Nature.com သို့ ဝင်ရောက်ကြည့်ရှုသည့်အတွက် ကျေးဇူးတင်ပါသည်။ သင်သည် CSS ပံ့ပိုးမှု အကန့်အသတ်ရှိသော ဘရောက်ဆာဗားရှင်းကို အသုံးပြုနေပါသည်။ အကောင်းဆုံးအတွေ့အကြုံအတွက်၊ အပ်ဒိတ်လုပ်ထားသော ဘရောက်ဆာကို အသုံးပြုရန် (သို့မဟုတ် Internet Explorer ရှိ Compatibility Mode ကို ပိတ်ရန်) အကြံပြုအပ်ပါသည်။ ထို့အပြင်၊ စဉ်ဆက်မပြတ် ပံ့ပိုးမှုကို သေချာစေရန်အတွက်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် ဆိုက်ကို styles နှင့် JavaScript မပါဘဲ ပြသပါသည်။
ဆလိုက်သုံးခုကို တစ်ပြိုင်နက်တည်း လှည့်ပတ်ပြသသည်။ တစ်ပြိုင်နက်တည်း ဆလိုက်သုံးခုကို ရွှေ့ရန် Previous နှင့် Next ခလုတ်များကို အသုံးပြုပါ၊ သို့မဟုတ် အဆုံးရှိ ဆလိုက်ခလုတ်များကို အသုံးပြု၍ တစ်ပြိုင်နက်တည်း ဆလိုက်သုံးခုကို ရွှေ့ပါ။
အပေါက်ကျယ်သော ဆီလီကာ အမှုန်များကို sol-gel နည်းလမ်းဖြင့် ပြုပြင်မွမ်းမံမှုအချို့ဖြင့် ပြင်ဆင်ခဲ့သည်။ ဤအမှုန်များကို N-phenylmaleimide-methylvinyl isocyanate (PMI) နှင့် styrene တို့ဖြင့် N-phenylmaleimide intercalated polyamides များ ထုတ်လုပ်ရန် reverse chain transfer-fragmentation (RAFT) polymerization မှတစ်ဆင့် derivative လုပ်ခဲ့သည်။ Styrene (PMP) stationary phase။ ကျဉ်းမြောင်းသော bore stainless steel columns (100 × 1.8 mm အတွင်းအချင်း) ကို slurry packing ဖြင့်ထုပ်ပိုးထားသည်။ PMP column ၏ chromatographic စွမ်းဆောင်ရည်ကို peptides ငါးမျိုး (Gly-Tyr၊ Gly-Leu-Tyr၊ Gly-Gly-Tyr-Arg၊ Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg၊ Leu amino acid enkephalin) နှင့် human serum albumin (HAS) ၏ tryptic hydrolyzate တို့ပါဝင်သော synthetic peptides ရောနှောမှုကို ခွဲထုတ်ရန် အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ အကောင်းဆုံး elution အခြေအနေများအောက်တွင်၊ peptides ရောနှောထားသော ပြားအရေအတွက်သည် သီအိုရီအရ ပြား ၂၈၀,၀၀၀/စတုရန်းမီတာအထိ ရောက်ရှိခဲ့သည်။ ဖွံ့ဖြိုးပြီးကော်လံ၏ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်ကို စီးပွားဖြစ် Ascentis Express RP-Amide ကော်လံနှင့် နှိုင်းယှဉ်ကြည့်လျှင် ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်နှင့် ရုပ်ထွက်အရည်အသွေးအရ PMP ကော်လံ၏ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်သည် စီးပွားဖြစ်ကော်လံထက် သာလွန်ကြောင်း တွေ့ရှိရသည်။
ဇီဝဆေးဝါးလုပ်ငန်းသည် မကြာသေးမီနှစ်များအတွင်း ဈေးကွက်ဝေစုသိသိသာသာတိုးလာခြင်းဖြင့် ကျယ်ပြန့်လာသော ကမ္ဘာလုံးဆိုင်ရာဈေးကွက်တစ်ခုဖြစ်လာခဲ့သည်။ ဇီဝဆေးဝါးလုပ်ငန်း1,2,3 ၏ အလျင်အမြန်တိုးတက်မှုနှင့်အတူ peptide နှင့် ပရိုတင်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအတွက် များစွာလိုအပ်ပါသည်။ ပစ်မှတ် peptide အပြင် peptide ပေါင်းစပ်မှုအတွင်း မသန့်ရှင်းမှုအမျိုးမျိုးဖြစ်ပေါ်လာသောကြောင့် peptide ၏ လိုချင်သောသန့်စင်မှုကိုရရှိရန် chromatographic သန့်စင်မှုလိုအပ်သည်။ တစ်ခုတည်းသောနမူနာတွင် တွေ့ရှိနိုင်သော မျိုးစိတ်များစွာရှိသောကြောင့် ခန္ဓာကိုယ်အရည်များ၊ တစ်ရှူးများနှင့် ဆဲလ်များရှိ ပရိုတင်းများကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းနှင့် လက္ခဏာရပ်ဖော်ထုတ်ခြင်းသည် အလွန်စိန်ခေါ်မှုရှိသောအလုပ်တစ်ခုဖြစ်သည်။ mass spectrometry သည် peptides နှင့် ပရိုတင်းများကို sequencing လုပ်ရန်အတွက် ထိရောက်သောကိရိယာတစ်ခုဖြစ်သော်လည်း၊ ထိုကဲ့သို့သောနမူနာများကို mass spectrometer ထဲသို့ တိုက်ရိုက်ထည့်သွင်းပါက ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုသည် ကျေနပ်ဖွယ်မကောင်းပါ။ ဤပြဿနာကို MS ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုမပြုမီ liquid chromatography (LC) ကို လုပ်ဆောင်ခြင်းဖြင့် ဖြေရှင်းနိုင်ပြီး၊ သတ်မှတ်ထားသောအချိန်4,5,6 တွင် mass spectrometer ထဲသို့ ဝင်ရောက်လာသော analytes ပမာဏကို လျှော့ချပေးမည်ဖြစ်သည်။ ထို့အပြင်၊ analytes များသည် အရည်အဆင့်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအတွင်း ကျဉ်းမြောင်းသောဒေသတွင် စုစည်းနိုင်ပြီး၊ ထို့ကြောင့် ဤ analytes များကို စုစည်းပြီး MS ထောက်လှမ်းမှု၏ အာရုံခံနိုင်စွမ်းကို မြှင့်တင်ပေးသည်။ အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ (LC) သည် လွန်ခဲ့သောဆယ်စုနှစ်အတွင်း သိသိသာသာတိုးတက်လာပြီး ပရိုတီယိုမစ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအတွက် ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့်အသုံးပြုသည့်နည်းလမ်းတစ်ခုဖြစ်လာသည်7,8,9,10။
ပြောင်းပြန်အဆင့်အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ (RP-LC) ကို octadecyl-modified silica (ODS) ကို stationary phase11,12,13 အဖြစ်အသုံးပြု၍ peptide များ၏အရောအနှောများကို သန့်စင်ပြီး ခွဲခြားရန်အတွက် ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့်အသုံးပြုကြသည်။ သို့သော် ၎င်းတို့၏ရှုပ်ထွေးသောဖွဲ့စည်းပုံနှင့် amphoteric သဘောသဘာဝကြောင့်14,15 RP stationary phases များသည် peptides နှင့် proteins များကို ကျေနပ်လောက်သောခွဲထုတ်မှုကို မပေးနိုင်ပါ။ ထို့ကြောင့် polar နှင့် non-polar fragments များပါရှိသော peptides နှင့် proteins များကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းသည် ဤ analytes16 များ အပြန်အလှန်ဆက်သွယ်ပြီး ထိန်းသိမ်းရန်အတွက် အထူးဒီဇိုင်းထုတ်ထားသော stationary phases များ လိုအပ်သည်။ multimodal interactions များကိုပေးဆောင်သည့် Mixed chromatography သည် peptides၊ proteins နှင့် အခြားရှုပ်ထွေးသောအရောအနှောများကို ခွဲခြားရန်အတွက် RP-LC အစားထိုးနည်းလမ်းတစ်ခုဖြစ်နိုင်သည်။ ရောနှောထားသော stationary phases အများအပြားကို