Nutrient acquisition and distribution integrates insect foraging and life history traits.To compensate for deficiencies in specific nutrients at different life stages, insects can obtain these nutrients through supplemental feeding, for example, by feeding on vertebrate secretions in a process known as puddles.The mosquito Anopheles arabiani appears to be malnourished and, therefore, requires nutrients for both metabolism and reproduction.The aim of this study was to assess whether An.Kacdoonka arabiensis ee kaadida lo'da ee helitaanka nafaqo waxay hagaajisaa sifooyinka taariikhda nolosha.
Hubi in ay badbaado leedahay.arabiensis waxaa soo jiitay urta cusub, 24-saac, 72-saacadood, iyo 168-saacadood kaadida lo'da, iyo marti-raadinta iyo dhiig-quudinta (48-saacadood cuntada ka dib) dheddigga waxaa lagu cabbiray olfactometer-Y-tube ah, iyo dheddigga uurka leh ayaa lagu qiimeeyay kombuyuutar kiimiko ah oo la isku daray. Kaadi dhammaan afarta da'da. duulista, iyo taranka.
Raadi dhiigga martida loo yahay.In shaybaarka iyo goobaha cilmi-baarista, Carabta ayaa lagu sawiray in udgoonka dabiiciga ah iyo synthetic ee kaadida lo'da cusub iyo da'da. Haweenka uurka leh waxay ahaayeen kuwo aan dan ka lahayn jawaabaha kaadida lo'da at sites. Marti-raadinta iyo dheddigga dhiig-nuugista si firfircoon u nuugaan kaadida lo'da iyo HOL al, ama taranka.
Qaadashada Anopheles arabinis iyo qaybinta kaadida lo'da si loo hagaajiyo sifooyinka taariikhda nolosha
Helitaanka nafaqeynta iyo qaybinta nafaqadu waxay isku daraysaa caleenta cayayaanka iyo sifooyinka taariikhda nolosha [1,2,3] . Cayayaanka ayaa awood u leh inay doortaan oo helaan cunto oo ay sameeyaan quudin magdhow ah oo ku salaysan helitaanka cuntada iyo shuruudaha nafaqada [1, 3. Qaybinta nafaqooyinka waxay ku xiran tahay geeddi-socodka nolosha-taariikhda waxayna keeni kartaa shuruudo kala duwan oo loogu talagalay tayada cuntada iyo tirada qaybaha kala duwan ee nafaqooyinka, si loo helo nafaqooyinka heerarka kala duwan. nafaqooyinkan iyada oo loo marayo quudinta dheeriga ah, sida dhoobada, saxarada kala duwan iyo dheecaanka laf dhabarta, iyo bakhtiga, habka loo yaqaan puddles [2]. In kasta oo noocyo kala duwan oo balanbaalis iyo aboor ah ayaa ugu horreyn lagu tilmaamay, godad waraabinta waxay sidoo kale ku dhacaan amarrada kale ee cayayaanka, iyo soo jiidashada iyo quudinta noocyadan kheyraadka ah waxay saameyn weyn ku yeelan karaan caafimaadka iyo nolosha kale, 6. Anopheles gambiae sensu lato (sl) waxay u soo baxdaa sidii qof weyn oo 'nafaqo-darro ah' [8], sidaas darteed waraabinta ayaa laga yaabaa inay door muhiim ah ka ciyaaraan sifooyinka taariikhda nolosha, laakiin dhaqankan ilaa hadda waa la dayacay . Isticmaalka kicinta oo ah habka kordhinta nafaqada ee gaadiidkan muhiimka ah ayaa dammaanad qaadaya dareenka sababtoo ah tani waxay yeelan kartaa cawaaqibyo faafa oo muhiim ah.
Qaadashada Nitrogen-ka ee kaneecada Anopheles ee dumarka qaangaarka ah ayaa xaddidan sababtoo ah kaydka kalooriyada hoose ee laga soo qaaday marxaladda dirxiga iyo isticmaalka aan fiicnayn ee cuntada dhiigga [9]. waxay isticmaali kartaa quudinta dheeriga ah ee qashin-qubka laf-dhabarta si ay u helaan xeryahooda nitrogenous kuwaas oo kor u qaadaya la qabsiga iyo duulimaadka, sida ay muujiyeen cayayaanka kale [2]. Marka la eego, soo jiidashada xooggan oo kala duwan ee mid ka mid ah noocyada walaalaha ah ee gudaha An. Gambian sl nooc kakan, Anopheles arabinis, kaadida lo'da cusub iyo da'da ah [12,13, isportun] waa mid xiiso leh. loo yaqaan in lala xiriiriyo oo la quudiyo xoolaha y oo ka mid ah kuwa soo saara xayndaabyada sunta kaneecada) way koraan [15], taas oo noqon karta dhedig Ann.arabiensis ayaa doorbidaya inay soo jiidato kaadida da'da 24 saacadood ama ka yar [13, 14].
Daraasaddan, martida loo yahay iyo Ans-da dhiigga ayaa la raadiyay. Inta lagu jiro wareegga ugu horreeya ee gonadotropin, arabiensis ayaa lagu qiimeeyay helitaanka xeryahooda nitrogenous, oo ay ku jiraan HOL, isku-darka kaadida si loo go'aamiyo in kuwani ay bixiyeen tilmaamo lagu kalsoonaan karo oo loogu talagalay martida loo yahay iyo kuwa dhiigga lagu quudiyo An. Raadinta kheyraadkan nafaqada ee suurtogalka ah, arabiensis waxay ogaatay isku-xirnaanta kiimikada ka dambeysa soo jiidashada kala duwanaanta la arkay.Soo jiidashada kaneecada.Natiijooyinka la helay ayaa xaqiijinaya in An.arabiensis waxay helaysaa oo u qaybisaa xeryahooda nitrogenous ee laga helo kaadida laf dhabarta si ay u saameeyaan sifooyinka taariikhda nolosha. Natiijooyinkan waxaa looga hadlay macnaha cawaaqibka cudurrada faafa ee suurtagalka ah iyo sida loogu isticmaali karo ilaalinta iyo xakamaynta vector.
