አኖፌልስ ትንኞች የህይወት ታሪክ ባህሪያትን ለማሻሻል የላም ሽንትን ያገኙ እና ያሰራጫሉ የወባ ጆርናል

የበሽታ መከላከያ እና የህይወት ታሪክ ባህሪያትን በማካተት, ለተለያዩ የህይወት ደረጃዎች አረቢያዎች በመመገብ የተደናገጡትን ንጥረ ነገር ለማካካስ, ለሜትቦሊዝም እና ለባለቤቶች ንጥረ ነገሮችን ለማካተት, ነፍሳት እነዚህን ንጥረ ነገሮች ለማካካስ, ዓላማዎች የዚህ ጥናት አንድ ሰው መገምገም ነበር.በላም ሽንት ላይ የአረብያንሲስ ቅስቀሳ ለተመጣጠነ ንጥረ ነገር ግዥ የህይወት ታሪክ ባህሪያትን ያሻሽላል።
ደህንነቱ የተጠበቀ መሆኑን ያረጋግጡ።arabiensis ትኩስ ፣ 24-ሰዓት ፣ 72-ሰዓት እና 168-ሰዓት የላም ሽንት ፣ እና አስተናጋጅ-ፈላጊ እና ደም-የተመገቡ (ከደም በኋላ ምግብ ከ48-ሰዓት) ሴቶችን በ Y-ቱብ ኦልፋክቶሜትር ፣ እና ነፍሰ ጡር ሴቶች በኬሚካል ውህድ ባዮሎጂያዊ ምርመራ እና ባዮሎጂያዊ ምርመራ ተደረገ ። ሽንት በአራቱም የእድሜ ክፍሎች የባዮአክቲቭ ውህዶች ሰው ሰራሽ ውህዶች በY-ቱብ እና በመስክ ሙከራዎች ተገምግመዋል።የላም ሽንት እና ዋና ናይትሮጅን የያዙ ውሁድ ዩሪያ ለወባ በሽታ መከላከያ ተጨማሪ ምግቦች፣ የአመጋገብ መለኪያዎች እና የህይወት ታሪክ ባህሪያት ተለክተዋል። በረራ, እና መራባት.
የአስተናጋጁን ደም እና አመጋገብ ይፈልጉ።በላብራቶሪ እና በመስክ ጥናቶች አረቦች ወደ ተፈጥሯዊ እና ሰው ሰራሽ ጠረን ትኩስ እና ያረጁ ላም ሽንት ይሳባሉ።ነፍሰ ጡር ሴቶች ለላም ሽንት ምላሽ ግድየለሾች ነበሩ።አስተናጋጅ ፈላጊ እና ደም የሚጠጡ ሴቶች ላም ሽንትን እና ዩሪያን በንቃት በመሳብ የላም ሽንትን እና ዩሪያን በንቃት ይሳባሉ ። አል, ወይም መራባት.
አኖፌሌስ አረቢኒስ የላም ሽንትን ማግኘት እና ማከፋፈል ለተሻሻሉ የህይወት ታሪክ ባህሪያት።የላም ሽንት ተጨማሪ መመገብ የእለት ህልውናን እና የቬክተር እፍጋትን በማሳደግ የቬክተር አቅምን በቀጥታ ይጎዳል እና በተዘዋዋሪ የበረራ እንቅስቃሴን በመቀየር ለወደፊቱ ሞዴሎች ግምት ውስጥ መግባት አለበት።
የተመጣጠነ ምግብ ማግኛ እና ስርጭት የነፍሳት መኖ እና የህይወት ታሪክ ባህሪያትን ያዋህዳል [1,2,3] ነፍሳት ምግብን መምረጥ እና ማግኘት እና የምግብ አቅርቦትን እና የንጥረ-ምግብ ፍላጎቶችን መሰረት በማድረግ የማካካሻ አመጋገብን ማከናወን ይችላሉ [1, 3]. እነዚህ ንጥረ ነገሮች እንደ ጭቃ ላይ፣ የተለያዩ እዳሪ እና የጀርባ አጥንት ህዋሳት፣ እና ካርሪዮን፣ ኩሬዎች በመባል የሚታወቁት ተጨማሪ ምግቦችን በመጠቀም ነው። ምንም እንኳን የተለያዩ የቢራቢሮ እና የእሳት ራት ዝርያዎች በዋነኛነት ቢገለጹም የውሃ ጉድጓዶች በሌሎች የነፍሳት ትእዛዝ ውስጥም ይከሰታሉ፣ እና የእነዚህን ሀብቶች መሳብ እና መመገብ በጤና እና በሌሎችም ህይወት ላይ ከፍተኛ ተጽእኖ ይኖረዋል። Anopheles gambiae sensu lato (sl) እንደ 'የተመጣጠነ ምግብ እጥረት' ሆኖ ብቅ ይላል [8], ስለዚህ ውሃ ማጠጣት በህይወት ታሪክ ባህሪው ውስጥ ትልቅ ሚና ሊጫወት ይችላል, ነገር ግን ይህ ባህሪ እስካሁን ድረስ ችላ ተብሏል. በዚህ አስፈላጊ ተሽከርካሪ ውስጥ የንጥረ-ምግቦችን መጨመር ዘዴ ቅስቀሳዎችን መጠቀም ትኩረትን የሚስብ ነው, ምክንያቱም ይህ ወሳኝ የሆነ ወረርሽኝ ውጤት ሊያስከትል ይችላል.
በአዋቂ ሴት አኖፌልስ ትንኞች ውስጥ ያለው ናይትሮጂን መጠን አነስተኛ የካሎሪክ ክምችቶች ከዕጭ ደረጃው ዝቅተኛ በመሆኑ እና የደም ምግብን በአግባቡ ባለመጠቀም የተገደበ ነው። ሌሎች ነፍሳት እንደሚያሳዩት የናይትሮጂን ውህዶችን ለማግኘት የጀርባ አከርካሪ አጥንትን ማሟያ መጠቀም ይችላል ። ከከብቶች ጋር በመገናኘት እና በመመገብ ይታወቃል።የላም ሽንት በናይትሮጅን ውህዶች የበለፀገ ሃብት ሲሆን ዩሪያ ከ50-95% የሚሆነው በአዲስ ሽንት ውስጥ ካለው አጠቃላይ ናይትሮጅን [15, 16] ይይዛል። y ከእነዚህ ውስጥ ለወባ ትንኞች መርዛማ የሆኑ ውህዶችን ያመነጫሉ) ያድጋሉ [15]፣ እሱም ሴት ሊሆን ይችላል Ann.arabiensis በ 24 ሰዓት ወይም ከዚያ ባነሰ ጊዜ ሽንት ይሳባል [13, 14].
በዚህ ጥናት ውስጥ አስተናጋጅ እና በደም የተመገቡ አንስ ፈልገዋል.በመጀመሪያው gonadotropin ዑደት ውስጥ አራቢየንሲስ ዩሪያን ጨምሮ ናይትሮጅን ውህዶችን በሽንት በመደባለቅ ለማግኘት ተገምግሟል። በመቀጠልም ሴት ትንኞች ይህንን እምቅ ንጥረ ነገር ለሕይወት፣ ለተጨማሪ እና ለተጨማሪ እርባታ እና ለተጨማሪ እርባታ ለመገምገም ተከታታይ ሙከራዎች ተካሂደዋል። እነዚህ ለአስተናጋጅ እና ለደም-ተመጋቢ አስተማማኝ ፍንጭ ይሰጡ እንደሆነ ለመወሰን አራቢየንሲስ ይህንን እምቅ የምግብ ምንጭ ለማግኘት በተደረገው ፍለጋ ከሚታየው ልዩነት ማራኪነት በስተጀርባ ኬሚካላዊ ግንኙነቶችን አግኝተዋል ። በ 24-ሰዓት ያረጀ ሽንት ውስጥ ተለይተው የሚታወቁት የተለዋዋጭ ኦርጋኒክ ውህዶች (VOCs) ሰው ሰራሽ ጠረን ድብልቆች በመስክ ሁኔታዎች ላይ የበለጠ ይገመገማሉ ፣ ይህም በተለያዩ የላቦራቶሪ ሁኔታዎች ላይ የተገኘውን ውጤት እና በዩቲኦሎጂያዊ ሁኔታዎች ላይ ያለውን ተፅእኖ ያሳድጋል ።የወባ ትንኝ መስህብ። የተገኘው ውጤት አን.arabiensis በህይወት ታሪክ ባህሪያት ላይ ተጽእኖ ለማሳደር በአከርካሪ ሽንት ውስጥ የሚገኙትን ናይትሮጅን ውህዶችን ያገኛል እና ያሰራጫል.እነዚህ ውጤቶች ሊከሰቱ ከሚችሉ ኤፒዲሚዮሎጂያዊ ውጤቶች አንፃር እና ለቬክተር ክትትል እና ቁጥጥር እንዴት ጥቅም ላይ እንደሚውሉ ተብራርተዋል.
