የንጥረ ነገር ማግኛ እና ስርጭት የነፍሳት ፍለጋ እና የህይወት ታሪክ ባህሪያትን ያዋህዳል። በተለያዩ የህይወት ደረጃዎች ላይ ባሉ የተወሰኑ ንጥረ ነገሮች ላይ ያሉ ጉድለቶችን ለማካካስ፣ ነፍሳት እነዚህን ንጥረ ነገሮች በተጨማሪ አመጋገብ በኩል ማግኘት ይችላሉ፣ ለምሳሌ፣ ኩሬ በመባል በሚታወቀው ሂደት ውስጥ የአከርካሪ አጥንት ፈሳሾችን በመመገብ። ትንኝ አኖፌልስ አራቢያኒ የተመጣጠነ ምግብ እጥረት ያለበት ይመስላል፣ ስለዚህ ለሜታቦሊዝም እና ለመራባት ንጥረ ነገሮችን ይፈልጋል። የዚህ ጥናት ዓላማ አን. አራቢያንሲስ በከብት ሽንት ላይ ለንጥረ ነገር ማግኛ የሚደረግ መነቃቃት የህይወት ታሪክ ባህሪያትን ያሻሽላል ወይ የሚለውን መገምገም ነበር።
ደህንነቱ የተጠበቀ መሆኑን ያረጋግጡ።arabiensis ትኩስ፣ የ24 ሰዓት፣ የ72 ሰዓት እና የ168 ሰዓት የላም ሽንት ሽታ መሳቡን አረጋግጡ፣ እና አስተናጋጅ የሚፈልጉ እና ደም የሚመገቡ ሴቶች (ከደም በኋላ 48 ሰዓት ምግብ) በY-tube olfactometer ውስጥ ተለኩ፣ እና እርጉዝ ሴቶች ለመውለድ ምርመራ ተገምግመዋል። ከዚያም በአራት የዕድሜ ክልሎች ውስጥ ባሉ የላም ሽንት ውስጥ ባዮአክቲቭ ውህዶችን ለመለየት የተቀናጀ የኬሚካል እና የኤሌክትሮፊዚዮሎጂ ትንተና ጥቅም ላይ ውሏል። የባዮአክቲቭ ውህዶች ሰው ሰራሽ ድብልቅ በY-tube እና በመስክ ሙከራዎች ተገምግሟል። የላም ሽንት እና ዋናውን ናይትሮጅን የያዘውን ውህድ ዩሪያን ለማላብ ቬክተሮች እንደ ተጨማሪ አመጋገብ ለመመርመር፣ የአመጋገብ መለኪያዎች እና የህይወት ታሪክ ባህሪያት ተለክተዋል። የሴት ትንኞች መጠን እና የላም ሽንት እና የዩሪያ መጠን ተገምግመዋል። ከተመገቡ በኋላ፣ ሴቶች ለመትረፍ፣ ለማሰር እና ለመራባት ተገምግመዋል።
የአስተናጋጁን ደም እና አመጋገብ ይፈልጉ። በላቦራቶሪ እና በመስክ ጥናቶች፣ አረቦች ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት ተፈጥሯዊ እና ሰው ሰራሽ ሽታ ይሳባሉ። እርጉዝ ሴቶች በመራቢያ ቦታዎች ላይ ለሚከሰቱ የላም ሽንት ምላሾች ግድየለሾች ነበሩ። አስተናጋጅ የሚፈልጉ እና ደም የሚጠቡ ሴቶች የላም ሽንት እና ዩሪያን በንቃት ይወስዳሉ እና እነዚህን ሀብቶች በህይወት ታሪክ ልውውጥ መሠረት ለመብረር፣ ለመትረፍ ወይም ለመራባት እንደ ፊዚዮሎጂያዊ ሁኔታ ተግባር ይመድባሉ።
አኖፌልስ አራቢኒስ የላም ሽንት ማግኘት እና ስርጭት የህይወት ታሪክን ለማሻሻል ይረዳል። የላም ሽንት ተጨማሪ መመገብ የቬክተር አቅምን በቀጥታ ዕለታዊ ህልውና እና የቬክተር ጥግግት በመጨመር እና በተዘዋዋሪ የበረራ እንቅስቃሴን በመቀየር ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል ስለዚህም በወደፊት ሞዴሎች ውስጥ ግምት ውስጥ መግባት አለበት።
የንጥረ ነገር ማግኛ እና ስርጭት የነፍሳት ፍለጋ እና የህይወት ታሪክ ባህሪያትን ያዋህዳል [1,2,3]። ነፍሳት ምግብን መምረጥ እና ማግኘት እና በምግብ አቅርቦት እና በንጥረ ነገር መስፈርቶች ላይ በመመስረት ማካካሻ መመገብ ይችላሉ [1, 3]። የንጥረ ነገሮች ስርጭት በህይወት ታሪክ ሂደት ላይ የተመሰረተ ሲሆን በተለያዩ የነፍሳት የህይወት ደረጃዎች ውስጥ ለምግብ ጥራት እና ብዛት የተለያዩ መስፈርቶችን ሊያስከትል ይችላል [1, 2]። በተወሰኑ ንጥረ ነገሮች ላይ ያሉ ጉድለቶችን ለማካካስ ነፍሳት እነዚህን ንጥረ ነገሮች እንደ ጭቃ ላይ፣ የተለያዩ የአከርካሪ አጥንቶች ፍሳሽ እና ፈሳሽ እና ካርሪዮን ባሉ ተጨማሪ ምግቦች ማግኘት ይችላሉ፣ ይህ ሂደት ኩሬዎች በመባል ይታወቃል [2]። ምንም እንኳን የተለያዩ የቢራቢሮ እና የእሳት እራት ዝርያዎች በዋናነት ቢገለጹም፣ የውሃ ማጠጫ ቀዳዳዎች በሌሎች የነፍሳት ቅደም ተከተሎችም ይከሰታሉ፣ እና ወደ እነዚህ አይነት ሀብቶች መሳብ እና መመገብ በጤና እና በሌሎች የህይወት ታሪክ ባህሪያት ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ ሊያሳድር ይችላል [2, 4, 5, 6],7]። የወባ ትንኝ አኖፌልስ ጋምቢያe sensu lato (sl) እንደ 'ያልተመገበ' አዋቂ ሆኖ ይወጣል [8]፣ ስለዚህ ውሃ ማጠጣት በህይወት ታሪክ ባህሪያቱ ውስጥ ትልቅ ሚና ሊጫወት ይችላል፣ ነገር ግን ይህ ባህሪ አለው እስካሁን ችላ ተብሏል። በዚህ አስፈላጊ ተሽከርካሪ ውስጥ የንጥረ ነገር ቅበላን ለመጨመር እንደ ዘዴ መነቃቃትን መጠቀም ትኩረትን የሚሻ ነው ምክንያቱም ይህ አስፈላጊ የሆኑ ኤፒዲሚዮሎጂያዊ ውጤቶችን ሊያስከትል ይችላል።
በአዋቂ ሴት አኖፌልስ ትንኞች ውስጥ የናይትሮጅን መጠን የተገደበ የሚሆነው ከእጭነት ደረጃ የሚወሰዱ ዝቅተኛ የካሎሪ ክምችት እና የደም ምግብ ውጤታማ ባልሆነ አጠቃቀም ምክንያት ነው [9]። ሴት አን.ጋምቢያe ኤስኤል በተለምዶ ለዚህ ተጨማሪ የደም ምግቦችን በማሟያነት ይካሳል [10፣ 11]፣ በዚህም ምክንያት ብዙ ሰዎችን ለበሽታው የመጋለጥ አደጋ ላይ ይጥላል እና ትንኞች ለአዳኝ የመጋለጥ አደጋ ላይ ይጥላሉ። በአማራጭ፣ ትንኞች በሌሎች ነፍሳት እንደሚታየው መላመድን እና የበረራ እንቅስቃሴን የሚያሻሽሉ ናይትሮጅን ውህዶችን ለማግኘት ተጨማሪ የአከርካሪ አጥንት እጢ መመገብ ይችላሉ [2]። በዚህ ረገድ፣ በአን ውስጥ ካሉት የወንድማማች ዝርያ ዝርያዎች አንዱ ጠንካራ እና ልዩ መስህብ። የጋምቢያ ስሎል ዝርያ ውስብስብ፣ አኖፌልስ አራቢኒስ፣ ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት [12፣13፣14]፣ አስደሳች ነው። አኖፌልስ አራቢኒስ በአስተናጋጁ ምርጫዎች ውስጥ እድል ሰጪ ሲሆን ከከብቶች ጋር እንደሚገናኝ እና እንደሚመገብ ይታወቃል። የላም ሽንት በናይትሮጅን ውህዶች የበለፀገ ሀብት ሲሆን ዩሪያ ደግሞ ከጠቅላላው ናይትሮጅን 50-95% ይይዛል [15፣ 16]። እንደ ላም ሽንት። ረቂቅ ተሕዋስያን እድሜያቸው ሲገፋ፣ እነዚህን ሀብቶች የሚጠቀሙት የናይትሮጂን ውህዶች ውስብስብነት በ24 ሰዓታት ውስጥ ለመቀነስ ነው [15]። በአሞኒያ ፈጣን መጨመር፣ ከኦርጋኒክ ናይትሮጅን መቀነስ ጋር ተያይዞ፣ የአልካሎፊክ ረቂቅ ተሕዋስያን (ብዙዎቹ ለትንኞች መርዛማ ንጥረ ነገሮችን የሚያመነጩ) ይበቅላሉ [15]፣ እነዚህም ሴት አን.arabiensis በ24 ሰዓት ወይም ከዚያ ባነሰ ጊዜ ውስጥ ወደ ሽንት ይሳባሉ [13፣ 14]።
በዚህ ጥናት ውስጥ፣ አስተናጋጅ እና ደም የሚመገቡ አንስ ተፈልገዋል። በመጀመሪያው የጎናዶትሮፒን ዑደት ወቅት፣ አራቢየንሲስ ዩሪያን ጨምሮ ናይትሮጅን ውህዶችን በሽንት በማደባለቅ ለማግኘት ተገምግሟል። በመቀጠልም፣ ሴት ትንኞች ይህንን እምቅ ንጥረ ነገር ሀብት ለተሻለ ህልውና፣ ለመራባት እና ለተጨማሪ ፍለጋ እንዴት እንደሚመድቡ ለመገምገም ተከታታይ ሙከራዎች ተካሂደዋል። በመጨረሻም፣ ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት ሽታ እነዚህ ለአስተናጋጁ እና ለደም ለሚመገበው አን አስተማማኝ ፍንጮችን ይሰጡ እንደሆነ ለማወቅ ተገምግሟል። ይህንን እምቅ የአመጋገብ ሀብት ፍለጋ፣ አራቢየንሲስ ከታየው ልዩነት ማራኪነት በስተጀርባ የኬሚካል ትስስር አግኝቷል። በ24 ሰዓት ዕድሜ ላይ ባለው ሽንት ውስጥ ተለይተው የሚታወቁ ተለዋዋጭ ኦርጋኒክ ውህዶች (VOCs) ሰው ሰራሽ ሽታ ድብልቆች በመስክ ሁኔታዎች ስር የበለጠ ተገምግመዋል፣ በላብራቶሪ ሁኔታዎች ስር የተገኙትን ውጤቶች ማራዘም እና የከብት የሽንት ሽታ በተለያዩ የፊዚዮሎጂ ሁኔታዎች ላይ ያለውን ተጽእኖ ያሳያል። የትንኝ መሳብ። የተገኙት ውጤቶች አን. አራቢየንሲስ በህይወት ታሪክ ባህሪያት ላይ ተጽዕኖ ለማሳደር በአከርካሪ ሽንት ውስጥ የሚገኙ ናይትሮጅን ውህዶችን እንደሚገዛ እና እንደሚያሰራጭ ያረጋግጣሉ። እነዚህ ውጤቶች ሊከሰቱ ከሚችሉ ኤፒዲሚዮሎጂያዊ ውጤቶች አውድ ውስጥ ተብራርተዋል እና ለቬክተር ክትትል እና ቁጥጥር እንዴት ጥቅም ላይ ሊውሉ እንደሚችሉ።
