পুষ্টি আহরণ ও বণ্টন পতঙ্গের খাদ্য অন্বেষণ এবং জীবনচক্রের বৈশিষ্ট্যসমূহকে একীভূত করে। জীবনের বিভিন্ন পর্যায়ে নির্দিষ্ট পুষ্টি উপাদানের ঘাটতি পূরণের জন্য, পতঙ্গরা সম্পূরক খাদ্যগ্রহণের মাধ্যমে এই পুষ্টি উপাদানগুলো সংগ্রহ করতে পারে, উদাহরণস্বরূপ, ‘পুডল’ নামে পরিচিত একটি প্রক্রিয়ায় মেরুদণ্ডী প্রাণীর নিঃসৃত রস ভক্ষণের মাধ্যমে। অ্যানোফিলিস অ্যারাবিয়ানি মশা অপুষ্টিতে ভুগছে বলে মনে হয় এবং তাই এর বিপাক ও প্রজনন উভয়ের জন্যই পুষ্টির প্রয়োজন। এই গবেষণার উদ্দেশ্য ছিল, পুষ্টি আহরণের জন্য গরুর মূত্রের উপর অ্যানোফিলিস অ্যারাবিয়ানি মশার আলোড়ন তার জীবনচক্রের বৈশিষ্ট্যগুলোর উন্নতি ঘটায় কিনা তা মূল্যায়ন করা।
এটি নিরাপদ কিনা তা নিশ্চিত করুন। অ্যারাবিয়েনসিস তাজা, ২৪-ঘণ্টা, ৭২-ঘণ্টা এবং ১৬৮-ঘণ্টা পুরোনো গরুর মূত্রের গন্ধে আকৃষ্ট হয়েছিল, এবং পোষক-সন্ধানী ও রক্ত-ভোজনকারী (রক্তপানের ৪৮-ঘণ্টা পর) স্ত্রী মশাগুলোকে একটি ওয়াই-টিউব অলফ্যাক্টোমিটারে পরিমাপ করা হয়েছিল, এবং গর্ভবতী স্ত্রী মশাগুলোর প্রজনন পরীক্ষা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। এরপর চারটি বয়সের শ্রেণিতেই গরুর মূত্রে থাকা জৈব-সক্রিয় যৌগগুলো শনাক্ত করার জন্য একটি সম্মিলিত রাসায়নিক এবং তড়িৎ-শারীরবৃত্তীয় বিশ্লেষণ ব্যবহার করা হয়েছিল। জৈব-সক্রিয় যৌগগুলোর কৃত্রিম মিশ্রণ ওয়াই-টিউব এবং মাঠ পর্যায়ের পরীক্ষায় মূল্যায়ন করা হয়েছিল। ম্যালেরিয়ার বাহক মশার জন্য সম্ভাব্য সম্পূরক খাদ্য হিসেবে গরুর মূত্র এবং এর প্রধান নাইট্রোজেন-যুক্ত যৌগ ইউরিয়াকে অনুসন্ধান করার জন্য, খাদ্যগ্রহণের পরামিতি এবং জীবনচক্রের বৈশিষ্ট্যগুলো পরিমাপ করা হয়েছিল। স্ত্রী মশার অনুপাত এবং শোষিত গরুর মূত্র ও ইউরিয়ার পরিমাণ মূল্যায়ন করা হয়েছিল। খাদ্যগ্রহণের পর, স্ত্রী মশাগুলোর বেঁচে থাকা, আবদ্ধ অবস্থায় উড্ডয়ন এবং প্রজনন মূল্যায়ন করা হয়েছিল।
আশ্রয়দাতার রক্ত ​​ও পুষ্টির সন্ধান। পরীক্ষাগার ও মাঠ পর্যায়ের গবেষণায় দেখা গেছে, আরব মাকড়সা তাজা ও পুরোনো গরুর মূত্রের প্রাকৃতিক এবং কৃত্রিম গন্ধে আকৃষ্ট হয়। ডিম পাড়ার স্থানে গর্ভবতী স্ত্রী মাকড়সারা গরুর মূত্রের প্রতি উদাসীন থাকে। আশ্রয়দাতা-সন্ধানী ও রক্তচোষা স্ত্রী মাকড়সারা সক্রিয়ভাবে গরুর মূত্র ও ইউরিয়া শোষণ করে এবং পলায়ন, বেঁচে থাকা বা প্রজননের জন্য শারীরবৃত্তীয় অবস্থার সাপেক্ষে জীবনচক্রের ভারসাম্য রক্ষার ভিত্তিতে এই সম্পদগুলো বণ্টন করে।
উন্নত জীবনচক্র বৈশিষ্ট্যের জন্য অ্যানোফিলিস অ্যারাবিনিসের গোমূত্র গ্রহণ ও বিতরণ। গোমূত্রের সম্পূরক সরবরাহ দৈনিক বেঁচে থাকার হার ও বাহকের ঘনত্ব বৃদ্ধির মাধ্যমে সরাসরি এবং পলায়ন প্রবণতা পরিবর্তনের মাধ্যমে পরোক্ষভাবে বাহক ক্ষমতাকে প্রভাবিত করে, এবং তাই ভবিষ্যতের মডেলগুলিতে এটি বিবেচনা করা উচিত।
পুষ্টি আহরণ এবং বিতরণ পোকামাকড়ের খাদ্য সংগ্রহ এবং জীবনচক্রের বৈশিষ্ট্যের সাথে একীভূত [১,২,৩]। পোকামাকড় খাদ্যের প্রাপ্যতা এবং পুষ্টির প্রয়োজনীয়তার উপর ভিত্তি করে খাদ্য নির্বাচন ও আহরণ করতে এবং ক্ষতিপূরণমূলক খাদ্যগ্রহণ করতে সক্ষম [১, ৩]। পুষ্টির বিতরণ জীবনচক্র প্রক্রিয়ার উপর নির্ভর করে এবং পোকামাকড়ের বিভিন্ন জীবন পর্যায়ে খাদ্যের গুণমান এবং পরিমাণের জন্য বিভিন্ন প্রয়োজনীয়তার দিকে পরিচালিত করতে পারে [১, ২]। নির্দিষ্ট পুষ্টির ঘাটতি পূরণের জন্য, পোকামাকড় পরিপূরক খাদ্যগ্রহণের মাধ্যমে এই পুষ্টিগুলি পেতে পারে, যেমন কাদা, মেরুদণ্ডী প্রাণীর বিভিন্ন মল ও নিঃসরণ এবং মৃতদেহ, এই প্রক্রিয়াটি ডোবা বা জলাশয় নামে পরিচিত [২]। যদিও প্রাথমিকভাবে বিভিন্ন প্রজাপতি এবং মথ প্রজাতির বর্ণনা করা হয়েছে, জলাশয় অন্যান্য পতঙ্গ বর্গেও দেখা যায়, এবং এই ধরণের সম্পদের প্রতি আকর্ষণ এবং খাদ্যগ্রহণ স্বাস্থ্য এবং অন্যান্য জীবনচক্রের বৈশিষ্ট্যের উপর উল্লেখযোগ্য প্রভাব ফেলতে পারে [২, ৪, ৫, ৬, ৭]। ম্যালেরিয়ার মশা Anopheles gambiae sensu lato (sl) একটি 'পুষ্টিহীন' পূর্ণাঙ্গ মশা হিসাবে আবির্ভূত হয় [৮], তাই এর জীবনচক্রের বৈশিষ্ট্য নির্ধারণে জলসেচ একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করতে পারে, কিন্তু এই আচরণটি এখন পর্যন্ত উপেক্ষিত হয়েছে। এই গুরুত্বপূর্ণ বাহনটির পুষ্টি গ্রহণ বৃদ্ধি করার উপায় হিসেবে আলোড়নের ব্যবহার মনোযোগ আকর্ষণ করে, কারণ এর গুরুত্বপূর্ণ মহামারী সংক্রান্ত পরিণতি থাকতে পারে।
লার্ভা পর্যায় থেকে প্রাপ্ত কম ক্যালোরি সঞ্চয় এবং রক্তপানের অদক্ষ ব্যবহারের কারণে পূর্ণবয়স্ক স্ত্রী অ্যানোফিলিস মশার নাইট্রোজেন গ্রহণ সীমিত থাকে [9]। স্ত্রী Ann.gambiae sl সাধারণত অতিরিক্ত রক্তপানের মাধ্যমে এর ক্ষতিপূরণ করে [10, 11], যার ফলে আরও বেশি মানুষ এই রোগে আক্রান্ত হওয়ার ঝুঁকিতে পড়ে এবং মশা শিকারের ঝুঁকিতে পড়ে। বিকল্পভাবে, মশা মেরুদণ্ডী প্রাণীর মল থেকে নাইট্রোজেনযুক্ত যৌগ গ্রহণ করতে পারে যা অভিযোজন এবং উড্ডয়নের কৌশল উন্নত করে, যেমনটি অন্যান্য পোকামাকড়ের ক্ষেত্রে দেখা গেছে [2]। এই প্রসঙ্গে, An.The Gambian sl প্রজাতি কমপ্লেক্সের অন্তর্গত একটি সহোদর প্রজাতি, Anopheles arabinis-এর তাজা এবং পুরোনো গরুর মূত্রের প্রতি শক্তিশালী এবং স্বতন্ত্র আকর্ষণ [12,13,14] আকর্ষণীয়। Anopheles arabinis তার পোষক পছন্দের ক্ষেত্রে সুযোগসন্ধানী এবং গবাদি পশুর সাথে মেলামেশা করে ও তাদের রক্ত ​​পান করে বলে পরিচিত। গরুর মূত্র নাইট্রোজেনযুক্ত যৌগে সমৃদ্ধ একটি উৎস, যেখানে মোট নাইট্রোজেনের ৫০-৯৫% ইউরিয়া থাকে। তাজা মূত্র [15, 16]। গরুর মূত্র পুরোনো হয়ে গেলে, অণুজীবগুলি 24 ঘন্টার মধ্যে নাইট্রোজেনযুক্ত যৌগগুলির জটিলতা কমাতে এই সম্পদগুলি ব্যবহার করে [15]। জৈব নাইট্রোজেনের হ্রাসের সাথে অ্যামোনিয়ার দ্রুত বৃদ্ধির ফলে, অ্যালকালোফিলিক অণুজীবগুলি (যার মধ্যে অনেকগুলি মশার জন্য বিষাক্ত যৌগ তৈরি করে) বৃদ্ধি পায় [15], যার মধ্যে স্ত্রী Ann.arabiensis 24 ঘন্টা বা তার কম পুরোনো মূত্রের প্রতি বিশেষভাবে আকৃষ্ট হতে পারে [13, 14]।
এই গবেষণায় পোষক এবং রক্ত-ভোজী অ্যানোফিলিস মশার সন্ধান করা হয়েছিল। এর প্রথম গোনাডোট্রপিন চক্রের সময়, মূত্রের সাথে মিশ্রণের মাধ্যমে ইউরিয়াসহ নাইট্রোজেনঘটিত যৌগসমূহ গ্রহণের জন্য অ্যারাবিয়েনসিস মশার মূল্যায়ন করা হয়েছিল। এরপর, স্ত্রী মশারা উন্নততর জীবনধারণ, প্রজনন এবং পরবর্তী খাদ্যান্বেষণের জন্য এই সম্ভাব্য পুষ্টি সম্পদ কীভাবে বণ্টন করে, তা মূল্যায়ন করার জন্য একাধিক পরীক্ষা চালানো হয়েছিল। পরিশেষে, পোষক এবং রক্ত-ভোজী অ্যানোফিলিস মশার জন্য এই গন্ধগুলো নির্ভরযোগ্য সূত্র প্রদান করে কিনা তা নির্ধারণ করতে তাজা এবং পুরোনো গরুর মূত্রের গন্ধের মূল্যায়ন করা হয়েছিল। এই সম্ভাব্য পুষ্টি সম্পদের সন্ধানে, অ্যারাবিয়েনসিস মশা পর্যবেক্ষণকৃত ভিন্ন ভিন্ন আকর্ষণের পেছনের রাসায়নিক সম্পর্কগুলো আবিষ্কার করে। ২৪-ঘণ্টা পুরোনো মূত্রে শনাক্তকৃত উদ্বায়ী জৈব যৌগের (VOCs) কৃত্রিম গন্ধ মিশ্রণগুলোকে মাঠপর্যায়ে আরও মূল্যায়ন করা হয়েছিল, যা পরীক্ষাগারে প্রাপ্ত ফলাফলকে প্রসারিত করে এবং বিভিন্ন শারীরবৃত্তীয় অবস্থায় গরুর মূত্রের গন্ধের প্রভাব প্রদর্শন করে। মশার আকর্ষণ। প্রাপ্ত ফলাফল নিশ্চিত করে যে অ্যানোফিলিস মশা... আরাবিয়েনসিস মেরুদণ্ডী প্রাণীর মূত্রে প্রাপ্ত নাইট্রোজেনঘটিত যৌগসমূহ গ্রহণ ও বিতরণ করে তার জীবনচক্রের বৈশিষ্ট্যসমূহকে প্রভাবিত করে। এই ফলাফলগুলো সম্ভাব্য মহামারী সংক্রান্ত পরিণতির প্রেক্ষাপটে এবং বাহক নজরদারি ও নিয়ন্ত্রণে এগুলো কীভাবে ব্যবহার করা যেতে পারে, তা আলোচনা করা হয়েছে।
