA បានគូសបញ្ជាក់ពីហ្សែន LlR18B ជាមជ្ឈមណ្ឌលនៅក្នុងម៉ូឌុលនេះ ដែលងាយនឹងទទួលការចាក់វ៉ាក់សាំង និងមានហ្សែនឆ្លើយតបការពារជាច្រើន។ ហ្សែន LlR18A និង LlR18B ត្រូវបានបង្កឡើងនៅក្នុងស្លឹក lupine ពណ៌លឿង ដើម្បីឆ្លើយតបទៅនឹងបាក់តេរីបង្កជំងឺ ក៏ដូចជានៅក្នុងដើម NLL បន្ទាប់ពីការចាក់វ៉ាក់សាំង D. toxica ខណៈពេលដែល homologue អង្ករនៃហ្សែនទាំងនេះ RSOsPR10 ត្រូវបានបង្កឡើងយ៉ាងឆាប់រហ័សដោយការឆ្លងមេរោគផ្សិត ដែលសន្មតថាពាក់ព័ន្ធនឹងផ្លូវសញ្ញាអាស៊ីត jasmonic53,61, 62។ ហ្សែន DIR1 អ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីនដឹកជញ្ជូនជាតិខ្លាញ់មិនជាក់លាក់ ដែលត្រូវការសម្រាប់ការចាប់ផ្តើមនៃភាពធន់នឹងប្រព័ន្ធ (SAR)។ ជាមួយនឹងការវិវត្តនៃប្រតិកម្មការពារ ប្រូតេអ៊ីន DIR1 ត្រូវបានដឹកជញ្ជូនពីចំណុចកណ្តាលនៃការឆ្លងមេរោគតាមរយៈ phloem ដើម្បីបង្កឱ្យមាន SAR នៅក្នុងសរីរាង្គឆ្ងាយៗ។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ ហ្សែន TanjilG_02313 DIR1 ត្រូវបានបង្កឱ្យមានយ៉ាងខ្លាំងនៅចំណុចដំបូងនៅក្នុងខ្សែ 84A:476 និង Population 22660 ប៉ុន្តែភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសបានវិវត្តដោយជោគជ័យតែនៅក្នុងខ្សែ 84A:476 ប៉ុណ្ណោះ។ នេះអាចបង្ហាញពីមុខងាររងមួយចំនួននៃហ្សែន DIR1 នៅក្នុង NLL ដោយសារ homologues បីដែលនៅសល់បានឆ្លើយតបទៅនឹងការចាក់វ៉ាក់សាំងតែនៅក្នុងខ្សែ 83A:476 នៅ 6 hpi ហើយការឆ្លើយតបនេះត្រូវបានដឹកនាំចុះក្រោម។
នៅក្នុងការសិក្សារបស់យើង សមាសធាតុទូទៅបំផុតដែលត្រូវគ្នានឹងដំណើរការជីវសាស្រ្តដែលហៅថា "ដំណើរការ GO:0055114 Redox" គឺប្រូតេអ៊ីន cytochrome P450, peroxidase, អាស៊ីត linoleic 9S-/13S-lipoxygenase និង 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase។ លើសពីនេះ WGCNA របស់យើងកំណត់ homologue HSFA4a ជាមជ្ឈមណ្ឌលផ្ទុកម៉ូឌុលដូចជាបេក្ខជនហ្សែនធន់ Lanr1 TanjilG_05042។ HSFA4a គឺជាសមាសធាតុនៃបទប្បញ្ញត្តិដែលពឹងផ្អែកលើ redox នៃការចម្លងនុយក្លេអ៊ែរនៅក្នុងរុក្ខជាតិ។
ប្រូតេអ៊ីន Cytochrome P450 គឺជាអង់ស៊ីមអុកស៊ីដូរ៉េដុកតាសដែលជំរុញប្រតិកម្មអ៊ីដ្រូស៊ីឡាស្យុង NADPH និង/ឬ O2 ដែលពឹងផ្អែកលើ O2 នៅក្នុងការរំលាយអាហារបឋម និងទីពីរ រួមទាំងការរំលាយអាហារនៃសារធាតុ xenobiotics ក៏ដូចជាអរម៉ូន អាស៊ីតខ្លាញ់ ស្តេរ៉ូល សមាសធាតុជញ្ជាំងកោសិកា ជីវប៉ូលីមែរ និងជីវសំយោគនៃសមាសធាតុការពារ 