ပြင်ဆင်ခဲ့ပြီး ဤ stationary phases များဖြင့်ဖြည့်ထားသော columns များကို peptides နှင့် proteins17,18,19,20,21 တို့ကို အသုံးပြု၍ peptides နှင့် proteins17,18,19,20,21 တို့ကို ခွဲထုတ်ခဲ့သည်။ ဝင်ရိုးစွန်းနှင့် ဝင်ရိုးစွန်းမဟုတ်သော အုပ်စုများ ရှိနေခြင်းကြောင့်၊ ရောနှောမုဒ် stationary phase များ (WAX/RPLC၊ HILIC/RPLC၊ polar intercalation/RPLC) သည် peptides များနှင့် proteins များကို ခွဲထုတ်ရန်အတွက် သင့်လျော်ပါသည်22,23,24,25,26,27,28။ covalently bonded polar groups များပါရှိသော polar intercalated stationary phase များသည် ခွဲထုတ်နိုင်စွမ်းကောင်းများနှင့် analyte နှင့် stationary phase အကြား အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုပေါ်တွင် မူတည်သောကြောင့်ဖြစ်သည်။ Multimodal interactions29,30,31,32။ မကြာသေးမီက Zhang et al.30 သည် polyamines များ၏ behenyl-terminated stationary phase များကို ရရှိခဲ့ပြီး hydrocarbons၊ antidepressants၊ flavonoids၊ nucleosides၊ estrogens နှင့် အခြား analytes အချို့ကို အောင်မြင်စွာ ခွဲထုတ်နိုင်ခဲ့သည်။ polar embedded stationary material တွင် polar နှင့် non-polar group နှစ်မျိုးလုံးရှိသောကြောင့် peptides များနှင့် proteins များကို hydrophobic နှင့် hydrophilic အစိတ်အပိုင်းများအဖြစ် ခွဲထုတ်ရန် အသုံးပြုနိုင်သည်။ Polar inline ကော်လံများ (ဥပမာ၊ amide inline ပါသော C18 ကော်လံများ) ကို Ascentis Express RP-Amide ကော်လံများဟူသော ကုန်အမှတ်တံဆိပ်ဖြင့် ရရှိနိုင်ပါသည်၊ သို့သော် ဤကော်လံများကို amine 33 ကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရန်အတွက်သာ အသုံးပြုခဲ့ပါသည်။
လက်ရှိလေ့လာမှုတွင် polar embedding stationary phase (N-phenylmaleimide၊ embedding polystyrene) ကို peptide ခွဲထုတ်ခြင်းနှင့် tryptic HSA cleavage အတွက် ပြင်ဆင်ပြီး အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ stationary phase ကိုပြင်ဆင်ရန် အောက်ပါဗျူဟာကို အသုံးပြုခဲ့သည်။ porous silica အမှုန်များကို ကျွန်ုပ်တို့၏ယခင်ထုတ်ဝေမှုများတွင်ဖော်ပြထားသောလုပ်ထုံးလုပ်နည်းများအတိုင်း ပြင်ဆင်မှုပုံစံ ၃၁၊ ၃၄၊ ၃၅၊ ၃၆၊ ၃၇၊ ၃၈၊ ၃၉ တွင်ပြောင်းလဲမှုအချို့ဖြင့် ပြင်ဆင်ခဲ့သည်။ urea၊ polyethylene glycol (PEG)၊ TMOS နှင့် aqueous-acetic acid အချိုးများကို pore အရွယ်အစားကြီးမားသော silica အမှုန်များရရှိရန် ချိန်ညှိခဲ့သည်။ ဒုတိယအနေဖြင့် phenylmaleimide-methylvinyl isocyanate ligand အသစ်တစ်ခုကို ပေါင်းစပ်ပြီး ၎င်းမှဆင်းသက်လာသော silica အမှုန်များကို polar embedded stationary phase များကိုပြင်ဆင်ရန်အသုံးပြုခဲ့သည်။ ရရှိလာသော stationary phase ကို အကောင်းဆုံး packing ပုံစံအရ stainless steel column (အတွင်းပိုင်းအချင်း ၁၀၀ × ၁.၈ မီလီမီတာ) ထဲသို့ထုပ်ပိုးထားသည်။ column ၏ packing ကို mechanical vibration ဖြင့်ကူညီပြီး column အတွင်း uniform layer တစ်ခုဖြစ်စေရန် ကူညီပေးသည်။ ထုပ်ပိုးထားသောကော်လံကို peptide ငါးမျိုး (Gly-Tyr၊ Gly-Leu-Tyr၊ Gly-Gly-Tyr-Arg၊ Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg၊ leucine-enkephalin peptide) နှင့် human serum albumin (HSA) ၏ tryptic hydrolysates တို့ပါဝင်သော peptide များ ရောနှောထားသော ခွဲထုတ်မှုအတွက် အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ peptide ရောနှောမှုနှင့် HSA tryptic digest တို့သည် ကောင်းမွန်သော resolution နှင့် efficiency ဖြင့် ခွဲထုတ်ထားကြောင်း တွေ့ရှိခဲ့သည်။ PMP ကော်လံ၏ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်ကို Ascentis Express RP-Amide ကော်လံနှင့် နှိုင်းယှဉ်ခဲ့သည်။ PMP ကော်လံတွင် peptide များနှင့် ပရိုတင်းများသည် ကောင်းမွန်သော resolution နှင့် separation efficiency ရှိပြီး PMP ကော်လံ၏ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်သည် Ascentis Express RP-Amide ကော်လံထက် ပိုမိုမြင့်မားကြောင်း တွေ့ရှိခဲ့ရပါသည်။
PEG (ပိုလီအီသလင်း ဂလိုင်ကော)၊ ယူရီးယား၊ အက်စီတစ် အက်ဆစ်၊ ထရိုင်မီသို့ဆီလီကိတ် (TMOS)၊ ထရိုင်မီသိုင်းကလိုရိုဆိုင်လိန်း (TMCS)၊ ထရစ်ပဆင်၊ လူ့သွေးရည်ကြည် အယ်လ်ဘူမင် (HSA)၊ အမိုးနီယမ် ကလိုရိုက်၊ ယူရီးယား၊ ဟက်ဆာမီသိုင်း မီသာခရီလွိုင်ဒိုင်ဆီလာဇိန်း (HMDS)၊ မီသာခရီလွိုင်ကလိုရိုက် (MC)၊ စတိုင်ရင်း၊ ၄-ဟိုက်ဒရောက်စီ- တမ်ပို၊ ဘန်ဇိုဝိုင်းပါအောက်ဆိုဒ် (BPO)၊ အက်စီတိုနိုက်ထရိုက် (ACN) အတွက် HPLC၊ မီသနော၊ ၂-ပရိုပနော နှင့် အက်စီတုန်း။ Sigma-Aldrich ကုမ္ပဏီ (စိန့်လူးဝစ်၊ မစ်ဆူရီ၊ အမေရိကန်)။
ယူရီးယား (၈ ဂရမ်)၊ ပိုလီအီလီသီယမ် ဂလိုင်ကော (၈ ဂရမ်) နှင့် ၀.၀၁ N. အက်စီတစ် အက်ဆစ် ၈ မီလီလီတာ ရောစပ်ထားသော အရောအနှောကို ၁၀ မိနစ်ကြာ မွှေပြီး TMOS ၂၄ မီလီလီတာကို ရေခဲဖြင့် အအေးခံခဲ့သည်။ ဓာတ်ပြုမှု အရောအနှောကို ၄၀°C တွင် ၆ နာရီကြာ အပူပေးပြီးနောက် သံမဏိ အော်တိုကလဗ်တွင် ၁၂၀°C တွင် ၈ နာရီကြာ အပူပေးခဲ့သည်။ ရေကို ဆယ်ထုတ်ပြီး အကြွင်းအကျန်ကို ၇၀°C တွင် ၁၂ နာရီကြာ အခြောက်ခံခဲ့သည်။ အခြောက်ခံထားသော ပျော့ပျောင်းသော အတုံးများကို ချောမွေ့စွာ ကြိတ်ချေပြီး ၅၅၀°C တွင် ၁၂ နာရီကြာ မီးဖို၌ ကယ်လ်စီနိတ် လုပ်ခဲ့သည်။ အမှုန်အရွယ်အစား၊ အပေါက်အရွယ်အစားနှင့် မျက်နှာပြင်ဧရိယာတို့၏ ပြန်လည်ထုတ်လုပ်နိုင်မှုကို စမ်းသပ်ရန် အသုတ်သုံးသုတ်ကို ပြင်ဆင်ပြီး လက္ခဏာရပ်များ ပြသခဲ့သည်။
ပိုလီစတိုင်ရင်း ကွင်းဆက်များအတွက် ဝင်ရိုးအုပ်စုနှင့် တည်ငြိမ်အဆင့်။ ပြင်ဆင်မှုလုပ်ထုံးလုပ်နည်းကို အောက်တွင်ဖော်ပြထားသည်။