অ্যানোফিলিস অ্যারাবিকানস (ডোঙ্গোলা স্ট্রেইন) ২৫ ± ২ °C তাপমাত্রা, ৬৫ ± ৫% আপেক্ষিক আর্দ্রতা এবং একটি ১২:১২ ঘণ্টার আলো:অন্ধকার চক্রে প্রতিপালিত হয়েছিল। লার্ভাগুলোকে পাতিত জলে ভরা প্লাস্টিকের ট্রেতে (২০ সেমি × ১৮ সেমি × ৭ সেমি) প্রতিপালন করা হয়েছিল এবং টেট্রামিন® মাছের খাবার (টেট্রা ওয়ার্ক, মেলে, ডিই) খাওয়ানো হয়েছিল। পিউপাগুলোকে ৩০ মিলি কাপে (নোলাটো হার্টিলা, অস্টর্প, এসই) সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং তারপর পূর্ণাঙ্গ পতঙ্গের আবির্ভাবের জন্য বাগডর্ম খাঁচায় (৩০ সেমি × ৩০ সেমি × ৩০ সেমি; মেগাভিউ সায়েন্স, তাইচুং, তাইওয়ান) স্থানান্তর করা হয়েছিল। পূর্ণাঙ্গ পতঙ্গদের আবির্ভাবের ৪ দিন পর পর্যন্ত ইচ্ছামতো ১০% সুক্রোজ দ্রবণ সরবরাহ করা হয়েছিল, এরপর পোষক-সন্ধানী স্ত্রী পতঙ্গদের পরীক্ষার ঠিক আগের খাবার দেওয়া হয়েছিল, অথবা পরীক্ষার আগের রাতে পাতিত জল দিয়ে অনাহারে রাখা হয়েছিল। নিচে বর্ণিত পরীক্ষা। ফ্লাইট টিউব পরীক্ষার জন্য ব্যবহৃত স্ত্রী মশাগুলোকে মাত্র ৪-৬ ঘণ্টা অনাহারে রাখা হয়েছিল এবং তাদের ইচ্ছামতো জল পান করতে দেওয়া হয়েছিল। পরবর্তী বায়োঅ্যাসে-র জন্য রক্তচোষা মশা প্রস্তুত করতে, ৪ দিন বয়সী স্ত্রী মশাগুলোকে একটি মেমব্রেন ফিডিং সিস্টেম (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK) ব্যবহার করে ফাইব্রোসিস-মুক্ত ভেড়ার রক্ত ​​(Håtunalab, Bro, SE) সরবরাহ করা হয়েছিল। এরপর সম্পূর্ণ রক্তপূর্ণ স্ত্রী মশাগুলোকে পৃথক খাঁচায় স্থানান্তর করা হয় এবং নিচে বর্ণিত পরীক্ষাগুলোর ৩ দিন আগে থেকে সরাসরি খাদ্য, অথবা ইচ্ছামতো ১০% সুক্রোজ সরবরাহ করা হয়। পরবর্তী স্ত্রী মশাগুলোকে ফ্লাইট টিউব বায়োঅ্যাসে-র জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল এবং পরীক্ষাগারে স্থানান্তর করা হয়েছিল, এবং তারপর পরীক্ষার ৪-৬ ঘণ্টা আগে তাদের ইচ্ছামতো পাতিত জল দেওয়া হয়েছিল।
পূর্ণবয়স্ক An.Arab স্ত্রী মশার মূত্র এবং ইউরিয়া গ্রহণের পরিমাণ নির্ণয়ের জন্য খাদ্যগ্রহণ পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়েছিল। পোষক-সন্ধানী এবং রক্ত-ভোজী স্ত্রী মশাদের ৪৮ ঘণ্টার জন্য ১% লঘুকৃত তাজা ও পুরোনো গরুর মূত্র, বিভিন্ন ঘনত্বের ইউরিয়া এবং দুটি নিয়ন্ত্রক (১০% সুক্রোজ ও জল) যুক্ত খাদ্য সরবরাহ করা হয়েছিল। এছাড়াও, খাদ্যের সাথে ফুড কালারিং (১ মিলিগ্রাম/মিলি জাইলিন সায়ানাইড এফএফ; সিএএস ২৬৫০-১৭-১; সিগমা-অলড্রিচ, স্টকহোম, এসই) যোগ করা হয়েছিল এবং এটি ২৫০ মাইক্রোলিটার মাইক্রোসেন্ট্রিফিউজ টিউবে (অ্যাক্সিজেন সায়েন্টিফিক, ইউনিয়ন সিটি, সিএ, ইউএস; চিত্র ১এ) একটি ৪ × ৪ ম্যাট্রিক্সে সরবরাহ করা হয়েছিল। টিউবটি কানায় কানায় (~৩০০ মাইক্রোলিটার) পূর্ণ করা হয়েছিল। মশাদের মধ্যে প্রতিযোগিতা এবং ডাই রঙের সম্ভাব্য প্রভাব এড়ানোর জন্য, একটি বড় পেট্রি ডিশে (১২ সেমি ব্যাস এবং ৬ সেমি উচ্চতা; সেমাডেনি, ওস্টারমুন্ডিগেন, সিএইচ; চিত্র ১এ) ১০টি মশা রাখা হয়েছিল। ২৫ ± ২ সেমি °C তাপমাত্রা এবং ৬৫ ± ৫% আপেক্ষিক আর্দ্রতায় সম্পূর্ণ অন্ধকারে এই পরীক্ষাগুলো করা হয়েছিল। খাদ্য গ্রহণের পর, পরবর্তী বিশ্লেষণের জন্য মশাগুলোকে -২০ °C তাপমাত্রায় রাখা হয়েছিল।
পোষক এবং রক্তচোষা স্ত্রী অ্যানোফিলিস অ্যারাবিয়ানাস দ্বারা শোষিত গরুর মূত্র এবং ইউরিয়া খুঁজুন। খাদ্যগ্রহণ পরীক্ষায় (A), স্ত্রী মশাদের তাজা ও পুরোনো গরুর মূত্র, বিভিন্ন ঘনত্বের ইউরিয়া, সুক্রোজ (১০%), এবং পাতিত জল (H2O) দিয়ে তৈরি একটি খাদ্য সরবরাহ করা হয়েছিল। পোষক-সন্ধানী (B) এবং রক্ত-ভোজী (C) স্ত্রী মশারা পরীক্ষিত অন্য যেকোনো খাদ্যের চেয়ে বেশি সুক্রোজ শোষণ করেছে। লক্ষ্য করুন যে পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মশারা ১৬৮-ঘণ্টার গরুর মূত্রের (B) চেয়ে ৭২-ঘণ্টার গরুর মূত্র কম শোষণ করেছে। মূত্রের গড় মোট নাইট্রোজেন উপাদান (± আদর্শ বিচ্যুতি) ইনসেটে দেখানো হয়েছে। পোষক-সন্ধানী (D, F) এবং রক্তচোষা (E, G) স্ত্রী মশারা ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে ইউরিয়া গ্রহণ করে। ভিন্ন অক্ষর নামযুক্ত গড় শ্বাসগ্রহণের পরিমাণ (D, E) একে অপরের থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন ছিল (টুকির পোস্ট হক বিশ্লেষণ ব্যবহার করে একমুখী অ্যানোভা; p < ০.০৫)। ত্রুটি দণ্ডগুলি গড়ের আদর্শ ত্রুটি নির্দেশ করে। (BE)। সোজা ড্যাশযুক্ত রেখাটি লগ-রৈখিক রিগ্রেশন রেখা (F, G) উপস্থাপন করে।
শোষিত খাদ্য মুক্ত করার জন্য, মশাগুলোকে পৃথকভাবে ২৩০ µl পাতিত জলযুক্ত ১.৫ মিলি মাইক্রোসেন্ট্রিফিউজ টিউবে রাখা হয়েছিল এবং একটি ডিসপোজেবল পেস্টল ও কর্ডলেস মোটর (VWR International, Lund, SE) ব্যবহার করে টিস্যুটি চূর্ণ করা হয়েছিল, এরপর ১০ মিনিট ধরে ১০ krpm গতিতে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। সুপারন্যাট্যান্ট (২০০ µl) একটি ৯৬-ওয়েল মাইক্রোপ্লেটে (Sigma-Aldrich) স্থানান্তর করা হয়েছিল এবং একটি স্পেকট্রোফটোমিটার-ভিত্তিক মাইক্রোপ্লেট রিডার (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) ব্যবহার করে অ্যাবজর্বেন্স (λ620 nm) নির্ধারণ করা হয়েছিল। বিকল্পভাবে, মশাগুলোকে ১ মিলি পাতিত জলে পিষে, যার ৯০০ µl স্পেকট্রোফটোমেট্রিক বিশ্লেষণের জন্য (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE) একটি কিউভেটে স্থানান্তর করা হয়েছিল। খাদ্য গ্রহণের পরিমাণ নির্ণয়ের জন্য, ধারাবাহিক লঘুকরণের মাধ্যমে একটি স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ প্রস্তুত করা হয়েছিল। ০.২ µl থেকে ২.৪ µl পরিমাণ ১ mg ml-1 জাইলিন সায়ানাইড যোগ করা হয়েছিল। এরপর, প্রতিটি মশা কী পরিমাণ খাদ্য গ্রহণ করেছে তা নির্ধারণ করার জন্য জ্ঞাত রঞ্জক ঘনত্বের অপটিক্যাল ডেনসিটি ব্যবহার করা হয়েছিল।
একমুখী বৈশ্লেষিক ভেদ (ANOVA) এবং পরবর্তীতে টুকির পোস্ট হক জোড়াভিত্তিক তুলনার মাধ্যমে আয়তনের উপাত্ত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007)। রৈখিক রিগ্রেশন বিশ্লেষণের মাধ্যমে ঘনত্ব-নির্ভর ইউরিয়া গ্রহণের পরিমাণ বর্ণনা করা হয়েছে এবং পোষক-সন্ধানী ও রক্তচোষা মশার মধ্যকার প্রতিক্রিয়ার তুলনা করা হয়েছে (GraphPad Prism v8.0.0 for Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US)।
প্রতিটি বয়সের গ্রুপ থেকে প্রায় ২০ µl মূত্রের নমুনা Chromosorb® W/AW (১০ মিলিগ্রাম ৮০/১০০ মেশ, সিগমা অলড্রিচ)-এর উপর আবদ্ধ করে টিনের ক্যাপসুলে (৮ মিমি × ৫ মিমি) ভরা হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল অনুযায়ী তাজা এবং পুরোনো মূত্রে নাইট্রোজেনের পরিমাণ নির্ণয় করার জন্য ক্যাপসুলগুলি একটি CHNS/O অ্যানালাইজারের (ফ্ল্যাশ ২০০০, থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএস) দহন প্রকোষ্ঠে প্রবেশ করানো হয়েছিল। স্ট্যান্ডার্ড হিসাবে ব্যবহৃত জ্ঞাত ইউরিয়ার ঘনত্বের উপর ভিত্তি করে মোট নাইট্রোজেন (g N l-1) পরিমাপ করা হয়েছিল।
পোষক-সন্ধানী এবং রক্তচোষা স্ত্রী মশার বেঁচে থাকার উপর খাদ্যের প্রভাব মূল্যায়ন করার জন্য, মশাগুলোকে পৃথকভাবে বড় পেট্রি ডিশে (১২ সেমি ব্যাস এবং ৬ সেমি উচ্চতা; সেমাডেনি) রাখা হয়েছিল। ডিশগুলোর ঢাকনায় বায়ুচলাচল এবং খাদ্য সরবরাহের জন্য একটি জাল-ঢাকা ছিদ্র (৩ সেমি ব্যাস) ছিল। ৪ ডিপিই (dpe)-এর ঠিক পরেই খাদ্য সরবরাহ করা হয়েছিল এবং এর মধ্যে ছিল ১% লঘুকৃত তাজা ও পুরোনো গরুর মূত্র, ইউরিয়ার চারটি ঘনত্ব, এবং দুটি নিয়ন্ত্রক, ১০% সুক্রোজ ও জল। প্রতিটি খাদ্য একটি ডেন্টাল ট্যাম্পনে (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) পিপেট করে নেওয়া হয়েছিল, যা একটি ৫ মিলি সিরিঞ্জে (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) প্রবেশ করানো হয়েছিল, প্লাঞ্জারটি সরানো হয়েছিল এবং একটি পেট্রি ডিশের উপরে রাখা হয়েছিল (চিত্র ১)। ১ক)। প্রতিদিন আপনার খাদ্য পরিবর্তন করুন। উপরে বর্ণিত পদ্ধতি অনুযায়ী ল্যাবটি রক্ষণাবেক্ষণ করুন। বেঁচে থাকা মশা দিনে দুবার গণনা করা হয়েছিল, এবং মৃত মশাগুলো ফেলে দেওয়া হয়েছিল যতক্ষণ না শেষ মশাটি মারা যায় (প্রতিটি ট্রিটমেন্টের জন্য n = ৪০)। মশার বেঁচে থাকা বিভিন্ন খাদ্যাভ্যাসের উপর প্রতিপালিত প্রাণীদের বেঁচে থাকার হারের বিন্যাস তুলনা করার জন্য কাপলান-মেয়ার সারভাইভাল কার্ভ এবং লগ-র‍্যাঙ্ক পরীক্ষা ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগতভাবে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0)।
