Nature.com தளத்திற்கு வருகை தந்ததற்கு நன்றி. நீங்கள் வரையறுக்கப்பட்ட CSS ஆதரவு கொண்ட உலாவிப் பதிப்பைப் பயன்படுத்துகிறீர்கள். சிறந்த அனுபவத்தைப் பெற, மேம்படுத்தப்பட்ட உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு (அல்லது இன்டர்நெட் எக்ஸ்ப்ளோரரில் இணக்கப் பயன்முறையை முடக்குமாறு) பரிந்துரைக்கிறோம். மேலும், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதி செய்வதற்காக, நாங்கள் இந்தத் தளத்தை ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் காட்டுகிறோம்.
ஒரே நேரத்தில் மூன்று ஸ்லைடுகளைக் கொண்ட ஒரு சுழல் பட்டியலைக் காண்பிக்கும். ஒரே நேரத்தில் மூன்று ஸ்லைடுகள் வழியாகச் செல்ல, முந்தைய மற்றும் அடுத்த பொத்தான்களைப் பயன்படுத்தவும், அல்லது இறுதியில் உள்ள ஸ்லைடர் பொத்தான்களைப் பயன்படுத்தி ஒரே நேரத்தில் மூன்று ஸ்லைடுகள் வழியாகச் செல்லவும்.
அகன்ற துளைகள் கொண்ட துகள்களைப் பெறுவதற்காக, சில மாற்றங்களுடன் சோல்-ஜெல் முறையில் நுண்துளை சிலிக்கா துகள்கள் தயாரிக்கப்பட்டன. இந்தத் துகள்கள், தலைகீழ் சங்கிலிப் பரிமாற்ற-துண்டாக்க (RAFT) பாலிமரைசேஷன் மூலம் N-ஃபினைல்மேலிமைடு-மெத்தில்வினைல் ஐசோசயனேட் (PMI) மற்றும் ஸ்டைரீன் உடன் வழிப்பொருளாக்கப்பட்டு, N-ஃபினைல்மேலிமைடு இடைச்செருகப்பட்ட பாலிஅமைடுகளை உருவாக்கின. ஸ்டைரீன் (PMP) நிலையான கட்டமாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. குறுகிய துளை கொண்ட துருப்பிடிக்காத எஃகு நிரல்கள் (100 × 1.8 மிமீ உள் விட்டம்) கூழ்மக் கலவையால் நிரப்பப்பட்டன. ஐந்து பெப்டைடுகளைக் (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leu அமினோ அமில என்கெஃபாலின்) கொண்ட செயற்கை பெப்டைடுகளின் கலவை மற்றும் மனித சீரம் அல்புமினின் (HAS) டிரிப்டிக் நீராற்பகுப்பு ஆகியவற்றைப் பிரிப்பதற்காக PMP நிரலின் நிறப்பிரிகைச் செயல்திறன் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது. உகந்த எலுஷன் நிலைமைகளின் கீழ், பெப்டைடுகளின் கலவையைக் கொண்ட தட்டுகளின் கோட்பாட்டு ரீதியான எண்ணிக்கை ஒரு சதுர மீட்டருக்கு 280,000 தட்டுகளை எட்டியது. உருவாக்கப்பட்ட நிரலின் பிரிப்புச் செயல்திறனை வணிக ரீதியான அசென்டிஸ் எக்ஸ்பிரஸ் RP-அமைடு நிரலுடன் ஒப்பிடுகையில், பிரிப்புத் திறன் மற்றும் பிரிதிறன் ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் PMP நிரலின் பிரிப்புத் திறன் வணிக ரீதியான நிரலை விடச் சிறந்தது என்பது கண்டறியப்பட்டது.
உயிரிமருந்துத் தொழில், சமீபத்திய ஆண்டுகளில் சந்தைப் பங்கில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்புடன், விரிவடைந்து வரும் ஒரு உலகளாவிய சந்தையாக உருவெடுத்துள்ளது. உயிரிமருந்துத் தொழிலின் அதிவேக வளர்ச்சியால்¹,²,³ பெப்டைடு மற்றும் புரதப் பகுப்பாய்விற்கு பெரும் தேவை ஏற்பட்டுள்ளது. இலக்கு பெப்டைடுடன் கூடுதலாக, பெப்டைடு தொகுப்பின் போது பல்வேறு அசுத்தங்கள் உருவாகின்றன, எனவே பெப்டைடின் விரும்பிய தூய்மையைப் பெற நிறப்பிரிகை சுத்திகரிப்பு தேவைப்படுகிறது. ஒரே மாதிரியில் கண்டறியக்கூடிய ஏராளமான இனங்கள் இருப்பதால், உடல் திரவங்கள், திசுக்கள் மற்றும் செல்களில் உள்ள புரதங்களைப் பகுப்பாய்வு செய்வதும், அவற்றின் பண்புகளைக் கண்டறிவதும் மிகவும் சவாலான ஒரு பணியாகும். பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களின் வரிசைப்படுத்தலுக்கு நிறை நிறமாலையியல் ஒரு சிறந்த கருவியாக இருந்தாலும், அத்தகைய மாதிரிகள் நேரடியாக நிறை நிறமாலையியலுக்குள் செலுத்தப்பட்டால், பிரிப்பு திருப்திகரமாக இருக்காது. நிறை நிறமாலையியல் பகுப்பாய்விற்கு முன் திரவ நிறப்பிரிகையை (LC) செய்வதன் மூலம் இந்தப் பிரச்சனையைத் தீர்க்க முடியும், இது ஒரு குறிப்பிட்ட நேரத்தில் நிறை நிறமாலையியலுக்குள் நுழையும் பகுப்பாய்வுப் பொருட்களின் அளவைக் குறைக்கும்⁴,⁵,⁶. மேலும், திரவ நிலை பிரிப்பின் போது பகுப்பாய்வுப் பொருட்கள் ஒரு குறுகிய பகுதியில் குவிக்கப்படலாம், இதன் மூலம் இந்தப் பகுப்பாய்வுப் பொருட்களை ஒருமுகப்படுத்தி, நிறை நிறமாலையியல் கண்டறிதலின் உணர்திறனை அதிகரிக்கலாம். திரவ நிறப்பிரிகை (LC) கடந்த பத்தாண்டுகளில் குறிப்பிடத்தக்க முன்னேற்றம் அடைந்து, புரதவியல் பகுப்பாய்விற்கு பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் ஒரு முறையாக மாறியுள்ளது7,8,9,10.
ஆக்டாடெசில்-மாற்றியமைக்கப்பட்ட சிலிக்காவை (ODS) நிலையான கட்டமாகப் பயன்படுத்தி, பெப்டைடுகளின் கலவைகளைத் தூய்மைப்படுத்தவும் பிரிக்கவும் ரிவர்ஸ்-ஃபேஸ் லிக்விட் குரோமடோகிராஃபி (RP-LC) பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது¹¹,¹²,¹³. இருப்பினும், அவற்றின் சிக்கலான அமைப்பு மற்றும் ஆம்போடெரிக் தன்மை காரணமாக,¹⁴,¹⁵ RP நிலையான கட்டங்களால் பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களின் திருப்திகரமான பிரிப்பை வழங்க முடியாது. எனவே, துருவ மற்றும் துருவமற்ற துண்டுகளைக் கொண்ட பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களின் பகுப்பாய்விற்கு, இந்த பகுப்பாய்வுப் பொருட்களுடன் தொடர்பு கொண்டு அவற்றைத் தக்கவைக்க சிறப்பாக வடிவமைக்கப்பட்ட நிலையான கட்டங்கள் தேவைப்படுகின்றன¹⁶. பலவகை இடைவினைகளை வழங்கும் கலப்பு குரோமடோகிராஃபி, பெப்டைடுகள், புரதங்கள் மற்றும் பிற சிக்கலான கலவைகளைப் பிரிப்பதற்கு RP-LC-க்கு ஒரு மாற்றாக இருக்க முடியும். பல கலப்பு வகை நிலையான கட்டங்கள் தயாரிக்கப்பட்டு, இந்த நிலையான கட்டங்களால் நிரப்பப்பட்ட நிரல்கள் பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களைப் பிரிக்கப் பயன்படுத்தப்பட்டன¹⁷,¹⁸,¹⁹,²⁰,²¹. துருவ மற்றும் துருவமற்ற குழுக்கள் இருப்பதால், கலப்பு முறை நிலையான கட்டங்கள் (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, துருவ இடைச்செருகல்/RPLC) பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களைப் பிரிப்பதற்கு ஏற்றவை²²⁻²³⁻²⁴,²⁵,²⁶,²⁷⁻²⁸. சகப்பிணைப்புடன் இணைக்கப்பட்ட துருவக் குழுக்களைக் கொண்ட துருவ இடைச்செருகப்பட்ட நிலையான கட்டங்கள், துருவ மற்றும் துருவமற்ற பகுப்பாய்வுகளுக்கு நல்ல பிரிப்புத் திறன்களையும் தனித்துவமான தேர்ந்தெடுப்புத் திறனையும் காட்டுகின்றன, ஏனெனில் பிரித்தலானது பகுப்பாய்வுக்கும் நிலையான கட்டத்திற்கும் இடையிலான பலவகை இடைவினைகளைச் சார்ந்துள்ளது²⁹,³⁰,³¹,³². சமீபத்தில், ஜாங் மற்றும் குழுவினர்³⁰ பாலிஅமைன்களின் பெஹினைல்-முனைய நிலையான கட்டங்களைப் பெற்று, ஹைட்ரோகார்பன்கள், மன அழுத்த எதிர்ப்பு மருந்துகள், ஃபிளாவனாய்டுகள், நியூக்ளியோசைடுகள், ஈஸ்ட்ரோஜன்கள் மற்றும் சில பிற பகுப்பாய்வுகளை வெற்றிகரமாகப் பிரித்தனர். துருவ உட்பொதிந்த நிலையான பொருளானது துருவ மற்றும் துருவமற்ற குழுக்கள் இரண்டையும் கொண்டுள்ளது, எனவே இது பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களை நீர்வெறுப்பு மற்றும் நீர்விருப்பப் பகுதிகளாகப் பிரிக்கப் பயன்படுத்தப்படலாம். போலார் இன்லைன் காலம்கள் (எ.கா., அமைடு இன்லைனுடன் கூடிய C18 காலம்கள்) அசென்டிஸ் எக்ஸ்பிரஸ் RP-அமைடு காலம்கள் என்ற வர்த்தகப் பெயரில் கிடைக்கின்றன, ஆனால் இந்தக் காலம்கள் அமீன் 33-இன் பகுப்பாய்விற்கு மட்டுமே பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளன.