የአኖፌልስ አራቢካኖች (ዶንጎላ ዝርያ) በ25 ± 2°ሴ፣ 65 ± 5% RH እና 12፡12 ሰዓት የብርሃን፡ ጨለማ ዑደት ተጠብቀዋል። እጭዎቹ በፕላስቲክ ትሪዎች (20 ሴ.ሜ × 18 ሴ.ሜ × 7 ሴ.ሜ) በተጣራ ውሃ ተሞልተው የቴትራሚን® የዓሳ ምግብ (ቴትራ ዌርኬ፣ ሜሌ፣ ዲኢ) ተመገቡ። ፑፓዎች በ30 ሚሊ ሊትር ኩባያዎች (ኖላቶ ሄርቲላ፣ አስቶርፕ፣ ኤስኢ) ውስጥ ተሰብስበው ከዚያም አዋቂ ሰው እንዲወጣ ወደ ቡግዶርም ኬጆች (30 ሴ.ሜ × 30 ሴ.ሜ × 30 ሴ.ሜ፤ ሜጋቪው ሳይንስ፣ ታይቹንግ፣ ታይዋን) ተዛውረዋል። አዋቂዎች ከተከሰተ በኋላ እስከ 4 ቀናት ድረስ 10% የሱክሮስ መፍትሄ በሊቢተም ተሰጥቷቸዋል፣ በዚህ ጊዜ አስተናጋጅ የሚፈልጉ ሴቶች ከሙከራው በፊት ወዲያውኑ ምግብ ይሰጣቸው ነበር፣ ወይም ከዚህ በታች እንደተገለጸው ከሙከራው በፊት በአንድ ሌሊት በተጣራ ውሃ ይራቡ ነበር። ለበረራ ቱቦ ሙከራዎች የሚያገለግሉ ሴቶች ለ4-6 ሰዎች ብቻ ተርበዋል። ሰዓታት በውሃ እና በሊቢተም። ለቀጣይ ባዮአሳዎች ደም የሚስቡ ትንኞችን ለማዘጋጀት፣ 4 ዲፒ ሴቶች በሜምብራል መመገቢያ ስርዓት (ሄሞቴክ ዲስከቨሪ ወርክሾፖች፣ አክሬንግተን፣ ዩኬ) ዲፋይብሮቲክ የበግ ደም (Håtunalab፣ Bro፣ SE) ተሰጥቷቸዋል። ሙሉ በሙሉ የተጨናነቁ ሴቶች ወደ ግለሰባዊ ጎጆዎች ተዛውረው ከታች እንደተገለጸው በቀጥታ አመጋገብ ወይም ከታች ከተገለጹት ሙከራዎች በፊት ለ 3 ቀናት 10% ሱክሮስ እና ሊቢተም ይሰጣሉ። የኋለኛው ሴቶች ለፍላይት ቱቦ ባዮአሳዎች ጥቅም ላይ ውለው ወደ ላቦራቶሪ ተላልፈዋል፣ ከዚያም ከሙከራው በፊት ለ 4-6 ሰዓታት የተጣራ ውሃ እና ሊቢተም ተወስደዋል።
የአረብ አዋቂ ሴት የሽንት እና የዩሪያ ፍጆታን ለመለካት የአመጋገብ ምርመራዎች ጥቅም ላይ ውለዋል። አስተናጋጅ የሚፈልጉ እና ደም የሚመገቡ ሴቶች 1% የተደባለቀ ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት፣ የተለያዩ የዩሪያ ክምችቶች እና ሁለት መቆጣጠሪያዎችን (10% ሱክሮስ እና ውሃ) ለ48 ሰዓታት የያዘ አመጋገብ ተሰጥቷቸዋል። በተጨማሪም የምግብ ቀለም (1 mg ml-1 xylene cyanide FF፤ CAS 2650-17-1፤ ሲግማ-አልድሪች፣ ስቶክሆልም፣ SE) ወደ አመጋገብ ተጨምሮ በ250 µl ማይክሮ ሴንትሪፉጅ ቱቦዎች (Axygen Scientific፣ Union City, CA, US፤ ምስል 1A) በ4 × 4 ማትሪክስ ውስጥ ቀርቧል (Axygen Scientific፣ Union City, CA, US፤ ምስል 1A) እስከ ጫፉ ድረስ ይሙሉ (~300 µl)። በትንኞች መካከል ያለውን ፉክክር እና የቀለም ቀለም ሊያስከትሉ የሚችሉ ተፅዕኖዎችን ለማስወገድ፣ 10 ትንኞችን በትልቅ የፔትሪ ምግብ (12 ሴ.ሜ ዲያሜትር እና 6 ሴ.ሜ ቁመት፤ ሴማዴኒ፣ ኦስተርሙንዲገን፣ CH፤ ምስል 1A) በ25 ± 2 ሴ.ሜ °ሴ እና 65 ± 5% አንጻራዊ በሆነ ጨለማ ውስጥ ያስቀምጡ። እርጥበት። እነዚህ ሙከራዎች ከ5 እስከ 10 ጊዜ ተደግመዋል። ለአመጋገብ ከተጋለጡ በኋላ፣ ትንኞች እስከ ተጨማሪ ትንተና ድረስ በ-20 ዲግሪ ሴልሺየስ ውስጥ እንዲቀመጡ ተደርገዋል።
በአስተናጋጁ እና በደም በሚጠባው ሴት አኖፌልስ አራቢያነስ የተዋጠውን የከብት ሽንት እና ዩሪያ ይፈልጉ። በአመጋገብ ሙከራ (A)፣ ሴት ትንኞች ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት፣ የተለያዩ የዩሪያ ክምችቶች፣ የሱክሮስ (10%) እና የተቀዳ ውሃ (H2O) የያዘ አመጋገብ ተሰጥቷቸዋል። አስተናጋጅ የሚፈልጉ (B) እና ደም የሚመገቡ (C) ሴቶች ከማንኛውም የተፈተነ አመጋገብ በበለጠ ሱክሮስን ይወስዳሉ። አስተናጋጅ የሚፈልጉ ሴቶች ከ168 ሰዓት የላም ሽንት (B) በታች የ72 ሰዓት የላም ሽንት እንደሚጠጡ ልብ ይበሉ። አማካኝ የሽንት ናይትሮጅን ይዘት (± መደበኛ መዛባት) በመግቢያው ውስጥ ይወከላል። አስተናጋጅ የሚፈልጉ (D፣ F) እና ደም የሚጠቡ (E፣ G) ሴቶች ዩሪያን በመጠን ጥገኛ በሆነ መንገድ ይወስዳሉ። የተለያዩ የፊደል ስሞች ያላቸው አማካኝ የተነፈሱ መጠኖች (D፣ E) እርስ በእርስ በእጅጉ የተለዩ ነበሩ (የአንድ አቅጣጫ ANOVA የቱኪ ድህረ-ሆክ ትንተናን በመጠቀም፤ p < 0.05)። የስህተት አሞሌዎች የአማካይ (BE) መደበኛ ስህተትን ይወክላሉ። ቀጥ ያለ የተቆራረጠ መስመር የሎግ-መስመራዊ ሪግሬሽን መስመርን ይወክላል (F፣ G)
የተዋጠ ምግብ ለመልቀቅ፣ ትንኞች 230 µl የተቀዳ ውሃ በያዙ 1.5 ሚሊ ሊትር ማይክሮ ሴንትሪፉጅ ቱቦዎች ውስጥ ገብተው ቲሹው በሚጣል ፔስትል እና ገመድ አልባ ሞተር (VWR International፣ Lund፣ SE) ተስተጓጉሏል፣ ከዚያም በ10 krpm ለ10 ደቂቃ ሴንትሪፉጌሽን ተስተጓጉሏል። የላይኛው ክፍል (200 µl) ወደ 96-ዌል ማይክሮፕሌት (ሲግማ-አልድሪች) ተላልፎ መምጠጥ (λ620) በስፔክትሮፎቶሜትር ላይ የተመሠረተ ማይክሮፕሌት አንባቢ (SPECTROStar® Nano፣ BMG Labtech፣ Ortenberg፣ DE) nm በመጠቀም ተለክቷል። በአማራጭ፣ ትንኞች በ1 ሚሊ ሊትር የተፈጨ ውሃ ውስጥ ተፈጭተው 900 µl ለስፔክትሮፎቶሜትሪክ ትንተና ወደ ኩቬት ተላልፈዋል (λ 620 nm፤ UV 1800፣ Shimadzu፣ Kista፣ SE)። የአመጋገብ ቅበላን ለመለካት፣ 0.2 µl ለማምረት መደበኛ ኩርባ በተከታታይ ዲሉሽን ተዘጋጅቷል። እስከ 2.4 µl ከ1 ሚ.ግ ሚሊ ሊትር-1 xylene ሲያናይድ። ከዚያም፣ እያንዳንዱ ትንኝ የተዋጠውን የምግብ መጠን ለማወቅ የሚታወቀው የቀለም ክምችት የኦፕቲካል ጥግግት ጥቅም ላይ ውሏል።
የመጠን መረጃ የተተነተነው የአንድ አቅጣጫ የልዩነት ትንተና (ANOVA) በመጠቀም ሲሆን ከዚያም የቱኪ ድህረ-ሆክ ጥንድ ንጽጽሮች (JMP Pro፣ v14.0.0፣ SAS Institute Inc.፣ Cary፣ NC፣ US፣ 1989–2007)። መስመራዊ ሪግሬሽን ትንታኔዎች በማጎሪያ ላይ የተመሰረተ የዩሪያ ቅበላን እና በአስተናጋጅ ፍለጋ እና ደም በሚጠቡ ትንኞች መካከል የተነፃፀሩ ምላሾችን ገልጸዋል (GraphPad Prism v8.0.0 ለማክ፣ GraphPad Software፣ San Diego፣ CA፣ US)።
ከእያንዳንዱ የዕድሜ ክልል የተውጣጡ በግምት 20 µl የሽንት ናሙናዎች በChromosorb® W/AW (10 mg 80/100 ሜሽ፣ ሲግማ አልድሪክ) ላይ ታስረው በቆርቆሮ ካፕሱሎች (8 ሚሜ × 5 ሚሜ) ተሸፍነዋል። እንክብሎቹ በአምራቹ ፕሮቶኮል መሠረት በአዲስ እና በአሮጌ ሽንት ውስጥ ያለውን የናይትሮጅን ይዘት ለመወሰን በCHNS/O ተንታኝ (Flash 2000፣ Thermo Fisher Scientific፣ Waltham፣ MA፣ US) የቃጠሎ ክፍል ውስጥ ገብተዋል። ጠቅላላ ናይትሮጅን (g N l-1) እንደ መደበኛ ጥቅም ላይ በሚውለው በሚታወቀው የዩሪያ ክምችት ላይ ተመስርቶ ተለክቷል።
