லூபின் ஆந்த்ராசிஸில் ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு எதிரான வெற்றிகரமான பாதுகாப்பு, ரெடாக்ஸ், ஒளிச்சேர்க்கை மற்றும் நோய்க்கிருமி உருவாக்கத்தில் ஈடுபடும் மரபணுக்களின் விரைவான மற்றும் ஒருங்கிணைந்த மறு நிரலாக்கத்தை உள்ளடக்கியது.

Nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவி பதிப்பில் குறைந்த CSS ஆதரவு உள்ளது. சிறந்த அனுபவத்திற்கு, புதுப்பிக்கப்பட்ட உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் இணக்கத்தன்மை பயன்முறையை முடக்கவும்). இதற்கிடையில், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதிசெய்ய, ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் தளத்தை ரெண்டர் செய்வோம்.
அங்கஸ்டிஃபோலியஸ் லூபின் (NLL, லூபினஸ் அங்கஸ்டிஃபோலியஸ் L.) என்பது உணவு உற்பத்தி மற்றும் மண் மேம்பாட்டிற்காகப் பயன்படுத்தப்படும் ஒரு பருப்பு வகை தாவரமாகும். NLL ஒரு பயிராக உலகளாவிய அளவில் விரிவடைந்து வருவது, பேரழிவு தரும் ஆந்த்ராக்னோஸ் நோயை ஏற்படுத்தும் லூபின் ஆந்த்ராக்னோஸ் உட்பட பல நோய்க்கிருமி பூஞ்சைகளை ஈர்த்துள்ளது. அதிகரித்த எதிர்ப்பை வழங்கும் இரண்டு அல்லீல்கள், Lanr1 மற்றும் AnMan, NLL இனப்பெருக்கத்தில் பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளன, ஆனால் அடிப்படை மூலக்கூறு வழிமுறைகள் தெரியவில்லை. இந்த ஆய்வில், ஐரோப்பிய NLL மாதிரிகளை திரையிட Lanr1 மற்றும் AnMan குறிப்பான்கள் பயன்படுத்தப்பட்டன. கட்டுப்படுத்தப்பட்ட சூழலில் தடுப்பூசியை சோதித்ததன் மூலம் எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட இருவரின் செயல்திறனையும் உறுதிப்படுத்தினர். பிரதிநிதித்துவ எதிர்ப்பு மற்றும் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய கோடுகளில் வேறுபட்ட மரபணு வெளிப்பாடு விவரக்குறிப்பு செய்யப்பட்டது. ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு "GO:0006952 பாதுகாப்பு பதில்", "GO:0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறை" மற்றும் "GO:0015979 ஒளிச்சேர்க்கை" என்ற மரபணு ஆன்டாலஜி சொற்களின் அதிகப்படியான வெளிப்பாட்டுடன் தொடர்புடையது. கூடுதலாக, Lanr1(83A:476) வரிசை தடுப்பூசிக்குப் பிறகு குறிப்பிடத்தக்க டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் மறுநிரலாக்கத்தை விரைவாகக் காட்டியது, அதே நேரத்தில் மற்ற வரிசைகள் இந்த பதிலில் சுமார் 42 மணிநேர தாமதத்தைக் காட்டின. பாதுகாப்பு பதில்கள் TIR-NBS, CC-NBS-LRR மற்றும் NBS-LRR மரபணுக்கள், நோய்க்கிருமி உருவாக்கத்தில் ஈடுபடும் 10 புரதங்கள், லிப்பிட் பரிமாற்ற புரதங்கள், எண்டோகுளூக்கன்-1,3-β-குளுக்கோசிடேஸ், கிளைசின் நிறைந்த செல் சுவர் புரதங்கள் மற்றும் ஆக்ஸிஜனின் எதிர்வினை பாதையிலிருந்து வரும் மரபணுக்களுடன் தொடர்புடையவை. ஒளிச்சேர்க்கையுடன் தொடர்புடைய மரபணுக்களை கவனமாக அடக்குவது உட்பட 83A:476க்கான ஆரம்பகால பதில்கள், பூஞ்சை உயிரியலின் தாவர வளர்ச்சி கட்டத்தில் வெற்றிகரமான பாதுகாப்போடு ஒத்துப்போனது, இது ஒரு விளைவு நோய் எதிர்ப்பு சக்தியைத் தூண்டுகிறது என்பதைக் குறிக்கிறது. மண்டேலூப் எதிர்வினை மெதுவாக்கப்படுகிறது, அதே போல் ஒட்டுமொத்த கிடைமட்ட இழுவையும்.
குறுகிய இலைகள் கொண்ட லூபின் (NLL, Lupinus angustifolius L.) என்பது மேற்கு மத்தியதரைக் கடல் பகுதியில் தோன்றிய ஒரு உயர் புரத தானியமாகும்1,2. இது தற்போது விலங்குகள் மற்றும் மனிதர்களுக்கான உணவுப் பயிராக வளர்க்கப்படுகிறது. கூட்டுவாழ் நைட்ரஜன் நிலைநிறுத்தும் பாக்டீரியாவால் நைட்ரஜன் நிலைநிறுத்தம் மற்றும் மண் அமைப்பின் ஒட்டுமொத்த முன்னேற்றம் காரணமாக பயிர் சுழற்சி முறைகளில் இது பசுந்தாள் உரமாகவும் கருதப்படுகிறது. NLL கடந்த நூற்றாண்டில் வளர்ப்பு செயல்முறையின் விரைவான செயல்முறைக்கு உட்பட்டுள்ளது மற்றும் இன்னும் அதிக இனப்பெருக்க அழுத்தத்தில் உள்ளது3,4,5,6,7,8,9,10,11,12. NLL இன் பரவலான சாகுபடியுடன், நோய்க்கிருமி பூஞ்சைகளின் தொடர்ச்சியானது புதிய விவசாய இடங்களை உருவாக்கி புதிய பயிர்களை அழிக்கும் நோய்களை ஏற்படுத்தியது. லூபின் விவசாயிகள் மற்றும் வளர்ப்பாளர்களுக்கு மிகவும் குறிப்பிடத்தக்கது, கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டர்) நிரென்பெர்க், ஃபீலர் & ஹேகெடோர்ன்13 என்ற நோய்க்கிருமி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸின் தோற்றம் ஆகும். லூபின் விவசாயிகள் மற்றும் வளர்ப்பாளர்களுக்கு மிகவும் குறிப்பிடத்தக்கது, கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டர்) நிரென்பெர்க், ஃபீலர் & ஹேகெடோர்ன்13 என்ற நோய்க்கிருமி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸின் தோற்றம் ஆகும். நைபோலி பிரைமச்சட்டெல்னிம் ஃபெர்மெரோவ் மற்றும் செலக்சியோனெரோவ் லிபினா பைலோ போவாவ்லேனி அன்ட்ராக்னோசா, வோகோவொன்சா கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டார்) நிரன்பெர்க், ஃபைலர் & ஹேகெடோர்ன்13. லூபின் விவசாயிகள் மற்றும் வளர்ப்பாளர்களுக்கு மிகவும் குறிப்பிடத்தக்கது, கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டர்) நிரென்பெர்க், ஃபீலர் & ஹேகெடோர்ன்13 என்ற நோய்க்கிருமி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸின் தோற்றம் ஆகும்.对于羽扇豆农民和饲养者来说,最引人注目的是炭疽病的出现,它是由病原,它是由病原) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13 引起的。对于羽扇豆农民和饲养者来说,最引人注目的是炭疽病的出现,它是由病原(போந்தர்)嵵ஹேர்டு。1 நைபோலி போரசிடெல்னிம் டெர்மெரோவ் மற்றும் செலெக்சியோனெரோவ் லிபினா யவ்லியாட்சியா போயாவ்லேனி அண்ட்ராக்னோசா, வீடியோ கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டார்) நிரன்பெர்க், ஃபைலர் & ஹேகெடோர்ன்13. லூபின் விவசாயிகள் மற்றும் வளர்ப்பாளர்களுக்கு மிகவும் குறிப்பிடத்தக்கது, கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போண்டர்) நிரென்பெர்க், ஃபீலர் & ஹேகெடோர்ன்13 என்ற நோய்க்கிருமி பூஞ்சையால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸின் தோற்றம் ஆகும்.இந்த நோய் பற்றிய ஆரம்பகால அறிக்கைகள் பிரேசில் மற்றும் அமெரிக்காவிலிருந்து வந்தன, வழக்கமான அறிகுறிகள் முறையே 1912 மற்றும் 1929 இல் தோன்றின. இருப்பினும், சுமார் 30 ஆண்டுகளுக்குப் பிறகு, நோய்க்கிருமி கோலெட்டோட்ரிச்சம் குளோயோஸ்போரியாடைஸ் (பென்ஸ்.) பென்ஸ் என்று பெயரிடப்பட்டது. & சாக்., டெலியோமார்ஃப் குளோமெரெல்லா சிங்குலாட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட். & சாக்., டெலியோமார்ஃப் குளோமெரெல்லா சிங்குலாட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட். & சாக்., டெலியோமோர்ஃப் குளோமரெல்லா சிங்குலாட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட். & சாக்., குளோமெரெல்லா சிங்குலாட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்டின் டெலியோமார்ஃப். & சாக்.,有目的形态的Glomerella சிங்குலட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட்。 & சாக்.,有目的形态的Glomerella சிங்குலட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட்。 & சாக்., க்ளோமரெல்லா சிங்குலட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட் மற்றும் டெலினாப்ராவ்லென்னோய் மோரிஃபோலோகி. & சாக்., இலக்கு வைக்கப்பட்ட உருவவியலில் குளோமெரெல்லா சிங்குலாட்டா (ஸ்டோன்மேன்) ஸ்பால்ட். & எச். ஷ்ரெங்க்,. & எச். ஷ்ரெங்க், .மற்றும் எச். ஷ்ரெங்க். & H.施伦克,. & H.施伦克,.மற்றும் எச். ஷ்லெங்க், .20 ஆம் நூற்றாண்டின் நடுப்பகுதியில் செய்யப்பட்ட ஆரம்பகால நோய் பினோடைப்பிங் NLL மற்றும் மஞ்சள் லூபின் (L. luteus L.) இணைப்புகளில் சில எதிர்ப்பைக் காட்டியது, ஆனால் பரிசோதிக்கப்பட்ட அனைத்து வெள்ளை லூபின் (L. albus L.) இணைப்புகளும் மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படுகின்றன15,16. ஆந்த்ராக்னோஸின் வளர்ச்சி அதிகரித்த மழைப்பொழிவு (காற்று ஈரப்பதம்) மற்றும் வெப்பநிலை (12-28°C வரம்பில்) ஆகியவற்றுடன் தொடர்புடையது என்று ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன, இது அதிக வெப்பநிலையில் எதிர்ப்பை மீறுவதற்கு வழிவகுக்கிறது17, 18. உண்மையில், கொனிடியா முளைத்து நோய் தொடங்குவதற்குத் தேவையான நேரம், அதிக ஈரப்பதம் உள்ள நிலையில் 12°C (16 மணிநேரம்) ஐ விட 24°C (4 மணிநேரம்) இல் நான்கு மடங்கு குறைவாக இருந்தது19. இதனால், நடந்து வரும் புவி வெப்பமடைதல் ஆந்த்ராக்னோஸின் பரவலுக்கு வழிவகுத்தது. இருப்பினும், இந்த நோய் பிரான்சில் (1982) மற்றும் உக்ரைனில் (1983) வரவிருக்கும் அச்சுறுத்தலின் முன்னோடியாகக் காணப்பட்டது, ஆனால் அந்த நேரத்தில் லூபின் தொழில்துறையால் புறக்கணிக்கப்பட்டது20,21. சில ஆண்டுகளுக்குப் பிறகு, இந்த அழிவுகரமான நோய் உலகம் முழுவதும் பரவியது மற்றும் ஆஸ்திரேலியா, போலந்து மற்றும் ஜெர்மனி போன்ற முக்கிய லூபின் உற்பத்தி செய்யும் நாடுகளையும் பாதித்தது22,23,24. 1990களின் நடுப்பகுதியில் ஆந்த்ராக்னோஸ் வெடித்ததைத் தொடர்ந்து, விரிவான பரிசோதனையின் விளைவாக NLL19 மாதிரிகளில் பல எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட கொடையாளர்கள் அடையாளம் காணப்பட்டனர். ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு NLL எதிர்ப்பு வெவ்வேறு ஜெர்ம்பிளாஸ்ம் மூலங்களில் காணப்படும் இரண்டு தனித்தனி ஆதிக்க அல்லீல்களால் கட்டுப்படுத்தப்படுகிறது: டான்ஜில் மற்றும் வோங்காவில் உள்ள லேன்ர்1 மற்றும் சாகுபடியில் ஆன்மேன். மண்டலே 25, 26. இனப்பெருக்கத் திட்டங்களில் எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட ஜெர்ம்பிளாஸ்மைத் தேர்ந்தெடுப்பதை ஆதரிக்கும் மூலக்கூறு குறிப்பான்களை இந்த அல்லீல்கள் பூர்த்தி செய்கின்றன25,26,27,28,29,30. Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும் எதிர்ப்பு இனப்பெருக்கக் கோடு 83A:476, ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பிற்கான RIL மக்கள்தொகையைப் பிரிப்பதற்காக, எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய காட்டுக் கோடு P27255 உடன் கடக்கப்பட்டது, இது Lanr1 லோகஸை குரோமோசோம் NLL-1131, 32, 33 க்கு ஒதுக்குவதை சாத்தியமாக்கியது. பக்கவாட்டு எதிர்ப்பு லோகியிலிருந்து ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு இணைப்பு வரைபட குறிப்பான்களை ஒரு மரபணு கட்டமைப்புடன் சீரமைத்ததில், NLL மூன்று அல்லீல்களின் இருப்பிடத்தையும் ஒரே குரோமோசோமில் (NLL-11) வெளிப்படுத்தியது, ஆனால் வெவ்வேறு நிலைகளில்29,34,35. இருப்பினும், சிறிய எண்ணிக்கையிலான RILகள் மற்றும் குறிப்பான்கள் மற்றும் தொடர்புடைய அல்லீல்களுக்கு இடையே உள்ள பெரிய மரபணு தூரம் காரணமாக, அவற்றின் அடிப்படை மரபணுக்கள் குறித்து நம்பகமான முடிவுகளை எடுக்க முடியாது. மறுபுறம், லூபின்களில் தலைகீழ் மரபியலை பயன்படுத்துவது அவற்றின் மிகக் குறைந்த மீளுருவாக்கம் திறன் காரணமாக கடினமாக உள்ளது, இது மரபணு கையாளுதலை சிக்கலாக்குகிறது37.
