Anopheles مڇر ڳئون جو پيشاب حاصل ڪري ورجائي ٿو زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي وڌائڻ لاءِ مليريا جرنل

غذائيت جي حاصلات ۽ ورهاڱي ۾ حشرات جي چرپر ۽ زندگيءَ جي تاريخ جي خاصيتن کي ضم ڪري ٿو. زندگيءَ جي مختلف مرحلن تي مخصوص غذائيت جي گھٽتائي کي پورو ڪرڻ لاءِ، حشرات انهن غذائي اجزاء کي اضافي کاڌ خوراڪ ذريعي حاصل ڪري سگھن ٿا، مثال طور، هڪ عمل ۾ فقرن جي رطوبتن کي کارائڻ سان، جنهن کي puddles طور سڃاتو وڃي ٿو. ميٽابولزم ۽ پيدائش ٻنهي لاء غذائيت. هن مطالعي جو مقصد اهو جائزو وٺڻ هو ته ڇا اين.غذائيت جي حصول لاءِ ڳئون جي پيشاب تي arabiensis agitation زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي بهتر بڻائي ٿو.
پڪ ڪريو ته اهو محفوظ آهي. arabiensis تازو، 24-ڪلاڪ، 72-ڪلاڪ، ۽ 168-ڪلاڪ ڳئون جي پيشاب جي بوء ڏانهن متوجه هئي، ۽ ميزبان ڳولڻ ۽ رت پيئڻ (48-ڪلاڪ رت کائڻ کانپوءِ) عورتن کي Y-tube olfactometer ۾ ماپيو ويو، ۽ حامله عورتن لاءِ اليڪٽرڪ ڪيميڪل ٽيسٽ ڪيو ويو. تجزيا پوءِ استعمال ڪيو ويو ڳئون جي پيشاب ۾ بايو ايڪٽو مرکبات جي سڃاڻپ ڪرڻ لاءِ سڀني چئن سالن جي عمرن ۾. بايو ايڪٽيو مرکبات جي مصنوعي مرکبن کي Y-ٽيوب ۽ فيلڊ ٽرائلز ۾ جانچيو ويو. ڳئون جي پيشاب ۽ ان جي مکيه نائٽروجن تي مشتمل مرڪب يوريا جي تحقيق ڪرڻ لاءِ امڪاني ضمني غذا جي طور تي مليريا ويڪٽرن جي ماپن لاءِ عورتن جي حياتياتي خاصيتن جي ماپن لاءِ. ۽ ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا جي جذب ڪيل مقدار جو اندازو لڳايو ويو. کاڌ خوراڪ کان پوء، عورتن جي بقا، ٽيچر پرواز، ۽ پيدائش لاء جائزو ورتو ويو.
ميزبانن جي رت ۽ غذا جي ڳولا ڪريو. پرواز، بقا، يا پيدائش لاء جسماني حالت جو هڪ ڪم.
Anopheles arabinis حاصل ڪرڻ ۽ ڳئون جي پيشاب جي ورڇ لاءِ بهتر زندگي جي تاريخ جي خاصيتن لاءِ. ڳئون جي پيشاب جو اضافي کاڌو سڌو سنئون ويڪٽر جي صلاحيت کي متاثر ڪري ٿو روزاني بقا ۽ ويڪر جي کثافت کي وڌائيندي، ۽ اڻ سڌي طرح پرواز جي سرگرمي کي تبديل ڪندي ۽ انهي ڪري مستقبل جي ماڊل ۾ غور ڪيو وڃي.
غذائيت جي حصول ۽ ورڇ ۾ حشرات جي چرپر ۽ زندگيءَ جي تاريخ جي خاصيتن کي ضم ڪري ٿو [1,2,3]. حشرا خوراڪ جي دستيابي ۽ غذائي ضرورتن جي بنياد تي خوراڪ جي چونڊ ۽ حاصل ڪرڻ ۽ معاوضي واري کاڌ خوراڪ انجام ڏيڻ جي قابل هوندا آهن [1, 3]. غذائي اجزاء جي ورڇ جو دارومدار زندگيءَ جي تاريخ تي هوندو آهي ۽ مختلف معيارن جي ضرورتن لاءِ غذائي معيار جي مختلف مرحلن ۾ رهن ٿا. 2] مخصوص غذائي جزن جي گھٽتائي کي پورو ڪرڻ لاءِ حشرات اضافي غذائيت جي ذريعي حاصل ڪري سگھن ٿا، جهڙوڪ مٽيءَ تي، ڪنارن جي مختلف رڳن ۽ رطوبتن ۽ ڍڳن تي، هڪ عمل جنهن کي puddles چئجي ٿو [2]. جيتوڻيڪ تتلي ۽ جيت جا مختلف قسم، پاڻيءَ ۾ ڪشش ۽ ڪشش جي لحاظ کان ٻين قسمن جي پکين ۽ پکين کي پڻ بيان ڪيو ويو آهي. ۽ ان قسم جي وسيلن کي کارائڻ سان صحت ۽ ٻين زندگيءَ جي تاريخ جي خاصيتن تي اهم اثر پون ٿا [2, 4, 5, 6] ,7] مليريا مڇر Anopheles gambiae sensu lato (sl) هڪ ’غذائيت وارو‘ بالغ طور اڀري ٿو [8]، تنهن ڪري پاڻي ڏيڻ شايد ان جي زندگيءَ ۾ اهم ڪردار ادا ڪري سگهي ٿو، پر ان جي استعمال جي تاريخ جي خاصيتن جي ڪري هن وقت تائين تاريخ جي خاصيتن جي استعمال ۾ واڌارو ڪيو ويو آهي. هن اهم گاڏي ۾ غذائيت جو استعمال ڌيان ڏيڻ جي ضرورت آهي، ڇاڪاڻ ته اهو شايد اهم ايپيڊميولوجيڪل نتيجا ٿي سگهي ٿو.
بالغ عورت اينوفليس مڇر ۾ نائٽروجن جي مقدار محدود هوندي آهي ڇاڪاڻ ته لاروا اسٽيج مان حاصل ڪيل گهٽ ڪيلوريڪ ذخيرا ۽ رت جي ماني جي غير موثر استعمال جي ڪري [9]. Female Ann.gambiae sl عام طور تي اضافي رت جي ماني سان گڏ ان جي تلافي ڪنديون آهن [10، 11 ماڻهن کي وڏي خطري ۾ وجهي ٿو ۽ وڌيڪ خطرناڪ بيماريون پيدا ڪري ٿو. اڳڪٿي جو خطرو. متبادل طور تي، مڇر نائيٽروجني مرکبات حاصل ڪرڻ لاءِ vertebrate excreta جي اضافي کاڌ خوراڪ استعمال ڪري سگھن ٿا جيڪي موافقت ۽ پرواز جي رفتار کي وڌائين ٿا، جيئن ٻين حشرن پاران ظاهر ڪيو ويو آهي [2]. ان سلسلي ۾، هڪ مضبوط ۽ الڳ ڪشش، ان جي اندر اندر هڪ مضبوط ۽ الڳ ڪشش آهي، ان جي اندر جي پيچيدگين جي پيچيدگين. ڳئون جو پيشاب [12,13,14]، دلچسپ آهي. Anopheles arabinis پنهنجي ميزبان جي ترجيحن ۾ موقعي پرست آهي ۽ ڍورن سان ملائڻ ۽ ان کي کارائڻ لاءِ سڃاتو وڃي ٿو. ڳئون جو پيشاب نائٽروجني مرکبات سان مالا مال آهي، يوريا جي حساب سان 50-95٪ 50 کان 95٪ 10000000000000000000000000000000000 تائين. عمر ۾، مائڪروجنزم انهن وسيلن کي 24 ڪلاڪن اندر نائيٽروجني مرکبات جي پيچيدگي کي گهٽائڻ لاء استعمال ڪن ٿا [15]. امونيا جي تيزيء سان وڌڻ سان، نامياتي نائٽروجن جي گهٽتائي سان لاڳاپيل، الڪولوفيلڪ مائڪروجنزم (جن مان ڪيترائي مرکبات مچھرن لاء زهر پيدا ڪن ٿا) جيڪي عورت جي ٿلهي کي ڪشش ڪري سگھن ٿيون. 24 ڪلاڪ يا گهٽ عمر ۾ [13، 14].
