पौष्टिक पदार्थांचे संपादन आणि वितरण हे कीटकांच्या चारा आणि जीवनाच्या इतिहासातील वैशिष्ट्यांचे समाकलित करते. जीवनाच्या विविध टप्प्यांवर विशिष्ट पोषकतत्त्वांची कमतरता भरून काढण्यासाठी, कीटक पूरक आहाराद्वारे ही पोषक द्रव्ये मिळवू शकतात, उदाहरणार्थ, कशेरुकाच्या स्रावांना खायला देऊन, डबके म्हणून ओळखल्या जाणार्‍या प्रक्रियेत. चयापचय आणि पुनरुत्पादन या दोन्हीसाठी पोषक.पौष्टिकतेच्या संपादनासाठी गोमूत्रावरील अरेबियन्सिस आंदोलनामुळे जीवन इतिहासाची वैशिष्ट्ये सुधारतात.
ते सुरक्षित असल्याची खात्री करा. अरेबियन्सिस ताज्या, 24-तास, 72-तास आणि 168-तास जुन्या गोमूत्राच्या गंधाकडे आकर्षित झाले होते आणि यजमान-शोधणाऱ्या आणि रक्त खाणाऱ्या (48-तास रक्त खाल्ल्यानंतर) महिलांचे Y-ट्यूब ऑल्फॅक्टोमीटरमध्ये मोजले गेले होते, आणि गर्भवती महिलांसाठी इलेक्ट्रोकॉम्बिनिंग रासायनिक चाचणी केली गेली होती. त्यानंतर चारही वयोगटातील गोमूत्रातील बायोएक्टिव्ह संयुगे ओळखण्यासाठी विश्लेषणाचा वापर करण्यात आला. बायोअॅक्टिव्ह संयुगेच्या सिंथेटिक मिश्रणाचे Y-ट्यूब आणि फील्ड ट्रायल्समध्ये मूल्यांकन करण्यात आले. गोमूत्र आणि त्यातील मुख्य नायट्रोजनयुक्त संयुगे युरियाचा संभाव्य पूरक आहार म्हणून तपासणी करण्यासाठी, मलेरियाच्या रोगनिदानविषयक वैशिष्ट्यांचे मापदंड आणि मादीच्या जीवसृष्टीचे प्रमाण मोजले गेले. आणि गोमूत्र आणि युरिया किती प्रमाणात शोषले गेले याचे मूल्यांकन केले गेले. आहार दिल्यानंतर, मादींचे जगणे, टेथर्ड फ्लाइट आणि पुनरुत्पादनासाठी मूल्यांकन केले गेले.
यजमानाचे रक्त आणि पोषण शोधा.प्रयोगशाळा आणि क्षेत्रीय अभ्यासात, अरब लोक ताज्या आणि वृद्ध गोमूत्राच्या नैसर्गिक आणि कृत्रिम सुगंधाकडे आकर्षित झाले. गरोदर स्त्रिया गोमूत्राच्या प्रतिक्रियांबद्दल उदासीन होत्या. गर्भधारणा करणार्‍या आणि रक्त शोषणार्‍या स्त्रिया या सर्व संसाधने सक्रियपणे शोषून घेतात. उड्डाण, जगण्याची किंवा पुनरुत्पादनासाठी शारीरिक स्थितीचे कार्य.
एनोफिलीस अरेबिनिस गोमूत्राचे संपादन आणि वितरण सुधारित जीवन इतिहास वैशिष्ट्यांसाठी. गोमूत्राचे पूरक आहार दैनंदिन अस्तित्व आणि वेक्टर घनता वाढवून आणि अप्रत्यक्षपणे उड्डाण क्रियाकलाप बदलून वेक्टर क्षमतेवर थेट परिणाम करते आणि म्हणूनच भविष्यातील मॉडेलमध्ये विचार केला पाहिजे.
पोषक तत्वांचे संपादन आणि वितरण हे कीटकांच्या चारा आणि जीवनाच्या इतिहासाची वैशिष्ट्ये एकत्रित करतात [१,२,३]. कीटक अन्न निवडण्यास आणि संपादन करण्यास सक्षम असतात आणि अन्न उपलब्धता आणि पोषक तत्वांच्या आवश्यकतांवर आधारित भरपाई देणारे आहार पार पाडतात [१, ३]. पोषक घटकांचे वितरण जीवन-इतिहासावर अवलंबून असते आणि विविध जीवनाच्या प्रक्रियेसाठी आहाराची गुणवत्ता आणि जीवनाच्या विविध टप्प्यात नेतृत्व करण्याची आवश्यकता असते. 2].विशिष्ट पोषकतत्त्वांची कमतरता भरून काढण्यासाठी, कीटक हे पोषक तत्त्वे पूरक आहाराद्वारे मिळवू शकतात, जसे की चिखल, विविध मलमूत्र आणि कशेरुकांचे स्राव आणि कॅरिअन, डबके म्हणून ओळखली जाणारी प्रक्रिया [२]. जरी विविध प्रकारचे फुलपाखरू आणि पतंगांचे वर्णन पाण्याच्या क्रमाने होते, परंतु इतर प्रजातींचे फुलपाखरू आणि पतंगांचे वर्णन केले जाते. आणि या प्रकारच्या संसाधनांवर आहार दिल्याने आरोग्य आणि इतर जीवन-इतिहास वैशिष्ट्यांवर महत्त्वपूर्ण परिणाम होऊ शकतात [२, ४, ५, ६] ,७]. मलेरिया डास अॅनोफिलीस गॅम्बिया सेन्सू लाटो (sl) हा 'कुपोषित' प्रौढ म्हणून उदयास येतो [८], त्यामुळे पाणी पिण्याची त्याच्या जीवनात महत्त्वाची भूमिका बजावली जाऊ शकते, परंतु या वर्तणुकीचा इतिहास वाढला आहे. या महत्त्वाच्या वाहनातील पोषक तत्वांचे सेवन लक्ष देण्याचे आश्वासन देते कारण याचे महत्त्वाचे महामारीविज्ञान परिणाम होऊ शकतात.
प्रौढ मादी अॅनोफिलीस डासांमध्ये नायट्रोजनचे सेवन कमी उष्मांकाच्या साठ्यामुळे अळ्या अवस्थेतून वाहून नेणे आणि रक्तातील जेवणाचा अकार्यक्षम वापर यामुळे मर्यादित आहे. भक्ष्याचा धोका. वैकल्पिकरित्या, डास कशेरुकाच्या मलमूत्राच्या पूरक आहाराचा वापर करून नायट्रोजनयुक्त संयुगे मिळवू शकतात जे इतर कीटकांद्वारे दर्शविल्याप्रमाणे अनुकूलता आणि उड्डाण क्षमता वाढवतात. आणि वृद्ध गोमूत्र [१२,१३,१४], मनोरंजक आहे. अॅनोफिलीस अरेबिनिस त्याच्या यजमान प्राधान्यांमध्ये संधीसाधू आहे आणि ते गुरांशी जोडण्यासाठी आणि त्यांना खाण्यासाठी ओळखले जाते. गोमूत्र हे नायट्रोजनयुक्त संयुगांनी समृद्ध स्त्रोत आहे, ज्यामध्ये युरियाचे प्रमाण एकूण 50-95% कोयुरीन [1 डब्ल्यूएएन] मध्ये आहे. वयोगटातील, सूक्ष्मजीव 24 तासांच्या आत नायट्रोजनयुक्त संयुगांची जटिलता कमी करण्यासाठी या संसाधनांचा वापर करतात [१५]. अमोनियाच्या जलद वाढीसह, सेंद्रिय नायट्रोजनच्या घटतेशी संबंधित, अल्कलोफिलिक सूक्ष्मजीव (ज्यापैकी अनेक संयुगे डासांना विषारी बनवतात) मादींना थ्राइव्ह होऊ शकतात. 24 तास किंवा त्यापेक्षा कमी वयाचे [13, 14].
या अभ्यासात, यजमान आणि रक्ताने भरलेल्या उत्तरांचा शोध घेण्यात आला. त्याच्या पहिल्या गोनाडोट्रॉपिन चक्रादरम्यान, युरियासह नायट्रोजनयुक्त संयुगे, मूत्र मिश्रणाद्वारे प्राप्त करण्यासाठी अरॅबियन्सिसचे मूल्यांकन केले गेले. पुढे, मादी डासांच्या वाढीच्या संभाव्यतेमध्ये सुधारणा कशी होते याचे मूल्यांकन करण्यासाठी प्रयोगांची मालिका आयोजित केली गेली. मूलतः, ताज्या आणि वृद्ध गोमूत्राच्या वासाचे मूल्यांकन केले गेले की यजमान आणि रक्त-पोषित An साठी विश्वासार्ह संकेत मिळतात की नाही. या संभाव्य पौष्टिक स्त्रोताच्या शोधात, arabiensis ला आढळलेल्या विभेदक आकर्षणामागे रासायनिक सहसंबंध आढळले. कृत्रिम गंध मिश्रणे पुढील व्ही-ओसी-4 ऑर्गेनिक (Volatile) मध्ये ओळखली गेली. प्रयोगशाळेच्या परिस्थितीत मिळालेल्या परिणामांचा विस्तार करणे आणि विविध शारीरिक अवस्थांवर गोवंशीय मूत्र गंधाचा प्रभाव दाखवणे.डासांचे आकर्षण.मिळालेले परिणाम पुष्टी करतात की An.arabiensis जीवन इतिहासाच्या वैशिष्ट्यांवर प्रभाव टाकण्यासाठी पृष्ठवंशीय मूत्रात आढळणारे नायट्रोजनयुक्त संयुगे मिळवते आणि वितरीत करते. या परिणामांवर संभाव्य साथीच्या परिणामांच्या संदर्भात चर्चा केली जाते आणि ते वेक्टर निरीक्षण आणि नियंत्रणासाठी कसे वापरले जाऊ शकतात.
