د غذايي موادو استملاک او ویش د حشراتو د څارویو او د ژوند تاریخي ځانګړتیاوو سره یوځای کوي. د ژوند په مختلفو مرحلو کې د ځانګړو غذایي موادو د کمښت د جبران کولو لپاره، حشرات کولی شي دا غذايي مواد د اضافي تغذیه کولو له الرې ترلاسه کړي، د بیلګې په توګه، د فقرو د رطوبتونو د تغذیه کولو په پروسه کې چې د puddles په نوم یادیږي، نو له همدې امله د پوټکي، د پوټکي او مسموم کولو لپاره اړتیا لیدل کیږي. د میټابولیزم او تکثیر دواړو لپاره غذايي مواد. د دې څیړنې موخه دا وه چې دا ارزونه وکړي چې ایا یو.د غذايي موادو د ترلاسه کولو لپاره د غوا په پیشاب باندې arabiensis agitation د ژوند تاریخ ځانګړتیاوې ښه کوي.
ډاډ ترلاسه کړئ چې دا خوندي دی. arabiensis د تازه، 24-ساعت، 72-ساعت، او 168-ساعت زاړه غوا د پیشاب بوی ته متوجه وه، او کوربه لټوونکې او وینه ورکول (48 ساعته وروسته د وینې خواړه) په Y-tube olfactometer کې اندازه شوي، او د امیندوارۍ لپاره د الکترو فیکټو میټرو په توګه د سپوبینولوژیکي کیمیاوي معاینې په توګه کارول شوي. بیا تحلیل په ټولو څلورو ټولګیو کې د غوا په پیشاب کې د بایو اکټیو مرکبونو پیژندلو لپاره کارول شوی و. د بایو اکټیو مرکبونو ترکیب په Y-ټیوب او ساحوي آزموینو کې ارزول شوی و. د غوا پیشاب او د هغې اصلي نایتروجن لرونکي مرکب یوریا تحقیق کولو لپاره د احتمالي ضمیمه خواړو په توګه د ملاریا ویکتورونو لپاره د میرمنو د ویکتورونو پیرامیټرونه او د میرمنو د ژوند د ویکتورونو اندازه کول. او د غوا د پیشاب او یوریا جذب اندازه ارزول شوې وه. د تغذیې وروسته، میرمنې د ژوندي پاتې کیدو، تړل شوي الوتنې، او بیا تولید لپاره ارزول شوي.
د کوربه د وینې او تغذیې په لټه کې. په لابراتوار او ساحوي مطالعاتو کې، عربان د تازه او زړو غوا د پیشاب طبیعي او مصنوعي بوی ته متوجه شول. امیندواره میرمنې د زیږون ځایونو کې د غوا د پیشاب غبرګون ته بې پامه وې. کوربه لټوونکې او وینه څښونکي میرمنې په فعاله توګه د ژوند ټولې سرچینې جذبوي او د سوداګرۍ په توګه جذبوي. د الوتنې، بقا، یا تکثیر لپاره د فیزولوژیکي حالت فعالیت.
د انوفیلس arabinis استملاک او د ژوند د تاریخ د ځانګړتیاوو لپاره د غوا د پیشابونو ویشل. د غوا د پیشاب اضافي تغذیه په مستقیم ډول د ورځني ژوندي پاتې کیدو او ویکتور کثافت په زیاتولو سره، او په غیر مستقیم ډول د الوتنې فعالیت بدلولو سره د ویکتور ظرفیت اغیزه کوي او له همدې امله باید په راتلونکي ماډلونو کې په پام کې ونیول شي.
د غذایي موادو استملاک او ویش د حشراتو د کرلو او د ژوند تاریخي ځانګړتیاوو سره یوځای کوي [1,2,3]. حشرات کولی شي خواړه غوره کړي او ترلاسه کړي او د خوړو د شتون او غذايي اړتیاوو پر بنسټ د خسارې تغذیه ترسره کړي [1, 3]. د غذايي موادو ویش د ژوند تاریخ پورې اړه لري او کیدای شي د ژوند مختلف پړاوونو کې د خوړو کیفیت او د ژوند کیفیت مختلف پړاوونو ته اړتیا ولري. 2] د ځانګړو غذايي موادو د کمښت د جبرانولو لپاره، حشرات کولی شي دا غذايي مواد د اضافي تغذیې له لارې ترلاسه کړي، لکه د خټو، د مختلفو فاضله موادو او د فقرو د رطوبت، او کیریون، دا پروسه چې د puddles په نوم پیژندل کیږي [2]. که څه هم د تیتلی او مچیو مختلف ډولونه په ترتیب سره د اوبو د جذبولو لپاره په ترتیب سره بیان شوي. او د دې ډول منابعو تغذیه کولی شي په روغتیا او نورو ژوندانه تاریخي ځانګړتیاو باندې د پام وړ اغیزې ولري [2, 4, 5, 6],7]. د ملاریا مچیو Anopheles gambiae sensu lato (sl) د "خوراکي" بالغ په توګه راپورته کیږي [8]، نو اوبه ورکول ممکن د دې په ژوند کې مهم رول ولوبوي مګر د دې تاریخي ځانګړتیاو په توګه د دې ناوړه ګټه اخیستنې تاریخي ځانګړنې ډیرې شوي دي. په دې مهم موټر کې د غذايي موادو اخیستل د پاملرنې غوښتنه کوي ځکه چې دا کیدای شي مهمې ایډیډیمولوژیکي پایلې ولري.
په بالغو ښځینه انوفیلس مچیو کې د نایټروجن مصرف د لاروا مرحله کې د کم کالوري ذخیرې او د وینې د خواړو د ناکافي کارولو له امله محدود دی [9]. ښځینه Ann.gambiae sl معمولا د اضافي وینې خواړو سره د دې لپاره خساره ورکوي [10 ، د لوی خطر سره خلکو ته د اخته کیدو خطر رامینځته کوي ، 11] په بدیل سره، مچان کولی شي د نایتروجن مرکباتو د ترلاسه کولو لپاره د فقراتي فاضله موادو اضافي تغذیه وکاروي چې د موافقت او الوتنې وړتیا لوړوي، لکه څنګه چې د نورو حشراتو لخوا ښودل شوي [2] . او د غوا پیشاب [12,13,14]، په زړه پورې دي. انوفیلس arabinis په خپل کوربه غوره توبونو کې فرصت لرونکی دی او د غواګانو سره ملګرتیا او تغذیه کولو لپاره پیژندل کیږي. د غوا پیشاب د نایتروجن مرکباتو څخه بډایه سرچینه ده چې یوریا د 50-95٪ 50-95٪ یوریا په مجموع کې د 50-95 troines [16wA] په برخه کې جوړوي. په عمرونو کې، مایکرو ارګانیزمونه دا سرچینې په 24 ساعتونو کې د نایتروجن مرکباتو پیچلتیا کمولو لپاره کاروي [15]. د امونیا په چټکۍ سره، د عضوي نایتروجن کمښت سره تړاو لري، الکالوفیلیک مایکروجنیزمونه (ډیری یې د مچیو لپاره زهرجن مرکبات تولیدوي) چې ممکن د ښځینه تودوخې لپاره جذب شي [5]. د 24 ساعتونو یا لږ عمر لرونکي [13, 14].