هن مطالعي ۾، ميزبان ۽ رت سان ڀريل جوابن کي ڳولهيو ويو. ان جي پهرين گوناڊوٽروپن چڪر دوران، arabiensis جو جائزو ورتو ويو نائٽروجني مرکبات جي حصول لاء، يوريا شامل آهن، پيشاب جي ميلاپ ذريعي. اڳتي هلي، تجربا جو هڪ سلسلو جاري ڪيو ويو ته اهو اندازو لڳايو ويو ته ڪيئن ماده مڇر جي صلاحيت کي بهتر بڻائي ٿو. اصل ۾، تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب جي بوءَ جو اندازو لڳايو ويو ته ڇا اهي مهيا ڪيا ويا قابل اعتماد اشارا ميزبان ۽ رت سان ڀريل An لاءِ. انهن جي ڳولا ۾ هن امڪاني غذائي وسيلن جي ڳولا ۾، arabiensis دريافت ڪيو ويو ڪيميائي باهمي تعلق جي پويان مشاهدو ڪيل فرق جي جذبي جي پٺيان. مصنوعي گند جي مرکب جي سڃاڻپ ڪئي وئي وڌيڪ volatile organic 2-Organic 2 ۾. فيلڊ جي حالتن هيٺ، ليبارٽري جي حالتن ۾ حاصل ڪيل نتيجن کي وڌائڻ ۽ مختلف جسماني رياستن تي بوائن جي پيشاب جي گند جي اثر کي ظاهر ڪرڻ.مڇر جي ڪشش. حاصل ڪيل نتيجن جي تصديق ڪئي وئي آهي ته اين.arabiensis زندگيء جي تاريخ جي خاصيتن تي اثر انداز ڪرڻ لاء vertebrate پيشاب ۾ مليل نائيٽروجني مرکبات حاصل ڪري ٿو ۽ تقسيم ڪري ٿو. اهي نتيجا امڪاني ايپيڊميولوجيجي نتيجن جي حوالي سان بحث ڪيا ويا آهن ۽ انهن کي ویکٹر نگراني ۽ ڪنٽرول لاء ڪيئن استعمال ڪري سگهجي ٿو.
Anopheles arabicans (Dongola strain) برقرار رکيا ويا 25 ± 2 °C، 65 ± 5% RH ۽ هڪ 12:12 h روشني: اونداهي چڪر. لاروا کي پلاسٽڪ ٽري ۾ پاليو ويو (20 سينٽي × 18 سينٽي × 7 سينٽي) ڊسٽل مين پاڻي سان ڀريل، ٽيليل فوڊ، پي اي ٽرا ۽ ايف ڊي اي. 30 ml کپن ۾ گڏ ڪيو ويو (Nolato Hertila, Åstorp, SE) ۽ پوءِ بگڊرم ڪيجز ۾ منتقل ڪيو ويو (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) بالغن کي ظاھر ڪرڻ جي اجازت ڏيڻ لاءِ. بالغن کي 10٪ sucrose سان مهيا ڪيو ويو ھو، جيستائين عورتون 4 ڏينهن تي پوسٽ ھوسٽ-پوائنٽ جو حل ڪيو ويو. تجربي کان فوري اڳ غذا ڏني وئي، يا تجربي کان اڳ ڊسٽيل پاڻي سان رات جو بکيو ويو، جيئن هيٺ بيان ڪيو ويو آهي. فلائيٽ ٽيوب تجربن لاءِ استعمال ٿيندڙ عورتن کي صرف 4-6 ڪلاڪن لاءِ واٽر ايڊ ليبٽم سان بکيو ويو. ايندڙ بايواسيز لاءِ رت چوسڻ واري مڇرن کي تيار ڪرڻ لاءِ، 4 dpe عورتن کي مهيا ڪيو ويو هو بلڊ هائبرون سسٽم استعمال ڪندي. Hemotek Discovery Workshops, Acrington, UK. مڪمل طور تي ڀريل عورتن کي پوءِ انفرادي ڪيج ۾ منتقل ڪيو ويو ۽ سڌو سنئون غذا مهيا ڪئي وئي، جيئن هيٺ بيان ڪيو ويو آهي، يا هيٺ بيان ڪيل تجربن کان 3 ڏينهن اڳ 10٪ sucrose ad libitum. بعد ۾ عورتن کي فلائيٽ ٽيوب بايواسيس لاءِ استعمال ڪيو ويو ۽ ليبارٽري ڏانهن منتقل ڪيو ويو، ۽ پوءِ 4-6 ڪلاڪ اڳ پاڻي جي تجربي لاءِ ليبارٽري منتقل ڪيو ويو.
کاڌ خوراڪ جو اندازو بالغ An.Arab عورتن ۾ پيشاب ۽ يوريا جي واپرائڻ جي مقدار کي طئي ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو. ميزبان ڳولڻ ۽ رت جي کاڌل عورتن کي هڪ غذا مهيا ڪئي وئي جنهن ۾ 1٪ پتلي تازو ۽ عمر جي ڳئون جو پيشاب، يوريا جي مختلف ڪنسنٽريشن، ۽ ٻه ڪنٽرول (10٪ sucrose ۽ پاڻي) اضافي طور تي 48 m-xyl 1000000000000000000000000000000000000000000000000000000000. 2650-17-1؛ Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) غذا ۾ شامل ڪيو ويو ۽ 4 × 4 ميٽرڪس ۾ 250 µl microcentrifuge tubes ۾ فراهم ڪيو ويو (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Figure 1A) برتري کي ڀريو ويو µl ۽ امڪاني رنگن جي وچ ۾ مقابلي کان بچڻ لاءِ (~ 3 رنگن جي امڪاني). 10 مڇرن کي هڪ وڏي پيٽري ڊش ۾ (12 سينٽي ميٽر ۽ اوچائي 6 سينٽي ميٽر؛ Semadeni, Ostermundigen, CH؛ شڪل 1A) کي مڪمل اونداهي ۾ 25 ± 2 سينٽي ڊگري سينٽي گريڊ ۽ 65 ± 5٪ نسبتي رطوبت تي رکيو ويو. اهي تجربا 5.0 کان وڌيڪ ڀيرا ڪيا ويا. وڌيڪ تجزيي تائين °C.
گھوڙن جي پيشاب ۽ يوريا کي ڳوليو جيڪو ميزبان ۽ رت چوسڻ واري عورت Anopheles arabianus پاران جذب ڪيو ويو. کاڌ خوراڪ جي آزمائش (A) ۾، مادي مڇرن کي غذا ڏني وئي جنهن ۾ تازي ۽ وڏي عمر جي ڳئون جو پيشاب، يوريا جي مختلف مقدار، سوڪروز (10٪)، ۽ ڊسٽيل پاڻي (H2-Of-C) ۽ عورتن جو پاڻي (H2-Of-C) شامل آهن. ڪنهن به ٻئي غذا جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ سکروز آزمايا ويا آهن. نوٽ ڪريو ته ميزبان ڳولڻ واريون عورتون 72-ڪلاڪ ڳئون جو پيشاب جذب ڪن ٿيون 168-ڪلاڪ ڳئون جي پيشاب (B) کان گهٽ. پيشاب جو مطلب ڪل نائٽروجن مواد (± معياري انحراف) inset ۾ نمائندگي ڪيو ويو آهي. مختلف اکرن جي نالن سان گڏ انھيل حجم (D, E) ھڪ ٻئي کان خاص طور تي مختلف ھئا (ھڪ طرفي ANOVA استعمال ڪندي Tukey جي پوسٽ ھاڪ تجزيي؛ p <0.05). ايرر بارز مطلب جي معياري غلطي جي نمائندگي ڪن ٿا (BE). سڌي ڊش ٿيل لڪير لاگ-ليڪ ريگريشن لائن جي نمائندگي ڪري ٿي (F, G)
جذب ٿيل کاڌي کي ڇڏڻ لاءِ، مڇرن کي انفرادي طور تي 1.5 ml microcentrifuge tubes ۾ رکيو ويو جنهن ۾ 230 µl ڊسٽل ٿيل پاڻي ۽ ٽشوز کي ڊسپوزيبل پيسٽل ۽ ڪارڊ لیس موٽر (VWR International, Lund, SE) استعمال ڪندي ٽوڙيو ويو، ان کان پوءِ سينٽريفيوگريشن µ10pmmin لاءِ 10000000000000000000000000000000 ميٽر تائين. هڪ 96-ڪل مائڪروپليٽ ڏانهن منتقل ڪيو ويو (Sigma-Aldrich) ۽ جذب (λ620) هڪ spectrophotometer-based microplate reader (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm استعمال ڪندي طئي ڪيو ويو) متبادل طور تي، مڇر زمين ۾ هئا جن کي 1 µ00ml پاڻي جي 100ml تائين 100000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000 ميٽر تائين منتقل ڪيو ويو آهي. spectrophotometric analysis (λ 620 nm؛ UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). غذائي مقدار جي مقدار کي طئي ڪرڻ لاء، هڪ معياري وکر تيار ڪيو ويو سيريل ڊيليوشن ذريعي حاصل ڪرڻ لاء 0.2 µl کان 2.4 µl جي 1 mg ml-1 xyln جي استعمال ڪيو ويو. هر مڇر جي کاڌي جي مقدار جو اندازو لڳائڻ.
مقدار جي ڊيٽا جو تجزيو ڪيو ويو هڪ طرفي تجزيي جي variance (ANOVA) جي استعمال سان بعد ۾ Tukey جي پوسٽ هاڪ جوڙو جوڙو (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007). لڪير رجعت تجزيي جو تجزيو ڪيو ويو بيان ڪيل رتبي-انحصار ۽ رت جي وچ ۾ جواب ڏيڻ جي وچ ۾. squitoes (GraphPad Prism v8.0.0 for Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
تقريبن 20 µl پيشاب جا نمونا هر عمر جي گروپ مان Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh، Sigma Aldrich) تي بند ڪيا ويا ۽ ٽين ڪيپسول (8 mm × 5 mm) ۾ داخل ڪيا ويا. ڪيپسول داخل ڪيا ويا. Fisher Scientific, Waltham, MA, US) ٺاهيندڙن جي پروٽوڪول جي مطابق تازي ۽ پراڻي پيشاب ۾ نائٽروجن جي مواد کي طئي ڪرڻ لاءِ. مجموعي نائيٽروجن (g N l-1) کي معياري طور استعمال ڪيل يوريا ڪنسنٽريشن جي بنياد تي مقدار ۾ مقرر ڪيو ويو.
