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O le Angustifolius lupine (NLL, Lupinus angustifolius L.) o se laʻau legume e faʻaaogaina mo le gaosiga o meaʻai ma le faʻaleleia atili o le eleele. O le faʻalauteleina o le NLL i le lalolagi atoa o se faʻatoʻaga ua tosina mai ai le tele o siama faʻamaʻi, e aofia ai le lupine anthracnose, lea e mafua ai le faʻamaʻi mataʻutia o le anthracnose. E lua alleles, Lanr1 ma AnMan, ia e faʻateleina ai le teteʻe, ua faʻaaogaina i le faʻatoʻaga NLL, ae o loʻo le o iloa pea auala faʻavae o le molecular. I lenei suʻesuʻega, o faʻailoga Lanr1 ma AnMan na faʻaaogaina e suʻesuʻe ai faʻataʻitaʻiga NLL a Europa. O le suʻeina o le tui i se siosiomaga faʻatonutonu na faʻamaonia ai le aoga o foaʻi e teteʻe uma. O le faʻavasegaina o le faʻaalia o kene na faia i luga o laina teteʻe ma laina vaivai. O le teteʻe atu i le Anthracnose na fesoʻotaʻi ma le soona faʻaalia o upu o le ontology o kene "GO:0006952 Defense Response", "GO:0055114 Redox Process", ma le "GO:0015979 Photosynthesis". E le gata i lea, o le laina Lanr1(83A:476) na faaalia ai le toe polokalameina o le transcriptome i se taimi vave ina ua uma ona tui, ae o isi laina na faaalia ai se faatuai i lenei tali pe tusa ma le 42 itula. O tali puipuiga e fesootai ma le TIR-NBS, CC-NBS-LRR ma le NBS-LRR genes, 10 porotini e aofia ai i le pathogenesis, lipid transfer proteins, endoglucan-1,3-β-glucosidase, glycine-rich cell wall proteins, ma genes mai le reactive path of oxygen. O tali vave i le 83A:476, e aofia ai le taofiofia ma le faaeteete o genes e fesootai ma le photosynthesis, na tutusa ma le puipuiga manuia i le taimi o le tuputupu aʻe o le fungal biology, ma fautua mai ai o se effector e mafua ai le puipuiga. O le tali atu o le Mandeloop e faagesegese, e faapea foi le toso faalava lautele.
O le lupine lau manifinifi (NLL, Lupinus angustifolius L.) o se sana e tele le porotini e afua mai i le itulagi i sisifo o le Metitirani1,2. O loʻo totoina nei o se faʻatoʻaga meaʻai mo manu ma tagata. E taʻua foʻi o se otaota lanumeamata i faiga faʻasolosolo o faʻatoʻaga ona o le faʻamautuina o le nitrogen e siama faʻamautu nitrogen ma le faʻaleleia atili o le fausaga o le eleele. Ua vave ona faia le faʻatoʻaga i le NLL i le seneturi talu ai ma o loʻo i ai pea i lalo o le mamafa tele o le faʻatoʻaga3,4,5,6,7,8,9,10,11,12. Faatasi ai ma le salalau lautele o le totoina o le NLL, o le faasologa o siama pathogenic na atiae ai ni vaega fou o faatoaga ma mafua ai ni faamai fou e faaleagaina ai faatoaga. O le mea e sili ona mataʻina mo faifaatoʻaga ma ē faʻafailele lupin o le aliaʻe mai lea o le anthracnose, e mafua mai i le siama faʻamaʻi, Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. O le mea e sili ona mataʻina mo faifaatoʻaga ma ē faʻafailele lupin o le aliaʻe mai lea o le anthracnose, e mafua mai i le siama faʻamaʻi, Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. Наиболее примечательным для фермеров и селекционеров люпина было появление антракноза, вызванного паморгиного люпина было появление антракноза, вызванного памомгрингрибто памогриление (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. O le mea e sili ona mataʻina i faifaatoʻaga ma ē faʻafailele lupine o le aliaʻe mai lea o le anthracnose e mafua mai i le siama faʻamaʻi Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真由病原真由病原真由病原真由病原真菌&Cotrici Hagedorn13 引起的.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真菌菌它是由病原真菌菌它是由病原真菌菌它是由病原真菌。 Наиболее поразительным для фермеров и селекционеров люпина является появление антракноза, вызываемогего прикмтор lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. O le mea e sili ona mataʻina i faifaatoʻaga ma ē faʻafailele lupine o le aliaʻe mai lea o le anthracnose e mafua mai i le siama Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13.O lipoti muamua o le faʻamaʻi na sau mai Pasila ma le Iunaite Setete, faʻatasi ai ma faʻailoga masani na aliali mai i le 1912 ma le 1929. Peitaʻi, ina ua mavae le tusa ma le 30 tausaga, na faʻailoa mai ai le siama o le Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., телеоморф Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., o le teleomorph o le Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.，有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.，有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld в Целенаправленной морфологии. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld i le Fa'atulagaga Fa'atatau. & H. Schrenk,. & H. Schrenk, .ma H. ​​Schrenk. & H.施伦克，. & H.施伦克，.ma H. ​​Schlenk, .O le su'esu'ega muamua o fa'ama'i na faia i le ogatotonu o le seneturi lona 20 na fa'aalia ai le tete'e atu i le NLL ma le lupine samasama (L. luteus L.) fa'aopoopoga, ae o fa'aopoopoga uma o le lupine pa'epa'e (L. albus L.) na fa'ata'ita'iina sa matua'i a'afia lava15,16. Ua fa'aalia e su'esu'ega o le atina'eina o le anthracnose e feso'ota'i ma le fa'ateleina o le timuga (susū o le ea) ma le vevela (i le va o le 12-28°C), e mafua ai ona solia le tete'e atu i vevela maualuluga17, 18. O le mea moni, o le taimi e mana'omia mo le conidia e tupu ai ma amata ai le fa'ama'i, e fa taimi pu'upu'u i le 24°C (4 itula) nai lo le 12°C (16 itula) i lalo o tulaga maualuga o le susū19. O lea la, o le fa'aauau pea o le fa'avevela o le lalolagi ua mafua ai ona salalau le anthracnose. Peita'i, na matauina le fa'ama'i i Falani (1982) ma Ukraine (1983) o se fa'ailoga o se taufa'amata'u o lo'o lumana'i, ae foliga mai na le amana'ia e le pisinisi lupine i le taimi lena20,21. I ni nai tausaga mulimuli ane, na salalau atu ai lenei faʻamaʻi mataʻutia i le lalolagi atoa ma aʻafia ai foʻi atunuu tetele e gaosia ai le lupine e pei o Ausetalia, Polani ma Siamani22,23,24. I le maeʻa ai o le pepesi o le anthracnose i le ogatotonu o le 1990, o le suʻesuʻega loloto na iʻu ai i le faʻailoaina o ni foaʻi teteʻe i faʻataʻitaʻiga NLL19. O le teteʻe atu o le NLL i le anthracnose e pulea e ni alleles e lua eseese e maua i punaoa eseese o le germplasm: Lanr1 i le cultivar Tanjil ma Wonga ma AnMan i le cultivar. Mandalay 25, 26. O nei alleles e faʻaopoopoina ai faʻailoga molecular e lagolagoina ai le filifilia o le germplasm teteʻe i polokalame faʻafailele25,26,27,28,29,30. O le laina fa'atuputupu tete'e 83A:476 o lo'o tauaveina le allele Lanr1 na fa'afefiloi ma le laina vao vaivai P27255 e maua ai se faitau aofa'i RIL e vaevaeina mo le tete'e atu i le anthracnose, lea na mafai ai ona tofia le nofoaga o le Lanr1 i le chromosome NLL-1131, 32, 33. O le fa'atulagaina o fa'ailoga o le fa'afanua o feso'ota'iga mai le flanking resistance loci i le anthracnose fa'atasi ai ma se fa'avae genomic, na fa'aalia ai e le NLL le nofoaga o allele uma e tolu i luga o le chromosome lava e tasi (NLL-11), ae i tulaga eseese29,34,35. Peita'i, ona o le la'ititi o le aofa'i o RIL ma le mamao tele o kenera i le va o fa'ailoga ma alleles talafeagai, e leai ni fa'ai'uga fa'atuatuaina e mafai ona faia e uiga i o latou kenera o lo'o i lalo. I le isi itu, o le fa'aogaina o kenera fa'afeagai i lupins e faigata ona o lo latou gafatia e matua maualalo lava le toe fa'afouina, lea e faigata ai le fa'aogaina o kenera37.
O le atinaʻeina o le germplasm faʻafailele e tauaveina le allele manaʻomia i le tulaga homozygous, e pei o le 83A:476 (Lanr1) ma le Mandelup (AnMan), ua tatalaina ai le faitotoʻa i le suʻesuʻeina o le teteʻe atu i le anthracnose i luma o le i ai o tuʻufaʻatasiga feteenai o alleles i totonu o tagata vao. Avanoa o faiga faʻamolekula. Faʻatusatusa tali puipuiga na faia e genotypes faʻapitoa. O lenei suʻesuʻega na iloiloina le tali vave o le transcriptome o le NLL i le tui puipui o le C. lupini. Muamua, o se panel germplasm NLL a Europa o loʻo i ai laina e 215 na suʻesuʻeina e faʻaaoga ai faʻailoga molecular e faʻailoga ai alleles Lanr1 ma AnMan. Ona faia lea o le phenotyping Anthracnose i luga o laina NLL e 50, na filifilia muamua mo faʻailoga molecular, i lalo o tulaga faʻatonutonuina. E faʻavae i luga o nei faʻataʻitaʻiga, e fa laina e eseese i le teteʻe atu i le anthracnose ma le Lanr1/AnMan allelic composition na filifilia mo le faʻavasegaina o le puipuiga eseese o gene e faʻaaoga ai auala faʻaopoopo e lua: high-throughput RNA sequencing ma le real-time PCR quantification.
