Nature.com സന്ദർശിച്ചതിന് നന്ദി. പരിമിതമായ CSS പിന്തുണയുള്ള ഒരു ബ്രൗസർ പതിപ്പാണ് നിങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്നത്. മികച്ച അനുഭവത്തിനായി, അപ്ഡേറ്റ് ചെയ്ത ഒരു ബ്രൗസർ ഉപയോഗിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു (അല്ലെങ്കിൽ ഇന്റർനെറ്റ് എക്സ്പ്ലോററിൽ കോംപാറ്റിബിലിറ്റി മോഡ് പ്രവർത്തനരഹിതമാക്കുക). കൂടാതെ, തുടർച്ചയായ പിന്തുണ ഉറപ്പാക്കാൻ, സ്റ്റൈലുകളും ജാവാസ്ക്രിപ്റ്റും ഇല്ലാതെ ഞങ്ങൾ സൈറ്റ് കാണിക്കുന്നു.
മൂന്ന് സ്ലൈഡുകളുടെ ഒരു കറൗസൽ ഒരേസമയം പ്രദർശിപ്പിക്കുന്നു. ഒരേ സമയം മൂന്ന് സ്ലൈഡുകളിലൂടെ നീങ്ങാൻ മുമ്പത്തേതും അടുത്തതും ബട്ടണുകൾ ഉപയോഗിക്കുക, അല്ലെങ്കിൽ ഒരേ സമയം മൂന്ന് സ്ലൈഡുകളിലൂടെ നീങ്ങാൻ അവസാനത്തിലുള്ള സ്ലൈഡർ ബട്ടണുകൾ ഉപയോഗിക്കുക.
വൈഡ്-പോർ കണികകൾ ലഭിക്കുന്നതിനായി സോൾ-ജെൽ രീതി ഉപയോഗിച്ച് ചില പരിഷ്കാരങ്ങളോടെ പോറസ് സിലിക്ക കണികകൾ തയ്യാറാക്കി. എൻ-ഫീനൈൽമലൈമൈഡ്-മീഥൈൽവിനൈൽ ഐസോസയനേറ്റ് (പിഎംഐ), റിവേഴ്സ് ചെയിൻ ട്രാൻസ്ഫർ-ഫ്രാഗ്മെന്റേഷൻ (ആർഎഎഫ്ടി) പോളിമറൈസേഷൻ വഴി സ്റ്റൈറീൻ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ഈ കണികകളെ വേർതിരിച്ചെടുത്ത് എൻ-ഫീനൈൽമലൈമൈഡ് ഇന്റർകലേറ്റഡ് പോളിമൈഡുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു. സ്റ്റൈറീൻ (പിഎംപി) സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടം. ഇടുങ്ങിയ ബോർ സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ നിരകൾ (100 × 1.8 മില്ലീമീറ്റർ ആന്തരിക വ്യാസം) ഒരു സ്ലറി പാക്കിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് പായ്ക്ക് ചെയ്തു. അഞ്ച് പെപ്റ്റൈഡുകൾ (ഗ്ലൈ-ടൈർ, ഗ്ലൈ-ല്യൂ-ടൈർ, ഗ്ലൈ-ഗ്ലൈ-ടൈർ-ആർഗ്, ടൈർ-ഐൽ-ഗ്ലൈ-സെർ-ആർഗ്, ല്യൂ അമിനോ ആസിഡ് എൻകെഫാലിൻ) എന്നിവ അടങ്ങിയ സിന്തറ്റിക് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ മിശ്രിതം വേർതിരിക്കുന്നതിന് പിഎംപി നിരയുടെ ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് പ്രകടനം വിലയിരുത്തി. ഹ്യൂമൻ സെറം ആൽബുമിൻ (എച്ച്എഎസ്) ന്റെ ട്രിപ്റ്റിക് ഹൈഡ്രോലൈസേറ്റ്. ഒപ്റ്റിമൽ എല്യൂഷൻ സാഹചര്യങ്ങളിൽ, പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ മിശ്രിതമുള്ള പ്ലേറ്റുകളുടെ സൈദ്ധാന്തിക എണ്ണം 280,000 പ്ലേറ്റുകൾ/ചതുരശ്ര മീറ്ററിലെത്തി. വികസിപ്പിച്ച കോളത്തിന്റെ വേർതിരിക്കൽ പ്രകടനത്തെ വാണിജ്യ അസെന്റിസ് എക്സ്പ്രസ് ആർപി-അമൈഡ് കോളവുമായി താരതമ്യം ചെയ്യുമ്പോൾ, വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമതയിലും റെസല്യൂഷനിലും പിഎംപി കോളത്തിന്റെ വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമത വാണിജ്യ കോളത്തേക്കാൾ മികച്ചതാണെന്ന് നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു.
സമീപ വർഷങ്ങളിൽ വിപണി വിഹിതത്തിൽ ഗണ്യമായ വർദ്ധനവുണ്ടായതോടെ ബയോഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വ്യവസായം വികസിച്ചുകൊണ്ടിരിക്കുന്ന ഒരു ആഗോള വിപണിയായി മാറിയിരിക്കുന്നു. ബയോഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വ്യവസായത്തിന്റെ സ്ഫോടനാത്മകമായ വളർച്ചയോടെ1,2,3 പെപ്റ്റൈഡ്, പ്രോട്ടീൻ വിശകലനത്തിന് വലിയ ആവശ്യകതയുണ്ട്. ടാർഗെറ്റ് പെപ്റ്റൈഡിന് പുറമേ, പെപ്റ്റൈഡ് സിന്തസിസ് സമയത്ത് വിവിധ മാലിന്യങ്ങൾ രൂപം കൊള്ളുന്നു, അതിനാൽ പെപ്റ്റൈഡിന്റെ ആവശ്യമുള്ള പരിശുദ്ധി ലഭിക്കുന്നതിന് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് ശുദ്ധീകരണം ആവശ്യമാണ്. ശരീര ദ്രാവകങ്ങൾ, ടിഷ്യൂകൾ, കോശങ്ങൾ എന്നിവയിലെ പ്രോട്ടീനുകളുടെ വിശകലനവും സ്വഭാവരൂപീകരണവും വളരെ വെല്ലുവിളി നിറഞ്ഞ ഒരു ജോലിയാണ്, കാരണം ഒരൊറ്റ സാമ്പിളിൽ കണ്ടെത്താനാകുന്ന നിരവധി സ്പീഷീസുകൾ ഉണ്ട്. പെപ്റ്റൈഡുകളും പ്രോട്ടീനുകളും ക്രമപ്പെടുത്തുന്നതിനുള്ള ഫലപ്രദമായ ഉപകരണമാണ് മാസ് സ്പെക്ട്രോമെട്രി എങ്കിലും, അത്തരം സാമ്പിളുകൾ നേരിട്ട് മാസ് സ്പെക്ട്രോമീറ്ററിലേക്ക് അവതരിപ്പിച്ചാൽ, വേർതിരിക്കൽ തൃപ്തികരമല്ല. എംഎസ് വിശകലനത്തിന് മുമ്പ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (എൽസി) നടത്തി ഈ പ്രശ്നം പരിഹരിക്കാൻ കഴിയും, ഇത് ഒരു നിശ്ചിത സമയത്ത് മാസ് സ്പെക്ട്രോമീറ്ററിലേക്ക് പ്രവേശിക്കുന്ന വിശകലനങ്ങളുടെ അളവ് കുറയ്ക്കും4,5,6. കൂടാതെ, ദ്രാവക ഘട്ടം വേർതിരിക്കൽ സമയത്ത് അനലൈറ്റുകൾക്ക് ഒരു ഇടുങ്ങിയ പ്രദേശത്ത് കേന്ദ്രീകരിക്കാൻ കഴിയും, അതുവഴി ഈ അനലൈറ്റുകളെ കേന്ദ്രീകരിക്കുകയും MS കണ്ടെത്തലിന്റെ സംവേദനക്ഷമത വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. കഴിഞ്ഞ ദശകത്തിൽ ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (LC) ഗണ്യമായി പുരോഗമിച്ചു, കൂടാതെ പ്രോട്ടിയോമിക് വിശകലനത്തിന് വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു രീതിയായി മാറിയിരിക്കുന്നു7,8,9,10.
