Nature.com தளத்திற்கு வருகை தந்ததற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவியில் CSS ஆதரவு குறைவாக உள்ளது. சிறந்த அனுபவத்தைப் பெற, மேம்படுத்தப்பட்ட உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு (அல்லது இன்டர்நெட் எக்ஸ்ப்ளோரரில் இணக்கப் பயன்முறையை முடக்குமாறு) பரிந்துரைக்கிறோம். இதற்கிடையில், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதிசெய்யும் வகையில், நாங்கள் இந்தத் தளத்தை ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் வழங்குவோம்.
ஆங்குஸ்டிஃபோலியஸ் லூபின் (NLL, Lupinus angustifolius L.) என்பது உணவு உற்பத்தி மற்றும் மண் மேம்பாட்டிற்காகப் பயன்படுத்தப்படும் ஒரு பயறு வகைத் தாவரமாகும். ஒரு பயிராக NLL-இன் உலகளாவிய விரிவாக்கம், பேரழிவை ஏற்படுத்தும் ஆந்த்ராக்னோஸ் நோயை உண்டாக்கும் லூபின் ஆந்த்ராக்னோஸ் உட்பட பல நோய்க்காரணி பூஞ்சைகளை ஈர்த்துள்ளது. அதிகரித்த எதிர்ப்பாற்றலை வழங்கும் Lanr1 மற்றும் AnMan ஆகிய இரண்டு அல்லீல்கள் NLL இனப்பெருக்கத்தில் பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளன, ஆனால் அதன் அடிப்படை மூலக்கூறு வழிமுறைகள் இன்னும் அறியப்படவில்லை. இந்த ஆய்வில், ஐரோப்பிய NLL மாதிரிகளை ஆய்வு செய்ய Lanr1 மற்றும் AnMan குறிப்பான்கள் பயன்படுத்தப்பட்டன. கட்டுப்படுத்தப்பட்ட சூழலில் தடுப்பூசியைச் சோதித்தபோது, ​​எதிர்ப்பாற்றல் கொண்ட இரண்டு மூலங்களின் செயல்திறனும் உறுதி செய்யப்பட்டது. பிரதிநிதித்துவ எதிர்ப்பாற்றல் மற்றும் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய மரபு வழிகளில் வேறுபட்ட மரபணு வெளிப்பாட்டு விவரக்குறிப்பு மேற்கொள்ளப்பட்டது. ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பாற்றலானது, “GO:0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினை”, “GO:0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறை” மற்றும் “GO:0015979 ஒளிச்சேர்க்கை” ஆகிய மரபணு வகைப்பாட்டுச் சொற்களின் மிகை வெளிப்பாட்டுடன் தொடர்புடையதாக இருந்தது. கூடுதலாக, Lanr1(83A:476) வரிசையானது நோய்த்தொற்றுக்குப் பிறகு விரைவாக குறிப்பிடத்தக்க டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் மறுநிரலாக்கத்தைக் காட்டியது, அதேசமயம் மற்ற வரிசைகள் இந்த எதிர்வினையில் சுமார் 42 மணிநேரம் தாமதத்தைக் காட்டின. பாதுகாப்பு எதிர்வினைகள் TIR-NBS, CC-NBS-LRR மற்றும் NBS-LRR மரபணுக்கள், நோயுண்டாக்கும் தன்மையில் ஈடுபட்டுள்ள 10 புரதங்கள், லிப்பிட் பரிமாற்றப் புரதங்கள், எண்டோகுளுக்கான்-1,3-β-குளுக்கோசிடேஸ், கிளைசின் நிறைந்த செல் சுவர் புரதங்கள் மற்றும் ஆக்சிஜனின் வினைபுரியும் பாதையில் உள்ள மரபணுக்களுடன் தொடர்புடையவை. ஒளிச்சேர்க்கையுடன் தொடர்புடைய மரபணுக்களைக் கவனமாக அடக்குவது உட்பட, 83A:476-க்கு எதிரான ஆரம்பகால எதிர்வினைகள், பூஞ்சை உயிரியலின் தாவர வளர்ச்சி கட்டத்தின் போது வெற்றிகரமான பாதுகாப்புடன் ஒத்துப்போனது, இது ஒரு விளைவி நோய் எதிர்ப்பு சக்தியைத் தூண்டுகிறது என்பதைக் காட்டுகிறது. மாண்டலூப் வினை மெதுவாகிறது, அதேபோல் ஒட்டுமொத்த கிடைமட்ட இழுவையும் மெதுவாகிறது.
குறுகிய இலை லுபின் (NLL, Lupinus angustifolius L.) என்பது மேற்கு மத்திய தரைக்கடல் பகுதியைத் தாயகமாகக் கொண்ட அதிக புரதச்சத்து வாய்ந்த ஒரு தானியமாகும்¹,². இது தற்போது விலங்குகள் மற்றும் மனிதர்களுக்கான உணவுப் பயிராகப் பயிரிடப்படுகிறது. கூட்டுவாழ் நைட்ரஜன் நிலைநிறுத்தும் பாக்டீரியாக்களால் நைட்ரஜன் நிலைநிறுத்தப்படுவதாலும், மண்ணின் அமைப்பு ஒட்டுமொத்தமாக மேம்படுவதாலும், இது பயிர் சுழற்சி முறைகளில் பசுந்தாள் உரமாகவும் கருதப்படுகிறது. கடந்த நூற்றாண்டில் NLL ஒரு விரைவான பழக்கப்படுத்தல் செயல்முறைக்கு உட்பட்டுள்ளது, மேலும் இது இன்னும் அதிக இனப்பெருக்க அழுத்தத்திற்கு உள்ளாகியுள்ளது³,⁴,⁵,⁶,⁷,⁸,⁹,⁹,⁻¹². NLL-இன் பரவலான சாகுபடியால், நோய்க்காரணி பூஞ்சைகளின் தொடர் வளர்ச்சி புதிய விவசாய இடங்களை உருவாக்கி, பயிர்களை அழிக்கும் புதிய நோய்களை ஏற்படுத்தியது. லூபின் விவசாயிகள் மற்றும் பயிர் வளர்ப்பாளர்களுக்கு மிகவும் குறிப்பிடத்தக்க விஷயம் என்னவென்றால், கோலெட்ரோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டார்) நிரன்பெர்க், ஃபைலர் & ஹேகடோர்ன்13 என்ற நோய்க்காரணி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸ் நோயின் தோற்றம் ஆகும். லூபின் விவசாயிகள் மற்றும் பயிர் வளர்ப்பாளர்களுக்கு மிகவும் குறிப்பிடத்தக்க விஷயம் என்னவென்றால், கோலெட்ரோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டார்) நிரன்பெர்க், ஃபைலர் & ஹேகடோர்ன்13 என்ற நோய்க்காரணி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸ் நோயின் தோற்றம் ஆகும். நைபோலி பிரைமச்சட்டெல்னிம் ஃபெர்மெரோவ் மற்றும் செலக்சியோனெரோவ் லிபினா பைலோ போவாவ்லேனி அன்ட்ராக்னோசா, வோகோவொன்சா கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டார்) நிரன்பெர்க், ஃபீலர் & ஹேகடோர்ன்13. லூபின் விவசாயிகள் மற்றும் பயிர் வளர்ப்பாளர்களுக்கு மிகவும் குறிப்பிடத்தக்க விஷயம் என்னவென்றால், கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டார்) நிரன்பெர்க், ஃபைலர் & ஹேகடோர்ன்13 என்ற நோய்க்காரணி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸ் நோயின் தோற்றம் ஆகும்.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原，它是由病原) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13 引起的。对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原(போந்தர்)嵵ஹேர்டு。1 நைபோலி போரசிடெல்னிம் டெர்மெரோவ் மற்றும் செலெக்சியோனெரோவ் லிபினா யவ்லியாட்சியா போயாவ்லேனி அண்ட்ராக்னோசா, வீடியோ கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டார்) நிரன்பெர்க், ஃபைலர் & ஹேகெடோர்ன்13. லூபின் விவசாயிகளுக்கும் பயிர் வளர்ப்பாளர்களுக்கும் மிகவும் கவனத்தை ஈர்ப்பது, கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டார்) நிரன்பெர்க், ஃபைலர் & ஹேகடோர்ன்13 என்ற நோய்க்காரணி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸ் நோயின் தோற்றமாகும்.இந்த நோயைப் பற்றிய ஆரம்பகால அறிக்கைகள் பிரேசில் மற்றும் அமெரிக்காவிலிருந்து வந்தன; அவற்றின் பொதுவான அறிகுறிகள் முறையே 1912 மற்றும் 1929-ஆம் ஆண்டுகளில் தோன்றின. இருப்பினும், சுமார் 30 ஆண்டுகளுக்குப் பிறகு, அந்த நோய்க்கிருமிக்கு Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. எனப் பெயரிடப்பட்டது. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & சாக்., டெலியோமோர்ஃப் குளோமரெல்லா சிங்குலாட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட். & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld-இன் டெலிமார்ப். & சாக்.，有目的形态的Glomerella சிங்குலட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட்。 & சாக்.，有目的形态的Glomerella சிங்குலட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட்。 & சாக்., க்ளோமரெல்லா சிங்குலட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட் மற்றும் டெலினாப்ராவ்லென்னோய் மோரிஃபோலோகி. & Sacc., குளோமெரெல்லா சிங்குலாட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட், இலக்கு உருவவியலில். மற்றும் எச். ஷ்ரெங்க். & எச். ஷ்ரெங்க், .மற்றும் எச். ஷ்ரெங்க். & H.施伦克,. & H.施伦克,.மற்றும் எச். ஷ்லெங்க், .20 ஆம் நூற்றாண்டின் மத்தியில் செய்யப்பட்ட ஆரம்பகட்ட நோய் புறத்தோற்றப் பகுப்பாய்வு, NLL மற்றும் மஞ்சள் லுபைன் (L. luteus L.) ரகங்களில் ஓரளவு எதிர்ப்புத்திறனைக் காட்டியது, ஆனால் பரிசோதிக்கப்பட்ட அனைத்து வெள்ளை லுபைன் (L. albus L.) ரகங்களும் அதிக பாதிப்புக்குள்ளாகக்கூடியவையாக இருந்தன¹⁵,¹⁶. ஆந்த்ராக்னோஸ் நோயின் வளர்ச்சி, அதிகரித்த மழைப்பொழிவு (காற்றின் ஈரப்பதம்) மற்றும் வெப்பநிலை (12-28°C வரம்பில்) ஆகியவற்றுடன் தொடர்புடையது என்றும், இது அதிக வெப்பநிலையில் எதிர்ப்புத்திறன் மீறப்படுவதற்கு வழிவகுக்கிறது என்றும் ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன¹⁷,¹⁸. உண்மையில், அதிக ஈரப்பதம் உள்ள சூழ்நிலைகளில், கோனிடியாக்கள் முளைத்து நோய் தொடங்குவதற்குத் தேவைப்படும் நேரம், 12°C வெப்பநிலையில் (16 மணிநேரம்) இருந்ததை விட 24°C வெப்பநிலையில் (4 மணிநேரம்) நான்கு மடங்கு குறைவாக இருந்தது¹⁹. இவ்வாறு, தொடர்ந்து நிகழும் புவி வெப்பமயமாதல் ஆந்த்ராக்னோஸ் பரவுவதற்கு வழிவகுத்துள்ளது. இருப்பினும், இந்த நோய் பிரான்ஸ் (1982) மற்றும் உக்ரைன் (1983) ஆகிய நாடுகளில் வரவிருக்கும் அச்சுறுத்தலின் ஒரு முன்னோடியாகக் காணப்பட்டது, ஆனால் அந்த நேரத்தில் லுபைன் தொழில்துறையால் இது புறக்கணிக்கப்பட்டதாகத் தெரிகிறது²⁰,²¹. சில ஆண்டுகளுக்குப் பிறகு, இந்த பேரழிவு நோய் உலகம் முழுவதும் பரவி, ஆஸ்திரேலியா, போலந்து மற்றும் ஜெர்மனி போன்ற முக்கிய லூபின் உற்பத்தி செய்யும் நாடுகளையும் பாதித்தது²²⁻³⁻²⁴. 1990களின் நடுப்பகுதியில் ஏற்பட்ட ஆந்த்ராக்னோஸ் நோய்த் தாக்குதலைத் தொடர்ந்து, விரிவான பரிசோதனையின் விளைவாக NLL¹⁹ மாதிரிகளில் பல எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட கொடையாளர்கள் அடையாளம் காணப்பட்டனர். ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு எதிரான NLL-இன் எதிர்ப்புத் திறன், வெவ்வேறு மரபணு மூலங்களில் காணப்படும் இரண்டு தனித்தனி ஓங்கு மரபணுக்களால் கட்டுப்படுத்தப்படுகிறது: டான்ஜில் மற்றும் வோங்கா பயிர் வகைகளில் காணப்படும் Lanr1 மற்றும் மண்டலே பயிர் வகையில் காணப்படும் AnMan²⁵,²⁶. இந்த மரபணுக்கள், இனப்பெருக்கத் திட்டங்களில் எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட மரபணு மூலங்களைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கு ஆதரவளிக்கும் மூலக்கூறு குறிப்பான்களுக்குத் துணைபுரிகின்றன²⁵,²⁶,²⁷,²⁸,²⁹,³⁰. Lanr1 அல்லீலைக் கொண்ட எதிர்ப்புத்திறன் மிக்க இனப்பெருக்க வரிசை 83A:476, எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய காட்டு வரிசை P27255 உடன் கலப்பு செய்யப்பட்டு, ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத்திறனுக்காகப் பிரிந்து செல்லும் ஒரு RIL இனத்தொகை பெறப்பட்டது. இது Lanr1 மரபணு இருப்பிடத்தை NLL-11 குரோமோசோமிற்கு ஒதுக்குவதை சாத்தியமாக்கியது³¹,³²,³³. ஆந்த்ராக்னோஸைச் சுற்றியுள்ள எதிர்ப்பு மரபணு இருப்பிடங்களிலிருந்து இணைப்பு வரைபடக் குறிப்பான்களை, NLL என்ற மரபணு கட்டமைப்புடன் சீரமைத்தபோது, ​​மூன்று அல்லீல்களும் ஒரே குரோமோசோமில் (NLL-11) ஆனால் வெவ்வேறு நிலைகளில் அமைந்திருப்பது தெரியவந்தது²⁹,³⁴,³⁵. இருப்பினும், RIL-களின் எண்ணிக்கை குறைவாக இருப்பதாலும், குறிப்பான்களுக்கும் அதனுடன் தொடர்புடைய அல்லீல்களுக்கும் இடையே உள்ள மரபணு தூரம் அதிகமாக இருப்பதாலும், அவற்றின் அடிப்படை மரபணுக்களைப் பற்றி நம்பகமான முடிவுகளை எடுக்க முடியவில்லை. மறுபுறம், லூபின்களில் தலைகீழ் மரபணுவியலைப் பயன்படுத்துவது கடினம், ஏனெனில் அவற்றின் மீளுருவாக்கத் திறன் மிகவும் குறைவாக இருப்பதால், மரபணு கையாளுதல் சிரமமாகிறது³⁷.
83A:476 (Lanr1) மற்றும் Mandelup (AnMan) போன்ற, விரும்பிய அல்லீலை ஒற்றைப்பண்பு நிலையில் கொண்டுள்ள வளர்ப்பு மரபணுத்தொகுதிகளின் வளர்ச்சியானது, காட்டு உயிரினத்தொகுதிகளில் காணப்படும் எதிர் அல்லீல் சேர்க்கைகளின் முன்னிலையில் ஆந்த்ராக்னோஸ் நோய் எதிர்ப்புத்திறனைப் பற்றி ஆய்வு செய்வதற்கான வழியைத் திறந்துவிட்டுள்ளது. மூலக்கூறு வழிமுறைகளின் சாத்தியக்கூறுகள். குறிப்பிட்ட மரபணுவகைகளால் உருவாக்கப்படும் பாதுகாப்பு எதிர்வினைகளை ஒப்பிடுக. இந்த ஆய்வு, C. lupini தடுப்பூசிக்கு NLL-இன் ஆரம்பகால டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் எதிர்வினையை மதிப்பிட்டது. முதலில், Lanr1 மற்றும் AnMan அல்லீல்களைக் குறிக்கும் மூலக்கூறு குறிப்பான்களைப் பயன்படுத்தி, 215 வரிசைகளைக் கொண்ட ஒரு ஐரோப்பிய NLL மரபணுத்தொகுதி குழு சல்லடை செய்யப்பட்டது. பின்னர், மூலக்கூறு குறிப்பான்களுக்காக முன்னரே தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட 50 NLL வரிசைகளில், கட்டுப்படுத்தப்பட்ட சூழ்நிலைகளில் ஆந்த்ராக்னோஸ் புறத்தோற்ற வகைப்படுத்தல் செய்யப்பட்டது. இந்த சோதனைகளின் அடிப்படையில், ஆந்த்ராக்னோஸ் நோய் எதிர்ப்புத்திறன் மற்றும் Lanr1/AnMan அல்லீல் கலவையில் வேறுபட்ட நான்கு வரிசைகள், இரண்டு நிரப்பு அணுகுமுறைகளைப் பயன்படுத்தி வேறுபட்ட பாதுகாப்பு மரபணு வெளிப்பாட்டு விவரக்குறிப்பிற்காகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன: அதிவேக ஆர்.என்.ஏ வரிசைப்படுத்தல் மற்றும் நிகழ்நேர பி.சி.ஆர் அளவீடு.
