O le mauaina ma le tufatufaina atu o meaʻai e tuʻufaʻatasia ai uiga o le sailia o meaʻai a iniseti ma le talafaasolopito o le olaga. Ina ia faʻafetaui le le lava o meaʻai faʻapitoa i laʻasaga eseese o le olaga, e mafai e iniseti ona maua nei meaʻai e ala i le fafagaina faʻaopoopo, mo se faʻataʻitaʻiga, e ala i le fafagaina o mea e maua mai i manu feʻai i se faiga e taʻua o puddles. E foliga mai e le lava meaʻai a le namu Anopheles arabiani ma, o le mea lea, e manaʻomia ai meaʻai mo le metabolism ma le toe gaosia. O le faʻamoemoega o lenei suʻesuʻega o le iloilo lea pe faʻaleleia e le An. arabiensis le faʻagaoioia i luga o le mimi povi mo le mauaina o meaʻai uiga o le talafaasolopito o le olaga.
Ia mautinoa e saogalemu. Sa tosina le arabiensis i le manogi o le mimi povi fou, 24-itula, 72-itula, ma le 168-itula le matutua, ma sa fuaina fafine na sailia ma fafagaina i le toto (48-itula pe a uma ona 'ai le toto) i le Y-tube olfactometer, ma sa iloiloina fafine ma'itaga mo le suega fanautama. Ona fa'aaogaina lea o se au'ili'iliga fa'akemikolo ma le electrophysiological e fa'ailoa ai vaila'au fa'aolaola i le mimi povi i vasega uma e fa o tausaga. Sa iloiloina fa'afefiloi fa'apitoa o vaila'au fa'aolaola i le Y-tube ma fa'ata'ita'iga i le fanua. Ina ia su'esu'eina le mimi povi ma lona vaila'au autu o lo'o i ai le nitrogen urea o ni mea'ai fa'aopoopo mo mea e feavea'i ai le malaria, sa fuaina ai fa'ailoga o mea'ai ma uiga o le tala'aga o le olaga. Sa iloiloina le vaega o namu fafine ma le aofa'i o le mimi povi ma le urea na mitiia. A mae'a ona fafagaina, sa iloiloina fafine mo le ola, le lele fa'apipi'i, ma le toe fanauina.
Saili le toto ma meaʻai a le povi e ana le fale. I suʻesuʻega i fale suʻesuʻe ma fanua, na tosina atu Arapi i le manogi masani ma le manogi faʻapitoa o le mimi povi fou ma matutua. E le popole fafine maʻitaga i tali atu o mimi povi i nofoaga e fanau ai. E mitiia e fafine e saili ma miti toto le mimi povi ma le urea ma vaevaeina nei punaoa e tusa ai ma fefaʻatauaʻiga o le olaga ma le talafaʻasolopito o le olaga e fai ma galuega tauave o le tulaga faaletino mo le lele, ola, poʻo le toe gaosia.
O le mauaina ma le tufatufaina atu o le mimi povi a le Anopheles arabinis mo le faaleleia atili o uiga o le talafaasolopito o le olaga. O le fafagaina faaopoopo o le mimi povi e aafia ai le gafatia o le vector i se auala tuusa'o e ala i le faateleina o le ola i aso taitasi ma le toatele o vector, ma e le tuusao foi e ala i le suia o gaioiga o le lele ma o lea e tatau ai ona mafaufau i ai i faataitaiga o le lumanai.
O le mauaina ma le tufatufaina atu o meaʻai e faʻapipiʻi ai uiga o le sailia o meaʻai ma le talafaasolopito o le olaga o iniseti [1,2,3]. E mafai e iniseti ona filifili ma maua meaʻai ma faʻatino le fafagaina faʻapitoa e faʻatatau i le maua o meaʻai ma manaʻoga o meaʻai [1, 3]. O le tufatufaina atu o meaʻai e faʻalagolago i le faagasologa o le talafaasolopito o le olaga ma e ono oʻo atu ai i manaʻoga eseese mo le lelei ma le tele o meaʻai i laʻasaga eseese o le olaga o iniseti [1, 2]. Ina ia faʻafetaui ai le le lava o meaʻai faʻapitoa, e mafai e iniseti ona maua nei meaʻai e ala i le fafagaina faʻaopoopo, e pei o le palapala, otaota eseese ma mea e le toe faʻaaogaina e manu feʻai, ma manu ua mate, o se faagasologa e taʻua o puddles [2]. E ui o loʻo faʻamatalaina le tele o ituaiga o pepe ma mogamoga, ae o pu vai e tutupu foʻi i isi oka o iniseti, ma o le tosina atu ma le fafagaina i nei ituaiga o punaoa e mafai ona i ai ni aʻafiaga taua i le soifua maloloina ma isi uiga o le talafaasolopito o le olaga [2, 4, 5, 6] ,7]. O le namu malaria Anopheles gambiae sensu lato (sl) e tulaʻi mai o se tagata matua 'le lava meaʻai' [8], o lea e ono i ai se sao taua o le faʻasusu i ona uiga o le talafaasolopito o le olaga, ae o lenei amioga ua le amanaʻiaina i le taimi nei. O le fa'aaogāina o le fa'agae'etia o se auala e fa'ateleina ai le taumafaina o mea'ai i lenei auala taua e tatau ona gauai atu i ai aua e ono i ai ni a'afiaga taua fa'ama'i pipisi.
E fa'atapula'aina le aofa'i o le namu fafine matua o le Anopheles ona o le maualalo o kalori e maua mai le tulaga o le larval ma le le lelei o le fa'aaogaina o le toto [9]. E masani ona fa'aleleia e le fafine Ann.gambiae sl lenei mea e ala i le fa'aopoopoina o le toto [10, 11], ma tu'u ai le tele o tagata i le lamatiaga o le a'afia i le fa'ama'i ma tu'u ai namu i le lamatiaga tele o le fa'aleagaina. I se isi itu, e mafai e namu ona fa'aogaina le fafagaina fa'aopoopo o otaota o manu fe'ai e maua ai ni vaila'au naitokene e fa'aleleia atili ai le fetu'una'i ma le mafai ona lele, e pei ona fa'aalia e isi iniseti [2]. I lenei tulaga, o le tosina malosi ma le tulaga ese o se tasi o ituaiga uso i totonu o le An. O le fa'aputuga ituaiga o le Gambian sl, Anopheles arabinis, o le mimi povi fou ma matutua [12,13,14], e manaia. O le Anopheles arabinis e avanoa i ana mea e fiafia i ai ma e iloa e fa'atasi ma fafaga povi. O le mimi povi o se punaoa e tele ai vaila'au naitokene, ma o le urea e 50-95% o le aofa'i atoa o le nitrogen i le mimi fou [15, 16]. A'o matua le mimi povi, e fa'aaogaina e meaola ninii o nei punaoa e faʻaitiitia ai le lavelave o vailaʻau faʻa-naitorosene i totonu o le 24 itula [15]. Faatasi ai ma le vave faateleina o le ammonia, e fesoʻotaʻi ma le paʻu o le nitrogen organic, e olaola ai meaola ninii alkalophilic (o le tele o ia mea e gaosia ai vailaʻau oona i namu) [15], lea atonu o le fafine Ann.arabiensis e sili atu ona tosina i le mimi ua 24 itula le matua pe itiiti ifo [13, 14].
