ຂອບໃຈທີ່ທ່ານເຂົ້າມາຢ້ຽມຊົມ Nature.com. ທ່ານກຳລັງໃຊ້ໂປຣແກຣມທ່ອງເວັບລຸ້ນທີ່ມີການຮອງຮັບ CSS ທີ່ຈຳກັດ. ເພື່ອປະສົບການທີ່ດີທີ່ສຸດ, ພວກເຮົາແນະນຳໃຫ້ທ່ານໃຊ້ໂປຣແກຣມທ່ອງເວັບທີ່ອັບເດດແລ້ວ (ຫຼືປິດໂໝດຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ໃນ Internet Explorer). ນອກຈາກນັ້ນ, ເພື່ອຮັບປະກັນການຮອງຮັບຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ, ພວກເຮົາສະແດງເວັບໄຊທ໌ໂດຍບໍ່ມີຮູບແບບ ແລະ JavaScript.
ສະແດງຮູບໝູນໝູນຂອງສາມສະໄລ້ພ້ອມກັນ. ໃຊ້ປຸ່ມກ່ອນໜ້າ ແລະ ຕໍ່ໄປເພື່ອເລື່ອນຜ່ານສາມສະໄລ້ໃນເວລາດຽວກັນ, ຫຼືໃຊ້ປຸ່ມຕົວເລື່ອນຢູ່ທ້າຍເພື່ອເລື່ອນຜ່ານສາມສະໄລ້ໃນເວລາດຽວກັນ.
ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ມີຮູພຸນໄດ້ຖືກກະກຽມໂດຍວິທີການ sol-gel ດ້ວຍການດັດແປງບາງຢ່າງເພື່ອໃຫ້ໄດ້ອະນຸພາກທີ່ມີຮູພຸນກວ້າງ. ອະນຸພາກເຫຼົ່ານີ້ໄດ້ຖືກອະນຸພັນດ້ວຍ N-phenylmaleimide-methylvinyl isocyanate (PMI) ແລະ styrene ຜ່ານການໂພລີເມີໄລເຊຊັນ reverse chain transfer-fragmentation (RAFT) ເພື່ອຜະລິດໂພລີອາໄມ N-phenylmaleimide intercalated. Styrene (PMP) ໄລຍະຢຸດນິ້ງ. ຖັນເຫຼັກສະແຕນເລດຮູແຄບ (ເສັ້ນຜ່າສູນກາງພາຍໃນ 100 × 1.8 ມມ) ໄດ້ຖືກບັນຈຸດ້ວຍການຫຸ້ມຫໍ່ແບບ slurry. ປະສິດທິພາບໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງຖັນ PMP ໄດ້ຖືກປະເມີນເພື່ອແຍກສ່ວນປະສົມຂອງ peptides ສັງເຄາະທີ່ປະກອບດ້ວຍ peptides ຫ້າຊະນິດ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leu amino acid enkephalin) ແລະ tryptic hydrolyzate ຂອງ human serum albumin (HAS). ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການລະລາຍທີ່ດີທີ່ສຸດ, ຈຳນວນແຜ່ນທາງທິດສະດີທີ່ມີສ່ວນປະສົມຂອງເພບໄທດ໌ບັນລຸ 280,000 ແຜ່ນ/ຕາແມັດ. ເມື່ອປຽບທຽບປະສິດທິພາບການແຍກຂອງຖັນທີ່ພັດທະນາແລ້ວກັບຖັນ Ascentis Express RP-Amide ທາງການຄ້າ, ສັງເກດເຫັນວ່າປະສິດທິພາບການແຍກຂອງຖັນ PMP ແມ່ນດີກ່ວາຖັນທາງການຄ້າໃນດ້ານປະສິດທິພາບການແຍກ ແລະ ຄວາມລະອຽດ.
ອຸດສາຫະກຳຢາຊີວະພາບໄດ້ກາຍເປັນຕະຫຼາດໂລກທີ່ກຳລັງຂະຫຍາຍຕົວດ້ວຍສ່ວນແບ່ງຕະຫຼາດທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນຊຸມປີມໍ່ໆມານີ້. ດ້ວຍການເຕີບໂຕຢ່າງໄວວາຂອງອຸດສາຫະກຳຢາຊີວະພາບ1,2,3 ມີຄວາມຕ້ອງການຢ່າງຫຼວງຫຼາຍສຳລັບການວິເຄາະເພບໄທດ໌ ແລະ ໂປຣຕີນ. ນອກເໜືອໄປຈາກເພບໄທດ໌ເປົ້າໝາຍ, ສິ່ງເຈືອປົນຕ່າງໆກໍ່ເກີດຂຶ້ນໃນລະຫວ່າງການສັງເຄາະເພບໄທດ໌, ສະນັ້ນການກັ່ນຕອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຈຶ່ງເປັນສິ່ງຈຳເປັນເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຄວາມບໍລິສຸດທີ່ຕ້ອງການຂອງເພບໄທດ໌. ການວິເຄາະ ແລະ ການກໍານົດລັກສະນະຂອງໂປຣຕີນໃນນໍ້າໃນຮ່າງກາຍ, ເນື້ອເຍື່ອ ແລະ ຈຸລັງແມ່ນວຽກງານທີ່ທ້າທາຍຫຼາຍເນື່ອງຈາກມີຊະນິດພັນທີ່ສາມາດກວດພົບໄດ້ຈຳນວນຫຼວງຫຼາຍທີ່ມີຢູ່ໃນຕົວຢ່າງດຽວ. ເຖິງແມ່ນວ່າມວນສານສະເປກໂຕຣມິຕີເປັນເຄື່ອງມືທີ່ມີປະສິດທິພາບສໍາລັບການຈັດລໍາດັບເພບໄທດ໌ ແລະ ໂປຣຕີນ, ຖ້າຕົວຢ່າງດັ່ງກ່າວຖືກນໍາເຂົ້າໄປໃນເຄື່ອງສະເປກໂຕຣມິເຕີມວນສານໂດຍກົງ, ການແຍກອອກຈະບໍ່ເປັນທີ່ພໍໃຈ. ບັນຫານີ້ສາມາດແກ້ໄຂໄດ້ໂດຍການປະຕິບັດການໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວ (LC) ກ່ອນການວິເຄາະ MS, ເຊິ່ງຈະຫຼຸດຜ່ອນປະລິມານຂອງສານວິເຄາະທີ່ເຂົ້າໄປໃນເຄື່ອງສະເປກໂຕຣມິເຕີມວນສານໃນເວລາທີ່ກໍານົດໄວ້4,5,6. ນອກຈາກນັ້ນ, ສານວິເຄາະສາມາດສຸມຢູ່ໃນພື້ນທີ່ແຄບໃນລະຫວ່າງການແຍກໄລຍະຂອງແຫຼວ, ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງສຸມສານວິເຄາະເຫຼົ່ານີ້ ແລະ ເພີ່ມຄວາມອ່ອນໄຫວຂອງການກວດຈັບ MS. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວ (LC) ໄດ້ກ້າວໜ້າຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນໄລຍະທົດສະວັດທີ່ຜ່ານມາ ແລະ ໄດ້ກາຍເປັນວິທີການທີ່ໃຊ້ກັນຢ່າງກວ້າງຂວາງສຳລັບການວິເຄາະໂປຣຕີໂອມິກ7,8,9,10.
ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແຫຼວໄລຍະປີ້ນກັບກັນ (RP-LC) ຖືກນຳໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງເພື່ອເຮັດໃຫ້ບໍລິສຸດ ແລະ ແຍກສ່ວນປະສົມຂອງເພບໄທດ໌ໂດຍໃຊ້ຊິລິກາທີ່ດັດແປງ octadecyl (ODS) ເປັນໄລຍະຄົງທີ່11,12,13. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ເນື່ອງຈາກໂຄງສ້າງທີ່ສັບສົນ ແລະ ລັກສະນະແອມໂຟເຕີຣິກຂອງມັນ,14,15 ໄລຍະຄົງທີ່ RP ບໍ່ສາມາດໃຫ້ການແຍກເພບໄທດ໌ ແລະ ໂປຣຕີນທີ່ໜ້າພໍໃຈ. ດັ່ງນັ້ນ, ການວິເຄາະເພບໄທດ໌ ແລະ ໂປຣຕີນທີ່ມີຊິ້ນສ່ວນທີ່ມີຂົ້ວ ແລະ ບໍ່ມີຂົ້ວຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີໄລຍະຄົງທີ່ທີ່ອອກແບບມາເປັນພິເສດເພື່ອພົວພັນ ແລະ ຮັກສາການວິເຄາະເຫຼົ່ານີ້16. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີປະສົມ, ເຊິ່ງສະເໜີການພົວພັນຫຼາຍຮູບແບບ, ສາມາດເປັນທາງເລືອກອື່ນແທນ RP-LC ສຳລັບການແຍກເພບໄທດ໌, ໂປຣຕີນ ແລະ ສ່ວນປະສົມທີ່ສັບສົນອື່ນໆ. ໄລຍະຄົງທີ່ແບບປະສົມຫຼາຍໄລຍະໄດ້ຖືກກະກຽມ ແລະ ຖັນທີ່ເຕັມໄປດ້ວຍໄລຍະຄົງທີ່ເຫຼົ່ານີ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອແຍກເພບໄທດ໌ ແລະ ໂປຣຕີນ17,18,19,20,21. ເນື່ອງຈາກມີກຸ່ມທີ່ມີຂົ້ວ ແລະ ບໍ່ມີຂົ້ວ, ໄລຍະທີ່ຢູ່ກັບຮູບແບບປະສົມ (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, ການແຊກແຊງຂົ້ວ/RPLC) ແມ່ນເໝາະສົມສຳລັບການແຍກ peptides ແລະ ໂປຣຕີນ22,23,24,25,26,27,28. , ໄລຍະທີ່ຢູ່ກັບທີ່ມີຂົ້ວທີ່ມີກຸ່ມຂົ້ວທີ່ມີພັນທະໂຄວາເລນສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມສາມາດໃນການແຍກທີ່ດີ ແລະ ການເລືອກທີ່ເປັນເອກະລັກສຳລັບການວິເຄາະທີ່ມີຂົ້ວ ແລະ ບໍ່ມີຂົ້ວ ເພາະວ່າການແຍກແມ່ນຂຶ້ນກັບການພົວພັນລະຫວ່າງການວິເຄາະ ແລະ ໄລຍະທີ່ຢູ່ກັບ ການພົວພັນຫຼາຍຮູບແບບ 29,30,31,32. ເມື່ອບໍ່ດົນມານີ້, Zhang ແລະ ຄະນະ 30 ໄດ້ຮັບໄລຍະທີ່ຢູ່ກັບ polyamines ທີ່ມີ behenyl terminated ແລະ ໄດ້ແຍກ hydrocarbons, antidepressants, flavonoids, nucleosides, estrogens, ແລະ analytes ອື່ນໆໄດ້ສຳເລັດ. ວັດສະດຸທີ່ຢູ່ກັບທີ່ຝັງຢູ່ໃນຂົ້ວມີທັງກຸ່ມທີ່ມີຂົ້ວ ແລະ ບໍ່ມີຂົ້ວ, ສະນັ້ນມັນສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອແຍກ peptides ແລະ ໂປຣຕີນອອກເປັນສ່ວນທີ່ບໍ່ລະລາຍ ແລະ ສ່ວນທີ່ບໍ່ລະລາຍ. ຖັນແບບ Polar inline (ເຊັ່ນ: ຖັນ C18 ທີ່ມີ amide inline) ແມ່ນມີຢູ່ພາຍໃຕ້ຊື່ການຄ້າວ່າ ຖັນ Ascentis Express RP-Amide, ແຕ່ຖັນເຫຼົ່ານີ້ຖືກໃຊ້ສຳລັບການວິເຄາະ amine 33 ເທົ່ານັ້ນ.
ໃນການສຶກສາໃນປະຈຸບັນ, ໄລຍະຢຸດນິ້ງທີ່ຝັງຢູ່ໃນຂົ້ວ (N-phenylmaleimide, ໂພລີສະໄຕຣີນທີ່ຝັງຢູ່ໃນຂົ້ວ) ໄດ້ຖືກກະກຽມ ແລະ ປະເມີນຜົນສຳລັບການແຍກເພບໄທດ໌ ແລະ ການແຍກ HSA ແບບທຣິບຕິກ. ຍຸດທະສາດຕໍ່ໄປນີ້ໄດ້ຖືກນຳໃຊ້ເພື່ອກະກຽມໄລຍະຢຸດນິ້ງ. ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ມີຮູພຸນໄດ້ຖືກກະກຽມຕາມຂັ້ນຕອນທີ່ໄດ້ອະທິບາຍໄວ້ໃນສິ່ງພິມກ່ອນໜ້ານີ້ຂອງພວກເຮົາ, ໂດຍມີການປ່ຽນແປງບາງຢ່າງໃນແຜນການກະກຽມ 31, 34, 35, 36, 37, 38, 39. ອັດຕາສ່ວນຂອງຢູເຣຍ, ໂພລີເອທິລີນໄກຄໍ (PEG), TMOS ແລະ ກົດນ້ຳ-ອາເຊຕິກໄດ້ຖືກປັບເພື່ອໃຫ້ໄດ້ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ມີຂະໜາດຮູພຸນໃຫຍ່. ອັນທີສອງ, ລີກັນ phenylmaleimide-methylvinyl isocyanate ໃໝ່ໄດ້ຖືກສັງເຄາະ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ດັດແປງແລ້ວຂອງມັນໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກະກຽມໄລຍະຢຸດນິ້ງທີ່ຝັງຢູ່ໃນຂົ້ວ. ໄລຍະຢຸດນິ້ງທີ່ໄດ້ຮັບໄດ້ຖືກບັນຈຸເຂົ້າໄປໃນຖັນເຫຼັກສະແຕນເລດ (ເສັ້ນຜ່າສູນກາງພາຍໃນ 100 × 1.8 ມມ) ຕາມແຜນການຫຸ້ມຫໍ່ທີ່ດີທີ່ສຸດ. ການຫຸ້ມຫໍ່ຂອງຖັນແມ່ນໄດ້ຮັບການຊ່ວຍເຫຼືອຈາກການສັ່ນສະເທືອນກົນຈັກເພື່ອຮັບປະກັນຊັ້ນທີ່ເປັນເອກະພາບພາຍໃນຖັນ. ຖັນທີ່ບັນຈຸໄດ້ຖືກປະເມີນຜົນສຳລັບການແຍກສ່ວນປະສົມຂອງ peptides ທີ່ປະກອບດ້ວຍ peptides ຫ້າຊະນິດ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, peptide leucine-enkephalin) ແລະ tryptic hydrolysates ຂອງ albumin ໃນເລືອດຂອງມະນຸດ (HSA). ມັນໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນວ່າສ່ວນປະສົມ peptide ແລະ tryptic digest HSA ໄດ້ແຍກອອກຈາກກັນດ້ວຍຄວາມລະອຽດ ແລະ ປະສິດທິພາບທີ່ດີ. ປະສິດທິພາບການແຍກຂອງຖັນ PMP ໄດ້ຖືກປຽບທຽບກັບຖັນ Ascentis Express RP-Amide. ມັນໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນວ່າ peptides ແລະ ໂປຣຕີນມີຄວາມລະອຽດທີ່ດີ ແລະ ປະສິດທິພາບການແຍກສູງໃນຖັນ PMP, ແລະ ປະສິດທິພາບການແຍກຂອງຖັນ PMP ແມ່ນສູງກວ່າຖັນ Ascentis Express RP-Amide.
PEG (ໂພລີເອທິລີນ ໄກຄໍ), ຢູເຣຍ, ກົດອະຊິຕິກ, ທຣີເມທອກຊີອໍໂທຊິລິເຄດ (TMOS), ທຣີເມທິລຄລໍໂຣຊິເລນ (TMCS), ທຣິບຊິນ, ອັລບັ້ມມິນໃນເລືອດຂອງມະນຸດ (HSA), ແອມໂມນຽມ ຄລໍໄຣ, ຢູເຣຍ, ເຮັກຊາເມທິລເມທາຄຣິລອຍດີຊິລາເຊນ (HMDS), ເມທາຄຣິລອຍຄລໍໄຣ (MC), ສະໄຕຣີນ, 4-ໄຮດຣອກຊີ-ເທມໂພ, ເບນໂຊອິລເປີອອກໄຊ (BPO), ອາເຊໂຕໄນໄຕຣ (ACN) ສຳລັບ HPLC, ເມທານອນ, 2-ໂປຣພານອລ ແລະ ອາເຊໂຕນ. ບໍລິສັດ Sigma-Aldrich (ເຊນຫຼຸຍ, ມິສຊູຣີ, ສະຫະລັດອາເມລິກາ).
ສ່ວນປະສົມຂອງຢູເຣຍ (8 ກຣາມ), ໂພລີເອທິລີນໄກຄໍ (8 ກຣາມ) ແລະ ກົດອະຊິຕິກ 0.01 N. 8 ມລ ໄດ້ຖືກຄົນເປັນເວລາ 10 ນາທີ, ແລະ TMOS 24 ມລ ໄດ້ຖືກເພີ່ມເຂົ້າໄປໃນນັ້ນພາຍໃຕ້ການເຮັດໃຫ້ເຢັນດ້ວຍນ້ຳກ້ອນ. ສ່ວນປະສົມປະຕິກິລິຍາໄດ້ຖືກໃຫ້ຄວາມຮ້ອນທີ່ 40°C ເປັນເວລາ 6 ຊົ່ວໂມງ ແລະ ຫຼັງຈາກນັ້ນທີ່ 120°C ເປັນເວລາ 8 ຊົ່ວໂມງໃນເຕົາອົບສະແຕນເລດ. ນ້ຳໄດ້ຖືກຖອກອອກ ແລະ ສິ່ງເສດເຫຼືອໄດ້ຖືກເຮັດໃຫ້ແຫ້ງທີ່ 70°C ເປັນເວລາ 12 ຊົ່ວໂມງ. ທ່ອນອ່ອນທີ່ແຫ້ງແລ້ວໄດ້ຖືກບົດໃຫ້ລຽບ ແລະ ເຜົາໃນເຕົາອົບທີ່ 550°C ເປັນເວລາ 12 ຊົ່ວໂມງ. ສາມລຸ້ນໄດ້ຖືກກະກຽມ ແລະ ມີລັກສະນະເພື່ອທົດສອບຄວາມສາມາດໃນການຜະລິດຊ້ຳຂອງຂະໜາດຂອງອະນຸພາກ, ຂະໜາດຮູຂຸມຂົນ ແລະ ພື້ນທີ່ຜິວ.