Anopheles arabicans (Dongola strain) ayaa lagu hayaa 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH iyo 12:12 h iftiin: wareegga mugdiga ah Nolato Hertila, Åstorp, SE) ka dibna loo wareejiyay baqashada Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) si loogu oggolaado soo bixitaanka qaangaarka. Hoos. Dumarkii loo isticmaalay tijaabada tuubada duulimaadka ayaa gaajoonayay kaliya 4-6 saacadood oo leh biyo ad libitum. Si loogu diyaariyo kaneecada dhiigga jaqaya ee bioassays xiga, 4 dpe dheddigga ah ayaa la siiyay dhiigga idaha defibrotic (Håtunalab, Bro, SE) iyadoo la adeegsanayo nidaamka quudinta xuubabka (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK) si toos ah ayaa loo bixiyaa. ama 10% sucrose ad libitum 3 maalmood ka hor tijaabooyinka hoos lagu sharaxay. Dumarkii dambe waxaa loo isticmaalay bioassays tube duulimaadka waxaana loo wareejiyay shaybaarka, ka dibna waxay lahaayeen biyaha ad libitum ee 4-6 saacadood ka hor tijaabada.
Qiimaynta quudinta ayaa loo isticmaalay in lagu qiyaaso isticmaalka kaadida iyo urea ee qaangaarka An. Arab . Marti-geliyaha iyo dheddigga dhiig-miirashada ayaa la siiyay cunto ay ku jiraan 1% kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah ee la qasi jiray, xaddi kala duwan oo urea ah, iyo laba kontorool (10% sukrose iyo biyaha) ee 48 h. Intaa waxaa dheer, midabaynta cuntada (1 mg-xyyan 1 mg-5 C) gma-Aldrich, Stockholm, SE) ayaa lagu daray cuntada waxaana lagu soo bandhigay 4 × 4 matrix in 250 µl microcentrifuge tubes (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Jaantuska 1A) Buuxi cidhifka (~ 300 µl) .Si looga fogaado tartanka u dhexeeya kaneecada iyo saamaynta suurtagalka ah ee saxanka 1 ee 1 moqui2 cm dhererka; Semadeni, Ostermundigen, CH; Jaantus 1A) mugdi dhamaystiran oo ah 25 ± 2 cm ° C iyo 65 ± 5% qoyaan qaraabo ah. Tijaabooyinkan ayaa lagu soo celiyay 5 ilaa 10 jeer. Ka dib marka la soo bandhigo cuntada, kaneecada ayaa la dhigayaa -20 ° C ilaa falanqayn dheeraad ah.
U fiirso kaadida lo'da iyo kaadida oo ay nuugo qofka martida loo yahay iyo dhedigga dhiigga jaqa Anopheles arabianus. In tijaabada quudinta (A), kaneecada dheddigga waxaa la siiyay cunto ka kooban kaadi sac cusub iyo mid duq ah, xaddi kala duwan oo urea, sukrose (10%), iyo biyo la miiray (H2O). dheddigga nuugo kaadida lo'da 72-saac in ka yar 168-saac kaadi lo'da (B) .The celceliska wadarta nitrogen content (± heerka weecinta) ee kaadida waxaa lagu matalaa inset. Marti-raadinta (D, F) iyo dhiig-nuugista (E, G) dheddigga qaadan ilaa HOL in a dose-based. ; p <0.05)
Si loo sii daayo cuntada la nuugo, kaneecada si gaar ah ayaa loo geliyay 1.5 ml tuubooyinka microcentrifuge oo ay ku jiraan 230 µl oo biyo nadiif ah iyo nudaha ayaa la carqaladeeyey iyadoo la adeegsanayo matoor la tuuri karo iyo xadhig la'aan (VWR International, Lund, SE), oo ay ku xigto centrifugation 10 krpm 10 min . ma-Aldrich) iyo nuugista (λ620) waxaa lagu go'aamiyey iyadoo la isticmaalayo spectrophotometer-ku salaysan akhristaha microplate (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm) 00, Shimadzu, Kista, SE) .Si loo qiyaaso qaadashada cuntada, qalooca caadiga ah ayaa lagu diyaariyay qasitaan taxane ah si uu u soo saaro 0.2 µl ilaa 2.4 µl 1 mg ml-1 xylene cyanide. Kadibna, cufnaanta indhaha ee dheeha la yaqaan ayaa loo isticmaalay si loo go'aamiyo qadarka cuntada kaneecada kasta.
Xogta mugga ayaa lagu falanqeeyay iyada oo la adeegsanayo falanqaynta hal dhinac ee kala duwanaanta (ANOVA) oo ay ku xigto Tukey's post hoc pairwise isbarbardhigga (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007). 0 ee Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
Qiyaastii 20 µl ee muunadaha kaadida ee koox kasta oo da 'kasta ah ayaa lagu xidhay Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) iyo ku duuban kaabsal daasad ah (8 mm × 5 mm) Kaabsoosha ayaa la geliyey qolka gubanaya ee CHNS,000 Finciant CHNS. , US) si loo go'aamiyo waxa ku jira nitrogen ee kaadida cusub iyo kuwa da'da ah sida ku cad nidaamka soo saaraha
Si loo qiimeeyo saameynta cuntada ay ku leedahay badbaadada martida martida loo yahay iyo kuwa dhiigga jaqaya, kaneecada ayaa si gaar ah loogu dhejiyay suxuunta waaweyn ee Petri (12 cm dhexroor iyo 6 cm oo dherer ah; Semadeni) oo leh godad daboolan oo daboolan oo dabool ah (3 cm dhexroor) oo leh hawo iyo cunto. sukrose iyo biyo.Cunto kasta waxa lagu shubay tuubbada tampon ilkaha (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) oo la geliyo 5 ml sirinji (Thermo Fisher Scientific, Göteborg, SE), tuubada laga saaray, oo la dul saaray saxan petri (sawirka 1) kaneecada ayaa la tuuray ilaa kaneecada ugu danbeysa ay dhimato (n = 40 daaweyn kasta) . Badbaadinta kaneecada lagu quudiyo cuntooyin kala duwan ayaa si tirakoob ah loo falanqeeyay iyadoo la adeegsanayo qalooca badbaadada Kaplan-Meyer iyo imtixaannada darajada log si loo barbardhigo isbarbardhigga qaybinta badbaadada ee u dhexeeya cuntooyinka (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Duuliyaha kaneecada caado u ah oo ku salaysan Attisano et al.[17], oo ka samaysan 5 mm dhumucdiisuna waxay tahay 5 mm dhumucdiisuna waxay tahay 5 mm dhumucdiisuna waxay tahay 10 cm dheer x 10 cm sare oo aan hore iyo gadaal (Jaantus. 3: top) . ymium magnets isu jira 9 cm. Tuubo siman oo ka samaysan isla wax la mid ah (6.5 cm L) ayaa kala qaybisay tuubada toosan si ay u samaysato cudud isku xidhan iyo cudud sidday qayb yar oo bireed aluminium ah oo ah calaamad iftiin ah.
