Faafetai mo le asiasi ile Nature.com. O le su'esu'ega o lo'o e fa'aogaina e fa'atapula'aina le lagolago a le CSS. Mo le poto sili ona lelei, matou te fautuaina oe e te faʻaogaina se suʻesuʻega fou (pe faʻamalo le Faiga Faʻatasi i Internet Explorer). I le taimi nei, ina ia mautinoa le faʻaauauina o le lagolago, matou te tuʻuina atu le saite e aunoa ma sitaili ma JavaScript.
Angustifolius lupine (NLL, Lupinus angustifolius L.) o se laau leguminous e faʻaaogaina mo le gaosiga o meaʻai ma le faʻaleleia o le eleele. O le faʻalauteleina o le NLL i le lalolagi atoa e avea o se faʻatoʻaga ua tosina mai ai le tele o siama faʻamaʻi, e aofia ai le lupine anthracnose, lea e mafua ai le faʻamaʻi mataʻutia o le anthracnose. E lua alleles, Lanr1 ma AnMan, lea e faʻateleina ai le teteʻe, na faʻaaogaina i le faʻatupuina o le NLL, ae o loʻo le iloa le faʻavae mole mole. I lenei suʻesuʻega, na faʻaogaina le Lanr1 ma AnMan faʻailoga e suʻe ai faʻataʻitaʻiga NLL Europa. O su'esu'ega ole tui ile si'osi'omaga fa'atonutonu na fa'amaonia ai le aoga o tagata foa'i e lua e tete'e. O le fa'avasegaina o fa'amatalaga o kenera 'ese'ese sa fa'atinoina i luga ole laiga e mafai ona fa'asa'o ma a'afia. O le tetee o Anthracnose e fesoʻotaʻi ma le faʻaalia o le gene ontology terms "GO: 0006952 Defense Response", "GO: 0055114 Redox Process", ma le "GO: 0015979 Photosynthesis". E le gata i lea, o le laina Lanr1 (83A: 476) na faʻaalia ai le tele o transcriptome reprogramming vave pe a uma le tui, ae o isi laina na faʻaalia le tuai i lenei tali e tusa ma le 42 itula. O tali puipuiga e fesoʻotaʻi ma genes TIR-NBS, CC-NBS-LRR ma NBS-LRR, 10 proteins e aʻafia i pathogenesis, lipid transfer proteins, endoglucan-1,3-β-glucosidase, glycine-rich cell wall proteins, ma genes mai le ala faʻafefe o le okesene. O tali muamua i le 83A:476, e aofia ai le taofiofia ma le faaeteete o kenera e fesootaʻi ma le photosynthesis, faʻatasi ma le puipuiga manuia i le taimi o le tuputupu aʻe vegetative vaega ole fungal biology, faʻapea o se mea e faʻaosoina ai le puipuiga. O le tali a Mandeloop e faʻagesegese, faʻapea foʻi ma le toso faʻalava atoa.
O le lupine vaapiapi (NLL, Lupinus angustifolius L.) o se cereal maualuga porotini e afua mai i le itu i sisifo o le Metitirani1,2. O lo'o fa'atupuina i le taimi nei e fai ma fa'ato'aga mo manu ma tagata. O lo'o ta'ua fo'i o otaota lanu meamata i faiga fa'ato'aga ona o le fa'apipi'iina o le nitrogen e ala ile symbiotic nitrogen fixing bacteria ma le fa'aleleia atili ole fausaga ole palapala. O le NLL na fa'ataunu'uina se fa'agasologa vave o le fa'atosinaina i le seneturi talu ai ma o lo'o i ai pea i lalo o le maualuga o le fa'atupuina o le mamafa3,4,5,6,7,8,9,10,11,12. Faatasi ai ma le salalau lautele o le NLL, o le faasologa o sigi faʻamaʻi na atiaʻe ni faʻatoʻaga fou ma mafua ai faʻamaʻi fou faʻaleagaina. O le mea sili ona mataʻina mo le au faifaatoʻaga lupine ma le au faifaatoʻaga o le foliga mai o le anthracnose, e mafua mai i le gaʻo faʻamaʻi, Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. O le mea sili ona mataʻina mo le au faifaatoʻaga lupine ma le au faifaatoʻaga o le foliga mai o le anthracnose, e mafua mai i le gaʻo faʻamaʻi, Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. Наиболее примечательным для фермеров и селекционеров люпина было появление антракноза, вызванного паморгиного люпина было появление антракноза, вызванного памомгрингрибто памогриление (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. O le mea e sili ona iloga i faifa'ato'aga lupine ma faifa'ato'aga o le alia'e mai o le anthracnose e mafua mai i le fa'ama'i fa'ama'i Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真由病原真由病原真由病原真由病原真菌&Cotrici Hagedorn13 引起的.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真菌菌它是由病原真菌菌它是由病原真菌菌它是由病原真菌。 Наиболее поразительным для фермеров и селекционеров люпина является появление антракноза, вызываемогего прикмтор lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. O le mea e sili ona mata'ina i le au faifa'ato'aga ma le au faifa'ato'aga lupine o le alia'e mai lea o le anthracnose e mafua mai i le fa'ama'i fa'ama'i Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13.O lipoti muamua o le faʻamaʻi na sau mai Pasila ma le Iunaite Setete, ma faʻailoga masani na aliali mai i le 1912 ma le 1929. Ae ui i lea, ina ua mavae le tusa ma le 30 tausaga, na taʻua le pathogen o Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., телеоморф Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph o Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.，有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.，有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld в Целенаправленной морфологии. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld i Morphology Taulai. & H. Schrenk,. & H. Schrenk, .ma H. ​​Schrenk. & H.施伦克，. & H.施伦克，.ma H. ​​Schlenk, .O faʻamaʻi muamua faʻamaʻi na faia i le ogatotonu o le 20th seneturi na faʻaalia ai le tetee i le NLL ma le lupine samasama (L. luteus L.) faʻafeiloaʻiga, ae o lupine paʻepaʻe uma (L. albus L.) faʻataʻitaʻiga na faʻataʻitaʻiina sa sili ona susceptible15,16. O suʻesuʻega ua faʻaalia ai o le atinaʻeina o le anthracnose e fesoʻotaʻi ma le faʻateleina o timuga (susū o le ea) ma le vevela (i le va o le 12-28 ° C), e taʻitaʻia ai le solia o le teteʻe i le maualuga o le vevela17, 18. O le mea moni, o le taimi e manaʻomia mo le conidia e tupu ma amata ai le faʻamaʻi , e fa taimi puupuu i le 24 ° C i lalo ole 12 itula (4 itula) C. tulaga19. O le mea lea, o le faʻaauau pea o le vevela o le lalolagi ua taʻitaʻia ai le sosolo o le anthracnose. Ae ui i lea, o le faʻamaʻi na matauina i Farani (1982) ma Iukureini (1983) o se faʻailoga o se faʻamataʻu o loʻo oʻo mai, ae na foliga mai na le amanaiaina e le pisinisi lupine i le taimi20,21. I ni nai tausaga mulimuli ane, o lenei faʻamaʻi faʻamaʻi na sosolo i le lalolagi atoa ma na aʻafia ai foʻi atunuu tetele o loʻo gaosia le lupine e pei o Ausetalia, Polani ma Siamani22,23,24. Ina ua mae'a le faama'i o le anthracnose i le ogatotonu o le 1990s, o le tele o su'esu'ega na maua ai le fa'ailoaina o le tele o foa'i fa'aletonu i fa'ata'ita'iga NLL19. O le tetee atu o le NLL i le anthracnose o loʻo faʻatonutonuina e alaleʻa taʻutaʻua eseese e lua o loʻo maua i punaoa germplasm eseese: Lanr1 i le cultivar Tanjil ma Wonga ma AnMan i cultivar. Mandalay 25. O le laina fa'ato'aga fa'asao 83A:476 o lo'o fa'auluina le Lanr1 allele na sopoia ma le P27255 laina fa'afefeteina e maua ai se faitau aofa'i RIL segregating mo tete'e anthracnose, lea na mafai ai ona tu'uina atu le Lanr1 locus i le chromosome NLL-1131, 32, 33. Alignment of a linkage faafanua. fa'avae, NLL na fa'aalia le nofoaga o mea uma e tolu i luga o le chromosome tutusa (NLL-11), ae i tulaga eseese29,34,35. Ae ui i lea, ona o le laʻititi o RILs ma le mamao tele o le kenera i le va o faʻailoga ma alalaupapa tutusa, e leai ni faʻaiʻuga faʻatuatuaina e mafai ona maua e uiga io latou kenera autu. I le isi itu, o le faʻaaogaina o genetics faʻaliliu i lupins e faigata ona o lo latou maualalo tele le toe faʻafouina, lea e faʻalavelave ai le faʻaogaina o kene37.
O le atinaʻeina o germplasm faʻapitonuʻu o loʻo tauaveina le allele manaʻomia i le tulaga homozygous, e pei o le 83A: 476 (Lanr1) ma Mandelup (AnMan), ua tatalaina le faitotoa e suʻesuʻe ai le tetee o le anthracnose i luma o le i ai o tuʻufaʻatasiga faʻafeagai o alleles i tagata vao. Avanoa o faiga mole mole. Fa'atusatusa tali puipui na fa'atupuina e fa'ailoga fa'apitoa. O lenei su'esu'ega na su'esu'eina ai le vave tali atu o le NLL ile tui ole C. lupini. Muamua, o le Europa NLL germplasm panel o loʻo i ai laina 215 na suʻeina e faʻaaoga ai faʻailoga mole e faʻailoga ai le Lanr1 ma AnMan alleles. O le Anthracnose phenotyping na faia i luga o laina 50 NLL, na filifilia muamua mo faʻailoga mole, i lalo o tulaga pulea. E fa'avae i luga o nei su'ega, e fa laina eseese i le anthracnose resistance ma Lanr1/AnMan allelic composition na filifilia mo le fa'avasegaina o fa'amatalaga fa'aaliga o le kenera e fa'aaoga ai auala fa'aopoopo e lua: fa'asologa o le RNA maualuga ma le fa'atusatusaina o le PCR taimi moni.
