Ҷамъоварӣ ва тақсимоти маводи ғизоӣ хусусиятҳои ҷустуҷӯи ҳашарот ва таърихи ҳаётро муттаҳид мекунад. Барои ҷуброни норасоии маводи ғизоии мушаххас дар марҳилаҳои гуногуни ҳаёт, ҳашарот метавонанд ин маводи ғизоиро тавассути ғизодиҳии иловагӣ, масалан, тавассути ғизодиҳӣ бо ихроҷи ҳайвоноти сутунмӯҳрадор дар раванде, ки бо номи кӯлмакҳо маълум аст, ба даст оранд. Пашшаи Anopheles arabiani ба назар чунин мерасад, ки аз норасоии ғизо азият мекашад ва аз ин рӯ, барои мубодилаи моддаҳо ва афзоиш ба маводи ғизоӣ ниёз дорад. Ҳадафи ин таҳқиқот арзёбии он буд, ки оё омехта кардани An. arabiensis дар пешоби гов барои ба даст овардани маводи ғизоӣ хусусиятҳои таърихи ҳаётро беҳтар мекунад.
Боварӣ ҳосил кунед, ки он бехатар аст. arabiensis ба бӯи пешоби гови тару тоза, 24-соата, 72-соата ва 168-соата ҷалб карда шуд ва модаговҳои мизбон ва ғизогирифташуда (48 соат пас аз хӯроки хун) дар олфактометри найчаи Y чен карда шуданд ва модаговҳои ҳомиладор барои санҷиши тухмгузорӣ арзёбӣ карда шуданд. Сипас, таҳлили якҷояи кимиёвӣ ва электрофизиологӣ барои муайян кардани пайвастагиҳои биоактивӣ дар пешоби гов дар ҳамаи чор синфи синну сол истифода шуд. Омехтаҳои синтетикии пайвастагиҳои биоактивӣ дар найчаи Y ва озмоишҳои саҳроӣ арзёбӣ карда шуданд. Барои таҳқиқи пешоби гов ва пайвастагии асосии мочевинаи дорои нитроген ҳамчун парҳезҳои эҳтимолии иловагӣ барои векторҳои вараҷа, параметрҳои ғизодиҳӣ ва хусусиятҳои таърихи ҳаёт чен карда шуданд. Таносуби пашшаҳои мода ва миқдори пешоби гов ва мочевинаи ҷаббидашуда арзёбӣ карда шуданд. Пас аз ғизодиҳӣ, модаговҳо аз ҷиҳати зинда мондан, парвози бофташуда ва афзоиш арзёбӣ карда шуданд.
Хуни мизбон ва ғизоро ҷустуҷӯ кунед. Дар таҳқиқоти лабораторӣ ва саҳроӣ, арабҳо ба бӯи табиӣ ва синтетикии пешоби гови тару тоза ва пир ҷалб карда шуданд. Модаҳои ҳомиладор ба аксуламалҳои пешоби гов дар ҷойҳои тухмгузорӣ бепарво буданд. Модаҳои мизбон ва хунмаккунанда пешоби гов ва мочевинаро фаъолона ҷаббида, ин захираҳоро мувофиқи муомилоти таърихи ҳаёт ҳамчун функсияи ҳолати физиологӣ барои парвоз, зинда мондан ё афзоиш тақсим мекунанд.
Гирифтан ва тақсимоти пешоби гов аз ҷониби Anopheles arabinis барои беҳтар кардани хусусиятҳои таърихи ҳаёт. Ғизодиҳии иловагии пешоби гов ба иқтидори вектор мустақиман тавассути афзоиши зиндамонии ҳаррӯза ва зичии вектор ва бавосита тавассути тағир додани фаъолияти парвоз таъсир мерасонад ва аз ин рӯ, бояд дар моделҳои оянда ба назар гирифта шавад.
Ҷамъоварӣ ва тақсимоти маводи ғизоӣ хусусиятҳои ҷустуҷӯи ҳашарот ва таърихи ҳаётро муттаҳид мекунад [1,2,3]. Ҳашарот метавонанд хӯрокро интихоб ва ба даст оранд ва ғизодиҳии ҷуброниро дар асоси мавҷудияти хӯрок ва талаботи маводи ғизоӣ анҷом диҳанд [1, 3]. Тақсимоти маводи ғизоӣ аз раванди таърихи ҳаёт вобаста аст ва метавонад боиси талаботи гуногун барои сифат ва миқдори парҳез дар марҳилаҳои гуногуни ҳаёти ҳашарот гардад [1, 2]. Барои ҷуброни норасоии маводи ғизоии мушаххас, ҳашарот метавонанд ин маводи ғизоиро тавассути ғизодиҳии иловагӣ, ба монанди лой, наҷосат ва ихроҷи гуногуни сутунмӯҳраҳо ва мурғ, раванде, ки бо номи кӯлмакҳо маълум аст, ба даст оранд [2]. Гарчанде ки намудҳои гуногуни шабпарак ва шабпарак асосан тавсиф шудаанд, чоҳҳои обёрӣ низ дар дигар гурӯҳҳои ҳашарот мавҷуданд ва ҷалб ба ин намуди захираҳо ва ғизодиҳӣ метавонад ба саломатӣ ва дигар хусусиятҳои таърихи ҳаёт таъсири назаррас расонад [2, 4, 5, 6], 7]. Пашшаи малярия Anopheles gambiae sensu lato (sl) ҳамчун як калонсоли "камғизо" пайдо мешавад [8], аз ин рӯ обёрӣ метавонад дар хусусиятҳои таърихи ҳаёти он нақши муҳим бозад, аммо ин рафтор то ҳол нодида гирифта шудааст. Истифодаи ангезиш ҳамчун воситаи афзоиши истеъмоли маводи ғизоӣ дар ин воситаи муҳим сазовори таваҷҷӯҳ аст, зеро ин метавонад оқибатҳои муҳими эпидемиологӣ дошта бошад.
Истеъмоли нитроген дар пашшаҳои модаи болиғи Anopheles аз сабаби захираҳои ками калория, ки аз марҳилаи кирминавӣ интиқол дода мешаванд ва истифодаи номуассири орди хун маҳдуд аст [9]. Модаи Ann.gambiae sl одатан инро бо илова кардани хӯрокҳои иловагии хун ҷуброн мекунад [10, 11], ки бо ин васила одамони бештарро дар хатари гирифторӣ ба ин беморӣ ва хатари бештари дарранда шудан мегузорад. Интихобан, пашшаҳо метавонанд аз ғизодиҳии иловагии ихроҷи сутунмӯҳраҳо барои ба даст овардани пайвастагиҳои нитрогенӣ, ки мутобиқшавӣ ва қобилияти парвозро беҳтар мекунанд, истифода баранд, чунон ки аз ҷониби дигар ҳашарот нишон дода шудааст [2]. Дар ин робита, ҷалби қавӣ ва равшани яке аз намудҳои бародар дар дохили An. Маҷмӯаи намудҳои sl Гамбиа, Anopheles arabinis, пешоби гови тару тоза ва пир [12,13,14], ҷолиб аст. Anopheles arabinis дар афзалиятҳои мизбони худ фурсатталаб аст ва маълум аст, ки бо чорвои калон алоқаманд аст ва бо онҳо ғизо мегирад. Пешоби гов захираест, ки аз пайвастагиҳои нитроген бой аст, ки карбамид 50-95% аз нитрогени умумии пешоби тозаро ташкил медиҳад [15, 16]. Ҳангоми пир шудани пешоби гов, микроорганизмҳо аз ин захираҳо барои кам кардани мураккабии пайвастагиҳои нитрогенӣ дар давоми 24 соат истифода мебаранд [15]. Бо афзоиши босуръати аммиак, ки бо коҳиши нитрогени органикӣ алоқаманд аст, микроорганизмҳои алкалофилӣ (ки бисёре аз онҳо пайвастагиҳои заҳролудро барои пашшаҳо истеҳсол мекунанд) рушд мекунанд [15], ки метавонад Ann.arabiensis-и мода ба пешоб дар синни 24 соат ё камтар аз он ҷалб карда шавад [13, 14].
