Upatikanaji na usambazaji wa virutubishi huunganisha lishe ya wadudu na sifa za historia ya maisha. Ili kufidia upungufu wa virutubisho maalum katika hatua tofauti za maisha, wadudu wanaweza kupata virutubisho hivi kupitia ulishaji wa ziada, kwa mfano, kwa kulisha majimaji ya wanyama wenye uti wa mgongo katika mchakato unaojulikana kama madimbwi. Mbu Anopheles arabiani anaonekana kuwa na lishe na kwa hiyo, lengo la utafiti huu ni lishe na lishe. tathmini kama An.arabiensis fadhaa kwenye mkojo wa ng'ombe kwa ajili ya kupata virutubisho huboresha sifa za historia ya maisha.
Hakikisha ni salama.arabiensis ilivutiwa na harufu ya mkojo mpya wa ng'ombe, wa saa 24, 72 na 168, na wanawake wanaotafuta mwenyeji na kulishwa damu (saa 48 baada ya mlo wa damu) walipimwa katika kipimo cha Y-tube olfactometer, na wanawake wajawazito walichanganua kemikali ya kibiologia na kuchunguzwa kwa uchanganuzi wa kibiologia. w mkojo katika madaraja yote manne. Michanganyiko ya syntetisk ya misombo ya bioactive ilitathminiwa katika majaribio ya Y-tube na shambani. Kuchunguza mkojo wa ng'ombe na urea yake kuu iliyo na nitrojeni kama lishe ya ziada kwa vidudu vya malaria, vigezo vya kulisha na sifa za historia ya maisha vilipimwa. Uwiano wa mbu jike na kiasi cha mkojo uliotumiwa na ng'ombe wa ng'ombe ulitumiwa. vival, ndege iliyofungwa, na kuzaliana.
Tafuta damu na lishe ya mwenyeji. Katika tafiti za maabara na shambani, Waarabu walivutiwa na harufu ya asili na ya asili ya mkojo wa ng'ombe aliyezeeka. Wanawake wajawazito hawakujali majibu ya mkojo wa ng'ombe mahali pa kuzaa. Wanawake wanaotafuta mwenyeji na wanaonyonya damu kwa bidii hunyonya mkojo wa ng'ombe na urea na kutenga rasilimali hizi za uokoaji kulingana na hali ya maisha. au uzazi.
Upatikanaji na usambazaji wa mkojo wa ng'ombe wa Anopheles arabini kwa sifa bora za historia ya maisha.Ulishaji wa ziada wa mkojo wa ng'ombe huathiri uwezo wa vekta moja kwa moja kwa kuongeza maisha ya kila siku na msongamano wa vekta, na kwa njia isiyo ya moja kwa moja kwa kubadilisha shughuli za ndege na kwa hivyo inapaswa kuzingatiwa katika mifano ya baadaye.
Upatikanaji na usambazaji wa virutubisho huunganisha lishe ya wadudu na sifa za historia ya maisha [1,2,3].Wadudu wanaweza kuchagua na kupata chakula na kufanya ulishaji wa fidia kulingana na upatikanaji wa chakula na mahitaji ya virutubishi [1, 3]. Usambazaji wa virutubisho hutegemea mchakato wa historia ya maisha na unaweza kusababisha mahitaji tofauti ya ubora wa chakula na kiasi cha maisha. virutubisho maalum, wadudu wanaweza kupata virutubisho hivi kupitia ulishaji wa ziada, kama vile kwenye matope, kinyesi na ute wa wanyama wenye uti wa mgongo, na nyamafu, mchakato unaojulikana kama madimbwi [2]. , 6] ,7]. Mbu wa malaria Anopheles gambiae sensu lato (sl) anaibuka kama mtu mzima 'aliye na utapiamlo' [8], kwa hivyo kumwagilia kunaweza kuwa na jukumu muhimu katika sifa za historia ya maisha yake, lakini tabia hii hadi sasa imepuuzwa .Matumizi ya fadhaa kama njia ya kuongeza ulaji wa virutubishi katika gari hili muhimu kama matokeo muhimu yanayoweza kuzingatiwa.
Ulaji wa nitrojeni kwa mbu jike Anopheles ni mdogo kwa sababu ya akiba ya chini ya kalori inayotokana na hatua ya mabuu na utumiaji duni wa mlo wa damu [9]. Ann.gambiae sl ya kike kwa kawaida hufidia hii kwa kuongeza milo ya ziada ya damu [10, 11], na hivyo kuwaweka watu zaidi katika hatari ya kuambukizwa na moquist. es inaweza kutumia ulishaji wa ziada wa kinyesi cha wanyama wenye uti wa mgongo kupata misombo ya nitrojeni ambayo huongeza ukabilianaji na uelekevu wa ndege, kama inavyoonyeshwa na wadudu wengine [2]. Katika suala hili, mvuto mkubwa na wa kipekee wa mojawapo ya spishi ndugu ndani ya An.The Gambia sl species complex, Anopheles arabinis, ng'ombe mbichi na mzee ni wa kuvutia3,14Abinini ya ng'ombe3,14A. mapendeleo ya mwenyeji na inajulikana kuhusishwa na kulisha ng'ombe. Mkojo wa ng'ombe ni rasilimali iliyojaa misombo ya nitrojeni, na urea huchangia 50-95% ya jumla ya nitrojeni katika mkojo safi [15, 16].Kadiri umri wa mkojo wa ng'ombe, vijidudu hutumia rasilimali hizi ili kupunguza utata wa misombo ya nitrojeni hupungua kwa kasi ya naitrojeni ndani ya saa 24 asubuhi. vijiumbe vya alkalofili (vingi vyao huzalisha misombo yenye sumu kwa mbu) hustawi [15], ambayo inaweza kuwa Ann.arabiensis jike huvutiwa zaidi na mkojo wenye umri wa saa 24 au chini ya hapo [13, 14].
Katika utafiti huu, Ans waliolishwa na waliolishwa damu walitafutwa. Wakati wa mzunguko wake wa kwanza wa gonadotropini, arabiensis ilitathminiwa ili kupata misombo ya nitrojeni, ikiwa ni pamoja na urea, kwa kuchanganya mkojo. Kisha, mfululizo wa majaribio ulifanyika ili kutathmini jinsi mbu wa kike wanavyotenga rasilimali hii ya virutubisho kwa ajili ya kuzaliana upya, kuzaliana na kuzaliana kwa uzazi. w mkojo ulitathminiwa ili kubaini kama hizi zilitoa dalili za kuaminika kwa mwenyeji na kulishwa damu An. Katika utafutaji wao wa rasilimali hii ya lishe inayoweza kutokea, arabiensis iligundua uwiano wa kemikali nyuma ya mvuto wa tofauti ulioonekana.Michanganyiko ya harufu ya sintetiki ya misombo ya kikaboni tete (VOCs) iliyotambuliwa katika masaa 24 ya umri wa masaa ilipatikana zaidi kutathminiwa kwa hali ya mkojo chini ya hali ya maabara chini ya hali ya maabara. juu ya hali tofauti za kisaikolojia.Kivutio cha mbu.Matokeo yaliyopatikana yanathibitisha kuwa An.arabiensis hupata na kusambaza misombo ya nitrojeni inayopatikana katika mkojo wa wanyama wenye uti wa mgongo ili kuathiri sifa za historia ya maisha.Matokeo haya yanajadiliwa katika muktadha wa matokeo yanayoweza kutokea ya epidemiolojia na jinsi yanavyoweza kutumika kwa ufuatiliaji na udhibiti wa vekta.
