Nature.com ପରିଦର୍ଶନ କରିବା ପାଇଁ ଆପଣଙ୍କୁ ଧନ୍ୟବାଦ। ଆପଣ ସୀମିତ CSS ସମର୍ଥନ ସହିତ ଏକ ବ୍ରାଉଜର ସଂସ୍କରଣ ବ୍ୟବହାର କରୁଛନ୍ତି। ସର୍ବୋତ୍ତମ ଅଭିଜ୍ଞତା ପାଇଁ, ଆମେ ଆପଣଙ୍କୁ ଏକ ଅପଡେଟ୍ ବ୍ରାଉଜର ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ସୁପାରିଶ କରୁଛୁ (କିମ୍ବା ଇଣ୍ଟରନେଟ୍ ଏକ୍ସପ୍ଲୋରରରେ ସୁସଙ୍ଗତତା ମୋଡ୍ ଅକ୍ଷମ କରନ୍ତୁ)। ଏହା ସହିତ, ନିରନ୍ତର ସମର୍ଥନ ସୁନିଶ୍ଚିତ କରିବା ପାଇଁ, ଆମେ ଷ୍ଟାଇଲ୍ ଏବଂ ଜାଭାସ୍କ୍ରିପ୍ଟ ବିନା ସାଇଟ୍ ଦେଖାଉଛୁ।
ଏକାଥରେ ତିନୋଟି ସ୍ଲାଇଡର ଏକ କାରୋସେଲ ପ୍ରଦର୍ଶିତ କରେ। ଗୋଟିଏ ସମୟରେ ତିନୋଟି ସ୍ଲାଇଡ ଦେଇ ଯିବା ପାଇଁ ପୂର୍ବ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ବଟନ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ, କିମ୍ବା ଗୋଟିଏ ସମୟରେ ତିନୋଟି ସ୍ଲାଇଡ ଦେଇ ଯିବା ପାଇଁ ଶେଷରେ ଥିବା ସ୍ଲାଇଡର ବଟନ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ।
ସୋଲ-ଜେଲ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ୱାରା ଛିଦ୍ରଯୁକ୍ତ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ ପ୍ରଶସ୍ତ-ଛିଦ୍ର କଣିକା ପାଇବା ପାଇଁ କିଛି ପରିବର୍ତ୍ତନ ସହିତ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ N-ଫିନାଇଲମାଲେଇମାଇଡ-ମିଥାଇଲଭିନାଇଲ ଆଇସୋସାଇନେଟ (PMI) ଏବଂ ଷ୍ଟାଇରିନ ସହିତ ରିଭର୍ସ ଚେନ୍ ଟ୍ରାନ୍ସଫର-ଫ୍ରାଗମେଣ୍ଟେସନ (RAFT) ପଲିମରାଇଜେସନ ମାଧ୍ୟମରେ N-ଫିନାଇଲମାଲେଇମାଇଡ ଇଣ୍ଟରକଲେଟେଡ୍ ପଲିମାଇଡ ଉତ୍ପାଦନ କରିବା ପାଇଁ ଡେରିଭେଟାଇଜ କରାଯାଇଥିଲା। ଷ୍ଟାଇରିନ (PMP) ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ। ସଂକୀର୍ଣ୍ଣ ବୋର୍ ଷ୍ଟେନଲେସ ଷ୍ଟିଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ (100 × 1.8 ମିମି ଭିତର ବ୍ୟାସ) ଏକ ସ୍ଲରି ପ୍ୟାକିଂ ସହିତ ପ୍ୟାକ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ପାଞ୍ଚଟି ପେପ୍ଟାଇଡ (ଗ୍ଲାଇ-ଟାୟାର, ଗ୍ଲାଇ-ଲେଉ-ଟାୟାର, ଗ୍ଲାଇ-ଗ୍ଲାଇ-ଟାୟାର-ଆର୍ଗ, ଟାଇର-ଇଲେ-ଗ୍ଲାଇ-ସେର-ଆର୍ଗ, ଲିଉ ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ଏନକେଫାଲିନ୍) ଏବଂ ମାନବ ସେରମ୍ ଆଲବୁମିନ୍ (HAS) ର ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜେଟ୍ ନେଇ ଗଠିତ ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ପେପ୍ଟାଇଡର ମିଶ୍ରଣକୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ PMP ସ୍ତମ୍ଭର କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା। ସର୍ବୋତ୍ତମ ନିର୍ଗମନ ପରିସ୍ଥିତିରେ, ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ ମିଶ୍ରଣ ସହିତ ପ୍ଲେଟର ସୈଦ୍ଧାନ୍ତିକ ସଂଖ୍ୟା 280,000 ପ୍ଲେଟ୍/ବର୍ଗମିଟରରେ ପହଞ୍ଚିଥିଲା। ବିକଶିତ ସ୍ତମ୍ଭର ପୃଥକୀକରଣ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତାକୁ ବାଣିଜ୍ୟିକ ଆସେଣ୍ଟିସ୍ ଏକ୍ସପ୍ରେସ୍ RP-ଆମାଇଡ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ସହିତ ତୁଳନା କରି, ଏହା ଦେଖାଗଲା ଯେ ପୃଥକୀକରଣ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ଏବଂ ସମାଧାନ ଦୃଷ୍ଟିରୁ PMP ସ୍ତମ୍ଭର ପୃଥକୀକରଣ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ବାଣିଜ୍ୟିକ ସ୍ତମ୍ଭ ଅପେକ୍ଷା ଉତ୍କୃଷ୍ଟ ଥିଲା।
ସାମ୍ପ୍ରତିକ ବର୍ଷଗୁଡ଼ିକରେ ବଜାର ଅଂଶରେ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ବୃଦ୍ଧି ସହିତ ଜୈବ ଔଷଧ ଶିଳ୍ପ ଏକ ବିସ୍ତାରିତ ବିଶ୍ୱ ବଜାରରେ ପରିଣତ ହୋଇଛି। ଜୈବ ଔଷଧ ଶିଳ୍ପର ବିସ୍ଫୋରକ ବୃଦ୍ଧି ସହିତ 1,2,3 ପେପଟାଇଡ୍ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣର ଏକ ବଡ଼ ଆବଶ୍ୟକତା ରହିଛି। ଲକ୍ଷ୍ୟ ପେପଟାଇଡ୍ ବ୍ୟତୀତ, ପେପଟାଇଡ୍ ସଂଶ୍ଳେଷଣ ସମୟରେ ବିଭିନ୍ନ ଅଶୁଦ୍ଧତା ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ, ତେଣୁ ପେପଟାଇଡ୍ ର ଇଚ୍ଛିତ ଶୁଦ୍ଧତା ପାଇବା ପାଇଁ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ଶୁଦ୍ଧତା ଆବଶ୍ୟକ। ଗୋଟିଏ ନମୁନାରେ ବହୁ ସଂଖ୍ୟକ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଚିହ୍ନଟଯୋଗ୍ୟ ପ୍ରଜାତି ଉପସ୍ଥିତ ଥିବାରୁ ଶରୀର ତରଳ, ଟିସୁ ଏବଂ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ପ୍ରୋଟିନ୍‌ର ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏବଂ ଚରିତ୍ରୀକରଣ ଏକ ଅତ୍ୟନ୍ତ ଚ୍ୟାଲେଞ୍ଜିଂ କାର୍ଯ୍ୟ। ଯଦିଓ ପେପଟାଇଡ୍ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍‌କୁ କ୍ରମିକ କରିବା ପାଇଁ ଗଣ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି ଏକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଉପକରଣ, ଯଦି ଏପରି ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ସିଧାସଳଖ ଗଣ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମିଟରରେ ପ୍ରବେଶ କରାଯାଏ, ତେବେ ପୃଥକୀକରଣ ଅସନ୍ତୁଷ୍ଟଜନକ ହେବ। MS ବିଶ୍ଳେଷଣ ପୂର୍ବରୁ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି (LC) କରି ଏହି ସମସ୍ୟାର ସମାଧାନ କରାଯାଇପାରିବ, ଯାହା ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସମୟରେ ଗଣ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମିଟରରେ ପ୍ରବେଶ କରୁଥିବା ବିଶ୍ଳେଷଣଗୁଡ଼ିକର ପରିମାଣକୁ ହ୍ରାସ କରିବ 4,5,6। ଏହା ସହିତ, ବିଶ୍ଳେଷଣକାରୀମାନେ ତରଳ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପୃଥକୀକରଣ ସମୟରେ ଏକ ସଂକୀର୍ଣ୍ଣ ଅଞ୍ଚଳରେ କେନ୍ଦ୍ରିତ ହୋଇପାରିବେ, ଯାହା ଫଳରେ ଏହି ବିଶ୍ଳେଷଣକାରୀମାନେ କେନ୍ଦ୍ରିତ ହୋଇପାରିବେ ଏବଂ MS ଚିହ୍ନଟର ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ବୃଦ୍ଧି କରିପାରିବେ। ଗତ ଦଶନ୍ଧି ମଧ୍ୟରେ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି (LC) ଯଥେଷ୍ଟ ଅଗ୍ରଗତି କରିଛି ଏବଂ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଏକ ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ପଦ୍ଧତି ହୋଇସାରିଛି7,8,9,10।
ଅକ୍ଟାଡେସିଲ୍-ପରିବର୍ତ୍ତିତ ସିଲିକା (ODS) କୁ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରି ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ମିଶ୍ରଣକୁ ବିଶୁଦ୍ଧ ଏବଂ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ ରିଭର୍ସ-ଫେଜ୍ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି (RP-LC) ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। ତଥାପି, ସେମାନଙ୍କର ଜଟିଳ ଗଠନ ଏବଂ ଆମ୍ଫୋଟେରିକ୍ ପ୍ରକୃତି ଯୋଗୁଁ, 14,15 RP ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍‌ର ଏକ ସନ୍ତୋଷଜନକ ପୃଥକୀକରଣ ପ୍ରଦାନ କରିପାରିବ ନାହିଁ। ତେଣୁ, ଧ୍ରୁବୀୟ ଏବଂ ଅଣ-ଧ୍ରୁବୀୟ ଖଣ୍ଡ ସହିତ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍‌ର ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଏହି ବିଶ୍ଳେଷଣଗୁଡ଼ିକୁ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଏବଂ ସଂରକ୍ଷଣ କରିବା ପାଇଁ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର ଭାବରେ ଡିଜାଇନ୍ କରାଯାଇଥିବା ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଆବଶ୍ୟକ। ମିଶ୍ରିତ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି, ଯାହା ମଲ୍ଟିମୋଡାଲ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ପ୍ରଦାନ କରେ, ପେପ୍ଟାଇଡ୍, ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଜଟିଳ ମିଶ୍ରଣକୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ RP-LC ର ଏକ ବିକଳ୍ପ ହୋଇପାରେ। ଅନେକ ମିଶ୍ରିତ ପ୍ରକାର ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ 17,18,19,20,21 କୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ ଏହି ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ଧ୍ରୁବୀୟ ଏବଂ ଅଣ-ଧ୍ରୁବୀୟ ଗୋଷ୍ଠୀର ଉପସ୍ଥିତି ଯୋଗୁଁ, ମିଶ୍ରିତ ମୋଡ୍ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, ପୋଲାର