Дар ин таҳқиқот, Ans-и мизбон ва бо хун ғизогирифта ҷустуҷӯ карда шуданд. Дар давраи аввали гонадотропини он, arabiensis барои ба даст овардани пайвастагиҳои нитрогенӣ, аз ҷумла мочевина, тавассути омехта кардани пешоб арзёбӣ карда шуд. Сипас, як қатор таҷрибаҳо барои арзёбии он, ки чӣ гуна пашшаҳои мода ин захираи эҳтимолии ғизоиро барои беҳтар кардани зинда мондан, афзоиш ва ҷустуҷӯи минбаъдаи хӯрок тақсим мекунанд, гузаронида шуданд. Ниҳоят, бӯи пешоби гови тару тоза ва пир арзёбӣ карда шуд, то муайян карда шавад, ки оё инҳо нишонаҳои боэътимодро барои Ans-и мизбон ва бо хун ғизогирифта таъмин мекунанд. Дар ҷустуҷӯи ин захираи эҳтимолии ғизоӣ, arabiensis коррелятсияҳои кимиёвии паси ҷолибияти фарқкунандаи мушоҳидашударо кашф кард. Омехтаҳои бӯи синтетикии пайвастагиҳои органикии идоранашаванда (VOC), ки дар пешоби пиршудаи 24-соата муайян шудаанд, минбаъд дар шароити саҳроӣ арзёбӣ карда шуданд, ки натиҷаҳои бадастомада дар шароити лабораторӣ ба даст овардашударо васеъ карданд ва таъсири бӯи пешоби говро ба ҳолатҳои гуногуни физиологӣ нишон доданд. Ҷалби пашша. Натиҷаҳои бадастомада тасдиқ мекунанд, ки An. arabiensis пайвастагиҳои нитрогении дар пешоби сутунмӯҳра мавҷудбударо ба даст меорад ва паҳн мекунад, то ба хусусиятҳои таърихи ҳаёт таъсир расонад. Ин натиҷаҳо дар заминаи оқибатҳои эҳтимолии эпидемиологӣ ва чӣ гуна онҳо метавонанд барои назорат ва назорати векторҳо истифода шаванд, баррасӣ карда мешаванд.
Anopheles arabicans (штами Dongola) дар ҳарорати 25 ± 2 °C, 65 ± 5% намӣ ва давраи 12:12 соат рӯшноӣ: торикӣ нигоҳ дошта шуд. Кирминаҳо дар табақҳои пластикӣ (20 см × 18 см × 7 см), ки бо оби тозашуда пур карда шуда буданд, парвариш карда шуданд ва ба онҳо хӯроки моҳии Tetramin® (Tetra Werke, Melle, DE) дода шуд. Кӯдакҳо дар пиёлаҳои 30 мл (Nolato Hertila, Åstorp, SE) ҷамъоварӣ карда шуданд ва сипас ба қафасҳои Bugdorm (30 см × 30 см × 30 см; MegaView Science, Тайчунг, Тайван) интиқол дода шуданд, то ки бачаҳои болиғ ба дунё оянд. Бачаҳои болиғ то 4 рӯз пас аз пайдоиш (dpe) бо маҳлули 10% сахароза ad libitum таъмин карда шуданд, ки дар он вақт ба занҳои мизбон фавран пеш аз таҷриба парҳез пешниҳод карда шуд ё пеш аз таҷриба шабона бо оби тозашуда гурусна монданд, тавре ки дар зер тавсиф шудааст. Занҳои модае, ки барои таҷрибаҳои найчаи парвоз истифода мешуданд, танҳо 4-6 рӯз гурусна монданд. соатҳо бо об бо иҷозати маҳдуд. Барои омода кардани пашшаҳои хунмакк барои биоозмоишҳои минбаъда, ба 4 мода гӯсфандони dpe бо хуни гӯсфандони дефибротикӣ (Håtunalab, Bro, SE) бо истифода аз системаи ғизодиҳии мембранӣ (Hemotek Discovery Workshops, Аккрингтон, Британияи Кабир) дода шуд. Сипас, модаҳои пурра пуршуда ба қафасҳои алоҳида интиқол дода шуданд ва мустақиман, тавре ки дар зер тавсиф шудааст, ё 3 рӯз пеш аз таҷрибаҳои дар зер тавсифшуда 10% сахароза бо иҷозати маҳдуд дода шуданд. Модаҳои охирин барои биоозмоишҳои найчаи парвоз истифода шуданд ва ба лаборатория интиқол дода шуданд ва сипас 4-6 соат пеш аз таҷриба бо иҷозати маҳдуд оби тоза кардашуда гирифтанд.
Санҷишҳои ғизодиҳӣ барои муайян кардани миқдори истеъмоли пешоб ва карбамид дар зани болиғи араб истифода шуданд. Ба занҳои мизбон ва ғизогирандаи хун парҳезе дода шуд, ки дорои 1% пешоби гови тару тоза ва пиршуда, консентратсияҳои гуногуни карбамид ва ду гурӯҳи назоратӣ (10% сахароза ва об) барои 48 соат буд. Илова бар ин, ранги хӯрокворӣ (1 мг мл-1 ксилен цианиди FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Стокголм, SE) ба парҳез илова карда шуд ва дар матритсаи 4 × 4 дар найчаҳои микросентрифугаи 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, ИМА; Расми 1A) дода шуд. То канор пур кунед (~300 µl). Барои пешгирӣ аз рақобат байни пашшаҳо ва таъсири эҳтимолии ранги ранг, 10 пашшаро дар косаи калони Петри (диаметраш 12 см ва баландиаш 6 см; Semadeni, Ostermundigen, CH; Расми 1A) дар торикии пурра дар ҳарорати 25 ± 2 см °C ва 65 ± ҷойгир кунед. 5% намӣ нисбӣ. Ин таҷрибаҳо аз 5 то 10 маротиба такрор карда шуданд. Пас аз дучор шудан бо парҳез, пашшаҳо то таҳлили минбаъда дар ҳарорати -20 °C ҷойгир карда шуданд.
Пешоби гов ва мочевинаро, ки аз ҷониби мизбон ва модаи хунмаки Anopheles arabianus ҷаббида мешавад, ҷустуҷӯ кунед. Дар озмоиши ғизодиҳӣ (A), ба пашшаҳои мода парҳезе дода шуд, ки аз пешоби гови тару тоза ва пир, консентратсияҳои гуногуни мочевина, сахароза (10%) ва оби тозашуда (H2O) иборат буд. Модаҳои ҷустуҷӯи мизбон (B) ва ғизои хундор (C) нисбат ба дигар парҳезҳои санҷидашуда сахарозаро бештар ҷаббидаанд. Дар хотир доред, ки модаҳои ҷустуҷӯи мизбон пешоби гови 72-соатаро камтар аз пешоби гови 168-соата (B) ҷаббидаанд. Миқдори миёнаи нитрогени умумии (± инҳирофи стандартӣ) пешоб дар варақ нишон дода шудааст. Модаҳои ҷустуҷӯи мизбон (D, F) ва хунмаки (E, G) мочевинаро ба таври вобаста ба воя истеъмол мекунанд. Ҳаҷмҳои миёнаи нафаскашӣ (D, E) бо номҳои гуногуни ҳарфҳо аз якдигар ба таври назаррас фарқ мекарданд (ANOVA-и яктарафа бо истифода аз таҳлили пост-хокии Туки; p <0.05). Хатогиҳои сатрӣ хатогии стандартии миёнаро (BE) нишон медиҳанд. Хати рости пунктир хати регрессияи логарифмиро (F, G) нишон медиҳад.
Барои раҳо кардани ғизои ҷаббидашуда, пашшаҳо алоҳида ба найчаҳои микросентрифугаи 1,5 мл, ки дорои 230 мкл оби тозашуда буданд, ҷойгир карда шуданд ва бофта бо истифода аз пестлеи якдафъаина ва муҳаррики бесим (VWR International, Lund, SE) вайрон карда шуд ва сипас бо суръати 10 кропм барои 10 дақиқа сентрифуга карда шуд. Қабати болоии об (200 мкл) ба микропластинаи 96-чоҳӣ (Sigma-Aldrich) интиқол дода шуд ва ҷаббидашавӣ (λ620) бо истифода аз микропластинаи хонандаи спектрофотометр (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm муайян карда шуд. Интихобан, пашшаҳо дар 1 мл оби тозашуда орд карда шуданд, ки 900 мкл аз он барои таҳлили спектрофотометрӣ ба кювет интиқол дода шуд (λ 620 нм; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Барои чен кардани истеъмоли ғизоӣ, каҷи стандартӣ бо роҳи ҳалкунии пайдарпай барои ҳосил кардани 0,2 мкл то 2,4 омода карда шуд. мкл 1 мг мл-1 ксилен сианиди. Сипас, зичии оптикии консентратсияҳои маълуми ранг барои муайян кардани миқдори ғизое, ки ҳар як пашша истеъмол мекунад, истифода шуд.
Маълумоти ҳаҷм бо истифода аз таҳлили яктарафаи дисперсия (ANOVA) ва баъдан муқоисаҳои ҷуфтии Tukey пас аз анҷоми кор таҳлил карда шуданд (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, ИМА, 1989–2007). Таҳлилҳои регрессияи хаттӣ истеъмоли карбамидро, ки аз консентратсия вобаста аст, тавсиф карданд ва вокунишҳоро байни пашшаҳои ҷустуҷӯкунанда ва хунмаккашон муқоиса карданд (GraphPad Prism v8.0.0 барои Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, ИМА).