83A:476 (Lanr1) மற்றும் Mandelup (AnMan) போன்ற ஹோமோசைகஸ் நிலையில் விரும்பிய அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும் வளர்ப்பு ஜெர்ம்பிளாசத்தின் வளர்ச்சி, காட்டு மக்கள்தொகையில் அல்லீல்களின் எதிர் சேர்க்கைகள் இருப்பதை எதிர்கொண்டு ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பைப் படிப்பதற்கான கதவைத் திறந்துள்ளது. மூலக்கூறு வழிமுறைகளின் சாத்தியக்கூறுகள். குறிப்பிட்ட மரபணு வகைகளால் உருவாக்கப்பட்ட பாதுகாப்பு பதில்களை ஒப்பிடுக. இந்த ஆய்வு C. lupini தடுப்பூசிக்கு NLL இன் ஆரம்பகால டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் பதிலை மதிப்பீடு செய்தது. முதலில், Lanr1 மற்றும் AnMan அல்லீல்களைக் குறிக்கும் மூலக்கூறு குறிப்பான்களைப் பயன்படுத்தி 215 கோடுகளைக் கொண்ட ஒரு ஐரோப்பிய NLL ஜெர்ம்பிளாசம் குழு திரையிடப்பட்டது. பின்னர் கட்டுப்படுத்தப்பட்ட நிலைமைகளின் கீழ், மூலக்கூறு குறிப்பான்களுக்கு முன்னர் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட 50 NLL கோடுகளில் ஆந்த்ராக்னோஸ் பினோடைப்பிங் செய்யப்பட்டது. இந்த சோதனைகளின் அடிப்படையில், ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மற்றும் Lanr1/AnMan அல்லீலிக் கலவையில் வேறுபடும் நான்கு கோடுகள் இரண்டு நிரப்பு அணுகுமுறைகளைப் பயன்படுத்தி வேறுபட்ட பாதுகாப்பு மரபணு வெளிப்பாடு விவரக்குறிப்புக்காகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன: உயர்-செயல்திறன் RNA வரிசைமுறை மற்றும் நிகழ்நேர PCR அளவீடு.
Lanr1 (Anseq3 மற்றும் Anseq4) மற்றும் AnMan (Anseq4) மற்றும் AnMan (AnManM1) குறிப்பான்களைக் கொண்ட NLL ஜெர்ம்பிளாசம் (N = 215) தொகுப்பின் திரையிடல், அனைத்து குறிப்பான்களுக்கும் ஒரே ஒரு வரி (95726, சலமன்கா-பிக்கு அருகில்) "எதிர்ப்பு" அல்லீலைப் பெருக்குகிறது என்பதைக் காட்டியது, அதே நேரத்தில் "'எதிர்ப்புக்கு ஆளாகக்கூடிய' அல்லீல்களின் இருப்பு" 158 (~73.5%) வரிகளில் அனைத்து குறிப்பான்களின் விகிதத்தைக் கண்டறிந்தது. பதின்மூன்று கோடுகள் Lanr1 குறிப்பானின் இரண்டு "எதிர்ப்பு" அல்லீல்களையும், 8 கோடுகள் Lanr1 இன் "எதிர்ப்பு" அல்லீல்களையும் உருவாக்கியது. மார்க்கர். AnMan குறிப்பானின் "எதிர்ப்பு" அல்லீல் (துணை அட்டவணை S1). இரண்டு கோடுகள் Anseq3 குறிப்பானுக்கு ஹெட்டோரோசைகஸாகவும், AnManM1 குறிப்பானுக்கு ஒரு ஹெட்டோரோசைகஸாகவும் இருந்தன. 42 கோடுகள் (19.5%) Anseq3 மற்றும் Anseq4 அல்லீல்களின் எதிர் நிலைகளைக் கொண்டிருந்தன, இது இந்த இரண்டு இடங்களுக்கிடையில் மீண்டும் இணைவதற்கான அதிக அதிர்வெண்ணைக் குறிக்கிறது. கட்டுப்படுத்தப்பட்ட நிலைமைகளின் கீழ் ஆந்த்ராக்னோஸ் பினோடைப்கள் (துணை அட்டவணை S2) சோதிக்கப்பட்ட மரபணு வகைகளின் எதிர்ப்பில் மாறுபாட்டை வெளிப்படுத்தின, இது ஆந்த்ராக்னோஸின் தீவிரத்தில் பிரதிபலித்தது. சராசரி மதிப்பெண்களில் உள்ள வேறுபாடுகள் 1.8 (மிதமான எதிர்ப்பு) முதல் 6.9 (எதிர்ப்பு) வரை இருந்தன, மேலும் தாவர எடை வேறுபாடுகள் 0.62 (எதிர்ப்பு) முதல் 4.45 கிராம் (எதிர்ப்பு) வரை இருந்தன. பரிசோதனையின் இரண்டு பிரதிகளில் காணப்பட்ட மதிப்புகளுக்கும் (நோய் தீவிர மதிப்பெண்களுக்கு 0.51, தாவர எடைக்கு P = 0.00017 மற்றும் 0.61, P < 0.0001) மற்றும் இந்த இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் (− 0.59 மற்றும் − 0.77, P < 0.0001) இடையே ஒரு குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு இருந்தது. பரிசோதனையின் இரண்டு பிரதிகளில் காணப்பட்ட மதிப்புகளுக்கும் (நோய் தீவிர மதிப்பெண்களுக்கு 0.51, தாவர எடைக்கு P = 0.00017 மற்றும் 0.61, P < 0.0001) இந்த இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் (− 0.59 மற்றும் − 0.77, P < 0.0001) இடையே குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு இருந்தது. வியாவ்லேனா டோஸ்டோவெர்னாயா கொரேலியா மேடு சன்செனியாமி, நப்லிடேமிமி வி டுவூஹ் போவ்டோர்னோஸ்ட்யாஹ் எக்ஸ்பெரிமென்ட்,510 тяжести болезни, P = 0,00017 மற்றும் 0,61 для массы растения, P <0,0001), а также между этими двуме, -0,7 ஆர் < 0,0001) 0,0001). பரிசோதனையின் இரண்டு மறுநிகழ்வுகளில் காணப்பட்ட மதிப்புகளுக்கும் (நோய் தீவிர மதிப்பெண்களுக்கு 0.51, தாவர எடைக்கு P = 0.00017 மற்றும் 0.61, P < 0.0001), அதே போல் இந்த இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் (- 0.59 மற்றும் -0.77, P < 0.0001) 0.0001) இடையே ஒரு குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு கண்டறியப்பட்டது.மேலும் 0.00017,植物重量为0.61,P <0.0001)以及这两个参数之间(- 0.59 和- 0.77,P <0.0001)மேலும் மேலும்和- 0.59 和– 0.59 和- 0.77,P <0.0001)。 நேப்லிடலஸ் சன்னாசிதெல்னாயா கொரேலியா மேஷ்டு சன்செனியாமி, நப்லிடேமிமி மற்றும் டிவூஹ் போவ்டோர்னோஸ்டியாக் (ஆசிரியர்) 0,51, P = 0,00017 и масса растения 0,61, P <0,0001), и между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,00070, P.10,0001) நகல்களில் காணப்பட்ட மதிப்புகளுக்கும் (நோய் தீவிர மதிப்பெண் 0.51, P = 0.00017 மற்றும் தாவர எடை 0.61, P < 0.0001) மற்றும் இந்த இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் (-0.59 மற்றும் -0 .0001) 0.77, P<0.0001 இடையே குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு இருந்தது. ).எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய தாவரங்களில் காணப்படும் பொதுவான அறிகுறிகளில் "மேய்ப்பனின் வில்" அமைப்பை ஒத்த தண்டு வளைந்து முறுக்குதல், அதைத் தொடர்ந்து ஆரஞ்சு/இளஞ்சிவப்பு ஸ்போரோசோயிட்டுகளுடன் ஓவல் புண்கள் (துணை படம் 1) ஆகியவை அடங்கும். Lanr1 (83A:476 மற்றும் Tanjil) மற்றும் AnMan (Mandelup) மரபணுக்களைக் கொண்ட ஆஸ்திரேலிய இணைப்புகள் மிதமான எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டவை, 0.0331 மற்றும் 0.0036). "எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட" Lanr1 மற்றும்/அல்லது AnMan அல்லீல்களையும் கொண்ட சில கோடுகள் நோயின் அறிகுறிகளைக் காட்டுகின்றன.
சுவாரஸ்யமாக, "எதிர்ப்பு" மார்க்கர் அல்லீல் இல்லாத சில NLL கோடுகள் அதிக அளவிலான ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பை வெளிப்படுத்தின (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணு வகைகளை விட ஒப்பிடத்தக்கது அல்லது அதிகமாகும்), உதாரணமாக Boregine (இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் P மதிப்பு < 0.0001), Bojar (மதிப்பெண்ணுக்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.001) மற்றும் மக்கள் தொகை B-549/79b (மதிப்பெண்ணுக்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் எடைக்கு முக்கியமற்றது). சுவாரஸ்யமாக, "எதிர்ப்பு" மார்க்கர் அல்லீல் இல்லாத சில NLL கோடுகள் அதிக அளவிலான ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பை வெளிப்படுத்தின (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணு வகைகளை விட ஒப்பிடத்தக்கது அல்லது அதிகமாகும்), உதாரணமாக Boregine (இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் P மதிப்பு < 0.0001), Bojar (மதிப்பெண்ணுக்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.001) மற்றும் மக்கள் தொகை B-549/79b (மதிப்பெண்ணுக்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் எடைக்கு முக்கியமற்றது). அன்டெரெஸ்னோ, செக்டோ நெஸ்கோல்கோ லினி என்எல்எல், லிஷென்னிக் ககோகோ-லிபோ «ரெஸிஸ்டென்ட்னோகோ» மார்கெர்னோகோ அலெலியா, போகாஸ் устойчивости к அன்ட்ராக்னோஸு (சோபோஸ்டாவிம் அல்லது பொலிவே விசோக்கி, செம் டிலை ஜெனோட்டிபோவ் லான்ர்1 அல்லது ஆன்மேன்), <0போக்னக், 100 для обоих параметров), போஜார் (பெரிய பி <0,0001 மற்றும் 0,001 நாள் மாஸ்ஸி ரஸ்டெனி) மற்றும் சுவாரஸ்யமாக, 'எதிர்ப்பு' மார்க்கர் அல்லீல் இல்லாத பல NLL கோடுகள் ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு அதிக அளவிலான எதிர்ப்பைக் காட்டின (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணு வகைகளுடன் ஒப்பிடத்தக்கவை அல்லது அதிகமாக உள்ளன), உதாரணமாக Boregine (இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் P மதிப்பு < 0.0001), Bojar (மதிப்பீட்டிற்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் தாவர எடைக்கு 0.001) மற்றும் மக்கள் தொகை B-549/79b (மதிப்பீட்டிற்கு P மதிப்பு < 0.0001 மற்றும் எடைக்கு குறிப்பிடத்தக்கதாக இல்லை).有趣的是,一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL 系显示出高水平的炭疽痸或AnMan 基因型相当或更高),例如Boregine(两个参数的P 值< 0.0001)、Bojar(P 值<得分为0.0001,植物重量为0.001)和种群B-549/79b(得分P 值< 0.0001,重量不昍 "ஆன்டிஜெனிக்" குறிப்பான்கள் இல்லாத சில NLL அமைப்புகள் அதிக கிடைமட்ட எதிர்ப்பைக் காட்டுகின்றன (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணுக்கள் அல்லது அதற்கு மேற்பட்டவை), உதாரணமாக Boregine (இரண்டு அளவுருக்கள் P < 0.0001), Bojar (P மதிப்பு < 0.0001, தாவர எடை 0.001) மற்றும் திரிபு B-549/79b (P மதிப்பு < 0.0001, எடை குறிப்பிடத்தக்கதாக இல்லை). அன்டெரெஸ்னோ, சிடோ நெகோடோரி லினிகள் என்எல்எல், லிஷென்னி கேக்கிஹ்-லிபோ மார்கெர்ன் அலெலி «ரெசிஸ்டென்ட்னோஸ்டிஸ்», போகாவஸ் அன்ட்ராக்னோஸு параметров <0,0001), போஜர் (பிரதிநிதி பி <0,0001, மாச ரஸ்டெனிய 0,001) மற்றும் பொபுளியசியா பி-549/79பி (ஒஷ்னேகா பி-அறிமுகம் <0,0001, மாசஸ் நியூஸ்). சுவாரஸ்யமாக, 'எதிர்ப்பு' மார்க்கர் அல்லீல்கள் இல்லாத சில NLL கோடுகள் அதிக அளவு ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பைக் காட்டின (Lanr1 அல்லது AnMan மரபணு வகைகளுடன் ஒப்பிடத்தக்கவை அல்லது அதிகமாக உள்ளன), எடுத்துக்காட்டாக, Boregine (இரண்டு அளவுருக்களுக்கும் P மதிப்பு <0.0001), Bojar (P-மதிப்பு < 0.0001, தாவர எடை 0.001) மற்றும் மக்கள் தொகை B-549/79b (P-மதிப்பு < 0.0001, எடை குறிப்பிடத்தக்கதாக இல்லை).இந்த நிகழ்வு, மார்க்கர் மரபணு வகைகளுக்கும் நோய் பினோடைப்களுக்கும் (~0.42 முதல் ~0.98 வரை) இடையே காணப்படும் தொடர்பு இல்லாததை விளக்கி, ஒரு புதிய மரபணு மூல எதிர்ப்பின் சாத்தியத்தை பரிந்துரைக்கிறது. எனவே, கோல்மோகோரோவ்-ஸ்மிர்னோவ் சோதனை, ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு பற்றிய தரவு தோராயமாக பொதுவாக மதிப்பெண்களுக்கு (P-மதிப்புகள் 0.25 மற்றும் 0.11) மற்றும் தாவர நிறை (P-மதிப்புகள் 0.47 மற்றும் 0.55) விநியோகிக்கப்பட்டது என்பதைக் காட்டுகிறது, இது Lanr1 மற்றும் AnMan ஐ விட அதிகமான அல்லீல்கள் சம்பந்தப்பட்டிருப்பதாக நான் அனுமானிக்கிறேன்.
ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத் திரையிடலின் முடிவுகளின் அடிப்படையில், டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் பகுப்பாய்விற்கு 4 கோடுகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன: 83A:476, போரெஜின், மண்டேலப் மற்றும் மக்கள் தொகை 22660. இந்த கோடுகள் ஆர்.என்.ஏ வரிசைமுறை மூலம் தடுப்பூசி பரிசோதனைகளில் ஆந்த்ராக்ஸ் எதிர்ப்புக்காக மீண்டும் சோதிக்கப்பட்டன, அவை முந்தைய சோதனையைப் போலவே இருந்தால். மதிப்பெண் மதிப்புகள் பின்வருமாறு: போரெஜின் (1.71 ± 1.39), 83A: 476 (2.09 ± 1.38), மண்டேலப் (3.82 ± 1.42) மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (6.11 ± 1.29).
