Шим тэжээлийг олж авах, түгээх нь шавжны идэш тэжээл, амьдралын түүхийн шинж чанаруудыг нэгтгэдэг. Амьдралын янз бүрийн үе шатанд тодорхой шим тэжээлийн дутагдлыг нөхөхийн тулд шавжнууд эдгээр шим тэжээлийг нэмэлт тэжээлээр, жишээлбэл, шалбааг гэж нэрлэгддэг сээр нуруутан амьтдын шүүрлээр хооллох замаар олж авдаг. болон нөхөн үржихүй.Энэ судалгааны зорилго нь Ан.Үхрийн шээсэнд шим тэжээл авахын тулд arabiensis өдөөх нь амьдралын түүхийн шинж чанарыг сайжруулдаг.
Аюулгүй эсэхийг шалгаарай.Арабиенсис нь шинэхэн, 24, 72, 168 цагийн настай үхрийн шээсний үнэрт татагдаж, тэжээгчийг хайж, цусаар хооллодог (цусны дараах 48 цагийн хоол) эмэгчинүүдийг Y хэлбэрийн олфактометрээр хэмжиж, хээлтэй эмэнд химийн шинжилгээ хийж, химийн шинжилгээнд хамруулсан. Бүх дөрвөн насны үхрийн шээсэнд агуулагдах э нэгдлүүд. Био идэвхит нэгдлүүдийн нийлэг хольцыг Y-хоолой болон хээрийн туршилтаар үнэлэв. Хумхаа өвчний тээгчийг нэмэлт тэжээл болгон үнээний шээс болон түүний гол азот агуулсан мочевиныг судлахын тулд хоол тэжээлийн үзүүлэлтүүд болон амьдралын түүхийн шинж чанарыг судалж үзсэн. хооллосны дараа эмэгчин амьд үлдэх, уясан нислэг, үржихүйн байдлыг үнэлэв.
Гэрийн тэжээвэр амьтдын цус, тэжээлийг эрэлхийлдэг. Лабораторийн болон хээрийн судалгаагаар арабууд үхрийн шинэхэн, хөгширсөн шээсний байгалийн болон нийлэг үнэрт татагддаг. Жирэмсэн эмэгтэйчүүд үржлийн газарт үхрийн шээсний хариу урвалд хайхрамжгүй ханддаг байв. Хост хайх, цус сорогч эмэгтэйчүүд үхрийн шээс, мочевиныг амьдралынхаа бүх үйл ажиллагааны дагуу идэвхтэй шингээж авдаг. , амьд үлдэх, эсвэл үржих.
Амьдралын түүхийн шинж чанарыг сайжруулахын тулд үхрийн шээсийг Anopheles arabinis олж авах, хуваарилах. Үхрийн шээсийг нэмэлтээр хооллох нь векторын багтаамжид шууд нөлөөлж, өдөр тутмын амьд үлдэх, векторын нягтралыг нэмэгдүүлж, шууд бусаар нислэгийн үйл ажиллагааг өөрчилдөг тул ирээдүйн загварт анхаарч үзэх хэрэгтэй.
Шим тэжээлийг олж авах, түгээх нь шавжны идэш тэжээл, амьдралын түүхийн шинж чанаруудыг нэгтгэдэг [1,2,3]. Шавжнууд нь хүнсний олдоц, шим тэжээлийн хэрэгцээнд тулгуурлан хоол хүнс сонгох, олж авах, нөхөн тэжээл өгөх чадвартай байдаг [1, 3]. Шим тэжээлийн хуваарилалт нь амьдралын түүхийн үйл явцаас хамаардаг бөгөөд хоол тэжээлийн янз бүрийн амьдралын чанар, тоо хэмжээний хувьд өөр өөр шаардлагад хүргэж болзошгүй [1,2]. тусгай тэжээллэг бодисоор шавжнууд эдгээр шим тэжээлийг шавар, сээр нуруутан амьтдын янз бүрийн ялгадас, шүүрэл, сэг зэм гэх мэт нэмэлт тэжээлээр олж авах боломжтой. Энэ үйл явц нь шалбааг [2]. Хэдийгээр олон төрлийн эрвээхэй, эрвээхэйний төрлийг голчлон тайлбарласан ч усалгааны нүхнүүд нь бусад төрлийн шавжны дараалал, тэжээллэг чанар, тэдгээрийн эрүүл мэндэд чухал нөлөө үзүүлдэг. [2, 4, 5, 6] ,7]. Хумхаа өвчний шумуул Anopheles gambiae sensu lato (sl) нь "хоол тэжээлийн дутагдалтай" насанд хүрсэн [8] байдлаар гарч ирдэг тул усалгаа нь түүний амьдралын түүхэнд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг боловч энэ зан үйлийг өнөөг хүртэл үл тоомсорлодог. Энэ нь тархалтын үр дагаврыг нэмэгдүүлэхэд чухал ач холбогдолтой юм.
Нас бие гүйцсэн эм Anopheles шумуулын авгалдайн үеийн илчлэгийн нөөц бага, цусны хоолыг үр ашиггүй зарцуулдаг зэргээс шалтгаалан азотын хэрэглээ хязгаарлагдмал байдаг [9].Эмэгтэй Ann.gambiae sl ихэвчлэн нэмэлт цусаар үүнийг нөхдөг [10, 11], улмаар шумуул өвчнөөр өвчлөх эрсдэлийг нэмэгдүүлдэг. ly, шумуул нь дасан зохицох болон нислэгийн маневрлах чадварыг сайжруулдаг азотын нэгдлүүдийг олж авахын тулд сээр нуруутан амьтдын ялгадсыг нэмэлт тэжээлээр хооллодог болохыг бусад шавж [2] харуулж байна. Үүнтэй холбогдуулан Ан. Гамбийн sl-ийн аль нэг төрөл зүйлийн хүчтэй бөгөөд тод татагддаг нь Гамбийн sl, Anopheles arabinis, Anopheles a newed төрлийн цогцолбор, сонирхолтой бөгөөд тод томруун юм. Anopheles arabinis нь өөрийн эзэгтэйн хувьд оппортунист бөгөөд үхэртэй нийлж, хооллодгоороо алдартай. Үхрийн шээс нь азотын нэгдлээр баялаг нөөц бөгөөд шинэхэн шээс дэх нийт азотын 50-95%-ийг мочевин эзэлдэг [15, 16]. Үхрийн шээсний бичил биетүүд хөгшрөхийн хэрээр эдгээр нэгдлүүдийн бичил биетүүд буурдаг. цаг [15].Органик азотын бууралттай холбоотой аммиак хурдацтай нэмэгдэхийн хэрээр шүлтлэг бичил биетүүд (тэдгээрийн ихэнх нь шумуулд хортой нэгдлүүд үүсгэдэг) үрждэг [15] нь эмэгтэй Ann.arabiensis 24 цаг ба түүнээс доош насны шээсэнд илүү татагддаг [14].