Тақрибан 20 мкл намунаҳои пешоб аз ҳар як гурӯҳи синну солӣ ба Chromosorb® W/AW (10 мг 80/100 mesh, Sigma Aldrich) часпонида шуда, дар капсулаҳои қалъагӣ (8 мм × 5 мм) ҷойгир карда шуданд. Капсулаҳо ба камераи сӯзиши анализатори CHNS/O (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ИМА) ворид карда шуданд, то миқдори нитрогенро дар пешоби тару тоза ва кӯҳна мувофиқи протоколи истеҳсолкунанда муайян кунанд. Нитрогени умумӣ (g N l-1) дар асоси консентратсияҳои маълуми мочевина, ки ҳамчун стандарт истифода мешуд, чен карда шуд.
Барои арзёбии таъсири парҳез ба зинда мондани занҳои мизбон ва хунмак, пашшаҳоро алоҳида дар косаҳои калони Петри (диаметри 12 см ва баландии 6 см; Семадени) бо сӯрохи бо тӯр пӯшида дар сарпӯш (диаметри 3 см) бо вентилятсия ва таъминоти ғизо ҷойгир карданд. Парҳезҳо фавран пас аз 4 dpe дода шуданд ва 1% пешоби гови тару тоза ва пиршударо дар бар мегирифтанд, чор консентратсияи мочевина ва ду гурӯҳи назоратӣ, 10% сахароза ва обро дар бар мегирифтанд. Ҳар як парҳез ба тампонҳои дандонпизишкӣ (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE), ки ба сӯзандоруи 5 мл (Thermo Fisher Scientific, Гетеборг, SE) ворид карда шуда, поршен хориҷ карда шуда, дар болои косаи Петри гузошта мешуд (расми 1).1A). Парҳези худро ҳар рӯз иваз кунед. Лабораторияро тавре ки дар боло тавсиф шудааст, нигоҳ доред. Пашшаҳои зиндамонда ду маротиба дар як рӯз ҳисоб карда мешуданд, дар ҳоле ки пашшаҳои мурда то марги охирин пашша партофта мешуданд (n = 40 барои як табобат). Зинда мондани пашшаҳое, ки бо парҳезҳои гуногун ғизо мегирифтанд, аз ҷиҳати оморӣ бо истифода аз... таҳлил карда шуд. Хатҳои зиндамонии Каплан-Мейер ва санҷишҳои log-rank барои муқоисаи тақсимоти зиндамонӣ байни парҳезҳо (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Дастгоҳи парвозкунандаи пашшаи фармоишӣ, ки аз рӯи асари Аттисано ва ҳамкоронаш [17] сохта шудааст, аз панелҳои шаффофи акрилии ғафсии 5 мм (паҳнои 10 см x дарозии 10 см x баландии 10 см) бе панелҳои пеш ва қафо сохта шудааст (Расми 3: боло). Маҷмӯаи чархзананда бо найчаи амудӣ, ки аз сутуни хроматографияи газӣ (0,25 мм; 7,5 см L) сохта шудааст ва нӯгҳояш ба сӯзани ҳашарот часпонида шудаанд, ки байни як ҷуфт магнитҳои неодимӣ бо масофаи 9 см аз ҳам овезон карда шудаанд. Найчаи уфуқӣ, ки аз ҳамон мавод сохта шудааст (6,5 см L), найчаи амудиро ду қисм кард, то як бозуи пайвастшуда ва бозуеро ташкил дод, ки як пораи хурди фолгаи алюминийро ҳамчун сигнали қатъкунандаи рӯшноӣ мебурд.
Ба пашшаҳои мода, ки 24 соат гурусна монда буданд, пеш аз боздошт, парҳези дар боло зикршударо ба муддати 30 дақиқа дода буданд. Пашшаҳои мода, ки пурра ғизо гирифта буданд, сипас ба таври инфиродӣ дар ях барои 2-3 дақиқа наркоз карда шуда, ба сӯзанҳои ҳашарот бо муми занбӯри асал (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) пайваст карда шуда, сипас ба бозуҳои найчаҳои уфуқӣ баста шуданд. Осиёби парвозкунанда. Гардишҳо дар як парвоз аз ҷониби як сабткунандаи маълумоти фармоишӣ сабт карда шуданд, сипас бо истифода аз нармафзори PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE) нигоҳдорӣ ва намоиш дода шуданд. Осиёби парвозкунанда дар як ҳуҷраи танзимшавандаи иқлим ҷойгир карда шуд (12 соат:12 соат, равшанӣ: торик, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Барои тасаввур кардани тарзи фаъолияти парвоз, масофаи умумии парвоз (м) ва шумораи умумии фаъолиятҳои пайдарпайи парвоз дар як соат дар тӯли 24 соат ҳисоб карда шуданд. Ғайр аз ин, масофаҳои миёнаи парвозкардаи занони алоҳида дар байни табобатҳо муқоиса карда шуданд ва бо истифода аз ANOVA-и яктарафа ва таҳлили post hoc-и Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) таҳлил карда шуданд, ки дар он масофаи миёна як тағирёбандаи вобаста ҳисобида мешуд, дар ҳоле ки табобат омили мустақил буд. Илова бар ин, шумораи миёнаи даврҳо бо афзоиши 10-дақиқаӣ ҳисоб карда мешавад.
Барои арзёбии таъсири парҳез ба фаъолияти репродуктивии An.arabiensis, шаш мода (4 dpe) пас аз гирифтани хун мустақиман ба қафасҳои Бугдорм (30 см × 30 см × 30 см) интиқол дода шуданд ва сипас парҳези таҷрибавиро барои 48 соат, тавре ки дар боло тавсиф шудааст, таъмин карданд. Сипас парҳезҳо гирифта шуданд ва дар рӯзи сеюм пиёлаҳои тухмгузорӣ (30 мл; Nolato Hertila), ки бо 20 мл оби тозашуда пур карда шуда буданд, барои 48 соат дода шуданд ва ҳар 24 соат иваз карда шуданд. Ҳар як режими парҳезиро 20-50 маротиба такрор кунед. Тухмҳо барои ҳар як қафаси таҷрибавӣ шумурда ва сабт карда шуданд. Намунаҳои зернамунаҳои тухмҳо барои арзёбии тағирёбии миёнаи андоза ва дарозии тухмҳои инфиродӣ (n ≥ 200 барои як парҳез) бо истифода аз микроскопи Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE), ки бо камераи Leica (DFC) 320 R2 муҷаҳҳаз шудааст, истифода шуданд; Leica Microsystems Ltd., DE). Тухмҳои боқимонда дар як ҳуҷраи бо иқлими назоратшаванда дар шароити стандартии парвариш барои 24 соат нигоҳ дошта шуданд ва намунаи зернамунаи кирминаҳои навзоди 1-ум (n ≥ 200 дар як парҳез), тавре ки дар боло тавсиф шудааст, чен карда шуданд. Шумораи тухмҳо ва андозаи тухмҳо ва кирминаҳо байни табобатҳо ва бо истифода аз ANOVA-и яктарафа ва таҳлили пост-хокии Туки (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) муқоиса карда шуданд.
Моддаҳои бухоршавандаи сар аз пешоби тару тоза (1 соат пас аз намунагирӣ), пешоби 24 соат, 72 соат ва 168 соата аз намунаҳои аз чорвои калони зотҳои Зебу ва зотҳои Арси ҷамъовардашуда ҷамъоварӣ карда шуданд. Барои қулайӣ, намунаҳои пешоб субҳи барвақт, вақте ки говҳо ҳанӯз дар оғил буданд, ҷамъоварӣ карда шуданд. Намунаҳои пешоб аз 10 нафар ҷамъоварӣ карда шуданд ва 100-200 мл аз ҳар як намуна ба халтаҳои нонпазии полиамидии инфиродӣ (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) дар полиамидҳои 3 литр бо сарпӯш дар зарфҳои пластикии винилхлорид интиқол дода шуданд. Моддаҳои бухоршавандаи сар аз ҳар як намунаи пешоби гов мустақиман (тару тоза) ё пас аз пухта расидан дар ҳарорати хонагӣ барои 24 соат, 72 соат ва 168 соат ҷамъоварӣ карда шуданд, яъне ҳар як намунаи пешоб намояндаи ҳар як гурӯҳи синну солӣ буд.
Барои ҷамъоварии моддаҳои борбардори фазоӣ, системаи ҳалқаи пӯшида барои гардиши ҷараёни гази филтршудаи карбони фаъолшуда (100 мл дақ-1) тавассути халтаи полиамид ба сутуни адсорбсия барои 2,5 соат бо истифода аз насоси вакуумии диафрагма (KNF Neuberger, Freiburg, DE) истифода шуд. Ҳамчун назорат, ҷамъоварии фазоӣ аз халтаи холӣ полиамид анҷом дода шуд. Сутуни адсорбсия аз найчаи тефлонӣ (5,5 см x 3 мм id) сохта шуда буд, ки дорои 35 мг Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, ИМА) байни вилкаҳои пашми шишагӣ буд. Пеш аз истифода, сутун бо 1 мл n-гексани аз нав дистиллятсияшуда (Merck, Darmstadt, DE) ва 1 мл пентан (99,0% ҳалкунандаи холиси GC дараҷаи Sigma Aldrich) шуста шуд. Моддаҳои борбардори адсорбсияшуда бо 400 мкл пентан элюсия карда шуданд. Ҷамъоварии фазоӣ ҷамъ карда шуд ва сипас дар -20°C то истифода барои таҳлили минбаъда нигоҳ дошта шуд.