ميزباني ۽ بلڊ چوسڻ واري عورت جي بقايت تي غذا جي اثر کي جانچڻ لاء ۽ ٻن حصن تي مشتمل. اهو هڪ ڏينهن ۾ ٻه دفعا شمار ڪيو ويو، جڏهن ته مئل مچاٽوز کي رد ڪيو ويو جيستائين آخري مچانو جي بقايا جي وچ ۾ بقايا جي مقابلي ۾.
Attisano et al. s کي 9 سينٽي ميٽرن جي فاصلي تي نيوڊيميم مقناطيس جي هڪ جوڙي جي وچ ۾ معطل ڪيل هڪ حشري جي سوئي تي چپ ڪيو ويو آهي. هڪ ئي مادي (6.5 سينٽي ايل) مان ٺهيل هڪ افقي ٽيوب عمودي ٽيوب کي هڪ ٽيچرڊ بازو ۽ هڪ بازو ٺاهي ٿو جيڪو ايلومينيم ورق جو هڪ ننڍڙو ٽڪرو کڻي ٿو.
24-ڪلاڪ بکايل عورتن کي مٿي ڏنل غذا 30 منٽ اڳ آرام ڪرڻ کان اڳ ڏني وئي هئي. مڪمل طور تي کارائڻ واري مادي مڇرن کي پوءِ انفرادي طور تي 2-3 منٽن لاءِ برف تي بيشمار ڪيو ويو ۽ بيز وڪس (جوئل سوينسن ويڪس فيبرڪ اي بي، منڪا لجنبي) ۽ پوءِ ٽيوبز هور جي ٽائيوبزٿل آرم سان ڪيڙن جي پنن سان ڳنڍيو ويو. Mill.Revolutions في اڏام کي رڪارڊ ڪيو ويو ڪسٽم-بلٽ ڊيٽا لاگر، پوءِ محفوظ ڪيو ويو ۽ ڏيکاريو ويو PC-Lab 2000™ سافٽ ويئر استعمال ڪندي (v4.01; Velleman, Gavere, BE). اڏام جي مل کي موسم جي ضابطي واري ڪمري ۾ رکيو ويو (12 h: 12 h، روشني: اونداهو، 25 ± 6 ° C ± 2 ° C ± 5).
پرواز جي سرگرمي جي نموني کي ڏسڻ لاء، ڪل فاصلو پرواز (m) ۽ لڳاتار پرواز جي سرگرمين جو ڪل تعداد 24-ڪلاڪن جي عرصي دوران في ڪلاڪ جي حساب سان ڪيو ويو. ان کان علاوه، انفرادي عورتن پاران پرواز ڪئي وئي اوسط فاصلي جي علاج جي وچ ۾ مقابلو ڪيو ويو ۽ ھڪڙي طرفي ANOVA ۽ Tukey جي پوسٽ ھاڪ تجزيي جي استعمال سان تجزيو ڪيو ويو، جتي انحصار ڪيو ويو فاصلو. جڏهن ته علاج هڪ آزاد عنصر آهي. اضافي طور تي، گولن جو سراسري تعداد 10 منٽ جي واڌ ۾ حساب ڪيو ويندو آهي.
An.arabiensis جي پيداواري ڪارڪردگيءَ تي غذا جي اثر جو اندازو لڳائڻ لاءِ، ڇهن ڄڻن (4 dpe) کي رت گڏ ڪرڻ کان پوءِ سڌو بگڊورم جيجز (30 cm × 30 cm × 30 cm) ۾ منتقل ڪيو ويو ۽ پوءِ 48 h لاءِ تجرباتي غذا ڏني وئي جيئن مٿي بيان ڪيو ويو آهي. غذا کي ختم ڪيو ويو ۽ اسپوننگ پيالو (30 ml کان 30 ml پاڻي ڀريو ويو) هر روز 48 ڪلاڪن لاءِ، هر 24 ڪلاڪن ۾ تبديل ڪريو. هر غذائي قاعدي کي 20-50 ڀيرا ورجايو. هر هڪ تجرباتي پنجري لاءِ انڊن کي ڳڻيو ويو ۽ رڪارڊ ڪيو ويو. آنڊن جا ذيلي نمونا استعمال ڪيا ويا ته انفرادي انڊن جي ماپ ۽ ڊگھائي فرق کي جانچڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو (n ≥ 200 في غذا) Dialux-20 استعمال ڪندي. هڪ Leica ڪئميرا (DFC) 320 R2؛Leica Microsystems Ltd., DE).باقي انڊن کي 24 ڪلاڪن لاءِ معياري پالڻ واري حالتن هيٺ موسمي ڪنٽرول واري ڪمري ۾ رکيو ويو، ۽ تازو ئي نڪرندڙ 1st instar larvae (n ≥ 200 per diet) جو هڪ نمونو ماپيو ويو، جيئن مٿي بيان ڪيو ويو آهي. انڊن جو تعداد ۽ سائيز انڊس ۽ A-Lawayana پوسٽ جي وچ ۾ استعمال ڪندي انڊس ۽ A-Lawayana جي وچ ۾ علاج ڪيو ويو. sis (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
هيڊ اسپيس وولٽائلز تازا (1 ڪلاڪ پوسٽ سيمپلنگ)، 24 ڪلاڪ، 72 ڪلاڪ ۽ 168 ڪلاڪ پراڻا پيشاب گڏ ڪيا ويا جيڪي نمونا زيبو ڍورن مان گڏ ڪيا ويا، ارسي نسلن مان. ڳاڙهي کان انفرادي پوليامائيڊ بيڪنگ بيگز (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) 3 l پوليامائيڊ ۾ لڪ ۾ vinyl chloride پلاسٽڪ ڊرم ۾. هر بوائن جي پيشاب جي نموني مان هيڊ اسپيس volatiles يا ته سڌو (تازو) گڏ ڪيا ويا يا هر ڪمري جي گرمي پد h2 کان پوءِ (تازو) يا ڪلاڪ 2 کان پوءِ. ine نموني هر عمر گروپ جو نمائندو هو.
هيڊ اسپيس ويڪيوم پمپ (KNF Neuberger, Freiburg, DE ) پوليامائيڊ بيگ ذريعي ايڊسورپشن ڪالمن ۾ 2.5 h لاءِ پوليامائيڊ بيگ ذريعي چالو ڪاربان فلٽر ٿيل گيس اسٽريم (100 ml منٽ-1) کي گردش ڪرڻ لاءِ هڪ بند-لوپ سسٽم استعمال ڪيو ويو (KNF Neuberger, Freiburg, a poliamide, DE. orption ڪالم Teflon tubing (5.5 cm x 3 mm id) مان ٺهيل هو جنهن ۾ 35 mg Porapak Q (50/80 mesh؛ Waters Associates, Milford, MA, US) شيشي جي اون پلگ جي وچ ۾. استعمال ڪرڻ کان اڳ، ڪالمن کي 1 ml-redistilled-ml-de-ml-de-ml-de-de-m-d-mg سان ڌوئي ويو. entane (99.0% pure solvent GC گريڊ، Sigma Aldrich). جذب ٿيل volatiles 400 μl pentane سان خارج ڪيا ويا. هيڊ اسپيس ڪليڪشن کي گڏ ڪيو ويو ۽ پوءِ -20 ° C تي ذخيرو ڪيو ويو جيستائين وڌيڪ تجزيو لاءِ استعمال نه ڪيو وڃي.
