పోషకాల సేకరణ మరియు పంపిణీ అనేది కీటకాల ఆహార సేకరణ మరియు జీవిత చరిత్ర లక్షణాలను అనుసంధానిస్తుంది. వివిధ జీవిత దశలలో నిర్దిష్ట పోషకాల లోపాలను భర్తీ చేయడానికి, కీటకాలు అనుబంధ దాణా ద్వారా ఈ పోషకాలను పొందగలవు. ఉదాహరణకు, 'పడ్ల్స్' అని పిలువబడే ప్రక్రియలో వెన్నెముక గల జీవుల స్రావాలను ఆహారంగా తీసుకోవడం ద్వారా. అనోఫెలెస్ అరాబియాని అనే దోమ పోషకాహార లోపంతో ఉన్నట్లు కనిపిస్తుంది, అందువల్ల దానికి జీవక్రియ మరియు పునరుత్పత్తి రెండింటికీ పోషకాలు అవసరం. పోషకాల సేకరణ కోసం ఆవు మూత్రంపై అనోఫెలెస్ అరాబియాని దోమ కదలడం దాని జీవిత చరిత్ర లక్షణాలను మెరుగుపరుస్తుందో లేదో అంచనా వేయడమే ఈ అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం.
ఇది సురక్షితమేనని నిర్ధారించుకోండి. తాజా, 24-గంటల, 72-గంటల, మరియు 168-గంటల పాత ఆవు మూత్రం వాసనకు అరబియెన్సిస్ ఆకర్షించబడింది. ఆతిథేయి కోసం వెతికే మరియు రక్తం తాగిన (రక్తం తాగిన 48 గంటల తర్వాత) ఆడ దోమలను Y-ట్యూబ్ ఓల్ఫాక్టోమీటర్‌లో కొలిచారు, మరియు గర్భవతిగా ఉన్న ఆడ దోమలను గుడ్లు పెట్టే పరీక్ష కోసం అంచనా వేశారు. ఆ తర్వాత, నాలుగు వయస్సు తరగతులలోని ఆవు మూత్రంలో జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాలను గుర్తించడానికి రసాయన మరియు ఎలక్ట్రోఫిజియోలాజికల్ విశ్లేషణను కలిపి ఉపయోగించారు. జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాల కృత్రిమ మిశ్రమాలను Y-ట్యూబ్ మరియు క్షేత్ర ప్రయోగాలలో మూల్యాంకనం చేశారు. మలేరియా వాహకాలకు సంభావ్య అనుబంధ ఆహారంగా ఆవు మూత్రం మరియు దాని ప్రధాన నత్రజని కలిగిన సమ్మేళనం యూరియాను పరిశోధించడానికి, ఆహార పారామితులు మరియు జీవిత చరిత్ర లక్షణాలను కొలిచారు. ఆడ దోమల నిష్పత్తి మరియు శోషించబడిన ఆవు మూత్రం మరియు యూరియా పరిమాణాన్ని అంచనా వేశారు. ఆహారం తీసుకున్న తర్వాత, ఆడ దోమల మనుగడ, కట్టివేసినప్పుడు ఎగరడం, మరియు పునరుత్పత్తిని అంచనా వేశారు.
ఆతిథేయి యొక్క రక్తం మరియు పోషణ కోసం వెతుకుతాయి. ప్రయోగశాల మరియు క్షేత్ర అధ్యయనాలలో, అరబ్ చేపలు తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం యొక్క సహజ మరియు కృత్రిమ వాసనకు ఆకర్షించబడ్డాయి. గర్భవతిగా ఉన్న ఆడ చేపలు గుడ్లు పెట్టే ప్రదేశాలలో ఆవు మూత్రం స్పందనల పట్ల ఉదాసీనంగా ఉన్నాయి. ఆతిథేయి కోసం వెతికే మరియు రక్తాన్ని పీల్చే ఆడ చేపలు ఆవు మూత్రం మరియు యూరియాను చురుకుగా గ్రహిస్తాయి మరియు ఎగరడం, మనుగడ లేదా పునరుత్పత్తి కోసం శారీరక స్థితికి అనుగుణంగా జీవిత-చరిత్ర మార్పిడుల ప్రకారం ఈ వనరులను కేటాయించుకుంటాయి.