O le suʻesuʻeina o se seti o le NLL germplasm (N = 215) faʻatasi ai ma maka Lanr1 (Anseq3 ma Anseq4) ma AnMan (Anseq4) ma AnMan (AnManM1) na faʻaalia ai e naʻo le tasi le laina (95726, latalata i Salamanca-b) faʻateleina le "tetee" allele mo maka uma, ae o le "faʻaalia uma o faʻailoga uma" 158 (~ 73.5%) laina. E sefulutolu laina na maua ai le lua "tetee" o le Lanr1 maka, ma le 8 laina na maua ai le "tetee" o le Lanr1. fa'ailoga. Le "tetee" allele o le faʻailoga AnMan (Sili Faʻaopoopo S1). E lua laina e heterozygous mo le faailoga Anseq3 ma le tasi heterozygous mo le faailoga AnManM1. 42 laina (19.5%) na ave faʻafeagai vaega o le Anseq3 ma Anseq4 alleles, e faʻaalia ai le maualuga o taimi o le toe tuʻufaʻatasia i le va o nei nofoaga e lua. Anthracnose phenotypes i lalo o tulaga pulea (Supplementary Table S2) na faʻaalia ai le fesuisuiai o le teteʻe o genotypes faʻataʻitaʻiina, lea na atagia i le ogaoga o le anthracnose. O ese'esega i fua fa'atatau na amata mai i le 1.8 (agalelei le fa'asa'o) i le 6.9 (mafatia) ma le eseesega o le mamafa o la'au mai le 0.62 (mafatia) i le 4.45 g (tete'e). Sa i ai se fesoʻotaʻiga taua i le va o tau o loʻo matauina i faʻasologa e lua o le faʻataʻitaʻiga (0.51 mo faʻamaʻi faʻamaʻi, P = 0.00017 ma 0.61 mo le mamafa o laʻau, P <0.0001) faʻapea foʻi ma le va o nei mea e lua (-0.59 ma -0.77, P <0.00). Sa i ai se fesoʻotaʻiga taua i le va o tau na matauina i faʻasologa e lua o le faʻataʻitaʻiga (0.51 mo faʻamaʻi faʻamaʻi, P = 0.00017 ma le 0.61 mo le mamafa o laʻau, P <0.0001) faʻapea foʻi ma le va o nei taʻiala e lua (-0.59 ma -0.77, P <0.77, P <0.77). Выявлена ​​достоверная корреляция между значениями, наблюдаемыми i двух повторностях эксперимента (0,51 для тля = 0,00017 и 0,61 для массы растения, P <0,0001), а также между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,77, Р001 < 0,0). Na maua se fesoʻotaʻiga taua i le va o tau o loʻo matauina i le toe faia o suʻega e lua (0.51 mo faʻamaʻi faʻamaʻi, P = 0.00017 ma le 0.61 mo le mamafa o laʻau, P <0.0001), faʻapea foʻi ma le va o nei laina e lua (- 0.59 ma le -0.77, P <0.0001)在两次重复实验中观察到的之间存在显着相关性（疾病严重程度评分为 = P0. 0.00017，植物重量为0.61，P <0.0001）以及这两个参数之间（- 0.59 和- 0.77，P <0.0001).在 两 次 重复 实验 中 观察 的值 之间 存在 相关性 （疾病 严重 程度 了了 评 度 了0.51 ， p = 0.00017 ， 植物 为 为 0.61 ， p <0.0001） 以及 两 个 参数 之间 （（（（ 5.–0 和 9–5. 0.59 i le 0.59 i le 0.77 le P <0.0001). Наблюдалась значительная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях (оценка тяжести 1,000, забо 0,000 и масса растения 0,61, P <0,0001), и между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,0001) 0,77, P <0,0001. Sa i ai se fesoʻotaʻiga taua i le va o tau o loʻo vaʻaia i le faʻalua (sikoa faʻamaʻi 0.51, P = 0.00017 ma le mamafa o laʻau 0.61, P <0.0001) ma le va o nei faʻamaufaʻailoga e lua (-0.59 ma le -0.0001) 0.77, P<0.0001. ).O fa'ailoga masani o lo'o va'aia i la'au e a'afia e aofia ai le kinkin ma le mimilo o le 'au e pei o le "aufana a le leoleo mamoe", soso'o ai ma manu'a oval ma moli/pink sporozoites (Fa'aopoopo Ata 1). O fa'atasiga a Ausetalia o lo'o tauaveina le Lanr1 (83A: 476 ma Tanjil) ma AnMan (Mandelup) genes e fa'afefeteina, 0.0331 ma le 0.0036). O nisi o laina o loʻo iai foʻi le "tetee" Lanr1 ma / poʻo AnMan alleles e faʻaalia ai faʻamaoniga o le maʻi.
O le mea e mataʻina ai, o nai laina NLL e leai ni faʻailoga "teteʻe" na faʻaalia ai se maualuga maualuga o le anthracnose resistance (faʻatusatusa pe maualuga atu nai lo Lanr1 poʻo AnMan genotypes), e pei o Boregine (P value <0.0001 mo faʻamaufaʻailoga uma e lua), Bojar (P value <0.0001 mo sikoa ma 0.001 mo le mamafa o le laau ma le 0.001 mo le mamafa o le B9) 0.0001 mo sikoa ae le taua mo le mamafa). O le mea e mataʻina ai, o nai laina NLL e leai ni faʻailoga "teteʻe" na faʻaalia ai se maualuga maualuga o le anthracnose resistance (faʻatusatusa pe maualuga atu nai lo Lanr1 poʻo AnMan genotypes), e pei o Boregine (P value <0.0001 mo faʻamaufaʻailoga uma e lua), Bojar (P value <0.0001 mo sikoa ma 0.001 mo le mamafa o le laau ma le 0.001 mo le mamafa o le B9) 0.0001 mo sikoa ae le taua mo le mamafa). Интересно, что несколько линий NLL, лишенных какого-либо «резистентного» маркерного аллеля, показали высокний уроский антракнозу (сопоставимый или более высокий, чем для генотипов Lanr1 po o AnMan), таких как Boregine (значение P <0,0001 для пробраба), Boregine (значение P <0,0001 для оценки и 0,001 для массы растения) ma популяции B-549/79b (значение P <0,0001 для оимицид массы). O le mea e malie ai, o le tele o laina NLL e leai soʻo se 'resistant' marker allele na faʻaalia ai le maualuga o le teteʻe i le anthracnose (faʻatusatusa pe maualuga atu nai lo Lanr1 poʻo AnMan genotypes), e pei ole Boregine (P value <0.0001 mo faʻamaufaʻailoga uma e lua), Bojar (P value <0.0001 mo le iloiloga ma le 0.001 mo le mamafa o le laau ma le 0.001 mo le mamafa o le 0.001) 0.0001 mo le iloiloga ae le taua mo le mamafa).有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL 系显示出高水平的炭疽病抗他他们他们我他们他们他们他们他们他们他们他们他们他们一一基因型相当或更高），例如Boregine（两个参数的P 众< 0.0001）、Bojar（P众分为0.0001，植物重量为0.001）和种群B-549/79b（得分P < 0.0001，重量不显。 O se mea manaia o nisi o NLL e leai ni faʻailoga "antigenic" e faʻaalia ai le maualuga o le faʻasagaga (e tutusa ma Lanr1 poʻo AnMan genes poʻo le maualuga), e pei o Boregine (faʻamau uma e lua P <0.0001), Bojar (P value <0.0001, mamafa o laʻau 0.001) ma faʻalavelave B-549 / 79b (P00) taua. Интересно, что некоторые линии NLL, лишенные каких-либо маркерных аллелей «резистентности», показали высокие уровничи антракнозу (сравнимые или выше, чем у генотипов Lanr1 po o AnMan), taкие как Boregine (значение P для обоих параметров <0,0001, Bojar <0,0001), Boregine масса растения 0,001) ma популяция B-549/79b (оценка P-значение <0,0001, масса незначительна). O le mea e mataʻina ai, o nisi o laina NLL e leai se 'tetee' faʻailoga faʻailoga na faʻaalia ai le maualuga o le anthracnose resistance (faʻatusatusa pe sili atu nai lo Lanr1 poʻo AnMan genotypes), e pei o Boregine (P tau mo faʻamaufaʻailoga e lua <0.0001), Bojar (P-value <0.0001, mamafa laau 0.0059) ma le mamafa o le laʻau. 0.0001, mamafa e le taua).O lenei mea faʻapitoa e taʻu mai ai le mafai ona maua se faʻapogai fou o le teteʻe, faʻamatalaina le leai o se fesoʻotaʻiga i le va o faʻailoga faʻailoga ma faʻamaʻi faʻamaʻi (P tau mai le ~ 0.42 i le ~ 0.98). O le mea lea, o le suʻega a Kolmogorov-Smirnov na faʻaalia ai o faʻamaumauga i luga o le anthracnose tetee e masani ona tufatufaina mo togi (P-values ​​0.25 ma 0.11) ma le tele o laau (P-values ​​0.47 ma 0.55), ma fautua mai ou te manatu e sili atu alleles nai lo Lanr1 ma AnMan e aofia ai.
Faʻavae i luga o faʻaiʻuga o le suʻesuʻeina o le anthracnose resistance, 4 laina na filifilia mo suʻesuʻega transcriptome: 83A: 476, Boregine, Mandelup, ma le Population 22660. O nei laina na toe faʻataʻitaʻiina mo le tetee i le anthrax i faʻataʻitaʻiga inoculation e ala i le faʻasologa o le RNA, pe a faʻapea e tutusa ma le suʻega muamua. O faʻailoga taua e faʻapea: Boregin (1.71 ± 1.39), 83A: 476 (2.09 ± 1.38), Mandelup (3.82 ± 1.42) ma le faitau aofaʻi 22660 (6.11 ± 1.29).