Lanr1 (Anseq3 மற்றும் Anseq4), AnMan (Anseq4) மற்றும் AnMan (AnManM1) ஆகிய குறிப்பான்களைக் கொண்டு NLL மரபணுத்தொகுதியின் (N = 215) ஒரு தொகுப்பை ஆய்வு செய்ததில், ஒரே ஒரு மரபணு வரிசை (95726, Salamanca-b க்கு அருகில்) மட்டுமே அனைத்து குறிப்பான்களுக்கும் "எதிர்ப்பு" அல்லீலைப் பெருக்குகிறது என்பது தெரியவந்தது. அதேசமயம், "பாதிக்கப்படக்கூடிய" அல்லீல்களின் இருப்பு என்ற ஆய்வில், 158 (~73.5%) மரபணு வரிசைகளில் அனைத்து குறிப்பான்களின் விகிதமும் காணப்பட்டது. பதின்மூன்று மரபணு வரிசைகள் Lanr1 குறிப்பானின் இரண்டு "எதிர்ப்பு" அல்லீல்களையும், 8 மரபணு வரிசைகள் Lanr1 குறிப்பானின் "எதிர்ப்பு" அல்லீல்களையும் உருவாக்கின. AnMan குறிப்பானின் "எதிர்ப்பு" அல்லீல் (துணை அட்டவணை S1). இரண்டு மரபணு வரிசைகள் Anseq3 குறிப்பானுக்குப் பல்லினச்சேர்க்கையாகவும், ஒரு மரபணு வரிசை AnManM1 குறிப்பானுக்குப் பல்லினச்சேர்க்கையாகவும் இருந்தன. 42 மரபுத்தொடர்கள் (19.5%) Anseq3 மற்றும் Anseq4 அல்லீல்களின் எதிர் கட்டங்களைக் கொண்டிருந்தன, இது இந்த இரண்டு மரபணு இடங்களுக்கு இடையே அதிக அளவில் மறுசேர்க்கை நிகழ்வதைக் குறிக்கிறது. கட்டுப்படுத்தப்பட்ட சூழ்நிலைகளில் ஆந்த்ராக்னோஸ் புறத்தோற்றங்கள் (துணை அட்டவணை S2), சோதிக்கப்பட்ட மரபணு வகைகளின் எதிர்ப்புத்திறனில் மாறுபாட்டைக் காட்டின, இது ஆந்த்ராக்னோஸின் தீவிரத்தில் பிரதிபலித்தது. சராசரி மதிப்பெண்களில் உள்ள வேறுபாடுகள் 1.8 (மிதமான எதிர்ப்புத்திறன்) முதல் 6.9 (பாதிக்கப்படக்கூடியது) வரையிலும், தாவர எடை வேறுபாடுகள் 0.62 (பாதிக்கப்படக்கூடியது) முதல் 4.45 கிராம் (எதிர்ப்புத்திறன்) வரையிலும் இருந்தன. சோதனையின் இரண்டு மறுசெய்கைகளில் காணப்பட்ட மதிப்புகளுக்கு (நோய் தீவிர மதிப்பெண்களுக்கு 0.51, P = 0.00017 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.61, P < 0.0001) இடையேயும், அத்துடன் இந்த இரண்டு அளவுருக்களுக்கு இடையேயும் (− 0.59 மற்றும் − 0.77, P < 0.0001) ஒரு குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு இருந்தது. சோதனையின் இரண்டு மறுசெய்கைகளில் காணப்பட்ட மதிப்புகளுக்கு (நோய் தீவிர மதிப்பெண்களுக்கு 0.51, P = 0.00017 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.61, P < 0.0001) இடையேயும், அத்துடன் இந்த இரண்டு அளவுருக்களுக்கு இடையேயும் (− 0.59 மற்றும் − 0.77, P < 0.0001) ஒரு குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு இருந்தது. வியாவ்லேனா டோஸ்டோவெர்னாயா கொரேலியா மேடு சன்செனியாமி, நப்லிடேமிமி வி டுவூஹ் போவ்டோர்னோஸ்ட்யாஹ் எக்ஸ்பெரிமென்ட்,510 тяжести болезни, P = 0,00017 и 0,61 для массы растения, P < 0,0001), а также между этими двумя параметрами (-0,59, и -0,77, <0,77) 0,0001). சோதனையை இரண்டு முறை மீண்டும் செய்தபோது கண்டறியப்பட்ட மதிப்புகளுக்கு (நோய் தீவிர மதிப்பெண்களுக்கு 0.51, P = 0.00017 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.61, P < 0.0001) இடையேயும், அத்துடன் இந்த இரண்டு அளவுருக்களுக்கு இடையேயும் (-0.59 மற்றும் -0.77, P < 0.0001) ஒரு குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு கண்டறியப்பட்டது.மேலும் 0.00017,植物重量为0.61,P <0.0001）以及这两个参数之间（- 0.59 和- 0.77,P <0.0001)மேலும் மேலும்和– 0.59 和– 0.59 和- 0.77,P <0.0001)。 நேப்லிடலஸ் சன்னாசிதெல்னாயா கொரேலியா மேஷ்டு சன்செனியாமி, நப்லிடேமிமி மற்றும் டிவூஹ் போவ்டோர்னோஸ்டியாக் (ஆசிரியர்) 0,51, பி = 0,00017 மற்றும் மாஸ்ஸா растения 0,61, P <0,0001), и между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,0001) 0,77, P <0,0001. இருமுறை உற்றுநோக்கப்பட்ட மதிப்புகளுக்கும் (நோய் தீவிர மதிப்பெண் 0.51, P = 0.00017 மற்றும் தாவர எடை 0.61, P < 0.0001) மற்றும் இந்த இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் (-0.59 மற்றும் -0.0001) இடையே 0.77, P<0.0001 என்ற குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு காணப்பட்டது. ).பாதிக்கப்படக்கூடிய தாவரங்களில் காணப்படும் பொதுவான அறிகுறிகளில், "மேய்ப்பரின் வில்" போன்ற அமைப்பில் தண்டு வளைந்து முறுக்குதல், அதைத் தொடர்ந்து ஆரஞ்சு/இளஞ்சிவப்பு நிற வித்துப்பைகளுடன் கூடிய நீள்வட்டப் புண்கள் ஆகியவை அடங்கும் (துணைப் படம் 1). Lanr1 (83A:476 மற்றும் Tanjil) மற்றும் AnMan (Mandelup) மரபணுக்களைக் கொண்ட ஆஸ்திரேலிய இனங்கள் மிதமான எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டவை (0.0331 மற்றும் 0.0036). "எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட" Lanr1 மற்றும்/அல்லது AnMan அல்லீல்களையும் கொண்டுள்ள சில ரகங்கள் நோயின் அறிகுறிகளைக் காட்டுகின்றன.
சுவாரஸ்யமாக, எந்தவொரு "எதிர்ப்பு" குறிப்பான் அல்லீலும் இல்லாத சில NLL ரகங்கள், ஆந்த்ராக்னோஸ் நோய்க்கு அதிக அளவிலான எதிர்ப்பை வெளிப்படுத்தின (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணு வகைகளுக்கு இணையான அல்லது அதைவிட அதிகமானவை). அவற்றுள் Boregine (இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் P மதிப்பு < 0.0001), Bojar (மதிப்பெண்ணுக்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.001) மற்றும் Population B-549/79b (மதிப்பெண்ணுக்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் எடைக்கு முக்கியத்துவம் அற்றது) ஆகியவை அடங்கும். சுவாரஸ்யமாக, எந்தவொரு "எதிர்ப்பு" குறிப்பான் அல்லீலும் இல்லாத சில NLL ரகங்கள், ஆந்த்ராக்னோஸ் நோய்க்கு அதிக அளவிலான எதிர்ப்பை வெளிப்படுத்தின (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணு வகைகளுக்கு இணையான அல்லது அதைவிட அதிகமானவை). அவற்றுள் Boregine (இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் P மதிப்பு < 0.0001), Bojar (மதிப்பெண்ணுக்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.001) மற்றும் Population B-549/79b (மதிப்பெண்ணுக்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் எடைக்கு முக்கியத்துவம் அற்றது) ஆகியவை அடங்கும். அன்டெரெஸ்னோ, செக்டோ நெஸ்கோல்கோ லினி என்எல்எல், லிஷென்னிக் ககோகோ-லிபோ «ரெஸிஸ்டென்ட்னோகோ» மார்கெர்னோகோ அலெலியா, போகாஸ் устойчивости கே அன்ட்ராக்னோஸு (சோபோஸ்டாவிம் அல்லது பொலி வைசோகி, செம் டிலை ஜெனோட்டிபோவ் லான்ர்1 அல்லது ஆன்மேன்), டாக்கிக் காக் போரெஜின் (பிற்பகல் 10,000 параметров), போஜர் (значение பி <0,0001 для оценки и 0,001 для массы растения) மற்றும் பொபுலியாசிகள் B-549/79b (பிரபலமான P <0,0001 для оценки и носение). சுவாரஸ்யமாக, எந்தவொரு 'எதிர்ப்பு' குறிப்பான் அல்லீலும் இல்லாத பல NLL ரகங்கள், ஆந்த்ராக்னோஸ் நோய்க்கு உயர் மட்ட எதிர்ப்பைக் காட்டின (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணு வகைகளுக்கு இணையான அல்லது அதைவிட அதிகமான எதிர்ப்புத்திறன்). அவற்றுள் போரிஜின் (இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் P மதிப்பு < 0.0001), போஜார் (மதிப்பீட்டிற்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.001) மற்றும் B-549/79b ரகம் (மதிப்பீட்டிற்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் எடைக்கு குறிப்பிடத்தக்கதல்ல) ஆகியவை அடங்கும்.有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL 系显示出高水平的炭疽痸或AnMan 基因型相当或更高），例如Boregine（两个参数的P 值< 0.0001）、Bojar（P 值<得分为0.0001,植物重量为0.001）和种群B-549/79b（得分P 值< 0.0001,重量不昍 எந்த "ஆன்டிஜெனிக்" குறிப்பான்களும் இல்லாத சில NLL அமைப்புகள், அதிக கிடைமட்ட எதிர்ப்பைக் (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணுக்களுக்குச் சமமான அல்லது அதற்கும் அதிகமான) காட்டுவது சுவாரஸ்யமானது. எடுத்துக்காட்டாக, போரிஜின் (இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் P < 0.0001), போஜார் (P மதிப்பு < 0.0001, தாவர எடை 0.001) மற்றும் B-549/79b ரகம் (P மதிப்பு < 0.0001, எடை குறிப்பிடத்தக்கதல்ல). அன்டெரெஸ்னோ, சிடோ நெகோடோரி லினிகள் என்எல்எல், லிஷென்னி கேக்கிஹ்-லிபோ மார்கெர்ன் அலெலி «ரெசிஸ்டென்ட்னோஸ்டிஸ்», போகாவஸ் устойчивости கே அன்ட்ராக்னோஸு (ஸ்ராவ்னிம் அல்லது விஷே, செம் யு ஜெனோட்டிபோவ் லான்ர்1 அல்லது ஆன்மேன்), டாக்கி காக் போரெஜின் (சான்றே காக் போரெஜின், (பெயர் பி <0,0001, மாச ரஸ்டெனிய 0,001) மற்றும் பி-549/79பி சுவாரஸ்யமாக, எந்த 'எதிர்ப்பு' குறிப்பான் அல்லீல்களும் இல்லாத சில NLL ரகங்கள், ஆந்த்ராக்னோஸ் நோய்க்கு அதிக அளவிலான எதிர்ப்பைக் காட்டின (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணு வகைகளுக்கு இணையான அல்லது அதைவிட அதிகமானவை). அவற்றுள் Boregine (இரு அளவுருக்களுக்குமான P மதிப்பு <0.0001), Bojar (P-மதிப்பு < 0.0001, தாவர எடை 0.001) மற்றும் B-549/79b இனக்கூட்டம் (P-மதிப்பு < 0.0001, எடை குறிப்பிடத்தக்கதல்ல) ஆகியவை அடங்கும்.இந்த நிகழ்வு, ஒரு புதிய மரபணு எதிர்ப்பு மூலத்தின் சாத்தியத்தைக் குறிக்கிறது. இது, குறிப்பான் மரபணு வகைகளுக்கும் நோய்ப் புறத்தோற்றங்களுக்கும் இடையே காணப்பட்ட தொடர்பின்மையை (P மதிப்புகள் ~0.42 முதல் ~0.98 வரை) விளக்குகிறது. இவ்வாறு, கோல்மோகோரோவ்-ஸ்மிர்னோவ் சோதனையானது, ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத் தரவுகள், மதிப்பெண்களுக்கு (P-மதிப்புகள் 0.25 மற்றும் 0.11) மற்றும் தாவர எடைக்கு (P-மதிப்புகள் 0.47 மற்றும் 0.55) ஏறக்குறைய இயல்நிலைப் பரவலைக் கொண்டிருந்ததைக் காட்டியது. இது, Lanr1 மற்றும் AnMan ஆகியவற்றை விட அதிகமான அல்லீல்கள் இதில் ஈடுபட்டுள்ளன என்ற எனது கருதுகோளை முன்வைக்கிறது.
ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத் திறன் பரிசோதனையின் முடிவுகளின் அடிப்படையில், டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் பகுப்பாய்விற்காக 83A:476, போரிஜின், மாண்டலப் மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 ஆகிய 4 ரகங்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. முந்தைய சோதனையில் இருந்ததைப் போலவே இந்த ரகங்களும் இருந்தன என்ற நிபந்தனையின் பேரில், ஆர்.என்.ஏ வரிசைப்படுத்தல் மூலம் நோய்த்தொற்று சோதனைகளில் ஆந்த்ராக்ஸ் எதிர்ப்புத் திறனுக்காக அவை மீண்டும் சோதிக்கப்பட்டன. மதிப்பெண் மதிப்புகள் பின்வருமாறு: போரிஜின் (1.71 ± 1.39), 83A:476 (2.09 ± 1.38), மாண்டலப் (3.82 ± 1.42) மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 (6.11 ± 1.29).