I lenei suʻesuʻega, sa suʻeina ai Ans e talimalo ma e fafagaina i le toto. I le taimi o lana taʻamilosaga muamua o le gonadotropin, sa iloiloina ai le arabiensis mo le mauaina o vailaʻau nitrogenous, e aofia ai le urea, e ala i le fefiloi o le mimi. Ona sosoo ai lea ma se faasologa o faʻataʻitaʻiga na faia e iloilo ai pe faʻapefea ona vaevaeina e namu fafine lenei punaoa meaʻai mo le faʻaleleia atili o le ola, toe gaosia ma le sailia atili o meaʻai. Mulimuli ane, sa iloiloina le manogi o le mimi povi fou ma le matua e iloa ai pe na maua ai ni faʻailoga faʻatuatuaina mo le An e talimalo ma e fafagaina i le toto. I la latou sailiga mo lenei punaoa meaʻai, na maua ai e le arabiensis ni fesoʻotaʻiga faʻakemikolo i tua atu o le eseesega o le tosina mai. O faʻafefiloi manogi faʻapitoa o vailaʻau faʻamaʻi (VOCs) na faʻamaonia i le mimi 24-itula le matua na toe iloiloina i lalo o tulaga o le fanua, faʻalauteleina ai taunuʻuga na maua i lalo o tulaga o le fale suʻesuʻe ma faʻaalia ai le aʻafiaga o le manogi o le mimi povi i tulaga eseese o le tino. Tosina mai o namu. O taunuʻuga na maua e faʻamaonia ai o le An. arabiensis e maua ma tufatufa atu vailaʻau nitrogenous o loʻo maua i le mimi vertebrate e faʻaosofia ai uiga o le talaʻaga o le olaga. O nei taunuʻuga o loʻo talanoaina i le tulaga o taunuuga faʻamaʻi pipisi ma pe faʻapefea ona faʻaaogaina mo le mataʻituina ma le puleaina o vector.
Sa tausia le Anopheles arabicans (Dongola strain) i le 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH ma le 12:12 itula o le malamalama:pogisa. Sa tausia anufe i totonu o fata palasitika (20 cm × 18 cm × 7 cm) sa fa'atumuina i le vai mama ma fafaga i mea'ai a i'a Tetramin® (Tetra Werke, Melle, DE). Sa aoina pupae i totonu o ipu e 30 ml (Nolato Hertila, Åstorp, SE) ona fa'aliliuina lea i totonu o pa Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) ina ia mafai ai ona toe tula'i mai tagata matutua. Sa tu'uina atu i tagata matutua se vaila'au sucrose 10% ad libitum se'ia o'o i le 4 aso talu ona toe tula'i mai (dpe), ona ofoina atu lea i fafine o lo'o sailia se mea'ai i le taimi lava e le'i faia ai le fa'ata'ita'iga, pe fa'a'ai i le vai mama i le po a'o le'i faia le fa'ata'ita'iga, e pei ona fa'amatalaina i lalo. O fafine na fa'aaogaina mo fa'ata'ita'iga o paipa lele sa fa'a'ai mo na'o le 4-6 itula. i le vai ad libitum. Mo le sauniaina o namu miti toto mo suʻega bio e sosoo ai, e 4 fafine dpe na tuʻuina atu i ai le toto mamoe defibrotic (Håtunalab, Bro, SE) e faʻaaoga ai se faiga fafagaina membrane (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK). Ona faʻaliliuina lea o fafine ua tumu i pa taʻitasi ma tuʻuina atu meaʻai saʻo, e pei ona faʻamatalaina i lalo, poʻo le 10% sucrose ad libitum mo le 3 aso aʻo leʻi faia faʻataʻitaʻiga o loʻo faʻamatalaina i lalo. O fafine mulimuli na faʻaaogaina mo suʻega bio o paipa lele ma faʻaliliuina atu i le fale suʻesuʻe, ona faʻasusu lea i le vai faʻamamā ad libitum mo le 4-6 itula aʻo leʻi faia le faʻataʻitaʻiga.
Sa fa'aaogaina su'ega fafagaina e fuafua ai le mimi ma le fa'aaogaina o le urea i fafine matutua An.Arab. O fafine na sailia le 'au talimalo ma fafine na fafaga i le toto sa tu'uina atu i ai se mea'ai e aofia ai le 1% o le mimi povi fou ma matutua ua fa'afefiloi, eseese le tele o le urea, ma ni vaega fa'atonutonu se lua (10% sucrose ma le vai) mo le 48 itula. E le gata i lea, o le vali mea'ai (1 mg ml-1 xylene cyanide FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) sa fa'aopoopo i le mea'ai ma sa tu'uina atu i totonu o se matrix 4 × 4 i totonu o le 250 µl microcentrifuge tubes (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Ata 1A) Fa'atumu i le pito (~300 µl). Ina ia 'alofia le tauvaga i le va o namu ma aafiaga e ono a'afia ai le lanu vali, tu'u namu e 10 i totonu o se ipu Petri tele (12 cm le lautele ma le 6 cm le maualuga; Semadeni, Ostermundigen, CH; Ata 1A) i le pogisa atoa i le 25 ± 2 cm °C ma le 65 ± 5% le susu fa'atatau. O nei fa'ata'ita'iga sa toe faia i le 5 i le 10 taimi. Ina ua uma ona fa'aalia i mea'ai, sa tu'u namu i le -20 °C se'ia o'o i se isi su'esu'ega.
Vaavaai mo le mimi povi ma le urea na mitiia e le fafine Anopheles arabianus e talimalo ma le fafine e mitiia le toto. I le suega fafagaina (A), na saunia ai namu fafine i se taumafataga e aofia ai le mimi povi fou ma le matua, le tele o le urea, sucrose (10%), ma le vai fa'amamāina (H2O). O fafine e sailia le talimalo (B) ma le fafine e fafagaina i le toto (C) na mitiia le sucrose e sili atu nai lo se isi lava taumafataga na tofotofoina. Manatua o fafine e sailia le talimalo na mitiia le mimi povi i le 72 itula e itiiti ifo i le mimi povi e 168 itula (B). O le averesi o le aofa'i atoa o le nitrogen (± standard deviation) o le mimi o lo'o fa'atusalia i le inset. O fafine e sailia le talimalo (D, F) ma le fafine e mitiia le toto (E, G) e fa'aaogaina le urea i se auala e fa'alagolago i le fua. O le averesi o le aofa'i o le manava (D, E) ma igoa eseese o mataitusi na matua eseese lava mai le tasi ma le isi (one-way ANOVA e fa'aaoga ai le au'ili'iliga post hoc a Tukey; p < 0.05). O pa sese e fa'atusalia ai le sese masani o le averesi (BE). O le laina sa'o e fa'atusalia ai le laina regression log-linear (F, G)
Ina ia fa'asa'oloto mea'ai ua mitiia, na tu'u ta'itasi namu i totonu o paipa microcentrifuge e 1.5 ml o lo'o i ai le 230 µl o le vai fa'amamā ma fa'alavelaveina le a'ano e fa'aaoga ai se pestle e lafoa'i ma se afi e leai se uaea (VWR International, Lund, SE), sosoo ai ma le centrifugation i le 10 krpm mo le 10 minute. O le supernatant (200 µl) na fa'aliliuina i totonu o se microplate 96-well (Sigma-Aldrich) ma le absorbance (λ620) na fuafuaina e fa'aaoga ai se spectrophotometer-based microplate reader (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). I se isi itu, na oloina namu i le 1 ml o le vai fa'amamā, 900 µl o lea na fa'aliliuina i totonu o se cuvette mo le su'esu'ega spectrophotometric (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Ina ia fuaina le taumafa i mea'ai, na saunia se pi'o masani e ala i le fa'asolosolo fa'asusu e maua ai le 0.2 µl i le 2.4 µl o le 1 mg ml-1 xylene cyanide. Ona fa'aaogaina lea o le optical density o le tele o vali ua iloa e fuafua ai le aofa'i o mea'ai na 'aina e namu ta'itasi.
Sa iloiloina faʻamaumauga o le voluma e faʻaaoga ai le tasi-ala o le suʻesuʻega o le eseesega (ANOVA) sosoo ai ma le faʻatusatusaga faʻalua a Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). O suʻesuʻega o le linear regression na faʻamatalaina ai le taumafaina o le urea e faʻalagolago i le maualuga o le suka ma faʻatusatusa tali i le va o namu e sailia ma miti toto (GraphPad Prism v8.0.0 mo Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
E tusa ma le 20 µl o faʻataʻitaʻiga o le mimi mai vaega taʻitasi o tausaga na fusifusia i le Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) ma faʻapipiʻiina i totonu o kapisi apamemea (8 mm × 5 mm). Na faʻaofiina kapisi i totonu o le potu mu o se CHNS/O analyzer (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, US) e fuafua ai le aofaʻi o le nitrogen i le mimi fou ma le mimi ua leva e tusa ai ma le faʻatonuga a le kamupani gaosi oloa. O le aofaʻi atoa o le nitrogen (g N l-1) na fuaina e faʻavae i luga o le maualuga o le urea ua iloa na faʻaaogaina o se tulaga faʻatonuina.
