Voedingverkryging en verspreiding integreer insekvreet- en lewensgeskiedenis-eienskappe. Om te kompenseer vir tekorte aan spesifieke voedingstowwe in verskillende lewensfases, kan insekte hierdie voedingstowwe verkry deur aanvullende voeding, byvoorbeeld deur te voed op gewerwelde sekresies in 'n proses bekend as plasse. reproduksie.Die doel van hierdie studie was om te bepaal of An.arabiensis agitasie op koei urine vir voedingstof verkryging verbeter lewensgeskiedenis eienskappe.
Maak seker dit is veilig.arabiensis was aangetrokke tot die reuk van vars, 24-uur, 72-uur en 168-uur ou koei-urine, en gasheersoekende en bloedgevoede (48-uur na-bloedmaaltyd) wyfies is in 'n Y-buis olfaktometer gemeet, en dragtige ontledings is gebruik om te kombineer vir swanger vroulike ontledings en is toe geassesseer vir bio-dragtige ontledings vir kombinasie van vroulike diere. koei-urine by al vier ouderdomsklasse. Sintetiese mengsels van bioaktiewe verbindings is in Y-buis- en veldproewe geëvalueer. Om koei-urine en sy vernaamste stikstofbevattende saamgestelde ureum as potensiële aanvullende diëte vir malariavektore te ondersoek, is voedingsparameters en lewensgeskiedenis-eienskappe gemeet. Die proporsie vroulike muskiete is geabsorbeer en die hoeveelheid vroulike muskiete wat geabsorbeer is, is geassesseer en die hoeveelheid vroulike muskiete is geassesseer. oorlewing, vasgebind vlug en voortplanting.
Soek na die gasheer se bloed en voeding. In laboratorium- en veldstudies is Arabiere aangetrokke tot die natuurlike en sintetiese geur van vars en bejaarde koei-urine. Dragtige wyfies was onverskillig teenoor koei-urine-reaksies by paaiplekke. Gasheersoekende en bloedsuigende wyfies absorbeer aktief koei-urien en histoureum en alle lewe-afwyking, soos die funksie van hierdie ureum en afwyk, val, of voortplanting.
Anopheles arabinis verkryging en verspreiding van koei-urine vir verbeterde lewensgeskiedenis-eienskappe. Aanvullende voeding van koei-urine beïnvloed vektorkapasiteit direk deur daaglikse oorlewing en vektordigtheid te verhoog, en indirek deur vlugaktiwiteit te verander en moet dus in toekomstige modelle oorweeg word.
Voedingverkryging en verspreiding integreer insekvreet- en lewensgeskiedenis-eienskappe [1,2,3]. Insekte is in staat om voedsel te selekteer en aan te skaf en kompenserende voeding uit te voer gebaseer op voedselbeskikbaarheid en voedingstofvereistes [1, 3]. Die verspreiding van voedingstowwe hang af van die lewensgeskiedenisproses en kan lei tot verskillende vereistes vir dieetkwaliteit en -kwantiteit, in verskillende lewensfases, in verskillende lewensfases [1]. In spesifieke voedingstowwe kan insekte hierdie voedingstowwe verkry deur aanvullende voeding, soos op modder, verskeie ontlasting en afskeidings van gewerwelde diere, en aas, 'n proses wat bekend staan ​​as plasse [2]. Alhoewel 'n verskeidenheid skoenlapper- en motspesies hoofsaaklik beskryf word, kom watergate ook in ander soorte insekte na voeding en voedingstowwe aan en kan dit 'n beduidende effek hê op die afskeiding van diere en diere. 2, 4, 5, 6] ,7].Die malariamuskiet Anopheles gambiae sensu lato (sl) kom na vore as 'n 'ondervoede' volwassene [8], so watering kan 'n belangrike rol speel in sy lewensgeskiedenis-eienskappe, maar hierdie gedrag is tot dusver verwaarloos.
Stikstofinname by volwasse vroulike Anopheles-muskiete is beperk as gevolg van lae kalorie-reserwes wat van die larwestadium af gedra word en ondoeltreffende benutting van bloedmeel [9]. Vroulike Ann.gambiae sl vergoed tipies hiervoor deur aan te vul met aanvullende bloedmaaltye [10, 11], waardeur meer mense die risiko loop om die siekte op te doen en alternatiewe voeding van muskiete te verhoog, en 'n groter risiko van muskietvoeding te plaas. ing van vertebrate uitskeidings om stikstofverbindings te verkry wat aanpassing en vlugmanoeuvreerbaarheid verbeter, soos gedemonstreer deur ander insekte [2]. In hierdie verband is die sterk en duidelike aantrekkingskrag van een van die broers en susters spesies binne An. Die Gambiese sl spesie kompleks, Anopheles arabinis, vars en bejaarde koei urine [12,13, is interessant in gasheerpreferensie [12,13,13, is interessant in gasheervoorkoms] en is opvallend. om te assosieer met en te voed op beeste.Koei urine is 'n hulpbron ryk aan stikstofverbindings, met ureum verantwoordelik vir 50-95% van die totale stikstof in vars urine [15, 16]. Soos koei urine ouer word, benut mikroörganismes hierdie hulpbronne om die kompleksiteit van stikstofverbindings binne 24 uur te verminder, die geassosieerde verhoging in 'n vinnige toename in 'n amW moniet in 24 uur. kalofiele mikroörganismes (waarvan baie verbindings produseer wat giftig is vir muskiete) floreer [15], wat vroulik kan wees.
In hierdie studie is daar na gasheer- en bloedgevoede Ans gesoek. Tydens sy eerste gonadotropiensiklus is arabiensis geassesseer vir die verkryging van stikstofverbindings, insluitend ureum, deur urinevermenging. Vervolgens is 'n reeks eksperimente uitgevoer om te bepaal hoe vroulike muskiete hierdie potensiële voedingstofhulpbron toeken vir verbeterde oorlewing, reuk en verdere reuk van 'n vars oorlewing en verdere reuk van urine. e is geassesseer om vas te stel of dit betroubare leidrade vir gasheer en bloedgevoede An.In hul soeke na hierdie potensiële voedingsbron het arabiensis chemiese korrelasies agter die waargenome differensiële aantreklikheid ontdek.Sintetiese reukmengsels van vlugtige organiese verbindings (VOC's) wat in 24-uur-verouderde urine geïdentifiseer is, is verder geëvalueer onder die laboratorium-effek van urine-toestande en die reuk van die urientoestande. verskillende fisiologiese toestande.Muskiet-aantreklikheid.Die resultate wat verkry is bevestig dat An.arabiensis verkry en versprei stikstofverbindings wat in gewerwelde urine gevind word om lewensgeskiedenis-eienskappe te beïnvloed. Hierdie resultate word bespreek in die konteks van potensiële epidemiologiese gevolge en hoe dit vir vektortoesig en beheer gebruik kan word.