இலுமினா நோவாசீக் 6000 நெறிமுறையானது, ஒரு மாதிரிக்கு சராசரியாக 40.5 Mread இணைகளை (29.7 முதல் 54.4 Mreads வரை) அடைந்தது (துணை அட்டவணை S3). குறிப்பு வரிசையில் சீரமைப்பு மதிப்பெண்கள் 75.5% முதல் 88.6% வரை இருந்தன. உயிரியல் பிரதிகளுக்கு இடையிலான சோதனை மாறுபாடுகளின் ரீட் எண்ணிக்கை தரவுகளின் சராசரி தொடர்பு 0.812 முதல் 0.997 வரை இருந்தது (சராசரி 0.959). பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட 35,170 மரபணுக்களில், 2917 மரபணுக்கள் எந்த வெளிப்பாட்டையும் வெளிப்படுத்தவில்லை, மற்ற 4785 மரபணுக்கள் புறக்கணிக்கத்தக்க அளவில் (அடிப்படை சராசரி < 5) வெளிப்படுத்தப்பட்டன. பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட 35,170 மரபணுக்களில், 2917 மரபணுக்கள் எந்த வெளிப்பாட்டையும் வெளிப்படுத்தவில்லை, மற்ற 4785 மரபணுக்கள் புறக்கணிக்கத்தக்க அளவில் (அடிப்படை சராசரி < 5) வெளிப்படுத்தப்பட்டன. Из 35 170 ப்ரோனாலிசிரோவன்னிக் ஜெனோவ் 2917 இல்லை ப்ரோயாவலி எக்ஸ்பிரஸ்ஸி, அ ஓஸ்டால்னி 4785 ஜெனோவ் எக்ஸப்ரேசிஸ் நிஜமான உரோவ்னே (பசோவோ среднее <5). பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட 35,170 மரபணுக்களில், 2917 மரபணுக்கள் எந்த வெளிப்பாட்டையும் காட்டவில்லை, மீதமுள்ள 4785 மரபணுக்கள் புறக்கணிக்கத்தக்க அளவில் (அடிப்படை சராசரி <5) வெளிப்படுத்தப்பட்டன.在分析的35,170 个基因中，2917 个没有表达，其他4785个基因的表达可以忽略不计（基本平均值< 5）。35,170 Из 35 170 ப்ரோனாலிசிரோவன்னிக் ஜெனோவ் 2917 இல்லை எக்ஸ்பிரஸ்சிரோவலிஸ், அ ஓஸ்டல்னி 4785 ஜெனோவ் எமிலிஸ் நெசன்ஸ் (பசோவோ ஸ்ரேட்னி значение <5). பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட 35,170 மரபணுக்களில், 2917 மரபணுக்கள் வெளிப்படுத்தப்படவில்லை, மீதமுள்ள 4785 மரபணுக்கள் புறக்கணிக்கத்தக்க வெளிப்பாட்டைக் கொண்டிருந்தன (அடிப்படை சராசரி <5).இவ்வாறு, பரிசோதனையின் போது வெளிப்படுத்தப்பட்டதாகக் கருதப்பட்ட மரபணுக்களின் எண்ணிக்கை (அடிப்படை சராசரி ≥ 5) 27,468 (78.1%) ஆக இருந்தது (துணை அட்டவணை S4).
முதல் நேரப் புள்ளியிலிருந்து, அனைத்து NLL மரபுத்தொடர்களும் C. lupini (Col-08 திரிபு) உட்செலுத்தலுக்கு டிரான்ஸ்கிரிப்டோமை மறுசீரமைப்பதன் மூலம் பதிலளித்தன (அட்டவணை 1), இருப்பினும், மரபுத்தொடர்களுக்கு இடையே குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் காணப்பட்டன. இவ்வாறு, எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட மரபுத்தொடரான ​​83A:476 (Lanr1 மரபணுவைக் கொண்டது), முதல் நேரப் புள்ளியில் (6 hpi) குறிப்பிடத்தக்க டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் மறுசீரமைப்பைக் காட்டியது. இந்த நேரப் புள்ளியில் மற்ற நேரப் புள்ளிகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​தனிமைப்படுத்தப்பட்ட மேல் மற்றும் கீழ் மரபணுக்களின் எண்ணிக்கையில் 31-69 மடங்கு அதிகரிப்பு காணப்பட்டது. மேலும், இந்த உச்சநிலை குறுகிய காலமே நீடித்தது, ஏனெனில் இரண்டாவது நேரப் புள்ளியில் (12 hpi) ஒரு சில மரபணுக்களின் வெளிப்பாடு மட்டுமே குறிப்பிடத்தக்க மாற்றத்துடன் காணப்பட்டது. சுவாரஸ்யமாக, ஒட்டுச் சோதனையில் அதிக அளவு எதிர்ப்புத் திறனைக் காட்டிய போரிஜின், பரிசோதனையின் போது அத்தகைய பெரிய டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனல் மறுசீரமைப்பிற்கு உள்ளாகவில்லை. இருப்பினும், 12 HPI-இல், வேறுபட்ட வெளிப்பாடு கொண்ட மரபணுக்களின் (DEG) எண்ணிக்கை போரிஜின் மற்றும் 83A:476 ஆகிய இரண்டிற்கும் ஒரே மாதிரியாக இருந்தது. மாண்டெலப் மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 ஆகிய இரண்டுமே கடைசி நேரப் புள்ளியில் (48 லி/வி) DEG உச்சங்களைக் காட்டின, இது பாதுகாப்பு எதிர்வினைகளில் ஒரு சார்பு தாமதத்தைக் குறிக்கிறது.
மற்ற அனைத்து மரபு வழிகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​83A:476 ஆனது தொற்று ஏற்பட்ட 6 மணி நேரத்தில் (6 HPI) C. lupini-க்கு பதிலளிக்கும் விதமாக மிகப்பெரிய டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் மறுநிரலாக்கத்திற்கு உள்ளானதால், இந்தக் காலகட்டத்தில் காணப்பட்ட வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்களில் (DEGs) சுமார் 91% மரபு வழி சார்ந்தவையாக இருந்தன (படம் 1). இருப்பினும், ஆய்வு மரபு வழிகளுக்கு இடையே ஆரம்பகால பதிலளிப்புகளில் சில ஒன்றுடன் ஒன்று பொருந்துதல்கள் இருந்தன; ஏனெனில், போரெஜின், மாண்டெலப் மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 ஆகியவற்றில் முறையே 68.5%, 50.9% மற்றும் 52.6% வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்கள், குறிப்பிட்ட காலகட்டங்களில் 83A:476-ல் காணப்பட்டவற்றுடன் ஒன்றுடன் ஒன்று பொருந்தியிருந்தன. இருப்பினும், இந்த வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்கள், 83A:476-ஐப் பயன்படுத்தி தற்போது கண்டறியப்பட்ட அனைத்து வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்களில் ஒரு சிறிய பகுதியை (0.97–1.70%) மட்டுமே கொண்டிருந்தன. கூடுதலாக, இந்த நேரத்தில் அனைத்து மரபு வழிகளிலிருந்தும் 11 வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்கள் (DEGs) ஒத்திசைவாக இருந்தன (துணை அட்டவணைகள் S4-S6). அவற்றுள், தாவரப் பாதுகாப்பு எதிர்வினைகளின் பொதுவான கூறுகளான கொழுப்புப் பரிமாற்றப் புரதம் (TanjilG_32225), எண்டோகுளுக்கான்-1,3-β-குளுக்கோசைடு நொதி (TanjilG_23384), SAM22 போன்ற இரண்டு அழுத்தத்தால் தூண்டப்படும் புரதங்கள் (TanjilG_31528 மற்றும் TanjilG_31531), அடிப்படை லேடெக்ஸ் புரதம் (TanjilG_32352), மற்றும் கிளைசின் நிறைந்த இரண்டு கட்டமைப்பு செல் சுவர் புரதங்கள் (TanjilG_19701 மற்றும் TanjilG_19702) ஆகியவை அடங்கும். மேலும், 24 HPI-இல் 83A:476 மற்றும் போரிஜின் (Boregine) ஆகியவற்றுக்கு இடையேயும் (மொத்தம் 16-38% DEG), 48 HPI-இல் மாண்டலப் (Mandelup) மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 (Population 22660) ஆகியவற்றுக்கு இடையேயும் டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் எதிர்வினைகளில் ஒப்பீட்டளவில் அதிக அளவில் ஒன்றுடன் ஒன்று பொருந்துதல் காணப்பட்டது (மொத்தம் 14-20% DEG).
1999-ல் போலந்தின் வியர்செனிஸ் நகரில் உள்ள லூபின் வயல்களிலிருந்து பெறப்பட்ட Col-08 வகை பூஞ்சையான கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினியால் நோய்த்தொற்றுக்கு உள்ளாக்கப்பட்ட குறுகிய இலை லூபின் (NLL) வகைகளில், வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்களின் (DEG) எண்ணிக்கையைக் காட்டும் வென் வரைபடம். பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட NLL வகைகள்: 83A:476 (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, Lanr1 அல்லீலைக் கொண்டது), போரிஜின் (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, மரபணுப் பின்னணி அறியப்படாதது), மாண்டெலப் (மிதமான எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, AnMan அல்லீலைக் கொண்டது) மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 (மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடியது). hpi என்ற சுருக்கமானது, தடுப்பூசிக்குப் பிறகான மணிநேரங்களைக் குறிக்கிறது. வரைபடத்தை எளிமையாக்குவதற்காக பூஜ்ஜிய மதிப்புகள் நீக்கப்பட்டுள்ளன.
தொற்று ஏற்பட்ட 6 மணி நேரத்தில் (6 hpi) மிகையாக வெளிப்படுத்தப்பட்ட மரபணுக்களின் தொகுப்பு, வழக்கமான R மரபணு டொமைன்கள் இருப்பதற்காகப் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது (துணை அட்டவணை S7). இந்த ஆய்வு, 83A:476-இல் மட்டுமே NBS-LRR டொமைன்களைக் கொண்ட பாரம்பரிய நோய் எதிர்ப்பு மரபணுக்களின் டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் தூண்டலை வெளிப்படுத்தியது. இந்தத் தொகுப்பில் ஒரு TIR-NBS-LRR மரபணு (tanjilg_05042), ஐந்து CC-NBS-LRR மரபணுக்கள் (tanjilg_06165, tanjilg_06162, tanjilg_22773, tanjilg_22640, மற்றும் tanjilg_16162), நான்கு NBS-LR, நான்கு NBS-LRRE (tanjilg_16162) மற்றும் நான்கு NBS-Lrr (tanjilg_16162) மற்றும் நான்கு NBS-LRR (TANJILG_16162) ஆகியவை அடங்கியிருந்தன. இந்த மரபணுக்கள் அனைத்தும் பாதுகாக்கப்பட்ட வரிசைகளில் அமைக்கப்பட்ட நியமன களங்களைக் கொண்டுள்ளன. NBS-LRR கள மரபணுக்களுக்குக் கூடுதலாக, பல RLL கைனேஸ்கள் 6 hpi-இல் செயல்படுத்தப்பட்டன, அதாவது போரேஜினில் ஒன்று (TanjilG_19877), மாண்டெலப்பில் இரண்டு (TanjilG_07141 மற்றும் TanjilG_19877) மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660-இல் (TanjilG_09014 மற்றும் TanjilG_10361) இரண்டு, மற்றும் 83A 27:476-இல் இரண்டு.
C. lupini (Col-08 திரிபு) மூலம் நோயூட்டப்பட்டதன் விளைவாக, வெளிப்பாட்டில் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றங்களைக் காட்டிய மரபணுக்கள், மரபணு வகைப்பாட்டு (GO) செறிவூட்டல் பகுப்பாய்வுக்கு உட்படுத்தப்பட்டன (துணை அட்டவணை S8). மிகவும் அதிகமாகக் காணப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறைச் சொல் “GO:0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினை” ஆகும், இது 16 (நேரம் × வரி) சேர்க்கைகளில் 6 இல் அதிக முக்கியத்துவத்துடன் (P மதிப்பு < 0.001) தோன்றியது (படம் 2). மிகவும் அதிகமாகக் காணப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறைச் சொல் “GO:0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினை” ஆகும், இது 16 (நேரம் × வரி) சேர்க்கைகளில் 6 இல் அதிக முக்கியத்துவத்துடன் (P மதிப்பு < 0.001) தோன்றியது (படம் 2). நைபோலி சாஸ்டோ பிரேஸ்மெர்னோ பிரட்ஸ்டாவ்லென்னிம் டெர்மினோம் பியோலாஜிக்செஸ்கோ ப்ரோசெஸ்ஸா பில் «GO: 0006952 அறிவிப்புகள், » 6 அல்லது 16 ஆம் தேதி (время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение பி <0,001) (ரிஸ். 2). மிகவும் அதிகமாகக் காணப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறைச் சொல் 'GO:0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினை' ஆகும், இது 16 (நேரம் × பரம்பரை) சேர்க்கைகளில் 6 இல் அதிக முக்கியத்துவத்துடன் (P மதிப்பு < 0.001) தோன்றியது (படம் 2).最常被过度代表的生物过程术语是“GO:0006952 防御反应”，它出现在16个（时间×线）组合中的6 个中，具有高显着性（P 值< 0.001）（图2）。 மிகவும் பிரதிநிதித்துவமான உயிரியல் செயல்முறைச் சொல் “GO:0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினை” ஆகும், இது 16 (நேரம்×கோடு) சேர்க்கைகளில் 6 இல் அதிக முக்கியத்துவத்துடன் (P மதிப்பு < 0.001) (படம் 2) தோன்றுகிறது. நைபோலி சாஸ்டோ பிரேஸ்மெர்னோ ப்ரெட்ஸ்டாவ்லென்னிம் டெர்மினோம் பியோலாஜிசெஸ்கோ ப்ரோஷெஸ்ஸா பைல் «GO: 0006952 பாதுகாப்பு பதில்» в 6 из 16 கொம்பினசிய் × линия) с высокой значимостью (значение பி <0,001) (ரிஸ். 2). மிகவும் அதிகமாகக் காணப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறைச் சொல் 'GO:0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினை' ஆகும், இது 16 சேர்க்கைகளில் (நேரம் × வரி) 6 இல் அதிக முக்கியத்துவத்துடன் (P மதிப்பு < 0.001) தோன்றியது (படம் 2).இந்தக் காரணி 83A: 476 மற்றும் போரிஜின் ஆகியவற்றில் இரண்டு நேரப் புள்ளிகளிலும் (6 மற்றும் 24 hpi) மற்றும் மாண்டெலப் மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 ஆகியவற்றில் ஒரு நேரப் புள்ளியிலும் (முறையே 12 மற்றும் 6 hpi) அதிகமாகக் காணப்பட்டது. இது எதிர்பார்க்கப்பட்ட ஒரு முடிவாகும், இது எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட ரகங்களின் பூஞ்சை எதிர்ப்புப் பதிலை எடுத்துக்காட்டுகிறது. கூடுதலாக, 83A:476 ஆனது, “GO:0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறை” என்ற காரணியால் குறிப்பிடப்படும் ஆக்ஸிஜனேற்ற வெடிப்புடன் தொடர்புடைய மரபணுக்களை விரைவாகத் தூண்டுவதன் மூலம் C. lupini-க்கு எதிர்வினையாற்றியது, இது ஒரு குறிப்பிட்ட பாதுகாப்புப் பதிலைக் குறிக்கிறது, அதேசமயம் போரிஜின், 'GO' என்ற காரணியுடன் தொடர்புடைய குறிப்பிட்ட பாதுகாப்புப் பதில்களை வெளிப்படுத்தியது. :0006950 அழுத்த எதிர்வினை”. பாப்புலேஷன் 22660, இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றப் பொருட்களை உள்ளடக்கிய கிடைமட்ட எதிர்ப்பு எதிர்வினையைச் செயல்படுத்தியது. இது “GO:0016104 டிரைடெர்பீன் உயிர் தொகுப்பு செயல்முறை” மற்றும் “GO:0006722 டிரைடெர்பீன் வளர்சிதை மாற்ற செயல்முறை” (இரண்டு சொற்களும் ஒரே மரபணுத் தொகுப்பைச் சேர்ந்தவை) ஆகிய சொற்களின் அதிகப்படியான எண்ணிக்கையை எடுத்துக்காட்டுகிறது. GO சொல் செறிவூட்டல் பகுப்பாய்வின் முடிவுகளைக் கருத்தில் கொண்டு, மாண்டலப் எதிர்வினை நிலைத்தன்மை போரெஜின் மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660-க்கு இடையில் இருந்தது. கூடுதலாக, ஆரம்ப எதிர்வினை 83A:476 (6 hpi) மற்றும் தாமதமான எதிர்வினை மாண்டலப் மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 ஆகியவை GO:0015979 'ஒளிச்சேர்க்கை' என்ற சொல்லையும் மற்றும் பிற தொடர்புடைய உயிரியல் செயல்முறைகளையும் உள்ளடக்கியுள்ளன.