Dumarka 24-saacadood-gaajaysan ayaa la siiyay cuntada kor ku xusan 30 daqiiqo ka hor inta aan la xakameynin. Kaneecada dheddigga ah ee si buuxda loo quudiyo ayaa markaa si gaar ah loogu suuxiyay barafka 2-3 min waxaana lagu dhejiyay biinanka cayayaanka leh beeswax (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) ka dibna waxaa lagu duubay tuubooyinka gaaska logger, ka dibna lagu kaydiyaa oo la soo bandhigay iyadoo la isticmaalayo PC-Lab 2000 ™ software (v4.01; Velleman, Gavere, BE) .Duulidda duulista waxaa la dhigay qol cimilo- nidaamisay (12 h: 12 h, iftiin: mugdi, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Si loo sawiro qaabka dhaqdhaqaaqa duulimaadka, wadarta guud ee duulimaadka (m) iyo tirada guud ee hawlaha duulimaadka ee isku xiga ayaa la xisaabiyay saacadiiba saacada 24. Intaa waxaa dheer, celceliska masaafada u duulaya dumarka shakhsi ahaaneed ayaa la barbardhigay daawaynta oo lagu falanqeeyay iyada oo la adeegsanayo hal-jidka ANOVA iyo Tukey's post hoc analysis (JMP Pro, v14.0.0), celceliska masaafada daawaynta ee SAS, halka celcelis ahaan masaafada daweynta Inc. celceliska tirada wareegyada waxaa lagu xisaabiyaa 10-daqiiqo oo dheeraad ah.
Si loo qiimeeyo saameynta cuntada ee waxqabadka taranka ee An.arabiensis, lix dumar ah (4 dpe) ayaa si toos ah loogu wareejiyay baqashada Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) ka dib ururinta dhiigga ka dibna la siiyay cuntada tijaabada ah ee 48 h sida kor lagu sharaxay. Saacadaha 4. Ku celi nidaam kasta oo cunto ah 20-50 jeer. Ukunta ayaa la tiriyay oo la duubay qafis kasta oo tijaabo ah. Tusaalooyinka ukumaha ayaa loo isticmaalay si loo qiimeeyo celceliska cabbirka iyo dhererka kala duwanaanshaha ukumaha shakhsi ahaaneed (n ≥ 200 cunto kasta) iyadoo la adeegsanayo microscope Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, DE) DE CameraLeica Microsystems Ltd. DE) , Machadka SAS Inc.).
Kaadida da'da ah ee laga soo ururiyay lo'da Zebu, jinsiyadaha Arsi ayaa laga soo ururiyay muunado laga soo qaaday lo'da Zebu, jinsiyadaha Arsi. Si ay ugu sahlanaato, kaadida ayaa la qaaday subaxii hore iyadoo lo'da ay weli ku jiraan bakhaarka. (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH iyo Co., Minden, DE) ee 3 l polyamide oo dabool leh Durbaannada caaga ah ee vinyl chloride. Headspace volatiles ka mid kasta oo muunad kaadi bovine ah ayaa la soo ururiyey si toos ah (cusub) ama ka dib korriinka heerkulka qolka 24 h, 72 h iyo 168 muunad kasta oo ka mid ah koox kasta oo h.
Ururinta isbeddellada madax-bannaanida, nidaamka wareegga-xiran ayaa loo isticmaalay in lagu wareejiyo qulqulka gaaska kaarboon-filtered ee firfircoon (100 ml min-1) iyada oo loo marayo bacda polyamide ilaa tiirka xayeysiiska ee 2.5 h iyadoo la adeegsanayo bamka vacuum diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE) .5 cm x 3 mm id) oo ka kooban 35 mg ee Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) inta u dhaxaysa furayaasha dhogorta dhalada ah. Isticmaalka ka hor, tiirarka waxaa lagu daadiyey 1 ml oo dib loo soo celiyay n-hexane (Merck, Darmstadt, DE) iyo 1 ml pentane% pentane (99 ad) 400 μl oo pentane ah ayaa la ururiyey ka dibna lagu kaydiyey -20°C ilaa loo isticmaalo falanqayn dheeraad ah.
Jawaabaha habdhaqanka ee marti-raadinta iyo dhiig-cunista An.Headspace-ka-soo-baxyada kacsan ee laga soo ururiyay kaadida cusub, 24-h, 72-h, iyo 168-h-ah-kaadi ayaa lagu falanqeeyay ka-soo-baxyada kacsan ee kaneecada Arabidopsis iyadoo la adeegsanayo tuubo muraayad toosan olfactometer [18]. 9] . Tuubada muraayadda olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) ayaa lagu iftiimiyay 3 ± 1 lx iftiinka cas ee korka ah. Dhuxusha la sifeeyay iyo qulqulka hawada qoyan (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% qoyaan qaraabo ah) ayaa ka gudbay bioassay at 30 cm s-1. Hawo-la'aanta waxaa la dhex maraa taxane ah qaab-dhismeed bir ah oo dhejis ah. n qaybiye (4 cm × 1 cm; L: D; DAB Ilkaha AB), laga hakiyay gariiradda 5 cm ee dabaysha dabayl ee olfactometer, oo leh kiciya isbeddelaya 5 daqiiqo kasta. Falanqaynta, 10 μl kasta oo laga soosaaray madax bannaan, qasi 1:10, ayaa loo isticmaalay sidii kicin. Qadar siman oo ah pentane-ka-hortagga ayaa loo adeegsaday sidii mooryaan. Qafis sii daaya 2-3 saacadood ka hor bilowga tijaabada 30 jeer, iyo si looga fogaado saameynta hal maalin, tiro isku mid ah daaweynta iyo xakamaynta ayaa la tijaabiyay maalin kasta oo tijaabo ah. Raadi jawaabaha martigeliyaha iyo dhiigga Ans. Carabiga oo ka soo horjeeda madax-madaxeed ayaa lagu falanqeeyay iyada oo la adeegsanayo dib-u-celinta saadka ee magaca leh oo ay ku xigto isbarbardhigga laba-geesoodka ah ee saamiyo aan caadi ahayn (JMP Pro, v14.0.0, SAS Inc.).