የአመጋገብ ስርዓት በአስተናጋጆች ፍለጋ እና ደም በሚጠጡ የሴቶች ህልውና ላይ ያለውን ተጽእኖ ለመገምገም፣ ትንኞች በትልልቅ የፔትሪ ምግቦች (ዲያሜትር 12 ሴ.ሜ እና ቁመት 6 ሴ.ሜ፤ ሴማዴኒ) ውስጥ በተናጠል በክዳኑ ውስጥ በተሸፈነ ቀዳዳ (ዲያሜትር 3 ሴ.ሜ) ውስጥ ተቀምጠዋል። አመጋገቦች በቀጥታ ከ4 ዲፒኢ በኋላ ተሰጥተዋል እና 1% የተደባለቀ ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት፣ አራት የዩሪያ ክምችት እና ሁለት መቆጣጠሪያዎች፣ 10% ሱክሮስ እና ውሃ ያካትታሉ። እያንዳንዱ አመጋገብ በ5 ሚሊ ሊትር መርፌ (Thermo Fisher Scientific፣ Gothenburg፣ SE) ውስጥ በጥርስ ታምፖን (DAB Dental AB፣ Upplands Vasby፣ SE) ላይ ተተክሎ፣ ፕለገሱ ተወግዶ በፔትሪ ምግብ ላይ (ምስል 1) ላይ ተቀምጧል። አመጋገብዎን በየቀኑ ይለውጡ። ከላይ እንደተገለጸው ላብራቶሪውን ይጠብቁ። ​​በሕይወት የተረፉት ትንኞች በቀን ሁለት ጊዜ ይቆጠራሉ፣ የሞቱ ትንኞች ደግሞ የመጨረሻው ትንኝ እስኪሞት ድረስ ይጣላሉ (n = 40 በአንድ ህክምና)። በተለያዩ አመጋገቦች የተመገቡ ትንኞች ህልውና በካፕላን-ሜየር የመዳን ኩርባዎች እና በሎግ-ደረጃ በመጠቀም በስታትስቲክስ ተተነተነ። በአመጋገብ መካከል የመዳን ስርጭት ንጽጽሮችን ለማነፃፀር የሚደረጉ ሙከራዎች (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0)።
በአቲሳኖ እና ሌሎች [17] ላይ የተመሠረተ ብጁ የወባ ትንኝ ወፍጮ፣ ያለ የፊት እና የኋላ ፓነሎች (ምስል 3፡ ላይ) ከ5 ሚሜ ውፍረት ያለው ግልጽ የአክሬሊክስ ፓነሎች (10 ሴ.ሜ ስፋት x 10 ሴ.ሜ ርዝመት x 10 ሴ.ሜ ቁመት) የተሰራ። ከጋዝ ክሮማቶግራፊ አምድ (0.25 ሚሜ መታወቂያ፤ 7.5 ሴ.ሜ ሊትር) የተሰራ ቀጥ ያለ ቱቦ ያለው የፓይቮት ስብሰባ በ9 ሴ.ሜ ርቀት ላይ በሚገኙ ጥንድ ኒዮዲሚየም ማግኔቶች መካከል በተንጠለጠለ የነፍሳት መርፌ ላይ የተጣበቁ ጫፎች። ከተመሳሳይ ቁሳቁስ (6.5 ሴ.ሜ ሊትር) የተሰራ አግድም ቱቦ ቀጥ ያለ ቱቦውን ለሁለት በመክተት የታሰረ ክንድ እና ትንሽ የአሉሚኒየም ፎይል ቁራጭ እንደ ብርሃን የሚቋረጥ ምልክት የሚይዝ ክንድ ይፈጥራል።
ለ24 ሰዓት የተራቡ ሴቶች ከመቆጣጠራቸው በፊት ለ30 ደቂቃዎች ከላይ የተጠቀሰውን ምግብ ተሰጣቸው። ሙሉ በሙሉ የተመገቡት ሴት ትንኞች ከዚያም በበረዶ ላይ ለ2-3 ደቂቃዎች ለየብቻ ማደንዘዣ ተሰጥቷቸው ከንብ ሰም (ጆኤል ስቨንሰንስ ቫክስፋብሪክ ኤቢ፣ ሙንካ ሉንግቢ፣ ኤስኢ) ጋር ከነፍሳት ፒኖች ጋር ተያይዘው ከዚያም ከአግድም ቱቦዎች ክንዶች ጋር ታስረዋል። የሚበር ወፍጮ። በአንድ በረራ የሚደረጉ ዝግመቶች በብጁ በተሰራ የውሂብ ምዝግብ ማስታወሻ ተቀርፀዋል፣ ከዚያም በፒሲ-ላብ 2000™ ሶፍትዌር (v4.01፤ ቬልማን፣ ጋቬሬ፣ ቢኢ) በመጠቀም ተከማችተው ይታያሉ። የበረራ ወፍጮው በአየር ንብረት ቁጥጥር ስር ባለ ክፍል ውስጥ ተተክሏል (12 ሰዓት፡12 ሰዓት፣ ብርሃን፡ ጨለማ፣ 25 ± 2 °ሴ፣ 65 ± 5% RH)።
የበረራ እንቅስቃሴን ንድፍ በዓይነ ሕሊናችን ለማየት፣ የተጓዘው አጠቃላይ ርቀት (ሜ) እና አጠቃላይ ተከታታይ የበረራ እንቅስቃሴዎች ብዛት በሰዓት በ24 ሰዓት ውስጥ ተሰልቷል። በተጨማሪም፣ በእያንዳንዱ ሴት የተጓዘው አማካይ ርቀት በሕክምናዎች ውስጥ ተነጻጽሮ የአንድ አቅጣጫ ANOVA እና የቱኪ ድህረ-ሆክ ትንተና (JMP Pro፣ v14.0.0፣ SAS Institute Inc.) በመጠቀም ተተነተነ፣ አማካይ ርቀት እንደ ጥገኛ ተለዋዋጭ ተደርጎ የሚቆጠር ሲሆን ህክምናው ግን ገለልተኛ ምክንያት ነው። በተጨማሪም፣ አማካይ የዙሮች ብዛት በ10 ደቂቃ ጭማሪዎች ይሰላል።
አመጋገብ በአን.አራቢየንሲስ የመራቢያ አፈፃፀም ላይ ያለውን ተጽእኖ ለመገምገም፣ ስድስት ሴቶች (4 dpe) ደም ከተሰበሰበ በኋላ በቀጥታ ወደ ቡግዶርም ኬጆች (30 ሴ.ሜ × 30 ሴ.ሜ × 30 ሴ.ሜ) ተላልፈዋል፣ ከዚያም ከላይ እንደተገለጸው ለ48 ሰዓታት የሙከራ አመጋገብ ሰጥተዋል። ከዚያም አመጋገቦች ተወግደው በሦስተኛው ቀን በ20 ሚሊ ሊትር የተቀዳ ውሃ የተሞሉ ኩባያዎች (30 ሚሊ ሊትር፤ ኖላቶ ሄርቲላ) ለ48 ሰዓታት በየ24 ሰዓቱ ተለዋወጡ። እያንዳንዱን የአመጋገብ ስርዓት ከ20-50 ጊዜ ይድገሙት። እንቁላሎች ተቆጥረው ለእያንዳንዱ የሙከራ ኬጅ ተመዝግበዋል። የእንቁላል ናሙናዎች የእያንዳንዱን እንቁላል አማካይ መጠን እና የርዝመት ልዩነት ለመገምገም ጥቅም ላይ ውለዋል (በአመጋገብ ≥ 200) በዲያሉክስ-20 ማይክሮስኮፕ (DM1000፤ Ernst Leitz Wetzlar፣ Wetzlar፣ DE) በሊካ ካሜራ (DFC) 320 R2 የተገጠመለት፤ ሌይካ ማይክሮሲስተምስ ሊሚትድ፣ ዲኢ)። የተቀሩት እንቁላሎች በመደበኛ የማሳደጊያ ሁኔታዎች ውስጥ ለ24 ሰዓታት በአየር ንብረት ቁጥጥር ስር ባለ ክፍል ውስጥ ተቀምጠዋል፣ እና ከላይ እንደተገለፀው በቅርቡ ብቅ ያሉ የመጀመሪያ ደረጃ እጭዎች (በአመጋገብ ≥ 200) ንዑስ ናሙና ተለክተዋል። የእንቁላል ብዛት እና የእንቁላል እና የእጭዎች መጠን በሕክምናዎች መካከል እና የአንድ አቅጣጫ ANOVA እና የቱኪ ድህረ-ሆክ ትንተና (JMP Pro፣ v14.0.0፣ SAS Institute Inc.) መካከል ተነጻጽረዋል።
ከትኩስ (ናሙና ከተደረገ በኋላ 1 ሰዓት)፣ ከአርሲ ዘሮች የተወሰዱ የ24 ሰዓት፣ የ72 ሰዓት እና የ168 ሰዓት ዕድሜ ያላቸው የሽንት ዓይነቶች ከዘቡ ከብቶች፣ ከአርሲ ዘሮች የተሰበሰቡ ናሙናዎች ተሰብስበው ነበር። ለምቾት ሲባል የሽንት ናሙናዎች በማለዳ ማለዳ ላይ የተሰበሰቡት ላሞቹ አሁንም በጎተራ ውስጥ እያሉ ነው። የሽንት ናሙናዎች ከ10 ግለሰቦች የተሰበሰቡ ሲሆን ከእያንዳንዱ ናሙና 100-200 ሚሊ ሊትር ወደ ፖሊአሚድ የመጋገሪያ ከረጢቶች (ቶፒትስ ኮፍሬስኮ፣ ፍሪሽሃልቴፕሮዱክቴ GmbH እና ኩባንያ፣ ሚንደን፣ DE) በ3 ሊትር ፖሊአሚድ ክዳን ባለው የቪኒል ክሎራይድ የፕላስቲክ ከበሮዎች ተላልፈዋል። ከእያንዳንዱ የከብት ሽንት ናሙና የተወሰዱ የጭንቅላት ክፍተት ተለዋዋጮች በቀጥታ (ትኩስ) ወይም በክፍል ሙቀት ውስጥ ለ24 ሰዓት፣ ለ72 ሰዓት እና ለ168 ሰዓታት ከበሰሉ በኋላ ተሰብስበዋል፣ ማለትም እያንዳንዱ የሽንት ናሙና የእያንዳንዱን የዕድሜ ቡድን ተወካይ ነበር።
ለጭንቅላት ቦታ ተለዋዋጭ ንጥረ ነገሮችን ለመሰብሰብ፣ የተዘጋ-ሉፕ ሲስተም የተነቃ የካርቦን ማጣሪያ የጋዝ ፍሰት (100 ሚሊ ሊትር ደቂቃ-1) በፖሊአሚድ ከረጢት በኩል ወደ መምጠጥ አምድ ለ2.5 ሰዓታት በዲያፍራም ቫክዩም ፓምፕ (KNF Neuberger፣ Freiburg፣ DE) ለማሰራጨት ጥቅም ላይ ውሏል። እንደ መቆጣጠሪያ፣ የፊት ቦታ መሰብሰብ ከባዶ ፖሊአሚድ ከረጢት ተከናውኗል። የመምጠጥ አምድ በመስታወት ሱፍ መሰኪያዎች መካከል 35 ሚ.ግ የፖራፓክ Q (50/80 ሜሽ፤ ዋተርስ አሶሴትስ፣ ሚልፎርድ፣ ኤምኤ፣ ዩኤስ) የያዘ ከቴፍሎን ቱቦ (5.5 ሴ.ሜ x 3 ሚሜ አይዲ) የተሰራ ነው። ከመጠቀምዎ በፊት አምድ በ1 ሚሊ ሊትር እንደገና በተዘጋጀ n-hexane (Merck፣ Darmstadt፣ DE) እና 1 ሚሊ ሊትር ፔንታን (99.0% ንጹህ ሶልቬንት GC ደረጃ፣ ሲግማ አልድሪክ) ታጥቧል። የተዋሃዱ ተለዋዋጭ ንጥረ ነገሮች በ400 μl ፔንታን ተወግደዋል። የጭንቅላት ቦታ ስብስቦች ተከማችተው ከዚያ ለተጨማሪ ጥቅም ላይ እስኪውሉ ድረስ በ-20°ሴ ተከማችተዋል። ትንተና።