Ina ia iloilo le aafiaga o meaʻai i le ola o fafine e saili ma miti toto, na tuu taʻitasi namu i totonu o ipu Petri tetele (12 cm le lautele ma le 6 cm le maualuga; Semadeni) faatasi ai ma se pu ua ufiufi i le upega i le tapuni (3 cm le lautele) faatasi ai ma Mo le ea ma le sapalai o meaʻai. Na saunia meaʻai i le taimi lava e uma ai le 4 dpe ma aofia ai le 1% o le mimi povi fou ma ua matua, fa o le urea, ma vaega e lua e pulea, 10% sucrose ma le vai. O meaʻai taʻitasi na faʻapipiʻiina i luga o se tampon nifo (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) na tuʻu i totonu o se syringe 5 ml (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), aveese le plunger, ma tuʻu i luga o se ipu petri (ata 1).1A).Suia lau meaʻai i aso uma.Tausia le fale suʻesuʻe e pei ona faʻamatalaina i luga.Na faitauina namu na ola faalua i le aso, aʻo namu ua oti na lafoaia seʻia oti le namu mulimuli (n = 40 i le togafitiga).O le ola o namu na fafagaina i meaʻai eseese na iloiloina faʻamaumauga e faʻaaoga ai le Kaplan-Meyer survival curves ma su'ega log-rank e fa'atusatusa ai fa'atusatusaga o le tufatufaina o le ola i le va o taumafa (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
O se fale gaosimea e fa'alele ai namu fa'apitoa e fa'avae i luga o Attisano et al.[17], e faia i paneli acrylic manino e 5 mm le mafiafia (10 cm lautele x 10 cm le umi x 10 cm le maualuga) e aunoa ma paneli pito i luma ma tua (Ata 3: pito i luga). O se fa'apotopotoga pivot ma se paipa fa'atulagaina e faia i se koluma chromatography kesi (0.25 mm id; 7.5 cm L) fa'atasi ai ma pito e fa'apipi'i i se nila iniseti e tautau i le va o ni maneta neodymium e 9 cm le va. O se paipa fa'alava e faia i le mea lava e tasi (6.5 cm L) na vaeluaina le paipa fa'atulagaina e fai ai se lima e fusifusia ma se lima e feavea'i ai se fasi pepa alumini la'ititi e fai ma fa'ailo e fa'alavelave ai le malamalama.
O namu fafine ua matelaina i le 24 itula na tuʻuina atu i ai le meaʻai o loʻo taʻua i luga mo le 30 minute aʻo leʻi taofia. Ona faʻasusu lea o namu fafine ua fafaga atoatoa i luga o le aisa mo le 2-3 minute ma faʻapipiʻi i pine iniseti i le beeswax (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) ona nonoa lea i lima o paipa faʻalava. Flying Mill. O taamilosaga i le vaalele na faʻamaumauina e se faʻamaumauga faʻapitoa, ona teuina lea ma faʻaalia e faʻaaoga ai le polokalama PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE). O le vaalele na tuʻu i totonu o se potu e pulea le tau (12 itula:12 itula, malamalama: pogisa, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Ina ia vaʻaia le mamanu o gaioiga o le vaalele, o le aofaʻi o le mamao na felelei ai (m) ma le aofaʻi o gaioiga o vaalele sosoo na fuafuaina i le itula i le vaitaimi e 24-itula. I se faʻaopoopoga, o le averesi o mamao na felelei ai fafine taʻitasi na faʻatusatusa i togafitiga uma ma suʻesuʻeina e faʻaaoga ai le ANOVA e tasi le itu ma le auʻiliʻiliga a Tukey i le maeʻa ai o le faʻalavelave (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.), lea na manatu ai o le averesi o le mamao o se fesuiaʻiga faʻalagolago, ae o le togafitiga o se mea tutoʻatasi. E le gata i lea, o le averesi o le aofaʻi o taʻamilosaga e fuafuaina i le 10-minute faʻaopoopoga.
Ina ia iloilo le aafiaga o meaʻai i le faʻatinoga o le toe fanauina o le An.arabiensis, e toʻaono fafine (4 dpe) na faʻaliliuina saʻo i totonu o pa Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) ina ua maeʻa ona aoina le toto ma tuʻuina atu le meaʻai faʻataʻitaʻi mo le 48 itula e pei ona faʻamatalaina i luga. Ona aveese lea o meaʻai ma tuʻuina atu ipu fanau (30 ml; Nolato Hertila) na faʻatumuina i le 20 ml o le vai mama i le aso lona tolu mo le 48 itula, sui i itula taʻitasi e 24. Toe fai meaʻai taʻitasi i le 20-50 taimi. Na faitauina ma faʻamaumauina fuamoa mo pa taʻitasi. Na faʻaaogaina ni faʻataʻitaʻiga o fuamoa e iloilo ai le tele ma le umi o fuamoa taʻitasi (n ≥ 200 i le meaʻai) e faʻaaoga ai se Dialux-20 microscope (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) faʻapipiʻiina i se Leica Camera (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd., DE). O fuamoa na totoe na teuina i totonu o se potu e pulea lelei le tau i lalo o tulaga masani o le tausiga mo le 24 itula, ma o se vaega o le larvae o le instar muamua na faatoa aliaʻe mai (n ≥ 200 i le taumafataga e tasi) na fuaina, e pei ona faamatalaina i luga. O le aofaʻi o fuamoa ma le tele o fuamoa ma larvae na faatusatusa i le va o togafitiga ma faaaoga ai le ANOVA e tasi le itu ma le auiliiliga a Tukey's post hoc (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
O mea manogi mai le mimi fou (1 itula talu ona faia le su'esu'ega), mimi tuai mo le 24 itula, 72 itula ma le 168 itula na aoina mai fa'ata'ita'iga na aoina mai povi Zebu, ituaiga Arsi. Mo le faigofie, na aoina fa'ata'ita'iga o mimi i le taeao po a'o i ai pea povi i totonu o le fale povi. Na aoina fa'ata'ita'iga o mimi mai povi e 10 ma 100-200 ml o fa'ata'ita'iga ta'itasi na fa'aliliuina i totonu o taga tao polyamide ta'itasi (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) i totonu o le 3 lita polyamide ma le tapuni i totonu o palasitika vinyl chloride. O mea manogi mai fa'ata'ita'iga o mimi povi ta'itasi na aoina sa'o (fou) pe a uma ona matua i le vevela o le potu mo le 24 itula, 72 itula ma le 168 itula, o lona uiga o fa'ata'ita'iga o mimi ta'itasi e fai ma sui o vaega ta'itasi o tausaga.
Mo le aoina o mea e maua mai le ulu, na faʻaaogaina ai se faiga tapuni e faʻasalalau ai se vaitafe o le kesi ua faʻamamāina e le kaponi faʻagaoioia (100 ml min-1) e ala i se taga polyamide i le koluma adsorption mo le 2.5 itula e ala i le faʻaaogaina o se pamu diaphragm vacuum (KNF Neuberger, Freiburg, DE). I le avea ai ma se faʻataʻitaʻiga, na faia le aoina o mea e maua mai le ulu mai se taga polyamide gaogao. O le koluma adsorption na faia i le paipa Teflon (5.5 cm x 3 mm id) o loʻo i ai le 35 mg o le Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) i le va o poloka glass wool. Aʻo leʻi faʻaaogaina, na fufuluina le koluma i le 1 ml redistilled n-hexane (Merck, Darmstadt, DE) ma le 1 ml pentane (99.0% pure solvent GC grade, Sigma Aldrich). O mea e maua mai le ulu na faʻamamāina i le 400 μl o le pentane. Na faʻaputuina aoina o mea e maua mai le ulu ma teuina i le -20°C seʻia faʻaaogaina mo nisi suʻesuʻega.