ଇଣ୍ଟରକ୍ୟାଲେସନ୍/RPLC) ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ 22,23,24,25,26,27,28 ର ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ। , ସହ-ଭାଲଣ୍ଟ ଭାବରେ ବନ୍ଧିତ ଧ୍ରୁବୀୟ ଗୋଷ୍ଠୀ ସହିତ ଧ୍ରୁବୀୟ ଅନ୍ତର୍କ୍ୟାଲେଟେଡ୍ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟଗୁଡ଼ିକ ଧ୍ରୁବୀୟ ଏବଂ ଅଣ-ଧ୍ରୁବୀୟ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଭଲ ପୃଥକୀକରଣ କ୍ଷମତା ଏବଂ ଅନନ୍ୟ ଚୟନଶୀଳତା ଦେଖାଏ କାରଣ ପୃଥକୀକରଣ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏବଂ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ ମଲ୍ଟିମୋଡାଲ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା 29,30,31,32। ସମ୍ପ୍ରତି, ଝାଙ୍ଗ୍ ଏଟ୍ ଅଲ୍ 30 ପଲିମାଇନ୍‌ର ବେହେନିଲ୍-ଟର୍ମିନେଟେଡ୍ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ହାସଲ କରିଛନ୍ତି ଏବଂ ସଫଳତାର ସହିତ ହାଇଡ୍ରୋକାର୍ବନ, ଆଣ୍ଟିଡିପ୍ରେସେଣ୍ଟସ୍, ଫ୍ଲାଭୋନଏଡ୍ସ, ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓସାଇଡ୍ସ, ଏଷ୍ଟ୍ରୋଜେନ୍ ଏବଂ କିଛି ଅନ୍ୟ ବିଶ୍ଳେଷଣଗୁଡ଼ିକୁ ପୃଥକ କରିଛନ୍ତି। ଧ୍ରୁବୀୟ ଏମ୍ବେଡେଡ୍ ସ୍ଥିର ସାମଗ୍ରୀରେ ଧ୍ରୁବୀୟ ଏବଂ ଅଣ-ଧ୍ରୁବୀୟ ଉଭୟ ଗୋଷ୍ଠୀ ଅଛି, ତେଣୁ ଏହାକୁ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍‌କୁ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଏବଂ ହାଇଡ୍ରୋଫିଲିକ୍ ଅଂଶରେ ପୃଥକ କରିବାକୁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ। ପୋଲାର ଇନଲାଇନ୍ ସ୍ତମ୍ଭ (ଯଥା, amide ଇନଲାଇନ୍ ସହିତ C18 ସ୍ତମ୍ଭ) ବାଣିଜ୍ୟ ନାମ Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ ଅଧୀନରେ ଉପଲବ୍ଧ, କିନ୍ତୁ ଏହି ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକ କେବଳ amine 33 ର ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଛି।
ବର୍ତ୍ତମାନର ଅଧ୍ୟୟନରେ, ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ପୃଥକୀକରଣ ଏବଂ ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ HSA କ୍ଲିଭେଜ୍ ପାଇଁ ଏକ ପୋଲାର ଏମ୍ବେଡିଂ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ (N-ଫିନାଇଲ୍‌ମାଲେଇମାଇଡ୍, ଏମ୍ବେଡିଂ ପଲିଷ୍ଟାଇରିନ୍) ପ୍ରସ୍ତୁତ ଏବଂ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା। ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବା ପାଇଁ ନିମ୍ନଲିଖିତ ରଣନୀତି ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରସ୍ତୁତି ଯୋଜନା 31, 34, 35, 36, 37, 38, 39 ରେ କିଛି ପରିବର୍ତ୍ତନ ସହିତ, ଆମର ପୂର୍ବ ପ୍ରକାଶନରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଅନୁସାରେ ଛିଦ୍ରଯୁକ୍ତ ସିଲିକା କଣିକା ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଥିଲା। ୟୁରିଆ, ପଲିଥିଲିନ୍ ଗ୍ଲାଇକଲ୍ (PEG), TMOS ଏବଂ ଜଳୀୟ-ଆସେଟିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ଅନୁପାତକୁ ବଡ଼ ଛିଦ୍ର ଆକାର ସହିତ ସିଲିକା କଣିକା ପାଇବା ପାଇଁ ସଜାଡ଼ି ଦିଆଯାଇଥିଲା। ଦ୍ୱିତୀୟତଃ, ଏକ ନୂତନ ଫିନାଇଲ୍‌ମାଲେଇମାଇଡ୍-ମିଥାଇଲ୍‌ଭିନାଇଲ୍‌ ଆଇସୋସାଇନାଟ୍ ଲିଗାଣ୍ଡ ସଂଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏହାର ଡେରିଭେଟାଇଜ୍‌ଡ୍ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ ପୋଲାର ଏମ୍ବେଡିଂ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରାପ୍ତ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟକୁ ଏକ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍‌ଡ୍ ପ୍ୟାକିଂ ଯୋଜନା ଅନୁଯାୟୀ ଏକ ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍‌ ସ୍ତମ୍ଭ (ଭିତର ବ୍ୟାସ 100 × 1.8 ମିମି) ରେ ପ୍ୟାକ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ସ୍ତମ୍ଭର ପ୍ୟାକିଂ ଯାନ୍ତ୍ରିକ କମ୍ପନ ଦ୍ୱାରା ସହାୟତା ପ୍ରାପ୍ତ ହୁଏ ଯାହା ଦ୍ୱାରା ସ୍ତମ୍ଭ ମଧ୍ୟରେ ଏକ ସମାନ ସ୍ତର ସୁନିଶ୍ଚିତ ହୁଏ। ପାଞ୍ଚଟି ପେପ୍ଟାଇଡ୍ (ଗ୍ଲାଇ-ଟାୟାର, ଗ୍ଲାଇ-ଲେଉ-ଟାୟାର, ଗ୍ଲାଇ-ଗ୍ଲାଇ-ଟାୟାର-ଆର୍ଗ, ଟାଇର-ଇଲେ-ଗ୍ଲାଇ-ସେର-ଆର୍ଗ, ଲ୍ୟୁସିନ୍-ଏନକେଫାଲିନ୍ ପେପ୍ଟାଇଡ୍) ଏବଂ ମାନବ ସେରମ୍ ଆଲବୁମିନ୍ (HSA) ର ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇସେଟ୍ସ ସହିତ ଗଠିତ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ମିଶ୍ରଣର ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ପ୍ୟାକ୍ ହୋଇଥିବା ସ୍ତମ୍ଭର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହା ଦେଖାଯାଇଥିଲା ଯେ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ମିଶ୍ରଣ ଏବଂ HSA ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ଡାଇଜେଷ୍ଟ ଭଲ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ଏବଂ ଦକ୍ଷତା ସହିତ ପୃଥକ ହୋଇଥିଲା। PMP ସ୍ତମ୍ଭର ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତାକୁ Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ ସହିତ ତୁଳନା କରାଯାଇଥିଲା। ଏହା ଦେଖାଯାଇଥିଲା ଯେ Peptides ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍‌ର PMP ସ୍ତମ୍ଭରେ ଭଲ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତା ଅଛି, ଏବଂ PMP ସ୍ତମ୍ଭର ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତା Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ।
PEG (ପଲିଥିଲିନ୍ ଗ୍ଲାଇକଲ୍), ୟୁରିଆ, ଆସେଟିକ୍ ଏସିଡ୍, ଟ୍ରାଇମେଥୋକ୍ସିଅର୍ଥୋସିଲିକେଟ୍ (TMOS), ଟ୍ରାଇମେଥାଇଲ୍କ୍ଲୋରୋସିଲେନ୍ (TMCS), ଟ୍ରିପ୍ସିନ୍, ମାନବ ସେରମ୍ ଆଲବୁମିନ୍ (HSA), ଆମୋନିୟମ୍ କ୍ଲୋରାଇଡ୍, ୟୁରିଆ, ହେକ୍ସାମିଥାଇଲ୍ମେଥାଆକ୍ରିଲୋଇଲ୍ଡିସିଲାଜେନ୍ (HMDS), ମେଥାକ୍ରିଲୋଇଲ୍ କ୍ଲୋରାଇଡ୍ (MC), ଷ୍ଟାଇରିନ୍, 4-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସି- TEMPO, ବେଞ୍ଜୋୟଲ୍ ପେରୋକ୍ସାଇଡ୍ (BPO), HPLC ପାଇଁ ଆସେଟୋନିଟ୍ରାଇଲ୍ (ACN), ମିଥାନଲ୍, 2-ପ୍ରୋପାନୋଲ୍ ଏବଂ ଆସିଟୋନ୍। ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍ କମ୍ପାନୀ (ସେଣ୍ଟ ଲୁଇସ୍, ମିସୌରୀ, ଆମେରିକା)।
ୟୁରିଆ (8 ଗ୍ରାମ), ପଲିଥିଲିନ୍ ଗ୍ଲାଇକୋଲ୍ (8 ଗ୍ରାମ) ଏବଂ 0.01 N. ଆସେଟିକ୍ ଏସିଡ୍ ର 8 ମିଲି ମିଶ୍ରଣକୁ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଘାଣ୍ଟାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ବରଫ-ଥଣ୍ଡାକରଣ ସମୟରେ 24 ମିଲି TMOS ଯୋଡାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମିଶ୍ରଣକୁ 40°C ରେ 6 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଏବଂ ତା'ପରେ 120°C ରେ 8 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଏକ ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍ ଅଟୋକ୍ଲେଭ୍ ରେ ଗରମ କରାଯାଇଥିଲା। ପାଣିକୁ ଡିକାଣ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ 70°C ରେ 12 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଶୁଖାଯାଇଥିଲା। ଶୁଖିଲା ନରମ ବ୍ଲକଗୁଡ଼ିକୁ ସୁଗମ ଭାବରେ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 550°C ରେ 12 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଏକ ଚୁଲିରେ କ୍ୟାଲସାଇନ୍ କରାଯାଇଥିଲା। କଣିକା ଆକାର, ଛିଦ୍ର ଆକାର ଏବଂ ପୃଷ୍ଠ କ୍ଷେତ୍ରଫଳର ପୁନଃଉତ୍ପାଦନ କ୍ଷମତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ତିନୋଟି ବ୍ୟାଚ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ ଏବଂ ବର୍ଣ୍ଣିତ କରାଯାଇଥିଲା।
ପଲିଷ୍ଟାଇରିନ୍ ଶୃଙ୍ଖଳ ପାଇଁ ପୋଲାର ଗ୍ରୁପ୍ ଏବଂ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ। ପ୍ରସ୍ତୁତି ପ୍ରକ୍ରିୟା ତଳେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରାଯାଇଛି।