የአስተናጋጅ ፍለጋ እና ደም የሚበሉ የባህሪ ምላሾች። ከትኩስ፣ 24-ሰዓት፣ 72-ሰዓት እና 168-ሰዓት ዕድሜ ላይ ከሚገኝ ሽንት የተሰበሰቡት የጭንቅላት ቦታ ተለዋዋጭ ተዋጽኦዎች ከአረብቢዶፕሲስ ትንኞች የሚወጡ ተለዋዋጭ ተዋጽኦዎችን በቀጥታ የመስታወት ቱቦ ኦልፋክቶሜትር በመጠቀም ተተነተኑ [18]። ሙከራዎቹ የተካሄዱት በZT 13-15 ወቅት ሲሆን ይህም የአን የቤት ፍለጋ እንቅስቃሴ ከፍተኛ ወቅት ነው። አረብ [19]። የመስታወት ቱቦ ኦልፋክቶሜትር (80 ሴ.ሜ × 9.5 ሴ.ሜ መታወቂያ) ከላይ በ3 ± 1 ሊትር ቀይ ብርሃን ተብራርቷል። የከሰል ማጣሪያ እና እርጥበት የተደረገበት የአየር ፍሰት (25 ± 2 °C፣ 65 ± 2% አንጻራዊ እርጥበት) በ30 ሴ.ሜ s-1 ባዮአሳይን አልፏል። አየር በተከታታይ የማይዝግ ብረት ሜሽ ስክሪኖች ውስጥ ያልፋል፣ ይህም የላሚናር ፍሰት እና ወጥ የሆነ የፕላም መዋቅር ይፈጥራል። የጥርስ ታምፖን ማከፋፈያ (4 ሴ.ሜ × 1 ሴ.ሜ፤ L:D፤ DAB Dental AB)፣ በነፋስ አቅጣጫው ጫፍ ላይ ከ5 ሴ.ሜ ጥቅልል ​​የተንጠለጠለ ኦልፋክቶሜትር፣ በየ 5 ደቂቃው አነቃቂ ለውጥ በማድረግ። ለትንታኔ፣ ከእያንዳንዱ የራስ ቦታ ማውጣት 10 μl፣ በ1፡10 የተበረዘ፣ እንደ ማነቃቂያ ጥቅም ላይ ውሏል። እኩል መጠን ያለው ፔንቴን እንደ መቆጣጠሪያ ጥቅም ላይ ውሏል። የግለሰብ አስተናጋጅ ወይም ደም የሚጠቡ ትንኞች ሙከራው ከመጀመሩ ከ2-3 ሰዓታት በፊት በግለሰብ የመልቀቂያ ጎጆዎች ውስጥ ተቀምጠዋል። የመልቀቂያው ጎጆ በኦልፋክቶሜትር ወደታች ንፋስ ጎን ላይ ተቀምጧል፣ እና ትንኞች ለ 1 ደቂቃ እንዲላመዱ ተፈቅዶላቸዋል፣ ከዚያም የሽቦው የቢራቢሮ ቫልቭ ለመልቀቅ ተከፍቷል። ለህክምና ወይም ለቁጥጥር መሳብ ከተለቀቀ በኋላ በ 5 ደቂቃዎች ውስጥ ከምንጩ ጋር የተገናኘው የትንኞች መጠን ተተነተነ። እያንዳንዱ የራስ ቦታ ተለዋዋጭ ማውጣት እና መቆጣጠሪያ ቢያንስ 30 ጊዜ ተደግሟል፣ እና የአንድ ቀን ውጤቶችን ለማስወገድ በእያንዳንዱ የሙከራ ቀን ተመሳሳይ የሕክምና እና የቁጥጥር ብዛት ተፈትኗል። ከአስተናጋጁ እና ከደም ከሚመገቡት መልሶችን ይፈልጉ መልስ። የአረብኛ እና የራስ ቦታ ስብስቦች በስመ ሎጂስቲክ ሪግሬሽን እና ለልዩ ጥምርታዎች ጥንድ ንፅፅሮችን በመጠቀም ተተነተኑ (JMP Pro፣ v14.0.0፣ SAS Institute Inc.)
የአን የመራቢያ ምላሽ። ከትኩስ እና አሮጌ የላም ሽንት የሚወጡ የራስ ቦታ ውጤቶች በቡግዶርም ዋሻዎች (30 ሴ.ሜ × 30 ሴ.ሜ × 30 ሴ.ሜ፤ ሜጋቪው ሳይንስ) ተተነተኑ። በ20 ሚሊ ሊትር የተቀዳ ውሃ የተሞሉ የፕላስቲክ ኩባያዎች (30 ሚሊ ሊትር፤ ኖላቶ ሄርቲላ) የመውለጃውን ንጣፍ ሰጥተው በዋሻው ተቃራኒ ማዕዘኖች፣ 24 ሴ.ሜ ርቀት ላይ ተቀምጠዋል። የሕክምና ኩባያዎች በ1፡10 ዲሉሽን በእያንዳንዱ የራስ ቦታ ማውጣት 10 μl ተስተካክለዋል። የመቆጣጠሪያ ኩባያውን ለማስተካከል እኩል መጠን ያለው የፔንቴን መጠን ጥቅም ላይ ውሏል። የአቀማመጥ ውጤቶችን ለመቆጣጠር በእያንዳንዱ ሙከራ መካከል የሕክምና እና የቁጥጥር ኩባያዎች ተለዋወጡ። አስር ደም የተጠቡ ሴቶች በZT 9-11 ወደ የሙከራ ዋሻዎች ተለቀቁ እና በኩባያዎች ውስጥ ያሉ እንቁላሎች ከ24 ሰዓታት በኋላ ተቆጥረዋል። የመውለጃ ኢንዴክስን ለማስላት ቀመር፡ (በማከሚያ ዋሻ ውስጥ የተጣሉት የእንቁላል ብዛት - በቁጥጥር ዋሻ ውስጥ የተጣሉት የእንቁላል ብዛት)/(ጠቅላላ የተጣሉት የእንቁላል ብዛት)። እያንዳንዱ ህክምና 8 ጊዜ ተደግሟል።
የሴት አን.arabiensis የጋዝ ክሮማቶግራፊክ እና የኤሌክትሮን አንቴና ንድፍ መለየት (GC-EAD) ትንተና ቀደም ሲል እንደተገለጸው ተከናውኗል [20]። በአጭሩ፣ ትኩስ የጭንቅላት ቦታ ተለዋዋጭ ንጥረ ነገሮች በኤችፒ-5 አምድ (30 ሜ × 0.25 ሚሜ መታወቂያ፣ 0.25 μm የፊልም ውፍረት፣ አጊለንት ቴክኖሎጂዎች) የተገጠመለት Agilent Technologies 6890 GC (ሳንታ ክላራ፣ ካሊፎርኒያ፣ አሜሪካ) በመጠቀም ተለያይተዋል። እና የእርጅና ሽንት። ሃይድሮጂን እንደ ተንቀሳቃሽ ደረጃ ሆኖ ጥቅም ላይ ውሏል፣ አማካይ መስመራዊ የፍሰት መጠን 45 ሴ.ሜ s-1 ነው። እያንዳንዱ ናሙና (2 μl) ለ30 ሰከንዶች በተሰነጠቀ ሁነታ በ225 °ሴ የመግቢያ ሙቀት ተወግቷል። የጂሲ ምድጃ ሙቀት ከ35 °ሴ (3 ደቂቃ ማቆየት) እስከ 300 °ሴ (10 ደቂቃ ማቆየት) በ10 °ሴ ደቂቃ-1 ፕሮግራም ተደርጓል። በጂሲ የፍሳሽ መከፋፈያ ውስጥ፣ 4 psi ናይትሮጅን ተጨምሮ በገርስቴል 3D/2 ዝቅተኛ የሞተ መጠን መስቀል (ገርስቴል፣ ሙልሃይም፣ DE) ውስጥ በነበልባል አዮኒዜሽን ማወቂያ እና በEAD መካከል 1፡1 ተከፍሎ ነበር። ለኢኤዲ የጂሲ የፍሳሽ መምጠጫ ካፒላሪ በጌርስቴል ODP-2 የዝውውር መስመር በኩል ተላልፏል፣ ይህም የጂሲ ምድጃውን የሙቀት መጠን ሲደመር 5 °ሴን የሚከታተል ሲሆን ወደ መስታወት ቱቦ (10 ሴ.ሜ × 8 ሚሜ) ተላልፏል፣ እዚያም ከካርቦን ከተጣራ፣ እርጥበት ካለው አየር (1.5 ሊ ደቂቃ−1) ጋር ተቀላቅሏል። አንቴናው ተቀመጠ። አንቴናው ተቀመጠ። አንቴናው ተቀመጠ። አንቴናው ተቀመጠ። ከቱቦው መውጫ 0.5 ሴ.ሜ ርቀት ላይ። እያንዳንዱ ትንኝ አንድ ተደጋጋሚ ነበር፣ እና ለማስተናገድ ለሚፈልጉ ትንኞች፣ በእያንዳንዱ ዕድሜ ላይ ባሉ የሽንት ናሙናዎች ላይ ቢያንስ ሦስት ድግግሞሾች ተደርገዋል።
በ70 eV በኤሌክትሮን ተጽዕኖ አዮኒዜሽን ሁነታ ላይ የሚሰራውን የጂሲ-ኢኤዲ ትንተና በመጠቀም ትኩስ እና ያረጁ የከብት ሽንት የራስ ቦታ ስብስቦች ውስጥ የባዮአክቲቭ ውህዶችን መለየት። ጂሲ በኤችፒ-5MS UI የተሸፈነ የተዋሃደ የሲሊካ ካፕላሪ አምድ (60 ሜ × 0.25 ሚሜ ውስጣዊ ዲያሜትር፣ 0.25 μm የፊልም ውፍረት) በሂሊየም የተገጠመለት ሲሆን አማካይ መስመራዊ የፍሰት መጠን 35 ሴ.ሜ s-1 ነው። 2 μl ናሙና ልክ እንደ GC-EAD ትንተና በተመሳሳይ መርፌ ቅንብሮች እና የምድጃ ሙቀት በመጠቀም ተለጠፈ። ውህዶች ከብጁ ቤተ-መጽሐፍት እና ከNIST14 ቤተ-መጽሐፍት (Agilent) ጋር ሲነፃፀሩ በማቆያ ጊዜያቸው (Kovát ኢንዴክስ) እና በጅምላ ስፔክትራ ተለይተዋል። የተለዩ ውህዶች ትክክለኛ ደረጃዎችን በመርፌ በመወጋት ተረጋግጠዋል (ተጨማሪ ፋይል 1፡ ሠንጠረዥ S2)። ለቁጥር፣ ሄፕቲል አሲቴት (10 ng፣ 99.8% የኬሚካል ንፅህና፣ አልድሪች) እንደ ውጫዊ መስፈርት ተወጋ።
ከላይ እንደተጠቀሰው ተመሳሳይ ኦልፋክቶሜትር እና ፕሮቶኮል በመጠቀም በአዲስ እና በአሮጌ ሽንት ውስጥ ተለይተው የሚታወቁ ባዮአክቲቭ ውህዶችን የያዘ ሰው ሰራሽ ሽታ ድብልቅ ውጤታማነትን መገምገም አስተናጋጁን የሚፈልግ እና ደም የሚጠባውን Ans.arabiensis ለመሳብ። ሰው ሰራሽ ድብልቆች በተደባለቀ የራስ ቦታ ተለዋዋጭ የሆኑ ትኩስ፣ 24 ሰዓት፣ 48 ሰዓት፣ 72 ሰዓት እና 168 ሰዓት ዕድሜ ያለው ሽንት ውስጥ ያሉትን ውህዶች ቅንብር እና መጠን አስመስለዋል (ምስል 5D-G፤ ተጨማሪ ፋይል 1፡ ሠንጠረዥ S2)። ለመተንተን፣ ለአስተናጋጁ እና ለደም የሚጠባ ትንኞች ማራኪነትን ለመገምገም ከ140-2400 ng h-1 የሚደርስ አጠቃላይ የመልቀቂያ መጠን ያለው 10 μl ሙሉ በሙሉ ሰው ሰራሽ ድብልቅ 1:100 የማቅለጫ መጠን ይጠቀሙ። ከዚያ በኋላ፣ ምርመራው የሚከናወነው በተሟሉ ድብልቆች ላይ ሲሆን፣ በዚህ ውስጥ የተሟላ ድብልቅ ነጠላ ውህዶች የሚቀነሱ ድብልቆች ይወገዳሉ። ከአስተናጋጁ እና ከደም ከሚመገቡት Ans.Arabies እና ሠራሽ እና ተቀናሽ ድብልቆች ምላሾችን ይፈልጉ። ስም-አልባ የሎጂስቲክ ሪግሬሽን በመጠቀም እና ለኦዲት ጥንድ ንጽጽሮችን በመጠቀም። ጥምርታዎች (JMP Pro፣ v14.0.0፣ SAS Institute Inc.)።