N-phenylmaleimide (၂၀၀ မီလီဂရမ်) နှင့် methyl vinyl isocyanate (၁၀၀ မီလီဂရမ်) တို့ကို ရေဓာတ်မပါသော toluene တွင် ပျော်ဝင်စေပြီး phenylmaleimide နှင့် methyl vinyl isocyanate (PMCP) တို့၏ copolymer ရရှိစေရန် 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) ၀.၁ မီလီလီတာကို ဓာတ်ပြုမှုဖန်ခွက်ထဲသို့ ထည့်ခဲ့သည်။) အရောအနှောကို ၆၀°C တွင် ၃ နာရီကြာ အပူပေးကာ စစ်ထုတ်ကာ ၄၀°C တွင် ၃ နာရီကြာ အခြောက်ခံခဲ့သည်။
ခြောက်သွေ့သော ဆီလီကာ အမှုန်များ (၂ ဂရမ်) ကို ခြောက်သွေ့သော တိုလူရင်း (၁၀၀ မီလီလီတာ) တွင် ပျံ့နှံ့စေပြီး မွှေကာ ၅၀၀ မီလီလီတာဆံ့ အောက်ခြေဝိုင်းသော ပုလင်းထဲတွင် ၁၀ မိနစ်ကြာ အသံလှိုင်းဖြင့် ရောစပ်ခဲ့သည်။ PMCP (၁၀ မီလီဂရမ်) ကို တိုလူရင်းတွင် ပျော်ဝင်စေပြီး ပေါင်းထည့်သည့် ဖန်နယ်မှတစ်ဆင့် ဓာတ်ပြုမှု ပုလင်းထဲသို့ ဖြည်းဖြည်းချင်း ထည့်ခဲ့သည်။ အရောအနှောကို ၁၀၀°C တွင် ၈ နာရီကြာ ပြန်စီးဆင်းစေကာ စစ်ထုတ်ကာ အက်စီတုန်းဖြင့် ဆေးကြောပြီး ၆၀°C တွင် ၃ နာရီကြာ အခြောက်ခံခဲ့သည်။ ထို့နောက် PMCP (၁၀၀ ဂရမ်) နှင့် ဆက်စပ်နေသော ဆီလီကာ အမှုန်များကို တိုလူရင်း (၂၀၀ မီလီလီတာ) တွင် ပျော်ဝင်စေပြီး ဓာတ်ကူပစ္စည်းအဖြစ် dibutyltin dilaurate ၁၀၀ μl ရှိနေချိန်တွင် 4-hydroxy-TEMPO (၂ မီလီလီတာ) ကို ထည့်ပါ။ အရောအနှောကို ၅၀°C တွင် ၈ နာရီကြာ မွှေပြီး စစ်ထုတ်ကာ ၅၀°C တွင် ၃ နာရီကြာ အခြောက်ခံခဲ့သည်။
စတိုင်ရင်း (၁ မီလီလီတာ)၊ ဘန်ဇိုဝိုင်ပါအောက်ဆိုဒ် BPO (၀.၅ မီလီလီတာ) နှင့် TEMPO-PMCP (၁.၅ ဂရမ်) နှင့် တွယ်ဆက်ထားသော ဆီလီကာ အမှုန်အမွှားများကို တိုလူရင်းတွင် ပျံ့နှံ့စေပြီး နိုက်ထရိုဂျင်ဖြင့် သန့်စင်ပေးခဲ့သည်။ စတိုင်ရင်း ပေါ်လီမာရိုက်ဇေးရှင်းကို ၁၀၀°C တွင် ၁၂ နာရီကြာ ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ ရရှိလာသော ထုတ်ကုန်ကို မီသနောဖြင့် ဆေးကြောပြီး ၆၀°C တွင် တစ်ညလုံး အခြောက်ခံခဲ့သည်။ ဓာတ်ပြုမှု၏ အထွေထွေအစီအစဉ်ကို ပုံ ၁ တွင် ပြသထားသည်။
10–3 Torr အောက် ကျန်ရှိသောဖိအားရရှိသည်အထိ နမူနာများကို 393 K တွင် 1 နာရီကြာ degassed လုပ်ခဲ့သည်။ relative pressure P/P0 = 0.99 တွင်စုပ်ယူထားသော N2 ပမာဏကို အသုံးပြု၍ စုစုပေါင်း pore volume ကိုဆုံးဖြတ်သည်။ သန့်စင်သောနှင့် ligand-bound silica အမှုန်များ၏ morphology ကို scanning electron microscope (Hitachi High Technologies, Tokyo, Japan) ကို အသုံးပြု၍ စစ်ဆေးခဲ့သည်။ ခြောက်သွေ့သောနမူနာများ (သန့်စင်သော silica နှင့် ligand bound silica အမှုန်များ) ကို carbon tape ကို အသုံးပြု၍ အလူမီနီယမ်ချောင်းများပေါ်တွင် တင်ခဲ့သည်။ Q150T sputtering device ကို အသုံးပြု၍ နမူနာပေါ်တွင် ရွှေကို ချထားခဲ့ပြီး 5 nm အထူ Au အလွှာကို နမူနာပေါ်တွင် ချထားခဲ့သည်။ ၎င်းသည် low voltage လုပ်ငန်းစဉ်၏ စွမ်းဆောင်ရည်ကို မြှင့်တင်ပေးပြီး fine cold spraying ကို ပေးစွမ်းသည်။ Thermo Electron (Waltham, MA, USA) Flash EA1112 elemental composition analyzer ကို အသုံးပြု၍ ဒြပ်စင် analysis ကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ Malvern particle size distribution ကိုရရှိရန် Malvern particle size analyzer (Worcestershire, UK) Mastersizer 2000 ကို အသုံးပြု၍ အမှုန်အရွယ်အစား ဖြန့်ဖြူးမှုကို ရရှိရန် ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ အဖုံးအကာမပါသော ဆီလီကာအမှုန်များနှင့် လီဂန်းချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာအမှုန်များ (တစ်ခုလျှင် ၅ မီလီဂရမ်) ကို အိုင်ဆိုပရိုပနော ၅ မီလီလီတာတွင် ပျံ့နှံ့စေပြီး ၁၀ မိနစ်ခန့် အသံလှိုင်းဖြင့် ရောနှောကာ ၅ မိနစ်ခန့် လှုပ်ခါကာ Mastersizer အလင်းတန်းပေါ်တွင် တင်ခဲ့သည်။ အပူဆွဲငင်အား ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို ၃၀ မှ ၈၀၀ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်အတွင်း အပူချိန်အတိုင်းအတာတွင် တစ်မိနစ်လျှင် ၅ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်နှုန်းဖြင့် ပြုလုပ်သည်။
အတိုင်းအတာများ (ID 100 × 1.8 mm) ရှိသော ဖန်ဖိုက်ဘာဖြင့် ပြုလုပ်ထားသော ကျဉ်းမြောင်းသော အပေါက်ပါ သံမဏိကော်လံများကို ကိုးကားချက် ၃၁ တွင်ကဲ့သို့ပင် slurry filling နည်းလမ်းဖြင့် ထုပ်ပိုးခဲ့သည်။ သံမဏိကော်လံ (ဖန်စီထားသော၊ ID 100 × 1 .8 mm) နှင့် 1 µm frit ပါရှိသော outlet ကို slurry packaging machine (Alltech Deerfield, IL, USA) နှင့် ချိတ်ဆက်ထားသည်။ stationary phase 150 mg ကို မီသနော 1.2 ml တွင် ဆိုင်းငံ့ထားပြီး reservoir column ထဲသို့ ထည့်သွင်းခြင်းဖြင့် stationary phase ၏ suspension ကို ပြင်ဆင်ပါ။ မီသနောကို slurry solvent နှင့် control solvent အဖြစ် အသုံးပြုခဲ့သည်။ 100 MP ကို ​​10 မိနစ်၊ 80 MP ကို ​​15 မိနစ် နှင့် 60 MP ကို ​​30 မိနစ် pressure sequence ဖြင့် ကော်လံကို ထုပ်ပိုးပါ။ packing လုပ်ငန်းစဉ်တွင် column uniform packing ကိုသေချာစေရန် mechanical vibration အတွက် gas chromatography column vibrators နှစ်ခု (Alltech, Deerfield, IL, USA) ကို အသုံးပြုခဲ့သည်။ slurry packing ကို ပိတ်ပြီး ကြိုးကို ပျက်စီးခြင်းမှ ကာကွယ်ရန် ဖိအားကို ဖြည်းဖြည်းချင်း လွှတ်ပါ။ ကော်လံကို အရည်ပျော်ပိုက်နှုတ်သီးမှ ဖြုတ်လိုက်ပြီး ၎င်း၏လုပ်ဆောင်ချက်ကို စမ်းသပ်ရန်အတွက် အခြားဆက်စပ်ပစ္စည်းတစ်ခုကို အဝင်ပေါက်တွင် တပ်ဆင်ပြီး LC စနစ်နှင့် ချိတ်ဆက်ထားသည်။