अॅनोफिलीस अरेबिकन्स (डोंगोला स्ट्रेन) 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH आणि 12:12 तास प्रकाश: गडद चक्रावर राखले गेले. अळ्यांचे पालन प्लॅस्टिकच्या ट्रेमध्ये (20 सेमी × 18 सेमी × 7 सेमी) डिस्टिल्ड वॉटर, टेलेल फूड, डब्ल्यूडीई फूड आणि एफडीईने भरलेले होते. 30 मिली कपमध्ये गोळा केले गेले (नोलाटो हर्टिला, Åstorp, SE) आणि नंतर ते बगडॉर्म पिंजऱ्यात (30 सेमी × 30 सेमी × 30 सेमी; मेगाव्ह्यू सायन्स, ताइचुंग, तैवान) मध्ये हस्तांतरित केले गेले. प्रयोगापूर्वी लगेच आहार दिला, किंवा खाली वर्णन केल्याप्रमाणे प्रयोगापूर्वी डिस्टिल्ड वॉटरने रात्रभर उपाशी राहिल्या. फ्लाइट ट्यूब प्रयोगासाठी वापरल्या जाणार्‍या स्त्रियांना पाण्याच्या अ‍ॅड लिबिटमसह फक्त 4-6 तास उपाशी राहावे लागले. त्यानंतरच्या बायोअॅसेससाठी रक्त शोषणारे डास तयार करण्यासाठी, 4 dpe मादींना डिफिल्डिंग सिस्टम (ब्रोहॅबटन, ब्रॉइड, ब्रॉड्स, ब्लड फीड) प्रदान करण्यात आले. Hemotek Discovery Workshops, Acrington, UK). पूर्ण गर्दी असलेल्या मादींना नंतर वैयक्तिक पिंजऱ्यात हस्तांतरित केले गेले आणि खाली वर्णन केल्याप्रमाणे थेट आहार दिला गेला, किंवा खाली वर्णन केलेल्या प्रयोगांच्या 3 दिवस आधी 10% सुक्रोज अॅड लिबिटम. नंतरच्या मादी फ्लाइट ट्यूब बायोअसेसाठी वापरल्या गेल्या आणि प्रयोगशाळेत 46 तास आधी प्रयोगशाळेत हस्तांतरित केल्या गेल्या.
प्रौढ An.Arab महिलांमध्ये लघवी आणि युरियाच्या वापराचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी फीडिंग अॅसेचा वापर करण्यात आला. यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त खाणाऱ्या महिलांना 1% पातळ केलेले ताजे आणि वृद्ध गोमूत्र, युरियाची विविध सांद्रता, आणि दोन नियंत्रणे (10% सुक्रोज आणि पाणी) 48 m-1ml फूड 48 cgyanide रंगात; 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) आहारात जोडले गेले आणि 250 μl मायक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूब्समध्ये 4 × 4 मॅट्रिक्समध्ये पुरवले गेले (Axygen Scientific, Union City, CA, US; आकृती 1A) धार भरा (~3 µl आणि संभाव्य रंग, µ0T रंग आणि संभाव्य रंगांमधील प्रभाव टाळण्यासाठी). एका मोठ्या पेट्री डिशमध्ये 10 डास (12 सेमी व्यास आणि 6 सेमी उंची; सेमाडेनी, ऑस्टरमुंडिजेन, CH; आकृती 1A) पूर्ण अंधारात 25 ± 2 सेमी °C आणि 65 ± 5% सापेक्ष आर्द्रता येथे ठेवा पुढील विश्लेषण होईपर्यंत °C.
यजमान आणि रक्त शोषणाऱ्या मादी अॅनोफिलीस अरेबियनसद्वारे शोषलेले बोवाइन मूत्र आणि युरिया शोधा. फीडिंग ट्रायल (ए) मध्ये, मादी डासांना ताजे आणि वृद्ध गोमूत्र, युरियाची विविध सांद्रता, सुक्रोज (10%), आणि डिस्टिल्ड वॉटर (H2-OsB) आणि मादी-अ‍ॅब-ओएसबी)युक्त आहार देण्यात आला. चाचणी केलेल्या इतर कोणत्याही आहारापेक्षा जास्त सुक्रोज. लक्षात ठेवा की यजमान-शोधणाऱ्या महिलांनी 168-तासांच्या गोमूत्र (B) पेक्षा कमी 72-तास गोमूत्र शोषले. मूत्रातील सरासरी एकूण नायट्रोजन सामग्री (± मानक विचलन) इनसेटमध्ये दर्शविली जाते. यजमान-शोधणाऱ्या (D, F) आणि स्त्री-पुरुषांवर अवलंबून असते. वेगवेगळ्या अक्षरांच्या नावांसह इनहेल्ड व्हॉल्यूम (D, E) एकमेकांपासून लक्षणीयरीत्या भिन्न होते (टुकीचे पोस्ट हॉक विश्लेषण वापरून वन-वे ANOVA; p < 0.05). एरर बार सरासरीच्या मानक त्रुटी (BE) दर्शवतात. सरळ डॅश केलेली रेषा लॉग-लिनियर रिग्रेशन लाइन (F, G) दर्शवते.
शोषलेले अन्न सोडण्यासाठी, डासांना वैयक्तिकरित्या 230 μl डिस्टिल्ड वॉटर असलेल्या 1.5 मिली मायक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये ठेवण्यात आले होते आणि डिस्पोजेबल पेस्टल आणि कॉर्डलेस मोटर (VWR इंटरनॅशनल, लंड, SE) वापरून टिश्यू विस्कळीत करण्यात आले होते, त्यानंतर सेंट्रीफ्यूगेशन 1010 μl (10 μl μl) वर सुपरकेंद्रित होते. 96-वेल मायक्रोप्लेट (सिग्मा-अल्ड्रिच) मध्ये हस्तांतरित केले गेले आणि शोषकता (λ620) स्पेक्ट्रोफोटोमीटर-आधारित मायक्रोप्लेट रीडर (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm वापरून निर्धारित केले गेले. वैकल्पिकरित्या, डास जमिनीत ग्राउंड होते ज्यामध्ये 1,00 मिली लिटर पाण्यात 1,00 मिली लिटर डिस्प्ले केले गेले. स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विश्लेषण (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). आहाराचे प्रमाण मोजण्यासाठी, 0.2 µl ते 2.4 µl 1 mg ml-1 mg ml-1 xylnte ची contical xylnet, cylnte ज्ञात ओपीएनटी, 0.2 µl ते 2.4 µl प्राप्त करण्यासाठी अनुक्रमांक डायल्युशनद्वारे मानक वक्र तयार केले गेले. प्रत्येक डास किती अन्न घेतो हे निर्धारित करण्यासाठी.
व्हॉल्यूम डेटाचे एकमार्गी विश्लेषण (ANOVA) वापरून विश्लेषण केले गेले ज्यानंतर Tukey च्या पोस्ट हॉक जोडीने तुलना केली गेली (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007). रेखीय रीग्रेशन विश्लेषणे वर्णन केलेल्या प्रतिक्रिया आणि एकाग्रता-अवलंबित रक्तामध्ये तुलना केली जाते. squitoes (Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US साठी GraphPad Prism v8.0.0).
प्रत्येक वयोगटातील अंदाजे 20 μl लघवीचे नमुने Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 जाळी, Sigma Aldrich) वर बांधलेले होते आणि टिन कॅप्सूलमध्ये (8 mm × 5 mm) कॅप्सूलमध्ये समाविष्ट केले होते. कॅप्सूल ज्वलन chaber, CH/CHM000m0 (Combustion chamber) मध्ये घालण्यात आले होते. फिशर सायंटिफिक, वॉल्थम, एमए, यूएस) निर्मात्याच्या प्रोटोकॉलनुसार ताज्या आणि वृद्ध मूत्रातील नायट्रोजन सामग्री निर्धारित करण्यासाठी. एकूण नायट्रोजन (g N l-1) मानक म्हणून वापरल्या जाणार्‍या ज्ञात युरिया सांद्रतेच्या आधारावर परिमाणित केले गेले.
यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त शोषणाऱ्या महिलांच्या जगण्यावर आहाराचा काय परिणाम होतो याचे मूल्यांकन करण्यासाठी, डासांना स्वतंत्रपणे मोठ्या पेट्री डिशमध्ये (12 सेमी व्यास आणि 6 सेमी उंची; सेमाडेनी) झाकणात जाळीने झाकलेले छिद्र (3 सेंटीमीटर व्यास) मध्ये ठेवण्यात आले होते. गोमूत्र, युरियाचे चार प्रमाण, आणि दोन नियंत्रणे, 10% सुक्रोज आणि पाणी. प्रत्येक आहार 5 मिली सिरिंज (थर्मो फिशर सायंटिफिक, गोथेनबर्ग, डिस्प्लेड 1 वर) मध्ये घातला (डीएबी डेंटल एबी, अपलँड्स व्हॅस्बी, एसई) वर पिपेट केला गेला. अ).रोज तुमचा आहार बदला. वर वर्णन केल्याप्रमाणे प्रयोगशाळेत ठेवा. वाचलेल्या डासांची दिवसातून दोनदा मोजणी केली गेली, तर शेवटचा डास मरेपर्यंत मृत डास टाकून दिले गेले (n = 40 प्रति उपचार).विविध आहारांवर खाल्लेल्या डासांच्या जगण्याचे सांख्यिकीय विश्लेषण केले गेले. आहार दरम्यान s (IBM SPSS सांख्यिकी 24.0.0.0).
Attisano et al. [17] वर आधारित सानुकूल मच्छर उडणारी गिरणी, समोर आणि मागील पॅनेलशिवाय (10 सेमी रुंद x 10 सेमी लांब x 10 सेमी उंच) 5 मिमी जाड स्पष्ट ऍक्रेलिक पॅनेलने बनविलेले (चित्र 3: शीर्ष). s 9 सेमी अंतरावर असलेल्या निओडीमियम मॅग्नेटच्या जोडीमध्ये लटकलेल्या एका कीटक सुईला चिकटवले जाते. समान सामग्री (6.5 सें.मी. एल) बनवलेल्या क्षैतिज नळीने उभ्या नळीचे दुभाजक करून एक टेथर्ड हात आणि एक हात तयार केला ज्यामध्ये अॅल्युमिनियम फॉइलचा एक छोटासा तुकडा लाइटिंग सिग्नल म्हणून वाहून गेला.
24-तास उपाशी असलेल्या मादींना वरील आहार 30 मिनिटे संयम करण्यापूर्वी देण्यात आला होता. पूर्णतः खाऊ घातलेल्या मादी डासांना 2-3 मिनिटांसाठी बर्फावर वैयक्तिकरित्या भूल देण्यात आली आणि मेण (जोएल स्वेन्सन्स वॅक्सफॅब्रिक एबी, मुन्का लजंगबी) आणि टिट्यूबिंग आर्म टू द ट्युबिंग्सच्या सहाय्याने कीटकांच्या पिनला जोडले गेले. मिल. प्रति फ्लाइट रिव्होल्यूशन कस्टम-बिल्ट डेटा लॉगरद्वारे रेकॉर्ड केले गेले, नंतर PC-Lab 2000™ सॉफ्टवेअर (v4.01; Velleman, Gavere, BE) वापरून संग्रहित आणि प्रदर्शित केले गेले. फ्लाइट मिल एका हवामान-नियमित खोलीत ठेवली गेली (12 h:12 h, प्रकाश: गडद, ​​25 ± 6 °C± 25 ° C± 2 R5).
फ्लाइट अ‍ॅक्टिव्हिटीच्या पॅटर्नची कल्पना करण्यासाठी, एकूण अंतर (m) आणि सलग उड्डाण क्रियाकलापांची एकूण संख्या 24-तासांच्या कालावधीत प्रति तास मोजली गेली. या व्यतिरिक्त, वैयक्तिक महिलांनी उडवलेल्या सरासरी अंतरांची उपचारांमध्ये तुलना केली गेली आणि एकमार्गी ANOVA आणि Tukey चे पोस्ट हॉक विश्लेषण वापरून विश्लेषण केले गेले. , तर उपचार हा एक स्वतंत्र घटक आहे. याव्यतिरिक्त, फेऱ्यांची सरासरी संख्या 10-मिनिटांच्या वाढीमध्ये मोजली जाते.
An.arabiensis च्या पुनरुत्पादक कार्यक्षमतेवर आहाराच्या परिणामाचे मूल्यांकन करण्यासाठी, रक्त संकलनानंतर सहा माद्या (4 dpe) थेट बगडॉर्म पिंजऱ्यात (30 cm × 30 cm × 30 cm) हस्तांतरित केल्या गेल्या आणि नंतर वर वर्णन केल्याप्रमाणे 48 तासांसाठी प्रायोगिक आहार प्रदान केला. आहार नंतर काढून टाकण्यात आला आणि स्पॉनिंग कप (30 ते 20 मिली लिटर पाण्यात 30 मिली लिटर पाण्यात भरले गेले); दिवस 48 तासांसाठी, दर 24 तासांनी बदलतो. प्रत्येक आहारातील पथ्ये 20-50 वेळा पुनरावृत्ती करा. प्रत्येक प्रायोगिक पिंजऱ्यासाठी अंडी मोजली गेली आणि रेकॉर्ड केली गेली. अंड्यांचे उपनमुने एक Dialux-20, Wetzlar, Wetzlar, 200, 200 प्रति आहार) वापरून वैयक्तिक अंड्यांच्या सरासरी आकार आणि लांबीच्या फरकाचे मूल्यांकन करण्यासाठी वापरले गेले. Leica कॅमेरा (DFC) 320 R2;Leica Microsystems Ltd., DE).उर्वरित अंडी 24 तासांसाठी मानक संगोपन परिस्थितीत हवामान-नियंत्रित खोलीत ठेवण्यात आली होती आणि वर वर्णन केल्याप्रमाणे अलीकडेच उदयास आलेल्या 1ल्या इंस्टार लार्व्हाचे (n ≥ 200 प्रति आहार) उपनमुने मोजण्यात आले होते. अंड्यांची संख्या आणि आकार यांची तुलना केली गेली आणि अंडी आणि A-larvaana उपचारानंतर एक अंडी आणि A-larvaa उपचाराचा वापर करून अंडी आणि आकाराची तुलना केली गेली. sis (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
झेबू गुरेढोरे, अरसी रेस यांच्याकडून गोळा केलेल्या नमुन्यांमधून ताज्या (1 तास सॅम्पलिंगनंतर), 24 तास, 72 तास आणि 168 तास वयोगटातील हेडस्पेस वाष्पशील मूत्र गोळा करण्यात आले. सोयीसाठी, गाई अजूनही कोठारात असताना लघवीचे नमुने पहाटे गोळा करण्यात आले. प्रत्येक मूत्राचे 10 मिली नमुने 100 मिली. लाल ते वैयक्तिक पॉलिमाइड बेकिंग पिशव्या (टॉपपिट्स कॉफ्रेस्को, फ्रिस्चॅल्टेप्रोडक्टे जीएमबीएच अँड कंपनी, मिंडेन, डीई) झाकण असलेल्या 3 एल पॉलिमाइडमध्ये विनाइल क्लोराईड प्लास्टिक ड्रममध्ये. प्रत्येक बोवाइन मूत्र नमुन्यातील हेडस्पेस वाष्पशील पदार्थ एकतर थेट (ताजे) गोळा केले गेले (ताजे) किंवा प्रत्येक खोलीत 2 तास तापमान, 2 तास आणि 2 तास नंतर ine नमुना प्रत्येक वयोगटाचा प्रतिनिधी होता.
हेडस्पेस व्होलाटिल्स कलेक्शनसाठी, डायफ्राम व्हॅक्यूम पंप (KNF Neuberger, Freiburg, DE, DE, DE, DE, DE, 2000000) पॉलीअमाइड पिशवीद्वारे सक्रिय कार्बन-फिल्टर्ड गॅस प्रवाह (100 मिली मि-1) 2.5 तासांसाठी शोषक स्तंभात प्रसारित करण्यासाठी बंद-लूप प्रणाली वापरली गेली. ऑर्प्शन कॉलम टेफ्लॉन टयूबिंग (5.5 सेमी x 3 मिमी आयडी) ने बनविला गेला होता ज्यामध्ये 35 मिलीग्राम पोरापाक क्यू (50/80 जाळी; वॉटर्स असोसिएट्स, मिलफोर्ड, एमए, यूएस) काचेच्या लोकर प्लगमध्ये होते. वापरण्यापूर्वी, स्तंभ 1 मिली-एम-एल-डीईएम, रीडिस्टिल्ड, एमएलडीई (पीडीएम) आणि रीडिस्टिल्ड (पीएमएलएक्स) ने फ्लश केला होता. एंटेन (99.0% शुद्ध सॉल्व्हेंट जीसी ग्रेड, सिग्मा अल्ड्रिच). शोषलेले वाष्पशील 400 μl पेंटेनसह इल्यूट केले गेले. हेडस्पेस संग्रह एकत्र केले गेले आणि नंतर पुढील विश्लेषणासाठी वापरल्या जाईपर्यंत -20 डिग्री सेल्सिअस तापमानात साठवले गेले.