ଏନ-ଫିନାଇଲମାଲେଇମାଇଡ (200 ମିଗ୍ରା) ଏବଂ ମିଥାଇଲ ଭାଇନାଇଲ ଆଇସୋସାଇନେଟ (100 ମିଗ୍ରା)କୁ ନିର୍ଜଳ ଟୋଲୁଇନରେ ଦ୍ରବୀଭୂତ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ତା’ପରେ 0.1 ମିଲି 2,2′-ଆଜୋଇସୋବ୍ୟୁଟିରୋନିଟ୍ରାଇଲ (AIBN) ରିଆକ୍ସନ ଫ୍ଲାସ୍କରେ ମିଶାଯାଇଥିଲା ଯାହା ଦ୍ୱାରା ଫିନାଇଲମାଲେଇମାଇଡ ଏବଂ ମିଥାଇଲ ଭାଇନାଇଲ ଆଇସୋସାଇନେଟ (PMCP)ର ଏକ କୋପଲିମର ମିଳିପାରିବ। ) ମିଶ୍ରଣକୁ 60°C ରେ 3 ​​ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଗରମ କରାଯାଇଥିଲା, ଫିଲ୍ଟର କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏକ ଚୁଲିରେ 40°C ରେ 3 ​​ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଶୁଖାଯାଇଥିଲା।
ଶୁଖିଲା ସିଲିକା କଣିକା (2 ଗ୍ରାମ) ଶୁଖିଲା ଟୋଲୁଇନ୍ (100 ମିଲି) ରେ ବିସ୍ତାରିତ ହୋଇଥିଲା, 500 ମିଲି ଗୋଲ ତଳ ଫ୍ଲାସ୍କରେ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଘୁଞ୍ଚାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସୋନିକେଟ କରାଯାଇଥିଲା। PMCP (10 ମିଗ୍ରା) ଟୋଲୁଇନ୍ ରେ ଦ୍ରବୀଭୂତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ଏକ ଅତିରିକ୍ତ ଫନେଲ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଫ୍ଲାସ୍କରେ ଡ୍ରପ୍ୱାଇଜ୍ ଯୋଡାଯାଇଥିଲା। ମିଶ୍ରଣକୁ 8 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 100°C ରେ ରିଫ୍ଲକ୍ସ କରାଯାଇଥିଲା, ଫିଲ୍ଟର କରାଯାଇଥିଲା, ଆସିଟୋନ୍ ସହିତ ଧୋଇ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ 60°C ରେ 3 ​​ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଶୁଖାଯାଇଥିଲା। ତା'ପରେ, PMCP (100 ଗ୍ରାମ) ସହିତ ଜଡିତ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ ଟୋଲୁଇନ୍ (200 ମିଲି) ରେ ଦ୍ରବୀଭୂତ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ 100 μl ଡିବ୍ୟୁଟିଲଟିନ୍ ଡାଇଲାଉରେଟ୍ ଏକ ଉତ୍ପ୍ରକାଶକ ଭାବରେ ଉପସ୍ଥିତିରେ 4-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସି-ଟେମ୍ପୋ (2 ମିଲି) ଯୋଡାଯାଇଥିଲା। ମିଶ୍ରଣକୁ 8 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 50°C ରେ ଘୁଞ୍ଚାଯାଇଥିଲା, ଫିଲ୍ଟର କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 3 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 50°C ରେ ଶୁଖାଯାଇଥିଲା।
ଷ୍ଟାଇରିନ୍ (୧ ମିଲି), ବେଞ୍ଜୋୟଲ୍ ପେରୋକ୍ସାଇଡ୍ BPO (୦.୫ ମିଲି) ଏବଂ TEMPO-PMCP (୧.୫ ଗ୍ରାମ) ସହିତ ସଂଲଗ୍ନ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକୁ ଟୋଲୁଇନ୍‌ରେ ବିଛାଡ଼ି ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ସହିତ ପରିଷ୍କାର କରାଯାଇଥିଲା। ଷ୍ଟାଇରିନ୍‌ର ପଲିମରାଇଜେସନ୍‌କୁ ୧୦୦°C ରେ ୧୨ ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ କରାଯାଇଥିଲା। ଫଳସ୍ୱରୂପ ଉତ୍ପାଦକୁ ମିଥାନଲ୍‌ ସହିତ ଧୋଇ ରାତାରାତି 60°C ରେ ଶୁଖାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ସାଧାରଣ ଯୋଜନା ଚିତ୍ର ୧ ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି।
ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 393 K ରେ ଗ୍ୟାସରୁ ମୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା ଯେପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ 10-3 Torr ରୁ କମ୍ ଅବଶିଷ୍ଟ ଚାପ ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇନଥିଲା। ମୋଟ ଛିଦ୍ର ପରିମାଣ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ P/P0 = 0.99 ଆପେକ୍ଷିକ ଚାପରେ ଶୋଷିତ N2 ପରିମାଣ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ଏକ ସ୍କାନିଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ (ହିଟାଚି ହାଇ ଟେକ୍ନୋଲୋଜିସ୍, ଟୋକିଓ, ଜାପାନ) ବ୍ୟବହାର କରି ଶୁଖିଲା ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ-ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକର ଆକାର ବିଜ୍ଞାନ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା। କାର୍ବନ ଟେପ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଆଲୁମିନିୟମ୍ ରଡ୍ ଉପରେ ଶୁଖିଲା ନମୁନା (ଶୁଦ୍ଧ ସିଲିକା ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକା) ରଖାଯାଇଥିଲା। Q150T ସ୍ପଟରିଂ ଡିଭାଇସ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ନମୁନାରେ ସୁନା ଜମା କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ନମୁନାରେ 5 nm ଘନ Au ସ୍ତର ଜମା କରାଯାଇଥିଲା। ଏହା କମ୍ ଭୋଲଟେଜ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟାର ଦକ୍ଷତାକୁ ଉନ୍ନତ କରେ ଏବଂ ସୂକ୍ଷ୍ମ ଥଣ୍ଡା ସ୍ପ୍ରେ କରିବା ପ୍ରଦାନ କରେ। ଏକ ଥର୍ମୋ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ୍ (ୱାଲଥାମ୍, MA, USA) ଫ୍ଲାସ୍ EA1112 ମୌଳିକ ରଚନା ବିଶ୍ଳେଷକ ବ୍ୟବହାର କରି ମୌଳିକ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। କଣିକା ଆକାର ବଣ୍ଟନ ପାଇବା ପାଇଁ ଏକ ମାଲଭର୍ନ କଣିକା ଆକାର ବିଶ୍ଳେଷକ (ୱର୍ସେଷ୍ଟରଶାୟାର, UK) ମାଷ୍ଟରସାଇଜର 2000 ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ଆବରଣହୀନ ସିଲିକା କଣିକା ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ-ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକା (ପ୍ରତ୍ୟେକ 5 ମିଲି) 5 ମିଲି ଆଇସୋପ୍ରୋପାନୋଲରେ ବିସ୍ତାରିତ ହୋଇଥିଲା, 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ସୋନିକେଟ କରାଯାଇଥିଲା, 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଆଲୋଚିତ ହୋଇଥିଲା, ଏବଂ ଏକ ମାଷ୍ଟରସାଇଜର ଅପ୍ଟିକାଲ୍ ବେଞ୍ଚରେ ରଖାଯାଇଥିଲା। ଥର୍ମୋଗ୍ରାଭିମେଟ୍ରିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ 30 ​​ରୁ 800 ଡିଗ୍ରୀ ସେଲସିୟସ୍ ତାପମାତ୍ରା ପରିସର ମଧ୍ୟରେ ପ୍ରତି ମିନିଟ୍ 5 ଡିଗ୍ରୀ ସେଲସିୟସ୍ ହାରରେ କରାଯାଏ।
ଗ୍ଲାସ୍ ଫାଇବର ଲାଇନ୍ ଥିବା ସଂକୀର୍ଣ୍ଣ ବୋର୍ ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକୁ ରେଫରେନ୍ସ 31 ରେ ଥିବା ସମାନ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଅନୁସରଣ କରି ସ୍ଲରି ଫିଲିଂ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ୱାରା ପ୍ୟାକ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ (ଗ୍ଲାସ୍ ଲାଇନ୍ ଥିବା, ID 100 × 1 .8 mm) ଏବଂ 1 µm ଫ୍ରିଟ୍ ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ ଆଉଟଲେଟ୍ ଏକ ସ୍ଲରି ପ୍ୟାକେଜିଂ ମେସିନ୍ (ଅଲଟେକ୍ ଡିଅରଫିଲ୍ଡ, IL, USA) ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ ଥିଲା। 1.2 ମିଲି ମିଥାନଲରେ 150 ମିଗ୍ରା ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟକୁ ସସପେଣ୍ଡ କରି ଏହାକୁ ଏକ ଜଳଭଣ୍ଡାର ସ୍ତମ୍ଭରେ ଫିଡ୍ କରି ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର ଏକ ସସପେଣ୍ଡେସନ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ। ମିଥାନଲକୁ ସ୍ଲରି ଦ୍ରାବକ ଏବଂ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଦ୍ରାବକ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 100 MP, 15 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 80 MP ଏବଂ 30 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 60 MP ଚାପ କ୍ରମ ପ୍ରୟୋଗ କରି ସ୍ତମ୍ଭକୁ ପ୍ୟାକ୍ କରନ୍ତୁ। ପ୍ୟାକିଂ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ସମାନ ସ୍ତମ୍ଭ ପ୍ୟାକିଂ ସୁନିଶ୍ଚିତ କରିବା ପାଇଁ ଯାନ୍ତ୍ରିକ କମ୍ପନ ପାଇଁ ଦୁଇଟି ଗ୍ୟାସ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ଭାଇବ୍ରେଟର (ଅଲଟେକ୍, ଡିଅରଫିଲ୍ଡ, IL, USA) ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ସ୍ଲରି ପ୍ୟାକରକୁ ବନ୍ଦ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଷ୍ଟ୍ରିଙ୍ଗ୍ କୁ କ୍ଷତି ନ କରିବା ପାଇଁ ଧୀରେ ଚାପ ଛାଡି ଦିଅନ୍ତୁ। ସ୍ତମ୍ଭଟିକୁ ସ୍ଲରି ନୋଜଲ୍ ରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏହାର କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ଇନଲେଟ୍ ସହିତ ଆଉ ଏକ ଫିଟିଂ ସଂଲଗ୍ନ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ LC ସିଷ୍ଟମ ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା।