మెరుగైన జీవిత చరిత్ర లక్షణాల కోసం అనోఫెలెస్ అరబినిస్ ఆవు మూత్రాన్ని గ్రహించి, పంపిణీ చేస్తుంది. ఆవు మూత్రాన్ని అనుబంధంగా తినిపించడం అనేది రోజువారీ మనుగడ మరియు వెక్టర్ సాంద్రతను పెంచడం ద్వారా ప్రత్యక్షంగా, మరియు ఎగిరే కార్యకలాపాలను మార్చడం ద్వారా పరోక్షంగా వెక్టర్ సామర్థ్యాన్ని ప్రభావితం చేస్తుంది, కాబట్టి దీనిని భవిష్యత్ నమూనాలలో పరిగణించాలి.
పోషకాల సేకరణ మరియు పంపిణీ కీటకాల ఆహార సేకరణ మరియు జీవిత చరిత్ర లక్షణాలను ఏకీకృతం చేస్తుంది [1,2,3]. కీటకాలు ఆహార లభ్యత మరియు పోషక అవసరాల ఆధారంగా ఆహారాన్ని ఎంచుకుని, సంపాదించగలవు మరియు పరిహార దాణా చేయగలవు [1, 3]. పోషకాల పంపిణీ జీవిత-చరిత్ర ప్రక్రియపై ఆధారపడి ఉంటుంది మరియు కీటకాల వివిధ జీవిత దశలలో ఆహార నాణ్యత మరియు పరిమాణానికి వేర్వేరు అవసరాలకు దారితీయవచ్చు [1, 2]. నిర్దిష్ట పోషకాల లోపాలను భర్తీ చేయడానికి, కీటకాలు బురద, వెన్నెముక గల జీవుల యొక్క వివిధ విసర్జనలు మరియు స్రావాలు, మరియు కుళ్ళిన మాంసం వంటి వాటిపై అనుబంధ దాణా ద్వారా ఈ పోషకాలను పొందగలవు, ఈ ప్రక్రియను నీటి గుంటలు అని పిలుస్తారు [2]. ప్రధానంగా వివిధ రకాల సీతాకోకచిలుక మరియు చిమ్మట జాతులు వర్ణించబడినప్పటికీ, నీటి గుంటలు ఇతర కీటకాల క్రమాలలో కూడా కనిపిస్తాయి, మరియు ఈ రకమైన వనరుల పట్ల ఆకర్షణ మరియు వాటిపై ఆహారం తీసుకోవడం ఆరోగ్యం మరియు ఇతర జీవిత-చరిత్ర లక్షణాలపై గణనీయమైన ప్రభావాలను కలిగి ఉంటాయి [2, 4, 5, 6], 7]. మలేరియా దోమ అనోఫెలెస్ గాంబియే సెన్సు లాటో (sl) 'పోషకాహార లోపం' ఉన్న వయోజనంగా ఉద్భవిస్తుంది [8], కాబట్టి దాని జీవిత చరిత్ర లక్షణాలలో నీరు త్రాగించడం ఒక ముఖ్యమైన పాత్ర పోషించవచ్చు, కానీ ఈ ప్రవర్తన ఇప్పటివరకు నిర్లక్ష్యం చేయబడింది. ఈ ముఖ్యమైన వాహనంలో పోషకాల గ్రహణాన్ని పెంచే సాధనంగా కదిలించడాన్ని ఉపయోగించడం శ్రద్ధకు అర్హమైనది, ఎందుకంటే ఇది ముఖ్యమైన వ్యాధిశాస్త్ర పరిణామాలను కలిగి ఉండవచ్చు.