ກຸ່ມຂົ້ວໂລກ ແລະ ໄລຍະຢູ່ກັບທີ່ສຳລັບຕ່ອງໂສ້ໂພລີສະໄຕຣີນ. ຂັ້ນຕອນການກະກຽມໄດ້ຖືກອະທິບາຍໄວ້ຂ້າງລຸ່ມນີ້.
N-phenylmaleimide (200 ມກ) ແລະ methyl vinyl isocyanate (100 ມກ) ຖືກລະລາຍໃນ toluene ທີ່ບໍ່ມີນ້ຳ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນ 0.1 ml ຂອງ 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) ໄດ້ຖືກເພີ່ມໃສ່ flask ປະຕິກິລິຍາເພື່ອໃຫ້ໄດ້ copolymer ຂອງ phenylmaleimide ແລະ methyl vinyl isocyanate (PMCP). ສ່ວນປະສົມດັ່ງກ່າວໄດ້ຖືກໃຫ້ຄວາມຮ້ອນທີ່ 60°C ເປັນເວລາ 3 ຊົ່ວໂມງ, ກັ່ນຕອງ ແລະ ຕາກແຫ້ງໃນເຕົາອົບທີ່ 40°C ເປັນເວລາ 3 ຊົ່ວໂມງ.
ອະນຸພາກຊິລິກາແຫ້ງ (2 ກຣາມ) ຖືກກະຈາຍຢູ່ໃນ toluene ແຫ້ງ (100 ມລ), ຄົນໃຫ້ເຂົ້າກັນ ແລະ ສັ່ນສະເທືອນດ້ວຍຄື້ນສຽງເປັນເວລາ 10 ນາທີໃນຂວດກົ້ນກົມ 500 ມລ. PMCP (10 ມກ) ຖືກລະລາຍໃນ toluene ແລະ ຕື່ມໃສ່ຂວດປະຕິກິລິຍາຜ່ານຊ່ອງທາງເພີ່ມ. ສ່ວນປະສົມດັ່ງກ່າວຖືກກັ່ນຄືນທີ່ 100°C ເປັນເວລາ 8 ຊົ່ວໂມງ, ກັ່ນຕອງ, ລ້າງດ້ວຍ acetone ແລະ ອົບແຫ້ງທີ່ 60°C ເປັນເວລາ 3 ຊົ່ວໂມງ. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບ PMCP (100 ກຣາມ) ຖືກລະລາຍໃນ toluene (200 ມລ), ແລະ 4-hydroxy-TEMPO (2 ມລ) ໄດ້ຖືກເພີ່ມເຂົ້າໄປໃນນັ້ນໂດຍມີ dibutyltin dilaurate 100 μl ເປັນຕົວເລັ່ງປະຕິກິລິຍາ. ສ່ວນປະສົມດັ່ງກ່າວຖືກຄົນຢູ່ທີ່ 50°C ເປັນເວລາ 8 ຊົ່ວໂມງ, ກັ່ນຕອງ ແລະ ອົບແຫ້ງທີ່ 50°C ເປັນເວລາ 3 ຊົ່ວໂມງ.
ສະໄຕຣີນ (1 ມລ), ເບນໂຊອິລເປີອອກໄຊ BPO (0.5 ມລ) ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຕິດກັບ TEMPO-PMCP (1.5 ກຣາມ) ໄດ້ຖືກກະຈາຍໄປໃນໂທລູອີນ ແລະ ລ້າງອອກດ້ວຍໄນໂຕຣເຈນ. ການໂພລີເມີໄຣເຊຊັນຂອງສະໄຕຣີນໄດ້ຖືກປະຕິບັດຢູ່ທີ່ 100°C ເປັນເວລາ 12 ຊົ່ວໂມງ. ຜະລິດຕະພັນທີ່ໄດ້ຮັບໄດ້ຖືກລ້າງດ້ວຍເມທານອນ ແລະ ຕາກແຫ້ງຄ້າງຄືນທີ່ 60°C. ຮູບແບບທົ່ວໄປຂອງປະຕິກິລິຍາແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີໜຶ່ງ.
ຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກ degassed ທີ່ 393 K ເປັນເວລາ 1 ຊົ່ວໂມງ ຈົນກວ່າຈະໄດ້ຮັບຄວາມກົດດັນທີ່ເຫຼືອໜ້ອຍກວ່າ 10–3 Torr. ປະລິມານຂອງ N2 ທີ່ດູດຊຶມຢູ່ທີ່ຄວາມກົດດັນທຽບເທົ່າ P/P0 = 0.99 ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກໍານົດປະລິມານຮູຂຸມຂົນທັງໝົດ. ຮູບຮ່າງຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີກັນໄດ້ຖືກກວດສອບໂດຍໃຊ້ກ້ອງຈຸລະທັດອີເລັກໂຕຣນສະແກນ (Hitachi High Technologies, ໂຕກຽວ, ຍີ່ປຸ່ນ). ຕົວຢ່າງແຫ້ງ (ຊິລິກາບໍລິສຸດ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີກັນ) ໄດ້ຖືກວາງໄວ້ເທິງແທ່ງອາລູມິນຽມໂດຍໃຊ້ເທບຄາບອນ. ຄໍາໄດ້ຖືກວາງໄວ້ໃນຕົວຢ່າງໂດຍໃຊ້ອຸປະກອນສະເປຣດ Q150T, ແລະຊັ້ນ Au ໜາ 5 nm ໄດ້ຖືກວາງໄວ້ໃນຕົວຢ່າງ. ສິ່ງນີ້ຊ່ວຍປັບປຸງປະສິດທິພາບຂອງຂະບວນການແຮງດັນຕໍ່າ ແລະ ໃຫ້ການສີດພົ່ນເຢັນທີ່ລະອຽດ. ການວິເຄາະທາດໄດ້ຖືກປະຕິບັດໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວິເຄາະສ່ວນປະກອບທາດ Thermo Electron (Waltham, MA, USA) Flash EA1112. ເຄື່ອງວິເຄາະຂະໜາດອະນຸພາກ Malvern (Worcestershire, UK) Mastersizer 2000 ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອໄດ້ຮັບການແຈກຢາຍຂະໜາດອະນຸພາກ. ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ບໍ່ໄດ້ເຄືອບ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີແກນ (5 ມກ ແຕ່ລະອັນ) ໄດ້ຖືກກະຈາຍໃນໄອໂຊໂປຣພານອລ 5 ມລ, ສັ່ນດ້ວຍສຽງເປັນເວລາ 10 ນາທີ, ສັ່ນເປັນເວລາ 5 ນາທີ, ແລະ ວາງໄວ້ເທິງໂຕະແສງ Mastersizer. ການວິເຄາະຄວາມໜາຂອງຄວາມຮ້ອນແມ່ນດຳເນີນໃນອັດຕາ 5°C ຕໍ່ນາທີໃນຊ່ວງອຸນຫະພູມຕັ້ງແຕ່ 30 ຫາ 800°C.