Anopheles arabicans (Dongola-stam) is by 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH en 'n 12:12 uur lig:donker siklus gehandhaaf. Larwes is grootgemaak in plastiekbakkies (20 cm × 18 cm × 7 cm) gevul met gedistilleerde water en gevoer met Tetramin® viskos (Tetramin® viskos in WerkeP, DE). 0 ml koppies (Nolato Hertila, Åstorp, SE) en dan oorgeplaas na Bugdorm-hokke (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) om volwasse opkoms moontlik te maak. Volwassenes is voorsien van 'n 10% sukrose-oplossing ad libitum tot 4 dae na-opkoms, waarna die vroulike punt onmiddellik geëksperimenteer is (d-nag). bewerkte water voor die eksperiment, soos hieronder beskryf. Wyfies wat vir vlugbuis-eksperimente gebruik is, is vir slegs 4-6 uur uitgehonger met water ad libitum. Om bloedsuiende muskiete voor te berei vir daaropvolgende biotoetse, is 4 dpe-wyfies van defibrotiese skaapbloed voorsien (Håtunalab, Bro, SE) deur gebruik te maak van 'n membraanvoedingsisteem (Hemotekyccstedly, VK, Discovered, Worlds) en die vroulike voedingstelsel. individuele hokke en dieet direk verskaf, soos hieronder beskryf, of 10% sukrose ad libitum vir 3 dae voor die eksperimente wat hieronder beskryf word. Laasgenoemde wyfies is gebruik vir vlugbuis-biotoetse en na die laboratorium oorgeplaas, en het dan gedistilleerde water ad libitum gehad vir 4-6 uur voor die eksperiment.
Voedingtoetse is gebruik om urien- en ureumverbruik in volwasse An.Arabiese wyfies te kwantifiseer. Gasheersoekende en bloedgevoede wyfies is voorsien van 'n dieet wat 1% verdunde vars en bejaarde koei-urine, verskillende konsentrasies ureum en twee kontroles (10% sukrose en water) vir 48 uur bevat. Boonop, FF, mlani-12de, 5 mg, 12, 12, 12, 1, 1, 1, 2 -1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) is by die dieet gevoeg en verskaf in 'n 4 × 4 matriks in 250 µl mikrosentrifugeerbuise (Axygen Scientific, Union City, CA, VS; Figuur 1A) Vul tot op die rand (~300 µl). Om mededinging tussen muskiete en potensiële kleure van 'n muskiete1 cm2 en potensiële kleur-effekte van 'n muskiete 1 cm te vermy 6 cm hoog; Semadeni, Ostermundigen, CH; Figuur 1A) in volledige duisternis by 25 ± 2 cm °C en 65 ± 5% relatiewe humiditeit.Hierdie eksperimente is 5 tot 10 keer herhaal.Na blootstelling aan dieet is muskiete by -20 °C geplaas tot verdere ontleding.
Soek vir beesurien en ureum wat deur die gasheer geabsorbeer word en bloedsuiende wyfie Anopheles arabianus. In voerproef (A) is vroulike muskiete voorsien van 'n dieet wat bestaan ​​uit vars en bejaarde koei-urine, verskeie konsentrasies ureum, sukrose (10%) en gedistilleerde water (H2O). Gasheersoekend (B) geen vroulike bloed geabsorbeer (B) nie meer bloed geabsorbeer (B) nie. te dat gasheersoekende wyfies 72-uur koei-urine minder as 168-uur koei-urine (B) geabsorbeer het. Die gemiddelde totale stikstofinhoud (± standaardafwyking) van urine word in die inset voorgestel. Gasheersoekende (D, F) en bloedsuiende (E, G) wyfies neem ureum op in 'n dosis-afhanklike volume (Dosis-afhanklike E) ander (Dosis-afhanklike) volumes (Dosis-afhanklike wyses) verskil van die naam. manier ANOVA met behulp van Tukey se post hoc analise; p < 0.05). Foutstawe verteenwoordig standaardfout van die gemiddelde (BE). Die reguit stippellyn verteenwoordig die log-lineêre regressielyn (F, G)
Om geabsorbeerde voedsel vry te stel, is muskiete individueel in 1,5 ml mikrosentrifugeerbuise geplaas wat 230 µl gedistilleerde water bevat en die weefsel is ontwrig met 'n weggooibare stamper en koordlose motor (VWR International, Lund, SE), gevolg deur sentrifugering by 10 krpm vir 10 min. ryk) en absorpsie (λ620) is bepaal deur gebruik te maak van 'n spektrofotometer-gebaseerde mikroplaatleser (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Alternatiewelik is die muskiete in 1 ml gedistilleerde water gemaal, waarvan 900 µl oorgedra is na 'n cuvetric20 spectrum (λ0m 60; , Kista, SE). Om dieetinname te kwantifiseer, is 'n standaardkurwe deur reeksverdunning voorberei om 0.2 µl tot 2.4 µl 1 mg ml-1 xileensianied te lewer. Toe is die optiese digtheid van bekende kleurstofkonsentrasies gebruik om die hoeveelheid voedsel wat elke muskiet ingeneem het, te bepaal.
Volumedata is ontleed deur gebruik te maak van eenrigting-variansie-analise (ANOVA) gevolg deur Tukey se post hoc paarsgewyse vergelykings (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). Lineêre regressie-ontledings beskryf konsentrasie-afhanklike ureum-inname en vergelyking van muskiete-gasheer- en bloedsuig-reaksies tussen Prism-toe-gasheer- en bloedsuigresponse. 0 vir Mac, GraphPad sagteware, San Diego, CA, VSA).
Ongeveer 20 µl urienmonsters van elke ouderdomsgroep is op Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) gebind en in blikkapsules (8 mm × 5 mm) ingekapsuleer. Kapsules is in die verbrandingskamer van 'n CHNS/O2-analiseerder van 'n CHNS/O20 Fish0-, MA-, MA-, Scientificer, , US) om stikstofinhoud in vars en verouderde urine volgens die vervaardiger se protokol te bepaal.Totale stikstof (g N l-1) is gekwantifiseer op grond van bekende ureumkonsentrasies wat as standaard gebruik is.