यजमान शोधणारे आणि रक्त खाणारे An. Headspace चंचल अर्क, 24-h, 72-h, आणि 168-h-वृद्ध लघवीचे वर्तणुकीशी प्रतिसाद, Arabidopsis डासांच्या अस्थिर अर्कांसाठी विश्लेषण केले गेले. An च्या घर शोधण्याच्या क्रियाकलापाचा कालावधी.अरब [१९].एक ग्लास ट्यूब ऑल्फॅक्टोमीटर (80 सेमी × 9.5 सेमी आयडी) वरून 3 ± 1 lx लाल दिव्याने प्रकाशित होते. चारकोल फिल्टर केलेला आणि आर्द्रतायुक्त हवा प्रवाह (25 ± 2 °C, 65 ± 65 सेमी ± 65 सेमी) सापेक्ष तापमानात 3 ± 1 lx लाल दिवा होता. ir ला स्टेनलेस स्टीलच्या जाळीच्या पडद्यांच्या मालिकेतून पार केले जाते, ज्यामुळे एक लॅमिनार प्रवाह आणि एकसमान प्ल्यूम रचना तयार होते. डेंटल टॅम्पन डिस्पेंसर (4 सेमी × 1 सेमी; L:D; DAB डेंटल एबी), ऑल्फॅक्टोमीटरच्या विंडवर्ड टोकाला 5 सेमी कॉइलमधून निलंबित केले जाते, प्रत्येक हेड 50 μl 1 मिनिटांत स्टिम्युलेटर किंवा स्टिमुलसेटर बदलते. , diluted 1:10, एक उत्तेजक म्हणून वापरला गेला. नियंत्रण म्हणून समान प्रमाणात पेंटेनचा वापर करण्यात आला. वैयक्तिक यजमान शोधणारे किंवा रक्त शोषणारे डास प्रयोग सुरू होण्याच्या 2-3 तास अगोदर स्वतंत्रपणे सोडलेल्या पिंजऱ्यांमध्ये ठेवण्यात आले होते. रिलीझ पिंजरा डाउनविंडच्या बाजूला ठेवण्यात आला होता आणि नंतर olfactometer आणि 1 ची परवानगी दिली गेली होती. सोडण्यासाठी पिंजऱ्याचा झडपा उघडण्यात आला. उपचार किंवा नियंत्रणासाठी आकर्षण हे सोडल्याच्या 5 मिनिटांच्या आत स्त्रोताच्या संपर्कात आलेल्या डासांचे प्रमाण म्हणून विश्लेषित केले गेले. प्रत्येक हेडस्पेस वाष्पशील अर्क आणि नियंत्रण किमान 30 वेळा प्रतिरूपित केले गेले आणि कोणत्याही एका दिवसाचे परिणाम टाळण्यासाठी, प्रत्येक दिवशी सारख्याच उपचारांवर आणि नियंत्रणाच्या तपासणीसाठी रक्त तपासणी आणि नियंत्रणे तपासल्या गेल्या. ic विरुद्ध हेडस्पेस सेटचे विश्लेषण नाममात्र लॉजिस्टिक रीग्रेशन वापरून केले गेले आणि त्यानंतर विषम गुणोत्तरांसाठी जोडीने तुलना केली गेली (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
एनचा स्पॉनिंग प्रतिसाद. ताज्या आणि वृद्ध गोमूत्रापासून काढलेल्या हेडस्पेस अर्कांचे बगडॉर्म पिंजऱ्यांमध्ये विश्लेषण केले गेले (30 सेमी × 30 सेमी × 30 सेमी; मेगाव्ह्यू सायन्स). 20 मिली डिस्टिल्ड वॉटरने भरलेले प्लास्टिक कप (30 मिली; नोलाटो हर्टिला) 4 सेमीच्या कोपऱ्यात कोपरा आणि कोपऱ्यात 4 सें.मी. .ट्रीटमेंट कप प्रत्येक हेडस्पेस अर्कच्या 10 μl सह 1:10 डायल्युशनमध्ये समायोजित केले गेले. कंट्रोल कप समायोजित करण्यासाठी समान प्रमाणात पेंटेन वापरण्यात आले. प्रत्येक प्रयोगादरम्यान उपचार आणि नियंत्रण कपची अदलाबदल केली गेली ज्यामुळे स्थितीचे परिणाम नियंत्रित केले गेले. दहा रक्ताने भरलेल्या मादींना ZT 9-11 येथे प्रायोगिक पिंजऱ्यांमध्ये सोडण्यात आले आणि नंतर कप 2 तासांमध्ये spculning फॉर्ममध्ये spculning फॉर्म 4 कॅल्यूला फॉर्म केले गेले. : (उपचार कपमध्ये घातलेल्या अंड्यांची संख्या – कंट्रोल कपमध्ये घातलेल्या अंड्यांची संख्या)/(एकूण अंडी घालण्याची संख्या).प्रत्येक उपचार 8 वेळा पुनरावृत्ती होते.
मादी An.arabiensis चे गॅस क्रोमॅटोग्राफिक आणि इलेक्ट्रॉन अँटेना पॅटर्न डिटेक्शन (GC-EAD) विश्लेषण पूर्वी वर्णन केल्याप्रमाणे केले गेले [२०]. थोडक्यात, ताज्या हेडस्पेस वाष्पशील अर्कांना Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA) सह विभक्त केले गेले. id, 0.25 μm फिल्म जाडी, Agilent तंत्रज्ञान).आणि वृद्धत्वाचा लघवी. हायड्रोजनचा वापर मोबाइल फेज म्हणून 45 सेमी s-1 च्या सरासरी रेखीय प्रवाह दरासह केला गेला. प्रत्येक नमुना (2 μl) 225 °C च्या इनलेट तापमानासह स्प्लिटलेस मोडमध्ये 30 सेकंदांसाठी इंजेक्ट करण्यात आला. GC ओव्हन तापमान 35 °C (3 °C ते 3 मिनिटे 01 मिनिट होल्ड) पर्यंत प्रोग्राम केले गेले. -1.GC एफ्लुएंट स्प्लिटरमध्ये, 4 psi नायट्रोजन जोडला गेला आणि 1:1 ने Gerstel 3D/2 लो डेड व्हॉल्यूम क्रॉस (Gerstel, Mülheim, DE) मध्ये फ्लेम आयनीकरण डिटेक्टर आणि EAD मध्ये विभाजित केला गेला. EAD साठी GC एफ्लुएंट केशिका Gerstel 2°C, O5+C तापमानात Gerstel 3D/2 कमी डेड व्हॉल्यूम क्रॉसमध्ये पार केली गेली. ट्यूब (10 सेमी × 8 मिमी), जिथे ती कार्बन-फिल्टर केलेली, आर्द्रतायुक्त हवा मिसळली होती (1.5 l min−1). अँटेना ट्यूबच्या आउटलेटपासून 0.5 सेमी अंतरावर ठेवण्यात आला होता. प्रत्येक वैयक्तिक डासाची एक प्रतिकृती होती, आणि यजमान शोधणार्‍या डासांसाठी, प्रत्येक नमुन्याचे किमान तीन वय होते.
एकत्रित GC आणि मास स्पेक्ट्रोमीटर (GC-MS; 6890 GC आणि 5975 MS; Agilent Technologies) वापरून ताज्या आणि वृद्ध गोवंश मूत्राच्या हेडस्पेस संग्रहातील बायोएक्टिव्ह यौगिकांची ओळख GC-EAD विश्लेषणामध्ये अँटेनल प्रतिसाद प्राप्त करण्यासाठी, GC-EAD विश्लेषणामध्ये E-7 E-VP इम्पॅक्ट इम्पॅक्ट मोडमध्ये कार्यरत होते. 5MS UI-कोटेड फ्यूज्ड सिलिका केशिका स्तंभ (60 m × 0.25 मिमी आतील व्यास, 0.25 μm फिल्म जाडी) हेलियमचा वापर करून मोबाइल फेज म्हणून 35 सेमी s-1.A 2 μl नमुना सरासरी रेखीय प्रवाह दरासह इंजेक्‍टर वापरून इंजेक्‍टरद्वारे इंजेक्‍ट केले गेले. कस्टम लायब्ररी आणि NIST14 लायब्ररी (Agilent) च्या तुलनेत वेळ (Kovát इंडेक्स) आणि मास स्पेक्ट्रा. ओळखलेल्या संयुगे अस्सल मानकांचे इंजेक्शन देऊन पुष्टी केली गेली (अतिरिक्त फाइल 1: तक्ता S2). प्रमाणीकरणासाठी, हेप्टाइल एसीटेट (10 ng, 99.8%) एक्सटेर्नल केमिकलमध्ये एक्सटर्नल मानक होते.