O le Illumina NovaSeq 6000 protocol na ausia le averesi o le 40.5 Mread pairs i le faʻataʻitaʻiga (29.7 i le 54.4 Mreads) (Sila Faʻaopoopo S3). Fa'asologa o togi i le fa'asologa fa'asologa e mai le 75.5% i le 88.6%. O le fa'amaopoopoina o fa'amaumauga faitau faitau i le va o fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga i le va o fa'asologa o mea ola na amata mai i le 0.812 i le 0.997 (o lona uiga 0.959). Mai le 35,170 genes na suʻesuʻeina, 2917 na faʻaalia e leai se faʻamatalaga, ma o isi 4785 genes na faʻaalia i se tulaga faʻatauvaʻa (base mean <5). Mai le 35,170 genes na suʻesuʻeina, 2917 na faʻaalia e leai se faʻamatalaga, ma o isi 4785 genes na faʻaalia i se tulaga faʻatauvaʻa (base mean <5). Из 35 170 проанализированных генов 2917 не проявляли экспрессии, а остальные 4785 генов экспресиронвались темирон (базовое среднее <5). Mai le 35,170 genes na suʻesuʻeina, 2917 na faʻaalia e leai se faʻamatalaga, ma o totoe 4785 genes na faʻaalia i se tulaga faʻatauvaʻa (base mean <5).在分析的35,170 个基因中，2917 个没有表达，其他4785 个基因的表达可以忽略不到略不审5）.35,170 Из 35 170 проанализированных генов 2917 не экспрессировались, а остальные 4785 генов имели незначительнсубю среднее значение <5). Mai le 35,170 genes na suʻesuʻeina, 2917 e leʻi faʻaalia ma o loʻo totoe 4785 genes e leai ni faʻamatalaga (base mean <5).O le mea lea, o le numera o kenera na faʻaalia o loʻo faʻaalia (base mean ≥ 5) i le taimi o le faʻataʻitaʻiga o le 27,468 (78.1%) (Sili Faʻaopoopo S4).
Mai le taimi muamua, o laina uma o le NLL na tali atu i le tui o le C. lupini (strain Col-08) e ala i le toe faʻatulagaina o le transcriptome (Table 1), ae ui i lea, o eseesega taua na matauina i le va o laina. O le mea lea, o le laina tetee 83A: 476 (tausia le Lanr1 gene) na faʻaalia ai le tele o le transcriptome reprogramming i le taimi muamua (6 hpi) faʻatasi ai ma le 31-69-faʻateleina le faʻateleina o le faʻaesea i luga ma lalo-genes faʻatusatusa i isi taimi taimi i lenei taimi. E le gata i lea, o lenei tumutumu sa puupuu, ona o le faʻaaliga o naʻo ni nai genes na tumau pea ona suia tele i le taimi lona lua (12 hpi). O le mea e malie ai, o Boregine, lea na faʻaalia ai foi le maualuga o le teteʻe i le suʻega suʻega, e leʻi oʻo i se faʻasologa tele o le transcriptional reprogramming i le taimi o le suʻega. Ae ui i lea, o le numera o kenera faʻaalia eseese (DEG) e tutusa mo Boregine ma le 83A: 476 i le 12 HPI. O Mandelup ma le faitau aofaʻi 22660 na faʻaalia le maualuga o le DEG i le taimi mulimuli (48 l / s), e faʻaalia ai se faʻatuai o tali i tali.
Talu ai ona o le 83A: 476 na faia le tele o le transcriptome reprogramming i le tali atu i le C. lupini i le 6 HPI faʻatusatusa i isi laina uma, ~ 91% o DEG na matauina i lenei taimi o le gafa-faʻapitoa (Fig. 1). Ae ui i lea, sa i ai nisi faʻalavelave i tali vave i le va o laina suʻesuʻe, e pei o le 68.5%, 50.9%, ma le 52.6% DEG i Boregine, Mandelup, ma le faitau aofaʻi 22660, i le faasologa, faʻatasi ma i latou na maua i le 83A: 476 i nisi taimi i le taimi. Peita'i, o nei DEG na na'o se vaega la'ititi (0.97–1.70%) o DEG uma na maua i le taimi nei e fa'aaoga ai le 83A:476. E le gata i lea, 11 DEGs mai laina uma sa faʻatasi i le taimi nei (Supplementary Tables S4-S6), e aofia ai vaega masani o tali puipuiga o laau: lipid transfer protein (TanjilG_32225), endoglucan-1,3-β-glucoside enzyme (TanjilG_23384), lua faʻamalosi faʻamalosia e pei o le SAM22 (TanjilG13_Tanjil15_2018_2018_2008_2008) (TanjilG_32352), ma lua glycine-mauoa structural sela palatini (TanjilG_19701 ma TanjilG_19702). Sa i ai foi le maualuga tele o tali i le va o le 83A: 476 ma le Boregine i le 24 HPI (total 16-38% DEG) ma le va o Mandelup ma le Population 22660 i le 48 HPI (total 14-20% DEG).
O le ata o Venn o loʻo faʻaalia ai le numera o kenera faʻaalia eseese (DEG) i laina lupine vaapiapi (NLL) faʻamaʻiina i le Colletotrichum lupini (strain Col-08 maua mai fanua lupine i Wierzhenice, Polani, 1999). O laina NLL na suʻesuʻeina o: 83A: 476 (teteʻe, ave le Lanr1 allele), Boregine (teteʻe, faʻasologa o gafa e le iloa), Mandelup (faʻafefeteina, tauaveina le AnMan allele) ma le faitau aofaʻi 22660 (matua faigofie). O le faapuupuuga hpi e tu mo itula pe a uma le tui. Ole tau ole Zero ua aveese e faafaigofie ai le kalafi.
O le seti o genes overexpressed i le 6 hpi na suʻesuʻeina mo le i ai o le canonical R gene domains (Supplementary Table S7). O lenei suʻesuʻega na faʻaalia ai le faʻaaogaina o faʻamaʻi faʻamaʻi masani faʻatasi ma NBS-LRR domains naʻo le 83A: 476. O lenei seti e aofia ai le tasi TIR-NBS-LRR genes (tanjilg_05042), lima CC-NBS-LRR genes (tanjilg_06165, tanjilg_06162, tanjilg_22773, tanjilg_22640, ma tanjilg_16162), ma le Four NBS-LR, Tanjilg2, ma le Four NBS-LR, Tanjilg2 (tanjilg_16162) faapea foi ma le Fa NBS-Lrr (tanjilg_16162) ma le Fa NBS-LRR (TANJILG_16162). O nei kenera uma e iai vaega fa'acanonical fa'atulagaina i fa'asologa fa'asao. I le faaopoopo atu i le NBS-LRR domain genes, e tele RLL kinases na faʻagaoioia ile 6 hpi, e taʻua o le tasi i Boregine (TanjilG_19877), lua i Mandelup (TanjilG_07141 ma TanjilG_19877) ma le faitau aofaʻi 22660 (TanjilG_09014 ma TanjilG_103) ma le 72.
O kenera e matua'i suia le fa'aaliga i le tali atu i le inoculation ma le C. lupini (strain Col-08) na tu'uina i le Gene Ontology (GO) su'esu'ega fa'atamaoaigaina (Supplementary Table S8). O le taimi sili ona faʻaalia o le biological process term o le "GO: 0006952 puipuiga tali" lea na faʻaalia i le 6 mai le 16 (taimi × laina) faʻatasi ma le maualuga maualuga (P value <0.001) (Fig. 2). O le taimi sili ona faʻaalia o le biological process term o le "GO: 0006952 puipuiga tali" lea na faʻaalia i le 6 mai le 16 (taimi × laina) faʻatasi ma le maualuga maualuga (P value <0.001) (Fig. 2). Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «Alu: 0006952 защитный ответо» 6 из 16 (время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). O le fa'aupuga fa'aola fa'atupu soo o le 'GO: 0006952 tali puipui', lea na fa'aalia i le 6 o le 16 (taimi × fa'asologa) fa'atasiga fa'atasi ma le maualuga taua (P value <0.001) (Fig. 2).最常被过度代表的生物过程术语是“Alu:0006952 防御反应”，它出现在16 个（时间（时间）他们他们他们他们他们一们一们一们一们一上一一一一么一一一一么一一一么上上上上不上上上一上上上一上上一上上上上上一上上上一间个中，具有高显着性（P ‼< 0.001）（图2）. O le faʻamatalaga faʻapitoa o le biological process o le "GO: 0006952 defense response", lea e aliali mai i le 6 o le 16 (时间×线) faʻapotopotoga, ma le maualuga maualuga (P value <0.001) (图2) . Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «GO: 0006952 Defense Response», которыл 6 поского процесса bыл комбинаций (время × линия) с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). O le fa'aupuga fa'aola fa'atupu soo o le 'GO: 0006952 Defence Response', lea na fa'aalia i le 6 mai le 16 tu'ufa'atasiga (taimi × laina) ma le maualuga taua (P value <0.001) (Fig. 2).O lenei faaupuga na sili atu ona faʻaalia i taimi e lua i le 83A: 476 ma Boregine (6 ma 24 hpi) ma i le tasi taimi i Mandelup ma le faitau aofaʻi 22660 (12 ma le 6 hpi, faasologa). O se taunuuga faʻamoemoeina, e faʻaalia ai le tali atu a le antifungal o laina faʻafefe. E le gata i lea, na tali atu le 83A: 476 i le C. lupini e ala i le faʻavaveina o kenera e fesoʻotaʻi ma le faʻamaʻi faʻamaʻi o loʻo faʻatusalia e le faaupuga "GO: 0055114 redox process", e faʻaalia ai se tali puipuia faʻapitoa, aʻo faʻaalia e Boregine ni tali puipuia patino, e fesoʻotaʻi ma le faaupuga 'GO'. :0006950 Tali fa'atiga.” O le faitau aofa'i o le 22660 na fa'agaoioia le tali fa'afeagai o lo'o a'afia ai metabolites lona lua, fa'amaonia ai le tele o le numera o fa'aupuga "GO: 0016104 Fa'agasologa o le biosynthesis triterpene" ma le "GO: 0006722 Fa'agasologa o le triterpene" (o fa'aupuga uma e fa'atatau i le fa'aupuga o le fa'aupuga a le GO: 0016104 Fa'agasologa o le biosynthesis triterpene" ma le "GO: 0006722 Fa'agasologa o le triterpene" (o upu uma e lua e aofia i le seti tutusa o genes e fa'atatau i le fa'asologa o genes), fa'atatau i le fa'aupuga o le fa'asologa o genes, fa'atatau i le fa'asologa o genes e tasi. mautu sa i le va o Boregine ma le faitau aofa'i 22660. E le gata i lea, o le vave tali 83A:476 (6 hpi) ma le tuai ona tali Mandelup ma le faitau aofa'i 22660 e aofia ai le faaupuga GO:0015979 'photosynthesis' ma isi fa'agaioiga fa'aola.