Вокунишҳои рафтории мизбон ва хунхӯр An. Иқтибосҳои борони Headspace, ки аз пешоби тару тоза, 24-соат, 72-соат ва 168-соат ҷамъоварӣ шудаанд, барои иқтибосҳои борони хомӯшакҳои Arabidopsis бо истифода аз олфактометри найчаи шишагини рост [18] таҳлил карда шуданд. Таҷрибаҳо дар давраи ZT 13-15, давраи авҷи фаъолияти ҷустуҷӯи хонагии An гузаронида шуданд. Arab [19]. Олфактометри найчаи шишагин (80 см × 9.5 см id) бо 3 ± 1 люкс нури сурх аз боло равшан карда шуд. Ҷараёни ҳавои филтршуда ва намнокшудаи ангиштсанг (25 ± 2 °C, 65 ± 2% нами нисбӣ) аз биоанализ дар 30 см с-1 гузашт. Ҳаво аз як қатор экранҳои тӯрии пӯлоди зангногир мегузарад, ки ҷараёни ламинарӣ ва сохтори якхелаи лойро ба вуҷуд меорад. Диспенсери тампонҳои дандонпизишкӣ (4 см × 1 см; L:D; DAB Dental AB), ки аз печи 5 см дар болои... тарафи шамолии олфактометр, бо иваз кардани стимулятор ҳар 5 дақиқа. Барои таҳлил, 10 мкл аз ҳар як экстракти фазои сар, ки бо таносуби 1:10 омехта карда шудааст, ҳамчун стимулятор истифода шуд. Миқдори баробари пентан ҳамчун назорат истифода шуд. Хомӯшакҳои инфиродии ҷустуҷӯи мизбон ё хунмак 2-3 соат пеш аз оғози таҷриба дар қафасҳои алоҳидаи раҳокунӣ ҷойгир карда шуданд. Қафаси раҳокунӣ дар тарафи шамоли поёнии олфактометр ҷойгир карда шуд ва ба хомӯшакҳо иҷозат дода шуд, ки барои 1 дақиқа мутобиқ шаванд ва сипас клапани шапараки қафас барои раҳокунӣ кушода шуд. Ҷалб ба табобат ё назорат ҳамчун таносуби хомӯшакҳое, ки дар давоми 5 дақиқа пас аз раҳокунӣ бо манбаъ тамос гирифтанд, таҳлил карда шуд. Экстракти ҳар як фазои сар ва назорати ҳаво ҳадди аққал 30 маротиба такрор карда шуд ва барои пешгирӣ аз таъсири ҳар як рӯз, ҳамон миқдор табобат ва назорат дар ҳар як рӯзи таҷрибавӣ санҷида шуданд. Ҷустуҷӯи посухҳо аз мизбон ва ғизогирандаи хун. Ҷавоб. Маҷмӯаҳои арабӣ ва фазои сар бо истифода аз регрессияи номиналии логистикӣ ва баъдан муқоисаҳои ҷуфтӣ барои таносубҳои тоқ таҳлил карда шуданд. (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Вокуниши тухмгузории Ан. Иқтибосҳои фазои сар аз пешоби гови тару тоза ва пир дар қафасҳои Бугдорм (30 см × 30 см × 30 см; MegaView Science) таҳлил карда шуданд. Пиёлаҳои пластикӣ (30 мл; Nolato Hertila), ки бо 20 мл оби тозашуда пур карда шуда буданд, субстрати тухмгузориро таъмин карданд ва дар кунҷҳои муқобили қафас, дар масофаи 24 см ҷойгир карда шуданд. Пиёлаҳои табобатӣ бо 10 мкл аз ҳар як экстракти фазои сар бо маҳлули 1:10 танзим карда шуданд. Барои танзими пиёлаи назоратӣ миқдори баробари пентан истифода шуд. Пиёлаҳои табобатӣ ва назоратӣ байни ҳар як таҷриба барои таъсири мавқеъ иваз карда шуданд. Даҳ модаи хунхӯрда дар ZT 9-11 ба қафасҳои таҷрибавӣ раҳо карда шуданд ва тухмҳо дар пиёлаҳо 24 соат пас ҳисоб карда шуданд. Формула барои ҳисоб кардани индекси тухмгузорӣ чунин аст: (шумораи тухмҳое, ки дар пиёлаи табобатӣ гузошта шудаанд - шумораи тухмҳое, ки дар пиёлаи назоратӣ гузошта шудаанд) / (шумораи умумии тухмҳое, ки гузошта шудаанд). Ҳар як табобат 8 маротиба такрор карда шуд.
Таҳлили хроматографии газ ва муайянкунии намунаи антеннаи электронӣ (GC-EAD)-и An.arabiensis-и модина тавре ки қаблан тавсиф шуда буд [20], анҷом дода шуд. Хулоса, экстрактҳои нави боришоти фазоӣ бо истифода аз Agilent Technologies 6890 GC (Санта Клара, Калифорния, ИМА), ки бо сутуни HP-5 (30 м × 0.25 мм id, ғафсии плёнкаи 0.25 мкм, Agilent Technologies) муҷаҳҳаз шудаанд, ҷудо карда шуданд. ва пешоби пиршавӣ. Ҳамчун фазаи мобилӣ бо суръати миёнаи ҷараёни хаттии 45 см с-1 истифода шуд. Ҳар як намуна (2 мкл) ба муддати 30 сония дар ҳолати беҷудокунӣ бо ҳарорати вуруди 225 °C ворид карда шуд. Ҳарорати танӯри GC аз 35 °C (нигоҳдории 3 дақиқа) то 300 °C (нигоҳдории 10 дақиқа) дар ҳарорати 10 °C дақ-1 барномарезӣ карда шуд. Дар тақсимкунандаи партовҳои GC, 4 psi нитроген илова карда шуд ва дар салиб бо ҳаҷми ками мурдаи Gerstel 3D/2 (Gerstel, Mülheim, DE) байни детектори ионизатсияи аланга ва EAD бо таносуби 1:1 тақсим карда шуд. Капилляри партовҳои GC барои EAD аз хатти интиқоли Gerstel ODP-2, ки ҳарорати танӯри GC-ро дар баробари 5 °C пайгирӣ мекунад, ба найчаи шишагӣ (10 см × 8 мм) гузаронида шуд, ки дар он ҷо бо ҳавои намнокшудаи филтршудаи карбон (1,5 л дақ-1) омехта карда шуд. Антенна ҷойгир карда шуд 0,5 см аз баромадгоҳи найча. Ҳар як пашшаи алоҳида як такрорро ташкил медод ва барои пашшаҳои мизбон, ҳадди аққал се такрор бо намунаҳои пешоби ҳар синну сол анҷом дода шуданд.
Муайян кардани пайвастагиҳои биоактивӣ дар коллексияҳои пешоби гови тару тоза ва пиршуда бо истифода аз GC ва спектрометри омехтаи массавӣ (GC-MS; 6890 GC ва 5975 MS; Agilent Technologies) барои ба даст овардани посухҳои антеннавӣ дар таҳлили GC-EAD, ки дар ҳолати ионизатсияи таъсири электронӣ дар 70 эВ кор мекунад. GC бо сутуни капиллярии кремнийи гудохташуда бо пӯшиши UI HP-5MS (диаметри дарунии 60 м × 0.25 мм, ғафсии плёнка 0.25 мкм) бо истифода аз гелий ҳамчун фазаи мобилӣ бо суръати миёнаи ҷараёни хаттии 35 см с-1 муҷаҳҳаз карда шуд. Намунаи 2 мкл бо истифода аз ҳамон танзимоти инжектор ва ҳарорати танӯр, ки барои таҳлили GC-EAD мувофиқ аст, ворид карда шуд. Пайвастагиҳо дар асоси вақти нигоҳдории онҳо (индекси Коват) ва спектрҳои массавӣ дар муқоиса бо китобхонаи фармоишӣ ва китобхонаи NIST14 (Agilent) муайян карда шуданд. Пайвастагиҳои муайяншуда бо ворид кардани стандартҳои аслӣ тасдиқ карда шуданд (Файли иловагӣ 1: Ҷадвали S2). Барои миқдор, ацетат гептил (10 нг, 99.8% тозагии кимиёвӣ, Aldrich) ҳамчун стандарти беруна ворид карда шуд.