Энэхүү судалгаанд эзэн болон цусаар тэжээгддэг Ans-ийг хайсан. Анхны гонадотропины мөчлөгийн үеэр arabiensis-ийг шээс холих замаар азотын нэгдлүүд, тэр дундаа мочевиныг олж авсан эсэхийг үнэлэв. Дараа нь, эм шумуул энэ боломжит шим тэжээлийн нөөцийг хэрхэн хуваарилж, үржил шимийг нь сайжруулж, үржил шимийг нь нөхөн төлжүүлж, нөхөн үржихүйн нөхөн төлжилтийг сайжруулах зорилгоор хэд хэдэн туршилт хийсэн. Эдгээр нь эзэн болон цусаар тэжээгддэг Ан-д найдвартай мэдээлэл өгч байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд шээсийг үнэлэв. Энэхүү боломжит тэжээлийн нөөцийг хайж олохдоо arabiensis нь ажиглагдсан ялгаатай сонирхол татахуйц химийн хамаарлыг олж илрүүлсэн. 24 цагийн настай шээсэнд илэрсэн дэгдэмхий органик нэгдлүүдийн (VOCs) нийлэг үнэрийн хольцыг хээрийн нөхцөлд шээсний үр нөлөөг цааш нь үнэлж, хөдөлмөрийн үр дүнг гаргаж авсан. янз бүрийн физиологийн төлөв байдалд.шумуул татах.Гаруулсан үр дүн нь Ан.arabiensis нь амьдралын түүхийн шинж чанарт нөлөөлөхийн тулд сээр нуруутан амьтдын шээсэнд агуулагдах азотын нэгдлүүдийг олж авч, түгээдэг. Эдгээр үр дүнг эпидемиологийн болзошгүй үр дагавар болон тэдгээрийг векторын тандалт, хяналтад хэрхэн ашиглах талаар авч үзнэ.
Anopheles arabicans (Dongola омог) нь 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH, 12:12 цагийн гэрэл: харанхуй мөчлөгт хадгалагдсан. Авгалдайг нэрмэл усаар дүүргэсэн хуванцар саванд (20 см × 18 см × 7 см) өсгөж, Tetramin® загасны хоолоор хооллосон. аяга (Nolato Hertila, Åstorp, SE), дараа нь насанд хүрэгсэд гарч ирэхийг зөвшөөрөхийн тулд Бугдормын торонд (30 см × 30 см × 30 см; MegaView Science, Taichung, Тайвань) шилжүүлсэн. Насанд хүрэгсдэд 10% сахарозын уусмалыг 10% -ийн сахарозын уусмалыг гарч ирснээс хойш 4 хоногийн өмнө (туршилтанд орохоос өмнө) өгсөн. Туршилтын өмнө доор дурдсанчлан нэрмэл усаар нэг хонуулсан. Нислэгийн хоолойн туршилтанд ашигласан эмэгчинүүдийг зөвхөн 4-6 цагийн турш ad libitum усаар өлсгөсөн. Дараагийн био шинжилгээнд цус сорогч шумуул бэлтгэхийн тулд 4 dpe эмэгчинд дефиброзтой хонины цус (Håtunalab, Bro, SE) ашиглан дефиброзтой хонины цус (Håtunalab, Bro, SE) , Discovershops, A Diaspora, Workshop, UK Membran систем ашиглан өгсөн. Дараа нь бөглөрсөн эмэгчинүүдийг тус тусад нь торонд шилжүүлж, доор тайлбарласны дагуу шууд хооллолтоор хангана, эсвэл доор тайлбарласан туршилтаас 3 хоногийн өмнө 10% сахароз ad libitum. Сүүлчийн эмэгчинүүдийг нислэгийн хоолойн био шинжилгээнд ашиглаж, лабораторид шилжүүлэн, туршилтаас өмнө 4-6 цагийн турш нэрмэл усаар ad libitum байлгана.
Арабын насанд хүрсэн эмэгтэйн шээс, мочевины хэрэглээг тодорхойлохын тулд тэжээлийн шинжилгээг ашигласан. Хост хайж буй болон цусаар хооллож буй эмэгтэйчүүдэд 1% шингэрүүлсэн шинэ болон хөгширсөн үнээний шээс, янз бүрийн концентрацитай мочевин, хоёр хяналтын (10% сахароз ба ус) агуулсан хоолны дэглэмийг 48 цагийн турш өгсөн. Үүнээс гадна хүнсний будагч бодис (c16-AS mg C17; ; Сигма-Алдрих, Стокгольм, SE) хоолны дэглэмд нэмж, 4 × 4 матрицаар 250 мкл микроцентрифугийн хоолойд нийлүүлсэн (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Зураг 1A) ирмэг хүртэл дүүргэ (~300 мкл). см диаметртэй, 6 см өндөртэй; Semadeni, Ostermundigen, CH; Зураг 1A) бүрэн харанхуйд 25 ± 2 см ° C, 65 ± 5% харьцангуй чийгшил. Эдгээр туршилтыг 5-10 удаа давтан хийсэн. Хоолны дэглэмд өртсөний дараа шумуулыг цаашдын шинжилгээнд хүртэл -20 ° C-т байрлуулсан.
Anopheles arabianus-ийн эзэн болон цус сордог эмэгчин шингэсэн үхрийн шээс, мочевин байгаа эсэхийг шалгаарай. Хооллох туршилтанд (A) эм шумуулыг үхрийн шинэ болон хөгширсөн шээс, янз бүрийн концентраци мочевин, сахароз (10%), нэрмэл ус (H2O) агуулсан хоолоор хангасан. Ижил хайж буй эмэгчин 72 цагийн үнээний шээсийг 168 цагийн үнээний шээс (B)-аас бага шингээж авдаг. Шээсний нийт азотын дундаж агууламж (±стандарт хазайлт) нь дотогшлогддог. Хост хайх (D, F) болон цус сорох (E, G) эмэгчин мочевиныг E үсгээр ялгаж, хэмжээ нь өөр өөр байсан. бусад (Tukey's post hoc шинжилгээг ашиглан нэг талын ANOVA; p < 0.05). Алдааны мөр нь дундаж (BE) стандарт алдааг илэрхийлнэ. Шулуун тасархай шугам нь лог-шугаман регрессийн шугамыг (F, G) илэрхийлнэ.
Шингээсэн хоолоо гаргахын тулд шумуулыг тус тусад нь 230 мкл нэрмэл ус агуулсан 1.5 мл микроцентрифугийн хоолойд хийж, эд эсийг нэг удаагийн пийшин болон утасгүй мотор (VWR International, Lund, SE) ашиглан задалж, дараа нь 10 кrpm-т центрифуг хийж 10 минутын турш (супернатант) 290 мкл-д шилжүүлэв. Сигма-Алдрих) ба шингээлтийг (λ620) спектрофотометр дээр суурилсан микропластин уншигч (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm ашиглан тодорхойлсон. Эсвэл шумуулыг 1 мл нэрмэл усанд нунтаглаж, 900 мкл-ийг спектрофотометрийн шинжилгээнд шилжүүлсэн. 1800, Shimadzu, Kista, SE). Хоолны хэрэглээг тооцоолохын тулд 0.2 мкл-2.4 мкл 1 мг мл-1 ксилол цианид авахын тулд цуваа шингэлэх замаар стандарт муруйг бэлтгэсэн. Дараа нь шумуул тус бүрд хамгийн их агуулагдах хүнсний хэмжээг тодорхойлоход мэдэгдэж буй будгийн концентрацийн оптик нягтыг ашигласан.
Эзлэхүүний өгөгдөлд нэг талын дисперсийн шинжилгээ (ANOVA) ашиглан дүн шинжилгээ хийж, дараа нь Tukey-ийн дараах хос хосоор харьцуулсан (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). Шугаман регрессийн шинжилгээнд цусан дахь мочевинийн хэрэглээ болон цусан дахь мочевины агууламжаас хамааралтай (притерс)-ийн шинжилгээг тодорхойлсон. Mac-д зориулсан v8.0.0, GraphPad програм хангамж, Сан Диего, Калифорниа, АНУ).
Насны бүлэг тус бүрээс ойролцоогоор 20 мкл шээсний дээжийг Chromosorb® W/AW (10 мг 80/100 торон, Sigma Aldrich) дээр холбож, цагаан тугалга капсулд (8 мм × 5 мм) битүүмжилсэн. Капсулыг шатаах камерт (CHNS/The Analytics, Waltham, CHNS/O2) оруулсан. Үйлдвэрлэгчийн протоколын дагуу шинэ болон хуучин шээсэнд агуулагдах азотын агууламжийг тодорхойлох зорилгоор MA, US).