O le bioprocess gene ontology terms ua filifilia i le faʻamatalaga o kenera faʻaalia i le taimi o tali transcriptome o le lupine vaapiapi (NLL) faʻamaʻiina i le anthrax lupine (Col-08 strain na maua mai le lupine fields i Wierzhenice, Polani, i le 1999) ua matua faʻateleina. O laina NLL na suʻesuʻeina o: 83A: 476 (teteʻe, tauaveina le homozygous Lanr1 allele), Boregine (teteʻe, le iloa faʻasologa o gafa), Mandelup (faʻafefeteina, tauaveina le homozygous AnMan allele) ma le faitau aofaʻi 22660 (mafatia).
Talu ai o lenei suʻesuʻega na faʻamoemoe e faʻamaonia kenera e fesoasoani i le tetee atu i le anthracnose, o kenera na tuʻuina atu i faaupuga GO "GO: 0006952 Defensive responses" ma le "GO: 0055114 Redox process" na suʻesuʻeina ma tipi talu ai o lona uiga o le ≥ 30 ma le itiiti ifo ma le tasi le laina. × i le taimi e tuʻufaʻatasia ai faʻamaumauga taua o le log2 (suiga gauga). Ole numera o kenera e fetaui ma nei ta'iala e 65 mo GO:0006952 ma le 524 mo GO:0055114.
83A: 476 na faʻaalia ai le lua DEG pito i luga o loʻo faʻamatalaina i le faaupuga GO: 0006952, o le muamua i le 6 genes i le inisi (64 genes, luga ma lalo tulafono faatonutonu) ma le lona lua i le 24 genes i le inisi (15 genes, up regulation only). Na faʻaalia foi e Boregine o le GO: 0006952 na maualuga i le taimi e tasi, ae faʻaitiitia le DEG (11 ma le 8) ma le faʻaosoina faʻapitoa. Na faʻaalia e Mandeloop ni tumutumu se lua o GO: 0006952 i le 12 ma le 48 HPI, o loʻo tauaveina uma 12 genes (muamua faʻatasi ai ma genes faʻagaoioia, ma le lona lua faʻatasi ai ma genes suppressive), ae o le 22660 faitau aofaʻi i le 6 HPI (13 genes) na sili atu le maualuga o le faʻateleina o le tumutumu. tulafono faatonutonu. E tatau ona maitauina o le 96.4% o le GO: 0006952 DEG i nei tumutumu e tutusa lava le ituaiga o tali (luga poʻo lalo), e faʻaalia ai le taua tele i tali puipui e ui lava i eseesega i le numera o kenera e aofia ai. O le vaega tele o fa'asologa e feso'ota'i ma le faaupuga GO:0006952 e fa'ailoga le Starvation Stress-Associated Message Protein 22 (SAM22-like), lea e aofia i le vasega 10 pathogenesis-associated protein (PR-10) protein clade ma le latex porotini autu. tutusa (MLP-pei) polotini) polotini (Ata 3). O vaega e lua na eseese i le natura o faʻamatalaga ma le itu o le tali. O kenera e faʻapipiʻi SAM22-pei o polotini na faʻaalia ai le tumau ma le taua tele i le taimi muamua (6 poʻo le 12 hpi) ma e masani lava ona le tali mai i le faaiuga o le suʻega (48 hpi), ae o le MLP-pei o le protein na faʻaalia le faʻamaopoopoina i le 6 hpi. hpi. 83A: 476 ma Mandelup i le 48 hp / i, toetoe lava o isi faʻamatalaga uma e le tali mai. E le gata i lea, o eseesega i faʻamatalaga faʻamatalaga o SAM22-pei o le protein genes na mulimulitaʻia ai le fesuisuiai o le anthracnose resistance, ona o le tele o laina faʻasaʻo e tele taimi taimi e faʻaosoina ai nei kenena nai lo le sili atu ona aʻafia. O le isi LlR18A/B-pei o le PR-10 gene na fa'aalia se fa'aaliga fa'atusa tutusa ma le SAM22-pei o le porotini gene.
O vaega autu o le faagasologa o mea ola "GO: 0006952 Defense Response" ma faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga o genes sui o le Lanr1 ma AnMan alleles na iloa. Ole fua ole Log2 o loʻo faʻatusalia ai le log2 (suiga gauga) i le va o tui (Colletotrichum lupini, strain Col-08, maua mai fanua lupine, Wizhenica, Polani, 1999) ma pulea (sham-inoculated) laau i le taimi e tasi. Na su'esu'eina laina lupine vaapiapi nei: 83A: 476 (tete'e, ave le Lanr1 allele homozygous), Boregine (tete'e, fa'atupu fa'asologa e le o iloa), Mandelup (tete'e fa'afeagai, tauaveina le homozygous AnMan allele), ma le Population 22660 (mafatia).
E le gata i lea, o faʻamatalaga faʻamatalaga o le RNA-seq sui tauva genes Lanr1 (TanjilG_05042) ma AnMan (TanjilG_12861) na iloiloina (Fig. 3). O le TanjilG_05042 gene na faʻaalia se tali taua (faʻagaoioia) i le 83A: 476 naʻo le taimi muamua (6 hpi), aʻo TanjilG_12861 sa taua i Mandeloop naʻo le lua taimi: 6 hpi (lalo tulafono faatonutonu) ma le 24 hpi (6 hpi). Faatasi ai ma.). fetuutuunai)).
O kenera sili ona fa'aalia i le faaupuga GO: 0055114 "redox process" o kenera e faʻapipiʻi ai le cytochrome P450 proteins ma peroxidase (Fig. 4). Mo faʻataʻitaʻiga vavae ese mai le 83A: 476 i le 6 HPI, maualuga poʻo le laʻititi log2 (suiga gauga) (mo le 86.6% o kenera) sa masani ona matauina i le va o le tui ma le pulea o laau, e faʻaalia ai le maualuga o le tali atu o lenei genotype i le faʻamaʻiina o feusuaiga. 83A: 476 na faʻaalia le GO sili ona taua: 0055114 DEG i le 6 hpi (503 genes), ae o isi laina i le 48 hpi (Boregine, 31 genes; Mandelup, 85 genes; ma Population 22660, 78 genes)). I le tele o genes o le GO: 0055114 aiga, e lua ituaiga o tali i tui (faʻagaoioia ma faʻasaina) na matauina. O le mea e malie ai, e oʻo atu i le 97.6% o DEGs ua faʻamaonia mo le faaupuga GO: 0055114 i Mandelupe i le 48 hp O nei faʻamatalaga o loʻo fautua mai ai, e ui lava i le laʻititi laʻititi (ie, le numera o genes redox mutated, 85 versus 503), o le mamanu o le tuai transcriptome tali o le maracnose vave tali tutusa i se tali vave maracnose. 83A:476. I Boregine ma le faitau aofa'i 22660, o lenei fa'atasiga e maualalo i le 51.6% ma le 75.6%, i le faasologa.
O faʻataʻitaʻiga o faʻamatalaga o vaega autu o le taimi o le biological process "GO: 0055114 Redox process" na faʻaalia. O le fua Log2 o loʻo faʻatusalia ai le log2 (suiga gauga) i le va o tui (Colletotrichum lupini, strain Col-08, maua mai fanua lupine, Wizhenica, Polani, 1999) ma le pulea (sham-inoculated) laau i le taimi e tasi. Na su'esu'eina laina lupine vaapiapi nei: 83A: 476 (tete'e, ave le Lanr1 allele homozygous), Boregine (tete'e, fa'atupu fa'asologa e le o iloa), Mandelup (tete'e fa'afeagai, tauaveina le homozygous AnMan allele), ma le Population 22660 (mafatia).
83A:476 O tali fa'aliliuga ile tui ile C. lupini (strain Col-08) na aofia ai fo'i le fa'amaopoopo fa'amaopoopoina o kenera e fa'atatau i le faaupuga GO:0015979 "photosynthesis" ma isi fa'asologa fa'aolaola e feso'ota'i (FIG. 5). O lenei GO: 0015979 DEG seti o loʻo i ai 105 genes na matua faʻasalaina ile 6 hpi ile 83A:476. I lenei vaega, 37 genes na faʻalaloina foi i Mandelup i le 48 HPI ma le 35 i le taimi lava e tasi i le 22660 faitau aofaʻi, e aofia ai le 19 DEGs masani i genotypes e lua. Leai DEGs e fesoʻotaʻi ma le faaupuga GO: 0015979 na matua faʻagaoioia i soʻo se tuufaatasiga (laina x taimi).
O faʻataʻitaʻiga o faʻamatalaga o vaega autu o le taimi o le biological process "GO: 0015979 Photosynthesis" na faʻaalia. O le fua Log2 o loʻo faʻatusalia ai le log2 (suiga gauga) i le va o tui (Colletotrichum lupini, strain Col-08, maua mai fanua lupine, Wizhenica, Polani, 1999) ma le pulea (sham-inoculated) laau i le taimi e tasi. Na su'esu'eina laina lupine vaapiapi nei: 83A: 476 (tete'e, ave le Lanr1 allele homozygous), Boregine (tete'e, fa'atupu fa'asologa e le o iloa), Mandelup (tete'e fa'afeagai, tauaveina le homozygous AnMan allele), ma le Population 22660 (mafatia).
Faʻavae i luga o faʻaiʻuga o suʻesuʻega faʻamatalaga eseese ma e ono aʻafia ai i tali puipuia e faasaga i siama faʻamaʻi, o lenei seti o kenera e fitu na filifilia mo le faʻatusatusaina o faʻamatalaga faʻamatalaga e ala i le PCR taimi moni (Supplementary Table S9).