ഒക്ടാഡെസൈൽ-മോഡിഫൈഡ് സിലിക്ക (ODS) ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടം 11,12,13 ഉപയോഗിച്ച് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ മിശ്രിതങ്ങൾ ശുദ്ധീകരിക്കുന്നതിനും വേർതിരിക്കുന്നതിനും റിവേഴ്സ്-ഫേസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (RP-LC) വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, അവയുടെ സങ്കീർണ്ണമായ ഘടനയും ആംഫോട്ടെറിക് സ്വഭാവവും കാരണം, 14,15 RP സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങൾക്ക് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും പ്രോട്ടീനുകളുടെയും തൃപ്തികരമായ വേർതിരിവ് നൽകാൻ കഴിയില്ല. അതിനാൽ, ധ്രുവ, ധ്രുവേതര ശകലങ്ങളുള്ള പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും പ്രോട്ടീനുകളുടെയും വിശകലനത്തിന് ഈ അനലൈറ്റുകൾ സംവദിക്കാനും നിലനിർത്താനും പ്രത്യേകം രൂപകൽപ്പന ചെയ്ത സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്. മൾട്ടിമോഡൽ ഇടപെടലുകൾ വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്ന മിക്സഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി, പെപ്റ്റൈഡുകൾ, പ്രോട്ടീനുകൾ, മറ്റ് സങ്കീർണ്ണ മിശ്രിതങ്ങൾ എന്നിവ വേർതിരിക്കുന്നതിന് RP-LC-ക്ക് പകരമാകാം. നിരവധി മിക്സഡ്-ടൈപ്പ് സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങൾ തയ്യാറാക്കി, പെപ്റ്റൈഡുകളും പ്രോട്ടീനുകളും വേർതിരിക്കുന്നതിന് ഈ സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങൾ നിറച്ച നിരകൾ ഉപയോഗിച്ചു17,18,19,20,21. പോളാർ, നോൺ-പോളാർ ഗ്രൂപ്പുകളുടെ സാന്നിധ്യം കാരണം, മിക്സഡ് മോഡ് സ്റ്റേഷണറി ഫേസുകൾ (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, പോളാർ ഇന്റർകലേഷൻ/RPLC) പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും പ്രോട്ടീനുകളുടെയും വേർതിരിക്കലിന് അനുയോജ്യമാണ്22,23,24,25,26,27,28. , സഹസംയോജിതമായി ബന്ധിപ്പിച്ച പോളാർ ഗ്രൂപ്പുകളുള്ള പോളാർ ഇന്റർകലേറ്റഡ് സ്റ്റേഷണറി ഫേസുകൾ പോളാർ, നോൺ-പോളാർ അനലൈറ്റുകൾക്ക് നല്ല വേർതിരിക്കൽ കഴിവുകളും അതുല്യമായ സെലക്റ്റിവിറ്റിയും കാണിക്കുന്നു, കാരണം വേർതിരിവ് അനലൈറ്റും സ്റ്റേഷണറി ഫേസും തമ്മിലുള്ള പ്രതിപ്രവർത്തനത്തെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു. മൾട്ടിമോഡൽ ഇന്ററാക്ഷനുകൾ 29,30,31,32. അടുത്തിടെ, ഷാങ് തുടങ്ങിയവർ പോളിഅമൈനുകളുടെ ബെഹെനൈൽ-ടെർമിനേറ്റഡ് സ്റ്റേഷണറി ഫേസുകൾ നേടി, ഹൈഡ്രോകാർബണുകൾ, ആന്റീഡിപ്രസന്റുകൾ, ഫ്ലേവനോയ്ഡുകൾ, ന്യൂക്ലിയോസൈഡുകൾ, ഈസ്ട്രജൻ, മറ്റ് ചില അനലൈറ്റുകൾ എന്നിവ വിജയകരമായി വേർതിരിച്ചു. പോളാർ എംബഡഡ് സ്റ്റേഷണറി മെറ്റീരിയലിൽ പോളാർ, നോൺ-പോളാർ ഗ്രൂപ്പുകൾ ഉണ്ട്, അതിനാൽ പെപ്റ്റൈഡുകളെയും പ്രോട്ടീനുകളെയും ഹൈഡ്രോഫോബിക്, ഹൈഡ്രോഫിലിക് ഭാഗങ്ങളായി വേർതിരിക്കാൻ ഇത് ഉപയോഗിക്കാം. പോളാർ ഇൻലൈൻ കോളങ്ങൾ (ഉദാഹരണത്തിന്, അമൈഡ് ഇൻലൈനുള്ള C18 കോളങ്ങൾ) അസെന്റിസ് എക്സ്പ്രസ് ആർപി-അമൈഡ് കോളങ്ങൾ എന്ന വ്യാപാര നാമത്തിൽ ലഭ്യമാണ്, എന്നാൽ ഈ കോളങ്ങൾ അമിൻ 33 ന്റെ വിശകലനത്തിനായി മാത്രമേ ഉപയോഗിച്ചിട്ടുള്ളൂ.
നിലവിലെ പഠനത്തിൽ, പെപ്റ്റൈഡ് വേർതിരിക്കലിനും ട്രിപ്റ്റിക് എച്ച്എസ്എ ക്ലീവേജിനും വേണ്ടി ഒരു പോളാർ എംബെഡിംഗ് സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടം (എൻ-ഫീനൈൽമലൈമൈഡ്, എംബെഡിംഗ് പോളിസ്റ്റൈറൈൻ) തയ്യാറാക്കി വിലയിരുത്തി. സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടം തയ്യാറാക്കാൻ ഇനിപ്പറയുന്ന തന്ത്രം ഉപയോഗിച്ചു. ഞങ്ങളുടെ മുൻ പ്രസിദ്ധീകരണങ്ങളിൽ വിവരിച്ച നടപടിക്രമങ്ങൾക്കനുസൃതമായാണ് പോറസ് സിലിക്ക കണികകൾ തയ്യാറാക്കിയത്, തയ്യാറെടുപ്പ് പദ്ധതികൾ 31, 34, 35, 36, 37, 38, 39 എന്നിവയിൽ ചില മാറ്റങ്ങൾ വരുത്തി. വലിയ സുഷിര വലുപ്പങ്ങളുള്ള സിലിക്ക കണികകൾ ലഭിക്കുന്നതിന് യൂറിയ, പോളിയെത്തിലീൻ ഗ്ലൈക്കോൾ (PEG), TMOS, ജല-അസറ്റിക് ആസിഡ് എന്നിവയുടെ അനുപാതങ്ങൾ ക്രമീകരിച്ചു. രണ്ടാമതായി, ഒരു പുതിയ ഫീനൈൽമലൈമൈഡ്-മീഥൈൽവിനൈൽ ഐസോസയനേറ്റ് ലിഗാൻഡ് സമന്വയിപ്പിക്കുകയും അതിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ സിലിക്ക കണികകൾ പോളാർ എംബെഡഡ് സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങൾ തയ്യാറാക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുകയും ചെയ്തു. ലഭിച്ച സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടം ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത പാക്കിംഗ് സ്കീം അനുസരിച്ച് ഒരു സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ കോളത്തിലേക്ക് (ആന്തരിക വ്യാസം 100 × 1.8 മില്ലീമീറ്റർ) പായ്ക്ക് ചെയ്തു. കോളത്തിനുള്ളിൽ ഒരു ഏകീകൃത പാളി ഉറപ്പാക്കാൻ മെക്കാനിക്കൽ വൈബ്രേഷൻ വഴി കോളത്തിന്റെ പാക്കിംഗ് സഹായിക്കുന്നു. പാക്ക് ചെയ്ത കോളം അഞ്ച് പെപ്റ്റൈഡുകൾ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine-enkephalin peptide) അടങ്ങിയ പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ മിശ്രിതം വേർതിരിക്കുന്നതിനായി വിലയിരുത്തി. മനുഷ്യ സെറം ആൽബുമിൻ (HSA) യുടെ ട്രിപ്റ്റിക് ഹൈഡ്രോലൈസേറ്റുകൾ. പെപ്റ്റൈഡ് മിശ്രിതവും HSA ട്രിപ്റ്റിക് ഡൈജസ്റ്റും നല്ല റെസല്യൂഷനും കാര്യക്ഷമതയോടെ വേർതിരിക്കുന്നതായി നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു. PMP കോളത്തിന്റെ വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമതയെ Ascentis Express RP-Amide കോളവുമായി താരതമ്യം ചെയ്തു. PMP കോളത്തിൽ പെപ്റ്റൈഡുകൾക്കും പ്രോട്ടീനുകൾക്കും നല്ല റെസല്യൂഷനും ഉയർന്ന വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമതയും ഉണ്ടെന്ന് നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു, കൂടാതെ PMP കോളത്തിന്റെ വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമത Ascentis Express RP-Amide കോളത്തേക്കാൾ കൂടുതലാണ്.
PEG (പോളിയെത്തിലീൻ ഗ്ലൈക്കോൾ), യൂറിയ, അസറ്റിക് ആസിഡ്, ട്രൈമെത്തോക്സിയോർത്തോസിലിക്കേറ്റ് (TMOS), ട്രൈമെഥൈൽക്ലോറോസിലെയ്ൻ (TMCS), ട്രിപ്സിൻ, ഹ്യൂമൻ സെറം ആൽബുമിൻ (HSA), അമോണിയം ക്ലോറൈഡ്, യൂറിയ, ഹെക്സമെഥൈൽമെത്തക്രൈലോയ്ൽഡിസിലാസെയ്ൻ (HMDS), മെത്തക്രൈലോയ്ൽ ക്ലോറൈഡ് (MC), സ്റ്റൈറീൻ, 4-ഹൈഡ്രോക്സി- TEMPO, ബെൻസോയിൽ പെറോക്സൈഡ് (BPO), HPLC-യ്ക്കായുള്ള അസെറ്റോണിട്രൈൽ (ACN), മെഥനോൾ, 2-പ്രൊപ്പനോൾ, അസെറ്റോൺ. സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച് കമ്പനി (സെന്റ് ലൂയിസ്, മിസോറി, യുഎസ്എ).
യൂറിയ (8 ഗ്രാം), പോളിയെത്തിലീൻ ഗ്ലൈക്കോൾ (8 ഗ്രാം), 0.01 നൈട്രജൻ അസിറ്റിക് ആസിഡ് എന്നിവയുടെ മിശ്രിതം 8 മില്ലി 10 മിനിറ്റ് ഇളക്കി, 24 മില്ലി ടിഎംഒഎസ് ഐസ്-കൂളിംഗിൽ ചേർത്തു. പ്രതിപ്രവർത്തന മിശ്രിതം 40°C-ൽ 6 മണിക്കൂർ ചൂടാക്കി, തുടർന്ന് 120°C-ൽ 8 മണിക്കൂർ സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ ഓട്ടോക്ലേവിൽ ചൂടാക്കി. വെള്ളം ഡീകന്റ് ചെയ്ത് അവശിഷ്ടം 70°C-ൽ 12 മണിക്കൂർ ഉണക്കി. ഉണങ്ങിയ മൃദുവായ ബ്ലോക്കുകൾ സുഗമമായി പൊടിച്ച് 550°C-ൽ ഒരു അടുപ്പിൽ 12 മണിക്കൂർ കാൽസിൻ ചെയ്തു. കണിക വലുപ്പങ്ങൾ, സുഷിര വലുപ്പം, ഉപരിതല വിസ്തീർണ്ണം എന്നിവയുടെ പുനരുൽപാദനക്ഷമത പരിശോധിക്കുന്നതിനായി മൂന്ന് ബാച്ചുകൾ തയ്യാറാക്കി സ്വഭാവസവിശേഷതകൾ കാണിച്ചു.
പോളിസ്റ്റൈറൈൻ ചെയിനുകൾക്കുള്ള പോളാർ ഗ്രൂപ്പും സ്റ്റേഷണറി ഫേസും. തയ്യാറാക്കൽ നടപടിക്രമം താഴെ വിവരിച്ചിരിക്കുന്നു.