Om die effek van dieet op gasheersoekende en bloedsuigende vroulike oorlewing te bepaal, is muskiete individueel in groot Petri-skottels (12 cm in deursnee en 6 cm hoog; Semadeni) geplaas met 'n gaas bedekte gat in die deksel (3 cm in deursnee) met Vir ventilasie en voedselvoorsiening. Dieet is direk na 4 dpe voorsien en het vars en 1% verdunde konsentrasie van urine en 1% verdunde 1 urine ingesluit. 0% sukrose en water.Elke dieet is gepipetteer op 'n tandheelkundige tampon (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) wat in 'n 5 ml spuit (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) geplaas is, die suier verwyder en bo-op 'n petriskottel geplaas (figuur 1).1A). twee keer per dag, terwyl dooie muskiete weggegooi is totdat die laaste muskiet gevrek het (n = 40 per behandeling). Oorlewing van muskiete wat op verskeie diëte gevoer is, is statisties ontleed met behulp van Kaplan-Meyer oorlewingskurwes en log-rang toetse om oorlewingsverspreiding vergelykings tussen diëte te vergelyk (IBM SPSS Statistics 0.004).
'n Gepasmaakte muskietvliegmeul gebaseer op Attisano et al.[17], gemaak van 5 mm dik deursigtige akrielpanele (10 cm breed x 10 cm lank x 10 cm hoog) sonder voor- en agterpanele (Fig. 3: bo). 'n Spilsamestelling met 'n vertikale buis gemaak van 'n gaschromatografiekolom (0.275 mm) gehang tussen 'n eindpunt (0.275 mm). paar neodymiummagnete 9 cm uitmekaar. 'n Horisontale buis wat van dieselfde materiaal gemaak is (6,5 cm L) het die vertikale buis gehalveer om 'n vasgemaakte arm te vorm en 'n arm wat 'n klein stukkie aluminiumfoelie as 'n ligonderbrekende sein gedra het.
24-uur-gehongerde wyfies is bogenoemde dieet vir 30 minute gegee voor beperking.Volledig gevoer vroulike muskiete is dan individueel op ys verdoof vir 2-3 min en vasgemaak aan insekpennetjies met byewas (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) en dan vasgebind aan die arms-revolusie-gegewens van 'n horisontale vlug. r, dan gestoor en vertoon met behulp van PC-Lab 2000™ sagteware (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Die vlugmeul is in 'n klimaatgereguleerde kamer geplaas (12 uur:12 uur, lig: donker, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Om die patroon van vlugaktiwiteit te visualiseer, is die totale afstand wat gevlieg is (m) en die totale aantal opeenvolgende vlugaktiwiteite per uur oor 'n tydperk van 24 uur bereken. Boonop is die gemiddelde afstande wat deur individuele vrouens gevlieg is, oor behandelings vergelyk en geanaliseer met behulp van eenrigting ANOVA en Tukey se post hoc-analise (JMP Pro, v14.0.0, terwyl SAS 'n afhanklike afstandsfaktor as 'n afhanklike Instituut beskou is, Inc. , word die gemiddelde aantal rondtes in inkremente van 10 minute bereken.
Om die effek van dieet op voortplantingsprestasie van An.arabiensis te bepaal, is ses wyfies (4 dpe) direk na Bugdorm-hokke (30 cm × 30 cm × 30 cm) na bloedversameling oorgeplaas en dan die eksperimentele dieet vir 48 uur verskaf soos hierbo beskryf. Dieet is dan verwyder en kuitkoppies (30 ml) is voorsien van die derde dag van die water gedistilleerde Nolato-water vir 40 ure. , verander elke 24 uur. Herhaal elke dieetregimen 20-50 keer. Eiers is getel en aangeteken vir elke eksperimentele hok.Submonsters van eiers is gebruik om gemiddelde grootte en lengte variasie van individuele eiers te bepaal (n ≥ 200 per dieet) deur gebruik te maak van 'n Dialux-20-mikroskoop (Dalux-20-mikroskoop, met Ernstz, DE30000000000000000, Ernstica, Ernstica en Ernstica; 20 R2;Leica Microsystems Ltd., DE). Die oorblywende eiers is vir 24 uur in 'n klimaatbeheerde kamer gehou onder standaard grootmaaktoestande, en 'n submonster van onlangs opgeduik 1ste stadium larwes (n ≥ 200 per dieet) is gemeet, soos hierbo beskryf. Die aantal eiers en die grootte van eiers en larwes is vergelyk met een-weg-analises A-MP-ho- en 1-weg-analises met behulp van een-pad-, 4- en 1-wegbehandelings. 0.0, SAS Institute Inc.).
Kopspasie vlugtige stowwe van vars (1 uur na-monsterneming), 24 uur, 72 uur en 168 uur verouderde urine is versamel van monsters wat van Zebu-beeste, Arsi-rasse versamel is. Gerieflikheidshalwe is urinemonsters vroeg in die oggend geneem terwyl die koeie nog in die stal was. Urinemonsters is versamel van 00 ml individuele poliamiedmonsters na 000 ml individue. ingsakke (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH en Co., Minden, DE) in 3 l poliamied met deksel In vinielchloried plastiek dromme. Kopspasie vlugtige stowwe van elke bees urinemonster is óf direk (vars) of na rypwording by kamertemperatuur vir 24 ure, 72 ure van elke ouderdomsmonster en 168 h verteenwoordigend van elke urinegroep versamel.
Vir die versameling van vlugtige stowwe in die kopspasie is 'n geslote-lusstelsel gebruik om 'n geaktiveerde koolstof-gefiltreerde gasstroom (100 ml min-1) deur 'n poliamiedsak na die adsorpsiekolom te sirkuleer vir 2,5 uur deur 'n diafragma vakuumpomp te gebruik (KNF Neuberger, Freiburg, DE). id) wat 35 mg Porapak Q (50/80 maas; Waters Associates, Milford, MA, VSA) tussen glaswolproppe bevat.Voor gebruik is die kolom gespoel met 1 ml hergedistilleerde n-heksaan (Merck, Darmstadt, DE) en 1 ml pentaan (99.0% graad suiwer oplosmiddelvol 0 GC). μl pentaan. Kopspasie versamelings is saamgevoeg en dan by -20°C gestoor totdat dit vir verdere ontleding gebruik word.