ເສົາເຫຼັກສະແຕນເລດຮູແຄບທີ່ຮອງດ້ວຍເສັ້ນໃຍແກ້ວທີ່ມີຂະໜາດ (ID 100 × 1.8 ມມ) ໄດ້ຖືກບັນຈຸໂດຍວິທີການຕື່ມນ້ຳຢາຕາມຂັ້ນຕອນດຽວກັນກັບໃນເອກະສານອ້າງອີງ 31. ເສົາເຫຼັກສະແຕນເລດ (ຮອງດ້ວຍເສັ້ນແກ້ວ, ID 100 × 1 .8 ມມ) ແລະທາງອອກທີ່ມີ frit 1 µm ໄດ້ເຊື່ອມຕໍ່ກັບເຄື່ອງຫຸ້ມຫໍ່ນ້ຳຢາ (Alltech Deerfield, IL, USA). ກະກຽມການລະລາຍຂອງໄລຍະຄົງທີ່ໂດຍການລະລາຍ 150 ມກ ຂອງໄລຍະຄົງທີ່ໃນ 1.2 ມລ ຂອງ methanol ແລະປ້ອນມັນເຂົ້າໄປໃນຖັນເກັບນ້ຳ. Methanol ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເປັນຕົວລະລາຍນ້ຳຢາ ແລະຕົວລະລາຍຄວບຄຸມ. ຫຸ້ມຫໍ່ຖັນໂດຍການໃຊ້ລໍາດັບຄວາມດັນ 100 MP ເປັນເວລາ 10 ນາທີ, 80 MP ເປັນເວລາ 15 ນາທີ, ແລະ 60 MP ເປັນເວລາ 30 ນາທີ. ຂະບວນການຫຸ້ມຫໍ່ໄດ້ໃຊ້ເຄື່ອງສັ່ນຖັນແກັສໂຄຣມາໂຕກຣາຟີສອງເຄື່ອງ (Alltech, Deerfield, IL, USA) ສໍາລັບການສັ່ນສະເທືອນກົນຈັກເພື່ອຮັບປະກັນການຫຸ້ມຫໍ່ຖັນທີ່ເປັນເອກະພາບ. ປິດເຄື່ອງຫຸ້ມຫໍ່ນ້ຳຢາ ແລະປ່ອຍຄວາມດັນຊ້າໆເພື່ອປ້ອງກັນຄວາມເສຍຫາຍຕໍ່ເຊືອກ. ຖັນໄດ້ຖືກຕັດການເຊື່ອມຕໍ່ຈາກຫົວສີດນ້ຳ ແລະ ມີຂໍ້ຕໍ່ອີກອັນໜຶ່ງຕິດກັບທາງເຂົ້າ ແລະ ເຊື່ອມຕໍ່ກັບລະບົບ LC ເພື່ອທົດສອບການເຮັດວຽກຂອງມັນ.
MLC ແບບກຳນົດເອງໄດ້ຖືກສ້າງຂຶ້ນໂດຍໃຊ້ປໍ້າ LC (10AD Shimadzu, ຍີ່ປຸ່ນ), ເຄື່ອງເກັບຕົວຢ່າງທີ່ມີວົງແຫວນສີດ 50 nL (Valco (USA) C14 W.05), ເຄື່ອງລະບາຍອາຍແກັສເຍື່ອ (Shimadzu DGU-14A), ແລະປ່ອງຢ້ຽມ capillary UV-VIS. ອຸປະກອນກວດຈັບ (UV-2075) ແລະຖັນຈຸລະພາກທີ່ເຄືອບດ້ວຍຢາ. ໃຊ້ທໍ່ເຊື່ອມຕໍ່ທີ່ແຄບ ແລະ ສັ້ນຫຼາຍເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນຜົນກະທົບຂອງການຂະຫຍາຍຖັນເພີ່ມເຕີມ. ຫຼັງຈາກຕື່ມຖັນແລ້ວ, ໃຫ້ຕິດຕັ້ງ capillary (50 µm id 365) ຢູ່ທີ່ທາງອອກຂອງຈຸດເຊື່ອມຕໍ່ຫຼຸດຜ່ອນ 1/16″ ແລະຕິດຕັ້ງ capillary (50 µm) ຂອງຈຸດເຊື່ອມຕໍ່ການຫຼຸດຜ່ອນ. ການເກັບກຳຂໍ້ມູນ ແລະ ການປະມວນຜົນ chromatogram ແມ່ນປະຕິບັດໂດຍໃຊ້ຊອບແວ Multichro 2000. ທີ່ 254 nm, ການດູດຊຶມ UV ຂອງວັດຖຸວິເຄາະໄດ້ຖືກຕິດຕາມກວດກາຢູ່ທີ່ 0. ຂໍ້ມູນ Chromatographic ໄດ້ຖືກວິເຄາະໂດຍໃຊ້ OriginPro8 (Northampton, MA).
ຜົງອາລະບູມິນໃນເລືອດຂອງມະນຸດ, ຜົງແຫ້ງ, ≥ 96% (agarose gel electrophoresis) 3 ມກ ປະສົມກັບ trypsin (1.5 ມກ), 4.0 M urea (1 ມລ) ແລະ 0.2 M ammonium bicarbonate (1 ມລ). ຄົນສານລະລາຍເປັນເວລາ 10 ນາທີ ແລະ ເກັບໄວ້ໃນອ່າງນໍ້າທີ່ອຸນຫະພູມ 37°C ເປັນເວລາ 6 ຊົ່ວໂມງ, ຈາກນັ້ນດັບດ້ວຍ 1 ml ຂອງ TFA 0.1%. ກອງສານລະລາຍ ແລະ ເກັບຮັກສາໄວ້ໃນອຸນຫະພູມຕໍ່າກວ່າ 4°C.
ການແຍກສ່ວນປະສົມຂອງ peptides ແລະ tryptic digest HSA ໃນຖັນ PMP ໄດ້ຖືກປະເມີນແຍກຕ່າງຫາກ. ກວດສອບການ hydrolysis tryptic ຂອງສ່ວນປະສົມຂອງ peptides ແລະ HSA ທີ່ແຍກອອກໂດຍຖັນ PMP ແລະປຽບທຽບຜົນໄດ້ຮັບກັບຖັນ Ascentis Express RP-Amide. ຈຳນວນແຜ່ນທາງທິດສະດີແມ່ນຄິດໄລ່ໂດຍໃຊ້ສົມຜົນຕໍ່ໄປນີ້:
ຮູບພາບ SEM ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີແກນແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 2. ຮູບພາບ SEM ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ (A, B) ສະແດງໃຫ້ເຫັນຮູບຮ່າງກົມທີ່ອະນຸພາກມີຄວາມຍາວ ຫຼື ມີຄວາມສົມມາດທີ່ບໍ່ສະໝໍ່າສະເໝີເມື່ອທຽບກັບການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ຂອງພວກເຮົາ. ໜ້າຜິວຂອງອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີແກນ (C, D) ແມ່ນລຽບກວ່າໜ້າຜິວຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ, ເຊິ່ງອາດຈະເປັນຍ້ອນຕ່ອງໂສ້ໂພລີສະໄຕຣີນທີ່ປົກຄຸມໜ້າຜິວຂອງອະນຸພາກຊິລິກາ.
ຮູບພາບຈຸລະທັດອີເລັກຕຣອນສະແກນຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ (A, B) ແລະອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີແກນ (C, D).
ການແຈກຢາຍຂະໜາດອະນຸພາກຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີແກນແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 2.3(A). ເສັ້ນໂຄ້ງການແຈກຢາຍຂະໜາດອະນຸພາກແບບປະລິມານສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຂະໜາດອະນຸພາກຊິລິກາເພີ່ມຂຶ້ນຫຼັງຈາກການດັດແປງທາງເຄມີ (ຮູບທີ 3A). ຂໍ້ມູນການແຈກຢາຍຂະໜາດອະນຸພາກຊິລິກາຈາກການສຶກສາໃນປະຈຸບັນ ແລະ ການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ໄດ້ຖືກປຽບທຽບໃນຕາຕະລາງທີ 1(A). ຂະໜາດອະນຸພາກແບບປະລິມານ d(0.5) ຂອງ PMP ແມ່ນ 3.36 µm, ເມື່ອທຽບກັບຄ່າ ad(0.5) ທີ່ 3.05 µm ໃນການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ຂອງພວກເຮົາ (ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບໂພລີສະໄຕຣີນ)34. ເນື່ອງຈາກການປ່ຽນແປງອັດຕາສ່ວນຂອງ PEG, ຢູເຣຍ, TMOS ແລະ ກົດອະຊີຕິກໃນສ່ວນປະສົມປະຕິກິລິຍາ, ການແຈກຢາຍຂະໜາດອະນຸພາກຂອງຊຸດນີ້ແຄບລົງເມື່ອທຽບກັບການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ຂອງພວກເຮົາ. ຂະໜາດອະນຸພາກຂອງໄລຍະ PMP ແມ່ນໃຫຍ່ກວ່າໄລຍະອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບໂພລີສະໄຕຣີນເລັກນ້ອຍທີ່ພວກເຮົາໄດ້ສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້. ນີ້ໝາຍຄວາມວ່າການເຮັດວຽກຂອງພື້ນຜິວຂອງອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ມີສະໄຕຣີນໄດ້ຝາກພຽງແຕ່ຊັ້ນໂພລີສະໄຕຣີນ (0.97 µm) ໄວ້ເທິງໜ້າດິນຊິລິກາ, ໃນຂະນະທີ່ຢູ່ໃນໄລຍະ PMP ຄວາມໜາຂອງຊັ້ນແມ່ນ 1.38 µm.
ການແຈກຢາຍຂະໜາດຂອງອະນຸພາກ (A) ແລະ ການແຈກຢາຍຂະໜາດຮູຂຸມຂົນ (B) ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີແກນ.