አኖፌሌስ አረቢካን (ዶንጎላ ዝርያ) በ 25 ± 2 ° ሴ, 65 ± 5% RH እና 12:12 h ብርሃን: ጨለማ ዑደት ተጠብቀዋል. እጭዎች በፕላስቲክ ትሪዎች (20 ሴ.ሜ × 18 ሴ.ሜ × 7 ሴ.ሜ) በተጣራ ውሃ ተሞልተው በ Tetramin® ዓሳ ምግብ (ቴትራሚን ሜል 0 ፒ) ውስጥ ተሞልተዋል. Nolato Hertila, Åstorp, SE) እና ከዚያም ወደ Bugdorm cages (30 ሴሜ × 30 ሴሜ × 30 ሴ.ሜ; ሜጋቪው ሳይንስ, ታይችንግ, ታይዋን) ጎልማሳ ብቅ እንዲል ተላልፏል. አዋቂዎች የ 10% sucrose solution ማስታወቂያ ሊቢቲም ተሰጥቷቸዋል ከ 4 ቀናት በኋላ (ዲፔ) , በዚህ ጊዜ አስተናጋጅ-ፈላጊ ሴቶች ለሙከራ ተሰጥቷቸው ነበር, ወዲያውኑ ለሙከራ ተሰጥቷቸዋል. ከዚህ በታች ለበረራ ቱቦ ሙከራዎች የሚያገለግሉ ሴቶች ከ4-6 ሰአታት ብቻ በውሃ ማስታወቂያ ሊቢተም በረሃብ ተዳርገዋል። ደም የሚጠጡ ትንኞች ለቀጣይ ባዮአሲይ ለማዘጋጀት 4 ዲፒ ሴቶች ዲፊብሮቲክ የበግ ደም (Håtunalab, Bro, SE) በገለባ የአመጋገብ ስርዓት (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK) በቀጥታ ወደ ግለሰብ የተላለፈ አመጋገብ ተሰጥቷል. ወይም 10% sucrose ad libitum ለ 3 ቀናት ከዚህ በታች ከተገለጹት ሙከራዎች በፊት.የኋለኞቹ ሴቶች ለበረራ ቱቦ ባዮአሳይስ ጥቅም ላይ ውለው ወደ ላቦራቶሪ ተላልፈዋል, እና ከሙከራው በፊት ለ 4-6 ሰአታት የተጣራ ውሃ ማስታወቂያ ሊቢቲም ነበራቸው.
የመመገቢያ ምርመራዎች በአዋቂዎች ውስጥ የሽንት እና የዩሪያ ፍጆታን ለመለካት ጥቅም ላይ ይውላሉ አን.አረብ ሴት አስተናጋጅ ፈላጊ እና ደም የሚጠጡ ሴቶች 1% የተቀጨ ትኩስ እና ያረጀ ላም ሽንት, የተለያዩ የዩሪያ ስብስቦች እና ሁለት መቆጣጠሪያዎች (10% sucrose እና ውሃ) ለ 48 h. በተጨማሪም የምግብ ማቅለሚያ (1 mg-xyyan 6); 1 mg-xyAS 2 gma-Aldrich, Stockholm, SE) በአመጋገብ ውስጥ ተጨምሯል እና በ 4 × 4 ማትሪክስ በ 250 µl ማይክሮ ሴንትሪፉጅ ቱቦዎች (Axygen Scientific, Union City, CA, US; ምስል 1A) ወደ ጫፉ ሙላ (~ 300 µl)። በወባ ትንኞች መካከል ውድድርን ለማስወገድ እና በዲሽ 6 ትልቅ ዲያሜትሮች ውስጥ ሊሆኑ የሚችሉ ውጤቶች። ሴሜሜዲኒ, ኦስተርሙንዲገን, CH; ምስል 1A) ሙሉ ጨለማ በ 25 ± 2 ሴ.ሜ እና 65 ± 5% አንጻራዊ እርጥበት. እነዚህ ሙከራዎች ከ 5 እስከ 10 ጊዜ ተደግመዋል. ለአመጋገብ ከተጋለጡ በኋላ ትንኞች በ -20 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ እስከ ተጨማሪ ትንታኔ ድረስ ተወስደዋል.
የከብት ሽንት እና ዩሪያ በአስተናጋጁ እና በደም የምትጠባ ሴት አኖፌሌስ አራቢያኑስ ይፈልጉ። በአመጋገብ ሙከራ (A) ለሴት ትንኞች ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት ፣የተለያዩ የዩሪያ መጠን ፣ sucrose (10%) እና የተጣራ ውሃ (H2O) ። አስተናጋጅ ፈላጊ (ቢ) እና ምንም አይነት ደም የበለፀገ (ከሴት በላይ) የበለፀገ ምግብ ይቀርብላቸዋል። ሴቶች 72-ሰዓት ላም ሽንት 168-ሰዓት ላም ሽንት (B) ያነሰ 168-ሰዓት ያነሰ. የሽንት አጠቃላይ የናይትሮጅን ይዘት (± መደበኛ መዛባት) inset ውስጥ ይወከላል. አስተናጋጅ-ፈላጊ (D, F) እና ደም-የሚጠባ (E, G) ሴቶች መጠን-ጥገኛ ውስጥ ዩሪያ የሚወስዱትን. አማካኝ ሲተነፍሱ ጥራዞች (D, ቱዌይ የተለየ ሆሄያት) የተለያዩ ስሞች ጋር - ትንተና እያንዳንዱ ሌላ የተለየ ፊደል (ዲ, ቱዌይ) የተለየ ትንተና. ; p <0.05)።የስህተት አሞሌዎች የአማካይ (BE) መደበኛ ስህተትን ይወክላሉ።ቀጥታ ሰረዝ ያለው መስመር የሎግ-ሊነር ሪግሬሽን መስመርን (ኤፍ፣ጂ) ይወክላል።
የታሸጉ ምግቦችን ለመልቀቅ ትንኞች በግለሰብ ደረጃ ወደ 1.5 ሚሊ ሜትር የማይክሮ ሴንትሪፉጅ ቱቦዎች 230 µl የተጣራ ውሃ የያዙ እና ቲሹው ተበላሽቷል የሚጣል ተባይ እና ገመድ አልባ ሞተር (VWR International, Lund, SE), በመቀጠል ሴንትሪፍግሽን በ 10 krpm ለ 10 ደቂቃ (20 00 microp) ተላልፏል. ma-Aldrich) እና መምጠጥ (λ620) የሚወሰነው በስፔክትሮፎቶሜትር ላይ የተመሰረተ ማይክሮፕሌት አንባቢ (SPECTROStar® Nano፣ BMG Labtech፣ Ortenberg፣DE) nm) ነው።በአማራጭ፣ ትንኞቹ በ1 ሚሊር የተጣራ ውሃ፣ 900 µl 620 ሚ.ሜትሪክ ወደ ኩብ ፎት 2 ትንተና ተላልፈዋል። 00, Shimadzu, Kista, SE).የአመጋገብ አወሳሰድን ለመለካት አንድ መደበኛ ኩርባ በተከታታይ ማቅለጫ ከ 0.2 μl እስከ 2.4 µl 1 mg ml-1 xylene cyanide ለማምረት ተዘጋጅቷል. ከዚያም በእያንዳንዱ ትንኝ ውስጥ የሚገቡትን የምግብ መጠን ለማወቅ የታወቁ ማቅለሚያዎች ኦፕቲካል ጥግግት ጥቅም ላይ ይውላል.