இல்லுமினா நோவாசெக் 6000 நெறிமுறை ஒரு மாதிரிக்கு சராசரியாக 40.5 Mread ஜோடிகளை (29.7 முதல் 54.4 Mreads வரை) அடைந்தது (துணை அட்டவணை S3). குறிப்பு வரிசையில் சீரமைப்பு மதிப்பெண்கள் 75.5% முதல் 88.6% வரை இருந்தன. உயிரியல் பிரதிகளுக்கு இடையிலான சோதனை மாறுபாடுகளுக்கு இடையிலான வாசிப்பு எண்ணிக்கை தரவுகளின் சராசரி தொடர்பு 0.812 முதல் 0.997 வரை இருந்தது (சராசரி 0.959). பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட 35,170 மரபணுக்களில், 2917 எந்த வெளிப்பாட்டையும் வெளிப்படுத்தவில்லை, மற்ற 4785 மரபணுக்கள் மிகக் குறைந்த அளவில் (அடிப்படை சராசரி < 5) வெளிப்படுத்தப்பட்டன. பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட 35,170 மரபணுக்களில், 2917 எந்த வெளிப்பாட்டையும் வெளிப்படுத்தவில்லை, மற்ற 4785 மரபணுக்கள் மிகக் குறைந்த அளவில் (அடிப்படை சராசரி < 5) வெளிப்படுத்தப்பட்டன. Из 35 170 ப்ரோனாலிசிரோவன்னிக் ஜெனோவ் 2917 இல்லை ப்ரோயாவலி எக்ஸ்பிரஸ்ஸி, அ ஓஸ்டால்னி 4785 ஜெனோவ் எக்ஸப்ரேசிஸ் незначительном уровне (базовое среднее <5). பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட 35,170 மரபணுக்களில், 2917 எந்த வெளிப்பாட்டையும் காட்டவில்லை, மீதமுள்ள 4785 மரபணுக்கள் மிகக் குறைந்த அளவில் (அடிப்படை சராசரி <5) வெளிப்படுத்தப்பட்டன.在分析的35,170 个基因中,2917 个没有表达,其他4785个基因的表达可以忽略不计(基本平均值< 5)。35,170 Из 35 170 ப்ரோனாலிசிரோவன்னிக் ஜெனோவ் 2917 இல்லை எக்ஸ்பிரஸ்சிரோவலிஸ், அ ஓஸ்டல்னி 4785 ஜெனோவ் எமிலிஸ் நெசன்ஸ் (பதவிகள் <5). பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட 35,170 மரபணுக்களில், 2917 வெளிப்படுத்தப்படவில்லை, மீதமுள்ள 4785 மரபணுக்கள் மிகக் குறைந்த வெளிப்பாட்டைக் கொண்டிருந்தன (அடிப்படை சராசரி <5).எனவே, பரிசோதனையின் போது வெளிப்படுத்தப்பட்டதாகக் கருதப்படும் மரபணுக்களின் எண்ணிக்கை (அடிப்படை சராசரி ≥ 5) 27,468 (78.1%) (துணை அட்டவணை S4).
முதல் நேரப் புள்ளியிலிருந்து, அனைத்து NLL வரிசைகளும் C. lupini (strain Col-08) தடுப்பூசிக்கு டிரான்ஸ்கிரிப்டோமை மறுநிரலாக்கம் செய்வதன் மூலம் பதிலளித்தன (அட்டவணை 1), இருப்பினும், வரிகளுக்கு இடையே குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் காணப்பட்டன. இதனால், எதிர்ப்புக் கோடு 83A:476 (Lanr1 மரபணுவைச் சுமந்து செல்லும்) முதல் நேரப் புள்ளியில் (6 hpi) குறிப்பிடத்தக்க டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் மறுநிரலாக்கத்தைக் காட்டியது, இந்த நேரப் புள்ளியில் மற்ற நேரப் புள்ளிகளுடன் ஒப்பிடும்போது தனிமைப்படுத்தப்பட்ட மேல் மற்றும் கீழ் மரபணுக்களின் எண்ணிக்கையில் 31-69 மடங்கு அதிகரிப்பு. கூடுதலாக, இந்த உச்சநிலை குறுகிய காலமாக இருந்தது, ஏனெனில் ஒரு சில மரபணுக்களின் வெளிப்பாடு இரண்டாவது நேரப் புள்ளியில் (12 hpi) கணிசமாக மாற்றப்பட்டது. சுவாரஸ்யமாக, ஒட்டு சோதனையில் அதிக அளவிலான எதிர்ப்பைக் காட்டிய போரெஜின், பரிசோதனையின் போது இவ்வளவு பெரிய டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனல் மறுநிரலாக்கத்திற்கு உட்படுத்தப்படவில்லை. இருப்பினும், போரெஜினுக்கும் 12 HPI இல் 83A:476 க்கும் வித்தியாசமாக வெளிப்படுத்தப்பட்ட மரபணுக்களின் எண்ணிக்கை (DEG) ஒரே மாதிரியாக இருந்தது. மண்டேலப் மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 இரண்டும் கடைசி நேரப் புள்ளியில் (48 லி/வி) DEG உச்சங்களைக் காட்டின, இது பாதுகாப்பு பதில்களில் ஒப்பீட்டளவில் தாமதத்தைக் குறிக்கிறது.
மற்ற அனைத்து வரிகளுடன் ஒப்பிடும்போது 6 HPI இல் C. lupini க்கு பதிலளிக்கும் விதமாக 83A:476 மிகப்பெரிய டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் மறு நிரலாக்கத்திற்கு உட்பட்டதால், இந்த நேரத்தில் காணப்பட்ட DEG களில் ~91% பரம்பரை சார்ந்தவை (படம் 1). இருப்பினும், ஆய்வு வரிகளுக்கு இடையேயான ஆரம்ப பதில்களில் சில ஒன்றுடன் ஒன்று இருந்தது, முறையே போரெஜின், மண்டேலப் மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 இல் 68.5%, 50.9% மற்றும் 52.6% DEG ஆகியவை குறிப்பிட்ட கால இடைவெளியில் 83A:476 இல் காணப்பட்டவற்றுடன் ஒன்றுடன் ஒன்று சேர்ந்தன. இருப்பினும், இந்த DEG கள் 83A:476 ஐப் பயன்படுத்தி தற்போது கண்டறியப்பட்ட அனைத்து DEG களிலும் ஒரு சிறிய பகுதியை மட்டுமே (0.97–1.70%) கொண்டிருந்தன. கூடுதலாக, அனைத்து வரிசைகளிலிருந்தும் 11 DEGகள் இந்த நேரத்தில் ஒத்திசைவாக இருந்தன (துணை அட்டவணைகள் S4-S6), தாவர பாதுகாப்பு பதில்களின் பொதுவான கூறுகள் உட்பட: லிப்பிட் பரிமாற்ற புரதம் (TanjilG_32225), எண்டோக்ளூகன்-1,3-β-குளுக்கோசைடு என்சைம் (TanjilG_23384), SAM22 (TanjilG_31528 மற்றும் TanjilG_31531) போன்ற இரண்டு மன அழுத்தத்தைத் தூண்டக்கூடிய புரதங்கள், அடிப்படை லேடெக்ஸ் புரதம் (TanjilG_32352), மற்றும் இரண்டு கிளைசின் நிறைந்த கட்டமைப்பு செல் சுவர் புரதங்கள் (TanjilG_19701 மற்றும் TanjilG_19702). 83A:476 மற்றும் 24 HPI (மொத்தம் 16-38% DEG) இல் போரெஜின் மற்றும் 48 HPI இல் மண்டேலப் மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 க்கு இடையில் ஒப்பீட்டளவில் அதிக ஒன்றுடன் ஒன்று இருந்தது (மொத்தம் 14-20% DEG).
கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி (போலந்து, 1999 இல் உள்ள வியர்ஜெனிஸில் உள்ள லூபின் வயல்களில் இருந்து பெறப்பட்ட கோல்-08 திரிபு) உடன் தடுப்பூசி போடப்பட்ட குறுகிய-இலைகள் கொண்ட லூபின் (NLL) கோடுகளில் வேறுபட்ட முறையில் வெளிப்படுத்தப்பட்ட மரபணுக்களின் எண்ணிக்கையை (DEG) காட்டும் வென் வரைபடம். பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட NLL கோடுகள்: 83A:476 (எதிர்ப்பு, Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்கிறது), போரெஜின் (எதிர்ப்பு, மரபணு பின்னணி தெரியவில்லை), மண்டேலப் (மிதமான எதிர்ப்பு, AnMan அல்லீலைச் சுமந்து செல்கிறது) மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படுகிறது). hpi என்ற சுருக்கமானது தடுப்பூசிக்குப் பிறகு மணிநேரங்களைக் குறிக்கிறது. வரைபடத்தை எளிமைப்படுத்த பூஜ்ஜிய மதிப்புகள் அகற்றப்பட்டுள்ளன.
6 hpi இல் அதிகமாக வெளிப்படுத்தப்பட்ட மரபணுக்களின் தொகுப்பு, நியமன R மரபணு களங்களின் இருப்புக்காக பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது (துணை அட்டவணை S7). இந்த ஆய்வு 83A:476 இல் மட்டுமே NBS-LRR களங்களைக் கொண்ட கிளாசிக் நோய் எதிர்ப்பு மரபணுக்களின் டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் தூண்டலை வெளிப்படுத்தியது. இந்த தொகுப்பில் ஒரு TIR-NBS-LRR மரபணு (tanjilg_05042), ஐந்து CC-NBS-LRR மரபணுக்கள் (tanjilg_06165, tanjilg_06162, tanjilg_22773, tanjilg_22640, மற்றும் tanjilg_16162), மற்றும் நான்கு NBS-LRRE (tanjilg_16162), அத்துடன் நான்கு NBS-LRR (tanjilg_16162) மற்றும் நான்கு NBS-LRR (TANJILG_16162) ஆகியவை இருந்தன. இந்த மரபணுக்கள் அனைத்தும் பாதுகாக்கப்பட்ட வரிசைகளில் அமைக்கப்பட்ட நியமன களங்களைக் கொண்டுள்ளன. NBS-LRR டொமைன் மரபணுக்களுக்கு கூடுதலாக, பல RLL கைனேஸ்கள் 6 hpi இல் செயல்படுத்தப்பட்டன, அதாவது போரெஜினில் ஒன்று (TanjilG_19877), மண்டேலப்பில் இரண்டு (TanjilG_07141 மற்றும் TanjilG_19877) மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (TanjilG_09014 மற்றும் TanjilG_10361) மற்றும் 83A 27:476 இல் இரண்டு.
C. lupini (strain Col-08) தடுப்பூசிக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக கணிசமாக மாற்றப்பட்ட வெளிப்பாட்டைக் கொண்ட மரபணுக்கள், மரபணு ஆன்டாலஜி (GO) செறிவூட்டல் பகுப்பாய்விற்கு உட்படுத்தப்பட்டன (துணை அட்டவணை S8). மிகவும் அதிகமாக பிரதிநிதித்துவப்படுத்தப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறை சொல் "GO:0006952 பாதுகாப்பு பதில்" ஆகும், இது 16 (நேர × கோடு) சேர்க்கைகளில் 6 இல் அதிக முக்கியத்துவம் வாய்ந்த (P மதிப்பு < 0.001) (படம் 2) தோன்றியது. மிகவும் அதிகமாக பிரதிநிதித்துவப்படுத்தப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறை சொல் "GO:0006952 பாதுகாப்பு பதில்" ஆகும், இது 16 (நேர × கோடு) சேர்க்கைகளில் 6 இல் அதிக முக்கியத்துவம் வாய்ந்த (P மதிப்பு < 0.001) (படம் 2) தோன்றியது. நைபோலி சாஸ்டோ பிரேஸ்மெர்னோ பிரட்ஸ்டாவ்லென்னிம் டெர்மினோம் பியோலாஜிக்செஸ்கோ ப்ரோசெஸ்ஸா பில் «GO: 0006952 அறிவிப்புகள், » появлялся в 6 из 16 (время × линия) கொம்பினசைஸ் வைசோகோய் சன்யாசிமோஸ்ட்யு (பிரதிநிதி பி <0,001) (ரிச. 2). மிகவும் அதிகமாக பிரதிநிதித்துவப்படுத்தப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறை சொல் 'GO:0006952 பாதுகாப்பு பதில்' ஆகும், இது அதிக முக்கியத்துவம் வாய்ந்த (P மதிப்பு < 0.001) 16 (நேரம் × பரம்பரை) சேர்க்கைகளில் 6 இல் தோன்றியது (படம் 2).最常被过度代表的生物过程术语是“GO:0006952 防御反应”,它出现在16个(时间×线)组合中的6 个中,具有高显着性(P 值< 0.001)(图2)。 மிகவும் பிரதிநிதித்துவ உயிரியல் செயல்முறை சொல் "GO:0006952 பாதுகாப்பு பதில்" ஆகும், இது 16 (时间×线) சேர்க்கைகளில் 6 இல் தோன்றுகிறது, அதிக முக்கியத்துவம் (P மதிப்பு < 0.001) (图2) உடன். நைபோலி சாஸ்டோ பிரேஸ்மெர்னோ ப்ரெட்ஸ்டாவ்லென்னிம் டெர்மினோம் பியோலாஜிசெஸ்கோ ப்ரோஷெஸ்ஸா பைல் «GO: 0006952 பாதுகாப்பு பதில்» в 6 из 16 комбинаций (время × லினி) மிகவும் அதிகமாக பிரதிநிதித்துவப்படுத்தப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறை சொல் 'GO:0006952 பாதுகாப்பு பதில்' ஆகும், இது 16 சேர்க்கைகளில் 6 இல் (நேர × கோடு) அதிக முக்கியத்துவத்துடன் (P மதிப்பு < 0.001) தோன்றியது (படம் 2).இந்த சொல் 83A இல் இரண்டு நேரப் புள்ளிகளில் மிகைப்படுத்தப்பட்டது: 476 மற்றும் போரெஜின் (6 மற்றும் 24 hpi) மற்றும் மண்டேலப் மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 இல் ஒரு நேரப் புள்ளியில் (முறையே 12 மற்றும் 6 hpi). இது ஒரு எதிர்பார்க்கப்பட்ட விளைவாகும், இது எதிர்ப்பு வரிகளின் பூஞ்சை எதிர்ப்பு பதிலை எடுத்துக்காட்டுகிறது. கூடுதலாக, 83A:476 "GO:0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறை" என்ற வார்த்தையால் குறிப்பிடப்படும் ஆக்ஸிஜனேற்ற வெடிப்புடன் தொடர்புடைய மரபணுக்களை விரைவாகத் தூண்டுவதன் மூலம் C. lupini க்கு பதிலளித்தது, இது ஒரு குறிப்பிட்ட பாதுகாப்பு பதிலைக் குறிக்கிறது, அதே நேரத்தில் போரெஜின் 'GO' என்ற வார்த்தையுடன் தொடர்புடைய குறிப்பிட்ட பாதுகாப்பு பதில்களை வெளிப்படுத்தியது. :0006950 மன அழுத்த பதில்”. மக்கள்தொகை 22660 இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றங்களை உள்ளடக்கிய கிடைமட்ட எதிர்ப்பு பதிலை செயல்படுத்தியது, அதிகப்படியான சொற்களின் எண்ணிக்கையை எடுத்துக்காட்டுகிறது “GO:0016104 டிரைடர்பீன் உயிரியக்கத் தொகுப்பு செயல்முறை” மற்றும் “GO:0006722 டிரைடர்பீன் வளர்சிதை மாற்ற செயல்முறை” (இரண்டு சொற்களும் ஒரே மரபணுக்களின் தொகுப்பைச் சேர்ந்தவை), GO கால செறிவூட்டல் பகுப்பாய்வின் முடிவுகளைக் கணக்கில் எடுத்துக்கொண்டால், மண்டேலப் எதிர்வினை நிலைத்தன்மை போரெஜின் மற்றும் மக்கள்தொகை 22660 க்கு இடையில் இருந்தது. கூடுதலாக, ஆரம்ப எதிர்வினை 83A:476 (6 hpi) மற்றும் தாமதமான எதிர்வினை மண்டேலப் மற்றும் மக்கள்தொகை 22660 ஆகியவை GO:0015979 'ஒளிச்சேர்க்கை' மற்றும் பிற தொடர்புடைய உயிரியல் செயல்முறைகளை உள்ளடக்கியது.
ஆந்த்ராக்ஸ் லூபின் (1999 இல் போலந்தின் வியர்ஜெனிஸில் உள்ள லூபின் வயல்களில் இருந்து பெறப்பட்ட Col-08 திரிபு) உடன் தடுப்பூசி போடப்பட்ட குறுகிய-இலைகள் கொண்ட லூபின் (NLL) டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் பதில்களின் போது வேறுபட்ட முறையில் வெளிப்படுத்தப்பட்ட மரபணுக்களின் குறிப்புகளில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறை மரபணு ஆன்டாலஜி சொற்கள் பெரிதும் மிகைப்படுத்தப்பட்டுள்ளன. பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட NLL கோடுகள்: 83A:476 (எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), போரெஜின் (எதிர்ப்பு, அறியப்படாத மரபணு பின்னணி), மண்டேலப் (மிதமான எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் AnMan அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்) மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடியது).