Арзёбии самаранокии омехтаи бӯи синтетикӣ, ки аз пайвастагиҳои биоактивӣ, ки дар пешоби тару тоза ва пиршуда муайян шудаанд, барои ҷалби мизбон ва хунмакзан бо истифода аз ҳамон олфактометр ва протоколи дар боло зикршуда иборат аст. Омехтаҳои синтетикӣ таркиб ва таносуби пайвастагиҳоро дар экстрактҳои омехтаи фазоӣ аз пешоби тару тоза, 24-соата, 48-соата, 72-соата ва 168-соата тақлид карданд (Расми 5D-G; Файли иловагӣ 1: Ҷадвали S2). Барои таҳлил, 10 мкл аз маҳлули 1:100 омехтаи пурра синтетикӣ бо суръати умумии озодшавӣ аз тақрибан 140-2400 нг h-1 истифода баред, то ҷолибият барои пашшаҳои мизбон ва хунмакзанро арзёбӣ кунед. Баъд аз ин, санҷиш дар омехтаҳои пурра гузаронида мешавад, ки дар он омехтаҳои субтрактивии пайвастагиҳои ягонаи омехтаи пурра хориҷ карда мешаванд. Ҷустуҷӯи посухҳо аз мизбон ва аз хун ғизогирифта бо истифода аз регрессияи номиналии логистикӣ ва баъдан муқоисаҳои ҷуфтӣ барои ... таҳлил карда шуданд. таносубҳои тоқ (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Барои арзёбии он, ки оё пешоби гов метавонад ҳамчун нишонаи муҳити зисти мизбон барои пашшаҳои вараҷа хизмат кунад, пешоби гови тару тоза ва пир, ки тавре ки дар боло тавсиф шудааст, ҷамъоварӣ карда шуд ва об дар сатилҳои 3-л (100 мл) ҷойгир карда шуд ва дар домҳои домӣ гузошта шуд. (версияи BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE). Даҳ дом дар чарогоҳ, дар масофаи 50 м аз ҳам дур, 400 м аз ҷамоати деҳот (Силай, Эфиопия, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) ва бе чорво, дар ҷойҳои парвариши доимӣ ва деҳаҳо ҷойгир карда шуданд. Панҷ дом барои тақлид кардани ҳузури мизбон гарм карда шуданд, дар ҳоле ки панҷ дом бе гармӣ гузошта шуданд. Ҳар як макони табобат ҳар шаб дар маҷмӯъ панҷ шаб иваз карда мешавад. Шумораи пашшаҳое, ки дар домҳои бо пешоб домӣ кардашуда аз синну соли гуногун сабт шудаанд, бо истифода аз регрессияи логистикӣ бо тақсимоти биномии бета муқоиса карда шуданд (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Дар деҳае, ки дар наздикии шаҳри Маки, минтақаи Оромия, Эфиопия паҳн шудааст (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Расми 6A). Тадқиқот байни нимаи моҳи август ва нимаи моҳи сентябр пеш аз пошидани боқимондаҳои солона дар дохили бино ва мавсими тӯлонии боронӣ гузаронида шуд. Панҷ ҷуфт хона (аз 20 то 50 м фосила), ки дар канори деҳа ҷойгиранд, барои таҳқиқот интихоб карда шуданд (Расми 6A). Меъёрҳое, ки барои интихоби хонаҳо истифода мешуданд, инҳоянд: ҳайвонот дар хона иҷозат дода намешаванд, пухтупаз дар дохили хона (бо истифода аз ҳезум ё ангишт) иҷозат дода намешавад (ҳадди аққал дар давраи озмоишӣ) ва хонаҳое, ки ҳадди аксар ду нафар аҳолӣ доранд ва дар доруҳои зидди ҳашарот хоб мекунанд. дар зери тӯри пашшаи коркардшуда. Тасдиқи ахлоқӣ аз ҷониби Шӯрои баррасии ахлоқи тадқиқоти институтсионалӣ (IRB/022/2016)-и факултети илмҳои табиӣ (CNS-IRB)-и Донишгоҳи Аддис-Абеба, мувофиқи дастурҳои муқаррарнамудаи Эъломияи Ассотсиатсияи тиббии ҷаҳонӣ дар Ҳелсинки дода шудааст. Розигии ҳар як сардори хонавода бо кумаки кормандони васеъкунии тандурустӣ ба даст оварда шуд. Тамоми раванд аз ҷониби маъмуриятҳои маҳаллӣ дар сатҳи ноҳия ва шӯъба ('кебеле') тасдиқ карда мешавад. Тарҳи таҷрибавӣ аз тарҳи чоркунҷаи лотинии 2 × 2 пайравӣ кард, ки дар он омехтаҳо ва назорати синтетикӣ дар шаби аввал ба хонаҳои ҷуфт таъин карда шуданд ва дар шаби таҷрибавии оянда байни хонаҳо иваз карда шуданд. Ин раванд даҳ маротиба такрор карда шуд. Илова бар ин, барои арзёбии фаъолияти пашша дар хонаҳои интихобшуда, домҳои CDC барои панҷ шаби пайдарпай дар аввал, миёна ва охири озмоиши саҳроӣ дар як вақти рӯз муқаррар карда шуданд.
Омехтаи синтетикӣ, ки шаш пайвастагии биоактивиро дар гептан (97.0% ҳалкунандаи GC дараҷаи, Sigma Aldrich) ҳал карда, бо истифода аз диспенсери фитили пахтагӣ дар 140 нг h-1 раҳо карда шуд [20]. Диспенсери фитили ба ҳамаи пайвастагиҳо имкон дод, ки дар тӯли таҷрибаи 12-соата бо таносуби доимӣ раҳо карда шаванд. Гептан ҳамчун назорати истифода шуд. Шиша дар паҳлӯи нуқтаи вуруди домҳои чароғи Марказҳои назорат ва пешгирии бемориҳо (CDC) (Ширкати Ҷон В. Ҳок, Гейнсвилл, Флорида, ИМА; Расми 6A) овезон карда шуд. Домҳо дар баландии 0.8-1 м аз замин, дар наздикии пои кат овезон карда шуданд ва як ихтиёрӣ дар зери тӯри пашшаи коркарднашуда хоб кард ва байни соатҳои 18:00 ва 06:30 амалиёт анҷом дод. Пашшаҳое, ки аз рӯи ҷинс ва ҳолати физиологӣ (ғизо надодашуда, ғизо надодашуда, нимҳомила ва ҳомиладор [21] дастгир карда шуданд, баъдан бо истифода аз таҳлили реаксияи занҷирии полимеразӣ (PCR) барои муайян кардани намудҳое, ки аз ҷиҳати морфологӣ ҳамчун A. gambiae sl муайян карда шудаанд, тафтиш карда шуданд. Аъзоёни комплекс [23]. Дар таҳқиқоти саҳроӣ, домбандии хонаҳои ҷуфтшуда бо истифода аз модели мувофиқати номиналии логистикӣ таҳлил карда шуд, ки дар он ҷо ҷаззобият тағйирёбандаи вобаста ва табобат (омехтаи синтетикӣ нисбат ба назорат) таъсири собит буд (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.). Дар ин ҷо мо арзишҳои χ2 ва p-ро аз санҷиши таносуби эҳтимолият гузориш медиҳем.
Арзёбӣ кунед, ки оё он бехатар аст. arabiensis тавонист пешоб, манбаи асосии нитрогени он, карбамидро, тавассути ғизодиҳии мустақим, дар давоми 48 соат пас аз истеъмол дар тӯли 4 рӯз пас аз озмоишҳои ғизодиҳии мизбон ва хунхӯранда ба даст орад (Расми 1A). Ҳам мизбон ва ҳам мизбон, ки хун мемаканд, нисбат ба ҳама гуна парҳез ё об ба таври назаррас бештар сахарозаро ҷаббидаанд (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 ва F(5,299) = 56.00, p < 0.0001 мутаносибан; Расми 1B,C). Ғайр аз ин, мизбонҳо дар 72 соат дар муқоиса бо пешоб дар 168 соат камтар дар пешоб хӯрданд (Расми 1B). Вақте ки парҳезе пешниҳод карда шуд, ки дорои карбамид бошад, мизбонҳо дар 2.69 мМ дар муқоиса бо ҳама консентратсияҳои дигар ва об миқдори хеле зиёди карбамидро ҷаббидаанд, дар ҳоле ки аз 10% сахароза фарқ кардан ғайриимкон аст (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Расми 1D). Ин баръакси вокуниши занони аз хун ғизогирифта буд, ки одатан парҳезҳои дорои карбамидро нисбат ба об ба таври назаррас бештар азхуд мекарданд, гарчанде ки аз 10% сахароза ба таври назаррас камтар буд (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; Расми 1).1E). Ғайр аз ин, ҳангоми муқоисаи байни ду ҳолати физиологӣ, занони флеботомизатсияшуда нисбат ба занони мизбон дар консентратсияҳои пасттарин бештар карбамидро аз худ карданд ва ин занон миқдори шабеҳи карбамидро дар консентратсияҳои баландтар аз худ карданд (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; Расми 1F, G). Дар ҳоле ки истеъмол аз парҳези дорои карбамид арзишҳои оптималӣ дошт (Расми 1D, E), занон дар ҳарду ҳолати физиологӣ тавонистанд миқдори карбамидро, ки дар тамоми диапазони консентратсияҳои карбамид ҷаббида шудааст, ба таври логарифмӣ танзим кунанд (Расми 1F, G). Ба ҳамин монанд, ба назар мерасад, ки пашшаҳо ҷабби нитрогени худро тавассути танзими миқдори пешобе, ки ҷаббида мешавад, назорат мекунанд, зеро миқдори нитроген дар пешоб дар миқдори ҷаббидашуда инъикос меёбад (Расми 1B, C ва B замимаҳо).