यजमान शोधणारे आणि रक्त शोषणारे Ans.arabiensis यांना आकर्षित करण्यासाठी ताजे आणि वृद्ध मूत्रात ओळखल्या जाणार्‍या बायोएक्टिव्ह संयुगे असलेल्या सिंथेटिक गंध मिश्रणाच्या परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करणे, वरील प्रमाणेच ऑल्फॅक्टोमीटर आणि प्रोटोकॉल वापरून. सिंथेटिक मिश्रणाने रचना आणि मिश्रित मिश्रित मिश्रित मिश्रण 4 च्या मिश्रणाची नक्कल केली. तास, 48-तास, 72-तास, आणि 168-तास वृद्ध मूत्र (आकृती 5D-G; अतिरिक्त फाइल 1: तक्ता S2). विश्लेषणासाठी, पूर्णपणे कृत्रिम मिश्रणाच्या 1:100 पातळीकरणाचे 10 μl वापरा, ज्याचा एकूण रिलीझ रेट ऍप 40-40-40-4-1 एवढा असतो. यजमान आणि रक्त शोषणाऱ्या डासांसाठी. त्यानंतर, संपूर्ण मिश्रणावर चाचणी केली जाते, ज्यामध्ये संपूर्ण मिश्रणातील एकल संयुगांचे वजाबाकीचे मिश्रण काढून टाकले जाते. यजमान आणि रक्त-पोषित उत्तरांकडून प्रतिसाद शोधा. अरब वि सिंथेटिक आणि वजाबाकी मिश्रणांचे विश्लेषण केले गेले. v14.0.0, SAS Institute Inc.).
गोमूत्र हे मलेरियाच्या डासांच्या निवासस्थानाचे संकेत म्हणून काम करू शकते का याचे मूल्यांकन करण्यासाठी, ताजे आणि वृद्ध गोमूत्र, वर वर्णन केल्याप्रमाणे गोळा केले गेले आणि पाणी 3 लीटर बादल्या (100 मिली) मध्ये ठेवले आणि यजमान आमिष सापळ्यात ठेवले.(BG-HDT आवृत्ती; BioGents, Regensburg, DE). कुरणात 50 मीटर अंतरावर दहा सापळे, गाव समुदायापासून 400 मीटर अंतरावर (सिले, इथिओपिया, 5°53´24´N, 37°29´24´E) आणि कोणतेही गुरे नाहीत, कायम प्रजनन ग्राउंडवर आणि खेड्यांमध्ये पाच सापळे उष्णतेने पसरलेले होते. त्यांना गरम न करता सोडण्यात आले. प्रत्येक उपचाराचे ठिकाण एकूण पाच रात्री फिरवले जाते. वेगवेगळ्या वयोगटातील लघवीच्या सापळ्यात पकडलेल्या डासांच्या संख्येची तुलना लॉजिस्टिक रिग्रेशन वापरून बीटा द्विपदीय वितरण (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) सह केली गेली.
माकी, ओरोमिया प्रदेश, इथिओपिया शहराजवळील मलेरिया-स्थानिक गावात (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; आकृती 6A). हा अभ्यास ऑगस्टच्या मध्य आणि सप्टेंबरच्या मध्यात वार्षिक इनडोअर हंगामापूर्वी आयोजित करण्यात आला होता. अभ्यासासाठी (चित्र 6A) गावाच्या सीमेवर असलेल्या भागांची निवड करण्यात आली होती (चित्र 6A). घरे निवडण्यासाठी वापरलेले निकष असे होते: घरात कोणत्याही प्राण्यांना परवानगी नाही, घरात स्वयंपाक करण्यास (सरपण किंवा कोळसा काढण्याची) परवानगी नाही (किमान चाचणी कालावधीत), आणि जास्तीत जास्त दोन रहिवासी असलेली घरे, कीटकनाशके झोपतात.उपचारित मच्छरदाणी अंतर्गत. नैतिक मान्यता संस्थात्मक संशोधन नैतिकता पुनरावलोकन मंडळाने (IRB/022/2016) फॅकल्टी ऑफ नॅचरल सायन्सेस (CNS-IRB), आदिस अबाबा विद्यापीठाने मंजूर केली आहे, वर्ल्ड मेडिकल असोसिएशनने स्थापन केलेल्या मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार, हेलसिंकी हेलसिन्स्कीच्या एक्सटेन्शन हाऊसचे हेलसिंग सहाय्यक कर्मचारी होते. संपूर्ण प्रक्रियेला जिल्हा आणि प्रभाग ('केबेले') स्तरावरील स्थानिक प्रशासनाकडून मान्यता दिली जाते. प्रायोगिक डिझाइनमध्ये 2 × 2 लॅटिन स्क्वेअर डिझाइनचे अनुकरण करण्यात आले, ज्यामध्ये सिंथेटिक मिश्रण आणि नियंत्रणे पहिल्या रात्री जोडलेल्या घरांना नियुक्त केली गेली आणि पुढच्या प्रायोगिक रात्री घरांमध्ये अदलाबदल केली गेली. ही प्रक्रिया दहा वेळा पुनरावृत्ती झाली. याशिवाय, गृह क्रियाकलाप सेट करण्यासाठी, सी डीसी सेट अप करण्यासाठी, पाच सेट अप करण्यासाठी सेट केले गेले. दिवसाच्या एकाच वेळी फील्ड चाचणीच्या सुरूवातीस, मध्य आणि शेवटी रात्री.
सहा बायोएक्टिव्ह संयुगे असलेले सिंथेटिक मिश्रण हेप्टेन (97.0% सॉल्व्हेंट जीसी ग्रेड, सिग्मा अल्ड्रिच) मध्ये विरघळले गेले आणि कॉटन विक डिस्पेंसर [२०] वापरून 140 एनजी एच-1 वर सोडण्यात आले. विक डिस्पेंसरने सर्व संयुगे स्थिर प्रमाणात सोडण्याची परवानगी दिली. पुढील 12 तास नियंत्रणासाठी 12 तास वापरण्यात आले. सेंटर्स फॉर डिसीज कंट्रोल अँड प्रिव्हेंशन (CDC) प्रकाश सापळा (जॉन डब्ल्यू. हॉक कंपनी, गेनेसविले, FL, US; आकृती 6A) चे ry पॉइंट. सापळे जमिनीपासून 0.8 - 1 मीटर उंचीवर, पलंगाच्या पायथ्याजवळ लटकले होते आणि एक स्वयंसेवक उपचार न केलेल्या डासांच्या खाली झोपला होता. लिंग आणि शारीरिक स्थिती द्वारे ed (अनफेड, फेड, अर्ध-गर्भवती आणि गर्भवती [21] नंतर ए. गॅम्बिया sl. कॉम्प्लेक्सचे सदस्य म्हणून ओळखल्या जाणार्‍या प्रजाती ओळखण्यासाठी पॉलिमरेझ चेन रिअॅक्शन (PCR) विश्लेषण वापरून तपासणी केली गेली. अवलंबित व्हेरिएबल आणि उपचार (सिंथेटिक मिश्रण विरुद्ध नियंत्रण) निश्चित प्रभाव होता (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.).येथे, आम्ही संभाव्य गुणोत्तर चाचणीतून χ2 आणि p-मूल्यांचा अहवाल देतो.
ते सुरक्षित आहे की नाही याचे मूल्यांकन करा. अरेबिएन्सिस मूत्र, त्याचा मुख्य नायट्रोजन स्त्रोत, युरिया, थेट आहार देऊन, प्रशासनाच्या 48 तासांच्या आत, 4 दिवसांनंतर (dpe) यजमान-शोधक आणि रक्त-पोषित महिला आहार चाचण्या (चित्र 1A) मिळविण्यात सक्षम होते. यजमान-शोधणाऱ्या आणि रक्त शोषणाऱ्या दोन्ही महिलांपेक्षा (कोणत्याही आहारात जास्त प्रमाणात पाणी शोषणाऱ्या किंवा 4 पेक्षा जास्त) ) = 20.15, p < 0.0001 आणि F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, अनुक्रमे; Fig. 1B,C). शिवाय, यजमान शोधणार्‍या स्त्रिया 168 तासांच्या मूत्राच्या तुलनेत 72 तासांत कमी लघवी करतात, 168 तासांच्या महिलांच्या आहारात F.W-होस्टिंग आहार (F.W) असतो. 10% सुक्रोज (F(10,813) = 15.72, p <0.0001; आकृती 1D) पासून वेगळे करता येण्यासारखे नसताना, इतर सर्व सांद्रता आणि पाण्याच्या तुलनेत 2.69 mM वर युरियाचे लक्षणीय प्रमाण जास्त प्रमाणात शोषले गेले. हे विरुद्ध होते, स्त्रियांच्या प्रतिसादाच्या विरूद्ध, ज्यांना रक्त-संसर्गयुक्त आहारापेक्षा जास्त प्रमाणात रक्ताभिसरण होते. पाणी, जरी 10% पेक्षा कमी सुक्रोज (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; आकृती 1.1E). शिवाय, दोन शारीरिक अवस्थांची तुलना करताना, फ्लेबोटोमाइज्ड मादींनी यजमानापेक्षा जास्त युरिया शोषून घेतला आणि सर्वात कमी समान प्रमाणात महिला शोधत होत्या. उच्च सांद्रता (F(1,953)= 78.82, p <0.0001;अंजीर. 1F, G). युरियायुक्त आहाराच्या सेवनाने इष्टतम मूल्ये (Fig. 1D,E) असल्याचे दिसून आले, दोन्ही शारीरिक अवस्थांमधील महिलांना युरियाच्या सांद्रतेच्या संपूर्ण श्रेणीमध्ये शोषलेल्या युरियाचे प्रमाण लॉग-लाइनर फॅशनमध्ये सुधारण्यात सक्षम होते (Fig1)..तसेच, मूत्र शोषून घेतलेल्या प्रमाणाचे नियमन करून डास त्यांच्या नायट्रोजन शोषणावर नियंत्रण ठेवतात, कारण लघवीतील नायट्रोजनचे प्रमाण शोषलेल्या प्रमाणात दिसून येते (आकृती 1B, C आणि B इनसेट).