Tali atu i amioga a le An. O mea e maua mai le ulu o le avanoa e aoina mai le mimi fou, 24-itula, 72-itula, ma le 168-itula na su'esu'eina mo mea e maua mai le mimi Arabidopsis e fa'aaoga ai se olfactometer tu'u tioata sa'o [18]. Na faia fa'ata'ita'iga i le taimi o le ZT 13-15, o le taimi pito i luga o le gaioiga a An e saili fale. Arab [19]. O se olfactometer tu'u tioata (80 cm × 9.5 cm id) na fa'amalamalamaina i le 3 ± 1 lx o le moli mumu mai luga. O le tafe o le ea ua fa'amama ma fa'asūsūina i le malala (25 ± 2 °C, 65 ± 2% le susu fa'atatau) na pasia le bioassay i le 30 cm s-1. O le ea e pasia i se fa'asologa o laupepa u'amea e le gaoia, ma faia ai se tafe laminar ma se fausaga tutusa o le plume. O le masini tufatufa tampon nifo (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), e tautau mai se uaea 5 cm i le pito i luga o le olfactometer, fa'atasi ai ma suiga o le stimulator i minute ta'i 5. Mo le su'esu'ega, 10 μl o le headspace extract ta'itasi, fa'avaivaia 1:10, na fa'aaogaina o se stimulus. O se aofa'i tutusa o le pentane na fa'aaogaina o se vaega fa'atonutonu. O namu ta'ito'atasi e sailia pe miti toto na tu'uina i totonu o pa ta'itasi e fa'asa'oloto ai 2-3 itula a'o le'i amataina le fa'ata'ita'iga. O le pa fa'asa'oloto na tu'uina i le itu i lalo o le olfactometer, ma na fa'atagaina namu e fa'amasani mo le 1 minute, ona tatala lea o le butterfly valve o le pa e fa'asa'oloto ai. O le tosina atu i togafitiga po'o le vaega fa'atonutonu na au'ili'iliina o le vaega o namu na fa'afeso'ota'i ma le puna i totonu o le 5 minute talu ona fa'asa'olotoina. O le headspace volatile extract ta'itasi ma le vaega fa'atonutonu na toe faia i le itiiti ifo i le 30 taimi, ma ina ia 'alofia ai a'afiaga o so'o se aso e tasi, o le aofa'i tutusa o togafitiga ma vaega fa'atonutonu na fa'ata'ita'iina i aso ta'itasi o fa'ata'ita'iga. Saili tali mai le vaega fa'atonutonu ma le vaega fa'atumu toto na fafaga i le toto. O seti Arapi e fa'atusatusa i le headspace na au'ili'iliina e fa'aaoga ai le nominal logistic regression sosoo ai ma fa'atusatusaga fa'alua mo fua fa'atatau eseese (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Tali a An i le fanauina o povi. O mea e maua mai le ulu mai le mimi povi fou ma le matua na su'esu'eina i totonu o pa Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). O ipu palasitika (30 mL; Nolato Hertila) na fa'atumuina i le 20 mL o le vai mama na saunia ai le mea e fanau ai ma tu'u i tulimanu fa'afeagai o le pa, e 24 cm le va. O ipu togafitiga na fa'asa'oina i le 10 μl o mea e maua mai le ulu ta'itasi i le 1:10 dilution. O se aofa'i tutusa o le pentane na fa'aaogaina e fa'asa'o ai le ipu pulea. O ipu togafitiga ma ipu pulea na fesuia'i i le va o fa'ata'ita'iga ta'itasi e pulea ai aafiaga o le tulaga. E sefulu fafine na fafagaina i le toto na fa'asa'olotoina i totonu o pa fa'ata'ita'i i le ZT 9-11 ma o fuamoa i totonu o ipu na faitauina i le 24 itula mulimuli ane. O le fua fa'atatau mo le fuafuaina o le fa'asinomaga o le fanauina o povi o le: (le aofa'i o fuamoa na fanau i totonu o le ipu togafitiga - le aofa'i o fuamoa na fanau i totonu o le ipu pulea)/(le aofa'i atoa o fuamoa na fanau). O togafitiga ta'itasi na toe faia i le 8 taimi.
Sa faia le au'ili'iliga o le gas chromatographic ma le electron antenna pattern detection (GC-EAD) o le An.arabiensis fafine e pei ona fa'amatalaina muamua [20]. I se fa'apu'upu'u, o mea fou e maua mai le ulu e vavae'eseina e fa'aaoga ai le Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) ua fa'apipi'iina i se koluma HP-5 (30 m × 0.25 mm id, 0.25 μm le mafiafia o le ata tifaga, Agilent Technologies). ma le mimi ua matua. Sa fa'aaogaina le hydrogen o le vaega feavea'i ma le averesi o le fua faatatau o le tafe linear o le 45 cm s-1. O fa'ata'ita'iga ta'itasi (2 μl) sa tuiina mo le 30 sekone i le faiga e le'i vaeluaina ma le vevela o le inlet o le 225 °C. O le vevela o le ogaumu GC sa fa'atulagaina mai le 35 °C (taofi 3 minute) i le 300 °C (taofi 10 minute) i le 10 °C min-1. I le GC effluent splitter, sa fa'aopoopoina le 4 psi o le nitrogen ma vaevaeina 1:1 i totonu o le Gerstel 3D/2 low dead volume cross (Gerstel, Mülheim, DE) i le va o le flame ionization detector ma le EAD. O le GC effluent capillary mo le EAD sa pasia i totonu o le Gerstel ODP-2 transfer line, lea e siaki ai le vevela o le ogaumu GC fa'aopoopo i le 5 °C, i totonu o se paipa tioata (10 cm × 8 mm), lea na fa'afefiloi ai ma le ea fa'asusu ua fa'amama ma fa'asūsūina i le carbon (1.5 l min−1). Sa tu'u le antenna. 0.5 cm mai le auala e alu ese ai le paipa. E tasi le fa'asologa o namu ta'itasi, ma mo namu o lo'o sailia ni mea e talimalo ai, e le itiiti ifo ma le tolu fa'asologa na faia i fa'ata'ita'iga o mimi o vaitausaga ta'itasi.
Fa'ailoaina o vaila'au fa'aolaola i totonu o le aoina o le ulu o le mimi povi fou ma matutua e fa'aaoga ai se GC tu'ufa'atasi ma le mass spectrometer (GC-MS; 6890 GC ma le 5975 MS; Agilent Technologies) e fa'aalia ai tali antennal i le au'ili'iliga GC-EAD, fa'agaoioia i le electron impact ionization mode i le 70 eV. O le GC na fa'apipi'iina i se HP-5MS UI-coated fused silica capillary column (60 m × 0.25 mm inner diameter, 0.25 μm film thickness) e fa'aaoga ai le helium o le mobile phase ma le averesi linear flow rate o le 35 cm s-1. O se fa'ata'ita'iga 2 μl na tuiina e fa'aaoga ai le tutusa o le injector settings ma le oven temperature e pei o le au'ili'iliga GC-EAD. Na fa'ailoaina vaila'au e fa'atatau i lo latou taimi taofi (Kovát index) ma le mass spectra pe a fa'atusatusa i le custom library ma le NIST14 library (Agilent). Na fa'amaonia vaila'au na fa'ailoaina e ala i le tuiina o tulaga fa'atonuina moni (Additional File 1: Table S2). Mo le fa'atusatusaga, heptyl acetate (10 ng, 99.8% le mama fa'akemikolo, Aldrich) na tuiina e fai ma fa'ata'ita'iga i fafo.