LC pump (10AD Shimadzu, Japan)၊ 50 nL injection loop (Valco (USA) C14 W.05) ပါသော sampler၊ membrane degasser (Shimadzu DGU-14A) နှင့် UV-VIS capillary window ကို အသုံးပြု၍ custom MLC တစ်ခုကို တည်ဆောက်ခဲ့သည်။ Detector device (UV-2075) နှင့် enamelled microcolumn။ ကော်လံတိုးချဲ့မှုအပို၏အကျိုးသက်ရောက်မှုကို အနည်းဆုံးဖြစ်စေရန် အလွန်ကျဉ်းမြောင်းပြီး တိုတောင်းသော ချိတ်ဆက်ပြွန်များကို အသုံးပြုပါ။ ကော်လံကိုဖြည့်ပြီးနောက်၊ 1/16″ reducing junction ၏ outlet တွင် capillary (50 µm id 365) ကိုတပ်ဆင်ပြီး reducing junction ၏ capillary (50 µm) ကိုတပ်ဆင်ပါ။ အချက်အလက်စုဆောင်းခြင်းနှင့် chromatogram processing ကို Multichro 2000 software ကို အသုံးပြု၍ လုပ်ဆောင်သည်။ 254 nm တွင်၊ ဘာသာရပ် analytes များ၏ UV absorbance ကို 0 တွင်စောင့်ကြည့်ခဲ့သည်။ Chromatographic data ကို OriginPro8 (Northampton, MA) ကို အသုံးပြု၍ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခဲ့သည်။
လူ့သွေးရည်ကြည် အယ်လ်ဘူမင်၊ ခြောက်သွေ့အောင်ပြုလုပ်ထားသော အမှုန့်၊ ≥ 96% (agarose gel electrophoresis) 3 mg ကို trypsin (1.5 mg)၊ 4.0 M urea (1 ml) နှင့် 0.2 M ammonium bicarbonate (1 ml) တို့ဖြင့် ရောစပ်ထားသည်။ ပျော်ရည်ကို ၁၀ မိနစ် မွှေပြီး 37°C တွင် ရေကန်ထဲတွင် ၆ နာရီကြာ ထားပါ၊ ထို့နောက် 0.1% TFA 1 ml ဖြင့် အအေးခံပါ။ ပျော်ရည်ကို စစ်ပြီး ၄°C အောက်တွင် သိမ်းဆည်းပါ။
PMP ကော်လံပေါ်ရှိ peptides နှင့် tryptic digest HSA ရောနှောမှုကို သီးခြားစီ အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ PMP ကော်လံဖြင့် ခွဲထားသော peptides နှင့် HSA ရောနှောမှု၏ tryptic hydrolysis ကို စစ်ဆေးပြီး ရလဒ်များကို Ascentis Express RP-Amide ကော်လံနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါ။ သီအိုရီဆိုင်ရာ plates အရေအတွက်ကို အောက်ပါညီမျှခြင်းကို အသုံးပြု၍ တွက်ချက်သည်-
သန့်စင်သော ဆီလီကာအမှုန်များနှင့် လီဂန်းချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာအမှုန်များ၏ SEM ပုံများကို ပုံ ၂ တွင် ပြသထားသည်။ သန့်စင်သော ဆီလီကာအမှုန်များ၏ SEM ပုံများ (A၊ B) သည် ကျွန်ုပ်တို့၏ ယခင်လေ့လာမှုများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက အမှုန်များသည် ရှည်လျားနေသည် သို့မဟုတ် မမှန်သော ဆ៊ီမက်တစ်ရှိသည့် ဂလိုဘယ်ပုံသဏ္ဍာန်ကို ပြသသည်။ လီဂန်း (C၊ D) ဖြင့် ချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာအမှုန်များ၏ မျက်နှာပြင်သည် သန့်စင်သော ဆီလီကာအမှုန်များထက် ချောမွေ့ပြီး ၎င်းသည် ဆီလီကာအမှုန်များ၏ မျက်နှာပြင်ကို ဖုံးအုပ်ထားသော ပိုလီစတိုင်ရင်း ကွင်းဆက်များကြောင့် ဖြစ်နိုင်သည်။
သန့်စင်သော ဆီလီကာ အမှုန်များ (A၊ B) နှင့် လီဂန်းချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာ အမှုန်များ (C၊ D) တို့၏ စကင်န်ဖတ် အီလက်ထရွန် မိုက်ခရိုဂရပ်များ။
သန့်စင်သော ဆီလီကာအမှုန်များနှင့် လီဂန်းချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာအမှုန်များ၏ အမှုန်အရွယ်အစား ဖြန့်ဖြူးမှုကို ပုံ ၂.၃(က) တွင် ပြသထားသည်။ ထုထည်အမှုန်အရွယ်အစား ဖြန့်ဖြူးမှုမျဉ်းကွေးများက ဆီလီကာအမှုန်အရွယ်အစားသည် ဓာတုဗေဒပြုပြင်မွမ်းမံပြီးနောက် တိုးလာကြောင်း ပြသထားသည် (ပုံ ၃က)။ လက်ရှိလေ့လာမှုနှင့် ယခင်လေ့လာမှုမှ ဆီလီကာအမှုန်အရွယ်အစား ဖြန့်ဖြူးမှုဒေတာကို ဇယား ၁(က) တွင် နှိုင်းယှဉ်ထားသည်။ PMP ၏ ထုထည်အမှုန်အရွယ်အစား d(0.5) သည် ကျွန်ုပ်တို့၏ ယခင်လေ့လာမှု (ပိုလီစတိုင်းရင်း ချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာအမှုန်များ)၃၄ တွင် ad(0.5) တန်ဖိုး 3.05 µm နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက 3.36 µm ရှိသည်။ ဓာတ်ပြုမှုအရောအနှောတွင် PEG၊ urea၊ TMOS နှင့် acetic acid တို့၏ အချိုးအစား ပြောင်းလဲမှုကြောင့် ဤအသုတ်၏ အမှုန်အရွယ်အစား ဖြန့်ဖြူးမှုသည် ကျွန်ုပ်တို့၏ ယခင်လေ့လာမှုနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ပိုမိုကျဉ်းမြောင်းသည်။ PMP အဆင့်၏ အမှုန်အရွယ်အစားသည် ကျွန်ုပ်တို့ အစောပိုင်းက လေ့လာခဲ့သော ပိုလီစတိုင်း ချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာအမှုန်အဆင့်ထက် အနည်းငယ်ပိုကြီးသည်။ ဆိုလိုသည်မှာ စတိုင်ရင်းပါသော ဆီလီကာအမှုန်များ၏ မျက်နှာပြင်လုပ်ဆောင်ချက်သည် ဆီလီကာမျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် ပိုလီစတိုင်ရင်းအလွှာ (0.97 µm) ကိုသာ စုပုံစေပြီး PMP အဆင့်တွင် အလွှာအထူ 1.38 µm ရှိသည်။
သန့်စင်သော ဆီလီကာ အမှုန်များနှင့် လီဂန်းချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာ အမှုန်များ၏ အမှုန်အရွယ်အစား ဖြန့်ဖြူးမှု (A) နှင့် အပေါက်အရွယ်အစား ဖြန့်ဖြူးမှု (B)။
ဤလေ့လာမှုတွင်အသုံးပြုသော ဆီလီကာအမှုန်များ၏ အပေါက်အရွယ်အစား၊ အပေါက်ထုထည်နှင့် မျက်နှာပြင်ဧရိယာတို့ကို ဇယား ၁ (ခ) တွင် ပြသထားသည်။ သန့်စင်သော ဆီလီကာအမှုန်များနှင့် လီဂန်းချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာအမှုန်များ၏ PSD ပရိုဖိုင်များကို ပုံ ၃ (ခ) တွင် ပြသထားသည်။ ရလဒ်များသည် ကျွန်ုပ်တို့၏ယခင်လေ့လာမှုနှင့် နှိုင်းယှဉ်နိုင်သည်။ သန့်စင်သောနှင့် လီဂန်းချည်နှောင်ထားသော ဆီလီကာအမှုန်များ၏ အပေါက်အရွယ်အစားများသည် အသီးသီး 310 Å နှင့် 241 Å ရှိပြီး ဇယား ၁ (ခ) တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း ဓာတုဗေဒပြုပြင်မွမ်းမံပြီးနောက် အပေါက်အရွယ်အစားသည် 69 Å လျော့နည်းသွားကြောင်း ညွှန်ပြပြီး ပုံ ၁ တွင် shift curve ကို ပြသထားသည်။ လက်ရှိလေ့လာမှုတွင် ဆီလီကာအမှုန်များ၏ သီးခြားမျက်နှာပြင်ဧရိယာမှာ 116 m2/g ဖြစ်ပြီး ကျွန်ုပ်တို့၏ယခင်လေ့လာမှု (124 m2/g) နှင့် နှိုင်းယှဉ်နိုင်သည်။ ဇယား ၁ (ခ) တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း ဓာတုဗေဒပြုပြင်မွမ်းမံပြီးနောက် ဆီလီကာအမှုန်များ၏ မျက်နှာပြင်ဧရိယာ (m2/g) သည်လည်း 116 m2/g မှ 105 m2/g အထိ လျော့နည်းသွားသည်။