தற்போதைய ஆய்வில், ஒரு முனைவு உட்பொதிவு நிலைப்புக் கட்டம் (N-ஃபினைல்மேலிமைடு, உட்பொதிவு பாலிஸ்டைரீன்) தயாரிக்கப்பட்டு, பெப்டைடு பிரிப்பு மற்றும் டிரிப்டிக் HSA பிளவுக்காக மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது. நிலைப்புக் கட்டத்தைத் தயாரிக்கப் பின்வரும் உத்தி பயன்படுத்தப்பட்டது. நுண்துளை சிலிக்கா துகள்கள், தயாரிப்புத் திட்டங்களில் சில மாற்றங்களுடன், எங்களின் முந்தைய வெளியீடுகளில் விவரிக்கப்பட்டுள்ள நடைமுறைகளின்படி தயாரிக்கப்பட்டன 31, 34, 35, 36, 37, 38, 39. பெரிய நுண்துளை அளவுகளைக் கொண்ட சிலிக்கா துகள்களைப் பெறுவதற்காக யூரியா, பாலிஎதிலீன் கிளைக்கால் (PEG), TMOS மற்றும் நீர்-அசிட்டிக் அமிலம் ஆகியவற்றின் விகிதங்கள் சரிசெய்யப்பட்டன. இரண்டாவதாக, ஒரு புதிய ஃபினைல்மேலிமைடு-மெத்தில்வினைல் ஐசோசயனேட் லிகண்ட் தொகுக்கப்பட்டு, அதன் வழித்தோன்றல் சிலிக்கா துகள்கள் முனைவு உட்பொதிவு நிலைப்புக் கட்டங்களைத் தயாரிக்கப் பயன்படுத்தப்பட்டன. பெறப்பட்ட நிலைப்புக் கட்டம், ஒரு உகந்த நிரப்புதல் திட்டத்தின்படி ஒரு துருப்பிடிக்காத எஃகுத் தூணில் (உள் விட்டம் 100 × 1.8 மிமீ) நிரப்பப்பட்டது. தூணுக்குள் ஒரு சீரான அடுக்கை உறுதி செய்வதற்காக, இயந்திர அதிர்வு மூலம் தூணின் நிரப்புதல் எளிதாக்கப்பட்டது. ஐந்து பெப்டைடுகளை (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, லூசின்-என்கெஃபாலின் பெப்டைட்) கொண்ட ஒரு பெப்டைடுகளின் கலவை மற்றும் மனித சீரம் அல்புமினின் (HSA) டிரிப்டிக் ஹைட்ரோலைசேட்டுகளைப் பிரிப்பதற்காக, நிரப்பப்பட்ட நிரல் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது. பெப்டைடு கலவையும் HSA டிரிப்டிக் டைஜெஸ்டும் நல்ல பிரிதிறன் மற்றும் செயல்திறனுடன் பிரிந்தன என்பது கவனிக்கப்பட்டது. PMP நிரலின் பிரிப்பு செயல்திறன், அசென்டிஸ் எக்ஸ்பிரஸ் RP-அமைடு நிரலின் பிரிப்பு செயல்திறனுடன் ஒப்பிடப்பட்டது. PMP நிரலில் பெப்டைடுகளும் புரதங்களும் நல்ல பிரிதிறனையும் அதிக பிரிப்பு செயல்திறனையும் கொண்டிருப்பதும், PMP நிரலின் பிரிப்பு செயல்திறன் அசென்டிஸ் எக்ஸ்பிரஸ் RP-அமைடு நிரலை விட அதிகமாக இருப்பதும் கவனிக்கப்பட்டது.
PEG (பாலிஎத்திலீன் கிளைக்கால்), யூரியா, அசிட்டிக் அமிலம், ட்ரைமெத்தாக்ஸிஆர்த்தோசிலிகேட் (TMOS), ட்ரைமெதில்குளோரோசிலேன் (TMCS), ட்ரைப்சின், மனித சீரம் அல்புமின் (HSA), அம்மோனியம் குளோரைடு, யூரியா, ஹெக்ஸாமெதில்மெத்தாக்ரிலோயில்டைசிலசேன் (HMDS), மெத்தாக்ரிலோயில் குளோரைடு (MC), ஸ்டைரீன், 4-ஹைட்ராக்ஸி-TEMPO, பென்சாயில் பெராக்சைடு (BPO), HPLC-க்கான அசிட்டோநைட்ரைல் (ACN), மெத்தனால், 2-புரோப்பனால் மற்றும் அசிட்டோன். சிக்மா-ஆல்ட்ரிச் நிறுவனம் (செயின்ட் லூயிஸ், மிசூரி, அமெரிக்கா).
யூரியா (8 கிராம்), பாலிஎதிலீன் கிளைக்கால் (8 கிராம்) மற்றும் 8 மில்லி 0.01 N. அசிட்டிக் அமிலம் ஆகியவற்றின் கலவை 10 நிமிடங்கள் கலக்கப்பட்டது, பின்னர் பனிக்கட்டி குளிர்விப்பின் கீழ் 24 மில்லி TMOS அதனுடன் சேர்க்கப்பட்டது. இந்த வினைக்கலவை ஒரு துருப்பிடிக்காத எஃகு ஆட்டோகிளேவில் 40°C வெப்பநிலையில் 6 மணி நேரமும், பின்னர் 120°C வெப்பநிலையில் 8 மணி நேரமும் சூடுபடுத்தப்பட்டது. நீர் வடித்து எடுக்கப்பட்டு, மீதம் இருந்த பொருள் 70°C வெப்பநிலையில் 12 மணி நேரம் உலர்த்தப்பட்டது. உலர்த்தப்பட்ட மென்மையான கட்டிகள் மென்மையாக அரைக்கப்பட்டு, ஒரு சூளையில் 550°C வெப்பநிலையில் 12 மணி நேரம் சுடப்பட்டன. துகள்களின் அளவு, துளை அளவு மற்றும் மேற்பரப்புப் பரப்பளவு ஆகியவற்றின் மீண்டும் மீண்டும் பெறும் தன்மையைச் சோதிப்பதற்காக மூன்று தொகுதிகள் தயாரிக்கப்பட்டு, அவற்றின் பண்புகள் ஆராயப்பட்டன.
பாலிஸ்டிரீன் சங்கிலிகளுக்கான முனைவுக் குழு மற்றும் நிலையான கட்டம். தயாரிப்பு முறை கீழே விவரிக்கப்பட்டுள்ளது.
N-ஃபினைல்மேலிமைடு (200 மி.கி) மற்றும் மெத்தில் வினைல் ஐசோசயனேட் (100 மி.கி) ஆகியவை நீரற்ற டோலுயீனில் கரைக்கப்பட்டன. பின்னர், ஃபினைல்மேலிமைடு மற்றும் மெத்தில் வினைல் ஐசோசயனேட் (PMCP) ஆகியவற்றின் கோபாலிமரைப் பெறுவதற்காக, 0.1 மிலி 2,2′-அசோஐசோபியூட்டிரோநைட்ரைல் (AIBN) வினைக்குழாயில் சேர்க்கப்பட்டது. இந்தக் கலவை 60°C வெப்பநிலையில் 3 மணி நேரம் சூடுபடுத்தப்பட்டு, வடிகட்டப்பட்டு, பின்னர் 40°C வெப்பநிலையில் ஒரு சூளையில் 3 மணி நேரம் உலர்த்தப்பட்டது.