Iloiloina o le aoga o se paluga manogi fa'apitoa e aofia ai vaila'au fa'aletino e fa'ailoa mai i le mimi fou ma le mimi ua leva ona fa'aaogaina e tosina mai ai le Ans.arabiensis o lo'o sailia ma miti toto, e fa'aaoga ai le olfactometer ma le faiga fa'avae e pei ona ta'ua i luga. O paluga fa'apitoa na fa'ata'ita'i le fa'atulagaga ma le fua fa'atatau o vaila'au i totonu o le headspace fefiloi o le mimi fou, 24-itula, 48-itula, 72-itula, ma le 168-itula ua leva ona fa'aaogaina (Ata 5D-G; Fa'amatalaga Fa'aopoopo 1: Laulau S2). Mo le su'esu'ega, fa'aaoga le 10 μl o le 1:100 fa'asusu o le paluga fa'apitoa atoa, fa'atasi ai ma le fua fa'atatau atoa e amata mai le tusa ma le 140-2400 ng h-1, mo le iloiloina o le tosina atu i namu talimalo ma namu miti toto. A mae'a lena, e faia le su'ega i paluga atoa, lea e aveese ai paluga fa'aopoopo o vaila'au ta'itasi o le paluga atoa. Saili tali mai le Ans. Arapi vs paluga fa'apitoa ma fa'aopoopo na su'esu'eina e fa'aaoga ai le nominal logistic regression sosoo ai ma fa'atusatusaga fa'alua mo fua fa'atatau eseese. (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Ina ia iloilo pe mafai e le mimi povi ona avea ma fa'ailoga o le nofoaga o namu malaria, o mimi povi fou ma mimi povi matutua, na aoina e pei ona fa'amatalaina i luga, ma tu'u le vai i totonu o pakete 3 lita ua fa'apipi'iina (100 ml) ma tu'u i totonu o mailei maunu a le namu. (BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE). E sefulu mailei na tu'u i le va o le 50 m i le vao, 400 m mai le nu'u (Silay, Etiopia, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) ma e leai ni povi, i luga o nofoaga tumau e fanafanau ai ma nu'u. E lima mailei na fa'avevela e fa'ata'ita'i ai le i ai o se namu, a'o lima mailei na tu'u e le'i fa'avevela. O nofoaga ta'itasi e togafitia ai e fesuia'i i po ta'itasi mo le aofa'i o po e lima. O le aofa'i o namu na pu'eina i mailei na maunu i mimi o tausaga eseese na fa'atusatusaina e fa'aaoga ai le logistic regression ma le beta binomial distribution (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
I se nuʻu e tele ai le malaria e lata ane i le taulaga o Maki, Oromia region, Ethiopia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Ata 6A). Na faia le suʻesuʻega i le va o le ogatotonu o Aokuso ma le ogatotonu o Setema aʻo leʻi faia le faʻasusuina o otaota i totonu o le fale i tausaga taʻitasi, faʻatasi ai ma se vaitau timuga umi. E lima paga o fale (20–50 m le va) o loʻo i tua o le nuʻu na filifilia mo le suʻesuʻega (Ata 6A). O taʻiala na faʻaaogaina e filifili ai fale o: e le faʻatagaina manu i totonu o le fale, e le faʻatagaina le kuka i totonu (tosoina o fafie poʻo malala) (ia le itiiti ifo i le taimi o le suʻega), ma fale e toʻalua tagata e nonofo ai, e momoe i vailaʻau e le faʻasaina ai iniseti. i lalo o le upega namu ua togafitia. Ua tuʻuina atu le faʻamaoniga tau amio e le Institutional Research Ethics Review Board (IRB/022/2016) o le Faculty of Natural Sciences (CNS-IRB), Addis Ababa University, e tusa ai ma taʻiala na faʻatuina e le World Medical Association Declaration of Helsinki. Na maua le maliega mai ulu taʻitasi o aiga i le fesoasoani a le aufaigaluega faʻalauteleina o le soifua maloloina. O le faagasologa atoa ua faʻamaonia e pulega faʻalotoifale i le tulaga o le itumalo ma le uarota ('kebele'). O le mamanu faʻataʻitaʻi na mulimulitaʻi i se mamanu sikuea Latina 2 × 2, lea na tofia ai faʻafefiloi ma pulega faʻapitoa i fale faʻalua i le po muamua ma fesuiaʻi i le va o fale i le po faʻataʻitaʻi e sosoo ai. O lenei faagasologa na toe faia i le sefulu taimi. E le gata i lea, ina ia fuafua le gaioiga o namu i fale filifilia, na setiina ai mailei CDC e faʻatino i po e lima sosoo i le amataga, ogatotonu ma le faʻaiʻuga o le suʻega i le fanua i le taimi lava e tasi o le aso.
O se paluga fa'apitoa o lo'o i ai ni vaila'au fa'aolaola e ono na fa'a'a'a i le heptane (97.0% solvent GC grade, Sigma Aldrich) ma fa'asa'olotoina i le 140 ng h-1 e fa'aaoga ai se cotton wick dispenser [20]. Na mafai e le wick dispenser ona fa'asa'olotoina vaila'au uma i ni fua fa'atatau tutusa i le 12 itula o le fa'ata'ita'iga. Na fa'aaoga le Heptane o se fa'atonutonu. Na tautau le fagu i tafatafa o le nofoaga e ulufale ai le Centers for Disease Control and Prevention (CDC) light trap (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Ata 6A). Na tautau mailei i le 0.8 – 1 m i luga a'e o le eleele, e lata ane i le vae o le moega, ma na moe se volenitia i lalo o se upega namu e le'i togafitia ma fa'agaoioia i le va o le 18:00 ma le 06:30. Namu na pu'eina e tusa ai ma le itupa ma le tulaga fa'aletino (le'i fafagaina, fafagaina, ma'itaga, ma ma'itaga [21] na mulimuli ane su'esu'eina e fa'aaoga ai le su'esu'ega o le polymerase chain reaction (PCR) e fa'ailoa ai le ituaiga na fa'ailoaina fa'aletino o le A. gambiae sl. O sui o le fa'alavelave [23]. I le fanua I se suʻesuʻega, o le mailei o fale paga na suʻesuʻeina e faʻaaoga ai se faʻataʻitaʻiga talafeagai faʻapitoa, lea o le tosina atu o le fesuiaʻiga faʻalagolago ma le togafitiga (faʻafefiloi faʻapitoa vs pulea) o le aafiaga tumau (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.). O iinei, matou te lipotia atu le χ2 ma le p-values ​​​​mai le suega o le fua faatatau o le mafai.
Iloilo pe saogalemu. Na mafai e arabiensis ona maua le mimi, o lona puna autu o le nitrogen, o le urea, e ala i le fafagaina sa'o, i totonu o le 48 itula talu ona fa'aogaina mo le 4 aso talu ona mae'a (dpe) su'ega fafagaina o fafine e saili ma fafaga toto (Ata 1A). O fafine e saili ma mitiia le toto na sili atu le tele o le sucrose nai lo se isi lava mea'ai po'o le vai (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 ma le F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, i le faasologa; Ata 1B,C). E le gata i lea, o fafine e saili ma mitiia le mimi na itiiti ifo a latou mea'ai i le mimi i le 72 itula pe a fa'atusatusa i le mimi i le 168 itula (Ata 1B). Ina ua ofoina atu se mea'ai o lo'o i ai le urea, na mitiia e fafine e saili ma mitiia le tele o le urea i le 2.69 mM pe a fa'atusatusa i isi mea'ai uma ma le vai, ae le mafai ona iloa mai le 10% sucrose (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Ata 1D). O lenei mea sa ese mai le tali a fafine na fafagaina i le toto, o ē e masani ona mitiia le tele o meaʻai e iai le urea nai lo le vai, e ui lava e itiiti ifo i le 10% sucrose (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; Ata 1).1E). E le gata i lea, pe a faʻatusatusa i le va o tulaga faʻaletino e lua, o fafine na faʻapipiʻiina le phlebotomy na mitiia le tele o le urea nai lo fafine na sailia le talimalo i le maualuga maualalo, ma o nei fafine na mitiia le tele tutusa o le urea i le maualuga maualuga (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; Ata 1F, G). E ui o le taumafaina mai se meaʻai e iai le urea na foliga mai e iai ni tau sili ona lelei (Ata 1D,E), o fafine i tulaga faʻaletino uma e lua na mafai ona fetuʻunaʻi le aofaʻi o le urea na mitiia i luga o le vaega atoa o le maualuga o le urea i se faiga log-linear (Ata 1F,G). ).E foliga mai fo’i e pulea e namu lo latou mitiia o le namu e ala i le fa’atonutonuina o le aofa’i o le mimi e mitiia, auā o le aofa’i o le namu i le mimi e atagia mai i le aofa’i e mitiia (Ata 1B, C ma le B fa’aopoopoga).