Jawaabta taranka ee hawada sare ee laga soo saaray kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah ayaa lagu falanqeeyay qafisyada Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science) l oo ka mid ah soosaar kasta oo madax bannaan oo ah 1: 10 dilution. Qadar siman oo pentane ah ayaa loo isticmaalay si loo hagaajiyo koobka xakamaynta. Daaweynta iyo koobabka xakamaynta ayaa la isku dhaafsaday inta u dhaxaysa tijaabo kasta si loo xakameeyo saamaynta booska koobka xakamaynta)/(tirada guud ee ukumaha la dhigay)
Gas chromatographic iyo ogaanshaha qaabka anteenada elektarooniga ah (GC-EAD) falanqaynta dheddigga An.arabiensis ayaa la sameeyay sidii hore loogu sharraxay [20] .iyo kaadida gabowga. 4 psi ee nitrogen ayaa lagu daray oo lagu kala qaybiyay 1: 1 Gerstel 3D / 2 iskutallaabta mugga hoose ee dhintay (Gerstel, Mülheim, DE) inta u dhaxaysa qalabka ionization ololka iyo EAD. Qalabka dareeraha ee GC ee EAD waxaa la sii mariyey khadka wareejinta Gerstel ODP-2, kaas oo la socdo heerkulka foornada GC ee lagu daray 5 × 0 cm, dhexda ah hawada (1.5 l min-1) .Anteenada waxaa la dhigay 0.5 cm ka soo baxa tuubada.Kaneecada shaqsi kasta ayaa ku xisaabtameysa hal nuqul, iyo kaneecada martida loo yahay, ugu yaraan saddex nuqul ayaa lagu sameeyay muunada kaadida ee da 'kasta.
Aqoonsiga xeryahooda bioactive ee ururinta hawada sare ee kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah iyadoo la adeegsanayo isku-darka GC iyo spectrometer mass (GC-MS; 6890 GC iyo 5975 MS; Teknolojiyadda Agilent) si loo soo saaro jawaabaha anteenada ee falanqaynta GC-EAD, oo ku shaqaynaysa habka ionization saamaynta elektarooniga ah ee 70 eVMS-5 × 0.25 mm dhexroorka gudaha, dhumucda filimka 0.25 μm) iyadoo la isticmaalayo helium sida marxaladda wareega oo leh celceliska qulqulka qulqulka tooska ah ee 35 cm s-1.A 2 μl muunad ayaa lagu duray iyadoo la adeegsanayo goobaha duritaanka iyo heerkulka foornada ee GC-EAD. xeryahooda ayaa lagu xaqiijiyay duritaanka heerarka dhabta ah (Faylka Dheeraadka ah 1: Shaxda S2) .Tirinta, heptyl acetate (10 ng, 99.8% nadiifinta kiimikada, Aldrich) ayaa lagu duray sida heerka dibadda.
Qiimaynta waxtarka isku dar ah urta synthetic oo ka kooban xeryahooda bioactive ee lagu aqoonsaday kaadida cusub iyo kuwa da'da ah si ay u soo jiitaan martida-raadinta iyo dhiig-nuujinta Ans.arabiensis, iyadoo la adeegsanayo olfactometer isku mid ah iyo borotokoolka sida kor ku xusan. Isku-darka synthetic waxay ku ekaayeen halabuurka iyo saamiga isku-dhafka ee isku-dhafka madax-bannaan ee isku-dhafka ah ee madax-xanuunsan2-hour-hour, 8-hour, 8-hour, 1-hour, 1-Hour, Hour-2, Hour, Hour, Hour, 1, Hour, Hour, Hour, Hour, 1, Hour, Hour, Hour, Hour, Hour. 8-saacadood kaadida da'da ah (Jaantuska 5D-G; Faylka Dheeraadka ah 1: Shaxda S2) .Si loo falanqeeyo, isticmaal 10 μl of 1: 100 dilution oo ah isku-darka dhamaystiran ee synthetic, oo leh qiyaasta guud ee sii-deynta oo u dhexeysa qiyaastii 140-2400 ng h-1, si loo qiimeeyo soo jiidashada martida iyo kaneecada dhiigga, tijaabinta kaneecada hoose ee isku-dhafka ah. Isku darka dhamaystiran waa la saarayaa.Ka raadso jawaabaha martida loo yahay iyo kuwa dhiigga lagu quudiyo Ans.Arab vs synthetic iyo subtractive mixes waxaa lagu falanqeeyay iyada oo la adeegsanayo dib-u-celinta saadka ee magac-u-yaalka ah oo ay ku xigto isbarbardhigga saamiyada aan caadiga ahayn (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Si loo qiimeeyo bal in kaadida lo'da ay u adeegi karto inay noqoto meel ay ku nool yihiin oo loogu talagalay kaneecada duumada, kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah, ee la soo ururiyay sida kor lagu sharaxay, iyo biyaha waxaa la dhex galiyay 3 l baaldi (100 ml) oo la shiiday oo la dhigay dabinno sed ah.(BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE).Toban dabin ayaa la dhigay meel 50 m u jirta daaqa, 400m bulshada tuulada (Silay, Ethiopia, 5°53′24′N, 37°29′24′′E) iyo wax lo’ ah, oo ku yaal dhul daaqsimeedka joogtada ah iyo tuulooyinka. Habeenkii la cunay wadar ahaan shan habeen. Tirooyinka kaneecada ee lagu qabtay dabinka lagu buufiyay kaadida da'aha kala duwan ayaa la barbar dhigay iyadoo la isticmaalayo dib u dhac ku yimaada saadka oo leh qaybinta beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Tuulo duumo-demic ah oo u dhow magaalada Maki, gobolka Oromia, Itoobiya (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Jaantuska 6A) .Daraasadda ayaa la sameeyey intii u dhaxaysay badhtamihii Agoosto iyo badhtamihii Sebtembar ka hor inta aan la buufin gudaha gudaha sannadlaha ah, oo ay weheliso xilli roobaadyo dheer. Shan-labo-5 ayaa ku yaal bannaanka bannaanka. 6A) .Shuruudaha lagu soo xulay guryaha waxaa ka mid ahaa: in aan guriga lagu soo darin xoolo, lama ogola in gudaha wax lagu karsado (xabo ama dhuxul la sawiro) (ugu yaraan inta lagu jiro xilliga tijaabada), iyo guryaha ugu badnaan laba qof oo deggan, oo lagu seexdo sunta cayayaanka.iyadoo la raacayo shabkada kaneecada ee lagu daweeyay. Ansixinta anshaxeed ayaa la siiyay Guddiga Dib-u-eegista Anshaxa Cilmi-baarista ee Hay'adda (IRB/022/2016) ee Kulliyadda Sayniska Dabiiciga ah (CNS-IRB), Jaamacadda Addis Ababa, iyadoo la raacayo tilmaamaha ay dejiyeen Baaqa Ururka Caafimaadka Adduunka ee Helsinki heerka. Naqshadaynta tijaabada ah waxay raacday naqshadaynta labajibbaaran ee 2 × 2 Laatiin, kaas oo isku-dhafka synthetic iyo kontaroolada loo qoondeeyay guryaha lammaanaha habeenkii ugu horreeya oo lagu kala beddelo guryaha habeenkii tijaabada ah ee soo socda. Habkani wuxuu soo noqnoqday toban jeer. Intaa waxaa dheer, si loo qiyaaso dhaqdhaqaaqa kaneecada ee guryaha la soo xulay, dabinnada CDC ayaa loo dejiyay inay socdaan shan habeen oo isku xigta bilowga tijaabada maalinta dhexe iyo dhamaadka maalinta tijaabada.
Isku-darka synthetic oo ka kooban lix xeryood oo bioactive ah ayaa lagu milmay heptane (97.0% dareeraha GC darajada, Sigma Aldrich) waxaana lagu sii daayay 140 ng h-1 iyadoo la isticmaalayo qalab suuf ah [20]. (CDC) dabinka khafiifka ah (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Jaantus 6A) Ka dib ayaa la baadhay iyada oo la adeegsanayo falanqaynta silsiladda polymerase (PCR) si loo aqoonsado noocyada qaab-dhismeed ahaan loo aqoonsaday inay yihiin A. gambiae sl. Xubnaha kakan [23].Daraasadda goobta, dabinka dabinnada guryaha lammaanaha ah ayaa la falanqeeyay iyadoo la adeegsanayo qaab ku habboon saadka magac ahaan, halkaas oo soo jiidashada ay ahayd doorsoomiyaha ku-tiirsanaanta iyo daaweynta (isku-darka synthetic vs control) waxay ahayd saamaynta go'an (J.MP0).0. Machadka SAS Inc.).Halkan, waxaan ka warbixineynaa χ2 iyo p-qiimaha laga soo bilaabo tijaabada saamiga suurtagalka.
Qiimee in ay badbaado tahay iyo F (5,299) = 56.00, p <0.0001, siday u kala horreeyaan; Jaantuska. 1B,C) .Waxaa intaa dheer, dumarka martida loo yahay waxay cuneen wax yar kaadida saacadaha 72 marka la barbar dhigo kaadida saacadaha 168 (Jaantus. 1B) .Marka la bixiyo cunto ka kooban urea, martigeliyaha-raadinta dheddigga, qadarka biyaha ee 6 ayaa si weyn u nuugaya marka loo eego 6 m. laga sooci karaa 10% sukrose (F (10,813) = 15.72, p <0.0001; Jaantuska 1D) Tani waxay ka duwan tahay jawaabta haweenka dhiigga ku quudiya, kuwaas oo sida caadiga ah si aad ah u nuugay cuntooyin badan oo urea ku jira marka loo eego biyaha, inkasta oo ay aad uga yar tahay 10% sucrose (F(10,50.0). 1.1E) .Waxaa intaa dheer, marka la barbardhigo labada dawladood ee jireed, dheddigga phlebotomized waxay nuugeen kaadi badan marka loo eego dheddigga martida loo yahay ee ugu hooseeya, dheddiggani waxay nuugeen xaddi la mid ah urea oo aad u sarreeya (F(1,953)= 78.82, p <0.0001;Jaantus. 1F, G) .In kasta oo qaadashada cuntada urea-ku jirta ay u muuqatay in ay leedahay qiyamka ugu fiican (Jaantus 1D, E), dheddigga labada dawladood ee jireed waxay awoodeen in ay beddelaan qadarka HOL ee la nuugo dhammaan qaybaha urea ee qaabka log-linear fashion (Jaantus 1F, G)..Si la mid ah, kaneecadu waxay u muuqataa inay xakamayso qaadashada nitrogen-ka iyada oo nidaamisa qadarka kaadida ee nuugista, maadaama qadarka nitrogen ee kaadidu ay ka muuqato qadarka nuugista (Jaantus 1B, C iyo B insets).