ຂະໜາດຮູຂຸມຂົນ, ປະລິມານຮູຂຸມຂົນ, ແລະ ພື້ນທີ່ຜິວຂອງອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ໃຊ້ໃນການສຶກສານີ້ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 1 (B). ໂປຣໄຟລ໌ PSD ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີແກນແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 3 (B). ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນທຽບເທົ່າກັບການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ຂອງພວກເຮົາ34. ຂະໜາດຮູຂຸມຂົນຂອງອະນຸພາກຊິລິກາບໍລິສຸດ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດກັບລີແກນແມ່ນ 310 Å ແລະ 241 Å ຕາມລຳດັບ, ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າຫຼັງຈາກການດັດແປງທາງເຄມີ, ຂະໜາດຮູຂຸມຂົນຫຼຸດລົງ 69 Å, ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 1 (B), ແລະ ເສັ້ນໂຄ້ງການປ່ຽນແປງແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ. ພື້ນທີ່ຜິວສະເພາະຂອງອະນຸພາກຊິລິກາໃນການສຶກສາໃນປະຈຸບັນແມ່ນ 116 m2/g, ເຊິ່ງທຽບເທົ່າກັບການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ຂອງພວກເຮົາ (124 m2/g). ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 1 (B), ພື້ນທີ່ຜິວ (m2/g) ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາຫຼັງຈາກການດັດແປງທາງເຄມີຍັງຫຼຸດລົງຈາກ 116 m2/g ເປັນ 105 m2/g.
ຜົນຂອງການວິເຄາະທາດຂອງໄລຍະຢຸດນິ້ງແມ່ນນຳສະເໜີຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 2. ປະລິມານຄາບອນຂອງໄລຍະຢຸດນິ້ງໃນປະຈຸບັນແມ່ນ 6.35%, ເຊິ່ງຕ່ຳກວ່າການສຶກສາຄັ້ງກ່ອນຂອງພວກເຮົາ (ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບໂພລີສະໄຕຣີນ, 7.93%35 ແລະ 10.21%, ຕາມລຳດັບ) 42. ປະລິມານຄາບອນຂອງໄລຍະຢຸດນິ້ງໃນປະຈຸບັນຂ້າງລຸ່ມນີ້, ເນື່ອງຈາກລີກັນຂົ້ວບາງຊະນິດເຊັ່ນ phenylmaleimide methyl vinyl isocyanate (PCMP) ແລະ 4-hydroxy-TEMPO ໄດ້ຖືກນຳໃຊ້ນອກເໜືອໄປຈາກ styrene ໃນການກະກຽມ SP. ອັດຕາສ່ວນນ້ຳໜັກຂອງໄນໂຕຣເຈນໃນໄລຍະຢຸດນິ້ງໃນປະຈຸບັນແມ່ນ 2.21% ເມື່ອທຽບກັບ 0.1735 ແລະ 0.85% ໃນການສຶກສາຄັ້ງກ່ອນ42. ນີ້ໝາຍຄວາມວ່າໄລຍະຢຸດນິ້ງໃນປະຈຸບັນມີອັດຕາສ່ວນນ້ຳໜັກຂອງໄນໂຕຣເຈນສູງເນື່ອງຈາກ phenylmaleimide. ໃນລັກສະນະດຽວກັນ, ຜະລິດຕະພັນ (4) ແລະ (5) ມີປະລິມານຄາບອນ 2.7% ແລະ 2.9% ຕາມລໍາດັບ, ໃນຂະນະທີ່ຜະລິດຕະພັນສຸດທ້າຍ (6) ມີປະລິມານຄາບອນ 6.35%, ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 2. ການວິເຄາະດ້ວຍຄວາມຮ້ອນ (TGA) ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ໃນໄລຍະຢຸດນິ້ງຂອງ PMP ເພື່ອທົດສອບການສູນເສຍນ້ໍາໜັກ, ແລະເສັ້ນໂຄ້ງ TGA ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 4. ເສັ້ນໂຄ້ງ TGA ສະແດງໃຫ້ເຫັນການສູນເສຍນ້ໍາໜັກ 8.6%, ເຊິ່ງສອດຄ່ອງກັບປະລິມານຄາບອນ (6.35%), ເນື່ອງຈາກວ່າລີກັນບໍ່ພຽງແຕ່ມີ C, ແຕ່ຍັງມີ N, O ແລະ H.
ລີແກນ phenylmaleimide-methylvinyl isocyanate ໄດ້ຖືກເລືອກໃຫ້ດັດແປງໜ້າດິນຂອງອະນຸພາກຊິລິກາເນື່ອງຈາກກຸ່ມ phenylmaleimide ແລະ vinylisocyanate ທີ່ມີຂົ້ວ. ກຸ່ມ vinyl isocyanate ສາມາດປະຕິກິລິຍາກັບ styrene ຕື່ມອີກໂດຍການ polymerization ອະນຸພາກທີ່ມີຊີວິດ. ເຫດຜົນທີສອງແມ່ນເພື່ອໃສ່ກຸ່ມທີ່ມີການພົວພັນປານກາງກັບ analyte ແລະບໍ່ມີການພົວພັນ electrostatic ທີ່ແຂງແຮງລະຫວ່າງ analyte ແລະໄລຍະຢຸດນິ້ງ, ເນື່ອງຈາກວ່າສ່ວນ phenylmaleimide ບໍ່ມີປະຈຸໄຟຟ້າທີ່ pH ປົກກະຕິ. ຂົ້ວຂອງໄລຍະຢຸດນິ້ງສາມາດຄວບຄຸມໄດ້ໂດຍປະລິມານທີ່ດີທີ່ສຸດຂອງ styrene ແລະເວລາປະຕິກິລິຍາຂອງການ polymerization ອະນຸພາກເສລີ. ຂັ້ນຕອນສຸດທ້າຍຂອງປະຕິກິລິຍາ (polymerization ອະນຸພາກເສລີ) ແມ່ນມີຄວາມສຳຄັນຍ້ອນວ່າມັນປ່ຽນແປງຂົ້ວຂອງໄລຍະຢຸດນິ້ງ. ການວິເຄາະທາດໄດ້ຖືກປະຕິບັດເພື່ອກວດສອບປະລິມານຄາບອນໃນໄລຍະຢຸດນິ້ງເຫຼົ່ານີ້. ມັນໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນວ່າການເພີ່ມປະລິມານຂອງ styrene ແລະເວລາປະຕິກິລິຍາເພີ່ມປະລິມານຄາບອນຂອງໄລຍະຢຸດນິ້ງແລະໃນທາງກັບກັນ. SPs ທີ່ກະກຽມດ້ວຍຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງ styrene ມີການໂຫຼດຄາບອນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ. ໃນລັກສະນະດຽວກັນ, ເຟສທີ່ຢູ່ກັບທີ່ເຫຼົ່ານີ້ໄດ້ຖືກວາງໄວ້ເທິງເສົາເຫຼັກສະແຕນເລດ ແລະ ຄຸນລັກສະນະໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງມັນ (ການເລືອກເຟສ, ຄວາມລະອຽດ, ຄ່າ N2, ແລະອື່ນໆ) ໄດ້ຖືກກວດສອບ. ໂດຍອີງໃສ່ການທົດລອງເຫຼົ່ານີ້, ສ່ວນປະກອບທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບການກະກຽມເຟສທີ່ຢູ່ກັບທີ່ PMP ໄດ້ຖືກເລືອກເພື່ອໃຫ້ມີການຄວບຄຸມຂົ້ວ ແລະ ການຮັກສາສານວິເຄາະທີ່ດີ.
ຖັນ PMP ຍັງໄດ້ຮັບການປະເມີນຜົນສຳລັບການວິເຄາະສ່ວນປະສົມຂອງ peptides ຫ້າຊະນິດ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine-enkephalin) ໂດຍໃຊ້ຄວາມຈຸຂອງໄລຍະເຄື່ອນທີ່. 60/40 (v/v) ACN/ນໍ້າ (0.1% TFA) ທີ່ອັດຕາການໄຫຼ 80 µl/ນາທີ. ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການລະລາຍທີ່ດີທີ່ສຸດ (200,000 ແຜ່ນ/ມ), ຈຳນວນແຜ່ນທາງທິດສະດີ (N) ຕໍ່ຖັນ (100 × 1.8 ມມ) ແມ່ນ 20,000 ± 100. ຄ່າ N ສຳລັບຖັນ PMP ສາມຖັນແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 3 ແລະໂຄຣມາໂຕແກຣມແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 5A. ການວິເຄາະໄວໃນອັດຕາການໄຫຼສູງ (700 µl/ນາທີ) ໃນຖັນ PMP, peptides ຫ້າອັນຖືກລະລາຍພາຍໃນໜຶ່ງນາທີ, ຄ່າ N2 ທີ່ດີເລີດ 13,500 ± 330 ຕໍ່ຖັນ (ເສັ້ນຜ່າສູນກາງ 100 x 1.8 ມມ), ເທົ່າກັບ 135,000 ແຜ່ນ/m2 (ຮູບທີ 5B). ສາມຖັນທີ່ມີຂະໜາດດຽວກັນ (ເສັ້ນຜ່າສູນກາງພາຍໃນ 100 x 1.8 ມມ) ໄດ້ຖືກເຕີມດ້ວຍສາມກຸ່ມທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງໄລຍະຢຸດ PMP ເພື່ອທົດສອບຄວາມສາມາດໃນການຜະລິດຊ້ຳ. ການວິເຄາະໄດ້ຖືກບັນທຶກໄວ້ສຳລັບແຕ່ລະຖັນໂດຍການແຍກສ່ວນປະສົມທົດສອບດຽວກັນໃນແຕ່ລະຖັນໂດຍໃຊ້ເງື່ອນໄຂການລະລາຍທີ່ດີທີ່ສຸດ, ຈຳນວນແຜ່ນທິດສະດີ N2, ແລະເວລາການເກັບຮັກສາ. ຂໍ້ມູນຄວາມສາມາດໃນການຜະລິດຊ້ຳສຳລັບຖັນ PMP ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 4. ຄວາມສາມາດໃນການຜະລິດຊ້ຳຂອງຖັນ PMP ມີຄວາມສຳພັນກັນດີກັບຄ່າ %RSD ທີ່ຕ່ຳຫຼາຍ ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 3.