ميزبان ڳولڻ ۽ رت کائڻ جي رويي جا جواب An.Headspace volatile extracts گڏ ڪيا ويا تازو، 24-h، 72-h، ۽ 168-h-عمر جي پيشاب کي Arabidopsis مچھرن مان غير مستحڪم نڪتلن لاء تجزيو ڪيو ويو هڪ سڌي شيشي جي ٽيوب olfac دوران تجربو ڪيو ويو. An's home-seeking activity.Arab [19]. هڪ شيشي جي ٽيوب olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) مٿي کان 3 ± 1 lx ڳاڙهي روشني سان روشن ڪيو ويو. چارڪو فلٽر ٿيل ۽ نمي ٿيل هوا جي وهڪري (25 ± 2 ° C، 65 ± 2 ° C، 25 ± 2 ° C، 65 سينٽي ميٽر 65 سينٽي ميٽر 65 سينٽي ميٽر تي) ir اسٽينلیس سٹیل جي ميش اسڪرين جي هڪ سيريز مان گذريو ويو آهي، هڪ لامينار وهڪري ۽ هڪ يونيفارم پلم ڍانچي ٺاهي ٿو. ڏندن واري ٽيمپون ڊسپينسر (4 سينٽي × 1 سينٽي؛ L:D؛ DAB Dental AB)، 5 سينٽي ڪوئل مان معطل ٿيل olfactometer جي ونڊ وارڊ آخر تي، هر هيڊ اسپيس 50 منٽ جي هر هيڊ ايس ايس پي 5 منٽ سان. , diluted 1:10, stimulus طور استعمال ڪيو ويو. pentane جي برابر مقدار کي ڪنٽرول طور استعمال ڪيو ويو. انفرادي ميزبان ڳولڻ يا رت چوسڻ واري مڇر کي انفرادي ڇڏڻ واري پنجري ۾ رکيو ويو تجربو شروع ٿيڻ کان 2-3 ڪلاڪ اڳ. ڇڏڻ واري پنجري کي ھيٺ ويندڙ پاسي تي رکيو ويو، پر پوء olfactometer ۽ 1 جي اجازت ڏني وئي. پنجري جو والو ڇڏڻ لاءِ کوليو ويو. علاج يا ڪنٽرول ڏانهن ڪشش جو تجزيو ڪيو ويو مچھرن جي تناسب جي طور تي جيڪو ماخذ سان رابطي ۾ آيو 5 منٽن جي اندر آزاد ڪيو ويو. هر هيڊ اسپيس volatile extract ۽ ڪنٽرول کي گهٽ ۾ گهٽ 30 ڀيرا ورجايو ويو، ۽ ڪنهن به هڪ ڏينهن جي اثرن کان بچڻ لاءِ، هر هڪ ڏينهن تي ساڳيو ئي علاج ڪيو ويو ۽ رت جي ٽيسٽن جي جوابي ٽيسٽن تي ڪنٽرول ۽ ڪنٽرول ٽيسٽ ڪيا ويا. ic بمقابله هيڊ اسپيس سيٽ نامياري لاجسٽڪ ريگريشن استعمال ڪندي تجزيو ڪيو ويو جنهن جي پٺيان بي جوڙ نسبتن لاءِ جوڙ جي ڀيٽ ۾ (JMP پرو، v14.0.0، SAS Institute Inc.).
An's spawning Response. Headspace extracts from fresh and old cowures in Bugdorm cages (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). پلاسٽڪ جا پيالا (30 mL; Nolato Hertila) ڀريا ويا 20 mL distilled water سان. .علاج کپن کي هر هيڊ اسپيس جي 10 μl سان 1:10 dilution تي ترتيب ڏني وئي. ڪنٽرول ڪپ کي ترتيب ڏيڻ لاءِ پينٽين جي برابر مقدار استعمال ڪئي وئي. پوزيشن جي اثرن کي ڪنٽرول ڪرڻ لاءِ هر تجربي جي وچ ۾ علاج ۽ ڪنٽرول کپ مٽايا ويا. ZT 9-11 تي ڏهه رت پيئندڙ عورتن کي تجرباتي ڪيجز ۾ آزاد ڪيو ويو ۽ بعد ۾ ڳڻپ ۾ 4 ڪلو 2 ڪلو ڪيو ويو. : (علاج جي پيالي ۾ رکيل آنڊن جو تعداد - ڪنٽرول پيالي ۾ رکيل انڊن جو تعداد) / (ڏيل آنن جو ڪل تعداد). هر علاج کي 8 ڀيرا ورجايو ويو.
گيس ڪروميٽوگرافڪ ۽ اليڪٽران اينٽينا پيٽرن جي چڪاس (GC-EAD) تجزيو ڪيو ويو جيئن اڳ ۾ بيان ڪيو ويو آهي [20]. id، 0.25 μm فلم جي ٿولهه، Agilent ٽيڪنالاجيز).۽ عمر جي پيشاب. هائيڊروجن کي استعمال ڪيو ويو موبائيل فيز جي سراسري لڪير جي وهڪري جي شرح سان 45 سينٽي s-1. هر نمونو (2 μl) 30 سيڪنڊن لاءِ ورهايل موڊ ۾ 225 °C جي انليٽ درجه حرارت سان انجيڪشن ڪيو ويو. جي سي اوون جو گرمي پد 35 °C کان پروگرام ڪيو ويو (3 °C 01 منٽ هولڊ تي 3 منٽ هولڊ) -1. GC effluent splitter ۾، 4 psi نائيٽروجن شامل ڪيو ويو ۽ ورهايو ويو 1:1 ۾ 1:1 هڪ Gerstel 3D/2 Low Dead Volume Cross (Gerstel, Mülheim, DE) ۾ فليم آئنائيزيشن ڊيڪٽر ۽ EAD جي وچ ۾. EAD لاءِ GC effluent ڪيپيلري هڪ Gerstel-O5C °C جي ذريعي گذريو ويو، جيڪو گرمي پد جي Gerstel-O5C °C ۾ منتقل ڪري ٿو. ٽيوب (10 cm × 8 mm)، جتي ان کي ڪاربان فلٽر ٿيل هوا سان ملايو ويو هو (1.5 l min−1). اينٽينا ٽيوب جي آئوٽليٽ کان 0.5 سينٽي ميٽر رکيل هئي. هر هڪ مڇر جو حساب هڪ نقل ڪيو ويو، ۽ ميزبان ڳولڻ واري مڇر لاءِ، هر هڪ جي عمر ۾ گهٽ ۾ گهٽ ٽي نمونا پرفارم ڪيا ويا.
گڏيل GC ۽ ماس اسپيڪٽروميٽر (GC-MS؛ 6890 GC ۽ 5975 MS؛ Agilent Technologies) استعمال ڪندي تازي ۽ عمر جي بوائن جي پيشاب جي هيڊ اسپيس ۾ بايو ايڪٽو مرکبات جي سڃاڻپ GC-EAD تجزيي ۾ اينٽينل جوابن کي ختم ڪرڻ لاءِ، GC-EAD جي تجزيي ۾ اي-اي-اي-اي-اي-اي-پي-اي-اي-اي-پ-م-ڊ-اي-پ-م-م-م-م-م- تي اثر-اثر ڪم ڪندي 5MS UI-coated فيوز ٿيل سليڪا ڪيپيلري ڪالمن (60 m × 0.25 mm اندروني قطر، 0.25 μm فلم جي ٿولهه) هيليم استعمال ڪندي موبائيل مرحلي جي طور تي 35 سينٽي s-1.A 2 μl نموني جي سراسري لڪير جي وهڪري جي شرح سان انجيڪشن ڪئي وئي ساڳي انجيڪٽر استعمال ڪندي انجيڪشن ڪئي وئي. ڪسٽم لائبريري ۽ NIST14 لائبريري (Agilent) جي مقابلي ۾ وقت (Kovát index) ۽ ماس اسپيڪٽرا (Agilent) .سڃاتل مرکبن جي تصديق ڪئي وئي انجيڪشن ذريعي مستند معيار (اضافي فائل 1: ٽيبل S2). مقدار جي لاءِ، هيپيٽل ايڪٽيٽ (10 ng، 99,8٪) هڪ معياري ڪيميائي ۾ شامل ڪيو ويو.