Si loo qiimeeyo saamaynta kaadida iyo kaadida ee badbaadada kaneecada martida loo yahay iyo dhiig-nuujinta, dheddigga ayaa la quudin jiray kaadida dhammaan afarta da'dood (cusub, 24 h, 72 h, iyo 168 h post-deposition) iyo tiro badan oo ah uruurinta urea, iyo sidoo kale biyo nadiif ah iyo 10 % badbaadada badbaadada ayaa muujisay saameyn weyn oo ku saabsan badbaadada martida 2. -raadinta dheddigga (Kaadi: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; Jaantus. 2B, C) iyo dheddigga dhiigga-quudinaysa (Durin: χ2, 0.0 = 93 ; 2 = 137.9, df = 5, p <0.0001; Jaantuska 2D,E) .Dhammaan tijaabooyinka, dumarku waxay quudiyeen cunto kaadi ah, urea, iyo biyuhu waxay si aad ah hoos ugu dhigeen heerarka badbaadada marka la barbar dhigo dheddigga quudin cunto sukrose ah (Jaantus 2B-E) . Marti-geliyaha dheddigga ayaa quudin jiray dheddig cusub iyo naafo kala duwan .016) haysashada ixtimaalka badbaadada ee ugu hooseeya (Jaantus. 2B) Waxaa intaa dheer, dheddigga martigeliyaha ah ee quudiyay 135 mM HOL ayaa ka badbaaday in ka badan kantaroolka biyaha (p <0.04) (Sawir.2C) .Marka la barbardhigo biyaha, dumarka lagu quudiyo kaadi cusub iyo kaadida 24-saac ayaa ka badbaaday in ka badan (p = 0.001 iyo p = 0.012, siday u kala horreeyaan; Jaantuska 2D), halka haweenka lagu quudiyay kaadida 72-saacadood ay ka badbaadeen in ka badan kuwa la quudiyay 24-saacadood kaadi cusub iyo 24-saacadood kaadida, ply 0.0 <1. D) .Markii la quudiyo 135 mM HOL, dheddigga dhiigga ku daatay waxay ka badbaadeen in ka badan dhammaan xaddiyada kale ee HOL iyo biyaha (p <0.013; Jaantuska 2E).
Badbaadinta martida martida loo yahay iyo kuwa dhiigga jaqaya Anopheles arabinis oo quudinaysa kaadida lo'da iyo urea.In bioassay (A), kaneecada dheddigga ayaa la siiyay cunto ka kooban kaadi sac cusub iyo da 'weyn, uruurin kala duwan oo urea, sucrose (10%) iyo biyaha la miiray (H2O) . Badbaadinta martida martida loo yahay iyo Esu, 2. Dhammaan dumarka laga quudiyo kaadida (B, D) iyo urea (C, E), iyo kontaroolada, Sucrose iyo biyaha, waa dhinteen
Wadarta masaafada iyo tirada wareegyada lagu go'aamiyay tijaabada duulista duulista ee saacadaha 24 waxay ku kala duwan yihiin martigeliyaha-raadinta iyo kaneecada dhiigga jaqaya, taas oo muujisay dhaqdhaqaaq yar oo duulimaad ah guud ahaan (Jaantus. 3) . Kaneecada ged kaneecada ee ku quudin jirtay kaadida waxay soo bandhigtay qaabab duulimaad oo kala duwan waxayna ahaayeen kuwa ugu horrayn. hoos u dhac joogto ah oo dhaqdhaqaaqa ah 24 saacadood (Jaantuska 3).
Waxqabadka duulimaadka ee ugaadhsiga-raadinta dhiigga-dhuuqida dhedig Anopheles arabinis quudinta kaadida lo'da iyo urea.In tijaabada warshad duullimaad, kaneecada dheddigga quudin on kaadida lo'da cusub iyo da'da weyn, uruurinta kala duwan ee HOL, sucrose (10%), iyo biyo distilled (H2O) ayaa lagu xidhxidhay si jiif ah, si xor ah u dhaqdhaqaaqa (fiiri hubka dumarka) wadarta masaafada iyo tirada duullimaadyada saacaddii ee cunto kasta muddo 24-saac ah ayaa la duubay ( madow: cawl; iftiin: caddaan) Celceliska masaafada iyo tirada celceliska ee feerka ayaa lagu muujiyay dhinaca midig ee garaafka dhaqdhaqaaqa wareegga. Baararka qaladku waxay u taagan yihiin qaladka caadiga ah ee celceliska. Falanqaynta tirakoobka eeg qoraalka
Guud ahaan, dhaqdhaqaaqa duulimaadka guud ee haweenka martida loo yahay waxay raaceen qaab la mid ah masaafada duulimaadka ee saacadaha 24. Masaafada celceliska duulimaadka ayaa si weyn u saameeyay cuntada la cunay (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001), iyo marti-geliyaha dheddigga 72 saacadood ee kaadida ayaa u duulay masaafo dheer oo dheeraad ah (0-0) quitoes ayaa duulay in ka badan mid cusub (p = 0.022) iyo 24-h-kaadi (p = 0.022) -kaneecada la quudiyo. Marka la barbardhigo qaabka dhaqdhaqaaqa duulimaadka ee lagu qeexay cuntada kaadida, ugxan-ujeedka martigeliyaha-raadinta haweenka waxay soo bandhigeen dhaqdhaqaaq duulimaad joogto ah muddo 24-h ah, heerka ugu sarreeya ee qaybta labaad ee haweenka. d urea waxay si wayn u korodhay celceliska fogaanta duulimaadka iyadoo ku xidhan fiirsashada la nuugo (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) . Dumar doonka ah waxay quudin jireen uruurinta HOL waxay ka duushay in ka badan dheddigga la siiyo biyo ama sukrose (p <0.03).
Dhaqdhaqaaqa duulimaadka guud ee kaneecada dhiigga-dhuuqida waxay ahayd mid deggan oo joogtaysa saacadaha 24 ee dhammaan cuntooyinka, iyada oo la kordhiyo dhaqdhaqaaqa kaadida inta lagu jiro qeybta labaad ee xilliga mugdiga ah ee dumarka lagu quudiyo biyaha iyo sidoo kale dheddigga la quudiyo cusub iyo 24 saacadood (sawir 3) F (5, 138) = 1.36, p = 0.24)
Saamaynta quudinta kaadida iyo kaadida ee qiyaasaha taranka ayaa lagu qiimeeyay bioassays-ka ukunta (Jaantuska 4A) waxaana la baadhay iyadoo loo eegayo tirada ukumaha ay dhigato dhedig kasta, cabbirka ukunta, iyo dirxiga ugu horreeya ee dhawaan dillaacay. Tirada ukumaha la dhigay Emales waxay quudin jireen kaadida 24-saacadood, cunnada dhiiga ayaa si aad ah uga badan ugxanta dheddigga ee la quudiyo cuntooyinka kale ee kaadida waxayna la mid yihiin kuwa la quudiyo sukrose (Jaantus. 4B) Sidoo kale, cabbirka ukunta ay dhigaan dumarka la nuugo kaadida ayaa ku kala duwanaa cuntada (F (5, 209) = 12.85, p <1-002) oo leh urine ka weyn. Ukuntu marka loo eego dumarka biyaha la quudiyo, halka ukumaha dheddigga ah ee lagu quudiyo 168 h ee kaadida ay aad uga yaraayeen (Jaantus. 4C) .Intaa waxaa dheer, cuntada kaadida ayaa si weyn u saamaysay xajmiga dirxiga (F (5, 187) = 7.86, p <0.0001), iyada oo larvae aad u weyn oo ka soo baxaya ukun ka soo baxa ukunta 2-4-ur lavae-ur ee 2-4-ur lavaid .Biyo-cunista iyo 168-saac ee dumarka kaadida ku quudiyaan (Jaantuska 4D).