Хоолны дэглэм нь эзэн хайж, цус сорогч эмэгтэйчүүдийн эсэн мэнд үлдэхэд хэрхэн нөлөөлж байгааг үнэлэхийн тулд шумуулуудыг нэг бүрчлэн том Петрийн аяганд (12 см диаметртэй, 6 см өндөр; Семадени) байрлуулсан бөгөөд таган дээр нь торон бүрээстэй нүхтэй (3 см диаметртэй) агааржуулалт, хүнсний хангамжийн зориулалтаар хооллоорой. мочевин, хоёр хяналт, 10% сахароз ба ус. Хоолны дэглэм бүрийг шүдний тампон дээр (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) соруулж, 5 мл-ийн тариурт (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) хийж, бүлүүрийг салгаж, хоолны дэглэмийн дээд хэсэгт байрлуулна. лабораторид дээр дурдсанчлан. Амьд үлдсэн шумуулыг өдөрт хоёр удаа тоолж, харин үхсэн шумуулыг сүүлчийн шумуул үхтэл нь хаясан (эмчилгээ бүрт n = 40). Янз бүрийн хоолоор хооллосон шумуулын амьд үлдэх байдалд Каплан-Мейерийн амьд үлдэх муруй болон лог-ранк тестийг ашиглан статистикийн дүн шинжилгээ хийж, амьд үлдэх хоолны дэглэмийг харьцуулсан (STI0.SP-ийн харьцуулалт).
Attisano нар.[17] дээр суурилсан захиалгат шумуул нисдэг тээрэм, урд болон хойд хавтангүй 5 мм зузаан тунгалаг нийлэг хавтангаар (10 см өргөн x 10 см урт х 10 см өндөр) хийсэн (Зураг 3: дээд). бие биенээсээ 9 см зайтай хос неодим соронз. Ижил материалаар хийсэн хэвтээ хоолой (6.5 см L) босоо хоолойг хоёр хуваасан гар болон хөнгөн цагаан тугалган цаасны жижиг хэсгийг гэрэл таслах дохио болгон зөөвөрлөсөн гар үүсгэв.
24 цагийн турш өлсгөлөнд нэрвэгдсэн эмэгчингүүдэд хязгаарлалт хийхээс 30 минутын өмнө дээрх хоолны дэглэмийг өгсөн. Бүрэн хооллосон эм шумуулыг тус тусад нь мөсөн дээр 2-3 минутын турш мэдээгүйжүүлж, лаагаар шавьжны тээглүүрт бэхэлсэн (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, Tizons of the Mills. Нислэг бүрийн зарцуулалтыг захиалгаар бүтээгдсэн дата бүртгэгчээр бүртгэж, дараа нь PC-Lab 2000™ программ хангамж (v4.01; Velleman, Gavere, BE) ашиглан хадгалж, үзүүлэв. Нислэгийн тээрэмийг цаг уурын зохицуулалттай өрөөнд (12 цаг:12 цаг, гэрэл: харанхуй, 25 ± 2 ° C, % 65 цаг) байрлуулсан.
Нислэгийн үйл ажиллагааны хэв маягийг дүрслэн харуулахын тулд 24 цагийн турш ниссэн нийт зай (м) болон дараалсан нислэгийн нийт тоог нэг цагт тооцоолсон. Үүнээс гадна, тус бүр эмэгтэйчүүдийн ниссэн дундаж зайг эмчилгээний турш харьцуулж, нэг талын ANOVA болон Tukey-ийн дараах шинжилгээ (JMP Pro, v14.0.0) ашиглан шинжилсэн. Үүнээс гадна, тойргийн дундаж тоог 10 минутын алхмаар тооцдог.
An.arabiensis-ийн нөхөн үржихүйн үйл ажиллагаанд хоолны дэглэмийн нөлөөллийг үнэлэхийн тулд зургаан эм (4 dpe) цус цуглуулсны дараа шууд Бугдормын торонд (30 см × 30 см × 30 см) шилжүүлж, дээр дурдсанчлан туршилтын хоолыг 48 цагийн турш өгсөн. Дараа нь хоолны дэглэмийг хасч, өндөглөдөг аяга (30 мл; Нолато Гертила 20 мл ус дүүргэж, гурав дахь өдөр нь Нолато Гертила 20 мл усаар дүүргэсэн40) 24 цаг тутамд. Хоолны дэглэм бүрийг 20-50 удаа давтана. Туршилтын тор бүрт өндөгийг тоолж, бүртгэв. Өндөгний дэд дээжийг Dialux-20 микроскоп (DM1000 (DM1000) ашиглан (DM1000, WenDFC) ашиглан бие даасан өндөгний урт, уртын өөрчлөлтийг (н ≥ 200) үнэлэхэд ашигласан. 320 R2;Leica Microsystems Ltd., DE).Үлдсэн өндөгийг уур амьсгалын хяналттай өрөөнд стандарт үржүүлгийн нөхцөлд 24 цагийн турш байлгаж, дээр дурдсанчлан саяхан гарч ирсэн 1-р үеийн авгалдайн дэд дээжийг (хоолны дэглэм тутамд n ≥ 200) хэмжсэн. Өндөгний тоо, хэмжээг нэг төрлийн өндөг, авгалдай ба NOJ-ийн шинжилгээгээр харьцуулсан. Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
HeadSpace Poletates-ээс 24 цагийн турш, 72 цаг, ARNIGAL SINES-ээс 24-2-2-2-200 мл-ыг цуглуулсан. ofresco, frischhalhalteproducte gmbh ба Co Mearse, DeeAdspace-ийг VINLALSIDE, SPEED (FIREDSPACE SOUPLE-ээс 24-48 ХАМГИЙН ХАМГИЙН ХУДАЛДААНЫ ТУСЛАМЖИЙН ХУДАЛДАН АВНА.
Толгойн зайд дэгдэмхий бодисыг цуглуулахдаа идэвхижүүлсэн нүүрсээр шүүсэн хийн урсгалыг (100 мл мин-1) полиамид уутаар шингээх багана руу 2.5 цагийн турш эргэлдүүлэхийн тулд битүү хэлхээтэй системийг ашиглан диафрагмын вакуум насос (KNF Neuberger, Freiburg, DE) ашиглан цуглуулсан. шилэн хөвөн залгууруудын хооронд 35 мг Porapak Q (50/80 торон; Waters Associates, Милфорд, АНУ) агуулсан флон хоолой (5.5 см х 3 мм). Ашиглахын өмнө баганыг 1 мл дахин нэрсэн n-гексан (Мерк, Дармштадт, DE) болон Sivent, G% 9, 1 мл дахин нэрсэн уусмалаар угаана. ).Шингээсэн дэгдэмхий бодисыг 400 мкл пентанаар цэвэрлэв. Толгойн зайны цуглуулгуудыг нэгтгэж, дараа нь цаашдын шинжилгээнд ашиглах хүртэл -20°С-д хадгалсан.