உலர்ந்த சிலிக்கா துகள்கள் (2 கிராம்) 500 மில்லி லிட்டர் கொள்ளளவுள்ள உருளை வடிவக் குடுவையில், உலர்ந்த டோலுயீனில் (100 மில்லி லிட்டர்) சிதறடிக்கப்பட்டு, 10 நிமிடங்கள் கலக்கப்பட்டு, மீயொலி அலைகளுக்கு உட்படுத்தப்பட்டன. PMCP (10 மில்லி கிராம்) டோலுயீனில் கரைக்கப்பட்டு, ஒரு சேர்ப்பு புனல் வழியாக வினைக்குடுவையில் துளித்துளியாகச் சேர்க்கப்பட்டது. இந்தக் கலவை 100°C வெப்பநிலையில் 8 மணி நேரம் பின்னொழுக்கு செய்யப்பட்டு, வடிகட்டப்பட்டு, அசிட்டோனால் கழுவப்பட்டு, 60°C வெப்பநிலையில் 3 மணி நேரம் உலர்த்தப்பட்டது. பின்னர், PMCP உடன் சேர்ந்த சிலிக்கா துகள்கள் (100 கிராம்) டோலுயீனில் (200 மில்லி லிட்டர்) கரைக்கப்பட்டு, அதனுடன் 100 மைக்ரோ லிட்டர் டைபியூட்டில்டின் டைலாரேட் வினையூக்கியாக இருக்கும் நிலையில் 4-ஹைட்ராக்ஸி-TEMPO (2 மில்லி லிட்டர்) சேர்க்கப்பட்டது. இந்தக் கலவை 50°C வெப்பநிலையில் 8 மணி நேரம் கலக்கப்பட்டு, வடிகட்டப்பட்டு, 50°C வெப்பநிலையில் 3 மணி நேரம் உலர்த்தப்பட்டது.
ஸ்டைரீன் (1 மிலி), பென்சாயில் பெராக்சைடு (BPO) (0.5 மிலி) மற்றும் TEMPO-PMCP உடன் இணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்கள் (1.5 கி) ஆகியவை டோலுயீனில் சிதறடிக்கப்பட்டு, நைட்ரஜனால் சுத்திகரிக்கப்பட்டன. ஸ்டைரீனின் பாலிமரைசேஷன் 100°C வெப்பநிலையில் 12 மணி நேரம் மேற்கொள்ளப்பட்டது. இதன் விளைவாகக் கிடைத்த தயாரிப்பு மெத்தனால் கொண்டு கழுவப்பட்டு, 60°C வெப்பநிலையில் இரவு முழுவதும் உலர்த்தப்பட்டது. இந்த வினையின் பொதுவான திட்டம் படம் ஒன்றில் காட்டப்பட்டுள்ளது.
10–3 Torr-க்கும் குறைவான எஞ்சிய அழுத்தம் கிடைக்கும் வரை, மாதிரிகள் 393 K வெப்பநிலையில் 1 மணி நேரத்திற்கு வாயு நீக்கம் செய்யப்பட்டன. மொத்த துளைக் கனஅளவைத் தீர்மானிக்க, P/P0 = 0.99 என்ற சார்பு அழுத்தத்தில் உறிஞ்சப்பட்ட N2-வின் அளவு பயன்படுத்தப்பட்டது. தூய மற்றும் ஈனி-பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களின் புறவமைப்பு, ஒரு ஸ்கேனிங் எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கியைப் (ஹிட்டாச்சி ஹை டெக்னாலஜிஸ், டோக்கியோ, ஜப்பான்) பயன்படுத்தி ஆய்வு செய்யப்பட்டது. உலர்ந்த மாதிரிகள் (தூய சிலிக்கா மற்றும் ஈனி-பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்கள்) கார்பன் நாடாவைப் பயன்படுத்தி அலுமினியத் தண்டுகளில் வைக்கப்பட்டன. ஒரு Q150T ஸ்பட்டரிங் கருவியைப் பயன்படுத்தி மாதிரியின் மீது தங்கம் படியவைக்கப்பட்டது, மேலும் மாதிரியின் மீது 5 nm தடிமன் கொண்ட Au அடுக்கு படியவைக்கப்பட்டது. இது குறைந்த மின்னழுத்த செயல்முறையின் செயல்திறனை மேம்படுத்துவதோடு, சிறந்த குளிர் தெளிப்பையும் வழங்குகிறது. ஒரு தெர்மோ எலக்ட்ரான் (வால்தாம், MA, USA) ஃபிளாஷ் EA1112 தனிமக் கலவைப் பகுப்பாய்வியைப் பயன்படுத்தி தனிமப் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது. துகள் அளவுப் பரவலைப் பெற, ஒரு மால்வர்ன் துகள் அளவுப் பகுப்பாய்வி (வொர்செஸ்டர்ஷைர், UK) மாஸ்டர்சைசர் 2000 பயன்படுத்தப்பட்டது. பூச்சு இல்லாத சிலிக்கா துகள்கள் மற்றும் லிகண்ட்-பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்கள் (தலா 5 மி.கி) 5 மி.லி ஐசோபுரோப்பனாலில் சிதறடிக்கப்பட்டு, 10 நிமிடங்கள் மீயொலிக்கு உட்படுத்தப்பட்டு, 5 நிமிடங்கள் கலக்கப்பட்டு, ஒரு மாஸ்டர்சைசர் ஒளியியல் மேசையில் வைக்கப்பட்டன. வெப்ப எடையியல் பகுப்பாய்வானது, 30 முதல் 800 °C வரையிலான வெப்பநிலை வரம்பில், நிமிடத்திற்கு 5 °C என்ற விகிதத்தில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது.
குறிப்பு 31-இல் உள்ள அதே செயல்முறையைப் பின்பற்றி, (உள் விட்டம் 100 × 1.8 மிமீ) பரிமாணங்களைக் கொண்ட கண்ணாடியிழை பூசப்பட்ட குறுகிய துளை துருப்பிடிக்காத எஃகு நிரல்கள் கூழ்ம நிரப்புதல் முறையில் நிரப்பப்பட்டன. துருப்பிடிக்காத எஃகு நிரல் (கண்ணாடி பூசப்பட்டது, உள் விட்டம் 100 × 1.8 மிமீ) மற்றும் 1 µm ஃபிரிட் கொண்ட ஒரு வெளிவழி ஆகியவை கூழ்ம பேக்கேஜிங் இயந்திரத்துடன் (Alltech Deerfield, IL, USA) இணைக்கப்பட்டன. 150 மி.கி நிலையான கட்டத்தை 1.2 மி.லி மெத்தனாலில் கரைத்து, அதை ஒரு நீர்த்தேக்க நிரலுக்குள் செலுத்துவதன் மூலம் நிலையான கட்டத்தின் கூழ்மத்தைத் தயாரிக்கவும். மெத்தனால் கூழ்மக் கரைப்பானாகவும் கட்டுப்பாட்டுக் கரைப்பானாகவும் பயன்படுத்தப்பட்டது. 10 நிமிடங்களுக்கு 100 MP, 15 நிமிடங்களுக்கு 80 MP, மற்றும் 30 நிமிடங்களுக்கு 60 MP என்ற அழுத்த வரிசையைப் பயன்படுத்தி நிரலை நிரப்பவும். சீரான நிரல் நிரப்புதலை உறுதி செய்வதற்காக, இந்த நிரப்புதல் செயல்முறைக்கு இயந்திர அதிர்வுக்காக இரண்டு வாயு நிறப்பிரிகை நிரல் அதிர்விகள் (Alltech, Deerfield, IL, USA) பயன்படுத்தப்பட்டன. கம்பிக்கு சேதம் ஏற்படுவதைத் தடுக்க, கூழ் அடைப்பானை மூடி, அழுத்தத்தை மெதுவாக விடுவிக்கவும். அதன் செயல்பாட்டைச் சோதிப்பதற்காக, தூண் கூழ் முனையிலிருந்து துண்டிக்கப்பட்டு, மற்றொரு இணைப்பு அதன் உள்ளீட்டில் பொருத்தப்பட்டு LC அமைப்புடன் இணைக்கப்பட்டது.