የላም ሽንት ለወባ ትንኞች፣ ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት ከላይ እንደተገለጸው የተሰበሰቡ እና ውሃ በተፈጨ 3 ሊትር ባልዲዎች (100 ሚሊ ሊትር) ውስጥ ተቀምጦ በአስተናጋጅ ማጥመጃ ወጥመዶች ውስጥ ተቀምጧል። (BG-HDT ስሪት፤ BioGents፣ Regensburg፣ DE)። አስር ወጥመዶች በግጦሽ ስፍራ 50 ሜትር ርቀት ላይ፣ ከመንደሩ ማህበረሰብ 400 ሜትር ርቀት ላይ ተቀምጠዋል (ሲላይ፣ ኢትዮጵያ፣ 5°53′24′N፣ 37°29′24′E) እና ምንም ከብቶች በቋሚ የመራቢያ ቦታዎች እና መንደሮች ላይ አልተቀመጡም። የአስተናጋጅ መኖርን ለማስመሰል አምስት ወጥመዶች ተሞቁ፣ አምስት ወጥመዶች ደግሞ ሳይሞቁ ቀርተዋል። እያንዳንዱ የሕክምና ቦታ በየምሽቱ ለአምስት ሌሊት ይሽከረከራል። የተለያየ ዕድሜ ባላቸው ሽንት በተጠመደባቸው ወጥመዶች ውስጥ የተያዙት የትንኝ ቁጥሮች በሎጅስቲክ ሪግሬሽን ከቤታ ቢኖሚያል ስርጭት ጋር ተነጻጽረዋል (JMP Pro፣ v14.0.0፣ SAS Institute Inc.)።
በኦሮሚያ ክልል፣ ኢትዮጵያ፣ ማኪ ከተማ አቅራቢያ በሚገኝ የወባ በሽታ ባለበት መንደር (8° 11′ 08″ ሰሜን፣ 38° 81′ 70″ ኢ፤ ምስል 6A)። ጥናቱ የተካሄደው ከነሐሴ አጋማሽ እስከ መስከረም አጋማሽ ባለው ጊዜ ውስጥ ሲሆን ከዓመታዊው የቤት ውስጥ ቀሪ ርጭት በፊት ረጅም የዝናብ ወቅትም ተከናውኗል። ለጥናቱ በመንደሩ ዳርቻ ላይ የሚገኙ አምስት ጥንድ ቤቶች (ከ20–50 ሜትር ርቀት) ተመርጠዋል (ምስል 6A)። ቤቶቹን ለመምረጥ የሚያገለግሉት መስፈርቶች፡ በቤት ውስጥ እንስሳት አይፈቀዱም፣ የቤት ውስጥ ምግብ ማብሰል (የማገዶ እንጨት ወይም ከሰል መሳል) አይፈቀድም (ቢያንስ በሙከራው ጊዜ)፣ እና ቢበዛ ሁለት ነዋሪዎች ያሏቸው ቤቶች፣ በነፍሳት መከላከያዎች ውስጥ ተኝተው። በታከመው የትንኝ መከላከያ መረብ ስር። የሥነ ምግባር ማረጋገጫ የተሰጠው በአዲስ አበባ ዩኒቨርሲቲ የተፈጥሮ ሳይንስ ፋኩልቲ (CNS-IRB) የተቋማዊ ምርምር ሥነ ምግባር ግምገማ ቦርድ (IRB/022/2016) ሲሆን፣ በሄልሲንኪ የዓለም የሕክምና ማህበር መግለጫ በተቀመጡት መመሪያዎች መሠረት ነው። ከእያንዳንዱ የቤተሰብ ኃላፊ ፈቃድ የተገኘው በጤና ኤክስቴንሽን ሰራተኞች እገዛ ነው። አጠቃላይ ሂደቱ በዲስትሪክቱ እና በዎርድ ('ቀበሌ') ደረጃ ባሉ የአካባቢ አስተዳደሮች ነው። የሙከራ ዲዛይኑ የ2 × 2 የላቲን ካሬ ዲዛይንን ተከትሎ ሲሆን፣ በመጀመሪያው ምሽት ለተጣመሩ ቤቶች ሰው ሰራሽ ውህዶች እና መቆጣጠሪያዎች ተመድበው በሚቀጥለው የሙከራ ምሽት በቤቶች መካከል ይለዋወጣሉ። ይህ ሂደት አስር ጊዜ ተደግሟል። በተጨማሪም፣ በተመረጡ ቤቶች ውስጥ የትንኝ እንቅስቃሴን ለመገመት፣ የሲዲሲ ወጥመዶች በቀኑ በተመሳሳይ ሰዓት በመስክ ሙከራው መጀመሪያ፣ መሃል እና መጨረሻ ላይ ለአምስት ተከታታይ ምሽቶች እንዲካሄዱ ተደርጓል።
ስድስት ባዮአክቲቭ ውህዶችን የያዘ ሰው ሰራሽ ድብልቅ በሄፕቴን (97.0% የሟሟ GC ደረጃ፣ ሲግማ አልድሪክ) ውስጥ ተሟጦ በ140 ng h-1 በጥጥ ዊክ ማከፋፈያ [20] ተለቋል። የዊክ ማከፋፈያው በ12 ሰዓት ሙከራው ውስጥ ሁሉም ውህዶች በቋሚ መጠን እንዲለቀቁ ፈቅዷል። ሄፕቴን እንደ መቆጣጠሪያ ጥቅም ላይ ውሏል። ጠርሙሱ ከማዕከላት ፎር ፎር ዲስዝ ኮንትሮል ኤንድ ፕሪቬንሽን (ሲዲሲ) የብርሃን ወጥመድ መግቢያ ነጥብ አጠገብ ተንጠልጥሏል (ጆን ደብሊው ሆክ ኩባንያ፣ ጌይንስቪል፣ ኤፍኤል፣ ዩኤስ፤ ምስል 6A)። ወጥመዶቹ ከመሬት በላይ ከ0.8 - 1 ሜትር፣ ከአልጋው እግር አጠገብ ተሰቅለው፣ እና አንድ በጎ ፈቃደኛ ባልታከመ የትንኝ መረብ ስር ተኝተው ከ18:00 እስከ 06:30 ባለው ጊዜ ውስጥ ቀዶ ጥገና ተደርጎላቸዋል። በጾታ እና በፊዚዮሎጂ ሁኔታ የተያዙ ትንኞች (ያልተመገቡ፣ ያልተመገቡ፣ ከፊል እርጉዝ የሆኑ እና እርጉዝ የሆኑ [21]) በኋላ በፖሊሜሬዝ ሰንሰለት ምላሽ (PCR) ትንተና በመጠቀም ተፈትሸዋል። የውስብስቡ አባላት [23]። በመስክ ጥናቱ፣ የተጣመሩ ቤቶች ወጥመድ ወጥመድ የተተነተነው በስመ ሎጂስቲክ ተስማሚ ሞዴል ሲሆን፣ መስህብ ጥገኛ ተለዋዋጭ ሲሆን ህክምናው (ሲንተቲክ ድብልቅ ከቁጥጥር ጋር) ቋሚ ውጤት ነበር (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc.)። እዚህ፣ የχ2 እና p-እሴቶችን ከአደጋ ጥምርታ ሙከራው ሪፖርት እናደርጋለን።
ደህንነቱ የተጠበቀ መሆኑን ይገምግሙ። አራቢየንሲስ ዋናው የናይትሮጅን ምንጩ ዩሪያ የሆነውን ሽንት በቀጥታ በመመገብ በ48 ሰዓታት ውስጥ (dpe) አስተናጋጅ ፍለጋ እና ደም የሚጠጡ ሴቶችን የመመገብ ሙከራዎችን ካደረገ በኋላ ለ4 ቀናት (ምስል 1A) ማግኘት ችሏል። አስተናጋጁን የሚፈልጉ እና ደም የሚጠቡ ሴቶች ከማንኛውም አመጋገብ ወይም ውሃ በበለጠ ሱክሮስን በብዛት ይወስዳሉ (F(5,426) = 20.15፣ p < 0.0001 እና F(5,299) = 56.00፣ p < 0.0001፣ በቅደም ተከተል፤ ምስል 1B,C)። በተጨማሪም አስተናጋጁን የሚፈልጉ ሴቶች በ168 ሰዓታት ሽንት ውስጥ ከነበረው ሽንት ጋር ሲነፃፀሩ በ72 ሰዓታት ውስጥ በሽንት ውስጥ የሚመገቡት መጠን አነስተኛ ነበር (ምስል 1B)። ዩሪያ የያዘ አመጋገብ ሲቀርብላቸው አስተናጋጁን የሚፈልጉ ሴቶች ከሌሎች ክምችቶች እና ውሃ ጋር ሲነፃፀሩ በ2.69 mM ውስጥ ከፍተኛ መጠን ያለው ዩሪያ ይወስዳሉ፣ ነገር ግን ከ10% ሱክሮስ (F(10,813) = 15.72፣ p < 0.0001፤ ምስል 1D)። ይህ ደም የሚጠጡ ሴቶች ከሚሰጡት ምላሽ ጋር የሚቃረን ነበር፣ ምንም እንኳን ከ10% ሱክሮስ በእጅጉ ያነሰ ቢሆንም (F(10,557) = 78.35፣ p < 0.0001፤ ምስል 1).1E)። በተጨማሪም፣ በሁለቱ የፊዚዮሎጂ ሁኔታዎች መካከል ሲነጻጸሩ፣ ፍሌቦቶሚድ የሆኑ ሴቶች ከአስተናጋጅ ከሚፈልጉ ሴቶች ይልቅ ዝቅተኛው ክምችት ላይ ዩሪያን ይጠጡ ነበር፣ እና እነዚህ ሴቶች በከፍተኛ ክምችት ተመሳሳይ መጠን ያለው ዩሪያ ይጠጡ ነበር (F(1,953)= 78.82፣ p < 0.0001፤ ምስል 1F፣ G)። ከዩሪያ የያዙ ምግቦች መውሰድ ጥሩ እሴቶች ያሉት ቢመስልም (ምስል 1D፣E)፣ በሁለቱም የፊዚዮሎጂ ሁኔታዎች ውስጥ ያሉ ሴቶች በጠቅላላው የዩሪያ ክምችት ክልል ውስጥ የሚወሰደውን የዩሪያ መጠን በሎግ-መስመራዊ መንገድ ማስተካከል ችለዋል (ምስል 1F፣G)። ) በተመሳሳይ፣ ትንኞች የሚወሰደውን የሽንት መጠን በመቆጣጠር የናይትሮጅን መምጠጥን የሚቆጣጠሩ ይመስላሉ፣ ምክንያቱም በሽንት ውስጥ ያለው የናይትሮጅን መጠን በሚወሰደው መጠን ውስጥ ስለሚንጸባረቅ (ምስል 1B፣ C እና B ኢንሴቶች)።