Attisano et al.[17] এর উপর ভিত্তি করে একটি কাস্টম মশা ওড়ানোর যন্ত্র, যা 5 মিমি পুরু স্বচ্ছ এক্রাইলিক প্যানেল (10 সেমি চওড়া x 10 সেমি লম্বা x 10 সেমি উঁচু) দিয়ে তৈরি, যার সামনে এবং পিছনের প্যানেল নেই (চিত্র 3: উপরে)। একটি পিভট অ্যাসেম্বলি, যার মধ্যে একটি উল্লম্ব নল রয়েছে যা একটি গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি কলাম (0.25 মিমি অভ্যন্তরীণ ব্যাস; 7.5 সেমি লম্বা) দিয়ে তৈরি, যার প্রান্তগুলি 9 সেমি দূরত্বে একজোড়া নিওডাইমিয়াম চুম্বকের মধ্যে ঝোলানো একটি পোকামাকড়ের সুইয়ের সাথে আঠা দিয়ে লাগানো। একই উপাদান দিয়ে তৈরি একটি অনুভূমিক নল (6.5 সেমি লম্বা) উল্লম্ব নলটিকে দ্বিখণ্ডিত করে একটি বাঁধা বাহু এবং একটি বাহু তৈরি করে যা আলো-বাধা সংকেত হিসাবে অ্যালুমিনিয়াম ফয়েলের একটি ছোট টুকরো বহন করে।
২৪ ঘন্টা অনাহারে থাকা স্ত্রী মশাগুলোকে আবদ্ধ করার ৩০ মিনিট আগে উপরোক্ত খাদ্য দেওয়া হয়েছিল। এরপর সম্পূর্ণ আহারপ্রাপ্ত স্ত্রী মশাগুলোকে একে একে বরফের উপর ২-৩ মিনিটের জন্য অবশ করা হয় এবং মৌমাছির মোম (জোয়েল সভেনসন্স ভাক্সফ্যাব্রিক এবি, মুঙ্কা লুংবি, এসই) দিয়ে পোকার পিনে সংযুক্ত করে অনুভূমিক টিউবের বাহুগুলোর সাথে বেঁধে দেওয়া হয়। ফ্লাইং মিল। প্রতিটি উড়ানের ঘূর্ণন সংখ্যা একটি বিশেষভাবে নির্মিত ডেটা লগার দ্বারা রেকর্ড করা হয়, তারপর পিসি-ল্যাব ২০০০™ সফটওয়্যার (ভি৪.০১; ভেলেম্যান, গ্যাভের, বিই) ব্যবহার করে সংরক্ষণ ও প্রদর্শন করা হয়। ফ্লাইট মিলটি একটি জলবায়ু-নিয়ন্ত্রিত কক্ষে (১২ ঘণ্টা:১২ ঘণ্টা, আলো:অন্ধকার, ২৫ ± ২ °সে, ৬৫ ± ৫% আপেক্ষিক আর্দ্রতা) রাখা হয়েছিল।
উড্ডয়ন কার্যকলাপের ধরণ পর্যবেক্ষণ করার জন্য, ২৪-ঘণ্টার সময়কালে প্রতি ঘণ্টায় মোট অতিক্রান্ত দূরত্ব (মিটার) এবং মোট ধারাবাহিক উড্ডয়ন কার্যকলাপের সংখ্যা গণনা করা হয়েছিল। এছাড়াও, প্রতিটি স্ত্রী পতঙ্গের দ্বারা অতিক্রান্ত গড় দূরত্ব বিভিন্ন ট্রিটমেন্টের মধ্যে তুলনা করা হয়েছিল এবং ওয়ান-ওয়ে অ্যানোভা ও ট্যুকির পোস্ট হক অ্যানালাইসিস (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল, যেখানে গড় দূরত্বকে একটি নির্ভরশীল চলক এবং ট্রিটমেন্টকে একটি স্বাধীন ফ্যাক্টর হিসেবে বিবেচনা করা হয়েছে। অতিরিক্তভাবে, প্রতি ১০-মিনিট অন্তর গড় প্রদক্ষিণের সংখ্যা গণনা করা হয়েছে।
An.arabiensis-এর প্রজনন ক্ষমতার উপর খাদ্যের প্রভাব মূল্যায়ন করার জন্য, রক্ত ​​সংগ্রহের পর ছয়টি স্ত্রী পোকাকে (৪ দিন বয়সী) সরাসরি বাগডর্ম খাঁচায় (৩০ সেমি × ৩০ সেমি × ৩০ সেমি) স্থানান্তর করা হয় এবং তারপর উপরে বর্ণিত পদ্ধতি অনুযায়ী ৪৮ ঘণ্টার জন্য পরীক্ষামূলক খাদ্য সরবরাহ করা হয়। এরপর তৃতীয় দিনে খাদ্য সরিয়ে নেওয়া হয় এবং ২০ মিলি পাতিত জল ভর্তি স্পনিং কাপ (৩০ মিলি; Nolato Hertila) ৪৮ ঘণ্টার জন্য সরবরাহ করা হয়, যা প্রতি ২৪ ঘণ্টা পর পর পরিবর্তন করা হতো। প্রতিটি খাদ্য ব্যবস্থা ২০-৫০ বার পুনরাবৃত্তি করা হয়। প্রতিটি পরীক্ষামূলক খাঁচার জন্য ডিম গণনা করে লিপিবদ্ধ করা হয়। প্রতিটি ডিমের গড় আকার এবং দৈর্ঘ্যের তারতম্য মূল্যায়ন করার জন্য ডিমের উপ-নমুনা ব্যবহার করা হয় (প্রতি খাদ্যের জন্য n ≥ ২০০), যা একটি লাইকা ক্যামেরা (DFC) 320 R2 সহ সজ্জিত Dialux-20 মাইক্রোস্কোপ (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) ব্যবহার করে করা হয়। লাইকা মাইক্রোসিস্টেমস লিমিটেড, ডিই)। অবশিষ্ট ডিমগুলোকে একটি জলবায়ু-নিয়ন্ত্রিত কক্ষে আদর্শ প্রতিপালন পরিস্থিতিতে ২৪ ঘণ্টা রাখা হয়েছিল, এবং উপরে বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে সদ্য উদ্ভূত প্রথম ইনস্টার লার্ভার একটি উপ-নমুনা (প্রতি ডায়েটে n ≥ ২০০) পরিমাপ করা হয়েছিল। ট্রিটমেন্টগুলোর মধ্যে ডিমের সংখ্যা এবং ডিম ও লার্ভার আকার ওয়ান-ওয়ে অ্যানোভা এবং ট্যুকির পোস্ট হক বিশ্লেষণ (জেএমপি প্রো, ভি১৪.০.০, এসএএস ইনস্টিটিউট ইনকর্পোরেটেড) ব্যবহার করে তুলনা করা হয়েছিল।
আরসি জাতের জেবু গরুর নমুনা থেকে তাজা (নমুনা সংগ্রহের ১ ঘন্টা পর), ২৪ ঘন্টা, ৭২ ঘন্টা এবং ১৬৮ ঘন্টা পুরোনো মূত্রের হেডস্পেস উদ্বায়ী পদার্থ সংগ্রহ করা হয়েছিল। সুবিধার জন্য, খুব সকালে মূত্রের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল যখন গরুগুলো তখনও গোয়ালঘরে ছিল। ১০টি গরুর মূত্রের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং প্রতিটি নমুনার ১০০-২০০ মিলি করে আলাদা আলাদা পলিমাইড বেকিং ব্যাগে (টপিটস কোফ্রেস্কো, ফ্রিশহাল্টেপ্রোডাক্টে জিএমবিএইচ অ্যান্ড কোং, মিন্ডেন, ডিই) স্থানান্তর করে ৩ লিটারের ঢাকনাযুক্ত পলিমাইডের ভিনাইল ক্লোরাইড প্লাস্টিকের ড্রামে রাখা হয়েছিল। প্রতিটি গরুর মূত্রের নমুনা থেকে হেডস্পেস উদ্বায়ী পদার্থ সরাসরি (তাজা) অথবা ঘরের তাপমাত্রায় ২৪ ঘন্টা, ৭২ ঘন্টা এবং ১৬৮ ঘন্টা ধরে পরিপক্ক হওয়ার পর সংগ্রহ করা হয়েছিল, অর্থাৎ প্রতিটি মূত্রের নমুনা প্রতিটি বয়সের গোষ্ঠীর প্রতিনিধিত্বকারী ছিল।
হেডস্পেস উদ্বায়ী পদার্থ সংগ্রহের জন্য, একটি ডায়াফ্রাম ভ্যাকুয়াম পাম্প (KNF Neuberger, Freiburg, DE) ব্যবহার করে একটি ক্লোজড-লুপ সিস্টেমের মাধ্যমে একটি সক্রিয় কার্বন-ফিল্টার করা গ্যাস প্রবাহ (১০০ মিলি/মিনিট) একটি পলিমাইড ব্যাগের মধ্য দিয়ে ২.৫ ঘন্টা ধরে অ্যাডসর্পশন কলামে সঞ্চালন করা হয়েছিল। নিয়ন্ত্রক হিসেবে, একটি খালি পলিমাইড ব্যাগ থেকে হেডস্পেস সংগ্রহ করা হয়েছিল। অ্যাডসর্পশন কলামটি টেফলন টিউবিং (৫.৫ সেমি x ৩ মিমি অভ্যন্তরীণ ব্যাস) দিয়ে তৈরি ছিল, যার মধ্যে গ্লাস উল প্লাগের মাঝে ৩৫ মিলিগ্রাম পোরাপাক কিউ (৫০/৮০ মেশ; Waters Associates, Milford, MA, US) রাখা হয়েছিল। ব্যবহারের আগে, কলামটি ১ মিলি পুনঃপাতিত এন-হেক্সেন (Merck, Darmstadt, DE) এবং ১ মিলি পেন্টেন (৯৯.০% বিশুদ্ধ দ্রাবক জিসি গ্রেড, Sigma Aldrich) দিয়ে ফ্লাশ করা হয়েছিল। শোষিত উদ্বায়ী পদার্থগুলো ৪০০ মাইক্রোলিটার পেন্টেন দিয়ে ইলিউটেড করা হয়েছিল। হেডস্পেস সংগ্রহগুলো একত্রিত করে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। পরবর্তী বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার না করা পর্যন্ত -২০° সেলসিয়াস তাপমাত্রায় রাখুন।