എൻ-ഫീനൈൽമലൈമൈഡ് (200 മില്ലിഗ്രാം), മീഥൈൽ വിനൈൽ ഐസോസയനേറ്റ് (100 മില്ലിഗ്രാം) എന്നിവ അൺഹൈഡ്രസ് ടോലുയിനിൽ ലയിപ്പിച്ചു, തുടർന്ന് 0.1 മില്ലി 2,2′-അസോയിസോബ്യൂട്ടിറോണിട്രൈൽ (AIBN) റിയാക്ഷൻ ഫ്ലാസ്കിൽ ചേർത്ത് ഫീനൈൽമലൈമൈഡിന്റെയും മീഥൈൽ വിനൈൽ ഐസോസയനേറ്റിന്റെയും (PMCP) ഒരു കോപോളിമർ ലഭിച്ചു. മിശ്രിതം 60°C-ൽ 3 മണിക്കൂർ ചൂടാക്കി, ഫിൽറ്റർ ചെയ്ത് 40°C-ൽ ഒരു അടുപ്പിൽ 3 മണിക്കൂർ ഉണക്കി.
ഉണങ്ങിയ സിലിക്ക കണികകൾ (2 ഗ്രാം) ഉണങ്ങിയ ടോലുയിനിൽ (100 മില്ലി) വിതറി, 500 മില്ലി വൃത്താകൃതിയിലുള്ള അടിഭാഗത്തെ ഫ്ലാസ്കിൽ 10 മിനിറ്റ് ഇളക്കി സോണിക്കേറ്റ് ചെയ്തു. പിഎംസിപി (10 മില്ലിഗ്രാം) ടോലുയിനിൽ ലയിപ്പിച്ച് ഒരു അഡീഷൻ ഫണൽ വഴി റിയാക്ഷൻ ഫ്ലാസ്കിലേക്ക് തുള്ളിയായി ചേർത്തു. മിശ്രിതം 100°C-ൽ 8 മണിക്കൂർ റിഫ്ലക്സ് ചെയ്തു, ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത്, അസെറ്റോൺ ഉപയോഗിച്ച് കഴുകി, 60°C-ൽ 3 മണിക്കൂർ ഉണക്കി. തുടർന്ന്, പിഎംസിപി (100 ഗ്രാം) യുമായി ബന്ധപ്പെട്ട സിലിക്ക കണികകൾ ടോലുയിനിൽ (200 മില്ലി) ലയിപ്പിച്ചു, 100 μl ഡൈബ്യൂട്ടിൽറ്റിൻ ഡിലോറേറ്റിന്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ 4-ഹൈഡ്രോക്സി-ടെംപോ (2 മില്ലി) അതിൽ ചേർത്തു. മിശ്രിതം 50°C-ൽ 8 മണിക്കൂർ ഇളക്കി, ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത് 50°C-ൽ 3 മണിക്കൂർ ഉണക്കി.
TEMPO-PMCP (1.5 ഗ്രാം) യിൽ ഘടിപ്പിച്ചിരിക്കുന്ന സ്റ്റൈറീൻ (1 മില്ലി), ബെൻസോയിൽ പെറോക്സൈഡ് BPO (0.5 മില്ലി), സിലിക്ക കണികകൾ എന്നിവ ടോലുയിനിൽ വിതറി നൈട്രജൻ ഉപയോഗിച്ച് ശുദ്ധീകരിച്ചു. സ്റ്റൈറീന്റെ പോളിമറൈസേഷൻ 100°C ൽ 12 മണിക്കൂർ നടത്തി. തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന ഉൽപ്പന്നം മെഥനോൾ ഉപയോഗിച്ച് കഴുകി രാത്രി മുഴുവൻ 60°C ൽ ഉണക്കി. പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന്റെ പൊതുവായ പദ്ധതി ചിത്രം ഒന്നിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു.
10–3 ടോറിൽ താഴെയുള്ള അവശിഷ്ട മർദ്ദം ലഭിക്കുന്നതുവരെ സാമ്പിളുകൾ 1 മണിക്കൂർ 393 K താപനിലയിൽ ഡീഗ്യാസ് ചെയ്തു. ആപേക്ഷിക മർദ്ദം P/P0 = 0.99 ൽ ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്ന N2 ന്റെ അളവ് ഉപയോഗിച്ച് മൊത്തം സുഷിരത്തിന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കാൻ ഉപയോഗിച്ചു. സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പ് (ഹിറ്റാച്ചി ഹൈ ടെക്നോളജീസ്, ടോക്കിയോ, ജപ്പാൻ) ഉപയോഗിച്ച് ശുദ്ധവും ലിഗാൻഡ്-ബൗണ്ട് സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ രൂപഘടന പരിശോധിച്ചു. കാർബൺ ടേപ്പ് ഉപയോഗിച്ച് അലുമിനിയം ദണ്ഡുകളിൽ ഉണങ്ങിയ സാമ്പിളുകൾ (ശുദ്ധമായ സിലിക്കയും ലിഗാൻഡ് ബന്ധിത സിലിക്ക കണികകളും) സ്ഥാപിച്ചു. Q150T സ്പട്ടറിംഗ് ഉപകരണം ഉപയോഗിച്ച് സാമ്പിളിൽ സ്വർണ്ണം നിക്ഷേപിച്ചു, കൂടാതെ 5 nm കട്ടിയുള്ള Au പാളി സാമ്പിളിൽ നിക്ഷേപിച്ചു. ഇത് കുറഞ്ഞ വോൾട്ടേജ് പ്രക്രിയയുടെ കാര്യക്ഷമത മെച്ചപ്പെടുത്തുകയും മികച്ച കോൾഡ് സ്പ്രേ നൽകുകയും ചെയ്യുന്നു. തെർമോ ഇലക്ട്രോൺ (വാൾത്താമ, MA, USA) ഫ്ലാഷ് EA1112 എലമെന്റൽ കോമ്പോസിഷൻ അനലൈസർ ഉപയോഗിച്ചാണ് എലമെന്റൽ വിശകലനം നടത്തിയത്. കണികാ വലിപ്പ വിതരണം ലഭിക്കാൻ ഒരു മാൽവെർൺ കണികാ വലിപ്പ വിശകലന വിദഗ്ദ്ധൻ (വോർസെസ്റ്റർഷയർ, യുകെ) മാസ്റ്റേഴ്‌സൈസർ 2000 ഉപയോഗിച്ചു. പൂശാത്ത സിലിക്ക കണികകളും ലിഗാൻഡ്-ബൗണ്ട് സിലിക്ക കണികകളും (5 മില്ലിഗ്രാം വീതം) 5 മില്ലി ഐസോപ്രോപനോളിൽ വിതറി, 10 മിനിറ്റ് സോണിക്കേറ്റ് ചെയ്ത്, 5 മിനിറ്റ് ഇളക്കി, മാസ്റ്ററൈസർ ഒപ്റ്റിക്കൽ ബെഞ്ചിൽ വച്ചു. 30 മുതൽ 800 °C വരെയുള്ള താപനില പരിധിയിൽ മിനിറ്റിൽ 5 °C എന്ന നിരക്കിൽ തെർമോഗ്രാവിമെട്രിക് വിശകലനം നടത്തുന്നു.
റഫറൻസ് 31-ൽ പറഞ്ഞിരിക്കുന്ന അതേ നടപടിക്രമം പിന്തുടർന്ന്, ഗ്ലാസ് ഫൈബർ ലൈനിംഗ് ചെയ്ത ഇടുങ്ങിയ ബോർ സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ നിരകൾ (ID 100 × 1.8 mm) സ്ലറി ഫില്ലിംഗ് രീതി ഉപയോഗിച്ച് പായ്ക്ക് ചെയ്തു. സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ കോളവും (ഗ്ലാസ് ലൈനിംഗ് ചെയ്ത, ID 100 × 1 .8 mm) 1 µm ഫ്രിറ്റ് അടങ്ങിയ ഒരു ഔട്ട്‌ലെറ്റും ഒരു സ്ലറി പാക്കേജിംഗ് മെഷീനുമായി (Alltech Deerfield, IL, USA) ബന്ധിപ്പിച്ചിരുന്നു. 1.2 മില്ലി മെഥനോളിൽ 150 mg സ്റ്റേഷണറി ഫേസ് സസ്പെൻഡ് ചെയ്ത് ഒരു റിസർവോയർ കോളത്തിലേക്ക് ഫീഡ് ചെയ്തുകൊണ്ട് സ്റ്റേഷണറി ഫേസിന്റെ ഒരു സസ്പെൻഷൻ തയ്യാറാക്കുക. സ്ലറി ലായകമായും നിയന്ത്രണ ലായകമായും മെഥനോൾ ഉപയോഗിച്ചു. 10 മിനിറ്റിന് 100 MP, 15 മിനിറ്റിന് 80 MP, 30 മിനിറ്റിന് 60 MP എന്നിങ്ങനെയുള്ള മർദ്ദ ക്രമം പ്രയോഗിച്ച് കോളം പായ്ക്ക് ചെയ്യുക. ഏകീകൃത കോളം പാക്കിംഗ് ഉറപ്പാക്കാൻ മെക്കാനിക്കൽ വൈബ്രേഷനായി പാക്കിംഗ് പ്രക്രിയയിൽ രണ്ട് ഗ്യാസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി കോളം വൈബ്രേറ്ററുകൾ (Alltech, Deerfield, IL, USA) ഉപയോഗിച്ചു. സ്ട്രിംഗിന്റെ കേടുപാടുകൾ തടയാൻ സ്ലറി പാക്കർ അടച്ച് മർദ്ദം പതുക്കെ വിടുക. സ്ലറി നോസിലിൽ നിന്ന് കോളം വിച്ഛേദിക്കുകയും ഇൻലെറ്റിൽ മറ്റൊരു ഫിറ്റിംഗ് ഘടിപ്പിക്കുകയും അതിന്റെ പ്രവർത്തനം പരിശോധിക്കുന്നതിനായി LC സിസ്റ്റവുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു.