stationary phase ၏ elemental analysis ရလဒ်များကို ဇယား ၂ တွင် ဖော်ပြထားပါသည်။ လက်ရှိ stationary phase ၏ carbon ပါဝင်မှုမှာ ၆.၃၅% ဖြစ်ပြီး ကျွန်ုပ်တို့၏ ယခင်လေ့လာမှုထက် နည်းပါးပါသည် (polystyrene နှင့် ဆက်စပ်နေသော silica အမှုန်အမွှားများ၊ ၇.၉၃%၃၅ နှင့် ၁၀.၂၁% အသီးသီး) ၄၂။ SP ပြင်ဆင်ရာတွင် styrene အပြင် phenylmaleimide methyl vinyl isocyanate (PCMP) နှင့် 4-hydroxy-TEMPO ကဲ့သို့သော polar ligands အချို့ကို အသုံးပြုထားသောကြောင့် လက်ရှိ stationary phase ၏ carbon ပါဝင်မှုကို အောက်တွင်ဖော်ပြထားပါသည်။ လက်ရှိ stationary phase တွင် နိုက်ထရိုဂျင်၏ အလေးချိန်ရာခိုင်နှုန်းမှာ ယခင်လေ့လာမှုများတွင် ၀.၁၇၃၅ နှင့် ၀.၈၅% ရှိပြီး ၄၂ နှိုင်းယှဉ်ပါက ၂.၂၁% ရှိပါသည်။ ဆိုလိုသည်မှာ လက်ရှိ stationary phase တွင် phenylmaleimide ကြောင့် နိုက်ထရိုဂျင်၏ အလေးချိန်ရာခိုင်နှုန်း မြင့်မားပါသည်။ အလားတူပင်၊ ထုတ်ကုန်များ (4) နှင့် (5) တွင် ကာဗွန်ပါဝင်မှု အသီးသီး 2.7% နှင့် 2.9% ရှိပြီး၊ နောက်ဆုံးထုတ်ကုန် (6) တွင် ဇယား 2 တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း ကာဗွန်ပါဝင်မှု 6.35% ရှိသည်။ အလေးချိန်ကျဆင်းမှုကို စမ်းသပ်ရန် PMP ၏ stationary phase တွင် Thermogravimetric analysis (TGA) ကို အသုံးပြုခဲ့ပြီး၊ TGA curve ကို ပုံ 4 တွင် ပြသထားသည်။ TGA curve သည် အလေးချိန်ကျဆင်းမှုကို 8.6% ပြသထားပြီး၊ ligands များတွင် C2 သာမက N2, O3 နှင့် H2 လည်း ပါဝင်သောကြောင့် ကာဗွန်ပါဝင်မှု (6.35%) နှင့် ကောင်းမွန်စွာ ကိုက်ညီပါသည်။
ligand phenylmaleimide-methylvinyl isocyanate ကို ၎င်း၏ polar phenylmaleimide နှင့် vinylisocyanate အုပ်စုများကြောင့် silica အမှုန်များ၏ မျက်နှာပြင်ကို ပြုပြင်မွမ်းမံရန် ရွေးချယ်ခဲ့သည်။ Vinyl isocyanate အုပ်စုများသည် အသက်ရှင်နေသော radical polymerization ဖြင့် styrene နှင့် ထပ်မံဓာတ်ပြုနိုင်သည်။ ဒုတိယအကြောင်းရင်းမှာ analyte နှင့် အသင့်အတင့် အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုရှိပြီး analyte နှင့် stationary phase အကြားတွင် ပြင်းထန်သော electrostatic အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှု မရှိသော အုပ်စုတစ်ခုကို ထည့်သွင်းရန်ဖြစ်သည်၊ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် phenylmaleimide moiety သည် ပုံမှန် pH တွင် virtual charge မရှိသောကြောင့်ဖြစ်သည်။ stationary phase ၏ polarity ကို styrene ၏ အကောင်းဆုံးပမာဏနှင့် free radical polymerization ၏ reaction time ဖြင့် ထိန်းချုပ်နိုင်သည်။ ဓာတ်ပြုမှု၏ နောက်ဆုံးအဆင့် (free radical polymerization) သည် stationary phase ၏ polarity ကို ပြောင်းလဲစေသောကြောင့် အရေးကြီးပါသည်။ ဤ stationary phase များတွင် ကာဗွန်ပါဝင်မှုကို စစ်ဆေးရန် elemental analysis ကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ styrene ပမာဏနှင့် reaction time တိုးမြှင့်ခြင်းသည် stationary phase ၏ carbon ပါဝင်မှုကို တိုးစေပြီး အပြန်အလှန်လည်း တိုးစေကြောင်း တွေ့ရှိခဲ့သည်။ styrene ၏ မတူညီသော အာရုံစူးစိုက်မှုဖြင့် ပြင်ဆင်ထားသော SP များတွင် မတူညီသော ကာဗွန်ဝန်များ ရှိသည်။ အလားတူပင်၊ ဤ stationary phase များကို stainless steel columns များပေါ်တွင် ထားရှိပြီး ၎င်းတို့၏ chromatographic ဝိသေသလက္ခဏာများ (ရွေးချယ်မှု၊ resolution၊ N တန်ဖိုး၊ စသည်) ကို စစ်ဆေးခဲ့သည်။ ဤစမ်းသပ်မှုများအပေါ် အခြေခံ၍ PMP stationary phase ပြင်ဆင်မှုအတွက် အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် ပြုလုပ်ထားသော composition ကို controlled polarity နှင့် analyte ကို ကောင်းမွန်သော ထိန်းသိမ်းမှုပေးစွမ်းနိုင်ရန် ရွေးချယ်ခဲ့သည်။
PMP ကော်လံကို peptides ရောစပ်ထားသော ပစ္စည်းငါးမျိုး (Gly-Tyr၊ Gly-Leu-Tyr၊ Gly-Gly-Tyr-Arg၊ Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg၊ leucine-enkephalin) တို့ကို မိုဘိုင်းအဆင့်၏ စွမ်းရည်ကို အသုံးပြု၍ အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ 80 µl/min စီးဆင်းမှုနှုန်းတွင် 60/40 (v/v) ACN/ရေ (0.1% TFA)။ အကောင်းဆုံး elution အခြေအနေများ (200,000 plates/m3) အောက်တွင်၊ ကော်လံတစ်ခုလျှင် theoretical plates (N) အရေအတွက် (100 × 1.8 mm) မှာ 20,000 ± 100 ဖြစ်သည်။ PMP ကော်လံသုံးခုအတွက် N တန်ဖိုးများကို ဇယား 3 တွင် ပြသထားပြီး chromatograms များကို ပုံ 5A တွင် ပြသထားသည်။ PMP ကော်လံပေါ်တွင် မြင့်မားသောစီးဆင်းမှုနှုန်း (700 µl/min) တွင် မြန်ဆန်သောခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုပြုလုပ်ခဲ့ပြီး၊ peptide ငါးခုသည် တစ်မိနစ်အတွင်း elevated ဖြစ်ပြီး၊ ကော်လံတစ်ခုလျှင် 13,500 ± 330 (100 x 1.8 mm အချင်း) ၏ အလွန်ကောင်းမွန်သော N တန်ဖိုးရှိပြီး၊ plates/m2 135,000 နှင့်ညီမျှသည် (ပုံ 5B)။ ပြန်လည်ထုတ်လုပ်နိုင်မှုကိုစမ်းသပ်ရန်အတွက် အရွယ်အစားတူကော်လံသုံးခု (အတွင်းပိုင်းအချင်း 100 x 1.8 mm) ကို PMP stationary phase ၏ အသုတ်သုံးမျိုးဖြင့် ဖြည့်သွင်းခဲ့သည်။ အကောင်းဆုံး elution အခြေအနေများ၊ သီအိုရီပြား N အရေအတွက်နှင့် ထိန်းသိမ်းမှုအချိန်ကို အသုံးပြု၍ ကော်လံတစ်ခုစီတွင် တူညီသောစမ်းသပ်အရောအနှောကို ခွဲထုတ်ခြင်းဖြင့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများကို ကော်လံတစ်ခုစီအတွက် မှတ်တမ်းတင်ခဲ့သည်။ PMP ကော်လံများအတွက် ပြန်လည်ထုတ်လုပ်နိုင်မှုကို ဒေတာများကို ဇယား 4 တွင် ပြသထားသည်။ ဇယား 3 တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း PMP ကော်လံ၏ ပြန်လည်ထုတ်လုပ်နိုင်မှုသည် %RSD တန်ဖိုးအလွန်နည်းသော %RSD တန်ဖိုးများနှင့် ကောင်းစွာဆက်စပ်နေသည်။