আশ্রয়প্রার্থী এবং রক্তভোজী An.-এর আচরণগত প্রতিক্রিয়া। তাজা, ২৪-ঘণ্টা, ৭২-ঘণ্টা, এবং ১৬৮-ঘণ্টা পুরোনো মূত্র থেকে সংগৃহীত হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাস একটি সোজা কাঁচের নল অলফ্যাক্টোমিটার [18] ব্যবহার করে অ্যারাবিডোপসিস মশার উদ্বায়ী নির্যাসের জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি ZT ১৩-১৫ এর সময় পরিচালিত হয়েছিল, যা An.-এর বাসা খোঁজার কার্যকলাপের শীর্ষ সময়। [19]। একটি কাঁচের নল অলফ্যাক্টোমিটার (৮০ সেমি × ৯.৫ সেমি অভ্যন্তরীণ ব্যাস) উপর থেকে ৩ ± ১ lx লাল আলো দিয়ে আলোকিত করা হয়েছিল। কাঠকয়লা ফিল্টার করা এবং আর্দ্র বায়ুপ্রবাহ (২৫ ± ২ °C, ৬৫ ± ২% আপেক্ষিক আর্দ্রতা) ৩০ সেমি/সেকেন্ড গতিতে বায়োঅ্যাসের মধ্যে দিয়ে প্রবাহিত হয়েছিল। বায়ু স্টেইনলেস স্টিলের জাল পর্দার একটি সিরিজের মধ্যে দিয়ে প্রবাহিত হয়, যা একটি ল্যামিনার প্রবাহ এবং একটি অভিন্ন প্লুম কাঠামো তৈরি করে। ডেন্টাল ট্যাম্পন ডিসপেনসার (৪ সেমি × ১ সেমি; দৈর্ঘ্য: ব্যাস; অলফ্যাক্টোমিটারের বায়ুপ্রবাহের দিকের প্রান্তে একটি ৫ সেমি কয়েল থেকে ডিএবি ডেন্টাল এবি (DAB Dental AB) ঝুলিয়ে দেওয়া হয়েছিল এবং প্রতি ৫ মিনিট পর পর উদ্দীপক পরিবর্তন করা হয়েছিল। বিশ্লেষণের জন্য, প্রতিটি হেডস্পেস নির্যাসের ১০ মাইক্রোলিটার, যা ১:১০ অনুপাতে লঘু করা হয়েছিল, উদ্দীপক হিসেবে ব্যবহার করা হয়েছিল। সমপরিমাণ পেন্টেন নিয়ন্ত্রক হিসেবে ব্যবহার করা হয়েছিল। পরীক্ষা শুরুর ২-৩ ঘণ্টা আগে পোষক-সন্ধানী বা রক্তচোষা মশাগুলোকে পৃথক পৃথক মুক্তি খাঁচায় রাখা হয়েছিল। মুক্তি খাঁচাটি অলফ্যাক্টোমিটারের বায়ুপ্রবাহের বিপরীত দিকে রাখা হয়েছিল এবং মশাগুলোকে ১ মিনিটের জন্য পরিবেশের সাথে অভ্যস্ত হতে দেওয়া হয়েছিল, এবং তারপর খাঁচার বাটারফ্লাই ভালভ খুলে ছেড়ে দেওয়া হয়েছিল। ছেড়ে দেওয়ার ৫ মিনিটের মধ্যে উৎসের সংস্পর্শে আসা মশার অনুপাত হিসেবে ট্রিটমেন্ট বা কন্ট্রোলের প্রতি আকর্ষণ বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। প্রতিটি হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাস এবং কন্ট্রোল কমপক্ষে ৩০ বার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল, এবং কোনো একটি দিনের প্রভাব এড়ানোর জন্য, প্রতিটি পরীক্ষামূলক দিনে একই সংখ্যক ট্রিটমেন্ট এবং কন্ট্রোল পরীক্ষা করা হয়েছিল। পোষক এবং রক্ত-ভোজী মশা থেকে প্রতিক্রিয়া খোঁজা। আরবি বনাম হেডস্পেস সেট। নমিনাল লজিস্টিক রিগ্রেশন এবং পরবর্তীতে অড রেশিওর জন্য জোড়ায় জোড়ায় তুলনার মাধ্যমে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.)।
অ্যানের প্রজনন প্রতিক্রিয়া। বাগডর্ম খাঁচায় (৩০ সেমি × ৩০ সেমি × ৩০ সেমি; মেগাভিউ সায়েন্স) তাজা এবং পুরোনো গরুর মূত্র থেকে সংগৃহীত হেডস্পেস এক্সট্র্যাক্ট বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ২০ মিলি পাতিত জলে ভরা ৩০ মিলি প্লাস্টিকের কাপ (নোলাটো হার্টিলা) প্রজননের মাধ্যম হিসেবে ব্যবহৃত হয়েছিল এবং খাঁচার বিপরীত কোণায় ২৪ সেমি দূরত্বে রাখা হয়েছিল। ট্রিটমেন্ট কাপগুলিতে প্রতিটি হেডস্পেস এক্সট্র্যাক্টের ১০ মাইক্রোলিটার করে ১:১০ অনুপাতে মিশ্রিত করা হয়েছিল। কন্ট্রোল কাপটি মিশ্রিত করার জন্য সমপরিমাণ পেন্টেন ব্যবহার করা হয়েছিল। অবস্থানের প্রভাব নিয়ন্ত্রণের জন্য প্রতিটি পরীক্ষার মধ্যে ট্রিটমেন্ট এবং কন্ট্রোল কাপগুলি অদলবদল করা হয়েছিল। ZT ৯-১১-এর মধ্যে দশটি রক্তপানকারী স্ত্রী মাছিকে পরীক্ষামূলক খাঁচায় ছাড়া হয়েছিল এবং ২৪ ঘণ্টা পরে কাপের ডিম গণনা করা হয়েছিল। স্পনিং ইনডেক্স গণনার সূত্রটি হলো: (ট্রিটমেন্ট কাপে পাড়া ডিমের সংখ্যা – কন্ট্রোল কাপে পাড়া ডিমের সংখ্যা)/(মোট পাড়া ডিমের সংখ্যা)। প্রতিটি ট্রিটমেন্টের পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল। ৮ বার।
স্ত্রী An.arabiensis-এর গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফিক এবং ইলেকট্রন অ্যান্টেনা প্যাটার্ন ডিটেকশন (GC-EAD) বিশ্লেষণ পূর্বে বর্ণিত [20] পদ্ধতি অনুসারে করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, তাজা হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাস একটি Agilent Technologies 6890 GC (সান্তা ক্লারা, CA, US) ব্যবহার করে পৃথক করা হয়েছিল, যা একটি HP-5 কলাম (30 মি × 0.25 মিমি আইডি, 0.25 μm ফিল্ম পুরুত্ব, Agilent Technologies) দ্বারা সজ্জিত ছিল। এবং পুরোনো মূত্র। হাইড্রোজেনকে মোবাইল ফেজ হিসেবে ব্যবহার করা হয়েছিল, যার গড় রৈখিক প্রবাহের হার ছিল ৪৫ সেমি/সেকেন্ড। প্রতিটি নমুনা (২ মাইক্রোলিটার) স্প্লিটলেস মোডে ৩০ সেকেন্ডের জন্য ইনজেক্ট করা হয়েছিল, যার ইনলেট তাপমাত্রা ছিল ২২৫ °C। GC ওভেনের তাপমাত্রা ৩৫ °C (৩ মিনিট ধরে রাখা) থেকে ৩০০ °C (১০ মিনিট ধরে রাখা) পর্যন্ত ১০ °C/মিনিট হারে প্রোগ্রাম করা হয়েছিল। GC এফ্লুয়েন্ট স্প্লিটারে, ৪ পিএসআই নাইট্রোজেন যোগ করা হয়েছিল এবং ফ্লেম আয়োনাইজেশন ডিটেক্টর ও EAD-এর মধ্যে একটি গার্সটেল 3D/2 লো ডেড ভলিউম ক্রস (গার্সটেল, মুলহাইম, ডিই)-এর মাধ্যমে ১:১ অনুপাতে বিভক্ত করা হয়েছিল। EAD-এর জন্য GC এফ্লুয়েন্ট ক্যাপিলারিটি একটি গার্সটেল ODP-2 ট্রান্সফার লাইনের মধ্য দিয়ে একটি কাচের টিউবে (১০ সেমি × ৮ মিমি) পাঠানো হয়েছিল, যা GC ওভেনের তাপমাত্রার সাথে ৫ °C যোগ করে তাপমাত্রা ট্র্যাক করে। সেখানে এটিকে কার্বন-ফিল্টার করা, আর্দ্র বাতাসের (১.৫ লিটার) সাথে মেশানো হয়েছিল। অ্যান্টেনাটি টিউবের আউটলেট থেকে ০.৫ সেমি দূরে স্থাপন করা হয়েছিল। প্রতিটি মশাকে একটি রেপ্লিকেট হিসাবে ধরা হয়েছিল, এবং পোষক-সন্ধানী মশাগুলির ক্ষেত্রে, প্রতিটি বয়সের মূত্রের নমুনার উপর কমপক্ষে তিনটি রেপ্লিকেট করা হয়েছিল।
একটি সম্মিলিত GC এবং ভর স্পেকট্রোমিটার (GC-MS; 6890 GC এবং 5975 MS; Agilent Technologies) ব্যবহার করে তাজা এবং পুরোনো গরুর মূত্রের হেডস্পেস সংগ্রহে থাকা জৈব-সক্রিয় যৌগ শনাক্ত করা হয়েছে। GC-EAD বিশ্লেষণে অ্যান্টেনার প্রতিক্রিয়া উদ্রেক করার জন্য এটি ব্যবহৃত হয় এবং ৭০ eV-তে ইলেকট্রন ইমপ্যাক্ট আয়োনাইজেশন মোডে পরিচালিত হয়। GC-টি একটি HP-5MS UI-কোটেড ফিউজড সিলিকা ক্যাপিলারি কলাম (৬০ মি × ০.২৫ মিমি অভ্যন্তরীণ ব্যাস, ০.২৫ μm ফিল্মের পুরুত্ব) দ্বারা সজ্জিত ছিল এবং এতে মোবাইল ফেজ হিসাবে হিলিয়াম ব্যবহৃত হয়, যার গড় রৈখিক প্রবাহের হার ছিল ৩৫ সেমি/সেকেন্ড। GC-EAD বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত একই ইনজেক্টর সেটিংস এবং ওভেনের তাপমাত্রা ব্যবহার করে ২ μl নমুনা ইনজেক্ট করা হয়েছিল। কাস্টম লাইব্রেরি এবং NIST14 লাইব্রেরির (Agilent) সাথে তুলনা করে যৌগগুলোকে তাদের রিটেনশন টাইম (কোভাট ইনডেক্স) এবং ভর বর্ণালীর উপর ভিত্তি করে শনাক্ত করা হয়েছিল। শনাক্তকৃত যৌগগুলোকে খাঁটি স্ট্যান্ডার্ড (অতিরিক্ত ফাইল ১: সারণি S2) ইনজেক্ট করে নিশ্চিত করা হয়েছিল। পরিমাণ নির্ধারণের জন্য, হেপ্টাইল অ্যাসিটেট (১০ ন্যানোগ্রাম, ৯৯.৮% রাসায়নিক বিশুদ্ধতা, অলড্রিচ) একটি বাহ্যিক স্ট্যান্ডার্ড হিসাবে ইনজেক্ট করা হয়েছিল।
উপরে উল্লিখিত একই অলফ্যাক্টোমিটার এবং প্রোটোকল ব্যবহার করে, তাজা এবং পুরোনো মূত্রে শনাক্তকৃত জৈব-সক্রিয় যৌগ দ্বারা গঠিত একটি কৃত্রিম গন্ধ মিশ্রণের কার্যকারিতা মূল্যায়ন করা হয়েছে, যা পোষক-সন্ধানী এবং রক্তচোষা Ans.arabiensis-কে আকর্ষণ করার জন্য ব্যবহৃত হয়। কৃত্রিম মিশ্রণগুলো তাজা, ২৪-ঘণ্টা, ৪৮-ঘণ্টা, ৭২-ঘণ্টা এবং ১৬৮-ঘণ্টা পুরোনো মূত্রের মিশ্র হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাসের যৌগগুলোর গঠন এবং অনুপাতকে অনুকরণ করে (চিত্র ৫ডি-জি; অতিরিক্ত ফাইল ১: সারণি এস২)। বিশ্লেষণের জন্য, পোষক এবং রক্তচোষা মশার প্রতি আকর্ষণ মূল্যায়নের উদ্দেশ্যে, সম্পূর্ণ কৃত্রিম মিশ্রণের ১:১০০ লঘুকরণের ১০ μl ব্যবহার করা হয়, যার সামগ্রিক নিঃসরণের হার প্রায় ১৪০-২৪০০ ng h-1 পর্যন্ত থাকে। এরপর, সম্পূর্ণ মিশ্রণের উপর পরীক্ষাটি করা হয়, যেখান থেকে সম্পূর্ণ মিশ্রণের একক যৌগের বিয়োগমূলক মিশ্রণগুলো অপসারণ করা হয়। পোষক এবং রক্তচোষা Ans.Arab-এর প্রতিক্রিয়া বনাম কৃত্রিম এবং বিয়োগমূলক মিশ্রণের প্রতিক্রিয়া নমিনাল লজিস্টিক রিগ্রেশন ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। অড রেশিওর জন্য জোড়ায় জোড়ায় তুলনার মাধ্যমে (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.)।