Ina ia iloilo aafiaga o le mimi ma le urea i le ola o namu e saili ma miti toto, na fafagaina fafine i mimi o vaitausaga uma e fa (fou, 24 itula, 72 itula, ma le 168 itula talu ona fa'aputuina) ma o le tele o le urea, fa'apea fo'i ma le vai fa'amamā ma le 10% sucrose na avea ma fa'ata'ita'iga (Ata 2A). O lenei au'ili'iliga o le ola na fa'aalia ai o mea'ai e iai sona aafiaga taua i le ola atoa o fafine e saili (mimi: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Ata 2B, C) ma fafine e fafagaina i le toto (mimi: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Ata 2D,E). I mea uma lava. I faʻataʻitaʻiga, o fafine na fafagaina i le mimi, urea, ma le vai na matua maualalo lava le fua faatatau o le ola pe a faʻatusatusa i fafine na fafagaina i le sucrose (Ata 2B-E). O fafine na sailia le talimalo na fafagaina i le mimi fou ma le mimi tuai na faaalia ai ni fua faatatau eseese o le ola, faatasi ai ma i latou na fafagaina i le mimi tuai mo le 72 itula (p = 0.016) na i ai le avanoa e ola ai e maualalo (Ata 2B). E le gata i lea, o fafine na sailia le talimalo na fafagaina i le 135 mM urea na ola umi atu nai lo le vai (p < 0.04) (Ata 2C). Pe a faatusatusa i le vai, o fafine na fafagaina i le mimi fou ma le mimi 24-itula na ola umi atu (p = 0.001 ma le p = 0.012, i le faasologa; Ata 2D), ae o fafine na fafagaina i le mimi 72-itula na ola umi atu nai lo i latou na fafagaina i le mimi fou pupuu ma le mimi tuai mo le 24-itula (p < 0.0001 ma le p = 0.013, i le faasologa; Ata 2D). Ina ua fafagaina i le 135 mM urea, o fafine na fafagaina i le toto na ola umi atu nai lo isi vaega uma o le urea ma le vai (p < 0.013; Ata 2E).
O le ola o namu fafine Anopheles arabinis e talimalo ma miti toto o loʻo 'ai i le mimi povi ma le urea. I le suʻega bio (A), na tuʻuina atu ai i namu fafine se meaʻai e aofia ai le mimi povi fou ma le mimi povi matutua, le tele o le urea, sucrose (10%) ma le vai faʻamamāina (H2O). O le ola o namu e sailia le talimalo (B, C) ma miti toto (D, E) na faʻamaumauina i itula taʻi 12 seʻia oʻo ina oti namu fafine uma e 'ai i le mimi (B, D) ma le urea (C, E), ma vaega e pulea, Sucrose ma le vai.
O le mamao atoa ma le aofaʻi o taʻamilosaga na fuafuaina i le suega o le vaalele i le vaitaimi e 24-itula na eseese i le va o namu e saili-talimalo ma namu e miti-toto, lea na faaalia ai le itiiti ifo o gaioiga lele i le aotelega (Ata 3). O namu e saili-talimalo na saunia le mimi fou ma le matua poʻo le sucrose ma le vai na faaalia ai ni mamanu lele eseese (Ata 3), faatasi ai ma fafine na 'ai i le mimi fou na sili atu ona toaga i le tafa o ata, ae o namu na fafagaina i le 24- ma le 168-itula matutua. O namu na 'ai i le mimi na faaalia ai ni mamanu lele eseese ma e masani lava ona ola i le ao. O namu fafine na saunia le sucrose poʻo le mimi 72-itula na faaalia le gaioiga i le vaitaimi atoa o le 24-itula, ae o fafine na saunia le vai na sili atu ona toaga i le ogatotonu o le vaitaimi. O namu na fafagaina i le sucrose na faaalia ai le maualuga o le gaioiga i le leva o le po ma le taeao po, ae o namu na 'ai le mimi 72-itula matutua na aafia i le faaitiitia pea o gaioiga i le silia ma le 24 itula (Ata 3).
Fa'atinoga o le lele a le fafine Anopheles arabinis e saili-toto ma mitiia le 'ai i le mimi povi ma le urea. I le suega o le fale olo lele, o namu fafine na fafagaina i le mimi povi fou ma matutua, o le tele o le urea, sucrose (10%), ma le vai fa'amamāina (H2O) na nonoa i lima fa'alava, e feliuliua'i saoloto (i luga). Mo fafine e saili-talimalo (agavale) ma fafine e miti-toto (taumatau), o le mamao atoa ma le aofa'i o lele i le itula mo mea'ai ta'itasi i le 24-itula na fa'amaumauina (pogisa: efuefu; malamalama: pa'epa'e). O le mamao averesi ma le aofa'i averesi o osofa'iga o lo'o fa'aalia i le taumatau o le kalafi o gaioiga circadian. O pa sese e fa'atusalia ai le sese masani o le averesi. Iloiloga fa'amaumauga va'ai tusitusiga
I se tulaga lautele, o le gaioiga atoa o le lele a fafine e saili-talimalo na mulimulitaʻi i se mamanu e tutusa ma le mamao o le lele i le vaitaimi e 24-itula. O le mamao o le lele na matua aʻafia lava i meaʻai na 'aina (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), ma o fafine na saili-talimalo na 'aina le mimi mo le 72 itula na lele mamao atu nai lo isi meaʻai uma (p < 0.0001), ma o namu na fafagaina i le sucrose na lele umi atu nai lo namu fou (p = 0.022) ma namu na fafagaina i le mimi e 24-itula (p = 0.022). E ese mai i le mamanu o gaioiga o le lele na faamatalaina e le taumafataga o le mimi, o fafine na sailia-talimalo na fafagaina i le urea na faaalia ai le gaioiga faifai pea o le lele i le vaitaimi e 24-itula, ma oʻo atu i le afa lona lua o le vaitaimi pogisa (Ata 3). E ui lava e tutusa mamanu o gaioiga, o fafine na sailia-talimalo na fafagaina i le urea na faateleina ai le mamao o le lele e faalagolago i le malosi o le mitiia (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). Saili-talimalo na felelei fafine na fafagaina i so'o se tu'ufa'atasiga o le urea mo se taimi umi atu nai lo fafine na fafagaina i le vai po'o le sucrose (p < 0.03).
O le gaioiga lele atoa a namu miti toto sa mautu ma tumau i le silia ma le 24 itula i mea'ai uma, faatasi ai ma le faateleina o le gaioiga o le mimi i le afa lona lua o le vaitaimi pogisa mo namu fafine na fafagaina i le vai faapea foi i namu fafine na fafagaina fou ma le 24 itula le matutua (ata 3). E ui o mea'ai o le mimi na aafia tele ai le mamao lele i namu fafine na fafagaina i le toto (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), ae le'i aafia ai e le mea'ai o le urea (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) faatasi ai ma isi mea'ai o le mimi ma mea'ai fa'atonutonu (fou, p = 0.0091; 72 itula, p = 0.0022; 168 itula, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
O aafiaga o le mimi ma le fafagaina o le urea i tulaga tau fanautama na iloiloina i suʻesuʻega o fuamoa (Ata 4A) ma sa suʻesuʻeina e tusa ai ma le aofaʻi o fuamoa na faia e fafine taʻitasi, le tele o fuamoa, ma anufe fou faatoa fofoa. O le aofaʻi o fuamoa na faia. O fafine Arapi na fafagaina i le mimi e eseese e tusa ai ma meaʻai (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; Ata 4B). O fafine na fafagaina i le mimi i le 24 itula, o le taumafataga toto na latou fafagaina ni fuamoa e sili atu nai lo fafine na fafagaina i isi meaʻai mimi ma e tutusa ma i latou na fafagaina i le sucrose (Ata 4B). E faʻapena foʻi, o le tele o fuamoa na faia e fafine na fafagaina i le mimi e eseese e tusa ai ma meaʻai (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), faʻatasi ai ma le mimi i le 24 itula ma fafine na fafagaina i le sucrose na latou fafagaina ni fuamoa e sili atu le tele nai lo fafine na fafagaina i le vai, aʻo fuamoa a fafine na fafagaina i le 168 itula o le mimi e laʻititi tele (Ata 4C). E le gata i lea, o le taumafataga o le mimi na aʻafia tele ai le tele o anufe (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), faatasi ai ma anufe tetele atu e alia'e mai fuamoa na fofoa e fafine e 24- ma le 72-itula le matutua na fafagaina i le mimi nai lo fuamoa na fofoa mai fuamoa anufe. O fafine e fafagaina i le vai ma fafine e fafagaina i le mimi i le 168-itula (Ata 4D).