O le putative protein gene TanjilG_10657 na matua faʻaosoina i laina suʻesuʻe uma ma taimi faʻatusatusa i le pulea (faʻataʻitaʻi) laau (Supplementary Tables S10, S11). E le gata i lea, o le faʻamatalaga faʻamatalaga o TanjilG_10657 na faʻaalia ai le faʻatupulaia o faʻataʻitaʻiga i le gasologa o le suʻega mo laina uma. O le faitau aofaʻi 22660 na faʻaalia ai le maualuga o le lagona o TanjilG_10657 i le inoculation ma le 114-fold activation ma le maualuga o le faʻaaliga faʻaalia (4.4 ± 0.4) ile 24 HPI (Fig 6a). O le PR10 LlR18A protein gene TanjilG_27015 na faʻaalia foi le faʻagaoioia i luga o laina uma ma taimi, faʻatasi ai ma le taua o fuainumera i le tele o faʻamaumauga (Fig. 6b). E tutusa ma TanjilG_10657, o le maualuga o le faʻaaliga faʻaalia o le TanjilG_27015 na matauina i le 22660 tagata tui ile 24 HPI (19.5 ± 2.4). O le acid endochitinase gene TanjilG_04706 sa matua fa'asalaina i laina uma ma i taimi uma sei vagana ai Boregine 6 hpi (Fig 6c). Na matua fa'aosoina i le taimi muamua (6 HPI) i le 83A: 476 (i le 10.5 taimi) ma fa'atuputeleina le fa'atupulaia i isi laina (i le 6.6-7.5 taimi). I le taimi o le faʻataʻitaʻiga, o le faʻaaliga o TanjilG_04706 na tumau pea i tulaga tutusa i le 83A: 476 ma Boregine, ae i Mandelup ma le Population 22660 na matua faʻateleina, e oʻo atu i tau maualuga (5.9 ± 1.5 ma 6.2 ± 1.5, faasologa). O le endoglucan-1,3-β-glucosidase-like gene TanjilG_23384 na faʻaalia le faʻamalosia maualuga i taimi muamua e lua (6 ma 12 hpi) i laina uma sei vagana ai le faitau aofaʻi 22660 (Fig 6d). O le maualuga o faʻamatalaga faʻamatalaga o TanjilG_23384 na matauina i le taimi lona lua (12 hpi) i Mandelup (2.7 ± 0.3) ma le 83A: 476 (1.5 ± 0.1). I le 24 HPI, o le TanjilG_23384 faʻamatalaga sa maualalo i laina suʻesuʻe uma (mai le 0.04 ± 0.009 i le 0.44 ± 0.12).
Fa'amatalaga fa'amatalaga o kenera filifilia (ag) fa'aalia ile quantitative PCR. O numera 6, 12 ma le 24 o lo'o fa'atusalia itula talu ona uma le tui. O le LanDExH7 ma LanTUB6 genes na faʻaaogaina mo le faʻavasegaina ma LanTUB6 na faʻaaogaina mo le vaʻaiga faʻasologa. Fa'ailoga sese e fai ma sui o le va'aiga masani e fa'avae i luga o fa'asologa fa'aola e tolu, o ia mea ta'itasi o le averesi o fa'asologa fa'apitoa e tolu. O le taua o fuainumera o eseesega i tulaga faʻaalia i le va o le tui (Colletotrichum lupini, strain Col-08, maua mai i le 1999 mai le fanua lupine i Wierzenica, Polani) ma le pulea (mock-inoculated) laau o loʻo faailogaina i luga aʻe o faʻamaumauga (* P tau <0.05, ** P tau ≤ 0.01, *** P 0.01, *** P 0.01). O le taua o fuainumera o eseesega i tulaga faʻaalia i le va o le tui (Colletotrichum lupini, strain Col-08, maua mai i le 1999 mai le fanua lupine i Wierzenica, Polani) ma le pulea (mock-inoculated) laau o loʻo faailogaina i luga aʻe o faʻamaumauga (* P tau <0.05, ** P tau ≤ 0.01, *** P 0.01, *** P 0.01). Статистическая значимость различий в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08, получен в гля 1999 г. в Верженице, Польша) ma контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечена над точками данных (*знач0,ние P 5 0,01, ***значение P ≤ 0,001). O eseesega taua o fuainumera i tulaga faʻaalia i le va o tui (Colletotrichum lupini, strain Col-08, maua i le 1999 mai se fanua lupine i Wierzhenice, Polani) ma le pulea (sham-inoculated) laau o loʻo maitauina i luga aʻe o faʻamaumauga (* P tau <0.05, ** P-value ≤ 0.01, ≤ 0. *** P-0).接种（Colletotrichum lupini，Col-08株，1999年从波兰Wierzenica的羽扇豆田获得）和对照（模拟接种）植物之间表达水平差异的统计学显着性标记在数据為0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001).接种 （colletotrichum lupini ， color-08 株 ， 1999 年 波兰 波兰 wierzenica 的 羽扇 获得） 和 对照 （ 接秉水平 差异 的 统计学 显着性 标记 数据点 上方*p 值 <0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001)。 Статистически значимые различия в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08, полученный спол. Верженице, Польша, в 1999 г.) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечены над точками (*, 5 * 0,00) P-значение ≤ 0,01, ***P-значение ≤ 0,001). O eseesega taua o fuainumera i tulaga faʻaalia i le va o tui (Colletotrichum lupini, strain Col-08, maua mai fanua lupine i Verzhenice, Polani, i le 1999) ma le pulea (sham-inoculated) laau o loʻo maitauina i luga aʻe o faʻamaumauga (* P tau <0.05 , **P-value ≤ 0.01, 0.0-1).O laina NLL na suʻesuʻeina o: 83A: 476 (teteʻe, tauaveina le homozygous Lanr1 allele), Mandelup (moderately teteʻe, tauaveina le homozygous AnMan allele), Boregine (teteʻe, le iloa faʻasologa o gafa) ma le faitau aofaʻi 22660 (mafatia).
O le sui o le gene TanjilG_05042 i le Lanr1 locus na faʻaalia ai se faʻaaliga iloga ese mai faʻamatalaga na maua mai suʻesuʻega RNA-seq (Fig. 6e). O le faʻagaoioia taua o lenei gene na matauina i Mandelup ma le 22660 faitau aofaʻi (e oʻo atu i le 39.7 ma le 11.7 taimi, i le faasologa), e mafua ai le maualuga o faʻamatalaga (e oʻo atu i le 1.4 ± 0.14 ma le 7.2 ± 1.3, faasologa). 83A: 476 na faʻaalia foi nisi o faʻasalalauga o le TanjilG_05042 gene (e oʻo atu i le 3.8-fold), ae ui i lea, o le maualuga o faʻamatalaga na ausia (0.044 ± 0.002) e sili atu nai lo le 30-faʻaitiitia nai lo i latou na matauina i Mandelup ma le 22660 faitau aofaʻi. suʻesuʻeina e le qPCR na faʻaalia ai le tele o eseesega i le faʻaalia o tulaga i le va o genotypes i faʻamaʻi-tuiina (pulea) fesuiaiga, e oʻo atu i le 58-saʻi eseesega i le va o le faitau aofaʻi 22660 ma le 83A: 476, faʻapea foʻi ma le va o le faitau aofaʻi o 22660 ma le 22660. Na maua se eseesega e lua i le va o Boregine ma Mandalup.
O le kenera sui tauva i le AnMan locus, TanjilG_12861, na faʻagaoioia i le tali atu i tui i le 83A: 476 ma Mandelup, e le faʻaituau i le 22660 faitau aofaʻi, ma sa faʻalaloina i Boregine (Fig 6f). O le faʻamatalaga faʻapitoa o le TanjilG_12861 gene na sili ona maualuga ile tui 83A: 476 (0.14±0.01). O le 17.4 kDa vasega I vevela fa'ate'ia porotini gene TanjilG_05080 HSP17.4 na fa'aalia ai le maualalo o fa'aaliga fa'atusa i su'esu'ega uma ma taimi taimi (Ata 6g). O le tau sili ona maualuga na matauina i le 24 HPI i le 22660 faitau aofaʻi (0.14 ± 0.02, o le faʻavalu faʻateleina i le tali atu i tui).
Faʻatusatusaga faʻamatalaga faʻamatalaga faʻamatalaga (Fig. 7) na faʻaalia ai le maualuga o le fesoʻotaʻiga i le va o TanjilG_10657 ma isi genes e fa: TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.80), ma TanjilG6_9 (R = 0.80). O ia fa'ai'uga e ono fa'ailoa mai ai le fa'atulafonoina o nei kenera i le taimi o tali puipui. O kenera TanjilG_12861 ma TanjilG_23384 na faʻaalia ai faʻamatalaga faʻamatalaga eseese ma le maualalo o le aofaʻi o le faʻatusatusaga o le Pearson (mai le 0.08 i le 0.43 ma le -0.19 i le 0.28, i le faasologa) faʻatusatusa i isi kene.
Fa'atasiga i le va o fa'amatalaga fa'amatalaga o gene na maua i le fa'aogaina o le PCR quantitative. O laina lupine vaapiapi o loʻo mulimuli mai na suʻesuʻeina: 83A: 476 (teteʻe, tauaveina le homozygous Lanr1 allele), Mandelup (moderately teteʻe, feaveaʻi le homozygous AnMan allele), Boregine (teteʻe, faʻasologa o gafa e le iloa), ma le faitau aofaʻi 22660 (mafatia). E tolu taimi na fuafuaina (6, 12 ma 24 itula ina ua uma le tui), e aofia ai tui (Colletotrichum lupini, strain Col-08, maua mai fanua lupine i Wierzhenice, Polani, i le 1999) ma le pulea (sham-inoculated) laau. O le fua o loʻo faʻaalia ai le tau o le faʻasologa o le Pearson correlation coefficient.