የድምጽ መጠን መረጃ በአንድ-መንገድ የልዩነት ትንተና (ANOVA) ከዚያም Tukey's post hoc pairwise ንጽጽሮችን (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007) ተንትነዋል. መስመር regression ትንተናዎች ትኩረት ትኩረት-ጥገኛ ዩሪያ ቅበላ እና ደም አስተናጋጅ-የሚመለከቱ 8 ምላሽ ጋር ሲነጻጸር. 0 ለ Mac፣ GraphPad ሶፍትዌር፣ ሳንዲያጎ፣ ካሊፎርኒያ፣ አሜሪካ)።
ከእያንዳንዱ የእድሜ ክልል ውስጥ በግምት 20 µl የሽንት ናሙናዎች በChromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh፣ Sigma Aldrich) እና በቆርቆሮ ካፕሱሎች (8 ሚሜ × 5 ሚሜ) ውስጥ የታሰሩ ናቸው። ካፕሱሎች የ CHNSFlash/02ለር ማቃጠያ ክፍል ውስጥ ገብተዋል። , US) በአምራቹ ፕሮቶኮል መሰረት ትኩስ እና ያረጀ ሽንት ውስጥ ያለውን የናይትሮጅን ይዘት ለመወሰን አጠቃላይ ናይትሮጅን (g N l-1) እንደ መደበኛ ጥቅም ላይ በሚውሉት በሚታወቁ የዩሪያ ውህዶች ላይ ተመስርቷል።
አመጋገብ በአስተናጋጅ ፈላጊ እና ደም በሚጠባ ሴት ህልውና ላይ ያለውን ተጽእኖ ለመገምገም ትንኞች በግለሰብ ደረጃ በትላልቅ የፔትሪ ምግቦች (12 ሴ.ሜ ዲያሜትር እና 6 ሴ.ሜ ቁመት ሴሜዲኒ) በክዳን የተሸፈነ ጉድጓድ (ዲያሜትር 3 ሴንቲ ሜትር) ለአየር ማናፈሻ እና ለምግብ አቅርቦት ይዘጋጃሉ ። አመጋገቦች ከ 4 ዲፔ በኋላ በቀጥታ ይቀርባሉ እና 1% የተቀበረ ትኩስ እና አራት 1% የተቀጨ ትኩስ እና 1% የተቀጨ ዩክሬን ይጨመራሉ። sucrose and water.እያንዳንዱ አመጋገብ በጥርስ ህክምና ታምፖን (DAB Dental AB, Uplands Väsby, SE) በ 5 ሚሊር መርፌ (ቴርሞ ፊሸር ሳይንቲፊክ, ጎተንበርግ, ኤስኢ) ውስጥ ገብቷል, ቧንቧው ተወግዶ በፔትሪ ዲሽ ላይ (ስእል 1) ላይ ተቀምጧል. 1A. በቀን ሁለት ጊዜ ከሞተ በኋላ አመጋገብዎን ይቀይሩ. የመጨረሻው ትንኝ እስኪሞት ድረስ ትንኞች ተጥለዋል (n = 40 በአንድ ህክምና) በተለያዩ ምግቦች የሚመገቡ ትንኞች መትረፍ በካፕላን-ሜየር የመዳን ኩርባዎች እና የሎግ-ደረጃ ፈተናዎች በአመጋገብ (IBM SPSS ስታቲስቲክስ 24.0.0.0) መካከል ያለውን የህልውና ስርጭት ንፅፅርን በመጠቀም በስታቲስቲክስ ተንትነዋል።
በአቲሳኖ እና ሌሎች [17] ላይ የተመሠረተ ብጁ የወባ ትንኝ በራሪ ወፍጮ ከ 5 ሚሜ ውፍረት ካለው ግልጽ አክሬሊክስ ፓነሎች (10 ሴሜ ስፋት x 10 ሴሜ ርዝመት x 10 ሴ.ሜ ቁመት) ያለ የፊት እና የኋላ ፓነሎች (ምስል 3: ከላይ)። በጋዝ ክሮማቶግራፊ አምድ (0.25 ሚሜ ኤል) ከተሰቀለው ቋሚ ቱቦ የተሰራ የምሰሶ ስብሰባ ከጫፍ ክሮማቶግራፊ አምድ (0.25 ሚሜ ኤል) ጋር ተጣምሯል ymium ማግኔቶች በ9 ሴ.ሜ ልዩነት።ከዚያው ቁስ (6.5 ሴ.ሜ ኤል) የተሰራ አግድም ቱቦ ቀጥ ያለ ቱቦውን ለሁለት ከፍ በማድረግ የተቆራኘ ክንድ እና ትንሽ የአልሙኒየም ፎይል እንደ ብርሃን የሚቆራረጥ ምልክት የተሸከመ ክንድ ይፈጥራል።
24-ሰዓት የተራቡ ሴቶች ከላይ የተጠቀሰው አመጋገብ ለ 30 ደቂቃዎች ከመታገዳቸው በፊት ተሰጥቷቸዋል ። ሙሉ ለሙሉ የሚመገቡ ሴት ትንኞች ለ 2-3 ደቂቃዎች በበረዶ ላይ በግል በማደንዘዝ ከነፍሳት ፒን ጋር በንብ ሰም (Joel Svenssons Vaxfabrik AB ፣ Munka Ljungby ፣ SE) እና ከዚያ በአግድም የታሰሩ ናቸው ። logger, ከዚያም ተከማችቷል እና PC-Lab 2000 ™ ሶፍትዌር (v4.01; Velleman, Gavere, BE) በመጠቀም ይታያል. የበረራ ወፍጮ በአየር ንብረት ቁጥጥር ክፍል ውስጥ ተቀምጧል (12 ሰዓት: 12 ሰ, ብርሃን: ጨለማ, 25 ± 2 ° ሴ, 65 ± 5% RH).
የበረራ እንቅስቃሴን ንድፍ በዓይነ ሕሊና ለማየት የጠቅላላ ርቀት (ሜ) እና ተከታታይ የበረራ እንቅስቃሴዎች ብዛት በሰዓት በ 24 ሰአታት ውስጥ ይሰላል.በተጨማሪም, በእያንዳንዱ ሴት የሚጓዙት አማካኝ ርቀቶች በሕክምናዎች ላይ ተነጻጽረው እና በአንድ-መንገድ ANOVA እና Tukey's post hoc ትንተና (JMP Pro, v14.0.0), አማካይ የሕክምና ርቀት ግምት ውስጥ ሲገባ, SAS በገለልተኛ ርቀት ላይ ሲቆጠር. አማካይ የዙሮች ብዛት በ10 ደቂቃ ጭማሪዎች ይሰላል።
አመጋገብ An.arabiensis የመራቢያ አፈጻጸም ላይ ያለውን ውጤት ለመገምገም, ስድስት ሴቶች (4 dpe) ደም ከተሰበሰቡ በኋላ በቀጥታ Bugdorm ጓዳዎች (30 ሴሜ × 30 ሴሜ × 30 ሴሜ) ተላልፈዋል እና ከዚያ በላይ እንደተገለጸው 48 ሰዓታት ያህል የሙከራ አመጋገብ ቀረበ. አመጋገብ ከዚያም ተወግዷል እና መራባት ጽዋዎች (30 ሚሊ, Nolato Hertila, በየሦስተኛው ቀን 8 መቀየር 8 ሚሊ 20 ሚሊ ሊትር) ጋር ለሙከራ አመጋገብ. 4 ሰአታት.እያንዳንዱን የአመጋገብ ስርዓት ከ20-50 ጊዜ ይድገሙት.እንቁላሎች ተቆጥረው ለእያንዳንዱ የሙከራ መያዣ ተመዝግበዋል.የእንቁላል ናሙናዎች የእያንዳንዱን እንቁላል አማካይ መጠን እና ርዝመት ልዩነት ለመገምገም (n ≥ 200 በአመጋገብ) በ Dialux-20 ማይክሮስኮፕ (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, LeFC 2) የተገጠመላቸው ካሜራዎች (ኤርነስት ሊትዝ ዌትዝላር)Leica Microsystems Ltd., DE) ቀሪዎቹ እንቁላሎች በአየር ንብረት ቁጥጥር ስር በሚገኝ ክፍል ውስጥ ለ 24 ሰአታት በመደበኛ የአስተዳደግ ሁኔታ ውስጥ እንዲቆዩ ተደርገዋል, እና በቅርብ ጊዜ ብቅ ያሉ የ 1 ኛ ደረጃ እጮች (n ≥ 200 በአመጋገብ) ንዑስ ናሙና ከላይ እንደተገለፀው. , SAS ኢንስቲትዩት Inc.).
ከዘቡ ከብቶች፣ ከአርሲ ዘሮች ከተሰበሰቡ ናሙናዎች የተሰበሰቡ የጭንቅላት ቦታ ተለዋዋጭነት ከአዲስ (1 ሰአታት በኋላ ናሙና)፣ 24 ሰአት፣ 72 ሰአት እና 168 ሰአት ያረጀ ሽንት የተሰበሰበ ሲሆን ለምቾት ሲባል ጠዋት ላይ የሽንት ናሙናዎች የተሰበሰቡ ሲሆን ላሞቹ አሁንም ጎተራ ውስጥ እያሉ ነው። (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH እና Co., Minden, DE) በ 3 l ፖሊማሚድ ክዳን ያለው በቪኒየል ክሎራይድ ፕላስቲክ ከበሮዎች ውስጥ ከእያንዳንዱ የከብት ሽንት ናሙና ውስጥ የራስ ቦታ ተለዋዋጭነት በቀጥታ (ትኩስ) ወይም በክፍሉ የሙቀት መጠን ለ 24 ሰአታት, 72 ሰአት እና 168 ሰአታት ባለው የሙቀት መጠን ከተመረተ በኋላ, የእያንዳንዱ የሽንት ቡድን ተወካይ ነው.
የጭንቅላት ቦታን የሚለዋወጡትን ለመሰብሰብ የዝግ ሉፕ ሲስተም የነቃ የካርቦን-የተጣራ ጋዝ ዥረት (100 ml min-1) በፖሊማሚድ ቦርሳ ወደ ማስታወቂያ አምድ ለ 2.5 ሰአታት በዲያፍራም ቫክዩም ፓምፕ (KNF Neuberger, Freiburg, DE) ለማሰራጨት ጥቅም ላይ ይውላል. ከቁጥጥር ሆኖ, የጭንቅላት ቦታ ፖሊፕሎድ ክምችት ተከናውኗል. .5 ሴሜ x 3 ሚሜ መታወቂያ) 35 mg የፖራፓክ ኪ (50/80 ሜሽ፣ ዋተርስ አሶሺየትስ፣ ሚልፎርድ፣ ኤምኤ፣ ዩኤስ) በመስታወት ሱፍ መሰኪያዎች መካከል ያለው። ከመጠቀምዎ በፊት ዓምዱ በ 1 ml በተሻሻለው n-hexane (Merck፣ Darmstadt፣ DE) እና 1 ml pentane (99.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ.ሲ) በ1 ሚሊ ሜትር እንደገና በተሰራ n-hexane ታጥቧል። ከ 400 ሚሊ ሜትር የፔንታይን ጋር ተዳክሟል.የጭንቅላት ክምችቶች ተከማችተው ከዚያም በ -20 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለበለጠ ትንተና ጥቅም ላይ እስኪውሉ ድረስ ተከማችተዋል.