هڪ مصنوعي خوري جي اختتام جو اندازو لڳائڻ لاء مصنوعي عيدن جي نشاندهي ۽ خون لهڻ جي لاء نمايان ۽ خاڪا ڪٽن سان گڏ هڪجهڙائي واري ڇنڊ ڇاڻ واري شڪلن جو ساڳيو ايڊ پيشاب (شڪل 5D-G؛ اضافي فائل S2) تجزيو ۽ رت جي سڪون جي هڪ مجموعي مرکب جو 10 μL وڳوڙ جي نسبت سان، ميزبان ۽ رت جي فيڊ اي اين اي ايس اين بي ايس بمقابلي مصلحت ۽ غير معمولي منطقي رجعتن جو جائزو ورتو ويو
اهو اندازو ڪرڻ لاءِ ته ڇا ڳئون جو پيشاب مليريا جي مچھرن لاءِ ميزبان رهائش جي نشاني طور ڪم ڪري سگهي ٿو، تازو ۽ پراڻو ڳئون جو پيشاب، گڏ ڪيو ويو جيئن مٿي بيان ڪيو ويو آهي، ۽ پاڻي کي ميش ٿيل 3 l بالڪن (100 ml) ۾ رکيل هو ۽ ميزبان بيٽ ٽريپ ۾ رکيل هو.(BG-HDT نسخو؛ BioGents, Regensburg, DE) چراگاهن ۾ 50 ميٽرن جي فاصلي تي ڏهه جاڙا، ڳوٺن جي ڪميونٽي کان 400 ميٽر (سيلي، ايٿوپيا، 5°53´24´N، 37°29´24´E) ۽ ڪو به ڍور ناهي، مستقل نسلن جي ميدانن تي، جڏهن ته پنجن ڳوٺن ۾ هيٽ ٽريپس موجود هئا. ھر علاج واري جڳھ کي رات جو ڪل پنجن راتين تائين گھمايو ويندو آھي. مختلف عمرن جي پيشاب سان جڙيل جالن ۾ پڪڙيل مچھرن جي تعداد جو مقابلو ڪيو ويو لاجسٽڪ ريگريشن کي بيٽا بائنوميل ڊسٽريبيوشن سان استعمال ڪندي (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
ايٿوپيا (8° 11′ 08″ N، 38 ° 81′ 70″ E؛ Figure 6A) جي شهر ماکي جي ويجهو هڪ مليريا جي وبائي مرض واري ڳوٺ ۾. اهو مطالعو آگسٽ جي وچ ۽ وچ سيپٽمبر جي وچ ۾ ڪيو ويو، ان کان اڳ ساليانو اندرين گهرن جي برساتن سان گڏ (50-2000 مينهن جي ڊگهي موسم سان گڏ. حصو) ڳوٺ جي ٻاهران واقعن کي مطالعي لاءِ چونڊيو ويو (تصوير 6A). گهرن کي چونڊڻ لاءِ استعمال ٿيل معيار هي هئا: گهر ۾ ڪنهن به جانور کي اجازت نه هئي، گهرن ۾ ڪو به پچائڻ جي اجازت نه هئي (گهٽ ۾ گهٽ آزمائشي دور ۾)، ۽ گهرن ۾ وڌ ۾ وڌ ٻه رهواسي، غير جراثيم ڪش دوا ۾ سمهي رهيا هئا.علاج ٿيل مڇر جا ڄار جي تحت. اخلاقي منظوري ڏني وئي آهي اداري ريسرچ ايٿڪس ريويو بورڊ (IRB/022/2016) فيڪلٽي آف نيچرل سائنسز (CNS-IRB)، اديس ابابا يونيورسٽي، طرفان قائم ڪيل ھدايتن جي مطابق، ورلڊ ميڊيڪل ايسوسي ايشن پاران قائم ڪيل ھدايتن جي مطابق، ھيلسنڪي جي ھيڊ اسٽاف سان گڏ ھيڊ اسٽاف ھولڊ ھيڊس. سڄي عمل کي ضلعي ۽ وارڊ ('ڪيبيلي') سطح تي مقامي انتظاميا پاران منظور ڪيو ويو آهي. تجرباتي ڊيزائن 2 × 2 لاطيني اسڪوائر ڊيزائن جي پيروي ڪئي، جنهن ۾ مصنوعي مرکب ۽ ڪنٽرول پهرين رات تي جوڙيل گهرن کي مقرر ڪيا ويا ۽ ايندڙ تجرباتي رات تي گهرن جي وچ ۾ تبديل ڪيا ويا. اهو عمل ڏهه ڀيرا ورجايو ويو. اضافي طور تي، سي ڊي سي کي ترتيب ڏيڻ لاء پنجن سرگرميون سيٽ ڪرڻ لاء، اضافي طور تي سيٽ ڪيو ويو. ive راتيون شروع ۾، وچين ۽ آخر ۾ فيلڊ آزمائشي ڏينهن جي ساڳئي وقت تي.
هڪ مصنوعي مرکب جنهن ۾ ڇهه حياتياتي مرکبات شامل هئا هيپٽين (97.0٪ سالوينٽ GC گريڊ، سگما Aldrich) ۾ حل ڪيو ويو ۽ 140 ng h-1 تي هڪ ڪپهه جي وِڪ ڊسپينسر کي استعمال ڪيو ويو [20]. وِک ڊسپينسر سڀني مرکبن کي مسلسل تناسب ۾ ڇڏڻ جي اجازت ڏني هئي. بيمارين جي ڪنٽرول ۽ روڪٿام لاءِ مرڪز (سي ڊي سي) لائٽ ٽريپ (جان ڊبليو هاڪ ڪمپني، گينسويل، FL، يو ايس؛ شڪل 6A) جو ري پوائنٽ. ٽريپ زمين کان 0.8 - 1 ميٽر مٿي، بيڊ جي پيرن جي ويجهو، ۽ هڪ رضاڪار هڪ غير علاج ٿيل مڇرن جي هيٺان سمهيو هو ۽: ed پاران جنسي ۽ جسماني حيثيت (اڻ کاڌل، کاڌل، نيم حامله، ۽ حامله [21] بعد ۾ پوليميرس زنجير رد عمل (PCR) تجزيي جي استعمال سان اسڪريننگ ڪئي وئي جن جي سڃاڻپ مورفولوجي طور تي سڃاڻپ ڪئي وئي A. gambiae sl. ڪمپليڪس جي ميمبرن [23]. فيلڊ جي مطالعي ۾، ٽريپ ٿيل ٽريپ ٽريپنگ جو استعمال ڪيو ويو هو هڪ ماڊل ٽريپنگ هائوس جو ڪو به ڪشش نه هو. انحصار متغير ۽ علاج (مصنوعي مرکب بمقابله ڪنٽرول) مقرر ٿيل اثر هو (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.).هتي، اسان رپورٽ ڪريون ٿا χ2 ۽ p-values ​​کان امڪاني تناسب ٽيسٽ.
اندازو لڳايو ته ڇا اهو محفوظ آهي. arabiensis پيشاب حاصل ڪرڻ جي قابل هئي، ان جو مکيه نائٽروجن جو ذريعو، يوريا، سڌي کاڌ خوراڪ ذريعي، انتظاميه جي 48 ڪلاڪن اندر 4 ڏينهن جي پوسٽ (dpe) ميزبان ڳولڻ ۽ رت کي کارائڻ واري عورتن کي فيڊنگ ٽرائلز (Fig. 1A). ٻئي ميزبان ڳولڻ ۽ رت چوسڻ واريون عورتون (ٻين خاص طور تي پاڻي پيئندڙ عورتن جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ) ) = 20.15، p <0.0001 ۽ F(5,299) = 56.00، p <0.0001، ترتيب سان؛ تصوير. 1B،C). ان کان علاوه، ميزبان ڳولڻ واريون عورتون 72 ڪلاڪن ۾ پيشاب ۾ گھٽ کائي 168 تي پيشاب جي مقابلي ۾، F.W-B-Hesteded-Hesteded-Heine ڪلاڪ تي مشتمل آهي. ٻين سڀني ڪنسنٽريشن ۽ پاڻي جي مقابلي ۾ 2.69 ايم ايم تي يوريا جي تمام وڏي مقدار کي گڏ ڪيو ويو، جڏهن ته 10٪ سکروز (F(10,813) = 15.72، p <0.0001؛ شڪل 1D) کان الڳ نه ڪيو وڃي. اهو ان جي ابتڙ هو، خاص طور تي عورتن جي رد عمل جي مقابلي ۾، جيڪي خاص طور تي رت سان ڀريل عورتن جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ غذائيت حاصل ڪن ٿيون. پاڻي، جيتوڻيڪ 10٪ سکروز کان خاص طور تي گهٽ (F(10,557) = 78.35، p <0.0001؛ شڪل 1.1E). ان کان علاوه، جڏهن ٻن جسماني رياستن جي وچ ۾ مقابلو ڪيو وڃي ته، فليبوٽوميز ٿيل عورتن جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ يوريا جذب ڪيو، ميزبان جي ڀيٽ ۾ عورتن جي گهٽ ۾ گهٽ مقدار ۾ ڳولهي رهيا آهن. وڌيڪ ڪنسنٽريشن تي (F(1,953) = 78.82، p <0.0001؛تصوير 1F, G).جڏهن ته يوريا تي مشتمل غذا مان حاصل ڪرڻ لاءِ مناسب قدر (Fig. 1D,E) نظر اچن ٿا، ٻنهي جسماني رياستن ۾ عورتون يوريا جي جذب ڪيل مقدار کي تبديل ڪرڻ جي قابل ٿي ويون يوريا جي مقدار جي پوري رينج ۾ هڪ لاگ-لائنر فيشن (Fig. 1).ساڳيء طرح، مڇر پيشاب جي جذب جي مقدار کي منظم ڪندي پنهنجي نائيٽروجن جي مقدار کي ڪنٽرول ڪرڻ لاء نظر اچن ٿا، جيئن پيشاب ۾ نائيٽروجن جي مقدار جذب ڪيل مقدار ۾ ظاهر ٿئي ٿي (شڪل 1B، C ۽ B انسٽٽس).
ميزبان ڳولڻ ۽ رت چوسڻ واري مڇر جي بقا تي پيشاب ۽ يوريا جي اثرن جو جائزو وٺڻ لاء، عورتن کي سڀني چئن عمرن جي پيشاب کي کارايو ويو (تازو، 24 h، 72 h، ۽ 168 h پوسٽ جمع ڪرڻ) ۽ يوريا جي مقدار جي هڪ حد، انهي سان گڏ ڊسٽل واٽر ۽ sucrovala10٪ ڪنٽرول. lysis ڏيکاريو ويو ته غذا ميزبان ڳولڻ واري عورتن ۾ مجموعي بقا تي هڪ اهم اثر پيو (پيشاب: χ2 = 108.5، df = 5، p <0.0001؛ يوريا: χ2 = 122.8، df = 5، p <0.0001؛ Fig. df = 5، p < 0.0001؛ يوريا: χ2 = 137.9، df = 5، p < 0.0001؛ شڪل 2D،E) سڀني تجربن ۾، عورتن کي پيشاب، يوريا ۽ پاڻي جي غذا ڏني وئي، عورتن جي ايف-اي پي ايڇ ڊي ۽ عورتن جي غذا جي مقابلي ۾ بقا جي شرح تمام گھٽ هئي. ale پيشاب مختلف بقا جي شرحن جي نمائش ڪئي، جن کي کارايو ويو 72-h اسٽيل پيشاب (p = 0.016) گھٽ ۾ گھٽ بقا جو امڪان (تصوير 2B). ان کان علاوه، ميزبان ڳولڻ واريون عورتون 135 ايم ايم يوريا کي کارايو پاڻي جي ڪنٽرولن (p ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا تي کاڌ خوراڪ جي ميزبان ۽ رت چوسڻ واري عورت Anopheles arabinis جي بقا. Bioassay (A) ۾، مادي مڇرن کي غذا ڏني وئي جنهن ۾ تازي ۽ وڏي عمر جي ڳئون جو پيشاب، يوريا جي مختلف مقدار، سوڪروز (10٪) ۽ ڊسٽل واٽر (H2O) شامل هئا. squitoes هر 12 ڪلاڪن ۾ رڪارڊ ڪيو ويو جيستائين سڀني عورتن کي پيشاب (B، D) ۽ يوريا (C، E) تي کارايو ويو، ۽ ڪنٽرول، سوڪروز ۽ پاڻي، مري ويا آهن.