Gedragsreaksies van gasheersoekende en bloed-etende An.Headspace-vlugtige ekstrakte wat versamel is uit vars, 24-uur, 72-uur en 168-uur-oue urine is ontleed vir vlugtige ekstrakte van Arabidopsis-muskiete met behulp van 'n reguit glasbuis olfaktometer [18]. Die eksperimente is uitgevoer gedurende die ZT-1-piek-aktiwiteit van die 13-1 aktiwiteit van die huis, 'Ab. [19].'n Glasbuis olfaktometer (80 cm × 9,5 cm id) is verlig met 3 ± 1 lx rooi lig van bo af. Houtskool gefiltreerde en bevochtigde lugvloei (25 ± 2 °C, 65 ± 2% relatiewe humiditeit) het die biotoets teen 30 cm vloei deur 'n 30 cm staar vloei gevoer en 'n laminelose vloei geskep. eenvormige pluimstruktuur.Tandtampondispenser (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), opgehang aan 'n 5 cm spoel aan die windwaartse punt van die olfaktometer, met stimulatorveranderings elke 5 minute.Vir ontleding is 10 μl van elke kopspasie-ekstrak, 1:10 verdun, as 'n gasheer gebruik as 'n-di-siening. 'n gelyke hoeveelheid bloed. uittrekmuskiete is 2-3 uur voor die aanvang van die eksperiment in individuele vrylatinghokke geplaas. Die vrylatinghok is aan die windafkant van die olfaktometer geplaas, en die muskiete is toegelaat om vir 1 min te akklimatiseer, en dan is die vlinderklep van die hok oopgemaak om vry te laat. Aantrekking tot behandeling of beheer is ontleed as die proporsie van die kop van die vrystelling van die muskiete en die vrystelling van die spasie van 5 minute in kontak. is ten minste 30 keer herhaal, en om die effekte van enige een dag te vermy, is dieselfde aantal behandelings en kontroles op elke eksperimentele dag getoets. Soek reaksies van gasheer en bloedgevoede Ans.Arabiese versus kopspasie-stelle is ontleed deur gebruik te maak van nominale logistiese regressie gevolg deur paarsgewyse vergelykings vir onewe verhoudings (JMP0 Institute Inc.01, v4AS).
An se paai-reaksie. Kopspasie-ekstrakte van vars en verouderde koei-urine is in Bugdorm-hokke (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science) ontleed. Plastiekkoppies (30 ml; Nolato Hertila) gevul met 20 ml gedistilleerde water het die paai-substraat verskaf en is 24 cm van die hoek van die hok uitmekaar geplaas. met 10 μl van elke kopspasie-ekstrak teen 'n 1:10-verdunning. 'n Gelyke hoeveelheid pentaan is gebruik om die kontrolebeker aan te pas. Behandeling- en kontrolekoppies is tussen elke eksperiment uitgeruil om te kontroleer vir posisie-effekte. Tien bloedgevoede wyfies is in eksperimentele hokke vrygelaat teen ZT 9-11 en eiers in koppies is later getel van die formule vir 24 uur se eiertelling: (w. gelê in die behandelingsbeker – die aantal eiers wat in die kontrolebeker gelê is)/(die totale aantal eiers gelê).Elke behandeling is 8 keer herhaal.
Gaschromatografiese en elektronantennapatroondeteksie (GC-EAD) analise van vroulike An.arabiensis is uitgevoer soos voorheen beskryf [20]. Kortliks is vars kopspasie vlugtige ekstrakte geskei deur gebruik te maak van 'n Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) toegerus met 'n HP-5-kolom (305 m × 50 dikte, Agilentheid, 205 mm × 50). ).en verouderende urine.Waterstof is as die mobiele fase gebruik met 'n gemiddelde lineêre vloeitempo van 45 cm s-1.Elke monster (2 μl) is vir 30 sekondes in splitless-modus ingespuit met 'n inlaattemperatuur van 225 °C. Die GC oondtemperatuur is geprogrammeer van 35 °C (3 minute hou) tot 300 minute hou °C (effluent) by 10 min. 4 psi stikstof is bygevoeg en verdeel 1:1 in 'n Gerstel 3D/2 lae dooie volume kruising (Gerstel, Mülheim, DE) tussen die vlamionisasiedetektor en die EAD. Die GC-uitvloeiselkapillêre vir EAD is deur 'n Gerstel ODP-2 oordraglyn gevoer, wat die GC oondtemperatuur volg, met 0 cm, 5 °C gemeng, met 'n gemeng in 'n 0 cm-glasbuis (1) bevochtigde lug (1,5 l min−1). Die antenna is 0,5 cm vanaf die uitlaat van die buis geplaas. Elke individuele muskiet was verantwoordelik vir een replikaat, en vir gasheersoekende muskiete is ten minste drie herhalings op urinemonsters van elke ouderdom uitgevoer.
Identifikasie van bioaktiewe verbindings in kopspasie-versamelings van vars en verouderde beesurien deur gebruik te maak van 'n gekombineerde GC- en massaspektrometer (GC-MS; 6890 GC en 5975 MS; Agilent Technologies) om antennale reaksies in GC-EAD-analise te ontlok, wat in elektronimpak-ionisasiemodus werk teen 70 HPUS-kolom- 5 eV toegerus met GUI-fusie-kolom 5 eV. (60 m × 0.25 mm binnedeursnee, 0.25 μm filmdikte) deur helium as die mobiele fase te gebruik met 'n gemiddelde lineêre vloeitempo van 35 cm s-1. 'n 2 μl monster is ingespuit met dieselfde inspuitinstellings en oondtemperatuur as vir die GC-EAD analise. Verbindings is geïdentifiseer op grond van die spektrum van retensietyd en libr 4, en vergelyk met die spektrum van retensietyd (Ková) ary (Agilent).Geïdentifiseerde verbindings is bevestig deur outentieke standaarde in te spuit (Addisionele Lêer 1: Tabel S2). Vir kwantifisering is heptielasetaat (10 ng, 99.8% chemiese suiwerheid, Aldrich) as 'n eksterne standaard ingespuit.