ଏକ କଷ୍ଟମ୍ MLC ଏକ LC ପମ୍ପ (10AD Shimadzu, ଜାପାନ), ଏକ 50 nL ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଲୁପ୍ (Valco (USA) C14 W.05) ସହିତ ଏକ ସାମ୍ପଲର, ଏକ ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ ଡିଗାସର୍ (Shimadzu DGU-14A) ଏବଂ ଏକ UV-VIS କ୍ୟାପିଲାରି ୱିଣ୍ଡୋ ବ୍ୟବହାର କରି ନିର୍ମିତ ହୋଇଥିଲା। ଡିଟେକ୍ଟର ଡିଭାଇସ୍ (UV-2075) ଏବଂ ଏନାମେଲଡ୍ ମାଇକ୍ରୋକଲମ୍। ଅତିରିକ୍ତ ସ୍ତମ୍ଭ ବିସ୍ତାରର ପ୍ରଭାବକୁ କମ କରିବା ପାଇଁ ବହୁତ ସଂକୀର୍ଣ୍ଣ ଏବଂ ଛୋଟ ସଂଯୋଗକାରୀ ଟ୍ୟୁବ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ। ସ୍ତମ୍ଭ ପୂରଣ କରିବା ପରେ, 1/16″ ରିଡୁସିଂ ଜଙ୍କସନର ଆଉଟଲେଟରେ ଏକ କ୍ୟାପିଲାରି (50 µm id 365) ସ୍ଥାପନ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ରିଡୁସିଂ ଜଙ୍କସନର ଏକ କ୍ୟାପିଲାରି (50 µm) ସ୍ଥାପନ କରନ୍ତୁ। Multichro 2000 ସଫ୍ଟୱେର୍ ବ୍ୟବହାର କରି ତଥ୍ୟ ସଂଗ୍ରହ ଏବଂ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାମ ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ କରାଯାଏ। 254 nm ରେ, ବିଷୟ ବିଶ୍ଳେଷଣକାରୀଙ୍କ UV ଅବଶୋଷଣ 0 ରେ ନିରୀକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। OriginPro8 (Northampton, MA) ବ୍ୟବହାର କରି କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ତଥ୍ୟ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା।
ମାନବ ସେରମ୍ ଆଲବୁମିନ୍, ଲାଇଓଫାଇଲାଇଜ୍ଡ ପାଉଡର, ≥ 96% (ଆଗାରୋଜ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍) 3 ମିଗ୍ରା ଟ୍ରିପସିନ୍ (1.5 ମିଗ୍ରା), 4.0 ମିଗ୍ରା ୟୁରିଆ (1 ମିଲି) ଏବଂ 0.2 ମିଗ୍ରା ଆମୋନିୟମ୍ ବାଇକାର୍ବୋନେଟ୍ (1 ମିଲି) ସହିତ ମିଶ୍ରିତ। ଦ୍ରବଣକୁ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଘାଣ୍ଟାଇ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ 37°C ରେ 6 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଜଳ ସ୍ନାନରେ ରଖାଯାଇଥିଲା, ତାପରେ 0.1% TFA ର 1 ମିଲି ସହିତ ଶାନ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା। ଦ୍ରବଣକୁ ଛାଣି 4°C ତଳେ ସଂରକ୍ଷଣ କରନ୍ତୁ।
ଏକ PMP ସ୍ତମ୍ଭରେ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ ଏବଂ ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ଡାଇଜେଷ୍ଟ HSA ମିଶ୍ରଣର ପୃଥକ ଭାବରେ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା। ଏକ PMP ସ୍ତମ୍ଭ ଦ୍ୱାରା ପୃଥକ କରାଯାଇଥିବା ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ ଏବଂ HSA ମିଶ୍ରଣର ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲିସିସ୍ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଫଳାଫଳକୁ ଏକ Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ ସହିତ ତୁଳନା କରନ୍ତୁ। ନିମ୍ନଲିଖିତ ସମୀକରଣ ବ୍ୟବହାର କରି ତତ୍ତ୍ୱଗତ ପ୍ଲେଟ୍ ସଂଖ୍ୟା ଗଣନା କରାଯାଏ:
ଶୁଦ୍ଧ ସିଲିକା କଣିକା ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକାର SEM ପ୍ରତିଛବିଗୁଡିକ ଚିତ୍ର 2 ରେ ଦେଖାଯାଇଛି। ଶୁଦ୍ଧ ସିଲିକା କଣିକା (A, B) ର SEM ପ୍ରତିଛବିଗୁଡିକ ଏକ ଗୋଲାକାର ଆକୃତି ଦେଖାଏ ଯେଉଁଥିରେ କଣିକାଗୁଡିକ ଦୀର୍ଘାକାର କିମ୍ବା ଆମର ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନ ତୁଳନାରେ ଅନିୟମିତ ପ୍ରତିସମତା ଅଛି। ଲିଗାଣ୍ଡ (C, D) ଦ୍ୱାରା ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡିକର ପୃଷ୍ଠ ଶୁଦ୍ଧ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡିକ ଅପେକ୍ଷା ମସୃଣ, ଯାହା ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡିକର ପୃଷ୍ଠକୁ ଆଚ୍ଛାଦିତ ପଲିଷ୍ଟାଇରିନ୍ ଶୃଙ୍ଖଳ ଯୋଗୁଁ ହୋଇପାରେ।
ଶୁଦ୍ଧ ସିଲିକା କଣିକା (A, B) ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକା (C, D) ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ ସ୍କାନିଂ।
ଶୁଦ୍ଧ ସିଲିକା କଣିକା ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ-ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକାର କଣିକା ଆକାର ବଣ୍ଟନ ଚିତ୍ର 2. 3(A) ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ଭଲ୍ୟୁମେଟ୍ରିକ୍ କଣିକା ଆକାର ବଣ୍ଟନ ବକ୍ର ଦେଖାଇଛି ଯେ ରାସାୟନିକ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପରେ ସିଲିକା କଣିକା ଆକାର ବୃଦ୍ଧି ପାଇଛି (ଚିତ୍ର 3A)। ବର୍ତ୍ତମାନର ଅଧ୍ୟୟନ ଏବଂ ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ସିଲିକା କଣିକା ଆକାର ବଣ୍ଟନ ତଥ୍ୟକୁ ସାରଣୀ 1(A) ରେ ତୁଳନା କରାଯାଇଛି। PMP ର ଭଲ୍ୟୁମେଟ୍ରିକ୍ କଣିକା ଆକାର d(0.5) 3.36 µm ଥିଲା, ଯାହା ଆମର ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନ (ପଲିଷ୍ଟାଇରିନ୍ ବଣ୍ଡେଡ୍ ସିଲିକା କଣିକା) ରେ 3.05 µm ମୂଲ୍ୟର ad(0.5) ମୂଲ୍ୟ ତୁଳନାରେ 34। ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମିଶ୍ରଣରେ PEG, ୟୁରିଆ, TMOS ଏବଂ ଆସେଟିକ୍ ଏସିଡର ଅନୁପାତରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଯୋଗୁଁ, ଏହି ବ୍ୟାଚର କଣିକା ଆକାର ବଣ୍ଟନ ଆମର ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନ ତୁଳନାରେ ସଂକୀର୍ଣ୍ଣ ଥିଲା। PMP ପର୍ଯ୍ୟାୟର କଣିକା ଆକାର ଆମେ ପୂର୍ବରୁ ଅଧ୍ୟୟନ କରିଥିବା ପଲିଷ୍ଟାଇରିନ୍ ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକା ପର୍ଯ୍ୟାୟ ତୁଳନାରେ ଟିକିଏ ବଡ଼। ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଷ୍ଟାଇରିନ୍ ସହିତ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକର ପୃଷ୍ଠ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମତା ସିଲିକା ପୃଷ୍ଠରେ କେବଳ ଏକ ପଲିଷ୍ଟାଇରିନ୍ ସ୍ତର (0.97 µm) ଜମା କରିଥିଲା, ଯେତେବେଳେ PMP ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ସ୍ତର ଘନତା 1.38 µm ଥିଲା।
ଶୁଦ୍ଧ ସିଲିକା କଣିକା ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକାର କଣିକା ଆକାର ବଣ୍ଟନ (A) ଏବଂ ଛିଦ୍ର ଆକାର ବଣ୍ଟନ (B)।
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ବ୍ୟବହୃତ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକର ଛିଦ୍ର ଆକାର, ଛିଦ୍ର ଆୟତନ ଏବଂ ପୃଷ୍ଠ କ୍ଷେତ୍ରଫଳ ସାରଣୀ 1 (B) ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ଶୁଦ୍ଧ ସିଲିକା କଣିକା ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ-ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକର PSD ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ଚିତ୍ର 3 (B) ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ଆମର ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନ ସହିତ ତୁଳନୀୟ ଥିଲା 34। ଶୁଦ୍ଧ ଏବଂ ଲିଗାଣ୍ଡ-ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକର ଛିଦ୍ର ଆକାର ଯଥାକ୍ରମେ 310 Å ଏବଂ 241 Å ଥିଲା, ଯାହା ସୂଚିତ କରେ ଯେ ରାସାୟନିକ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପରେ, ଛିଦ୍ର ଆକାର 69 Å ହ୍ରାସ ପାଇଛି, ଯେପରି ସାରଣୀ 1 (B) ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି, ଏବଂ ଶିଫ୍ଟ କର୍ଭ ଚିତ୍ରରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ବର୍ତ୍ତମାନର ଅଧ୍ୟୟନରେ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଷ୍ଠ କ୍ଷେତ୍ରଫଳ 116 m2/g, ଯାହା ଆମର ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନ (124 m2/g) ସହିତ ତୁଳନୀୟ। ସାରଣୀ 1 (B) ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଥିବା ପରି, ରାସାୟନିକ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପରେ ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକର ପୃଷ୍ଠ କ୍ଷେତ୍ରଫଳ (m2/g) ମଧ୍ୟ 116 m2/g ରୁ 105 m2/g କୁ ହ୍ରାସ ପାଇଛି।
ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର ମୌଳିକ ବିଶ୍ଳେଷଣର ଫଳାଫଳ ସାରଣୀ 2 ରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଛି। ବର୍ତ୍ତମାନର ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର କାର୍ବନ ପରିମାଣ 6.35%, ଯାହା ଆମର ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନ (ପଲିଷ୍ଟାଇରିନ ସହିତ ଜଡିତ ସିଲିକା କଣିକା, ଯଥାକ୍ରମେ 7.93%35 ଏବଂ 10.21%) ତୁଳନାରେ କମ୍। SP ପ୍ରସ୍ତୁତିରେ ଷ୍ଟାଇରିନ୍ ବ୍ୟତୀତ ଫିନାଇଲ୍‌ମାଲେଇମାଇଡ୍ ମିଥାଇଲ୍ ଭିନାଇଲ୍ ଆଇସୋସାଇନେଟ୍ (PCMP) ଏବଂ 4-ହାଇଡ୍ରୋକ୍ସି-ଟେମ୍ପୋ ଭଳି କିଛି ପୋଲାର ଲିଗାଣ୍ଡ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିବାରୁ ନିମ୍ନରେ ବର୍ତ୍ତମାନର ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ନାଇଟ୍ରୋଜେନର ଓଜନ ପ୍ରତିଶତ 2.21%, ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନରେ 0.1735 ଏବଂ 0.85% ତୁଳନାରେ 42। ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଯେ ବର୍ତ୍ତମାନର ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ଫିନାଇଲ୍‌ମାଲେଇମାଇଡ୍ ଯୋଗୁଁ ନାଇଟ୍ରୋଜେନର ଉଚ୍ଚ ଓଜନ ପ୍ରତିଶତ ରହିଛି। ସେହିପରି, ଉତ୍ପାଦ (4) ଏବଂ (5) ରେ ଯଥାକ୍ରମେ 2.7% ଏବଂ 2.9% କାର୍ବନ ପରିମାଣ ଅଛି, ଯେତେବେଳେ ଚୂଡ଼ାନ୍ତ ଉତ୍ପାଦ (6) ରେ କାର୍ବନ ପରିମାଣ 6.35% ଅଛି, ଯେପରି ସାରଣୀ 2 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ଓଜନ ହ୍ରାସ ପାଇଁ ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ PMP ର ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ଥର୍ମୋଗ୍ରାଭିମେଟ୍ରିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ (TGA) ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା, ଏବଂ TGA ବକ୍ର ଚିତ୍ର 4 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। TGA ବକ୍ର 8.6% ଓଜନ ହ୍ରାସ ଦର୍ଶାଉଛି, ଯାହା କାର୍ବନ ପରିମାଣ (6.35%) ସହିତ ଉତ୍ତମ ସମାନ, କାରଣ ଲିଗାଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକରେ କେବଳ C ନୁହେଁ, ବରଂ N, O ଏବଂ H ମଧ୍ୟ ଥାଏ।
ସିଲିକା କଣିକାଗୁଡ଼ିକର ପୃଷ୍ଠକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିବା ପାଇଁ ଲିଗାଣ୍ଡ ଫିନାଇଲମାଲେଇମାଇଡ୍-ମିଥାଇଲଭିନାଇଲ୍ ଆଇସୋସାଇନେଟ୍ ବାଛିଥିଲେ କାରଣ ଏହାର ଧ୍ରୁବୀୟ ଫିନାଇଲମାଲେଇମାଇଡ୍ ଏବଂ ଭିନାଇଲିସୋସାଇନେଟ୍ ଗୋଷ୍ଠୀଗୁଡ଼ିକ ଅଛନ୍ତି। ଭିନାଇଲ ଆଇସୋସାଇନେଟ୍ ଗୋଷ୍ଠୀଗୁଡ଼ିକ ଜୀବନ୍ତ ରାଡିକାଲ୍ ପଲିମରାଇଜେସନ୍ ଦ୍ୱାରା ଷ୍ଟାଇରିନ୍ ସହିତ ଆହୁରି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା କରିପାରିବେ। ଦ୍ୱିତୀୟ କାରଣ ହେଉଛି ଏକ ଗୋଷ୍ଠୀ ପ୍ରବେଶ କରିବା ଯାହାର ବିଶ୍ଳେଷଣକାରୀ ସହିତ ମଧ୍ୟମ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଥାଏ ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣକାରୀ ଏବଂ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ମଧ୍ୟରେ କୌଣସି ଦୃଢ଼ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଥାଏ, କାରଣ ଫିନାଇଲମାଲେଇମାଇଡ୍ ଅଂଶର ସାଧାରଣ pH ରେ କୌଣସି ଭର୍ଚୁଆଲ୍ ଚାର୍ଜ ନାହିଁ। ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର ଧ୍ରୁବତାକୁ ଷ୍ଟାଇରିନ୍ ର ସର୍ବୋତ୍ତମ ପରିମାଣ ଏବଂ ମୁକ୍ତ ରାଡିକାଲ୍ ପଲିମରାଇଜେସନ୍ ର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ ଦ୍ୱାରା ନିୟନ୍ତ୍ରିତ କରାଯାଇପାରିବ। ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ଶେଷ ପଦକ୍ଷେପ (ମୁକ୍ତ ରାଡିକାଲ୍ ପଲିମରାଇଜେସନ୍) ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ କାରଣ ଏହା ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର ଧ୍ରୁବତାକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରେ। ଏହି ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟଗୁଡ଼ିକରେ କାର୍ବନ ପରିମାଣ ଯାଞ୍ଚ କରିବା ପାଇଁ ମୌଳିକ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହା ଦେଖାଯାଇଛି ଯେ ଷ୍ଟାଇରିନ୍ ର ପରିମାଣ ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ ବୃଦ୍ଧି କରିବା ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର କାର୍ବନ ପରିମାଣ ବୃଦ୍ଧି ପାଏ ଏବଂ ବିପରୀତ। ଷ୍ଟାଇରିନ୍ ର ବିଭିନ୍ନ ସାନ୍ଦ୍ରତା ସହିତ ପ୍ରସ୍ତୁତ SP ଗୁଡ଼ିକରେ ବିଭିନ୍ନ କାର୍ବନ ଲୋଡ୍ ଥାଏ। ସେହିପରି, ଏହି ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟଗୁଡ଼ିକୁ ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ଉପରେ ରଖାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡ଼ିକ (ଚୟନଶୀଳତା, ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍, N ମୂଲ୍ୟ, ଇତ୍ୟାଦି) ଯାଞ୍ଚ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି ପରୀକ୍ଷଣଗୁଡ଼ିକ ଉପରେ ଆଧାର କରି, ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ପୋଲାରଟି ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣକାରୀର ଭଲ ପ୍ରତିଧାରଣ ପ୍ରଦାନ କରିବା ପାଇଁ PMP ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପ୍ରସ୍ତୁତି ପାଇଁ ଏକ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରାଯାଇଥିବା ରଚନା ବାଛି ଦିଆଯାଇଥିଲା।
ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟ କ୍ଷମତା ବ୍ୟବହାର କରି ପାଞ୍ଚଟି ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine-enkephalin) ମିଶ୍ରଣର ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ PMP ସ୍ତମ୍ଭର ମଧ୍ୟ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା। 80 µl/ମିନିଟ୍ ପ୍ରବାହ ହାରରେ 60/40 (v/v) ACN/ଜଳ (0.1% TFA)। ସର୍ବୋତ୍ତମ ନିର୍ଗମନ ଅବସ୍ଥା (200,000 ପ୍ଲେଟ୍/ମି) ଅଧୀନରେ, ପ୍ରତି ସ୍ତମ୍ଭ (100 × 1.8 mm) ରେ ସୈଦ୍ଧାନ୍ତିକ ପ୍ଲେଟ୍ (N) ସଂଖ୍ୟା 20,000 ± 100। ତିନୋଟି PMP ସ୍ତମ୍ଭ ପାଇଁ N ମୂଲ୍ୟଗୁଡ଼ିକ ସାରଣୀ 3 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି ଏବଂ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାମଗୁଡ଼ିକ ଚିତ୍ର 5A ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ଏକ PMP ସ୍ତମ୍ଭରେ ଉଚ୍ଚ ପ୍ରବାହ ହାର (700 µl/ମିନିଟ୍) ରେ ଦ୍ରୁତ ବିଶ୍ଳେଷଣ, ଗୋଟିଏ ମିନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ପାଞ୍ଚଟି ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ନିର୍ଗତ, ପ୍ରତି ସ୍ତମ୍ଭରେ 13,500 ± 330 ଉତ୍କୃଷ୍ଟ N ମୂଲ୍ୟ (100 x 1.8 ମିମି ବ୍ୟାସ), 135,000 ପ୍ଲେଟ୍ / ମିଟର ସହିତ ସମତୁଲ୍ୟ (ଚିତ୍ର 5B)। ପ୍ରଜନନକ୍ଷମତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ସମାନ ଆକାରର ତିନୋଟି ସ୍ତମ୍ଭ (ଭିତର ବ୍ୟାସ 100 x 1.8 ମିମି) PMP ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର ତିନୋଟି ଭିନ୍ନ ବ୍ୟାଚ୍ ସହିତ ପୂର୍ଣ୍ଣ କରାଯାଇଥିଲା। ସର୍ବୋତ୍ତମ ପ୍ରଜନନ ଅବସ୍ଥା, ତତ୍ତ୍ୱଗତ ପ୍ଲେଟ୍ N ସଂଖ୍ୟା ଏବଂ ପ୍ରତିଧାରଣ ସମୟ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରତ୍ୟେକ ସ୍ତମ୍ଭରେ ସମାନ ପରୀକ୍ଷଣ ମିଶ୍ରଣକୁ ପୃଥକ କରି ପ୍ରତ୍ୟେକ ସ୍ତମ୍ଭ ପାଇଁ ବିଶ୍ଳେଷଣ ରେକର୍ଡ କରାଯାଇଥିଲା। PMP ସ୍ତମ୍ଭ ପାଇଁ ପ୍ରଜନନକ୍ଷମତା ତଥ୍ୟ ସାରଣୀ 4 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। PMP ସ୍ତମ୍ଭର ପ୍ରଜନନକ୍ଷମତା ସାରଣୀ 3 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଥିବା ପରି ବହୁତ କମ୍ %RSD ମୂଲ୍ୟ ସହିତ ଭଲ ଭାବରେ ସହଭାଗୀ ଥିଲା।