ການແຍກສ່ວນປະສົມ peptide ໃນຖັນ PMP (B) ແລະຖັນ Ascentis Express RP-Amide (A), ໄລຍະເຄື່ອນທີ່ 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), ຂະໜາດຖັນ PMP (100 x 1.8 ມມ id), ການວິເຄາະລຳດັບການລະລາຍຂອງສານປະກອບ: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) ແລະ 5 (leucic acid enkephalin).
ຖັນ PMP (ເສັ້ນຜ່າສູນກາງພາຍໃນ 100 x 1.8 ມມ) ໄດ້ຖືກປະເມີນຜົນສຳລັບການແຍກ tryptic hydrolyzate ຂອງ albumin ໃນເລືອດຂອງມະນຸດໂດຍ HPLC. chromatogram ໃນຮູບທີ 6 ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຕົວຢ່າງຖືກແຍກອອກໄດ້ດີດ້ວຍຄວາມລະອຽດທີ່ດີຫຼາຍ. ສານລະລາຍ HSA ໄດ້ຖືກວິເຄາະໂດຍໃຊ້ອັດຕາການໄຫຼ 100 μl/ນາທີ, ໄລຍະເຄື່ອນທີ່ 70/30 acetonitrile/ນໍ້າ ແລະ 0.1% TFA. ການຕັດ HSA ໄດ້ຖືກແບ່ງອອກເປັນ 17 ຈຸດສູງສຸດ, ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນ chromatogram (ຮູບທີ 6), ເຊິ່ງສອດຄ້ອງກັບ 17 peptides. ປະສິດທິພາບການແຍກຂອງຈຸດສູງສຸດສ່ວນບຸກຄົນຈາກ HSA hydrolyzate ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ ແລະ ຄ່າຕ່າງໆແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 5.
ໄຮໂດຣໄລເຊດທຣິບຕິກ HSA ໄດ້ຖືກແຍກອອກໃນຖັນ PMP (ເສັ້ນຜ່າສູນກາງພາຍໃນ 100 x 1.8 ມມ), ອັດຕາການໄຫຼ (100 μl/ນາທີ), ໄລຍະເຄື່ອນທີ່ 60/40 ອາເຊໂຕໄນໄຕຣ/ນໍ້າ, ແລະ 0.1% TFA.
ບ່ອນທີ່ L ແມ່ນຄວາມຍາວຂອງຖັນ, η ແມ່ນຄວາມໜືດຂອງໄລຍະເຄື່ອນທີ່, ΔP ແມ່ນຄວາມດັນກັບຄືນຂອງຖັນ, ແລະ u ແມ່ນຄວາມໄວເສັ້ນຊື່ຂອງໄລຍະເຄື່ອນທີ່. ຄວາມຊຶມຜ່ານຂອງຖັນ PMP ແມ່ນ 2.5 × 10–14 m2, ອັດຕາການໄຫຼແມ່ນ 25 µl/ນາທີ, 60/40 v/v ໄດ້ຖືກນຳໃຊ້. ACN/ນ້ຳ. ຄວາມຊຶມຜ່ານຂອງຖັນ PMP (ID 100 × 1.8 ມມ) ແມ່ນຄ້າຍຄືກັນກັບການສຶກສາ Ref.34 ກ່ອນໜ້ານີ້ຂອງພວກເຮົາ. ຄວາມຊຶມຜ່ານຂອງຖັນທີ່ເຕັມໄປດ້ວຍອະນຸພາກທີ່ມີຮູພຸນແມ່ນ 1.7 × 10 .6 µm, 2.5 × 10-14 m2 ສຳລັບອະນຸພາກ 5 µm43. ດັ່ງນັ້ນ, ຄວາມຊຶມຜ່ານຂອງໄລຍະ PMP ແມ່ນຄ້າຍຄືກັນກັບຄວາມຊຶມຜ່ານຂອງອະນຸພາກ core-shell ທີ່ມີຂະໜາດ 5 μm.
ບ່ອນທີ່ Wx ແມ່ນມວນຂອງຖັນທີ່ເຕັມໄປດ້ວຍຄລໍໂຣຟອມ, Wy ແມ່ນມວນຂອງຖັນທີ່ເຕັມໄປດ້ວຍເມທານອນ, ແລະ ρ ແມ່ນຄວາມໜາແໜ້ນຂອງຕົວລະລາຍ. ຄວາມໜາແໜ້ນຂອງເມທານອນ (ρ = 0.7866) ແລະຄລໍໂຣຟອມ (ρ = 1.484). ຄວາມพรຸນທັງໝົດຂອງຖັນອະນຸພາກຊິລິກາ-C18 (100 × 1.8 ມມ ID)34 ແລະຖັນ C18-urea31 ທີ່ພວກເຮົາໄດ້ສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ແມ່ນ 0.63 ແລະ 0.55 ຕາມລຳດັບ. ນີ້ໝາຍຄວາມວ່າການມີຢູ່ຂອງລີກັນຢູເຣຍຊ່ວຍຫຼຸດຜ່ອນຄວາມຊຶມຜ່ານຂອງໄລຍະຄົງທີ່. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ຄວາມพรຸນທັງໝົດຂອງຖັນ PMP (ເສັ້ນຜ່າສູນກາງພາຍໃນ 100 × 1.8 ມມ) ແມ່ນ 0.60. ຖັນ PMP ມີຄວາມຊຶມຜ່ານໄດ້ໜ້ອຍກວ່າຖັນທີ່ເຕັມໄປດ້ວຍອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດ C18 ເພາະວ່າໃນໄລຍະຄົງທີ່ປະເພດ C18, ລີກັນ C18 ຈະຕິດກັບອະນຸພາກຊິລິກາໃນຕ່ອງໂສ້ເສັ້ນຊື່, ໃນຂະນະທີ່ໃນໄລຍະຄົງທີ່ປະເພດໂພລີສະໄຕຣີນ, ໂພລີເມີທີ່ໜາຂ້ອນຂ້າງຈະຖືກສ້າງຂຶ້ນອ້ອມຮອບອະນຸພາກ. ຊັ້ນ A. ໃນການທົດລອງທົ່ວໄປ, ຄວາມพรຸນຂອງຖັນຖືກຄິດໄລ່ດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
ໃນຮູບທີ 7A, B ສະແດງໃຫ້ເຫັນຕາຕະລາງ Van Deemter ສຳລັບຖັນ PMP (ຂະໜາດ 100 x 1.8 ມມ) ແລະ ຖັນ Ascentis Express RP-Amide (ຂະໜາດ 100 x 1.8 ມມ) ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການລະລາຍດຽວກັນ, 60/40 ACN/H2O ແລະ 0 .1% TFA 20 µl/ນາທີ ຫາ 800 µl/ນາທີ ໃນທັງສອງຖັນ. ຄ່າ HETP ຕໍ່າສຸດທີ່ອັດຕາການໄຫຼທີ່ດີທີ່ສຸດ (80 µl/ນາທີ) ແມ່ນ 2.6 µm ແລະ 3.9 µm ສຳລັບຖັນ PMP ແລະ ຖັນ Ascentis Express RP-Amide ຕາມລຳດັບ. ຄ່າ HETP ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າປະສິດທິພາບການແຍກຂອງຖັນ PMP (ຂະໜາດ 100 x 1.8 ມມ) ສູງກວ່າຖັນ Ascentis Express RP-Amide (ຂະໜາດ 100 x 1.8 ມມ) ທີ່ມີຢູ່ໃນທ້ອງຕະຫຼາດຫຼາຍ. ກຣາຟ van Deemter ໃນຮູບທີ 7(A) ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການຫຼຸດລົງຂອງຄ່າ N ບໍ່ສູງຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍເມື່ອມີການໄຫຼເພີ່ມຂຶ້ນເມື່ອທຽບກັບການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ຂອງພວກເຮົາ. ປະສິດທິພາບການແຍກທີ່ສູງຂຶ້ນຂອງຖັນ PMP (id 100 × 1.8 ມມ) ເມື່ອທຽບກັບຖັນ Ascentis Express RP-Amide ແມ່ນອີງໃສ່ຮູບຮ່າງ ແລະ ຂະໜາດຂອງອະນຸພາກທີ່ດີຂຶ້ນ ແລະ ຂັ້ນຕອນການຫຸ້ມຫໍ່ຖັນທີ່ຊັບຊ້ອນທີ່ໃຊ້ໃນວຽກງານປະຈຸບັນ34.