Fa'atinoga o le fanautama a le fafine Anopheles arabinis o lo'o 'ai i le mimi povi ma le urea. O namu fafine na fafaga i le toto na fafagaina i mea'ai e aofia ai le mimi povi fou ma le mimi povi matutua, le tele o le urea, sucrose (10%), ma le vai fa'amamā (H2O) mo le 48 itula a'o le'i tu'uina i totonu o su'ega bio ma maua ai mea e fofoa ai fuamoa mo le 48 itula (A). O le aofa'i o fuamoa (B, E), le tele o fuamoa (C, F) ma le tele o anufe (D, G) na matua a'afia lava i mea'ai na saunia (mimi povi: BD; urea: EG). O fua fa'atatau mo parakalafa ta'itasi na fuaina e fa'aaoga ai igoa eseese o mata'itusi na matua eseese lava le tasi mai le isi (tasi le itu ANOVA e fa'aaoga ai le su'esu'ega a Tukey's post hoc; p < 0.05). O pa sese e fa'atusalia ai le sese masani o le averesi.
I le avea ai ma vaega autū o le naitorosene o le mimi, o le urea, pe a tuʻuina atu o se meaʻai i fafine na fafagaina i le toto, na matuā aʻafia ai tulaga faʻafanau i suʻesuʻega uma. O le aofaʻi o fuamoa na faʻatupuina e fafine na fafagaina i le urea, pe a uma se taumafataga toto, e fuafua i le maualuga o le urea (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), o fafine na fafagaina i le maualuga o le urea i le va o le 134 µM ma le 1.34 mM na latou faʻatupuina ni fuamoa se tele (Ata 4E). O fafine na fafagaina i le maualuga o le urea e 134 µM pe sili atu na latou faʻatupuina ni fuamoa tetele nai lo fafine na fafagaina i le vai (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Ata 4F), ma le tele o le anufe, e ui ina aʻafia i le tutusa o le maualuga o le urea i tina (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) e sili atu ona fesuisuiaʻi (Ata 4G).
O le tosina atu lautele i le mimi povi ulu-o-le-ulu e sailia le talimalo. O le arabiensis na iloiloina i le olfactometer o le paipa tioata (Ata 5A) na matua aafia lava i le matua o le mimi (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Ata 5B). O le auiliiliga o le post hoc na faaalia ai o le manogi leaga o le mimi i le 24 itula na mafua ai le maualuga tele o le tosina atu pe a faatusatusa i isi togafitiga uma (72 itula: p = 0.0060, 168 itula: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Sei vagana ai le manogi o le mimi fou (p = 0.13; Ata 5B). E ui lava o le tosina atu lautele o namu miti toto i le manogi o le mimi e le o se eseesega tele (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Ata 5C), o nei fafine na maua e sili atu ona tosina atu i le mimi ulu-o-le-ulu pe a faatusatusa i le mimi ua 72-itula le matua pe a faatusatusa i le vaega pulea (p = 0.0066; Ata 5C).
Tali atu i amioga i manogi masani ma manogi fa'apitoa o le mimi povi i le sailiga mo le talimalo ma le toto o le Anopheles arabianus. Ata o le olfactometer o le paipa tioata (A). Tosina mai o mea e maua mai le ulu mai le mimi povi fou ma le matua i le talimalo (B) ma namu e mitiia le toto (C). Saili le tali atu o le tentacle a le Lord An. O mea e maua mai le ulu ua vavae'ese mai le mimi povi fou (D), 24-itula (E), 72-itula (F), ma le 168-itula (G) ua matua o lo'o fa'aalia. O fa'ailoga o le electron antenna detection (EAD) e fa'aalia ai suiga o le voltage i le tali atu i vaila'au bioactive i le ulu ua fa'aesea mai le gas chromatograph ma iloa e se flame ionization detector (FID). O le pa fua e fa'atusalia ai le tele o tali (mV) e fa'atusatusa i le taimi e taofia ai (s). O meatotino ma fua fa'atatau o le fa'asa'olotoina (µg h-1) o vaila'au fa'aolaola o lo'o fa'aalia. O se fetu e tasi (*) e fa'ailoa mai ai se tali maualalo mautu. O fetu e lua (**) e fa'ailoa mai ai tali e le mafai ona toe gaosia. Saili le talimalo (H) ma le (I) An.arabiensis e miti toto e eseese ona tosina atu i fa'afefiloi fa'apitoa o manogi o mimi povi fou ma matutua. O le averesi o vaega o namu e tosina atu i igoa eseese o mata'itusi e matua eseese lava le tasi mai le isi (tasi-ala ANOVA e fa'aaoga ai le au'ili'iliga post hoc a Tukey; p < 0.05). O pa sese e fa'atusalia ai le sese masani o le fua.
O le Ann.arabiensis fafine, 72 itula ma le 120 itula talu ona uma le toto, i le taimi o le fanautama, e leai se fa'amuamua na fa'aalia mo mea e maua mai le mimi povi fou ma le mimi povi ua matutua pe a fa'atusatusa i le pentane controls (χ2 = 3.07, p > 0.05; Fa'aopoopoga faila 1: Ata S1).
Mo le Ann.arabiensis fafine, o suʻesuʻega a le GC-EAD ma le GC-MS na faʻamaonia ai le valu, ono, tolu ma le tolu o vailaʻau faʻaosofia (Ata 5D-G). E ui ina matauina eseesega i le aofaʻi o vailaʻau na mafua ai tali eletise, o le tele o nei vailaʻau sa i ai i totonu o mea faʻaola taʻitasi o le ulu na aoina mai le mimi fou ma le mimi ua leva. O le mea lea, mo mea faʻaola taʻitasi, naʻo vailaʻau na mafua ai se tali faʻaletino mai antennae fafine i luga aʻe o le tulaga maualuga na aofia ai i suʻesuʻega faaopoopo.
O le aofaʻi atoa o le fua faatatau o le faʻasaʻolotoina o vailaʻau faʻaolaola i le aoina o le headspace na faʻateleina mai le 29 µg h-1 i le mimi fou i le 242 µg h-1 i le mimi ua leva ona faʻamaʻaʻaina i le 168 itula, ona o le faʻateleina o le p-cresol ma le m-formaldehyde Phenol faʻapea foʻi ma le phenol. I se faʻatusatusaga, o fua faatatau o le faʻasaʻolotoina o isi vailaʻau, e pei o le 2-cyclohexen-1-one ma le decanal, na faʻaitiitia i le faʻateleina o le matua o le mimi, lea e fesoʻotaʻi ma le faʻaitiitia o le malosi o le faʻailoga (tele) i le chromatogram (Ata 5D)-G le vaega agavale) ma tali faʻaletino i nei vailaʻau (Ata 5D-G le vaega taumatau).
I le aotelega, o le paluga fa'apitoa sa i ai se fua fa'atatau masani tutusa o vaila'au fa'agaoioia na fa'ailoa mai i totonu o mea e maua mai le vai o le mimi fou ma le mimi ua leva (Ata 5D–G) ma e foliga mai e le'i maua ai se tosina tele i le sailiga mo se namu talimalo (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Ata 5H) po'o namu miti toto (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; Ata 5I). Peita'i, o fa'atusatusaga fa'alua i le va o togafitiga na fa'aalia ai o namu sailia namu talimalo sa matua tosina atu i le paluga fa'apitoa o le mimi ua leva ona 24 itula pe a fa'atusatusa i namu fa'atonutonu pentane (p = 0.0086; Ata 5H).