የሽንት እና የዩሪያ በአስተናጋጆች ፍለጋ እና ደም በሚጠባ የወባ ትንኝ ህልውና ላይ ያላቸውን ተጽእኖ ለመገምገም፣ ሴቶች በአራቱም የዕድሜ ክልል ውስጥ የሚገኙ ሽንት (ትኩስ፣ 24 ሰዓት፣ 72 ሰዓት እና 168 ሰዓት ከተወገደ በኋላ) እና የተለያዩ የዩሪያ ክምችቶችን እንዲሁም የተቀዳ ውሃ እና 10% ሱክሮስ እንደ መቆጣጠሪያ ሆኖ አገልግሏል (ምስል 2A)። ይህ የመትረፍ ትንተና እንደሚያሳየው አመጋገብ በአስተናጋጆች ፍለጋ ሴቶች ላይ በአጠቃላይ ህልውና ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ አሳድሯል (ሽንት፡ χ2 = 108.5፣ df = 5፣ p < 0.0001፤ ዩሪያ፡ χ2 = 122.8፣ df = 5፣ p < 0.0001፤ ምስል 2B፣ C) እና በደም በሚጠቡ ሴቶች (ሽንት፡ χ2 = 93.0፣ df = 5፣ p < 0.0001፤ ዩሪያ፡ χ2 = 137.9፣ df = 5፣ p < 0.0001፤ ምስል 2D፣E)። በሁሉም በተደረገላቸው ሙከራዎች መሠረት፣ ሴቶች የሽንት፣ የዩሪያ እና የውሃ አመጋገብን የሚመገቡ ሲሆን ከሱክሮስ አመጋገብ ከሚመገቡት ሴቶች ጋር ሲነጻጸር በእጅጉ ዝቅተኛ የመዳን መጠን አሳይተዋል (ምስል 2ቢ-ኢ)። ትኩስ እና የቆየ ሽንት የሚመገቡ አስተናጋጅ የሚፈልጉ ሴቶች የተለያዩ የመዳን መጠኖችን አሳይተዋል፣ ለ72 ሰዓታት የቆየ ሽንት የተመገቡት (p = 0.016) ዝቅተኛው የመዳን እድል አላቸው (ምስል 2ቢ)። በተጨማሪም፣ 135 mM ዩሪያ የሚመገቡ አስተናጋጅ የሚፈልጉ ሴቶች ከውሃ መቆጣጠሪያ ይልቅ ረዘም ላለ ጊዜ ኖረዋል (p < 0.04) (ምስል 2ሲ)። ከውሃ ጋር ሲነጻጸር፣ ትኩስ ሽንት እና 24 ሰዓት ሽንት የተመገቡ ሴቶች ረዘም ላለ ጊዜ ኖረዋል (p = 0.001 እና p = 0.012፣ በቅደም ተከተል፤ ምስል 2ዲ)፣ 72 ሰዓት ሽንት የተመገቡ ሴቶች ደግሞ ከተመገቡት ሴቶች ረዘም ላለ ጊዜ ኖረዋል (p < 0.0001 እና p = 0.013፣ በቅደም ተከተል፤ ምስል 2ዲ)። 135 mM ዩሪያ ሲመገቡ፣ ደም የሚመገቡ ሴቶች ከሌሎች የዩሪያ እና የውሃ ክምችት የበለጠ ረዘም ላለ ጊዜ ኖረዋል (p < 0.013፤ ምስል 2E)።
የላም ሽንትና ዩሪያን የሚመገቡ የአስተናጋጆችና ደም የሚጠጡ ሴት አኖፌልስ አራቢኒስ በሕይወት መትረፍ። በባዮአሳይ (A) ውስጥ፣ የሴት ትንኞች ትኩስና ያረጀ የላም ሽንት፣ የተለያዩ የዩሪያ ክምችቶች፣ ሱክሮስ (10%) እና የተጣራ ውሃ (H2O) የያዘ አመጋገብ ተሰጥቷቸዋል። የአስተናጋጅ ፍለጋ (B፣ C) እና ደም የሚጠባ (D፣ E) ትንኞች በሕይወት መትረፍ በየ12 ሰዓቱ ተመዝግቧል፣ ሁሉም ሴቶች ሽንት (B፣ D) እና ዩሪያ (C፣ E) እስኪመገቡ ድረስ፣ እና ሱክሮስና ውሃ እስኪሞሉ ድረስ።
በ24 ሰዓት የበረራ ወፍጮ ምርመራ ውስጥ የተወሰደው አጠቃላይ ርቀት እና የዙሮች ብዛት በአስተናጋጅ ፍለጋ እና ደም በሚጠቡ ትንኞች መካከል ልዩነት ነበረው፣ ይህም በአጠቃላይ አነስተኛ የበረራ እንቅስቃሴ አሳይቷል (ምስል 3)። ትኩስ እና ያረጀ ሽንት ወይም ሱክሮስ እና ውሃ የሚሰጡ አስተናጋጅ ፍለጋ ትንኞች የተለያዩ የበረራ ቅጦችን አሳይተዋል (ምስል 3)፣ ትኩስ ሽንት የሚመገቡ ሴቶች ጎህ ሲቀድ የበለጠ ንቁ ሲሆኑ፣ ሽንት የሚመገቡ 24 እና 168 ሰዓት ዕድሜ ያላቸው ትንኞች ደግሞ የተለያዩ የበረራ ቅጦችን አሳይተዋል እና በዋናነት በቀን የሚደረጉ ነበሩ። ሱክሮስ ወይም 72 ሰዓት ሽንት የሚሰጡ ሴት ትንኞች በ24 ሰዓት ጊዜ ውስጥ እንቅስቃሴ አሳይተዋል፣ ውሃ የሚያቀርቡ ሴቶች ደግሞ በወራት አጋማሽ ላይ የበለጠ ንቁ ነበሩ። ሱክሮስ የሚመገቡ ትንኞች በሌሊት እና በማለዳ ከፍተኛውን የእንቅስቃሴ ደረጃ አሳይተዋል፣ የ72 ሰዓት ዕድሜ ያላቸውን ሽንት የዋጡ ደግሞ በ24 ሰዓታት ውስጥ የማያቋርጥ የእንቅስቃሴ መቀነስ አሳይተዋል (ምስል 3)።
የአዳኝ ደም የሚጠባ ሴት አኖፌልስ አራቢኒስ የላም ሽንት እና ዩሪያን ሲመገቡ የበረራ አፈጻጸም። በበረራ ወፍጮ ምርመራ፣ ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት የሚመገቡ ሴት ትንኞች፣ የተለያዩ የዩሪያ፣ የሱክሮስ (10%) እና የተቀዳ ውሃ (H2O) ክምችት ከአግድም እና በነፃነት ከሚሽከረከሩ ክንዶች ጋር (ከላይ) ተያይዘዋል። ለአስተናጋጅ ፈላጊ (ግራ) እና ደም የሚጠባ (ቀኝ) ሴቶች፣ በ24 ሰዓት ጊዜ ውስጥ ለእያንዳንዱ አመጋገብ በሰዓት የሚደረጉ አጠቃላይ ርቀት እና የበረራዎች ብዛት ተመዝግቧል (ጥቁር፡ ግራጫ፤ ቀላል፡ ነጭ)። አማካይ ርቀት እና አማካይ የውጊያዎች ብዛት በሰርካዲያን እንቅስቃሴ ግራፉ ቀኝ በኩል ይታያል። የስህተት አሞሌዎች የአማካይውን መደበኛ ስህተት ይወክላሉ። የስታቲስቲክስ ትንተና ጽሑፉን ይመልከቱ
በአጠቃላይ፣ የአስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች አጠቃላይ የበረራ እንቅስቃሴ በ24 ሰዓት ጊዜ ውስጥ ከበረራ ርቀት ጋር ተመሳሳይ የሆነ ንድፍ ተከትሏል። አማካይ የበረራ ርቀት በተመገቡት ምግቦች (F(5, 138) = 28.27፣ p < 0.0001) እና 72 ሰዓታት ሽንት የበሉ የአስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች ከሌሎች ምግቦች ጋር ሲነፃፀሩ በጣም ረጅም ርቀት በረሩ (p < 0.0001)፣ እና በሱክሮስ የተመገቡ ትንኞች ከትኩስ (p = 0.022) እና ከ24 ሰዓት እድሜ ያላቸው ሽንት (p = 0.022) ከሚመገቡ ትንኞች ረዘም ላለ ጊዜ በረሩ። በሽንት አመጋገብ ከተገለጸው የበረራ እንቅስቃሴ ንድፍ በተቃራኒ፣ በዩሪያ የሚመገቡ የአስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች በ24 ሰዓት ጊዜ ውስጥ የማያቋርጥ የበረራ እንቅስቃሴ አሳይተዋል፣ በጨለማው ምዕራፍ ሁለተኛ አጋማሽ ላይ ከፍተኛ ደረጃ ላይ ደርሷል (ምስል 3)። የእንቅስቃሴ ቅጦች ተመሳሳይ ቢሆኑም፣ አስተናጋጅ ፈላጊ ሴቶች ዩሪያን የሚመገቡት አማካይ የበረራ ርቀትን በሚመገበው ክምችት ላይ በመመስረት በእጅጉ ጨምረዋል (F(5, 138) = 1310.91፣ p < 0.0001)። አስተናጋጅ የሚፈልጉ ሴቶች ማንኛውንም የዩሪያ ክምችት ከሚመገቡት በላይ ረዘም ላለ ጊዜ የሚመገቡ ሲሆን ይህም ሴቶች ውሃ ወይም ሱክሮስ ከሚመገቡት በላይ ነው (p < 0.03)።
የደም መምጠጥ ትንኞች አጠቃላይ የበረራ እንቅስቃሴ በሁሉም የአመጋገብ ዓይነቶች ውስጥ ለ24 ሰዓታት የተረጋጋ እና የቀጠለ ሲሆን፣ በውሃ ለሚመገቡ ሴቶች እንዲሁም ትኩስ እና 24 ሰዓት ለሆናቸው ሴቶች የሽንት እንቅስቃሴ ጨምሯል (ምስል 3)። የሽንት አመጋገብ በደም ለሚመገቡ ሴቶች አማካይ የበረራ ርቀት ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ ቢያሳድርም (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004)፣ የዩሪያ አመጋገብ ግን አላሳየም (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24)። ከሌሎች ሽንት እና የቁጥጥር አመጋገብ ጋር (ትኩስ፣ p = 0.0091፤ 72 ሰዓታት፣ p = 0.0022፤ 168 ሰዓታት፣ p = 0.001፤ ሱክሮስ፣ p = 0.0017፤ dH2O፣ p = 0.036)።
የሽንት እና የዩሪያ አመጋገብ በመራቢያ መለኪያዎች ላይ የሚያሳድረው ተጽእኖ በእንቁላል መጣል ባዮአሳይስ (ምስል 4A) ተገምግሟል እና በእያንዳንዱ ሴት በተወረወረው የእንቁላል ብዛት፣ በእንቁላል መጠን እና አዲስ በተፈለፈሉ የመጀመሪያ እጭዎች መሠረት ተመርምሯል። የተወረወሩ የእንቁላል ብዛት። በሽንት የሚመገቡ የአረብ ሴቶች በአመጋገብ ይለያያሉ (F(5,222) = 4.38፣ p = 0.0008፤ ምስል 4B)። ሴቶች ለ24 ሰዓት ሽንት ሲመገቡ፣ የደም ምግብ ከሌሎች የሽንት ምግቦች ከሚመገቡት ሴቶች በበለጠ እንቁላል ይጥላሉ እና ከተመገቡት ሱክሮስ ጋር ተመሳሳይ ነበሩ (ምስል 4B)። በተመሳሳይ፣ በሽንት የሚመገቡ ሴቶች የተወረወሩት የእንቁላል መጠን በአመጋገብ ይለያያል (F(5፣ 209) = 12.85፣ p < 0.0001)፣ በ24 ሰዓት ሽንት እና በሱክሮስ የሚመገቡ ሴቶች ከውሃ ከሚመገቡት ሴቶች በእጅጉ ትላልቅ እንቁላሎችን ሲጥሉ፣ በ168 ሰዓት ሽንት የሚመገቡት የሴቶች እንቁላሎች ደግሞ በእጅጉ ያነሱ ነበሩ (ምስል 4C)። በተጨማሪም፣ የሽንት አመጋገብ የእጭ መጠንን በእጅጉ ነክቷል (F(5፣ 187) = 7.86፣ p < 0.0001)፣ በ24 እና 72 ሰዓት ዕድሜ ክልል ውስጥ ባሉ ሴቶች ሽንት ከሚመገቡ እንቁላሎች ይልቅ ከእንቁላል እጭ ከሚወጡት እንቁላሎች በእጅጉ የሚበልጥ እጭ ይወጣል። ውሃ የሚመገቡ እና 168 ሰዓት ሽንት የሚመገቡ ሴቶች (ምስል 4D)።