यजमान शोधणार्‍या आणि रक्त शोषणार्‍या डासांच्या जगण्यावर मूत्र आणि युरियाच्या परिणामांचे मूल्यांकन करण्यासाठी, महिलांना चारही वयोगटातील (ताजे, 24 तास, 72 तास, आणि 168 तास पोस्ट-पॉझिशन) लघवी देण्यात आली आणि युरिया सांद्रताची श्रेणी, तसेच डिस्टिल्ड वॉटर आणि sucrose20% नियंत्रण (हे sucrose20% नियंत्रण). लिसिसने दर्शविले की आहाराचा यजमान शोधणार्‍या महिलांच्या एकूण जगण्यावर महत्त्वपूर्ण प्रभाव पडतो (मूत्र: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; युरिया: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Fig. 32, Fig. df = 5, p < 0.0001; युरिया: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; आकृती 2D,E). सर्व प्रयोगांमध्ये, स्त्रियांनी लघवी, युरिया, आणि पाण्याचा आहार दिला, स्त्रियांना f-f-f-s-f-s-f-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-s-fed-fed-fed-fed-fed-fed-s-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-s-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed-fed (f-2) च्या तुलनेत स्त्रियांना लघवी, युरिया आणि पाणी यांचा आहार दिला. ale मूत्राने जगण्याचे वेगवेगळे दर प्रदर्शित केले, ज्यांना 72-h शिळे लघवी (p = 0.016) दिले गेले त्यांना जगण्याची सर्वात कमी संभाव्यता आहे (चित्र 2B). शिवाय, यजमान-शोधणार्‍या महिलांनी 135 mM युरिया दिलेले पाणी नियंत्रण (p गोमूत्र आणि युरिया खाणाऱ्या यजमान आणि रक्त शोषणाऱ्या मादी अॅनोफिलीस अरेबिनिसचे जगणे. बायोअॅसे (ए) मध्ये, मादी डासांना ताजे आणि वृद्ध गोमूत्र, युरियाची विविध सांद्रता, सुक्रोज (10%) आणि डिस्टिल्ड वॉटर (H2O) यांचा समावेश असलेला आहार देण्यात आला. सर्व महिलांना लघवी (बी, डी) आणि युरिया (सी, ई), आणि नियंत्रणे, सुक्रोज आणि पाणी, मृत होईपर्यंत दर 12 तासांनी स्क्विटोज नोंदवले गेले.
24-तासांच्या कालावधीत फ्लाइट मिल चाचणीमध्ये निर्धारित केलेले एकूण अंतर आणि फेऱ्यांची संख्या यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त शोषणाऱ्या डासांमध्ये भिन्न आहे, ज्यांनी एकूण उड्डाण क्रियाकलाप कमी दर्शविला (चित्र 3). यजमान शोधणारे डास ज्याने ताजे आणि वृद्ध मूत्र किंवा सुक्रोज आणि पाणी दिले. ताज्या फ्लाइट पॅटर्नवर अधिक सक्रिय, मादी फ्लाइट पॅटर्नवर अधिक सक्रिय आहेत. 24- आणि 168-तास वयोगटातील डास ज्यांनी लघवीला खायला दिले, त्यांनी वेगवेगळ्या फ्लाइट पॅटर्नचे प्रदर्शन केले आणि ते प्रामुख्याने दैनंदिन होते. सुक्रोज किंवा 72-तास लघवी देणार्‍या मादी डासांनी 24-तासांच्या कालावधीत क्रियाशीलता दर्शविली, तर पाणी पुरवणार्‍या स्त्रिया उच्च पातळीवरील क्रियाकलापांच्या दरम्यान जास्त सक्रिय होत्या. रात्री उशिरा आणि पहाटे, ज्यांनी 72-तास-वयोगटातील लघवीचे सेवन केले, त्यांनी 24 तासांहून अधिक क्रियाकलापांमध्ये स्थिर घट अनुभवली (आकृती 3).
गोमूत्र आणि युरिया खाणारी शिकारी रक्त शोषणारी मादी अॅनोफिलीस अरेबिनिसची उड्डाण कामगिरी. फ्लाइट मिल चाचणीत, मादी डासांना ताजे आणि वृद्ध गोमूत्र, युरिया, सुक्रोज (10%) आणि डिस्टिल्ड वॉटर (H2O) ची विविध सांद्रता (H2O) गोमूत्र, घुटमळणारे किंवा घुटमळणारे, मोकळेपणाने फिरवले जाते. शोधत असलेल्या (डावीकडे) आणि रक्त शोषणाऱ्या (उजवीकडे) मादी, २४ तासांच्या कालावधीत प्रत्येक आहारासाठी प्रति तास एकूण अंतर आणि फ्लाइटची संख्या नोंदवली गेली (गडद: राखाडी; हलका: पांढरा). सरासरी अंतर आणि बाउट्सची सरासरी संख्या सर्केडियन क्रियाकलाप ग्राफच्या उजवीकडे दर्शविली गेली आहे. त्रुटी पट्ट्या क्षुल्लक मजकूराची मानक त्रुटी दर्शवितात. सांख्यिकीय मजकूर पहा.
सर्वसाधारणपणे, यजमान-शोधणाऱ्या महिलांच्या एकूण उड्डाण क्रियाकलापाने 24-तासांच्या कालावधीत फ्लाइटच्या अंतराप्रमाणेच एक पॅटर्न फॉलो केला. सरासरी उड्डाण अंतर खाल्लेल्या आहारामुळे लक्षणीयरीत्या प्रभावित झाले (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), आणि यजमान-शोधणाऱ्या महिलांनी 72 तासांच्या जास्त अंतराच्या तुलनेत f1wp जास्त अंतर घेतले. ), आणि सुक्रोज-फेड डास ताजे (p = 0.022) आणि 24-ता-वृद्ध लघवी (p = 0.022) खालेल्या डासांपेक्षा जास्त काळ उडत होते. मूत्र आहाराद्वारे वर्णन केलेल्या उड्डाण क्रियाकलाप पॅटर्नच्या विरूद्ध, युरिया-फेड यजमान-शोधणार्‍या स्त्रिया, फ्लाइटिंग कालावधीच्या अर्ध्या टप्प्यात (पी 2) गडद क्रियाकलाप दर्शवितात. 3).क्रियाकलापांचे स्वरूप समान असले तरी, यजमान-शोधणाऱ्या महिलांनी युरिया खाल्ल्याने शोषलेल्या एकाग्रतेवर (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001) आधारीत उड्डाण अंतर लक्षणीयरीत्या वाढले. यजमान-शोधणाऱ्या मादींना युरिया flesewp किंवा <स्त्री flesewp पाण्यापेक्षा जास्त प्रमाणात युरिया दिले जाते.
रक्त शोषणाऱ्या डासांची एकूण उड्डाण क्रिया सर्व आहारांमध्ये 24 तासांहून अधिक काळ स्थिर आणि टिकून राहिली, गडद कालावधीच्या दुस-या सहामाहीत पाण्यावर तसेच ताज्या आणि 24 तासांच्या वयाच्या स्त्रियांमध्ये लघवीची क्रिया वाढली (प्रतिमा 3). लघवीच्या आहाराचा लक्षणीय परिणाम झाला, तर रक्त पिणाऱ्या महिलांमध्ये फ्लाइटचे अंतर, p = 40 = 40 (40), (40 = 40) युरिया आहार (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .इतर लघवी आणि नियंत्रण आहारासह (ताजे, p = 0.0091; 72 तास, p = 0.0022; 168 तास, p = 0.001; sucrose, p = 0.001; sucrose, p = 0.01, p = 0.24. 0.24).
पुनरुत्पादक मापदंडांवर मूत्र आणि युरिया आहाराचे परिणाम अंडी देणाऱ्या बायोअसे (आकृती 4A) मध्ये मूल्यमापन केले गेले आणि प्रत्येक मादीने घातलेल्या अंड्यांची संख्या, अंड्याचा आकार आणि नव्याने उबवलेल्या पहिल्या इनस्टार अळ्यांनुसार तपासले गेले. अंडी घालण्याची संख्या. मूत्र-पोषित अरबी स्त्रिया (p. 0 = 2. 0 = 0 द्वारे भिन्न) 8; अंजीर 4B). स्त्रियांनी 24-तास लघवी केली, रक्ताच्या जेवणाने इतर लघवीच्या आहारापेक्षा स्त्रियांनी जास्त अंडी घातली आणि त्यांना दिलेले सुक्रोज (चित्र 4B) सारखेच होते. त्याचप्रमाणे, लघवीने आहार दिलेल्या स्त्रियांनी घातलेल्या अंड्यांचा आकार आहारानुसार बदलतो (F. 9 0 = 5.20, p.20 = 5.20 = 5.0). -तास लघवी आणि सुक्रोज दिलेली स्त्रिया पाणी पाजलेल्या स्त्रियांपेक्षा लक्षणीयरीत्या मोठी अंडी घालतात, तर 168 तास लघवीने दिलेली मादींची अंडी लक्षणीयरीत्या लहान होती (चित्र 4C). शिवाय, लघवीच्या आहारामुळे अळ्यांच्या आकारावर लक्षणीय परिणाम झाला (F(5, 187) = 7.80, 1.80 पेक्षा जास्त अंडी. 24- आणि 72-तास-जुन्या लघवी-पोषित महिलांनी अंड्यातील अळ्यांमधून घातलेल्या अंड्यांपेक्षा.पाणी-पावलेले आणि 168-तास लघवीयुक्त मादी (आकृती 4D).