ஒரு LC பம்ப் (10AD ஷிமாட்சு, ஜப்பான்), 50 nL ஊசி வளையத்துடன் கூடிய ஒரு மாதிரி எடுப்பான் (வால்கோ (அமெரிக்கா) C14 W.05), ஒரு சவ்வு வாயு நீக்கி (ஷிமாட்சு DGU-14A), மற்றும் ஒரு UV-VIS நுண்குழாய் சாளரம் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி ஒரு தனிப்பயன் MLC உருவாக்கப்பட்டது. கண்டறி சாதனம் (UV-2075) மற்றும் எனாமல் பூசப்பட்ட நுண்குழாய். கூடுதல் குழாய் விரிவாக்கத்தின் விளைவைக் குறைக்க, மிகவும் குறுகிய மற்றும் குட்டையான இணைப்புக் குழாய்களைப் பயன்படுத்தவும். குழாயை நிரப்பிய பிறகு, 1/16″ குறைக்கும் சந்திப்பின் வெளியேறும் இடத்தில் ஒரு நுண்குழாயை (50 µm id 365) நிறுவவும், மேலும் குறைக்கும் சந்திப்பின் ஒரு நுண்குழாயை (50 µm) நிறுவவும். தரவு சேகரிப்பு மற்றும் நிறப்பகுப்பாய்வு செயலாக்கம் ஆகியவை மல்டிகுரோ 2000 மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்டன. 254 nm-ல், ஆய்வுக்குட்பட்ட பொருட்களின் UV உறிஞ்சுதல் 0-ல் கண்காணிக்கப்பட்டது. நிறப்பகுப்பாய்வுத் தரவு ஆரிஜின்ப்ரோ8 (நார்தாம்ப்டன், MA) பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.
மனித சீரம் அல்புமின், உறைந்த உலர்ந்த தூள், ≥ 96% (அகரோஸ் ஜெல் எலக்ட்ரோஃபோரெசிஸ்) 3 மி.கி, டிரிப்சின் (1.5 மி.கி), 4.0 M யூரியா (1 மி.லி) மற்றும் 0.2 M அம்மோனியம் பைகார்பனேட் (1 மி.லி) ஆகியவற்றுடன் கலக்கப்பட்டது. இந்தக் கரைசல் 10 நிமிடங்கள் கலக்கப்பட்டு, 37°C வெப்பநிலையில் உள்ள நீர்த் தொட்டியில் 6 மணி நேரம் வைக்கப்பட்டது. பின்னர், 1 மி.லி 0.1% TFA கொண்டு திடீரெனக் குளிர்விக்கப்பட்டது. கரைசலை வடிகட்டி, 4°C-க்குக் கீழ் சேமிக்கவும்.
PMP நிரலில் பெப்டைடுகள் மற்றும் டிரிப்டிக் டைஜெஸ்ட் HSA ஆகியவற்றின் கலவையைப் பிரித்தெடுப்பது தனித்தனியாக மதிப்பிடப்பட்டது. PMP நிரலால் பிரிக்கப்பட்ட பெப்டைடுகள் மற்றும் HSA கலவையின் டிரிப்டிக் நீராற்பகுப்பைச் சரிபார்த்து, அதன் முடிவுகளை அசென்டிஸ் எக்ஸ்பிரஸ் RP-அமைடு நிரலுடன் ஒப்பிடவும். கோட்பாட்டுத் தட்டுகளின் எண்ணிக்கை பின்வரும் சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்படுகிறது:
தூய சிலிக்கா துகள்கள் மற்றும் லிகண்டுடன் பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களின் SEM படங்கள் படம் 2-இல் காட்டப்பட்டுள்ளன. தூய சிலிக்கா துகள்களின் SEM படங்கள் (A, B), எங்களின் முந்தைய ஆய்வுகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​துகள்கள் நீள்வட்டமாகவோ அல்லது ஒழுங்கற்ற சமச்சீருடனோ காணப்படும் ஒரு கோள வடிவத்தைக் காட்டுகின்றன. லிகண்டால் பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களின் (C, D) மேற்பரப்பு, தூய சிலிக்கா துகள்களின் மேற்பரப்பை விட மென்மையாக உள்ளது; சிலிக்கா துகள்களின் மேற்பரப்பை மூடியிருக்கும் பாலிஸ்டிரீன் சங்கிலிகளே இதற்குக் காரணமாக இருக்கலாம்.
தூய சிலிக்கா துகள்கள் (A, B) மற்றும் ஈனி பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்கள் (C, D) ஆகியவற்றின் ஸ்கேனிங் எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கிப் படங்கள்.
தூய சிலிக்கா துகள்கள் மற்றும் லிகண்ட்-பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களின் துகள் அளவுப் பரவல் படம் 2.3(A)-இல் காட்டப்பட்டுள்ளது. கன அளவு துகள் அளவுப் பரவல் வளைவுகள், வேதியியல் மாற்றியமைப்பிற்குப் பிறகு சிலிக்கா துகளின் அளவு அதிகரித்ததைக் காட்டின (படம் 3A). தற்போதைய ஆய்வு மற்றும் முந்தைய ஆய்வின் சிலிக்கா துகள் அளவுப் பரவல் தரவுகள் அட்டவணை 1(A)-இல் ஒப்பிடப்பட்டுள்ளன. PMP-இன் கன அளவு துகள் அளவு d(0.5) 3.36 µm ஆக இருந்தது, இது எங்கள் முந்தைய ஆய்வில் (பாலிஸ்டைரீன் பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்கள்)34 இருந்த ad(0.5) மதிப்பு 3.05 µm உடன் ஒப்பிடப்படுகிறது. வினைக்கலவையில் PEG, யூரியா, TMOS மற்றும் அசிட்டிக் அமிலம் ஆகியவற்றின் விகிதத்தில் ஏற்பட்ட மாற்றத்தின் காரணமாக, இந்தத் தொகுதியின் துகள் அளவுப் பரவல் எங்கள் முந்தைய ஆய்வை விடக் குறுகியதாக இருந்தது. PMP கட்டத்தின் துகள் அளவு, நாங்கள் முன்னர் ஆய்வு செய்த பாலிஸ்டைரீன் பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள் கட்டத்தின் துகள் அளவை விடச் சற்றுப் பெரியதாக உள்ளது. இதன் பொருள் என்னவென்றால், ஸ்டைரீனைக் கொண்டு சிலிக்கா துகள்களின் மேற்பரப்பைச் செயல்முறைப்படுத்தியபோது, ​​சிலிக்கா மேற்பரப்பில் ஒரு பாலிஸ்டைரீன் அடுக்கு (0.97 µm) மட்டுமே படிந்தது, அதேசமயம் PMP கட்டத்தில் அந்த அடுக்கின் தடிமன் 1.38 µm ஆக இருந்தது.
தூய சிலிக்கா துகள்கள் மற்றும் ஈனி பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களின் துகள் அளவுப் பரவல் (A) மற்றும் துளை அளவுப் பரவல் (B).
இந்த ஆய்வில் பயன்படுத்தப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களின் துளை அளவு, துளைக் கன அளவு மற்றும் மேற்பரப்புப் பரப்பளவு ஆகியவை அட்டவணை 1 (B)-இல் காட்டப்பட்டுள்ளன. தூய சிலிக்கா துகள்கள் மற்றும் லிகண்ட்-பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களின் PSD விவரங்கள் படம் 3(B)-இல் காட்டப்பட்டுள்ளன. முடிவுகள் எங்களின் முந்தைய ஆய்வு34 உடன் ஒப்பிடத்தக்கதாக இருந்தன. தூய மற்றும் லிகண்ட்-பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களின் துளை அளவுகள் முறையே 310 Å மற்றும் 241 Å ஆக இருந்தன. அட்டவணை 1 (B)-இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, வேதியியல் மாற்றத்திற்குப் பிறகு துளை அளவு 69 Å குறைந்துள்ளது என்பதை இது குறிக்கிறது, மேலும் அதன் நகர்வு வளைவு படத்தில் காட்டப்பட்டுள்ளது. தற்போதைய ஆய்வில் சிலிக்கா துகள்களின் குறிப்பிட்ட மேற்பரப்புப் பரப்பளவு 116 மீ2/கி ஆகும், இது எங்களின் முந்தைய ஆய்வுடன் (124 மீ2/கி) ஒப்பிடத்தக்கது. அட்டவணை 1(B)-இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, வேதியியல் மாற்றத்திற்குப் பிறகு சிலிக்கா துகள்களின் மேற்பரப்புப் பரப்பளவும் (மீ2/கி) 116 மீ2/கி-இலிருந்து 105 மீ2/கி ஆகக் குறைந்துள்ளது.