Faʻavae i luga o faʻamaumauga na maua i le 6 horsepower i le inisi, na faia le WGCNA i luga o le 9981 DEG na faʻaalia e ala i le faʻatusatusaina o le tui ma le pulea o laʻau e taulaʻi atu i tali vave puipuia (Supplementary Table S12). E luasefululua fa'atupu fa'atupu (fa'aputuga) na maua fa'atasi ai (lelei pe leaga) fa'amatalaga fa'amatalaga i le va o genotypes ma su'ega fa'ata'ita'iga. I le averesi, sa fa'asolo i lalo le fa'aaliga o kenera i le fa'atonuga 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (i suiga uma e lua, peita'i, o lenei faiga na malosi atu i la'au fa'atonutonu). I le averesi, sa fa'asolo i lalo le fa'aaliga o kenera i le fa'atonuga 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (i suiga uma e lua, peita'i, o lenei faiga na malosi atu i la'au fa'atonutonu). В среднем уровни экспрессии генов снижались i порядке 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (i luga ole обоих вариантах, обнтакондяд, обандако, белет сильнее у контрольных растений). I le averesi, na faʻaititia le maualuga o faʻamatalaga o kene i le faʻatonuga 83A: 476> Mandelup> Boregine> Population 22660 (i suiga uma e lua, peitaʻi, o lenei tulaga na sili atu le malosi i le pulea o laau).平均而言，基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > Tagata 22660的顺序下降（然而，在两种变体中，这种趋势在对照植物中更强）。平均 而 言 ， 基因 水平 按 按 83a: 476> mandelup> boregine> faitau aofaʻi 22660 的顺序 下降 （， 在 种 中植物 中 更） .. . . . . . . . . . . . . . . . . . В среднем уровни экспрессии генов снижались i ряду 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 контрольных растений). I le averesi, na faʻaititia le maualuga o faʻamatalaga o kenera i le faasologa 83A: 476> Mandelup> Boregine> Population 22660 (peitaʻi, i suiga uma e lua, o lenei tulaga na sili atu le malosi i le puleaina o laau).O le tui na mafua ai le faʻatonutonuina o faʻamatalaga o kene, aemaise lava i modules 18, 19, 14, 6 ma 1 (i le faʻasologa o le aʻafiaga), tulafono faatonutonu le lelei (eg modules 9 ma 20) poʻo faʻatasi ai ma aʻafiaga (eg modules 11, 22, 8 ma 13). GO su'esu'ega fa'atamaoaigaina (Tulafono Fa'aopoopo S13) na fa'aalia ai le "GO: 0006952 tali Puipuia" mo le fa'aogaina o le module (18) fa'atasi ai ma le maualuga o le fa'aagaoioia, e aofia ai genes na su'esu'eina e qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 ma Tanjilny55), fa'apea fo'i ma ata fa'atosina ma TanjilG_270. modules (9). Module 18 concentrator (Fig. 8) na faailoaina o le TanjilG_26536 gene encoding le PR-10-pei LlR18B porotini, ma module 9 concentrator na faailoaina o le TanjilG_28955 gene encoding le photosystem II PsbQ porotini. O se sui tauva anthracnose gene Lanr1, TanjilG_05042, na maua i le module 22 (Fig. 9) ma e fesoʻotaʻi ma faaupuga "GO: 0044260 Cellular macromolecular metabolic process" ma le "GO: 0006355 Transcriptional regulation, DNA templating" o loʻo tauaveina le TanjilG_01212 hub. e fa'aigoaina e le kenele fa'amamafa vevela fa'aliliuga A-4a (HSFA4a).
Su'esu'ega tau feso'ota'iga o fa'amatalaga fa'atasi o ga'o o modules fa'atasi ai ma fa'aupuga fa'aolaola fa'aolaola "GO: 0006952 tali puipuiga". Sa fa'afaigofieina le Ligation e fa'ailoa ai kenera e fa na su'esu'eina e le qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 ma TanjilG_27015).
Su'esu'ega o feso'ota'iga mamafa o fa'amatalaga fa'atasi o se module fa'atasi ai ma se fa'aupuga fa'aolaola fa'aolaola "GO: 0006355: Fa'atonuga fa'aliliuga, fa'ata'ita'iga DNA" ma le fa'auluina o se sui fa'atupu anthracnose gene tetee Lanr1 TanjilG_05042. Sa fa'afaigofieina le fa'amauina e fa'aesea ai le kenera TanjilG_05042 ma le kenera TanjilG_01212 tutotonu.
O su'esu'ega a le Anthracnose na aoina i Ausetalia na fa'aalia ai o le tele o fa'ato'aga fa'ato'a fa'amatu'u e a'afia; Kalya, Coromup ma Mandelup ua faʻamatalaina o se tulaga faʻafefeteina, ae o Wonga, Tanjil ma le 83A: 476 ua faʻamatalaina e maualuga le tetee26,27,31. sa i ai le allele tetee tutusa, filifilia Lanr1, ma Coromup ma Mandelup sa i ai se allele ese, ua filifilia AnMan10, 26, 39, ae o Kalya na pasi i luga o se isi allele. , Lanr2. O le su'esu'eina o le anthracnose tete'e i Siamani na i'u ai i le fa'ailoaina o se laina fa'asao Bo7212 fa'atasi ai ma se sui tauva e ese mai i le Lanr1, ua filifilia LanrBo36.
O la matou suʻesuʻega na faʻaalia ai le maualalo tele (e tusa ma le 6%) o le Lanr1 allele i le germplasm faʻataʻitaʻiina. O lenei faʻamatalaga e ogatusa ma taunuʻuga o le suʻeina o le germplasm Europa i Sasaʻe e faʻaaoga ai faʻailoga Anseq3 ma Anseq4, lea na faʻaalia ai o le Lanr1 allele o loʻo i ai i na o le lua laina Belarusian. E ta'u mai ai o le Lanr1 allele e le'o fa'aogaina lautele e polokalame fa'atupu fa'alotoifale, e le pei o Ausetalia, lea o se tasi o alale autu mo fa'ailoga-fesoasoani fa'ato'aga. Atonu e mafua ona o le maualalo o le teteʻe na tuʻuina atu e le Lanr1 allele i tulaga o Europa faʻatusatusa i le lipoti a Ausetalia. E le gata i lea, o suʻesuʻega o le anthracnose i nofoaga maualuga timuga i Ausetalia ua faʻaalia ai o tali tetee e faʻasalalau e le Lanr1 allele atonu e le aoga i tulaga o le tau e fiafia i le tuputupu aʻe ma vave le atinaʻeina o le pathogen19,42. O le mea moni, i le suʻesuʻega nei, o nisi o faʻamaoniga o le anthracnose na matauina foi i genotypes o loʻo tauaveina le Lanr1 allele, ma fautua mai e mafai ona mou atu le tetee i lalo o tulaga sili ona lelei mo le atinaʻeina o C. lupini. E le gata i lea, o faʻamatalaga lelei sese o le i ai o Anseq3 ma Anseq4 faʻailoga, e tusa ma le 1 cM mai le Lanr1 locus, e mafai 28,30,43 .
O la matou suʻesuʻega na faʻaalia ai o le 83A: 476, o loʻo tauaveina le Lanr1 allele, na tali atu i le C. lupini inoculation ma le tele o le transcriptome reprogramming i le taimi muamua na suʻesuʻeina ai (6 hpi), aʻo iai i Mandelup, o loʻo tauaveina le AnMan allele, o tali transcriptomic na matauina mulimuli ane. (mai le 24 i le 48 hp). O nei suiga faʻaletino i tali puipui e fesoʻotaʻi ma eseesega i faʻamaʻi faʻamaʻi, faʻamaonia le taua o le vave iloa o pathogen mo se tali manuia i le tetee. Ina ia a'afia aano o la'au, e tatau ona uia le tele o la'asaga tau atina'e i luga ole la'au, e aofia ai le germination, vaevaega o sela, ma le fausia o se apppressorium. O se fa'aopoopoga o se fausaga fa'ama'i e fa'apipi'i i luga o le 'au ma fa'afaigofie ai le ulu atu i totonu o a'a. O le mea lea, o spores o le C. gloeosporioides i le pea extract na faʻaalia ai le vaega muamua o le nucleus i le maeʻa ai o le 75-90 minute o le incubation, le faʻavaeina o se faʻamaʻi siama pe a uma le 90-120 minute, ma le taofiofia pe a uma le 4 itula 45 . Mango C. gloeosporioides na faʻaalia le sili atu i le 40% conidial germination pe a maeʻa le 3 itula o faʻamaʻi ma e tusa ma le 20% faʻavaeina o apppressors pe a uma le 4 itula. O le virulence-fesoʻotaʻi CAP20 gene o C. gloeosporioides na faʻaalia ai le transcriptional activity in epiphyte-forming conidia ina ua maeʻa le 3.5 h incubation i le avocado wax ma le maualuga o le CAP20 protein pe a uma le 4 h 46 min. E faapena foi, o le gaioiga o le melanin biosynthesis genes i le C. trifolii na faaosofia i le 2-itula faʻamaʻi ma sosoo ai ma le faʻavaeina o se appressorium pe a maeʻa le 1 itula. O su'esu'ega o laula'au na fa'aalia ai o strawberries na tui i le C. acutatum e muamua ona taofiofia i le 8 hpi, a'o tamato na tui i le C. coccodes e muamua ona taofiofi i le 4 hpi48,49. tele e ogatasi ma le fua ole taimi ole Colletotrichum spp. faiga fa'ama'i. O tali vave o le puipuiga i le 83A: 476 o loʻo fautua mai ai le aʻafia o le teteʻe o laʻau ma le faʻatupuina o le puipuiga (ETI) genes i lenei laina, ae o tali tuai a Mandelup e lagolagoina ai le micro-associated molecular pattern-triggered immunity (MTI) hypothesis 50. Tali vave i le 83A: 476. O le vaega o loʻo faʻapipiʻiina i le va o genes faʻatulafonoina i luga poʻo lalo i le tali tuai e lagolagoina ai foi lenei manatu, ona o le ETI e masani ona manatu o se tali faʻavavevave ma faʻaleleia le MTI lea e faʻamaeʻa i le oti o le cell programmed i le nofoaga o faʻamaʻi pipisi, e taʻua o le anaphylactic shock 51,52 .