গরুর মূত্র ম্যালেরিয়ার মশার জন্য পোষক আবাসস্থলের সংকেত হিসেবে কাজ করতে পারে কিনা তা মূল্যায়ন করার জন্য, উপরে বর্ণিত পদ্ধতিতে সংগৃহীত তাজা ও পুরোনো গরুর মূত্র এবং জল জালযুক্ত ৩ লিটারের বালতিতে (১০০ মিলি) রাখা হয়েছিল এবং পোষক টোপ ফাঁদে (BG-HDT সংস্করণ; BioGents, Regensburg, DE) স্থাপন করা হয়েছিল। স্থায়ী প্রজনন ক্ষেত্র এবং গ্রামগুলিতে, গবাদি পশুবিহীন চারণভূমিতে দশটি ফাঁদ ৫০ মিটার দূরত্বে স্থাপন করা হয়েছিল, যা গ্রাম্য জনপদ (সিলায়, ইথিওপিয়া, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) থেকে ৪০০ মিটার দূরে অবস্থিত। পোষকের উপস্থিতি অনুকরণ করার জন্য পাঁচটি ফাঁদ গরম করা হয়েছিল, এবং বাকি পাঁচটি ফাঁদ গরম করা হয়নি। প্রতিটি পরীক্ষামূলক স্থান মোট পাঁচ রাতের জন্য প্রতি রাতে পরিবর্তন করা হয়েছিল। বিভিন্ন বয়সের মূত্র দিয়ে টোপ দেওয়া ফাঁদে ধরা পড়া মশার সংখ্যা একটি বিটা বাইনোমিয়াল ডিস্ট্রিবিউশন সহ লজিস্টিক রিগ্রেশন (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) ব্যবহার করে তুলনা করা হয়েছিল।
ইথিওপিয়ার ওরোমিয়া অঞ্চলের মাকি শহরের নিকটবর্তী একটি ম্যালেরিয়া-প্রবণ গ্রামে (৮° ১১′ ০৮″ উত্তর, ৩৮° ৮১′ ৭০″ পূর্ব; চিত্র ৬ক)। গবেষণাটি বার্ষিক অভ্যন্তরীণ কীটনাশক স্প্রে করার আগে, আগস্টের মাঝামাঝি থেকে সেপ্টেম্বরের মাঝামাঝি পর্যন্ত একটি দীর্ঘ বর্ষাকালে পরিচালিত হয়েছিল। গবেষণার জন্য গ্রামের উপকণ্ঠে অবস্থিত পাঁচ জোড়া বাড়ি (২০-৫০ মিটার দূরত্বে) নির্বাচন করা হয়েছিল (চিত্র ৬ক)। বাড়িগুলো নির্বাচনের জন্য ব্যবহৃত মানদণ্ডগুলো ছিল: বাড়িতে কোনো পশু প্রবেশ করতে দেওয়া হবে না, বাড়ির ভেতরে রান্না (কাঠ বা কয়লা ব্যবহার করে) করার অনুমতি নেই (অন্তত পরীক্ষাকালীন সময়ে), এবং বাড়িগুলোতে সর্বোচ্চ দুজন বাসিন্দা থাকবে, যারা কীটনাশকমুক্ত ঘরে ঘুমাবে। শোধিত মশারির নিচে। ওয়ার্ল্ড মেডিকেল অ্যাসোসিয়েশন ডিক্লারেশন অফ হেলসিঙ্কি দ্বারা প্রতিষ্ঠিত নির্দেশিকা অনুসারে, আদ্দিস আবাবা বিশ্ববিদ্যালয়ের প্রাকৃতিক বিজ্ঞান অনুষদের (সিএনএস-আইআরবি) প্রাতিষ্ঠানিক গবেষণা নীতি পর্যালোচনা বোর্ড (আইআরবি/০২২/২০১৬) কর্তৃক নৈতিক অনুমোদন প্রদান করা হয়েছে। স্বাস্থ্য সম্প্রসারণ কর্মীদের সহায়তায় প্রতিটি পরিবারের প্রধানের কাছ থেকে সম্মতি নেওয়া হয়েছিল। সম্পূর্ণ প্রক্রিয়াটি জেলা এবং ওয়ার্ড ('কেবেলে') পর্যায়ে স্থানীয় প্রশাসন দ্বারা অনুমোদিত। পরীক্ষামূলক নকশাটি একটি ২ × ২ ল্যাটিন স্কোয়ার নকশা অনুসরণ করে, যেখানে প্রথম রাতে কৃত্রিম মিশ্রণ এবং নিয়ন্ত্রকগুলিকে জোড়ায় জোড়ায় ঘরগুলিতে স্থাপন করা হয়েছিল এবং পরবর্তী পরীক্ষামূলক রাতে ঘরগুলির মধ্যে অদলবদল করা হয়েছিল। এই প্রক্রিয়াটি দশবার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল। উপরন্তু, নির্বাচিত ঘরগুলিতে মশার কার্যকলাপ অনুমান করার জন্য, মাঠ পরীক্ষার শুরুতে, মাঝে এবং শেষে দিনের একই সময়ে পরপর পাঁচ রাত সিডিসি ফাঁদগুলি চালানো হয়েছিল।
ছয়টি জৈব-সক্রিয় যৌগ ধারণকারী একটি সংশ্লেষিত মিশ্রণ হেপ্টেনে (97.0% দ্রাবক GC গ্রেড, সিগমা অলড্রিচ) দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং একটি তুলার সলতে ডিসপেনসার ব্যবহার করে 140 ng h-1 হারে নির্গত করা হয়েছিল [20]। সলতে ডিসপেনসারটি 12 ঘন্টার পরীক্ষা জুড়ে সমস্ত যৌগগুলিকে স্থির অনুপাতে নির্গত হতে সাহায্য করেছিল। হেপ্টেনকে নিয়ন্ত্রক হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। শিশিটি সেন্টার ফর ডিজিজ কন্ট্রোল অ্যান্ড প্রিভেনশন (CDC) লাইট ট্র্যাপের (জন ডব্লিউ. হক কোম্পানি, গেইনসভিল, FL, US; চিত্র 6A) প্রবেশ পথের পাশে ঝুলিয়ে রাখা হয়েছিল। ফাঁদগুলি মাটি থেকে 0.8 – 1 মিটার উপরে, বিছানার পায়ের কাছে ঝুলানো হয়েছিল, এবং একজন স্বেচ্ছাসেবক একটি অপরিশোধিত মশারির নিচে ঘুমিয়েছিলেন এবং 18:00 থেকে 06:30 এর মধ্যে এটি পরিচালনা করা হয়েছিল। লিঙ্গ এবং শারীরবৃত্তীয় অবস্থা (অভুক্ত, খাওয়ানো, অর্ধ-গর্ভবতী এবং গর্ভবতী [21]) অনুসারে ধরা পড়া মশাগুলিকে পরবর্তীতে পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (PCR) বিশ্লেষণের মাধ্যমে স্ক্রিনিং করা হয়েছিল যাতে রূপগতভাবে A. gambiae sl. Members হিসাবে চিহ্নিত প্রজাতি শনাক্ত করা যায়। জটিল [23] এর। মাঠ গবেষণায়, জোড়া ঘরের ফাঁদ পাতা একটি নমিনাল লজিস্টিক ফিট মডেল ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল, যেখানে আকর্ষণ ছিল নির্ভরশীল চলক এবং ট্রিটমেন্ট (কৃত্রিম মিশ্রণ বনাম নিয়ন্ত্রণ) ছিল স্থির প্রভাব (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.)। এখানে, আমরা লাইকলিহুড রেশিও টেস্ট থেকে প্রাপ্ত χ2 এবং p-মান রিপোর্ট করছি।
এটি নিরাপদ কিনা তা মূল্যায়ন করুন। পোষক-সন্ধানী এবং রক্ত-চোষা স্ত্রী মাকড়ের উপর ৪ দিনব্যাপী (dpe) খাদ্যগ্রহণ পরীক্ষার সময়, arabiensis সরাসরি খাদ্যগ্রহণের ৪৮ ঘণ্টার মধ্যে মূত্র, যা নাইট্রোজেনের প্রধান উৎস, অর্থাৎ ইউরিয়া, গ্রহণ করতে সক্ষম হয়েছিল (চিত্র ১ক)। পোষক-সন্ধানী এবং রক্তচোষা উভয় স্ত্রী মাকড়ই অন্য যেকোনো খাদ্য বা জলের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি সুক্রোজ শোষণ করেছিল (যথাক্রমে F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 এবং F(5,299) = 56.00, p < 0.0001; চিত্র ১খ,গ)। অধিকন্তু, পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মাকড়গুলো ১৬৮ ঘণ্টার মূত্রের তুলনায় ৭২ ঘণ্টার মূত্র কম গ্রহণ করেছিল (চিত্র ১খ)। যখন ইউরিয়াযুক্ত খাদ্য দেওয়া হয়েছিল, তখন পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মাকড়গুলো অন্য সমস্ত ঘনত্ব এবং জলের তুলনায় ২.৬৯ mM ঘনত্বে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি পরিমাণে ইউরিয়া শোষণ করেছিল, যদিও তা ১০% ঘনত্বের থেকে আলাদা করা যায়নি। সুক্রোজ (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; চিত্র 1D)। এটি রক্ত-খাওয়া স্ত্রী মাকড়সাদের প্রতিক্রিয়ার বিপরীত ছিল, যারা সাধারণত পানির চেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ইউরিয়া-যুক্ত খাদ্য শোষণ করত, যদিও তা ১০% সুক্রোজের চেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; চিত্র 1E)। অধিকন্তু, দুটি শারীরবৃত্তীয় অবস্থার মধ্যে তুলনা করার সময়, রক্ত-অপসারিত স্ত্রী মাকড়সারা সর্বনিম্ন ঘনত্বে পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মাকড়সাদের চেয়ে বেশি ইউরিয়া শোষণ করেছিল, এবং এই স্ত্রী মাকড়সারা উচ্চতর ঘনত্বে একই পরিমাণ ইউরিয়া শোষণ করেছিল (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; চিত্র 1F, G)। যদিও ইউরিয়া-যুক্ত খাদ্য থেকে গ্রহণ সর্বোত্তম মান বলে মনে হয়েছিল (চিত্র 1D,E), উভয় শারীরবৃত্তীয় অবস্থার স্ত্রী মাকড়সারাই সক্ষম ছিল ইউরিয়ার ঘনত্বের সম্পূর্ণ পরিসর জুড়ে শোষিত ইউরিয়ার পরিমাণকে লগ-রৈখিক পদ্ধতিতে নিয়ন্ত্রণ করে (চিত্র ১এফ, জি)। একইভাবে, মশাও শোষিত মূত্রের পরিমাণ নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে তাদের নাইট্রোজেন গ্রহণ নিয়ন্ত্রণ করে বলে মনে হয়, কারণ মূত্রে নাইট্রোজেনের পরিমাণ শোষিত পরিমাণে প্রতিফলিত হয় (চিত্র ১বি, সি এবং বি ইনসেট)।