69។ នៅក្នុងការសិក្សារបស់យើង ភាពប្រែប្រួលនៃមុខងារ cytochrome P450 របស់រុក្ខជាតិត្រូវបានកាត់បន្ថយពី -10.6 log2 (ការផ្លាស់ប្តូរដង) ដល់ 5.7 ដោយសារតែចំនួនដ៏ច្រើននៃ homologues ដែលបានផ្លាស់ប្តូរ (37) និងភាពខុសគ្នានៃគំរូឆ្លើយតបរវាងហ្សែនជាក់លាក់ ដែលឆ្លុះបញ្ចាំងពីការកែប្រែឡើងលើ។ ការប្រើប្រាស់តែទិន្នន័យ RNA-seq ដើម្បីបញ្ជាក់ពីមុខងារជីវសាស្រ្តដែលបានសន្មត់នៃហ្សែន NLL នៅក្នុង superfamily ប្រូតេអ៊ីនដ៏ធំមួយបែបនេះនឹងជាការស្មានទុកជាមុនខ្ពស់។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ គួរកត់សម្គាល់ថាហ្សែន cytochrome P450 មួយចំនួនត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងភាពធន់នឹងផ្សិត ឬបាក់តេរីបង្កជំងឺកើនឡើង រួមទាំងការរួមចំណែកដល់ប្រតិកម្មអាលែហ្សី 69,70,71។
ភេរ៉ុកស៊ីដាសថ្នាក់ទី III គឺជាអង់ស៊ីមរុក្ខជាតិពហុមុខងារដែលពាក់ព័ន្ធនឹងដំណើរការមេតាបូលីសជាច្រើនក្នុងអំឡុងពេលលូតលាស់ និងការអភិវឌ្ឍរបស់រុក្ខជាតិ ក៏ដូចជាការឆ្លើយតបទៅនឹងភាពតានតឹងបរិស្ថានដូចជាជាតិប្រៃ គ្រោះរាំងស្ងួត អាំងតង់ស៊ីតេពន្លឺខ្ពស់ និងការវាយប្រហាររបស់ភ្នាក់ងារបង្ករោគ72។ ភេរ៉ុកស៊ីដាសពាក់ព័ន្ធនឹងអន្តរកម្មរបស់ប្រភេទរុក្ខជាតិជាច្រើនជាមួយផ្សិត Anthracis រួមទាំង Stylosanthes humilis និង C. gloeosporioides, Lens culinaris និង C. truncatum, Phaseolus vulgaris និង C. lindemuthianum, Cucumis sativus និង C. lagenarium73,74,75,76។ ការឆ្លើយតបគឺលឿនណាស់ ជួនកាលសូម្បីតែនៅ 4 HPI មុនពេលផ្សិតជ្រាបចូលទៅក្នុងជាលិការុក្ខជាតិ73។ ហ្សែនភេរ៉ុកស៊ីដាសក៏បានឆ្លើយតបទៅនឹងការចាក់វ៉ាក់សាំង D. toxica NLL ផងដែរ។ បន្ថែមពីលើមុខងារធម្មតារបស់វាក្នុងការគ្រប់គ្រងការផ្ទុះអុកស៊ីតកម្ម ឬលុបបំបាត់ភាពតានតឹងអុកស៊ីតកម្ម ភេរ៉ុកស៊ីដាសអាចជ្រៀតជ្រែកដល់ការលូតលាស់របស់ភ្នាក់ងារបង្ករោគដោយបង្កើតរបាំងរូបវន្តដោយផ្អែកលើការពង្រឹងជញ្ជាំងកោសិកាក្នុងអំឡុងពេល lignification អនុឯកតា ឬការភ្ជាប់គ្នានៃសមាសធាតុជាក់លាក់។ មុខងារនេះអាចត្រូវបានកំណត់គុណលក្ខណៈនៅក្នុងស៊ីលីកូទៅនឹងហ្សែន TanjilG_03329 ដែលអ៊ិនកូដអង់ស៊ីម peroxidase អ៊ីយ៉ុងបង្កើតលីញីនដែលត្រូវបានធ្វើឱ្យកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៅក្នុងការសិក្សារបស់យើងនៅក្នុងខ្សែធន់នឹង 83A:476 នៅ 6 HPI ប៉ុន្តែមិនមែននៅក្នុងពូជផ្សេងទៀត និងចំណុចពេលវេលាដែលមិនឆ្លើយតបនោះទេ។