இந்த ஆய்வு ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பிற்கு பங்களிக்கும் மரபணுக்களை அடையாளம் காண்பதை நோக்கமாகக் கொண்டிருந்ததால், GO “GO: 0006952 தற்காப்பு பதில்கள்” மற்றும் “GO: 0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறைகள்” ஆகிய சொற்களுக்கு ஒதுக்கப்பட்ட மரபணுக்கள் கட்-ஆஃப்களுடன் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன, ஏனெனில் அடிப்படை என்பது குறைந்தபட்சம் ஒரு வரியுடன் ≥ 30 ஆகும். × புள்ளி நேரமானது log2 இன் புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க மதிப்புகளை இணைக்கிறது (மடிப்பு மாற்றம்). இந்த அளவுகோல்களை பூர்த்தி செய்யும் மரபணுக்களின் எண்ணிக்கை GO:0006952 க்கு 65 ஆகவும் GO:0055114 க்கு 524 ஆகவும் இருந்தது.
83A:476 GO:0006952 என்ற வார்த்தையுடன் குறிக்கப்பட்ட இரண்டு DEG சிகரங்களை வெளிப்படுத்தியது, முதலாவது ஒரு அங்குலத்திற்கு 6 மரபணுக்கள் (64 மரபணுக்கள், மேல் மற்றும் கீழ் ஒழுங்குமுறை) மற்றும் இரண்டாவது ஒரு அங்குலத்திற்கு 24 மரபணுக்கள் (15 மரபணுக்கள், மேல் ஒழுங்குமுறை மட்டும்). GO:0006952 ஒரே நேரத்தில் உச்சத்தை எட்டியது என்றும், ஆனால் குறைந்த DEG (11 மற்றும் 8) மற்றும் முன்னுரிமை செயல்படுத்தலுடன் என்றும் போரெஜின் காட்டியது. மண்டேலூப் 12 மற்றும் 48 HPI இல் GO:0006952 இன் இரண்டு சிகரங்களைக் காட்டியது, இரண்டும் 12 மரபணுக்களைக் கொண்டிருந்தன (முதலாவது செயல்படுத்தும் மரபணுக்களுடன், இரண்டாவது அடக்கும் மரபணுக்களுடன் மட்டுமே), அதே நேரத்தில் 6 HPI (13 மரபணுக்கள்) இல் உள்ள 22660 மக்கள் தொகை அதிகரிப்பு உச்ச ஒழுங்குமுறையின் அதிக ஆதிக்கத்தைக் கொண்டிருந்தது. இந்த சிகரங்களில் 96.4% GO:0006952 DEG ஒரே மாதிரியான பதிலை (மேலே அல்லது கீழ்) கொண்டிருந்தது என்பதைக் கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும், இது சம்பந்தப்பட்ட மரபணுக்களின் எண்ணிக்கையில் வேறுபாடுகள் இருந்தபோதிலும் பாதுகாப்பு பதில்களில் குறிப்பிடத்தக்க ஒன்றுடன் ஒன்று இருப்பதைக் குறிக்கிறது. GO:0006952 என்ற வார்த்தையுடன் தொடர்புடைய மிகப்பெரிய வரிசைமுறைகள், பட்டினி அழுத்த-தொடர்புடைய செய்தி புரதம் 22 (SAM22-போன்றவை) ஐ குறியீடாக்குகின்றன, இது வகுப்பு 10 நோய்க்கிருமி உருவாக்கம்-தொடர்புடைய புரதம் (PR-10) புரத கிளேடு மற்றும் கோர் புரத லேடெக்ஸ் ஆகியவற்றைச் சேர்ந்தது. ஒத்த (MLP-போன்ற) புரதம்) புரதம் (படம் 3). இரண்டு குழுக்களும் வெளிப்பாட்டின் தன்மை மற்றும் பதிலின் திசையில் வேறுபட்டன. SAM22-போன்ற புரதங்களை குறியீடாக்கும் மரபணுக்கள் ஆரம்ப நேர புள்ளிகளில் (6 அல்லது 12 hpi) நிலையான மற்றும் குறிப்பிடத்தக்க தூண்டலைக் காட்டின, மேலும் பரிசோதனையின் முடிவில் (48 hpi) பொதுவாக பதிலளிக்கவில்லை, அதே நேரத்தில் MLP-போன்ற புரதங்கள் 6 hpi இல் ஒருங்கிணைப்பைக் காட்டின. hpi. 83A:476 மற்றும் மண்டேலப் 48 hp/in இல், கிட்டத்தட்ட அனைத்து மற்ற தரவு புள்ளிகளும் பதிலளிக்கவில்லை. கூடுதலாக, SAM22 போன்ற புரத மரபணுக்களின் வெளிப்பாடு சுயவிவரங்களில் உள்ள வேறுபாடுகள் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பில் காணப்பட்ட மாறுபாட்டைத் தொடர்ந்து வந்தன, ஏனெனில் அதிக எதிர்ப்பு கோடுகள் இந்த மரபணுக்களை அதிக உணர்திறன் கொண்ட மரபணுக்களை விட கணிசமாக தூண்டும் நேர புள்ளிகளைக் கொண்டிருந்தன. மற்றொரு LlR18A/B போன்ற PR-10 மரபணு SAM22 போன்ற புரத மரபணுவுக்கு மிகவும் ஒத்த வெளிப்பாடு வடிவத்தைக் காட்டியது.
"GO:0006952 பாதுகாப்பு பதில்" என்ற உயிரியல் செயல்முறை வார்த்தையின் முக்கிய கூறுகள் மற்றும் Lanr1 மற்றும் AnMan அல்லீல்களின் வேட்பாளர் மரபணுக்களின் வெளிப்பாடு வடிவங்கள் அடையாளம் காணப்பட்டன. Log2 அளவுகோல், தடுப்பூசி போடப்பட்ட (Colletotrichum lupini, strain Col-08, லூபின் வயல்களிலிருந்து பெறப்பட்டது, Wizhenica, Poland, 1999) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (ஷாம்-தடுப்பூசி போடப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையேயான log2 மதிப்புகளை (மடிப்பு மாற்றம்) குறிக்கிறது. பின்வரும் குறுகிய இலை லூபின் கோடுகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: 83A:476 (எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), போரெஜின் (எதிர்ப்பு, மரபணு பின்னணி தெரியவில்லை), மண்டேலப் (மிதமான எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் AnMan அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (எதிர்ப்பு).
கூடுதலாக, RNA-seq வேட்பாளர் மரபணுக்கள் Lanr1 (TanjilG_05042) மற்றும் AnMan (TanjilG_12861) ஆகியவற்றின் வெளிப்பாடு சுயவிவரங்கள் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டன (படம் 3). TanjilG_05042 மரபணு முதல் முறை புள்ளியில் (6 hpi) மட்டுமே 83A:476 இல் குறிப்பிடத்தக்க பதிலை (செயல்படுத்தல்) காட்டியது, அதே நேரத்தில் TanjilG_12861 மண்டேலூப்பில் இரண்டு முறை புள்ளிகளில் மட்டுமே குறிப்பிடத்தக்கதாக இருந்தது: 6 hpi (கீழ் ஒழுங்குமுறை) மற்றும் 24 hpi (6 hpi). உடன்.). சரிசெய்யக்கூடியது).
GO:0055114 "ரெடாக்ஸ் செயல்முறை" என்ற வார்த்தையில் மிகவும் அதிகமாக வெளிப்படுத்தப்பட்ட மரபணுக்கள் சைட்டோக்ரோம் P450 புரதங்கள் மற்றும் பெராக்ஸிடேஸை குறியாக்கம் செய்யும் மரபணுக்கள் ஆகும் (படம் 4). 6 HPI இல் 83A:476 இலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட மாதிரிகளுக்கு, அதிகபட்ச அல்லது குறைந்தபட்ச log2 (மடிப்பு மாற்றம்) மதிப்புகள் (86.6% மரபணுக்களுக்கு) பொதுவாக தடுப்பூசி போடப்பட்ட மற்றும் கட்டுப்பாட்டு தாவரங்களுக்கு இடையில் காணப்பட்டன, இது தடுப்பூசி போடும் பாலினத்திற்கு இந்த மரபணு வகையின் உயர் பதிலை எடுத்துக்காட்டுகிறது. 83A:476 மிக முக்கியமான GO ஐக் காட்டியது: 0055114 DEG 6 hpi இல் (503 மரபணுக்கள்), மீதமுள்ள கோடுகள் 48 hpi இல் (போரெஜின், 31 மரபணுக்கள்; மண்டேலப், 85 மரபணுக்கள்; மற்றும் மக்கள் தொகை 22660, 78 மரபணுக்கள்)). GO:0055114 குடும்பத்தின் பெரும்பாலான மரபணுக்களில், தடுப்பூசிக்கு (செயல்படுத்துதல் மற்றும் தடுப்பு) இரண்டு வகையான பதில்கள் காணப்பட்டன. சுவாரஸ்யமாக, 48 hp இல் மண்டேலூப்பில் GO: 0055114 என்ற சொல்லுக்கு அடையாளம் காணப்பட்ட DEGகளில் 97.6% வரை. இந்த அவதானிப்புகள், கணிசமாக சிறிய அளவில் இருந்தபோதிலும் (அதாவது, பிறழ்ந்த ரெடாக்ஸ் மரபணுக்களின் எண்ணிக்கை, 85 எதிராக 503), மண்டேலூப்பின் ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு தாமதமான டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் பதில்களின் முறை 83A:476 இன் ஆரம்ப பதிலைப் போன்றது என்பதைக் குறிக்கிறது. போரெஜின் மற்றும் மக்கள்தொகை 22660 இல், இந்த ஒருங்கிணைப்பு முறையே 51.6% மற்றும் 75.6% இல் குறைவாக உள்ளது.
"GO:0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறை" என்ற உயிரியல் செயல்முறையின் முக்கிய கூறுகளின் வெளிப்பாட்டின் வடிவங்கள் வெளிப்படுத்தப்பட்டன. Log2 அளவுகோல், தடுப்பூசி போடப்பட்ட (Colletotrichum lupini, strain Col-08, லூபின் வயல்களிலிருந்து பெறப்பட்டது, Wizhenica, Poland, 1999) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (ஷாம்-தடுப்பூசி போடப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையேயான log2 மதிப்புகளை (மடிப்பு மாற்றம்) குறிக்கிறது. பின்வரும் குறுகிய இலை லூபின் கோடுகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: 83A:476 (எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), போரெஜின் (எதிர்ப்பு, மரபணு பின்னணி தெரியவில்லை), மண்டேலப் (மிதமான எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் AnMan அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (எதிர்ப்பு).
83A:476 C. lupini (strain Col-08) உடன் தடுப்பூசி போடுவதற்கான டிரான்ஸ்கிரிப்டோமிக் பதில்களில் GO:0015979 "ஒளிச்சேர்க்கை" என்ற சொல்லுக்குக் காரணமான மரபணுக்களின் ஒருங்கிணைந்த அமைதிப்படுத்தலும் மற்றும் பிற தொடர்புடைய உயிரியல் செயல்முறைகளும் அடங்கும் (படம் 5). இந்த GO:0015979 DEG தொகுப்பில் 105 மரபணுக்கள் இருந்தன, அவை 83A:476 இல் 6 hpi இல் கணிசமாக அடக்கப்பட்டன. இந்த துணைக்குழுவில், 22660 மக்கள்தொகையில் 48 HPI இல் 37 மரபணுக்களும் ஒரே நேரத்தில் 35 இல் மண்டேலப்பில் குறைக்கப்பட்டன, இதில் இரண்டு மரபணு வகைகளுக்கும் பொதுவான 19 DEGகள் அடங்கும். GO: 0015979 என்ற சொல்லுடன் தொடர்புடைய எந்த DEGகளும் எந்த கலவையிலும் (வரி x நேரம்) கணிசமாக செயல்படுத்தப்படவில்லை.
"GO:0015979 ஒளிச்சேர்க்கை" என்ற உயிரியல் செயல்முறையின் முக்கிய கூறுகளின் வெளிப்பாட்டின் வடிவங்கள் வெளிப்படுத்தப்பட்டன. Log2 அளவுகோல், தடுப்பூசி போடப்பட்ட (Colletotrichum lupini, strain Col-08, லூபின் வயல்களிலிருந்து பெறப்பட்டது, Wizhenica, Poland, 1999) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (ஷாம்-தடுப்பூசி போடப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையேயான log2 மதிப்புகளை (மடிப்பு மாற்றம்) குறிக்கிறது. பின்வரும் குறுகிய இலை லூபின் கோடுகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: 83A:476 (எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), போரெஜின் (எதிர்ப்பு, மரபணு பின்னணி தெரியவில்லை), மண்டேலப் (மிதமான எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் AnMan அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (எதிர்ப்பு).
வேறுபட்ட வெளிப்பாடு பகுப்பாய்வின் முடிவுகளின் அடிப்படையில் மற்றும் நோய்க்கிருமி பூஞ்சைகளுக்கு எதிரான பாதுகாப்பு பதில்களில் ஈடுபட்டுள்ளதாகக் கருதப்படும், இந்த ஏழு மரபணுக்களின் தொகுப்பு நிகழ்நேர PCR (துணை அட்டவணை S9) மூலம் வெளிப்பாடு சுயவிவரங்களை அளவிடுவதற்குத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டது.