ഒരു LC പമ്പ് (10AD ഷിമാഡ്‌സു, ജപ്പാൻ), 50 nL ഇഞ്ചക്ഷൻ ലൂപ്പുള്ള ഒരു സാമ്പിൾ (വാൽകോ (USA) C14 W.05), ഒരു മെംബ്രൻ ഡീഗാസർ (Shimadzu DGU-14A), ഒരു UV-VIS കാപ്പിലറി വിൻഡോ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ഒരു കസ്റ്റം MLC നിർമ്മിച്ചു. ഡിറ്റക്ടർ ഉപകരണം (UV-2075) ഇനാമൽ ചെയ്ത മൈക്രോകോളവും. അധിക കോളം വികാസത്തിന്റെ പ്രഭാവം കുറയ്ക്കുന്നതിന് വളരെ ഇടുങ്ങിയതും ചെറുതുമായ കണക്റ്റിംഗ് ട്യൂബുകൾ ഉപയോഗിക്കുക. കോളം പൂരിപ്പിച്ച ശേഷം, 1/16″ കുറയ്ക്കുന്ന ജംഗ്ഷന്റെ ഔട്ട്‌ലെറ്റിൽ ഒരു കാപ്പിലറി (50 µm id 365) ഇൻസ്റ്റാൾ ചെയ്യുകയും കുറയ്ക്കുന്ന ജംഗ്ഷന്റെ ഒരു കാപ്പിലറി (50 µm) ഇൻസ്റ്റാൾ ചെയ്യുകയും ചെയ്യുക. മൾട്ടിക്രോ 2000 സോഫ്റ്റ്‌വെയർ ഉപയോഗിച്ചാണ് ഡാറ്റ ശേഖരണവും ക്രോമാറ്റോഗ്രാം പ്രോസസ്സിംഗും നടത്തുന്നത്. 254 nm-ൽ, വിഷയ വിശകലനങ്ങളുടെ UV ആഗിരണം 0-ൽ നിരീക്ഷിച്ചു. OriginPro8 (നോർത്താംപ്ടൺ, MA) ഉപയോഗിച്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് ഡാറ്റ വിശകലനം ചെയ്തു.
ഹ്യൂമൻ സെറം ആൽബുമിൻ, ലയോഫിലൈസ്ഡ് പൗഡർ, ≥ 96% (അഗരോസ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്) 3 മില്ലിഗ്രാം ട്രിപ്സിൻ (1.5 മില്ലിഗ്രാം), 4.0 മില്ലി യൂറിയ (1 മില്ലി), 0.2 മില്ലി അമോണിയം ബൈകാർബണേറ്റ് (1 മില്ലി) എന്നിവയുമായി കലർത്തി. ലായനി 10 മിനിറ്റ് ഇളക്കി 37°C യിൽ 6 മണിക്കൂർ വാട്ടർ ബാത്തിൽ വച്ച ശേഷം 0.1% TFA 1 മില്ലി ഉപയോഗിച്ച് ശമിപ്പിക്കുക. ലായനി ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത് 4°C യിൽ താഴെ സൂക്ഷിക്കുക.
ഒരു PMP കോളത്തിൽ പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും ട്രിപ്റ്റിക് ഡൈജസ്റ്റ് HSA യുടെയും മിശ്രിതം വേർതിരിക്കുന്നത് പ്രത്യേകം വിലയിരുത്തി. ഒരു PMP കോളം കൊണ്ട് വേർതിരിച്ച പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും HSA യുടെയും മിശ്രിതത്തിന്റെ ട്രിപ്റ്റിക് ജലവിശ്ലേഷണം പരിശോധിക്കുകയും ഒരു Ascentis Express RP-Amide കോളവുമായി ഫലങ്ങൾ താരതമ്യം ചെയ്യുകയും ചെയ്യുക. സൈദ്ധാന്തിക പ്ലേറ്റുകളുടെ എണ്ണം ഇനിപ്പറയുന്ന സമവാക്യം ഉപയോഗിച്ച് കണക്കാക്കുന്നു:
ശുദ്ധമായ സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും ലിഗാൻഡ് ബന്ധിത സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും SEM ചിത്രങ്ങൾ ചിത്രം 2-ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. ശുദ്ധമായ സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ (A, B) SEM ചിത്രങ്ങൾ ഒരു ഗോളാകൃതി കാണിക്കുന്നു, അതിൽ കണികകൾ നമ്മുടെ മുൻ പഠനങ്ങളെ അപേക്ഷിച്ച് നീളമേറിയതോ ക്രമരഹിതമായ സമമിതിയോ ഉള്ളവയാണ്. ലിഗാൻഡ് (C, D) ബന്ധിതമായ സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ ഉപരിതലം ശുദ്ധമായ സിലിക്ക കണങ്ങളേക്കാൾ മിനുസമാർന്നതാണ്, ഇത് സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ ഉപരിതലത്തെ മൂടുന്ന പോളിസ്റ്റൈറൈൻ ശൃംഖലകൾ മൂലമാകാം.
ശുദ്ധമായ സിലിക്ക കണികകളുടെ (A, B) ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോഗ്രാഫുകൾ സ്കാൻ ചെയ്യുന്നു, ലിഗാൻഡ് ബന്ധിത സിലിക്ക കണികകളുടെ (C, D).
ശുദ്ധമായ സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും ലിഗാൻഡ്-ബൗണ്ടഡ് സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും കണികാ വലിപ്പ വിതരണം ചിത്രം 2. 3(A)-ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. രാസമാറ്റത്തിന് ശേഷം സിലിക്ക കണിക വലുപ്പം വർദ്ധിച്ചതായി വോള്യൂമെട്രിക് കണികാ വലിപ്പ വിതരണ വക്രങ്ങൾ കാണിച്ചു (ചിത്രം 3A). നിലവിലെ പഠനത്തിൽ നിന്നും മുൻ പഠനത്തിൽ നിന്നുമുള്ള സിലിക്ക കണിക വലുപ്പ വിതരണ ഡാറ്റ പട്ടിക 1(A)-ൽ താരതമ്യം ചെയ്തിരിക്കുന്നു. PMP-യുടെ വോള്യൂമെട്രിക് കണികാ വലിപ്പം d(0.5) 3.36 µm ആയിരുന്നു, ഞങ്ങളുടെ മുൻ പഠനത്തിലെ (പോളിസ്റ്റൈറൈൻ ബോണ്ടഡ് സിലിക്ക കണികകൾ) 34 എന്ന ad(0.5) മൂല്യവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ. പ്രതിപ്രവർത്തന മിശ്രിതത്തിലെ PEG, യൂറിയ, TMOS, അസറ്റിക് ആസിഡ് എന്നിവയുടെ അനുപാതത്തിലെ മാറ്റം കാരണം, ഈ ബാച്ചിന്റെ കണികാ വലിപ്പ വിതരണം ഞങ്ങളുടെ മുൻ പഠനവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഇടുങ്ങിയതായിരുന്നു. PMP ഘട്ടത്തിന്റെ കണികാ വലിപ്പം നമ്മൾ മുമ്പ് പഠിച്ച പോളിസ്റ്റൈറൈൻ ബന്ധിത സിലിക്ക കണിക ഘട്ടത്തേക്കാൾ അല്പം വലുതാണ്. ഇതിനർത്ഥം സ്റ്റൈറൈൻ ഉപയോഗിച്ചുള്ള സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ ഉപരിതല പ്രവർത്തനക്ഷമത സിലിക്ക പ്രതലത്തിൽ ഒരു പോളിസ്റ്റൈറൈൻ പാളി (0.97 µm) മാത്രമേ നിക്ഷേപിച്ചിട്ടുള്ളൂ എന്നാണ്, അതേസമയം PMP ഘട്ടത്തിൽ പാളിയുടെ കനം 1.38 µm ആയിരുന്നു.
ശുദ്ധമായ സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും ലിഗാൻഡ് ബന്ധിത സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും കണികാ വലിപ്പ വിതരണം (A) ഉം സുഷിര വലിപ്പ വിതരണം (B).
ഈ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ചിരിക്കുന്ന സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ സുഷിര വലുപ്പം, സുഷിര അളവ്, ഉപരിതല വിസ്തീർണ്ണം എന്നിവ പട്ടിക 1 (B) ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. ശുദ്ധമായ സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും ലിഗാൻഡ്-ബൗണ്ട് സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും PSD പ്രൊഫൈലുകൾ ചിത്രം 3 (B) ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. ഫലങ്ങൾ ഞങ്ങളുടെ മുൻ പഠനവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്താവുന്നതായിരുന്നു34. ശുദ്ധമായതും ലിഗാൻഡ്-ബൗണ്ട് സിലിക്ക കണങ്ങളുടെയും സുഷിര വലുപ്പങ്ങൾ യഥാക്രമം 310 Å ഉം 241 Å ഉം ആയിരുന്നു, ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നത് രാസ പരിഷ്കരണത്തിന് ശേഷം, പട്ടിക 1 (B) ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, സുഷിര വലുപ്പം 69 Å കുറഞ്ഞുവെന്നും ഷിഫ്റ്റ് കർവ് ചിത്രത്തിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നുവെന്നും ആണ്. നിലവിലെ പഠനത്തിലെ സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ നിർദ്ദിഷ്ട ഉപരിതല വിസ്തീർണ്ണം 116 m2/g ആണ്, ഇത് ഞങ്ങളുടെ മുൻ പഠനവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്താവുന്നതാണ് (124 m2/g). പട്ടിക 1 (B) ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, രാസ പരിഷ്കരണത്തിന് ശേഷമുള്ള സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ ഉപരിതല വിസ്തീർണ്ണം (m2/g) 116 m2/g ൽ നിന്ന് 105 m2/g ആയി കുറഞ്ഞു.