Шинэхэн, 24, 72, 168 цагийн настай шээснээс цуглуулсан хост хайгч болон цус иддэг An.Headspace дэгдэмхий хандны зан үйлийн хариуг Арабидопсисын шумуулаас авсан дэгдэмхий хандыг шулуун шилэн хоолойн олфактометр [18] ашиглан шинжилэв. .Араб [19]. Шилэн хоолойн олфактометрийг (80 см × 9.5 см-ийн id) дээрээс 3 ± 1 lx улаан гэрлээр гэрэлтүүлэв. Нүүрс шүүж, чийгшүүлсэн агаарын урсгал (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% харьцангуй чийгшил) нь био шинжилгээг 30 см-ийн зайд гангаар дамжуулж, гангаар хийсэн. ламинар урсгал ба жигд чавганы бүтэц. Шүдний тампон түгээгч (4 см × 1 см; L: D; DAB Dental AB), олфактометрийн салхины үзүүрт 5 см-ийн ороомогоос дүүжлэгдсэн, өдөөгчийг 5 минут тутамд өөрчилдөг. Шинжилгээнд толгойн зай тус бүрээс 10 мкл-ийг өдөөлтөд шингэлсэн хандыг 1 тэнцүү хэмжээгээр хэрэглэсэн. Туршилт эхлэхээс 2-3 цагийн өмнө жинхэнэ эзэн хайгч эсвэл цус сорох шумуулуудыг ялгах торонд хийж, салгах торыг олфактометрийн салхины доод талд байрлуулж, шумуулыг 1 минутын турш дасан зохицож, дараа нь торны эрвээхэй хавхлагыг онгойлгож, шумуулын эх үүсвэртэй шүргэлцэх буюу хяналтанд оруулснаар шинжилгээ хийсэн. суллагдсан минут. Толгойн зайны дэгдэмхий бодисын ханд, хяналт бүрийг дор хаяж 30 удаа давтаж, аль нэг өдрийн нөлөөллөөс зайлсхийхийн тулд туршилтын өдөр бүр ижил тооны эмчилгээ, хяналтыг туршсан. Хост болон цусаар тэжээгддэг Ans.Араб хэл ба толгойн зайны багцуудын хариултыг нэрлэсэн логистикийн регрессийн дараагаар ProAS40, ProAS40, хосын харьцаа ашиглан шинжлэв. Inc.).
Ан-ийн үржлийн хариу үйлдэл. Шинэ болон хөгширсөн үхрийн шээсний толгойн хөндийн хандыг Бугдормын торонд (30 см × 30 см × 30 см; MegaView Science) шинжилэв. 20 мл нэрмэл усаар дүүргэсэн хуванцар аяганд (30 мл; Нолато Хертила) түрсээ шахаж, аяганы 2 см-ийн эсрэг талд байрлуулж, 2 см-ийн зайд байрлуулав. Толгойн зай тус бүрээс 10 мкл-ээр 1:10 шингэрүүлэлтээр тохируулсан. Хяналтын аягыг тохируулахын тулд тэнцүү хэмжээний пентаныг ашигласан. Туршилт бүрийн хооронд байрлалын нөлөөг хянахын тулд эмчилгээний болон хяналтын аягануудыг сольсон. Цусаар хооллосон 10 эмэгтэйг ZT 9-11 температурт туршилтын торонд хийж, аяганд хийсэн өндөгний өндөгний өндөгний хэмжээг хожим нь 24 калор тоолно. эмчилгээний аяганд тавьсан – хяналтын аяганд тавьсан өндөгний тоо)/(өндөгний нийт тоо).Арчилгаа бүрийг 8 удаа давтав.
Эмэгтэй An.arabiensis-ийн хийн хроматограф болон электрон антенны загвар илрүүлэх (GC-EAD) шинжилгээг өмнө тайлбарласны дагуу гүйцэтгэсэн [20]. Товчхондоо, шинэ толгойн дэгдэмхий хандыг Agilent Technologies 6890 GC (Санта Клара, Калифорниа, АНУ) ашиглан тусгаарлаж, HP-5 мм зузаантай хальс (3 μm2 × 20.m зузаантай) ашигласан. , Agilent Technologies).болон хөгшрөлтийн шээс. Устөрөгчийг хөдөлгөөнт үе шатанд дунджаар 45 см с-1 шугаман урсгалаар ашигласан. Дээж бүрийг (2 мкл) 225 ° C-ийн оролтын температуртай 30 секундын турш хуваах горимд тарьсан. GC зуухны температурыг 35 ° C (3 минутын турш барих) -аас 30 ° C-аас 30 ° C-аас 10 ° C-аас 10 ° C-аас 1 минут барих хүртэл програмчилсан. luent splitter, 4 psi азот нэмж, Gerstel 3D/2 бага үхсэн эзэлхүүнтэй загалмайд (Gerstel, Mülheim, DE) 1:1 харьцаагаар дөл иончлох детектор болон EAD-ийн хооронд хуваасан. EAD-д зориулсан GC хаягдлын хялгасан судсыг Gerstel ODP-2 дамжуулах хоолойгоор дамжуулсан бөгөөд энэ нь температурыг G1 ° C, дээр нь шилэнд 8 мм-ээр тэмдэглэнэ. нүүрстөрөгчөөр шүүсэн, чийгшүүлсэн агаартай (1.5 л мин−1) хольсон. Антенныг хоолойн гаралтаас 0.5 см зайд байрлуулсан. Шумуул тус бүр нэг хуулбарыг эзэлж, эзэн хайж буй шумуулын хувьд нас тус бүрийн шээсний дээжинд дор хаяж гурван давталт хийсэн.
GC-EAD шинжилгээнд антенны хариу урвалыг илрүүлэхийн тулд хосолсон GC болон масс спектрометр (GC-MS; 6890 GC ба 5975 MS; Agilent Technologies) ашиглан шинэ болон хөгширсөн үхрийн шээсний толгойн зайны цуглуулгад биоидэвхтэй нэгдлүүдийг тодорхойлох нь GC-EAD-ийн шинжилгээнд электрон нөлөөллийн иончлолын горимд ажилладаг HPMS5-тай GC07-ээр тоноглогдсон. Хөдөлгөөнт фаз болгон гелийг ашигласан цахиурын хялгасан багана (60 м × 0.25 мм дотоод диаметр, 0.25 μм зузаантай) дундаж шугаман урсгалын хурд нь 35 см с-1. 2 мкл дээжийг GC-EAD-тай ижилхэн форсункийн тохиргоо болон зуухны температурыг ашиглан тарьсан. захиалгат номын сан болон NIST14 номын сан (Agilent). Тодорхойлсон нэгдлүүдийг жинхэнэ стандарт тарьж баталгаажуулсан (Нэмэлт файл 1: Хүснэгт S2). Тоо хэмжээг тодорхойлохын тулд гептил ацетат (10 нг, 99.8% химийн цэвэршилт, Олдрих) гадны стандарт болгон тарьсан.