கட்டுப்பாட்டு (மிமிக்) தாவரங்களுடன் ஒப்பிடும்போது (துணை அட்டவணைகள் S10, S11) ஆய்வு செய்யப்பட்ட அனைத்து கோடுகள் மற்றும் நேரப் புள்ளிகளிலும், TanjilG_10657 என்ற உத்தேச புரத மரபணு கணிசமாக தூண்டப்பட்டது. கூடுதலாக, TanjilG_10657 இன் வெளிப்பாடு சுயவிவரம் அனைத்து கோடுகளுக்கும் சோதனையின் போது அதிகரிக்கும் போக்கைக் காட்டியது. மக்கள்தொகை 22660, 24 HPI இல் 114 மடங்கு செயல்படுத்தல் மற்றும் மிக உயர்ந்த ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு நிலை (4.4 ± 0.4) உடன் தடுப்பூசிக்கு TanjilG_10657 இன் மிக உயர்ந்த உணர்திறனைக் காட்டியது (படம் 6a). PR10 LlR18A புரத மரபணு TanjilG_27015 அனைத்து கோடுகள் மற்றும் நேரப் புள்ளிகளிலும் செயல்படுத்தலைக் காட்டியது, பெரும்பாலான தரவு புள்ளிகளில் புள்ளிவிவர முக்கியத்துவத்துடன் (படம் 6b). TanjilG_10657 ஐப் போலவே, TanjilG_27015 இன் மிக உயர்ந்த ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு நிலை 22660 தடுப்பூசி போடப்பட்ட மக்கள்தொகையில் 24 HPI (19.5 ± 2.4) இல் காணப்பட்டது. TanjilG_04706 என்ற அமில எண்டோகிடினேஸ் மரபணு போரெஜின் 6 hpi (படம் 6c) தவிர அனைத்து வரிகளிலும் மற்றும் அனைத்து நேர புள்ளிகளிலும் கணிசமாக உயர்ந்தது. இது முதல் நேர புள்ளியில் (6 HPI) 83A:476 இல் (10.5 மடங்கு) வலுவாக தூண்டப்பட்டது மற்றும் பிற வரிகளில் (6.6-7.5 மடங்கு) மிதமாக அதிகரித்தது. பரிசோதனையின் போது, ​​TanjilG_04706 இன் வெளிப்பாடு 83A:476 மற்றும் போரெஜினில் இதே நிலைகளில் இருந்தது, அதே நேரத்தில் மண்டேலப் மற்றும் மக்கள்தொகை 22660 இல் இது கணிசமாக அதிகரித்து, ஒப்பீட்டளவில் அதிக மதிப்புகளை எட்டியது (முறையே 5.9 ± 1.5 மற்றும் 6.2 ± 1.5). எண்டோக்ளூக்கன்-1,3-β-குளுக்கோசிடேஸ் போன்ற மரபணு டான்ஜில்ஜி_23384, மக்கள் தொகை 22660 (படம் 6d) தவிர அனைத்து வரிகளிலும் முதல் இரண்டு நேர புள்ளிகளில் (6 மற்றும் 12 ஹெச்பிஐ) அதிக செயல்பாட்டைக் காட்டியது. டான்ஜில்ஜி_23384 இன் மிக உயர்ந்த ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு நிலைகள் மண்டேலப்பில் (2.7 ± 0.3) மற்றும் 83A:476 (1.5 ± 0.1) இரண்டாவது நேர புள்ளியில் (12 ஹெச்பிஐ) காணப்பட்டன. 24 ஹெச்பிஐயில், டான்ஜில்ஜி_23384 வெளிப்பாடு அனைத்து ஆய்வு செய்யப்பட்ட வரிகளிலும் ஒப்பீட்டளவில் குறைவாக இருந்தது (0.04 ± 0.009 முதல் 0.44 ± 0.12 வரை).
அளவு PCR மூலம் வெளிப்படுத்தப்பட்ட தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மரபணுக்களின் (ag) வெளிப்பாடு சுயவிவரங்கள். 6, 12 மற்றும் 24 எண்கள் தடுப்பூசி போட்ட சில மணிநேரங்களைக் குறிக்கின்றன. LanDExH7 மற்றும் LanTUB6 மரபணுக்கள் இயல்பாக்கத்திற்கும் LanTUB6 இடை-தொடர் அளவுத்திருத்தத்திற்கும் பயன்படுத்தப்பட்டன. பிழைப் பட்டைகள் மூன்று உயிரியல் பிரதிகளின் அடிப்படையில் நிலையான விலகலைக் குறிக்கின்றன, ஒவ்வொன்றும் மூன்று தொழில்நுட்ப பிரதிகளின் சராசரியாகும். போலந்தின் வியர்செனிகாவில் உள்ள லூபின் புலத்திலிருந்து 1999 இல் பெறப்பட்ட தடுப்பூசி (கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி, ஸ்ட்ரெய்ன் கோல்-08) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி-தடுப்பூசி) தாவரங்களுக்கு இடையிலான வெளிப்பாடு நிலைகளில் உள்ள வேறுபாடுகளின் புள்ளிவிவர முக்கியத்துவம் தரவு புள்ளிகளுக்கு மேலே குறிக்கப்பட்டுள்ளது (*P மதிப்பு < 0.05, **P மதிப்பு ≤ 0.01, ***P மதிப்பு ≤ 0.001). போலந்தின் வியர்செனிகாவில் உள்ள லூபின் புலத்திலிருந்து 1999 இல் பெறப்பட்ட தடுப்பூசி (கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி, ஸ்ட்ரெய்ன் கோல்-08) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (போலி-தடுப்பூசி) தாவரங்களுக்கு இடையிலான வெளிப்பாடு நிலைகளில் உள்ள வேறுபாடுகளின் புள்ளிவிவர முக்கியத்துவம் தரவு புள்ளிகளுக்கு மேலே குறிக்கப்பட்டுள்ளது (*P மதிப்பு < 0.05, **P மதிப்பு ≤ 0.01, ***P மதிப்பு ≤ 0.001). ஸ்டாட்டிஸ்கயா பிரசிமோஸ்ட் ரஸ்லிச்சி மற்றும் உரோவ்னியா எக்ஸ்பிரஸ்ஸி மெஷடு இனோகுலரிரோவன்னிமி (கோலெட்டோட்ரிகம் லூபினி, ஷோல்ப்819 GA dannыh (*значение P <0,05, **значение P ≤ 0,01, ***значение பி ≤ 0,001). 1999 ஆம் ஆண்டு போலந்தின் வியர்ஜெனிஸில் உள்ள ஒரு லூபின் வயலில் இருந்து தடுப்பூசி போடப்பட்ட (கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி, ஸ்ட்ரெய்ன் கோல்-08) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (ஷாம்-தடுப்பூசி போடப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையிலான வெளிப்பாடு நிலைகளில் புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் தரவு புள்ளிகளுக்கு மேலே குறிப்பிடப்பட்டுள்ளன (*P மதிப்பு < 0.05, **P-மதிப்பு ≤ 0.01, ***P-மதிப்பு ≤ 0.001).接种 (கொலெட்டோட்ரிகம் lupini, Col-08株, 1999年从波兰 Wierzenica的羽扇豆田获得)和对照(模拟接种)植物之间表达水平差异的统计学显着性标记在着性标记在湕渍0.05, **P 值≤ 0.01, ***P 值≤ 0.001).接种 (colletotrichum lupini , color-08 株 , 1999 மேலும் உரோவ்னியா எக்ஸ்பிரஸ்ஸி மெஷடு இனோகுலிரோவன்னிமி (கோலெட்டோட்ரிகம் லூபினி, ஷூட்டம், கோல்-08 பொலி லிபினா வ வர்ஜெனிசே, போல்ஷா, 1999 ஜி.) மற்றும் கான்ட்ரோலிமி டோச்காமி данных (* значение P <0,05, ** P-значение ≤ 0,01, ***P-значение ≤ 0,001). 1999 ஆம் ஆண்டு போலந்தின் வெர்ஷெனிஸில் உள்ள லூபின் வயல்களில் இருந்து தடுப்பூசி போடப்பட்ட (கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி, ஸ்ட்ரெய்ன் கோல்-08) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (ஷாம்-தடுப்பூசி போடப்பட்ட) தாவரங்களுக்கு இடையிலான வெளிப்பாடு நிலைகளில் புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் தரவு புள்ளிகளுக்கு மேலே குறிப்பிடப்பட்டுள்ளன (*P மதிப்பு < 0.05 , **P-மதிப்பு ≤ 0.01, ***P-மதிப்பு ≤ 0.001).பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட NLL கோடுகள்: 83A:476 (எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டது, ஹோமோசைகஸ் Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்கிறது), மண்டேலப் (மிதமான எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டது, ஹோமோசைகஸ் AnMan அல்லீலைச் சுமந்து செல்கிறது), போரெஜின் (எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டது, அறியப்படாத மரபணு பின்னணி) மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டது).
Lanr1 லோகஸில் உள்ள வேட்பாளர் மரபணு TanjilG_05042, RNA-seq ஆய்வுகளிலிருந்து பெறப்பட்ட சுயவிவரங்களிலிருந்து குறிப்பிடத்தக்க வகையில் வேறுபட்ட வெளிப்பாடு வடிவத்தைக் காட்டியது (படம் 6e). இந்த மரபணுவின் குறிப்பிடத்தக்க செயல்படுத்தல் மண்டேலப் மற்றும் 22660 மக்கள்தொகையில் (முறையே 39.7 மற்றும் 11.7 மடங்கு வரை) காணப்பட்டது, இதன் விளைவாக ஒப்பீட்டளவில் அதிக வெளிப்பாடு நிலைகள் (முறையே 1.4 ± 0.14 மற்றும் 7.2 ± 1.3 வரை) ஏற்பட்டன. 83A:476, TanjilG_05042 மரபணுவின் (3.8 மடங்கு வரை) சில கூடுதல் ஒழுங்குமுறைகளையும் வெளிப்படுத்தியது, இருப்பினும், அடையப்பட்ட ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு நிலைகள் (0.044 ± 0.002) மண்டேலப் மற்றும் 22660 மக்கள்தொகையில் காணப்பட்டதை விட 30 மடங்கு குறைவாக இருந்தன. qPCR ஆல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டதில், போலி-தடுப்பூசி (கட்டுப்பாட்டு) வகைகளில் மரபணு வகைகளுக்கு இடையேயான வெளிப்பாடு நிலைகளில் குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் காணப்பட்டன, இது 22660 மற்றும் 83A:476 மக்கள்தொகைகளுக்கு இடையே 58 மடங்கு வித்தியாசத்தை எட்டியது, அதே போல் 22660 மற்றும் 22660 மக்கள்தொகைகளுக்கு இடையேயும் இருந்தது. போரெஜின் மற்றும் மண்டலப் இடையே இரண்டு மடங்கு வித்தியாசம் அடையப்பட்டது.
83A:476 இல் தடுப்பூசிக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக AnMan லோகஸில் உள்ள வேட்பாளர் மரபணு, TanjilG_12861, செயல்படுத்தப்பட்டது மற்றும் மண்டேலப், 22660 மக்கள்தொகையில் நடுநிலையாக இருந்தது, மேலும் போரெஜினில் குறைக்கப்பட்டது (படம் 6f). TanjilG_12861 மரபணுவின் ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு தடுப்பூசி போடப்பட்ட 83A: 476 இல் மிக அதிகமாக இருந்தது (0.14±0.01). 17.4 kDa வகுப்பு I வெப்ப அதிர்ச்சி புரத மரபணு TanjilG_05080 HSP17.4 அனைத்து ஆய்வு செய்யப்பட்ட விகாரங்கள் மற்றும் நேர புள்ளிகளிலும் குறைந்த ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு நிலைகளைக் காட்டியது (படம் 6g). 22660 மக்கள்தொகையில் 24 HPI இல் அதிகபட்ச மதிப்பு காணப்பட்டது (0.14 ± 0.02, தடுப்பூசிக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக எட்டு மடங்கு அதிகரிப்பு).
மரபணு வெளிப்பாடு சுயவிவரங்களின் ஒப்பீடு (படம் 7) TanjilG_10657 மற்றும் நான்கு பிற மரபணுக்களுக்கு இடையே ஒரு உயர் தொடர்பை வெளிப்படுத்தியது: TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.80), மற்றும் TanjilG_04706 (r = 0.79). இத்தகைய முடிவுகள் பாதுகாப்பு பதில்களின் போது இந்த மரபணுக்களின் இணை-ஒழுங்குமுறையைக் குறிக்கலாம். TanjilG_12861 மற்றும் TanjilG_23384 மரபணுக்கள் மற்ற மரபணுக்களுடன் ஒப்பிடும்போது குறைந்த பியர்சன் தொடர்பு குணக மதிப்புகளுடன் (முறையே 0.08 முதல் 0.43 மற்றும் -0.19 முதல் 0.28 வரை) வெவ்வேறு வெளிப்பாடு சுயவிவரங்களைக் காட்டின.
மரபணு வெளிப்பாடு சுயவிவரங்களுக்கு இடையிலான தொடர்புகள் அளவு PCR ஐப் பயன்படுத்தி கண்டறியப்பட்டன. பின்வரும் குறுகிய இலை லூபின் கோடுகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: 83A:476 (எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), மண்டேலப் (மிதமான எதிர்ப்பு, ஹோமோசைகஸ் AnMan அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும்), போரெஜின் (எதிர்ப்பு, மரபணு பின்னணி தெரியவில்லை), மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 (எதிர்ப்பு). தடுப்பூசி போடப்பட்ட (1999 இல் போலந்தின் வியர்ஜெனிஸில் உள்ள லூபின் வயல்களில் இருந்து பெறப்பட்ட கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி, ஸ்ட்ரெய்ன் கோல்-08) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (ஷாம்-இனாகுலேட்டட்) தாவரங்கள் உட்பட மூன்று நேர புள்ளிகள் (தடுப்பூசி போடப்பட்ட 6, 12 மற்றும் 24 மணிநேரங்களுக்குப் பிறகு) கணக்கிடப்பட்டன. அளவுகோல் பியர்சன் தொடர்பு குணகத்தின் மதிப்பைக் காட்டுகிறது.
ஒரு அங்குலத்திற்கு 6 குதிரைத்திறன் என்ற விகிதத்தில் பெறப்பட்ட தரவுகளின் அடிப்படையில், ஆரம்பகால பாதுகாப்பு பதில்களில் கவனம் செலுத்த தடுப்பூசி போடப்பட்ட மற்றும் கட்டுப்பாட்டு ஆலைகளை ஒப்பிட்டு அடையாளம் காணப்பட்ட 9981 DEG இல் WGCNA செய்யப்பட்டது (துணை அட்டவணை S12). மரபணு வகைகளுக்கும் சோதனை மாறுபாடுகளுக்கும் இடையில் தொடர்புடைய (நேர்மறை அல்லது எதிர்மறை) வெளிப்பாடு சுயவிவரங்களுடன் இருபத்தி இரண்டு மரபணு தொகுதிகள் (கொத்துகள்) காணப்பட்டன. சராசரியாக, மரபணு வெளிப்பாடு அளவுகள் 83A:476 > மண்டேலப் > போரேஜின் > மக்கள் தொகை 22660 வரிசையில் குறைந்து கொண்டிருந்தன (இருப்பினும், இரண்டு வகைகளிலும், கட்டுப்பாட்டு ஆலைகளில் இந்தப் போக்கு வலுவாக இருந்தது). சராசரியாக, மரபணு வெளிப்பாடு அளவுகள் 83A:476 > மண்டேலப் > போரேஜின் > மக்கள் தொகை 22660 வரிசையில் குறைந்து கொண்டிருந்தன (இருப்பினும், இரண்டு வகைகளிலும், கட்டுப்பாட்டு ஆலைகளில் இந்தப் போக்கு வலுவாக இருந்தது). போர்யாட்கே 83A:476 > மாண்டலப் > போரேஜின் > மக்கள் தொகை 22660 டெண்டன்ஷியா பைல சிலினே யூ காண்ட்ரோல்னிக் ராஸ்டெனிய்). சராசரியாக, மரபணு வெளிப்பாடு அளவுகள் 83A:476 > மண்டேலப் > போரேஜின் > மக்கள் தொகை 22660 என்ற வரிசையில் குறைந்துள்ளன (இருப்பினும், இரண்டு வகைகளிலும், கட்டுப்பாட்டு தாவரங்களில் இந்தப் போக்கு வலுவாக இருந்தது).平均而言,基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > மக்கள் தொகை 22660的顺序下陌平均 而 言 , 基因 水平 按 按 83a: 476> mandelup> boregin> மக்கள் தொகை 22660 的 顺序 下降在 植物 நீங்கள் 更.... ராடு 83A:476 > மாண்டலப் > போரேஜின் > மக்கள் தொகை 22660 была сильнее у kontroльных растений). சராசரியாக, 83A:476 > மண்டேலப் > போரெஜின் > மக்கள் தொகை 22660 தொடரில் மரபணு வெளிப்பாடு அளவுகள் குறைந்துள்ளன (இருப்பினும், இரண்டு வகைகளிலும், கட்டுப்பாட்டு தாவரங்களில் இந்தப் போக்கு வலுவாக இருந்தது).தடுப்பூசி மரபணு வெளிப்பாட்டை மேம்படுத்தியது, குறிப்பாக தொகுதிகள் 18, 19, 14, 6 மற்றும் 1 (விளைவின் இறங்கு வரிசையில்), எதிர்மறை ஒழுங்குமுறை (எ.கா. தொகுதிகள் 9 மற்றும் 20) அல்லது நடுநிலை விளைவுகளுடன் (எ.கா. தொகுதிகள் 11, 22, 8 மற்றும் 13). GO கால செறிவூட்டல் பகுப்பாய்வு (துணை அட்டவணை S13), தடுப்பூசி போடப்பட்ட தொகுதிக்கு (18) அதிகபட்ச செயல்படுத்தலுடன் “GO: 0006952 பாதுகாப்பு பதில்கள்” வெளிப்படுத்தியது, இதில் qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 மற்றும் TanjilG_27015) ஆல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட மரபணுக்கள் அடங்கும், அத்துடன் பல தடுப்பூசி போடப்பட்ட மிகவும் அடக்கப்பட்ட ஒளிச்சேர்க்கை தொகுதிகள் (9). தொகுதி 18 செறிவுப்படுத்தி (படம் 8) PR-10 போன்ற LlR18B புரதத்தை குறியாக்கம் செய்யும் TanjilG_26536 மரபணுவாகவும், தொகுதி 9 செறிவுப்படுத்தி ஒளிச்சேர்க்கை II PsbQ புரதத்தை குறியாக்கம் செய்யும் TanjilG_28955 மரபணுவாகவும் அடையாளம் காணப்பட்டது. தொகுதி 22 (படம் 9) இல் ஒரு வேட்பாளர் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணு Lanr1, TanjilG_05042 காணப்பட்டது, மேலும் இது TanjilG_01212 மையத்தைக் கொண்ட “GO:0044260 செல்லுலார் மேக்ரோமாலிகுலர் வளர்சிதை மாற்ற செயல்முறைகள்” மற்றும் “GO:0006355 டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனல் ஒழுங்குமுறை, டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட்டிங்” ஆகிய சொற்களுடன் தொடர்புடையது. மரபணு வெப்ப அழுத்த டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணி A-4a (HSFA4a) ஐ குறியாக்கம் செய்கிறது.