9S-/13S-lipoxygenase នៃអាស៊ីតលីណូលេអ៊ីក គឺជាជំហានដំបូងនៅក្នុងផ្លូវអុកស៊ីតកម្មនៃជីវសំយោគ lipid78។ ផលិតផលនៃផ្លូវនេះមានមុខងារច្រើនក្នុងការការពាររុក្ខជាតិ រួមទាំងការពង្រឹងជញ្ជាំងកោសិកាតាមរយៈការបង្កើតប្រាក់បញ្ញើ callose និង pectin និងការគ្រប់គ្រងភាពតានតឹងអុកស៊ីតកម្មតាមរយៈការផលិតប្រភេទអុកស៊ីសែនដែលមានប្រតិកម្ម79,80,81,82,83។ នៅក្នុងការសិក្សាបច្ចុប្បន្ននេះ ការបញ្ចេញមតិនៃអាស៊ីតលីណូលេអ៊ីក 9S-/13S-lipoxygenase ត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងពូជទាំងអស់ ប៉ុន្តែនៅក្នុងចំនួនប្រជាជនងាយរងគ្រោះ 22660 ការកើនឡើងនៃការគ្រប់គ្រងបានគ្របដណ្ដប់នៅចំណុចពេលវេលាផ្សេងៗគ្នា ខណៈពេលដែលនៅក្នុងពូជដែលផ្ទុក Lanr1 ដែលធន់នឹងមេរោគ និងអាឡែល AnMan វាសង្កត់ធ្ងន់លើភាពចម្រុះនៃស្រទាប់អុកស៊ីលីពីននៅក្នុងប្រតិកម្មការពារអង់ត្រាក់រវាងហ្សែនទាំងនេះ។
អង់ស៊ីមដូចគ្នា 1-អាមីណូស៊ីក្លូប្រូផេន-1-កាបូស៊ីឡាតអុកស៊ីដាស (ACO) ត្រូវបានបង្កើន ឬបន្ថយគួរឱ្យកត់សម្គាល់ (ហ្សែន 2) នៅពេលដែលចាក់វ៉ាក់សាំងជាមួយរុក្ខជាតិលូពីន។ លើកលែងតែពីរករណី ការឆ្លើយតបទាំងអស់នេះបានកើតឡើងនៅ 6 hp នៅ 83A:476។ ប្រតិកម្មអង់ស៊ីមដែលសម្របសម្រួលដោយប្រូតេអ៊ីន ACO គឺជាជំហានកំណត់អត្រាក្នុងការផលិតអេទីឡែន ហើយដូច្នេះវាត្រូវបានគ្រប់គ្រងយ៉ាងខ្លាំង84។ អេទីឡែនគឺជាអរម៉ូនរុក្ខជាតិដែលដើរតួនាទីជាច្រើនក្នុងការគ្រប់គ្រងការអភិវឌ្ឍរុក្ខជាតិ និងការឆ្លើយតបទៅនឹងលក្ខខណ្ឌស្ត្រេសអសរីរាង្គ និងជីវសាស្រ្ត។ ការបង្កើតប្រតិចារិក ACO និងការធ្វើឱ្យសកម្មនៃផ្លូវសញ្ញាអេទីឡែនគឺពាក់ព័ន្ធនឹងការបង្កើនភាពធន់របស់ស្រូវទៅនឹងផ្សិត hemibiotrophic oryzae oryzae ដោយការគ្រប់គ្រងការផលិតប្រភេទអុកស៊ីសែនដែលមានប្រតិកម្ម និង phytoalexins។ ដំណើរការឆ្លងមេរោគស្លឹកស្រដៀងគ្នាខ្លាំងដែលត្រូវបានរកឃើញរវាង M. oryzae និង C. lupini88,89 ទល់នឹងផ្ទៃខាងក្រោយនៃការកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃសារធាតុដូចគ្នា ACO នៅក្នុងខ្សែ 83A:476 ដែលបានរាយការណ៍នៅក្នុងការសិក្សានេះ ផ្លាស់ប្តូរលទ្ធភាពនៃការផ្តល់ភាពធន់នឹងអង់ត្រាក់ណូស NLL អេទីឡែន ដែលជាជំហានកណ្តាលនៃសញ្ញានៅក្នុងផ្លូវម៉ូលេគុល។