நிலையான கட்டத்தின் தனிமப் பகுப்பாய்வின் முடிவுகள் அட்டவணை 2-இல் வழங்கப்பட்டுள்ளன. தற்போதைய நிலையான கட்டத்தின் கார்பன் உள்ளடக்கம் 6.35% ஆகும், இது எங்கள் முந்தைய ஆய்வில் (பாலிஸ்டைரீனுடன் தொடர்புடைய சிலிக்கா துகள்கள், முறையே 7.93%35 மற்றும் 10.21%) 42 இருந்ததை விடக் குறைவாகும். SP தயாரிப்பில் ஸ்டைரீனுடன் கூடுதலாக ஃபினைல்மேலிமைடு மெத்தில் வினைல் ஐசோசயனேட் (PCMP) மற்றும் 4-ஹைட்ராக்ஸி-TEMPO போன்ற சில முனைவுள்ள ஈந்தணைவிகள் பயன்படுத்தப்பட்டதால், தற்போதைய நிலையான கட்டத்தின் கார்பன் உள்ளடக்கம் குறைவாக உள்ளது. முந்தைய ஆய்வுகளில்42 0.1735 மற்றும் 0.85% ஆக இருந்ததோடு ஒப்பிடுகையில், தற்போதைய நிலையான கட்டத்தில் நைட்ரஜனின் எடை சதவீதம் 2.21% ஆகும். ஃபினைல்மேலிமைடு காரணமாக தற்போதைய நிலையான கட்டத்தில் நைட்ரஜனின் எடை சதவீதம் அதிகமாக உள்ளது என்பதே இதன் பொருள். இதேபோல், அட்டவணை 2-இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, தயாரிப்புகள் (4) மற்றும் (5) முறையே 2.7% மற்றும் 2.9% கார்பன் உள்ளடக்கத்தைக் கொண்டுள்ளன, அதே நேரத்தில் இறுதித் தயாரிப்பு (6) 6.35% கார்பன் உள்ளடக்கத்தைக் கொண்டுள்ளது. PMP-இன் நிலையான கட்டத்தில் எடை இழப்பைச் சோதிக்க வெப்ப எடையியல் பகுப்பாய்வு (TGA) பயன்படுத்தப்பட்டது, மேலும் TGA வளைவு படம் 4-இல் காட்டப்பட்டுள்ளது. TGA வளைவு 8.6% எடை இழப்பைக் காட்டுகிறது, இது கார்பன் உள்ளடக்கத்துடன் (6.35%) நன்கு ஒத்துப்போகிறது, ஏனெனில் லிகண்டுகள் C-ஐ மட்டுமல்லாமல், N, O மற்றும் H-ஐயும் கொண்டுள்ளன.
சிலிக்கா துகள்களின் மேற்பரப்பை மாற்றுவதற்காக, ஃபினைல்மேலிமைடு-மெத்தில்வினைல் ஐசோசயனேட் என்ற லிகண்ட், அதன் முனைவுள்ள ஃபினைல்மேலிமைடு மற்றும் வினைல்ஐசோசயனேட் தொகுதிகள் காரணமாகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டது. வினைல் ஐசோசயனேட் தொகுதிகள், உயிருள்ள ரேடிக்கல் பாலிமரைசேஷன் மூலம் ஸ்டைரீனுடன் மேலும் வினைபுரிய முடியும். இரண்டாவது காரணம், பகுப்பாய்வுப் பொருளுடன் மிதமான இடைவினைகளைக் கொண்ட ஒரு தொகுதியைச் செருகுவதாகும். மேலும், பகுப்பாய்வுப் பொருளுக்கும் நிலையான கட்டத்திற்கும் இடையில் வலுவான நிலைமின்னியல் இடைவினைகள் எதுவும் இருக்காது, ஏனெனில் ஃபினைல்மேலிமைடு பகுதிக்கு சாதாரண pH-இல் மெய்நிகர் மின்னூட்டம் இல்லை. நிலையான கட்டத்தின் முனைவுத்தன்மையை, ஸ்டைரீனின் உகந்த அளவு மற்றும் ஃப்ரீ ரேடிக்கல் பாலிமரைசேஷன் வினை நேரம் ஆகியவற்றைக் கொண்டு கட்டுப்படுத்தலாம். வினையின் இறுதிப் படி (ஃப்ரீ ரேடிக்கல் பாலிமரைசேஷன்) மிகவும் முக்கியமானது, ஏனெனில் அது நிலையான கட்டத்தின் முனைவுத்தன்மையை மாற்றுகிறது. இந்த நிலையான கட்டங்களில் உள்ள கார்பன் உள்ளடக்கத்தைச் சரிபார்க்க தனிமப் பகுப்பாய்வு மேற்கொள்ளப்பட்டது. ஸ்டைரீனின் அளவையும் வினை நேரத்தையும் அதிகரிப்பது நிலையான கட்டத்தின் கார்பன் உள்ளடக்கத்தை அதிகரிக்கிறது என்பதும், நேர்மாறாகவும் நிகழ்கிறது என்பதும் கண்டறியப்பட்டுள்ளது. வெவ்வேறு செறிவுகளில் ஸ்டைரீனுடன் தயாரிக்கப்பட்ட SP-கள் வெவ்வேறு கார்பன் சுமைகளைக் கொண்டுள்ளன. இதேபோல், இந்த நிலையான கட்டங்கள் துருப்பிடிக்காத எஃகுத் தூண்களில் வைக்கப்பட்டு, அவற்றின் நிறப்பிரிகை பண்புகள் (தேர்ந்தெடுப்புத்திறன், பிரித்தறியும் திறன், N மதிப்பு போன்றவை) சரிபார்க்கப்பட்டன. இந்தச் சோதனைகளின் அடிப்படையில், கட்டுப்படுத்தப்பட்ட முனைவுத்தன்மையையும் பகுப்பாய்வுப் பொருளின் நல்ல தக்கவைப்பையும் வழங்குவதற்காக, PMP நிலையான கட்டத்தைத் தயாரிப்பதற்கான ஒரு உகந்த கலவை தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டது.
நகரும் கட்டத்தின் திறனைப் பயன்படுத்தி, ஐந்து பெப்டைடுகளின் கலவைகளை (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, லூசின்-என்கெஃபாலின்) பகுப்பாய்வு செய்வதற்காக PMP நிரலும் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது. 60/40 (v/v) ACN/நீர் (0.1% TFA) 80 µl/நிமிடம் என்ற பாய்வு விகிதத்தில் இது செய்யப்பட்டது. உகந்த கரைத்தல் நிலைமைகளின் கீழ் (200,000 தட்டுகள்/மீ), ஒரு நிரலுக்கு (100 × 1.8 மிமீ) உள்ள கோட்பாட்டுத் தட்டுகளின் எண்ணிக்கை (N) 20,000 ± 100 ஆகும். மூன்று PMP நிரல்களுக்கான N மதிப்புகள் அட்டவணை 3-லும், குரோமட்டோகிராம்கள் படம் 5A-லும் காட்டப்பட்டுள்ளன. PMP நிரலில் அதிக பாய்வு விகிதத்தில் (700 µl/min) விரைவான பகுப்பாய்வு, ஒரு நிமிடத்திற்குள் ஐந்து பெப்டைடுகள் வெளியேற்றப்பட்டன, ஒரு நிரலுக்கு (100 x 1.8 மிமீ விட்டம்) 13,500 ± 330 என்ற சிறந்த N மதிப்பு, இது 135,000 தட்டுகள்/மீ க்கு சமம் (படம் 5B). மீண்டும் மீண்டும் செய்யும் திறனைச் சோதிக்க, ஒரே அளவிலான (உள் விட்டம் 100 x 1.8 மிமீ) மூன்று நிரல்கள், PMP நிலையான கட்டத்தின் மூன்று வெவ்வேறு தொகுதிகளால் நிரப்பப்பட்டன. உகந்த வெளியேற்ற நிலைமைகள், கோட்பாட்டுத் தட்டுகளின் எண்ணிக்கை N, மற்றும் தக்கவைப்பு நேரம் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி ஒவ்வொரு நிரலிலும் ஒரே சோதனைக் கலவையைப் பிரிப்பதன் மூலம் ஒவ்வொரு நிரலுக்கும் பகுப்பாய்வுகள் பதிவு செய்யப்பட்டன. PMP நிரல்களுக்கான மீண்டும் மீண்டும் செய்யும் திறன் தரவுகள் அட்டவணை 4 இல் காட்டப்பட்டுள்ளன. அட்டவணை 3 இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, PMP நிரலின் மீண்டும் மீண்டும் செய்யும் திறன் மிகக் குறைந்த %RSD மதிப்புகளுடன் நன்கு ஒத்துப்போனது.
PMP காலம் (B) மற்றும் அசென்டிஸ் எக்ஸ்பிரஸ் RP-அமைடு காலம் (A) ஆகியவற்றில் பெப்டைட் கலவைகளைப் பிரித்தல், நகரும் நிலை 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), PMP காலம் பரிமாணங்கள் (100 x 1.8 மிமீ உள்விட்டம்), பகுப்பாய்வு. சேர்மங்களின் வெளியேற்ற வரிசை: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) மற்றும் 5 (லூசிக் அமில என்கெஃபாலின்).
HPLC மூலம் மனித சீரம் அல்புமினின் டிரிப்டிக் ஹைட்ரோலைசேட்டைப் பிரிப்பதற்காக ஒரு PMP நெடுவரிசை (உள் விட்டம் 100 x 1.8 மிமீ) மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது. படம் 6-இல் உள்ள குரோமட்டோகிராம், மாதிரிகள் மிகச் சிறந்த பிரிதிறனுடன் நன்கு பிரிக்கப்பட்டிருப்பதைக் காட்டுகிறது. HSA கரைசல்கள் 100 μl/நிமிடம் பாய்வு வீதம், 70/30 அசிட்டோநைட்ரைல்/நீர் மற்றும் 0.1% TFA கொண்ட ஒரு நகரும் கட்டம் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. குரோமட்டோகிராமில் (படம் 6) காட்டப்பட்டுள்ளபடி, HSA-வின் பிளவு 17 பெப்டைடுகளுக்கு இணையாக 17 சிகரங்களாகப் பிரிக்கப்பட்டது. HSA ஹைட்ரோலைசேட்டிலிருந்து தனிப்பட்ட சிகரங்களின் பிரிப்புத் திறன்கள் கணக்கிடப்பட்டு, அந்த மதிப்புகள் அட்டவணை 5-இல் காட்டப்பட்டுள்ளன.