Anopheles arabicans (Strain Dongola) zilidumishwa kwa 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH na 12:12 h mwanga:mzunguko wa giza. Mabuu yalifugwa kwenye trei za plastiki (cm 20 × 18 cm × 7 cm) zilizojaa maji yaliyosafishwa na kulishwa chakula cha Mepalletran, DE ® 3 ml ya Tetramin. vikombe (Nolato Hertila, Åstorp, SE) na kisha kuhamishiwa kwenye vizimba vya Bugdorm (cm 30 × 30 cm × 30 cm; Sayansi ya MegaView, Taichung, Taiwan) ili kuruhusu kutokea kwa watu wazima. Watu wazima walipewa suluhisho la 10% la sucrose ad libitum hadi siku 4 ambapo wapangaji walitolewa mara moja kabla ya kuibuka kwa mlo, mwanamke aliyehudhuria majaribio yalitolewa mara moja kabla ya kuibuka. maji yaliyotulia kabla ya jaribio, kama ilivyoelezwa hapa chini. Wanawake waliotumiwa kwa majaribio ya bomba la ndege walikufa kwa njaa kwa saa 4-6 tu kwa kutumia maji ya tangazo. Ili kuandaa mbu wanaonyonya damu kwa ajili ya uchunguzi wa kibayolojia uliofuata, wanawake 4 wa dpe walipewa damu ya kondoo yenye upungufu wa fibrotic (Håtunalab, Bro, SE) kwa kutumia utando wa kulisha wa kike, Discovered UK, Discover ya Uingereza, kisha uhamishaji wa jike. nyekundu kwa mabwawa ya mtu binafsi na kutoa mlo moja kwa moja, kama ilivyoelezwa hapa chini, au 10% sucrose ad libitum kwa siku 3 kabla ya majaribio yaliyoelezwa hapa chini. Wanawake wa mwisho walitumiwa kwa bioassays ya tube ya ndege na kuhamishiwa kwenye maabara, na kisha walikuwa na maji ya distilled ad libitum kwa saa 4-6 kabla ya majaribio.
Vipimo vya ulishaji vilitumiwa kutathmini utumiaji wa mkojo na urea kwa mwanamke wa Kiarabu. Wanawake wanaotafuta mwenyeji na kulishwa damu walipewa lishe iliyo na 1% ya mkojo safi na mzee uliochanganywa na mkojo, viwango mbalimbali vya urea, na vidhibiti viwili (10% sucrose na maji) kwa saa 48. Aidha, kupaka rangi kwa chakula (1 mgne61 CAS; gma-Aldrich, Stockholm, SE) iliongezwa kwenye lishe na ikatolewa katika tumbo la 4 × 4 katika mirija midogo midogo 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Mchoro 1A) Jaza ukingo (~300 µl). Ili kuepuka ushindani kati ya mbu 1 wa rangi ya pet (rangi ya pet0). 12 cm kipenyo na 6 cm kwa urefu, Semadeni, Ostermundigen, CH; Kielelezo 1A) katika giza kamili katika 25 ± 2 cm °C na 65 ± 5% unyevu wa jamaa.Majaribio haya yalirudiwa mara 5 hadi 10. Baada ya kufichuliwa na chakula, mbu waliwekwa hadi -20 ° C zaidi.
Tafuta mkojo wa bovine na urea unaofyonzwa na mwenyeji na anopheles wa kike arabianus.in ya kulisha (A), mbu wa kike walitolewa na lishe iliyo na mkojo wa ng'ombe safi na wazee, viwango tofauti vya urea, sucrose (10%), na maji ya maji (H2O). Wanawake wanaotafuta mwenyeji alichukua mkojo wa ng'ombe wa masaa 72 chini ya mkojo wa ng'ombe wa masaa 168 (b). Maana ya jumla ya nitrojeni (± kupotoka) ya mkojo inawakilishwa katika kipengee.Host-kutafuta (D, F) na kunyonya damu (e, g) kwa njia ya ureal (d, f) na kutofautisha kwa njia ya kutegemewa. -Way ANOVA Kutumia Uchambuzi wa Posta ya Tukey;
Ili kutoa chakula kilichofyonzwa, mbu waliwekwa mmoja mmoja ndani ya mirija ya mililita 1.5 yenye 230 µl ya maji yaliyoyeyushwa na tishu ilitatizwa kwa kutumia mchi inayoweza kutupwa na injini isiyo na waya (VWR International, Lund, SE), ikifuatiwa na kuangazia saa 10 krpm kwa dakika 10 . ma-Aldrich) na uwezo wa kufyonza (λ620) iliamuliwa kwa kutumia kisomaji cha microplate chenye spectrophotometer (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Vinginevyo, mbu walisagwa kwa ml 1 ya maji yaliyochujwa, 900 µl ambayo ilihamishiwa kwenye spectrometa ya 60m1, UV 0photte kwa 60m8; .
Data ya sauti ilichanganuliwa kwa kutumia uchanganuzi wa njia moja wa tofauti (ANOVA) ikifuatwa na ulinganifu wa Tukey wa baada ya hoc (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007). Uchambuzi wa urejeshaji wa mstari ulifafanua majibu ya urea ya kutegemea mkusanyiko na ulaji wa urea ya damu na kulinganisha ulaji wa urea wa damu v8.0.0 ya Mac, Programu ya GraphPad, San Diego, CA, Marekani).
Takriban 20 µl za sampuli za mkojo kutoka kwa kila kikundi cha umri zilifungwa kwenye Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) na kuingizwa kwenye vidonge vya bati (8 mm × 5 mm). Vidonge viliwekwa kwenye chumba cha mwako cha 2000Flash ya Fisher/O2Fish, Waciflix, Wacifl, CHNS / O2. ltham, MA, US) ili kubainisha maudhui ya nitrojeni katika mkojo safi na uliozeeka kulingana na itifaki ya mtengenezaji. Jumla ya nitrojeni (g N l-1) ilihesabiwa kulingana na viwango vya urea vinavyojulikana vinavyotumika kama kawaida.
Ili kutathmini athari za lishe kwa wanawake wanaotafuta mwenyeji na wanaonyonya damu, mbu waliwekwa mmoja mmoja kwenye vyombo vikubwa vya Petri (sentimita 12 kwa kipenyo na urefu wa sentimeta 6; Semadeni) na shimo lililofunikwa na matundu kwenye mfuniko (sentimita 3 kwa kipenyo) na Kwa uingizaji hewa na usambazaji wa chakula. Mlo ulitolewa moja kwa moja baada ya 4% ya mkojo safi, mkusanyiko wa 4% ya mkojo safi na mchanganyiko wa 4% vidhibiti, 10% ya sucrose na maji.Kila mlo uliwekwa kwa bomba kwenye kisoso cha meno (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) iliyoingizwa kwenye sindano ya mililita 5 (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), plunger iliondolewa, na kuwekwa juu ya sahani ya petri (Mavivingintained your day kila siku). es zilihesabiwa mara mbili kwa siku, ilhali mbu waliokufa walitupwa hadi mbu wa mwisho alipokufa (n = 40 kwa matibabu).Uhai wa mbu waliolishwa kwa vyakula mbalimbali ulichambuliwa kitakwimu kwa kutumia mikondo ya kuishi ya Kaplan-Meyer na vipimo vya kiwango cha logi ili kulinganisha ulinganifu wa usambazaji wa IBM 20 kati ya lishe.