នៅក្នុងការសិក្សាបច្ចុប្បន្ននេះ ការបង្ក្រាបទ្រង់ទ្រាយធំនៃហ្សែនជាច្រើនដែលទាក់ទងនឹងរស្មីសំយោគត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅ 6 hpi ក្នុង 83A:476 និងនៅ 48 hpi ក្នុង Mandeloop និងចំនួនប្រជាជន 22660។ វិសាលភាព និងវឌ្ឍនភាពនៃការផ្លាស់ប្តូរទាំងនេះគឺសមាមាត្រទៅនឹងកម្រិត។ ភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងការពិសោធន៍នេះ។ ថ្មីៗនេះ ការបង្ក្រាបយ៉ាងខ្លាំង និងដំបូងនៃការចម្លងដែលទាក់ទងនឹងរស្មីសំយោគត្រូវបានរាយការណ៍នៅក្នុងគំរូជាច្រើននៃអន្តរកម្មរវាងរុក្ខជាតិ និងភ្នាក់ងារបង្កជំងឺ រួមទាំងបាក់តេរីបង្កជំងឺ និងផ្សិត។ ការប្រញាប់ប្រញាល់ (ពី 2 HPI ក្នុងអន្តរកម្មមួយចំនួន) និងការបង្ក្រាបជាសកលនៃហ្សែនដែលទាក់ទងនឹងរស្មីសំយោគជាការឆ្លើយតបទៅនឹងការឆ្លងមេរោគអាចបង្កឱ្យមានភាពស៊ាំរបស់រុក្ខជាតិដោយផ្អែកលើការដាក់ពង្រាយប្រភេទអុកស៊ីសែនដែលមានប្រតិកម្ម និងអន្តរកម្មរបស់ពួកវាជាមួយនឹងផ្លូវអាស៊ីតសាលីស៊ីលីកដើម្បីសម្របសម្រួលប្រតិកម្មអាលែហ្សី 90,94។
សរុបមក យន្តការឆ្លើយតបការពារដែលបានស្នើឡើងសម្រាប់ពូជពង្សដែលធន់បំផុត (83A:476) រួមមានការទទួលស្គាល់ភ្នាក់ងារបង្ករោគយ៉ាងឆាប់រហ័សដោយហ្សែន R (ប្រហែលជា TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) និងការបញ្ជូនសញ្ញាអាស៊ីត salicylic និងអេទីឡែនដែលសម្របសម្រួលដោយការឆ្លើយតបអាឡែស៊ី បន្ទាប់មកដោយការបង្កើតសកម្មភាព SAR រយៈចម្ងាយឆ្ងាយ។ ត្រូវបានគាំទ្រដោយប្រូតេអ៊ីន DIR-1។ គួរកត់សម្គាល់ថារយៈពេលជីវត្រូពិចសម្រាប់ការឆ្លងមេរោគ C. lupini គឺខ្លីណាស់ (ប្រហែល 2 ថ្ងៃ) បន្ទាប់មកដោយការលូតលាស់រលួយ95។ ការផ្លាស់ប្តូររវាងដំណាក់កាលទាំងនេះអាចត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការរលួយ និងការបញ្ចេញមតិនៃប្រូតេអ៊ីនដែលបង្កឡើងដោយអេទីឡែន ដែលដើរតួជាកត្តាជំរុញសម្រាប់ប្រតិកម្មអាលែហ្សីនៅក្នុងរុក្ខជាតិម្ចាស់ផ្ទះ។ ដូច្នេះ បង្អួចពេលវេលាសម្រាប់ការចាប់យក C. lupini ដោយជោគជ័យនៅដំណាក់កាលជីវត្រូពិចគឺតូចចង្អៀតណាស់។ ការសរសេរកម្មវិធីឡើងវិញនៃហ្សែនដែលទាក់ទងនឹង redox និងរស្មីសំយោគដែលសង្កេតឃើញនៅក្នុង 83A:476 នៅ 6 hpi គឺស្របនឹងវឌ្ឍនភាពនៃ hyphae ផ្សិត និងបង្ហាញពីការអភិវឌ្ឍនៃការឆ្លើយតបការពារដោយជោគជ័យនៅដំណាក់កាលជីវត្រូពិច។ ការឆ្លើយតបប្រតិចារិករបស់ Mandelup និងប្រជាជន 22660 អាចយឺតយ៉ាវពេកក្នុងការចាប់យកផ្សិតមុនពេលប្តូរទៅជាការលូតលាស់រលួយ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ Mandelup អាចមានប្រសិទ្ធភាពជាងប្រជាជន 22660 ពីព្រោះបទប្បញ្ញត្តិលឿននៃប្រូតេអ៊ីន PR-10 ជំរុញភាពធន់ផ្ដេក។