1999-ல் போலந்தின் வியர்செனிஸ் நகரில் உள்ள லூபின் வயல்களிலிருந்து பெறப்பட்ட ஆந்த்ராக்ஸ் லூபின் (Col-08 வகை) மூலம் நோய்த்தொற்று ஏற்படுத்தப்பட்ட குறுகிய இலை லூபினின் (NLL) டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் எதிர்வினைகளின் போது, ​​வேறுபட்ட முறையில் வெளிப்படுத்தப்பட்ட மரபணுக்களின் குறிப்பீட்டில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட உயிரியல்செயல்முறை மரபணு வகைப்பாட்டுச் சொற்கள் பெரிதும் மிகைப்படுத்தப்பட்டுள்ளன. பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட NLL வகைகள்: 83A:476 (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான Lanr1 அல்லீலைக் கொண்டது), Boregine (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, அறியப்படாத மரபணுப் பின்னணி), Mandelup (மிதமான எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான AnMan அல்லீலைக் கொண்டது) மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 (பாதிக்கப்படக்கூடியது).
ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புக்குப் பங்களிக்கும் மரபணுக்களைக் கண்டறிவதே இந்த ஆய்வின் நோக்கமாக இருந்ததால், “GO: 0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினைகள்” மற்றும் “GO: 0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறைகள்” என்ற GO சொற்களுக்கு ஒதுக்கப்பட்ட மரபணுக்கள், log2 (மடங்கு மாற்றம்) இன் புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க மதிப்புகளை இணைத்து, அடிப்படை சராசரிகள் ≥ 30 மற்றும் குறைந்தபட்சம் ஒரு நேரப் புள்ளி என்ற வரம்புகளுடன் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. இந்த அளவுகோல்களைப் பூர்த்தி செய்யும் மரபணுக்களின் எண்ணிக்கை GO:0006952-க்கு 65 ஆகவும், GO:0055114-க்கு 524 ஆகவும் இருந்தது.
83A:476, GO:0006952 என்ற சொல்லால் குறிக்கப்பட்ட இரண்டு வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணு (DEG) உச்சங்களைக் காட்டியது; முதலாவது ஒரு அங்குலத்திற்கு 6 மரபணுக்கள் (64 மரபணுக்கள், மேல் மற்றும் கீழ் ஒழுங்குமுறை) என்ற அளவிலும், இரண்டாவது ஒரு அங்குலத்திற்கு 24 மரபணுக்கள் (15 மரபணுக்கள், மேல் ஒழுங்குமுறை மட்டும்) என்ற அளவிலும் இருந்தன. போரிஜின் ஆய்வும், GO:0006952 அதே நேரப் புள்ளியில் உச்சத்தை அடைந்ததைக் காட்டியது, ஆனால் குறைவான வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்களுடனும் (11 மற்றும் 8) மற்றும் முன்னுரிமைச் செயல்பாட்டுடனும் இருந்தது. மாண்டலூப் ஆய்வு, 12 மற்றும் 48 HPI-இல் GO:0006952-இன் இரண்டு உச்சங்களைக் காட்டியது; இரண்டுமே 12 மரபணுக்களைக் கொண்டிருந்தன (முதலாவது செயல்படுத்தும் மரபணுக்களையும், இரண்டாவது அடக்கும் மரபணுக்களை மட்டுமே கொண்டிருந்தது). அதேசமயம், 6 HPI-இல் இருந்த 22660 மரபணுத்தொகுப்பில் (13 மரபணுக்கள்) அதிகரிப்பு உச்சத்தின் ஆதிக்கம் அதிகமாக இருந்தது. இந்த உச்சங்களில் உள்ள GO:0006952 வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்களில் 96.4% ஒரே வகையான பதிலைக் (மேல் அல்லது கீழ்) கொண்டிருந்தன என்பது குறிப்பிடத்தக்கது. இது, சம்பந்தப்பட்ட மரபணுக்களின் எண்ணிக்கையில் வேறுபாடுகள் இருந்தபோதிலும், பாதுகாப்புப் பதில்களில் ஒரு குறிப்பிடத்தக்க ஒன்றுடன் ஒன்று சேர்தலைக் குறிக்கிறது. GO:0006952 என்ற சொல்லுடன் தொடர்புடைய வரிசைமுறைகளின் மிகப்பெரிய குழு, வகுப்பு 10 நோய்க்காரணி-தொடர்புடைய புரத (PR-10) புரதக் கிளை மற்றும் மையப் புரத லேடெக்ஸ் போன்ற (MLP-போன்ற) புரதத்தைச் சேர்ந்த பட்டினி அழுத்த-தொடர்புடைய செய்திப் புரதம் 22 (SAM22-போன்ற) புரதத்தை குறியீடாக்குகிறது (படம் 3). இந்த இரண்டு குழுக்களும் வெளிப்பாட்டின் தன்மை மற்றும் பதிலின் திசையில் வேறுபட்டன. SAM22-போன்ற புரதங்களை குறியீடாக்கும் மரபணுக்கள் ஆரம்ப நேரப் புள்ளிகளில் (6 அல்லது 12 hpi) சீரான மற்றும் குறிப்பிடத்தக்க தூண்டலைக் காட்டின, மேலும் பரிசோதனையின் முடிவில் (48 hpi) பொதுவாக பதிலளிக்கவில்லை, அதேசமயம் MLP-போன்ற புரதங்கள் 6 hpi-இல் ஒருங்கிணைப்பைக் காட்டின. 83A:476 மற்றும் மாண்டெலப் 48 hpi-இல், மற்ற எல்லா தரவுப் புள்ளிகளும் பதிலளிக்கவில்லை. மேலும், ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பில் காணப்பட்ட மாறுபாட்டைப் பின்பற்றியே SAM22-போன்ற புரத மரபணுக்களின் வெளிப்பாட்டுப் பண்புகளிலும் வேறுபாடுகள் காணப்பட்டன; ஏனெனில், எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய மரபணுக்களைக் காட்டிலும், அதிக எதிர்ப்புத்திறன் கொண்ட இரகங்களில் இந்த மரபணுக்களைக் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் தூண்டும் காலப் புள்ளிகள் அதிகமாக இருந்தன. மற்றொரு LlR18A/B-போன்ற PR-10 மரபணு, SAM22-போன்ற புரத மரபணுவைப் போலவே மிகவும் ஒத்த வெளிப்பாட்டுப் பாணியைக் காட்டியது.
"GO:0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினை" என்ற உயிரியல் செயல்முறைப் பெயரின் முக்கியக் கூறுகளும், Lanr1 மற்றும் AnMan அல்லீல்களின் சாத்தியமான மரபணுக்களின் வெளிப்பாட்டு முறைகளும் அடையாளம் காணப்பட்டன. Log2 அளவுகோலானது, ஒரே நேரப் புள்ளியில், நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட (Colletotrichum lupini, Col-08 வகை, போலந்தின் விஷேனிகாவில் உள்ள லூபின் வயல்களிலிருந்து 1999-இல் பெறப்பட்டது) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி-நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையேயான log2 மதிப்புகளை (மடங்கு மாற்றம்) குறிக்கிறது. பின்வரும் குறுகிய இலை லூபின் வகைகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: 83A:476 (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான Lanr1 அல்லீலைக் கொண்டது), Boregine (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, மரபணுப் பின்னணி அறியப்படாதது), Mandelup (மிதமான எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான AnMan அல்லீலைக் கொண்டது), மற்றும் Population 22660 (பாதிக்கப்படக்கூடியது).
கூடுதலாக, RNA-seq வேட்பாளர் மரபணுக்களான Lanr1 (TanjilG_05042) மற்றும் AnMan (TanjilG_12861) ஆகியவற்றின் வெளிப்பாட்டு விவரங்கள் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டன (படம் 3). TanjilG_05042 மரபணுவானது 83A:476-இல் முதல் நேரப் புள்ளியில் (6 hpi) மட்டுமே ஒரு குறிப்பிடத்தக்க பதிலைக் (செயல்படுத்தலைக்) காட்டியது, அதேசமயம் TanjilG_12861 ஆனது Mandeloop-இல் இரண்டு நேரப் புள்ளிகளில் மட்டுமே குறிப்பிடத்தக்கதாக இருந்தது: 6 hpi (கீழ் ஒழுங்குமுறை) மற்றும் 24 hpi (6 hpi).
GO:0055114 "ரெடாக்ஸ் செயல்முறை" என்ற சொல்லில் மிகவும் அதிகமாக வெளிப்படுத்தப்பட்ட மரபணுக்கள், சைட்டோக்ரோம் P450 புரதங்கள் மற்றும் பெராக்ஸைடேஸைக் குறியீடு செய்யும் மரபணுக்களாகும் (படம் 4). 6 HPI-இல் 83A:476-இலிருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்ட மாதிரிகளில், நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட மற்றும் கட்டுப்பாட்டுத் தாவரங்களுக்கு இடையில் அதிகபட்ச அல்லது குறைந்தபட்ச log2 (மடங்கு மாற்றம்) மதிப்புகள் (86.6% மரபணுக்களுக்கு) பொதுவாகக் காணப்பட்டன. இது, நோய்த்தொற்றுக்கு இந்த மரபணு வகையின் உயர்வான பிரதிபலிப்பை எடுத்துக்காட்டுகிறது. 83A:476, 6 hpi-இல் மிகவும் குறிப்பிடத்தக்க GO:0055114 DEG-ஐக் காட்டியது (503 மரபணுக்கள்), அதேசமயம் மீதமுள்ள வகைகள் 48 hpi-இல் (போரெஜின், 31 மரபணுக்கள்; மாண்டெலப், 85 மரபணுக்கள்; மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660, 78 மரபணுக்கள்) காணப்பட்டன. GO:0055114 குடும்பத்தின் பெரும்பாலான மரபணுக்களில், நோய்த்தொற்றுக்கு இரண்டு வகையான பிரதிபலிப்புகள் (செயல்படுத்துதல் மற்றும் தடுத்தல்) காணப்பட்டன. சுவாரஸ்யமாக, 48 hp-இல் மாண்டெலூப்பில் GO: 0055114 என்ற சொல்லுக்காக அடையாளம் காணப்பட்ட DEGs-இல் 97.6% வரை காணப்பட்டது. இந்த அவதானிப்புகள், குறிப்பிடத்தக்க அளவில் சிறியதாக இருந்தபோதிலும் (அதாவது, பிறழ்ந்த ரெடாக்ஸ் மரபணுக்களின் எண்ணிக்கை, 503-க்கு எதிராக 85), ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு மாண்டெலூப்பின் தாமதமான டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் பதில்களின் வடிவம், 83A:476-இன் ஆரம்பகால பதிலைப் போலவே உள்ளது என்பதைக் காட்டுகின்றன. போரேஜின் மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660-இல், இந்த ஒருமிப்பு முறையே 51.6% மற்றும் 75.6% என குறைவாக உள்ளது.
"GO:0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறை" என்ற உயிரியல் செயல்முறையின் முக்கிய கூறுகளின் வெளிப்பாட்டு முறைகள் வெளிப்படுத்தப்பட்டன. Log2 அளவுகோல், ஒரே நேரத்தில், நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட (Colletotrichum lupini, Col-08 வகை, போலந்தின் விஷேனிகாவில் உள்ள லூபின் வயல்களிலிருந்து 1999-இல் பெறப்பட்டது) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி-நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையிலான log2 மதிப்புகளை (மடங்கு மாற்றம்) குறிக்கிறது. பின்வரும் குறுகிய இலை லூபின் வகைகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: 83A:476 (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான Lanr1 அல்லீலைக் கொண்டது), Boregine (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, மரபணுப் பின்னணி அறியப்படாதது), Mandelup (மிதமான எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான AnMan அல்லீலைக் கொண்டது), மற்றும் Population 22660 (பாதிக்கப்படக்கூடியது).
83A:476 C. lupini (Col-08 திரிபு) மூலம் நோயூட்டம் செய்வதற்கான டிரான்ஸ்கிரிப்டோமிக் பதில்களில், GO:0015979 என்ற சொல்லுடன் தொடர்புடைய "ஒளிச்சேர்க்கை" மற்றும் பிற தொடர்புடைய உயிரியல் செயல்முறைகளுக்கான மரபணுக்களின் ஒருங்கிணைந்த அமைதியாக்கமும் அடங்கும் (படம் 5). இந்த GO:0015979 வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுத் தொகுப்பில் (DEG), 83A:476-இல் நோயூட்டம் செய்யப்பட்ட 6 மணி நேரத்தில் (6 hpi) குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அடக்கப்பட்ட 105 மரபணுக்கள் இருந்தன. இந்த துணைத்தொகுப்பில், மாண்டலப்பில் நோயூட்டம் செய்யப்பட்ட 48 மணி நேரத்தில் (48 HPI) 37 மரபணுக்களும், 22660 இனத்தொகையில் அதே நேரத்தில் 35 மரபணுக்களும் குறைக்கப்பட்டன; இதில் இரண்டு மரபணுவகைகளுக்கும் பொதுவான 19 வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்களும் அடங்கும். GO:0015979 என்ற சொல்லுடன் தொடர்புடைய எந்தவொரு வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்களும் (DEG) எந்தவொரு கலவையிலும் (வரிசை x நேரம்) குறிப்பிடத்தக்க அளவில் செயல்படுத்தப்படவில்லை.
"GO:0015979 ஒளிச்சேர்க்கை" என்ற உயிரியல் செயல்முறையின் முக்கிய கூறுகளின் வெளிப்பாட்டு முறைகள் வெளிப்படுத்தப்பட்டன. Log2 அளவுகோலானது, ஒரே நேரத்தில், நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட (Colletotrichum lupini, Col-08 வகை, போலந்தின் விஷேனிகாவில் உள்ள லூபின் வயல்களிலிருந்து 1999-இல் பெறப்பட்டது) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி-நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையிலான log2 மதிப்புகளை (மடங்கு மாற்றம்) குறிக்கிறது. பின்வரும் குறுகிய இலை லூபின் வகைகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: 83A:476 (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான Lanr1 அல்லீலைக் கொண்டது), Boregine (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, மரபணுப் பின்னணி அறியப்படாதது), Mandelup (மிதமான எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான AnMan அல்லீலைக் கொண்டது), மற்றும் Population 22660 (பாதிக்கப்படக்கூடியது).
வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டுப் பகுப்பாய்வின் முடிவுகளின் அடிப்படையிலும், நோய்க்காரணி பூஞ்சைகளுக்கு எதிரான பாதுகாப்பு எதிர்வினைகளில் ஈடுபடுவதாகக் கருதப்படுவதாலும், இந்த ஏழு மரபணுக்களின் தொகுப்பு, நிகழ்நேர PCR மூலம் வெளிப்பாட்டு விவரங்களை அளவிடுவதற்காகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டது (துணை அட்டவணை S9).