24 ڪلاڪ جي عرصي دوران فلائيٽ مل ٽيسٽ ۾ طئي ٿيل ڪل فاصلو ۽ گولن جو تعداد ميزبان ڳولڻ ۽ رت چوسڻ واري مڇر جي وچ ۾ فرق آهي، جنهن مجموعي طور تي گهٽ پرواز جي سرگرمي ڏيکاري ٿي (تصوير 3). ميزبان ڳولڻ وارا مڇر جيڪي تازو ۽ پراڻو پيشاب يا سکروز ۽ پاڻي مهيا ڪن ٿا. اهي 24- ۽ 168 ڪلاڪ جي عمر وارا مڇر جيڪي پيشاب تي کارائيندا هئا انهن ۾ مختلف پروازن جا نمونا ڏيکاريا ويا ۽ بنيادي طور تي روزاني هئا. عورتون مڇر جيڪي سوڪروز يا 72 ڪلاڪ پيشاب فراهم ڪن ٿيون انهن 24 ڪلاڪن دوران سرگرمي ڏيکاري ٿي، جڏهن ته عورتون جيڪي پاڻي فراهم ڪن ٿيون انهن جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ سرگرميون حد کان وڌيڪ سرگرميون هيون. رات جو دير سان ۽ صبح جو سوير، جڏهن ته اهي جيڪي 72-ڪلاڪ پيشاب پيئندا هئا انهن 24 ڪلاڪن دوران سرگرمي ۾ مسلسل گهٽتائي محسوس ڪئي (شڪل 3).
ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا کي کارائڻ لاءِ شڪار ڪندڙ رت چوسڻ واري عورت اينوفيلس اربينز جي پرواز جي ڪارڪردگي. فلائيٽ مل ٽيسٽ ۾، ماکي مڇر کي تازو ۽ وڏي عمر جي ڳئون جي پيشاب تي کارايو ويو، يوريا جي مختلف ڪنسنٽريشن، سوڪروز (10٪)، ۽ ڊسٽل واٽر (H2O) کي آزاد طور تي هوربوٽل يا هوربوٽل هوسٽ ڪيو ويو. ڳولهڻ (کاٻي) ۽ رت چوسڻ واريون (ساڄي) عورتون، 24-ڪلاڪن جي عرصي دوران هر هڪ غذا لاءِ في ڪلاڪ فلائيٽ جو ڪل فاصلو ۽ تعداد رڪارڊ ڪيو ويو (ڪارو: گري؛ هلڪو: اڇو). سراسري فاصلو ۽ بوٽن جو سراسري تعداد سرڪيڊين سرگرمي گراف جي ساڄي پاسي ڏيکاريو ويو آهي. غلطي بار ظاهر ڪن ٿا مطلب جي معياري غلطي.
عام طور تي، ميزبان ڳولڻ واري عورتن جي مجموعي پرواز جي سرگرمي 24-ڪلاڪن جي عرصي دوران پرواز جي فاصلي وانگر هڪ نموني جي پيروي ڪئي. مطلب پرواز جي فاصلي تي خاص طور تي متاثر ٿيل غذا جي ذريعي متاثر ڪيو ويو (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001)، ۽ ميزبان ڳولڻ واريون عورتون تمام گهڻي فاصلي جي مقابلي ۾ 72 ڪلاڪ فاصلي جي مقابلي ۾. )، ۽ sucrose-fed مڇر تازو (p = 0.022) ۽ 24-h-عمر پيشاب (p = 0.022)-fed مڇر کان ڊگھا ٿي ويا. ان جي ابتڙ پرواز جي سرگرمي جي نمونن جي بيان ڪيل پيشاب جي غذا جي مطابق، يوريا کاڌل ميزبان ڳولڻ واريون عورتون، اونداھي مرحلي دوران نمودار ٿي ويون آھن في 4 فيز جي اونداھي واري مرحلي ۾، اڌ في 4 فائيٽ جي سرگرمي .3).جيتوڻيڪ سرگرمي جا نمونا ساڳيا هئا، ميزبان ڳولهيندڙ عورتن يوريا کي کارايو، خاص طور تي وڌو مطلب فلائيٽ فاصلو جذب ٿيل ڪنسنٽريشن (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) جي لحاظ کان. ميزبان ڳولهيندڙ عورتن کي يوريا flesew3 يا flese0 کان وڌيڪ پاڻي ڏنو ويو.
رت چوسڻ واري مڇرن جي مجموعي پرواز جي سرگرمي سڀني غذان ۾ 24 ڪلاڪن کان وڌيڪ مستحڪم ۽ برقرار رهي، گندي دور جي ٻئي اڌ دوران پيشاب جي سرگرمي ۾ واڌ سان گڏ عورتن لاء پاڻي کارايو ويو ۽ عورتن ۾ تازو ۽ 24 ڪلاڪ کارايو ويو (تصوير 3). جڏهن ته پيشاب جي غذا خاص طور تي متاثر ڪيو مطلب فلائيٽ جي فاصلي ۾ رت کي کارايو ويو، p = 40 (40) = 40 (40) = 40 (480). يوريا غذا (F(5، 138) = 1.36، p = 0.24) .ٻين پيشاب ۽ ڪنٽرول غذا سان گڏ (تازو، p = 0.0091؛ 72 ڪلاڪ، p = 0.0022؛ 168 ڪلاڪ، p = 0.001؛ sucrose، p = 0.001؛ sucrose، p = 0.001؛ p = 0.001؛ sucrose = 0.001).
پيشاب ۽ يوريا فيڊنگ جي اثرن جو پيشاب جي پيٽرول تي اثر انداز ڪيو ويو بيواساسيس (شڪل 4A) ۾ ۽ ان جي تحقيق ڪئي وئي هر هڪ عورت پاران رکيل انڊن جي تعداد جي مطابق، آنڊا جي سائيز، ۽ نئين نڪتل پهرين انسٽار لاروا. رکيل آنن جو تعداد. پيشاب-فيڊ عرب عورتون = 3. 0 (4.2 غذا = 5.0 مختلف) 8؛ تصوير 4B) عورتون 24 ڪلاڪ پيشاب کائينديون آهن، رت جي ماني عورتن جي پيشاب جي ٻين غذان جي ڀيٽ ۾ خاص طور تي وڌيڪ انڊيون ڏنيون آهن ۽ انهن کي کارائڻ واري سوڪروز (Fig. 4B) سان ملندڙ جلندڙ هئا. ساڳي طرح، پيشاب کارائيندڙ عورتن پاران ڏنل انڊن جي ماپ، غذا جي لحاظ کان مختلف آهي. -ڪلاڪ پيشاب ۽ سڪروز کاڌل عورتون پاڻي پيئندڙ عورتن جي ڀيٽ ۾ تمام وڏا انڊا ڏين ٿيون، جڏهن ته 168 ڪلاڪ پيشاب سان کارائڻ وارين عورتن جا آنا تمام ننڍا هئا (تصوير 4C) ان کان علاوه، پيشاب جي غذا خاص طور تي لاروا جي سائيز کي متاثر ڪيو (F(5, 187) = 7.80، p <1 کان وڏي انگن سان. 24- ۽ 72-ڪلاڪ پيشاب پائڻ واريون عورتون جيڪي آنڊن جي لاروا مان ڏنيون ويون آهن. پاڻيءَ سان کارائيندڙ ۽ 168 ڪلاڪ پيشاب پيئندڙ عورتون (شڪل 4D).
ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا تي کارائڻ واري عورتن جي Anopheles arabinis جي پيداواري ڪارڪردگي. رت ۾ کائيندڙ ماده مڇرن کي غذا ڏني وئي جنهن ۾ تازو ۽ وڏي عمر جي ڳئون جو پيشاب، يوريا جي مختلف ڪنسنٽريشن، سوڪروز (10٪)، ۽ ڊسٽل واٽر (H2O) 48 ڪلاڪ اڳ ۽ بائيو اسٽريٽ بي اي نمبر 8 ۾ رکڻ کان اڳ (بائيو اسٽريٽ بي اي نمبر 4). , E), آنڊن جي سائيز (C, F) ۽ لاروا جي سائيز (D, G) خاص طور تي مهيا ڪيل غذا کان متاثر ٿيا (ڳئون جو پيشاب: BD؛ يوريا: EG). مختلف اکر نالن کي استعمال ڪندي ماپيل هر پيٽرولر لاءِ مطلب هڪ ٻئي کان بلڪل مختلف هئا (هڪ طرفي ANOVA استعمال ڪندي Tukey جي پوسٽ هاڪ تجزيي؛ p <0.05 جي معياري غلطي جو مطلب آهي.