په دې څیړنه کې، کوربه او د وینې تغذیه شوي ځوابونه وڅیړل شول. د هغې د لومړي ګوناډوټروپین دورې په جریان کې، arabiensis د یوریا په ګډون د نایتروجن مرکباتو د استملاک لپاره ارزول شوی و، د ادرار مخلوط کولو سره. بیا وروسته، یو لړ تجربې ترسره شوې ترڅو دا ارزونه وکړي چې څنګه د ښځینه مچیو د بیا رغونې احتمالي سرچینې او د بیا رغونې امکانات ښه کړي. په اصل کې، د تازه او زوړ غوا د پیشاب بوی ارزول شوی ترڅو معلومه کړي چې ایا دا د کوربه او وینې تغذیه کولو لپاره د اعتبار وړ نښې وړاندې کړي. د دې احتمالي تغذیې سرچینې په لټه کې، عربینسیس د لیدل شوي توپیر د جذب تر شا کیمیاوي ارتباط کشف کړ. د مصنوعي بوی مخلوط په غیر متزلزل عضوي مرکبونو کې پیژندل شوي وو. د ساحوي شرایطو لاندې ترسره شوي، د لابراتوار شرایطو لاندې ترلاسه شوي پایلو پراخول او په مختلفو فیزولوژیکي حالتونو کې د غواګانو د پیشاب بوی اغیز ښیې.د مچیو جذب. ترلاسه شوي پایلې تاییدوي چې An.arabiensis د نایتروجن مرکبات ترلاسه کوي او توزیع کوي چې په فقري ادرار کې موندل شوي ترڅو د ژوند تاریخ ځانګړتیاو باندې اغیزه وکړي. دا پایلې د احتمالي ایپیډیمولوژیکي پایلو په شرایطو کې بحث کیږي او دا چې څنګه د ویکتور څارنې او کنټرول لپاره کارول کیدی شي.
د انوفیلس عربان (ډونګولا فشار) په 25 ± 2 ° C، 65 ± 5٪ RH او 12:12 h رڼا کې ساتل شوي: تور دوره. لاروا په پلاستيکي ټریونو کې ساتل شوي (20 cm × 18 cm × 7 cm) د ټیسټرمین اوبو، P®etra (Tetramine) څخه ډک شوي ماهیان (P®etrain) او FDE. په 30 ملی لیتره پیالو کې راټول شوي (Nolato Hertila, Åstorp, SE) او بیا د بګډورم کیجونو ته لیږدول شوي (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) ترڅو بالغانو ته د 10٪ سوکروز حل ورکړل شي، چې د 4 ورځو څخه وروسته د کوربه توب په وخت کې (د 4 ورځو څخه وروسته) د تجربې څخه سمدلاسه دمخه خواړه وړاندیز شوي ، یا د تجربې دمخه د څښاک اوبو سره د شپې لخوا وږي شوي ، لکه څنګه چې لاندې تشریح شوي. د الوتنې ټیوب تجربې لپاره کارول شوې میرمنې یوازې د 4-6 ساعتونو لپاره د اوبو اعلان کولو سره وږي پاتې شوې. د راتلونکو بایوسیس لپاره د وینې چوسونکي مچیو چمتو کولو لپاره ، 4 dpe میرمنو ته د میټابوران د وینې سیسټم (برو هیبرون د وینې ورکولو سیسټم) سره چمتو شوي. Hemotek Discovery Workshops, Acrington, UK. بیا په بشپړه توګه کنجنګ شوي میرمنې انفرادي پنجرو ته لیږدول شوي او مستقیم خواړه چمتو شوي لکه څنګه چې لاندې تشریح شوي، یا 10٪ sucrose ad libitum د تجربو څخه د 3 ورځو لپاره د لاندې تشریح شوي. وروستنۍ میرمنې د الوتنې ټیوب بایوسیس لپاره کارول شوي او لابراتوار ته لیږدول شوي، او بیا د 46 ساعتونو څخه دمخه د اوبو تجربه کولو لپاره لابراتوار ته لیږدول شوي.
د تغذیې معاینات په بالغه عربو میرمنو کې د ادرار او یوریا مصرف اندازه کولو لپاره کارول شوي. کوربه لټوونکو او وینه تغذیه کونکو میرمنو ته داسې خواړه چمتو شوي چې 1٪ ککړ شوي تازه او زاړه د غوا پیشاب ، د یوریا مختلف غلظت ، او دوه کنټرولونه (10٪ سوکروز او اوبه) د 48 سی جی 1 ملی لیتر F-1 ملی ګرامه رنګ F-100 ملی لیتر (F-10ml) رنګ. 2650-17-1؛ Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) په رژیم کې اضافه شوی او په 4 × 4 میټریکس کې په 250 μl مایکرو سینټریفیوج ټیوبونو کې چمتو شوی (اکسیجن ساینټیفیک, اتحادیه ښار, CA, US؛ شکل 1A) په څنډه کې ډک کړئ ترڅو د µT رنګونو او احتمالي اغیزو څخه مخنیوی وشي (~3 mody) او د رنګونو ترمینځ سیالي. په یوه لوی پیټری ډش کې 10 مچۍ ځای په ځای کړئ (12 سانتي متره قطر او 6 سانتي متره لوړوالی؛ Semadeni, Ostermundigen, CH; شکل 1A) په بشپړ تیاره کې په 25 ± 2 cm ° C او 65 ± 5% نسبي رطوبت کې. دا تجربې 5.00 ځله تکرار شوې ترڅو د 2000 څخه تر 5.00 دقیقو پورې د خواړو په ځای کې 5.000 ځله تکرار شي. تر نور تحلیل پورې °C.
د غواګانو ادرار او یوریا وګورئ چې د کوربه او وینه څښونکي ښځینه Anopheles arabianus لخوا جذب شوي دي. د تغذیې آزموینې (A) په جریان کې، ښځینه مچیو ته خواړه ورکړل شوي چې د تازه او زړو غوا پیشاب، د یوریا مختلف غلظت، سوکروز (10٪)، او نسج شوي اوبه (H2-O-C) او د ښځینه وینه (H2-O-C) او د وینې څښاک (Ab-H2-O) . سوکروز د نورو ازموینو په پرتله ډیر سوکروز. په یاد ولرئ چې کوربه لټوونکې میرمنې د 168 ساعتونو غوا پیشاب (B) څخه لږ 72 ساعته د غوا پیشاب جذبوي. د ادرار ټول نایټروجن مینځپانګه (± معیاري انحراف) په انسیت کې ښودل کیږي. کوربه لټوونکې (D,F) او د میرمنو په وینه کې انحصار (د وینې رګونو) اخیستل. د تنفس حجمونه (D, E) د مختلف لیکونو نومونو سره د یو بل څخه د پام وړ توپیر درلود (یو طرفه ANOVA د Tukey د پوسټ هاک تحلیل په کارولو سره؛ p <0.05). د تېروتنې بارونه د معنی (BE) معیاري تېروتنه څرګندوي. مستقیم ډش شوی کرښه د log-linear regression line (F, G) استازیتوب کوي.
د جذب شوي خواړو د خوشې کولو لپاره، مچان په انفرادي ډول په 1.5 ملی لیتر مایکرو سینټرفیوج ټیوب کې ځای په ځای شوي چې 230 μl منحل شوي اوبه لري او نسج د بې ځایه کیدونکي پیسټل او کورډلیس موټرو (VWR International, Lund, SE) په کارولو سره ګډوډ شوي ، وروسته د سینټرفیوګیشن لخوا د 10pm 2010 μl لپاره سوپر 10 μl. د 96 څاه مایکروپلیټ (Sigma-Aldrich) ته لیږدول شوی او جذب (λ620) د سپیکٹرو فوټومیټر پراساس مایکروپلیټ ریډر (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm په کارولو سره ټاکل شوی. په بدیل سره ، مچان په ځمکه کې د 1 µ0 ملی لیتر اوبو لپاره 1 µ 0 ملی لیتر ډیسک شوي وو. spectrophotometric analysis (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). د غذایي موادو د اندازه کولو لپاره، یو معیاري وکر د سیریل کمولو په واسطه چمتو شوی و ترڅو د 0.2 µl څخه 2.4 µl د 1 mg ml-1 xylnite پیژندګلوی د سیډین سینټ کانډینیټ کارول شوی. د خوراک اندازه معلومه کړئ چې هر مچر یې خوري.