PMP ကော်လံ (B) နှင့် Ascentis Express RP-Amide ကော်လံ (A) တွင် peptide ရောစပ်မှုများကို ခွဲထုတ်ခြင်း၊ မိုဘိုင်းအဆင့် 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%)၊ PMP ကော်လံအတိုင်းအတာ (100 x 1.8 mm id)၊ ဒြပ်ပေါင်းများ၏ အရည်ပျော်အစီအစဉ် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း- 1 (Gly-Tyr)၊ 2 (Gly-Leu-Tyr)၊ 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg)၊ 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) နှင့် 5 (leucic acid enkephalin)။
HPLC မှတစ်ဆင့် လူ့သွေးရည်ကြည် အယ်လ်ဘူမင်၏ tryptic hydrolyzate ခွဲထုတ်မှုအတွက် PMP ကော်လံ (အတွင်းပိုင်းအချင်း 100 x 1.8 မီလီမီတာ) ကို အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ ပုံ 6 ရှိ chromatogram သည် နမူနာများကို အလွန်ကောင်းမွန်သော resolution ဖြင့် ကောင်းစွာခွဲထုတ်ထားကြောင်း ပြသထားသည်။ HSA ပျော်ရည်များကို 100 μl/min ၏ စီးဆင်းမှုနှုန်း၊ 70/30 acetonitrile/water ၏ မိုဘိုင်းအဆင့်နှင့် 0.1% TFA ကို အသုံးပြု၍ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခဲ့သည်။ HSA ၏ ဖြတ်တောက်မှုကို chromatogram (ပုံ 6) တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း peak 17 ခုအဖြစ် ပိုင်းခြားထားပြီး peptide 17 ခုနှင့် ကိုက်ညီသည်။ HSA hydrolyzate မှ တစ်ဦးချင်း peak များ၏ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်များကို တွက်ချက်ပြီး တန်ဖိုးများကို ဇယား 5 တွင် ပြသထားသည်။
HSA ထရစ်ပတစ် ဟိုက်ဒရိုလိုက်ဆိတ်များကို PMP ကော်လံ (အတွင်းပိုင်းအချင်း 100 x 1.8 မီလီမီတာ)၊ စီးဆင်းမှုနှုန်း (100 μl/မိနစ်)၊ မိုဘိုင်းအဆင့် 60/40 အက်စီတိုနိုက်ထရိုက်/ရေ နှင့် 0.1% TFA တို့တွင် ခွဲထုတ်ခဲ့သည်။
L သည် ကော်လံအလျား၊ η သည် မိုဘိုင်းအဆင့်၏ viscosity၊ ΔP သည် ကော်လံ၏ back pressure နှင့် u သည် မိုဘိုင်းအဆင့်၏ linear velocity ဖြစ်သည်။ PMP ကော်လံ၏ permeability မှာ 2.5 × 10–14 m2 ဖြစ်ပြီး၊ flow rate မှာ 25 µl/min ဖြစ်ပြီး 60/40 v/v ကို အသုံးပြုခဲ့သည်။ ACN/ရေ။ PMP ကော်လံ (ID 100 × 1.8 mm) ၏ permeability သည် ကျွန်ုပ်တို့၏ ယခင် Ref.34 လေ့လာမှုနှင့် ဆင်တူသည်။ အပေါ်ယံ porous အမှုန်များဖြင့် ပြည့်နေသော ကော်လံ၏ permeability မှာ 1.7×10 .6 µm၊ 5 µm အမှုန်များအတွက် 2.5×10-14 m2 ဖြစ်သည်။ ထို့ကြောင့် PMP အဆင့်၏ permeability သည် 5 μm အရွယ်အစားရှိသော core-shell အမှုန်များ၏ permeability နှင့် ဆင်တူသည်။
ဤနေရာတွင် Wx သည် ကလိုရိုဖောင်းဖြင့်ဖြည့်ထားသောကော်လံ၏ဒြပ်ထုဖြစ်ပြီး Wy သည် မီသနောဖြင့်ဖြည့်ထားသောကော်လံ၏ဒြပ်ထုဖြစ်ပြီး ρ သည် ပျော်ရည်၏သိပ်သည်းဆဖြစ်သည်။ မီသနော၏သိပ်သည်းဆ (ρ = 0.7866) နှင့် ကလိုရိုဖောင်း (ρ = 1.484)။ ဆီလီကာ-C18 အမှုန်ကော်လံ (100 × 1.8 mm ID)34 နှင့် ကျွန်ုပ်တို့ယခင်လေ့လာခဲ့သော C18-urea31 ကော်လံ၏ စုစုပေါင်း porosity မှာ အသီးသီး 0.63 နှင့် 0.55 ဖြစ်သည်။ ဆိုလိုသည်မှာ urea ligands ရှိနေခြင်းသည် stationary phase ၏ permeability ကို လျော့နည်းစေသည်။ အခြားတစ်ဖက်တွင်၊ PMP ကော်လံ၏ စုစုပေါင်း porosity (အတွင်းပိုင်းအချင်း 100 × 1.8 mm) မှာ 0.60 ဖြစ်သည်။ PMP ကော်လံများသည် C18 bound silica အမှုန်များဖြင့်ထုပ်ပိုးထားသောကော်လံများထက် permeability နည်းသည်၊ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် C18 အမျိုးအစား stationary phases များတွင် C18 ligands များသည် silica အမှုန်များနှင့် linear chains များဖြင့် ချိတ်ဆက်ထားပြီး polystyrene အမျိုးအစား stationary phases များတွင် အမှုန်များပတ်လည်တွင် အတော်လေးထူသော polymer တစ်ခုဖွဲ့စည်းထားသောကြောင့်ဖြစ်သည်။ အလွှာ A။ ပုံမှန်စမ်းသပ်မှုတစ်ခုတွင်၊ ကော်လံ porosity ကို အောက်ပါအတိုင်း တွက်ချက်သည်။
ပုံ ၇A၊ B တွင် PMP ကော်လံ (id 100 x 1.8 mm) နှင့် Ascentis Express RP-Amide ကော်လံ (id 100 x 1.8 mm) အတွက် Van Deemter ပုံများကို ပြသထားပြီး ကော်လံနှစ်ခုလုံးတွင် တူညီသော elution အခြေအနေများအောက်တွင် 60/40 ACN/H2O နှင့် 0 .1% TFA 20 µl/min မှ 800 µl/min အထိဖြစ်သည်။ PMP ကော်လံနှင့် Ascentis Express RP-Amide ကော်လံအတွက် အကောင်းဆုံးစီးဆင်းမှုနှုန်း (80 µl/min) တွင် အနည်းဆုံး HETP တန်ဖိုးများသည် အသီးသီး 2.6 µm နှင့် 3.9 µm ဖြစ်သည်။ HETP တန်ဖိုးများက PMP ကော်လံ (100 x 1.8 mm id) ၏ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်သည် စီးပွားဖြစ်ရရှိနိုင်သော Ascentis Express RP-Amide ကော်လံ (100 x 1.8 mm id) ထက် များစွာပိုမိုမြင့်မားကြောင်း ပြသသည်။ ပုံ ၇(က) ရှိ van Deemter ဂရပ်က ကျွန်ုပ်တို့၏ ယခင်လေ့လာမှုနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက စီးဆင်းမှုတိုးလာသည်နှင့်အမျှ N တန်ဖိုးကျဆင်းမှုသည် သိသိသာသာမြင့်မားခြင်းမရှိကြောင်း ပြသထားသည်။ Ascentis Express RP-Amide ကော်လံနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက PMP ကော်လံ (id 100 × 1.8 mm) ၏ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည် ပိုမိုမြင့်မားခြင်းသည် အမှုန်ပုံသဏ္ဍာန်နှင့် အရွယ်အစား တိုးတက်လာခြင်းနှင့် လက်ရှိလုပ်ငန်း၃၄ တွင် အသုံးပြုသည့် ခေတ်မီသော ကော်လံထုပ်ပိုးခြင်းလုပ်ထုံးလုပ်နည်းအပေါ် အခြေခံသည်။
(က) 0.1% TFA ရှိသော 60/40 ACN/H2O တွင် PMP ကော်လံ (id 100 x 1.8 mm) ပေါ်တွင် ရရှိထားသော Van Deemter plot (HETP vs. mobile phase linear velocity)။ (ခ) 0.1% TFA ရှိသော 60/40 ACN/H2O တွင် Ascentis Express RP-Amide ကော်လံ (id 100 x 1.8 mm) ပေါ်တွင် ရရှိထားသော Van Deemter plot (HETP vs. mobile phase linear velocity)။