የአስተናጋጅ ፍለጋ እና ደም መብላት ባህሪ ምላሾች ከአዲስ ፣ 24-ሰ ፣ 72-ሰ ፣ እና 168-ሰ-እድሜ ያለው ሽንት የተሰበሰቡ የHeadspace ተለዋዋጭ ተዋጽኦዎች በቀጥታ የመስታወት ቱቦ ኦልፋክቶሜትር [18] በመጠቀም ከአረብኛ ትንኞች ለተለዋዋጭ ተዋጽኦዎች ተንትነዋል። 9.የመስታወት ቱቦ ኦልፋቶሜትር (80 ሴሜ × 9.5 ሴ.ሜ መታወቂያ) ከላይ በ 3 ± 1 lx ቀይ ብርሃን ተበራክቷል. ከሰል የተጣራ እና እርጥበት ያለው የአየር ፍሰት (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% አንጻራዊ እርጥበት) በ 30 ሴ.ሜ s-1 የአየር ባዮአሳይን በ 30 ሴ.ሜ s-1. አየር አልባ ስክሪን የፕላሚኒ ስክሪን ይፈጥራል. n ማከፋፈያ (4 ሴሜ × 1 ሴ.ሜ; L: D; DAB የጥርስ AB), በኦልፋቶሜትር የንፋስ ጫፍ ላይ ከ 5 ሴ.ሜ ጠመዝማዛ የተንጠለጠለ, በየ 5 ደቂቃው አነቃቂ ለውጦች. ለመተንተን, 10 μl ከእያንዳንዱ የጭንቅላት ቦታ ማውጣት, በ 1: 10 ተጨምሯል, እንደ ማነቃቂያ ጥቅም ላይ ይውላል. እኩል መጠን ያለው ፔንታይን ለመቆጣጠር ወይም ለነፍስ ወከፍ ጥቅም ላይ ይውላል. ሙከራው ከመጀመሩ ከ2-3 ሰአታት በፊት የተለቀቀው ኬዝ በ olfactometer የታችኛው ክፍል ላይ ተቀምጧል እና ትንኞቹ ለ 1 ደቂቃ ያህል እንዲቆዩ ተፈቅዶላቸዋል ፣ እና የቤቱ ቢራቢሮ ቫልቭ እንዲለቀቅ ተደረገ ። የሕክምናው ወይም የቁጥጥር መስህቡ ከ 5 ደቂቃዎች በኋላ ወደ ተለቀቀው የትንኞች መጠን ተተነተነ። 30 ጊዜ እና የአንድ ቀን ተፅእኖዎችን ለማስወገድ በእያንዳንዱ የሙከራ ቀን ተመሳሳይ የሕክምና እና የቁጥጥር ብዛት ተፈትኗል.ከአስተናጋጅ እና በደም-የተመገቡ Ans ምላሾችን ይፈልጉ.አረብኛ በተቃራኒ የጭንቅላት ስብስቦች በስመ ሎጂስቲክስ ሪግሬሽን በመጠቀም የተተነተኑ ሲሆን ከዚያም ጥንድ ጥምር ንጽጽሮችን ለጎዶ ሬሾዎች (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) ተካሂደዋል.
የአን የመራቢያ ምላሽ።ከአዲስ እና ያረጀ የላም ሽንት የጭንቅላት ስፔስ ተዋጽኦዎች በቡግዶርም ማስቀመጫዎች (30 ሴሜ × 30 ሴሜ × 30 ሴ.ሜ፣ ሜጋቪው ሳይንስ) ተተነተኑ።የፕላስቲክ ስኒዎች (30 ሚሊሆል፣ ኖላቶ ሄርቲላ) በ20 ሚሊ የተጣራ ውሃ ተሞልተው የሚፈልቅበትን ንጥረ ነገር አቅርበው በተቃራኒ ማእዘኖች ተቀምጠዋል። l ከእያንዳንዱ የጭንቅላት ቦታ በ 1: 10 ማቅለጫ ላይ እኩል መጠን ያለው ፔንታይን የመቆጣጠሪያውን ኩባያ ለማስተካከል ጥቅም ላይ ይውላል.በእያንዳንዱ ሙከራ መካከል የሕክምና እና የቁጥጥር ኩባያዎች ይለዋወጣሉ የአቀማመጥ ተፅእኖን ለመቆጣጠር. የቁጥጥር ኩባያ) / (ጠቅላላ የተቀመጡት እንቁላሎች) .እያንዳንዱ ሕክምና 8 ጊዜ ተደግሟል.
የጋዝ ክሮማቶግራፊክ እና የኤሌክትሮን አንቴና ጥለት ማወቂያ (ጂሲ-ኢአድ) የሴት አን.አራቢንሲስ ትንታኔ ቀደም ሲል እንደተገለፀው ተካሂዷል [20]።በአጭር ጊዜ ትኩስ የጭንቅላት ቦታ የሚተኑ ቀረጻዎች በ HP-5 አምድ (30 ሜትር × 0.0.25 ሚሜ የሆነ ፊልም) የተገጠመ Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) በመጠቀም ተለያይተዋል.እና እርጅና ሽንት.ሃይድሮጅን እንደ ተንቀሳቃሽ ደረጃ ጥቅም ላይ የዋለው አማካይ የመስመራዊ ፍሰት መጠን 45 ሴ.ሜ ነው.እያንዳንዱ ናሙና (2 μl) ለ 30 ሰከንድ ባልተከፋፈለ ሁነታ ለ 225 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ የመግቢያ ሙቀት. የ GC ምድጃ የሙቀት መጠን ከ 35 ° ሴ (3 ደቂቃ ማቆየት) ወደ 300 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ በ 10 ደቂቃ ውስጥ በ 10 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ተከፍሏል. 4 psi ናይትሮጅን ተጨምሮበት 1:1 ተከፍሏል Gerstel 3D/2 ዝቅተኛ የሞተ የድምጽ መጠን መስቀል (ገርስቴል, ሙልሃይም, DE) በእሳት ነበልባል ionization ማወቂያ እና EAD መካከል. የ GC የፍሳሽ capillary ለ EAD የጂኤስቴል ODP-2 ማስተላለፊያ መስመር በኩል, የ GC ምድጃ የሙቀት መጠን እና 5 × 0 ጋር ተቀላቅለዋል መስታወት ቱቦ ጋር, መሃል, hudified ነበር 5 × 0 ጋር, hudified ነበር የት. አየር (1.5 ሊት ደቂቃ-1) አንቴናውን ከቧንቧው መውጫ በ 0.5 ሴ.ሜ ርቀት ላይ ተቀምጧል.እያንዳንዱ ግለሰብ ትንኞች አንድ ድግግሞሽን ይይዛሉ, እና ለአስተናጋጅ ፈላጊ ትንኞች, በእያንዳንዱ ዕድሜ ላይ በሚገኙ የሽንት ናሙናዎች ላይ ቢያንስ ሦስት ድግግሞሽ ተካሂደዋል.
በGC-EAD ትንተና ውስጥ የአንቴና ምላሾችን ለማስገኘት የተቀናጀ ጂሲ እና የጅምላ ስፔክትሮሜትር (ጂሲ-ኤምኤስ፣ 6890 ጂሲ እና 5975 ኤምኤስ፣ አጊለንት ቴክኖሎጂዎች) በመጠቀም የባዮአክቲቭ ውህዶችን መለየት፣ በኤሌክትሮን ተጽእኖ ionization ሁነታ በ 70 eVMS. የ GC-5 ፉድ ሲ ዩአይአይኤይድ 70 eVMS. × 0.25 ሚሜ የውስጥ ዲያሜትር፣ 0.25 μm የፊልም ውፍረት) ሄሊየምን እንደ ሞባይል ደረጃ በመጠቀም በአማካይ የመስመራዊ ፍሰት መጠን 35 ሴ.ሜ s-1.A 2 μl ናሙና በተመሳሳይ የኢንጀክተር ቅንጅቶች እና የምድጃ ሙቀት በመጠቀም ልክ እንደ GC-EAD ትንተና ውህዶች ተለይተዋል በማቆያ ጊዜያቸው (Kovát ብጁ ቤተመፃህፍት) እና በንፅፅር። ውህዶች ትክክለኛ ደረጃዎችን (ተጨማሪ ፋይል 1: ሠንጠረዥ S2) በመርፌ ተረጋግጠዋል.ለቁጥር, heptyl acetate (10 ng, 99.8% የኬሚካል ንፅህና, አልድሪክ) እንደ ውጫዊ መስፈርት ተካቷል.