Барои арзёбии таъсири пешоб ва мочевина ба зинда мондани пашшаҳои мизбон ва хунмак, ба мода пешобҳои ҳар чор синну сол (тару тоза, 24 соат, 72 соат ва 168 соат пас аз таҳшиншавӣ) ва як қатор консентратсияҳои мочевина, инчунин оби тозашуда ва 10% сахароза ҳамчун назорати назоратӣ дода шуданд (Расми 2A). Ин таҳлили зиндамонӣ нишон дод, ки парҳез ба зинда мондани умумии модаҳои мизбон (пешоб: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; мочевина: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Расми 2B, C) ва модаҳои мизбон (пешоб: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; мочевина: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Расми 2D, E) таъсири назаррас дошт. Дар ҳама Дар таҷрибаҳо, заноне, ки парҳези пешоб, карбамид ва обро мехӯрданд, дар муқоиса бо заноне, ки парҳези сахарозаро мехӯрданд, сатҳи зинда мондани онҳо ба таври назаррас пасттар буд (Расми 2B-E). Занони мизбон, ки пешоби тару тоза ва кӯҳнаро мехӯрданд, сатҳи зинда мондани онҳоро нишон доданд, ки эҳтимолияти зинда мондани онҳо пасттарин буд (Расми 2B). Ғайр аз ин, занони мизбон, ки бо 135 мМ карбамид мехӯрданд, нисбат ба гурӯҳи назоратии об дарозтар зинда монданд (p < 0.04) (Расми 2C). Дар муқоиса бо об, заноне, ки бо пешоби тару тоза ва пешоби 24-соата мехӯрданд, дарозтар зинда монданд (мутаносибан p = 0.001 ва p = 0.012; Расми 2D), дар ҳоле ки заноне, ки бо пешоби 72-соата мехӯрданд, нисбат ба заноне, ки бо пешоби тару тозаи кӯтоҳ ва пешоби пири 24-соата мехӯрданд, дарозтар зинда монданд (мутаносибан p < 0.0001 ва p = 0.013; Расми 2D). Ҳангоми додани 135 мМ карбамид, занони мизбон, ки бо хун мехӯрданд, нисбат ба ҳама консентратсияҳои дигари карбамид ва об дарозтар зинда монданд (p <0.013; Расми 2E).
Зинда мондани пашшаҳои модаи мизбон ва хунмаки Anopheles arabinis, ки бо пешоби гов ва мочевина ғизо мегиранд. Дар биоанализ (A), ба пашшаҳои мода парҳезе дода шуд, ки аз пешоби гови тару тоза ва пир, консентратсияҳои гуногуни мочевина, сахароза (10%) ва оби тозашуда (H2O) иборат буд. Зинда мондани пашшаҳои мизбон (B, C) ва хунмаки (D, E) ҳар 12 соат сабт карда шуд, то он даме ки ҳамаи пашшаҳои мода, ки бо пешоб (B, D) ва мочевина (C, E) ғизо мегиранд, ва гурӯҳҳои назоратӣ, сахароза ва об, мурданд.
Масофаи умумӣ ва шумораи тирпарронӣ, ки дар озмоиши осиёби парвоз дар тӯли 24 соат муайян карда шуд, байни пашшаҳои мизбон ва пашшаҳои хунмак, ки дар маҷмӯъ фаъолияти камтари парвоз нишон доданд, фарқ мекард (Расми 3). Пашшаҳои мизбон, ки пешоби тоза ва пир ё сахароза ва об медоданд, намунаҳои гуногуни парвозро нишон доданд (Расми 3), ки модаҳое, ки бо пешоби тоза ғизо мегиранд, субҳ фаъолтар буданд, дар ҳоле ки пашшаҳои 24 ва 168-соата, ки бо пешоб ғизо мегирифтанд, намунаҳои гуногуни парвозро нишон доданд ва асосан рӯзона буданд. Пашшаҳои мода, ки сахароза ё пешоби 72-соата медоданд, дар тӯли 24 соат фаъолият нишон доданд, дар ҳоле ки модаҳое, ки об медоданд, дар миёнаи давра фаъолтар буданд. Пашшаҳои мизбон, ки бо сахароза ғизо мегирифтанд, сатҳи баландтарини фаъолиятро дар дер шаб ва субҳи барвақт нишон доданд, дар ҳоле ки онҳое, ки пешоби 72-соата истеъмол мекарданд, дар тӯли 24 соат коҳиши доимии фаъолиятро аз сар гузарониданд (Расми 3).
Иҷрои парвози шикорчии хунмаки Anopheles arabinis, ки бо пешоби гов ва карбамид ғизо мегирад. Дар озмоиши осиёби парвоз, пашшаҳои мода, ки бо пешоби гови тару тоза ва пир, консентратсияҳои гуногуни карбамид, сахароза (10%) ва оби тозашуда (H2O) ғизо мегиранд, ба дастҳои уфуқӣ ва озодона гардишкунанда (боло) пайваст карда шуданд. Барои пашшаҳои мизбон (чап) ва пашшаҳои хунмак (рост), масофа ва шумораи умумии парвозҳо дар як соат барои ҳар як парҳез дар тӯли 24 соат сабт карда шуданд (торик: хокистарӣ; равшан: сафед). Масофаи миёна ва шумораи миёнаи ҳамлаҳо дар тарафи рости графики фаъолияти сиркадианӣ нишон дода шудаанд. Хатогиҳо хатои стандартии миёнаро нишон медиҳанд. Таҳлили оморӣ ба матн нигаред.
Умуман, фаъолияти умумии парвози модаҳои мизбон, ки дар тӯли 24 соат ба масофаи парвоз монанд буданд, пайравӣ карданд. Масофаи миёнаи парвоз аз парҳези истеъмолшуда ба таври назаррас таъсир расонд (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001) ва модаҳои мизбон, ки 72 соат пешоб истеъмол кардаанд, дар муқоиса бо ҳама парҳезҳои дигар масофаҳои хеле дарозтар парвоз карданд (p < 0.0001) ва пашшаҳои бо сахароза ғизогирифта нисбат ба пашшаҳои тару тоза (p = 0.022) ва бо пешоби 24-соата ғизогирифта (p = 0.022) дарозтар парвоз карданд. Бар хилофи нақшаи фаъолияти парвозе, ки дар парҳези пешоб тавсиф шудааст, модаҳои мизбон, ки бо карбамид ғизо гирифтаанд, дар тӯли 24 соат фаъолияти доимии парвозро нишон доданд ва дар нимаи дуюми марҳилаи торик ба авҷи худ расиданд (Расми 3). Гарчанде ки нақшаҳои фаъолият монанд буданд, модаҳои мизбон, ки бо карбамид ғизо гирифтаанд, вобаста ба консентратсияи ҷаббида масофаи миёнаи парвозро ба таври назаррас афзоиш доданд (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). Модаҳои мизбон, ки бо ҳар гуна консентратсияи карбамид ғизо гирифтаанд, нисбат ба модаҳое, ки бо об ё сахароза ғизо гирифтаанд, дарозтар парвоз карданд (p <0.03).
Фаъолияти умумии парвози пашшаҳои хунмак дар тамоми парҳезҳо устувор ва дар тӯли 24 соат нигоҳ дошта шуд, ки дар нимаи дуюми давраи торик барои модаҳое, ки бо об ғизо мегиранд, инчунин дар модаҳое, ки тару тоза ва 24 соат ғизо мегиранд, фаъолияти пешоб афзоиш ёфт (расми 3). Дар ҳоле ки парҳези пешоб ба масофаи миёнаи парвоз дар модаҳое, ки бо хун ғизо мегиранд, таъсири назаррас расонд (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), парҳези мочевина бо дигар парҳези пешоб ва назорат (тару тоза, p = 0.0091; 72 соат, p = 0.0022; 168 соат, p = 0.001; сахароза, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
Таъсири ғизогирии пешоб ва мочевина ба параметрҳои репродуктивӣ дар биосанҷишҳои тухмгузор арзёбӣ карда шуданд (Расми 4A) ва мувофиқи шумораи тухмҳое, ки аз ҷониби ҳар як мода гузошта шудаанд, андозаи тухм ва кирминаҳои аввалини навзод таҳқиқ карда шуданд. Шумораи тухмҳое, ки гузошта шудаанд. Модаҳои араби бо пешоб ғизогирифта аз рӯи парҳез фарқ мекарданд (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; Расми 4B). Модаҳое, ки бо пешоб ва орди хун 24-соата ғизо мегирифтанд, нисбат ба модаҳое, ки бо дигар парҳезҳои пешоб ғизо мегирифтанд, тухмҳои хеле бештар медоданд ва ба онҳое, ки бо сахароза ғизо мегирифтанд, монанд буданд (Расми 4B). Ба ҳамин монанд, андозаи тухмҳое, ки модаҳои бо пешоб ғизо додашуда аз рӯи парҳез фарқ мекарданд (F(5, 209) = 12.85, p <0.0001), ки модаҳои бо пешоб ғизогирифта аз модаҳои бо об ғизогирифта тухмҳои хеле калонтар медоданд, дар ҳоле ки тухмҳои модаҳое, ки бо 168 соат пешоб ғизо мегирифтанд, хеле хурдтар буданд (Расми 4C). Илова бар ин, парҳези пешоб ба андозаи кирминаҳо таъсири назаррас расонд (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), ки кирминаҳои хеле калонтар аз тухмҳои гузоштаи модаҳое, ки 24 ва 72 соат бо пешоб ғизо мегиранд, нисбат ба тухмҳое, ки аз тухмҳои гузошташуда бо кирминаҳои бо об ғизо мегиранд ва 168 соат бо пешоб ғизо мегиранд (Расми 4D).