O le su'esu'eina o se seti o le NLL germplasm (N = 215) fa'atasi ai ma fa'ailoga Lanr1 (Anseq3 ma Anseq4) ma AnMan (Anseq4) ma AnMan (AnManM1) na fa'aalia ai e na'o le tasi le laina (95726, e lata ane i Salamanca-b) e fa'ateleina ai le allele "tete'e" mo fa'ailoga uma , ae o le "Aia o 'allele' e faigofie ona maaleale" na maua ai le vaega o fa'ailoga uma i laina e 158 (~73.5%). E sefulutolu laina na gaosia ai ni alleles "tete'e" se lua o le fa'ailoga Lanr1, ma e 8 laina na gaosia ai ni alleles "tete'e" o le fa'ailoga Lanr1. O le allele "tete'e" o le fa'ailoga AnMan (Supplementary Table S1). E lua laina e heterozygous mo le fa'ailoga Anseq3 ma le tasi heterozygous mo le fa'ailoga AnManM1. E 42 laina (19.5%) na tauaveina ni vaega feteenai o le Anseq3 ma le Anseq4 alleles, o loʻo faʻaalia ai le tele o le toe tuʻufaʻatasia i le va o nei loci e lua. O phenotypes o le Anthracnose i lalo o tulaga faʻatonutonuina (Supplementary Table S2) na faʻaalia ai le eseesega i le teteʻe o genotypes na tofotofoina, lea na atagia mai i le ogaoga o le anthracnose. O eseesega i togi averesi na amata mai le 1.8 (teteʻe feololo) i le 6.9 (faʻaletonu) ma eseesega o le mamafa o le laʻau na amata mai le 0.62 (faʻaletonu) i le 4.45 g (teteʻe). Sa i ai se fesoota’iga taua i le va o tau na matauina i ni toe faia se lua o le fa’ata’ita’iga (0.51 mo togi o le ogaoga o fa’ama’i, P = 0.00017 ma le 0.61 mo le mamafa o le la’au, P < 0.0001) fa’apea fo’i ma le va o nei fa’ailoga e lua (− 0.59 ma le − 0.77, P < 0.0001). Sa i ai se fesootaʻiga taua i le va o tau na matauina i ni toe faia se lua o le faʻataʻitaʻiga (0.51 mo togi o le ogaoga o faʻamaʻi, P = 0.00017 ma le 0.61 mo le mamafa o le laʻau, P < 0.0001) faʻapea foʻi ma le va o nei faʻailoga e lua (− 0.59 ma le − 0.77, P < 0.0001). Выявлена ​​достоверная корреляция между значениями, наблюдаемыми i двух повторностях эксперимента (0,51 для тля = 0,00017 и 0,61 для массы растения, P <0,0001), а также между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,77, Р001 < 0,0). Sa maua se fesoota’iga taua i le va o tau na matauina i ni toe fai se lua o le fa’ata’ita’iga (0.51 mo togi o le ogaoga o fa’ama’i, P = 0.00017 ma le 0.61 mo le mamafa o le la’au, P < 0.0001), fa’apea fo’i ma le va o nei fa’ailoga e lua (- 0.59 ma le -0.77, P < 0.0001) 0.0001).在两次重复实验中观察到的之间存在显着相关性（疾病严重程度评分为 = P0. 0.00017，植物重量为0.61，P <0.0001）以及这两个参数之间（- 0.59 和- 0.77，P <0.0001).在 两 次 重复 实验 中 观察 的值 之间 存在 相关性 （疾病 严重 程度 了了 评 度 了0.51 ， p = 0.00017 ， 植物 为 为 0.61 ， p <0.0001） 以及 两 个 参数 之间 （（（（ 5.–0 和 9–5. 0.59 和– 0.59 和- 0.77, P < 0.0001). Наблюдалась значительная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях (оценка тяжести 1,000, забо 0,000 и масса растения 0,61, P <0,0001), и между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,0001) 0,77, P <0,0001. Sa i ai se fesootaʻiga taua i le va o tau na matauina i le faaluaina (togi o le ogaoga o le faʻamaʻi 0.51, P = 0.00017 ma le mamafa o le laʻau 0.61, P < 0.0001) ma le va o nei parakalafa e lua (-0.59 ma le -0 .0001) 0.77, P<0.0001. ).O fa'ailoga masani e va'aia i la'au e vaivai e aofia ai le mimilo ma le mimilo o le 'au e foliga mai o se fausaga o le "aufana a le leoleo mamoe", sosoo ai ma ni manu'a oval ma sporozoites moli/piniki (Ata Fa'aopoopo 1). O fa'aopoopoga Ausetalia o lo'o tauaveina le Lanr1 (83A:476 ma Tanjil) ma le AnMan (Mandelup) genes e tete'e feololo, 0.0331 ma le 0.0036). O nisi laina e tauaveina fo'i le Lanr1 "tete'e" ma/po'o le AnMan alleles e fa'aalia ai fa'ailoga o le fa'ama'i.
O le mea e malie ai, o ni nai laina NLL e leai se allele fa'ailoga "tete'e" na fa'aalia ai le maualuga o le tete'e atu i le anthracnose (tutusa pe maualuga atu nai lo Lanr1 po'o AnMan genotypes), e pei o Boregine (taua P < 0.0001 mo fa'asologa uma e lua), Bojar (taua P < 0.0001 mo le togi ma le 0.001 mo le mamafa o le la'au) ma le Population B-549/79b (taua P < 0.0001 mo le togi ma e le taua mo le mamafa). O le mea e malie ai, o ni nai laina NLL e leai se allele fa'ailoga "tete'e" na fa'aalia ai le maualuga o le tete'e atu i le anthracnose (tutusa pe maualuga atu nai lo Lanr1 po'o AnMan genotypes), e pei o Boregine (taua P < 0.0001 mo fa'asologa uma e lua), Bojar (taua P < 0.0001 mo le togi ma le 0.001 mo le mamafa o le la'au) ma le Population B-549/79b (taua P < 0.0001 mo le togi ma e le taua mo le mamafa). Интересно, что несколько линий NLL, лишенных какого-либо «резистентного» маркерного аллеля, показали высокний уроский антракнозу (сопоставимый или более высокий, чем для генотипов Lanr1 po o AnMan), таких как Boregine (значение P <0,0001 для пробраба), Boregine (значение P <0,0001 для оценки и 0,001 для массы растения) ma популяции B-549/79b (значение P <0,0001 для оценки и незначимо для массы). O le mea e malie ai, o le tele o laina NLL e leai se allele fa'ailoga 'tetee' na fa'aalia ai le maualuga o le tete'e atu i le anthracnose (e tutusa pe maualuga atu nai lo le Lanr1 po'o le AnMan genotypes), e pei o le Boregine (P value < 0.0001 mo fa'ailoga uma e lua), Bojar (P value < 0.0001 mo le iloiloga ma le 0.001 mo le mamafa o le la'au) ma le faitau aofa'i B-549/79b (P value < 0.0001 mo le iloiloga ma e le taua mo le mamafa).有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL 系显示出高水平的炭疽病抗他他们他们我他们他们他们他们他们他们他们他们他们他们一一基因型相当或更高），例如Boregine（两个参数的P 众< 0.0001）、Bojar（P 众分为0.0001，植物重量为0.001）和种群B-549/79b（得分P < 0.0001，重量不显。 E manaia le iloa o nisi o faiga NLL e leai ni fa'ailoga "antigenic" e fa'aalia ai le tete'e maualuga fa'alava (e tutusa ma Lanr1 po'o AnMan genes pe maualuga atu), e pei o Boregine (o fa'asologa uma e lua P < 0.0001), Bojar (taua P < 0.0001, mamafa o le la'au 0.001) ma le ituaiga B-549/79b (taua P < 0.0001, mamafa e le taua). Интересно, что некоторые линии NLL, лишенные каких-либо маркерных аллелей «резистентности», показали высокие уровничи антракнозу (сравнимые или выше, чем у генотипов Lanr1 po o AnMan), taкие как Boregine (значение P для обоих параметров <0,0001, Bojar <0,0001), Boregine масса растения 0,001) ma популяция B-549/79b (оценка P-значение <0,0001, масса незначительна). O le mea e malie ai, o nisi o laina NLL e leai ni alleles fa'ailoga 'tete' na fa'aalia ai le maualuga o le tete'e atu i le anthracnose (e tutusa pe maualuga atu nai lo le Lanr1 po'o le AnMan genotypes), e pei o le Boregine (taua P mo parakalafa uma e lua <0.0001), Bojar (taua P < 0.0001, mamafa o le la'au 0.001) ma le faitau aofa'i B-549/79b (taua P < 0.0001, mamafa e le taua).O lenei mea ua tupu ua fautua mai ai le ono mafai ona iai se puna fou o le tete’e i le tupuaga, ma faamatala ai le leai o se fesootaiga i le va o genotypes o faailoga ma phenotypes o faamai (taua P mai le ~0.42 i le ~0.98). O lea la, o le suega a Kolmogorov-Smirnov ua faaalia ai o faamatalaga i luga o le tete’e i le anthracnose sa toetoe lava tutusa le tufatufaina masani mo togi (taua P 0.25 ma le 0.11) ma le tele o laau (taua P 0.47 ma le 0.55), ma fautua mai ai ou te manatu o loo tele atu alleles e aofia ai nai lo Lanr1 ma AnMan.
E faʻavae i luga o taunuuga o le suʻesuʻega o le teteʻe atu i le anthracnose, e 4 laina na filifilia mo le suʻesuʻega o le transcriptome: 83A:476, Boregine, Mandelup, ma le Population 22660. O nei laina na toe suʻeina mo le teteʻe atu i le anthrax i faʻataʻitaʻiga tui e ala i le faʻasologa o le RNA, pe afai e tutusa ma le suʻega muamua. O tau o togi e faʻapea: Boregin (1.71 ± 1.39), 83A: 476 (2.09 ± 1.38), Mandelup (3.82 ± 1.42) ma le faitau aofaʻi 22660 (6.11 ± 1.29).