ଏକ PMP ସ୍ତମ୍ଭ (B) ଏବଂ ଏକ Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ (A), ମୋବାଇଲ୍ ଫେଜ୍ 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), PMP ସ୍ତମ୍ଭ ପରିମାପ (100 x 1.8 mm id), ବିଶ୍ଳେଷଣ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକର ଏଲୁସନ୍ କ୍ରମ: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) ଏବଂ 5 (leucic acid enkephalin) ରେ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ମିଶ୍ରଣର ପୃଥକୀକରଣ।
HPLC ଦ୍ୱାରା ମାନବ ସେରମ୍ ଆଲବୁମିନର ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜେଟ୍ ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ଏକ PMP ସ୍ତମ୍ଭ (ଭିତର ବ୍ୟାସ 100 x 1.8 ମିମି) ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା। ଚିତ୍ର 6 ରେ ଥିବା କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାମ ଦର୍ଶାଉଛି ଯେ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକ ବହୁତ ଭଲ ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ ସହିତ ଭଲ ଭାବରେ ପୃଥକ କରାଯାଇଛି। HSA ସମାଧାନଗୁଡ଼ିକୁ 100 μl/ମିନିଟ୍ ପ୍ରବାହ ହାର, 70/30 ଆସେଟୋନିଟ୍ରାଇଲ୍/ଜଳର ଏକ ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଏବଂ 0.1% TFA ବ୍ୟବହାର କରି ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। HSA ର କ୍ଲିଭେଜ୍ 17 ଶିଖରରେ ବିଭକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା, ଯେପରି କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାମ (ଚିତ୍ର 6) ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି, 17 ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ସହିତ ସମାନ। HSA ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜେଟ୍ ରୁ ବ୍ୟକ୍ତିଗତ ଶିଖରର ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତା ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ମୂଲ୍ୟଗୁଡ଼ିକ ସାରଣୀ 5 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି।
HSA ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇସେଟ୍‌ଗୁଡ଼ିକୁ ଏକ PMP ସ୍ତମ୍ଭ (ଭିତର ବ୍ୟାସ 100 x 1.8 ମିମି), ପ୍ରବାହ ହାର (100 μl/ମିନିଟ୍), ମୋବାଇଲ୍ ଫେଜ୍ 60/40 ଆସେଟୋନିଟ୍ରାଇଲ୍/ପାଣି, ଏବଂ 0.1% TFA ଉପରେ ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା।
ଯେଉଁଠାରେ L ହେଉଛି ସ୍ତମ୍ଭର ଲମ୍ବ, η ହେଉଛି ମୋବାଇଲ ପର୍ଯ୍ୟାୟର ସାନ୍ଦ୍ରତା, ΔP ହେଉଛି ସ୍ତମ୍ଭର ପଛ ଚାପ, ଏବଂ u ହେଉଛି ମୋବାଇଲ ପର୍ଯ୍ୟାୟର ରେଖୀୟ ବେଗ। PMP ସ୍ତମ୍ଭର ପାରଗମ୍ୟତା 2.5 × 10–14 m2 ଥିଲା, ପ୍ରବାହ ହାର 25 µl/ମିନିଟ୍ ଥିଲା, 60/40 v/v ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା। ACN/ଜଳ। PMP ସ୍ତମ୍ଭର ପାରଗମ୍ୟତା (ID 100 × 1.8 mm) ଆମର ପୂର୍ବ Ref.34 ଅଧ୍ୟୟନ ସହିତ ସମାନ ଥିଲା। ପୃଷ୍ଠ ଛିଦ୍ରଯୁକ୍ତ କଣିକାରେ ପରିପୂର୍ଣ୍ଣ ଏକ ସ୍ତମ୍ଭର ପାରଗମ୍ୟତା 1.7×10 .6 µm, 5 µm କଣିକା ପାଇଁ 2.5×10-14 m2। ତେଣୁ, PMP ପର୍ଯ୍ୟାୟର ପାରଗମ୍ୟତା 5 μm ଆକାରର କୋର-ଶେଲ୍ କଣିକାଗୁଡ଼ିକର ପାରଗମ୍ୟତା ସହିତ ସମାନ।
ଯେଉଁଠାରେ Wx ହେଉଛି କ୍ଲୋରୋଫର୍ମରେ ପରିପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ତମ୍ଭର ବସ୍ତୁତ୍ୱ, Wy ହେଉଛି ମିଥାନଲରେ ପରିପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ତମ୍ଭର ବସ୍ତୁତ୍ୱ, ଏବଂ ρ ହେଉଛି ଦ୍ରାବକଙ୍କ ଘନତା। ମିଥାନଲର ଘନତା (ρ = 0.7866) ଏବଂ କ୍ଲୋରୋଫର୍ମ (ρ = 1.484)। ସିଲିକା-C18 କଣିକା ସ୍ତମ୍ଭ (100 × 1.8 mm ID)34 ଏବଂ ଆମର ପୂର୍ବରୁ ଅଧ୍ୟୟନ କରାଯାଇଥିବା C18-ୟୁରିଆ31 ସ୍ତମ୍ଭର ମୋଟ ପୋରୋସିଟି ଯଥାକ୍ରମେ 0.63 ଏବଂ 0.55 ଥିଲା। ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ୟୁରିଆ ଲିଗାଣ୍ଡର ଉପସ୍ଥିତି ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର ପାରଗମ୍ୟତାକୁ ହ୍ରାସ କରେ। ଅନ୍ୟପକ୍ଷରେ, PMP ସ୍ତମ୍ଭର ମୋଟ ପୋରୋସିଟି (ଭିତର ବ୍ୟାସ 100 × 1.8 mm) 0.60। PMP ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକ C18 ବନ୍ଧିତ ସିଲିକା କଣିକା ସହିତ ପରିପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକ ଅପେକ୍ଷା କମ୍ ପାରଗମ୍ୟ କାରଣ C18 ପ୍ରକାରର ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ C18 ଲିଗାଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକ ସିଲିକା କଣିକା ସହିତ ରେଖୀୟ ଶୃଙ୍ଖଳରେ ସଂଲଗ୍ନ ଥାଏ, ଯେତେବେଳେ ପଲିଷ୍ଟାଇରିନ୍ ପ୍ରକାରର ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ କଣିକାଗୁଡିକ ଚାରିପାଖରେ ଏକ ଅପେକ୍ଷାକୃତ ଘନ ପଲିମର ଗଠିତ ହୋଇଥାଏ। ସ୍ତର A. ଏକ ସାଧାରଣ ପରୀକ୍ଷଣରେ, ସ୍ତମ୍ଭ ପୋରୋସିଟି ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ ଗଣନା କରାଯାଏ:
ଚିତ୍ର 7A ରେ, B ସମାନ ଇଲୁସନ୍ ପରିସ୍ଥିତିରେ ଏକ PMP ସ୍ତମ୍ଭ (id 100 x 1.8 mm) ଏବଂ ଏକ Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ (id 100 x 1.8 mm) ପାଇଁ ଭାନ୍ ଡିମ୍ଟର ପ୍ଲଟ୍ ଦେଖାନ୍ତୁ, ଉଭୟ ସ୍ତମ୍ଭରେ 60/40 ACN/H2O ଏବଂ 0 .1% TFA 20 µl/ମିନିଟ୍ ରୁ 800 µl/ମିନିଟ୍। ସର୍ବୋତ୍ତମ ପ୍ରବାହ ହାର (80 µl/ମିନିଟ୍) ରେ ସର୍ବନିମ୍ନ HETP ମୂଲ୍ୟ PMP ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ ପାଇଁ ଯଥାକ୍ରମେ 2.6 µm ଏବଂ 3.9 µm ଥିଲା। HETP ମୂଲ୍ୟଗୁଡିକ ଦର୍ଶାଉଛି ଯେ PMP ସ୍ତମ୍ଭ (100 x 1.8 mm id) ର ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତା ବାଣିଜ୍ୟିକ ଭାବରେ ଉପଲବ୍ଧ Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ (100 x 1.8 mm id) ଅପେକ୍ଷା ବହୁତ ଅଧିକ। ଚିତ୍ର 7(A) ରେ ଥିବା ଭାନ୍ ଡିଏମ୍ଟର ଗ୍ରାଫ୍ ଦର୍ଶାଉଛି ଯେ ଆମର ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନ ତୁଳନାରେ ବର୍ଦ୍ଧିତ ପ୍ରବାହ ସହିତ N ମୂଲ୍ୟରେ ହ୍ରାସ ଯଥେଷ୍ଟ ଅଧିକ ନୁହେଁ। Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ ତୁଳନାରେ PMP ସ୍ତମ୍ଭର ଉଚ୍ଚ ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତା (id 100 × 1.8 mm) ଉନ୍ନତ କଣିକା ଆକୃତି ଏବଂ ଆକାର ଏବଂ ବର୍ତ୍ତମାନର କାର୍ଯ୍ୟରେ ବ୍ୟବହୃତ ସୁସଂସ୍କୃତ ସ୍ତମ୍ଭ ପ୍ୟାକିଂ ପଦ୍ଧତି ଉପରେ ଆଧାରିତ।
(କ) 0.1% TFA ସହିତ 60/40 ACN/H2O ରେ ଏକ PMP ସ୍ତମ୍ଭ (id 100 x 1.8 mm) ଉପରେ ପ୍ରାପ୍ତ ଭାନ୍ ଡିଏମ୍ଟର ପ୍ଲଟ୍ (HETP ବନାମ ମୋବାଇଲ୍ ଫେଜ୍ ରେଖୀୟ ବେଗ)। (ଖ) 0.1% TFA ସହିତ 60/40 ACN/H2O ରେ ଏକ Ascentis Express RP-Amide ସ୍ତମ୍ଭ (id 100 x 1.8 mm) ଉପରେ ପ୍ରାପ୍ତ ଭାନ୍ ଡିଏମ୍ଟର ପ୍ଲଟ୍ (HETP ବନାମ ମୋବାଇଲ୍ ଫେଜ୍ ରେଖୀୟ ବେଗ)।
ଉଚ୍ଚ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିରେ ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ ଏବଂ ମାନବ ସେରମ୍ ଆଲବୁମିନ୍ (HSA) ର ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜେଟ୍ ମିଶ୍ରଣର ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ଇଣ୍ଟରକଲେଟେଡ୍ ପଲିଷ୍ଟାଇରିନର ଏକ ଧ୍ରୁବୀ ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପ୍ରସ୍ତୁତ ଏବଂ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା। ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ମିଶ୍ରଣ ପାଇଁ PMP ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକର କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମତା ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତା ଏବଂ ସମାଧାନ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ଉତ୍କୃଷ୍ଟ। PMP ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକର ଉନ୍ନତ ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତା ସିଲିକା କଣିକା ଆକାର ଏବଂ ଛିଦ୍ର ଆକାର, ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟଗୁଡ଼ିକର ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ସଂଶ୍ଳେଷଣ ଏବଂ ଜଟିଳ ସ୍ତମ୍ଭ ପ୍ୟାକିଂ ସାମଗ୍ରୀ ଭଳି ଅନେକ କାରଣ ଯୋଗୁଁ ହୋଇଥାଏ। ଉଚ୍ଚ ପୃଥକୀକରଣ ଦକ୍ଷତା ବ୍ୟତୀତ, ଏହି ସ୍ଥିର ପର୍ଯ୍ୟାୟର ଆଉ ଏକ ସୁବିଧା ହେଉଛି ଉଚ୍ଚ ପ୍ରବାହ ହାରରେ ନିମ୍ନ ସ୍ତମ୍ଭ ପଛ ଚାପ। PMP ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକ ଅତ୍ୟନ୍ତ ପୁନଃଉତ୍ପାଦନଯୋଗ୍ୟ ଏବଂ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସର ମିଶ୍ରଣ ଏବଂ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରୋଟିନର ଟ୍ରିପ୍ଟିକ୍ ପାଚନ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ। ଆମେ ଏହି ସ୍ତମ୍ଭକୁ ପ୍ରାକୃତିକ ଉତ୍ପାଦ, ଔଷଧୀୟ ଉଦ୍ଭିଦର ନିର୍ଗମ ଏବଂ ଛତୁରୁ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିରେ ଜୈବ ସକ୍ରିୟ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକର ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ଚାହୁଁଛୁ। ଭବିଷ୍ୟତରେ, ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ମୋନୋକ୍ଲୋନାଲ୍ ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡ଼ିକର ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ PMP ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକର ମଧ୍ୟ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯିବ।
ଫିଲ୍ଡ, ଜେକେ, ୟୁର୍ବି, ଏମଆର, ଲାଉ, ଜେ., ଥୋଗରସେନ, ଏଚ୍. ଏବଂ ପିଟରସନ, ପି. ବିପରୀତ ପର୍ଯ୍ୟାୟ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ପେପ୍ଟାଇଡ ପୃଥକୀକରଣ ପ୍ରଣାଳୀର ତଦନ୍ତ ଭାଗ I: ସ୍ତମ୍ଭ ଚରିତ୍ରୀକରଣ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରୋଟୋକଲର ବିକାଶ। ଫିଲ୍ଡ, ଜେକେ, ୟୁର୍ବି, ଏମଆର, ଲାଉ, ଜେ., ଥୋଗରସେନ, ଏଚ୍. ଏବଂ ପିଟରସନ, ପି. ବିପରୀତ ପର୍ଯ୍ୟାୟ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ପେପ୍ଟାଇଡ ପୃଥକୀକରଣ ପ୍ରଣାଳୀର ତଦନ୍ତ ଭାଗ I: ସ୍ତମ୍ଭ ଚରିତ୍ରୀକରଣ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରୋଟୋକଲର ବିକାଶ।ଫିଲ୍ଡ, ଜେକେ, ଓୱର୍ବି, ଏମ୍ଆର, ଲାଉ, ଜେ., ଟୋଗରସେନ, ଏଚ୍., ଏବଂ ପିଟରସନ, ପି. ରିଭର୍ସ-ଫେଜ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଦ୍ୱାରା ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ପୃଥକୀକରଣ ପ୍ରଣାଳୀର ତଦନ୍ତ, ଭାଗ I: ସ୍ତମ୍ଭ ଚରିତ୍ରୀକରଣ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରୋଟୋକଲ ବିକାଶ କରିବା। ଫିଲ୍ଡ, ଜେକେ, ୟୁର୍ବି, ଏମଆର, ଲାଉ, ଜେ., ଥୋଗରସେନ, ଏଚ୍. ଏବଂ ପିଟରସନ, ପି. ବିପରୀତ ପର୍ଯ୍ୟାୟ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ପୃଥକୀକରଣ ପ୍ରଣାଳୀର ତଦନ୍ତ ଭାଗ I: ସ୍ତମ୍ଭ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରୋଟୋକଲର ବିକାଶ। ଫିଲ୍ଡ, ଜେକେ, ୟୁର୍ବି, ଏମଆର, ଲାଉ, ଜେ., ଥୋଗରସେନ, ଏଚ୍. ଏବଂ ପିଟରସନ, ପି. ବିପରୀତ ପର୍ଯ୍ୟାୟ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ପୃଥକୀକରଣ ପ୍ରଣାଳୀର ତଦନ୍ତ ଭାଗ I: ସ୍ତମ୍ଭ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରୋଟୋକଲର ବିକାଶ।ଫିଲ୍ଡ, ଜେକେ, ଓୱର୍ବି, ଏମ୍ଆର, ଲାଉ, ଜେ., ଟୋଗରସେନ, ଏଚ୍., ଏବଂ ପିଟରସନ, ପି. ରିଭର୍ସ-ଫେଜ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଦ୍ୱାରା ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ପୃଥକୀକରଣ ପ୍ରଣାଳୀର ତଦନ୍ତ, ଭାଗ I: ସ୍ତମ୍ଭ ଚରିତ୍ରୀକରଣ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରୋଟୋକଲ ବିକାଶ କରିବା।J. 色谱法。 1603，113-129。 https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038(2019)。
ଗୋମେଜ୍, ବି. ଏଟ୍ ଅନ୍ୟମାନେ। ସଂକ୍ରାମକ ରୋଗର ଚିକିତ୍ସା ପାଇଁ ଉନ୍ନତ ସକ୍ରିୟ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ସୃଷ୍ଟି କରିବାର ପଦ୍ଧତି। ଜୈବ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା। ସଫଳତା 36(2), 415–429। https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018)।
ଭ୍ଲିଘେ, ପି., ଲିସୋସ୍କି, ଭି., ମାର୍ଟିନେଜ୍, ଜେ. ଏବଂ କ୍ରେଷ୍ଟଚାଟିସ୍କି, ଏମ୍. ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ଥେରାପୁଟିକ୍ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ: ବିଜ୍ଞାନ ଏବଂ ବଜାର। ଭ୍ଲିଘେ, ପି., ଲିସୋସ୍କି, ଭି., ମାର୍ଟିନେଜ୍, ଜେ. ଏବଂ କ୍ରେଷ୍ଟଚାଟିସ୍କି, ଏମ୍. ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ଥେରାପୁଟିକ୍ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ: ବିଜ୍ଞାନ ଏବଂ ବଜାର।ଭ୍ଲିଗେ ପି, ଲିସୋସ୍କି ଭି, ମାର୍ଟିନେଜ୍ ଜେ ଏବଂ କ୍ରେସଚାଟିସ୍କି ଏମ୍। ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ଥେରାପିଟିଡ୍ସ: ବିଜ୍ଞାନ ଏବଂ ବଜାର।ଭ୍ଲିଗେ ପି, ଲିସୋସ୍କି ଭି, ମାର୍ଟିନେଜ୍ ଜେ ଏବଂ ଖ୍ରେସଚାଟସ୍କି ଏମ୍। ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ଥେରାପିଟିଡ୍ସ: ବିଜ୍ଞାନ ଏବଂ ବଜାର। ଔଷଧ ଆବିଷ୍କାର। ଆଜି ୧୫ (୧-୨), ୪୦-୫୬। https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010)।
ଜୀ, ଏଫ୍., ସ୍ମିଥ୍, ଆରଡି ଏବଂ ସେନ୍, ୱାଇ. ଉନ୍ନତ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି। ଜୀ, ଏଫ୍., ସ୍ମିଥ୍, ଆରଡି ଏବଂ ସେନ୍, ୱାଇ. ଉନ୍ନତ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି।ଏଫ୍., ସ୍ମିଥ୍ ଆରଡି ଏବଂ ସେନ୍ ୟୁ ଦେଖନ୍ତୁ। ଉନ୍ନତ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି। ଜେଇ, ଏଫ୍, ସ୍ମିଥ୍, ଆରଡି ଏବଂ ଶେନ୍, Y. 高级蛋白质组液相色谱。 ଜି, ଏଫ୍, ସ୍ମିଥ୍, ଆରଡି ଏବଂ ଶେନ୍, Y. ଉନ୍ନତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ରଚନା 液相色谱。ଏଫ୍., ସ୍ମିଥ୍ ଆରଡି ଏବଂ ସେନ୍ ୟୁ ଦେଖନ୍ତୁ। ଉନ୍ନତ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି।ଜେ. କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି। ଏ ୧୨୬୧, ୭୮–୯୦ (୨୦୧୨)।
ଲିଉ, ଡବ୍ଲୁ. ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ। ଉନ୍ନତ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି-ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି ବ୍ୟାପକ-ଆଧାରିତ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ସକୁ ମିଶ୍ରଣ କରିବାକୁ ସକ୍ଷମ। ମଳଦ୍ୱାର। ଚିମ୍। ଆକ୍ଟା 1069, 89-97 (2019)।
ଚେସନ୍ଟ, ଏସଏମ ଏବଂ ସାଲିସବରୀ, ଜେଜେ ଔଷଧ ବିକାଶରେ ୟୁଏଚପିଏଲସିର ଭୂମିକା। ଚେସନ୍ଟ, ଏସଏମ ଏବଂ ସାଲିସବରୀ, ଜେଜେ ଔଷଧ ବିକାଶରେ ୟୁଏଚପିଏଲସିର ଭୂମିକା।ଚେସନ୍ଟ, ଏସଏମ ଏବଂ ସାଲିସବରୀ, ଜେଜେ ଔଷଧ ବିକାଶରେ ୟୁଏଚପିଏଲସିର ଭୂମିକା।ଚେସନ୍ଟ, ଏସଏମ ଏବଂ ସାଲିସବରୀ, ଜେଜେ ଔଷଧ ବିକାଶରେ ୟୁଏଚପିଏଲସିର ଭୂମିକା। ଜେ. ସେପ୍ଟ ବିଜ୍ଞାନ। 30(8), 1183–1190 (2007)।
ଉ, ଏନ. ଏବଂ କ୍ଲାଉସେନ, ଏଏମ ଦ୍ରୁତ ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ଅଲ୍ଟ୍ରାହାଇଚାପ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ମୌଳିକ ଏବଂ ବ୍ୟବହାରିକ ଦିଗ। ଉ, ଏନ. ଏବଂ କ୍ଲାଉସେନ, ଏଏମ ଦ୍ରୁତ ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ଅଲ୍ଟ୍ରାହାଇଚାପ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ମୌଳିକ ଏବଂ ବ୍ୟବହାରିକ ଦିଗ।ଉ, ଏନ. ଏବଂ କ୍ଲାଉସେନ, ଏଏମ ଦ୍ରୁତ ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ଉଚ୍ଚଚାପ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ମୌଳିକ ଏବଂ ବ୍ୟବହାରିକ ଦିଗ। ୱୁ, ଏନ। ଏବଂ କ୍ଲାଉସେନ୍, ଏମ୍ 用于快速分离的超高压液相色谱的基础和实践方面。 ଉ, ଏନ. ଏବଂ କ୍ଲାଉସେନ, ଏଏମ ଦ୍ରୁତ ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ହାଇଚାପ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ମୌଳିକ ଏବଂ ବ୍ୟବହାରିକ ଦିଗ।ଉ, ଏନ. ଏବଂ କ୍ଲାଉସେନ, ଏଏମ ଦ୍ରୁତ ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ ଉଚ୍ଚଚାପ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ମୌଳିକ ଏବଂ ବ୍ୟବହାରିକ ଦିଗ।ଜେ. ସେପ୍ଟେମ୍ବର ବିଜ୍ଞାନ. 30(8), 1167–1182. https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