አስተናጋጅ-ፈላጊ እና ደም-የሚጠባ Ans.arabiensis ለመሳብ ትኩስ እና ያረጁ ሽንት ውስጥ bioactive ውህዶች ያካተተ ሠራሽ ሽታ ቅልቅል ያለውን ውጤታማነት መገምገም, ከላይ እንደተጠቀሰው ተመሳሳይ olfactometer እና ፕሮቶኮል በመጠቀም. ሠራሽ ድብልቆች ድብልቅ headspace ውስጥ ተለዋዋጭ headspace,4-hour,4-2 Hour,4-hour, 8-hour,4-hour,8-hour,4-hour,4-hour, 8-hour,4-hour, 8-hour,4-hour, 8-hour,8-hour, 8-hour,8-hour,4-hour, 8-hour,4-hour, 8-hour, 8-hour, 8-hour, 8-hour,8-hour,4-hour,4-hour,4-hour,8-hour,4-hour,4-hour,8-1-00. 8-ሰዓት ያረጀ ሽንት (ምስል 5D-G፤ ተጨማሪ ፋይል 1፡ ሠንጠረዥ S2)። ለመተንተን፣ 10 μl የ1፡100 ሙሉ ሰው ሰራሽ ድብልቅን ይጠቀሙ፣ አጠቃላይ የመልቀቂያ መጠን በግምት 140-2400 ng h-1። የተጠናቀቀው ድብልቅ ይወገዳል.ከአስተናጋጅ እና በደም ከሚመገቡት Ans.Arab vs synthetic and subtractive ድብልቅዎች በስመ ሎጅስቲክ ሪግሬሽን በመጠቀም የተተነተኑ ሲሆን ከዚያም ጥንድ ጥምር ንጽጽሮችን ለጎዶ ሬሾዎች (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
ከላይ እንደተገለፀው የተሰበሰበ ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት ለወባ ትንኞች እንደ አስተናጋጅ መኖሪያነት ምልክት የላም ሽንት እና ውሃ በ 3 ሊትር ባልዲ (100 ሚሊ ሊትር) ውስጥ ተጣብቆ በአስተናጋጅ ማጥመጃ ወጥመዶች ውስጥ ተጭኗል።(BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE).10 ወጥመዶች በግጦሽ 50 ሜትር, 400 ሜትር ከመንደር ማህበረሰብ (ሲላይ, ኢትዮጵያ, 5°53′24′N, 37°29′24′E) እና ምንም ከብቶች, በቋሚ መራቢያ ቦታዎች እና መንደሮች ላይ, አምስት ወጥመዶች ተሞቀዋል, አምስት ወጥመዶች ተሞቁ. ለሊት በድምሩ ለአምስት ምሽቶች ይመገባል።በተለያየ ዕድሜ ሽንት በተያዙ ወጥመዶች ውስጥ የተያዙ የወባ ትንኝ ቁጥሮች በሎጅስቲክ ሪግሬሽን ከቅድመ-ይሁንታ ሁለት ስርጭት (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) ጋር ተነጻጽረዋል.
በኦሮሚያ ክልል ማኪ ከተማ አቅራቢያ በወባ በሽታ የተያዘ መንደር (8° 11′ 08″ N፣ 38° 81′ 70″ E፣ ስእል 6 ሀ) ጥናቱ የተካሄደው ከነሐሴ አጋማሽ እስከ መስከረም አጋማሽ ባለው ጊዜ ውስጥ ከዓመታዊ የቤት ውስጥ ቅሪት ርጭት በፊት፣ ከረጅም ዝናብ ጊዜ ጋር። አምስት ጥንድ -0 ቤቶች በጥናት ላይ ይገኛሉ (ምስል 5)። 6 ሀ) ቤቶችን ለመምረጥ የተጠቀሙባቸው መመዘኛዎች፡- በቤት ውስጥ ምንም አይነት እንስሳት፣ የቤት ውስጥ ምግብ ማብሰል (ማገዶ ወይም ከሰል መሳል) አይፈቀድም (ቢያንስ በሙከራ ጊዜ) እና ቢያንስ ሁለት ነዋሪዎች ያሏቸው ቤቶች በፀረ-ነፍሳት ውስጥ ተኝተዋል።under the treaty mosquito net.የሥነ ምግባር ፈቃድ በተቋማዊ ጥናትና ምርምር ሥነምግባር ክለሳ ቦርድ (IRB/022/2016) የተፈጥሮ ሳይንስ ፋኩልቲ (ሲኤንኤስ-አይአርቢ) አዲስ አበባ ዩኒቨርሲቲ የዓለም ሕክምና ማኅበር የሄልሲንኪ መግለጫ ባወጣው መመሪያ መሠረት ከየአካባቢው አስተዳዳሪዎች ፈቃድ ማግኘት ተችሏል። ደረጃ.የሙከራ ዲዛይኑ 2 × 2 የላቲን ስኩዌር ንድፍ የተከተለ ሲሆን በመጀመሪያው ምሽት ሰው ሠራሽ ድብልቆች እና መቆጣጠሪያዎች የተጣመሩ ቤቶችን በመመደብ እና በሚቀጥለው የሙከራ ምሽት በቤቶች መካከል ይለዋወጣሉ.ይህ ሂደት አሥር ጊዜ ተደግሟል.በተጨማሪም በተመረጡ ቤቶች ውስጥ የወባ ትንኝ እንቅስቃሴን ለመገመት የሲዲሲ ወጥመዶች በሙከራው መጀመሪያ ላይ አምስት ተከታታይ ምሽቶች እንዲሰሩ ተወስኗል.
ስድስት ባዮአክቲቭ ውህዶችን የያዘው ሰው ሰራሽ ውህድ በሄፕታን (97.0% ሟሟ ጂሲ ግሬድ፣ ሲግማ አልድሪች) እና በ140 ng h-1 በጥጥ ዊክ ማሰራጫ ተጠቅሞ ተለቀቀ። (ሲዲሲ) የብርሃን ወጥመድ (ጆን ደብሊው ሆክ ኩባንያ፣ ጋይንስቪል፣ ኤፍኤል፣ ዩኤስ፣ ምስል 6A)። ወጥመዶቹ ከመሬት በላይ 0.8 - 1 ሜትር ከፍታ ላይ፣ በአልጋው እግር አጠገብ ተሰቅለው ነበር፣ እና አንድ በጎ ፈቃደኛ ባልታከመ የወባ ትንኝ መረብ ስር ተኝቶ ከ18፡00 እስከ 06፡30 ባለው ጊዜ ውስጥ ቀዶ ጥገና አድርጓል። በመቀጠልም የ polymerase chain reaction (PCR) ትንታኔን በመጠቀም በሥነ-ቅርጽ ተለይተው የሚታወቁትን ዝርያዎች A. gambiae sl. የኮምፕሌክስ አባላትን ለመለየት [23] ተደረገ። በመስክ ጥናት፣ የተጣመሩ ቤቶች ወጥመድ መጠመዳቸው በስመ ሎጂስቲክስ ተስማሚ ሞዴል በመጠቀም ተንትነዋል።0. SAS ተቋም Inc.).እዚህ፣ የ χ2 እና p-እሴቶቹን ከእድል ጥምርታ ሙከራ ሪፖርት እናደርጋለን።
ደህንነቱ የተጠበቀ መሆኑን ይገምግሙ።አራቢየንሲስ ሽንት፣ ዋና ናይትሮጅን ምንጩን፣ ዩሪያን በቀጥታ በመመገብ በ48 ሰአታት ውስጥ ከአስተዳደሩ በኋላ ለ 4 ቀናት በአስተናጋጅ ፈላጊ እና በደም የተደገፈ ሴት የመመገብ ሙከራዎች (ምስል 1 ሀ)። ሁለቱም አስተናጋጅ ፈላጊ እና ደም የሚጠጡ ሴቶች = ከማንኛውም ሌላ አመጋገብ ፣202 p.5 እና ኤፍ (5,299) = 56.00, p <0.0001, በቅደም ተከተል; ምስል 1B,C).ከዚህም በተጨማሪ አስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች በሽንት ውስጥ በ 72 ሰአታት ውስጥ ከሽንት ጋር ሲነፃፀሩ በ 168 ሰአታት (ምስል 1 ለ) ያነሰ ይበላሉ. ከ 10% sucrose (F (10,813) = 15.72, p <0.0001; ምስል 1D) ይለያል.ይህ በደም ከተመገቡ ሴቶች ምላሽ ጋር ሲነጻጸር, በተለምዶ ከውሃ የበለጠ ዩሪያን የያዙ ምግቦችን ይመገቡ ነበር, ምንም እንኳን ከ 10% ያነሰ ቢሆንም እንኳ ከ 10% sucrose (F) 50.551. 1.1E)።ከዚህም በተጨማሪ በሁለቱ የፊዚዮሎጂ ግዛቶች መካከል ሲነፃፀሩ ፍሌቦቶሚዝድ ሴቶች ዩሪያን ከአስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች ይልቅ በትንሹ በመምጠጥ እነዚህ ሴቶች ተመሳሳይ መጠን ያለው ዩሪያ በከፍተኛ መጠን ይወስዳሉ (F(1,953)= 78.82, p <0.0001;ምስል 1F, G) ዩሪያን ከያዘው የአመጋገብ ስርዓት መወሰድ በጣም ጥሩ እሴቶች ቢመስሉም (ምስል 1 ዲ, ኢ), በሁለቱም የፊዚዮሎጂ ግዛቶች ውስጥ ያሉ ሴቶች በሎግ-ሊኒየር ፋሽን (ምስል 1 ኤፍ, ጂ) ውስጥ በጠቅላላው የዩሪያ መጠን ውስጥ የሚወሰደውን የዩሪያ መጠን ማስተካከል ችለዋል..በተመሳሳይ ትንኞች በሽንት ውስጥ ያለው የናይትሮጅን መጠን በሚወስደው መጠን ስለሚንፀባረቅ (ምስል 1B, C እና B insets) የሚይዘውን የሽንት መጠን በመቆጣጠር ናይትሮጅን አወሳሰዳቸውን የሚቆጣጠሩ ይመስላሉ።
ሽንት እና ዩሪያ በአስተናጋጅ ፈላጊ እና ደም በሚጠባ ትንኝ ህይወት ላይ የሚያሳድሩትን ተፅእኖ ለመገምገም ሴቶች በአራቱም እድሜዎች (ትኩስ፣ 24 ሰአት፣ 72 ሰአት እና 168 ሰአታት በኋላ) ሽንት ይመገባሉ እና የተለያዩ የዩሪያ ውሀዎች እንዲሁም የተጣራ ውሃ እና የ 10% ሱክሮስ ህይወትን የመትረፍ ሁኔታ ላይ ከፍተኛ ውጤት እንዳለው ያሳያል። - ሴትን መፈለግ (ሽንት: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; ዩሪያ: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; ምስል 2B, C) እና በደም የተሞሉ ሴቶች (ሽንት: χ0, 0.0 = 93; 0.0 = 93). 2 = 137.9, df = 5, p <0.0001; ምስል 2D, E) በሁሉም ሙከራዎች ውስጥ ሴቶች የሽንት, ዩሪያ እና ውሃ አመጋገብን ይመገባሉ ከሴቶች ጋር ሲነፃፀሩ የሱክሮስ አመጋገብን ከሚመገቡት ሴቶች ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ደረጃ ዝቅተኛ ነው. .016) ዝቅተኛው የመዳን እድል ያለው (ምስል 2 ለ)።ከዚህም በተጨማሪ አስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች 135 ሚሜ ዩሪያን ይመገቡ ከውኃ መቆጣጠሪያዎች የበለጠ ረጅም ጊዜ ኖረዋል (p <0.04) (ምስል.2C) ከውሃ ጋር ሲነፃፀር፣ በአዲስ ሽንት የሚመገቡ ሴቶች እና የ24-ሰአት ሽንት ለረጅም ጊዜ ይተርፋሉ (p = 0.001 እና p = 0.012, በቅደም ተከተል; ምስል 2D), ሴቶች 72-ሰዓት ሽንት ከተመገቡት ይልቅ ረዘም ያለ ጊዜ በሕይወት የተረፉ ሴት አጭር ትኩስ ሽንት እና 24-ሰዓት ያረጁ ሽንት = 0.000 (ምስል 1) መ) 135 ሚ.ሜ ዩሪያን ሲመገቡ በደም የተሞሉ ሴቶች ከሌሎቹ የዩሪያ እና የውሃ ውሀዎች ሁሉ ረዘም ላለ ጊዜ ይተርፋሉ (p <0.013; ምስል 2E).