സ്റ്റേഷണറി ഫേസിന്റെ മൂലക വിശകലനത്തിന്റെ ഫലങ്ങൾ പട്ടികയിൽ അവതരിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു. 2. നിലവിലെ സ്റ്റേഷണറി ഫേസിലെ കാർബൺ ഉള്ളടക്കം 6.35% ആണ്, ഇത് ഞങ്ങളുടെ മുൻ പഠനത്തേക്കാൾ കുറവാണ് (പോളിസ്റ്റൈറൈനുമായി ബന്ധപ്പെട്ട സിലിക്ക കണികകൾ, യഥാക്രമം 7.93%35 ഉം 10.21 ഉം) 42. നിലവിലെ സ്റ്റേഷണറി ഫേസിലെ കാർബൺ ഉള്ളടക്കം താഴെയാണ്, കാരണം SP തയ്യാറാക്കുന്നതിൽ സ്റ്റൈറീനു പുറമേ ഫീനൈൽമലൈമൈഡ് മീഥൈൽ വിനൈൽ ഐസോസയനേറ്റ് (PCMP), 4-ഹൈഡ്രോക്സി-ടെംപോ തുടങ്ങിയ ചില ധ്രുവ ലിഗാൻഡുകൾ ഉപയോഗിച്ചിട്ടുണ്ട്. നിലവിലെ സ്റ്റേഷണറി ഫേസിലെ നൈട്രജന്റെ ഭാര ശതമാനം മുൻ പഠനങ്ങളിലെ 0.1735 ഉം 0.85% ഉം ആയിരുന്നു, 42. ഇതിനർത്ഥം ഫിനൈൽമലൈമൈഡ് കാരണം നിലവിലെ സ്റ്റേഷണറി ഫേസിൽ നൈട്രജന്റെ ഉയർന്ന ഭാര ശതമാനം ഉണ്ടെന്നാണ്. അതുപോലെ, ഉൽപ്പന്നങ്ങളിൽ (4) ഉം (5) ഉം യഥാക്രമം 2.7% ഉം 2.9% ഉം കാർബൺ ഉള്ളടക്കമുണ്ട്, അതേസമയം അന്തിമ ഉൽപ്പന്നത്തിൽ (6) 6.35% കാർബൺ ഉള്ളടക്കമുണ്ട്, പട്ടിക 2 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ. ഭാരം കുറയ്ക്കുന്നതിനുള്ള പരിശോധനയ്ക്കായി PMP യുടെ സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിൽ തെർമോഗ്രാവിമെട്രിക് വിശകലനം (TGA) ഉപയോഗിച്ചു, കൂടാതെ TGA വക്രം ചിത്രം 4 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. TGA വക്രം 8.6% ഭാരക്കുറവ് കാണിക്കുന്നു, ഇത് കാർബൺ ഉള്ളടക്കവുമായി (6.35%) നല്ല യോജിപ്പിലാണ്, കാരണം ലിഗാൻഡുകളിൽ C മാത്രമല്ല, N, O, H എന്നിവയും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.
സിലിക്ക കണങ്ങളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ മാറ്റം വരുത്താൻ ലിഗാൻഡ് ഫീനൈൽമലൈമൈഡ്-മീഥൈൽവിനൈൽ ഐസോസയനേറ്റ് തിരഞ്ഞെടുത്തത് അതിന്റെ ധ്രുവീയ ഫിനൈൽമലൈമൈഡ്, വിനൈൽഐസോസയനേറ്റ് ഗ്രൂപ്പുകൾ കാരണം ആണ്. വിനൈൽ ഐസോസയനേറ്റ് ഗ്രൂപ്പുകൾക്ക് സ്റ്റൈറീനുമായി കൂടുതൽ പ്രതിപ്രവർത്തിക്കാൻ കഴിയും, ലിവിംഗ് റാഡിക്കൽ പോളിമറൈസേഷൻ വഴി. രണ്ടാമത്തെ കാരണം, അനലൈറ്റുമായി മിതമായ ഇടപെടലുകളും അനലൈറ്റിനും സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിനും ഇടയിൽ ശക്തമായ ഇലക്ട്രോസ്റ്റാറ്റിക് ഇടപെടലുകളുമില്ലാത്ത ഒരു ഗ്രൂപ്പ് ചേർക്കുക എന്നതാണ്, കാരണം ഫിനൈൽമലൈമൈഡ് മൊയറ്റിക്ക് സാധാരണ pH-ൽ വെർച്വൽ ചാർജ് ഇല്ല. സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിന്റെ പോളാരിറ്റി സ്റ്റൈറീന്റെ ഒപ്റ്റിമൽ അളവും ഫ്രീ റാഡിക്കൽ പോളിമറൈസേഷന്റെ പ്രതികരണ സമയവും ഉപയോഗിച്ച് നിയന്ത്രിക്കാൻ കഴിയും. പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന്റെ അവസാന ഘട്ടം (ഫ്രീ റാഡിക്കൽ പോളിമറൈസേഷൻ) നിർണായകമാണ്, കാരണം ഇത് സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിന്റെ ധ്രുവത മാറ്റുന്നു. ഈ സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങളിലെ കാർബൺ ഉള്ളടക്കം പരിശോധിക്കുന്നതിനായി മൂലക വിശകലനം നടത്തി. സ്റ്റൈറീന്റെ അളവും പ്രതിപ്രവർത്തന സമയവും വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നത് സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിന്റെ കാർബൺ ഉള്ളടക്കം വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും തിരിച്ചും ചെയ്യുന്നതായി നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്. വ്യത്യസ്ത സാന്ദ്രതകളുള്ള സ്റ്റൈറീനുമായി തയ്യാറാക്കിയ SP-കൾക്ക് വ്യത്യസ്ത കാർബൺ ലോഡുകൾ ഉണ്ട്. അതുപോലെ, ഈ സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങൾ സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ തൂണുകളിൽ സ്ഥാപിക്കുകയും അവയുടെ ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് സവിശേഷതകൾ (സെലക്റ്റിവിറ്റി, റെസല്യൂഷൻ, N മൂല്യം മുതലായവ) പരിശോധിക്കുകയും ചെയ്തു. ഈ പരീക്ഷണങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, നിയന്ത്രിത ധ്രുവീകരണവും അനലൈറ്റിന്റെ നല്ല നിലനിർത്തലും നൽകുന്നതിന് PMP സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടം തയ്യാറാക്കുന്നതിനായി ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത ഒരു ഘടന തിരഞ്ഞെടുത്തു.
മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിന്റെ ശേഷി ഉപയോഗിച്ച് അഞ്ച് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ മിശ്രിതങ്ങളുടെ (ഗ്ലൈ-ടൈർ, ഗ്ലൈ-ല്യൂ-ടൈർ, ഗ്ലൈ-ഗ്ലൈ-ടൈർ-ആർഗ്, ടൈർ-ഐൽ-ഗ്ലൈ-സെർ-ആർഗ്, ല്യൂസിൻ-എൻകെഫാലിൻ) വിശകലനത്തിനായി പിഎംപി കോളവും വിലയിരുത്തി. 80 µl/മിനിറ്റ് എന്ന ഫ്ലോ റേറ്റിൽ 60/40 (v/v) ACN/ജലം (0.1% TFA). ഒപ്റ്റിമൽ എല്യൂഷൻ സാഹചര്യങ്ങളിൽ (200,000 പ്ലേറ്റുകൾ/മീറ്റർ), ഒരു കോളത്തിന് സൈദ്ധാന്തിക പ്ലേറ്റുകളുടെ (N) എണ്ണം (100 × 1.8 മിമി) 20,000 ± 100 ആണ്. മൂന്ന് പിഎംപി കോളങ്ങൾക്കുള്ള N മൂല്യങ്ങൾ പട്ടിക 3-ലും ക്രോമാറ്റോഗ്രാമുകൾ ചിത്രം 5A-യിലും കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. ഒരു PMP കോളത്തിൽ ഉയർന്ന ഫ്ലോ റേറ്റിൽ (700 µl/മിനിറ്റ്) വേഗത്തിലുള്ള വിശകലനം, ഒരു മിനിറ്റിനുള്ളിൽ അഞ്ച് പെപ്റ്റൈഡുകൾ വേർതിരിച്ചെടുത്തു, ഓരോ കോളത്തിനും 13,500 ± 330 എന്ന മികച്ച N മൂല്യം (100 x 1.8 mm വ്യാസം), 135,000 പ്ലേറ്റുകൾ/മീറ്റർ (ചിത്രം 5B) ന് തുല്യം. പുനരുൽപാദനക്ഷമത പരിശോധിക്കുന്നതിനായി ഒരേ വലുപ്പത്തിലുള്ള മൂന്ന് കോളങ്ങൾ (ആന്തരിക വ്യാസം 100 x 1.8 mm) PMP സ്റ്റേഷണറി ഫേസിന്റെ മൂന്ന് വ്യത്യസ്ത ബാച്ചുകൾ കൊണ്ട് നിറച്ചു. ഒപ്റ്റിമൽ എല്യൂഷൻ അവസ്ഥകൾ, സൈദ്ധാന്തിക പ്ലേറ്റുകളുടെ എണ്ണം N, നിലനിർത്തൽ സമയം എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ഓരോ കോളത്തിലും ഒരേ ടെസ്റ്റ് മിശ്രിതം വേർതിരിച്ചുകൊണ്ട് ഓരോ കോളത്തിനും അനലൈറ്റുകൾ രേഖപ്പെടുത്തി. PMP കോളങ്ങൾക്കായുള്ള പുനരുൽപാദനക്ഷമത ഡാറ്റ പട്ടിക 4 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. പട്ടിക 3 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ വളരെ കുറഞ്ഞ %RSD മൂല്യങ്ങളുമായി PMP കോളത്തിന്റെ പുനരുൽപാദനക്ഷമത നന്നായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു.
ഒരു PMP കോളം (B), ഒരു Ascentis Express RP-Amide കോളം (A) എന്നിവയിൽ പെപ്റ്റൈഡ് മിശ്രിതങ്ങളുടെ വേർതിരിക്കൽ, മൊബൈൽ ഘട്ടം 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), PMP കോളം അളവുകൾ (100 x 1.8 mm id), വിശകലനം സംയുക്തങ്ങളുടെ ഇല്യൂഷൻ ക്രമം: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) and 5 (leucic acid enkephalin).