Kinu maalum cha kurukia mbu kulingana na Attisano et al.[17], kilichoundwa kwa paneli za akriliki zenye unene wa milimita 5 ( upana wa 10 x 10 cm kwa urefu x 10 cm kwenda juu) bila paneli za mbele na za nyuma (Kielelezo 3: juu). Mkusanyiko wa egemeo na mrija wa wima ulioundwa na safu wima ya kromatografia ya gesi (cm; 0.25 na gundi ya 5 mm) kwenye safu ya gundi ya 5. d kati ya jozi ya sumaku za neodymium zenye umbali wa sentimita 9. Mrija wa mlalo uliotengenezwa kwa nyenzo sawa (cm 6.5 L) uligawanya bomba la wima kufanyiza mkono uliofungwa na mkono uliobeba kipande kidogo cha karatasi ya alumini kama ishara ya kukatiza mwanga.
Wanawake wenye njaa ya saa 24 walipewa mlo ulio hapo juu kwa dakika 30 kabla ya kuzuiliwa. Mbu wa kike waliolishwa kikamilifu walilazimishwa mmoja mmoja kwenye barafu kwa muda wa dakika 2-3 na kuunganishwa kwenye pini za wadudu kwa nta (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) na kisha kurekodiwa kwa mikondo ya bomba. inayotolewa na kiweka kumbukumbu cha data kilichoundwa maalum, kisha kuhifadhiwa na kuonyeshwa kwa kutumia programu ya PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE).Kinu cha ndege kiliwekwa kwenye chumba kinachodhibitiwa na hali ya hewa (saa 12:saa 12, nyepesi: giza, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Ili kuibua mchoro wa shughuli za ndege, jumla ya umbali wa (m) na jumla ya idadi ya shughuli za ndege zinazofuatana zilihesabiwa kwa saa katika kipindi cha saa 24. Aidha, umbali wa wastani unaosafirishwa na mwanamke mmoja mmoja ulilinganishwa katika matibabu na kuchambuliwa kwa kutumia ANOVA na uchanganuzi wa post hoc wa njia moja ya Tukey (JMP Pro, v14.0.0), umbali wa wastani unaotegemewa na Taasisi ya Ad Inc. , idadi ya wastani ya raundi huhesabiwa kwa nyongeza za dakika 10.
Ili kutathmini athari za mlo kwenye utendaji wa uzazi wa An.arabiensis, wanawake sita (4 dpe) walihamishwa moja kwa moja kwenye vizimba vya Bugdorm (cm 30 × 30 cm × 30 cm) baada ya kukusanya damu na kisha kutoa mlo wa majaribio kwa saa 48 kama ilivyoelezwa hapo juu. Mlo uliondolewa na vikombe vya kuzaa (30 ml) vilijaa maji kwa siku 8 ya Hertila; Nolato ya tatu ilitolewa kwa siku 2 ya Nolato. kubadilisha kila baada ya saa 24. Rudia kila mlo mara 20-50.Mayai yalihesabiwa na kurekodiwa kwa kila ngome ya majaribio.Sampuli ndogo za mayai zilitumika kutathmini wastani wa ukubwa na tofauti ya urefu wa mayai ya mtu binafsi (n ≥ 200 kwa kila mlo) kwa kutumia darubini ya Dialux-20 (DM1000; Wetzlarst aquitzD) Leitzlar Leitzlar Leitzlar 320 R2;Leica Microsystems Ltd., DE).Mayai yaliyosalia yaliwekwa kwenye chumba kinachodhibitiwa na hali ya hewa chini ya hali ya kawaida ya ufugaji kwa saa 24, na sampuli ndogo ya mabuu ya 1 iliyoibuka hivi majuzi (n ≥ 200 kwa kila mlo) yalipimwa, kama ilivyoelezwa hapo juu. Idadi ya mayai na ukubwa wa mayai na mabuu ililinganishwa kati ya matibabu na kutumia njia ya posta, v. Taasisi ya SAS Inc.).
Tetesi za nafasi ya kichwa kutoka safi (saa 1 baada ya sampuli), saa 24, saa 72 na mkojo uliozeeka saa 168 zilikusanywa kutoka kwa sampuli zilizokusanywa kutoka kwa ng'ombe wa Zebu, mbio za Arsi. mifuko (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) katika 3 l polyamide yenye mfuniko Katika ngoma za plastiki za kloridi ya vinyl. Tete za nafasi ya kichwa kutoka kwa kila sampuli ya mkojo wa ng'ombe zilikusanywa ama moja kwa moja (safi) au baada ya kukomaa kwa joto la kawaida kwa h 24 h, sampuli ya 72 ya kila kikundi cha mkojo 162 kila kikundi.
Kwa mkusanyiko wa tetemeko la nafasi ya kichwa, mfumo wa kitanzi funge ulitumiwa kusambaza mkondo wa gesi iliyochujwa kaboni (100 ml min-1) kupitia mfuko wa polyamide hadi safu ya adsorption kwa saa 2.5 kwa kutumia pampu ya utupu ya diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE) . n neli (5.5 cm x 3 mm id) iliyo na miligramu 35 za Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) kati ya plagi za pamba za glasi.Kabla ya matumizi, safu wima ilimwagika kwa n-hexane iliyotiwa upya kwa 1 ml (Merck, Darmstadt, DE, 9 ml 9,000 ml Silgredi ya Silgredi) na 1.9 ml Silgredi ya Silgredi tete za kitanda zilitolewa kwa 400 μl za pentane. Mikusanyo ya nafasi ya kichwa iliunganishwa na kisha kuhifadhiwa kwenye -20 ° C hadi kutumika kwa uchambuzi zaidi.
Majibu ya kitabia ya kutafuta mwenyeji na ulaji wa damu Dondoo tete za An.Headspace zilizokusanywa kutoka kwa mkojo safi, saa 24, 72 na 168 zilichanganuliwa ili kupata dondoo tete kutoka kwa mbu wa Arabidopsis kwa kutumia bomba la kioo moja kwa moja olfactometer [18]. [19].Olfaktomita ya bomba la kioo (kitambulisho cha sentimita 80 × 9.5) iliangaziwa na 3 ± 1 lx ya mwanga mwekundu kutoka juu. Mtiririko wa hewa uliochujwa na unyevunyevu wa mkaa (25 ± 2 °C, 65 ± 2% unyevu wa jamaa) ulipitisha uchunguzi wa bioassay kwa safu ya 30 cm ya stain, kupita skirini ya 1. muundo sare wa bomba. Kisambazaji cha visodo vya meno (cm 4 × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), kilichosimamishwa kutoka kwenye koili ya sentimita 5 kwenye ncha ya upepo ya olfaktomita, na mabadiliko ya kichocheo kila baada ya dakika 5. Kwa uchanganuzi, 10 μl ya kila dondoo la nafasi ya kichwa, iliyeyushwa 1:10, kiasi cha kichocheo kilitumiwa kama kidhibiti cha mpangaji. au mbu wanaofyonza damu waliwekwa kwenye vizimba vya kutolea mtu binafsi saa 2-3 kabla ya kuanza kwa jaribio. Kizio cha kutolea kiliwekwa kwenye upande wa chini wa kipima olfactometer, na mbu waliruhusiwa kuzoeana kwa dakika 1, na kisha vali ya kipepeo ya ngome ilifunguliwa ili kutolewa. Kuvutiwa kwa matibabu au udhibiti wa chanzo ulichambuliwa kwa muda wa dakika 5. dondoo na udhibiti tete wa nafasi ya kichwa uliigwa angalau mara 30, na ili kuepuka madhara ya siku yoyote, idadi sawa ya matibabu na vidhibiti vilijaribiwa kila siku ya majaribio.Tafuta majibu kutoka kwa seti za Ans.Kiarabu dhidi ya sehemu ya kichwa zilizolishwa kwa damu zilichanganuliwa kwa kutumia urejeshaji wa kawaida wa vifaa na kufuatiwa na ulinganisho wa jozi kwa uwiano wa odd, SAJ4.