မြင့်မားသောစွမ်းဆောင်ရည်ရှိသော အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီတွင် ဓာတုပက်ပတိုက်များနှင့် လူ့သွေးရည်ကြည်အယ်လ်ဘူမင် (HSA) ၏ ထရစ်ပတစ်ဟိုက်ဒရိုလိုက်ဇိတ်တို့ ရောနှောထားသော အရည်ကို ခွဲထုတ်ရန်အတွက် အပြန်အလှန်ဖွဲ့စည်းထားသော ပိုလာစလီနင်၏ ပိုလာစလီနင်တည်ငြိမ်သောအဆင့်ကို ပြင်ဆင်ပြီး အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ ပက်ပတိုက်အရောအနှောများအတွက် PMP ကော်လံများ၏ ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီစွမ်းဆောင်ရည်သည် ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်နှင့် ပြတ်သားမှုအရ အလွန်ကောင်းမွန်ပါသည်။ PMP ကော်လံများ၏ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည် တိုးတက်လာခြင်းသည် ဆီလီကာအမှုန်အရွယ်အစားနှင့် အပေါက်အရွယ်အစား၊ ထိန်းချုပ်ထားသော တည်ငြိမ်သောအဆင့်များ၏ ပေါင်းစပ်မှုနှင့် ရှုပ်ထွေးသောကော်လံထုပ်ပိုးပစ္စည်းများကဲ့သို့သော အကြောင်းရင်းများစွာကြောင့်ဖြစ်သည်။ ခွဲထုတ်မှုစွမ်းဆောင်ရည်မြင့်မားခြင်းအပြင်၊ ဤတည်ငြိမ်သောအဆင့်၏ နောက်ထပ်အားသာချက်တစ်ခုမှာ မြင့်မားသောစီးဆင်းမှုနှုန်းတွင် ကော်လံနောက်ကျောဖိအားနည်းပါးခြင်းဖြစ်သည်။ PMP ကော်လံများသည် ပြန်လည်ထုတ်လုပ်နိုင်မှုနှုန်းမြင့်မားပြီး ပက်ပတိုက်များ၏ ရောနှောမှုများနှင့် ပရိုတင်းအမျိုးမျိုး၏ ထရစ်ပတစ်ချေဖျက်ခြင်းကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရန် အသုံးပြုနိုင်သည်။ ကျွန်ုပ်တို့သည် ဤကော်လံကို သဘာဝထုတ်ကုန်များမှ ဇီဝတက်ကြွဒြပ်ပေါင်းများ၊ ဆေးဖက်ဝင်အပင်များနှင့် မှိုများမှ ထုတ်ယူထားသော အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီတွင် ခွဲထုတ်ရန်အတွက် အသုံးပြုရန် ရည်ရွယ်ပါသည်။ အနာဂတ်တွင်၊ PMP ကော်လံများကို ပရိုတင်းများနှင့် monoclonal antibodies များ ခွဲထုတ်ရန်အတွက်လည်း အကဲဖြတ်မည်ဖြစ်သည်။
Field၊ JK၊ Euerby၊ MR၊ Lau၊ J.၊ Thøgersen၊ H. & Petersson၊ P. ပြောင်းပြန်အဆင့် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ ပက်ပတိုက် ခွဲထုတ်ခြင်းစနစ်များကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခြင်း အပိုင်း I: ကော်လံ လက္ခဏာရပ်ဖော်ပြခြင်းအတွက် ပရိုတိုကောတစ်ခု တီထွင်ခြင်း။ Field၊ JK၊ Euerby၊ MR၊ Lau၊ J.၊ Thøgersen၊ H. & Petersson၊ P. ပြောင်းပြန်အဆင့် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ ပက်ပတိုက် ခွဲထုတ်ခြင်းစနစ်များကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခြင်း အပိုင်း I: ကော်လံလက္ခဏာရပ်ဖော်ပြခြင်းအတွက် ပရိုတိုကောတစ်ခု တီထွင်ခြင်း။Field၊ JK၊ Owerby၊ MR၊ Lau၊ J.၊ Togersen၊ H. နှင့် Petersson၊ P. Reverse-Phase Chromatography ဖြင့် Peptide ခွဲထုတ်ခြင်းစနစ်များကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခြင်း၊ အပိုင်း I: Column Characterization အတွက် Protocol တစ်ခု တီထွင်ခြင်း။ Field၊ JK၊ Euerby၊ MR၊ Lau၊ J.၊ Thøgersen၊ H. & Petersson၊ P. ပြောင်းပြန်အဆင့်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ ပက်ပတိုက်ခွဲထုတ်ခြင်းစနစ်များကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခြင်း အပိုင်း I: ကော်လံဝိသေသလက္ခဏာများအတွက် ပရိုတိုကောတစ်ခု တီထွင်ခြင်း။ Field၊ JK၊ Euerby၊ MR၊ Lau၊ J.၊ Thøgersen၊ H. & Petersson၊ P. ပြောင်းပြန်အဆင့်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ ပက်ပတိုက်ခွဲထုတ်ခြင်းစနစ်များကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခြင်း အပိုင်း I: ကော်လံဝိသေသလက္ခဏာများအတွက် ပရိုတိုကောတစ်ခု တီထွင်ခြင်း။Field၊ JK၊ Owerby၊ MR၊ Lau၊ J.၊ Togersen၊ H. နှင့် Petersson၊ P. Reverse-Phase Chromatography ဖြင့် Peptide ခွဲထုတ်ခြင်းစနစ်များကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခြင်း၊ အပိုင်း I: Column Characterization အတွက် Protocol တစ်ခု တီထွင်ခြင်း။J.色谱法။ 1603၊ 113-129။ https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038(2019)။
Gomez၊ B. et al. ကူးစက်ရောဂါများကို ကုသရန်အတွက် တိုးတက်ကောင်းမွန်သော တက်ကြွသော peptide များ ဖန်တီးရန် နည်းလမ်းများ။ ဇီဝနည်းပညာ။ Achievements 36(2), 415–429။ https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018)။
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ကုထုံးဆိုင်ရာ peptides များ- သိပ္ပံနှင့် ဈေးကွက်။ Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ကုထုံးဆိုင်ရာ peptides များ- သိပ္ပံနှင့် ဈေးကွက်။Vliege P, Lisowski V, Martinez J နှင့် Chreschatyski M. ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ကုသသော peptides များ- သိပ္ပံနှင့် ဈေးကွက်။Vliege P, Lisowski V, Martinez J နှင့် Khreschatsky M. ဓာတုကုထုံးဆိုင်ရာ peptides များ- သိပ္ပံနှင့်ဈေးကွက်။ ဆေးဝါးရှာဖွေတွေ့ရှိမှု။ Today 15 (1–2), 40–56။ https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010)။
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. အဆင့်မြင့် proteomic အရည် chromatography။ Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. အဆင့်မြင့် proteomic အရည် chromatography။F., Smith RD နှင့် Shen Yu ကိုကြည့်ပါ။ အဆင့်မြင့် proteomic liquid chromatography။ Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. 高级蛋白质组液相色谱။ Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. အဆင့်မြင့် ပရိုတင်းဖွဲ့စည်းမှု 液相色谱။F., Smith RD နှင့် Shen Yu ကိုကြည့်ပါ။ အဆင့်မြင့် proteomic liquid chromatography။J. Chromatography။ A 1261, 78–90 (2012)။
Liu, W. et al. အဆင့်မြင့်အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ-မာဆက်စပက်ထရိုမက်ထရီသည် ကျယ်ပြန့်သောအခြေခံဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာပညာနှင့်ပရိုတီအိုမစ်စ်တို့ကို ပေါင်းစပ်နိုင်သည်။ anus. Chim. Acta 1069, 89–97 (2019).