गोमूत्र आणि युरिया खाणाऱ्या मादी अॅनोफिलीस अरेबिनिसची पुनरुत्पादक कामगिरी. रक्ताने ग्रासलेल्या मादी डासांना ताजे आणि वृद्ध गोमूत्र, युरिया, सुक्रोज (10%), आणि डिस्टिल्ड वॉटर (H2O) यांचा समावेश असलेला आहार 48 तास आधी आणि बायोअॅस-ए-बी 8 तास (सब-ए-ए-बी) ठेवण्यापूर्वी (सब-ए-ए-8 तास) घातला गेला. , E), अंड्याचा आकार (C, F) आणि अळ्यांचा आकार (D, G) पुरविलेल्या आहारामुळे लक्षणीयरीत्या प्रभावित झाला (गोमूत्र: BD; युरिया: EG). भिन्न अक्षरांची नावे वापरून मोजले जाणारे प्रत्येक पॅरामीटरचे अर्थ एकमेकांपासून लक्षणीयरीत्या भिन्न होते (टुकीच्या पोस्ट हॉक विश्लेषणाचा वापर करून वन-वे ANOVA; p < 0.05 ची त्रुटी किंवा मानक बारचा अर्थ दर्शवितो).
मूत्रातील प्रमुख नायट्रोजनयुक्त घटक म्हणून, युरिया, जेव्हा रक्त पिणाऱ्या स्त्रियांना आहार म्हणून पुरवले जाते, तेव्हा सर्व अभ्यासांमध्ये पुनरुत्पादक मापदंडांवर लक्षणीय परिणाम होतो. युरियाच्या एकाग्रतेवर (F(11, 360) = 4.601 p <4.60 360, 4.60 360, 4.60% दरम्यान महिलांनी खाल्ल्यानंतर युरिया दिलेली अंड्यांची संख्या. µM आणि 1.34 mM ने अधिक अंडी घातली (आकृती 4E). 134 µM किंवा त्यापेक्षा जास्त युरिया सांद्रता खाल्लेल्या मादी पाण्यावर खायला दिलेल्या मादींपेक्षा मोठी अंडी घालतात (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; आणि आकृती 4 द्वारे प्रभावित मादीच्या आकारमानात समान आकार, व्हॅलर एफ. (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) अधिक परिवर्तनशील होते (चित्र 4G).
यजमान-शोधत असलेल्या बोवाइन मूत्र हेडस्पेस अस्थिर अर्कांकडे एकूणच आकर्षण. ग्लास ट्यूब ऑल्फॅक्टोमीटर (चित्र 5A) मध्ये मूल्यांकन केलेल्या अरॅबियन्सिसचा लघवीच्या वयामुळे लक्षणीय परिणाम झाला (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032). 24 तासांमुळे इतर सर्व उपचारांच्या तुलनेत आकर्षकपणाची लक्षणीय पातळी निर्माण झाली (72 तास: p = 0.0060, 168 तास: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), ताज्या लघवीचा वास वगळता (p = 0.13; आकृती 5B) रक्ताचे आकर्षण जास्त नव्हते. ly भिन्न (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Fig. 5C), नियंत्रणांच्या तुलनेत 72-तास वृद्ध मूत्राच्या तुलनेत या स्त्रिया हेडस्पेस अस्थिर अर्कांसाठी लक्षणीयरीत्या अधिक आकर्षक असल्याचे आढळले (p = 0.0066; आकृती 5C).
यजमानाच्या शोधात नैसर्गिक आणि कृत्रिम गोमूत्राच्या गंधांना वर्तणूक प्रतिसाद आणि रक्त-पोषित एनोफिलीस अरेबियनस. ग्लास ट्यूब ऑल्फॅक्टोमीटर (ए) चे योजनाबद्ध. ताज्या आणि वृद्ध गोमूत्रापासून यजमानाकडे हेडस्पेस अस्थिर अर्कांचे आकर्षण (बी) आणि रक्त शोषक प्रतिक्रिया (सी) लॉर्ड्सच्या दहा भागांमध्ये रक्त-शोषक प्रतिक्रिया. s ताजे (D), 24-तास (E), 72-तास (F), आणि 168-तास (G) वृद्ध गोमूत्र दर्शविले आहेत. इलेक्ट्रॉन अँटेना डिटेक्शन (EAD) ट्रेस हेडस्पेसमधील बायोएक्टिव्ह कंपाऊंड्सच्या प्रतिसादात व्होल्टेज बदल दर्शवितात वायूपासून उत्सर्जित केलेल्या हेडस्पेस आणि रिस्पॉन्स क्रोमॅटोग्राफ द्वारे रिस्पॉन्स क्रोमॅटोग्राफ ओळखले जाते. de (mV) विरुद्ध धारणा वेळ (s). जैविक दृष्ट्या सक्रिय संयुगांचे गुणधर्म आणि प्रकाशन दर (µg h-1) दर्शविले आहेत. एकच तारा (*) एक सुसंगत कमी-मोठेपणाचा प्रतिसाद दर्शवितो. दुहेरी तारका (**) पुनरुत्पादित न होणारे प्रतिसाद दर्शवितात. यजमान शोधा (H) आणि ताज्या संयुगेचे संश्लेषण (मिआरा) चे वेगवेगळे अपील आहे. आणि वृद्ध गोमूत्र गंध. वेगवेगळ्या अक्षरांच्या नावांकडे आकर्षित झालेल्या डासांचे सरासरी प्रमाण एकमेकांपासून लक्षणीयरीत्या भिन्न होते (टुकीच्या पोस्ट हॉक विश्लेषणाचा वापर करून वन-वे ANOVA;p <0.05).एरर बार स्केलची मानक त्रुटी दर्शवतात
स्त्री Ann.arabiensis, 72 तास आणि 120 तासांनी रक्त खाल्ल्यानंतर, स्पॉनिंग दरम्यान, पेंटेन नियंत्रणांच्या तुलनेत ताज्या आणि वृद्ध गोमूत्रापासून हेडस्पेस अस्थिर अर्कांना कोणतेही प्राधान्य दर्शविले गेले नाही (χ2 = 3.07, p > 0.05; अतिरिक्त फाइल 1: Fig. S1).
महिला Ann.arabiensis साठी, GC-EAD आणि GC-MS विश्लेषणाने आठ, सहा, तीन आणि तीन बायोएक्टिव्ह संयुगे (आकृती 5D-G) ओळखले. जरी इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल प्रतिसाद प्राप्त करणार्‍या संयुगेच्या संख्येत फरक आढळून आला, तरी यातील बहुतेक संयुगे प्रत्येक हेडस्पेसमध्ये उपस्थित होते, जे प्रत्येक संयुगासाठी केवळ ताज्या संयुगासाठी तयार केले जातात. d थ्रेशोल्डच्या वर असलेल्या मादी अँटेनाचा शारीरिक प्रतिसाद पुढील विश्लेषणांमध्ये समाविष्ट केला गेला.
हेडस्पेस कलेक्शनमधील बायोएक्टिव्ह कंपाऊंड्सचा एकूण अस्थिर प्रकाशन दर ताज्या मूत्रात 29 µg h-1 वरून 168-तास वृद्ध मूत्रात 242 µg h-1 पर्यंत वाढला, मुख्यतः p-cresol आणि m-formaldehyde Phenol मुळे तसेच phenol वाढतो. याउलट डी-सायकल आणि इतर कंपाऊंड 2-1 च्या विमोचन दर. कालवा, वाढत्या लघवीच्या वयासह कमी झाले, जे क्रोमॅटोग्राम (Fig. 5D)-G डावे पॅनेल) आणि या संयुगे (Fig. 5D-G उजवे पॅनेल) मधील सिग्नल तीव्रता (विपुलता) मध्ये आढळून आलेली घट यांच्याशी संबंधित आहे.
एकंदरीत, सिंथेटिक मिश्रणामध्ये ताजे आणि वृद्ध मूत्र हेडस्पेसेसच्या अस्थिर अर्कांमध्ये ओळखल्या जाणार्‍या बायोएक्टिव्ह संयुगांचे समान नैसर्गिक गुणोत्तर होते (चित्र 5D–G) आणि यजमानाच्या शोधात लक्षणीय अपील झाल्याचे दिसून आले नाही (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.03) किंवा mogus = 0.08 रक्त. 4.91, df = 4, p = 0.30; अंजीर. 5I). तथापि, उपचारांमध्‍ये तदर्थीनंतर जोडीने तुलना केल्‍याने असे दिसून आले की यजमान शोधणारे डास 24-तास वयोवृद्ध लघवीचे सिंथेटिक मिश्रण पेंटेन नियंत्रणे (p = 6; F00igure) च्या तुलनेत लक्षणीयरीत्या आकर्षक होते.