O le polokalame a le Illumina NovaSeq 6000 na ausia ai le averesi o le 40.5 paga Mread i le faʻataʻitaʻiga taʻitasi (29.7 i le 54.4 Mreads) (Supplementary Table S3). O togi faʻatulagaina i le faʻasologa o faʻasinomaga na amata mai le 75.5% i le 88.6%. O le averesi o le fesootaʻiga o faʻamaumauga o le faitauga i le va o fesuiaiga faʻataʻitaʻi i le va o faʻataʻitaʻiga faʻapitoa na amata mai le 0.812 i le 0.997 (averesi 0.959). Mai genes e 35,170 na iloiloina, e 2917 na leai se faʻaalia, ma o isi genes e 4785 na faʻaalia i se tulaga e le taua tele (averesi autu < 5). Mai genes e 35,170 na iloiloina, e 2917 na leai se faʻaalia, ma o isi genes e 4785 na faʻaalia i se tulaga e le taua tele (averesi autu < 5). Из 35 170 проанализированных генов 2917 не проявляли экспрессии, а остальные 4785 генов экспресиронвались темирон (базовое среднее <5). Mai genes e 35,170 na iloiloina, e 2917 e leai se fa'aaliga na fa'aalia, ma genes e 4785 na totoe na fa'aalia i se tulaga e le taua tele (averesi autu <5).在分析的35,170 个基因中，2917 个没有表达，其他4785 个基因的表达可以忽略不到略不审5）.35,170 Из 35 170 проанализированных генов 2917 не экспрессировались, а остальные 4785 генов имели незначительнсубю среднее значение <5). Mai genes e 35,170 na iloiloina, e 2917 e leʻi faʻaalia ma genes e 4785 na totoe e leai se faʻaalia (base mean <5).O lea la, o le aofaʻi o genes na mafaufauina na faʻaalia (averesi autu ≥ 5) i le taimi o le faʻataʻitaʻiga e 27,468 (78.1%) (Faʻaopoopoga Laulau S4).
Mai le taimi muamua, na tali atu laina uma o le NLL i le tui o le C. lupini (strain Col-08) e ala i le toe polokalameina o le transcriptome (Table 1), peitaʻi, na matauina ni eseesega taua i le va o laina. O lea la, o le laina teteʻe 83A:476 (o loʻo tauaveina le gene Lanr1) na faʻaalia ai le toe polokalameina o le transcriptome taua i le taimi muamua (6 hpi) faʻatasi ai ma le faʻateleina o le 31-69-fold i le aofaʻi o genes ua tuʻueseese i luga ma lalo pe a faʻatusatusa i isi taimi i lenei taimi. E le gata i lea, o lenei tumutumuga sa puʻupuʻu, aua o le faʻaalia o ni nai genes na tumau pea le suiga tele i le taimi lona lua (12 hpi). O le mea e malie ai, o le Boregine, lea na faʻaalia ai foʻi le maualuga o le teteʻe i le suʻega o le graft, e leʻi faia se toe polokalameina tele o le transcriptional i le taimi o le faʻataʻitaʻiga. Peitaʻi, o le aofaʻi o genes ua faʻaalia eseese (DEG) sa tutusa mo Boregine ma le 83A:476 i le 12 HPI. Na faʻaalia e Mandelup ma le faitau aofaʻi e 22660 le tumutumuga o le DEG i le taimi mulimuli (48 l/s), o loʻo faʻaalia ai se faʻatuai faʻatatau i tali atu a le puipuiga.
Ona o le 83A:476 na faia i ai se toe polokalame tele o le transcriptome e tali atu ai i le C. lupini i le 6 HPI pe a faatusatusa i isi laina uma, ~91% o DEG na matauina i le taimi nei sa patino i le gafa (Ata 1). Peitai, sa i ai ni nai mea na tutusa ai tali muamua i le va o laina o suesuega, aua o le 68.5%, 50.9%, ma le 52.6% DEG i Boregine, Mandelup, ma le faitau aofai o tagata 22660, i le faasologa lava lea, na tutusa ma mea na maua i le 83A:476 i nisi taimi. Peitai, o nei DEG na o se vaega itiiti (0.97–1.70%) o DEG uma na iloa i le taimi nei e faaaoga ai le 83A:476. E le gata i lea, e 11 DEG mai laina uma sa tutusa lelei i le taimi lea (Supplementary Tables S4-S6), e aofia ai vaega masani o tali puipuia o laau: lipid transfer protein (TanjilG_32225), endoglucan-1,3-β-glucoside enzyme (TanjilG_23384), e lua porotini e mafua mai i le stress e pei o le SAM22 (TanjilG_31528 ma TanjilG_31531), basic latex protein (TanjilG_32352), ma e lua porotini e mauoa i le glycine structural cell wall (TanjilG_19701 ma TanjilG_19702). Sa iai foi se fefiloi maualuga i tali transcriptome i le va o le 83A:476 ma Boregine i le 24 HPI (aofaiga 16-38% DEG) ma le va o Mandelup ma le Population 22660 i le 48 HPI (aofaiga 14-20% DEG).
O le ata Venn o loʻo faʻaalia ai le aofaʻi o genes eseese o loʻo faʻaalia (DEG) i laina lupine lau manifinifi (NLL) na faʻapipiʻiina i le Colletotrichum lupini (ituaiga Col-08 na maua mai fanua lupine i Wierzhenice, Polani, 1999). O laina NLL na suʻesuʻeina o: 83A:476 (tetee, o loʻo tauaveina le allele Lanr1), Boregine (tetee, e le o iloa le talaaga o le kenera), Mandelup (tetee feololo, o loʻo tauaveina le allele AnMan) ma le faitau aofaʻi 22660 (e matua vaivai lava). O le faʻapuʻupuʻuga hpi o loʻo faʻatusalia i itula talu ona maeʻa le tui puipui. Ua aveeseina tau zero e faʻafaigofie ai le kalafi.
O le seti o genes ua soona fa'aalia i le 6 hpi na su'esu'eina mo le i ai o vaega masani o le gene R (Supplementary Table S7). O lenei su'esu'ega na fa'aalia ai le fa'aosoina o le transcriptome o genes masani e tete'e atu i fa'ama'i ma vaega NBS-LRR i le 83A:476. O lenei seti e aofia ai le tasi le gene TIR-NBS-LRR (tanjilg_05042), lima genes CC-NBS-LRR (tanjilg_06165, tanjilg_06162, tanjilg_22773, tanjilg_22640, ma le tanjilg_16162), ma le Fa NBS-LR, Tanjilg_16162), ma le Fa NBS-LRRE (tanjilg_16162) fa'apea fo'i ma le Fa NBS-Lrr (tanjilg_16162) ma le Fa NBS-LRR (TANJILG_16162). O nei genes uma e iai vaega masani ua fa'atulagaina i ni fa'asologa fa'asao. I le fa’aopoopoga i le NBS-LRR domain genes, e tele RLL kinases na fa’agaoioia i le 6 hpi, o le tasi i Boregine (TanjilG_19877), lua i Mandelup (TanjilG_07141 ma TanjilG_19877) ma le faitau aofa’i e 22660 (TanjilG_09014 ma TanjilG_10361) ma le lua i le 83A 27:476.
O kene ua matuā suia le fa'aalia ona o le tui i le C. lupini (ituaiga Col-08) na faia i ai le au'ili'iliga o le fa'atamaoaigaina o le Gene Ontology (GO) (Fa'aopoopoga Laulau S8). O le faaupuga e sili ona taatele i le faagasologa o mea ola o le “GO:0006952 puipuiga tali” lea na aliali mai i le 6 mai le 16 (taimi × laina) tuufaatasiga ma le taua tele (P taua < 0.001) (Ata 2). O le faaupuga e sili ona taatele i le faagasologa o mea ola o le “GO:0006952 puipuiga tali” lea na aliali mai i le 6 mai le 16 (taimi × laina) tuufaatasiga ma le taua tele (P taua < 0.001) (Ata 2). Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «Alu: 0006952 защитный ответо» 6 из 16 (время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). O le faaupuga e sili ona taatele i le faagasologa o mea ola o le 'GO:0006952 puipuiga tali', lea na aliali mai i le 6 o le 16 (taimi × gafa) tuufaatasiga ma le taua tele (P taua < 0.001) (Ata 2).最常被过度代表的生物过程术语是“Alu:0006952 防御反应”，它出现在16 个（时间（时间）他们他们他们他们他们一们一们一们一们一上一一一一么一一一一么一一一么上上上上不上上上一上上上一上上一上上上上上一上上上一间个中，具有高显着性（P ‼< 0.001）（图2）. O le faaupuga sili ona fa'atusalia o le faagasologa fa'aolaola o le "GO:0006952 puipuiga tali atu", lea e aliali mai i le 6 o le 16 (时间 ×线) tu'ufa'atasiga, fa'atasi ai ma le taua tele (P taua < 0.001) (图2). Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «GO: 0006952 Defense Response», которыл 6 поского процесса bыл комбинаций (время × линия) с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). O le faaupuga e sili ona taatele i le faagasologa o mea ola o le 'GO:0006952 Defense Response', lea na aliali mai i le 6 mai le 16 tuufaatasiga (taimi × laina) ma le taua tele (P value < 0.001) (Ata 2).O lenei faaupuga sa sili atu ona fa'atusalia i taimi e lua i le 83A: 476 ma Boregine (6 ma le 24 hpi) ma i le taimi e tasi i Mandelup ma le Population 22660 (12 ma le 6 hpi, i le faasologa). O se taunuuga lea e fa'amoemoeina, e fa'amamafaina ai le tali atu o le antifungal o laina tete'e. E le gata i lea, na tali atu le 83A:476 i le C. lupini e ala i le vave fa'aosofiaina o genes e feso'ota'i ma le oxidative burst o lo'o fa'atusalia e le faaupuga "GO:0055114 redox process", e fa'ailoa mai ai se tali puipuiga fa'apitoa, a'o Boregine na fa'aalia ni tali puipuiga fa'apitoa, e feso'ota'i ma le faaupuga 'GO'. :0006950 Tali atu i le atuatuvale”. Na fa'agaoioia e le faitau aofa'i 22660 le tali tete'e fa'alava e aofia ai metabolites lona lua, ma fa'amamafaina ai le tele naua o upu "GO:0016104 Fa'agasologa o le biosynthesis triterpene" ma le "GO:0006722 Fa'agasologa o le metabolism triterpene" (o upu uma e lua e patino i le seti tutusa o genes), i le iloiloina o taunu'uga o le au'ili'iliga o le fa'amauoa o le upu GO, o le mautu o le tali atu a Mandelup sa i le va o Boregine ma le faitau aofa'i 22660. E le gata i lea, o le tali vave 83A:476 (6 hpi) ma le tali fa'atuai a Mandelup ma le faitau aofa'i 22660 e aofia ai le upu GO:0015979 'photosynthesis' ma isi fa'agasologa fa'aola e feso'ota'i.