O le tele o kenera e mafua mai i le faaupuga ua sili atu ona faʻaalia Gene Ontology GO: 0006952 "Tali Puipuiga" o le 11 homologues o le feʻau anapogi faʻaoso faʻaoso 22 porotini (e tutusa ma le SAM22) ma le fitu tele latex protein-likes (MLPs). -pei o polotini 31, 34, 43 ma 423 na faʻaalia ai le faʻasologa tutusa. SAM22-pei o genes na faʻaalia ai le faʻagaoioia taua e umi atu, faʻaalia ai le maualuga o le maualuga o le anthracnose resistance (83A: 476 ma Boregine). Ae ui i lea, o kenera e pei o le MLP na faʻalaloina naʻo laina o loʻo tauaveina le allele tetee sui (83A: 476 / Lanr1 i le 6 hpi ma Mandelup / AnMan i le 24 hpi). E tatau ona maitauina o SAM22-e pei o homologues uma ua iloa e afua mai i se fuifui gafa e tusa ma le 105 kb, ae o genes pei o le MLP e afua mai i itu eseese o le genome. O le faʻamaopoopoina o le faʻagaoioia o ia SAM22-pei o genes na maua foi i la matou suʻesuʻega talu ai o le NLL tetee i le Diaporthetoxica inoculation, e faʻapea o loʻo latou aʻafia i vaega faʻasolosolo o le tali puipui. O lenei fa'ai'uga o lo'o lagolagoina fo'i e lipoti o se tali lelei a genes-pei o le SAM22 i manu'a po'o togafitiga i le salicylic acid, fa'aoso fa'ama'i, po'o le hydrogen peroxide.
O kenera e pei o le MLP ua fa'aalia e tali atu i fa'ama'i fa'ama'i ma biotic eseese, e aofia ai fa'ama'i siama, fa'ama'i ma fa'ama'i fa'ama'i fa'ama'i i le tele o ituaiga o la'au55. O fa'atonuga o le tali atu i nisi o feso'ota'iga i le va o la'au ma fa'ama'i e amata mai i le fa'atupula'ia malosi (fa'atusa, i le taimi o le fa'ama'iina o le cotton ma le Verticillium dahliae) i le fa'aitiitia tele (fa'apena, pe a mae'a fa'ama'i o le apu i le Alternaria spp.)56,57. O le fa'aitiitia o le fa'atonutonuina o le kenera e pei o le MLP 423 na matauina i le taimi e puipuia ai le avoka mai fa'ama'i F. niger ma le taimi o fa'ama'i o le apu Botryosphaeria berengeriana f. cn. piricola ma Alternaria alternata o apu pathotypes58,59. E le gata i lea, o le apple calli o loʻo faʻaalia le MLP-pei o le 423 gene na maualalo le faʻaalia o kenera e fesoʻotaʻi ma teteʻe ma sili atu ona aʻafia i faʻamaʻi pipisi59. I le mulimulitaia o le Fusarium oxysporum f, o le MLP-pei o le 423 gene na taofiofia foi i le siama masani o fatu pi. cn. Fa'ama'i pi 60.
O isi tagata o le aiga PR-10 na faʻaalia i la matou suʻesuʻega RNA-seq o le LlR18A ma le LlR18B genes e tali atu i le faʻatonutonuina, faʻapea foʻi ma le faʻatulafonoina (1 gene) poʻo lalo ifo (3 genes) genes mo le lipid transfer protein DIR1. . E le gata i lea, o le WGCNA o loʻo faʻamamafaina le kenera LlR18B o se faʻaoga i totonu o lenei module, lea e sili ona aʻafia i tui ma o loʻo tauaveina ni kenera tali puipui. O genes LlR18A ma LlR18B na faʻaosoina i lau lanu samasama e tali atu ai i siama faʻamaʻi, faʻapea foʻi ma NLL aʻa ina ua maeʻa D. toxica inoculation, ae o le homologue araisa o nei kenera, RSOsPR10, na vave faʻaosoina e se faʻamaʻi pipisi e ono aʻafia i le jasmonic acid signaling pathway 63, DIR16 genes. e le fa'apitoa le lipid felauaiga polotini e mana'omia mo le amataga o le systemic acquired resistance (SAR). Faatasi ai ma le atinaʻeina o tali puipuia, o le DIR1 protein e feaveaʻi mai le taulaʻi o faʻamaʻi e ala i le phloem e faʻaosofia ai le SAR i totoga mamao. O le mea e malie ai, o le TanjilG_02313 DIR1 gene na matua fa'aosoina i le taimi muamua i laina 84A: 476 ma le faitau aofa'i 22660, ae na o le laina 84A: 476 na tupu manuia ai le tetee o le anthracnose. E mafai ona faʻaalia ai nisi o le faʻaogaina o le DIR1 gene i le NLL, talu ai o le isi tolu o loʻo totoe na tali atu i le inoculation naʻo le 83A: 476 laina i le 6 hpi, ma o lenei tali na agai i lalo.
I la matou suʻesuʻega, o vaega sili ona taatele e fetaui ma le faagasologa o meaola e taʻua o le "GO: 0055114 Redox process" o le cytochrome P450 protein, peroxidase, linoleic acid 9S-/13S-lipoxygenase, ma le 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase. E le gata i lea, o le matou WGCNA o loʻo faʻamatalaina le HSFA4a homologue o se faʻaoga o loʻo tauaveina modules pei o le Lanr1 resistance gene candidate TanjilG_05042. HSFA4a o se vaega o le redox-faalagolago tulafono faatonutonu o le faaniukilia transcription i laau.
Cytochrome P450 polotini o oxidoreductases e faʻamalosia le NADPH ma / poʻo le O2 faʻalagolago i le hydroxylation reactions i le metabolism muamua ma le lua, e aofia ai le metabolism o xenobiotics, faʻapea foʻi ma hormones, gaʻo gaʻo, sterols, vaega puipui puipui, biopolymers, ma le biosynthesis o mea puipuia 69. I totonu o la matou suʻesuʻega o le P450d cytochromability na faʻaitiitia ai le faʻaogaina o le cytochrome. -10.6 log2 (suiga gaugau) i le 5.7 ona o se numera tele o homologues ua suia (37) ma eseesega i mamanu tali i le va o kenera patino, e atagia ai se toe iloiloga i luga. . O le fa'aaogaina na'o le RNA-seq fa'amatalaga e fa'amalamalama ai le galuega fa'aola o le NLL genes i totonu o se fa'aiga sili polotini tele o le a matua taumatemate lava. Ae ui i lea, e taua le matauina o nisi o genes cytochrome P450 e fesoʻotaʻi ma le faʻateleina o le teteʻe atu i fungi pathogenic poʻo siama, e aofia ai se sao i faʻamaʻi faʻamaʻi69,70,71.
Vasega III peroxidases o enzymes laau e tele galuega e aofia ai i le tele o gaioiga metabolic i le taimi o le tuputupu aʻe ma le atinaʻeina o laʻau, faʻapea foʻi ma le tali atu i faʻafitauli tau le siosiomaga e pei o le salinity, lamala, maualuga le malosi o le malamalama, ma osofaʻiga pathogen72. Peroxidases o loʻo aʻafia i fegalegaleaiga a le tele o ituaiga o laau ma Anthracis, e aofia ai Stylosanthes humilis ma C. gloeosporioides, Lens culinaris ma C. truncatum, Phaseolus vulgaris ma C. lindemuthianum, Cucumis sativus ma C. lagenarium73,74,75,76. O le tali e vave tele, o nisi taimi e oʻo i le 4 HPI, aʻo leʻi oʻo i totonu le gaʻo i totonu o le laau73. Na tali atu fo'i le gene peroxidase ile tui ole D. toxica NLL. I le faaopoopo atu ia latou galuega masani e faʻatonutonu ai le paʻu o le oxidative poʻo le faʻaumatiaina o le faʻamaʻi faʻamaʻi, e mafai e peroxidases ona faʻalavelave i le tuputupu aʻe o le pathogen e ala i le fatuina o pa puipui faʻaletino e faʻavae i luga o le puipui puipui i le taimi o le lignification, subunit poʻo le faʻafesoʻotaʻi o mea faʻapitoa. O lenei galuega e mafai ona faʻatatau i le silico i le TanjilG_03329 gene encoding a putative lignin-forming anion peroxidase lea na matua faʻatonutonuina i la matou suʻesuʻega i le 83A: 476 resistant line i le 6 HPI, ae le o isi faʻalavelave ma taimi e leʻi tali mai.
9S-/13S-lipoxygenase o le linoleic acid o le laasaga muamua lea i le auala oxidative o lipid biosynthesis78. O oloa o lenei auala e tele galuega i le puipuiga o laau, e aofia ai le faʻamalosia o le puipui puipui e ala i le faʻavaeina o le callose ma pectin deposits, ma le faʻatonutonuina o le faʻamaʻi faʻamaʻi e ala i le gaosiga o ituaiga okesene reactive79,80,81,82,83. I le suʻesuʻega nei, o le faʻamatalaga o le linoleic acid 9S- / 13S-lipoxygenase na suia i faʻalavelave uma, ae i le faitau aofaʻi o le 22660, na manumalo ai le faʻatonuga i taimi eseese, ae i totonu o galu o loʻo tauaveina Lanr1 ma le AnMan allele, e faʻamalosia ai le faʻavasegaina o le tali o le oxylipinx i le va o le oxylipin layers.
O le 1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase (ACO) homologue na matua faʻasalaina (9 genes) poʻo lalo ifo (2 genes) pe a tui i le lupine. Faatasi ai ma tuusaunoaga e lua, o nei tali uma na tutupu i le 6 hp. i le 83A:476. Ole tali ole enzymatic e fa'atalanoaina e polotini ACO ole la'asaga fa'atapula'aina ile gaosiga ole ethylene ma e fa'atulafonoina84. O le Ethylene o se hormone o la'au o lo'o faia le tele o matafaioi i le fa'atonutonuina o le atina'eina o la'au ma le tali atu i fa'afitauli o le abiotic ma biotic. O le fa'auluina o le fa'aliliuga a le ACO ma le fa'agaoioia o le ala fa'ailoga ethylene o lo'o a'afia i le fa'ateleina o le tete'e o araisa i le hemibiotrophic fungus oryzae oryzae e ala i le fa'atonutonuina o le gaosiga o ituaiga o okesene fa'afoliga ma phytoalexins. O se faiga faʻamaʻi laʻau tutusa e maua i le va o M. oryzae ma C. lupini88,89, faʻasaga i le faʻasologa o se faʻatonuga taua o ACO homologues i le 83A: 476 laina lipotia i lenei suʻesuʻega, e suia ai le avanoa e tuʻuina atu ai le tetee i le NLL anthracnose Ethylene o se laasaga tutotonu i ala mole mole .