கட்டுப்பாட்டு (போலி) தாவரங்களுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​ஆய்வு செய்யப்பட்ட அனைத்து ரகங்களிலும் மற்றும் நேரப் புள்ளிகளிலும் அனுமானிக்கப்பட்ட புரத மரபணுவான TanjilG_10657 குறிப்பிடத்தக்க அளவில் தூண்டப்பட்டது (துணை அட்டவணைகள் S10, S11). கூடுதலாக, TanjilG_10657-இன் வெளிப்பாட்டுப் பண்பு, பரிசோதனையின் போது அனைத்து ரகங்களிலும் ஒரு அதிகரிக்கும் போக்கைக் காட்டியது. இனத்தொகை 22660, TanjilG_10657-க்கு நோய்த்தொற்றுக்கு மிக உயர்ந்த உணர்திறனைக் காட்டியது; இது 114 மடங்கு செயல்பாட்டையும், நோய்த்தொற்று ஏற்பட்ட 24 மணி நேரத்தில் (HPI) மிக உயர்ந்த சார்பு வெளிப்பாட்டு அளவையும் (4.4 ± 0.4) கொண்டிருந்தது (படம் 6a). PR10 LlR18A புரத மரபணுவான TanjilG_27015-ம் அனைத்து ரகங்களிலும் மற்றும் நேரப் புள்ளிகளிலும் செயல்பாட்டைக் காட்டியது, மேலும் பெரும்பாலான தரவுப் புள்ளிகளில் புள்ளிவிவர முக்கியத்துவத்தைக் கொண்டிருந்தது (படம் 6b). TanjilG_10657-ஐப் போலவே, TanjilG_27015-இன் மிக உயர்ந்த சார்பு வெளிப்பாட்டு நிலை, 24 HPI-இல் (19.5 ± 2.4) 22660 தடுப்பூசி இடப்பட்ட இனத்தொகையில் காணப்பட்டது. அமில எண்டோசிட்டினேஸ் மரபணுவான TanjilG_04706, Boregine-ஐத் தவிர மற்ற அனைத்து வரிசைகளிலும் மற்றும் அனைத்து நேரப் புள்ளிகளிலும் 6 hpi-இல் குறிப்பிடத்தக்க அளவு அதிகமாக வெளிப்படுத்தப்பட்டது (படம் 6c). இது முதல் நேரப் புள்ளியில் (6 HPI) 83A:476-இல் வலுவாகத் தூண்டப்பட்டது (10.5 மடங்கு) மற்றும் மற்ற வரிசைகளில் மிதமாக அதிகரித்தது (6.6-7.5 மடங்கு). சோதனையின் போது, ​​83A:476 மற்றும் போரிஜின் ஆகியவற்றில் TanjilG_04706-இன் வெளிப்பாடு ஒரே மாதிரியான அளவுகளில் இருந்தது, அதேசமயம் மாண்டெலப் மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 ஆகியவற்றில் அது கணிசமாக அதிகரித்து, ஒப்பீட்டளவில் உயர் மதிப்புகளை (முறையே 5.9 ± 1.5 மற்றும் 6.2 ± 1.5) எட்டியது. எண்டோகுளுக்கான்-1,3-β-குளுக்கோசிடேஸ் போன்ற மரபணுவான TanjilG_23384, பாப்புலேஷன் 22660-ஐத் தவிர மற்ற அனைத்து மரபு வழிகளிலும் முதல் இரண்டு நேரப் புள்ளிகளில் (6 மற்றும் 12 hpi) உயர் செயல்பாட்டைக் காட்டியது (படம் 6d). TanjilG_23384-இன் மிக உயர்ந்த ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு அளவுகள் மாண்டெலப் (2.7 ± 0.3) மற்றும் 83A:476 (1.5 ± 0.1) ஆகியவற்றில் இரண்டாவது நேரப் புள்ளியில் (12 hpi) காணப்பட்டன. 24 HPI-இல், ஆய்வு செய்யப்பட்ட அனைத்து மரபு வழிகளிலும் TanjilG_23384-இன் வெளிப்பாடு ஒப்பீட்டளவில் குறைவாக இருந்தது (0.04 ± 0.009 முதல் 0.44 ± 0.12 வரை).
அளவுசார் PCR மூலம் வெளிப்படுத்தப்பட்ட தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மரபணுக்களின் (ag) வெளிப்பாட்டு விவரங்கள். 6, 12 மற்றும் 24 ஆகிய எண்கள் தடுப்பூசிக்குப் பிறகான மணிநேரங்களைக் குறிக்கின்றன. LanDExH7 மற்றும் LanTUB6 மரபணுக்கள் இயல்பாக்கத்திற்கும், LanTUB6 மரபணு தொடர்களுக்கு இடையேயான அளவுத்திருத்தத்திற்கும் பயன்படுத்தப்பட்டன. பிழைப்பட்டைகள் மூன்று உயிரியல் பிரதிகளின் அடிப்படையிலான திட்ட விலகலைக் குறிக்கின்றன; இவற்றில் ஒவ்வொன்றும் மூன்று தொழில்நுட்பப் பிரதிகளின் சராசரியாகும். போலந்தின் வியர்செனிகாவில் உள்ள லூபின் வயலில் இருந்து 1999-ல் பெறப்பட்ட, நோயூட்டப்பட்ட (Colletotrichum lupini, Col-08 வகை) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி நோயூட்டப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையேயான வெளிப்பாட்டு நிலைகளில் உள்ள வேறுபாடுகளின் புள்ளிவிவர முக்கியத்துவம் தரவுப் புள்ளிகளுக்கு மேலே குறிக்கப்பட்டுள்ளது (*P மதிப்பு < 0.05, **P மதிப்பு ≤ 0.01, ***P மதிப்பு ≤ 0.001). போலந்தின் வியர்செனிகாவில் உள்ள லூபின் வயலில் இருந்து 1999-ல் பெறப்பட்ட, நோயூட்டப்பட்ட (Colletotrichum lupini, Col-08 வகை) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி நோயூட்டப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையேயான வெளிப்பாட்டு நிலைகளில் உள்ள வேறுபாடுகளின் புள்ளிவிவர முக்கியத்துவம் தரவுப் புள்ளிகளுக்கு மேலே குறிக்கப்பட்டுள்ளது (*P மதிப்பு < 0.05, **P மதிப்பு ≤ 0.01, ***P மதிப்பு ≤ 0.001). ஸ்டாட்டிஸ்கயா பிரசிமோஸ்ட் ரஸ்லிச்சி மற்றும் உரோவ்னியா எக்ஸ்பிரஸ்ஸி மெஷடு இனோகுலரிரோவன்னிமி (கோலெட்டோட்ரிகம் லூபினி, ஷோல்ப்819 г. с поля люпина в வெர்ஜெனிஸ், பொல்ஷா) மற்றும் கான்ட்ரோலிமி 0,05, **значение P ≤ 0,01, ***значение பி ≤ 0,001). நுண்ணுயிரேற்றம் செய்யப்பட்ட (போலந்தின் வியர்செனிஸ் நகரில் உள்ள ஒரு லூபின் வயலில் இருந்து 1999-ல் பெறப்பட்ட கோலெட்ரோட்ரிச்சம் லூபினி, கோல்-08 வகை) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி நுண்ணுயிரேற்றம் செய்யப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையேயான வெளிப்பாட்டு நிலைகளில் உள்ள புள்ளிவிவரப்படி குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் தரவுப் புள்ளிகளுக்கு மேலே குறிப்பிடப்பட்டுள்ளன (*P மதிப்பு < 0.05, **P-மதிப்பு ≤ 0.01, ***P-மதிப்பு ≤ 0.001).接种 (கொலெட்டோட்ரிகம் lupini, Col-08株, 1999年从波兰 Wierzenica的羽扇豆田获得）和对照（模拟接种）植物之间表达水平差异的统计学显着性标记在着性标记在湕渍0.05, **P 值≤ 0.01, ***P 值≤ 0.001).接种 （colletotrichum lupini , color-08 株 , 1999 மேலும் உரோவ்னியா எக்ஸ்பிரஸ்ஸி மெஷடு இனோகுலிரோவன்னிமி (கோலெட்டோட்ரிகம் லூபினி, ஷூட்டம், கோல்-08 பொலி லிபினா மற்றும் வர்ஜெனிசே, போல்ஷா, 1999 இல். ** P-значение ≤ 0,01, ***P-значение ≤ 0,001). நுண்ணுயிரேற்றம் செய்யப்பட்ட (1999-ஆம் ஆண்டில் போலந்தின் வெர்செனிஸ் நகரில் உள்ள லூபின் வயல்களிலிருந்து பெறப்பட்ட, Col-08 வகை) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி நுண்ணுயிரேற்றம் செய்யப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையேயான வெளிப்பாட்டு நிலைகளில் உள்ள புள்ளிவிவரப்படி குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் தரவுப் புள்ளிகளுக்கு மேலே குறிப்பிடப்பட்டுள்ளன (*P மதிப்பு < 0.05, **P-மதிப்பு ≤ 0.01, ***P-மதிப்பு ≤ 0.001).பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட NLL மரபணுத் தொடர்கள்: 83A:476 (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான Lanr1 அல்லீலைக் கொண்டது), Mandelup (மிதமான எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான AnMan அல்லீலைக் கொண்டது), Boregine (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, அறியப்படாத மரபணுப் பின்னணி) மற்றும் இனத்தொகை 22660 (பாதிக்கப்படக்கூடியது).
Lanr1 லோகஸில் உள்ள TanjilG_05042 என்ற வேட்பு மரபணு, RNA-seq ஆய்வுகளிலிருந்து பெறப்பட்ட விவரங்களிலிருந்து குறிப்பிடத்தக்க அளவு மாறுபட்ட வெளிப்பாட்டு வடிவத்தைக் காட்டியது (படம் 6e). இந்த மரபணுவின் கணிசமான செயல்பாடு மாண்டெலப் மற்றும் 22660 இனக்குழுவில் காணப்பட்டது (முறையே 39.7 மற்றும் 11.7 மடங்கு வரை), இதன் விளைவாக ஒப்பீட்டளவில் உயர் வெளிப்பாட்டு நிலைகள் (முறையே 1.4 ± 0.14 மற்றும் 7.2 ± 1.3 வரை) ஏற்பட்டன. 83A:476 இனக்குழுவும் TanjilG_05042 மரபணுவின் சில உயர் வெளிப்பாட்டை (3.8 மடங்கு வரை) வெளிப்படுத்தியது; இருப்பினும், அடையப்பட்ட ஒப்பீட்டு வெளிப்பாட்டு நிலைகள் (0.044 ± 0.002), மாண்டெலப் மற்றும் 22660 இனக்குழுவில் காணப்பட்டதை விட 30 மடங்குக்கும் அதிகமாகக் குறைவாக இருந்தன. qPCR மூலம் பகுப்பாய்வு செய்ததில், போலித் தடுப்பூசி போடப்பட்ட (கட்டுப்பாட்டு) வகைகளில் உள்ள மரபணு வகைகளுக்கு இடையே வெளிப்பாட்டு நிலைகளில் குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் காணப்பட்டன. இது 22660 மற்றும் 83A:476 இனக்கூட்டங்களுக்கு இடையேயும், அத்துடன் 22660 மற்றும் 22660 இனக்கூட்டங்களுக்கு இடையேயும் 58 மடங்கு வேறுபாட்டை எட்டியது. போரிஜின் மற்றும் மண்டலப் இடையே இரண்டு மடங்கு வேறுபாடு காணப்பட்டது.
AnMan லோகஸில் உள்ள வேட்பு மரபணுவான TanjilG_12861, 83A:476 மற்றும் மாண்டெலப் ஆகியவற்றில் தடுப்பூசிக்குப் பதிலளிக்கும் விதமாகச் செயல்படுத்தப்பட்டது, 22660 இனத்தொகையில் நடுநிலையாக இருந்தது, மற்றும் போரிஜின் இனத்தொகையில் அதன் வெளிப்பாடு குறைக்கப்பட்டது (படம் 6f). தடுப்பூசி போடப்பட்ட 83A:476-ல் TanjilG_12861 மரபணுவின் சார்பு வெளிப்பாடு மிக அதிகமாக இருந்தது (0.14±0.01). 17.4 kDa வகை I வெப்ப அதிர்ச்சிப் புரத மரபணுவான TanjilG_05080 HSP17.4, ஆய்வு செய்யப்பட்ட அனைத்து விகாரங்களிலும் மற்றும் நேரப் புள்ளிகளிலும் குறைந்த சார்பு வெளிப்பாட்டு அளவுகளைக் காட்டியது (படம் 6g). மிக உயர்ந்த மதிப்பு 22660 இனத்தொகையில் 24 HPI-ல் காணப்பட்டது (0.14 ± 0.02, இது தடுப்பூசிக்குப் பதிலளிக்கும் விதமாக எட்டு மடங்கு அதிகரிப்பு ஆகும்).
மரபணு வெளிப்பாட்டு விவரங்களின் ஒப்பீடு (படம் 7), TanjilG_10657 மற்றும் மற்ற நான்கு மரபணுக்களான TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.80), மற்றும் TanjilG_04706 (r = 0.79) ஆகியவற்றுக்கு இடையே ஒரு உயர் தொடர்பைக் காட்டியது. இத்தகைய முடிவுகள், பாதுகாப்பு எதிர்வினைகளின் போது இந்த மரபணுக்களின் இணை-ஒழுங்குமுறையைக் குறிக்கலாம். TanjilG_12861 மற்றும் TanjilG_23384 மரபணுக்கள், மற்ற மரபணுக்களுடன் ஒப்பிடும்போது குறைந்த பியர்சன் தொடர்பு குணக மதிப்புகளுடன் (முறையே 0.08 முதல் 0.43 வரையிலும் மற்றும் -0.19 முதல் 0.28 வரையிலும்) வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு விவரங்களைக் காட்டின.
அளவுசார் PCR-ஐப் பயன்படுத்தி மரபணு வெளிப்பாட்டு விவரங்களுக்கு இடையேயான தொடர்புகள் கண்டறியப்பட்டன. பின்வரும் குறுகிய இலை லுபைன் வகைகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: 83A:476 (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான Lanr1 அல்லீலைக் கொண்டது), Mandelup (மிதமான எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, ஒருபடித்தான AnMan அல்லீலைக் கொண்டது), Boregine (எதிர்ப்புத்திறன் கொண்டது, மரபணுப் பின்னணி அறியப்படாதது), மற்றும் Population 22660 (பாதிக்கப்படக்கூடியது). நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட (1999-ல் போலந்தின் வியர்செனிஸ் நகரில் உள்ள லுபைன் வயல்களிலிருந்து பெறப்பட்ட, Colletotrichum lupini, Col-08 வகை) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி-நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட) தாவரங்கள் உட்பட, மூன்று நேரப் புள்ளிகள் (நோய்த்தொற்று செலுத்திய 6, 12 மற்றும் 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு) கணக்கிடப்பட்டன. இந்த அளவுகோல் பியர்சன் தொடர்பு குணகத்தின் மதிப்பைக் காட்டுகிறது.
ஒரு அங்குலத்திற்கு 6 குதிரைத்திறன் என்ற அளவில் பெறப்பட்ட தரவுகளின் அடிப்படையில், ஆரம்பகால பாதுகாப்பு எதிர்வினைகளில் கவனம் செலுத்துவதற்காக, நோயூட்டப்பட்ட மற்றும் கட்டுப்பாட்டுத் தாவரங்களை ஒப்பிட்டு அடையாளம் காணப்பட்ட 9981 வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு மரபணுக்களில் (DEG) முழு மரபணு மரபணுப் பகுப்பாய்வு (WGCNA) மேற்கொள்ளப்பட்டது (துணை அட்டவணை S12). மரபணுவகைகளுக்கும் சோதனை வகைகளுக்கும் இடையில் தொடர்புடைய (நேர்மறை அல்லது எதிர்மறை) வெளிப்பாட்டு விவரங்களைக் கொண்ட இருபத்தி இரண்டு மரபணுத் தொகுதிகள் (கொத்துகள்) கண்டறியப்பட்டன. சராசரியாக, மரபணு வெளிப்பாட்டு நிலைகள் 83A:476 > மாண்டலப் > போரிஜின் > பாப்புலேஷன் 22660 என்ற வரிசையில் இறங்கின (இருப்பினும், இரண்டு வகைகளிலும், கட்டுப்பாட்டுத் தாவரங்களில் இந்தப் போக்கு வலுவாக இருந்தது). சராசரியாக, மரபணு வெளிப்பாட்டு நிலைகள் 83A:476 > மாண்டலப் > போரிஜின் > பாப்புலேஷன் 22660 என்ற வரிசையில் இறங்கின (இருப்பினும், இரண்டு வகைகளிலும், கட்டுப்பாட்டுத் தாவரங்களில் இந்தப் போக்கு வலுவாக இருந்தது). போர்யாட்கே 83A:476 > மாண்டலப் > போரேஜின் > மக்கள் தொகை 22660 டெண்டன்ஷியா была сильneе у கான்ட்ரோல்னிக் ராஸ்டெனி). சராசரியாக, மரபணு வெளிப்பாட்டு நிலைகள் 83A:476 > மாண்டலப் > போரிஜின் > பாப்புலேஷன் 22660 என்ற வரிசையில் குறைந்தன (இருப்பினும், இரண்டு வகைகளிலும், கட்டுப்பாட்டுத் தாவரங்களில் இந்தப் போக்கு வலுவாக இருந்தது).平均而言，基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > மக்கள் தொகை 22660的顺序下陌平均 而 言 , 基因 水平 按 按 83a: 476> mandelup> boregin> மக்கள் தொகை 22660 的 顺序 下降在 植物 நீங்கள் 更.... ராடு 83A:476 > மாண்டலப் > போரேஜின் > மக்கள் தொகை 22660 была сильneе у kontrolnыh растений). சராசரியாக, 83A:476 > மாண்டலப் > போரிஜின் > பாப்புலேஷன் 22660 என்ற வரிசையில் மரபணு வெளிப்பாட்டு அளவுகள் குறைந்தன (இருப்பினும், இரண்டு வகைகளிலும், கட்டுப்பாட்டுத் தாவரங்களில் இந்தப் போக்கு வலுவாக இருந்தது).தடுப்பூசியானது மரபணு வெளிப்பாட்டின் அதிகரிப்புக்கு வழிவகுத்தது, குறிப்பாக தொகுதிகள் 18, 19, 14, 6 மற்றும் 1 (விளைவின் இறங்கு வரிசையில்), எதிர்மறை ஒழுங்குமுறை (எ.கா. தொகுதிகள் 9 மற்றும் 20) அல்லது நடுநிலை விளைவுகளுடன் (எ.கா. தொகுதிகள் 11, 22, 8 மற்றும் 13). GO சொல் செறிவூட்டல் பகுப்பாய்வு (துணை அட்டவணை S13), qPCR மூலம் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட மரபணுக்கள் (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 மற்றும் TanjilG_27015) மற்றும் மிகவும் அடக்கப்பட்ட பல ஒளிச்சேர்க்கை தொகுதிகள் (9) உட்பட, அதிகபட்ச செயல்பாட்டைக் கொண்ட தடுப்பூசி போடப்பட்ட தொகுதிக்கு (18) "GO: 0006952 பாதுகாப்பு பதில்கள்" என்பதைக் காட்டியது. தொகுதி 18 செறிவூட்டி (படம் 8), PR-10-போன்ற LlR18B புரதத்தைக் குறியீடு செய்யும் TanjilG_26536 மரபணுவாகவும், தொகுதி 9 செறிவூட்டி, ஒளித்தொகுப்பு II PsbQ புரதத்தைக் குறியீடு செய்யும் TanjilG_28955 மரபணுவாகவும் அடையாளம் காணப்பட்டன. ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணுவான Lanr1, TanjilG_05042, தொகுதி 22-இல் (படம் 9) கண்டறியப்பட்டது. இது TanjilG_01212 மையத்தைக் கொண்டு, “GO:0044260 செல்லுலார் பெருமூலக்கூறு வளர்சிதை மாற்ற செயல்முறைகள்” மற்றும் “GO:0006355 படியெடுத்தல் ஒழுங்குமுறை, டிஎன்ஏ வார்ப்புருவாக்கம்” ஆகிய சொற்களுடன் தொடர்புடையதாக உள்ளது. இந்த மரபணு, வெப்ப அழுத்த படியெடுத்தல் காரணி A-4a (HSFA4a)-ஐக் குறியீடு செய்கிறது.