Mwitikio wa kuzaa wa An. Michanganyiko ya sehemu ya kichwa kutoka kwenye mkojo wa ng'ombe mbichi na aliyezeeka ilichambuliwa katika vizimba vya Bugdorm (cm 30 × 30 cm × 30 cm; Sayansi ya MegaView). Vikombe vya plastiki (30 ml; Nolato Hertila) vilivyojazwa na mililita 20 za maji yaliyoyeyushwa vilitoa sehemu ndogo ya kuzaa, sehemu ndogo ya 2 na kuwekwa kwenye kona ya 2 cm kinyume na glasi. 10 μl ya kila dondoo la nafasi ya kichwa kwa dilution ya 1: 10. Kiasi sawa cha pentane kilitumiwa kurekebisha kikombe cha udhibiti.Vikombe vya matibabu na udhibiti vilibadilishwa kati ya kila jaribio ili kudhibiti kwa athari za nafasi.Wanawake kumi waliolishwa damu walitolewa kwenye mabwawa ya majaribio katika ZT 9-11 na mayai katika vikombe yalihesabiwa kwa masaa 24 ya kielelezo cha mayai - nambari ya matibabu ya kikombe cha spawn ya namba ya matibabu. mayai yaliyowekwa kwenye kikombe cha kudhibiti)/(jumla ya mayai yaliyotagwa).Kila matibabu yalirudiwa mara 8.
Uchambuzi wa kromatografia ya gesi na muundo wa antena ya elektroni (GC-EAD) wa An.arabiensis ya kike ulifanyika kama ilivyoelezwa hapo awali [20]. Kwa ufupi, madondoo tete ya anga ya juu yalitenganishwa kwa kutumia Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) iliyo na safu wima ya HP-5, unene wa 5 mm × 30 mm Technologies ya Technologies 30 × 2μ. teknolojia).na mkojo kuzeeka.Hidrojeni ilitumika kama awamu ya kuhamishika na kiwango cha wastani cha mtiririko wa mstari wa sm 45 s-1.Kila sampuli (2 μl) ilidungwa kwa sekunde 30 katika hali isiyogawanyika na halijoto ya ingizo ya 225 °C. Halijoto ya tanuri ya GC ilipangwa kutoka 35 °C (kushikilia kwa dakika 3) hadi 1000 °C kushikilia kwa dakika 100 °C kwa dakika 100 °C. , psi 4 za nitrojeni ziliongezwa na kupasuliwa 1:1 katika msalaba wa kiasi cha chini cha Gerstel 3D/2 (Gerstel, Mülheim, DE) kati ya kigunduzi cha ioni ya moto na EAD. Kapilari ya maji machafu ya GC ya EAD ilipitishwa kupitia laini ya uhamishaji ya Gerstel ODP-2, ambayo hufuatilia oveni ya GC, na joto la glasi 0 × 8 mm, glasi iliyochanganywa na 5 × 8 mm. hewa yenye unyevunyevu (1.5 l min−1).Antena iliwekwa sm 0.5 kutoka kwa tundu la bomba.Kila mbu mmoja mmoja alitoa nakala moja, na kwa mbu wanaotafuta mwenyeji, angalau nakala tatu zilifanywa kwenye sampuli za mkojo za kila umri.
Utambulisho wa misombo ya viumbe hai katika mikusanyo ya anga ya juu ya mkojo wa ng'ombe safi na kongwe kwa kutumia GC iliyounganishwa na spectrometer ya wingi (GC-MS; 6890 GC na 5975 MS; Agilent Technologies) ili kuibua majibu ya antena katika uchanganuzi wa GC-EAD, unaofanya kazi katika modi ya ioni ya athari ya elektroni kwa 70 silika ya silika ya 70 HP. safu wima ya lala (60 m × 0.25 mm kipenyo cha ndani, unene wa filamu 0.25 μm) kwa kutumia heliamu kama awamu ya rununu yenye kiwango cha wastani cha mtiririko wa mstari wa cm 35 s-1.A 2 μl sampuli ilidungwa kwa kutumia mipangilio sawa ya kidunga na halijoto ya oveni kama kwa uchanganuzi wa GC-EAD. Michanganyiko ilitambuliwa kulingana na wakati wa maktaba ya NIST1 ililinganishwa kulingana na maktaba ya 4. (Agilent). Michanganyiko iliyotambuliwa ilithibitishwa kwa kudunga viwango halisi (Faili la Ziada la 1: Jedwali S2). Kwa kuhesabu, heptyl acetate (10 ng, 99.8% ya usafi wa kemikali, Aldrich) ilidungwa kama kiwango cha nje.