(ກ) ຮູບແຕ້ມ Van Deemter (ຄວາມໄວເສັ້ນຊື່ HETP ທຽບກັບຄວາມໄວໄລຍະເຄື່ອນທີ່) ທີ່ໄດ້ມາຈາກຖັນ PMP (ຂະໜາດ 100 x 1.8 ມມ) ໃນ 60/40 ACN/H2O ດ້ວຍ 0.1% TFA. (ຂ) ຮູບແຕ້ມ Van Deemter (ຄວາມໄວເສັ້ນຊື່ HETP ທຽບກັບຄວາມໄວໄລຍະເຄື່ອນທີ່) ທີ່ໄດ້ມາຈາກຖັນ Ascentis Express RP-Amide (ຂະໜາດ 100 x 1.8 ມມ) ໃນ 60/40 ACN/H2O ດ້ວຍ 0.1% TFA.
ຂັ້ນຕອນການແຍກໂພລີສະໄຕຣີນທີ່ມີຂົ້ວໄດ້ຖືກກະກຽມ ແລະ ປະເມີນຜົນສຳລັບການແຍກສ່ວນປະສົມຂອງເພບໄທດ໌ສັງເຄາະ ແລະ tryptic hydrolyzate ຂອງ albumin ໃນເລືອດຂອງມະນຸດ (HSA) ໃນໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແຫຼວປະສິດທິພາບສູງ. ປະສິດທິພາບໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງຖັນ PMP ສຳລັບສ່ວນປະສົມເພບໄທດ໌ແມ່ນດີເລີດໃນດ້ານປະສິດທິພາບການແຍກ ແລະ ຄວາມລະອຽດ. ປະສິດທິພາບການແຍກທີ່ດີຂຶ້ນຂອງຖັນ PMP ແມ່ນຍ້ອນຫຼາຍເຫດຜົນເຊັ່ນ: ຂະໜາດຂອງອະນຸພາກຊິລິກາ ແລະ ຂະໜາດຮູຂຸມຂົນ, ການສັງເຄາະທີ່ຄວບຄຸມຂອງຂັ້ນຕອນການແຍກ, ແລະ ວັດສະດຸຫຸ້ມຫໍ່ຖັນທີ່ສັບສົນ. ນອກເໜືອໄປຈາກປະສິດທິພາບການແຍກທີ່ສູງ, ຂໍ້ໄດ້ປຽບອີກອັນໜຶ່ງຂອງຂັ້ນຕອນການແຍກນີ້ແມ່ນຄວາມກົດດັນກັບຄືນຂອງຖັນຕ່ຳໃນອັດຕາການໄຫຼສູງ. ຖັນ PMP ແມ່ນສາມາດຜະລິດຄືນໄດ້ສູງ ແລະ ສາມາດນຳໃຊ້ເພື່ອວິເຄາະສ່ວນປະສົມຂອງເພບໄທດ໌ ແລະ ການຍ່ອຍໂປຣຕີນຕ່າງໆດ້ວຍ tryptic. ພວກເຮົາຕັ້ງໃຈທີ່ຈະໃຊ້ຖັນນີ້ສຳລັບການແຍກສານປະກອບຊີວະພາບຈາກຜະລິດຕະພັນທຳມະຊາດ, ສານສະກັດຈາກພືດສະໝຸນໄພ ແລະ ເຫັດໃນໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແຫຼວ. ໃນອະນາຄົດ, ຖັນ PMP ຍັງຈະຖືກປະເມີນຜົນສຳລັບການແຍກໂປຣຕີນ ແລະ ພູມຕ້ານທານໂມໂນໂຄນ.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. ການສືບສວນລະບົບການແຍກ peptide ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປີ້ນກັບກັນ ພາກທີ I: ການພັດທະນາໂປໂຕຄອນສຳລັບການກຳນົດລັກສະນະຂອງຖັນ. Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. ການສືບສວນລະບົບການແຍກ peptide ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປີ້ນກັບກັນ ພາກທີ I: ການພັດທະນາໂປໂຕຄອນສຳລັບການກຳນົດລັກສະນະຂອງຖັນ.Field, JK, Owerby, MR, Lau, J., Togersen, H., ແລະ Petersson, P. ການສືບສວນລະບົບການແຍກ peptide ໂດຍການວິເຄາະດ້ວຍວິທີ Reverse-Phase Chromatography, ພາກທີ I: ການພັດທະນາໂປໂຕຄອນສຳລັບການກຳນົດລັກສະນະຖັນ. Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. ການສືບສວນລະບົບການແຍກ peptide ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປີ້ນກັບກັນ ພາກທີ I: ການພັດທະນາໂປໂຕຄອນສຳລັບລັກສະນະຂອງຖັນ. Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. ການສືບສວນລະບົບການແຍກ peptide ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປີ້ນກັບກັນ ພາກທີ I: ການພັດທະນາໂປໂຕຄອນສຳລັບລັກສະນະຂອງຖັນ.Field, JK, Owerby, MR, Lau, J., Togersen, H., ແລະ Petersson, P. ການສືບສວນລະບົບການແຍກ peptide ໂດຍການວິເຄາະດ້ວຍວິທີ Reverse-Phase Chromatography, ພາກທີ I: ການພັດທະນາໂປໂຕຄອນສຳລັບການກຳນົດລັກສະນະຖັນ.J.色谱法。 1603, 113-129. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038(2019).
Gomez, B. ແລະ ອື່ນໆ. ວິທີການສ້າງ peptides ທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວທີ່ດີຂຶ້ນສຳລັບການປິ່ນປົວພະຍາດຕິດຕໍ່. ເຕັກໂນໂລຊີຊີວະພາບ. ຜົນສຳເລັດ 36(2), 415–429. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. ເພບໄທດ໌ສັງເຄາະໃນການປິ່ນປົວ: ວິທະຍາສາດ ແລະ ຕະຫຼາດ. Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. ເພບໄທດ໌ສັງເຄາະໃນການປິ່ນປົວ: ວິທະຍາສາດ ແລະ ຕະຫຼາດ.Vliege P, Lisowski V, Martinez J ແລະ Chreschatyski M. ເພບໄທດ໌ສັງເຄາະທີ່ໃຊ້ໃນການປິ່ນປົວ: ວິທະຍາສາດ ແລະ ຕະຫຼາດ.Vliege P, Lisowski V, Martinez J ແລະ Khreschatsky M. ເພບໄທດ໌ສັງເຄາະທີ່ໃຊ້ໃນການປິ່ນປົວ: ວິທະຍາສາດ ແລະ ຕະຫຼາດ. ການຄົ້ນພົບຢາ. ມື້ນີ້ 15 (1–2), 40–56. https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010).
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວໂປຣຕີໂອມິກຂັ້ນສູງ. Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວໂປຣຕີໂອມິກຂັ້ນສູງ.ເບິ່ງ F., Smith RD ແລະ Shen Yu. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວໂປຣຕີໂອມິກຂັ້ນສູງ. Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. 高级蛋白质组液相色谱. Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. ທາດໂປຼຕີນຂັ້ນສູງ 液相色谱.ເບິ່ງ F., Smith RD ແລະ Shen Yu. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວໂປຣຕີໂອມິກຂັ້ນສູງ.J. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີ. A 1261, 78–90 (2012).
Liu, W. ແລະ ອື່ນໆ. ການວິເຄາະດ້ວຍໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວແບບພິເສດ-ມວນສານສາມາດສົມທົບການວິເຄາະດ້ວຍວິທີ metabolomics ແລະ proteomics ທີ່ກວ້າງຂວາງເຂົ້າກັນໄດ້. anus. Chim. Acta 1069, 89–97 (2019).
Chesnut, SM & Salisbury, JJ ບົດບາດຂອງ UHPLC ໃນການພັດທະນາຢາ. Chesnut, SM & Salisbury, JJ ບົດບາດຂອງ UHPLC ໃນການພັດທະນາຢາ.Chesnut, SM ແລະ Salisbury, JJ ບົດບາດຂອງ UHPLC ໃນການພັດທະນາຢາ.Chesnut, SM ແລະ Salisbury, JJ ບົດບາດຂອງ UHPLC ໃນການພັດທະນາຢາ. J. Sept Science. 30(8), 1183–1190 (2007).