Ina ia iloilo le matafaioi o vaega taʻitasi i totonu o paluga faʻapitoa o le mimi ua 24 itula le matua, e ono paluga faʻaopoopo na iloiloina e faʻasaga i paluga atoatoa i le suʻega Y-tube, lea na aveeseina ai vaega taʻitasi. Mo namu e sailia ni mea e talimalo ai, o le toesea o vaega taʻitasi mai le paluga atoatoa sa i ai se aafiaga taua i tali amioga (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; Faila faaopoopo 1: Ata S2A), o paluga faʻaopoopo uma sa sili atu ona tosina atu nai lo le Laʻititi nai lo le palu atoatoa. I se faatusatusaga, o le aveeseina o vaega taʻitasi mai le paluga atoatoa e leʻi afaina ai tali amioga a namu e miti toto (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), vagana ai le decanal, lea na iʻu ai i tulaga maualalo pe a faʻatusatusa i le paluga atoa o le Tosina (p = 0.022; Faila faaopoopo 1: Ata S2B).
I se nuʻu e maua i le malaria i Etiopia, na iloiloina ai le aogā o se paluga faʻapitoa o le mimi povi i le 24 itula i le tosina mai o namu i lalo o tulaga o le fanua mo po e sefulu (Ata 6A). E 4,861 namu na puʻeina ma faʻailoaina, e 45.7% o Anthropus.gambiae sl, 18.9% o Anopheles pharoensis ma le 35.4% o Culex spp. (Faila faʻaopoopo 1: Laulau S1). O le Anopheles arabinis o le pau lea o le sui o le An.Gambian species complex na faʻailoaina e ala i le auʻiliʻiliga PCR. I le averesi, e 320 namu na puʻeina i le po, i le taimi lea na maua ai e mailei faʻatasi ai ma maunu faʻapitoa ni namu e sili atu nai lo mailei faʻatasi e leai se paluga (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). Na faʻatulaga mailei e leʻi faʻaaogaina ni maunu i po taʻitasi e lima o le pulega i le amataga, ogatotonu, ma le faʻaiʻuga o le suʻega. E tutusa le aofaʻi o namu na puʻeina i paga taʻitasi o mailei, e faʻaalia ai le leai o se faʻaituau i le va o fale (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) ma e leai se faʻaitiitia o le faitau aofaʻi i le taimi o le suʻesuʻega. Pe a faʻatusatusa i mailei faʻatonutonu, o le aofaʻi o namu na maua i mailei o loʻo i ai le paluga faʻapitoa na matua faʻateleina: sailiga o le talimalo (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), fafagaina talu ai nei o le toto (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) ma le maitaga (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; Faʻaopoopoga faila 1: Laulau S1). O loʻo atagia foʻi lenei mea i le aofaʻi atoa o namu na maua: sailiga o le talimalo > miti toto > maʻitaga > maʻitaga faʻafaʻatoʻa > tane.
Iloiloga o le fanua i le aoga o se paluga manogi o le mimi povi fa'apitoa i le 24 itula. Na faia su'ega i le fanua i saute-tutotonu o Aitiope (fa'afanua), e lata ane i le taulaga o Maki (fa'aofi), fa'aaoga se mailei malamalama a le Centers for Disease Control (CDC) (taumatau) i totonu o fale fa'alua, fa'atasi ai ma se mamanu fa'atafafā Latina (ata mai luga) (A). O mailei ata CDC fa'apitoa e fa'aaogaina manogi e tosina mai ma pu'eina ai Anopheles arabesques fafine (B), ae le o Anopheles farroes (C), i se auala ese, o se aafiaga fa'aletino e fa'alagolago i le tulaga. E le gata i lea, o nei mailei na pu'eina le aofa'i tele o namu Culex talimalo. (D) Fa'atusatusa i le vaega pulea. O pa i le agavale o lo'o fa'atusalia ai le averesi o le fa'asinomaga o filifiliga o namu na pu'eina i paga o mailei manogi (lanumeamata) ma le vaega pulea (tatala) (N = 10), ae o pa i le taumatau o lo'o fa'atusalia ai le averesi o le fa'asinomaga o filifiliga i paga o mailei pulea (tatala; N = 5). .O fetu e fa'ailoa mai ai tulaga taua fa'amaumauga (*p = 0.01 ma ***p < 0.0001)
Sa eseese le pu'eina o ituaiga e tolu i mailei o lo'o i ai ni fa'afefiloi fa'apitoa. I le sailia o le 'au talimalo (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), fafagaina i le toto (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) ma le ma'itaga (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) sa maileia le .arabiensis i le mailei ma fa'asa'oloto ai le fa'afefiloi fa'apitoa (Ata 6B), ae le'i eseese le aofa'i o le An. Sa maua le Pharoensis i tulaga eseese o le tino (Ata 6C). Mo le Culex, na'o le fa'ateleina tele o le aofa'i o namu o lo'o sailia 'au talimalo na maua i mailei na fa'aaogaina ai le fa'afefiloi fa'apitoa (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; Ata 6D), pe a fa'atusatusa i mailei fa'atonutonu.
O mailei maunu a le 'au talimalo na tu'u i fafo atu o 'au talimalo e ono mafai ona fa'atupuina i le va o nofoaga e fanafanau ai ma nu'u i tua i Aitiope na fa'aaogaina e iloilo ai pe fa'aaogaina e namu malaria le manogi o le mimi povi e fai ma fa'ailoga o le nofoaga o le 'au talimalo. I le leai o ni fa'ailoga o le 'au talimalo, le vevela, ma le i ai pe leai fo'i o le manogi o le mimi povi, e leai ni namu na maua (Faila fa'aopoopo 1: Ata S3). Peita'i, i le i ai o le vevela maualuga ma le manogi o le mimi povi, na tosina ma pu'eina namu fafine malaria, e ui lava i ni nai numera, e tuto'atasi mai le matua o le mimi (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Faila fa'aopoopo 1: Ata S3). I se fa'atusatusaga, o le puleaina o le vai e le'i pu'eina namu malaria i le vevela maualuga (Faila fa'aopoopo 1: Ata S3).
E maua ma tufatufa atu e namu malaria ni vailaʻau o loʻo i ai le nitrogen e ala i le fafagaina faʻaopoopo i le mimi povi (e pei o vaieli) e faʻaleleia atili ai uiga o le olaga, e tutusa ma isi iniseti [2, 4, 24, 25, 26]. O le mimi povi o se punaoa faʻafouina e faigofie ona maua e fesoʻotaʻi ma nofoaga e malolo ai mo tagata e feaveaʻi le malaria, e pei o fale povi ma laʻau maualuluga e lata ane i fale i nuʻu ma nofoaga e fanau ai. E maua e namu fafine lenei punaoa e ala i le manogi ma e mafai ona faʻatonutonuina le faʻaaogaina o vailaʻau nitrogenous i le mimi, e aofia ai le urea, o le vaega autu o le nitrogenous i le mimi [15, 16]. E faʻalagolago i le tulaga faʻaletino o le namu fafine, o meaʻai i le mimi e tuʻuina atu e faʻaleleia atili ai le gaioiga lele ma le ola o namu fafine e sailia le talimalo, faʻapea foʻi ma le ola ma uiga faʻafanau o tagata e fafagaina i le toto i le taimi o le taʻamilosaga muamua o le gonadotropic. O le mea lea, o le faʻafefiloi o le mimi e taua tele i meaʻai mo tagata e feaveaʻi le malaria e tapunia e pei o tagata matutua e le lava meaʻai [8], aua e maua ai e namu fafine le gafatia e maua ai vailaʻau nitrogenous taua e ala i le auai i le fafagaina e maualalo le lamatiaga. O lenei sailiga e i ai ni taunuuga taua o le epidemiological, aua e faʻateleina e fafine lo latou umi e ola ai, gaioiga ma le gaosiga o le toe gaosia, o ia mea uma e aʻafia ai le gafatia o vectors. E le gata i lea, o lenei amioga atonu o le sini lea o polokalame tau pulega o vectors i le lumanaʻi.