የላም ሽንት እና ዩሪያን የሚመገቡ ሴት አኖፌልስ አራቢኒስ የመራቢያ አፈፃፀም። በደም የሚመገቡ ሴት ትንኞች ትኩስ እና ያረጀ የላም ሽንት፣ የተለያዩ የዩሪያ ክምችቶች፣ ሱክሮስ (10%) እና የተቀዳ ውሃ (H2O) ለ48 ሰዓታት በባዮአሳይስ ውስጥ ከማስገባት እና የእንቁላል መጣል ንጥረ ነገሮችን ከማግኘትዎ በፊት ለ48 ሰዓታት ይመገባሉ። የእንቁላል ቁጥር (B፣ E)፣ የእንቁላል መጠን (C፣ F) እና የእጮች መጠን (D፣ G) በተሰጠው አመጋገብ በእጅጉ ተጎድተዋል (የላም ሽንት፡ BD፤ ዩሪያ፡ EG)። የተለያዩ የፊደል ስሞችን በመጠቀም የሚለኩት ለእያንዳንዱ መለኪያ እርስ በእርስ በእጅጉ የተለዩ ነበሩ (የቱኪ ድህረ-ሆክ ትንተናን በመጠቀም የአንድ-መንገድ ANOVA፤ p < 0.05)። የስህተት አሞሌዎች የአማካይውን መደበኛ ስህተት ይወክላሉ።
ዩሪያ የሽንት ዋና ናይትሮጅን ንጥረ ነገር እንደመሆኑ መጠን፣ ደም ለሚጠቡ ሴቶች እንደ አመጋገብ ሲሰጥ፣ በሁሉም ጥናቶች የመራቢያ መለኪያዎችን በእጅጉ ነክቷል። ሴቶች ዩሪያን ከደም ከተመገቡ በኋላ የሚጥሏቸው እንቁላሎች ብዛት በዩሪያ ክምችት ላይ በመመስረት (F(11, 360) = 4.69፤ p < 0.0001)፣ ሴቶች ከ134 µM እስከ 1.34 mM የሚደርስ የዩሪያ ክምችትን ይመገባሉ (ምስል 4E)። 134 µM ወይም ከዚያ በላይ የዩሪያ ክምችትን የሚመገቡ ሴቶች በውሃ ከሚመገቡት ሴቶች የበለጠ ትላልቅ እንቁላሎችን ይጥላሉ (F(10, 4245) = 36.7፤ p < 0.0001፤ ምስል 4F)፣ እና የእጭ መጠን፣ ምንም እንኳን በእናቶች ውስጥ ተመሳሳይ የዩሪያ ክምችት ቢጎዳም (F(10, 3305) = 37.9፤ p < 0.0001) የበለጠ ተለዋዋጭ ነበር (ምስል 4G)።
በአስተናጋጅነት ለሚፈልጉ የከብት ሽንት ራስ ቦታ ተለዋዋጭ የሆኑ ተዋጽኦዎች አጠቃላይ መስህብ። በመስታወት ቱቦ ኦልፋክቶሜትር (ምስል 5A) የተገመገመው አራቢየንሲስ በሽንት ዕድሜ (χ2 = 15.9፣ df = 4፣ p = 0.0032፤ ምስል 5B) በእጅጉ ተጎድቷል። ከሆክ ትንተና በኋላ የተደረገው ጥናት እንደሚያሳየው በ24 ሰዓታት ውስጥ የቆየ የሽንት ሽታ ከሌሎች ሕክምናዎች ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ሁኔታ ከፍ ያለ የውበት ደረጃን አስከትሏል (72 ሰዓታት፡ p = 0.0060፣ 168 ሰዓታት፡ p = 0.012፣ ፔንቴን፡ p = 0.00070)፣ ከንፁህ ሽንት ሽታ በስተቀር (p = 0.13፤ ምስል 5B)። ደም የሚጠጡ ትንኞች ወደ ሽንት ሽታ ያላቸው አጠቃላይ መስህቦች በእጅጉ የተለየ ባይሆኑም (χ2 = 8.78፣ df = 4፣ p = 0.067፤ ምስል 5C)፣ እነዚህ ሴቶች ከቁጥጥር ጋር ሲነጻጸር ከ72 ሰዓት ዕድሜ ያለው ሽንት ጋር ሲነፃፀሩ ለጭንቅላት ቦታ ተለዋዋጭ ተዋጽኦዎች በጣም ማራኪ እንደሆኑ ተረጋግጧል። (p = 0.0066፤ ምስል 5C)።
የአስተናጋጁን እና የደም ምግባቸውን የሚመገቡ አኖፌልስ አራቢያነስን በመፈለግ ለተፈጥሯዊ እና ሰው ሰራሽ የላም የሽንት ሽታዎች የባህሪ ምላሾች። የመስታወት ቱቦ ኦልፋክቶሜትር (A) ንድፍ። ከትኩስ እና አሮጌ የላም ሽንት ወደ አስተናጋጅ (B) እና ደም የሚጠቡ (C) ትንኞች የሚስቡ የራስ ቦታ ተለዋዋጭ ተዋጽኦዎች። የጌታ አን የድንኳን ምላሽ ያግኙ። ከትኩስ (D)፣ 24 ሰዓት (E)፣ 72 ሰዓት (F) እና 168 ሰዓት (G) የቆዩ የላም ሽንት የተለዩ የጭንቅላት ቦታ ተዋጽኦዎች ይታያሉ። የኤሌክትሮን አንቴና ማወቂያ (EAD) ዱካዎች ከጋዝ ክሮማቶግራፍ የተወጣውን እና በነበልባል አዮኒዜሽን ማወቂያ (FID) በሚታወቀው የራስ ቦታ ውስጥ ባዮአክቲቭ ውህዶች ምላሽ የቮልቴጅ ለውጦችን ያሳያሉ። የመለኪያ አሞሌው የምላሽ ስፋት (mV) እና የማቆያ ጊዜ (s) ይወክላል። የባዮሎጂካል ንቁ ውህዶች ባህሪያት እና የመልቀቂያ መጠኖች (µg h-1) ይታያሉ። አንድ ኮከብ (*) ወጥ የሆነ ዝቅተኛ-ምጥጥን ምላሽ ያሳያል። ድርብ ኮከቦች (**) የማይባዙ ምላሾችን ያመለክታሉ። ያግኙ አስተናጋጅ (H) እና ደም የሚጠባው (I) አን.arabiensis ለትኩስ እና ለአሮጌ ላም የሽንት ሽታዎች በተዋሃዱ ውህዶች ላይ የተለያዩ ማራኪነቶች አሉት። ለተለያዩ የፊደል ስሞች የሚሳቡት የትንኞች አማካይ መጠን እርስ በእርስ በእጅጉ የተለየ ነበር (የቱኪ የድህረ-ሆክ ትንተናን በመጠቀም የአንድ-መንገድ ANOVA፤ p < 0.05)። የስህተት አሞሌዎች የመለኪያውን መደበኛ ስህተት ይወክላሉ።
አን.arabiensis የተባለች ሴት፣ ደም ከተመገበች በኋላ በ72 ሰዓታት እና በ120 ሰዓታት ውስጥ፣ በመራቢያ ወቅት፣ ከፔንቴን መቆጣጠሪያዎች ጋር ሲነጻጸር ከትኩስ እና አሮጌ የላም ሽንት የሚወጡ ተለዋዋጭ ንጥረ ነገሮችን በጭንቅላት ላይ ለማስቀመጥ ምንም ምርጫ አልታየም (χ2 = 3.07፣ p > 0.05፤ ተጨማሪ ፋይል 1፡ ምስል S1)።
ለሴት አን.arabiensis፣ የGC-EAD እና የGC-MS ትንታኔዎች ስምንት፣ ስድስት፣ ሶስት እና ሶስት ባዮአክቲቭ ውህዶችን ለይተዋል (ምስል 5D-G)። ምንም እንኳን የኤሌክትሮፊዚዮሎጂ ምላሾችን ያስከተሉ ውህዶች ብዛት ልዩነቶች ቢታዩም፣ አብዛኛዎቹ እነዚህ ውህዶች ከትኩስ እና አሮጌ ሽንት በተሰበሰበው በእያንዳንዱ የራስ ቦታ ተለዋዋጭ ፈሳሽ ውስጥ ይገኛሉ። ስለዚህ፣ ለእያንዳንዱ ማውጣት፣ ከገደቡ በላይ ካለው የሴት አንቴናዎች የፊዚዮሎጂ ምላሽ የሚያመነጩ ውህዶች ብቻ በተጨማሪ ትንታኔዎች ውስጥ ተካተዋል።
በጭንቅላት ክፍተት ስብስብ ውስጥ ያሉት የባዮአክቲቭ ውህዶች አጠቃላይ ተለዋዋጭ የመልቀቂያ መጠን ከ29 µg h-1 ትኩስ ሽንት ውስጥ ከነበረው ወደ 242 µg h-1 ጨምሯል፣ ይህም በዋናነት በp-cresol እና m-formaldehyde ምክንያት ፊኖል እንዲሁም ፊኖል ይጨምራል። በተቃራኒው፣ እንደ 2-cyclohexen-1-one እና decanal ያሉ ሌሎች ውህዶች የመልቀቂያ መጠን እየጨመረ በሄደ መጠን የሽንት ዕድሜ እየቀነሰ ይሄዳል፣ ይህም በክሮማቶግራም ውስጥ ካለው የምልክት ጥንካሬ (ብዛት) መቀነስ (ምስል 5D)-G ግራ ፓነል) እና ለእነዚህ ውህዶች የፊዚዮሎጂ ምላሾች ጋር ይዛመዳል (ምስል 5D-G የቀኝ ፓነል)።
በአጠቃላይ፣ ሰው ሰራሽ ድብልቅ በአዲስ እና በአሮጌ የሽንት ራስ ቦታዎች ውስጥ በሚለዋወጡ ተለዋዋጭ ንጥረ ነገሮች ውስጥ ተለይተው የሚታወቁ የባዮአክቲቭ ውህዶች ተመሳሳይ የተፈጥሮ ጥምርታ ነበረው (ምስል 5D–G) እና አስተናጋጅን ለመፈለግ (χ2 = 8.15፣ df = 4፣ p = 0.083፤ ምስል 5H) ወይም ደም የሚጠቡ ትንኞችን (χ2 = 4.91፣ df = 4፣ p = 0.30፤ ምስል 5I) ከፍተኛ ማራኪነት አላሳየም። ሆኖም፣ በሕክምናዎች መካከል የተደረጉት የድህረ-ሆክ ጥንድ ንፅፅሮች አስተናጋጅ የሚፈልጉ ትንኞች ከፔንቴን መቆጣጠሪያዎች ጋር ሲነፃፀሩ ለ24-ሰዓት ዕድሜ ላለው የሽንት ውህድ በጣም ማራኪ መሆናቸውን አሳይተዋል (p = 0.0086፤ ምስል 5H)።