አስተናጋጅ እና ደም የምትጠጣ ሴት አኖፌሌስ አረቢኒስ በላም ሽንት እና ዩሪያ የምትመገበው አኖፌሌስ አረቢኒስ በባዮአሳይ (A) ውስጥ የሴት ትንኞች ትኩስ እና ያረጀ ላም ሽንት፣ የተለያዩ የዩሪያ ክምችት፣ sucrose (10%) እና የተጣራ ውሃ (H2O) ያቀፈ አመጋገብ ቀርቧል። ሁሉም ሴቶች በሽንት (B, D) እና ዩሪያ (ሲ, ኢ) እና መቆጣጠሪያዎች, ሱክሮስ እና ውሃ, ሞተዋል.
በ 24 ሰአታት ጊዜ ውስጥ በበረራ ወፍጮ ሙከራ ውስጥ የሚወሰነው አጠቃላይ ርቀት እና የዙሮች ብዛት በአስተናጋጅ ፈላጊ እና ደም በሚጠጡ ትንኞች መካከል ልዩነት ያለው ሲሆን ይህም በአጠቃላይ የበረራ እንቅስቃሴ አነስተኛ ነው (ምስል 3) ። ትኩስ እና ያረጀ ሽንት ወይም ሱክሮስ እና ውሃ የሚያቀርቡ አስተናጋጅ ፈላጊ ትንኞች ልዩ የበረራ ቅጦችን አሳይተዋል (ምስል 3) ፣ ሴቶች ፣ ትኩስ እና ትኩስ 1 ን ሲመገቡ ፣ 2 ሴቶች - ትኩስ እና ትኩስ 1 2 ናቸው ። በሽንት የሚመገቡ ትንኞች በሽንት የሚመገቡት ትንኞች በዋነኛነት የቀን ጅቦችን የሚያሳዩ ሲሆን ሱክሮስ ወይም የ72 ሰአት ሽንት የሚያቀርቡ ሴት ትንኞች በ24-ሰአት ጊዜ ውስጥ እንቅስቃሴን ያሳያሉ። በ 24 ሰዓታት ውስጥ ያለማቋረጥ የእንቅስቃሴ መቀነስ (ምስል 3)።
አዳኝ ፈላጊ ደም የምታጠባ ሴት አኖፌሌስ አረቢኒስ በላም ሽንት እና ዩሪያ የምትመግብ የበረራ አፈፃፀም በበረራ ወፍጮ ሙከራ ውስጥ ሴት ትንኞች ትኩስ እና ያረጀ ላም ሽንት ፣የተለያዩ የዩሪያ ክምችት ፣ sucrose (10%) እና የተጣራ ውሃ (H2O) ከአግድም ፣ ከቀኝ የሚሽከረከር (የቀኝ እጆችን ይመልከቱ) ። በ 24 ሰአታት ጊዜ ውስጥ ለእያንዳንዱ አመጋገብ በሰዓት አጠቃላይ ርቀት እና የበረራዎች ብዛት ተመዝግቧል (ጨለማ: ግራጫ; ብርሃን: ነጭ) አማካይ ርቀት እና አማካይ የድብደባ ብዛት በሰርከዲያን እንቅስቃሴ ግራፍ በስተቀኝ ይታያል የስህተት አሞሌዎች የአማካይ መደበኛ ስህተትን ያመለክታሉ ። ስታቲስቲካዊ ትንታኔ ጽሑፍ ይመልከቱ
በአጠቃላይ የበረራ አስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች አጠቃላይ የበረራ እንቅስቃሴ በ24 ሰአታት ውስጥ ካለው የበረራ ርቀት ጋር ተመሳሳይነት ያለው አሰራርን ተከትሏል።በአማካኝ የበረራ ርቀት ላይ በአመጋገብ አመጋገብ (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001) እና አስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች የ 72 ሰአታት ሽንት ወስደዋል) እና ሁሉም ከ 0 በላይ ረዣዥም ርቀቶች (p) ኲቶዎች ከትኩስ (p = 0.022) እና 24-ሰ-እድሜ ያለው ሽንት (p = 0.022) - የተመገቡ ትንኞች ረዘም ያለ ጊዜ በረሩ። በሽንት አመጋገብ ከተገለጸው የበረራ እንቅስቃሴ ሁኔታ በተቃራኒ ዩሪያ የሚመገቡ አስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች በ 24-ሰዓት ጊዜ ውስጥ የማያቋርጥ የበረራ እንቅስቃሴ አሳይተዋል ፣ የጨለማው አስተናጋጅ ፣ በሁለተኛው ግማሽ ጊዜ ውስጥ ከፍተኛ ደረጃ ላይ ደርሷል። d ዩሪያ በአማካኝ የበረራ ርቀት በከፍተኛ ደረጃ ጨምሯል።
ደም የሚጠጡ ትንኞች አጠቃላይ የበረራ እንቅስቃሴ የተረጋጋ እና በሁሉም ምግቦች ውስጥ ከ24 ሰአታት በላይ የሚቆይ ሲሆን በጨለማው ክፍለ ጊዜ ሁለተኛ አጋማሽ ላይ የሽንት እንቅስቃሴ ጨምሯል በውሃ ላይ ለሚመገቡ ሴቶች እንዲሁም ትኩስ እና 24 ሰአት የሆናቸው ሴቶች (ምስል 3) የሽንት እንቅስቃሴ በደም-የተመገቡ ሴቶች ውስጥ አማካይ የበረራ ርቀት ላይ ተጽዕኖ ያሳደረ (F(5, 4.0) (ምስል 3) F (5, 138) = 1.36, p = 0.24) . ከሌሎች የሽንት እና ቁጥጥር አመጋገብ ጋር (ትኩስ, p = 0.0091; 72 ሰዓቶች, p = 0.0022; 168 ሰዓቶች, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; dH00.3, p).