পোষক-সন্ধানী এবং রক্তচোষা মশার বেঁচে থাকার উপর মূত্র এবং ইউরিয়ার প্রভাব মূল্যায়ন করার জন্য, স্ত্রী মশাদের চার বয়সের (সদ্য মূত্র ত্যাগের পর, ২৪ ঘণ্টা, ৭২ ঘণ্টা এবং ১৬৮ ঘণ্টা) মূত্র এবং বিভিন্ন ঘনত্বের ইউরিয়া খাওয়ানো হয়েছিল। এছাড়াও, নিয়ন্ত্রক হিসেবে পাতিত জল এবং ১০% সুক্রোজ দেওয়া হয়েছিল (চিত্র ২ক)। এই বেঁচে থাকার বিশ্লেষণ থেকে দেখা যায় যে, পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মশাদের (মূত্র: χ² = ১০৮.৫, df = ৫, p < ০.০০০১; ইউরিয়া: χ² = ১২২.৮, df = ৫, p < ০.০০০১; চিত্র ২খ, গ) এবং রক্তচোষা স্ত্রী মশাদের (মূত্র: χ² = ৯৩.০, df = ৫, p < ০.০০০১; ইউরিয়া: χ² = ১৩৭.৯, df = ৫, p < ০.০০০১) সামগ্রিক বেঁচে থাকার উপর খাদ্যের একটি উল্লেখযোগ্য প্রভাব ছিল। সমস্ত পরীক্ষায়, সুক্রোজযুক্ত খাবার খাওয়ানো স্ত্রী মাকড়সার তুলনায় মূত্র, ইউরিয়া এবং জলের খাবার খাওয়ানো স্ত্রী মাকড়সাগুলির বেঁচে থাকার হার উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (চিত্র ২বি-ই)। তাজা এবং বাসি মূত্র খাওয়ানো পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মাকড়সাগুলির বেঁচে থাকার হার ভিন্ন ছিল, যার মধ্যে ৭২-ঘণ্টার বাসি মূত্র খাওয়ানো মাকড়সাগুলির বেঁচে থাকার সম্ভাবনা ছিল সর্বনিম্ন (পি = ০.০১৬) (চিত্র ২বি)। অধিকন্তু, ১৩৫ mM ইউরিয়া খাওয়ানো পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মাকড়সাগুলি জল-নিয়ন্ত্রিত মাকড়সাগুলির চেয়ে বেশি দিন বেঁচে ছিল (পি < ০.০৪) (চিত্র ২সি)। জলের তুলনায়, তাজা মূত্র এবং ২৪-ঘণ্টার মূত্র খাওয়ানো স্ত্রী মাকড়সাগুলি বেশি দিন বেঁচে ছিল (যথাক্রমে পি = ০.০০১ এবং পি = ০.০১২; চিত্র ২ডি), যেখানে ৭২-ঘণ্টার মূত্র খাওয়ানো স্ত্রী মাকড়সাগুলি তাজা মূত্র এবং ২৪-ঘণ্টার বাসি মূত্র খাওয়ানো মাকড়সাগুলির চেয়ে বেশি দিন বেঁচে ছিল (যথাক্রমে পি < ০.০০০১ এবং পি = ০.০১৩; চিত্র ২ডি)। চিত্র ২ডি)। ১৩৫ mM ইউরিয়া খাওয়ানোর পর, রক্ত-খাওয়া স্ত্রী পোকাগুলো ইউরিয়া ও পানির অন্য সব ঘনত্বের চেয়ে বেশি দিন বেঁচে ছিল (p < ০.০১৩; চিত্র ২ই)।
গরুর মূত্র এবং ইউরিয়া খেয়ে পোষক ও রক্তচোষা স্ত্রী অ্যানোফিলিস অ্যারাবিনিস মশার বেঁচে থাকা। জৈব পরীক্ষায় (A), স্ত্রী মশাদের তাজা ও পুরোনো গরুর মূত্র, বিভিন্ন ঘনত্বের ইউরিয়া, সুক্রোজ (১০%) এবং পাতিত জল (H2O) দিয়ে তৈরি খাবার দেওয়া হয়েছিল। পোষক-সন্ধানী (B, C) এবং রক্তচোষা (D, E) মশাদের বেঁচে থাকার হার প্রতি ১২ ঘণ্টা অন্তর রেকর্ড করা হয়েছিল, যতক্ষণ না মূত্র (B, D) ও ইউরিয়া (C, E) খাওয়া সমস্ত স্ত্রী মশা এবং নিয়ন্ত্রক দল, অর্থাৎ সুক্রোজ ও জল খাওয়া মশাগুলো মারা যায়।
২৪-ঘণ্টা সময়কালে ফ্লাইট মিল পরীক্ষায় নির্ধারিত মোট দূরত্ব এবং চক্করের সংখ্যা পোষক-সন্ধানী এবং রক্তচোষা মশার মধ্যে ভিন্ন ছিল, যেখানে রক্তচোষা মশাগুলো সামগ্রিকভাবে কম উড্ডয়ন কার্যকলাপ দেখিয়েছে (চিত্র ৩)। যে পোষক-সন্ধানী মশাগুলোকে তাজা ও পুরোনো মূত্র অথবা সুক্রোজ ও জল সরবরাহ করা হয়েছিল, তারা স্বতন্ত্র উড্ডয়ন ধরণ দেখিয়েছে (চিত্র ৩), যেখানে তাজা মূত্র পানকারী স্ত্রী মশাগুলো ভোরের দিকে বেশি সক্রিয় ছিল, অন্যদিকে ২৪- এবং ১৬৮-ঘণ্টা পুরোনো মূত্র পানকারী মশাগুলো ভিন্ন উড্ডয়ন ধরণ প্রদর্শন করেছে এবং প্রধানত দিবাচর ছিল। যে স্ত্রী মশাগুলো সুক্রোজ বা ৭২-ঘণ্টা পুরোনো মূত্র সরবরাহ করেছিল, তারা ২৪-ঘণ্টা সময়কাল জুড়ে সক্রিয় ছিল, অন্যদিকে যে স্ত্রী মশাগুলো জল সরবরাহ করেছিল, তারা মধ্যবর্তী সময়ে বেশি সক্রিয় ছিল। সুক্রোজ পানকারী মশাগুলো গভীর রাতে এবং খুব ভোরে সর্বোচ্চ মাত্রার কার্যকলাপ প্রদর্শন করেছে, অন্যদিকে যারা ৭২-ঘণ্টা পুরোনো মূত্র পান করেছিল, তাদের কার্যকলাপ ২৪-ঘণ্টা ধরে ক্রমাগত হ্রাস পেয়েছে (চিত্র ৩)।
গরুর মূত্র এবং ইউরিয়া খেয়ে জীবনধারণকারী শিকারি রক্তচোষা স্ত্রী অ্যানোফিলিস অ্যারাবিনিস মশার উড্ডয়ন কর্মক্ষমতা। ফ্লাইট মিল পরীক্ষায়, তাজা ও পুরোনো গরুর মূত্র, বিভিন্ন ঘনত্বের ইউরিয়া, সুক্রোজ (১০%), এবং পাতিত জল (H2O) খাওয়ানো স্ত্রী মশাগুলোকে অনুভূমিক, অবাধে ঘূর্ণনশীল বাহুর (উপরে) সাথে বেঁধে রাখা হয়েছিল। পোষক-সন্ধানী (বাম) এবং রক্তচোষা (ডান) স্ত্রী মশাগুলোর জন্য, ২৪-ঘণ্টার সময়কালে প্রতিটি খাদ্যের জন্য মোট দূরত্ব এবং প্রতি ঘণ্টায় উড্ডয়নের সংখ্যা রেকর্ড করা হয়েছিল (গাঢ়: ধূসর; হালকা: সাদা)। গড় দূরত্ব এবং গড় উড্ডয়ন সংখ্যা সার্কাডিয়ান কার্যকলাপ গ্রাফের ডানদিকে দেখানো হয়েছে। ত্রুটি দণ্ডগুলো গড়ের আদর্শ ত্রুটি নির্দেশ করে। পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ পাঠ্য দেখুন।
সাধারণভাবে, পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মশাগুলোর সামগ্রিক উড্ডয়ন কার্যকলাপ ২৪-ঘণ্টার সময়কালে উড্ডয়ন দূরত্বের অনুরূপ একটি ধরণ অনুসরণ করে। গৃহীত খাদ্যের দ্বারা গড় উড্ডয়ন দূরত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত হয়েছিল (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), এবং ৭২ ঘণ্টার মূত্র গ্রহণকারী পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মশাগুলো অন্য সব খাদ্যের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি দূরত্ব উড়েছিল (p < 0.0001), এবং সুক্রোজ-খাওয়ানো মশাগুলো তাজা (p = 0.022) এবং ২৪-ঘণ্টা-পুরোনো মূত্র (p = 0.022)-খাওয়ানো মশাগুলোর চেয়ে বেশি দূরত্ব উড়েছিল। মূত্র-খাদ্য দ্বারা বর্ণিত উড্ডয়ন কার্যকলাপের ধরণটির বিপরীতে, ইউরিয়া-খাওয়ানো পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মশাগুলো ২৪-ঘণ্টা সময়কাল ধরে অবিরাম উড্ডয়ন কার্যকলাপ প্রদর্শন করেছিল, যা অন্ধকার পর্বের দ্বিতীয়ার্ধে সর্বোচ্চ পর্যায়ে পৌঁছেছিল (চিত্র ৩)। যদিও কার্যকলাপের ধরণগুলো একই রকম ছিল, ইউরিয়া-খাওয়ানো পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মশাগুলো শোষিত ঘনত্বের উপর নির্ভর করে গড় উড্ডয়ন দূরত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছিল (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001)। ১৩৮) = ১৩১০.৯১, পি < ০.০০০১)। যেকোনো ঘনত্বের ইউরিয়া খাওয়ানো পোষক-সন্ধানী স্ত্রী পোকাগুলো, পানি বা সুক্রোজ খাওয়ানো স্ত্রী পোকাগুলোর চেয়ে বেশি সময় ধরে উড়েছিল (পি < ০.০৩)।
সমস্ত খাদ্যের ক্ষেত্রেই রক্তচোষা মশার সামগ্রিক উড্ডয়ন কার্যকলাপ ২৪ ঘন্টা ধরে স্থিতিশীল ও অবিচ্ছিন্ন ছিল, তবে জল পানকারী স্ত্রী মশা এবং তাজা ও ২৪ ঘন্টা পুরোনো খাবার খাওয়া স্ত্রী মশার ক্ষেত্রে অন্ধকার পর্বের দ্বিতীয়ার্ধে মূত্রের কার্যকলাপ বৃদ্ধি পেয়েছিল (চিত্র ৩)। যদিও মূত্রযুক্ত খাদ্য রক্ত ​​পানকারী স্ত্রী মশার গড় উড্ডয়ন দূরত্বকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করেছিল (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), ইউরিয়াযুক্ত খাদ্য তা করেনি (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24)। অন্যান্য মূত্র এবং নিয়ন্ত্রক খাদ্যের ক্ষেত্রেও একই ফলাফল দেখা গেছে (তাজা, p = 0.0091; ৭২ ঘন্টা, p = 0.0022; ১৬৮ ঘন্টা, p = 0.001; সুক্রোজ, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036)।
ডিম পাড়ার বায়োঅ্যাসে (চিত্র ৪ক)-এর মাধ্যমে প্রজনন সংক্রান্ত প্যারামিটারগুলির উপর মূত্র এবং ইউরিয়া খাওয়ানোর প্রভাব মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং প্রতিটি স্ত্রী মাকড়সার পাড়া ডিমের সংখ্যা, ডিমের আকার এবং সদ্য ফোটা প্রথম ইনস্টার লার্ভার উপর ভিত্তি করে তা তদন্ত করা হয়েছিল। মূত্র-খাওয়ানো আরব স্ত্রী মাকড়সাদের পাড়া ডিমের সংখ্যা খাদ্যাভ্যাসের উপর নির্ভর করে ভিন্ন ছিল (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; চিত্র ৪খ)। যে স্ত্রী মাকড়সাদের ২৪-ঘণ্টা মূত্র ও রক্তের খাবার দেওয়া হয়েছিল, তারা অন্যান্য মূত্র-ভিত্তিক খাবার খাওয়া মাকড়সাদের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ডিম পেড়েছিল এবং তাদের পাড়া ডিমের সংখ্যা সুক্রোজ-খাওয়ানো মাকড়সাদের ডিমের সংখ্যার অনুরূপ ছিল (চিত্র ৪খ)। একইভাবে, মূত্র-খাওয়ানো স্ত্রী মাকড়সাদের পাড়া ডিমের আকার খাদ্যাভ্যাসের উপর নির্ভর করে ভিন্ন ছিল (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), যেখানে ২৪-ঘণ্টা মূত্র এবং সুক্রোজ-খাওয়ানো স্ত্রী মাকড়সারা জল-খাওয়ানো মাকড়সাদের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বড় ডিম পাড়ে, অন্যদিকে ১৬৮-ঘণ্টা মূত্র-খাওয়ানো স্ত্রী মাকড়সাদের ডিম উল্লেখযোগ্যভাবে ছোট ছিল। (চিত্র ৪সি)। এছাড়াও, মূত্রভিত্তিক খাদ্য লার্ভার আকারকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করে (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), যেখানে পানি-খাওয়ানো এবং ১৬৮-ঘণ্টা মূত্র-খাওয়ানো স্ত্রী লার্ভার ডিমের তুলনায় ২৪- এবং ৭২-ঘণ্টা-বয়সী মূত্র-খাওয়ানো স্ত্রী লার্ভার ডিম থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে বড় লার্ভা বেরিয়ে আসে (চিত্র ৪ডি)।