د حجم ډاټا د یو طرفه تحلیل په کارولو سره تحلیل شوي (ANOVA) وروسته د توکی پوسټ هاک جوړه پرتله کولو سره (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007) . د لینر ریګریشن تحلیلونه د وینې متمرکز او متمرکز غبرګون - متمرکز او د کوربه توب پرتله کولو په پرتله بیان شوي. squitoes (GraphPad Prism v8.0.0 for Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
د هر عمر ګروپ څخه نږدې 20 µl د ادرار نمونې په Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh، Sigma Aldrich) کې تړل شوي او د ټین کپسولونو کې پوښل شوي (8 mm × 5 mm). کیپسول د احتراق چیمبر (ACH200/CHM0r00m) د احتراق په برخه کې داخل شوي. Fisher Scientific, Waltham, MA, US) د تولید کونکي پروتوکول سره سم په تازه او زاړه ادرار کې د نایتروجن مینځپانګې معلومولو لپاره. ټول نایټروجن (g N l-1) د یوریا پیژندل شوي غلظت پراساس چې د معیاري په توګه کارول کیږي مقدار ټاکل شوی.
د کوربه په لټه کې او وینه څښونکي میرمنې بقا باندې د رژیم اغیزې ارزولو لپاره ، مچان په انفرادي ډول په لوی پیټري لوښو کې ځای په ځای شوي (12 سانتي متره قطر او 6 سانتي متره لوړوالی؛ سیماډیني) په پوښ کې د میش پوښ شوي سوري سره (د 3 سانتي قطر قطر) سره د هوا او تازه خوراکي توکو لپاره په مستقیم ډول د هوا ورکولو او 4٪ 1 څخه وروسته تازه خواړه چمتو شوي. د غوا پیشاب، د یوریا څلور غلظت، او دوه کنټرولونه، 10٪ سوکروز او اوبه. هر خواړه د غاښونو ټیمپون (DAB Dental AB، Upplands Väsby, SE) کې د 5 ملی لیتره سرنج (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, 1 diseplive)، او د پیټرونګ 1 ځای څخه لیرې شوي. الف) هره ورځ خپل خواړه بدل کړئ لکه څنګه چې پورته تشریح شوي لابراتوار وساتئ. ژوندي پاتې شوي مچانونه په ورځ کې دوه ځله شمیرل شوي، پداسې حال کې چې مړ شوي مچان له مینځه وړل شوي تر هغه چې وروستی غوماشي مړ شي (n = 40 د درملنې لپاره). د خواړو ترمنځ (IBM SPSS احصایې 24.0.0.0).
د Attisano et al [17] پر بنسټ د ګمرک مچیو الوتنې مل چې د 5 ملي متر ضخامت روښانه اکریلیک تختو څخه جوړ شوی (10 سانتي متره اوږد x 10 سانتي متره اوږد x 10 سانتي متره لوړ) پرته له مخکینۍ او شا پینل (انځور 3: سر). د پایوټ اسمبلۍ د عمودی ټیوب سره جوړ شوی د ګازو پایپ 5mm 5mm 5cm سره. s د حشراتو ستنې ته چپک شوی چې د نیوډیمیم میګنیټ د یوې جوړې تر مینځ 9 سانتي فاصله لري. د ورته موادو (6.5 سانتي L) څخه جوړ یو افقی ټیوب د عمودی ټیوب دوه طرفه کړی ترڅو یو ټیتر شوی بازو او یو بازو رامینځته کړي چې د المونیم ورق کوچنۍ ټوټه د روښنايي نښې په توګه لیږدوي.
د 24-ساعت وږی میرمنو ته پورته خواړه د 30 دقیقو لپاره د استراحت دمخه ورکړل شوي. بشپړ تغذیه شوي ښځینه مچۍ بیا په انفرادي ډول د 2-3 دقیقو لپاره په یخ کې انسټیټس شوي او د موم سره د حشراتو پنونو سره نښلول شوي (جویل سوینسسن ویکس فابریک AB، مونکا لجنګبی) او د ټیوبینګونس ټیوبیز هارم. Mill. Revolutions په هره الوتنه کې د ګمرک جوړ شوي ډیټا لوګر لخوا ثبت شوي، بیا د PC-Lab 2000™ سافټویر (v4.01؛ Velleman, Gavere, BE) په کارولو سره زیرمه شوي او ښودل شوي. د الوتنې مل په اقلیم تنظیم شوي خونه کې ځای پر ځای شوی و (12 h: 12 h، رڼا: تیاره، 25 ± 6 ° C ± 25 ° C ± 5 ° C).
د الوتنې د فعالیت د بڼې د لیدلو لپاره، د الوتنې ټول فاصله (m) او د الوتنې د پرله پسې فعالیتونو ټوله شمیره د 24 ساعتونو په موده کې په هر ساعت کې محاسبه شوې. سربیره پردې، د انفرادي میرمنو لخوا الوتنې منځنۍ فاصلې د درملنې په اوږدو کې پرتله شوي او د یو طرفه ANOVA او Tukey د پوسټ هاک تحلیل په کارولو سره تحلیل شوي، چیرې چې د JMP Institut، inc.01 د اوسط فاصله په پام کې نیول شوې وه. په داسې حال کې چې درملنه یو خپلواک فکتور دی. سربیره پردې، د پړاوونو منځنۍ شمیره د 10 دقیقو په زیاتوالي کې محاسبه کیږي.
د An.arabiensis په تولیدي فعالیت باندې د رژیم اغیزې ارزولو لپاره ، شپږ میرمنې (4 dpe) د وینې راټولولو وروسته په مستقیم ډول د بګډورم پنجرې (30 cm × 30 cm × 30 cm) ته لیږدول شوې او بیا د 48 ساعتونو لپاره تجربه لرونکي خواړه چمتو شوي لکه څنګه چې پورته تشریح شوي. بیا وروسته خواړه لیرې شوي او سپونینګ پیالې ( 30 ملی لیتره د 30 ملی لیتره اوبه نه ډکې شوې) هره ورځ د 48 ساعتونو لپاره، په هر 24 ساعتونو کې بدلیږي. د هر غذایی رژیم 20-50 ځله تکرار کړئ. هګۍ د هرې تجربې پنجرې لپاره شمیرل شوي او ثبت شوي. د هګیو فرعي نمونې د Dialux-20 په کارولو سره د انفرادي هګیو د اندازې او اوږدوالي توپیر ارزولو لپاره کارول شوي (n ≥ 200 په هر غذا کې) د لییکا کیمره (DFC) 320 R2؛Leica Microsystems Ltd., DE) پاتې هګۍ د اقلیم په کنټرول خونه کې د 24 ساعتونو لپاره د معیاري پالنې شرایطو لاندې ساتل شوي، او په دې وروستیو کې د 1st instar larvae (n ≥ 200 per diet) یوه فرعي نمونه اندازه شوې، لکه څنګه چې پورته تشریح شوي. د هګیو شمیر او اندازه د هګیو او A-Larwayana د درملنې په کارولو سره د هګیو او A-Larvayana پوسټونو ترمنځ پرتله شوې. sis (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
د تازه (1 ساعته نمونې اخیستلو وروسته)، 24 ساعته، 72 ساعته او 168 ساعته عمر لرونکي ادرار د زیبو غواګانو، ارسي نسلونو څخه راټول شوي نمونو څخه راټول شوي. د اسانتیا لپاره، د ادرار نمونې سهار وختي راټولې شوې پداسې حال کې چې غواګانې لا هم په خټګر کې وې. د هر یو څخه 100 ملی لیتر نمونې راټولې شوې. سور څخه تر انفرادي پولیامایډ پخولو کڅوړې (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) په 3 l پولیامایډ کې د وینیل کلورایډ پلاستيکي ډرمونو کې. د هر حیوان ادرار نمونې څخه د سر ځای بې ثباته راټول شوي یا په مستقیم ډول (تازه) یا د 2 ساعتونو لپاره د 2 ساعتونو لپاره په 2 ساعتونو کې ، یا د کوټې د حرارت درجه 2 ساعت وروسته. ine نمونه د هر عمر ګروپ نماینده وه.