O fa'aupuga o le bioprocess gene ontology na filifilia i le fa'amatalaga o genes eseese o lo'o fa'aalia i le taimi o tali transcriptome o le lupine lau-vaapiapi (NLL) na fa'asusuina i le anthrax lupine (Col-08 strain na maua mai fanua lupine i Wierzhenice, Polani, i le 1999) ua matua fa'ateleina lava. O laina NLL na su'esu'eina o: 83A:476 (tete'e, o lo'o tauaveina le homozygous Lanr1 allele), Boregine (tete'e, e le'o iloa le talaaga fa'asolopito), Mandelup (tete'e feololo, o lo'o tauaveina le homozygous AnMan allele) ma le faitau aofa'i 22660 (mafaufau).
Ona o le fa'amoemoe o lenei su'esu'ega e fa'ailoa ai ni kene e fesoasoani i le tete'e atu i le anthracnose, o kene ua tofia i fa'aupuga GO “GO: 0006952 Tali Puipui” ma le “GO: 0055114 Fa'agasologa Redox” sa su'esu'eina ma ni tipi ona o le fua fa'atatau o le ≥ 30 ma le itiiti ifo ma le tasi le laina. × taimi e tu'ufa'atasia ai tau taua fa'amaumauga o le log2 (suiga o le gaugau). O le aofa'i o kene na ausia nei ta'iala e 65 mo le GO:0006952 ma le 524 mo le GO:0055114.
83A:476 na faʻaalia ai ni tumutumuga DEG se lua ua faʻamatalaina i le upu GO:0006952, o le muamua i le 6 genes i le inisi (64 genes, faʻatonutonu i luga ma lalo) ma le lona lua i le 24 genes i le inisi (15 genes, faʻatonutonu i luga naʻo le). Na faʻaalia foʻi e Boregine o le GO:0006952 na tumutumu i le taimi lava e tasi, ae itiiti ifo le DEG (11 ma le 8) ma le faʻamalosia faʻapitoa. Na faʻaalia e Mandeloop ni tumutumuga se lua o le GO:0006952 i le 12 ma le 48 HPI, o loʻo tauaveina uma le 12 genes (o le muamua ma genes faʻagaoioia, ma le lona lua ma naʻo genes taofiofi), ae o le faitau aofaʻi e 22660 i le 6 HPI (13 genes) sa sili atu le tele o le faʻateleina o le tumutumuga. faʻatonutonu. E tatau ona maitauina o le 96.4% o le GO:0006952 DEG i nei tumutumuga sa i ai le ituaiga tali tutusa (i luga pe i lalo), e faʻaalia ai se fesoʻotaʻiga tele i tali puipuiga e ui lava i eseesega i le aofaʻi o genes o loʻo aʻafia ai. O le vaega aupito tele o faʻasologa e fesoʻotaʻi ma le upu GO:0006952 o loʻo faʻailoa mai ai le Starvation Stress-Associated Message Protein 22 (SAM22-like), lea e aofia i le vasega 10 pathogenesis-associated protein (PR-10) protein clade ma le core protein latex. tutusa (MLP-like) protein) protein (Ata 3). E eseese vaega e lua i le natura o le faʻaalia ma le itu o le tali atu. O genes o loʻo faʻailoa mai ai SAM22-like proteins na faʻaalia ai le faʻaosofiaga tutusa ma taua i taimi muamua (6 poʻo le 12 hpi) ma e masani lava ona le tali mai i le faʻaiʻuga o le faʻataʻitaʻiga (48 hpi), aʻo MLP-like proteins na faʻaalia ai le felagolagomaʻi i le 6 hpi. hpi. 83A:476 ma Mandelup i le 48 hp/in, toetoe lava o isi faʻamaumauga uma e le tali mai. E le gata i lea, o eseesega i faʻamatalaga o faʻaaliga o SAM22-like protein genes na mulimuli mai i le eseesega na matauina i le teteʻe atu i le anthracnose, aua o laina e sili atu le teteʻe e tele atu taimi e faʻaosofia ai nei genes nai lo genes e sili atu ona vaivai. O le isi gene PR-10 e pei o le LlR18A/B na faaalia ai se mamanu faaalia e tai tutusa lava ma le gene porotini e pei o le SAM22.
O vaega autū o le fa'asologa o le olaola o le fa'aupuga "GO:0006952 Defense Response" ma mamanu o le fa'aalia o kenera sui o le alleles Lanr1 ma le AnMan na fa'ailoaina. O le fua fa'atatau o le Log2 o lo'o fa'atusalia ai tau o le log2 (suiga o le gaugau) i le va o la'au na tui (Colletotrichum lupini, ituaiga Col-08, na maua mai fanua lupine, Wizhenica, Polani, 1999) ma la'au pulea (sham-inoculated) i le taimi e tasi. O laina lupine lau manifinifi nei na su'esu'eina: 83A:476 (tete'e, tauaveina le allele Lanr1 homozygous), Boregine (tete'e, e le'o iloa le talaaga o le kenera), Mandelup (tete'e feololo, tauaveina le allele AnMan homozygous), ma le Faitau aofa'i 22660 (mafaufau).
E le gata i lea, o fa'amatalaga o fa'aaliga o RNA-seq candidate genes Lanr1 (TanjilG_05042) ma AnMan (TanjilG_12861) na iloiloina (Ata 3). O le gene TanjilG_05042 na fa'aalia ai se tali taua (fa'agaoioiga) i le 83A:476 i le taimi muamua (6 hpi), ae o le TanjilG_12861 na taua i Mandeloop i taimi e lua: 6 hpi (fa'atonutonuina i lalo) ma le 24 hpi (6 hpi). Fa'atasi ai ma.). fetu'una'i) ).
O genes e sili ona tele naua le fa'aalia i le faaupuga GO:0055114 "redox process" o genes ia o lo'o fa'ailoa ai porotini cytochrome P450 ma peroxidase (Ata 4). Mo fa'ata'ita'iga na vavae'eseina mai le 83A:476 i le 6 HPI, o le maualuga po'o le maualalo o le log2 (suiga o le gaugau) tau (mo le 86.6% o genes) na masani ona matauina i le va o la'au na tui ma la'au pulea, ma fa'ailoa mai ai le maualuga o le tali atu o lenei genotype i le tui o le itupa. O le 83A:476 na fa'aalia ai le GO sili ona taua: 0055114 DEG i le 6 hpi (503 genes), a'o isi laina i le 48 hpi (Boregine, 31 genes; Mandelup, 85 genes; ma le Population 22660, 78 genes)). I le tele o genes o le aiga GO:0055114, e lua ituaiga o tali atu i tui puipui (fa'agaoioia ma le taofia) na matauina. O le mea e malie ai, e oo atu i le 97.6% o DEGs ua faʻailoa mai mo le upu GO: 0055114 i le Mandelupe i le 48 hp. O nei matauga ua faʻailoa mai ai, e ui lava i le laʻititi tele o le fua (e pei o le aofaʻi o redox genes ua suia, 85 e faʻatusatusa i le 503), o le mamanu o tali tuai o le transcriptome o le mandeloup i le anthracnose e tutusa ma le tali vave o le 83A:476. I le Boregine ma le Population 22660, o lenei faʻatasiga e maualalo i le 51.6% ma le 75.6%, i le faasologa.
Na faʻaalia mai mamanu o le faʻaalia o vaega autū o le faʻasologa o le faʻagasologa faʻaolaola "GO:0055114 Redox process". O le fua faʻatatau o le Log2 o loʻo faʻatusalia ai tau o le log2 (suiga o le gaugau) i le va o laʻau na tui (Colletotrichum lupini, ituaiga Col-08, na maua mai fanua lupine, Wizhenica, Polani, 1999) ma laʻau pulea (sham-inoculated) i le taimi e tasi. O laina lupine lau manifinifi nei na suʻesuʻeina: 83A:476 (tetee, tauaveina le allele homozygous Lanr1), Boregine (tetee, e le iloa le talaaga o le kenera), Mandelup (tetee feololo, tauaveina le allele homozygous AnMan), ma le Faitau aofaʻi 22660 (agasita).
83A:476 O tali fa'aliliuupu i le tui fa'atasi ma le C. lupini (strain Col-08) sa aofia ai fo'i le fa'afilemuina fa'atasi o genes e mafua mai i le upu GO:0015979 "photosynthesis" ma isi faiga fa'aola e feso'ota'i (ATA 5). O lenei seti GO:0015979 DEG sa i ai genes e 105 na taofia tele i le 6 hpi i le 83A:476. I lenei vaega, e 37 genes na fa'aitiitia fo'i i Mandelup i le 48 HPI ma le 35 i le taimi lava e tasi i le faitau aofa'i e 22660, e aofia ai le 19 DEGs e tutusa i genotypes uma e lua. E leai ni DEGs e feso'ota'i ma le upu GO: 0015979 na fa'agaoioia tele i so'o se tu'ufa'atasiga (laina x taimi).
Na faʻaalia mai mamanu o le faʻaalia o vaega autū o le faʻasologa o le faagasologa o le olaola "GO:0015979 Photosynthesis". O le fua faʻatatau o le Log2 o loʻo faʻatusalia ai tau o le log2 (suiga o le gaugau) i le va o laʻau na tui (Colletotrichum lupini, ituaiga Col-08, na maua mai fanua lupine, Wizhenica, Polani, 1999) ma laʻau pulea (sham-inoculated) i le taimi e tasi. O laina lupine lau manifinifi nei na suʻesuʻeina: 83A:476 (tetee, tauaveina le allele homozygous Lanr1), Boregine (tetee, e le iloa le talaaga o le kenera), Mandelup (tetee feololo, tauaveina le allele homozygous AnMan), ma le Faitau aofaʻi 22660 (agasita).
E faʻavae i luga o taunuʻuga o le auʻiliʻiliga o le eseesega o faʻaaliga ma le mea e foliga mai e aʻafia i tali puipuia faʻasaga i siama faʻamaʻi, o lenei seti o genes e fitu na filifilia mo le fuaina o faʻamatalaga o faʻaaliga e ala i le PCR taimi moni (Supplementary Table S9).