Дээр дурдсантай ижил олфактометр болон протоколыг ашиглан шинэ болон хөгшрөлтийн шээсэнд агуулагдах био идэвхит нэгдлүүдээс бүрдсэн синтетик үнэрийн хольцын үр нөлөөг үнэлэх. цаг, 168 цагийн настай шээс (Зураг 5D-G; Нэмэлт файл 1: Хүснэгт S2). Шинжилгээнд 10 мкл-ийг 1:100 шингэрүүлсэн бүрэн синтетик хольцыг ашиглана, нийт ялгаруулах хурд нь ойролцоогоор 140-2400 нг цаг-1 хооронд хэлбэлзэж, цусан дахь хольцын сэтгэл татам байдлыг үнэлэхийн тулд шинжилгээнд хамруулна. Бүрэн хольцын дан нэгдлүүдийн хасагдах хольцыг арилгадаг. Хост болон цусаар тэжээгддэг Ans.Arab ба синтетик болон хасах хольцын хариултыг нэрлэсэн логистик регресс ашиглан шинжилж, дараа нь сондгой харьцааг хосоор нь харьцуулсан (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Үхрийн шээс нь хумхаа өвчний шумуулын амьдрах орчин болж чадах эсэхийг үнэлэхийн тулд дээр дурдсанчлан шинэхэн болон хөгширсөн үхрийн шээсийг цуглуулж, усыг 3 литрийн багтаамжтай хувингаар (100 мл) хийж, тэжээгч өгөөшний саванд хийсэн.(BG-HDT хувилбар; BioGents, Regensburg, DE). 10 хавхыг бэлчээрт 50 м зайд, тосгоны хамт олноос 400 м зайд (Силай, Этиоп, 5°53´24´´Н, 37°29´24´´E) зайд байрлуулсан ба байнгын голомтот тосгонд ямар ч үхэр үржүүлээгүй байна. таван хавхыг халаагаагүй орхисон. Эмчилгээний газар бүрийг шөнө бүр нийт таван шөнийн турш эргүүлдэг. Янз бүрийн насны шээсээр өгөөштэй хавханд баригдсан шумуулын тоог бета бином тархалттай логистик регресс ашиглан харьцуулсан (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Этиоп улсын Ороми мужийн Маки хотын ойролцоох хумхаа өвчний голомттой тосгонд (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Зураг 6А). Судалгааг 8-р сарын дунд үеэс 9-р сарын дунд хооронд жил бүрийн байшинд үлдэгдэл бороо орохоос өмнө хийсэн (05-аас 0F, улирал хүртэл бороо орохоос өмнө). t) тосгоны захад байрлах судалгаанд сонгосон (Зураг 6А). Байшинг сонгох шалгуур нь: байшинд ямар ч амьтан орохыг хориглосон, дотор хоол хийх (түлээ, нүүрс зурах) (наад зах нь туршилтын хугацаанд), хамгийн ихдээ хоёр оршин суугчтай байшингууд, шавьж устгах бодисоор унтдаг.Хельсинкийн Дэлхийн Анагаах Ухааны Нийгэмлэгийн Тунхаглалын дагуу Аддис Абабагийн Их Сургуулийн Байгалийн Шинжлэх Ухааны Факультетийн (CNS-IRB) Байгууллагын Судалгааны Ёс зүйн Хяналтын Зөвлөл (IRB/022/2016) ёс зүйн зөвшөөрлийг Хельсинкийн Дэлхийн Анагаах Ухааны Нийгэмлэгийн Тунхаглалаас гаргасан. Өрхийн тэргүүн тус бүрээс зөвшөөрлийг тухайн дүүргийн эрүүл мэндийн ажилтнуудаас тус тус авсан. болон тойргийн ('kebele') түвшин. Туршилтын загвар нь 2 × 2 латин дөрвөлжин дизайныг дагаж, синтетик хольц ба удирдлагыг эхний шөнө хосолсон байшинд хуваарилж, дараагийн туршилтын шөнө байшин хооронд сольсон. Энэ процессыг арван удаа давтсан. Нэмж дурдахад, сонгосон байшингууд дахь шумуулын идэвхжилийг тооцоолохын тулд CDC-ийн эхний шөнө дундын хээрийн гүйлтийн гүйлтийн хээрийн хээрийн трипс болон дундын төгсгөлд хээрийн гүйлтийг тогтоосон. өдрийн ижил цаг.
Биологийн идэвхт бодис агуулсан нийлэг хольцыг гептанд (97.0% уусгагч GC агуулгатай, Sigma Aldrich) уусгаж, хөвөн зулын савлагч [20] ашиглан 140 нг цаг-1-д гаргаж авсан. Зулангийн тараагч нь бүх нэгдлүүдийг 12 цагийн турш тогтмол хувь хэмжээгээр ялгаруулах боломжийг олгосон. ase Control and Prevention (CDC) гэрлийн урхи (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Зураг 6A). Хавхнууд нь газраас 0.8 – 1 м өндөрт, орны хөлийн ойролцоо өлгөгдсөн бөгөөд сайн дурын ажилтан цэвэрлэгдээгүй шумуулын торны дор унтаж, 18:00-аас 03:00 цагийн хооронд ажиллаж байжээ. Дараа нь хооллож буй, хагас жирэмсэн болон жирэмсэн [21]-ыг полимеразын гинжин урвалын (ПГУ) шинжилгээгээр шалгаж, морфологийн хувьд A. gambiae sl гэж тодорхойлсон, цогцолборын гишүүд [23]. Хээрийн судалгаанд хос байшингуудын урхи барихад нэрлэсэн логистик эмчилгээний загвар ашиглан дүн шинжилгээ хийж, нөлөөлөл нь янз бүр байна. MP® 14.0.0. SAS Institute Inc.).Энд бид магадлалын харьцааны тестээс χ2 ба p-утгуудыг мэдээлэв.
Аюулгүй эсэхийг үнэлнэ үү.Arabiensis азотын гол эх үүсвэр болох мочевиныг шууд хооллох замаар 48 цагийн дотор тэжээгчийг хайж, цусаар хооллосон эмэгтэйг тэжээх туршилт (Зураг 1А). Хотын тэжээгч болон цус сорох эмэгчинүүдийн аль аль нь бусад хоолны дэглэмээс илүү их хэмжээний ус шингээж авдаг (Зураг 1A) p < 0.0001 ба F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, Зураг 1B,C).Цаашилбал, эзэн хайж буй эмэгтэйчүүд 168 цагийн шээстэй харьцуулахад 72 цагт бага шээсээр хооллодог (Зураг 1В). Бусад бүх концентраци болон устай харьцуулахад 2.69 mM, харин 10%-ийн сахарозоос ялгагдахгүй (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Зураг 1D). Энэ нь ихэвчлэн мочевин (усны агууламж багатай, 15% -иас бага) цусаар хооллодог эмэгтэйчүүдийн хариу урвалаас ялгаатай байв. 7) = 78.35, p < 0.0001; Зураг 1).1Д).Цаашилбал, физиологийн хоёр төлөвийг харьцуулж үзэхэд флеботомижсон эмэгчин мочевиныг хамгийн бага концентрацид эзэгтэйчүүдээс илүү шингээж авсан ба эдгээр эмэгчин мочевиныг өндөр концентрацитай ижил хэмжээгээр шингээж авсан байна (F(18, p<0.0)).Зураг 1F, G). Мочевин агуулсан хоолны дэглэмийн хэрэглээ нь оновчтой утгатай мэт харагдаж байсан (Зураг 1D,E), физиологийн хоёр төлөвт байгаа эмэгтэйчүүд мочевины концентрацийн бүх хүрээнд шингэсэн мочевины хэмжээг лог-шугаман байдлаар өөрчлөх боломжтой байв (Зураг 1F, G).).Үүний нэгэн адил шумуул нь шээсэнд агуулагдах азотын хэмжээ шингэсэн хэмжээгээр тусгагдсан байдаг тул шингэсэн шээсний хэмжээг зохицуулах замаар азотын хэрэглээгээ хянадаг бололтой (Зураг 1B, C, B-ийн оруулга).