“GO: 0006952 பாதுகாப்பு எதிர்வினைகள்” எனும், அதிகமாகக் காணப்படும் உயிரியல் செயல்முறைச் சொற்களைக் கொண்ட தொகுதிகளின் மரபணு இணை வெளிப்பாட்டின் எடையிடப்பட்ட வலையமைப்புப் பகுப்பாய்வு. qPCR மூலம் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட நான்கு மரபணுக்களை (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 மற்றும் TanjilG_27015) முன்னிலைப்படுத்த, மரபணுப் பிணைப்பு எளிமையாக்கப்பட்டது.
அதிகமாகக் காணப்படும் உயிரியல் செயல்முறைச் சொல்லான “GO: 0006355: படியெடுத்தல் ஒழுங்குமுறை, டிஎன்ஏ வார்ப்புருவாக்கம்” மற்றும் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணுவான Lanr1 TanjilG_05042-ஐக் கொண்டுள்ள ஒரு தொகுதியின் மரபணு இணை வெளிப்பாட்டின் எடையிடப்பட்ட வலையமைப்புப் பகுப்பாய்வு. TanjilG_05042 மரபணுவையும் மைய TanjilG_01212 மரபணுவையும் தனிமைப்படுத்துவதற்காகப் பிணைப்பு எளிமையாக்கப்பட்டது.
ஆஸ்திரேலியாவில் சேகரிக்கப்பட்ட ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத் திறன் பரிசோதனையில், ஆரம்பத்தில் வெளியிடப்பட்ட பெரும்பாலான சாகுபடி இரகங்கள் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடியவை என்பது தெரியவந்தது; கல்யா, கோரமப் மற்றும் மாண்டெலப் ஆகியவை மிதமான எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டவையாகவும், வோங்கா, டான்ஜில் மற்றும் 83A:476 ஆகியவை அதிக எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டவையாகவும் விவரிக்கப்பட்டுள்ளன26,27,31. ஒரே எதிர்ப்பு அல்லீலைக் கொண்டிருந்தது, அது Lanr1 எனப் பெயரிடப்பட்டது, மற்றும் கோரமப் மற்றும் மாண்டெலப் ஆகியவை வேறுபட்ட அல்லீலைக் கொண்டிருந்தன, அது AnMan10, 26, 39 எனப் பெயரிடப்பட்டது, அதே நேரத்தில் கல்யா வேறுபட்ட அல்லீலான Lanr2-ஐக் கடத்தியது. ஜெர்மனியில் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத் திறனுக்கான பரிசோதனையின் விளைவாக, Lanr1-ஐத் தவிர வேறு ஒரு சாத்தியமான அல்லீலைக் கொண்ட Bo7212 என்ற எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட ரகம் அடையாளம் காணப்பட்டது, அது LanrBo36 எனப் பெயரிடப்பட்டது.
எங்கள் ஆய்வில், சோதிக்கப்பட்ட மரபணுத் தொகுப்பில் Lanr1 அல்லீலின் அதிர்வெண் மிகக் குறைவாக (சுமார் 6%) இருப்பது தெரியவந்தது. இந்த அவதானிப்பு, Anseq3 மற்றும் Anseq4 குறிப்பான்களைப் பயன்படுத்தி கிழக்கு ஐரோப்பிய மரபணுத் தொகுப்பை ஆய்வு செய்ததன் முடிவுகளுடன் ஒத்துப்போகிறது. அந்த ஆய்வில், Lanr1 அல்லீல் இரண்டு பெலாரசிய மரபு வழிகளில் மட்டுமே இருப்பது தெரியவந்தது. ஆஸ்திரேலியாவில் குறிப்பான்-உதவி இனப்பெருக்கத்திற்கான முக்கிய அல்லீல்களில் ஒன்றாக இது இருப்பது போலல்லாமல், Lanr1 அல்லீல் உள்ளூர் இனப்பெருக்கத் திட்டங்களால் இன்னும் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படவில்லை என்பதை இது உணர்த்துகிறது. ஆஸ்திரேலிய அறிக்கையுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​ஐரோப்பிய களச் சூழல்களில் Lanr1 அல்லீல் வழங்கும் எதிர்ப்புத்திறன் குறைவாக இருப்பதே இதற்குக் காரணமாக இருக்கலாம். மேலும், ஆஸ்திரேலியாவில் அதிக மழைப்பொழிவு உள்ள பகுதிகளில் ஆந்த்ராக்னோஸ் குறித்த ஆய்வுகள், நோய்க்கிருமியின் வளர்ச்சிக்கும் விரைவான பெருக்கத்திற்கும் சாதகமான வானிலை நிலைகளில் Lanr1 அல்லீலால் ஏற்படும் எதிர்ப்புத்திறன் பதில்கள் திறம்பட செயல்படாமல் போகலாம் என்பதைக் காட்டியுள்ளன¹⁹,⁴². உண்மையில், தற்போதைய ஆய்வில், Lanr1 அல்லீலைக் கொண்ட மரபணு வகைகளிலும் ஆந்த்ராக்னோஸின் சில அறிகுறிகள் காணப்பட்டன. இது, C. lupini-யின் வளர்ச்சிக்கு உகந்த சூழ்நிலைகளில் எதிர்ப்புத்திறன் மறைந்துவிடக்கூடும் என்பதை உணர்த்துகிறது. கூடுதலாக, Lanr1 லோகஸிலிருந்து தோராயமாக 1 cM தொலைவில் உள்ள Anseq3 மற்றும் Anseq4 குறிப்பான்கள் இருப்பதற்கான தவறான நேர்மறை விளக்கங்களும் சாத்தியமாகும் 28,30,43.
எங்கள் ஆய்வில், Lanr1 அல்லீலைக் கொண்ட 83A:476, C. lupini நோய்த்தொற்றுக்கு முதல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட நேரத்தில் (6 hpi) பெரிய அளவிலான டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் மறுநிரலாக்கத்துடன் பதிலளித்தது; அதேசமயம், AnMan அல்லீலைக் கொண்ட Mandelup-ல், டிரான்ஸ்கிரிப்டோமிக் பதில்கள் மிகவும் தாமதமாக (24 முதல் 48 hpi வரை) காணப்பட்டன. பாதுகாப்புப் பதில்களில் உள்ள இந்த தற்காலிக மாறுபாடுகள், நோய் அறிகுறிகளில் உள்ள வேறுபாடுகளுடன் தொடர்புடையவை. இது, எதிர்ப்புக்கு வெற்றிகரமாகப் பதிலளிப்பதற்கு நோய்க்கிருமியை முன்கூட்டியே கண்டறிவதன் முக்கியத்துவத்தை எடுத்துக்காட்டுகிறது. தாவரத் திசுக்களைத் தொற்ற, ஆந்த்ராக்ஸ் வித்துக்கள் ஓம்புயிரின் மேற்பரப்பில் முளைத்தல், செல் பிரிவு மற்றும் அப்ரெசோரியம் உருவாக்கம் உள்ளிட்ட பல வளர்ச்சி நிலைகளைக் கடக்க வேண்டும். அப்பெண்டேஜ் என்பது ஓம்புயிரின் மேற்பரப்பில் ஒட்டிக்கொண்டு, அதன் திசுக்களுக்குள் ஊடுருவ உதவும் ஒரு தொற்று அமைப்பாகும். இவ்வாறு, பட்டாணிச் சாற்றில் உள்ள C. gloeosporioides வித்துக்கள், 75-90 நிமிட அடைகாத்தலுக்குப் பிறகு உட்கருவின் முதல் பிரிவையும், 90-120 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு முளைக்குழாய் உருவாவதையும், 4 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு ஒடுக்கத்தையும் காட்டின 45. மாம்பழ C. gloeosporioides, 3 மணி நேர அடைகாத்தலுக்குப் பிறகு 40%-க்கும் அதிகமான வித்து முளைப்பையும், 4 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு சுமார் 20% ஒட்டுவித்திகள் உருவாவதையும் காட்டியது. C. gloeosporioides-இன் வீரியத்துடன் தொடர்புடைய CAP20 மரபணு, அவகாடோ மேற்பரப்பு மெழுகில் 3.5 மணி நேர அடைகாத்தலுக்குப் பிறகு ஒட்டுண்ணி-உருவாக்கும் வித்துகளில் படியெடுத்தல் செயல்பாட்டைக் காட்டியது, மேலும் 4 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு CAP20 புரதத்தின் செறிவு அதிகமாக இருந்தது 46. இதேபோல், C. trifolii-இல் மெலனின் உயிர் தொகுப்பு மரபணுக்களின் செயல்பாடு 2 மணி நேர அடைகாத்தலின் போது தூண்டப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து 1 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு ஒட்டுவித்திகள் உருவானது. இலைத் திசுக்களின் ஆய்வுகள், C. acutatum-ஆல் நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட ஸ்ட்ராபெர்ரிகளில் 8 hpi-இல் முதல் ஒடுக்கம் ஏற்படுவதையும், அதே சமயம் C. coccodes-ஆல் நோய்த்தொற்று செய்யப்பட்ட தக்காளிகளில் 4 hpi-இல் முதல் ஒடுக்கம் ஏற்படுவதையும் காட்டியுள்ளன⁴⁸,⁴⁹. இது பெரும்பாலும் Colletotrichum spp. தொற்று செயல்முறையின் கால அளவோடு ஒத்துப்போகிறது. 83A:476-க்கு எதிரான விரைவான பாதுகாப்பு எதிர்வினைகள், இந்த வரிசையில் தாவர எதிர்ப்பு மற்றும் எஃபெக்டர்-தூண்டப்பட்ட நோயெதிர்ப்பு (ETI) மரபணுக்களின் ஈடுபாட்டைக் குறிக்கின்றன, அதே சமயம் மாண்டெலப்பின் தாமதமான எதிர்வினைகள் மைக்ரோ-அசோசியேட்டட் மாலிகுலர் பேட்டர்ன்-டிரிகர்டு இம்யூனிட்டி (MTI) கருதுகோளை ஆதரிக்கின்றன⁵⁰. 83A:476 மற்றும் மாண்டெலப்பிற்கு எதிரான ஆரம்பகால எதிர்வினைகள். தாமதமான எதிர்வினையில் மேல்நோக்கி அல்லது கீழ்நோக்கி ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட மரபணுக்களுக்கு இடையிலான பகுதி ஒன்றுடன் ஒன்று சேர்தலும் இந்தக் கருத்தை ஆதரிக்கிறது, ஏனெனில் ETI என்பது பெரும்பாலும் ஒரு துரிதப்படுத்தப்பட்ட மற்றும் மேம்படுத்தப்பட்ட MTI எதிர்வினையாகக் கருதப்படுகிறது, இது நோய்த்தொற்று ஏற்பட்ட இடத்தில் திட்டமிடப்பட்ட செல் இறப்பில் முடிவடைகிறது, இது அனாஃபிலாக்டிக் அதிர்ச்சி என அழைக்கப்படுகிறது⁵¹,⁵².
அதிகமாகப் பிரதிநிதித்துவப்படுத்தப்பட்ட மரபணு வகைப்பாட்டியல் GO:0006952 “பாதுகாப்புப் பதில்வினை” என்ற சொல்லுக்குக் காரணமாகக் கூறப்படும் பெரும்பாலான மரபணுக்கள், மன அழுத்தத்தால் தூண்டப்பட்ட உண்ணாவிரதச் செய்தி 22 புரதத்தின் (SAM22-ஐ ஒத்த) 11 ஒத்த மரபணுக்களும் மற்றும் ஏழு முக்கிய லேடெக்ஸ் புரதம் போன்ற மரபணுக்களும் (MLP-கள்) ஆகும். லேடெக்ஸ் புரதம் போன்ற புரதங்கள் 31, 34, 43 மற்றும் 423 ஆகியவை வரிசை ஒற்றுமையைக் காட்டின. SAM22-போன்ற மரபணுக்கள் நீண்ட காலம் நீடித்த குறிப்பிடத்தக்க செயல்பாட்டைக் காட்டி, ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பின் அதிகரித்த அளவுகளை வெளிப்படுத்தின (83A:476 மற்றும் போரிஜின்). இருப்பினும், MLP-போன்ற மரபணுக்கள், வேட்பாளர் எதிர்ப்பு அல்லீலைக் கொண்ட மரபு வழிகளில் மட்டுமே குறைக்கப்பட்டன (6 hpi-இல் 83A:476/Lanr1 மற்றும் 24 hpi-இல் Mandelup/AnMan). அடையாளம் காணப்பட்ட அனைத்து SAM22-போன்ற ஒத்த மரபணுக்களும் சுமார் 105 kb பரவியுள்ள ஒரு மரபணுக் கொத்திலிருந்து உருவாகின்றன, அதேசமயம் MLP-போன்ற மரபணுக்கள் மரபணுத்தொகுதியின் தனித்தனிப் பகுதிகளிலிருந்து உருவாகின்றன என்பது குறிப்பிடத்தக்கது. டையாபோர்தெடாக்சிகா தடுப்பூசிக்கு எதிரான NLL எதிர்ப்புத்திறன் குறித்த எங்களின் முந்தைய ஆய்விலும், இதுபோன்ற SAM22-போன்ற மரபணுக்களின் ஒருங்கிணைந்த செயல்பாடு கண்டறியப்பட்டது. இது, அவை பாதுகாப்பு எதிர்வினையின் கிடைமட்டக் கூறுகளில் ஈடுபட்டுள்ளன என்பதைச் சுட்டிக்காட்டுகிறது. மேலும், காயம் அல்லது சாலிசிலிக் அமிலம், பூஞ்சைத் தூண்டிகள், அல்லது ஹைட்ரஜன் பெராக்சைடு ஆகியவற்றைக் கொண்டு செய்யப்படும் சிகிச்சைக்கு SAM22-போன்ற மரபணுக்கள் சாதகமாகப் பதிலளிப்பதாக வரும் அறிக்கைகளாலும் இந்த முடிவு ஆதரிக்கப்படுகிறது.