የሽንት እና ዩሪያ አመጋገብ በመራቢያ መለኪያዎች ላይ የሚያሳድረው ተጽእኖ በእንቁላል ባዮአሳይስ (ምስል 4A) ላይ ተገምግሟል እና በእያንዳንዱ ሴት በተጣሉ እንቁላሎች ብዛት ፣የእንቁላል መጠን እና አዲስ የተፈለፈሉ የመጀመሪያ እጭዎች ብዛት ተመርምሯል ።የተቀመጡት እንቁላል ብዛት።በሽንት የሚመገቡ የአረብ ሴቶች 0 = በአመጋገብ ይለያያሉ (F(5,223))። ሴቶች የ 24 ሰአታት ሽንትን ይመገባሉ ፣ የደም ምግብ ከሌሎች የሽንት አመጋገቦች ከሚመገቡት ሴቶች የበለጠ እንቁላል ይጥላል እና ከተመገቡት sucrose ጋር ተመሳሳይ ናቸው (ምስል 4 ለ) እንዲሁም በሽንት በሚመገቡ ሴቶች የተቀመጡት የእንቁላል መጠን በአመጋገብ ይለያያል (F(5, 209) = 12.85, p <100s ሴት ትልቅ እና ሱክሮስ 02. እንቁላል ከውሃ ከሚመገቡ ሴቶች ይልቅ፣ በ 168 ሰአታት ሽንት የሚመገቡት የሴቶች እንቁላሎች በጣም ያነሱ ናቸው (ምስል 4C) በተጨማሪም የሽንት አመጋገብ በእጭ መጠን ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ ያሳድራል (F (5, 187) = 7.86, p <0.0001), ከ 2-4ሆድ እንቁላል ከሚወጡት እንቁላሎች በጣም ትልቅ የሆነ ትልቅ እጭ እና ከ 2-4ሆድ እንቁላል ከሚወጡት እንቁላሎች እና 2-4-ur lavaeur lavae. በውሃ የተሞሉ እና 168 ሰአታት በሽንት የሚመገቡ ሴቶች (ምስል 4D).
የመራቢያ ተግባር የሴት አኖፌሌስ አረቢኒስ በላም ሽንት እና ዩሪያ መመገብ በደም የተመገቡ የሴቶች ትንኞች ትኩስ እና ያረጀ ላም ሽንት ፣ የተለያዩ የዩሪያ ፣ sucrose (10%) እና የተጣራ ውሃ (H2O) ለ 48 ሰዓታት ያህል ባዮአሳይስ ውስጥ ከማስገባት በፊት እና እንቁላልን ከመግዛቱ በፊት 4 ሰአታት (Egg መጠን)። , F) እና እጮች መጠን (D, G) በቀረበው አመጋገብ (የላም ሽንት: BD; ዩሪያ: EG) በከፍተኛ ሁኔታ ተጎድተዋል. ለእያንዳንዱ ግቤት የተለያዩ የፊደል ስሞችን በመጠቀም የሚለኩ መንገዶች እርስ በርሳቸው በእጅጉ ይለያያሉ (አንድ-መንገድ ANOVA የቱኪ የድህረ-ሆክ ትንታኔን በመጠቀም, p <0.05) የስህተት አሞሌዎች አማካይ አማካይ ስህተትን ያመለክታሉ.
የሽንት ዋና ናይትሮጅንን ንጥረ ነገር እንደመሆኑ መጠን ዩሪያ በደም ለሚመገቡ ሴቶች እንደ አመጋገብ ሲሰጥ በሁሉም ጥናቶች የመራቢያ መለኪያዎችን በእጅጉ ይነካል ።ሴቶች ዩሪያ የሚመገቡት የእንቁላል ብዛት ፣ከደም ምግብ በኋላ ፣በዩሪያ ትኩረት (F(11, 360) = 4.69; p <0.0001) ፣ሴቶች በ 3 m እና 3 m መካከል ባለው መጠን ይመገባሉ። (ምስል 4E) በ 134 µM ወይም ከዚያ በላይ በሆነ የዩሪያ መጠን የሚመገቡ ሴቶች በውሃ ላይ ከሚመገቡት ሴቶች የበለጠ ትላልቅ እንቁላሎች ይጥላሉ (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001; ስእል 4F), እና የእጭ መጠን, ምንም እንኳን በእናቶች ውስጥ ተመሳሳይ የዩሪያ ክምችት ቢጎዳም (33.0.0) ተለዋዋጭ (ምስል 4G).
በአጠቃላይ አስተናጋጅ ፈላጊ የከብት ሽንት ጭንቅላት ላይ የሚንፀባረቁ ንጥረ ነገሮችን ይስባል።በመስታወት ቱቦ ኦልፋቶሜትር ውስጥ የተገመገመው አረብያንሲስ በሽንት ዕድሜ (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; ስእል 5B) የድህረ-5B ትንታኔዎች እንደሚያሳየው የ 2 ሰዓቶች ከፍተኛ ጥራት ያለው የሽንት ህክምና እና የ 2 ሰዓታት ልዩነት ከፍተኛ ጥራት ያለው የሽንት መጠን 4 ሰዓት ሲወዳደር. = 0.0060, 168 ሰአታት: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), ትኩስ ሽንት ሽታ በስተቀር (p = 0.13; ምስል 5B) .ምንም እንኳን ደም የሚጠጡ ትንኞች የሽንት ሽታ ያላቸው አጠቃላይ መስህብ ከፍተኛ ልዩነት ባይኖረውም = ሐ = 2, 5, 6 ስእል = C = 7 ስእል = 80 ስእል = C = 7 ስእል 80. s ከ 72 ሰአታት እድሜ ያለው ሽንት ከመቆጣጠሪያዎች ጋር ሲነጻጸር (p = 0.0066; ምስል 5C) ጋር ሲነፃፀር ለጭንቅላት ቦታ ተለዋዋጭ ምርቶች በጣም ማራኪ ሆኖ ተገኝቷል.
አስተናጋጅ እና በደም የተመገቡ አኖፌሌስ arabianus ፍለጋ ውስጥ የተፈጥሮ እና ሰው ሠራሽ ላም ሽንት ጠረን የባሕርይ ምላሾች. የመስታወት ቱቦ ኦልፋቶሜትር (A) Schematic - የ headspace የሚተኑ ተዋጽኦዎች ከ ትኩስ እና ያረጁ ላም ሽንት ወደ ማስተናገጃ (B) እና ደም-የሚጠባ (ሐ) ትንኞች ከ 2 ትንኞች ፈልግ, ጌታን ፈልግ 4 የትኩስ አታክልት ዓይነት. ur (E)፣ 72-ሰዓት (ኤፍ)፣ እና 168-ሰዓት (ጂ) ያረጀ ላም ሽንት ይታያሉ።የኤሌክትሮን አንቴና ማወቂያ (EAD) ዱካዎች የቮልቴጅ ለውጦች በጭንቅላት ቦታ ላይ ባዮአክቲቭ ውህዶች ላይ ምላሽ ሲሰጡ ከጋዝ ክሮማቶግራፍ ወጥተው በእሳት ነበልባል ionization ፈላጊ (FID) ተገኝቷል።የሚዛን አሞሌው የመልቀቂያ ጊዜን ያሳያል (Vglitus)። ከባዮሎጂያዊ ንቁ ውህዶች መካከል ይታያሉ ። አንድ ነጠላ ኮከብ (*) የማያቋርጥ ዝቅተኛ ስፋት ምላሽ ያሳያል ። ድርብ ኮከቦች (**) የማይደገሙ ምላሾችን ያመለክታሉ ። አስተናጋጁን ይፈልጉ (H) እና ደም የሚጠባው (I) An.arabiensis ትኩስ እና ያረጁ ላም ሽንቶች የተለያዩ ስሞችን ይማርካሉ ፣ እያንዳንዱ ከሌላው የተለየ ሽታ ያለው ሽታ አለው ። ANOVA የቱኪ የድህረ-ሆክ ትንታኔን በመጠቀም;p <0.05)።የስህተት አሞሌዎች የመለኪያውን መደበኛ ስህተት ይወክላሉ
ሴት Ann.arabiensis፣ 72 ሰአት እና 120 ሰአት ከደም ምግብ በኋላ፣ በመራባት ወቅት፣ ከፔንታይን ቁጥጥሮች (χ2 = 3.07፣ p> 0.05፣ ተጨማሪ ፋይል 1፡ ምስል S1) ከ ትኩስ እና ያረጀ ላም ሽንት ለሚመነጩ የጭንቅላት ቦታ ምንም አይነት ምርጫ አልታየም።
ለሴት Ann.arabiensis ፣ GC-EAD እና GC-MS ትንታኔዎች ስምንት ፣ ስድስት ፣ ሶስት እና ሶስት ባዮአክቲቭ ውህዶችን ለይተው ያውቃሉ (ምስል 5D-G) ምንም እንኳን የኤሌክትሮፊዚዮሎጂያዊ ምላሾችን ያስከተሏቸው ውህዶች ብዛት ላይ ልዩነቶች ቢታዩም ፣ አብዛኛዎቹ እነዚህ ውህዶች በእያንዳንዱ የጭንቅላት ቦታ ላይ ተለዋዋጭነት ባለው ትኩስ እና እርጅና ከሽንት የተሰበሰቡ ናቸው ። ስለሆነም አንቴናውን ከእያንዳንዱ የአካል ብቃት እንቅስቃሴ የሚወጣ ምላሽ ብቻ ነበር ። ተጨማሪ ትንታኔዎች ውስጥ ተካትቷል.