Kutathmini ufanisi wa mchanganyiko wa harufu ya sintetiki unaojumuisha viambato vya kibiolojia vinavyotambuliwa katika mkojo safi na kongwe ili kuvutia Ans.arabiensis ya watu wanaotafuta mwenyeji na kunyonya damu, kwa kutumia olfaktomita na itifaki sawa na hapo juu. Michanganyiko ya syntetisk iliiga utungaji na uwiano wa misombo katika dondoo tete za hewa safi, 6-hourho 24, 24ho na 24ho-ho-24-ho. mkojo uliozeeka (Mchoro 5D-G; Faili ya Ziada ya 1: Jedwali S2). Kwa uchanganuzi, tumia 10 μl ya myeyusho wa 1:100 wa mchanganyiko uliotengenezwa kikamilifu, na kiwango cha jumla cha kutolewa kutoka takriban 140-2400 ng h-1, kwa kutathmini mvuto wa kukaribisha na kunyonya damu, mchanganyiko wa mbu, ambao hukamilishwa kwenye michanganyiko ya mbu. mchanganyiko huondolewa. Majibu ya Tafuta kutoka kwa seva pangishi na michanganyiko ya Ans.Arab iliyolishwa kwa damu dhidi ya sintetiki na kupunguza yalichanganuliwa kwa kutumia urejeshaji wa kawaida wa vifaa na kufuatiwa na ulinganisho wa jozi kwa uwiano usio wa kawaida (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Kutathmini kama mkojo wa ng'ombe unaweza kutumika kama kielelezo cha makazi ya mbu wa malaria, mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee, uliokusanywa kama ilivyoelezwa hapo juu, na maji yaliwekwa kwenye ndoo za lita 3 (100 ml) na kuwekwa kwenye mitego ya chambo.(Toleo la BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE).Mitego kumi iliwekwa kando ya mita 50 katika malisho, mita 400 kutoka jamii ya kijiji (Silay, Ethiopia, 5°53'24′′N, 37°29′24′′E) na hakuna ng'ombe, kwenye maeneo ya kuzaliana na vijiji vya kudumu. ly kwa jumla ya usiku tano.Nambari za mbu walionaswa katika mitego iliyonaswa na mkojo wa umri tofauti zililinganishwa kwa kutumia urekebishaji wa vifaa na usambazaji wa beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Katika kijiji kilicho na malaria karibu na mji wa Maki, eneo la Oromia, Ethiopia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Kielelezo 6A). Utafiti ulifanyika kati ya katikati ya Agosti na katikati ya Septemba kabla ya unyunyiziaji wa mabaki ya ndani ya kila mwaka, pamoja na msimu mrefu wa mvua. Jozi tano kati ya 20 kati ya nyumba zilichaguliwa kwa ajili ya utafiti katika eneo la mita 20 kati ya 0. (Mchoro 6A). Vigezo vilivyotumika kuchagua nyumba vilikuwa: hakuna wanyama wanaoruhusiwa ndani ya nyumba, hakuna kupikia ndani (kuchora kuni au mkaa) kuruhusiwa (angalau wakati wa majaribio), na nyumba zilizo na idadi ya juu ya wakazi wawili, kulala katika dawa za kuua wadudu.chini ya chandarua kilichotibiwa. Uidhinishaji wa kimaadili umetolewa na Bodi ya Mapitio ya Maadili ya Utafiti ya Kitaasisi (IRB/022/2016) ya Kitivo cha Sayansi Asilia (CNS-IRB), Chuo Kikuu cha Addis Ababa, kwa mujibu wa miongozo iliyoanzishwa na Tamko la Chama cha Madaktari Ulimwenguni cha Helsinki. Ridhaa ilipatikana kutoka kwa kila mfanyikazi wa idara ya afya ya eneo hilo. na ngazi ya kata ('kebele').Mchoro wa majaribio ulifuata muundo wa mraba wa 2 × 2 wa Kilatini, ambapo mchanganyiko na udhibiti wa synthetic uliwekwa kwa nyumba za jozi usiku wa kwanza na kubadilishana kati ya nyumba usiku wa majaribio uliofuata. Utaratibu huu ulirudiwa mara kumi. Zaidi ya hayo, ili kukadiria shughuli za mbu katika nyumba zilizochaguliwa, mitego ya CDC iliwekwa ili kukimbia katikati ya siku ya siku tano mfululizo wa majaribio, wakati wa usiku wa mwisho wa siku tano mfululizo wa majaribio.
Mchanganyiko wa sintetiki wenye misombo sita ya kibiolojia uliyeyushwa katika heptane (kiyeyuzi 97.0% daraja la GC, Sigma Aldrich) na kutolewa kwa 140 ng h-1 kwa kutumia kisambaza utambi wa pamba [20]. Kisambaza utambi kiliruhusu misombo yote kutolewa kwa uwiano wa mara kwa mara katika muda wote wa saa 12. Kituo cha Kudhibiti na Kudhibiti kilitumika kama kituo cha kudhibiti kilichofuata. Kinga (CDC) mwanga wa trap (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Kielelezo 6A). Mitego ilining'inizwa 0.8 - 1 m juu ya ardhi, karibu na mguu wa kitanda, na mtu wa kujitolea alilala chini ya chandarua ambacho hakijatibiwa na kuendeshwa kati ya 18:00 na 06:00. wajawazito, na wajawazito [21] walichunguzwa baadaye kwa kutumia uchanganuzi wa mfuatano wa polimerasi (PCR) ili kutambua spishi iliyotambuliwa kimofolojia kama A. gambiae sl. Wanachama wa tata [23] Katika utafiti wa nyanjani, utegaji wa mtego wa nyumba zilizooanishwa ulichanganuliwa kwa kutumia muundo wa kawaida wa kufaa, ambapo mvuto ulikuwa athari tegemezi dhidi ya mabadiliko ya J0 (udhibiti tegemezi).0. Taasisi ya SAS Inc.).Hapa, tunaripoti maadili ya χ2 na p kutoka kwa jaribio la uwiano wa uwezekano.
Tathmini kama ni salama.arabiensis iliweza kupata mkojo, chanzo chake kikuu cha nitrojeni, urea, kwa kulisha moja kwa moja, ndani ya saa 48 za utawala kwa muda wa siku 4 baada ya (dpe) majaribio ya ulishaji wa wanawake wanaotafuta mwenyeji na kulishwa damu (Mchoro 1A). Wanawake wanaotafuta mwenyeji na wanaonyonya damu walifyonza kwa kiasi kikubwa sucrose zaidi kuliko nyingine yoyote. 01 na F(5,299) = 56.00, p <0.0001, mtawalia; Kielelezo 1B,C).Zaidi ya hayo, wanawake wanaotafuta mwenyeji walikula mkojo kidogo kwa saa 72 ikilinganishwa na mkojo wa saa 168 (Mchoro 1B).Walipopewa chakula kilicho na urea, walipata mkusanyiko wa maji ya urea, mwenyeji u9 ikilinganishwa na wanawake wengine wa 2 kwa kiasi kikubwa ikilinganishwa na m2 wa maji. isiyoweza kutofautishwa na 10% ya sucrose (F(10,813) = 15.72, p <0.0001; Kielelezo 1D).Hii ilikuwa tofauti na mwitikio wa wanawake waliolishwa damu, ambao kwa kawaida walifyonza vyakula vilivyo na urea zaidi kuliko maji, ingawa kwa kiasi kikubwa chini ya 10% ya sucrose, 70,580,51;70 = 10,510; 70,51; 51; gure 1).1E).Aidha, wakati wa kulinganisha kati ya hali mbili za kisaikolojia, wanawake walio na phlebotomized walifyonza urea zaidi kuliko wanawake wanaotafuta mwenyeji katika viwango vya chini zaidi, na wanawake hawa walichukua kiasi sawa cha urea katika viwango vya juu (F(1,953)= 78.82, p <0.0001;Kielelezo 1F, G).Ijapokuwa ulaji kutoka kwa lishe iliyo na urea ulionekana kuwa na maadili bora (Kielelezo 1D, E), wanawake katika hali zote mbili za kisaikolojia waliweza kurekebisha kiwango cha urea iliyofyonzwa juu ya safu nzima ya viwango vya urea kwa mtindo wa logi (Mchoro 1F, G).).Vile vile, mbu wanaonekana kudhibiti uchukuaji wao wa nitrojeni kwa kudhibiti kiasi cha mkojo unaofyonzwa, kwani kiasi cha nitrojeni kwenye mkojo huonyeshwa kwa kiasi kinachofyonzwa (Mchoro 1B, C na B).