د هیډ اسپیس بې ثباته راټولولو لپاره، د تړل شوي لوپ سیسټم څخه د فعال کاربن فلټر شوي ګاز جریان (100 ml min-1) د پولیامایډ کڅوړې له لارې د جذب کولو کالم ته د 2.5 h لپاره د ډایفراګم ویکیوم پمپ په کارولو سره کارول شوی و (KNF Neuberger, Freiburg, DE د پولی اسپایډ کنټرول بیګسایډ د کنټرول بیګسایډ څخه ترسره شوی). د اورپشن کالم د Teflon ټیوب (5.5 cm x 3 mm id) څخه جوړ شوی و چې د 35 ملی ګرامه پورپاک Q (50/80 میش؛ Waters Associates, Milford, MA, US) سره د شیشې وړۍ پلګونو په مینځ کې شتون درلود. د کارولو دمخه، کالم د 1 ملی لیتر سره فلش شوی و. entane (99.0% خالص محلول GC درجې، Sigma Aldrich). جذب شوي بې ثباته مواد د 400 μl pentane سره جلا شوي. د سر ځای ټولګه راټول شوي او بیا په -20 ° C کې زیرمه شوي ترڅو د نورو تحلیلونو لپاره وکارول شي.
د کوربه په لټه کې او د وینې خوړلو چلند غبرګونونه د سر ځای بې ثباته استخراج له تازه، 24-h، 72-h، او 168-h-عمر لرونکي ادرار څخه راټول شوي د Arabidopsis مچیو څخه د بې ثباته استخراج لپاره د مستقیم شیشې ټیوب په کارولو سره تحلیل شوي. د An's د کور لټون فعالیت موده.Arab [19]. د شیشې ټیوب olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) د پورته څخه د 3 ± 1 lx سور ر lightا سره روښانه شوی و. د چارکول فلټر شوی او رطوبت شوی هوا جریان (25 ± 2 ° C ، 25 ± 2 ° C، 65 ± 65 سانتي مترو د بایو میډیا په نسبت 65 سانتي مترو کې تېر شوی) ir د سټینلیس سټیل میش سکرینونو سلسله څخه تیریږي ، د لامینار جریان او یونیفورم پلوم جوړښت رامینځته کوي. د غاښونو ټیمپون توزیع کونکي (4 سانتي متره × 1 سانتي متره؛ L:D؛ DAB د غاښونو AB) ، د olfactometer د باد په پای کې د 5 سانتي کویل څخه معطل شوی ، د هر μsp 50 دقیقې سر یا 1 دقیقې د stimulsis سره بدلیږي. په 1:10 کې کم شوی، د محرک په توګه کارول شوی و. یو مساوي مقدار پینټین د کنټرول په توګه کارول شوی و. انفرادي کوربه یا وینه چوسونکي ماماګانې د تجربې له پیل څخه 2-3 ساعته دمخه په انفرادي خوشې پنجرو کې ځای په ځای شوي وې. د خوشې کولو پنجره د لاندې باد په اړخ کې کیښودل شوه، مګر بیا د olfactometer او 1 olfactometer لپاره اجازه ورکړل شوه. د پنجرې والو د خوشې کولو لپاره پرانستل شو. درملنې یا کنټرول ته جذب د مچیو د تناسب په توګه تحلیل شو چې د خوشې کیدو په 5 دقیقو کې د سرچینې سره تماس ته رسیدلی و. هر سر ځای بې ثباته استخراج او کنټرول لږترلږه 30 ځله تکرار شوی و، او د یوې ورځې د اغیزو څخه مخنیوي لپاره، د هرې ورځې د درملنې او کنټرول ازموینې څخه د وینې ازموینې څخه ورته شمیرې او کنټرول شوي. د ic په مقابل کې د سر ځای سیټونه د نامناسب لوژیستیکي ریګریشن په کارولو سره تحلیل شوي او وروسته د عجیب نسبتونو لپاره جوړه پرتله کول (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
د تازه او زړو غوا د پیشاب څخه د سر ځای استخراج د بګډورم په پنجرو کې تحلیل شوي (30 cm × 30 cm × 30 cm؛ MegaView Science). پلاستیک کپ ( 30 mL؛ Nolato Hertila) د 20 ملی لیتر د منحل شویو اوبو څخه ډک شوي، د کونج په کونج کې د 4 سانتي مترو په کونج کې د سپون کولو ځای چمتو شوی و. د درملنې کپونه د 10 μl د هر سر ځای استخراج سره په 1:10 کې تنظیم شوي. د کنټرول کپ تنظیم کولو لپاره مساوي مقدار پینټین کارول شوی. د درملنې او کنټرول کپونه د هرې تجربې تر مینځ تبادله شوي ترڅو د موقعیت اغیزې کنټرول کړي. لس وینه تغذیه شوي میرمنې په ZT 9-11 کې په تجربوي پنجرو کې خوشې شوي او وروسته د هګۍ په 2 ساعتونو کې د هګیو په شکل کې شمیرل کیږي. : (د درملنې په جام کې د ایښودل شویو هګیو شمیر - د کنټرول کپ کې ایښودل شوي هګیو شمیر) / (د ایښودل شویو هګیو ټول شمیر) هره درملنه 8 ځله تکرار شوې.
د ګاز کروماتګرافیک او د الکترون انتن نمونه کشف (GC-EAD) د ښځینه An.arabiensis تحلیل ترسره شو لکه څنګه چې مخکې تشریح شوي [20]. په لنډه توګه، تازه د سر ځای بې ثباته استخراج د Agilent ټیکنالوژۍ 6890 GC (سانتا کلارا، CA، CA5، 5، 5، 5، 3، 5 mm) سره جلا شوي. id، د 0.25 μm فلم ضخامت، Agilent ټیکنالوژي).هایډروجن د ګرځنده مرحلې په توګه د 45 سانتي مترو s-1 اوسط خطي جریان نرخ سره کارول کیده. هره نمونه (2 μl) د 30 ثانیو لپاره په سپیټلیس حالت کې د 225 سانتي ګریډ تودوخې سره انجیکشن شوې وه. د GC تنور تودوخه له 35 °C (3 °C 01 دقیقې 01 دقیقې ساتل) څخه برنامه شوې. -1. د GC د فاضله توزیع کونکي کې، 4 psi نایټروجن اضافه شوی او په 1:1 ویشل شوی په ګیرسټیل 3D/2 ټیټ ډیډ حجم کراس (Gerstel, Mülheim, DE) کې د شعاع ionization detector او EAD تر مینځ. د EAD لپاره د GC فاضله کیپیلري د Gerstel 2C °C د تودوخې درجې ته لیږدول شوی، کوم چې د Gerstel 2C °C د تودوخې درجې ته لیږدول کیږي. ټیوب (10 cm × 8 mm)، چیرې چې دا د کاربن فلټر شوي، رطوبت هوا (1.5 l min−1) سره مخلوط شوی و. انتن د ټیوب له بهر څخه 0.5 سانتي متره کې کیښودل شو. هر انفرادي غوماشی د یو نقل لپاره حساب شوی، او د کوربه په لټه کې د مچیو لپاره، لږترلږه د هر یو نمونې په عمر کې درې نمونې ترسره شوي.
د GC-MS؛ 6890 GC او 5975 MS؛ Agilent Technologies) په کارولو سره د GC-MS؛ 6890 GC او 5975 MS؛ Agilent Technologies په کارولو سره د تازه او زړو غواګانو ادرارونو د سر ځای په راټولولو کې د بایو اکټیو مرکبونو پیژندنه د GC-EAD تحلیل کې د انټینال غبرګونونو څرګندولو لپاره، د GC-7 EVP په EVC موډ کې د EVP په اغیزمنه توګه کار کوي. د 5MS UI لیپت شوي فیوز شوي سیلیکا کیپلري کالم (60 m × 0.25 mm داخلي قطر، 0.25 μm فلم ضخامت) د ګرځنده مرحلې په توګه د هیلیم په کارولو سره د اوسط خطي جریان نرخ 35 سانتي s-1.A 2 μl نمونه د ورته انجیکټر په کارولو سره انجیکشن شوی و چې د دوی د تودوخې پر اساس د ADC-Consis ترتیبونو په اساس پیژندل شوی و. وخت (Kovát index) او ډله ایز سپیکٹرا د ګمرک کتابتون او NIST14 کتابتون (Agilent) په پرتله. پیژندل شوي مرکبات د مستند معیارونو انجیکشن لخوا تایید شوي (اضافي فایل 1: جدول S2). د مقدار کولو لپاره، هیپتیل اسټیټ (10 ng، 99,8 % 10 ng, 99,8 purdity) د کیمیاوي معیار په توګه د 10 ng.