ETI ដែលជំរុញដោយហ្សែន R ធម្មតា ហាក់ដូចជាយន្តការទូទៅមួយសម្រាប់ភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសរបស់សណ្តែក។ ដូច្នេះ នៅក្នុងគំរូសណ្តែក Medicago truncatula ភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសត្រូវបានផ្តល់ដោយហ្សែន RCT1 ដែលជាសមាជិកនៃថ្នាក់ហ្សែន R របស់រុក្ខជាតិ TIR-NBS-LRR97។ ហ្សែននេះក៏ផ្តល់ភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសក្នុងវិសាលគមទូលំទូលាយនៅក្នុងស្មៅអាល់ហ្វាល់ហ្វានៅពេលដែលត្រូវបានផ្ទេរទៅរុក្ខជាតិដែលងាយរងគ្រោះ។ នៅក្នុងសណ្តែកធម្មតា (P. vulgaris) ហ្សែនធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសជាងពីរដប់ត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណរហូតមកដល់បច្ចុប្បន្ន។ ហ្សែនទាំងនេះមួយចំនួនត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងតំបន់ដែលខ្វះហ្សែន R ធម្មតាណាមួយ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ហ្សែនជាច្រើនទៀតមានទីតាំងនៅគែមនៃក្រូម៉ូសូមដែលផ្ទុកចង្កោមហ្សែន NBS-LRR រួមទាំង TIR-NBS-LRRs99។ ការសិក្សា SSR ទូទាំងហ្សែនក៏បានបញ្ជាក់ពីទំនាក់ទំនងនៃហ្សែន NBS-LRR ជាមួយនឹងភាពធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសនៅក្នុងសណ្តែកធម្មតា។ ហ្សែន R ធម្មតាក៏ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងតំបន់ហ្សែនដែលផ្ទុកទីតាំងធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូសដ៏សំខាន់នៅក្នុងរុក្ខជាតិលូពីនពណ៌ស 101។
ការងាររបស់យើងបង្ហាញថា ប្រតិកម្មធន់ទ្រាំភ្លាមៗ ដែលត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្មនៅដំណាក់កាលដំបូងនៃការឆ្លងមេរោគរុក្ខជាតិ (ល្អបំផុតមិនឱ្យលើសពី 12 hpi) ការពាររុក្ខជាតិលូពីនស្លឹកតូចចង្អៀតពីជំងឺអង់ត្រាក់ណូសដែលបង្កឡើងដោយផ្សិតបង្កជំងឺ Collelotrichum lupini ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព។ ដោយប្រើលំដាប់លំដោយខ្ពស់ យើងបានបង្ហាញពីទម្រង់ការបញ្ចេញមតិឌីផេរ៉ង់ស្យែលនៃហ្សែនធន់នឹងអង់ត្រាក់ណូសនៅក្នុងរុក្ខជាតិ NLL ដែលសម្របសម្រួលដោយហ្សែនធន់នឹង Lanr1 និង AnMan។ ការការពារដោយជោគជ័យពាក់ព័ន្ធនឹងការរចនាហ្សែនដោយប្រុងប្រយ័ត្នសម្រាប់ប្រូតេអ៊ីនដែលពាក់ព័ន្ធនឹង redox រស្មីសំយោគ និងរោគវិទ្យាក្នុងរយៈពេលប៉ុន្មានម៉ោងនៃការប៉ះពាល់លើកដំបូងរបស់រុក្ខជាតិជាមួយភ្នាក់ងារបង្កជំងឺ។ ប្រតិកម្មការពារស្រដៀងគ្នា