Ili kutathmini athari za mkojo na urea kwa mbu anayetafuta mwenyeji na anayenyonya damu, wanawake walilishwa mkojo wa miaka yote minne (safi, 24 h, 72 h na 168 h post-deposition) na aina mbalimbali za viwango vya urea, pamoja na maji yaliyosafishwa na 10 % surcrose ilionyesha kuwa mlo huu ulikuwa na athari kubwa ya 2. kuishi katika wanawake wanaotafuta mwenyeji (mkojo: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; Mchoro 2B, C) na wanawake waliolishwa damu (2,0 : 3 f = 0.0,0 = f. urea: χ2 = 137.9, df = 5, p <0.0001; Kielelezo 2D,E).Katika majaribio yote, wanawake walilisha chakula cha mkojo, urea, na maji walikuwa na viwango vya chini vya kuishi ikilinganishwa na wanawake waliolishwa chakula cha sucrose (Kielelezo 2B-E). -h mkojo uliochakaa (p = 0.016) kuwa na uwezekano wa chini kabisa wa kuishi (Mchoro 2B). Zaidi ya hayo, wanawake wanaotafuta mwenyeji waliolishwa urea 135 mM walidumu kwa muda mrefu kuliko vidhibiti vya maji (p <0.04) (Mtini.2C).Ikilinganishwa na maji, wanawake waliolishwa kwa mkojo safi na mkojo wa saa 24 walidumu kwa muda mrefu zaidi (p = 0.001 na p = 0.012, mtawalia; Mchoro 2D), huku wanawake waliolishwa kwa mkojo wa saa 72 walidumu kwa muda mrefu kuliko wale waliolishwa Mkojo fupi wa kike na 24-saa 0
Umbali wa jumla na idadi ya mizunguko iliyoamuliwa katika jaribio la kinu cha ndege katika kipindi cha saa 24 ilitofautiana kati ya mbu wanaotafuta mwenyeji na wanaonyonya damu, ambayo ilionyesha shughuli ndogo ya kukimbia kwa ujumla (Mchoro 3). Mbu wanaotafuta mwenyeji ambao walitoa mkojo safi na wa zamani au sucrose na maji walionyesha mifumo tofauti ya kukimbia (Mchoro 3), na majike 6 ya alfajiri ya 2 na 2 ya maji safi ya kulisha - 2 ya alfajiri ya kulisha majike 2. Mbu wa kike waliotoa mkojo wa saa 72 walionyesha shughuli katika kipindi cha saa 24, huku majike waliotoa maji walikuwa wakifanya kazi zaidi katikati ya kipindi.Mbu waliolishwa kwa kutumia sucrose walijidhihirisha asubuhi na mapema asubuhi, na wale 7 walionyesha kiwango cha juu cha mkojo asubuhi. sikupata kupungua kwa shughuli kwa muda wa saa 24 (Mchoro 3).
Utendaji wa ndege wa wawindaji wanaonyonya damu Anopheles arabini wa kike wanaokula mkojo wa ng'ombe na urea.Katika jaribio la kinu cha ndege, mbu wa kike waliolishwa kwa mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee, viwango mbalimbali vya urea, sucrose (10%), na maji yaliyochujwa (H2O) yalifungwa kwa usawa, kuzunguka kwa mikono kwa jike (kwa kuzunguka-zunguka) kwa kuzunguka kwa mikono (kwa kuzunguka kwa mikono). jumla ya umbali na idadi ya safari za ndege kwa saa kwa kila mlo katika kipindi cha saa 24 zilinakiliwa (giza: kijivu; mwanga: nyeupe). Umbali wa wastani na wastani wa idadi ya marudio huonyeshwa upande wa kulia wa grafu ya shughuli za mzunguko.Pau za hitilafu zinawakilisha makosa ya kawaida ya wastani.Uchanganuzi wa takwimu tazama maandishi.
Kwa ujumla, shughuli za jumla za safari za ndege za wanawake wanaotafuta mwenyeji zilifuata muundo sawa na ule wa umbali wa kukimbia kwa muda wa saa 24. Umbali wa wastani wa kukimbia uliathiriwa kwa kiasi kikubwa na chakula kilichoingizwa (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001), na wanawake wanaotafuta mwenyeji walichukua saa 72 za mkojo waliruka kwa kiasi kikubwa umbali mrefu zaidi wa mlo <000000000000000 kupita zaidi 0 ikilinganishwa na mlo mwingine zaidi00000000000000000 kupita zaidi. es iliruka kwa muda mrefu zaidi kuliko safi (p = 0.022) na mkojo wenye umri wa 24-h-h (p = 0.022)-kulishwa na mbu. Tofauti na muundo wa shughuli za kukimbia ulioelezewa na chakula cha mkojo, wanawake wanaotafuta mwenyeji wa urea walionyesha shughuli za kukimbia zinazoendelea katika kipindi cha 24-h, wakipanda kilele wakati wa awamu ya 3 inayofanana (mwenyeji wa nusu ya pili ya shughuli za kike). rea iliongeza kwa kiasi kikubwa umbali wa wastani wa kukimbia kutegemeana na ukolezi uliofyonzwa (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001).Wanawake wanaotafuta mwenyeji walilisha mkusanyiko wowote wa urea waliruka kwa muda mrefu kuliko wanawake waliolishwa maji au sucrose (p <0.03).
Shughuli ya jumla ya ndege ya mbu wanaonyonya damu ilikuwa thabiti na iliendelea kwa zaidi ya saa 24 katika milo yote, na kuongezeka kwa shughuli za mkojo katika nusu ya pili ya kipindi cha giza kwa wanawake waliolishwa kwa maji na vile vile kwa wanawake waliolishwa safi na umri wa saa 24 (picha 3). Wakati chakula cha mkojo kiliathiri kwa kiasi kikubwa umbali wa kukimbia kwa wanawake wanaolishwa damu (F.8,0 = 1). (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .pamoja na mkojo mwingine na udhibiti wa chakula (safi, p = 0.0091; masaa 72, p = 0.0022; masaa 168, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; dH200 = dH2O).
Madhara ya ulaji wa mkojo na urea kwenye vigezo vya uzazi yalipimwa katika uchunguzi wa kibayolojia wa kuwekea yai (Mchoro 4A) na kuchunguzwa kulingana na idadi ya mayai yaliyotagwa na kila jike, ukubwa wa yai, na vibuu wapya walioanguliwa. B).Wanawake walilisha mkojo wa saa 24, mlo wa damu hutaga mayai zaidi kuliko wanawake waliolisha chakula kingine cha mkojo na walikuwa sawa na wale waliolishwa sucrose (Kielelezo 4B). Vilevile, ukubwa wa mayai yaliyotagwa na wanawake waliolishwa na mkojo ulitofautiana kulingana na chakula (F (5, 209) = 12.85, p0-200 ya kike na mkojo wa kike 20. mayai makubwa zaidi kuliko majike ya kunyonyesha , wakati mayai ya wanawake waliolishwa kwa 168 h ya mkojo yalikuwa madogo sana (Mchoro 4C). Aidha, chakula cha mkojo kiliathiri kwa kiasi kikubwa ukubwa wa mabuu (F (5, 187) = 7.86, p <0.0001), na mabuu makubwa zaidi yanajitokeza kutoka kwa mayai 24 ya kike kutoka kwa mayai 24 na 24 ya mayai ya kike. kutoka kwa vibuu vya mayai.Wanawake wanaolishwa kwa maji na waliolishwa mkojo kwa saa 168 (Mchoro 4D).