Шээс, мочевин нь эзэн хайж, цус сордог шумуулын амьд үлдэхэд үзүүлэх нөлөөг үнэлэхийн тулд эмэгтэйчүүдийг дөрвөн насны (шинэхэн, 24 цаг, 72 цаг, 168 цагийн дараа) шээсээр хооллож, мочевины янз бүрийн концентраци, түүнчлэн нэрмэл ус, 10% сахарозын шинжилгээ нь хоолны дэглэмд ихээхэн нөлөөлсөн болохыг харуулсан. эзэн хайж буй эмэгтэйчүүдийн амьд үлдэх (шээс: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; мочевин: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Зураг 2B, C) болон цусаар тэжээгддэг эм (шээс: 2 = f <0.0; мочевин: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Зураг 2D,E).Бүх туршилтуудад шээс, мочевин, усаар хооллосон эмэгтэйчүүд сахарозын хоолоор хооллодог эмэгтэйчүүдтэй харьцуулахад амьд үлдэх хувь нь мэдэгдэхүйц бага байсан (Зураг 2B-E). -h хуучирсан шээс (p = 0.016) амьд үлдэх магадлал хамгийн бага (Зураг 2B). Цаашилбал, 135 мМ мочевинээр хооллосон эзэн хайж буй эмэгчин усны хяналтаас илүү удаан амьд үлджээ (p <0.04) (Зураг.2C).Устай харьцуулахад шинэхэн шээс болон 24 цагийн шээсээр хооллосон эмэгтэйчүүд илүү удаан амьд үлдсэн (p = 0.001 ба p = 0.012 тус тус; Зураг 2D), харин 72 цагийн шээсээр хооллодог эмэгтэйчүүд илүү удаан амьд үлджээ. 2D). 135 мм мочевинээр хооллох үед цусаар хооллосон эмэгчин мочевин болон усны бусад концентрациас илүү удаан амьд үлджээ (p <0.013; Зураг 2E).
Үхрийн шээс, мочевинаар хооллож буй эзэн ба цус сорох эм Anopheles arabinis-ийн амьд үлдэх байдал. Био шинжилгээнд (A) эм шумуулыг үхрийн шинэ болон хөгширсөн шээс, янз бүрийн концентрацитай мочевин, сахароз (10%), нэрмэл ус (H2O) агуулсан хоолоор хангасан. Шээс (B, D) ба мочевин (C, E) болон сахароз, усаар тэжээгддэг бүх эмэгчин үхэх хүртэл хэдэн цагийн дараа.
Нислэгийн тээрмийн туршилтаар 24 цагийн турш тодорхойлсон нийт зай, тойргийн тоо нь эзэн хайгч болон цус сорох шумуулуудын хооронд ялгаатай байсан бөгөөд энэ нь нийт нислэгийн идэвхжил багатай байсан (Зураг 3). Шинэ болон хөгширсөн шээс эсвэл сахароз, усаар хангадаг эзэн хайгч шумуулууд нь нислэгийн хэлбэрийг харуулсан (Зураг 3). Шээсээр хооллодог 24 ба 168 цагийн настай шумуулууд өөр өөр нислэг үйлддэг бөгөөд голчлон өдрийн цагаар амьдардаг байжээ. Сахароз буюу 72 цагийн шээсээр хангадаг эм шумуулууд 24 цагийн турш идэвхтэй байсан бол усаар хангадаг эмэгчин шумуулууд шөнийн дунд болон оройн цагаар илүү идэвхтэй байсан. 72 цагийн настай шээсийг залгисан хүний ​​үйл ажиллагаа 24 цагийн турш тогтмол буурчээ (Зураг 3).
Үхрийн шээс, мочевинаар хооллож буй анчин хайгч цус сорох эмэгтэй Anopheles arabinis-ийн нислэгийн гүйцэтгэл. Нислэгийн тээрмийн туршилтанд шинэ болон хөгширсөн үнээний шээс, янз бүрийн концентрацитай мочевин, сахароз (10%), нэрмэл усаар (H2O) хооллож буй эм шумуулуудыг хэвтээ, эргэлдэгч цусаар холбосон. ing (баруун) эмэгтэй, 24 цагийн турш хоолны дэглэм бүрийн нэг цагт нислэгийн нийт зай, тоог бүртгэсэн (харанхуй: саарал; цайвар: цагаан). Дундаж зай болон тулааны дундаж тоог циркадийн үйл ажиллагааны графикийн баруун талд харуулав. Алдааны мөр нь дундаж үзүүлэлтийн стандарт алдааг харуулж байна. Статистикийн шинжилгээ текстийг харна уу.
Ерөнхийдөө хост хайж буй эмэгтэйчүүдийн нийт нислэгийн идэвхжил нь 24 цагийн турш нислэгийн зайтай төстэй загвартай байсан. Нислэгийн дундаж зайд хоол хүнс хэрэглэсэн (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001) ихээхэн нөлөөлсөн ба хост хайж буй эмэгчин 72 цагийн зайтай шээсээр хооллосон нь бусад бүх хооллолттой харьцуулахад нэлээд урт (<100) байсан. сахарозоор хооллодог шумуулууд шинэхэн (p = 0.022) болон 24 цагийн настай шээсээр (p = 0.022) хооллодог шумуулуудаас илүү удаан нисдэг байв. Шээсний хоолны дэглэмд тодорхойлсон нислэгийн үйл ажиллагааны хэв маягаас ялгаатай нь, мочевинаар хооллодог хост хайж буй эмэгчинүүдийн нислэгийн идэвхжил нь сүүлийн 2-р сарын 2-ны хагаст үргэлжилсэн байна. Үйл ажиллагааны хэв маяг ижил төстэй байсан тул мочевинаар хооллосон хост хайж буй эмэгчин шингэсэн концентрациас хамааран нислэгийн дундаж зайг мэдэгдэхүйц нэмэгдүүлсэн (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). Ямар ч төрлийн мочевины агууламжийг тэжээсэн эзэгтэйчүүд ус эсвэл сахарозоор хооллодог эмэгтэйчүүдээс илүү удаан ниссэн (p <0.0).
Цус сорогч шумуулын нийт нислэгийн идэвхжил нь бүх хоолны дэглэмийн дагуу 24 цагийн турш тогтвортой, тогтвортой байсан ба харанхуй үеийн хоёрдугаар хагаст усаар хооллосон эмэгчин, мөн шинэхэн, 24 цагийн настай эмэгтэйчүүдийн шээсний идэвхжил нэмэгдсэн (зураг 3). Цусаар хооллодог эмэгтэйчүүдийн нислэгийн дундаж зайд шээсний дэглэм мэдэгдэхүйц нөлөөлсөн (F = 80, p1) (F = 80, p1, 80). хоолны дэглэмд ороогүй (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .бусад шээс болон хяналтын хоолны дэглэмтэй (шинэхэн, p = 0.0091; 72 цаг, p = 0.0022; 168 цаг, p = 0.001; сахароз, p = 0.0017, p = 0.H = .H = .H;).
Шээс, мочевинаар хооллох нь нөхөн үржихүйн үзүүлэлтүүдэд үзүүлэх нөлөөг өндөглөдөг био шинжилгээнд (Зураг 4А) үнэлж, эм тус бүрийн өндөглөдөг өндөгний тоо, өндөгний хэмжээ, шинээр гарч ирсэн анхны авгалдай зэргийг харгалзан үзсэн. Өндөгний тоо. Шээсээр хооллодог араб эмэгчин (2 p =F305) 008; Зураг 4B). 24 цагийн турш шээсээр хооллож, цусан хоолоор хооллодог эмэгтэйчүүд бусад шээсээр хооллодог эмэгтэйчүүдээс хамаагүй илүү өндөглөдөг бөгөөд сахарозоор хооллодогтой төстэй байв (Зураг 4B). Үүний нэгэн адил, шээсээр хооллодог эмэгтэйчүүдийн өндөглөдөг өндөгний хэмжээ нь хооллолтоос хамаарч өөр өөр байв (F(5) 2, p <1, 008). -цагт шээс болон сахарозоор хооллодог эмэгчинүүд усаар хооллодог эмэгчинүүдээс хамаагүй том өндөглөдөг бол 168 цаг шээсээр хооллодог эмэгчинүүдийн өндөг мэдэгдэхүйц бага байсан (Зураг 4C). Үүнээс гадна шээсний хооллолт авгалдайны хэмжээ ихээхэн нөлөөлсөн (F(5, 187) = 7.86, p<0.00-аар их өндөглөдөг). 24 ба 72 цагийн шээсээр хооллодог эмэгчин нь авгалдай өндөгнөөс гаргасан өндөгнөөс илүү. Усаар хооллож, 168 цаг шээсээр хооллодог эм (Зураг 4D).