د مصنوعي بوی مخلوط د اغیزمنتیا ارزونه چې په تازه او زړو ادرار کې پیژندل شوي بایو اکټیو مرکبات دي چې د کوربه توب او وینې چوسونکي Ans.arabiensis جذبوي، د ورته olfactometer او پروتوکول په کارولو سره چې پورته پورته شوي. مصنوعي مخلوط د ترکیب او د سر 2 د سرونو د ترکیب او تناسب څخه نقل کوي. ساعت، 48-ساعت، 72-ساعت، او 168-ساعت عمر لرونکي ادرار (انځور 5D-G؛ اضافي فایل 1: جدول S2). د تحلیل لپاره، د 10 μl د 1:100 په بشپړ ډول مصنوعي مخلوط کې د 10 μl څخه کار واخلئ، د عمومي خوشې کولو کچه د 40-400-1000 څخه د 400-10000 څخه د جذب اندازه پورې اړه لري. د کوربه او وینه څښونکي مچیو لپاره. له دې وروسته، ازموینه په بشپړ مخلوط باندې ترسره کیږي، په کوم کې چې د بشپړ مخلوط څخه د واحد مرکبونو فرعي مرکبونه لیرې کیږي. د کوربه او وینې تغذیه شوي ځوابونو څخه د ځوابونو په لټه کې دي. د عرب په مقابل کې مصنوعي او فرعي مرکبونه د نومولو لپاره د ریګریسسټیک په کارولو سره تحلیل شوي. v14.0.0، SAS Institute Inc.).
د دې د ارزونې لپاره چې آیا د غوا پیشاب د ملاریا مچیو لپاره د کوربه استوګنځای په توګه کار کولی شي، د غوا پیشاب تازه او زاړه، لکه څنګه چې پورته تشریح شوي راټول شوي، او اوبه په 3 لیتره سطلونو (100 ملی لیتر) کې ځای پرځای شوي او د کوربه توب جالونو کې ځای پرځای شوي.(BG-HDT نسخه؛ BioGents, Regensburg, DE). لس جالونه په څړځایونو کې 50 متر په فاصله کې، د کلیو د ټولنې څخه 400 متر (سیلي، ایتوپیا، 5°53´24´N، 37°29´24´E) او هیڅ څاروی نه و، د دایمي نسل پالنې په ډګرونو کې، په داسې حال کې چې د پنځو کلیو لپاره د تودوخې شتون شتون درلود. د درملنې هر ځای په ټوله شپه کې د پنځه شپې لپاره ګرځول کیږي. د مختلفو عمرونو د ادرار په جال کې نیول شوي د مچیو شمیرې د بیټا دوه اړخیز ویش سره د لوژیستیکي ریګریشن په کارولو سره پرتله شوي (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
د ایتوپیا د اورومیا سیمې د ماکي ښارګوټي ته نږدې په ملاریا اخته کلي کې (8° 11′ 08″ N، 38 ° 81′ 70″ E؛ شکل 6A). دا څیړنه د اګست په نیمایي او د سپتمبر په نیمایي کې د کلني داخلي داخلي بارانونو سره سره ترسره شوې. برخه) د کلي په څنډه کې موقعیت لري د مطالعې لپاره غوره شوي (انځور 6A). د کورونو د ټاکلو لپاره معیارونه دا وو: په کور کې هیڅ څارویو ته اجازه نه ورکول کیږي، د کور دننه پخلی کول (د لرګیو یا چارکول رسمول) اجازه نه وه (لږترلږه د محاکمې په جریان کې)، او هغه کورونه چې حد اکثر دوه اوسیدونکي وي په غیر حشره وژونکو کې خوب کوي.د طبيعي علومو د پوهنځي (CNS-IRB) د ادیس ابابا پوهنتون د اداري څیړنو د اخالقي بیاکتنې بورډ (IRB/022/2016) لخوا اخلاقي تصویب شوی، د نړۍ د طبي اتحادیې لخوا رامینځته شوي لارښوونو سره سم چې د روغتیا نړیوال سازمان لخوا رامینځته شوی د هیلسینسکي د هر یو د روغتیایی کور څخه د روغتیایی کارمندانو لخوا مرسته شوی. ټوله پروسه د ولسوالۍ او وارډ ('کبل') په کچه د سیمه ایزو ادارو لخوا تایید شوې. تجربې ډیزاین د 2 × 2 لاتین مربع ډیزاین تعقیب کړ، چې په لومړۍ شپه مصنوعي مرکبات او کنټرولونه جوړ شوي کورونو ته ځانګړي شوي او په بله تجربه لرونکي شپه د کورونو ترمنځ تبادله شوي. دا پروسه لس ځله تکرار شوه. د اندازې په توګه د کور کټ کولو لپاره، د کور کټ کولو لپاره پنځه ټاکل شوي، په ترتیب سره ټاکل شوي د کور کټ کولو لپاره. د ورځې په ورته وخت کې د ساحې محاکمې په پیل، منځني او پای کې شپې.
یو مصنوعي مرکب چې شپږ بایو اکټیو مرکبات لري په هیپټین (97.0٪ محلول GC درجې ، سیګما الډریچ) کې حل شوي او د کاټن ویک ډسپنسر په کارولو سره په 140 ng h-1 کې خوشې شوي [20]. د wick dispenser اجازه ورکړه چې ټول مرکبات په دوامداره تناسب کې خوشې شي. د ناروغیو د کنټرول او مخنیوي مرکزونو (CDC) د رڼا جال (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; شکل 6A). جالونه د ځمکې څخه 0.8 - 1 متر لوړ د بستر پښو ته نږدې ځړول شوي، او یو رضاکار د یو غیر درملنې لاندې د مچیو او کیپونو تر منځ ویده شوی. د جنس او فزیولوژیکي حالت له مخې ed (نه تغذیه شوي، تغذیه شوي، نیمه امیندواره، او امیندواره [21] وروسته د پولیمیریز چین غبرګون (PCR) تحلیل په کارولو سره معاینه شوي ترڅو د مورفولوژیک ډول د A. gambiae sl. د کمپلیکس غړو په توګه پیژندل شوي ډولونه وپیژني [23]. د انحصار متغیر او درملنه (مصنوعی مخلوط vs کنټرول) ثابت اغیزه وه (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.).دلته، موږ د احتمالي تناسب ازموینې څخه د χ2 او p - ارزښتونو راپور ورکوو.
ارزونه وکړئ چې آیا دا خوندي دی. arabiensis د ادرار، د هغې اصلي نایتروجن سرچینه، یوریا، د مستقیم تغذیې په واسطه، د 4 ورځو لپاره د ادارې په 48 ساعتونو کې د کوربه توب څخه وروسته (dpe) او د وینې تغذیه شوي ښځینه تغذیه آزموینې (انځور 1A) ترلاسه کولی شي. ) = 20.15, p <0.0001 او F(5,299) = 56.00, p <0.0001، په ترتیب سره؛ انځور 1B,C) سربيره پردې، د کوربه په لټه کې ښځو په 168 ساعتونو کې د ادرار په پرتله په 72 ساعتونو کې لږ ادرار وخوړل، د 168 ساعتونو کې د ادرار په پرتله د F.W-B-WH-B-WH په خوړو کې شامل دي. د نورو ټولو غلظت او اوبو په پرتله په 2.69 mM کې د پام وړ ډیر مقدار یوریا جذب کړی، پداسې حال کې چې د 10٪ سوکروز (F(10,813) = 15.72، p <0.0001؛ شکل 1D څخه د توپیر وړ نه دی). اوبه، که څه هم د پام وړ له 10٪ سوکروز څخه کم وي (F(10,557) = 78.35, p <0.0001؛ شکل 1.1E). برسیره پردې، کله چې د دوه فزیولوژیکي حالتونو ترمنځ پرتله شي، فلیبوټومیز شوي میرمنې د کوربه په پرتله ډیر یوریا جذبوي او د میرمنو په پرتله د ورته اندازې په لټه کې د میرمنو په پرتله خورا ټیټه اندازه جذبوي. په لوړ غلظت کې (F(1,953) = 78.82, p <0.0001;انځور 1F, G) په داسې حال کې چې د یوریا لرونکي خواړو څخه اخیستل غوره ارزښتونه (انځور 1D,E) ښکاري، په دواړو فزیولوژیکي حالتونو کې میرمنې توانیدلي چې د یوریا غلظت په ټوله سلسله کې د یوریا جذب شوي مقدار کې د لوګ-لینیر فیشن (Fig1) بڼه بدل کړي.په ورته ډول، مچیو د ادرار جذب شوي مقدار تنظیمولو سره خپل نایتروجن جذب کنټرولوي، ځکه چې په ادرار کې د نایتروجن مقدار د جذب شوي مقدار کې منعکس کیږي (شکل 1B، C او B انسټیټونه).