Chesnut, SM & Salisbury, JJ ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတွင် UHPLC ၏ အခန်းကဏ္ဍ။ Chesnut, SM & Salisbury, JJ ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတွင် UHPLC ၏ အခန်းကဏ္ဍ။Chesnut, SM နှင့် Salisbury, JJ ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတွင် UHPLC ၏ အခန်းကဏ္ဍ။Chesnut, SM နှင့် Salisbury, JJ ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတွင် UHPLC ၏ အခန်းကဏ္ဍ။ J. Sept Science. 30(8), 1183–1190 (2007)။
Wu၊ N. & Clausen၊ AM လျင်မြန်စွာ ခွဲထုတ်ရန်အတွက် အလွန်မြင့်မားသောဖိအား အရည် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခြေခံနှင့် လက်တွေ့ကျသော ရှုထောင့်များ။ Wu၊ N. & Clausen၊ AM လျင်မြန်စွာ ခွဲထုတ်ရန်အတွက် အလွန်မြင့်မားသောဖိအား အရည် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခြေခံနှင့် လက်တွေ့ကျသော ရှုထောင့်များ။Wu၊ N. နှင့် Clausen၊ AM လျင်မြန်စွာခွဲထုတ်ရန်အတွက် မြင့်မားသောဖိအားရှိသော အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခြေခံနှင့် လက်တွေ့ကျသော ရှုထောင့်များ။ Wu, N. & Clausen, AM 用于快速分离的超高压液相色谱的基础和实践方面။ Wu၊ N. & Clausen၊ AM လျင်မြန်စွာခွဲထုတ်ရန်အတွက် အလွန်မြင့်မားသောဖိအားရှိသော အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခြေခံနှင့် လက်တွေ့ကျသော ရှုထောင့်များ။Wu၊ N. နှင့် Clausen၊ AM လျင်မြန်စွာခွဲထုတ်ရန်အတွက် မြင့်မားသောဖိအားရှိသော အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခြေခံနှင့် လက်တွေ့ကျသော ရှုထောင့်များ။J. Sept. Science. 30(8), 1167–1182။ https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (၂၀၀၇)။
Wren၊ SA & Tchelitcheff၊ P. ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတွင် အလွန်စွမ်းဆောင်ရည်မြင့် အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီကို အသုံးပြုခြင်း။ Wren၊ SA & Tchelitcheff၊ P. ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတွင် အလွန်စွမ်းဆောင်ရည်မြင့် အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီကို အသုံးပြုခြင်း။Ren၊ SA နှင့် Chelischeff၊ P. ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတွင် အလွန်မြင့်မားသောစွမ်းဆောင်ရည်ရှိသော အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီကို အသုံးပြုခြင်း။ Wren၊ SA နှင့် Tchelitcheff၊ P. 超高效液相色谱在药物开发中的应用။ Wren၊ SA နှင့် Tchelitcheff၊ P.Ren၊ SA နှင့် Chelischeff၊ P. ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတွင် အလွန်စွမ်းဆောင်ရည်မြင့် အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ အသုံးချမှု။J. Chromatography. 1119(1-2), 140-146. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (၂၀၀၆)။
Gu၊ H. et al. အင်တာရိုဗိုင်းရပ်စ် ၇၁ ကို ထိရောက်စွာ သန့်စင်ပေးရန်အတွက် အတွင်းပိုင်းအဆင့်မြင့်မားသော ဆီတွင်ပါဝင်သော ရေတွင်ပါဝင်သော emulsion မှရရှိသော monolithic macroporous hydrogel။ ဓာတုဗေဒ။ ပရောဂျက်။ ဂျာနယ် ၄၀၁၊ ၁၂၆၀၅၁ (၂၀၂၀)။
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA ပရိုတီအိုမစ်စ်တွင် အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခန်းကဏ္ဍ။ Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA ပရိုတီအိုမစ်စ်တွင် အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခန်းကဏ္ဍ။Shi, Y., Xiang, R., Horvath, C. နှင့် Wilkins, JA ပရိုတီအိုမစ်စ်တွင် အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခန်းကဏ္ဍ။ Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA 液相色谱在蛋白质组学中的作用。 Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JAShi, Y., Xiang, R., Horvath, C. နှင့် Wilkins, JA ပရိုတီအိုမစ်စ်တွင် အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ၏ အခန်းကဏ္ဍ။J. ခရိုမတိုဂရပ်ဖီ။ A 1053 (1-2), 27-36 (2004)။
Fekete, S., Vutey, J.-L. & Guillarme၊ D. ကုထုံးဆိုင်ရာ peptides နှင့် ပရိုတင်းများ၏ ပြောင်းပြန်အဆင့် အရည် chromatographic ခွဲထုတ်ခြင်းဆိုင်ရာ ခေတ်ရေစီးကြောင်းအသစ်များ- သီအိုရီနှင့် အသုံးချမှုများ။ & Guillarme၊ D. ကုထုံးဆိုင်ရာ peptides နှင့် ပရိုတင်းများ၏ ပြောင်းပြန်အဆင့် အရည် chromatographic ခွဲထုတ်ခြင်းဆိုင်ရာ ခေတ်ရေစီးကြောင်းအသစ်များ- သီအိုရီနှင့် အသုံးချမှုများ။ & Guillarme, D. Новые тенденции в разделении терапевтических пептидов и белков с помощью жидкостной громатой громат фазой: теория и приложения။ & Guillarme၊ D. ပြောင်းပြန်အဆင့်အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီဖြင့် ကုထုံးဆိုင်ရာ ပက်ပတိုက်များနှင့် ပရိုတင်းများကို ခွဲထုတ်ခြင်းဆိုင်ရာ ခေတ်ရေစီးကြောင်းအသစ်များ- သီအိုရီနှင့် အသုံးချမှုများ။ & Guillarme, D. 治疗性肽和蛋白质的反相液相色谱分离的新趋势：理论和应用။ & ဂီလာမီ၊ ဒီ။နှင့် Guillarmé၊ D. ပြောင်းပြန်အဆင့်အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီဖြင့် ကုထုံးဆိုင်ရာ peptides နှင့် proteins များကို ခွဲထုတ်ခြင်းဆိုင်ရာ ခေတ်ရေစီးကြောင်းအသစ်များ- သီအိုရီနှင့် အသုံးချမှုများ။J. Pharm. ဇီဝဆေးပညာသိပ္ပံ။ anus. 69, 9–27 (2012)။
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC ပထမနှင့် ဒုတိယခွဲခြားမှုအတိုင်းအတာများတွင် မတူညီသော pH ဖြင့် RP-RP-HPLC စနစ်ကို အသုံးပြု၍ peptides များကို နှစ်ဘက်မြင်ခွဲထုတ်ခြင်း။ Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC ပထမနှင့် ဒုတိယခွဲခြားမှုအတိုင်းအတာများတွင် မတူညီသော pH ဖြင့် RP-RP-HPLC စနစ်ကို အသုံးပြု၍ peptides များကို နှစ်ဘက်မြင်ခွဲထုတ်ခြင်း။Gilar M., Olivova P., Dali AE နှင့် Gebler JK ပထမနှင့် ဒုတိယခွဲထုတ်မှုအတိုင်းအတာများတွင် မတူညီသော pH ဖြင့် RP-RP-HPLC စနစ်ကို အသုံးပြု၍ peptides များကို နှစ်ဘက်မြင်ခွဲထုတ်ခြင်း။Gilar M., Olivova P., Dali AE နှင့် Gebler JK RP-RP-HPLC စနစ်ကို အသုံးပြု၍ ပထမနှင့် ဒုတိယခွဲထုတ်မှု အတိုင်းအတာများတွင် မတူညီသော pH တန်ဖိုးများကို အသုံးပြု၍ peptide များကို နှစ်ဘက်မြင်ခွဲထုတ်ခြင်း။ J. Sept Science. 28 (14), 1694–1703 (2005).
Fellitti၊ S. et al. 2 µm ထက်သေးငယ်သော အပြည့်အဝ porous နှင့် superficially porous C18 အမှုန်များဖြင့် ပြည့်နှက်နေသော high-performance chromatography columns များ၏ mass transfer နှင့် kinetic ဝိသေသလက္ခဏာများကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခြင်း။ J. Sept Science. 43 (9–10), 1737–1745 (2020).
Piovesana၊ S. et al. အပင်ဇီဝတက်ကြွ peptide များကို ခွဲထုတ်ခြင်း၊ ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်းနှင့် အတည်ပြုခြင်းတွင် လတ်တလောခေတ်ရေစီးကြောင်းများနှင့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုဆိုင်ရာစိန်ခေါ်မှုများ။ anus. Creature analytical. Chemical. 410(15), 3425-3444. https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
Muller၊ JB et al. အသက်၏နိုင်ငံတော်၏ ပရိုတီယိုမစ်ရှုခင်း။ Nature 582 (7813)၊ 592–596။ https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (၂၀၂၀)။
De Luca၊ K. et al. ပြင်ဆင်မှုအရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီဖြင့် ကုထုံးဆိုင်ရာ peptide များကို နောက်ဆက်တွဲကုသခြင်း။ မော်လီကျူးများ (ဘေဆယ်၊ ဆွစ်ဇာလန်) 26(15)၊ 4688 (2021)။
Yang၊ Y. & Geng၊ X။ ရောနှောမုဒ်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီနှင့် ဇီဝပိုလီမာများအတွက် ၎င်း၏အသုံးချမှုများ။ Yang၊ Y. & Geng၊ X။ ရောနှောမုဒ်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီနှင့် ဇီဝပိုလီမာများအတွက် ၎င်း၏အသုံးချမှုများ။Yang၊ Yu။ နှင့် Geng၊ X။ ရောနှောမုဒ်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီနှင့် ဇီဝပိုလီမာများတွင် ၎င်း၏အသုံးချမှု။ Yang, Y. & Geng, X. 混合模式色谱及其在生物聚合物中的应用။ Yang၊ Y. & Geng၊ X။ ရောနှောမုဒ်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီနှင့် ဇီဝပိုလီမာများတွင် ၎င်း၏အသုံးချမှု။Yang၊ Yu နှင့် Gene၊ X။ ရောနှောမုဒ်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီနှင့် ဇီဝပိုလီမာများအတွက် ၎င်း၏အသုံးချမှု။J. Chromatography။ A 1218(49)၊ 8813–8825 (2011)။