பல தாவர இனங்களில் பாக்டீரியா, வைரஸ் மற்றும் நோய்க்கிருமி பூஞ்சை தொற்றுகள் உட்பட பல்வேறு உயிரற்ற மற்றும் உயிருள்ள அழுத்தங்களுக்கு MLP-போன்ற மரபணுக்கள் பதிலளிப்பதாகக் காட்டப்பட்டுள்ளது55. தாவரங்களுக்கும் நோய்க்கிருமிகளுக்கும் இடையிலான சில தொடர்புகளுக்கான பதிலளிப்பு திசைகள், வலுவாக அதிகரிப்பதில் (அதாவது, வெர்டிசிலியம் டாலியே மூலம் பருத்தி தாக்கப்படும் போது) இருந்து கணிசமாகக் குறைவது வரை (அதாவது, ஆல்டர்னேரியா இனங்கள் மூலம் ஆப்பிள் மரம் பாதிக்கப்பட்ட பிறகு) வேறுபட்டன56,57. அவகேடோவின் F. நைஜர் தொற்றுக்கு எதிரான பாதுகாப்பின் போதும், ஆப்பிள் மரத்தில் தொற்று ஏற்படும் போதும் MLP-போன்ற 423 மரபணுவின் குறிப்பிடத்தக்க குறைவு காணப்பட்டது. போட்ரியோஸ்பேரியா பெரெஞ்சேரியானா f. cn. பிரிகோலா மற்றும் ஆல்டர்னேரியா ஆல்டர்னாட்டா ஆகியவை ஆப்பிள் நோய்க்கிருமி வகைகள் ஆகும்58,59. கூடுதலாக, MLP-போன்ற 423 மரபணுவை அதிகமாக வெளிப்படுத்தும் ஆப்பிள் திசுக்களில், எதிர்ப்புத்திறன் தொடர்பான மரபணுக்களின் வெளிப்பாடு குறைவாக இருந்தது மற்றும் அவை பூஞ்சை தொற்றுக்கு அதிக பாதிப்புக்குள்ளாகின59. ஃபுசாரியம் ஆக்சிஸ்போரம் f-ஐத் தொடர்ந்து, எதிர்ப்புத்திறன் கொண்ட பொதுவான அவரைச் செடியின் மரபணுத்தொகுதியிலும் MLP-போன்ற 423 மரபணு ஒடுக்கப்பட்டது. சிஎன். பீன் தொற்று 60.
எங்கள் RNA-seq ஆய்வில் அடையாளம் காணப்பட்ட PR-10 குடும்பத்தின் மற்ற உறுப்பினர்களாக, மேம்படுத்தப்பட்ட வெளிப்பாட்டிற்கு பதிலளிக்கும் விதமாக LlR18A மற்றும் LlR18B மரபணுக்களும், அத்துடன் கொழுப்புப் பரிமாற்றப் புரதமான DIR1-க்கான மேம்படுத்தப்பட்ட (1 மரபணு) அல்லது குறைக்கப்பட்ட (3 மரபணுக்கள்) மரபணுவும் இருந்தன. கூடுதலாக, WGCNA இந்தத் தொகுதியில் LlR18B மரபணுவை ஒரு மையமாக முன்னிலைப்படுத்துகிறது, இது தடுப்பூசிக்கு மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடியது மற்றும் பல பாதுகாப்பு மறுமொழி மரபணுக்களைக் கொண்டுள்ளது. நோய்க்கிருமி பாக்டீரியாக்களுக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக மஞ்சள் லுபைன் இலைகளிலும், D. toxica நோய்த்தொற்றுக்குப் பிறகு NLL தண்டுகளிலும் LlR18A மற்றும் LlR18B மரபணுக்கள் தூண்டப்பட்டன, அதேசமயம் இந்த மரபணுக்களின் அரிசி ஒத்த மரபணுவான RSOsPR10, ஜாஸ்மோனிக் அமில சமிக்ஞை பாதையில் ஈடுபடுவதாகக் கருதப்படும் ஒரு பூஞ்சைத் தொற்றால் விரைவாகத் தூண்டப்பட்டது53,61, 62. DIR1 மரபணு, அமைப்புசார் பெறப்பட்ட எதிர்ப்பின் (SAR) தொடக்கத்திற்குத் தேவையான, குறிப்பிட்ட தன்மையற்ற கொழுப்புப் பரிமாற்றப் புரதங்களைக் குறியீடாக்குகிறது. பாதுகாப்பு எதிர்வினைகள் உருவாகும்போது, ​​DIR1 புரதமானது நோய்த்தொற்று மையத்திலிருந்து ஃபுளோயம் வழியாகக் கொண்டு செல்லப்பட்டு, தொலைதூர உறுப்புகளில் SAR-ஐத் தூண்டுகிறது. சுவாரஸ்யமாக, TanjilG_02313 DIR1 மரபணுவானது 84A:476 மற்றும் பாப்புலேஷன் 22660 ஆகிய மரபணுத் தொடர்களில் முதல் நேரப் புள்ளியிலேயே குறிப்பிடத்தக்க அளவில் தூண்டப்பட்டது, ஆனால் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத்திறன் 84A:476 மரபணுத் தொடரில் மட்டுமே வெற்றிகரமாக உருவானது. இது NLL-ல் DIR1 மரபணுவின் சில துணைச் செயல்பாடுகளைக் குறிக்கலாம், ஏனெனில் மீதமுள்ள மூன்று ஹோமோலாக்குகள் நோய்த்தொற்று ஏற்பட்ட 6 மணி நேரத்தில் 83A:476 மரபணுத் தொடரில் மட்டுமே நோய்த்தொற்றுக்கு எதிர்வினையாற்றின, மேலும் இந்த எதிர்வினை கீழ்நோக்கி இயக்கப்பட்டது.
எங்கள் ஆய்வில், “GO:0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறை” எனப்படும் உயிரியல் செயல்முறையுடன் தொடர்புடைய மிகவும் பொதுவான கூறுகள் சைட்டோக்ரோம் P450 புரதம், பெராக்ஸிடேஸ், லினோலிக் அமிலம் 9S-/13S-லிப்பாக்ஸிஜனேஸ் மற்றும் 1-அமினோசைக்ளோபுரோபேன்-1-கார்பாக்சிலிக் அமில ஆக்சிடேஸ் ஆகியவை ஆகும். கூடுதலாக, எங்கள் WGCNA, HSFA4a ஹோமோலாக்கை, Lanr1 எதிர்ப்பு மரபணு வேட்பாளரான TanjilG_05042 போன்ற தொகுதிகளைக் கொண்ட ஒரு மையமாக வரையறுக்கிறது. HSFA4a என்பது தாவரங்களில் அணுக்கரு படியெடுத்தலின் ரெடாக்ஸ்-சார்ந்த ஒழுங்குமுறையின் ஒரு கூறு ஆகும்.
சைட்டோக்ரோம் P450 புரதங்கள் ஆக்ஸிடோரிடக்டேஸ்கள் ஆகும், அவை முதன்மை மற்றும் இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றத்தில் NADPH மற்றும்/அல்லது O2-சார்ந்த ஹைட்ராக்சிலேஷன் எதிர்வினைகளை வினையூக்குகின்றன. இதில் அயல் வேதிப்பொருட்களின் வளர்சிதை மாற்றம், ஹார்மோன்கள், கொழுப்பு அமிலங்கள், ஸ்டெரால்கள், செல் சுவர் கூறுகள், உயிர் பாலிமர்கள் மற்றும் பாதுகாப்பு சேர்மங்களின் உயிர் தொகுப்பு ஆகியவை அடங்கும் 69. எங்கள் ஆய்வில், அதிக எண்ணிக்கையிலான மாற்றப்பட்ட ஹோமோலாக்ஸ் (37) மற்றும் குறிப்பிட்ட மரபணுக்களுக்கு இடையிலான பதில் வடிவங்களில் உள்ள வேறுபாடுகள் காரணமாக, தாவர சைட்டோக்ரோம் P450 செயல்பாட்டில் உள்ள மாறுபாடு -10.6 log2 (மடங்கு மாற்றம்) இலிருந்து 5.7 ஆகக் குறைக்கப்பட்டது, இது ஒரு மேல்நோக்கிய திருத்தத்தைப் பிரதிபலிக்கிறது. இவ்வளவு பெரிய புரத சூப்பர்ஃபேமிலியில் உள்ள NLL மரபணுக்களின் சாத்தியமான உயிரியல் செயல்பாட்டை விளக்குவதற்கு RNA-seq தரவை மட்டும் பயன்படுத்துவது மிகவும் ஊகமானதாக இருக்கும். இருப்பினும், சில சைட்டோக்ரோம் P450 மரபணுக்கள் நோய்க்கிருமி பூஞ்சைகள் அல்லது பாக்டீரியாக்களுக்கு எதிரான அதிகரித்த எதிர்ப்புடன் தொடர்புடையவை என்பது குறிப்பிடத்தக்கது, இதில் ஒவ்வாமை எதிர்வினைகளுக்கு பங்களிப்பும் அடங்கும்69,70,71.
வகுப்பு III பெராக்ஸிடேஸ்கள் என்பவை தாவர வளர்ச்சி மற்றும் மேம்பாட்டின் போது பரந்த அளவிலான வளர்சிதை மாற்ற செயல்முறைகளிலும், அத்துடன் உப்புத்தன்மை, வறட்சி, அதிக ஒளிச்செறிவு மற்றும் நோய்க்கிருமித் தாக்குதல் போன்ற சுற்றுச்சூழல் அழுத்தங்களுக்கு பதிலளிப்பதிலும் ஈடுபடும் பல்பணி தாவர நொதிகள் ஆகும்72. ஸ்டைலோசாந்தஸ் ஹுமிலிஸ் மற்றும் சி. குளோயோஸ்போரியாய்டஸ், லென்ஸ் குலினாரிஸ் மற்றும் சி. ட்ரங்கேட்டம், ஃபேசியோலஸ் வல்காரிஸ் மற்றும் சி. லிண்டெமுத்தியானம், குக்குமிஸ் சாடிவஸ் மற்றும் சி. லேஜெனாரியம் உள்ளிட்ட பல தாவர இனங்கள் ஆந்த்ராசிஸுடன் தொடர்பு கொள்வதில் பெராக்ஸிடேஸ்கள் ஈடுபட்டுள்ளன73,74,75,76. பூஞ்சை தாவர திசுக்களுக்குள் ஊடுருவுவதற்கு முன்பே, சில சமயங்களில் 4 HPI-இல் கூட, இந்த எதிர்வினை மிகவும் விரைவாக நிகழ்கிறது73. பெராக்ஸிடேஸ் மரபணு D. டாக்சிகா NLL தடுப்பூசிக்கும் பதிலளித்தது. ஆக்ஸிஜனேற்ற வெடிப்பை ஒழுங்குபடுத்துதல் அல்லது ஆக்ஸிஜனேற்ற அழுத்தத்தை நீக்குதல் போன்ற அவற்றின் வழக்கமான செயல்பாடுகளுக்கு மேலதிகமாக, பெராக்ஸிடேஸ்கள் லிக்னிஃபிகேஷன், துணை அலகு அல்லது குறிப்பிட்ட சேர்மங்களின் குறுக்கு-இணைப்பின் போது செல் சுவர் வலுவூட்டலின் அடிப்படையில் இயற்பியல் தடைகளை உருவாக்குவதன் மூலம் நோய்க்கிருமி வளர்ச்சியில் தலையிட முடியும். இந்தச் செயல்பாட்டை, கணினிவழி ஆய்வின் மூலம், லிக்னினை உருவாக்கும் ஒரு சாத்தியமான எதிர்மின் அயனி பெராக்ஸிடேஸைக் குறியீடு செய்யும் TanjilG_03329 மரபணுவுடன் தொடர்புபடுத்தலாம். இந்த மரபணு, எங்கள் ஆய்வில் 6 HPI-இல் 83A:476 எதிர்ப்புத் திறனுள்ள வரிசையில் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகமாக வெளிப்படுத்தப்பட்டது; ஆனால், எதிர்வினையாற்றாத மற்ற திரிபுகள் மற்றும் காலப் புள்ளிகளில் அவ்வாறு வெளிப்படுத்தப்படவில்லை.
லினோலிக் அமிலத்தின் 9S-/13S-லிபாக்சிஜனேஸ் என்பது லிப்பிட் உயிர் தொகுப்பின் ஆக்சிஜனேற்றப் பாதையில் முதல் படியாகும்78. இந்தப் பாதையின் விளைபொருட்கள் தாவரப் பாதுகாப்பில் பல செயல்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளன; அவற்றுள், காலோஸ் மற்றும் பெக்டின் படிவுகளை உருவாக்குவதன் மூலம் செல் சுவரை வலுப்படுத்துதல், மற்றும் வினைத்திறன் மிக்க ஆக்சிஜன் இனங்களை உற்பத்தி செய்வதன் மூலம் ஆக்சிஜனேற்ற அழுத்தத்தைக் கட்டுப்படுத்துதல் ஆகியவை அடங்கும்79,80,81,82,83. தற்போதைய ஆய்வில், லினோலிக் அமில 9S-/13S-லிபாக்சிஜனேஸின் வெளிப்பாடு அனைத்து விகாரங்களிலும் மாற்றமடைந்திருந்தது, ஆனால் பாதிப்புக்குள்ளாகும் இனத்தொகை 22660-இல், வெவ்வேறு நேரப் புள்ளிகளில் வெளிப்பாடு அதிகரித்திருந்தது. அதே சமயம், எதிர்ப்புத்திறன் கொண்ட Lanr1 மற்றும் AnMan அல்லீலைக் கொண்ட விகாரங்களில், இந்த மரபணு வகைகளுக்கு இடையே பாதுகாப்பு ஆந்த்ராக்ஸ் எதிர்வினைகளில் ஆக்சிலிப்பின் அடுக்கின் பன்முகத்தன்மையை இது வலியுறுத்துகிறது.
லுபைன் சேர்க்கப்பட்டபோது, ​​1-அமினோசைக்ளோபுரோபேன்-1-கார்பாக்சிலேட் ஆக்சிடேஸ் (ACO) ஹோமோலாக் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகரித்தது (9 மரபணுக்கள்) அல்லது குறைந்தது (2 மரபணுக்கள்). இரண்டு விதிவிலக்குகளைத் தவிர, இந்த எதிர்வினைகள் அனைத்தும் 6 hp-இல் 83A:476-இல் நிகழ்ந்தன. ACO புரதங்களால் நிகழ்த்தப்படும் நொதிவினை, எத்திலீன் உற்பத்தியில் வேகத்தைக் கட்டுப்படுத்தும் படியாகும், எனவே இது மிகவும் ஒழுங்குபடுத்தப்படுகிறது84. எத்திலீன் என்பது ஒரு தாவர ஹார்மோன் ஆகும், இது தாவர வளர்ச்சியை ஒழுங்குபடுத்துவதிலும், உயிரற்ற மற்றும் உயிருள்ள அழுத்த நிலைகளுக்கு எதிர்வினையாற்றுவதிலும் பல்வேறு பங்குகளை வகிக்கிறது. ACO படியெடுத்தலைத் தூண்டுவதும், எத்திலீன் சமிக்ஞைப் பாதையைச் செயல்படுத்துவதும், வினைத்திறன் மிக்க ஆக்சிஜன் இனங்கள் மற்றும் பைட்டோஅலெக்சின்களின் உற்பத்தியை ஒழுங்குபடுத்துவதன் மூலம், அரை உயிரி ஊட்டப் பூஞ்சையான ஒரைசே ஒரைசே-க்கு எதிராக நெல்லின் எதிர்ப்பாற்றலை அதிகரிப்பதில் ஈடுபட்டுள்ளன. இந்த ஆய்வில் தெரிவிக்கப்பட்டுள்ள 83A:476 வரிசையில் ACO ஹோமோலாகுகளின் குறிப்பிடத்தக்க உயர் வெளிப்பாட்டின் பின்னணியில், M. oryzae மற்றும் C. lupini88,89 ஆகியவற்றுக்கு இடையே காணப்படும் மிகவும் ஒத்த இலைத் தொற்று செயல்முறையானது, NLL ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு எதிர்ப்பை வழங்கும் சாத்தியக்கூறை, மூலக்கூறு வழித்தடங்களில் சமிக்ஞையின் மையப் படியான எத்திலீனை நோக்கி நகர்த்துகிறது.