د کوربه په لټه کې او وینه څښونکي مچیو بقا باندې د ادرار او یوریا اغیزې ارزولو لپاره ، میرمنو ته په ټولو څلورو عمرونو کې ادرار ورکړل شوي (تازه ، 24 h، 72 h او 168 h وروسته له مینځه وړل) او د یوریا غلظت یو لړ لړۍ ، او همدارنګه د منحل شوي اوبو او sucrose20A% کنټرول په توګه د دې سرویو 2010٪ کنټرول. lysis وښودله چې رژیم د کوربه په لټه کې میرمنو کې په ټولیز ډول بقا باندې د پام وړ اغیزه درلوده (ادرار: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; انځور: 32, C, 9, B, B, 0,0001, Fig. df = 5, p < 0.0001؛ یوریا: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001؛ شکل 2D,E) په ټولو تجربو کې، میرمنو د ادرار، یوریا او اوبو خواړه تغذیه کړي د ښځو د ژوندي پاتې کیدو کچه د F-S-B-F-د تازه تغذیه شویو میرمنو په پرتله د پام وړ ټیټه وه. ale ادرار د ژوندي پاتې کیدو مختلف نرخونه ښودلي ، د 72-h پخې ادرار (p = 0.016) سره د ژوندي پاتې کیدو ترټولو ټیټ احتمال لري (Fig. 2B). سربیره پردې ، کوربه توب کونکو میرمنو 135 ملی میتر یوریا تغذیه کړې د اوبو کنټرول (p
د الوتنې مل ټیسټ کې د 24 ساعتونو په موده کې ټاکل شوي ټول فاصله او شمیره د کوربه غوښتونکي او وینه چوسونکي مچیو ترمنځ توپیر لري، کوم چې په ټولیز ډول د الوتنې لږ فعالیت ښودلی (3 انځور). د 24 او 168 ساعتونو عمر لرونکي مچکو چې په ادرار تغذیه شوي د الوتنې مختلف نمونې ښودلې او په عمده توګه ورځنۍ وې. ښځینه مچۍ چې سوکروز یا 72 ساعته ادرار چمتو کوي په 24 ساعتونو کې فعالیت ښودلی ، پداسې حال کې چې هغه میرمنې چې اوبه چمتو کوي د معدې په مینځ کې د لوړې کچې فعالیت په جریان کې ډیرې فعالې وې. د شپې ناوخته او سهار وختي، پداسې حال کې چې هغه کسان چې د 72-ساعت عمر لرونکي ادرار خوري په 24 ساعتونو کې په فعالیت کې د ثابت کمښت تجربه کوي (شکل 3).
د ښکار په لټه کې وینه چوسونکې ښځینه انوفیلس اربینیس الوتنې فعالیت چې د غوا په پیشاب او یوریا تغذیه کوي. د الوتنې مل ازموینې کې ، ښځینه مچۍ د تازه او زړو غوا په پیشاب تغذیه شوې ، د یوریا مختلف غلظت ، سوکروز (10٪) ، او منحل شوي اوبه (H2O) په وړیا توګه د هورمون یا تودوخې سره تنظیم شوي. په لټه کې (کیڼ) او وینه څښونکي (ښي) میرمنې، د 24 ساعتونو په موده کې د هر غذا لپاره په هر ساعت کې د الوتنې ټول فاصله او شمیر ثبت شوي (تور: خړ؛ رڼا: سپین). اوسط فاصله او د بوټونو اوسط شمیر د سرکیډین فعالیت ګراف ښیې خوا ته ښودل شوي. د تېروتنې بار د معیاري تېروتنې استازیتوب کوي. احصایوي متن وګورئ.
په عموم کې، د کوربه په لټه کې میرمنو د الوتنې ټول فعالیت د 24 ساعتونو په موده کې د الوتنې فاصلې ته ورته نمونه تعقیب کړه. د الوتنې فاصله د پام وړ د خوراکي رژیم لخوا اغیزمنه شوې (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001)، او کوربه لټوونکې میرمنې د 72 ساعتونو اوږد فاصلې په پرتله د ټولو غذایي رژیم په پرتله د پام وړ 72 ساعتونو فاصله مصرف کړې. )، او سوکروز تغذیه شوي مچان د تازه (p = 0.022) او 24-h-عمر لرونکي ادرار (p = 0.022) تغذیه شوي مچیو څخه ډیر الوتل. د الوتنې د فعالیت طرزالعمل برعکس چې د ادرار رژیم لخوا تشریح شوي، یوریا تغذیه شوي کوربه لټوونکې میرمنې د الوتنې په دوهم پړاو کې د تیاره فعالیت په نیمایي مرحله کې ښودل شوي. 3) .که څه هم د فعالیت نمونې ورته وې، خو کوربه په لټه کې میرمنو یوریا تغذیه کړه د پام وړ د الوتنې فاصله د جذب شوي غلظت (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) پورې اړه لري. کوربه توب میرمنو هر ډول غلظت د یوریا flesew یا د ښځینه flese000000 څخه اوږده اوبه تغذیه کړې.
د وینې چوونکي مچیو په ټولیز ډول الوتنې فعالیت په ټولو رژیمونو کې د 24 ساعتونو په اوږدو کې باثباته او دوام لري ، د تیاره دورې په دویمه نیمایي کې د میرمنو لپاره چې په اوبو کې تغذیه کیږي د ادرار فعالیت ډیر شوی او همدارنګه په هغو میرمنو کې چې تازه تغذیه شوي او 24 ساعته عمر لري (انځور 3). د یوریا رژیم نه درلود (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24). د نورو ادرار او کنټرول رژیم سره (تازه، p = 0.0091؛ 72 ساعته، p = 0.0022؛ 168 ساعتونه، p = 0.001؛ sucrose، p = 0.001؛ sucrose, p = 0.001, p = 0.00d.001).
په تناسلي پیرامیټرونو باندې د ادرار او یوریا تغذیه اغیزې د هګیو ایښودلو بایوسایز (4A شکل) کې ارزول شوي او د هرې میرمنې لخوا د ایښودل شوي هګیو شمیر ، د هګیو اندازې او نوي زیږون شوي لومړي انسټار لاروا له مخې څیړل شوي. د ایښودل شوي هګیو شمیر. د ادرار تغذیه شوي عرب میرمنې (5.0 = 2.0.2 سره توپیر لري). 8؛ انځر 4B) ښځو د 24 ساعتونو ادرار تغذیه کړه، د وینې خواړه د ښځو د نورو ادرار خواړو په پرتله د پام وړ ډیرې هګۍ اچولې او د سوکروز تغذیه شوي (4B شکل) سره ورته وې. په ورته ډول، د ادرار تغذیه شوي میرمنو لخوا د ایښودل شوي هګیو اندازه د رژیم له مخې توپیر لري (F (5.20 = 5.20، 5.20) <p.0.20، <1.20. په ساعت کې ادرار او سوکروز تغذیه شوې میرمنې د اوبو تغذیه کونکو میرمنو په پرتله د پام وړ لویې هګۍ اچوي ، پداسې حال کې چې د 168 ساعتونو ادرار سره تغذیه شوې میرمنې هګۍ د پام وړ وړې وې (انځور 4C). سربیره پردې ، د ادرار رژیم د لاروا اندازه (F(5, 187) = 7.80 l<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<রর د پیشاب رژیم د لاروا اندازه اغیزمنه کړې. د 24- او 72-ساعت عمر لرونکو میرمنو لخوا چې د ادرار تغذیه شوې میرمنې د هګیو لاروا څخه ایښودل شوي هګیو څخه. د اوبو لخوا تغذیه شوي او 168-ساعت ادرار لرونکي میرمنې (شکل 4D).