O le gene porotini e ono fa'atatauina o le TanjilG_10657 sa matuā fa'aosofia i laina uma na su'esu'eina ma taimi na fa'atusatusa i la'au fa'atonutonu (fa'ata'ita'i) (Supplementary Tables S10, S11). E le gata i lea, o le fa'amatalaga o le TanjilG_10657 na fa'aalia ai se aga fa'atupula'ia i le gasologa o le fa'ata'ita'iga mo laina uma. O le faitau aofa'i e 22660 na fa'aalia ai le maualuga o le maaleale o le TanjilG_10657 i le tui fa'atasi ai ma le fa'agaoioiga e 114-fold ma le maualuga o le fa'aalia o le fa'atusa (4.4 ± 0.4) i le 24 HPI (Ata 6a). O le gene porotini PR10 LlR18A TanjilG_27015 na fa'aalia ai fo'i le fa'agaoioiga i laina uma ma taimi, fa'atasi ai ma le taua fa'amaumauga i le tele o fa'amaumauga (Ata 6b). E tutusa ma le TanjilG_10657, o le maualuga o le fa'aalia o le TanjilG_27015 na matauina i le faitau aofa'i e 22660 na tui fa'atasi i le 24 HPI (19.5 ± 2.4). O le acid endochitinase gene TanjilG_04706 sa matuā fa’ateleina i laina uma ma taimi uma vagana ai le Boregine 6 hpi (Ata 6c). Sa matuā fa’aosofia i le taimi muamua (6 HPI) i le 83A:476 (e 10.5 taimi) ma fa’ateleina teisi i isi laina (e 6.6-7.5 taimi). I le taimi o le fa’ata’ita’iga, o le fa’aalia o le TanjilG_04706 sa tumau pea i tulaga tutusa i le 83A:476 ma le Boregine, ae i le Mandelup ma le Population 22660 sa matuā fa’ateleina, ma o’o atu i tulaga maualuluga (5.9 ± 1.5 ma le 6.2 ± 1.5, i le fa’asologa). O le endoglucan-1,3-β-glucosidase-like gene TanjilG_23384 na fa’aalia ai le maualuga o le fa’agaoioiga i taimi muamua e lua (6 ma le 12 hpi) i laina uma vagana ai le faitau aofa’i 22660 (Ata 6d). O le maualuga o le fa'aalia o le TanjilG_23384 na matauina i le taimi lona lua (12 hpi) i Mandelup (2.7 ± 0.3) ma le 83A:476 (1.5 ± 0.1). I le 24 HPI, o le fa'aalia o le TanjilG_23384 sa maualalo lava i laina uma na su'esu'eina (mai le 0.04 ± 0.009 i le 0.44 ± 0.12).
O fa'amatalaga o fa'aaliga o kene ua filifilia (ag) ua fa'aalia e le PCR fa'atatau. O numera 6, 12 ma le 24 o lo'o fa'atusalia ai itula talu ona mae'a le tui puipui. O kene LanDExH7 ma LanTUB6 na fa'aaogaina mo le fa'atulagaina masani ma o le LanTUB6 na fa'aaogaina mo le fa'atulagaina i le va o fa'asologa. O pa sese e fa'atusalia ai le fa'asologa masani e fa'avae i luga o fa'ata'ita'iga fa'aola e tolu, o ia mea ta'itasi o le averesi o fa'ata'ita'iga fa'atekinolosi e tolu. O le taua fa'amaufa'ailoga o eseesega i le maualuga o le fa'aalia i le va o la'au na tui (Colletotrichum lupini, ituaiga Col-08, na maua i le 1999 mai le fanua lupin i Wierzenica, Polani) ma la'au fa'atonutonu (fa'ata'ita'i tui) o lo'o fa'ailogaina i luga o fa'amaumauga (*P value < 0.05, **P value ≤ 0.01, ***P value ≤ 0.001). O le taua fa'amaufa'ailoga o eseesega i le maualuga o le fa'aalia i le va o la'au na tui (Colletotrichum lupini, ituaiga Col-08, na maua i le 1999 mai le fanua lupin i Wierzenica, Polani) ma la'au fa'atonutonu (fa'ata'ita'i tui) o lo'o fa'ailogaina i luga o fa'amaumauga (*P value < 0.05, **P value ≤ 0.01, ***P value ≤ 0.001). Статистическая значимость различий в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08, получен в гля 1999 г. в Верженице, Польша) ma контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечена над точками данных (*знач0,ние P 5 0,01, ***значение P ≤ 0,001). O eseesega taua fa'amaufa'ailoga i le maualuga o le fa'aalia i le va o la'au na tui (Colletotrichum lupini, ituaiga Col-08, na maua i le 1999 mai se fanua lupine i Wierzhenice, Polani) ma la'au fa'atonutonu (na tui fa'ata'ita'i) o lo'o maitauina i luga a'e o fa'amaumauga (*P value < 0.05, **P-value ≤ 0.01, ***P-value ≤ 0.001).接种（Colletotrichum lupini，Col-08株，1999年从波兰Wierzenica的羽扇豆田获得）和对照（模拟接种）植物之间表达水平差异的统计学显着性标记在数据為0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001).接种 （colletotrichum lupini ， color-08 株 ， 1999 年 波兰 波兰 wierzenica 的 羽扇 获得） 和 对照 （ 接秉水平 差异 的 统计学 显着性 标记 数据点 上方*p 值 <0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001)。 Статистически значимые различия в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08, полученный спол. Верженице, Польша, в 1999 г.) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечены над точками (*, 5 * 0,00) P-значение ≤ 0,01, ***P-значение ≤ 0,001). O eseesega taua fa'amaufa'ailoga i le maualuga o le fa'aalia i le va o la'au na tui (Colletotrichum lupini, ituaiga Col-08, na maua mai fanua lupine i Verzhenice, Polani, i le 1999) ma la'au fa'atonutonu (na tui fa'ata'ita'i) o lo'o maitauina i luga a'e o fa'amaumauga (*P value < 0.05 , **P-value ≤ 0.01, ***P-value ≤ 0.001).O laina NLL na su'esu'eina o: 83A:476 (tete'e, o lo'o i ai le allele homozygous Lanr1), Mandelup (tete'e feololo, o lo'o i ai le allele homozygous AnMan), Boregine (tete'e, e le'o iloa le talaaga o le kenera) ma le faitau aofa'i 22660 (e vaivai).
O le sui tauva o le gene TanjilG_05042 i le Lanr1 locus na faaalia ai se mamanu fa'aalia e matua ese lava mai fa'amatalaga na maua mai su'esu'ega RNA-seq (Ata 6e). O le fa'agaoioiga taua o lenei gene na matauina i Mandelup ma le faitau aofa'i o le 22660 (e o'o atu i le 39.7 ma le 11.7 taimi, i le faasologa), ma i'u ai i le maualuga o le fa'aalia (e o'o atu i le 1.4 ± 0.14 ma le 7.2 ± 1.3, i le faasologa). O le 83A:476 na faaalia ai foi nisi o le si'itia o le gene TanjilG_05042 (e o'o atu i le 3.8-fold), peita'i, o le maualuga o le fa'aalia na ausia (0.044 ± 0.002) e sili atu ma le 30-fold maualalo ifo nai lo na matauina i Mandelup ma le faitau aofa'i o le 22660. o le su'esu'ega e ala i le qPCR na fa'aalia ai ni eseesega taua i le maualuga o le fa'aalia i le va o genotypes i fesuiaiga fa'ata'ita'i (pulea), ma o'o atu ai i le eseesega e 58-fold i le va o faitau aofa'i 22660 ma le 83A:476, fa'apea fo'i i le va o faitau aofa'i 22660 ma le 22660. Na ausia se eseesega e lua-fold i le va o Boregine ma Mandalup.
O le sui tauva i le nofoaga o le AnMan, TanjilG_12861, na fa'agaoioia e tali atu ai i le tui puipui i le 83A:476 ma Mandelup, sa leai sona aoga i le faitau aofa'i o le 22660, ma sa fa'aitiitia lona aoga i le Boregine (Ata 6f). O le fa'aaliga fa'atatau o le TanjilG_12861 gene sa sili ona maualuga i le tui puipui 83A: 476 (0.14±0.01). O le 17.4 kDa vasega I heat shock protein gene TanjilG_05080 HSP17.4 na fa'aalia ai le maualalo o le fa'aaliga fa'atatau i ituaiga uma na su'esu'eina ma taimi (Ata 6g). O le tau maualuga na matauina i le 24 HPI i le faitau aofa'i o le 22660 (0.14 ± 0.02, o se fa'aopoopoga e valu taimi i le tali atu i le tui puipui).
O le fa'atusatusaga o fa'amatalaga o le fa'aalia o kene (Ata 7) na fa'aalia ai se fesoota'iga maualuga i le va o le TanjilG_10657 ma isi kene e fa: TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.80), ma le TanjilG_04706 (r = 0.79). O ia taunuuga e ono fa'aalia ai le fa'atonutonuina fa'atasi o nei kene i le taimi o tali puipuia. O kene o le TanjilG_12861 ma le TanjilG_23384 na fa'aalia ai ni fa'amatalaga eseese o le fa'aalia ma ni tau maualalo o le Pearson correlation coefficient (mai le 0.08 i le 0.43 ma le -0.19 i le 0.28, i le fa'asologa) pe a fa'atusatusa i isi kene.
Sa iloa fesootaiga i le va o talaaga o le fa'aalia o kenera e fa'aaoga ai le quantitative PCR. O laina nei o le lupine lau manifinifi na su'esu'eina: 83A:476 (tete'e, e iai le allele homozygous Lanr1), Mandelup (tete'e feololo, e iai le allele homozygous AnMan), Boregine (tete'e, e le'i iloa le talaaga o kenera), ma le Population 22660 (e faigofie ona a'afia). E tolu taimi na fuafuaina (6, 12 ma le 24 itula talu ona fa'a'a'a), e aofia ai la'au na fa'a'a'a'a (Colletotrichum lupini, ituaiga Col-08, na maua mai fanua lupine i Wierzhenice, Polani, i le 1999) ma la'au fa'atonutonu (sham-inoculated). O le fua fa'atatau e fa'aalia ai le taua o le Pearson correlation coefficient.