Wu, N. & Clausen, AM ລັກສະນະພື້ນຖານ ແລະ ການປະຕິບັດຕົວຈິງຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວຄວາມດັນສູງພິເສດ ສຳລັບການແຍກສານໄດ້ໄວ. Wu, N. & Clausen, AM ລັກສະນະພື້ນຖານ ແລະ ການປະຕິບັດຕົວຈິງຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວຄວາມດັນສູງພິເສດ ສຳລັບການແຍກສານໄດ້ໄວ.Wu, N. ແລະ Clausen, AM ລັກສະນະພື້ນຖານ ແລະ ການປະຕິບັດຕົວຈິງຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວຄວາມດັນສູງ ສຳລັບການແຍກຕົວຢ່າງໄວວາ. Wu, N. & Clausen, AM 用于快速分离的超高压液相色谱的基础和实践方面. Wu, N. & Clausen, AM ລັກສະນະພື້ນຖານ ແລະ ການປະຕິບັດຕົວຈິງຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວຄວາມດັນສູງພິເສດ ສຳລັບການແຍກຕົວຢ່າງໄວວາ.Wu, N. ແລະ Clausen, AM ລັກສະນະພື້ນຖານ ແລະ ການປະຕິບັດຕົວຈິງຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວຄວາມດັນສູງ ສຳລັບການແຍກຕົວຢ່າງໄວວາ.J. Sept. ວິທະຍາສາດ. 30(8), 1167–1182. https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. ການນໍາໃຊ້ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງໃນການພັດທະນາຢາ. Wren, SA & Tchelitcheff, P. ການນໍາໃຊ້ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງໃນການພັດທະນາຢາ.Ren, SA ແລະ Chelischeff, P. ການນໍາໃຊ້ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວປະສິດທິພາບສູງສຸດໃນການພັດທະນາຢາ. Wren, SA & Tchelitcheff, P. 超高效液相色谱在药物开发中的应用. ເຣນ, SA ແລະ ເຊລິດເຊຟ, ປ.Ren, SA ແລະ Chelischeff, P. ການນຳໃຊ້ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງໃນການພັດທະນາຢາ.J. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີ. 1119(1-2), 140-146. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
Gu, H. ແລະ ອື່ນໆ. ໄຮໂດຣເຈວທີ່ມີຮູພຸນຂະໜາດດຽວທີ່ໄດ້ມາຈາກອີມັນຊັນທີ່ມີນ້ຳມັນໃນນ້ຳທີ່ມີໄລຍະພາຍໃນສູງ ສຳລັບການກັ່ນຕອງເຊື້ອໄວຣັດເອນເຕີໂຣໄວຣັສ 71 ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ. ໂຄງການທາງເຄມີ. ວາລະສານ 401, 126051 (2020).
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA ບົດບາດຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແຫຼວໃນໂປຣຕີໂອມິກ. Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA ບົດບາດຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແຫຼວໃນໂປຣຕີໂອມິກ.Shi, Y., Xiang, R., Horvath, C. ແລະ Wilkins, JA ບົດບາດຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແຫຼວໃນໂປຣຕີໂອມິກ. Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA 液相色谱在蛋白质组学中的作用。 Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JAShi, Y., Xiang, R., Horvath, C. ແລະ Wilkins, JA ບົດບາດຂອງໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແຫຼວໃນໂປຣຕີໂອມິກ.J. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີ. A 1053 (1-2), 27-36 (2004).
ເຟເຄເຕ, ສ., ວູເຕ, ເຈ.-ລ. & Guillarme, D. ແນວໂນ້ມໃໝ່ໃນການແຍກໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວໃນໄລຍະປີ້ນກັບກັນຂອງເພບໄທດ໌ ແລະ ໂປຣຕີນໃນການປິ່ນປົວ: ທິດສະດີ ແລະ ການນຳໃຊ້. & Guillarme, D. ແນວໂນ້ມໃໝ່ໃນການແຍກໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວໃນໄລຍະປີ້ນກັບກັນຂອງເພບໄທດ໌ ແລະ ໂປຣຕີນໃນການປິ່ນປົວ: ທິດສະດີ ແລະ ການນຳໃຊ້. & Guillarme, D. Новые тенденции в разделении терапевтических пептидов и белков с помощью жидкостной громатой громат фазой: теория и приложения. & Guillarme, D. ແນວໂນ້ມໃໝ່ໃນການແຍກ peptides ແລະໂປຣຕີນໃນການປິ່ນປົວໂດຍການແຍກໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວໃນໄລຍະປີ້ນກັບກັນ: ທິດສະດີ ແລະ ການນຳໃຊ້. & Guillarme, D. 治疗性肽和蛋白质的反相液相色谱分离的新趋势：理论和应用. & ກິວລາມ, ດີ.ແລະ Guillarmé, D. ແນວໂນ້ມໃໝ່ໃນການແຍກ peptides ແລະໂປຣຕີນໃນການປິ່ນປົວໂດຍການແຍກໂຄຣມາໂຕກຣາຟີຂອງແຫຼວໃນໄລຍະປີ້ນກັບກັນ: ທິດສະດີ ແລະ ການນຳໃຊ້.J. Pharm. ວິທະຍາສາດຊີວະວິທະຍາ. ຮູທະວານ. 69, 9–27 (2012).
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC ການແຍກ peptides ສອງມິຕິໂດຍໃຊ້ລະບົບ RP-RP-HPLC ທີ່ມີ pH ແຕກຕ່າງກັນໃນມິຕິການແຍກທີໜຶ່ງ ແລະ ທີສອງ. Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC ການແຍກ peptides ສອງມິຕິໂດຍໃຊ້ລະບົບ RP-RP-HPLC ທີ່ມີ pH ແຕກຕ່າງກັນໃນມິຕິການແຍກທີໜຶ່ງ ແລະ ທີສອງ.Gilar M., Olivova P., Dali AE ແລະ Gebler JK ການແຍກ peptides ສອງມິຕິໂດຍໃຊ້ລະບົບ RP-RP-HPLC ທີ່ມີ pH ແຕກຕ່າງກັນໃນມິຕິການແຍກທີໜຶ່ງ ແລະ ທີສອງ.Gilar M., Olivova P., Dali AE ແລະ Gebler JK ການແຍກ peptides ສອງມິຕິໂດຍໃຊ້ຄ່າ pH ທີ່ແຕກຕ່າງກັນໃນມິຕິການແຍກທີໜຶ່ງ ແລະ ທີສອງໂດຍໃຊ້ລະບົບ RP-RP-HPLC. J. Sept Science. 28 (14), 1694–1703 (2005).
Fellitti, S. ແລະ ອື່ນໆ. ການສືບສວນການຖ່າຍໂອນມວນສານ ແລະ ຄຸນລັກສະນະທາງຈຸລະພາກຂອງຖັນໂຄຣມາໂຕກຣາຟີທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງທີ່ບັນຈຸດ້ວຍອະນຸພາກ C18 ທີ່ມີຮູພຸນເຕັມທີ່ ແລະ ມີຮູພຸນເທິງໜ້າດິນທີ່ມີຂະໜາດນ້ອຍກວ່າ 2 µm. J. Sept Science. 43 (9–10), 1737–1745 (2020).
Piovesana, S. ແລະ ອື່ນໆ. ແນວໂນ້ມທີ່ຜ່ານມາ ແລະ ສິ່ງທ້າທາຍໃນການວິເຄາະໃນການແຍກ, ການກຳນົດ ແລະ ການກວດສອບຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງ peptides ທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວທາງຊີວະພາບຂອງພືດ. ຮູທະວານ. ຮູທະວານຂອງສັດ. ສານເຄມີ. 410(15), 3425-3444. https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
Muller, JB ແລະ ອື່ນໆ. ພູມສັນຖານໂປຣຕີໂອມຂອງອານາຈັກຊີວິດ. ທຳມະຊາດ 582 (7813), 592–596. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
De Luca, K. ແລະ ອື່ນໆ. ຫຼັງການປິ່ນປົວ peptides ປິ່ນປົວໂດຍການກະກຽມໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແຫຼວ. ໂມເລກຸນ (Basel, ສະວິດເຊີແລນ) 26(15), 4688 (2021).
Yang, Y. & Geng, X. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປະສົມ ແລະ ການນຳໃຊ້ຂອງມັນກັບຊີວະໂພລີເມີ. Yang, Y. & Geng, X. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປະສົມ ແລະ ການນຳໃຊ້ຂອງມັນກັບຊີວະໂພລີເມີ.Yang, Yu. ແລະ Geng, X. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປະສົມ ແລະ ການນຳໃຊ້ຂອງມັນກັບຊີວະໂພລີເມີ. Yang, Y. & Geng, X. 混合模式色谱及其在生物聚合物中的应用. Yang, Y. & Geng, X. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປະສົມ ແລະ ການນຳໃຊ້ຂອງມັນໃນຊີວະໂພລີເມີ.Yang, Yu. ແລະ Gene, X. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີແບບປະສົມ ແລະ ການນຳໃຊ້ຂອງມັນກັບໂພລີເມີຊີວະພາບ.J. ໂຄຣມາໂຕກຣາຟີ. A 1218(49), 8813–8825 (2011).