Фаъолияти репродуктивии Anopheles arabinis-и мода, ки бо пешоби гов ва мочевина ғизо мегиранд. Ба пашшаҳои мода, ки бо хун ғизо мегиранд, парҳезҳое дода мешуданд, ки аз пешоби гови тару тоза ва пир, консентратсияҳои гуногуни мочевина, сахароза (10%) ва оби тозашуда (H2O) иборат буданд, пеш аз ҷойгиркунӣ дар биоозмоишҳо ва гирифтани субстратҳои тухмгузор 48 соат (A) иборат буданд. Шумораи тухм (B, E), андозаи тухм (C, F) ва андозаи кирминаҳо (D, G) аз парҳези додашуда (пешоби гов: BD; мочевина: EG) ба таври назаррас таъсир расониданд. Миёна барои ҳар як параметр, ки бо истифода аз номҳои гуногуни ҳарфҳо чен карда шудааст, аз якдигар ба таври назаррас фарқ мекард (ANOVA-и яктарафа бо истифода аз таҳлили пост-хокии Туки; p <0.05). Хатогиҳо хатои стандартии миёнаро нишон медиҳанд.
Мочевина ҳамчун ҷузъи асосии нитрогении пешоб, вақте ки ҳамчун парҳез ба занони хунхӯрда дода мешавад, дар ҳама таҳқиқот ба параметрҳои репродуктивӣ таъсири назаррас расонд. Шумораи тухмҳое, ки модонҳое, ки модонҳое, ки модонҳоеро, ки пас аз хӯроки хун ғизо мегиранд, мегузоранд, вобаста ба консентратсияи мочевина (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), модонҳое, ки консентратсияи мочевинаро аз 134 µM то 1.34 мМ ғизо медиҳанд, тухмҳои бештар мегузоранд (Расми 4E). Модонҳое, ки бо консентратсияи мочевинаи аз 134 µM ё болотар ғизо мегиранд, нисбат ба модонҳое, ки бо об ғизо мегиранд (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Расми 4F), тухмҳои калонтар мегузоранд ва андозаи кирминаҳо, гарчанде ки аз консентратсияи шабеҳи мочевина дар модарон (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) таъсир мебинанд, тағйирёбандатар буд (Расми 4G).
Ҷалби умумӣ ба экстрактҳои ҳавоии пешоби гови мизбон. Арабиенсис, ки дар олфактометри найчаи шишагӣ арзёбӣ шудааст (Расми 5A), аз синну соли пешоб ба таври назаррас таъсир расонидааст (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Расми 5B). Таҳлили пас аз табобат нишон дод, ки бӯи пешоби кӯҳна дар 24 соат нисбат ба ҳама табобатҳои дигар сатҳи хеле баланди ҷолибиятро ба вуҷуд меорад (72 соат: p = 0.0060, 168 соат: p = 0.012, пентан: p = 0.00070), ба истиснои бӯи пешоби тоза (p = 0.13; Расми 5B). Гарчанде ки ҷалби умумии пашшаҳои хунмак ба бӯи пешоб ба таври назаррас фарқ надошт (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Расми 5C), муайян карда шуд, ки ин модаҳо нисбат ба пешоби 72-соата ба экстрактҳои ҳавоии пешоб ба таври назаррас ҷолибтаранд. назоратҳо (p = 0.0066; Расми 5C).
Вокунишҳои рафторӣ ба бӯйҳои табиӣ ва синтетикии пешоби гов дар ҷустуҷӯи Anopheles arabianus-и мизбон ва аз хун ғизогирифта. Схемаи олфактометри найчаи шишагин (A). Ҷалби экстрактҳои боришоти сар аз пешоби гови тару тоза ва пир ба пашшаҳои мизбон (B) ва хунмаккуш (C). Реаксияи tentacle-и Lord An-ро ёбед. Экстрактҳои сар аз пешоби гови пир (D), 24-соата (E), 72-соата (F) ва 168-соата (G) ҷудо карда шудаанд. Нишонаҳои муайянкунии антеннаи электронӣ (EAD) тағйироти шиддатро дар посух ба пайвастагиҳои биоактивӣ дар сар аз хроматографи газ ҷудошуда ва аз ҷониби детектори ионизатсияи аланга (FID) муайяншуда нишон медиҳанд. Сатри миқёс амплитудаи вокунишро (mV) нисбат ба вақти нигоҳдорӣ (s) нишон медиҳад. Хусусиятҳо ва суръати озодшавӣ (µg h-1) пайвастагиҳои биологии фаъол нишон дода шудаанд. Як ситорача (*) вокуниши доимии амплитудаи пастро нишон медиҳад. Ситорачаҳои дугона (**) вокунишҳои ноистеҳсолшавандаро нишон медиҳанд. Ёфтани мизбон (H) ва хунмаканда (I) An.arabiensis ба омехтаҳои синтетикии бӯйҳои пешоби гови тару тоза ва пир муроҷиатҳои гуногун доранд. Таносуби миёнаи пашшаҳое, ки ба номҳои гуногуни ҳарфҳо ҷалб шудаанд, аз якдигар ба таври назаррас фарқ мекарданд (ANOVA-и яктарафа бо истифода аз таҳлили пост-хокии Туки; p <0.05). Хатогиҳои сатрӣ хатогии стандартии миқёсро нишон медиҳанд.
Модаи Ann.arabiensis, 72 соат ва 120 соат пас аз хӯроки хун, ҳангоми тухмгузорӣ, дар муқоиса бо пентанҳои назоратӣ, экстрактҳои боришоти фазоӣ аз пешоби гови тару тоза ва пир бартарӣ надоштанд (χ2 = 3.07, p > 0.05; Файли иловагӣ 1: Расми S1).
Барои Ann.arabiensis-и модина, таҳлилҳои GC-EAD ва GC-MS ҳашт, шаш, се ва се пайвастагии биоактивиро муайян карданд (Расми 5D-G). Гарчанде ки тафовутҳо дар шумораи пайвастагиҳое, ки вокунишҳои электрофизиологиро ба вуҷуд оварданд, мушоҳида шуданд, аксари ин пайвастагиҳо дар ҳар як экстрактҳои фазоӣ мавҷуд буданд, ки аз пешоби тару тоза ва кӯҳна ҷамъоварӣ шуда буданд. Аз ин рӯ, барои ҳар як экстракт, танҳо пайвастагиҳое, ки вокуниши физиологиро аз антеннаҳои модина дар болои остона ба вуҷуд оварданд, ба таҳлилҳои минбаъда дохил карда шуданд.
Суръати умумии озодшавии ноустувори пайвастагиҳои биоактивӣ дар коллексияи сар аз 29 мкг h-1 дар пешоби тоза то 242 мкг h-1 дар пешоби 168-соата афзоиш ёфт, ки асосан аз ҳисоби p-крезол ва м-формальдегид, афзоиши фенол ва инчунин фенол ба амал омадааст. Баръакс, суръати озодшавии дигар пайвастагиҳо, ба монанди 2-циклогексен-1-он ва деканал, бо афзоиши синну соли пешоб коҳиш ёфт, ки бо коҳиши мушоҳидашудаи шиддати сигнал (фаровонӣ) дар хроматограмма (Расми 5D)-G (панели чап) ва вокунишҳои физиологӣ ба ин пайвастагиҳо (Панели рости Расми 5D-G) алоқаманд буд.
Умуман, омехтаи синтетикӣ таносуби табиии пайвастагиҳои биоактивиро дошт, ки дар экстрактҳои парвозкунандаи фазоҳои пешоби тару тоза ва кӯҳна муайян карда шудаанд (Расми 5D-G) ва ба назар чунин мерасад, ки дар ҷустуҷӯи мизбон (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Расми 5H) ё пашшаҳои хунмаккунанда (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; Расми 5I) ҷолибияти назаррас ба бор наовардааст. Аммо, муқоисаҳои ҷуфтӣ пас аз hoc байни табобатҳо нишон доданд, ки пашшаҳои ҷустуҷӯкунандаи мизбон дар муқоиса бо назорати пентан барои омехтаи синтетикии пешоби 24-соата хеле ҷолиб буданд (p = 0.0086; Расми 5H).