HSA டிரிப்டிக் ஹைட்ரோலைசேட்டுகள், ஒரு PMP நிரலில் (உள் விட்டம் 100 x 1.8 மிமீ), பாய்வு விகிதம் (100 μl/நிமிடம்), 60/40 அசிட்டோநைட்ரைல்/நீர் நகரும் நிலை மற்றும் 0.1% TFA ஆகியவற்றைக் கொண்டு பிரிக்கப்பட்டன.
இதில் L என்பது நெடுவரிசையின் நீளம், η என்பது நகரும் கட்டத்தின் பாகுத்தன்மை, ΔP என்பது நெடுவரிசையின் பின் அழுத்தம், மற்றும் u என்பது நகரும் கட்டத்தின் நேரியல் திசைவேகம் ஆகும். PMP நெடுவரிசையின் ஊடுருவுத்திறன் 2.5 × 10–14 மீ2 ஆகவும், பாய்வு விகிதம் 25 µl/நிமிடமாகவும் இருந்தது, மேலும் 60/40 v/v விகிதத்தில் ACN/நீர் பயன்படுத்தப்பட்டது. PMP நெடுவரிசையின் (உள் விட்டம் 100 × 1.8 மிமீ) ஊடுருவுத்திறன், எங்களின் முந்தைய Ref.34 ஆய்வின் ஊடுருவுத்திறனை ஒத்திருந்தது. மேலோட்டமாக நுண்துளைகள் கொண்ட துகள்களால் நிரப்பப்பட்ட ஒரு நெடுவரிசையின் ஊடுருவுத்திறன் 1.7×10.6 µm ஆகவும், 5 µm துகள்களுக்கு 2.5×10-14 மீ2 ஆகவும் உள்ளது43. எனவே, PMP கட்டத்தின் ஊடுருவுத்திறன், 5 µm அளவுள்ள உள்ளகம்-மேலோடு துகள்களின் ஊடுருவுத்திறனை ஒத்திருக்கிறது.
இதில் Wx என்பது குளோரோஃபார்ம் நிரப்பப்பட்ட நிரலின் நிறை, Wy என்பது மெத்தனால் நிரப்பப்பட்ட நிரலின் நிறை, மற்றும் ρ என்பது கரைப்பானின் அடர்த்தி ஆகும். மெத்தனால் (ρ = 0.7866) மற்றும் குளோரோஃபார்ம் (ρ = 1.484) ஆகியவற்றின் அடர்த்தி. சிலிக்கா-C18 துகள் நிரல் (100 × 1.8 மிமீ உள்விட்டம்)34 மற்றும் எங்களால் முன்னர் ஆய்வு செய்யப்பட்ட C18-யூரியா31 நிரல் ஆகியவற்றின் மொத்த நுண்துளைத்தன்மை முறையே 0.63 மற்றும் 0.55 ஆக இருந்தது. இதன் பொருள், யூரியா லிகண்டுகளின் இருப்பு நிலையான கட்டத்தின் ஊடுருவுத்திறனைக் குறைக்கிறது என்பதாகும். மறுபுறம், PMP நிரலின் (உள்விட்டம் 100 × 1.8 மிமீ) மொத்த நுண்துளைத்தன்மை 0.60 ஆகும். C18 வகை நிலைத்த கட்டங்களில் C18 லிகண்டுகள் சிலிக்கா துகள்களுடன் நேரியல் சங்கிலிகளாக இணைக்கப்பட்டுள்ளதால், C18 பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா துகள்களால் நிரப்பப்பட்ட நிரல்களை விட PMP நிரல்கள் குறைந்த ஊடுருவக்கூடியவை. அதேசமயம், பாலிஸ்டிரீன் வகை நிலைத்த கட்டங்களில் துகள்களைச் சுற்றி ஒப்பீட்டளவில் தடிமனான பாலிமர் உருவாகிறது. அடுக்கு A. ஒரு வழக்கமான சோதனையில், நிரல் நுண்துளைத்தன்மை பின்வருமாறு கணக்கிடப்படுகிறது:
படம் 7A, B-இல், ஒரே மாதிரியான எலுஷன் நிலைமைகளின் கீழ், அதாவது 60/40 ACN/H2O மற்றும் 0.1% TFA உடன், இரண்டு காலம்களிலும் 20 µl/min முதல் 800 µl/min வரையிலான ஓட்ட விகிதத்தில், ஒரு PMP காலம் (உள் விட்டம் 100 x 1.8 மிமீ) மற்றும் ஒரு Ascentis Express RP-Amide காலம் (உள் விட்டம் 100 x 1.8 மிமீ) ஆகியவற்றிற்கான வான் டீம்டர் வரைபடங்கள் காட்டப்பட்டுள்ளன. உகந்த ஓட்ட விகிதத்தில் (80 µl/min) குறைந்தபட்ச HETP மதிப்புகள், PMP காலத்திற்கு 2.6 µm ஆகவும், Ascentis Express RP-Amide காலத்திற்கு 3.9 µm ஆகவும் இருந்தன. HETP மதிப்புகள், PMP நிரலின் (100 x 1.8 மிமீ உள்விட்டம்) பிரிப்புத் திறன், வணிகரீதியாகக் கிடைக்கும் Ascentis Express RP-Amide நிரலை (100 x 1.8 மிமீ உள்விட்டம்) விட மிகவும் அதிகமாக இருப்பதைக் காட்டுகின்றன. படம் 7(A)-இல் உள்ள வான் டீம்டர் வரைபடம், நமது முந்தைய ஆய்வுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​பாய்வு அதிகரிக்கும்போது N மதிப்பின் குறைவு குறிப்பிடத்தக்க அளவு அதிகமாக இல்லை என்பதைக் காட்டுகிறது. Ascentis Express RP-Amide நிரலுடன் ஒப்பிடும்போது PMP நிரலின் (உள்விட்டம் 100 × 1.8 மிமீ) அதிக பிரிப்புத் திறன், தற்போதைய ஆய்வில்34 பயன்படுத்தப்பட்ட மேம்படுத்தப்பட்ட துகள் வடிவம் மற்றும் அளவு மற்றும் அதிநவீன நிரல் நிரப்பும் செயல்முறையை அடிப்படையாகக் கொண்டது.
(A) 0.1% TFA உடன் கூடிய 60/40 ACN/H2O கரைசலில், ஒரு PMP நிரலில் (உள்விட்டம் 100 x 1.8 மிமீ) பெறப்பட்ட வான் டீம்டர் வரைபடம் (HETP எதிர் நகரும் கட்டத்தின் நேரியல் திசைவேகம்). (B) 0.1% TFA உடன் கூடிய 60/40 ACN/H2O கரைசலில், ஒரு Ascentis Express RP-Amide நிரலில் (உள்விட்டம் 100 x 1.8 மிமீ) பெறப்பட்ட வான் டீம்டர் வரைபடம் (HETP எதிர் நகரும் கட்டத்தின் நேரியல் திசைவேகம்).
உயர் செயல்திறன் திரவ நிறப்பிரிகை முறையில், செயற்கை பெப்டைடுகள் மற்றும் மனித சீரம் அல்புமினின் (HSA) டிரிப்டிக் நீராற்பகுப்பு ஆகியவற்றின் கலவையைப் பிரிப்பதற்காக, இடைச்செருகப்பட்ட பாலிஸ்டைரீனின் ஒரு முனைவுள்ள நிலையான கட்டம் தயாரிக்கப்பட்டு மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது. பெப்டைடு கலவைகளுக்கான PMP நிரல்களின் நிறப்பிரிகை செயல்திறன், பிரிப்புத் திறன் மற்றும் பிரிதிறன் ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் மிகச் சிறப்பாக உள்ளது. PMP நிரல்களின் மேம்பட்ட பிரிப்புத் திறனுக்கு, சிலிக்கா துகள் அளவு மற்றும் துளை அளவு, நிலையான கட்டங்களின் கட்டுப்படுத்தப்பட்ட தொகுப்பு, மற்றும் சிக்கலான நிரல் நிரப்புப் பொருட்கள் போன்ற பல காரணங்கள் உள்ளன. உயர் பிரிப்புத் திறனுடன் கூடுதலாக, இந்த நிலையான கட்டத்தின் மற்றொரு நன்மை, அதிக பாய்வு விகிதங்களில் ஏற்படும் குறைந்த நிரல் பின் அழுத்தமாகும். PMP நிரல்கள் அதிக மீள்உருவாக்கத் திறன் கொண்டவை மற்றும் பெப்டைடுகளின் கலவைகள் மற்றும் பல்வேறு புரதங்களின் டிரிப்டிக் செரிமானத்தைப் பகுப்பாய்வு செய்யப் பயன்படுத்தப்படலாம். திரவ நிறப்பிரிகை முறையில், இயற்கை பொருட்கள், மருத்துவ தாவரங்கள் மற்றும் காளான்களின் சாறுகளிலிருந்து உயிரியல் செயல்பாட்டு சேர்மங்களைப் பிரிப்பதற்காக இந்த நிரலைப் பயன்படுத்த நாங்கள் உத்தேசித்துள்ளோம். எதிர்காலத்தில், புரதங்கள் மற்றும் மோனோகுளோனல் ஆன்டிபாடிகளைப் பிரிப்பதற்காகவும் PMP நிரல்கள் மதிப்பீடு செய்யப்படும்.