Waxqabadka taranka ee dumarka Anopheles arabinis quudinta kaadida lo'da iyo urea.Kaneecada dheddigga ah ee dhiigga lagu quudiyo ayaa la quudin jiray cuntooyin ka kooban kaadida lo'da cusub iyo da'da, xajmiyada kala duwan ee HOL, sucrose (10%), iyo biyo la miiray (H2O) saacadaha 48 ka hor inta aan la gelin bioassays-lambarka Egg (lambarka Egg) , F) iyo cabbirka dirxiga (D, G) ayaa si weyn u saameeyay cuntada la bixiyay (kaadi lo'da: BD; urea: EG) . Macnaha halbeeg kasta oo lagu cabbiro iyadoo la adeegsanayo magacyo xaraf oo kala duwan ayaa si weyn uga duwanaa midba midka kale (hal-dariiq ANOVA iyadoo la adeegsanayo falanqaynta hoc ee Tukey; p <0.05) .
Sida qaybta ugu weyn ee nitrogenous ee kaadida, urea, marka la siiyo cunto ahaan dheddigga dhiigga ku quudiya, waxay si weyn u saamaysay cabbirada taranka ee dhammaan daraasadaha. Tirada ukumaha ay dhigeen dumarku waxay quudiyeen HOL, ka dib cunto dhiig, taas oo ku xidhan xoojinta HOL (Jaantuska 4E) .Dumarka la quudiyo qiyaasta urea ee 134 µM ama ka badan waxay dhigaan ukumo ka weyn kuwa dheddigga lagu quudiyo biyaha doorsoome (Jaantus. 4G).
Soojiidashada guud ee martida-raadinta kaadida bovine madax bannaan oo kacsan. Arabiensis ee lagu qiimeeyay tuubada muraayadda olfactometer (Jaantus. 5A) ayaa si weyn u saamaysay da'da kaadida = 0.0060, 168 saacadood: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Marka laga reebo urta kaadida cusub (p = 0.13; Jaantuska 5B) .In kasta oo soo jiidashada guud ee kaneecada dhiigga-nuugta urta kaadidu aanay si weyn uga duwanayn (χ2, = 80.0). s waxaa la ogaaday in ay aad ugu soo jiidanayeen soosaarayaasha isbedbedelaya ee hawada sare marka la barbar dhigo kaadida da'da ah ee 72-saac marka la barbar dhigo kontaroolada (p = 0.0066; Jaantuska 5C).
Jawaabaha dabeecadda ee urta lo'da ee dabiiciga ah iyo synthetic ee raadinta martida iyo dhiigga Anopheles arabianus.Schematic of the glass tube olfactometer (A).Soo jiidashada madax bannaan oo kacsan oo laga soosaaray kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah si ay u martigeliso (B) iyo dhiig- nuugid (C) kaneecada. Ka hel falcelinta Rabbiga-D. ur (E), 72-saac (F), iyo 168-saacadood (G) kaadida lo'da da'da ah ayaa la muujinayaa. Raadinta anteenada Electron (EAD) waxay muujineysaa isbeddellada korantada ee ka jawaab celinta xeryahooda bioactive ee madaxa bannaanka ee ka soo baxa chromatograph-ga gaaska oo lagu ogaado qalabka ionization ololka (FID) . oo ka mid ah xeryahooda bayooloji firfircoon ayaa lagu muujiyay. Hal calaamad (*) waxay muujineysaa jawaab celin hoose oo joogto ah. Xiddigo labajibbaaran (**) waxay muujinayaan jawaabaha aan dib loo soo saari karin ANOVA iyadoo la adeegsanayo falanqaynta hoc ee Tukey;p <0.05)
Dheddig Ann.arabiensis, 72 h iyo 120 h ka dib cuntada dhiigga, inta lagu jiro dhalidda, wax door bid ah looma muujin madax bannaan oo laga soosaaray kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah marka la barbar dhigo kontaroolada pentane (χ2 = 3.07, p> 0.05; Faylka dheeriga ah 1: Jaantuska. S1).
Waayo, dhedig Ann.arabiensis, GC-EAD iyo GC-MS falanqaynta aqoonsaday siddeed, lix, saddex iyo saddex xeryahooda bioactive (Jaantus 5D-G) .In kasta oo kala duwanaansho in tirada xeryahooda in elicited jawaabaha electrophysiological ayaa la arkay, inta badan xeryahooda, kuwaas oo ahaa joog kasta headspace soosaaray kacsan oo laga soo ururiyay kaadida cusub iyo da'da. Sidaa darteed, anteeno kaliya ee ka soo baxay xarun dumar ah oo ka korraysa ka mid ah ka mid ah unugyada jidhka ka soo saaray lagu daray falanqayn dheeraad ah.
Wadarta xadiga sii daynta kacsan ee xeryahooda bioactive ee ururinta madaxa ayaa ka kordhay 29 µg h-1 ee kaadida cusub ilaa 242 µg h-1 ee 168-saac kaadida da'da, inta badan ay sabab u tahay p-cresol iyo m-formaldehyde Phenol korodhka iyo sidoo kale phenol da'da kaadida, taas oo la xiriirta hoos u dhaca la arkay ee xoojinta calaamadaha (badanaa) ee chromatogram (Jaantus. 5D) -G guddiga bidix) iyo jawaabaha jir ahaaneed ee xeryahooda (Jaantus. 5D-G guddiga saxda ah).