پيشاب جي وڏي نائيٽروجني جزو جي طور تي، يوريا، جڏهن رت پيئندڙ عورتن کي غذا جي طور تي مهيا ڪيو وڃي ٿو، سڀني مطالعي ۾ خاص طور تي پيدائش واري معيار کي متاثر ڪري ٿو. عورتن پاران ڏنل آنڊن جو تعداد، يوريا کاڌ خوراڪ کان پوء، يوريا جي ڪنسنٽريشن جي بنياد تي (F(11, 360) = 4.601 s <4.601 ؛ 4.601 سينٽ جي وچ ۾ عورتن جي ڪنسنٽريشن. µM ۽ 1.34 mM وڌيڪ انڊا رکيا آهن (شڪل 4E). 134 µM يا ان کان مٿي جي يوريا ڪنسنٽريشن تي کارائڻ واريون عورتون پاڻي تي کارائڻ وارين عورتن جي ڀيٽ ۾ وڏا انڊا ڏيندا آهن (F(10, 4245) = 36.7؛ p <0.0001)، ۽ شڪل 4 سينٽي جي متاثر ٿيل مادر جي مقدار ۾. (F(10، 3305) = 37.9؛ p <0.0001) وڌيڪ متغير هو (تصوير 4G).
مجموعي طور تي ڪشش ميزبان-ڳولڻ واري بوائن جي پيشاب جي هيڊ اسپيس volatile extracts.The arabiensis جو اندازو لڳايو ويو گلاس ٽيوب olfactometer (Fig. 5A) ۾ پيشاب جي عمر جي لحاظ کان خاص طور تي متاثر ڪيو ويو (χ2 = 15.9، df = 4، p = 0.0032)؛ جيڪو اسٽيل يا بي بي ڏيکاري ٿو. 24 ڪلاڪ ٻين سڀني علاجن جي مقابلي ۾ ڪشش جي اعلي سطح جو سبب بڻيا (72 ڪلاڪ: p = 0.0060، 168 ڪلاڪ: p = 0.012، pentane: p = 0.00070)، تازي پيشاب جي بوءَ کان سواءِ (p = 0.13؛ شڪل 5B) خون جي تمام گهڻي ڪشش نه هئي. ly مختلف (χ2 = 8.78، df = 4، p = 0.067؛ Fig. 5C)، اهي عورتون 72-ڪلاڪ پراڻي پيشاب جي مقابلي ۾ ڪنٽرولن جي مقابلي ۾ هيڊ اسپيس volatile extracts لاءِ خاص طور تي وڌيڪ پرڪشش ثابت ٿيون (p = 0.0066؛ شڪل 5C).
قدرتي ۽ مصنوعي ڳئون جي پيشاب جي بدبوءَ لاءِ رويي جا ردعمل ميزبان ۽ رت سان ڀريل Anopheles arabianus جي ڳولا ۾. شيشي جي ٽيوب olfactometer جي اسڪيميٽڪ (A). تازي ۽ عمر واري ڳئون جي پيشاب مان هيڊ اسپيس جي غير مستحڪم نڪاتن جو ڪشش ميزبان ڏانهن (B) ۽ رت چوسڻ جو ردعمل (C) 10. s تازو (D)، 24-ڪلاڪ (اي)، 72-ڪلاڪ (F)، ۽ 168-ڪلاڪ (G) عمر جي ڳئون جو پيشاب ڏيکاريو ويو آهي. اليڪٽران اينٽينا ڊيٽڪشن (EAD) جا نشان ڏيکاريا ويا آهن وولٹیج تبديلين جي جواب ۾ بايو ايڪٽو مرکبات جي رد عمل ۾ هيڊ اسپيس مان خارج ٿيل گيس ڪروميٽو فلا جي نمائندگي ڪري ٿو ريسپانس آئي ڊي ڪروميٽوفلا اسڪيل. de (mV) بمقابله برقرار رکڻ واري وقت (s). حياتياتي طور تي فعال مرکبات جي ملڪيت ۽ ڇڏڻ جي شرح (µg h-1) ڏيکاريا ويا آهن. هڪ واحد ستارو (*) هڪ مسلسل گهٽ-طول و عرض جي ردعمل کي ظاهر ڪري ٿو. ڊبل اسٽرڪس (**) اڻ سڌريل جوابن کي ظاهر ڪن ٿا. ميزبان کي ڳوليو (H) ۽ بلڊ ميڪس جي مختلف اپليڪشن (H) ۽ بلڊ-ايڪس اينيمڪس-مختلف اپليڪشن کي. ۽ ڳئون جي پيشاب جي بوءِ. مختلف اکرن جي نالن ڏانهن متوجه ٿيندڙ مڇرن جو اوسط تناسب هڪ ٻئي کان بلڪل مختلف هئا (ٽوڪي جي پوسٽ هاڪ تجزيي کي استعمال ڪندي هڪ طرفي ANOVA؛p <0.05. غلطي بار اسڪيل جي معياري غلطي جي نمائندگي ڪن ٿا
عورت Ann.arabiensis، 72 h ۽ 120 h رت جي ماني کان پوء، اسپوننگ دوران، پينٽين ڪنٽرولز (χ2 = 3.07، p > 0.05؛ اضافي فائل 1: Fig. S1) جي مقابلي ۾ تازي ۽ عمر واري ڳئون جي پيشاب مان هيڊ اسپيس جي غير معمولي نڪتل لاءِ ڪا ترجيح نه ڏيکاري وئي.
عورتن جي Ann.arabiensis لاءِ، GC-EAD ۽ GC-MS تجزيا اٺ، ڇهه، ٽي ۽ ٽي حياتياتي مرکبات (شڪل 5D-G) جي نشاندهي ڪن ٿا. جيتوڻيڪ مرکبن جي تعداد ۾ فرق جيڪي اليڪٽرروفيزيولوجيڪل ردعمل کي ظاهر ڪن ٿا، انهن مان اڪثر مرکبات هر هيڊ اسپيس ۾ موجود هئا، جيڪي هر هڪ لاءِ گڏ ڪيا ويا آهن، جن مان نڪرندڙ تازو ۽ ٻرندڙ مرکبات مان ڪڍيا ويا آهن. d هڪ جسماني ردعمل عورت اينٽيني کان مٿي حد کان مٿي وڌيڪ تجزيي ۾ شامل ڪيو ويو.
هيڊ اسپيس ڪليڪشن ۾ بايو ايڪٽيو مرکبات جي ڪل غير مستحڪم ڇڏڻ جي شرح تازي پيشاب ۾ 29 µg h-1 کان وڌي 242 µg h-1 تائين 168-ڪلاڪ پيشاب ۾، خاص طور تي p-cresol ۽ m-formaldehyde فينول جي ڪري وڌي ٿو ۽ گڏوگڏ فينول وڌائي ٿو. واهه، پيشاب جي عمر وڌڻ سان گھٽجي وئي، جيڪا ڪروميٽگرام (Fig. 5D) -G کاٻي پينل) ۾ سگنل جي شدت (ڪثرت) ۾ مشاهدي جي گھٽتائي سان لاڳاپو رکي ٿي ۽ انهن مرکبن تي جسماني ردعمل (Fig. 5D-G ساڄي پينل).
مجموعي طور تي، مصنوعي مرکب ۾ بايو ايڪٽو مرکبات جو ساڳيو قدرتي تناسب هو جنهن جي سڃاڻپ تازي ۽ عمر جي پيشاب جي سرن جي غير مستحڪم نڪتلن ۾ آهي (Fig. 5D-G) ۽ هڪ ميزبان جي ڳولا ۾ اهم اپيل کي ظاهر نه ڪيو ويو (χ2 = 8.15، df = 4، p = 0.03) يا رت = 0.03. 4.91، df = 4، p = 0.30؛ تصوير. 5I). بهرحال، علاج جي وچ ۾ پوسٽ-هڪ جوڙو جو مقابلو ڏيکاريو ويو آهي ته ميزبان ڳولڻ وارا مچھر 24-h عمر جي پيشاب جي مصنوعي مرکب سان پينٽين ڪنٽرولز (p = H5008) جي مقابلي ۾ خاص طور تي پرڪشش هئا.