Evaluering van die doeltreffendheid van 'n sintetiese reukmengsel wat bestaan ​​uit bioaktiewe verbindings wat in vars en verouderde urine geïdentifiseer is om gasheersoekende en bloedsuiende Ans.arabiensis aan te trek, deur dieselfde olfaktometer en protokol as hierbo te gebruik.Sintetiese mengsels het die samestelling en verhoudings van verbindings in gemengde kopspasie vlugtige ekstrakte van vars, 8 uur, 8 uur, 4 uur en 8 uur nageboots. -uur-verouderde urine (Figuur 5D-G; Addisionele Lêer 1: Tabel S2). Vir ontleding, gebruik 10 μl van 'n 1:100 verdunning van die ten volle sintetiese mengsel, met 'n algehele vrystellingstempo wat wissel van ongeveer 140-2400 ng h-1, vir die assessering van aantreklikheid vir gasheer en bloedsuigende mengsel van die mengsel, wat uitgevoer word op die mengsel van muskiete en bloedsuig. enkele verbindings van die volledige mengsel word verwyder. Soek reaksies van gasheer en bloedgevoede Ans.Arab vs sintetiese en subtraktiewe mengsels is ontleed deur gebruik te maak van nominale logistiese regressie gevolg deur paarsgewyse vergelykings vir onewe verhoudings (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Om te bepaal of koei-urine kan dien as 'n gasheer-habitat-aanwyser vir malariamuskiete, is vars en verouderde koei-urine, versamel soos hierbo beskryf, en water in maas 3 l-emmers (100 ml) geplaas en in gasheerlokvalle gesit.(BG-HDT-weergawe; BioGents, Regensburg, DE). Tien strikke wat 50 m van mekaar in weiveld geplaas is, 400 m van dorpsgemeenskap (Silay, Ethiopië, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) en geen beeste nie, op vyf permanente broeigronde en dorpe is nageboots, terwyl die aanwesigheid van 'n lokasie van gasheer gelaat is. word nagtelik vir 'n totaal van vyf nagte geroteer. Muskietgetalle wat vasgevang is in lokvalle wat met urine van verskillende ouderdomme aas is, is vergelyk met behulp van logistiese regressie met 'n beta-binomiale verspreiding (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
In 'n malaria-endemiese dorpie naby die dorp Maki, Oromia-streek, Ethiopië (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ O; Figuur 6A). Die studie is uitgevoer tussen middel Augustus en middel September voor die jaarlikse binnenshuise oorblywende bespuitingseisoen van 'n 50 m per jaar uitmekaar, tesame met 'n lang reënseisoen van 50 m uitmekaar (0 m) uitmekaar. buitewyke van die dorpie is vir die studie geselekteer (Fig. 6A). Die kriteria wat gebruik is om die huise te selekteer was: geen diere toegelaat in die huis nie, geen binnenshuise kook (trek vuurmaakhout of houtskool) is toegelaat nie (ten minste gedurende die proeftydperk), en huise met 'n maksimum van twee inwoners, wat in oninsekdoders slaap.onder die behandelde muskietnet.Etiese goedkeuring is verleen deur die Institusionele Navorsingsetiek-oorsigraad (IRB/022/2016) van die Fakulteit Natuurwetenskappe (CNS-IRB), Addis Abeba Universiteit, in ooreenstemming met die riglyne wat deur die World Medical Association Declaration of Helsinki vasgestel is.Toestemming van elke hoof van die huishouding is verkry deur die distrikshoof van die proses van gesondheidsadministrasie by die einde van die proses. 'kebele') vlak. Die eksperimentele ontwerp het 'n 2 × 2 Latynse vierkantige ontwerp gevolg, waarin sintetiese mengsels en kontroles op die eerste nag aan gepaarde huise toegewys is en op die volgende eksperimentele nag tussen huise omgeruil is. Hierdie proses is tien keer herhaal. Boonop, om muskietaktiwiteit in geselekteerde huise te skat, is die CDC-lokvalle van die begin van die drie opeenvolgende dag en die einde van die dag op dieselfde tyd gestel om vyf agtereenvolgens te loop.
'n Sintetiese mengsel wat ses bioaktiewe verbindings bevat, is opgelos in heptaan (97.0% oplosmiddel GC graad, Sigma Aldrich) en vrygestel teen 140 ng h-1 met behulp van 'n katoenpit dispenser [20]. Die pit dispenser het toegelaat dat alle verbindings vrygestel word in konstante proporsies gedurende die 12 uur eksperiment. Beheer en Voorkoming (CDC) ligval (John W. Hock Company, Gainesville, FL, VSA; Figuur 6A). Die lokvalle is 0,8 – 1 m bo die grond, naby die voetenent van die bed gehang, en 'n vrywilliger het onder 'n onbehandelde muskietnet geslaap en tussen 18:00 en 06:30 geopereer deur seks, gekap, semin- en muskiete. , en swanger [21] is daarna gekeur deur gebruik te maak van polimerase kettingreaksie (PCR) analise om die spesies te identifiseer morfologies geïdentifiseer as A. gambiae sl. Lede van die kompleks [23]. In die veldstudie is vang vang van gepaarde huise ontleed deur gebruik te maak van 'n nominale logistiese pas model, waar aantrekking die afhanklike veranderlike was en behandeling (J.) was die afhanklike veranderlike en behandeling (J.)0. SAS Institute Inc.).Hier rapporteer ons die χ2- en p-waardes van die waarskynlikheidsverhoudingtoets.
Evalueer of dit veilig is.arabiensis was in staat om urine, sy hoofstikstofbron, ureum, deur direkte voeding, binne 48 uur na toediening vir 4 dae na (dpe) gasheersoekende en bloedgevoede vroulike voedingproewe te verkry (Fig. 1A). Beide gasheersoekende en bloedsuiende wyfies het aansienlik meer sukrose geabsorbeer as enige ander dieet, 206 (5 p) of enige ander sukrose. 0,0001 en F(5,299) = 56,00, p < 0,0001, onderskeidelik; Fig. 1B,C).Verder het gasheersoekende wyfies op 72 uur minder in urine geëet in vergelyking met urine op 168 uur (Fig. 1B). vergeleke met alle ander konsentrasies en water, terwyl dit nie van 10% sukrose onderskei kan word nie (F(10,813) = 15,72, p < 0,0001; Figuur 1D). Dit was in teenstelling met die reaksie van bloedgevoede wyfies, wat tipies aansienlik meer ureumbevattende diëte geabsorbeer het, aansienlik minder as water, alhoewel 50 (7) 0% sukrose as water, alhoewel 50% sukrose. 5, p < 0.0001; Figuur 1).1E). Verder, wanneer die twee fisiologiese toestande vergelyk word, het flebotomiseerde wyfies meer ureum geabsorbeer as gasheersoekende wyfies by die laagste konsentrasies, en hierdie wyfies het soortgelyke hoeveelhede ureum by hoër konsentrasies geabsorbeer (F(1,953.08)= 01;Fig. 1F, G). Terwyl inname van 'n ureumbevattende dieet optimale waardes geblyk het (Fig. 1D,E), kon vroue in beide fisiologiese toestande die hoeveelheid ureum geabsorbeer oor die hele reeks ureumkonsentrasies op 'n log-lineêre wyse moduleer (Fig. 1F,G).).Net so blyk dit dat muskiete hul stikstofopname beheer deur die hoeveelheid urine wat geabsorbeer word te reguleer, aangesien die hoeveelheid stikstof in urine weerspieël word in die hoeveelheid geabsorbeer (Figuur 1B, C en B insetsels).