গরুর মূত্র এবং ইউরিয়া খেয়ে বেঁচে থাকা স্ত্রী অ্যানোফিলিস অ্যারাবিনিস মশার প্রজনন ক্ষমতা। বায়োঅ্যাসেতে রাখার এবং ডিম পাড়ার সাবস্ট্রেট সংগ্রহের আগে, রক্ত-খাওয়ানো স্ত্রী মশাগুলোকে ৪৮ ঘণ্টা ধরে তাজা ও পুরোনো গরুর মূত্র, বিভিন্ন ঘনত্বের ইউরিয়া, সুক্রোজ (১০%), এবং পাতিত জল (H2O) দিয়ে তৈরি খাবার খাওয়ানো হয়েছিল। ডিমের সংখ্যা (B, E), ডিমের আকার (C, F) এবং লার্ভার আকার (D, G) প্রদত্ত খাদ্যের (গরুর মূত্র: BD; ইউরিয়া: EG) দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত হয়েছিল। ভিন্ন ভিন্ন অক্ষরের নাম ব্যবহার করে পরিমাপ করা প্রতিটি প্যারামিটারের গড় মান একে অপরের থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন ছিল (টুকির পোস্ট হক বিশ্লেষণ ব্যবহার করে একমুখী অ্যানোভা; p < ০.০৫)। এরর বারগুলো গড়ের স্ট্যান্ডার্ড এরর নির্দেশ করে।
মূত্রের প্রধান নাইট্রোজেনঘটিত উপাদান হিসেবে ইউরিয়া, যখন রক্তপানকারী স্ত্রী পোকাদের খাদ্য হিসেবে সরবরাহ করা হয়, তখন তা সমস্ত গবেষণায় প্রজনন সংক্রান্ত প্যারামিটারগুলিকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করে। রক্তপানের পর, ইউরিয়া খাওয়ানো স্ত্রী পোকাদের দ্বারা পাড়া ডিমের সংখ্যা ইউরিয়ার ঘনত্বের উপর নির্ভর করে (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), যেখানে 134 µM থেকে 1.34 mM এর মধ্যে ইউরিয়ার ঘনত্বে খাওয়ানো স্ত্রী পোকারা বেশি ডিম পাড়ে (চিত্র 4E)। 134 µM বা তার বেশি ঘনত্বের ইউরিয়া খাওয়ানো স্ত্রী পোকারা জল খাওয়ানো স্ত্রী পোকাদের চেয়ে বড় ডিম পাড়ে (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; চিত্র 4F), এবং লার্ভার আকার, যদিও মায়ের মধ্যে ইউরিয়ার একই ঘনত্ব দ্বারা প্রভাবিত হয় (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001), আরও পরিবর্তনশীল ছিল (চিত্র 4G)।
আশ্রয়প্রার্থী গরুর মূত্রের হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাসের প্রতি সামগ্রিক আকর্ষণ। গ্লাস টিউব অলফ্যাক্টোমিটারে (চিত্র ৫ক) মূল্যায়ন করা অ্যারাবিয়েনসিস মশার আকর্ষণ মূত্রের বয়সের দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত হয়েছিল (χ² = ১৫.৯, df = ৪, p = ০.০০৩২; চিত্র ৫খ)। পোস্ট হক বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে, তাজা মূত্রের গন্ধ (p = ০.১৩; চিত্র ৫খ) ব্যতীত, ২৪ ঘণ্টা পুরোনো বাসি মূত্রের গন্ধ অন্যান্য সমস্ত ট্রিটমেন্টের (৭২ ঘণ্টা: p = ০.০০৬০, ১৬৮ ঘণ্টা: p = ০.০১২, পেন্টেন: p = ০.০০০৭০) তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি আকর্ষণ সৃষ্টি করেছিল। যদিও মূত্রের গন্ধের প্রতি রক্তচোষা মশার সামগ্রিক আকর্ষণ উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন ছিল না (χ² = ৮.৭৮, df = ৪, p = ০.০৬৭; চিত্র ৫গ), এই স্ত্রী মশাগুলোকে ৭২ ঘণ্টা পুরোনো মূত্রের তুলনায় হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাসের প্রতি উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি আকর্ষণীয় বলে মনে করা হয়েছিল। কন্ট্রোলের তুলনায় প্রস্রাবে (পি = ০.০০৬৬; চিত্র ৫সি)।
পোষক এবং রক্তচোষা অ্যানোফিলিস অ্যারাবিয়ানাসের সন্ধানে প্রাকৃতিক এবং কৃত্রিম গোমূত্রের গন্ধের প্রতি আচরণগত প্রতিক্রিয়া। কাচের নল অলফ্যাক্টোমিটারের নকশাচিত্র (A)। পোষক (B) এবং রক্তচোষা (C) মশার প্রতি তাজা এবং পুরোনো গোমূত্র থেকে প্রাপ্ত হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাসের আকর্ষণ। লর্ড অ্যানের শুঁড়ের প্রতিক্রিয়া খুঁজুন। তাজা (D), ২৪-ঘণ্টা (E), ৭২-ঘণ্টা (F), এবং ১৬৮-ঘণ্টা (G) পুরোনো গোমূত্র থেকে পৃথক করা হেডস্পেস নির্যাস দেখানো হয়েছে। ইলেকট্রন অ্যান্টেনা ডিটেকশন (EAD) ট্রেসগুলি গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফ থেকে নির্গত এবং ফ্লেম আয়োনাইজেশন ডিটেক্টর (FID) দ্বারা শনাক্তকৃত হেডস্পেসের জৈব-সক্রিয় যৌগগুলির প্রতিক্রিয়ায় ভোল্টেজের পরিবর্তন দেখায়। স্কেল বারটি প্রতিক্রিয়ার বিস্তার (mV) বনাম ধারণকাল (s) উপস্থাপন করে। জৈব-সক্রিয় যৌগগুলির বৈশিষ্ট্য এবং নির্গমনের হার (µg h-1) দেখানো হয়েছে। একটি একক তারকাচিহ্ন (*) একটি সামঞ্জস্যপূর্ণ কম-বিস্তারের প্রতিক্রিয়া নির্দেশ করে। দুটি তারকাচিহ্ন (**) পুনরুৎপাদনযোগ্যতার অভাব নির্দেশ করে। প্রতিক্রিয়া। পোষক (H) এবং রক্তচোষা (I) An.arabiensis-এর তাজা ও পুরোনো গোমূত্রের গন্ধের কৃত্রিম মিশ্রণের প্রতি ভিন্ন ভিন্ন আকর্ষণ রয়েছে। বিভিন্ন অক্ষরের নামের প্রতি আকৃষ্ট মশার গড় অনুপাত একে অপরের থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন ছিল (টুকির পোস্ট হক বিশ্লেষণ ব্যবহার করে একমুখী অ্যানোভা; p < 0.05)। ত্রুটি দণ্ডগুলি স্কেলের আদর্শ ত্রুটি নির্দেশ করে।
প্রজননকালে, রক্তপানের ৭২ ঘণ্টা এবং ১২০ ঘণ্টা পরে, স্ত্রী Ann.arabiensis মাছ পেন্টেন কন্ট্রোলের তুলনায় তাজা এবং পুরোনো গরুর মূত্রের হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাসের প্রতি কোনো পছন্দ দেখায়নি (χ2 = ৩.০৭, p > ০.০৫; অতিরিক্ত ফাইল ১: চিত্র S1)।
স্ত্রী Ann.arabiensis-এর ক্ষেত্রে, GC-EAD এবং GC-MS বিশ্লেষণে যথাক্রমে আট, ছয়, তিন এবং তিনটি জৈব-সক্রিয় যৌগ শনাক্ত করা হয়েছে (চিত্র 5D-G)। যদিও তড়িৎ-শারীরবৃত্তীয় প্রতিক্রিয়া সৃষ্টিকারী যৌগের সংখ্যায় পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়েছিল, এই যৌগগুলির বেশিরভাগই তাজা এবং পুরোনো মূত্র থেকে সংগৃহীত প্রতিটি হেডস্পেস উদ্বায়ী নির্যাসে উপস্থিত ছিল। অতএব, প্রতিটি নির্যাসের জন্য, শুধুমাত্র সেই যৌগগুলিকেই পরবর্তী বিশ্লেষণে অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছিল যেগুলি থ্রেশহোল্ডের উপরে স্ত্রী মৌমাছির অ্যান্টেনা থেকে শারীরবৃত্তীয় প্রতিক্রিয়া তৈরি করেছিল।
হেডস্পেস সংগ্রহে জৈব-সক্রিয় যৌগসমূহের মোট উদ্বায়ী নিঃসরণের হার তাজা মূত্রে ২৯ µg h-1 থেকে ১৬৮ ঘণ্টা পুরোনো মূত্রে ২৪২ µg h-1 পর্যন্ত বৃদ্ধি পেয়েছে, যার প্রধান কারণ হলো পি-ক্রেসল, এম-ফর্মালডিহাইড এবং ফেনলের বৃদ্ধি। এর বিপরীতে, ২-সাইক্লোহেক্সেন-১-ওন এবং ডেকানাল-এর মতো অন্যান্য যৌগের নিঃসরণের হার মূত্রের বয়স বাড়ার সাথে সাথে হ্রাস পেয়েছে, যা ক্রোমাটোগ্রামে (চিত্র ৫ডি-জি বাম প্যানেল) সংকেতের তীব্রতা (প্রাচুর্য)-এর পর্যবেক্ষণকৃত হ্রাস এবং এই যৌগগুলির প্রতি শারীরবৃত্তীয় প্রতিক্রিয়ার (চিত্র ৫ডি-জি ডান প্যানেল) সাথে সম্পর্কযুক্ত।
সামগ্রিকভাবে, কৃত্রিম মিশ্রণটিতে তাজা এবং পুরোনো মূত্রের হেডস্পেসের উদ্বায়ী নির্যাসে শনাক্তকৃত জৈব-সক্রিয় যৌগগুলির প্রাকৃতিক অনুপাতের অনুরূপ ছিল (চিত্র ৫ডি-জি) এবং এটি পোষক (χ2 = ৮.১৫, df = ৪, p = ০.০৮৩; চিত্র ৫এইচ) বা রক্তচোষা মশার (χ2 = ৪.৯১, df = ৪, p = ০.৩০; চিত্র ৫আই) সন্ধানে উল্লেখযোগ্য আকর্ষণ তৈরি করতে পারেনি। তবে, ট্রিটমেন্টগুলির মধ্যে পোস্ট হক জোড়াভিত্তিক তুলনা দেখিয়েছে যে, পেন্টেন কন্ট্রোলের তুলনায় পোষক-সন্ধানী মশাগুলি ২৪-ঘণ্টা পুরোনো মূত্রের কৃত্রিম মিশ্রণটির প্রতি উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি আকৃষ্ট হয়েছিল (p = ০.০০৮৬; চিত্র ৫এইচ)।