Үхрийн шээс, мочевинаар хооллож буй эм Anopheles arabinis-ийн нөхөн үржихүйн гүйцэтгэл. Цусаар хооллосон эм шумуулыг шинэ болон хөгшрөлттэй үнээний шээс, янз бүрийн концентраци мочевин, сахароз (10%), нэрмэл ус (H2O) зэргээс бүрдсэн хоол тэжээлээр 48 цагийн турш биологийн шинжилгээнд оруулахаас өмнө хооллосон (E тоо, өндөгний хэмжээ 8, E-C). ) болон авгалдайн хэмжээ (D, G)-д өгсөн хооллолт (үхрийн шээс: BD; мочевин: EG) ихээхэн нөлөөлсөн. Янз бүрийн үсгийн нэр ашиглан хэмжсэн параметр бүрийн дундаж нь бие биенээсээ эрс ялгаатай байв (Tukey's post hoc шинжилгээг ашиглан нэг талын ANOVA; p < 0.05). Алдааны мөр нь дундаж утгын стандарт алдааг илэрхийлнэ.
Шээсний азотын гол бүрэлдэхүүн хэсэг болох мочевин нь цусаар хооллодог эмэгтэйчүүдэд хоол хүнс болгон өгөхөд бүх судалгаанд нөхөн үржихүйн үзүүлэлтэд ихээхэн нөлөөлсөн. Цусны хоол идсэний дараа мочевин идсэн эмэгтэйчүүдийн өндөглөдөг өндөгний тоо нь мочевины концентрациас хамаарч (F(11, 360) = 4.69; p<1110, эмэгтэйчїїдийн шээсний концентраци 0 0 мкм-ийн хооронд). .34 мМ илүү их өндөглөдөг (Зураг 4E). 134 мкМ ба түүнээс дээш хэмжээний мочевины агууламжаар хооллодог эмэгчин нь усаар хооллодог эмэгчинүүдээс илүү том өндөглөдөг (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Зураг 4F), авгалдайн хэмжээ нь ижил боловч F03 нөлөөлөлд өртсөн боловч F03. 9; p <0.0001) илүү хувьсах шинж чанартай байсан (Зураг 4G).
Шилэн хоолойн олфактометр (Зураг 5А)-д үнэлэгдсэн arabiensis-д шээсний нас ихээхэн нөлөөлсөн (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Зураг 5B; Зураг. 5В) Шээсний дэгдэмхий хандыг цаг хугацаанд нь харьцуулсан. бусад бүх эмчилгээнд (72 цаг: p = 0.0060, 168 цаг: p = 0.012, пентан: p = 0.00070), шинэ шээсний үнэрийг эс тооцвол (p = 0.13; Зураг 5B). Хэдийгээр цус сорох шумуулын нийт таталт нь шээсний үнэрээс мэдэгдэхүйц ялгаатай биш байсан (p = χ 8, p = 8) .067; Зураг 5C), эдгээр эмэгчин нь хяналтын хүмүүстэй харьцуулахад 72 цагийн настай шээстэй харьцуулахад толгойн зайны дэгдэмхий хандыг илүү их татдаг болохыг тогтоожээ (p = 0.0066; Зураг 5C).
Хөгшин ба цусаар тэжээгддэг Anopheles arabianus-ийг хайж олоход үхрийн шээсний байгалийн болон синтетик үнэрт үзүүлэх зан үйлийн хариу үйлдэл. Шилэн хоолойн олфактометрийн бүдүүвч зураг (A). Шинэхэн болон хөгширсөн үхрийн шээсний толгойн зайд дэгдэмхий хандыг (B) болон цус сорох (C) шинэ шумуулын хандыг татах. ), 24 цагийн (E), 72 цагийн (F), 168 цагийн (G) насжилттай үхрийн шээсийг харуулав. Электрон антен илрүүлэх (EAD) ул мөр нь хийн хроматографаас ялгаруулж, галын иончлолын детектороор илрүүлсэн био идэвхт нэгдлүүдийн хариуд хүчдэлийн өөрчлөлтийг харуулдаг. Биологийн идэвхит нэгдлүүдийн шинж чанар, ялгарах хурдыг (мкг h-1) харуулав. Нэг од (*) нь тогтмол бага далайцтай хариу урвалыг илэрхийлдэг. Давхар тэмдэгт (**) нь давтагдах боломжгүй хариу урвалыг илэрхийлдэг. Хос (H) ба цус сорох (I) An.arabiensis нь шинэхэн шээсний болон нийлэг хольцыг татахад өөр өөр ханддаг. өөр өөр үсгийн нэрүүд бие биенээсээ эрс ялгаатай байсан (Тукейгийн дараах шинжилгээг ашиглан нэг талын ANOVA;p < 0.05).Алдааны мөр нь масштабын стандарт алдааг илэрхийлнэ
Эмэгтэй Ann.arabiensis, цус идсэнээс хойш 72 цаг ба 120 цагийн дараа түрсээ шахах үед пентаны хяналттай харьцуулахад шинэ болон хөгширсөн үхрийн шээснээс толгойн зайд дэгдэмхий хандыг илүүд үзээгүй (χ2 = 3.07, p > 0.05; Нэмэлт файл 1: Зураг. S1).
Эмэгтэйчүүдийн Ann.arabiensis, GC-EAD болон GC-MS шинжилгээгээр найм, зургаа, гурав, гурван биоидэвхтэй нэгдлүүдийг илрүүлсэн (Зураг 5D-G). Хэдийгээр электрофизиологийн хариу урвалыг үүсгэсэн нэгдлүүдийн тоо ялгаатай байсан ч эдгээр нэгдлүүдийн ихэнх нь шинэ болон хөгшрөлтөөс цуглуулсан дэгдэмхий хандыг толгойн зай бүрт агуулагдаж, зөвхөн эмэгтэй хүний ​​шээсний нэгдэл, хариу урвалын нэгдэл тус бүрээс үүсдэг. босгыг давсан нь цаашдын шинжилгээнд хамрагдсан.
Толгойн зайны цуглуулга дахь биоидэвхтэй нэгдлүүдийн нийт дэгдэмхий ялгарлын хэмжээ шинэ шээсэнд 29 мкг цаг-1 байсан бол 168 цагийн настай шээсэнд 242 мкг цаг-1 болж нэмэгдсэн нь голчлон фенол, фенол ихсэхээс гадна п-крезол, м-формальдегидээс шалтгаална. г хроматограмм (Зураг. 5D)-G зүүн самбар) дохионы эрчим (элбэг) ажиглагдсан бууралт нь хамааралтай шээсний нас нэмэгдэж, эдгээр нэгдлүүдийн физиологийн хариу (Зураг. 5D-G баруун самбар).
Ерөнхийдөө нийлэг хольц нь шинэ болон хөгшрөлтийн шээсний дэгдэмхий хандаас тодорхойлогддог биоидэвхтэй нэгдлүүдийн байгалийн харьцаатай ижил төстэй байсан (Зураг 5D–G) бөгөөд хостыг хайхад төдийлөн сонирхол татдаггүй (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Зураг 5, df. 4, p = 0.30; Зураг 5I). Гэсэн хэдий ч эмчилгээний дараа хосолсон харьцуулалт нь эзэн хайж буй шумуулууд нь пентантай хяналттай харьцуулахад 24 цагийн шээсний синтетик хольцыг ихээхэн татдаг болохыг харуулсан (p = 0.0086; Зураг 5H).