ஃபீல்ட், ஜே.கே., யூயர்பி, எம்.ஆர்., லாவ், ஜே., தோகர்சென், எச். & பீட்டர்சன், பி. தலைகீழ் கட்ட நிறப்பிரிகை பெப்டைட் பிரிப்பு அமைப்புகள் குறித்த ஆய்வு பகுதி I: நெடுவரிசை பண்புக்கூறுக்கான ஒரு நெறிமுறையின் உருவாக்கம். ஃபீல்ட், ஜே.கே., யூயர்பி, எம்.ஆர்., லாவ், ஜே., தோகர்சென், எச். & பீட்டர்சன், பி. தலைகீழ் கட்ட நிறப்பிரிகை பெப்டைட் பிரிப்பு அமைப்புகள் குறித்த ஆய்வு பகுதி I: நெடுவரிசை பண்புக்கூறுக்கான ஒரு நெறிமுறையின் உருவாக்கம்.ஃபீல்ட், ஜே.கே., ஓவர்பி, எம்.ஆர்., லாவ், ஜே., டோகர்சென், எச்., மற்றும் பீட்டர்சன், பி. தலைகீழ்-கட்ட நிறப்பிரிகை மூலம் பெப்டைட் பிரிப்பு அமைப்புகளின் ஆய்வு, பகுதி I: நெடுவரிசைப் பண்பறிதலுக்கான ஒரு நெறிமுறையை உருவாக்குதல். ஃபீல்ட், ஜே.கே., யூயர்பி, எம்.ஆர்., லாவ், ஜே., தோகர்சென், எச். & பீட்டர்சன், பி. தலைகீழ் கட்ட நிறப்பிரிகை பெப்டைட் பிரிப்பு அமைப்புகள் குறித்த ஆய்வு பகுதி I: நெடுவரிசை பண்புகளுக்கான ஒரு நெறிமுறையின் உருவாக்கம். ஃபீல்ட், ஜே.கே., யூயர்பி, எம்.ஆர்., லாவ், ஜே., தோகர்சென், எச். & பீட்டர்சன், பி. தலைகீழ் கட்ட நிறப்பிரிகை பெப்டைட் பிரிப்பு அமைப்புகள் குறித்த ஆய்வு பகுதி I: நெடுவரிசை பண்புகளுக்கான ஒரு நெறிமுறையின் உருவாக்கம்.ஃபீல்ட், ஜே.கே., ஓவர்பி, எம்.ஆர்., லாவ், ஜே., டோகர்சென், எச்., மற்றும் பீட்டர்சன், பி. தலைகீழ்-கட்ட நிறப்பிரிகை மூலம் பெப்டைட் பிரிப்பு அமைப்புகளின் ஆய்வு, பகுதி I: நெடுவரிசைப் பண்பறிதலுக்கான ஒரு நெறிமுறையை உருவாக்குதல்.ஜே.色谱法。 1603,113-129。 https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038(2019)。
கோமஸ், பி. மற்றும் பலர். தொற்று நோய்களுக்கான சிகிச்சைக்கு மேம்படுத்தப்பட்ட செயல்திறன் மிக்க பெப்டைடுகளை உருவாக்குவதற்கான முறைகள். உயிரித்தொழில்நுட்பம். சாதனைகள் 36(2), 415–429. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
வ்லீகே, பி., லிசோவ்ஸ்கி, வி., மார்டினெஸ், ஜே. & க்ரெஸ்ட்சாடிஸ்கி, எம். செயற்கை சிகிச்சை பெப்டைடுகள்: அறிவியலும் சந்தையும். வ்லீகே, பி., லிசோவ்ஸ்கி, வி., மார்டினெஸ், ஜே. & க்ரெஸ்ட்சாடிஸ்கி, எம். செயற்கை சிகிச்சை பெப்டைடுகள்: அறிவியலும் சந்தையும்.வ்லீஜ் பி, லிசோவ்ஸ்கி வி, மார்டினெஸ் ஜே மற்றும் க்ரெஷ்சாட்டிஸ்கி எம். செயற்கை சிகிச்சை பெப்டைடுகள்: அறிவியலும் சந்தையும்.வ்லீஜ் பி, லிசோவ்ஸ்கி வி, மார்டினெஸ் ஜே மற்றும் க்ரெஷாட்ஸ்கி எம். செயற்கை சிகிச்சை பெப்டைடுகள்: அறிவியல் மற்றும் சந்தை. மருந்து கண்டுபிடிப்பு. டுடே 15 (1–2), 40–56. https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010).
ஷீ, எஃப்., ஸ்மித், ஆர்.டி. & ஷென், ஒய். மேம்பட்ட புரோட்டியோமிக் திரவ நிறப்பிரிகை. ஷீ, எஃப்., ஸ்மித், ஆர்.டி. & ஷென், ஒய். மேம்பட்ட புரோட்டியோமிக் திரவ நிறப்பிரிகை.F., ஸ்மித் RD மற்றும் ஷென் யூ ஆகியோரின் 'மேம்பட்ட புரோட்டியோமிக் திரவ நிறப்பிரிகை' நூலைக் காண்க. Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. 高级蛋白质组液相色谱。 Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. மேம்பட்ட புரத கலவை 液相色谱。F., ஸ்மித் RD மற்றும் ஷென் யூ ஆகியோரின் 'மேம்பட்ட புரோட்டியோமிக் திரவ நிறப்பிரிகை' நூலைக் காண்க.ஜே. குரோமட்டோகிராபி. ஏ 1261, 78–90 (2012).
லியு, டபிள்யூ. மற்றும் பலர். மேம்பட்ட திரவ நிறப்பிரிகை-நிறை நிறமாலையியல், பரந்த அடிப்படையிலான வளர்சிதை மாற்றவியல் மற்றும் புரதவியல் ஆகியவற்றை இணைக்க வல்லது. அனஸ். சிம். ஆக்டா 1069, 89–97 (2019).
செஸ்நட், எஸ்.எம். மற்றும் சாலிஸ்பரி, ஜே.ஜே. மருந்து மேம்பாட்டில் UHPLC-யின் பங்கு. செஸ்நட், எஸ்.எம். மற்றும் சாலிஸ்பரி, ஜே.ஜே. மருந்து மேம்பாட்டில் UHPLC-யின் பங்கு.செஸ்நட், எஸ்.எம் மற்றும் சாலிஸ்பரி, ஜே.ஜே. மருந்து மேம்பாட்டில் UHPLC-யின் பங்கு.செஸ்நட், எஸ்.எம் மற்றும் சாலிஸ்பரி, ஜே.ஜே மருந்து மேம்பாட்டில் UHPLC இன் பங்கு. ஜே. செப்ட் சயின்ஸ். 30(8), 1183–1190 (2007).
வூ, என். & கிளாசென், ஏ.எம். விரைவான பிரித்தல்களுக்கான அதி உயர் அழுத்த திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் அடிப்படை மற்றும் நடைமுறை அம்சங்கள். வூ, என். & கிளாசென், ஏ.எம். விரைவான பிரித்தல்களுக்கான அதி உயர் அழுத்த திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் அடிப்படை மற்றும் நடைமுறை அம்சங்கள்.வூ, என். மற்றும் கிளாசென், ஏ.எம். விரைவான பிரித்தலுக்கான உயர் அழுத்த திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் அடிப்படை மற்றும் நடைமுறை அம்சங்கள். வு, என். & கிளாசன், AM வூ, என். & கிளாசென், ஏ.எம். விரைவான பிரித்தலுக்கான அதி உயர் அழுத்த திரவ நிறப்பகுப்பாய்வின் அடிப்படை மற்றும் நடைமுறை அம்சங்கள்.வூ, என். மற்றும் கிளாசென், ஏ.எம். விரைவான பிரித்தலுக்கான உயர் அழுத்த திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் அடிப்படை மற்றும் நடைமுறை அம்சங்கள்.ஜே. செப்ட். சயின்ஸ். 30(8), 1167–1182. https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
ரென், எஸ்.ஏ. & செலிட்செஃப், பி. மருந்து மேம்பாட்டில் அதி செயல்திறன் திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் பயன்பாடு. ரென், எஸ்.ஏ. & செலிட்செஃப், பி. மருந்து மேம்பாட்டில் அதி செயல்திறன் திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் பயன்பாடு.ரென், எஸ்.ஏ. மற்றும் செலிஷெஃப், பி. மருந்து மேம்பாட்டில் அதி உயர் செயல்திறன் திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் பயன்பாடு. Wren, SA & Tchelitcheff, P. 超高效液相色谱在药物开发中的应用。 ரென், எஸ்.ஏ. மற்றும் செலிட்செஃப், பி.ரென், எஸ்.ஏ. மற்றும் செலிஷெஃப், பி. மருந்து மேம்பாட்டில் அதி செயல்திறன் திரவ நிறப்பகுப்பாய்வின் பயன்பாடு.ஜே. குரோமட்டோகிராபி. 1119(1-2), 140-146. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
கு, எச். மற்றும் பலர். என்டிரோவைரஸ் 71-ஐ திறமையாக சுத்திகரிப்பதற்காக, உயர் உள் கட்டத்தைக் கொண்ட எண்ணெய்-நீர் குழம்பிலிருந்து பெறப்பட்ட ஒரு ஒற்றைக்கல் பெருந்துளை நீர்க்கூழ். கெமிக்கல் ப்ராஜெக்ட் ஜர்னல் 401, 126051 (2020).