Guud ahaan, isku dhafka synthetic wuxuu lahaa saamiga dabiiciga ah ee isku midka ah ee xeryahooda bioactive ee lagu aqoonsaday soosaarayaasha kacsan ee kaadida cusub iyo kuwa da'da ah ee madaxyada kaadida (Jaantus. 5D-G) oo uma muuqan inay soo jiidanayso rafcaan weyn raadinta martigeliyaha (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Jaantus. 5H, 4) = 0.30; Jaantuska 5I) Si kastaba ha ahaatee, post hoc isbarbardhigga labo-geesoodka ah ee u dhexeeya daawaynta ayaa muujisay in kaneecada martida loo yahay ay si weyn u soo jiidatay isku dhafka synthetic ee 24-h kaadida da'da marka la barbardhigo kontaroolada pentane (p = 0.0086; Jaantuska 5H).
Si loo qiimeeyo doorka qaybaha shakhsi ahaaneed ee isku-dhafka synthetic ee kaadida 24-h-da'da, lix isku-dar ah oo kala-goys ah ayaa lagu qiimeeyay ka soo horjeeda isku-dhafka dhamaystiran ee Y-tube assay, kaas oo xeryahooda gaarka ah laga saaray. ), Dhammaan isku-dhafka kala-goynta waxay ahaayeen kuwo soo jiidasho badan marka loo eego kuwa si buuxda isku dhafan. Taas bedelkeeda, ka saarista isku-dhafka shakhsi ahaaneed ee isku-dhafka dhamaystiran ma saameynin jawaabaha habdhaqanka ee kaneecada dhiigga jaqaya (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), marka laga reebo decanal, taas oo keentay hoos u dhac ku yimaada heerarka 2 ee dhamaystiran (2 Faylka 2).
Tuulo ku taal Itoobiya oo duumada ka jirto, waxtarka isku darka kaadida lo'da ee 24-saacadood ee soo jiidashada kaneecada ayaa la qiimeeyay toban habeen were Culex spp. (Faylka Dheeraadka ah 1: Shaxda S1) .Anopheles arabinis waa xubinta kaliya ee ka kooban noocyada An.Gambian ee lagu aqoonsaday falanqaynta PCR. Celcelis ahaan, 320 kaneeco ayaa la qabtay habeenkii, inta lagu gudajiro dabinnada isku dhafka ah ee isku dhafka ah ayaa qabtay kaneeco ka badan kaneecada la isku daray ee aan lahayn isku dar ah (χ19 (6) 0.0.0 = 1. Dabinnada n-baitied ayaa la dhigay mid kasta oo ka mid ah shanta habeen ee kantaroolka bilowga, dhexe, iyo dhamaadka tijaabada. Tiro la mid ah kaneecada ayaa lagu qabtay mid kasta oo ka mid ah dabinnada, taas oo muujinaysa wax aan kala sooc lahayn oo u dhexeeya guryaha (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p> 0.05) iyo dad aan hoos u dhicin tirada traps-ka ee muddada daraasadda. Isku darka tic ayaa si weyn loo kordhiyey: raadinta martida loo yahay (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), quudinta dhiiga dhow (χ2 (0, 650) = 32.2, p <0.0001) iyo uurka (χ2 (0, 228) = 6.27, p23;Faylka dheeriga ah 1: Shaxda S1) Tani waxay sidoo kale ka muuqataa wadarta tirada kaneecada ee la qabtay: martigeliyaha raadinta > dhiig-jaqidda > uur leh > uur yar > lab.
Qiimaynta goobta ee waxtarka kaadida lo'da synthetic ee 24-saac ah isku darka kaadida. laakiin ma aha Anopheles farroes (C), si ka duwan, saamayn ku-tiirsan physiological state. Intaa waxaa dheer, kuwan dabinada qabtay si weyn u kordhay tirada kaneecada Culex martida loo yahay. ps (furan; N = 5)..Asterisks waxay tilmaamaysaa heerarka muhiimka ah ee tirakoobka (*p = 0.01 iyo *** p <0.0001)
Saddexda nooc ayaa si kala duwan loogu qabtay dabinada ay ku jiraan isku-darka synthetic. Raadinta martida loo yahay (χ2 (1, 1345) = 71.7, p <0.0001), quudinta dhiigga (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) = uurka (χ2 (1, 1.345) p. nsis ayaa ku xayiran dabinka sii daaya isku dhafka synthetic (Jaantus. 6B), halka qadarka An uusan kala duwanayn. Pharoensis ee gobollo kala duwan oo jireed ayaa la helay (Jaantus. 6C) . Culex, kaliya koror weyn oo tirada kaneecada raadinaya martida ayaa laga helay dabinada lagu buufiyay isku-dhafka synthetic (χ2 (1), 13.0 = χ2 (1,0). D), marka la barbar dhigo dabinka xakamaynta.
Dabinnada martigelinta ee ku yaal meel ka baxsan martigaliyeyaasha suurtagalka ah ee u dhexeeya goobaha taranka iyo bulshooyinka reer miyiga ah ee Itoobiya ayaa loo isticmaalay si loo qiimeeyo in kaneecada duumada ay isticmaasho urta kaadida lo'da sida calaamadda deegaanka. ed oo la qabtay, inkastoo tiro yar, oo ka madax bannaan da'da kaadida (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Faylka dheeraadka ah 1: Jaantuska S3)
Kaneecada Duumadu waxay helaysaa oo qaybisaa xeryahooda nitrogen-ku jira iyada oo loo marayo quudinta magdhowga kaadida lo'da (ie, puddles) si kor loogu qaado sifooyinka taariikhda nolosha, oo la mid ah cayayaanka kale Kaneecada emale waxay ku helaysaa kheyraadkan ur waxayna awood u leedahay inay nidaamiso qaadashada xeryahooda nitrogenous ee kaadida, oo ay ku jiraan HOL, qaybta ugu weyn ee nitrogenous ee kaadida [15, 16]. Sidaa darteed, isku-darka kaadidu waxay door muhiim ah ka ciyaaraan door nafaqo oo muhiim u ah xuubka duumada kuwaas oo xiran sida dadka waaweyn ee nafaqo-xumada leh [8], maadaama ay siinayso kaneecada dheddigga awoodda ay u leedahay inay hesho xeryahooda nitrogenous ee muhiimka ah iyagoo ku hawlan quudinta khatarta yar. barnaamijyada maaraynta jilayaasha.