24 цагийн настай шээсний нийлэг хольц дахь бие даасан бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн үүргийг үнэлэхийн тулд бие даасан нэгдлүүдийг устгасан Y-хоолойн шинжилгээнд зургаан хасах хольцыг бүрэн хольцтой харьцуулан үнэлэв. Хостыг хайж буй шумуулын хувьд бүрэн хольцоос бие даасан нэгдлүүдийг хасах нь зан үйлийн хариу урвалд ихээхэн нөлөөлсөн (χ2, d = 06. Зураг: p = 02. Зураг). S2A), бүх хасах хольц нь бүрэн холилдсоноос жижиг хэмжээтэй харьцуулахад илүү сонирхол татахуйц байсан. Үүний эсрэгээр, бүрэн синтетик хольцоос бие даасан нэгдлүүдийг зайлуулах нь цус сорох шумуулын зан үйлийн хариу үйлдэлд нөлөөлсөнгүй (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), нэмэлт хольцыг эс тооцвол 10. нэмэлт түвшин 2-той харьцуулсан. : Зураг S2B).
Этиопын хумхаа өвчний тархалт ихтэй тосгонд 24 цагийн үнээний шээсний синтетик хольц нь хээрийн нөхцөлд шумуул татахад хэр үр дүнтэй болохыг арван шөнийн турш үнэлэв (Зураг 6А). Нийт 4861 шумуул барьж, илрүүлсний 45.7% нь гаароус.%18. ensis болон 35.4% нь Culex spp.(Нэмэлт файл 1: Хүснэгт S1). Anopheles arabinis нь ПГУ-ын шинжилгээгээр тодорхойлогдсон Ан.Гамбын зүйлийн цогцолборын цорын ганц гишүүн юм. Нэг шөнө дунджаар 320 шумуул баригдсан ба энэ хугацаанд синтетик хольцтой өгөөш бүхий урхинд холимог шумуулаас илүү олон шумуул баригдсан байна (χ07, χ01, хосолсоноос илүү) p < 0.0001) . Туршилтын эхэн, дунд, төгсгөлд хяналтын таван шөнө тус бүр дээр өгөөшгүй хавх суурилуулсан. Хос хавх бүрт ижил тооны шумуул баригдсан нь байшин хоорондын хазайлт байхгүй байгааг харуулж байна (χ2(0, 1665) = 9 × 10-105-ийн судалгаанд хамрагдсан. ps, синтетик хольц агуулсан урхинд баригдсан шумуулын тоо мэдэгдэхүйц нэмэгдсэн: эзэн хайж байгаа (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), саяхан цусаар хооллосон (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) (p < 0.0002) (p = 0.2), жирэмслэлт (p < 0.0002) (p = 0.2, p = 0.2), p = 0.2. 3;Нэмэлт файл 1: Хүснэгт S1). Энэ нь мөн баригдсан шумуулын нийт тоонд тусгагдсан болно: эзэн хайгч > цус сорогч > жирэмсэн > хагас жирэмсэн > эрэгтэй.
24 цагийн синтетик үхрийн шээсний үнэрийн хольцын үр нөлөөний хээрийн үнэлгээ. Талбайн туршилтыг Этиопийн өмнөд хэсэгт, Маки хотын ойролцоо (газрын зураг) хийж, Өвчнийг хянах төвийн (CDC) гэрлийн хавх (баруун талд) хос байшинд (CDSAitra) зурагтай, латин зурагтай (CDSAitra) зурагтай (оруулах). болон эм Anopheles arabesques (B) барьж, харин Anopheles farroes (C) биш, өөрөөр хэлбэл, физиологийн төлөвөөс хамааралтай нөлөө үзүүлдэг. Үүнээс гадна эдгээр урхинд агуулагдах Culex шумуулын тоо мэдэгдэхүйц нэмэгдсэн. 10), баруун талд байгаа баарууд нь хос хяналтын хавхаар сонгох дундаж индексийг илэрхийлдэг (нээлттэй; N = 5).).Од тэмдэг нь статистикийн ач холбогдлын түвшинг заана (*p = 0.01 ба ***p < 0.0001)
Гурван зүйлийг нийлэг хольц агуулсан хавханд өөр өөрөөр баригдсан. Хүлээн авагч (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), цусаар хооллох (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) болон жирэмслэлт (χ2(1, 1, х 13)) -ийг хайж байна. biensis нь нийлэг хольцыг гаргаж буй урхинд баригдсан (Зураг 6B), харин An-ийн хэмжээ ялгаатай байсангүй. Физиологийн янз бүрийн төлөв байдалд байгаа фаренсис илэрсэн (Зураг 6С). Culex-ийн хувьд зөвхөн нийлэг хольцоор өгөгдсөн урхинд эзэн хайж буй шумуулын тоо мэдэгдэхүйц нэмэгдсэн байна (χ1.0, p16) (χ1.0) 04; Зураг 6D), хяналтын хавхтай харьцуулсан.
Этиопийн нутаг дэвсгэр болон хөдөөгийн бүлгүүдийн хооронд байрлах боломжит эзэн өгөөшний урхинд хумхаа өвчний шумуул нь үхрийн шээсний үнэрийг эзэн амьдрах орчны дохио болгон ашиглаж байгаа эсэхийг үнэлэхэд ашигласан болно. Хотын дохио байхгүй, халуун, үнээний шээсний үнэртэй эсвэл үнэргүй үед ямар ч шумуул баригдаагүй (Зураг 1: Шээсний өндөр температур). , эм хумхаа шумуулыг шээсний наснаас хамааралгүйгээр цөөн тоогоор ч гэсэн татаж, барьж авсан (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Нэмэлт файл 1: Зураг S3 ).Харин усны хяналт нь хумхаа өвчний шумуулыг өндөр температурт барьж чадаагүй (Нэмэлт файл: S3 1).
Хумхаа өвчний шумуул нь үхрийн шээсээр (өөрөөр хэлбэл шалбааг) нөхөн тэжээх замаар азот агуулсан нэгдлүүдийг олж авч, тарааж, амьдралын түүхийг сайжруулахын тулд бусад шавьжтай төстэй [2, 4, 24, 25, 26]. Үхрийн шээс нь гахайн өвчтнүүдтэй нягт холбоотой байдаг нөхөн сэргээгдэх нөөц юм. Эмэгтэй шумуул нь энэ нөөцийг үнэрээр нь олж тогтоодог бөгөөд шээсэнд агуулагдах азотын нэгдлүүдийг, тэр дундаа шээсэнд агуулагдах азотын гол бүрэлдэхүүн хэсэг болох мочевиныг зохицуулах чадвартай байдаг [15, 16]. Эмэгтэй шумуулын физиологийн төлөв байдлаас хамааран бүх шим тэжээлт бодисууд нь шээсэнд шингэж, шумуулын шимэгдэлтийг сайжруулдаг. Эхний гонадотроп мөчлөгийн үед цусаар хооллодог хүмүүсийн амьд үлдэх, нөхөн үржихүйн шинж чанартай байдаг.Тиймээс шээсний хольц нь хоол тэжээлийн дутагдалд орсон насанд хүрэгчид шиг хаалттай байдаг хумхаа өвчний тээгчдийн хоол тэжээлийн чухал үүрэг гүйцэтгэдэг [8], энэ нь эм шумуулуудад азотын чухал нэгдлүүдийг авах боломжийг олгодог тул эмэгчин амьтдын тархалтыг ихэсгэхэд хүргэдэг. cy, үйл ажиллагаа болон нөхөн үржихүйн гарц зэрэг нь векторын багтаамжид нөлөөлдөг.Цаашилбал, энэ зан үйл нь ирээдүйн векторын менежментийн хөтөлбөрүүдийн зорилт байж болно.