ରେନ୍, ଏସଏ ଏବଂ ଚେଲିଟେଚେଫ୍, ପି. ଔଷଧ ବିକାଶରେ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ପର୍ଫର୍ମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ବ୍ୟବହାର। ରେନ୍, ଏସଏ ଏବଂ ଚେଲିଟେଚେଫ୍, ପି. ଔଷଧ ବିକାଶରେ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ପର୍ଫର୍ମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ବ୍ୟବହାର।ରେନ୍, SA ଏବଂ ଚେଲିସେଫ୍, ପି. ଔଷଧ ବିକାଶରେ ଅଲ୍ଟ୍ରା ହାଇ ପରଫରମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ବ୍ୟବହାର। ୱ୍ରେନ୍, SA ଏବଂ ଟେଲିଚେଫ୍, ପି। ରେନ୍, SA ଏବଂ ଚେଲିଟେଚେଫ୍, ପି.ରେନ୍, SA ଏବଂ ଚେଲିସେଫ୍, ପି. ଔଷଧ ବିକାଶରେ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ପର୍ଫର୍ମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ପ୍ରୟୋଗ।ଜେ. କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି। ୧୧୧୯(୧-୨), ୧୪୦-୧୪୬। https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (୨୦୦୬)।
ଗୁ, ଏଚ୍. ଏଟ୍ ଅନ୍ୟମାନେ। ଏଣ୍ଟେରୋଭାଇରସ୍‌ର ଦକ୍ଷ ବିଶୋଧନ ପାଇଁ ଉଚ୍ଚ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସହିତ ତେଲ-ଭିତରେ-ପାଣି ଏମଲ୍ସନ୍‌ରୁ ପ୍ରାପ୍ତ ଏକ ମୋଲୋଲିଥିକ୍ ମାକ୍ରୋପୋରସ୍ ହାଇଡ୍ରୋଜେଲ୍। 71। ରାସାୟନିକ। ପ୍ରକଳ୍ପ। ଜର୍ଣ୍ଣାଲ୍ 401, 126051 (2020)।
ଶି, ୱାଇ., ଜିଆଙ୍ଗ, ଆର., ହର୍ଭାଥ, ସି. ଏବଂ ୱିଲକିନ୍ସ, ଜେଏ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ସରେ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ଭୂମିକା। ଶି, ୱାଇ., ଜିଆଙ୍ଗ, ଆର., ହର୍ଭାଥ, ସି. ଏବଂ ୱିଲକିନ୍ସ, ଜେଏ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ସରେ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ଭୂମିକା।ଶି, ୱାଇ., ସିଆଙ୍ଗ, ଆର., ହର୍ଭାଥ, ସି. ଏବଂ ୱିଲକିନ୍ସ, ଜେଏ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ସରେ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ଭୂମିକା। ଶି, Y., ଜିଆଙ୍ଗ, ଆର।, ହୋର୍ଭାଥ, ସି ଏବଂ ୱିଲକିନ୍ସ, JA 液相色谱在蛋白质组学中的作用。 ଶି, Y., ଜିଆଙ୍ଗ, ଆର।, ହୋର୍ଭାଥ, ସି ଏବଂ ୱିଲକିନ୍ସ, ଜେଶି, ୱାଇ., ସିଆଙ୍ଗ, ଆର., ହର୍ଭାଥ, ସି. ଏବଂ ୱିଲକିନ୍ସ, ଜେଏ ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ସରେ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ଭୂମିକା।ଜେ. କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି। ଏ ୧୦୫୩ (୧-୨), ୨୭-୩୬ (୨୦୦୪)।
ଫେକେଟ୍, ଏସ୍., ଭୁଟେ, ଜେ.-ଏଲ୍. & ଗୁଇଲାର୍ମେ, ଡି. ଚିକିତ୍ସା ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନର ବିପରୀତ-ଫେଜ୍ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ପୃଥକୀକରଣରେ ନୂତନ ଧାରା: ତତ୍ତ୍ୱ ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗ। & ଗୁଇଲାର୍ମେ, ଡି. ଚିକିତ୍ସା ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନର ବିପରୀତ-ଫେଜ୍ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ପୃଥକୀକରଣରେ ନୂତନ ଧାରା: ତତ୍ତ୍ୱ ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗ। & ଗୁଇଲାର, ଡି। & ଗୁଇଲାର୍ମେ, ଡି. ରିଭର୍ସ ଫେଜ୍ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଦ୍ୱାରା ଚିକିତ୍ସା ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନକୁ ପୃଥକ କରିବାରେ ନୂତନ ଧାରା: ତତ୍ତ୍ୱ ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗ। & Guillarme, D. 治疗性肽和蛋白质的反相液相色谱分离的新趋势：理论和应用。 ଏବଂ ଗୁଇଲାର୍ମେ, ଡି.ଏବଂ ଗୁଇଲାର୍ମେ, ଡି. ରିଭର୍ସ ଫେଜ୍ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଦ୍ୱାରା ଚିକିତ୍ସା ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନଗୁଡ଼ିକୁ ପୃଥକ କରିବାରେ ନୂତନ ଧାରା: ତତ୍ତ୍ୱ ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗ।ଜେ. ଫାର୍ମ. ବାୟୋମେଡିକାଲ୍ ସାଇନ୍ସ. ମଳଦ୍ୱାର. 69, 9–27 (2012).
ଗିଲାର, ଏମ୍., ଅଲିଭୋଭା, ପି., ଡାଲି, AE ଏବଂ ଗେବଲର, ଜେସି ପ୍ରଥମ ଏବଂ ଦ୍ୱିତୀୟ ପୃଥକୀକରଣ ପରିମାଣରେ ଭିନ୍ନ pH ସହିତ RP-RP-HPLC ସିଷ୍ଟମ ବ୍ୟବହାର କରି ପେପ୍ଟାଇଡଗୁଡ଼ିକର ଦୁଇ-ପରିମାଣ ପୃଥକୀକରଣ। ଗିଲାର, ଏମ୍., ଅଲିଭୋଭା, ପି., ଡାଲି, AE ଏବଂ ଗେବଲର, ଜେସି ପ୍ରଥମ ଏବଂ ଦ୍ୱିତୀୟ ପୃଥକୀକରଣ ପରିମାଣରେ ଭିନ୍ନ pH ସହିତ RP-RP-HPLC ସିଷ୍ଟମ ବ୍ୟବହାର କରି ପେପ୍ଟାଇଡଗୁଡ଼ିକର ଦୁଇ-ପରିମାଣ ପୃଥକୀକରଣ।ଗିଲାର ଏମ୍., ଅଲିଭୋଭା ପି., ଡାଲି AE ଏବଂ ଗେବଲର JK ପ୍ରଥମ ଏବଂ ଦ୍ୱିତୀୟ ପୃଥକୀକରଣ ପରିମାଣରେ ଭିନ୍ନ pH ସହିତ RP-RP-HPLC ସିଷ୍ଟମ ବ୍ୟବହାର କରି ପେପ୍ଟାଇଡଗୁଡ଼ିକର ଦୁଇ-ପରିମାଣ ପୃଥକୀକରଣ।ଗିଲାର ଏମ୍., ଅଲିଭୋଭା ପି., ଡାଲି AE ଏବଂ ଗେବଲର JK RP-RP-HPLC ସିଷ୍ଟମ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରଥମ ଏବଂ ଦ୍ୱିତୀୟ ପୃଥକୀକରଣ ପରିମାଣରେ ଭିନ୍ନ pH ମୂଲ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରି ପେପ୍ଟାଇଡଗୁଡ଼ିକର ଦୁଇ-ପରିମାଣ ପୃଥକୀକରଣ। J. ସେପ୍ଟେମ୍ବର ବିଜ୍ଞାନ। 28 (14), 1694–1703 (2005)।
ଫେଲିଟି, ଏସ୍. ଏଟ୍ ଅଲ୍। 2 µm ରୁ ଛୋଟ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଛିଦ୍ର ଏବଂ ଉପର ଛିଦ୍ର C18 କଣିକା ସହିତ ପ୍ୟାକ୍ ହୋଇଥିବା ଉଚ୍ଚ-କାର୍ମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକର ଗଣ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ଏବଂ ଗତିଜ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡ଼ିକର ତଦନ୍ତ। ଜେ. ସେପ୍ଟେମ୍ବର ବିଜ୍ଞାନ। 43 (9-10), 1737-1745 (2020)।
ପିଓଭେସାନା, ଏସ୍. ଏଟ୍ ଅନ୍ୟମାନେ। ଉଦ୍ଭିଦ ଜୈବ ସକ୍ରିୟ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସର ପୃଥକୀକରଣ, ଚିହ୍ନଟକରଣ ଏବଂ ବୈଧକରଣରେ ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଧାରା ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣାତ୍ମକ ଚ୍ୟାଲେଞ୍ଜ। ମଳଦ୍ୱାର। ପ୍ରାଣୀ ମଳଦ୍ୱାର। ରାସାୟନିକ। 410(15), 3425-3444। https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018)।
ମୁଲର, ଜେବି ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ। ଜୀବନର ରାଜ୍ୟର ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ ଭୂଦୃଶ୍ୟ। ପ୍ରକୃତି 582 (7813), 592–596। https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020)।
ଡି ଲୁକା, କେ. ଏଟ୍ ଅନ୍ୟମାନେ। ପ୍ରସ୍ତୁତିମୂଳକ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଦ୍ୱାରା ଚିକିତ୍ସା ପେପ୍ଟାଇଡ୍‌ର ପରବର୍ତ୍ତୀ ଚିକିତ୍ସା। ଅଣୁ (ବାସେଲ୍, ସ୍ୱିଜରଲ୍ୟାଣ୍ଡ) 26(15), 4688 (2021)।
ୟାଙ୍ଗ, ୱାଇ. ଏବଂ ଗେଙ୍ଗ, ଏକ୍ସ. ମିଶ୍ରିତ-ମୋଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଏବଂ ବାୟୋପଲିମରରେ ଏହାର ପ୍ରୟୋଗ। ୟାଙ୍ଗ, ୱାଇ. ଏବଂ ଗେଙ୍ଗ, ଏକ୍ସ. ମିଶ୍ରିତ-ମୋଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଏବଂ ବାୟୋପଲିମରରେ ଏହାର ପ୍ରୟୋଗ।ୟାଙ୍ଗ, ୟୁ. ଏବଂ ଗେଙ୍ଗ, ଏକ୍ସ. ମିଶ୍ରିତ ମୋଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଏବଂ ବାୟୋପଲିମରରେ ଏହାର ପ୍ରୟୋଗ। ୟାଙ୍ଗ, Y. ଏବଂ ଗେଙ୍ଗ, X. 混合模式色谱及其在生物聚合物中的应用。 ୟାଙ୍ଗ, ୱାଇ. ଏବଂ ଗେଙ୍ଗ, ଏକ୍ସ. ମିଶ୍ରିତ ମୋଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଏବଂ ବାୟୋପଲିମରରେ ଏହାର ପ୍ରୟୋଗ।ୟାଙ୍ଗ, ୟୁ. ଏବଂ ଜିନ୍, ଏକ୍ସ. ମିଶ୍ରିତ ମୋଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଏବଂ ବାୟୋପଲିମରରେ ଏହାର ପ୍ରୟୋଗ।ଜେ. କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି। ଏ ୧୨୧୮(୪୯), ୮୮୧୩–୮୮୨୫ (୨୦୧୧)।