లార్వా దశ నుండి తీసుకువెళ్ళే తక్కువ క్యాలరీ నిల్వలు మరియు రక్త భోజనాన్ని అసమర్థంగా ఉపయోగించుకోవడం వల్ల వయోజన ఆడ అనోఫెలెస్ దోమలలో నత్రజని తీసుకోవడం పరిమితంగా ఉంటుంది [9]. ఆడ Ann.gambiae sl సాధారణంగా అదనపు రక్త భోజనంతో భర్తీ చేయడం ద్వారా దీనిని భర్తీ చేస్తుంది [10, 11], తద్వారా ఎక్కువ మందికి వ్యాధి సోకే ప్రమాదం మరియు దోమలు వేటాడబడే ప్రమాదం పెరుగుతుంది. ప్రత్యామ్నాయంగా, ఇతర కీటకాలు ప్రదర్శించినట్లుగా [2], దోమలు అనుకూలత మరియు ఎగిరే విన్యాస సామర్థ్యాన్ని పెంచే నత్రజని సమ్మేళనాలను పొందడానికి వెన్నెముక గల జంతువుల విసర్జనను అదనపు ఆహారంగా ఉపయోగించుకోగలవు. ఈ విషయంలో, An.The Gambian sl జాతుల సముదాయంలోని సోదర జాతులలో ఒకటైన అనోఫెలెస్ అరబినిస్, తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం పట్ల బలమైన మరియు విలక్షణమైన ఆకర్షణను కలిగి ఉండటం ఆసక్తికరంగా ఉంది [12,13,14]. అనోఫెలెస్ అరబినిస్ తన ఆతిథేయ ప్రాధాన్యతలలో అవకాశవాది మరియు పశువులతో సంబంధం కలిగి వాటిపై ఆహారం తీసుకుంటుందని అంటారు. ఆవు మూత్రం నత్రజని సమ్మేళనాలతో సమృద్ధిగా ఉన్న వనరు, ఇందులో యూరియా 50-95% ఉంటుంది. తాజా మూత్రంలో మొత్తం నత్రజని [15, 16]. ఆవు మూత్రం పాతబడేకొద్దీ, సూక్ష్మజీవులు ఈ వనరులను ఉపయోగించుకుని 24 గంటల్లోపు నత్రజని సమ్మేళనాల సంక్లిష్టతను తగ్గిస్తాయి [15]. సేంద్రీయ నత్రజని తగ్గుదలతో సంబంధం ఉన్న అమ్మోనియా వేగంగా పెరగడంతో, క్షారప్రియ సూక్ష్మజీవులు (వీటిలో చాలా వరకు దోమలకు విషపూరితమైన సమ్మేళనాలను ఉత్పత్తి చేస్తాయి) వృద్ధి చెందుతాయి [15], వీటిలో ఆడ యాన్.అరాబియెన్సిస్ ఉండవచ్చు, ఇది 24 గంటలు లేదా అంతకంటే తక్కువ వయస్సు ఉన్న మూత్రం వైపు ప్రాధాన్యతగా ఆకర్షించబడుతుంది [13, 14].
ఈ అధ్యయనంలో, ఆతిథేయి మరియు రక్తం తాగిన ఆన్స్ కోసం వెతకడం జరిగింది. దాని మొదటి గోనాడోట్రోపిన్ చక్రం సమయంలో, మూత్రం కలపడం ద్వారా యూరియాతో సహా నత్రజని సమ్మేళనాలను పొందేందుకు అరబియెన్సిస్‌ను అంచనా వేశారు. తరువాత, ఆడ దోమలు మెరుగైన మనుగడ, పునరుత్పత్తి మరియు తదుపరి ఆహార సేకరణ కోసం ఈ సంభావ్య పోషక వనరును ఎలా కేటాయించుకుంటాయో అంచనా వేయడానికి వరుస ప్రయోగాలు నిర్వహించబడ్డాయి. చివరగా, తాజా మరియు పాతబడిన ఆవు మూత్రం వాసన, ఆతిథేయి మరియు రక్తం తాగిన ఆన్స్‌కు నమ్మదగిన ఆధారాలను అందిస్తాయో లేదో నిర్ధారించడానికి అంచనా వేయబడింది. ఈ సంభావ్య పోషక వనరు కోసం తమ అన్వేషణలో, గమనించిన విభిన్న ఆకర్షణ వెనుక ఉన్న రసాయన సంబంధాలను అరబియెన్సిస్ కనుగొంది. 24 గంటల పాటు నిల్వ ఉంచిన మూత్రంలో గుర్తించిన అస్థిర సేంద్రీయ సమ్మేళనాల (VOCs) కృత్రిమ వాసన మిశ్రమాలను క్షేత్ర పరిస్థితులలో మరింతగా మూల్యాంకనం చేశారు, ఇది ప్రయోగశాల పరిస్థితులలో పొందిన ఫలితాలను విస్తరించింది మరియు వివిధ శారీరక స్థితులపై ఆవు మూత్రం వాసన ప్రభావాన్ని ప్రదర్శించింది. దోమల ఆకర్షణ. పొందిన ఫలితాలు ఆన్ అని నిర్ధారిస్తున్నాయి. అరాబియెన్సిస్, జీవిత చరిత్ర లక్షణాలను ప్రభావితం చేయడానికి వెన్నెముక గల జీవుల మూత్రంలో కనిపించే నత్రజని సమ్మేళనాలను గ్రహించి, పంపిణీ చేస్తుంది. ఈ ఫలితాలు సంభావ్య అంటువ్యాధి పరిణామాల నేపథ్యంలో చర్చించబడ్డాయి మరియు వాటిని వాహకాల పర్యవేక్షణ మరియు నియంత్రణ కోసం ఎలా ఉపయోగించవచ్చో కూడా చర్చించబడింది.