Utendaji wa uzazi wa Anopheles arabini wa kike kulisha mkojo wa ng'ombe na urea.Mbu jike waliolishwa kwa damu walilishwa mlo unaojumuisha mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee, viwango mbalimbali vya urea, sucrose (10%), na maji yaliyochujwa (H2O) kwa saa 48 kabla ya kuweka kwenye bioassays ya yai na kupata namba ya yai (A) na kupata namba ya yai ndogo (A) na kupata namba ya yai chini , F) na saizi ya mabuu (D, G) iliathiriwa kwa kiasi kikubwa na mlo uliotolewa (mkojo wa ng'ombe: BD; urea: EG).Njia kwa kila kigezo kilichopimwa kwa kutumia majina tofauti ya herufi zilikuwa tofauti sana kutoka kwa kila mmoja (ANOVA ya njia moja kwa kutumia uchanganuzi wa post hoc wa Tukey; p <0.05).Pau za hitilafu zinawakilisha makosa ya kawaida ya wastani wa wastani.
Kama sehemu kuu ya nitrojeni ya mkojo, urea, inapotolewa kama chakula kwa wanawake wanaolishwa damu, iliathiri kwa kiasi kikubwa vigezo vya uzazi katika tafiti zote. Idadi ya mayai yaliyotagwa na wanawake waliolishwa urea, baada ya mlo wa damu, kulingana na ukolezi wa urea (F(11, 360) = 4.69; p <0.0001), ukolezi wa mayai 4M kati ya 1M na yai ya wanawake 1M 3 m3 urea (F(11,360) = 4.69; Kielelezo 4E).Wanawake wanaolishwa kwa viwango vya urea 134 µM au zaidi hutaga mayai makubwa kuliko majike wanaolishwa kwenye maji (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001; Mchoro 4F), na saizi ya mabuu, ingawa huathiriwa na viwango sawa vya urea kwa mama;0 3 (F.19) = 3 (F.19) ilikuwa tofauti zaidi (Mchoro 4G).
Kivutio cha jumla kwa dondoo tete za nafasi ya kichwa cha mkojo wa ng'ombe wanaotafuta mwenyeji.Arabiensis iliyotathminiwa katika olfactometer ya bomba la glasi (Kielelezo 5A) iliathiriwa kwa kiasi kikubwa na umri wa mkojo (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Mtini. 5B). Uchambuzi wa kiwango cha juu cha mkojo wa 24 ulionyesha kuwa kiwango cha juu cha mkojo wa 24 kililinganisha kiwango cha juu cha mkojo kililinganisha kwa kiasi kikubwa. (Saa 72: p = 0.0060, saa 168: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Isipokuwa harufu ya mkojo safi (p = 0.13; Kielelezo 5B).Ingawa mvuto wa jumla wa mbu wa kunyonya damu kwa harufu ya mkojo haukuwa tofauti sana, 6 p.8 = p. g. 5C), wanawake hawa walionekana kuvutia zaidi kwa dondoo tete za nafasi ya kichwa ikilinganishwa na mkojo uliozeeka wa saa 72 ikilinganishwa na vidhibiti (p = 0.0066; Mchoro 5C).
Majibu ya kitabia kwa harufu ya asili na ya asili ya mkojo wa ng'ombe katika kutafuta mwenyeji na kulishwa damu Anopheles arabianus.Schematic of the glass tube olfactometer (A).Kivutio cha dondoo tete za nafasi ya kichwa kutoka kwenye mkojo wa ng'ombe mbichi na aliyezeeka kuwa mwenyeji (B) na mbu wa kunyonya damu (C).Tafuta4Mtiririko wa Lord20D kutoka kwa dondoo mpya ya Lord. (E), saa 72 (F), na mkojo wa ng'ombe mwenye umri wa saa 168 (G) huonyeshwa. Ugunduzi wa antena ya elektroni (EAD) huonyesha mabadiliko ya volteji katika kukabiliana na misombo ya kibayolojia katika nafasi ya kichwa iliyotolewa kutoka kwa kromatografu ya gesi na kutambuliwa na kitambua ioni ya moto (FID). Vipimo vya kipimo huwakilisha mwitikio wa muda wa kutolewa (Viwango vya upunguzaji wa saa) (Viwango vya uondoaji wa saa). h-1) ya misombo amilifu ya kibiolojia inaonyeshwa. Nyota moja (*) inaonyesha jibu thabiti la amplitude ya chini. Nyota mbili (**) zinaonyesha majibu yasiyoweza kuzaa. Tafuta mwenyeji (H) na anayenyonya damu (I) An.arabiensis ina mvuto tofauti kwa michanganyiko ya sanisi ya herufi mbichi na iliyozeeka kwa kiasi kikubwa. tofauti kutoka kwa kila mmoja (ANOVA ya njia moja kwa kutumia uchanganuzi wa post hoc wa Tukey;p <0.05).Pau za hitilafu zinawakilisha hitilafu ya kawaida ya kipimo
Ann.arabiensis wa kike, saa 72 na 120 baada ya mlo wa damu, wakati wa kuzaa, hakuna upendeleo ulioonyeshwa kwa dondoo tete za nafasi ya kichwa kutoka kwa mkojo wa ng'ombe safi na mzee ikilinganishwa na udhibiti wa pentane (χ2 = 3.07, p > 0.05; Faili ya ziada 1: Mchoro S1).
Kwa Ann.arabiensis wa kike, uchambuzi wa GC-EAD na GC-MS ulibainisha misombo minane, sita, tatu na tatu ya bioactive (Kielelezo 5D-G) .Ingawa tofauti katika idadi ya misombo ambayo ilisababisha majibu ya electrophysiological ilizingatiwa, zaidi ya misombo hii ilikuwepo katika kila dondoo tete ya nafasi ya kichwa iliyokusanywa kutoka kwa mkojo safi na wa zamani ambao ulitoa dondoo la mkojo wa kike tu. kizingiti kilijumuishwa katika uchambuzi zaidi.
Jumla ya kiwango tete cha kutolewa kwa misombo ya kibiolojia katika mkusanyiko wa nafasi ya kichwa kiliongezeka kutoka 29 µg h-1 katika mkojo safi hadi 242 µg h-1 katika mkojo uliozeeka wa saa 168, hasa kutokana na ongezeko la p-cresol na m-formaldehyde Phenoli pamoja na phenol. umri wa mkojo, ambayo inahusiana na kupungua aliona katika kiwango ishara (wingi) katika kromatogramu (Mtini. 5D)-G kushoto jopo) na majibu ya kisaikolojia kwa misombo haya (Mtini. 5D-G jopo kulia).
Kwa ujumla, mchanganyiko wa syntetisk ulikuwa na uwiano sawa wa asili wa misombo ya bioactive iliyotambuliwa katika dondoo tete za vichwa vya mkojo safi na vya zamani (Mchoro 5D-G) na haukuonekana kutoa rufaa kubwa katika utafutaji wa mwenyeji (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Mchoro 0.083; Kielelezo 4-to-sucking = 5H = 5H = 5H / squito, 2 H) 4, p = 0.30; Mtini. 5I).Hata hivyo, ulinganisho wa baada ya hapo wawili kati ya matibabu ulionyesha kuwa mbu wanaotafuta mwenyeji walikuwa wakivutia sana mchanganyiko wa sanisi wa mkojo wenye umri wa saa 24 ikilinganishwa na vidhibiti vya pentane (p = 0.0086; Mchoro 5H).