"GO: 0006952 பாதுகாப்பு மறுமொழிகள்" என்ற மிகைப்படுத்தப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறை சொற்களைக் கொண்ட தொகுதிகளின் மரபணு இணை வெளிப்பாட்டின் எடையுள்ள நெட்வொர்க் பகுப்பாய்வு. qPCR ஆல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட நான்கு மரபணுக்களை முன்னிலைப்படுத்த லிகேஷன் எளிமைப்படுத்தப்பட்டது (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 மற்றும் TanjilG_27015).
"GO: 0006355: டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனல் ஒழுங்குமுறை, டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட்டிங்" என்ற மிகைப்படுத்தப்பட்ட உயிரியல் செயல்முறை வார்த்தையுடன் கூடிய ஒரு தொகுதியின் மரபணு இணை வெளிப்பாட்டின் எடையுள்ள நெட்வொர்க் பகுப்பாய்வு மற்றும் ஒரு வேட்பாளர் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணு Lanr1 TanjilG_05042 ஐ சுமந்து செல்கிறது. TanjilG_05042 மரபணுவையும் மத்திய TanjilG_01212 மரபணுவையும் தனிமைப்படுத்த லிகேஷன் எளிமைப்படுத்தப்பட்டது.
ஆஸ்திரேலியாவில் சேகரிக்கப்பட்ட ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்புத் திரையிடல், ஆரம்பத்தில் வெளியிடப்பட்ட சாகுபடிகளில் பெரும்பாலானவை எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடியவை என்பதைக் காட்டியது; கல்யா, கோரோமப் மற்றும் மண்டேலப் ஆகியவை மிதமான எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டவை என்று விவரிக்கப்பட்டுள்ளன, அதே நேரத்தில் வோங்கா, டான்ஜில் மற்றும் 83A:476 ஆகியவை அதிக எதிர்ப்புத் திறன் கொண்டவை என்று விவரிக்கப்பட்டுள்ளன26,27,31. அதே எதிர்ப்பு அலீலைக் கொண்டிருந்தன, இது Lanr1 என நியமிக்கப்பட்டது, மேலும் கோரமப் மற்றும் மண்டேலப் ஆகியவை AnMan10, 26, 39 என நியமிக்கப்பட்ட வேறுபட்ட அலீலைக் கொண்டிருந்தன, அதே நேரத்தில் கல்யா வேறு அலீலைக் கடத்தியது. , Lanr2. ஜெர்மனியில் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பிற்கான திரையிடல், Lanr1 ஐத் தவிர வேறு ஒரு வேட்பாளர் அலீலுடன் Bo7212 எதிர்ப்புத் தொடரை அடையாளம் காண வழிவகுத்தது, இது LanrBo36 என நியமிக்கப்பட்டது.
எங்கள் ஆய்வு, சோதிக்கப்பட்ட ஜெர்ம்பிளாஸில் Lanr1 அல்லீலின் மிகக் குறைந்த அதிர்வெண் (சுமார் 6%) இருப்பதை வெளிப்படுத்தியது. இந்த அவதானிப்பு Anseq3 மற்றும் Anseq4 குறிப்பான்களைப் பயன்படுத்தி கிழக்கு ஐரோப்பிய ஜெர்ம்பிளாஸைத் திரையிடுவதன் முடிவுகளுடன் ஒத்துப்போகிறது, இது Lanr1 அல்லீல் இரண்டு பெலாரஷ்ய வரிகளில் மட்டுமே இருப்பதைக் காட்டியது. இது Lanr1 அல்லீல் இன்னும் உள்ளூர் இனப்பெருக்கத் திட்டங்களால் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படவில்லை என்பதைக் குறிக்கிறது, ஆஸ்திரேலியாவைப் போலல்லாமல், இது மார்க்கர்-உதவி இனப்பெருக்கத்திற்கான முக்கிய அல்லீல்களில் ஒன்றாகும். ஆஸ்திரேலிய அறிக்கையுடன் ஒப்பிடும்போது ஐரோப்பிய கள நிலைமைகளில் Lanr1 அல்லீல் வழங்கும் குறைந்த அளவிலான எதிர்ப்பின் காரணமாக இது இருக்கலாம். கூடுதலாக, ஆஸ்திரேலியாவில் அதிக மழை பெய்யும் பகுதிகளில் ஆந்த்ராக்னோஸின் ஆய்வுகள், Lanr1 அல்லீலால் மத்தியஸ்தம் செய்யப்பட்ட எதிர்ப்பு பதில்கள் நோய்க்கிருமியின் வளர்ச்சி மற்றும் விரைவான வளர்ச்சிக்கு சாதகமான வானிலை நிலைகளில் பயனுள்ளதாக இருக்காது என்பதைக் காட்டுகின்றன. உண்மையில், தற்போதைய ஆய்வில், Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும் மரபணு வகைகளிலும் ஆந்த்ராக்னோஸின் சில அறிகுறிகள் காணப்பட்டன, இது C. lupini இன் வளர்ச்சிக்கு உகந்த நிலைமைகளின் கீழ் எதிர்ப்பு மறைந்து போகக்கூடும் என்பதைக் குறிக்கிறது. கூடுதலாக, Lanr1 லோகஸிலிருந்து தோராயமாக 1 cM தொலைவில் உள்ள Anseq3 மற்றும் Anseq4 குறிப்பான்களின் இருப்பின் தவறான நேர்மறை விளக்கங்கள் 28,30,43 சாத்தியமாகும்.
எங்கள் ஆய்வில், Lanr1 அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும் 83A:476, முதல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட நேரப் புள்ளியில் (6 hpi) பெரிய அளவிலான டிரான்ஸ்கிரிப்டோம் மறுநிரலாக்கம் மூலம் C. lupini தடுப்பூசிக்கு பதிலளித்தது, அதே நேரத்தில் Mandelup இல், AnMan அல்லீலைச் சுமந்து செல்லும், டிரான்ஸ்கிரிப்டோமிக் பதில்கள் மிகவும் பின்னர் காணப்பட்டன. (24 முதல் 48 hp வரை). பாதுகாப்பு பதில்களில் இந்த தற்காலிக மாறுபாடுகள் நோய் அறிகுறிகளில் உள்ள வேறுபாடுகளுடன் தொடர்புடையவை, எதிர்ப்பிற்கு வெற்றிகரமான பதிலுக்கான ஆரம்பகால நோய்க்கிருமி அங்கீகாரத்தின் முக்கியத்துவத்தை எடுத்துக்காட்டுகின்றன. தாவர திசுக்களைப் பாதிக்க, ஆந்த்ராக்ஸ் வித்துகள் முளைப்பு, செல் பிரிவு மற்றும் ஒரு அப்ரெசோரியம் உருவாக்கம் உள்ளிட்ட ஹோஸ்ட் மேற்பரப்பில் பல வளர்ச்சி நிலைகளைக் கடந்து செல்ல வேண்டும். ஒரு துணை என்பது ஹோஸ்டின் மேற்பரப்பில் இணைக்கப்பட்டு ஹோஸ்ட் திசுக்களில் ஊடுருவலை எளிதாக்கும் ஒரு தொற்று அமைப்பாகும். இவ்வாறு, பட்டாணி சாற்றில் உள்ள C. gloeosporiodes இன் வித்துகள் 75-90 நிமிடங்கள் அடைகாத்த பிறகு கருவின் முதல் பிரிவையும், 90-120 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு ஒரு கிருமி குழாய் உருவாவதையும், 4 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு அடக்குவதையும் காட்டியது 45 . மாம்பழ சி. குளோயோஸ்போரியாய்டுகள் 3 மணி நேர அடைகாத்தலுக்குப் பிறகு 40% க்கும் அதிகமான கூம்பு முளைப்பையும், 4 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு சுமார் 20% அப்ரெசர்களை உருவாக்குவதையும் காட்டின. சி. குளோயோஸ்போரியாய்டுகளின் வைரஸ்-தொடர்புடைய CAP20 மரபணு, வெண்ணெய் மேற்பரப்பு மெழுகில் 3.5 மணி நேரம் அடைகாத்த பிறகு எபிஃபைட்-உருவாக்கும் கொனிடியாவில் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனல் செயல்பாட்டைக் காட்டியது. 4 மணி 46 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு அதிக செறிவுள்ள CAP20 புரதத்துடன். இதேபோல், சி. ட்ரைஃபோலியில் மெலனின் உயிரியல் தொகுப்பு மரபணுக்களின் செயல்பாடு 2 மணி நேர அடைகாத்தலின் போது தூண்டப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து 1 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு ஒரு அப்ரெசோரியம் உருவாக்கப்பட்டது. இலை திசுக்களின் ஆய்வுகள், சி. அக்யூடேட்டத்துடன் தடுப்பூசி போடப்பட்ட ஸ்ட்ராபெர்ரிகள் 8 hpi இல் முதல் அடக்கத்தைக் கொண்டுள்ளன, அதே நேரத்தில் சி. கோகோட்களுடன் தடுப்பூசி போடப்பட்ட தக்காளிகள் 4 hpi இல் முதல் அடக்கத்தைக் கொண்டுள்ளன. கோலெட்டோட்ரிகம் எஸ்பிபி தொற்று செயல்முறையின் நேர அளவோடு பெரும்பாலும் ஒத்துப்போகின்றன. 83A:476 க்கான விரைவான பாதுகாப்பு பதில்கள் இந்த வரிசையில் தாவர எதிர்ப்பு மற்றும் விளைவு-தூண்டப்பட்ட நோய் எதிர்ப்பு சக்தி (ETI) மரபணுக்களின் ஈடுபாட்டைக் குறிக்கின்றன, அதே நேரத்தில் மண்டேலப்பின் தாமதமான பதில்கள் நுண்ணிய-தொடர்புடைய மூலக்கூறு முறை-தூண்டப்பட்ட நோய் எதிர்ப்பு சக்தி (MTI) கருதுகோளை ஆதரிக்கின்றன 50. 83A: 476 மற்றும் மண்டேலப்பிற்கான ஆரம்ப பதில்கள். தாமதமான பதிலில் மேல் அல்லது கீழ்-ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட மரபணுக்களுக்கு இடையிலான பகுதி ஒன்றுடன் ஒன்று இந்த கருத்தை ஆதரிக்கிறது, ஏனெனில் ETI பெரும்பாலும் துரிதப்படுத்தப்பட்ட மற்றும் மேம்படுத்தப்பட்ட MTI பதிலைக் குறிக்கிறது, இது தொற்று ஏற்பட்ட இடத்தில் திட்டமிடப்பட்ட செல் இறப்பில் முடிவடைகிறது, இது அனாபிலாக்டிக் அதிர்ச்சி 51,52 என அழைக்கப்படுகிறது.
அதிகமாக பிரதிநிதித்துவப்படுத்தப்பட்ட ஜீன் ஆன்டாலஜி GO:0006952 "பாதுகாப்பு பதில்" என்ற சொல்லுக்குக் காரணமான பெரும்பாலான மரபணுக்கள், மன அழுத்தத்தால் தூண்டப்பட்ட உண்ணாவிரத செய்தி 22 புரதத்தின் 11 ஹோமோலாக்குகள் (SAM22 ஐப் போன்றது) மற்றும் ஏழு முக்கிய லேடெக்ஸ் புரத-போன்றவை (MLPகள்) ஆகும். -போன்ற புரதங்கள் 31, 34, 43 மற்றும் 423 வரிசை ஒற்றுமையைக் காட்டின. SAM22 போன்ற மரபணுக்கள் நீண்ட காலம் நீடித்த குறிப்பிடத்தக்க செயல்பாட்டைக் காட்டின, அதிகரித்த ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பைக் காட்டின (83A:476 மற்றும் போரெஜின்). இருப்பினும், MLP போன்ற மரபணுக்கள் வேட்பாளர் எதிர்ப்பு அல்லீலைக் கொண்ட கோடுகளில் மட்டுமே குறைக்கப்பட்டன (6 hpi இல் 83A:476/Lanr1 மற்றும் 24 hpi இல் Mandelup/AnMan). அடையாளம் காணப்பட்ட அனைத்து SAM22 போன்ற ஹோமோலாக்குகளும் தோராயமாக 105 kb வரை பரவியுள்ள மரபணு கிளஸ்டரிலிருந்து உருவாகின்றன, அதே நேரத்தில் MLP போன்ற மரபணுக்கள் மரபணுவின் தனித்தனி பகுதிகளிலிருந்து உருவாகின்றன என்பதைக் கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும். டயாபோர்தெடாக்சிகா தடுப்பூசிக்கு NLL எதிர்ப்பு பற்றிய எங்கள் முந்தைய ஆய்வில், SAM22 போன்ற மரபணுக்களின் ஒருங்கிணைந்த செயல்படுத்தல் கண்டறியப்பட்டது, அவை பாதுகாப்பு பதிலின் கிடைமட்ட கூறுகளில் ஈடுபட்டுள்ளன என்பதைக் குறிக்கிறது. சாலிசிலிக் அமிலம், பூஞ்சை தூண்டிகள் அல்லது ஹைட்ரஜன் பெராக்சைடுடன் காயம் அல்லது சிகிச்சைக்கு SAM22 போன்ற மரபணுக்களின் நேர்மறையான பதிலின் அறிக்கைகளாலும் இந்த முடிவு ஆதரிக்கப்படுகிறது.