24-तास-वृद्ध मूत्राच्या सिंथेटिक मिश्रणातील वैयक्तिक घटकांच्या भूमिकेचे मूल्यांकन करण्यासाठी, Y-ट्यूब परखातील संपूर्ण मिश्रणाविरूद्ध सहा वजाबाकी मिश्रणांचे मूल्यांकन केले गेले, ज्यामध्ये वैयक्तिक संयुगे काढून टाकण्यात आले. यजमान-शोधणार्‍या डासांसाठी, संपूर्ण मिश्रणातून वैयक्तिक संयुगे वजा करणे = 62 वर्तन = 96 वर्तनावर लक्षणीय परिणाम झाला. 6, p = 0.0032; अतिरिक्त फाइल 1: आकृती S2A), सर्व वजाबाकी मिश्रणे पूर्णपणे मिसळलेल्या पेक्षा लहान पेक्षा अधिक आकर्षक होती. याउलट, पूर्णपणे कृत्रिम मिश्रणातून वैयक्तिक संयुगे काढून टाकल्याने रक्त शोषणाऱ्या डासांच्या वर्तणुकीशी संबंधित प्रतिसादांवर परिणाम झाला नाही (χ2 = 1,78 = 3.78, p.78 शिवाय). कालवा, ज्याचा परिणाम संपूर्ण मिश्रणाच्या आकर्षणाच्या तुलनेत कमी पातळीत झाला (p = 0.022; अतिरिक्त फाइल 1: आकृती S2B).
इथिओपियामधील एका मलेरिया-स्थानिक गावात, शेताच्या परिस्थितीत डासांना आकर्षित करण्यासाठी 24 तासांच्या गोमूत्राच्या सिंथेटिक मिश्रणाच्या परिणामकारकतेचे दहा रात्री (चित्र 6A) मूल्यमापन करण्यात आले. एकूण 4,861 डास पकडले गेले आणि त्यांची ओळख पटवली गेली, त्यापैकी 45.19% डास होते. फॅरोएन्सिस आणि 35.4% हे क्युलेक्स एसपीपी होते.(अतिरिक्त फाइल 1: टेबल S1). ऍनोफिलीस अरेबिनिस हा An.Gambian प्रजातींच्या कॉम्प्लेक्सचा एकमेव सदस्य आहे जो PCR विश्लेषणाद्वारे ओळखला जातो. सरासरी, प्रति रात्र 320 डास पकडले गेले, या काळात सिंथेटिक मिश्रणासह सापळे पकडले गेले. (0, 3196) = 170.0, p < 0.0001) .चाचणीच्या सुरूवातीस, मध्यभागी आणि शेवटी प्रत्येक पाच नियंत्रण रात्रींवर नॉन-बाइटेड सापळे लावले गेले. प्रत्येक सापळ्याच्या जोडीमध्ये तत्सम संख्येने डास पकडले गेले, जे घरांमध्ये कोणताही पूर्वाग्रह दर्शवत नाही, p >02 = 01, χ (16) 0.05) आणि अभ्यास कालावधीत लोकसंख्येमध्ये कोणतीही घट झाली नाही.नियंत्रण सापळ्यांच्या तुलनेत, कृत्रिम मिश्रण असलेल्या सापळ्यांमध्ये पकडलेल्या डासांच्या संख्येत लक्षणीय वाढ झाली आहे: यजमान शोधणे (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), अलीकडील रक्त आहार (0.2 = 0.02, χ2 = 0.6) ) आणि गर्भधारणा (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123;अतिरिक्त फाइल 1: तक्ता S1). हे पकडलेल्या एकूण डासांच्या संख्येत देखील दिसून येते: यजमान शोधणारे > रक्त शोषणारे > गर्भवती > अर्ध-गर्भवती > पुरुष.
24-तास सिंथेटिक गोमूत्र गंध मिश्रणाच्या कार्यक्षमतेचे फील्ड मूल्यांकन. दक्षिण-मध्य इथियोपिया (नकाशा), माकी शहराजवळ (इन्सर्ट), पेअर केलेल्या घरांमध्ये रोग नियंत्रण केंद्र (CDC) प्रकाश सापळा (उजवीकडे) वापरून फील्ड चाचण्या घेण्यात आल्या. फोटोट्रॅप्स मादी अॅनोफिलीस अरेबेस्कस (बी) आकर्षित करतात आणि कॅप्चर करतात, परंतु अॅनोफिलीस फॅरो (सी) नाही, वेगळ्या पद्धतीने, एक शारीरिक स्थितीवर अवलंबून प्रभाव. शिवाय, या सापळ्यांनी यजमान क्युलेक्स डासांची लक्षणीय वाढलेली संख्या पकडली. (डी) नियंत्रणाच्या तुलनेत. डावीकडील पट्ट्या सरासरी निवडक जोड्या दर्शवितात आणि कॅप्चर इंडेक्स (सी) ची सरासरी निवड करतात. ) सापळे (N = 10), तर उजवीकडील पट्ट्या कंट्रोल ट्रॅपच्या जोडीमध्ये सरासरी निवड निर्देशांक दर्शवतात (उघडलेले; N = 5).).तारका सांख्यिकीय महत्त्व पातळी दर्शवतात (*p = 0.01 आणि ***p < 0.0001)
सिंथेटिक मिश्रण असलेल्या सापळ्यांमध्ये तीन प्रजाती वेगवेगळ्या पद्धतीने पकडल्या गेल्या. यजमान (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), रक्त आहार (χ2(1, 517) = 16.7, p <0.0001) आणि गर्भधारणा (χ2(1, 0.0001) आणि गर्भधारणा (χ1 = 021) आणि गर्भधारणा (χ2(1, 1345) = 71.7. 4) a .arabiensis सिंथेटिक मिश्रण (Fig. 6B) सोडणाऱ्या सापळ्यात अडकले होते, तर An चे प्रमाण वेगळे नव्हते. वेगवेगळ्या शारीरिक अवस्थेतील फॅरोएन्सिस आढळले (Fig. 6C). क्युलेक्ससाठी, यजमान शोधणाऱ्या डासांच्या संख्येत केवळ लक्षणीय वाढ झाली आहे. 12.6, p = 0.0004; अंजीर 6D), नियंत्रण सापळ्यांच्या तुलनेत.
इथिओपियातील प्रजनन स्थळे आणि ग्रामीण समुदायांमधील संभाव्य यजमानांच्या बाहेर स्थित यजमान आमिष सापळे मलेरियाचे डास यजमान निवासस्थान क्यू म्हणून गोमूत्राचा गंध वापरतात की नाही हे मूल्यांकन करण्यासाठी वापरले गेले. यजमान संकेतांच्या अनुपस्थितीत, उष्णता आणि गोमूत्राच्या उपस्थितीत किंवा त्याशिवाय गंध 3 (F mo quigtured odor: 3) होते. तथापि, उच्च तापमान आणि गोमूत्राच्या वासाच्या उपस्थितीत, मादी मलेरिया डास आकर्षित झाले आणि पकडले गेले, जरी कमी संख्येत, लघवीचे वय (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; अतिरिक्त फाईल 1: आकृती S3 ). : आकृती S3).
मलेरियाचे डास इतर कीटकांप्रमाणेच जीवन-इतिहास गुणधर्म वाढवण्यासाठी गोमूत्र (म्हणजे डबके) वर भरपाई देणारे खाद्य देऊन नायट्रोजनयुक्त संयुगे मिळवतात आणि वितरित करतात. आणि ग्रामीण घरे आणि उगवण्याच्या ठिकाणांजवळील उंच झाडे. मादी डास हे स्त्रोत वासाद्वारे शोधतात आणि मूत्रातील नायट्रोजनयुक्त संयुगे, युरियासह, मूत्रातील प्रमुख नायट्रोजनयुक्त घटकांच्या शोषणाचे नियमन करण्यास सक्षम असतात [१५, १६]. मादीच्या सर्व शरीरावर अवलंबून असतात. यजमान शोधणार्‍या मादी डासांच्या उड्डाण क्रियाकलाप आणि जगण्याची तसेच पहिल्या गोनाडोट्रॉपिक चक्रादरम्यान रक्त पिलेल्या व्यक्तींचे जगण्याची आणि पुनरुत्पादक वैशिष्ट्ये वाढविण्यासाठी केले जाते. त्यामुळे, मूत्र मिसळणे हे मलेरियाच्या वाहकांसाठी महत्त्वपूर्ण पौष्टिक भूमिका बजावते जे कुपोषित मादींना प्रौढत्व प्रदान करते. कमी जोखमीच्या आहारामध्ये गुंतून ट्रोजेनस संयुगे. या शोधाचे महत्त्वपूर्ण महामारीशास्त्रीय परिणाम आहेत, कारण महिलांचे आयुर्मान, क्रियाकलाप आणि पुनरुत्पादक उत्पादन वाढते, या सर्वांचा वेक्टर क्षमतेवर परिणाम होतो. शिवाय, हे वर्तन भविष्यातील वेक्टर व्यवस्थापन कार्यक्रमांचे लक्ष्य असू शकते.