በ24 ሰዓት ዕድሜ ላይ ባሉ ሽንት ውስጥ በተዋሃዱ ውህዶች ውስጥ የግለሰብ ክፍሎች ሚናን ለመገምገም፣ ስድስት የመቀነስ ድብልቆች በY-tube ምርመራ ውስጥ ከተሟሉ ድብልቆች ጋር ተገምግመዋል፣ በዚህም ውስጥ የግለሰብ ውህዶች ተወግደዋል። አስተናጋጅ ለሚፈልጉ ትንኞች፣ ከተሟሉ ድብልቅ ውስጥ የግለሰብ ውህዶችን መቀነስ በባህሪ ምላሾች ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ አሳድሯል (χ2 = 19.63፣ df = 6፣ p = 0.0032፤ ተጨማሪ ፋይል 1፡ ምስል S2A)፣ ሁሉም የመቀነስ ድብልቆች ከተሟሉ ድብልቅ ይልቅ ከትንሽ የበለጠ ማራኪ ነበሩ። በተቃራኒው፣ ከተሟሉ ድብልቅ ውስጥ የግለሰብ ውህዶችን ማስወገድ ደም የሚጠቡ ትንኞች የባህሪ ምላሾችን አልነካም (χ2 = 11.38፣ df = 6፣ p = 0.077)፣ ይህም ከዲካንታል በስተቀር፣ ይህም ከተሟሉ ድብልቅ ጋር ሲነጻጸር ዝቅተኛ ደረጃዎችን አስከትሏል (p = 0.022፤ ተጨማሪ ፋይል 1፡ ምስል S2B)።
በኢትዮጵያ በወባ በሽታ በተያዘ መንደር ውስጥ፣ በሜዳ ሁኔታዎች ውስጥ ትንኞችን ለመሳብ የ24 ሰዓት የላም ሽንት ሠራሽ ድብልቅ ውጤታማነት ለአስር ምሽቶች ተገምግሟል (ምስል 6A)። በአጠቃላይ 4,861 ትንኞች ተይዘው ተለይተዋል፣ ከእነዚህም ውስጥ 45.7% የሚሆኑት አንትሮፐስ.ጋምቢያe sl፣ 18.9% የሚሆኑት አኖፌልስ ፋሮኢንሲስ እና 35.4% የሚሆኑት Culex spp ናቸው። (ተጨማሪ ፋይል 1፡ ሠንጠረዥ S1)። አኖፌልስ አራቢኒስ በPCR ትንተና የታወቀው የአን.ጋምቢያን ዝርያ ውስብስብ ብቸኛው አባል ነው። በአማካይ፣ በአንድ ሌሊት 320 ትንኞች ተይዘዋል፣ በዚህ ጊዜ ውስጥ ሰው ሰራሽ ድብልቅ ማጥመጃዎች ያላቸው ወጥመዶች ድብልቅ ከሌላቸው ወጥመዶች ይልቅ ብዙ ትንኞችን ይይዛሉ (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001)። በሙከራው መጀመሪያ፣ መሃል እና መጨረሻ ላይ በእያንዳንዱ አምስት የቁጥጥር ምሽቶች ላይ ያልተጠመቁ ወጥመዶች ተቀምጠዋል። በእያንዳንዱ ጥንድ ውስጥ ተመሳሳይ ቁጥር ያላቸው የትንኞች ተይዘዋል። ወጥመዶች፣ ይህም በቤቶች መካከል ምንም ዓይነት አድልዎ አለመኖሩን ያሳያል (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) እና በጥናቱ ወቅት የህዝብ ቁጥር አለመቀነሱን ያሳያል። ከቁጥጥር ወጥመዶች ጋር ሲነጻጸር፣ ሰው ሰራሽ ድብልቅን በያዙ ወጥመዶች ውስጥ የተያዙት የትንኞች ብዛት በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል፡ የአስተናጋጅ ፍለጋ (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001)፣ የቅርብ ጊዜ የደም መመገብ (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) እና እርግዝና (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; ተጨማሪ ፋይል 1: ሠንጠረዥ S1)። ይህ በተያዙት አጠቃላይ የወባ ትንኞች ብዛት ላይም ይንጸባረቃል፡ የአስተናጋጅ ፍለጋ > ደም የሚጠባ > እርጉዝ > ከፊል እርጉዝ > ወንድ።
የ24 ሰዓት ሰው ሰራሽ የላም የሽንት ሽታ ድብልቅ ውጤታማነት የመስክ ግምገማ። የመስክ ሙከራዎች የተካሄዱት በደቡብ-ማዕከላዊ ኢትዮጵያ (ካርታ)፣ በማኪ ከተማ አቅራቢያ፣ በተጣመሩ ቤቶች ውስጥ የበሽታ መቆጣጠሪያ ማዕከል (CDC) የብርሃን ወጥመድ (በስተቀኝ) በመጠቀም ሲሆን፣ የላቲን ካሬ ዲዛይን (የአየር ምስል) (A) አለው። ሰው ሰራሽ ሽታ ያላቸው የሲዲሲ ፎቶትራፖች ሴት አኖፌልስ አረብቤስክ (B)ን፣ ነገር ግን አኖፌልስ ፋሮዎችን (C) በተለየ መንገድ አይስቡም፣ ፊዚዮሎጂያዊ ሁኔታ ላይ የተመሰረተ ውጤት አላቸው። በተጨማሪም፣ እነዚህ ወጥመዶች የአስተናጋጅ ኩሌክስ ትንኞችን በከፍተኛ ሁኔታ የጨመሩ ቁጥሮችን ይይዛሉ። (D) ከቁጥጥር ጋር ሲነፃፀሩ። በግራ በኩል ያሉት አሞሌዎች በጥንድ ሽታ ማጥመጃ (አረንጓዴ) እና ቁጥጥር (ክፍት) ወጥመዶች (N = 10) የተያዙ ትንኞች አማካይ የምርጫ መረጃ ጠቋሚን ይወክላሉ፣ በቀኝ በኩል ያሉት አሞሌዎች ደግሞ በጥንድ ቁጥጥር ወጥመዶች ውስጥ አማካይ የምርጫ መረጃ ጠቋሚን ይወክላሉ። (ክፍት፤ N = 5)። ኮከቦች የስታቲስቲክስ ጠቀሜታ ደረጃዎችን ያመለክታሉ (*p = 0.01 እና ***p < 0.0001)
ሦስቱ ዝርያዎች ሰው ሰራሽ ድብልቅ ነገሮችን በያዙ ወጥመዶች ውስጥ በተለየ መንገድ ተይዘዋል። አስተናጋጁን እየፈለጉ ነው (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001)፣ የደም መመገብ (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) እና እርግዝና (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) a.arabiensis ሰው ሰራሽ ድብልቅን በሚለቀው ወጥመድ ውስጥ ተይዟል (ምስል 6B)፣ የአን መጠን ግን አልለየም። በተለያዩ የፊዚዮሎጂ ሁኔታዎች ውስጥ ፋሮኔሲስ ተገኝቷል (ምስል 6C)። ለኩሌክስ፣ ሰው ሰራሽ ድብልቅን በሚፈልጉት ትንኞች ቁጥር ላይ ጉልህ የሆነ ጭማሪ ብቻ ተገኝቷል (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; ምስል 6D)፣ ከቁጥጥር ወጥመዶች ጋር ሲነጻጸር።
በወባ ትንኞች የከብት ሽንት ሽታ እንደ አስተናጋጅ መኖሪያ ምልክት አድርገው ይጠቀሙ እንደሆነ ለመገምገም ጥቅም ላይ ውለዋል። የማዳኛ ምልክቶች፣ ሙቀት፣ እና የከብት ሽንት ሽታ ሲኖር ወይም ሳይኖር፣ ትንኞች አልተያዙም (ተጨማሪ ፋይል 1፡ ምስል S3)። ሆኖም፣ ከፍተኛ ሙቀት እና የከብት ሽንት ሽታ በሚኖርበት ጊዜ፣ የሴት የወባ ትንኞች በሽንት ዕድሜ ላይ ሳይደርሱ በትንሽ ቁጥር ቢሳቡም ተማርከዋል (χ2(5፣ 25) = 2.29፣ p = 0.13፤ ተጨማሪ ፋይል 1፡ ምስል S3)። በአንፃሩ፣ የውሃ መቆጣጠሪያዎች የወባ ትንኞችን በከፍተኛ ሙቀት አልያዙም (ተጨማሪ ፋይል 1፡ ምስል S3)።
የወባ ትንኞች ናይትሮጅን የያዙ ውህዶችን በከብት ሽንት (ማለትም ኩሬዎች) በማካካሻ በመመገብ ያሰራጫሉ እና ያሰራጫሉ፣ ልክ እንደ ሌሎች ነፍሳት [2፣ 4፣ 24፣ 25፣ 26]። የላም ሽንት እንደ የከብት መሸፈኛዎች እና በገጠር ቤቶች እና በእንቁላጣ ቦታዎች አቅራቢያ ላሉ የወባ ቬክተሮች ማረፊያ ቦታዎች በቅርበት የተቆራኘ በቀላሉ የሚገኝ ታዳሽ ሀብት ነው። ሴት ትንኞች ይህንን ሀብት በማሽተት ያገኙታል እና በሽንት ውስጥ የናይትሮጅን ውህዶችን መውሰድ ይችላሉ፣ ዩሪያን ጨምሮ፣ በሽንት ውስጥ ዋናውን ናይትሮጅን አካል ጨምሮ [15፣ 16]። እንደ ሴት ትንኝ ፊዚዮሎጂያዊ ሁኔታ፣ በሽንት ውስጥ ያሉ ንጥረ ነገሮች የሚመደቡት የአስተናጋጅ ፍለጋ ሴት ትንኞች የበረራ እንቅስቃሴ እና ህልውና እንዲሁም በመጀመሪያው የጎናዶትሮፒክ ዑደት ወቅት የደም የሚመገቡ ግለሰቦችን የመትረፍ እና የመራቢያ ባህሪያትን ለማሻሻል ነው። ስለዚህ፣ የሽንት ድብልቅ እንደ ምግብ እጥረት ላለባቸው አዋቂዎች የተዘጉ የወባ ቬክተሮች አስፈላጊ የአመጋገብ ሚና ይጫወታል [8]፣ ምክንያቱም ሴት ትንኞች በዝቅተኛ አደጋ ላይ በመመገብ አስፈላጊ ናይትሮጅን ውህዶችን የማግኘት ችሎታ ይሰጣቸዋል። ይህ ግኝት ሴቶች የህይወት ዘመናቸውን፣ እንቅስቃሴያቸውን ሲጨምሩ ከፍተኛ የሆነ የወረርሽኝ ውጤቶች አሉት እና የመራቢያ ውጤት፣ እነዚህ ሁሉ የቬክተር አቅምን ይነካሉ። በተጨማሪም፣ ይህ ባህሪ የወደፊት የቬክተር አስተዳደር ፕሮግራሞች ኢላማ ሊሆን ይችላል።