മനുഷ്യ സെറം ആൽബുമിൻ ട്രിപ്റ്റിക് ഹൈഡ്രോലൈസേറ്റ് വേർതിരിക്കുന്നതിനായി HPLC ഉപയോഗിച്ച് ഒരു PMP കോളം (ആന്തരിക വ്യാസം 100 x 1.8 mm) വിലയിരുത്തി. ചിത്രം 6 ലെ ക്രോമാറ്റോഗ്രാം കാണിക്കുന്നത് സാമ്പിളുകൾ വളരെ നല്ല റെസല്യൂഷനോടെ നന്നായി വേർതിരിച്ചിരിക്കുന്നു എന്നാണ്. 100 μl/മിനിറ്റ് ഫ്ലോ റേറ്റ്, 70/30 അസെറ്റോണിട്രൈൽ/വെള്ളം, 0.1% TFA എന്നിവയുടെ മൊബൈൽ ഘട്ടം എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് HSA ലായനികൾ വിശകലനം ചെയ്തു. ക്രോമാറ്റോഗ്രാമിൽ (ചിത്രം 6) കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, 17 പീക്കുകളായി HSA യുടെ പിളർപ്പ് വിഭജിച്ചു, ഇത് 17 പെപ്റ്റൈഡുകൾക്ക് തുല്യമാണ്. HSA ഹൈഡ്രോലൈസേറ്റിൽ നിന്ന് വ്യക്തിഗത പീക്കുകളുടെ വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമത കണക്കാക്കി, മൂല്യങ്ങൾ പട്ടിക 5 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു.
HSA ട്രിപ്റ്റിക് ഹൈഡ്രോലൈസേറ്റുകൾ ഒരു PMP കോളത്തിൽ (ആന്തരിക വ്യാസം 100 x 1.8 mm), ഫ്ലോ റേറ്റ് (100 μl/min), മൊബൈൽ ഫേസ് 60/40 അസെറ്റോണിട്രൈൽ/ജലം, 0.1% TFA എന്നിവയിൽ വേർതിരിച്ചു.
ഇവിടെ L എന്നത് കോളം നീളമാണ്, η എന്നത് മൊബൈൽ ഫേസിന്റെ വിസ്കോസിറ്റിയാണ്, ΔP എന്നത് കോളത്തിന്റെ പിൻ മർദ്ദമാണ്, u എന്നത് മൊബൈൽ ഫേസിന്റെ രേഖീയ പ്രവേഗമാണ്. PMP കോളത്തിന്റെ പെർമിയബിലിറ്റി 2.5 × 10–14 m2 ആയിരുന്നു, ഫ്ലോ റേറ്റ് 25 µl/മിനിറ്റ് ആയിരുന്നു, 60/40 v/v ഉപയോഗിച്ചു. ACN/ജലം. PMP കോളത്തിന്റെ പെർമിയബിലിറ്റി (ID 100 × 1.8 mm) നമ്മുടെ മുൻ Ref.34 പഠനത്തിന് സമാനമായിരുന്നു. ഉപരിപ്ലവമായി പോറസ് കണികകൾ നിറഞ്ഞ ഒരു കോളത്തിന്റെ പെർമിയബിലിറ്റി 1.7×10 .6 µm ആണ്, 5 µm കണികകൾക്ക് 2.5×10-14 m2 ആണ്43. അതിനാൽ, PMP ഘട്ടത്തിന്റെ പെർമിയബിലിറ്റി 5 μm വലിപ്പമുള്ള കോർ-ഷെൽ കണങ്ങളുടെ പെർമിയബിലിറ്റിക്ക് സമാനമാണ്.
ഇവിടെ Wx എന്നത് ക്ലോറോഫോം കൊണ്ട് നിറച്ച നിരയുടെ പിണ്ഡമാണ്, Wy എന്നത് മെഥനോൾ കൊണ്ട് നിറച്ച നിരയുടെ പിണ്ഡമാണ്, ρ എന്നത് ലായകത്തിന്റെ സാന്ദ്രതയാണ്. മെഥനോൾ (ρ = 0.7866), ക്ലോറോഫോം (ρ = 1.484) എന്നിവയുടെ സാന്ദ്രത. സിലിക്ക-C18 കണികാ നിരയുടെയും (100 × 1.8 mm ID)34 ന്റെയും മുമ്പ് പഠിച്ച C18-urea31 നിരയുടെയും ആകെ പോറോസിറ്റി യഥാക്രമം 0.63 ഉം 0.55 ഉം ആയിരുന്നു. ഇതിനർത്ഥം യൂറിയ ലിഗാൻഡുകളുടെ സാന്നിധ്യം സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിന്റെ പ്രവേശനക്ഷമത കുറയ്ക്കുന്നു എന്നാണ്. മറുവശത്ത്, PMP നിരയുടെ (ആന്തരിക വ്യാസം 100 × 1.8 mm) ആകെ പോറോസിറ്റി 0.60 ആണ്. C18 ബന്ധിത സിലിക്ക കണികകൾ പായ്ക്ക് ചെയ്ത നിരകളെ അപേക്ഷിച്ച് PMP നിരകൾക്ക് പ്രവേശനക്ഷമത കുറവാണ്, കാരണം C18 തരം സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങളിൽ C18 ലിഗാൻഡുകൾ ലീനിയർ ചെയിനുകളിൽ സിലിക്ക കണങ്ങളുമായി ഘടിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു, അതേസമയം പോളിസ്റ്റൈറൈൻ തരം സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങളിൽ കണികകൾക്ക് ചുറ്റും താരതമ്യേന കട്ടിയുള്ള ഒരു പോളിമർ രൂപം കൊള്ളുന്നു. പാളി A. ഒരു സാധാരണ പരീക്ഷണത്തിൽ, നിര പോറോസിറ്റി ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ കണക്കാക്കുന്നു:
ചിത്രം 7A-യിൽ, B, ഒരേ ഇല്യൂഷൻ സാഹചര്യങ്ങളിൽ, 60/40 ACN/H2O ഉം 0 .1% TFA 20 µl/min മുതൽ 800 µl/min വരെ, രണ്ട് നിരകളിലും, ഒരു PMP കോളത്തിനും (id 100 x 1.8 mm) ഒരു Ascentis Express RP-Amide കോളത്തിനുമുള്ള വാൻ ഡീംറ്റർ പ്ലോട്ടുകൾ കാണിക്കുന്നു. PMP കോളത്തിനും Ascentis Express RP-Amide കോളത്തിനും ഒപ്റ്റിമൽ ഫ്ലോ റേറ്റിൽ (80 µl/min) ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ HETP മൂല്യങ്ങൾ യഥാക്രമം 2.6 µm ഉം 3.9 µm ഉം ആയിരുന്നു. HETP മൂല്യങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത് PMP കോളത്തിന്റെ (100 x 1.8 mm id) വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമത വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ Ascentis Express RP-Amide കോളത്തേക്കാൾ (100 x 1.8 mm id) വളരെ കൂടുതലാണ് എന്നാണ്. ചിത്രം 7(A) ലെ വാൻ ഡീംറ്റർ ഗ്രാഫ് കാണിക്കുന്നത്, നമ്മുടെ മുൻ പഠനവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന ഒഴുക്കിനനുസരിച്ച് N മൂല്യത്തിലെ കുറവ് ഗണ്യമായി കൂടുതലല്ല എന്നാണ്. അസെന്റിസ് എക്സ്പ്രസ് RP-അമൈഡ് നിരയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ PMP നിരയുടെ (id 100 × 1.8 mm) ഉയർന്ന വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമത, മെച്ചപ്പെട്ട കണിക ആകൃതിയും വലുപ്പവും നിലവിലെ ജോലിയിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന സങ്കീർണ്ണമായ നിര പാക്കിംഗ് നടപടിക്രമവും അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ്34.
(എ) 0.1% TFA ഉള്ള 60/40 ACN/H2O ലെ ഒരു PMP കോളത്തിൽ (ഐഡി 100 x 1.8 mm) ലഭിച്ച വാൻ ഡീംറ്റർ പ്ലോട്ട് (HETP vs. മൊബൈൽ ഫേസ് ലീനിയർ വെലോസിറ്റി). (ബി) 0.1% TFA ഉള്ള 60/40 ACN/H2O ലെ ഒരു അസെന്റിസ് എക്സ്പ്രസ് RP-അമൈഡ് കോളത്തിൽ (ഐഡി 100 x 1.8 mm) ലഭിച്ച വാൻ ഡീംറ്റർ പ്ലോട്ട് (HETP vs. മൊബൈൽ ഫേസ് ലീനിയർ വെലോസിറ്റി).
ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയിൽ സിന്തറ്റിക് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും ട്രിപ്റ്റിക് ഹൈഡ്രോലൈസേറ്റിന്റെയും (HSA) മിശ്രിതം വേർതിരിക്കുന്നതിനായി ഇന്റർകലേറ്റഡ് പോളിസ്റ്റൈറീന്റെ ഒരു പോളാർ സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടം തയ്യാറാക്കി വിലയിരുത്തി. പെപ്റ്റൈഡ് മിശ്രിതങ്ങൾക്കായുള്ള PMP നിരകളുടെ ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് പ്രകടനം വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമതയിലും റെസല്യൂഷനിലും മികച്ചതാണ്. സിലിക്ക കണിക വലുപ്പവും സുഷിര വലുപ്പവും, സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടങ്ങളുടെ നിയന്ത്രിത സിന്തസിസ്, സങ്കീർണ്ണമായ കോളം പാക്കിംഗ് വസ്തുക്കൾ തുടങ്ങിയ നിരവധി കാരണങ്ങളാൽ PMP നിരകളുടെ മെച്ചപ്പെട്ട വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമതയുണ്ട്. ഉയർന്ന വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമതയ്ക്ക് പുറമേ, ഉയർന്ന ഫ്ലോ റേറ്റുകളിൽ കുറഞ്ഞ കോളം ബാക്ക് മർദ്ദമാണ് ഈ സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിന്റെ മറ്റൊരു നേട്ടം. PMP നിരകൾ വളരെ പുനരുൽപ്പാദിപ്പിക്കാവുന്നവയാണ്, കൂടാതെ പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ മിശ്രിതങ്ങളും വിവിധ പ്രോട്ടീനുകളുടെ ട്രിപ്റ്റിക് ദഹനവും വിശകലനം ചെയ്യാൻ ഇത് ഉപയോഗിക്കാം. ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയിൽ പ്രകൃതിദത്ത ഉൽപ്പന്നങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങൾ, ഔഷധ സസ്യങ്ങളുടെ സത്തുകൾ, കൂൺ എന്നിവ വേർതിരിക്കുന്നതിന് ഈ നിര ഉപയോഗിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ഉദ്ദേശിക്കുന്നു. ഭാവിയിൽ, പ്രോട്ടീനുകളുടെയും മോണോക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികളുടെയും വേർതിരിക്കലിനായി PMP നിരകളും വിലയിരുത്തപ്പെടും.