በዋና ቦታ ስብስብ ውስጥ ያለው አጠቃላይ ተለዋዋጭ የባዮአክቲቭ ውህዶች መጠን በአዲስ ሽንት ውስጥ ከ29 µg h-1 ወደ 242 μg h-1 በ 168-ሰዓት ያረጀ ሽንት ጨምሯል፣በዋነኛነት በ p-cresol እና m-formaldehyde Phenol እና በ phenol እና በ phenol ይጨምራል። በ chromatogram (ምስል 5D) -ጂ ግራ ፓነል ውስጥ ከሚታየው የሲግናል መጠን መቀነስ (ብዛት) መቀነስ እና ለእነዚህ ውህዶች የፊዚዮሎጂ ምላሾች ጋር የተቆራኘ የሽንት ዕድሜ (ምስል 5D-G የቀኝ ፓነል)።
በአጠቃላይ፣ ሰው ሰራሽ ድብልቅው በተለዋዋጭ ትኩስ እና ያረጁ የሽንት ክፍሎች ውስጥ ተለይተው የሚታወቁ የባዮአክቲቭ ውህዶች ተመሳሳይ የተፈጥሮ ሬሾ ነበረው (ምስል 5D-G) እና አስተናጋጅ ፍለጋ ላይ ጉልህ የሆነ ይግባኝ የሚጠይቅ አይመስልም (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; ምስል. 5H, 4) ወይም ደም - 9. = 0.30; ስእል 5I).ሆኖም በድህረ-ሁለት ጥንድ ህክምናዎች መካከል የተደረጉ ንጽጽሮች እንደሚያሳየው አስተናጋጅ ፈላጊ ትንኞች ከፔንታይን መቆጣጠሪያዎች ጋር ሲነፃፀሩ በ 24 ሰአት እድሜ ላለው የሽንት ውህደት በጣም ማራኪ ናቸው (p = 0.0086; ምስል 5H).
በ 24 ሰአታት እድሜ ያለው ሽንት በተቀነባበረ ድብልቆች ውስጥ የነጠላ አካላትን ሚና ለመገምገም በ Y-tube assay ውስጥ ስድስት የተቀናጁ ድብልቆች በተሟሉ ድብልቅ ነገሮች ላይ ተገምግመዋል ፣ በዚህ ውስጥ የግለሰብ ውህዶች ተወግደዋል ። ለአስተናጋጅ ፈላጊ ትንኞች ፣ የነጠላ ውህዶችን ከተሟላ ድብልቅ መቀነስ በባህሪ ምላሾች ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ አሳድሯል (χ2 = 19.60 ፣ ስእል 2) = 19.63 ፣ ስእል = 19.63 ፣ ተጨማሪ ምስል ), ሁሉም የተቀናጁ ውህዶች ሙሉ በሙሉ ከተደባለቁ ያነሱ ነበሩ ። በአንፃሩ ፣ የነጠላ ውህዶችን ሙሉ በሙሉ ከተዋሃዱ ድብልቅ ውስጥ ማስወገድ ደም በሚጠጡ ትንኞች (χ2 = 11.38 ፣ df = 6 ፣ p = 0.077) ፣ ከዲካን በስተቀር ፣ ይህም ከተጠናቀቀው ጋር ሲነፃፀር ዝቅተኛ ደረጃ: 0 ፋይል = 2)።
በኢትዮጵያ ወባ በሽታ ባለባት መንደር የ24 ሰአት የላም ሽንት ሰው ሰራሽ ድብልቅ በመስክ ላይ ያሉ ትንኞችን ለመሳብ ያለው ውጤታማነት ለአስር ሌሊት ተገምግሟል። were Culex spp.(ተጨማሪ ፋይል 1፡ ሠንጠረዥ S1)። የጋምቢያን ዝርያ ስብስብ ብቸኛ አባል የሆነው አኖፌሌስ አራቢኒስ በ PCR ትንተና የሚታወቅ ነው።በአማካኝ 320 ትንኞች በአንድ ሌሊት ተይዘዋል፣በዚህም ጊዜ ወጥመዶች በሰው ሰራሽ ድብልቅ ማጥመጃ ትንኞች ከተያዙ የበለጠ ትንኞች ከተጣመሩ ወጥመዶች ውጭ (χ10,0.0) n-baited ወጥመዶች በእያንዳንዱ አምስት የቁጥጥር ምሽቶች ላይ በሙከራው መጀመሪያ, መካከለኛ እና መጨረሻ ላይ ተቀምጠዋል.በእያንዳንዱ ጥንድ ወጥመዶች ውስጥ ተመሳሳይ ቁጥር ያላቸው ትንኞች ተይዘዋል, ይህም በቤቶች መካከል ምንም ዓይነት አድልዎ እንደሌለ የሚያመለክት ነው (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p> 0.05) እና ከቁጥጥር ጊዜ ጋር በተገናኘ ቁጥር ከቁጥጥር ውጭ የሆነ ህዝብ የለም. የቲክ ድብልቅ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል፡ አስተናጋጅ መፈለግ (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), የቅርብ ጊዜ ደም መመገብ (χ2 (0, 650) = 32.2, p <0.0001) እና እርግዝና (χ2 (0, 228) = 6.27, p23;ተጨማሪ ፋይል 1፡ ሠንጠረዥ S1) ይህ ደግሞ በተያዙት ትንኞች ጠቅላላ ቁጥር ላይ ተንጸባርቋል፡ አስተናጋጅ መፈለግ > ደም መምጠጥ > እርጉዝ > ከፊል ነፍሰ ጡር > ወንድ።
የ24 ሰአት ሰው ሰራሽ የላም ሽንት ሽታ ያለው ውጤታማነት የመስክ ግምገማ በደቡብ ማእከላዊ ኢትዮጵያ (ካርታ)፣ ማኪ ከተማ አቅራቢያ (ማስገባት)፣ የበሽታ መቆጣጠሪያ ማእከል (ሲዲሲ) የብርሃን ወጥመድን (በስተቀኝ) በተጣመሩ ቤቶች ውስጥ፣ በላቲን ካሬ ዲዛይን (የአየር ላይ ምስል) (Adorsklested) (አዶርፕስቴክት ኦይዲሲሲሲ) ነገር ግን Anopheles farroes (C) አይደለም, በተለየ መልኩ, ፊዚዮሎጂያዊ ሁኔታ ላይ የተመሰረተ ተጽእኖ. በተጨማሪም, እነዚህ ወጥመዶች የአስተናጋጁ Culex ትንኞች በከፍተኛ ሁኔታ ጨምረዋል.(D) ከቁጥጥር ጋር ሲነጻጸር.በግራ በኩል ያሉት አሞሌዎች በአማካይ ሽታ ያለው ማጥመጃ (አረንጓዴ) ጥንድ ጥንድ ሆነው የተያዙ ትንኞች (አረንጓዴ) እና ቁጥጥር (ክፍት ባር) ወጥመዶችን ያመለክታሉ. ps (ክፍት N = 5)) ኮከቦች እስታቲስቲካዊ ጠቀሜታ ደረጃዎችን ያመለክታሉ (*p = 0.01 እና *** p <0.0001)
ሦስቱ ዝርያዎች ሰው ሠራሽ ድብልቆችን በያዙ ወጥመዶች ውስጥ በተለያየ መንገድ ተይዘዋል. አስተናጋጅ መፈለግ (χ2 (1, 1345) = 71.7, p <0.0001), ደም መመገብ (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) እና እርግዝና (χ2 (1, 1345) = 1, 180.0. nsis በሰው ሰራሽ ውህድ በሚለቀቀው ወጥመድ ውስጥ ተይዞ ነበር (ምስል 6 ለ) ፣ የኤን መጠን ግን አይለይም ። በተለያዩ የፊዚዮሎጂ ግዛቶች ውስጥ ያሉ ፋሮኤንሲስ ተገኝተዋል (ምስል 6 ሐ)። መ) ከቁጥጥር ወጥመዶች ጋር ሲነጻጸር.
በኢትዮጵያ ውስጥ ከሚገኙት የመራቢያ ቦታዎች እና የገጠር ማህበረሰቦች መካከል ሊገኙ ከሚችሉ አስተናጋጆች ውጭ የሚገኙ አስተናጋጅ የማጥመጃ ወጥመዶች የወባ ትንኞች የላም ሽንት ሽታን እንደ ማስተናገጃ ቤት ይጠቀሙ እንደሆነ ለመገምገም ጥቅም ላይ ውለው ነበር። ኤድ እና ተይዟል, ምንም እንኳን በትንሽ ቁጥሮች, ከሽንት እድሜ ነጻ (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; ተጨማሪ ፋይል 1: ምስል S3).በተቃራኒው የውሃ መቆጣጠሪያዎች በከፍተኛ ሙቀት ውስጥ የወባ ትንኞችን አልያዙም (ተጨማሪ ፋይል 1: ምስል S3).
የወባ ትንኞች የላም ሽንትን በማካካሻ በመመገብ ናይትሮጅን የያዙ ውህዶችን ያገኛሉ እና ያሰራጫሉ (ማለትም ኩሬዎች) ከሌሎች ነፍሳት ጋር ተመሳሳይነት ያላቸውን የህይወት ታሪክ ባህሪያትን ለማሻሻል [2, 4, 24, 25, 26]። የወባ ትንኞች በሽንት ውስጥ የሚገኘውን የናይትሮጅን ውህዶችን በሽንት ውስጥ ያለውን የናይትሮጅን ውህዶች አወሳሰድ መቆጣጠር ይችላሉ [15፣16] የመጀመሪያ gonadotropic ዑደቱ። ስለዚህ የሽንት መቀላቀል እንደ የተመጣጠነ ምግብ እጥረት ላለባቸው አዋቂዎች ለወባ ተላላፊ በሽታዎች ጠቃሚ የሆነ የአመጋገብ ሚና ይጫወታል። የ ctor አስተዳደር ፕሮግራሞች.


የልጥፍ ሰዓት፡- ጁን-15-2022