பல தாவர இனங்களில் பாக்டீரியா, வைரஸ் மற்றும் நோய்க்கிருமி பூஞ்சை தொற்றுகள் உட்பட பல்வேறு அஜியோடிக் மற்றும் உயிரியல் அழுத்தங்களுக்கு MLP-போன்ற மரபணுக்கள் பதிலளிப்பதாகக் காட்டப்பட்டுள்ளது55. தாவரங்கள் மற்றும் நோய்க்கிருமிகளுக்கு இடையிலான சில தொடர்புகளுக்கான எதிர்வினையின் திசைகள் வலுவாக அதிகரிப்பது (அதாவது, வெர்டிசிலியம் டாலியாவுடன் பருத்தியின் தொற்று போது) முதல் கணிசமாகக் குறைவது (அதாவது, ஆல்டர்னேரியா எஸ்பிபியுடன் ஆப்பிள் மரத்தின் தொற்றுக்குப் பிறகு) வரை இருந்தன56,57. F. நைகர் தொற்றுக்கு வெண்ணெய் பழ பாதுகாப்புகளின் போது மற்றும் ஆப்பிள் மரத்தின் தொற்று போது Botryosphaeria berengeriana f. cn. pricola மற்றும் Alternaria alternata ஆகியவை ஆப்பிள் நோய்க்கிருமி வகைகளாகும்58,59. கூடுதலாக, MLP-போன்ற 423 மரபணுவை அதிகமாக வெளிப்படுத்தும் ஆப்பிள் காலி எதிர்ப்பு-தொடர்புடைய மரபணுக்களின் வெளிப்பாட்டைக் குறைவாகக் கொண்டிருந்தது மற்றும் பூஞ்சை தொற்றுக்கு அதிக வாய்ப்புள்ளது59. Fusarium oxysporum f ஐத் தொடர்ந்து, MLP-போன்ற 423 மரபணு எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட பொதுவான பீன் ஜெர்ம்பிளாசத்திலும் அடக்கப்பட்டது. cn. பீன் தொற்று 60.
எங்கள் RNA-seq ஆய்வில் அடையாளம் காணப்பட்ட PR-10 குடும்பத்தின் மற்ற உறுப்பினர்கள், மேல்-ஒழுங்குமுறைக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக LlR18A மற்றும் LlR18B மரபணுக்கள், அதே போல் லிப்பிட் பரிமாற்ற புரதம் DIR1 க்கான மேல்-ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட (1 மரபணு) அல்லது கீழ்-ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட (3 மரபணுக்கள்) மரபணு. கூடுதலாக, WGCNA இந்த தொகுதியில் LlR18B மரபணுவை ஒரு மையமாக எடுத்துக்காட்டுகிறது, இது தடுப்பூசிக்கு மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படுகிறது மற்றும் பல பாதுகாப்பு மறுமொழி மரபணுக்களைக் கொண்டுள்ளது. நோய்க்கிரும பாக்டீரியாக்களுக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக LlR18A மற்றும் LlR18B மரபணுக்கள் மஞ்சள் லூபின் இலைகளிலும், D. டாக்ஸிகா தடுப்பூசிக்குப் பிறகு NLL தண்டுகளிலும் தூண்டப்பட்டன, அதே நேரத்தில் இந்த மரபணுக்களின் அரிசி ஹோமோலாக், RSOsPR10, ஜாஸ்மோனிக் அமில சமிக்ஞை பாதையில் ஈடுபடும் ஒரு பூஞ்சை தொற்றால் விரைவாக தூண்டப்பட்டது53,61, 62. DIR1 மரபணு, முறையான பெறப்பட்ட எதிர்ப்பின் (SAR) தொடக்கத்திற்குத் தேவையான குறிப்பிட்ட அல்லாத லிப்பிட் போக்குவரத்து புரதங்களை குறியாக்குகிறது. பாதுகாப்பு எதிர்வினைகளின் வளர்ச்சியுடன், DIR1 புரதம் தொலைதூர உறுப்புகளில் SAR ஐத் தூண்டுவதற்காக நோய்த்தொற்றின் மையத்திலிருந்து புளோயம் வழியாக கொண்டு செல்லப்படுகிறது. சுவாரஸ்யமாக, TanjilG_02313 DIR1 மரபணு 84A:476 மற்றும் மக்கள் தொகை 22660 வரிகளில் முதல் நேரப் புள்ளியில் கணிசமாகத் தூண்டப்பட்டது, ஆனால் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு 84A:476 வரியில் மட்டுமே வெற்றிகரமாக வளர்ந்தது. மீதமுள்ள மூன்று ஹோமோலாக்குகள் 6 hpi இல் 83A:476 வரியில் மட்டுமே தடுப்பூசிக்கு பதிலளித்ததால், இந்த பதில் கீழ்நோக்கி இயக்கப்பட்டது, இது NLL இல் DIR1 மரபணுவின் சில துணை செயல்பாட்டுத்தன்மையைக் குறிக்கலாம்.
எங்கள் ஆய்வில், "GO:0055114 ரெடாக்ஸ் செயல்முறை" என்று அழைக்கப்படும் உயிரியல் செயல்முறைக்கு தொடர்புடைய மிகவும் பொதுவான கூறுகள் சைட்டோக்ரோம் P450 புரதம், பெராக்ஸிடேஸ், லினோலிக் அமிலம் 9S-/13S-லிபாக்ஸிஜனேஸ் மற்றும் 1-அமினோசைக்ளோப்ரோபேன்-1-கார்பாக்சிலிக் அமில ஆக்சிடேஸ் ஆகும். கூடுதலாக, எங்கள் WGCNA, HSFA4a ஹோமோலாக்கை Lanr1 எதிர்ப்பு மரபணு வேட்பாளர் TanjilG_05042 போன்ற தொகுதிகளைச் சுமந்து செல்லும் மையமாக வரையறுக்கிறது. HSFA4a என்பது தாவரங்களில் அணுக்கரு டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனின் ரெடாக்ஸ் சார்ந்த ஒழுங்குமுறையின் ஒரு அங்கமாகும்.
சைட்டோக்ரோம் P450 புரதங்கள் முதன்மை மற்றும் இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றத்தில் NADPH மற்றும்/அல்லது O2-சார்ந்த ஹைட்ராக்சிலேஷன் எதிர்வினைகளை ஊக்குவிக்கும் ஆக்ஸிடோரடக்டேஸ்கள் ஆகும், இதில் xenobiotics இன் வளர்சிதை மாற்றம், அத்துடன் ஹார்மோன்கள், கொழுப்பு அமிலங்கள், ஸ்டெரோல்கள், செல் சுவர் கூறுகள், பயோபாலிமர்கள் மற்றும் பாதுகாப்பு சேர்மங்களின் உயிரியல் தொகுப்பு ஆகியவை அடங்கும். எங்கள் ஒரு ஆய்வில், தாவர சைட்டோக்ரோம் P450 செயல்பாட்டில் உள்ள மாறுபாடு -10.6 log2 (மடிப்பு மாற்றம்) இலிருந்து 5.7 ஆகக் குறைக்கப்பட்டது, ஏனெனில் அதிக எண்ணிக்கையிலான மாற்றப்பட்ட ஹோமோலாக்குகள் (37) மற்றும் குறிப்பிட்ட மரபணுக்களுக்கு இடையிலான பதில் முறைகளில் உள்ள வேறுபாடுகள், மேல்நோக்கிய திருத்தத்தை பிரதிபலிக்கின்றன. . இவ்வளவு பெரிய புரத சூப்பர்ஃபாமிலியில் NLL மரபணுக்களின் உயிரியல் செயல்பாட்டை தெளிவுபடுத்த RNA-seq தரவை மட்டும் பயன்படுத்துவது மிகவும் ஊகமாக இருக்கும். இருப்பினும், சில சைட்டோக்ரோம் P450 மரபணுக்கள் நோய்க்கிருமி பூஞ்சை அல்லது பாக்டீரியாக்களுக்கு அதிகரித்த எதிர்ப்புடன் தொடர்புடையவை, இதில் ஒவ்வாமை எதிர்வினைகளுக்கு பங்களிப்பும் அடங்கும்69,70,71.
வகுப்பு III பெராக்ஸிடேஸ்கள் தாவர வளர்ச்சி மற்றும் வளர்ச்சியின் போது பரவலான வளர்சிதை மாற்ற செயல்முறைகளில் ஈடுபடும் மல்டிஃபங்க்ஸ்னல் தாவர நொதிகள் ஆகும், அத்துடன் உப்புத்தன்மை, வறட்சி, அதிக ஒளி தீவிரம் மற்றும் நோய்க்கிருமி தாக்குதல் போன்ற சுற்றுச்சூழல் அழுத்தங்களுக்கு பதிலளிக்கின்றன72. பெராக்ஸிடேஸ்கள் ஆந்த்ராசிஸுடனான பல தாவர இனங்களின் தொடர்புகளில் ஈடுபட்டுள்ளன, இதில் ஸ்டைலோசாந்தஸ் ஹுமிலிஸ் மற்றும் சி. குளோயோஸ்போரியோடைடுகள், லென்ஸ் குலினாரிஸ் மற்றும் சி. ட்ரன்கேட்டம், ஃபேசோலஸ் வல்காரிஸ் மற்றும் சி. லிண்டெமுதியானம், குகுமிஸ் சாடிவஸ் மற்றும் சி. லாஜெனேரியம்73,74,75,76 ஆகியவை அடங்கும். பூஞ்சை தாவர திசுக்களில் ஊடுருவுவதற்கு முன்பு, எதிர்வினை மிக விரைவாக இருக்கும், சில நேரங்களில் 4 HPI இல் கூட73. பெராக்ஸிடேஸ் மரபணு D. டாக்ஸிகா NLL தடுப்பூசிக்கும் பதிலளித்தது. ஆக்ஸிஜனேற்ற வெடிப்பை ஒழுங்குபடுத்துதல் அல்லது ஆக்ஸிஜனேற்ற அழுத்தத்தை நீக்குதல் ஆகியவற்றுக்கான அவற்றின் வழக்கமான செயல்பாடுகளுக்கு கூடுதலாக, பெராக்ஸிடேஸ்கள் குறிப்பிட்ட சேர்மங்களின் லிக்னிஃபிகேஷன், துணை அலகு அல்லது குறுக்கு-இணைப்பின் போது செல் சுவர் வலுவூட்டலின் அடிப்படையில் இயற்பியல் தடைகளை உருவாக்குவதன் மூலம் நோய்க்கிருமி வளர்ச்சியில் தலையிடலாம். இந்தச் செயல்பாட்டை சிலிக்கோவில், 6 HPI இல் 83A:476 எதிர்ப்பு வரிசையில் எங்கள் ஆய்வில் கணிசமாக ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட ஒரு உத்தேச லிக்னின்-உருவாக்கும் அயனி பெராக்ஸிடேஸை குறியாக்கம் செய்யும் TanjilG_03329 மரபணுவிற்குக் காரணமாகக் கூறலாம், ஆனால் பதிலளிக்காத பிற விகாரங்கள் மற்றும் நேரப் புள்ளிகளில் அல்ல.
லிப்பிட் உயிரியக்கத் தொகுப்பின் ஆக்ஸிஜனேற்ற பாதையில் லினோலிக் அமிலத்தின் 9S-/13S-லிபோக்சிஜனேஸ் முதல் படியாகும்78. இந்த பாதையின் தயாரிப்புகள் தாவர பாதுகாப்பில் பல செயல்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளன, இதில் காலோஸ் மற்றும் பெக்டின் படிவுகளை உருவாக்குவதன் மூலம் செல் சுவர் வலுப்படுத்துதல் மற்றும் எதிர்வினை ஆக்ஸிஜன் இனங்கள்79,80,81,82,83 உற்பத்தி மூலம் ஆக்ஸிஜனேற்ற அழுத்தத்தை ஒழுங்குபடுத்துதல் ஆகியவை அடங்கும். தற்போதைய ஆய்வில், லினோலிக் அமிலம் 9S-/13S-லிபோக்சிஜனேஸின் வெளிப்பாடு அனைத்து விகாரங்களிலும் மாற்றப்பட்டது, ஆனால் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய மக்கள்தொகை 22660 இல், வெவ்வேறு நேரப் புள்ளிகளில் மேல்முறையீடு நிலவியது, அதே நேரத்தில் எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட Lanr1 மற்றும் AnMan அல்லீலைக் கொண்ட விகாரங்களில், இந்த மரபணு வகைகளுக்கு இடையிலான பாதுகாப்பு ஆந்த்ராக்ஸ் எதிர்வினைகளில் ஆக்ஸிலிபின் அடுக்கின் பல்வகைப்படுத்தலை இது வலியுறுத்துகிறது.
லூபினுடன் தடுப்பூசி போடப்பட்டபோது 1-அமினோசைக்ளோபுரோபேன்-1-கார்பாக்சிலேட் ஆக்சிடேஸ் (ACO) ஹோமோலாக் கணிசமாக அதிகமாக ஒழுங்குபடுத்தப்பட்டது (9 மரபணுக்கள்) அல்லது குறைவாக ஒழுங்குபடுத்தப்பட்டது (2 மரபணுக்கள்). இரண்டு விதிவிலக்குகளைத் தவிர, இந்த அனைத்து பதில்களும் 6 hp இல் 83A:476 இல் நிகழ்ந்தன. ACO புரதங்களால் மத்தியஸ்தம் செய்யப்படும் நொதி வினை எத்திலீன் உற்பத்தியில் விகிதத்தைக் கட்டுப்படுத்தும் படியாகும், எனவே இது மிகவும் ஒழுங்குபடுத்தப்படுகிறது84. எத்திலீன் என்பது ஒரு தாவர ஹார்மோன் ஆகும், இது தாவர வளர்ச்சியை ஒழுங்குபடுத்துவதிலும், அஜியோடிக் மற்றும் பயோடிக் அழுத்த நிலைமைகளுக்கு பதிலளிப்பதிலும் பல்வேறு பாத்திரங்களை வகிக்கிறது. ACO டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனின் தூண்டுதல் மற்றும் எத்திலீன் சிக்னலிங் பாதையை செயல்படுத்துதல் ஆகியவை எதிர்வினை ஆக்ஸிஜன் இனங்கள் மற்றும் பைட்டோஅலெக்சின்களின் உற்பத்தியை ஒழுங்குபடுத்துவதன் மூலம் ஹெமிபயோட்ரோபிக் பூஞ்சை ஓரிசே ஓரிசே ஓரிசேக்கு அரிசியின் எதிர்ப்பை அதிகரிப்பதில் ஈடுபட்டுள்ளன. இந்த ஆய்வில் தெரிவிக்கப்பட்டுள்ள 83A:476 வரிசையில் ACO ஹோமோலாஜ்களின் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு பின்னணியில், M. oryzae மற்றும் C. lupini88,89 இடையே காணப்படும் மிகவும் ஒத்த இலை தொற்று செயல்முறை, மூலக்கூறு பாதைகளில் சமிக்ஞை செய்யும் மையப் படியான NLL ஆந்த்ராக்னோஸ் எத்திலீனுக்கு எதிர்ப்பை வழங்குவதற்கான சாத்தியத்தை மாற்றுகிறது.