E faʻavae i luga o faʻamaumauga na maua i le 6 horsepower i le inisi, na faia ai le WGCNA i luga o le 9981 DEG na faʻailoaina e ala i le faʻatusatusaina o laʻau na tui ma laʻau faʻatonutonu e taulaʻi atu i tali vave o le puipuiga (Supplementary Table S12). E luasefululua gene modules (clusters) na maua ma faʻamatalaga faʻaalia e fesoʻotaʻi (lelei pe leaga) i le va o genotypes ma fesuiaiga faʻataʻitaʻi. I le averesi, o le maualuga o le faʻaalia o kene sa faʻaitiitia i le faasologa 83A:476 > Mandelup > Boregine > Faitau aofaʻi 22660 (peitaʻi, i ituaiga uma e lua, o lenei aga sa sili atu ona malosi i laʻau faʻatonutonu). I le averesi, o le maualuga o le faʻaalia o kene sa faʻaitiitia i le faasologa 83A:476 > Mandelup > Boregine > Faitau aofaʻi 22660 (peitaʻi, i ituaiga uma e lua, o lenei aga sa sili atu ona malosi i laʻau faʻatonutonu). В среднем уровни экспрессии генов снижались i порядке 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (i luga ole обоих вариантах, обнтакондяд, обандако, белет сильнее у контрольных растений). I le averesi, o le maualuga o le faʻaalia o kene na faʻaitiitia i le faʻasologa 83A:476 > Mandelup > Boregine > Faitau aofaʻi 22660 (peitaʻi, i ituaiga uma e lua, o lenei aga na sili atu ona malosi i laʻau faʻatonutonu).平均而言，基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > Tagata 22660的顺序下降（然而，在两种变体中，这种趋势在对照植物中更强）。平均 而 言 ， 基因 水平 按 按 83a: 476> mandelup> boregine> faitau aofaʻi 22660 的顺序 下降 （， 在 种 中植物 中 更） .. . . . . . . . . . . . . . . . . . В среднем уровни экспрессии генов снижались i ряду 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 контрольных растений). I le averesi, o le maualuga o le faʻaalia o kene na faʻaitiitia i le faʻasologa 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (peitaʻi, i ituaiga uma e lua, o lenei aga na sili atu ona malosi i laʻau faʻatonutonu).O le tui puipui na mafua ai ona faʻateleina le faʻaalia o kenera, aemaise lava i vaega 18, 19, 14, 6 ma le 1 (i le faʻasologa o le aʻafiaga), faʻatonutonu leaga (e.g. vaega 9 ma le 20) poʻo ni aʻafiaga e le faʻaituau (e.g. vaega 11, 22, 8 ma le 13). O le suʻesuʻega faʻamauoa o le upu GO (Supplementary Table S13) na faʻaalia ai le "GO: 0006952 Tali Puipui" mo le vaega tui (18) ma le faʻagaoioiga maualuga, e aofia ai kenera na suʻesuʻeina e le qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 ma TanjilG_27015), faʻapea foʻi ma le tele o vaega o le photosynthesis o loʻo taofia i le Inoculate (9). O le Module 18 concentrator (Ata 8) na fa'ailoaina o le gene TanjilG_26536 o lo'o fa'ailoa mai ai le porotini PR-10-like LlR18B, ma o le module 9 concentrator na fa'ailoa mai o le gene TanjilG_28955 o lo'o fa'ailoa mai ai le porotini photosystem II PsbQ. O se gene Lanr1 e tete'e atu i le anthracnose, TanjilG_05042, na maua i le module 22 (Ata 9) ma e feso'ota'i ma fa'aupuga "GO:0044260 Cellular macromolecular metabolic processes" ma le "GO:0006355 Transcriptional regulation, DNA templating" o lo'o tauaveina le TanjilG_01212 hub. o le gene e fa'ailoa mai ai le heat stress transcription factor A-4a (HSFA4a).
Su'esu'ega feso'ota'iga mamafa o le fa'aalia fa'atasi o kenera o modules ma fa'aupuga fa'agasologa fa'aolaola ua tele naua "GO: 0006952 Tali Puipuiga". Sa fa'afaigofieina le fa'apipi'iina e fa'amamafa ai kenera e fa na su'esu'eina e le qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 ma TanjilG_27015).
Su'esu'ega o feso'ota'iga mamafa o le fa'aalia fa'atasi o kene o se module fa'atasi ai ma se fa'asologa o le fa'agasologa fa'abiology ua tele naua "GO: 0006355: Fa'atonutonuina o le Transcription, DNA templateing" ma le tauaveina o se kene e tete'e atu i le anthracnose Lanr1 TanjilG_05042. Sa fa'afaigofieina le fa'apipi'iina e vavae'ese ai le kene TanjilG_05042 ma le kene tutotonu o le TanjilG_01212.
O le su'esu'ega o le tete'e atu i le anthracnose na aoina i Ausetalia na fa'aalia ai o le tele o ituaiga na vave fa'asa'olotoina sa vaivai; O Kalya, Coromup ma Mandelup ua fa'amatalaina o ni tete'e feololo, a'o Wonga, Tanjil ma le 83A:476 ua fa'amatalaina o ni tete'e malosi26,27,31. sa i ai le allele tete'e tutusa, ua fa'ailogaina o Lanr1, ma o Coromup ma Mandelup sa i ai se allele ese, ua fa'ailogaina o AnMan10, 26, 39, a'o Kalya na tu'uina atu se allele ese. , Lanr2. O le su'esu'ega mo le tete'e atu i le anthracnose i Siamani na i'u ai i le fa'ailoaina o se laina tete'e Bo7212 fa'atasi ai ma se allele sui e ese mai le Lanr1, ua fa'ailogaina o LanrBo36.
O la matou suʻesuʻega na faʻaalia ai se faʻateleina maualalo (pe tusa ma le 6%) o le allele Lanr1 i le germplasm na suʻeina. O lenei matauga e ogatasi ma taunuuga o le suʻesuʻeina o le germplasm Europa i Sasaʻe e faʻaaoga ai faʻailoga Anseq3 ma Anseq4, lea na faʻaalia ai o le allele Lanr1 e naʻo le lua laina Belarusian o loʻo iai. O lenei mea e faʻaalia ai e leʻi faʻaaogaina lautele le allele Lanr1 e polokalame faʻatoʻaga i le lotoifale, e le pei o Ausetalia, lea o se tasi o alleles autu mo le faʻatoʻaga fesoasoani faʻailoga. Atonu e mafua lenei mea i le maualalo o le teteʻe e maua mai le allele Lanr1 i tulaga o fanua Europa pe a faʻatusatusa i le lipoti a Ausetalia. E le gata i lea, o suʻesuʻega o le anthracnose i nofoaga e tele timuga i Ausetalia ua faʻaalia ai o tali teteʻe e mafua mai i le allele Lanr1 atonu e le aoga i tulaga o le tau e lagolagoina ai le tuputupu aʻe ma le vave atinaʻe o le pathogen19,42. O le mea moni, i le suʻesuʻega o loʻo iai nei, o nisi faʻailoga o le anthracnose na matauina foi i genotypes o loʻo tauaveina le allele Lanr1, ma faʻaalia ai o le teteʻe e ono mou atu i lalo o tulaga sili ona lelei mo le atinaʻeina o le C. lupini. E le gata i lea, e mafai ona faia ni faauigaga sese lelei o le i ai o faailoga Anseq3 ma Anseq4, ia e tusa ma le 1 cM mai le nofoaga o Lanr1 28,30,43.
O la matou suʻesuʻega na faʻaalia ai o le 83A:476, o loʻo tauaveina le allele Lanr1, na tali atu i le tui o le C. lupini i le tele o le toe polokalameina o le transcriptome i le taimi muamua na suʻesuʻeina (6 hpi), ae i Mandelup, o loʻo tauaveina le allele AnMan, na matauina ai tali transcriptomic i se taimi mulimuli ane. (mai le 24 i le 48 hp). O nei suiga faʻavaitaimi i tali puipuia e fesoʻotaʻi ma eseesega i faʻailoga o faʻamaʻi, ma faʻamamafaina ai le taua o le vave iloa o pathogen mo se tali manuia i le teteʻe. Ina ia aʻafia ai le aano o laʻau, e tatau i spores anthrax ona ui atu i ni laʻasaga o le atinaʻe i luga o le fogāeleele o le tagata e talimalo ai, e aofia ai le germination, le vaevaeina o le sela, ma le fausiaina o se appressorium. O se appendage o se fausaga pipisi e pipii i luga o le fogāeleele o le tagata e talimalo ai ma faʻafaigofie ai le ulu atu i totonu o aano o le tagata e talimalo ai. O lea la, o spores o le C. gloeosporioides i le pea extract na faʻaalia ai le vaevaega muamua o le nucleus pe a uma le 75-90 minute o le incubation, le fausiaina o se germ tube pe a uma le 90-120 minute, ma le taofiofia pe a uma le 4 itula 45. O le Mango C. gloeosporioides na faaalia ai le sili atu i le 40% o le germination conidial ina ua mavae le 3 itula o le incubation ma le tusa ma le 20% o le fausiaina o appressors ina ua mavae le 4 itula. O le virulence-associated CAP20 gene o le C. gloeosporioides na faaalia ai le transcriptional activity i totonu o epiphyte-forming conidia ina ua mavae le 3.5 itula o le incubation i le avocado surface wax faatasi ai ma le maualuga o le CAP20 protein ina ua mavae le 4 itula 46 minute. I se tulaga tutusa, o le gaioiga o melanin biosynthesis genes i le C. trifolii na faatupuina i le taimi o le incubation e 2-itula sosoo ai ma le fausiaina o se appressorium ina ua mavae le 1 itula. O suesuega i aano o lau ua faaalia ai o strawberries na totoina i le C. acutatum e muamua taofia i le 8 hpi, ae o tamato na totoina i le C. coccodes e muamua taofia i le 4 hpi48,49. e matua ogatasi ma le taimi o le Colletotrichum spp. infectious process. O tali vave o le puipuiga i le 83A:476 e fautua mai ai le aʻafia o le teteʻe o laʻau ma le effector-triggered immunity (ETI) genes i lenei laina, ae o tali tuai a Mandelup e lagolagoina le manatu o le micro-associated molecular pattern-triggered immunity (MTI) 50. Tali vave i le 83A: 476 ma Mandelup. O le felagolagomaʻi faʻatasi i le va o genes i luga pe i lalo i le tali tuai e lagolagoina ai foʻi lenei manatu, aua e masani ona manatu le ETI o se tali vave ma faʻaleleia atili a le MTI lea e iʻu i le oti faʻatulagaina o sela i le nofoaga o le faʻamaʻi, e taʻua o le anaphylactic shock 51,52.