Om die uitwerking van urine en ureum op gasheersoekende en bloedsuigende muskietoorlewing te bepaal, is wyfies urien van al vier ouderdomme gevoer (vars, 24 uur, 72 uur en 168 uur na-afsetting) en 'n reeks ureumkonsentrasies, sowel as gedistilleerde water en 10 % sukrose het 'n beduidende effek op die survi-analise gehad (Hierdie survi-effek het as 'n 2A-kontrole gedien). lewe in gasheersoekende wyfies (urine: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; ureum: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Fig. 2B, C) en bloedgevoede wyfies (urine: χ.02, p.0, d = 9.02, p. χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Figuur 2D,E). In alle eksperimente het vrouens wat 'n dieet van urine, ureum en water gevoer het, aansienlik laer oorlewingsyfers gehad in vergelyking met vroue wat 'n sukrose-dieet gevoer het (Figuur 2B-E). h ou urine (p = 0,016) met die laagste oorlewingwaarskynlikheid (Fig. 2B). Verder het gasheersoekende wyfies wat 135 mM ureum gevoer is, langer oorleef as waterkontroles (p < 0,04) (Fig.2C).Vergeleke met water, het vroue wat met vars urine en 24-uur urine gevoer is, langer oorleef (p = 0,001 en p = 0,012, onderskeidelik; Figuur 2D), terwyl vroue wat met 72-uur urine gevoer is, langer oorleef het as dié wat Vroulike kort vars urine en 24-uur < 1,0 p. e 2D). Wanneer 135 mM ureum gevoer is, het bloedgevoede wyfies langer oorleef as alle ander konsentrasies ureum en water (p < 0,013; Figuur 2E).
Oorlewing van gasheer en bloedsuiende vroulike Anopheles arabinis wat op koei-urine en ureum voed. In die biotoets (A) is vroulike muskiete 'n dieet voorsien wat bestaan ​​het uit vars en verouderde koei-urine, verskeie konsentrasies ureum, sukrose (10%) en gedistilleerde water (H2O). Die oorlewing van gasheersoekende (E) en muskiete wat elke gasheer soek (E) is aangeteken. 2 uur totdat alle wyfies wat op urine (B, D) en ureum (C, E) gevoer word, en kontroles, sukrose en water, dood is
Die totale afstand en aantal rondtes wat in die vlugmeultoets oor 'n 24-uur-tydperk bepaal is, het verskil tussen gasheersoekende en bloedsuiende muskiete, wat in die algemeen minder vlugaktiwiteit getoon het (Fig. 3). Gasheersoekende muskiete wat vars en verouderde urine of sukrose en water verskaf het, het duidelike vlugpatrone getoon, terwyl die vroulike vreetpatrone meer aktief was by daw 3 (Fig. 4- en 168-uur verouderde Muskiete wat op urine gevoed het, het verskillende vlugpatrone getoon en was hoofsaaklik daagliks. Vroulike muskiete wat sukrose of 72-uur urine verskaf het, het aktiwiteit deur die 24-uur periode getoon, terwyl wyfies wat water verskaf het, meer aktief was gedurende die middel van die tydperk. Muskiete het in die laat, die oggend en die hoogste aktiwiteit in die nag en die hoogste aktiwiteit getoon. 72-uur-oue urine het 'n bestendige afname in aktiwiteit oor 24 uur ervaar (Figuur 3).
Vlugprestasie van jagtersoekende bloedsuiende vroulike Anopheles arabinis wat op koei-urine en ureum vreet. In die vlugmeultoets is vroulike muskiete wat op vars en bejaarde koei-urine gevoer is, verskeie konsentrasies ureum, sukrose (10%) en gedistilleerde water (H2O) vasgemaak aan horisontale, vry-roterende arms (vir die gasheer-na-vleuel-bloed) en vrylik roterende arms. , is die totale afstand en aantal vlugte per uur vir elke dieet oor 'n tydperk van 24 uur aangeteken (donker: grys; lig: wit).Gemiddelde afstand en gemiddelde aantal aanvalle word regs van die sirkadiese aktiwiteitsgrafiek getoon.Foutstawe verteenwoordig standaardfout van die gemiddelde.Statistiese analise sien teks
Oor die algemeen het die algehele vlugaktiwiteit van gasheersoekende wyfies 'n patroon gevolg soortgelyk aan dié van vlugafstand oor 'n 24-uur periode.Gemiddelde vlugafstand is beduidend beïnvloed deur dieet wat ingeneem is (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), en gasheersoekende wyfies het 72 uur se urine ingeneem en <0 ure het betekenisvol gevlieg (<0 ure) in vergelyking met alle ander urine wat gevlieg het. gevoede muskiete het langer gevlieg as vars (p = 0.022) en 24-uur-oue urine (p = 0.022)-gevoede muskiete. In teenstelling met die vlugaktiwiteitspatroon wat deur die urine-dieet beskryf word, het ureum-gevoed gasheersoekende wyfies aanhoudende vlugaktiwiteit getoon oor 'n 24-uur patroon gedurende die tweede patroon van die tweede, donker aktiwiteit (Alig. soekende wyfies wat ureum gevoer is, het die gemiddelde vlugafstand aansienlik verhoog na gelang van die geabsorbeerde konsentrasie (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). Gasheersoekende wyfies wat enige konsentrasie ureum gevoer is, het langer gevlieg as vrouens wat óf water óf sukrose gevoer het (p < 0.03).
Algehele vlugaktiwiteit van bloedsuiende muskiete was stabiel en het oor 24 uur oor alle diëte volgehou, met verhoogde urineaktiwiteit gedurende die tweede helfte van die donker periode vir wyfies wat op water gevoer is, sowel as by wyfies wat vars en 24 uur oud gevoer is (prent 3). t het nie (F(5, 138) = 1,36, p = 0,24) .met ander urine en kontrole dieet (vars, p = 0,0091; 72 uur, p = 0,0022; 168 uur, p = 0,001; sukrose, p = 0,0017, p. = 0,0017, p. = 0,0017, p.
Die uitwerking van urine en ureumvoeding op voortplantingsparameters is in eierlê-biotoetse (Figuur 4A) geassesseer en is ondersoek volgens die aantal eiers wat deur elke wyfie gelê is, eiergrootte en nuutgebroeide larwes in die eerste stadium. Die aantal eiers wat gelê is. Urine-gevoede Arabiese wyfies het gevarieer volgens dieet (F. = p. 4B). Wyfies wat 'n 24-uur urine gevoer het, bloedmeel het aansienlik meer eiers gelê as wyfies wat ander urinediëte gevoer het en was soortgelyk aan dié wat sukrose gevoer het (Fig. 4B). Net so het die grootte van eiers wat deur urine-gevoede wyfies gelê is, gevarieer volgens dieet (F(5, 209) = 0 crose, - 0, 0, 0, 0, 0, 0, 128. gevoerde wyfies wat aansienlik groter eiers lê as watergevoede wyfies, terwyl die eiers van wyfies wat met 168 h urine gevoer is, aansienlik kleiner was (Fig. 4C). Boonop het urine-dieet die larwegrootte betekenisvol beïnvloed (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001, met beduidende eiers - 4 - 2 larwe en 4 laerhoue. ou urine-gevoed wyfies as van eiers gelê van eiers larwes.Water-gevoed en 168-h urine-gevoed wyfies (Figuur 4D).