Барои арзёбии нақши ҷузъҳои инфиродӣ дар омехтаҳои синтетикии пешоби 24-соата, шаш омехтаи субтрактивӣ дар муқоиса бо омехтаҳои пурра дар озмоиши найчаи Y арзёбӣ карда шуданд, ки дар он пайвастагиҳои инфиродӣ хориҷ карда шуданд. Барои пашшаҳои ҷустуҷӯкунандаи мизбон, хориҷ кардани пайвастагиҳои инфиродӣ аз омехтаи пурра ба вокунишҳои рафторӣ таъсири назаррас дошт (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; Файли иловагӣ 1: Расми S2A), ҳамаи омехтаҳои субтрактивӣ нисбат ба омехтаи хурдтар аз омехтаи пурра ҷолибтар буданд. Баръакс, хориҷ кардани пайвастагиҳои инфиродӣ аз омехтаи пурра синтетикӣ ба вокунишҳои рафтории пашшаҳои хунмакк таъсир нарасонд (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), ба истиснои деканал, ки боиси паст шудани сатҳҳо дар муқоиса бо омехтаи пурраи Ҷалб (p = 0.022; Файли иловагӣ 1: Расми S2B).
Дар деҳае, ки дар он бемории малярия паҳн шудааст, дар Эфиопия, самаранокии омехтаи синтетикии пешоби гов дар давоми даҳ шаб дар ҷалби пашшаҳо дар шароити саҳроӣ арзёбӣ карда шуд (Расми 6А). Дар маҷмӯъ 4861 пашша дастгир ва муайян карда шуданд, ки аз онҳо 45,7% Anthropus.gambiae sl, 18,9% Anopheles pharoensis ва 35,4% Culex spp. буданд. (Файли иловагӣ 1: Ҷадвали S1). Anopheles arabinis ягона узви комплекси намудҳои An.Gambian аст, ки тавассути таҳлили PCR муайян карда шудааст. Ба ҳисоби миёна, дар як шаб 320 пашша дастгир карда шуд, ки дар ин муддат домҳои вақт бо домҳои омехтаи синтетикӣ нисбат ба домҳои ҷуфтшуда бе омехта пашшаҳоро бештар сайд карданд (χ2(0, 3196) = 170,0, p < 0,0001). Дар ҳар яке аз панҷ шаби назоратӣ дар аввал, миёна ва охири озмоиш домҳои бе дом гузошта шуданд. Шумораҳои монанд. Дар ҳар як ҷуфт домҳо шумораи пашшаҳо дастгир карда шуд, ки ин нишон медиҳад, ки байни хонаҳо ягон тафовут вуҷуд надорад (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) ва дар давраи тадқиқот коҳиши шумораи онҳо ба назар нарасидааст. Дар муқоиса бо домҳои назоратӣ, шумораи пашшаҳое, ки дар домҳое, ки омехтаи синтетикиро дар бар мегирифтанд, ба таври назаррас афзоиш ёфт: ҷустуҷӯи мизбон (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), ғизодиҳии охирини хун (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) ва ҳомиладорӣ (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; Файли иловагӣ 1: Ҷадвали S1). Ин инчунин дар шумораи умумии пашшаҳои дастгиршуда инъикос ёфтааст: ҷустуҷӯи мизбон > хунмакк > ҳомиладор > нимҳомила > нарина.
Арзёбии саҳроии самаранокии омехтаи бӯи пешоби гови синтетикӣ дар давоми 24 соат. Озмоишҳои саҳроӣ дар ҷанубу марказии Эфиопия (харита), дар наздикии шаҳри Маки (ворид кунед), бо истифода аз домҳои рӯшноии Марказҳои назорати бемориҳо (CDC) (рост) дар хонаҳои ҷуфтшуда, бо тарҳи чоркунҷаи лотинӣ (тасвири ҳавоӣ) (A) гузаронида шуданд. Фотодомҳои синтетикии CDC, ки бо бӯи дом дода мешаванд, Anopheles arabesques-и модинаро (B) ҷалб ва дастгир мекунанд, аммо Anopheles farroes-ро (C) не, бо роҳи дигар, таъсири вобаста ба ҳолати физиологӣ. Илова бар ин, ин домҳо шумораи назарраси пашшаҳои Culex-и мизбонро дастгир карданд.(D) Дар муқоиса бо гурӯҳи назоратӣ. Сутунҳо дар тарафи чап нишондиҳандаи миёнаи интихоби пашшаҳоеро нишон медиҳанд, ки дар ҷуфтҳои доми бӯйдор (сабз) ва назоратӣ (кушода) (N = 10) дастгир карда шудаанд, дар ҳоле ки сутунҳо дар тарафи рост нишондиҳандаи миёнаи интихобиро дар ҷуфтҳои домҳои назоратӣ (кушода; N = 5) нишон медиҳанд. Ситорача сатҳҳои аҳамияти омориро нишон медиҳад (*p = 0.01 ва ***p < 0.0001)
Се намуд дар домҳое, ки омехтаҳои синтетикӣ доштанд, ба таври гуногун дастгир карда шуданд. Дар ҷустуҷӯи мизбон (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), ғизодиҳии хун (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) ва ҳомиладорӣ (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) .arabiensis дар дом афтод ва омехтаи синтетикиро раҳо кард (Расми 6B), дар ҳоле ки миқдори An фарқ надошт. Pharoensis дар ҳолатҳои гуногуни физиологӣ пайдо шуд (Расми 6C). Барои Culex, дар домҳое, ки бо омехтаи синтетикӣ дом карда шуда буданд, танҳо афзоиши назарраси шумораи пашшаҳое, ки мизбонҳоро меҷӯянд, дар муқоиса бо домҳои назоратӣ мушоҳида шуд (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; Расми 6D).
Домҳои домҳои мизбон, ки берун аз мизбонҳои эҳтимолӣ байни маконҳои парвариш ва ҷамоатҳои деҳоти Эфиопия ҷойгир буданд, барои арзёбии он, ки оё магасҳои вараҷа бӯи пешоби говро ҳамчун нишонаи муҳити зисти мизбон истифода мебаранд, истифода шуданд. Дар сурати набудани нишонаҳои мизбон, гармӣ ва бо ё бе бӯи пешоби гов, ягон магас дастгир карда нашуд (Файли иловагӣ 1: Расми S3). Аммо, дар сурати мавҷуд будани ҳарорати баланд ва бӯи пешоби гов, магасҳои модаи вараҷа ҷалб ва дастгир карда шуданд, гарчанде ки шумораи кам, новобаста аз синну соли пешоб (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Файли иловагӣ 1: Расми S3). Баръакс, назорати об магасҳои вараҷаро дар ҳарорати баланд дастгир накарданд (Файли иловагӣ 1: Расми S3).
Хомӯшакҳои вараҷа пайвастагиҳои дорои нитрогенро тавассути ғизодиҳии ҷубронӣ бо пешоби гов (яъне, кӯлҳо) ба даст меоранд ва паҳн мекунанд, то хусусиятҳои таърихи ҳаётро, ба монанди дигар ҳашарот, беҳтар кунанд [2, 4, 24, 25, 26]. Пешоби гов як захираи барқароршавандаи дастрас аст, ки бо ҷойҳои истироҳатии векторҳои вараҷа, ба монанди оғилхонаҳо ва растаниҳои баланд дар наздикии хонаҳои деҳот ва ҷойҳои тухмгузорӣ, зич алоқаманд аст. Хомӯшакҳои мода ин захираро аз рӯи бӯй пайдо мекунанд ва қодиранд ҷабби пайвастагиҳои нитрогениро дар пешоб, аз ҷумла мочевина, ҷузъи асосии нитрогенӣ дар пешобро танзим кунанд [15, 16]. Вобаста аз ҳолати физиологии хомӯшаки мода, моддаҳои ғизоӣ дар пешоб барои беҳтар кардани фаъолияти парвоз ва зинда мондани хомӯшакҳои модаи мизбон, инчунин хусусиятҳои зинда мондан ва репродуктивии афроди бо хун ғизогирифта дар давраи аввали гонадотропӣ ҷудо карда мешаванд. Аз ин рӯ, омезиши пешоб барои векторҳои вараҷа, ки мисли калонсолони камғизо бастаанд, нақши муҳими ғизоӣ мебозад [8], зеро он ба хомӯшакҳои мода имкон медиҳад, ки тавассути ғизодиҳии камхатар пайвастагиҳои муҳими нитрогенро ба даст оранд. Ин бозёфт оқибатҳои назарраси эпидемиологӣ дорад, зеро занон зиёд мешаванд. давомнокии умр, фаъолият ва ҳосили репродуктивии онҳо, ки ҳамаи ин ба иқтидори векторҳо таъсир мерасонанд. Ғайр аз ин, ин рафтор метавонад ҳадафи барномаҳои ояндаи идоракунии векторҳо бошад.