Ili kutathmini jukumu la vipengele vya mtu binafsi katika mchanganyiko wa synthetic wa mkojo wenye umri wa 24-h, michanganyiko sita ya ziada ilitathminiwa dhidi ya mchanganyiko kamili katika kipimo cha Y-tube, ambapo misombo ya mtu binafsi iliondolewa. 1: Kielelezo S2A), mchanganyiko wote wa subtractive ulikuwa wa kuvutia zaidi kuliko Ndogo kuliko mchanganyiko kikamilifu. Kwa kulinganisha, kuondolewa kwa misombo ya mtu binafsi kutoka kwa mchanganyiko wa synthetic kikamilifu hakuathiri majibu ya tabia ya mbu wa kunyonya damu (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), isipokuwa ya mchanganyiko katika viwango vya ziada vya 0 = 2 ikilinganishwa na kiwango cha chini cha 2. : Kielelezo S2B).
Katika kijiji kilichoathiriwa na malaria nchini Ethiopia, ufanisi wa mchanganyiko wa sanisi wa mkojo wa ng'ombe wa saa 24 katika kuvutia mbu chini ya hali ya shamba ulitathminiwa kwa muda wa usiku kumi (Mchoro 6A). Jumla ya mbu 4,861 walikamatwa na kutambuliwa, ambapo 45.7% walikuwa Anthropus.gambia 5% na 5% Culex spp.(Faili la ziada la 1: Jedwali S1).Anopheles arabinis ndiye mwanachama pekee wa aina ya An.Gambian iliyotambuliwa na uchambuzi wa PCR.Kwa wastani, mbu 320 walinaswa kwa usiku mmoja, wakati ambapo mitego yenye chambo cha mchanganyiko wa sintetiki ilinasa mbu zaidi kuliko mitego iliyooanishwa bila mchanganyiko, 01200 = 010 = 010 = 012 .Mitego isiyo na chambo iliwekwa kwenye kila moja ya usiku tano za udhibiti mwanzoni, katikati, na mwisho wa jaribio.Nambari sawa za mbu zilinaswa katika kila jozi ya mitego, ikionyesha kutokuwa na upendeleo kati ya nyumba (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.0, ilipungua wakati wa udhibiti wa idadi ya mbu. mitego iliyo na mchanganyiko wa syntetisk iliongezeka kwa kiasi kikubwa: kutafuta mwenyeji (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), kulisha damu hivi karibuni (χ2 (0, 650) = 32.2, p <0.0001) na mimba (χ2 (0, 228) = 2.0 = 6;Faili la ziada 1: Jedwali S1).Hii pia inaonekana katika jumla ya idadi ya mbu waliokamatwa: mwenyeji anayetafuta > kunyonya damu > wajawazito > nusu wajawazito > dume.
Tathmini ya ufanisi wa mchanganyiko wa harufu ya mkojo wa ng'ombe wa saa 24. Majaribio ya shamba yalifanyika kusini-kati mwa Ethiopia (ramani), karibu na mji wa Maki (weka), kwa kutumia Kituo cha Kudhibiti Magonjwa (CDC) mtego mwepesi (kulia) katika nyumba zilizooanishwa, na muundo wa mraba wa Kilatini (picha ya angani ya CDC), picha ya kike ya Anodor (As-baps) inayovutia ya CDC ya picha ya kike (As-Bphelei). lakini si Anopheles farroes (C), kwa namna tofauti, athari inayotegemea hali ya kisaikolojia. Kwa kuongezea, mitego hii ilinasa idadi iliyoongezeka ya mbu mwenyeji wa Culex.(D) Ikilinganishwa na udhibiti.Nyumba zilizo upande wa kushoto zinawakilisha kielezo cha wastani cha mbu walionaswa katika jozi za chambo cha kunukia (kijani) na kudhibiti (kipimo cha N1) kulia (kielekezo cha N1). kudhibiti mitego (wazi; N = 5).).Nyota huonyesha viwango vya umuhimu wa takwimu (*p = 0.01 na ***p <0.0001)
Aina hizi tatu zilinaswa kwa njia tofauti katika mitego iliyo na mchanganyiko wa sanisi.Kutafuta mwenyeji (χ2(1, 1345) = 71.7, p <0.0001), ulishaji wa damu (χ2(1, 517) = 16.7, p <0.0001) na mimba (χ2(1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 4, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 4, p. sis alinaswa kwenye mtego ukitoa mchanganyiko wa sintetiki (Kielelezo 6B), wakati kiasi cha An hakikutofautiana.Pharoensis katika hali tofauti za kisaikolojia zilipatikana (Mchoro 6C). Kwa Culex, ni ongezeko kubwa tu la idadi ya mbu wanaotafuta majeshi lilipatikana katika mitego iliyopigwa na mchanganyiko wa synthetic, 0 20 = 160 = 1 0 1 = 1 0 1 = 1 0 1 = 1 0 1 = 1 0 1 = 0 1 = 0 1 = 0 1 = 1 0 1 = 0 1 = 1 0 1 = 1 = 1 0 1 = 1 0 1 = 1 0 1 = 1 0 1 = 1 = 1. 6D), ikilinganishwa na mitego ya kudhibiti.
Mitego ya chambo ya mwenyeji iliyo nje ya maeneo yanayoweza kuzalishwa kati ya maeneo ya kuzaliana na jamii za mashambani nchini Ethiopia ilitumiwa kutathmini kama mbu wa malaria hutumia harufu ya mkojo wa ng'ombe kama kiashiria cha makazi ya mwenyeji. Kwa kukosekana kwa dalili za mwenyeji, joto, pamoja na au bila uwepo wa harufu ya mkojo wa ng'ombe, hakuna mbu walionaswa (Jalada la ziada 1: Kielelezo, na ng'ombe, uwepo wa joto la juu la mkojo wa ng'ombe wa ng'ombe). ed na kukamatwa, ingawa kwa idadi ndogo, bila kuzingatia umri wa mkojo (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Faili ya ziada 1: Kielelezo S3). Kinyume chake, udhibiti wa maji haukukamata mbu wa malaria kwa joto la juu (Faili ya Ziada 1: Kielelezo S3).
Mbu wa malaria hupata na kusambaza misombo iliyo na nitrojeni kupitia ulishaji wa fidia kwenye mkojo wa ng'ombe (yaani, madimbwi) ili kuboresha sifa za historia ya maisha, sawa na wadudu wengine [2, 4, 24, 25, 26]. Mbu wa kike hupata rasilimali hii kwa kunusa na wanaweza kudhibiti unywaji wa misombo ya nitrojeni kwenye mkojo, ikiwa ni pamoja na urea, sehemu kuu ya nitrojeni katika mkojo [15, 16]. Kutegemeana na hali ya kisaikolojia ya mbu jike, virutubisho kwenye mkojo hutengwa ili kunusuru maisha ya mbu. na sifa za uzazi za watu wanaolishwa damu wakati wa mzunguko wa kwanza wa gonadotropiki. Kwa hiyo, kuchanganya mkojo kuna jukumu muhimu la lishe kwa waenezaji wa malaria ambao wamefungwa kama watu wazima wenye utapiamlo [8], kwani huwapa mbu wa kike uwezo wa kupata misombo ya nitrojeni muhimu kwa kujihusisha katika ulishaji wa hatari kidogo. Ugunduzi huu una athari kubwa ya magonjwa ya milipuko, ongezeko la uwezo wa kuzaa wa kike, na kuathiri maisha ya wanawake. zaidi, tabia hii inaweza kuwa lengo la programu za usimamizi wa vekta za baadaye.
Muda wa kutuma: Juni-15-2022