I le suʻesuʻega nei, o le taofiofia tele o le tele o genes e fesoʻotaʻi ma le photosynthesis na matauina i le 6 hpi i le 83A: 476 ma le 48 hpi i Mandeloop ma le 22660 faitau aofaʻi. O le lautele ma le alualu i luma o nei suiga e tutusa ma le maualuga. I lenei suʻesuʻega, na matauina le tetee o Anthracnose. Talu ai nei, o le malosi ma le vave taofiofia o tusitusiga e fesoʻotaʻi ma le photosynthesis na lipotia i le tele o faʻataʻitaʻiga o fesoʻotaʻiga o laʻau-pathogen, e aofia ai siama faʻamaʻi ma sigi. Fa'atopetope (mai le 2 HPI i nisi o fegalegaleaiga) ma le taofiofia o kenera e fesoʻotaʻi ma le photosynthesis i le tali atu i faʻamaʻi pipisi e mafai ona faʻaosoina le puipuiga o le laau e faʻavae i luga o le faʻapipiʻiina o ituaiga okesene faʻafefe ma a latou fegalegaleaiga ma le salicylic acid pathway e faʻasalalau faʻamaʻi 90,94.
I le faaiuga, o auala e tali atu ai i le puipuiga ua fuafuaina mo le gafa sili ona tetee (83A: 476) e aofia ai le vave iloa o pathogen e le R gene (atonu o le TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) ma le tali a le allergic-mediated salicylic acid ma le ethylene signaling, sosoo ai ma le faʻavaeina o le SAR umi. gaioiga e lagolagoina e le DIR-1 porotini. E tatau ona maitauina o le vaitaimi o le biotrophic mo C. lupini faʻamaʻi e matua puupuu lava (pe a ma le 2 aso), sosoo ai ma le necrotic growth95. O le suiga i le va o nei laʻasaga e mafai ona fesoʻotaʻi ma necrosis ma faʻaalia o polotini e mafai ona faʻaaogaina ethylene e fai ma faʻaosoina faʻalavelave faʻafuaseʻi i laʻau talimalo. O le mea lea, o le faʻamalama o le taimi mo le puʻeina manuia o C. lupini i le biotrophic tulaga e matua vaapiapi. O le toe faʻatulagaina o kenera e fesoʻotaʻi ma redox ma photosynthesis o loʻo matauina i le 83A: 476 i le 6 hpi e ogatasi ma le alualu i luma o le fungal hyphae ma faʻailoa le atinaʻeina o se tali puipuia manuia i le biotrophic stage. O tali transcriptomic a Mandelup ma le faitau aofaʻi o le 22660 atonu e tuai tele e puʻeina le gaʻo aʻo leʻi suia i le tuputupu aʻe o le necrotic, ae ui i lea, atonu e sili atu le aoga o Mandelup nai lo le faitau aofaʻi o le 22660 ona o le faʻatonuga vave o le PR-10 protein e faʻamalosia ai le faʻasagaga faʻasaga.
ETI, fa'aosoina e le canonical R gene, e foliga mai o se faiga masani mo le tete'e o pi i le anthracnose. O le mea lea, i le faʻataʻitaʻiga legume Medicago truncatula, o le tetee atu i le anthracnose e tuʻuina atu e le RCT1 gene, o se sui o le TIR-NBS-LRR97 laau R gene vasega. O le kenera fo'i e tu'uina atu ai le lautele o alaleo e tete'e ai i le alfalfa pe a tu'uina atu i la'au e a'afia. I le pi masani (P. vulgaris), e silia ma le lua taseni genes tetee anthracnose ua faailoa mai i le taimi nei. O nisi o nei kenera e maua i itulagi e leai ni genes R canonical, ae o le tele o isi o loʻo i pito o chromosomes o loʻo tauaveina le NBS-LRR gene cluster, e aofia ai TIR-NBS-LRRs99. O suʻesuʻega a le SSR genome-wide na faʻamaonia ai foi le fesoʻotaʻiga o le gene NBS-LRR faʻatasi ma le anthracnose tetee i le pi masani. Na maua fo'i le gene canonical R i le itulagi genomic o lo'o tauaveina le nofoaga tele e tete'e ai le anthracnose ile lupine pa'epa'e 101.
O la matou galuega o loʻo faʻaalia ai o le vave faʻaalia o le teteʻe, faʻaagaoioia i le amataga o le faʻamaʻi pipisi o laau (sili atu e le sili atu i le 12 hpi), e puipuia lelei le lupine vaapiapi mai le anthracnose e mafua mai i le pathogenic fungus Collelotrichum lupini. I le fa'aogaina o le fa'asologa maualuga, na matou fa'aalia ai fa'amatalaga fa'aaliga eseese o kenera tete'e anthracnose i la'au NLL fa'atalanoaina e le Lanr1 ma le AnMan fa'asagaga genes. O le puipuiga manuia e aofia ai le fuafuaina ma le faaeteete o kenera mo polotini o loo aafia i le redox, photosynthesis, ma le pathogenesis i totonu o itula o le uluai fesootaiga a le laau ma se pathogen. O tali tutusa puipuia, ae tuai i le taimi, e sili atu le aoga i le puipuia o laau mai faʻamaʻi. Anthrax resistance mediated by Lanr1 gene e foliga tutusa ma le masani vave o le R gene (effector-triggered immunity), ae o le AnMan gene e foliga mai e maua ai se tali fa'alava (immunity fa'aosoina e se microbe-associated molecular pattern), e maua ai se tulaga talafeagai o le faʻaauau.
O laina 215 NLL na faʻaaogaina e suʻe ai faʻailoga anthracnose e aofia ai 74 cultivars, 60 laina maua mai i le kolosi poʻo le faʻatupuina, 5 mutants, ma le 76 vao poʻo muamua germplasms. O laina na sau mai atunuu e 17, aemaise lava mai Polani (58), Sepania (47), Siamani (27), Ausetalia (26), Rusia (19), Belarus (7), Italia (5) ma isi laina. mai atunuu e 10. O le seti e aofia ai foʻi laina faʻamaufaʻailoga: 83A: 476, Tanjil, Wonga o loʻo tauaveina le Lanr1 allele, ma Mandelup o loʻo tauaveina le AnMan allele. O laina na maua mai le European Lupine Genetic Resource Database o loʻo tausia e le Poznań Plant Breeding Ltd., Wiatrowo, Polani (Supplementary Table S1).
O laʻau na totoina i lalo o tulaga faʻatonutonu (photoperiod 16 itula, vevela 25°C i le ao ma 18°C ​​​​i le po). E lua fa'ata'ita'iga fa'aola na su'esu'eina. O le DNA na vavae ese mai lau tolu vaiaso le matutua e faʻaaoga ai le DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, Siamani) e tusa ai ma le protocol. O le lelei ma le faʻaogaina o le DNA tuʻufua na suʻesuʻeina e ala ile spectrophotometric (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ISA). O le AnManM1 faʻailoga o loʻo faʻailogaina le anthracnose resistance gene AnMan (na maua mai cv. Mandelup) ma faʻailoga Anseq3 ma Anseq4 faʻapipiʻi le gene Lanr1 (na maua mai cv. Tanjil) na suʻesuʻeina 11,26,28. O Homozygotes mo le allele tetee na togiina o le "1", faigofie - pei o le "0", ma heterozygotes - pei o le 0.5.
E tusa ai ma faʻaiʻuga o suʻesuʻega mo faʻailoga AnManM1, AnSeq3 ma AnSeq4 ma le maua o fatu mo suʻesuʻega mulimuli mulimuli, 50 NLL laina na filifilia mo anthracnose resistance phenotyping. O le au'ili'iliga sa faia fa'alua i totonu ose komipiuta e pulea fale'ele'ele fa'atasi ma le 14 itula fa'ata'ita'iga fa'atasi ma le vevela e 22°C i le ao ma le 19°C i le po. E mata'ia fatu (tipi ese le peleue fatu i le isi itu o le afuafua i le lau ma'ai) a'o le'i luluina ina ia taofia ai le moe o fatu ona o le maaa tele o le peleue fatu ma ia mautinoa le tupu tutusa. O laʻau na totoina i totonu o fagu (11 × 11 × 21 cm) faʻatasi ai ma eleele mama (TS-1 REC 085 Medium Basic, Klasmann-Deilmann Polska, Warsaw, Polani). Na faia le inoculation i le Colletotrichum lupini Col-08 strain, na tupu i le 1999 mai laʻau o laʻau lupine vaapiapi na ola i se fanua i Verzhenitsa, Polani Tele (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E ). Maua se eria. O fa'aesea na fa'atupuina i le SNA medium i le 20 ° C. i lalo o le malamalama uliuli mo le 21 aso e fa'aosofia ai le sporulation. E fa vaiaso talu ona luluina, ina ua oʻo atu laʻau i le 4-6 laʻau laʻau, na faia le tui e ala i le faʻafefeteina o le conidia i le maualuga o le 0.5 x 106 conidia i le ml. A maeʻa le tui, o laʻau na teuina i le pogisa mo le 24 itula i le susu e tusa ma le 98% ma le vevela o le 25 ° C e faʻafaigofie ai le germination o le conidia ma le faʻamaʻi pipisi. Ona totoina lea o laau i lalo ole 14-itula photoperiod ile 22°C ao/19°C po ma le 70% susū. Ole togi ole fa'ama'i na faia ile 22 aso talu ona tui ma e amata ile 0 (immune) i le 9 (sili ona faigofie) e fa'atatau ile iai po'o le leai o ni manu'a necrotic ile au ma lau. E le gata i lea, ina ua uma ona togi, ona fuaina lea o le mamafa o laau. O sootaga i le va o faʻailoga faʻailoga ma faʻamaʻi faʻamaʻi na fuafuaina e avea ma faʻasologa o faʻasologa e lua (leai o faʻailoga heterozygous i le seti o laina mo le auiliiliga o le phenotype tetee anthracnose).