ഫീൽഡ്, ജെ.കെ, യൂർബി, എം.ആർ, ലൗ, ജെ., തോഗെർസെൻ, എച്ച്. & പീറ്റേഴ്‌സൺ, പി. റിവേഴ്‌സ്ഡ് ഫേസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി പെപ്റ്റൈഡ് സെപ്പറേഷൻ സിസ്റ്റങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള അന്വേഷണം ഭാഗം I: കോളം സ്വഭാവരൂപീകരണത്തിനായുള്ള ഒരു പ്രോട്ടോക്കോളിന്റെ വികസനം. ഫീൽഡ്, ജെ.കെ, യൂർബി, എം.ആർ, ലൗ, ജെ., തോഗെർസെൻ, എച്ച്. & പീറ്റേഴ്‌സൺ, പി. റിവേഴ്‌സ്ഡ് ഫേസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി പെപ്റ്റൈഡ് സെപ്പറേഷൻ സിസ്റ്റങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള അന്വേഷണം ഭാഗം I: കോളം സ്വഭാവരൂപീകരണത്തിനായുള്ള ഒരു പ്രോട്ടോക്കോളിന്റെ വികസനം.ഫീൽഡ്, ജെ.കെ., ഒവർബി, എം.ആർ., ലൗ, ജെ., ടോഗേഴ്‌സൺ, എച്ച്., പീറ്റേഴ്‌സൺ, പി. ഇൻവെസ്റ്റിഗേഷൻ ഓഫ് പെപ്റ്റൈഡ് സെപ്പറേഷൻ സിസ്റ്റംസ് ബൈ റിവേഴ്‌സ്-ഫേസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി, ഭാഗം I: കോളം സ്വഭാവരൂപീകരണത്തിനായുള്ള ഒരു പ്രോട്ടോക്കോൾ വികസിപ്പിക്കൽ. ഫീൽഡ്, ജെ.കെ, യൂർബി, എം.ആർ, ലൗ, ജെ., തോഗെർസെൻ, എച്ച്. & പീറ്റേഴ്‌സൺ, പി. റിവേഴ്‌സ്ഡ് ഫേസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി പെപ്റ്റൈഡ് സെപ്പറേഷൻ സിസ്റ്റങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള അന്വേഷണം ഭാഗം I: കോളം സ്വഭാവസവിശേഷതകൾക്കായുള്ള ഒരു പ്രോട്ടോക്കോളിന്റെ വികസനം. ഫീൽഡ്, ജെ.കെ, യൂർബി, എം.ആർ, ലൗ, ജെ., തോഗെർസെൻ, എച്ച്. & പീറ്റേഴ്‌സൺ, പി. റിവേഴ്‌സ്ഡ് ഫേസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി പെപ്റ്റൈഡ് സെപ്പറേഷൻ സിസ്റ്റങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള അന്വേഷണം ഭാഗം I: കോളം സ്വഭാവസവിശേഷതകൾക്കായുള്ള ഒരു പ്രോട്ടോക്കോളിന്റെ വികസനം.ഫീൽഡ്, ജെ.കെ., ഒവർബി, എം.ആർ., ലൗ, ജെ., ടോഗേഴ്‌സൺ, എച്ച്., പീറ്റേഴ്‌സൺ, പി. ഇൻവെസ്റ്റിഗേഷൻ ഓഫ് പെപ്റ്റൈഡ് സെപ്പറേഷൻ സിസ്റ്റംസ് ബൈ റിവേഴ്‌സ്-ഫേസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി, ഭാഗം I: കോളം സ്വഭാവരൂപീകരണത്തിനായുള്ള ഒരു പ്രോട്ടോക്കോൾ വികസിപ്പിക്കൽ.J.色谱法。 1603,113-129。 https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038(2019)。
ഗോമസ്, ബി. തുടങ്ങിയവർ. പകർച്ചവ്യാധികളുടെ ചികിത്സയ്ക്കായി മെച്ചപ്പെട്ട സജീവ പെപ്റ്റൈഡുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നതിനുള്ള രീതികൾ. ബയോടെക്നോളജി. നേട്ടങ്ങൾ 36(2), 415–429. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
വ്ലീഗെ, പി., ലിസോവ്സ്കി, വി., മാർട്ടിനെസ്, ജെ. & ക്രെസ്റ്റ്ചാറ്റിസ്കി, എം. സിന്തറ്റിക് തെറാപ്പിറ്റിക് പെപ്റ്റൈഡുകൾ: ശാസ്ത്രവും വിപണിയും. വ്ലീഗെ, പി., ലിസോവ്സ്കി, വി., മാർട്ടിനെസ്, ജെ. & ക്രെസ്റ്റ്ചാറ്റിസ്കി, എം. സിന്തറ്റിക് തെറാപ്പിറ്റിക് പെപ്റ്റൈഡുകൾ: ശാസ്ത്രവും വിപണിയും.വ്ലീജ് പി, ലിസോവ്സ്കി വി, മാർട്ടിനെസ് ജെ, ക്രെസ്ചാറ്റിസ്കി എം. സിന്തറ്റിക് തെറാപ്പിക് പെപ്റ്റൈഡുകൾ: ശാസ്ത്രവും വിപണിയും.വ്ലീജ് പി, ലിസോവ്സ്കി വി, മാർട്ടിനെസ് ജെ, ക്രെഷാറ്റ്സ്കി എം. സിന്തറ്റിക് തെറാപ്പിക് പെപ്റ്റൈഡുകൾ: ശാസ്ത്രവും വിപണിയും. മരുന്ന് കണ്ടെത്തൽ. ഇന്ന് 15 (1–2), 40–56. https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010).
സീ, എഫ്., സ്മിത്ത്, ആർ.ഡി & ഷെൻ, വൈ. അഡ്വാൻസ്ഡ് പ്രോട്ടിയോമിക് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി. സീ, എഫ്., സ്മിത്ത്, ആർ.ഡി & ഷെൻ, വൈ. അഡ്വാൻസ്ഡ് പ്രോട്ടിയോമിക് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി.എഫ്., സ്മിത്ത് ആർ.ഡി., ഷെൻ യു എന്നിവരെ കാണുക. അഡ്വാൻസ്ഡ് പ്രോട്ടിയോമിക് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി. Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. 高级蛋白质组液相色谱。 Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. അഡ്വാൻസ്ഡ് പ്രോട്ടീൻ ഘടന 液相色谱。എഫ്., സ്മിത്ത് ആർ.ഡി., ഷെൻ യു എന്നിവരെ കാണുക. അഡ്വാൻസ്ഡ് പ്രോട്ടിയോമിക് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി.ജെ. ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി. എ 1261, 78–90 (2012).
ലിയു, ഡബ്ല്യു. തുടങ്ങിയവർ. അഡ്വാൻസ്ഡ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി-മാസ് സ്പെക്ട്രോമെട്രിക്ക് വിശാലമായ മെറ്റബോളോമിക്സും പ്രോട്ടിയോമിക്സും സംയോജിപ്പിക്കാൻ കഴിയും. അനസ്. ചിം. ആക്റ്റ 1069, 89–97 (2019).
ചെസ്നട്ട്, എസ്എം & സാലിസ്ബറി, ജെജെ. ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വികസനത്തിൽ യുഎച്ച്പിഎൽസിയുടെ പങ്ക്. ചെസ്നട്ട്, എസ്എം & സാലിസ്ബറി, ജെജെ. ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വികസനത്തിൽ യുഎച്ച്പിഎൽസിയുടെ പങ്ക്.ചെസ്നട്ട്, എസ്.എം., സാലിസ്ബറി, ജെ.ജെ. ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വികസനത്തിൽ യു.എച്ച്.പി.എൽ.സിയുടെ പങ്ക്.ചെസ്നട്ട്, എസ്.എം., സാലിസ്ബറി, ജെ.ജെ. മയക്കുമരുന്ന് വികസനത്തിൽ യു.എച്ച്.പി.എൽ.സിയുടെ പങ്ക്. ജെ. സെപ്റ്റംബർ സയൻസ്. 30(8), 1183–1190 (2007).