Voortplantingsprestasie van vroulike Anopheles arabinis wat op koei-urine en ureum vreet. Bloedgevoede vroulike muskiete is gevoer met diëte bestaande uit vars en verouderde koei-urine, verskeie konsentrasies ureum, sukrose (10%) en gedistilleerde water (H2O) vir 48 uur voordat dit in biotoetse geplaas is (Egg-nommer A), (Egg-nommer A), (Egg-grootte A), (Egg-nommer A) verkry. , F) en larwes grootte (D, G) is aansienlik beïnvloed deur die dieet wat verskaf is (koei urine: BD; ureum: EG).Gemiddeldes vir elke parameter gemeet met behulp van verskillende lettername was betekenisvol verskillend van mekaar (eenrigting ANOVA met behulp van Tukey se post hoc analise; p < 0.05). Foutbalkies verteenwoordig standaardfout van die gemiddelde
As die belangrikste stikstofkomponent van urine, het ureum, wanneer dit as 'n dieet aan bloedgevoede wyfies verskaf word, reproduktiewe parameters in alle studies beduidend beïnvloed. Die aantal eiers wat gelê is deur wyfies wat ureum gevoer het, na 'n bloedmaaltyd, afhangende van ureumkonsentrasie (F(11, 360) = 4.69; p < 10.00s tussen 1,000, 1,000 wyfies. 34 mM het meer eiers gelê (Figuur 4E). Wyfies wat met ureumkonsentrasies van 134 µM of hoër gevoer word, lê groter eiers as wyfies wat op water gevoer word (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Figuur 4F), en larwe-groottes van (31.00 in 31) moeders, alhoewel geaffekteer deur (31) p < 0,0001) was meer veranderlik (Fig. 4G).
Algehele aantrekkingskrag vir gasheer-soekende bees urine kopspasie vlugtige ekstrakte. Die arabiensis geassesseer in die glasbuis olfaktometer (Fig. 5A) is beduidend beïnvloed deur urine ouderdom (χ2 = 15,9, df = 4, p = 0,0032; Fig. 5B). na alle ander behandelings (72 uur: p = 0.0060, 168 uur: p = 0.012, pentaan: p = 0.00070), Behalwe vir die reuk van vars urine (p = 0.13; Figuur 5B). Alhoewel die algehele aantrekkingskrag van bloedsuiende muskiete na urien reuk = 4,8 nie betekenisvol was nie 8,0 (χ 8,0) .067; Fig. 5C), is gevind dat hierdie wyfies aansienlik meer aantreklik is vir kopspasie-vlugtige ekstrakte in vergelyking met 72-uur verouderde urine in vergelyking met kontroles (p = 0,0066; Figuur 5C).
Gedragsreaksies op natuurlike en sintetiese koei-urine-reuke in die soeke na gasheer en bloedgevoede Anopheles arabianus.Skematiese van die glasbuis-olfaktometer (A).Aantrekking van kopspasie-vlugtige ekstrakte van vars en bejaarde koei-urine na gasheer (B) en bloedsuiende (C)-muskiete.Vind die Here-tent-reaksie van die Here-tent-reaksie. -uur (E), 72-uur (F), en 168-uur (G) verouderde koei urine word getoon. Elektronantenna-opsporing (EAD) spore toon spanningsveranderinge in reaksie op bioaktiewe verbindings in die kopspasie wat uit die gaschromatograaf geëlueer word en deur 'n vlamionisasie-detektor bar (FID) bespeur word. s (µg h-1) van die biologies aktiewe verbindings word getoon.'n Enkele sterretjie (*) dui op 'n konsekwente lae-amplitude-reaksie.Dubbele sterretjies (**) dui onreproduceerbare response aan.Vind die gasheer (H) en die bloedsuiende (I) An.arabiensis het verskillende aantrekkingskragte op sintetiese mengsels van vars en verouderde bees-name, verskillende verhoudings van vars en verouderde bees-name aantrek beduidende verhoudings van vars en verouderde beesname. mekaar (eenrigting ANOVA deur gebruik te maak van Tukey se post hoc analise;p < 0.05). Foutstawe verteenwoordig standaardfout van die skaal
Vroulike Ann.arabiensis, 72 uur en 120 uur na bloedmaaltyd, tydens paai, is geen voorkeur getoon vir kopspasie-vlugtige ekstrakte van vars en verouderde koei-urine in vergelyking met pentaankontroles nie (χ2 = 3.07, p > 0.05; Addisionele lêer 1: Fig. S1).
Vir vroulike Ann.arabiensis, GC-EAD en GC-MS ontledings het agt, ses, drie en drie bioaktiewe verbindings geïdentifiseer (Figuur 5D-G). Alhoewel verskille in die aantal verbindings wat elektrofisiologiese reaksies ontlok is waargeneem is, was die meeste van hierdie verbindings teenwoordig in elke kopspasie vlugtige uittreksel wat versamel is uit vars en verouderde uriene van die vroulike samestelling, vir elke antenna-ekstrak wat hierbo geproduseer het. die drempel is by verdere ontledings ingesluit.
Die totale vlugtige vrystellingstempo van bioaktiewe verbindings in die kopspasieversameling het toegeneem van 29 µg h-1 in vars urine tot 242 µg h-1 in 168-uur-verouderde urine, hoofsaaklik as gevolg van p-kresol en m-formaldehied Fenolverhogings sowel as fenol. Daarteenoor verlaag die vrystellingstempo van 1-2-verbindings, soos 1-sikloonverbindings, en toenemende urine. ouderdom, wat gekorreleer het met die waargenome afname in seinintensiteit (oorvloed) in die chromatogram (Fig. 5D)-G linkerpaneel) en fisiologiese reaksies op hierdie verbindings (Fig. 5D-G regterpaneel).
Algehele, die sintetiese mengsel het 'n soortgelyke natuurlike verhouding van bioaktiewe verbindings wat geïdentifiseer is in vlugtige ekstrakte van vars en verouderde urine kopspasies (Fig. 5D-G) en het nie gelyk of dit beduidende aantrekkingskrag in die soeke na 'n gasheer ontlok het nie (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Fig. 5H) of bloedsug, 4, 4, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 1, 1, 2, 4 = 0.30; Fig. 5I). Post hoc paarsgewyse vergelykings tussen behandelings het egter getoon dat gasheersoekende muskiete beduidend aantreklik was vir die sintetiese mengsel van 24-uur verouderde urine in vergelyking met pentaankontroles (p = 0,0086; Figuur 5H).