ប៉ុន្តែយឺតយ៉ាវ មានប្រសិទ្ធភាពតិចជាងក្នុងការការពាររុក្ខជាតិពីជំងឺ។ ភាពធន់នឹងអង់ត្រាក់ដែលសម្របសម្រួលដោយហ្សែន Lanr1 ស្រដៀងនឹងការឆ្លើយតបរហ័សធម្មតានៃហ្សែន R (ភាពស៊ាំដែលបង្កឡើងដោយ effector) ខណៈពេលដែលហ្សែន AnMan ទំនងជាផ្តល់នូវការឆ្លើយតបផ្ដេក (ភាពស៊ាំដែលបង្កឡើងដោយគំរូម៉ូលេគុលដែលទាក់ទងនឹងមីក្រូ) ដែលផ្តល់នូវកម្រិតមធ្យមនៃនិរន្តរភាព។
ខ្សែ NLL ចំនួន 215 ដែលប្រើសម្រាប់ពិនិត្យរកសញ្ញាសម្គាល់អង់ត្រាក់ណូស មានពូជចំនួន 74 ខ្សែ 60 ខ្សែដែលទទួលបានដោយការបង្កាត់ពូជ 5 ខ្សែដែលមានការផ្លាស់ប្តូរហ្សែន និង 76 ខ្សែពូជព្រៃ ឬដើម។ ខ្សែទាំងនេះបានមកពី 17 ប្រទេស ដែលភាគច្រើនមកពីប្រទេសប៉ូឡូញ (58) អេស្ប៉ាញ (47) អាល្លឺម៉ង់ (27) អូស្ត្រាលី (26) រុស្ស៊ី (19) បេឡារុស្ស (7) អ៊ីតាលី (5) និងខ្សែផ្សេងៗទៀត។ សំណុំនេះក៏រួមបញ្ចូលទាំងខ្សែដែលធន់នឹងឯកសារយោងផងដែរ៖ 83A:476, Tanjil, Wonga ដែលមានអាឡែល Lanr1 និង Mandelup ដែលមានអាឡែល AnMan។ ខ្សែទាំងនេះត្រូវបានទទួលពីមូលដ្ឋានទិន្នន័យធនធានហ្សែនលូពីនអឺរ៉ុបដែលថែរក្សាដោយ Poznań Plant Breeding Ltd., Wiatrowo, ប៉ូឡូញ (តារាងបន្ថែម S1)។
រុក្ខជាតិត្រូវបានដាំដុះក្រោមលក្ខខណ្ឌដែលគ្រប់គ្រង (រយៈពេលពន្លឺ ១៦ ម៉ោង សីតុណ្ហភាព ២៥°C ពេលថ្ងៃ និង ១៨°C នៅពេលយប់)។ ការចម្លងជីវសាស្រ្តពីរត្រូវបានវិភាគ។ DNA ត្រូវបានញែកចេញពីស្លឹកអាយុបីសប្តាហ៍ដោយប្រើ DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, អាល្លឺម៉ង់) ស្របតាមពិធីការ។ គុណភាព និងកំហាប់នៃ DNA ដែលញែកដាច់ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយវិធីសាស្ត្រវិសាលគម (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, សហរដ្ឋអាមេរិក)។ សញ្ញាសម្គាល់ AnManM1 ដែលសម្គាល់ហ្សែនធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស AnMan (មកពី cv. Mandelup) និងសញ្ញាសម្គាល់ Anseq3 និង Anseq4 ដែលនៅជាប់នឹងហ្សែន Lanr1 (មកពី cv. Tanjil) ត្រូវបានវិភាគ ១១, ២៦, ២៨។ Homozygotes សម្រាប់អាឡែលធន់នឹងជំងឺត្រូវបានវាយតម្លៃជា "១", ងាយរងគ្រោះ - ជា "០", និង heterozygotes - ជា ០.៥។