২৪-ঘণ্টা-পুরোনো মূত্রের কৃত্রিম মিশ্রণে স্বতন্ত্র উপাদানগুলোর ভূমিকা মূল্যায়ন করার জন্য, Y-টিউব পরীক্ষায় সম্পূর্ণ মিশ্রণের বিপরীতে ছয়টি বিয়োজিত মিশ্রণের মূল্যায়ন করা হয়েছিল, যেখান থেকে স্বতন্ত্র যৌগগুলো অপসারণ করা হয়েছিল। পোষক-সন্ধানী মশার ক্ষেত্রে, সম্পূর্ণ মিশ্রণ থেকে স্বতন্ত্র যৌগগুলো বিয়োজিত করার ফলে তাদের আচরণগত প্রতিক্রিয়ার উপর একটি উল্লেখযোগ্য প্রভাব দেখা যায় (χ2 = ১৯.৬৩, df = ৬, p = ০.০০৩২; অতিরিক্ত ফাইল ১: চিত্র S2A), এবং সমস্ত বিয়োজিত মিশ্রণ সম্পূর্ণ মিশ্রণের চেয়ে বেশি আকর্ষণীয় ছিল। এর বিপরীতে, সম্পূর্ণ কৃত্রিম মিশ্রণ থেকে স্বতন্ত্র যৌগগুলো অপসারণ করা রক্তচোষা মশার আচরণগত প্রতিক্রিয়ার উপর কোনো প্রভাব ফেলেনি (χ2 = ১১.৩৮, df = ৬, p = ০.০৭৭), তবে ডেকানাল এর ব্যতিক্রম ছিল, যার ফলে সম্পূর্ণ মিশ্রণের তুলনায় আকর্ষণের মাত্রা কম ছিল (p = ০.০২২; অতিরিক্ত ফাইল ১: চিত্র S2B)।
ইথিওপিয়ার একটি ম্যালেরিয়া-প্রবণ গ্রামে, মাঠ পর্যায়ে মশা আকর্ষণে ২৪-ঘণ্টার গোমূত্রের একটি কৃত্রিম মিশ্রণের কার্যকারিতা দশ রাত ধরে মূল্যায়ন করা হয়েছিল (চিত্র ৬ক)। মোট ৪,৮৬১টি মশা ধরা ও শনাক্ত করা হয়েছিল, যার মধ্যে ৪৫.৭% ছিল Anthropus.gambiae sl, ১৮.৯% ছিল Anopheles pharoensis এবং ৩৫.৪% ছিল Culex spp. (অতিরিক্ত ফাইল ১: সারণি S1)। পিসিআর বিশ্লেষণের মাধ্যমে An.Gambian প্রজাতি কমপ্লেক্সের একমাত্র সদস্য হিসেবে Anopheles arabinis-কে শনাক্ত করা হয়েছে। গড়ে প্রতি রাতে ৩২০টি মশা ধরা পড়েছিল, এই সময়ে কৃত্রিম মিশ্রণযুক্ত টোপ দেওয়া ফাঁদগুলো মিশ্রণবিহীন জোড়া ফাঁদের চেয়ে বেশি মশা ধরেছিল (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001)। পরীক্ষার শুরুতে, মাঝে এবং শেষে পাঁচটি নিয়ন্ত্রণ রাতের প্রতিটিতে টোপবিহীন ফাঁদ পাতা হয়েছিল। প্রতিটি ফাঁদের জোড়ায় মশা ধরা পড়েছিল, যা বাড়িগুলোর মধ্যে কোনো পক্ষপাতিত্বের অনুপস্থিতি (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) এবং গবেষণাকালীন সময়ে জনসংখ্যার কোনো হ্রাস না হওয়া নির্দেশ করে। কন্ট্রোল ফাঁদের তুলনায়, কৃত্রিম মিশ্রণযুক্ত ফাঁদগুলোতে ধরা পড়া মশার সংখ্যা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছিল: পোষক সন্ধানী (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), সাম্প্রতিক রক্তপানকারী (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) এবং গর্ভবতী (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; অতিরিক্ত ফাইল ১: সারণি S1)। এটি ধরা পড়া মোট মশার সংখ্যাতেও প্রতিফলিত হয়: পোষক সন্ধানী > রক্তচোষা > গর্ভবতী > আংশিক-গর্ভবতী > পুরুষ।
২৪-ঘণ্টার কৃত্রিম গোমূত্রের গন্ধের মিশ্রণের কার্যকারিতার মাঠ পর্যায়ের মূল্যায়ন। দক্ষিণ-মধ্য ইথিওপিয়ায় (মানচিত্র), মাকি শহরের (ইনসার্ট) কাছে, সেন্টারস ফর ডিজিজ কন্ট্রোল (CDC)-এর একটি আলোক ফাঁদ (ডানদিকে) ব্যবহার করে জোড়া ঘরে ল্যাটিন স্কয়ার নকশায় (আকাশ থেকে তোলা ছবি) (A) মাঠ পর্যায়ের পরীক্ষা চালানো হয়েছিল। কৃত্রিম গন্ধযুক্ত টোপ দেওয়া সিডিসি আলোক ফাঁদগুলো স্ত্রী অ্যানোফিলিস অ্যারাবেস্ক (B) মশাকে আকর্ষণ করে ও ধরে, কিন্তু অ্যানোফিলিস ফ্যারোস (C) মশাকে ভিন্নভাবে ধরে না, যা একটি শারীরবৃত্তীয় অবস্থা-নির্ভর প্রভাব। এছাড়াও, এই ফাঁদগুলো পোষক কিউলেক্স মশার সংখ্যা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছিল। (D) নিয়ন্ত্রণের সাথে তুলনা করে। বামদিকের বারগুলো গন্ধযুক্ত টোপ (সবুজ) এবং নিয়ন্ত্রণ (খোলা) ফাঁদের জোড়ায় ধরা পড়া মশার গড় নির্বাচন সূচক (N = 10) নির্দেশ করে, যেখানে ডানদিকের বারগুলো নিয়ন্ত্রণ ফাঁদের (খোলা; N = 5) জোড়ায় ধরা পড়া মশার গড় নির্বাচন সূচক নির্দেশ করে। তারকাচিহ্নগুলো পরিসংখ্যানগত তাৎপর্যের মাত্রা নির্দেশ করে (*p = 0.01 এবং ***p < 0.0001)।
কৃত্রিম মিশ্রণযুক্ত ফাঁদে তিনটি প্রজাতিকে ভিন্নভাবে ধরা হয়েছিল। পোষকের সন্ধানে (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), রক্তপানে (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) এবং গর্ভধারণে (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) কৃত্রিম মিশ্রণযুক্ত ফাঁদে a.arabiensis ধরা পড়েছিল (চিত্র 6B), যদিও An-এর পরিমাণে কোনো পার্থক্য দেখা যায়নি। Pharoensis-কে বিভিন্ন শারীরবৃত্তীয় অবস্থায় পাওয়া গিয়েছিল (চিত্র 6C)। কিউলেক্সের ক্ষেত্রে, কন্ট্রোল ফাঁদের তুলনায় শুধুমাত্র কৃত্রিম মিশ্রণযুক্ত ফাঁদে পোষক সন্ধানী মশার সংখ্যায় একটি উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি পাওয়া গেছে (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; চিত্র 6D)।
ইথিওপিয়ায় প্রজনন ক্ষেত্র এবং গ্রামীণ জনবসতির মধ্যবর্তী সম্ভাব্য পোষকের বাইরে অবস্থিত পোষক টোপ ফাঁদ ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল যে ম্যালেরিয়ার মশা পোষক আবাসস্থলের সংকেত হিসেবে গরুর মূত্রের গন্ধ ব্যবহার করে কিনা। পোষক সংকেতের অনুপস্থিতিতে, তাপ এবং গরুর মূত্রের গন্ধের উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে কোনো মশা ধরা পড়েনি (অতিরিক্ত ফাইল ১: চিত্র S3)। তবে, উচ্চ তাপমাত্রা এবং গরুর মূত্রের গন্ধের উপস্থিতিতে, স্ত্রী ম্যালেরিয়ার মশা আকৃষ্ট হয়েছিল এবং ধরা পড়েছিল, যদিও সংখ্যায় কম, যা মূত্রের বয়সের উপর নির্ভরশীল ছিল না (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; অতিরিক্ত ফাইল ১: চিত্র S3)। এর বিপরীতে, উচ্চ তাপমাত্রায় জলের নিয়ন্ত্রিত নমুনায় ম্যালেরিয়ার মশা ধরা পড়েনি (অতিরিক্ত ফাইল ১: চিত্র S3)।
অন্যান্য পোকামাকড়ের মতোই, ম্যালেরিয়ার মশা তাদের জীবনচক্রের বৈশিষ্ট্য উন্নত করার জন্য গরুর মূত্র (অর্থাৎ, ডোবা) থেকে ক্ষতিপূরণমূলক খাদ্যগ্রহণের মাধ্যমে নাইট্রোজেনযুক্ত যৌগ গ্রহণ ও বিতরণ করে [২, ৪, ২৪, ২৫, ২৬]। গরুর মূত্র একটি সহজলভ্য নবায়নযোগ্য সম্পদ যা ম্যালেরিয়ার বাহকদের বিশ্রামস্থল, যেমন গ্রামীণ বাড়ির কাছাকাছি গোয়ালঘর, লম্বা গাছপালা এবং ডিম পাড়ার স্থানের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে জড়িত। স্ত্রী মশা গন্ধের মাধ্যমে এই সম্পদ সনাক্ত করে এবং মূত্রে থাকা নাইট্রোজেনযুক্ত যৌগ, যার মধ্যে ইউরিয়া (মূত্রের প্রধান নাইট্রোজেনযুক্ত উপাদান) অন্তর্ভুক্ত, তার গ্রহণ নিয়ন্ত্রণ করতে সক্ষম [১৫, ১৬]। স্ত্রী মশার শারীরবৃত্তীয় অবস্থার উপর নির্ভর করে, মূত্রের পুষ্টি উপাদানগুলি পোষক-সন্ধানী স্ত্রী মশার উড্ডয়ন কার্যকলাপ এবং বেঁচে থাকার ক্ষমতা বাড়ানোর জন্য, সেইসাথে প্রথম গোনাডোট্রপিক চক্রের সময় রক্ত-ভোজী মশার বেঁচে থাকা এবং প্রজনন বৈশিষ্ট্য উন্নত করার জন্য বরাদ্দ করা হয়। অতএব, মূত্র মিশ্রণ ম্যালেরিয়ার বাহকদের জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ পুষ্টির ভূমিকা পালন করে, বিশেষ করে যারা অপুষ্টিতে ভোগা প্রাপ্তবয়স্কদের মতো আবদ্ধ থাকে [৮], কারণ এটি স্ত্রী মশাদের কম ঝুঁকিপূর্ণ উপায়ে গুরুত্বপূর্ণ নাইট্রোজেনযুক্ত যৌগ গ্রহণ করার ক্ষমতা প্রদান করে। খাদ্যগ্রহণ। এই আবিষ্কারটির তাৎপর্যপূর্ণ মহামারী সংক্রান্ত প্রভাব রয়েছে, কারণ এর ফলে স্ত্রী মশা তাদের জীবনকাল, কার্যকলাপ এবং প্রজনন ক্ষমতা বৃদ্ধি করে, যা সবই বাহকের ধারণক্ষমতাকে প্রভাবিত করে। অধিকন্তু, এই আচরণটি ভবিষ্যৎ বাহক ব্যবস্থাপনা কর্মসূচির লক্ষ্য হতে পারে।