Om die rol van individuele komponente in sintetiese mengsels van 24-uur-verouderde urine te evalueer, is ses subtraktiewe mengsels geëvalueer teen volledige mengsels in die Y-buistoets, waarin individuele verbindings verwyder is. Vir gasheersoekende muskiete, het die aftrekking van individuele verbindings van die volledige mengsel 'n beduidende effek op gedragsreaksies gehad (χ2 = 19.06; S = 19.60; 2A), was alle subtraktiewe mengsels aantrekliker as Kleiner as ten volle gemeng. Daarteenoor het die verwydering van individuele verbindings uit die ten volle sintetiese mengsel nie die gedragsreaksies van bloedsuiende muskiete beïnvloed nie (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), met die uitsondering van decanal vlakke, wat in vergelyking met die laer decanal vlakke gelei het (20 Addisionele aantrekkingskrag; 2; B).
In 'n malaria-endemiese dorpie in Ethiopië is die doeltreffendheid van 'n sintetiese mengsel van 24-uur koei-urine om muskiete onder veldtoestande te lok vir tien nagte geëvalueer (Fig. 6A). Altesaam 4 861 muskiete is gevang en geïdentifiseer, waarvan 45,7% Anthropus, 5% Anthropus en 5% Anthropus was. .4% was Culex spp.(Bykomende lêer 1: Tabel S1). Anopheles arabinis is die enigste lid van An.Gambian spesiekompleks wat deur PCR-analise geïdentifiseer is.Gemiddeld is 320 muskiete per nag gevang, waartydens lokvalle met sintetiese mengsel lokaas meer muskiete gevang het as gepaarde lokvalle sonder mengsel, (χ12 09) = 012 p. ) .Nie-aas lokvalle is op elk van die vyf kontrole nagte aan die begin, middel en einde van die proef gestel.Soortgelyke getalle muskiete is in elke paar lokvalle gevang, wat aandui dat daar geen vooroordeel tussen huise is nie (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0 van die populasie van die kontrole,05. vasgevang in die lokvalle wat die sintetiese mengsel bevat, het aansienlik toegeneem: gasheersoek (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), onlangse bloedvoeding (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) en swangerskap (χ2.8) = 2.0, 0, 2.0, 0, 0, 0;Addisionele lêer 1: Tabel S1). Dit word ook weerspieël in die totale aantal muskiete wat gevang is: gasheer soek > bloedsuig > dragtig > halfswanger > manlik.
Veld-evaluering van die doeltreffendheid van 'n 24-uur sintetiese koei-urienreukmengsel.Veldproewe is uitgevoer in suid-sentrale Ethiopië (kaart), naby die dorp Maki (inlas), met behulp van 'n Sentrums vir Siektebeheer (CDC) ligval (regs) in gepaarde huise, met 'n Latynse vierkantige ontwerp (lugbeeld-CD's) (Aerial-rapheltic) (Aerial image) (Aerial-rapheltic-reuk) (A). besques (B), maar nie Anopheles farroes (C), op 'n ander manier, 'n fisiologiese toestand-afhanklike effek. Boonop het hierdie lokvalle aansienlik verhoogde getalle van die gasheer Culex-muskiete gevang.(D) In ​​vergelyking met kontrole. Die stawe aan die linkerkant verteenwoordig die gemiddelde seleksie-indeks van muskiete wat in pare van reukstof gevang word op die reukmiddel vang) en beheer (1) gemiddeld die reuk (1)0 seleksie verteenwoordig (1) indeks in pare kontrole lokvalle (oop; N = 5).).Asterisks dui statistiese beduidendheidsvlakke aan (*p = 0,01 en ***p < 0,0001)
Die drie spesies is verskillend gevang in lokvalle wat sintetiese mengsels bevat. Op soek na gasheer (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), bloedvoeding (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) en swangerskap (χ181, p = 6.01, 0.01, 0.01) .arabiensis was in die lokval vasgevang wat die sintetiese mengsel vrystel (Fig. 6B), terwyl die hoeveelheid An nie verskil het nie. Pharoensis in verskillende fisiologiese toestande is gevind (Fig. 6C). Vir Culex is slegs 'n betekenisvolle toename in die aantal muskiete wat gashere soek gevind in lokvalle wat met die sintetiese mengsel aas is (13.09) (13.09;13.09) (13.09; Fig. .6D), in vergelyking met kontrolevalle.
Gasheerlokvalle wat buite potensiële gashere tussen broeiplekke en landelike gemeenskappe in Ethiopië geleë is, is gebruik om te bepaal of malariamuskiete koei-urine-reuk as 'n gasheerhabitat-leidraad gebruik. In die afwesigheid van gasheerleidrade, hitte en met of sonder die teenwoordigheid van koei-urine-reuk, is geen muskiete gevang nie (FigureHoe urienreuk S31: Hoë urienlêer, hoë urienreuk S31: Hoë urienlêer 1: Hoë urienlêer 31). aria-muskiete is aangetrek en gevang, alhoewel in klein getalle, onafhanklik van urine-ouderdom (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Addisionele lêer 1: Figuur S3). Daarteenoor het waterkontroles nie malariamuskiete by hoë temperature gevang nie (Addisionele Lêer 1: Figuur S3).
Malariamuskiete verkry en versprei stikstofbevattende verbindings deur kompenserende voeding van koei-urine (dws plasse) om lewensgeskiedenis-eienskappe te verbeter, soortgelyk aan ander insekte [2, 4, 24, 25, 26]. Koei-urine is 'n geredelik beskikbare hernubare hulpbron wat nou geassosieer word met malaria-muskiete en rusplekke vir plantegroei en plase vir plantegroei. .Vroulike muskiete lokaliseer hierdie hulpbron deur reuk en is in staat om die opname van stikstofverbindings in urine te reguleer, insluitend ureum, die belangrikste stikstofkomponent in urine [15, 16]. Afhangende van die vroulike muskiet se fisiologiese toestand, word voedingstowwe in die urine toegewys om die oorlewing van die gasheer, oorlewingsaktiwiteit en oorlewingsaktiwiteit van die vroulike muskiet te verbeter en die oorlewing van die muskiet te verbeter. eienskappe van bloedgevoede individue tydens die eerste gonadotropiese siklus. Daarom speel urinevermenging 'n belangrike voedingsrol vir malaria-vektore wat gesluit is soos ondervoede volwassenes [8], aangesien dit vroulike muskiete die vermoë bied om belangrike stikstofverbindings te verkry deur betrokke te raak by laerisiko-voeding. Hierdie bevinding het beduidende lewens-epidemie-aktiwiteit en verhoging van die vroulike uitset, wat alle vroulike gevolge van epidemie affekteer, kapasiteit.Verder kan hierdie gedrag die teiken van toekomstige vektorbestuurprogramme wees.