O le tele o kenera e mafua mai i le faaupuga ua tele naua le Gene Ontology GO:0006952 “Defense Response” o le 11 homologues o le stress-induced fasting message 22 protein (e tutusa ma le SAM22) ma le fitu latex protein-likes (MLPs) tetele. -like proteins 31, 34, 43 ma le 423 na faaalia ai le tutusa o le faasologa. O kenera e pei o le SAM22 na faaalia ai le faagaoioiga taua lea na umi atu, ma faaalia ai le faateleina o le tetee atu i le anthracnose (83A:476 ma Boregine). Peitai, o kenera e pei o le MLP na faaitiitia i laina o loo tauaveina le allele tetee (83A:476/Lanr1 i le 6 hpi ma Mandelup/AnMan i le 24 hpi). E tatau ona maitauina o kenera uma e pei o le SAM22 ua faailoa mai e afua mai i se faaputuga kenera e tusa ma le 105 kb, ae o kenera e pei o le MLP e afua mai i vaega eseese o le genome. O le fa'agaoioiga fa'atasi o ia kenera e pei o le SAM22 na maua fo'i i la matou su'esu'ega muamua o le tete'e atu i le NLL i le tui o le Diaporthetoxica, ma fa'ailoa mai ai o lo'o a'afia i latou i vaega fa'alava o le tali atu o le puipuiga. O lenei fa'ai'uga e lagolagoina fo'i e lipoti o se tali lelei o kenera e pei o le SAM22 i manu'a po'o togafitiga i le salicylic acid, fungal inducers, po'o le hydrogen peroxide.
Ua faʻaalia e MLP-like genes le tali atu i faʻalavelave eseese e mafua mai i siama ma siama, e aofia ai siama, siama ma siama fungal i le tele o ituaiga o laʻau55. O faʻatonuga o le tali atu i nisi o fegalegaleaiga i le va o laʻau ma siama na amata mai i le faʻateleina tele (e pei o le taimi o le osofaʻiga o le cotton i le Verticillium dahliae) i le faʻaitiitia tele (e pei o le taimi o le aʻafia o le laʻau apu i le Alternaria spp.)56,57. O le faʻaitiitia tele o le MLP-like gene 423 na matauina i le taimi o le puipuiga avoka i le aʻafiaga o le F. niger ma le taimi o le aʻafiaga o le laʻau apu Botryosphaeria berengeriana f. cn. piricola ma Alternaria alternata o ituaiga apu ia58,59. E le gata i lea, o le apu calli e sili atu le faʻaalia o le MLP-like gene 423 e maualalo le faʻaalia o genes e fesoʻotaʻi ma le teteʻe ma e sili atu ona aʻafia i le aʻafiaga o le fungal59. I le maeʻa ai o le Fusarium oxysporum f, o le MLP-like gene 423 na taofia foʻi i le germplasm pi masani e teteʻe. cn. Pi faʻamaʻi 60.
O isi sui o le aiga PR-10 na faʻailoa mai i la matou suʻesuʻega RNA-seq o le LlR18A ma le LlR18B genes e tali atu i le faʻateleina o le faʻatonutonuina, faʻapea foʻi ma le faʻateleina (1 gene) poʻo le faʻaitiitia (3 genes) gene mo le lipid transfer protein DIR1. . E le gata i lea, o loʻo faʻamamafaina e le WGCNA le LlR18B gene o se ogatotonu i lenei module, lea e matua faigofie ona faia tui puipui ma e tele ni genes tali puipuiga. O le LlR18A ma le LlR18B genes na faʻaosofia i laulaau lupine samasama e tali atu i siama faʻamaʻi, faʻapea foʻi ma ogalaau NLL ina ua maeʻa le tui o le D. toxica, aʻo le araisa homologue o nei genes, RSOsPR10, na vave ona faʻaosofia e se faʻamaʻi fungal e ono aʻafia i le jasmonic acid signaling pathway53,61, 62. O le DIR1 gene e faʻailoa ai ni proteins felauaiga lipid e le faʻapitoa e manaʻomia mo le amataga o le systemic acquired resistance (SAR). Faatasi ai ma le atinaʻeina o tali puipuia, o le porotini DIR1 e feaveaʻi mai le nofoaga autu o le faʻamaʻi e ala i le phloem e faʻaosofia ai le SAR i totoga mamao. O le mea e malie ai, o le TanjilG_02313 DIR1 gene sa faʻaosofia tele i le taimi muamua i laina 84A:476 ma le Population 22660, ae o le teteʻe atu i le anthracnose na atiaʻe manuia i le laina 84A:476. Atonu e faʻaalia ai nisi o galuega le lelei o le DIR1 gene i le NLL, talu ai o isi homologues e tolu na tali atu i le tui i le laina 83A:476 i le 6 hpi, ma o lenei tali na faʻasino i lalo.
I la matou suʻesuʻega, o vaega masani e fesoʻotaʻi ma le faagasologa faʻaola e taʻua o le "GO:0055114 Redox process" o le cytochrome P450 protein, peroxidase, linoleic acid 9S-/13S-lipoxygenase, ma le 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase. E le gata i lea, o la matou WGCNA e faʻamatalaina le HSFA4a homologue o se hub e feaveaʻi modules e pei o le Lanr1 resistance gene candidate TanjilG_05042. O le HSFA4a o se vaega o le redox-dependent regulation o le nuclear transcription i laʻau.
O porotini Cytochrome P450 o oxidoreductases ia e fa'atino ai le NADPH ma/po'o le O2-dependent hydroxylation reactions i le metabolism muamua ma le lona lua, e aofia ai le metabolism o xenobiotics, fa'apea fo'i ma hormones, fatty acids, sterols, cell wall components, biopolymers, ma le biosynthesis o protective compounds 69. I la matou I se su'esu'ega, o le eseesega i le galuega a le cytochrome P450 a le la'au na fa'aitiitia mai le -10.6 log2 (fold change) i le 5.7 ona o le tele o homologues ua suia (37) ma eseesega i mamanu tali i le va o genes patino, e atagia ai se toe teuteuga i luga. . O le fa'aaogaina na'o fa'amaumauga RNA-seq e fa'amalamalama ai le galuega fa'aletino o genes NLL i se aiga tele o porotini o le a matua'i fa'atatauina lava. Peita'i, e taua le maitauina o nisi genes cytochrome P450 e feso'ota'i ma le fa'ateleina o le tete'e atu i fungi po'o siama fa'ama'i, e aofia ai le sao i tali allergic69,70,71.
O peroxidases Vasega III o ni enzymes e tele galuega a la'au e a'afia i le tele o faiga fa'asolosolo i le taimi o le tuputupu a'e ma le atina'eina o la'au, fa'apea fo'i ma le tali atu i fa'alavelave tau si'osi'omaga e pei o le masima, lāmala, malosi tele o le malamalama, ma osofa'iga a siama72. O peroxidases e a'afia i le fegalegaleaiga a le tele o ituaiga la'au ma Anthracis, e aofia ai Stylosanthes humilis ma le C. gloeosporioides, Lens culinaris ma le C. truncatum, Phaseolus vulgaris ma le C. lindemuthianum, Cucumis sativus ma le C. lagenarium73,74,75,76. E vave tele le tali atu, o nisi taimi e o'o lava i le 4 HPI, a'o le'i ulufia e le fungus le a'ano o le la'au73. Na tali atu fo'i le gene peroxidase i le tui o le D. toxica NLL. I le fa'aopoopoga i a latou galuega masani e fa'atonutonu ai le pa o le oxidative po'o le fa'aumatia o le atuatuvale o le oxidative, e mafai e peroxidases ona fa'alavelave i le tuputupu a'e o siama e ala i le faia o pa puipui fa'aletino e fa'avae i luga o le fa'amalosia o puipui o le sela i le taimi o le lignification, subunit po'o le cross-linking o vaila'au fa'apitoa. E mafai ona fa'atatauina lenei galuega faatino in silico i le gene TanjilG_03329 o lo'o fa'ailoa mai ai se lignin-forming anion peroxidase lea na matua'i fa'ateleina i la matou su'esu'ega i le laina tete'e 83A:476 i le 6 HPI, ae le o isi ituaiga ma taimi e le'i tali mai.
O le 9S-/13S-lipoxygenase o le linoleic acid o le laasaga muamua lea i le auala oxidative o le lipid biosynthesis78. O oloa o lenei auala e tele ana galuega i le puipuiga o laau, e aofia ai le faamalosia o le puipui o le sela e ala i le fausiaina o le callose ma le pectin deposits, ma le faatonutonuina o le oxidative stress e ala i le gaosiga o reactive oxygen species79,80,81,82,83. I le suʻesuʻega o loʻo iai nei, o le faʻaalia o le linoleic acid 9S-/13S-lipoxygenase na suia i ituaiga uma, ae i le faitau aofaʻi vaivai 22660, na i ai le upregulation i taimi eseese, ae i ituaiga o loʻo tauaveina le Lanr1 teteʻe ma le AnMan allele, e faʻamamafa ai le faʻalauteleina o le oxylipin layer i tali puipuia o le anthrax i le va o nei genotypes.
O le 1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase (ACO) homologue sa matuā fa’ateleina (9 genes) pe fa’aitiitia (2 genes) ina ua fa’apipi’iina i le lupine. Se’i vagana ai ni tuusaunoaga se lua, o nei tali uma na tutupu i le 6 hp. i le 83A:476. O le tali atu o le enzymatic e fa’atinoina e polotini ACO o le la’asaga e fa’atapula’aina ai le saoasaoa i le gaosiga o le ethylene ma o lea e matua fa’atonutonuina lava84. O le Ethylene o se hormone o la’au e tele ana matafaioi i le fa’atonutonuina o le atina’eina o la’au ma le tali atu i tulaga faigata abiotic ma biotic. O le fa’aosofiaina o le ACO transcription ma le fa’agaoioia o le auala fa’ailoilo o le ethylene e a’afia ai le fa’ateleina o le tete’e o le araisa i le hemibiotrophic fungus oryzae oryzae e ala i le fa’atonutonuina o le gaosiga o reactive oxygen species ma phytoalexins. O se faiga tutusa lava o le pipisi o laulaau na maua i le va o le M. oryzae ma le C. lupini88,89, e faasaga i le tulaga o le faateleina tele o le ACO homologues i le laina 83A:476 o loʻo lipotia mai i lenei suʻesuʻega, ua suia ai le avanoa e maua ai le teteʻe i le NLL anthracnose Ethylene o se laasaga tutotonu o faailoilo i auala molecular.