தற்போதைய ஆய்வில், ஒளிச்சேர்க்கையுடன் தொடர்புடைய பல மரபணுக்களின் பெரிய அளவிலான ஒடுக்கம் 83A:476 இல் 6 hpi ஆகவும், மண்டேலூப் மற்றும் 22660 மக்கள்தொகையில் 48 hpi ஆகவும் காணப்பட்டது. இந்த மாற்றங்களின் அளவு மற்றும் முன்னேற்றம் நிலைக்கு விகிதாசாரமாகும். இந்த சோதனையில் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு காணப்பட்டது. சமீபத்தில், நோய்க்கிருமி பாக்டீரியா மற்றும் பூஞ்சைகள் உட்பட தாவர-நோய்க்கிருமி தொடர்புகளின் பல மாதிரிகளில் ஒளிச்சேர்க்கை தொடர்பான டிரான்ஸ்கிரிப்டுகளின் வலுவான மற்றும் ஆரம்பகால அடக்குமுறை பதிவாகியுள்ளது. தொற்றுக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக ஒளிச்சேர்க்கையுடன் தொடர்புடைய மரபணுக்களின் அவசரம் (சில தொடர்புகளில் 2 HPI இலிருந்து) மற்றும் உலகளாவிய அடக்குமுறை ஆகியவை எதிர்வினை ஆக்ஸிஜன் இனங்களின் பயன்பாடு மற்றும் ஒவ்வாமை எதிர்வினைகளை மத்தியஸ்தம் செய்ய சாலிசிலிக் அமில பாதையுடன் அவற்றின் தொடர்பு ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் தாவர நோய் எதிர்ப்பு சக்தியைத் தூண்டும் 90,94.
முடிவில், மிகவும் எதிர்ப்புத் திறன் கொண்ட பரம்பரைக்கு (83A:476) முன்மொழியப்பட்ட பாதுகாப்பு மறுமொழி வழிமுறைகளில் R மரபணுவால் (மறைமுகமாக TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) விரைவான நோய்க்கிருமி அங்கீகாரம் மற்றும் ஒவ்வாமை மறுமொழி-மத்தியஸ்த சாலிசிலிக் அமிலம் மற்றும் எத்திலீன் சமிக்ஞை ஆகியவை அடங்கும், அதைத் தொடர்ந்து நீண்ட தூர SAR செயல்பாட்டை நிறுவுதல் DIR-1 புரதத்தால் ஆதரிக்கப்படுகிறது. C. lupini தொற்றுக்கான பயோட்ரோபிக் காலம் மிகக் குறைவு (தோராயமாக 2 நாட்கள்), அதைத் தொடர்ந்து நெக்ரோடிக் வளர்ச்சி95 என்பதை கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும். இந்த நிலைகளுக்கு இடையிலான மாற்றம், ஹோஸ்ட் தாவரங்களில் ஹைபர்சென்சிட்டிவிட்டி எதிர்வினைகளுக்கு தூண்டுதல்களாக செயல்படும் எத்திலீன்-தூண்டக்கூடிய புரதங்களின் நெக்ரோசிஸ் மற்றும் வெளிப்பாட்டுடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம். எனவே, பயோட்ரோபிக் கட்டத்தில் C. lupini ஐ வெற்றிகரமாகப் பிடிப்பதற்கான நேர சாளரம் மிகவும் குறுகியது. 6 hpi இல் 83A:476 இல் காணப்பட்ட ரெடாக்ஸ் மற்றும் ஒளிச்சேர்க்கையுடன் தொடர்புடைய மரபணுக்களின் மறுநிரலாக்கம் பூஞ்சை ஹைஃபாவின் முன்னேற்றத்துடன் ஒத்துப்போகிறது மற்றும் பயோட்ரோபிக் கட்டத்தில் வெற்றிகரமான பாதுகாப்பு மறுமொழியின் வளர்ச்சியைக் குறிக்கிறது. மண்டேலப் மற்றும் 22660 மக்கள்தொகையின் டிரான்ஸ்கிரிப்டோமிக் பதில்கள் பூஞ்சையை நெக்ரோடிக் வளர்ச்சிக்கு மாற்றுவதற்கு முன்பு பிடிக்க மிகவும் தாமதமாகலாம், இருப்பினும், PR-10 புரதத்தின் ஒப்பீட்டளவில் வேகமான கட்டுப்பாடு கிடைமட்ட எதிர்ப்பை ஊக்குவிப்பதால், மண்டேலப் 22660 மக்கள்தொகையை விட மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கும்.
கேனானிகல் R மரபணுவால் இயக்கப்படும் ETI, ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு பீன் எதிர்ப்பிற்கான ஒரு பொதுவான வழிமுறையாகத் தோன்றுகிறது. எனவே, மாதிரி பருப்பு வகை மெடிகாகோ ட்ரன்கட்டுலாவில், TIR-NBS-LRR97 தாவர R மரபணு வகுப்பின் உறுப்பினரான RCT1 மரபணுவால் ஆந்த்ராக்னோஸுக்கு எதிர்ப்பு வழங்கப்படுகிறது. இந்த மரபணு, எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய தாவரங்களுக்கு மாற்றப்படும்போது அல்ஃபால்ஃபாவில் பரந்த-ஸ்பெக்ட்ரம் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பையும் வழங்குகிறது. பொதுவான பீனில் (P. வல்காரிஸ்), இன்றுவரை இரண்டு டஜன் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணுக்கள் அடையாளம் காணப்பட்டுள்ளன. இந்த மரபணுக்களில் சில எந்த கேனானிகல் R மரபணுக்களையும் கொண்ட பகுதிகளில் காணப்படுகின்றன, இருப்பினும் மற்ற பல TIR-NBS-LRRs99 உட்பட NBS-LRR மரபணு கிளஸ்டரைக் கொண்ட குரோமோசோம்களின் விளிம்புகளில் அமைந்துள்ளன. மரபணு அளவிலான SSR ஆய்வு, NBS-LRR மரபணுவை பொதுவான பீனில் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்போடு இணைப்பதையும் உறுதிப்படுத்தியது. வெள்ளை லூபின் 101 இல் முக்கிய ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு லோகஸைக் கொண்ட மரபணுப் பகுதியிலும் கேனானிகல் R மரபணு காணப்பட்டது.
தாவர நோய்த்தொற்றின் ஆரம்ப கட்டத்தில் (முன்னுரிமை 12 hpi க்கு பிறகு) செயல்படுத்தப்படும் உடனடி எதிர்ப்பு எதிர்வினை, நோய்க்கிருமி பூஞ்சையான கோலெலோட்ரிச்சம் லூபினியால் ஏற்படும் ஆந்த்ராக்னோஸிலிருந்து குறுகிய-இலைகள் கொண்ட லூபினை திறம்பட பாதுகாக்கிறது என்பதை எங்கள் பணி காட்டுகிறது. அதிக செயல்திறன் வரிசைமுறையைப் பயன்படுத்தி, Lanr1 மற்றும் AnMan எதிர்ப்பு மரபணுக்களால் மத்தியஸ்தம் செய்யப்பட்ட NLL தாவரங்களில் ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு மரபணுக்களின் வேறுபட்ட வெளிப்பாடு சுயவிவரங்களை நாங்கள் நிரூபித்தோம். வெற்றிகரமான பாதுகாப்பு என்பது ஒரு நோய்க்கிருமியுடன் தாவரத்தின் முதல் தொடர்புக்கு சில மணி நேரங்களுக்குள் ரெடாக்ஸ், ஒளிச்சேர்க்கை மற்றும் நோய்க்கிருமி உருவாக்கத்தில் ஈடுபடும் புரதங்களுக்கான மரபணுக்களை கவனமாக வடிவமைப்பதை உள்ளடக்குகிறது. இதேபோன்ற பாதுகாப்பு எதிர்வினைகள், ஆனால் காலப்போக்கில் தாமதமாகி, நோய்களிலிருந்து தாவரங்களைப் பாதுகாப்பதில் மிகவும் குறைவான செயல்திறன் கொண்டவை. Lanr1 மரபணுவால் மத்தியஸ்தம் செய்யப்பட்ட ஆந்த்ராக்ஸ் எதிர்ப்பு R மரபணுவின் (எஃபெக்டர்-தூண்டப்பட்ட நோய் எதிர்ப்பு சக்தி) வழக்கமான விரைவான பதிலை ஒத்திருக்கிறது, அதே நேரத்தில் AnMan மரபணு பெரும்பாலும் ஒரு கிடைமட்ட பதிலை (நுண்ணுயிரி-தொடர்புடைய மூலக்கூறு வடிவத்தால் தூண்டப்பட்ட நோய் எதிர்ப்பு சக்தி) வழங்குகிறது, இது மிதமான நிலைத்தன்மையை வழங்குகிறது.
ஆந்த்ராக்னோஸ் குறிப்பான்களைத் திரையிடப் பயன்படுத்தப்பட்ட 215 NLL வரிசைகள் 74 சாகுபடி வகைகள், 60 குறுக்கு அல்லது இனப்பெருக்கம் மூலம் பெறப்பட்ட கோடுகள், 5 மரபுபிறழ்ந்தவை மற்றும் 76 காட்டு அல்லது அசல் கிருமி பிளாஸ்மாக்கள் ஆகியவற்றைக் கொண்டிருந்தன. இந்தக் கோடுகள் 17 நாடுகளிலிருந்து வந்தன, முக்கியமாக போலந்து (58), ஸ்பெயின் (47), ஜெர்மனி (27), ஆஸ்திரேலியா (26), ரஷ்யா (19), பெலாரஸ் (7), இத்தாலி (5) மற்றும் பிற வரிசைகள். 10 நாடுகளிலிருந்து. இந்தத் தொகுப்பில் குறிப்பு எதிர்ப்பு வரிசைகளும் அடங்கும்: 83A:476, டான்ஜில், லான்ர்1 அல்லீலைச் சுமக்கும் வோங்கா, மற்றும் அன்மேன் அல்லீலைச் சுமக்கும் மண்டேலப். இந்தக் கோடுகள் போலந்தின் வியட்ரோவோவில் உள்ள போஸ்னான் தாவர இனப்பெருக்கம் லிமிடெட் (துணை அட்டவணை S1) ஆல் பராமரிக்கப்படும் ஐரோப்பிய லூபின் மரபணு வள தரவுத்தளத்திலிருந்து பெறப்பட்டன.
கட்டுப்படுத்தப்பட்ட நிலைமைகளின் கீழ் தாவரங்கள் வளர்க்கப்பட்டன (புகைப்பட காலம் 16 மணி நேரம், பகலில் வெப்பநிலை 25°C மற்றும் இரவில் 18°C). இரண்டு உயிரியல் பிரதிகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. நெறிமுறையின்படி DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germani) ஐப் பயன்படுத்தி மூன்று வார வயதுடைய இலைகளிலிருந்து DNA தனிமைப்படுத்தப்பட்டது. தனிமைப்படுத்தப்பட்ட DNA வின் தரம் மற்றும் செறிவு ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமெட்ரிக் முறைகள் மூலம் மதிப்பிடப்பட்டது (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Anthracnose எதிர்ப்பு மரபணு AnMan (cv. Mandelup இலிருந்து பெறப்பட்டது) ஐக் குறிக்கும் AnManM1 மார்க்கர் மற்றும் Lanr1 மரபணுவைச் (cv. Tanjil இலிருந்து பெறப்பட்டது) பக்கவாட்டில் உள்ள Anseq3 மற்றும் Anseq4 குறிப்பான்கள் 11,26,28 பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. எதிர்ப்பு அல்லீலுக்கான ஹோமோசைகோட்கள் "1" ஆகவும், எளிதில் பாதிக்கக்கூடியவை - "0" ஆகவும், ஹீட்டோரோசைகோட்கள் - 0.5 ஆகவும் மதிப்பிடப்பட்டன.
AnManM1, AnSeq3 மற்றும் AnSeq4 குறிப்பான்களுக்கான ஸ்கிரீனிங் முடிவுகள் மற்றும் இறுதி பின்தொடர்தல் சோதனைகளுக்கான விதைகளின் கிடைக்கும் தன்மை ஆகியவற்றின் அடிப்படையில், ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு பினோடைப்பிங்கிற்காக 50 NLL கோடுகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. பகலில் 22°C மற்றும் இரவில் 19°C வெப்பநிலை வரம்பைக் கொண்ட 14 மணிநேர ஒளிக்காலத்துடன் கணினி கட்டுப்படுத்தப்பட்ட கிரீன்ஹவுஸில் இந்த பகுப்பாய்வு நகல் செய்யப்பட்டது. விதை உறை மிகவும் கடினமாக இருப்பதால் விதை செயலற்ற தன்மையைத் தடுக்கவும், சீரான முளைப்பை உறுதி செய்யவும் விதைப்பதற்கு முன் விதைகள் கீறப்படுகின்றன (கூர்மையான பிளேடுடன் கருவின் எதிர் பக்கத்தில் உள்ள விதை உறையை வெட்டுகின்றன). தாவரங்கள் மலட்டு மண்ணுடன் (TS-1 REC 085 மீடியம் பேசிக், கிளாஸ்மேன்-டீல்மேன் போல்ஸ்கா, வார்சா, போலந்து) தொட்டிகளில் (11 × 11 × 21 செ.மீ) வளர்க்கப்பட்டன. கிரேட்டர் போலந்தின் வெர்ஜெனிட்சாவில் (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E ) ஒரு வயலில் வளர்க்கப்பட்ட குறுகிய இலைகள் கொண்ட லூபின் தாவரங்களின் தண்டுகளிலிருந்து 1999 இல் வளர்க்கப்பட்ட கோலெட்டோட்ரிச்சம் லூபினி கோல்-08 வகையுடன் தடுப்பூசி போடப்பட்டது. ஒரு பகுதியைப் பெறுங்கள். தனிமைப்படுத்தப்பட்டவை 20° C வெப்பநிலையில் SNA ஊடகத்தில் 21 நாட்களுக்கு கருப்பு ஒளியின் கீழ் வளர்க்கப்பட்டன. விதைத்த நான்கு வாரங்களுக்குப் பிறகு, தாவரங்கள் 4-6 இலை நிலையை அடைந்ததும், ஒரு மில்லிக்கு 0.5 x 106 கோனிடியா செறிவில் கோனிடியாவின் இடைநீக்கத்துடன் தெளிப்பதன் மூலம் தடுப்பூசி போடப்பட்டது. தடுப்பூசி போட்ட பிறகு, கோனிடியா முளைப்பதற்கும் தொற்று செயல்முறைக்கும் வசதியாக, தாவரங்கள் சுமார் 98% ஈரப்பதத்திலும் 25°C வெப்பநிலையிலும் 24 மணி நேரம் இருட்டில் வைக்கப்பட்டன. பின்னர் தாவரங்கள் 22°C பகல்/19°C இரவு மற்றும் 70% ஈரப்பதத்தில் 14 மணி நேர ஒளிக்காலத்தின் கீழ் வளர்க்கப்பட்டன. தடுப்பூசி போடப்பட்ட 22 நாட்களுக்குப் பிறகு நோய் மதிப்பெண் பெறப்பட்டது மற்றும் தண்டுகள் மற்றும் இலைகளில் நெக்ரோடிக் புண்கள் இருப்பது அல்லது இல்லாதிருப்பதைப் பொறுத்து 0 (நோய் எதிர்ப்பு சக்தி) முதல் 9 (மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடியது) வரை இருந்தது. கூடுதலாக, மதிப்பெண் பெற்ற பிறகு, தாவரங்களின் எடை அளவிடப்பட்டது. மார்க்கர் மரபணு வகைகள் மற்றும் நோய் பினோடைப்களுக்கு இடையிலான உறவுகள் புள்ளி இரண்டு-வரிசை தொடர்புகளாகக் கணக்கிடப்பட்டன (ஆந்த்ராக்னோஸ் எதிர்ப்பு பினோடைப்பின் பகுப்பாய்விற்கான கோடுகளின் தொகுப்பில் ஹெட்டோரோசைகஸ் குறிப்பான்கள் இல்லாதது).


இடுகை நேரம்: ஆகஸ்ட்-17-2022