24-h-عمر پيشاب جي مصنوعي مرکبن ۾ انفرادي اجزاء جي ڪردار جو جائزو وٺڻ لاء، Y-tube assay ۾ مڪمل مرکبن جي مقابلي ۾ ڇهه ذيلي مرکبات جو جائزو ورتو ويو، جنهن ۾ انفرادي مرکبات کي هٽايو ويو هو. ميزبان ڳولڻ واري مڇرن لاء، انفرادي مرکبات کي ختم ڪرڻ، مڪمل مرکب تي هڪ اهم اثر = 962 تي اثر پيو. 6، p = 0.0032؛ اضافي فائل 1: شڪل S2A)، سڀئي ذيلي مرکب مڪمل طور تي مخلوط کان ننڍا ننڍا کان وڌيڪ پرڪشش هئا. ان جي ابتڙ، مڪمل طور تي مصنوعي مرکب مان انفرادي مرکبات کي هٽائڻ سان رت چوسڻ واري مڇر جي رويي جي جوابن تي اثر انداز نه ڪيو (χ2 = 178، χ2، 178 = 1.78 سان). واهه، جنهن جي نتيجي ۾ هيٺين سطحن جي مقابلي ۾ مڪمل مرکب ڪشش (p = 0.022؛ اضافي فائل 1: شڪل S2B).
ايٿوپيا جي هڪ مليريا واري ڳوٺ ۾، 24 ڪلاڪ ڳئون جي پيشاب جي هڪ مصنوعي مرکب جي افاديت کي زمين جي حالتن ۾ مڇرن کي راغب ڪرڻ لاءِ ڏهن راتين تائين جانچيو ويو (تصوير 6A). مجموعي طور تي 4,861 مڇرن کي پڪڙيو ويو ۽ سڃاڻپ ڪئي وئي، جن مان 45.19٪ مڇرن جي سڃاڻپ ڪئي وئي. pharoensis ۽ 35.4% Culex spp. (اضافي فائل 1: Table S1). Anopheles arabinis واحد ميمبر آهي. Gambian species Complex جو PCR analysis جي نشاندهي ڪئي وئي آهي. سراسري طور تي، في رات 320 مڇر پڪڙيا ويا، ان وقت دوران traps with synthetic mixture کان سواءِ 2 کان وڌيڪ مچھر پڪڙيا ويا. (0، 3196) = 170.0، p < 0.0001) . آزمائش جي شروعات، وچين ۽ آخر ۾ پنجن ڪنٽرول راتن مان هر هڪ تي غير جڙيل جال مقرر ڪيا ويا. مڇرن جا ساڳيا انگ هر هڪ جوڙي ۾ پڪڙيا ويا، گهرن جي وچ ۾ ڪوبه تعصب ظاهر نه ڪيو، p = 16 (χ16 = χ16) 0.05) ۽ مطالعي جي عرصي دوران آبادي ۾ ڪا به گهٽتائي نه آئي. ڪنٽرول ٽريپس جي مقابلي ۾، مصنوعي مرکب تي مشتمل مچھرن جو تعداد خاص طور تي وڌايو ويو: ميزبان ڳولڻ (χ2(0، 2107) = 138.7، p <0.0001)، تازو رت جي کاڌ خوراڪ (0.02 = 0.02، χ02 = 0.3. ) ۽ حمل (χ2(0، 228) = 6.27، p = 0.0123؛اضافي فائل 1: ٽيبل S1). اهو پڻ ظاهر ڪيو ويو آهي ته مڇرن جي ڪل تعداد ۾ قبضو ڪيو ويو آهي: ميزبان ڳولڻ > خون چوسڻ > حامله > نيم-حامل > مرد.
24-ڪلاڪ مصنوعي ڳئون جي پيشاب جي گند جي ميلاپ جي افاديت جي فيلڊ تشخيص. فيلڊ آزمائشي ڏکڻ-مرڪزي ايٿوپيا (نقشي) ۾، ماکي جي شهر جي ويجهو (داخل ڪيو ويو)، سينٽرز فار ڊيزيز ڪنٽرول (سي ڊي سي) لائيٽ ٽرپ (ساڄي) سان ٺهيل گهرن ۾ (ساڄي) استعمال ڪيو ويو. ڦوٽو ٽريپس عورتن جي Anopheles arabesques (B) کي ڪشش ۽ قبضو ڪن ٿا، پر Anopheles farroes (C) نه، هڪ مختلف انداز ۾، هڪ جسماني حالت تي منحصر اثر آهي. ان کان علاوه، انهن پيچرن کي قبضو ڪيو آهي وڏي تعداد ۾ ميزبان Culex مڇر جي. ) traps (N = 10)، جڏهن ته ساڄي پاسي وارا بار ڪنٽرول ٽرپس جي جوڑوں ۾ اوسط چونڊ انڊيڪس جي نمائندگي ڪن ٿا (کليل؛ N = 5)..Asterisks انگن اکرن جي اهميت جي سطح کي ظاهر ڪن ٿا (*p = 0.01 ۽ ***p <0.0001)
ٽن نسلن کي مختلف طرح سان پڪڙيو ويو جن ۾ مصنوعي مرکبات شامل هئا. ميزبان جي ڳولا (χ2(1، 1345) = 71.7، p <0.0001)، رت جي کاڌ خوراڪ (χ2(1، 517) = 16.7، p <0.0001) ۽ حمل (χ1 = 0.1001) ۽ حمل (χ1 = 0.10) 4) a .arabiensis مصنوعي مرکب (Fig. 6B) کي جاري ڪرڻ واري ٽريپ ۾ ڦاسي پيو، جڏهن ته An جي مقدار ۾ فرق نه آيو. مختلف جسماني رياستن ۾ Pharoensis مليا ويا (Fig. 6C). Culex لاء، صرف مڇرن جي تعداد ۾ هڪ اهم واڌارو هوسٽ ڳولڻ جي تعداد ۾ مليو هو. 12.6، p = 0.0004؛ تصوير. 6D)، ڪنٽرول ٽرپس جي مقابلي ۾.
ايٿوپيا ۾ نسلن جي سائيٽن ۽ ڳوٺاڻن برادرين جي وچ ۾ امڪاني ميزبانن جي ٻاهران واقع ميزبان بيٽ ٽريپس استعمال ڪيا ويا ته ڇا مليريا مڇر ڳئون جي پيشاب جي بدبو کي ميزبان رهائش واري اشارو طور استعمال ڪن ٿا. ميزبان اشارن جي غير موجودگي ۾، گرمي، ۽ ڳئون جي پيشاب جي موجودگي سان گڏ يا ان کان سواء (Fodd File odoration S:3) هئا. جڏهن ته، اعلي درجه حرارت ۽ ڳئون جي پيشاب جي گند جي موجودگي ۾، مادي مليريا مچھرن کي راغب ڪيو ويو ۽ قبضو ڪيو ويو، جيتوڻيڪ ننڍن انگن ۾، پيشاب جي عمر کان آزاد (χ2(5, 25) = 2.29، p = 0.13؛ اضافي فائل 1: شڪل S3 ).ان جي ابتڙ، پاڻي جي قبضي تي قبضو نه ڪيو ويو گرمي پد تي پاڻي (Figure S3). : شڪل S3).
مليريا مڇر نائيٽروجن تي مشتمل مرکبات حاصل ڪري ڳئون جي پيشاب (يعني puddles) تي معاوضي واري کاڌ خوراڪ جي ذريعي ورهائيندا آهن زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي وڌائڻ لاء، ٻين حشرن وانگر [2, 4, 24, 25, 26]. ڳئون جو پيشاب ھڪڙو آسان ذريعو آھي جنھن سان ملندڙ آرام سان لاڳاپيل جڳهون موجود آھن. ۽ ڳوٺاڻن گهرن ۽ اُٿڻ جي جڳهن جي ويجهو ڊگها ٻوٽا. عورتون مڇر هن وسيلا کي بوءَ ذريعي ڳولين ٿيون ۽ پيشاب ۾ نائيٽروجني مرکبات جي جذب کي ضابطي ۾ آڻي سگهن ٿيون، جن ۾ يوريا شامل آهي، جيڪو پيشاب ۾ موجود اهم نائيٽروجني جزو آهي [15, 16]. مادي مڇر جو دارومدار سڀني جي جسماني حالت تي آهي. پرواز جي سرگرمي کي وڌائڻ ۽ ميزبان ڳولڻ واري مادہ مڇرن جي بقا کي وڌائڻ لاء، گڏوگڏ پهرين گوناڊٽروپڪ چڪر دوران رت کي کارائڻ وارن ماڻهن جي بقا ۽ پيدائش واري خاصيتن کي وڌايو. ان ڪري، پيشاب جي ميلاپ مليريا جي ويڪٽرن لاء هڪ اهم غذائي ڪردار ادا ڪري ٿو جيڪي بند ٿي ويا آهن، جهڙوڪ بالغن، عورتن جي غذائيت سان گڏ غذائيت فراهم ڪن ٿا. گهٽ خطري واري کاڌ خوراڪ ۾ مشغول ٿيڻ سان trogenous مرکبات. هن ڳولها اهم ايپيڊميولوجيڪل نتيجا آهن، جيئن ته عورتون پنهنجي زندگي جي اميد، سرگرمي ۽ پيدائشي پيداوار وڌائين ٿا، اهي سڀئي ويڪٽر جي صلاحيت کي متاثر ڪن ٿا. ان کان علاوه، اهو رويي مستقبل جي ویکٹر مئنيجمينٽ پروگرامن جو مقصد ٿي سگهي ٿو.


پوسٽ ٽائيم: جون-15-2022