I le suʻesuʻega o loʻo iai nei, o le taofiofia tele o le tele o genes e fesoʻotaʻi ma le photosynthesis na matauina i le 6 hpi i le 83A:476 ma le 48 hpi i Mandeloop ma le faitau aofaʻi e 22660. O le tele ma le alualu i luma o nei suiga e tutusa ma le tulaga. Na matauina le teteʻe atu i le Anthracnose i lenei faʻataʻitaʻiga. Talu ai nei, o le taofiofia malosi ma le vave o tusitusiga e fesoʻotaʻi ma le photosynthesis ua lipotia mai i le tele o faʻataʻitaʻiga o fegalegaleaiga a laʻau-pathogen, e aofia ai siama pathogenic ma fungi. O le faanatinati (mai le 2 HPI i nisi fegalegaleaiga) ma le taofiofia i le lalolagi atoa o genes e fesoʻotaʻi ma le photosynthesis e tali atu ai i faʻamaʻi e mafai ona faʻaosofia ai le puipuiga o laʻau e faʻavae i luga o le faʻalauiloaina o ituaiga okesene tali atu ma a latou fegalegaleaiga ma le auala salicylic acid e faʻatautaia ai tali allergic 90,94.
I le faaiuga, o auala e tali atu ai i le puipuiga ua fautuaina mo le gafa sili ona tete'e (83A:476) e aofia ai le vave iloa o siama e ala i le gene R (atonu o le TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) ma le salicylic acid ma le ethylene signaling e mafua mai i le tali atu i le allergy, sosoo ai ma le faatuina o le SAR umi. O le gaioiga e lagolagoina e le porotini DIR-1. E tatau ona maitauina o le vaitaimi biotrophic mo le pipisi o le C. lupini e matua puupuu lava (pe tusa ma le 2 aso), sosoo ai ma le tuputupu a'e o le necrotic95. O le fesuiaiga i le va o nei laasaga e ono fesootai ma le necrosis ma le faʻaalia o porotini e mafai ona faʻaosofia e le ethylene e fai ma mea e faʻaosofia ai tali atu i le hypersensitivity i laʻau talimalo. O le mea lea, o le taimi e puʻeina ai le C. lupini i le tulaga biotrophic e matua vaapiapi lava. O le toe polokalameina o genes e fesoʻotaʻi ma le redox ma le photosynthesis na matauina i le 83A:476 i le 6 hpi e ogatasi ma le alualu i luma o le fungal hyphae ma faʻailoa mai ai le atinaʻeina o se tali puipuia manuia i le tulaga biotrophic. Atonu e tuai tele tali fa'aliliuupu a Mandelup ma le faitau aofa'i o le 22660 e pu'eina ai le siama a'o le'i sui i le tuputupu a'e o le necrotic, peita'i, atonu e sili atu le aoga o Mandelup nai lo le faitau aofa'i o le 22660 ona o le vave fa'atonutonuina o le porotini PR-10 e fa'alauiloa ai le tete'e fa'alava.
O le ETI, e fa'amalosia e le kene R masani, e foliga mai o se faiga masani lea mo le tete'e atu o pi i le anthracnose. O lea la, i le fa'ata'ita'iga o le legume Medicago truncatula, o le tete'e atu i le anthracnose e maua mai i le kene RCT1, o se sui o le vasega kene R o le la'au TIR-NBS-LRR97. O lenei kene e maua ai fo'i le tete'e atu i le anthracnose lautele i le alfalfa pe a fa'aliliuina atu i la'au e vaivai. I le pi masani (P. vulgaris), e silia ma le luasefulu ma le lua kene tete'e atu i le anthracnose ua fa'ailoa mai i le taimi nei. O nisi o nei kene e maua i vaega e leai ni kene R masani, peita'i o le tele o isi o lo'o i pito o chromosomes o lo'o tauaveina le kulupu kene NBS-LRR, e aofia ai le TIR-NBS-LRRs99. O le su'esu'ega SSR lautele o le genome na fa'amaonia ai fo'i le fesoota'iga o le kene NBS-LRR ma le tete'e atu i le anthracnose i le pi masani. O le kene R masani na maua fo'i i le vaega genomic o lo'o tauaveina le nofoaga autu o le tete'e atu i le anthracnose i le lupine pa'epa'e 101.
O la matou galuega e faʻaalia ai o se tali vave i le teteʻe, e faʻagaoioia i le amataga o le faʻamaʻi o laʻau (e sili atu pe a le silia le 12 hpi), e puipuia lelei ai le lupine lau manifinifi mai le anthracnose e mafua mai i le fungus pathogenic Collelotrichum lupini. I le faʻaaogaina o le faʻasologa maualuga o le throughput, na matou faʻaalia ai le eseesega o faʻamatalaga o genes teteʻe i le anthracnose i laʻau NLL e faʻatautaia e le Lanr1 ma le AnMan resistance genes. O le puipuiga manuia e aofia ai le mamanuina ma le faʻaeteete o genes mo porotini e aʻafia i le redox, photosynthesis, ma le pathogenesis i totonu o ni nai itula talu ona muamua fesootaʻi le laʻau ma se pathogen. O tali puipuia tutusa, ae tuai i le taimi, e le aoga tele i le puipuia o laʻau mai faʻamaʻi. O le teteʻe i le Anthrax e faʻatautaia e le Lanr1 gene e foliga tutusa ma le tali vave masani o le R gene (effector-triggered immunity), ae o le AnMan gene e foliga mai e maua ai se tali faʻalava (puipuiga e mafua mai i se microbe-associated molecular pattern), e maua ai se tulaga talafeagai o le faʻaauauina.
O laina NLL e 215 na faʻaaogaina e suʻe ai faʻailoga o le anthracnose e aofia ai ituaiga e 74, laina e 60 na maua mai i le faʻafefiloi poʻo le faʻafailele, mutants e 5, ma germplasms vao poʻo le uluai 76. O laina na sau mai atunuu e 17, e tele lava mai Polani (58), Sepania (47), Siamani (27), Ausetalia (26), Rusia (19), Belarus (7), Italia (5) ma isi laina mai atunuu e 10. O loʻo aofia ai foʻi i le seti laina e teteʻe i faʻasinomaga: 83A:476, Tanjil, Wonga o loʻo tauaveina le allele Lanr1, ma Mandelup o loʻo tauaveina le allele AnMan. O laina na maua mai le European Lupine Genetic Resource Database o loʻo tausia e Poznań Plant Breeding Ltd., Wiatrowo, Polani (Supplementary Table S1).
Sa totoina laau i lalo o tulaga faatonutonu (photoperiod 16 itula, vevela 25°C i le ao ma le 18°C ​​i le po). E lua ituaiga o meaola na iloiloina. Sa vavaeeseina le DNA mai laulaau e tolu vaiaso le matutua e faaaoga ai le DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, Siamani) e tusa ai ma le protocol. O le lelei ma le malosi o le DNA ua vavaeeseina sa iloiloina e ala i metotia spectrophotometric (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ISA). O le faailoga AnManM1 o loo faailogaina ai le gene tete'e atu i le anthracnose o le AnMan (e maua mai le cv. Mandelup) ma faailoga Anseq3 ma Anseq4 o loo siomia ai le gene Lanr1 (e maua mai le cv. Tanjil) na iloiloina 11,26,28. O Homozygotes mo le allele tete'e na togiina o le "1", susceptible - o le "0", ma heterozygotes - o le 0.5.
E faʻavae i luga o taunuʻuga o le suʻesuʻeina o faʻailoga AnManM1, AnSeq3 ma le AnSeq4 ma le maua o fatu mo faʻataʻitaʻiga mulimuli, e 50 laina NLL na filifilia mo le faʻailoga o le teteʻe atu i le anthracnose. Na faia le suʻesuʻega i ni kopi se lua i totonu o se fale lauʻeleʻele e pulea e le komepiuta ma se vaitaimi o le malamalama e 14 itula ma le vevela e 22°C i le ao ma le 19°C i le pō. E valuina fatu (oti ese le paʻu o le fatu i le isi itu o le embryo i se lau maʻai) aʻo leʻi lūlūina e puipuia ai le moe o fatu ona o le paʻu o le fatu e matua faigata ma ia mautinoa le tutusa o le tuputupu aʻe. Na totoina laʻau i totonu o ulo (11 × 11 × 21 cm) ma le eleele mama (TS-1 REC 085 Medium Basic, Klasmann-Deilmann Polska, Warsaw, Polani). Sa fa'atinoina le tui i le ituaiga Colletotrichum lupini Col-08, na totoina i le 1999 mai 'au o la'au lupine lau manifinifi na totoina i se fanua i Verzhenitsa, Polani Tele (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E). Ia maua se eria. Sa totoina ia mea ua vavae'ese i totonu o le SNA medium i le 20° C. i lalo o le malamalama uliuli mo le 21 aso e fa'aosofia ai le sporulation. I le fa vaiaso talu ona lūlūina, ina ua o'o atu la'au i le tulaga o lau e 4-6, sa fa'atinoina le tui e ala i le fa'asusuina i se conidia fa'asusu i le 0.5 x 106 conidia i le ml. A mae'a ona tui, sa teuina la'au i le pogisa mo le 24 itula i le susu e tusa ma le 98% ma le vevela o le 25°C e fa'afaigofie ai le tuputupu a'e o conidia ma le fa'agasologa o le fa'ama'i. Ona totoina lea o laau i lalo o le 14-itula photoperiod i le 22°C i le ao/19°C i le po ma le 70% susū. Na faia le togi o le faamai i le 22 aso talu ona tui ma e amata mai le 0 (puipuia) i le 9 (matua vaivai lava) e fuafua i le iai pe leai foi o ni manu'a necrotic i luga o au ma laulaau. E le gata i lea, ina ua uma ona togi, ona fuaina lea o le mamafa o laau. O sootaga i le va o genotypes o faailoga ma phenotypes o faamai na fuafuaina o ni correlations o le point two-sequence (leai o ni faailoga heterozygous i le seti o laina mo le auiliiliga o le phenotype o le tete'e atu i le anthracnose).