د ښځینه Anopheles arabinis تناسلي فعالیت د غوا په پیشاب او یوریا تغذیه کوي. د وینې تغذیه شوي ښځینه مچیو ته خواړه ورکړل شوي چې تازه او د زړو غوا پیشاب لري، د یوریا مختلف غلظت، سوکروز (10٪)، او د څښاک اوبه (H2O) د 48 ساعتونو لپاره مخکې له دې چې د هګیو ایګ 8 شمیره (د بیوسټرای بی شمیره) کې واچول شي. , E)، د هګۍ اندازه (C, F) او د لاروا اندازه (D, G) د ورکړل شوي غذا لخوا د پام وړ اغیزمن شوي (د غوا پیشاب: BD؛ یوریا: EG). د هر پیرامیټر لپاره معنی چې د مختلف لیکونو نومونو په کارولو سره اندازه شوي د یو بل څخه د پام وړ توپیر درلود (یو طرفه ANOVA د Tukey د پوسټ هاک تحلیل په کارولو سره؛ p <0.05 د معیاري غلطی معنی څرګندوي).
د پیشاب د عمده نایتروجني اجزا په توګه، یوریا، کله چې د وینې تغذیه شوې میرمنو ته د غذا په توګه ورکړل شي، په ټولو مطالعاتو کې د زیږون پیرامیټرو باندې د پام وړ اغیزه کوي. د ښځو لخوا د یوریا تغذیه شوي هګیو شمیر، د یوریا غلظت پورې اړه لري (F(11, 360) = د یوریا غلظت پورې اړه لري (F(11, 360) = د 4.601 4.60 4.60 4.60 4.60 s<4010] µM او 1.34 mM ډیرې هګۍ اچوي (شکل 4E) .د 134 µM یا پورته یوریا غلظت باندې تغذیه شوې میرمنې په اوبو کې تغذیه شوي میرمنو په پرتله لویې هګۍ اچوي (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001)، او د مور د اندازې په 4 سینټ کې د ورته والټریشن لخوا اغیزمن شوي. (F(10, 3305) = 37.9؛ p <0.0001) ډیر متغیر و (انځور 4G).
په ټولیز ډول د کوربه په لټه کې د غواګانو ادرار سر ځای بې ثباته استخراج ته جذب. د ګلاس ټیوب olfactometer (Fig. 5A) کې ارزول شوي arabiensis د ادرار عمر (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032) لخوا د پام وړ اغیزمن شوی و. 24 ساعته د نورو ټولو درملنو په پرتله د پام وړ لوړ جذابیت رامینځته کوي (72 ساعته: p = 0.0060، 168 ساعته: p = 0.012، pentane: p = 0.00070)، پرته له دې چې د تازه ادرار بوی (p = 0.13؛ شکل 5B) د وینې د پام وړ جذبولو لپاره د پام وړ نه و. ly مختلف (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067؛ انځور. 5C)، دا ښځینه د کنټرول په پرتله د 72-ساعت عمر لرونکي ادرار په پرتله د سر ځای بې ثباته استخراج لپاره د پام وړ ډیر زړه راښکونکي موندل شوي (p = 0.0066؛ شکل 5C).
د طبیعي او مصنوعي غوا د پیشاب بوی ته د چلند ځوابونه د کوربه او وینې تغذیه شوي انوفیلس عربانوس په لټون کې. د شیشې ټیوب اولفاکټومیټر سکیمیټ (A). د تازه او زړو غوا پیشاب څخه کوربه (B) ته د هیډ سپیس بې ثباته استخراج او د رب د مایعاتو ایستل (C) ته د وینې چوس کولو عکس العمل. s د تازه (D) څخه جلا شوی، 24-hour (E)، 72-hour (F)، او 168-hour (G) عمر لرونکي د غوا پیشاب ښودل شوي. د الکترون انتن کشف (EAD) نښې په سر کې د بایو فعال مرکباتو په ځواب کې د ولتاژ بدلون ښیي چې د ګازو کروماتوګرافی کشف شوي باروتوګراف لخوا کشف شوي او د IDF chromatoflap لخوا کشف شوي غبرګون څرګندوي. de (mV) د ساتلو وخت (s) په مقابل کې. د بیولوژیکي پلوه فعال مرکبونو ملکیتونه او د خوشې کولو نرخونه (µg h-1) ښودل شوي. یو واحد ستوری (*) د ثابت ټیټ طول البلد غبرګون په ګوته کوي. دوه ځله ستوري (**) د نه تولیدي غبرګون څرګندوي. کوربه ومومئ (H) او د وینې د تازه کولو لپاره د مائیکسیک اپل مختلف ترکیبونه (MiX) لري. او د غوا د ادرار بویونه. د غواګانو منځنۍ تناسب چې د مختلفو لیکو نومونو ته متوجه شوي یو له بل څخه د پام وړ توپیر درلود (یو طرفه ANOVA د توکی پوسټ هاک تحلیل په کارولو سره؛p <0.05).د تېروتنې بار د پیمانه معیاري تېروتنه څرګندوي
ښځینه Ann.arabiensis، 72 h او 120 h د وینې له خواړو وروسته، د سپون کولو په جریان کې، د پنټین کنټرولونو په پرتله د تازه او زړو غوا پیشاب څخه د سر ځای بې ثباته استخراج ته هیڅ ترجیح نه وه ښودل شوې (χ2 = 3.07, p > 0.05؛ اضافي فایل 1: انځور S1).
د ښځینه Ann.arabiensis لپاره، GC-EAD او GC-MS تحلیلونو اته، شپږ، درې او درې بایو اکټیو مرکبات پیژندلي (شکل 5D-G). که څه هم د مرکبونو په شمیر کې توپیرونه لیدل شوي چې الیکټرو فزیولوژیکي غبرګونونه یې لیدلي، ډیری دا مرکبات په هر سر ځای کې موجود وو، د هر یو بې ثباته استخراج لپاره یوازې د تازه استخراج لپاره راټول شوي. د حد څخه پورته د ښځینه انتن څخه فیزولوژیکي غبرګون په نورو تحلیلونو کې شامل شوي.
د هیډ اسپیس په ټولګه کې د بایو اکټیو مرکبونو ټول بې ثباته خوشې کولو کچه په تازه ادرار کې له 29 µg h-1 څخه په 168-ساعت عمر لرونکي ادرار کې 242 µg h-1 ته لوړه شوې ، په عمده توګه د p-cresol او m-formaldehyde فینول له امله وده کوي او همدارنګه د فینول د خوشې کیدو کچه ، د دې په مقابل کې ، د ډیسایکل 1 د خوشې کولو نرخ ، د دې برعکس. کانال، د ادرار د عمر د زیاتوالي سره کم شوی، کوم چې د سیګنال شدت (کثرت) کې د کروماتوگرام (انځور 5D) -G بائیں پینل) او د دې مرکبونو فزیولوژیکي غبرګونونو (انځور 5D-G ښي پینل) کې د لیدل شوي کمښت سره تړاو لري.
په ټولیز ډول، مصنوعي مخلوط د بایو فعال مرکبونو ورته طبیعي تناسب درلود چې د تازه او زړو ادرار سر ځایونو (انځور 5D-G) کې په بې ثباته استخراج کې پیژندل شوي او داسې نه ښکاري چې د کوربه په لټون کې د پام وړ اپیل رامینځته کړي (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.03 = 0.03) یا وینه. 4.91, df = 4, p = 0.30؛ انځور 5I). په هرصورت، د درملنې تر مینځ وروسته وروسته پرتله پرتله کول وښودله چې د کوربه په لټه کې مچیو د 24-h عمر لرونکي ادرار مصنوعي مخلوط ته د پام وړ زړه راښکونکي وو چې د پینټین کنټرول (p = 6 08 0.50).