വു, എൻ. & ക്ലോസെൻ, എ.എം. വേഗത്തിലുള്ള വേർതിരിവുകൾക്കായുള്ള അൾട്രാഹൈ പ്രഷർ ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ അടിസ്ഥാനപരവും പ്രായോഗികവുമായ വശങ്ങൾ. വു, എൻ. & ക്ലോസെൻ, എ.എം. വേഗത്തിലുള്ള വേർതിരിവുകൾക്കായുള്ള അൾട്രാഹൈ പ്രഷർ ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ അടിസ്ഥാനപരവും പ്രായോഗികവുമായ വശങ്ങൾ.വു, എൻ., ക്ലോസെൻ, എ.എം. ദ്രുതഗതിയിലുള്ള വേർതിരിവിനുള്ള ഉയർന്ന മർദ്ദത്തിലുള്ള ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ അടിസ്ഥാനപരവും പ്രായോഗികവുമായ വശങ്ങൾ. വു, എൻ വു, എൻ. & ക്ലോസെൻ, എ.എം. ദ്രുത വേർതിരിവിനുള്ള അൾട്രാ-ഹൈ പ്രഷർ ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ അടിസ്ഥാനപരവും പ്രായോഗികവുമായ വശങ്ങൾ.വു, എൻ., ക്ലോസെൻ, എ.എം. ദ്രുതഗതിയിലുള്ള വേർതിരിവിനുള്ള ഉയർന്ന മർദ്ദത്തിലുള്ള ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ അടിസ്ഥാനപരവും പ്രായോഗികവുമായ വശങ്ങൾ.ജെ. സെപ്റ്റംബർ സയൻസ്. 30(8), 1167–1182. https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
റെൻ, എസ്എ & ടിചെലിറ്റ്ചെഫ്, പി. ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വികസനത്തിൽ അൾട്രാ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ ഉപയോഗം. റെൻ, എസ്എ & ടിചെലിറ്റ്ചെഫ്, പി. ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വികസനത്തിൽ അൾട്രാ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ ഉപയോഗം.റെൻ, എസ്എ, ചെലിഷെഫ്, പി. ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വികസനത്തിൽ അൾട്രാ ഹൈ പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ ഉപയോഗം. Wren, SA & Tchelitcheff, P. 超高效液相色谱在药物开发中的应用。 റെൻ, എസ്‌എ & ടിചെലിറ്റ്ചെഫ്, പി.റെൻ, എസ്എ, ചെലിഷെഫ്, പി. മയക്കുമരുന്ന് വികസനത്തിൽ അൾട്രാ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ പ്രയോഗം.ജെ. ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി. 1119(1-2), 140-146. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
ഗു, എച്ച്. തുടങ്ങിയവർ. എന്ററോവൈറസിന്റെ കാര്യക്ഷമമായ ശുദ്ധീകരണത്തിനായി ഉയർന്ന ആന്തരിക ഘട്ടമുള്ള ഒരു ഓയിൽ-ഇൻ-വാട്ടർ എമൽഷനിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ഒരു മോണോലിത്തിക് മാക്രോപോറസ് ഹൈഡ്രോജൽ 71. കെമിക്കൽ. പ്രോജക്റ്റ്. ജേണൽ 401, 126051 (2020).
ഷി, വൈ., സിയാങ്, ആർ., ഹോർവാത്ത്, സി. & വിൽക്കിൻസ്, ജെഎ പ്രോട്ടിയോമിക്സിൽ ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ പങ്ക്. ഷി, വൈ., സിയാങ്, ആർ., ഹോർവാത്ത്, സി. & വിൽക്കിൻസ്, ജെഎ പ്രോട്ടിയോമിക്സിൽ ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ പങ്ക്.ഷി, വൈ., സിയാങ്, ആർ., ഹോർവാത്ത്, സി., വിൽക്കിൻസ്, ജെഎ. പ്രോട്ടിയോമിക്സിൽ ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ പങ്ക്. Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA 液相色谱在蛋白质组学中的作用。 ഷി, വൈ., സിയാങ്, ആർ., ഹോർവാത്ത്, സി. & വിൽകിൻസ്, ജെ.എഷി, വൈ., സിയാങ്, ആർ., ഹോർവാത്ത്, സി., വിൽക്കിൻസ്, ജെഎ. പ്രോട്ടിയോമിക്സിൽ ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ പങ്ക്.ജെ. ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി. എ 1053 (1-2), 27-36 (2004).
ഫെക്കെറ്റ്, എസ്., വ്യൂട്ടേ, ജെ.-എൽ. & ഗില്ലാർമെ, ഡി. തെറാപ്പിക് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും പ്രോട്ടീനുകളുടെയും റിവേഴ്സ്ഡ്-ഫേസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വേർതിരിവുകളിലെ പുതിയ പ്രവണതകൾ: സിദ്ധാന്തവും പ്രയോഗങ്ങളും. & ഗില്ലാർമെ, ഡി. തെറാപ്പിക് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും പ്രോട്ടീനുകളുടെയും റിവേഴ്സ്ഡ്-ഫേസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വേർതിരിവുകളിലെ പുതിയ പ്രവണതകൾ: സിദ്ധാന്തവും പ്രയോഗങ്ങളും. & ഗില്ലാർം, ഡി. നോവി ടെൻഡെൻസിയിൽ നിന്ന് റാസ്‌ഡെലെനി തെരപെവ്തിചെസ്‌കി പെപ്റ്റിഡോവ് ആൻഡ് ബെൽകോവ് സ് പോമോഷ്‌സ് ജിഡ്‌കോസ്‌റ്റ്നോവ് ഒബ്രാഷെന്നോയ് ഫാസോയ്: തെയോറിയയും പ്രിലോജെനിയയും. & ഗില്ലാർമെ, ഡി. റിവേഴ്സ് ഫേസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി വഴി ചികിത്സാ പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും പ്രോട്ടീനുകളുടെയും വേർതിരിക്കലിലെ പുതിയ പ്രവണതകൾ: സിദ്ധാന്തവും പ്രയോഗങ്ങളും. & ഗില്ലാർം, ഡി. & ഗില്ലാർമെ, ഡി.റിവേഴ്സ് ഫേസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി വഴി ചികിത്സാ പെപ്റ്റൈഡുകളുടെയും പ്രോട്ടീനുകളുടെയും വേർതിരിക്കലിലെ പുതിയ പ്രവണതകൾ: സിദ്ധാന്തവും പ്രയോഗങ്ങളും. ഗില്ലാർമെ, ഡി.ജെ. ഫാം. ബയോമെഡിക്കൽ സയൻസ്. അനസ്. 69, 9–27 (2012).
ഗിലാർ, എം., ഒലിവോവ, പി., ഡാലി, എഇ & ഗെബ്ലർ, ജെസി. ഒന്നാമത്തെയും രണ്ടാമത്തെയും വേർതിരിക്കൽ അളവുകളിൽ വ്യത്യസ്ത pH ഉള്ള RP-RP-HPLC സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ ദ്വിമാന വേർതിരിക്കൽ. ഗിലാർ, എം., ഒലിവോവ, പി., ഡാലി, എഇ & ഗെബ്ലർ, ജെസി. ഒന്നാമത്തെയും രണ്ടാമത്തെയും വേർതിരിക്കൽ അളവുകളിൽ വ്യത്യസ്ത pH ഉള്ള RP-RP-HPLC സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ ദ്വിമാന വേർതിരിക്കൽ.ഗിലാർ എം., ഒലിവോവ പി., ഡാലി എഇ, ഗെബ്ലർ ജെകെ. ഒന്നാമത്തെയും രണ്ടാമത്തെയും വേർതിരിക്കൽ അളവുകളിൽ വ്യത്യസ്ത pH ഉള്ള RP-RP-HPLC സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ ദ്വിമാന വേർതിരിക്കൽ.ഗിലാർ എം., ഒലിവോവ പി., ഡാലി എഇ, ഗെബ്ലർ ജെകെ. ആർ‌പി-ആർ‌പി-എച്ച്‌പി‌എൽ‌സി സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് ഒന്നും രണ്ടും വേർതിരിക്കൽ അളവുകളിൽ വ്യത്യസ്ത പി‌എച്ച് മൂല്യങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ ദ്വിമാന വേർതിരിക്കൽ. ജെ. സെപ്റ്റംബർ സയൻസ്. 28 (14), 1694–1703 (2005).
ഫെല്ലിറ്റി, എസ്. തുടങ്ങിയവർ. 2 µm-ൽ താഴെ വലിപ്പമുള്ള പൂർണ്ണമായും സുഷിരങ്ങളുള്ളതും ഉപരിപ്ലവമായി സുഷിരങ്ങളുള്ളതുമായ C18 കണികകൾ നിറഞ്ഞ ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി നിരകളുടെ മാസ് ട്രാൻസ്ഫറിനെയും ചലനാത്മക സവിശേഷതകളെയും കുറിച്ചുള്ള അന്വേഷണം. ജെ. സെപ്റ്റംബർ സയൻസ്. 43 (9–10), 1737–1745 (2020).
പിയോവേസന, എസ്. തുടങ്ങിയവർ. സസ്യ ബയോആക്ടീവ് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ ഒറ്റപ്പെടൽ, തിരിച്ചറിയൽ, സാധൂകരണം എന്നിവയിലെ സമീപകാല പ്രവണതകളും വിശകലന വെല്ലുവിളികളും. മലദ്വാരം. ജീവജാല ഗുദം. കെമിക്കൽ. 410(15), 3425-3444. https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
മുള്ളർ, ജെ.ബി. തുടങ്ങിയവർ. ജീവന്റെ സാമ്രാജ്യത്തിന്റെ പ്രോട്ടിയോമിക് ലാൻഡ്‌സ്‌കേപ്പ്. നേച്ചർ 582 (7813), 592–596. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
ഡി ലൂക്ക, കെ. തുടങ്ങിയവർ. തയ്യാറെടുപ്പ് ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി വഴി ചികിത്സാ പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ പോസ്റ്റ്-ട്രീറ്റ്മെന്റ്. മോളിക്യൂൾസ് (ബേസൽ, സ്വിറ്റ്സർലൻഡ്) 26(15), 4688 (2021).
യാങ്, വൈ. & ഗെങ്, എക്സ്. മിക്സഡ്-മോഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയും ബയോപോളിമറുകളിലേക്കുള്ള അതിന്റെ പ്രയോഗങ്ങളും. യാങ്, വൈ. & ഗെങ്, എക്സ്. മിക്സഡ്-മോഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയും ബയോപോളിമറുകളിലേക്കുള്ള അതിന്റെ പ്രയോഗങ്ങളും.യാങ്, യു., ഗെങ്, എക്സ്. മിക്സഡ് മോഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയും ബയോപോളിമറുകളിൽ അതിന്റെ പ്രയോഗവും. Yang, Y. & Geng, X. 混合模式色谱及其在生物聚合物中的应用。 യാങ്, വൈ. & ഗെങ്, എക്സ്. മിക്സഡ് മോഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയും ബയോപോളിമറുകളിലെ അതിന്റെ പ്രയോഗവും.യാങ്, യു., ജീൻ, എക്സ്. മിക്സഡ് മോഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയും ബയോപോളിമറുകളിൽ അതിന്റെ പ്രയോഗവും.ജെ. ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി. എ 1218(49), 8813–8825 (2011).