தற்போதைய ஆய்வில், 83A:476 இல் தொற்று ஏற்பட்ட 6 மணி நேரத்திலும், மாண்டலூப் மற்றும் 22660 இனக்கூட்டத்தில் தொற்று ஏற்பட்ட 48 மணி நேரத்திலும் ஒளிச்சேர்க்கையுடன் தொடர்புடைய பல மரபணுக்களின் பெரிய அளவிலான ஒடுக்கம் காணப்பட்டது. இந்த மாற்றங்களின் அளவும் முன்னேற்றமும் அதன் நிலைக்கு விகிதாசாரமாக உள்ளது. இந்த சோதனையில் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத்திறன் காணப்பட்டது. சமீபத்தில், நோய்க்கிருமி பாக்டீரியா மற்றும் பூஞ்சைகள் உட்பட, தாவர-நோய்க்கிருமி இடைவினைகளின் பல மாதிரிகளில் ஒளிச்சேர்க்கை தொடர்பான டிரான்ஸ்கிரிப்டுகளின் வலுவான மற்றும் ஆரம்பகால ஒடுக்கம் பதிவாகியுள்ளது. தொற்றுக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக ஒளிச்சேர்க்கையுடன் தொடர்புடைய மரபணுக்களின் அவசரம் (சில இடைவினைகளில் தொற்று ஏற்பட்ட 2 மணி நேரத்திலிருந்தே) மற்றும் உலகளாவிய ஒடுக்கம், வினைத்திறன் கொண்ட ஆக்ஸிஜன் இனங்களை வெளியிடுவதன் மூலமும், ஒவ்வாமை எதிர்வினைகளை ஏற்படுத்துவதற்காக சாலிசிலிக் அமிலப் பாதையுடன் அவை இடைவினை புரிவதன் மூலமும் தாவர நோய் எதிர்ப்புத்திறனைத் தூண்டக்கூடும் 90,94.
முடிவாக, மிகவும் எதிர்ப்புத்திறன் கொண்ட மரபுவழிக்கு (83A:476) முன்மொழியப்பட்ட பாதுகாப்பு மறுமொழி வழிமுறைகளில், R மரபணுவால் (அநேகமாக TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) நோய்க்கிருமியை விரைவாக அடையாளம் காணுதல் மற்றும் ஒவ்வாமை மறுமொழி-மத்தியஸ்த சாலிசிலிக் அமிலம் மற்றும் எத்திலீன் சமிக்ஞை அனுப்புதல் ஆகியவை அடங்கும். இதைத் தொடர்ந்து நீண்ட தூர SAR நிறுவப்படுகிறது. இந்தச் செயல்பாடு DIR-1 புரதத்தால் ஆதரிக்கப்படுகிறது. C. lupini தொற்றுக்கான உயிரி ஊட்டக் காலம் மிகவும் குறுகியது (சுமார் 2 நாட்கள்), அதைத் தொடர்ந்து திசு சிதைவு வளர்ச்சி ஏற்படுகிறது என்பது குறிப்பிடத்தக்கது95. இந்த நிலைகளுக்கு இடையிலான மாற்றம், திசு சிதைவு மற்றும் புரவலன் தாவரங்களில் அதிஉணர்திறன் எதிர்வினைகளைத் தூண்டும் எத்திலீன்-தூண்டக்கூடிய புரதங்களின் வெளிப்பாட்டுடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம். எனவே, உயிரி ஊட்ட நிலையில் C. lupini-ஐ வெற்றிகரமாகப் பிடிப்பதற்கான கால அவகாசம் மிகவும் குறுகியது. தொற்று ஏற்பட்ட 6 மணி நேரத்தில் 83A:476-ல் காணப்பட்ட ஆக்சிஜன் ஒடுக்கம் மற்றும் ஒளிச்சேர்க்கையுடன் தொடர்புடைய மரபணுக்களின் மறு நிரலாக்கமானது, பூஞ்சை இழைகளின் வளர்ச்சியுடன் ஒத்துப்போகிறது மற்றும் உயிரி ஊட்ட நிலையில் ஒரு வெற்றிகரமான பாதுகாப்பு எதிர்வினையின் வளர்ச்சியை முன்னறிவிக்கிறது. மாண்டலப் மற்றும் 22660 இனக்கூட்டத்தின் மரபணுப் படியெடுத்தல் எதிர்வினைகள், பூஞ்சை நசிவு வளர்ச்சிக்கு மாறுவதற்கு முன்பு அதைப் பிடிப்பதற்கு மிகவும் தாமதமாக இருக்கலாம்; இருப்பினும், PR-10 புரதத்தின் ஒப்பீட்டளவில் வேகமான ஒழுங்குமுறை கிடைமட்ட எதிர்ப்பை ஊக்குவிப்பதால், 22660 இனக்கூட்டத்தை விட மாண்டலப் அதிக செயல்திறன் மிக்கதாக இருக்கலாம்.
வழக்கமான R மரபணுவால் இயக்கப்படும் ETI, அவரைச் செடியின் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத்திறனுக்கான ஒரு பொதுவான வழிமுறையாகத் தோன்றுகிறது. இவ்வாறு, மாதிரிப் பயறு வகையான மெடிகாகோ ட்ரங்கடுலாவில், TIR-NBS-LRR97 தாவர R மரபணு வகையைச் சேர்ந்த RCT1 மரபணு, ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத்திறனை வழங்குகிறது. இந்த மரபணு, எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய தாவரங்களுக்கு மாற்றப்படும்போது, ​​அல்ஃபால்ஃபாவிலும் பரந்த அளவிலான ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத்திறனை வழங்குகிறது. சாதாரண அவரைச் செடியில் (P. vulgaris), இன்றுவரை இருபதுக்கும் மேற்பட்ட ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணுக்கள் அடையாளம் காணப்பட்டுள்ளன. இந்த மரபணுக்களில் சில, எந்தவொரு வழக்கமான R மரபணுக்களும் இல்லாத பகுதிகளில் காணப்படுகின்றன; இருப்பினும், மற்ற பல மரபணுக்கள், TIR-NBS-LRRs99 உட்பட, NBS-LRR மரபணுக் கொத்தைக் கொண்டுள்ள குரோமோசோம்களின் விளிம்புகளில் அமைந்துள்ளன. மரபணுத்தொகுதி முழுவதுமான SSR ஆய்வும், சாதாரண அவரைச் செடியில் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத்திறனுடன் NBS-LRR மரபணுவின் தொடர்பை உறுதிப்படுத்தியது. வெள்ளை லுபைன் 101-ல், முக்கிய ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணு இருப்பிடத்தைக் கொண்டுள்ள மரபணுப் பகுதியிலும், செம்மையான R மரபணு கண்டறியப்பட்டது.
தாவரத் தொற்று ஏற்பட்ட ஆரம்பக் கட்டத்திலேயே (முன்னுரிமையாக 12 மணி நேரத்திற்குள்) செயல்படுத்தப்படும் ஒரு உடனடி எதிர்ப்பு எதிர்வினையானது, கோலெலோட்ரிச்சம் லுபினி என்ற நோய்க்காரணி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸ் நோயிலிருந்து குறுகிய இலை லுபினை திறம்படப் பாதுகாக்கிறது என்பதை எங்கள் ஆய்வு காட்டுகிறது. உயர் செயல்திறன் வரிசைப்படுத்தலைப் பயன்படுத்தி, Lanr1 மற்றும் AnMan எதிர்ப்பு மரபணுக்களால் NLL தாவரங்களில் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணுக்களின் வேறுபட்ட வெளிப்பாட்டு விவரங்களை நாங்கள் நிரூபித்தோம். ஒரு வெற்றிகரமான பாதுகாப்பு என்பது, ஒரு நோய்க்காரணியுடன் தாவரம் முதன்முதலில் தொடர்பு கொண்ட சில மணி நேரங்களுக்குள், ஆக்சிஜன் ஒடுக்கம், ஒளிச்சேர்க்கை மற்றும் நோயுண்டாக்கும் செயல்முறைகளில் ஈடுபடும் புரதங்களுக்கான மரபணுக்களைக் கவனமாக வடிவமைப்பதை உள்ளடக்கியது. இதேபோன்ற பாதுகாப்பு எதிர்வினைகள், ஆனால் கால தாமதத்துடன் செயல்படுத்தப்படும்போது, ​​தாவரங்களை நோய்களிலிருந்து பாதுகாப்பதில் மிகவும் குறைவான செயல்திறனையே கொண்டுள்ளன. Lanr1 மரபணுவால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்ஸ் எதிர்ப்பு, R மரபணுவின் வழக்கமான விரைவான எதிர்வினையை (செயல்விளைவியால் தூண்டப்படும் நோயெதிர்ப்பு சக்தி) ஒத்திருக்கிறது, அதேசமயம் AnMan மரபணு பெரும்பாலும் ஒரு கிடைமட்ட எதிர்வினையை (நுண்ணுயிரியுடன் தொடர்புடைய மூலக்கூறு வடிவத்தால் தூண்டப்படும் நோயெதிர்ப்பு சக்தி) வழங்கி, மிதமான அளவிலான நிலைத்தன்மையை அளிக்கிறது.
ஆந்த்ராக்னோஸ் குறிப்பான்களைக் கண்டறியப் பயன்படுத்தப்பட்ட 215 NLL மரபுத்தொடர்களில், 74 சாகுபடி ரகங்கள், கலப்பு அல்லது இனப்பெருக்கம் மூலம் பெறப்பட்ட 60 மரபுத்தொடர்கள், 5 சடுதிமாற்றிகள் மற்றும் 76 காட்டு அல்லது அசல் மரபுப்பொருட்கள் அடங்கியிருந்தன. இந்த மரபுத்தொடர்கள் 17 நாடுகளில் இருந்து பெறப்பட்டன; முக்கியமாக போலந்து (58), ஸ்பெயின் (47), ஜெர்மனி (27), ஆஸ்திரேலியா (26), ரஷ்யா (19), பெலாரஸ் (7), இத்தாலி (5) மற்றும் 10 நாடுகளில் இருந்து பெறப்பட்ட பிற மரபுத்தொடர்கள் இதில் அடங்கும். இந்தத் தொகுப்பில், Lanr1 அல்லீலைக் கொண்ட 83A:476, டான்ஜில், வோங்கா மற்றும் AnMan அல்லீலைக் கொண்ட மாண்டெலப் ஆகிய குறிப்பு எதிர்ப்பு மரபுத்தொடர்களும் அடங்கும். இந்த மரபுத்தொடர்கள், போலந்தின் வியாட்ரோவோவில் உள்ள போஸ்னான் பிளான்ட் பிரீடிங் லிமிடெட் நிறுவனத்தால் பராமரிக்கப்படும் ஐரோப்பிய லுபைன் மரபணு வளத் தரவுத்தளத்திலிருந்து பெறப்பட்டன (துணை அட்டவணை S1).
தாவரங்கள் கட்டுப்படுத்தப்பட்ட சூழ்நிலைகளில் (ஒளிக்காலம் 16 மணிநேரம், பகலில் வெப்பநிலை 25°C மற்றும் இரவில் 18°C) வளர்க்கப்பட்டன. இரண்டு உயிரியல் பிரதிகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. நெறிமுறையின்படி, DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) ஐப் பயன்படுத்தி மூன்று வார வயதுடைய இலைகளிலிருந்து டி.என்.ஏ பிரித்தெடுக்கப்பட்டது. பிரித்தெடுக்கப்பட்ட டி.என்.ஏ-வின் தரம் மற்றும் செறிவு நிறமாலை அளவியல் முறைகள் (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) மூலம் மதிப்பிடப்பட்டது. ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணுவான AnMan-ஐ (cv. Mandelup-இலிருந்து பெறப்பட்டது) குறிக்கும் AnManM1 மார்க்கரும், Lanr1 மரபணுவை (cv. Tanjil-இலிருந்து பெறப்பட்டது) சூழ்ந்திருக்கும் Anseq3 மற்றும் Anseq4 மார்க்கர்களும் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன 11,26,28. எதிர்ப்பு அல்லீலுக்கான ஹோமோசைகோட்டுகள் “1” என்றும், பாதிப்புக்குள்ளாகும் அல்லீலுக்கு “0” என்றும், ஹெட்டிரோசைகோட்டுகளுக்கு 0.5 என்றும் மதிப்பெண் வழங்கப்பட்டது.
AnManM1, AnSeq3 மற்றும் AnSeq4 குறிப்பான்களுக்கான பரிசோதனை முடிவுகளின் அடிப்படையிலும், இறுதிப் பின்தொடர் சோதனைகளுக்கான விதைகள் கிடைத்ததன் அடிப்படையிலும், ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத் திறனை வகைப்படுத்துவதற்காக 50 NLL ரகங்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. இந்தப் பகுப்பாய்வு, கணினி கட்டுப்பாட்டில் இயங்கும் பசுமைக்குடிலில், 14 மணி நேர ஒளிக்காலத்துடனும், பகலில் 22°C மற்றும் இரவில் 19°C வெப்பநிலை வரம்புடனும் இருமுறை மேற்கொள்ளப்பட்டது. விதை உறை மிகவும் கடினமாக இருப்பதால் ஏற்படும் விதை உறக்கத்தைத் தடுக்கவும், சீரான முளைப்பை உறுதி செய்யவும், விதைப்பதற்கு முன் விதைகள் கீறப்படுகின்றன (ஒரு கூர்மையான கத்தியைக் கொண்டு கருவின் எதிர்ப் பக்கத்தில் உள்ள விதை உறையை வெட்டி எடுக்கப்படுகின்றன). தாவரங்கள், கிருமியழிக்கப்பட்ட மண்ணுடன் (TS-1 REC 085 Medium Basic, Klasmann-Deilmann Polska, Warsaw, Poland) தொட்டிகளில் (11 × 11 × 21 செ.மீ) வளர்க்கப்பட்டன. பெரிய போலந்தின் வெர்செனிட்சாவில் (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E) உள்ள ஒரு வயலில் வளர்க்கப்பட்ட குறுகிய இலை லுபைன் தாவரங்களின் தண்டுகளிலிருந்து 1999-ல் வளர்க்கப்பட்ட கோலெட்டோட்ரிச்சம் லுபினி கோல்-08 (Colletotrichum lupini Col-08) திரிபைக் கொண்டு நோயூட்டம் செய்யப்பட்டது. வித்துருவாக்கத்தைத் தூண்டுவதற்காக, பிரித்தெடுக்கப்பட்டவை 21 நாட்களுக்கு SNA ஊடகத்தில் 20° C வெப்பநிலையில், கருப்பு ஒளியின் கீழ் வளர்க்கப்பட்டன. விதைத்த நான்கு வாரங்களுக்குப் பிறகு, தாவரங்கள் 4-6 இலைகள் கொண்ட நிலையை அடைந்தபோது, ​​ஒரு மில்லி லிட்டருக்கு 0.5 x 10⁶ வித்துக்கள் என்ற செறிவில் வித்துக்களின் கூழ்மத்தைத் தெளிப்பதன் மூலம் நோயூட்டம் செய்யப்பட்டது. நோயூட்டத்திற்குப் பிறகு, வித்துக்கள் முளைப்பதையும் தொற்று செயல்முறையையும் எளிதாக்குவதற்காக, தாவரங்கள் சுமார் 98% ஈரப்பதம் மற்றும் 25°C வெப்பநிலையில் 24 மணி நேரம் இருட்டில் வைக்கப்பட்டன. பின்னர், அந்தத் தாவரங்கள் 14 மணி நேர ஒளிக்காலச் சூழலில், பகலில் 22°C/இரவில் 19°C வெப்பநிலை மற்றும் 70% ஈரப்பதத்தில் வளர்க்கப்பட்டன. நோய்த்தொற்று ஏற்படுத்திய 22 நாட்களுக்குப் பிறகு நோய் மதிப்பெண் கணக்கிடப்பட்டது. தண்டுகள் மற்றும் இலைகளில் திசு சிதைவுப் புண்கள் இருப்பதையோ அல்லது இல்லாததையோ பொறுத்து, இந்த மதிப்பெண் 0 (நோய் எதிர்ப்பு சக்தி கொண்டது) முதல் 9 (மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடியது) வரை இருந்தது. மேலும், மதிப்பெண் வழங்கிய பிறகு, தாவரங்களின் எடை அளவிடப்பட்டது. குறிப்பான் மரபணு வகைகளுக்கும் நோய்ப் புறத்தோற்றங்களுக்கும் இடையிலான தொடர்புகள், புள்ளி இரண்டு-வரிசைத் தொடர்புகளாகக் கணக்கிடப்பட்டன (ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புப் புறத்தோற்றத்தைப் பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான மரபணுத் தொகுப்பில் பல்லின மரபணு குறிப்பான்கள் இல்லாதிருத்தல்).