ដោយផ្អែកលើលទ្ធផលនៃការត្រួតពិនិត្យសញ្ញាសម្គាល់ AnManM1, AnSeq3 និង AnSeq4 និងភាពអាចរកបាននៃគ្រាប់ពូជសម្រាប់ការពិសោធន៍តាមដានចុងក្រោយ ខ្សែ NLL ចំនួន 50 ត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ការកំណត់ប្រភេទធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស។ ការវិភាគត្រូវបានអនុវត្តជាពីរផ្នែកនៅក្នុងផ្ទះកញ្ចក់ដែលគ្រប់គ្រងដោយកុំព្យូទ័រ ជាមួយនឹងរយៈពេលពន្លឺ 14 ម៉ោង ជាមួយនឹងជួរសីតុណ្ហភាព 22°C នៅពេលថ្ងៃ និង 19°C នៅពេលយប់។ គ្រាប់ពូជត្រូវបានកោស (កាត់សំបកគ្រាប់ពូជនៅម្ខាងទៀតនៃអំប្រ៊ីយ៉ុងដោយកាំបិតមុតស្រួច) មុនពេលសាបព្រួស ដើម្បីការពារការអសកម្មនៃគ្រាប់ពូជ ដោយសារតែសំបកគ្រាប់ពូជរឹងពេក និងដើម្បីធានាបាននូវដំណុះស្មើគ្នា។ រុក្ខជាតិត្រូវបានដាំនៅក្នុងផើង (11 × 11 × 21 សង់ទីម៉ែត្រ) ជាមួយដីគ្មានមេរោគ (TS-1 REC 085 Medium Basic, Klasmann-Deilmann Polska, Warsaw, Poland)។ ការចាក់វ៉ាក់សាំងត្រូវបានអនុវត្តជាមួយនឹងពូជ Colletotrichum lupini Col-08 ដែលដាំដុះក្នុងឆ្នាំ 1999 ពីដើមនៃរុក្ខជាតិ lupine ស្លឹកតូចចង្អៀតដែលដាំដុះនៅក្នុងវាលស្រែមួយក្នុងទីក្រុង Verzhenitsa ប្រទេសប៉ូឡូញ (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E)។ រៀបចំតំបន់មួយ។ ពូជដែលញែកចេញពីគ្នាត្រូវបានដាំដុះក្នុងឧបករណ៍ផ្សព្វផ្សាយ SNA នៅសីតុណ្ហភាព 20°C ក្រោមពន្លឺខ្មៅរយៈពេល 21 ថ្ងៃដើម្បីបង្កឲ្យមានការបង្កើតស្ព័រ។ បួនសប្តាហ៍បន្ទាប់ពីសាបព្រួស នៅពេលដែលរុក្ខជាតិបានឈានដល់ដំណាក់កាលស្លឹក 4-6 ការចាក់វ៉ាក់សាំងត្រូវបានអនុវត្តដោយការបាញ់ថ្នាំស៊ុស្ប៉ង់ស្យុង conidia ក្នុងកំហាប់ 0.5 x 106 conidia ក្នុងមួយមីលីលីត្រ។ បន្ទាប់ពីចាក់វ៉ាក់សាំងរួច រុក្ខជាតិត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងទីងងឹតរយៈពេល 24 ម៉ោងក្នុងសំណើមប្រហែល 98% និងសីតុណ្ហភាព 25°C ដើម្បីសម្រួលដល់ការដុះពន្លកនៃ conidia និងដំណើរការឆ្លងមេរោគ។ បន្ទាប់មករុក្ខជាតិត្រូវបានដាំដុះក្រោមរយៈពេលពន្លឺ 14 ម៉ោងនៅសីតុណ្ហភាព 22°C ថ្ងៃ/19°C យប់ និងសំណើម 70%។ ពិន្ទុជំងឺត្រូវបានធ្វើឡើង 22 ថ្ងៃបន្ទាប់ពីការចាក់វ៉ាក់សាំង ហើយមានចាប់ពី 0 (ភាពស៊ាំ) ដល់ 9 (ងាយនឹងកើតជំងឺ) អាស្រ័យលើវត្តមាន ឬអវត្តមាននៃដំបៅរលួយនៅលើដើម និងស្លឹក។ លើសពីនេះ បន្ទាប់ពីការដាក់ពិន្ទុរួច ទម្ងន់របស់រុក្ខជាតិត្រូវបានវាស់វែង។ ទំនាក់ទំនងរវាងហ្សែនសម្គាល់ និងលក្ខណៈនៃជំងឺត្រូវបានគណនាជាសហសម្ព័ន្ធចំណុចលំដាប់ពីរ (អវត្តមាននៃសញ្ញាសម្គាល់ heterozygous នៅក្នុងសំណុំនៃបន្ទាត់សម្រាប់ការវិភាគលក្ខណៈធន់នឹងជំងឺអង់ត្រាក់ណូស)។
ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ១៧ ខែសីហា ឆ្នាំ ២០២២