ஷி, ஒய்., சியாங், ஆர்., ஹோர்வாத், சி. & வில்கின்ஸ், ஜே.ஏ. புரோட்டியோமிக்ஸில் திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் பங்கு. ஷி, ஒய்., சியாங், ஆர்., ஹோர்வாத், சி. & வில்கின்ஸ், ஜே.ஏ. புரோட்டியோமிக்ஸில் திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் பங்கு.ஷி, ஒய்., சியாங், ஆர்., ஹோர்வத், சி. மற்றும் வில்கின்ஸ், ஜே.ஏ. புரோட்டியோமிக்ஸில் திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் பங்கு. ஷி, ஒய்., சியாங், ஆர்., ஹார்வாத், சி. & வில்கின்ஸ், ஜேஏ 液相色谱在蛋白质组学中的作用。 ஷி, ஒய்., சியாங், ஆர்., ஹார்வாத், சி. & வில்கின்ஸ், ஜே.ஏஷி, ஒய்., சியாங், ஆர்., ஹோர்வத், சி. மற்றும் வில்கின்ஸ், ஜே.ஏ. புரோட்டியோமிக்ஸில் திரவ நிறப்பிரிகை முறையின் பங்கு.ஜே. குரோமட்டோகிராபி. ஏ 1053 (1-2), 27-36 (2004).
ஃபெகெட்டே, எஸ்., வுடே, ஜே.-எல். & கில்லார்ம், டி. சிகிச்சைக்கான பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களின் தலைகீழ்-கட்ட திரவ நிறப்பிரிகை பிரித்தலில் புதிய போக்குகள்: கோட்பாடு மற்றும் பயன்பாடுகள். & கில்லார்ம், டி. சிகிச்சைக்கான பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களின் தலைகீழ்-கட்ட திரவ நிறப்பிரிகை பிரித்தலில் புதிய போக்குகள்: கோட்பாடு மற்றும் பயன்பாடுகள். & குய்லார்ம், டி. நோவி டெண்டன்சிஸ் வ ரஸ்டெலெனி டெராபெவ்டிசெஸ்கி பெப்டிடோவ் மற்றும் பெல்கோவ்ஸ் போமோஷ்யூஸ் ஜிட்கோஸ்ட்னோ обращенной фазой: டோரியா மற்றும் приложения. & கில்லார்ம், டி. ரிவர்ஸ் ஃபேஸ் லிக்விட் குரோமட்டோகிராஃபி மூலம் சிகிச்சைக்கான பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களைப் பிரித்தெடுப்பதில் புதிய போக்குகள்: கோட்பாடு மற்றும் பயன்பாடுகள். & கில்லர்ம், டி. & கில்லார்ம், டி.மற்றும் கில்லார்மே, டி. ரிவர்ஸ் ஃபேஸ் லிக்விட் குரோமட்டோகிராஃபி மூலம் சிகிச்சைக்கான பெப்டைடுகள் மற்றும் புரதங்களைப் பிரித்தெடுப்பதில் புதிய போக்குகள்: கோட்பாடு மற்றும் பயன்பாடுகள்.ஜே. பார்ம். பயோமெடிக்கல் சயின்ஸ். அனஸ். 69, 9–27 (2012).
கிலார், எம்., ஒலிவோவா, பி., டேலி, ஏ.இ. மற்றும் கெப்லர், ஜே.சி. முதல் மற்றும் இரண்டாம் பிரிப்புப் பரிமாணங்களில் வெவ்வேறு pH மதிப்புகளுடன் கூடிய RP-RP-HPLC அமைப்பைப் பயன்படுத்தி பெப்டைடுகளின் இரு பரிமாணப் பிரிப்பு. கிலார், எம்., ஒலிவோவா, பி., டேலி, ஏ.இ. மற்றும் கெப்லர், ஜே.சி. முதல் மற்றும் இரண்டாம் பிரிப்புப் பரிமாணங்களில் வெவ்வேறு pH மதிப்புகளுடன் கூடிய RP-RP-HPLC அமைப்பைப் பயன்படுத்தி பெப்டைடுகளின் இரு பரிமாணப் பிரிப்பு.கிலார் எம்., ஒலிவோவா பி., டாலி ஏஇ மற்றும் கெப்லர் ஜேகே, முதல் மற்றும் இரண்டாம் பிரிப்புப் பரிமாணங்களில் வெவ்வேறு pH மதிப்புகளுடன் கூடிய RP-RP-HPLC அமைப்பைப் பயன்படுத்தி பெப்டைடுகளின் இரு பரிமாணப் பிரிப்பு.கிலார் எம்., ஒலிவோவா பி., டாலி ஏஇ மற்றும் கெப்லர் ஜேகே, RP-RP-HPLC அமைப்பைப் பயன்படுத்தி முதல் மற்றும் இரண்டாவது பிரிப்பு பரிமாணங்களில் வெவ்வேறு pH மதிப்புகளைப் பயன்படுத்தி பெப்டைடுகளின் இரு பரிமாண பிரிப்பு. ஜே. செப்ட் சயின்ஸ். 28 (14), 1694–1703 (2005).
ஃபெலிட்டி, எஸ். மற்றும் பலர். 2 µm-க்கும் குறைவான, முழுமையான நுண்துளைகள் மற்றும் மேலோட்டமான நுண்துளைகள் கொண்ட C18 துகள்களால் நிரப்பப்பட்ட உயர் செயல்திறன் நிறப்பிரிகை நிரல்களின் நிறை பரிமாற்றம் மற்றும் இயக்கவியல் பண்புகள் குறித்த ஆய்வு. ஜே. செப்ட் சயின்ஸ். 43 (9–10), 1737–1745 (2020).
பியோவெசானா, எஸ். மற்றும் பலர். தாவர உயிரியல் செயல்பாட்டு பெப்டைடுகளைப் பிரித்தெடுத்தல், அடையாளம் காணுதல் மற்றும் சரிபார்ப்பதில் சமீபத்திய போக்குகள் மற்றும் பகுப்பாய்வு சவால்கள். அனஸ். கிரியேச்சர் அனல். கெமிக்கல். 410(15), 3425-3444. https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
முல்லர், ஜே.பி. மற்றும் பலர். உயிரின இராச்சியத்தின் புரோட்டியோமிக் நிலப்பரப்பு. நேச்சர் 582 (7813), 592–596. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
டி லூகா, கே. மற்றும் பலர். தயாரிப்பு திரவ குரோமடோகிராபி மூலம் சிகிச்சை பெப்டைடுகளின் பிந்தைய சிகிச்சை. மூலக்கூறுகள் (பேசல், சுவிட்சர்லாந்து) 26(15), 4688 (2021).
யாங், ஒய். & ஜெங், எக்ஸ். கலப்பு முறை நிறப்பிரிகை மற்றும் உயிரிப் பாலிமர்களுக்கான அதன் பயன்பாடுகள். யாங், ஒய். & ஜெங், எக்ஸ். கலப்பு முறை நிறப்பிரிகை மற்றும் உயிரிப் பாலிமர்களுக்கான அதன் பயன்பாடுகள்.யாங், யூ. மற்றும் ஜெங், எக்ஸ். கலப்பு முறை நிறப்பிரிகை மற்றும் உயிரிப் பாலிமர்களில் அதன் பயன்பாடு. யாங், ஒய். & ஜெங், எக்ஸ். 混合模式色谱及其在生物聚合物中的应用。 யாங், ஒய். & ஜெங், எக்ஸ். கலப்பு முறை நிறப்பிரிகை மற்றும் உயிரிப் பாலிமர்களில் அதன் பயன்பாடு.யாங், யூ. மற்றும் ஜீன், எக்ஸ். கலப்பு முறை நிறப்பிரிகை மற்றும் உயிரிப் பாலிமர்களில் அதன் பயன்பாடு.ஜே. குரோமடோகிராபி. ஏ 1218(49), 8813–8825 (2011).