د 24-h-عمر لرونکي ادرار په مصنوعي مرکبونو کې د انفرادي اجزاو رول ارزولو لپاره، شپږ فرعي مرکبونه د Y-tube assay کې د بشپړ مرکبونو په مقابل کې ارزول شوي، په کوم کې چې انفرادي مرکبات لیرې شوي. د کوربه په لټه کې د مچیو لپاره، د بشپړ مخلوط څخه د انفرادي مرکبونو کمول = 962 د چلند په اړه د پام وړ اغیزه درلوده χ63. 6, p = 0.0032؛ اضافي فایل 1: شکل S2A)، ټول تخفیف لرونکي مرکبونه د بشپړ مخلوط په پرتله کوچني په پرتله خورا زړه راښکونکي وو. په مقابل کې، د بشپړ مصنوعي مخلوط څخه د انفرادي مرکبونو لرې کول د وینې چوسونکي مچیو (χ2 = 78، 78 = 3.0، 7.0، χ2 = 1 d 78 سره)، د بشپړ مصنوعي مرکب څخه د انفرادي مرکبونو لیرې کول اغیزه نه کوي. کانال، کوم چې د بشپړ مخلوط جذب په پرتله د ټیټې کچې په پایله کې (p = 0.022؛ اضافي فایل 1: شکل S2B).
په ایتوپیا کې د ملاریا په ناروغۍ اخته کلي کې، د ځمکې لاندې شرایطو کې د مچیو په جذبولو کې د 24 ساعتونو لپاره د غوا پیشاب د مصنوعي ترکیب اغیز د لسو شپې لپاره ارزول شوی (6A انځور). pharoensis او 35.4% د Culex spp. (0, 3196) = 170.0, p <0.0001) .د محاکمې په پیل، منځني او پای کې د کنټرول په پنځو شپو کې په هر یو کې غیر داغ شوي جالونه ترتیب شوي وو. د مچیو ورته شمیر په هره جوړه جال کې نیول شوي، چې د کورونو تر منځ هیڅ ډول تعصب ښیي، χ16 = 02 = 06 (χ) 0.05) او د مطالعې دورې په جریان کې د نفوس کمښت ندی راغلی. د کنټرول جالونو سره په پرتله، په جالونو کې نیول شوي مچیو شمیر چې مصنوعي مخلوط لري د پام وړ زیاتوالی موندلی: د کوربه لټون (χ2(0, 2107) = 138.7, p <0.0001)، وروستي وینې (p <0.0001). ) او حمل (χ2(0، 228) = 6.27، p = 0.0123؛اضافي فایل 1: جدول S1) دا هم د نیول شوي مچیو په ټولیز شمیر کې منعکس کیږي: کوربه لټوونکي> وینې څښل> امیندواره> نیمه امیندواره> نارینه.
د 24 ساعتونو مصنوعي غوا پیشاب بوی مخلوط د اغیزمنتیا ساحه ارزونه. د ساحې آزموینې په سویل مرکزي ایتوپیا (نقشه) کې د ماکي ښارګوټي ته نږدې (نقشې) کې ترسره شوي، د ناروغیو کنټرول مرکز (CDC) د رڼا جال (ښي) په کارولو سره په جوړه کورونو کې (د CDC) د رڼا جال (ښي) سره په جوړه شوې کورونو کې (د CDC) عکس العمل ډیزاین شوی. فوټوټراپونه ښځینه انوفیلیز عربیسکوز (B) جذبوي او نیسي، مګر د انوفیلس فارروز (C) نه، په بل ډول، په فیزولوژیکي حالت پورې تړلي اغیز لري. سربیره پردې، دا جالونه د کوربه Culex مچیو د پام وړ زیاتې شمیرې نیولې. (D) د کنټرول سره پرتله کیږي. په کیڼ اړخ کې بارونه د منځني کنټرول شاخص (baughitor etdex) د منځني کنټرول شاخص استازیتوب کوي. ) جالونه (N = 10)، پداسې حال کې چې په ښي خوا کې بارونه د کنټرول جالونو په جوړه کې د اوسط انتخاب شاخص څرګندوي (خلاص؛ N = 5).ستوري د احصایوي اهمیت کچه په ګوته کوي (*p = 0.01 او ***p <0.0001)
درې ډولونه په جلا توګه په جالونو کې نیول شوي چې مصنوعي مرکبات پکې شامل دي. د کوربه په لټه کې (χ2(1, 1345) = 71.7, p <0.0001)، د وینې تغذیه (χ2(1, 517) = 16.7, p <0.0001) او حمل (1.01 = 0.0001) او امیندوارۍ (χ1 = 102) 4) a .arabiensis په هغه جال کې ودرول شو چې مصنوعي مرکب (انځور 6B) خوشې کوي، پداسې حال کې چې د An مقدار توپیر نه درلود. په مختلفو فزیولوژیکي حالتونو کې فیروینسیس وموندل شو (انځور 6C). د Culex لپاره، یوازې د هغه مچیو په شمیر کې د پام وړ زیاتوالی چې د کوربه په لټه کې و، په 133 کې موندل شوی. 12.6، p = 0.0004؛ انځور 6D)، د کنټرول جالونو سره پرتله کول.
په ایتوپیا کې د نسل ورکولو ځایونو او کلیوالي ټولنو ترمنځ د احتمالي کوربه څخه بهر د کوربه بیت جالونه کارول شوي ترڅو دا ارزونه وکړي چې ایا د ملاریا مچان د غوا د پیشاب بوی د کوربه استوګنځای په توګه کاروي. په هرصورت، د لوړې تودوخې او د غوا د پیشاب بوی په شتون کې، ښځینه ملاریا مچۍ جذب شوي او نیول شوي، که څه هم په لږ شمیر کې، د ادرار عمر څخه خپلواک (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13؛ اضافي فایل 1: شکل S3 ). : شکل S3).
د ملاریا مچۍ د نایتروجن لرونکی مرکبات د غوا په پیشاب (یعنې د پوډرو) د معاوضې تغذیه کولو له لارې ترلاسه کوي او توزیع کوي ترڅو د ژوند تاریخي ځانګړتیاو ته وده ورکړي، لکه د نورو حشراتو په څیر [2, 4, 24, 25, 26]. د غوا پیشاب یو په اسانۍ سره د آرام کولو وړ ځایونه دي چې د کوریا سره تړلي ځایونه شتون لري. او د کلیوالي کورونو او د زیږون ځایونو ته نږدې اوږد بوټي. ښځینه مچۍ دا سرچینه د بوی په واسطه کشف کوي او کولی شي په ادرار کې د نایتروجن مرکباتو جذب تنظیم کړي، په شمول د یوریا، په ادرار کې د نایتروجن لوی جز دی [15, 16]. په ټولو مایعاتو پورې اړه لري د ښځو په فزیولوژیکي حالت پورې اړه لري. د الوتنې فعالیت او د کوربه لټولو ښځینه مچیو بقا، او همدارنګه د لومړي ګوناډوټروپيک دورې په جریان کې د وینې تغذیه شوي اشخاصو بقا او تولیدي ځانګړتیاو ته وده ورکوي. له همدې امله د ادرار مخلوط د ملاریا ویکتورونو لپاره مهم تغذیه رول لوبوي چې د خوارځواکۍ میرمنو په څیر د لویانو په څیر تړل شوي د خوارځواکۍ لپاره مهم رول لوبوي. trogenous مرکبات د ټیټ خطر سره تغذیه کې ښکیل دي. دا موندنه د پام وړ ایډیډیمولوژیکي پایلې لري، ځکه چې د میرمنو د ژوند اټکل، فعالیت او د زیږون تولید زیاتیږي، دا ټول د ویکتور ظرفیت اغیزه کوي. سربیره پردې، دا چلند ممکن د راتلونکي ویکتور مدیریت پروګرامونو هدف وي.
د پوسټ وخت: جون-15-2022