అనోఫెలెస్ అరబికాన్స్ (డోంగోలా జాతి) దోమలను 25 ± 2 °C ఉష్ణోగ్రత, 65 ± 5% సాపేక్ష ఆర్ద్రత (RH) మరియు 12:12 గంటల కాంతి:చీకటి చక్రంలో ఉంచారు. లార్వాలను స్వేదన జలంతో నింపిన ప్లాస్టిక్ ట్రేలలో (20 సెం.మీ × 18 సెం.మీ × 7 సెం.మీ) పెంచి, టెట్రామిన్® చేపల ఆహారాన్ని (టెట్రా వెర్కే, మెల్లె, DE) తినిపించారు. ప్యూపాలను 30 మి.లీ కప్పులలో (నోలాటో హెర్టిలా, ఆస్టార్ప్, SE) సేకరించి, ఆ తర్వాత వయోజన దశలోకి రావడానికి వీలుగా బగ్‌డార్మ్ పంజరాలకు (30 సెం.మీ × 30 సెం.మీ × 30 సెం.మీ; మెగావ్యూ సైన్స్, తైచుంగ్, తైవాన్) మార్చారు. వయోజన దశలోకి వచ్చిన 4 రోజుల వరకు (dpe) వయోజన దశలోకి వచ్చిన దోమలకు 10% సుక్రోజ్ ద్రావణాన్ని స్వేచ్ఛగా అందించారు. ఆ తర్వాత, ఆతిథేయి కోసం వెతుకుతున్న ఆడ దోమలకు ప్రయోగానికి ముందు వెంటనే ఆహారం అందించారు, లేదా ప్రయోగానికి ముందు రాత్రంతా స్వేదన జలంతో ఉపవాసం ఉంచారు. క్రింద వివరించిన విధంగా ప్రయోగం నిర్వహించబడింది. ఫ్లైట్ ట్యూబ్ ప్రయోగాల కోసం ఉపయోగించిన ఆడ దోమలను 4-6 గంటల పాటు ఆహారం లేకుండా ఉంచి, నీటిని యథేచ్ఛగా తాగనిచ్చారు. తదుపరి బయోఅస్సేల కోసం రక్తం పీల్చే దోమలను సిద్ధం చేయడానికి, 4 రోజుల వయస్సు గల ఆడ దోమలకు మెంబ్రేన్ ఫీడింగ్ సిస్టమ్ (హెమోటెక్ డిస్కవరీ వర్క్‌షాప్స్, అక్రింగ్టన్, UK) ఉపయోగించి డీఫైబ్రోటిక్ గొర్రె రక్తాన్ని (హాటునాలాబ్, బ్రో, SE) అందించారు. పూర్తిగా ఆహారం తీసుకున్న ఆడ దోమలను ఆ తర్వాత వేర్వేరు బోనులలోకి మార్చి, క్రింద వివరించిన ప్రయోగాలకు 3 రోజుల ముందు, క్రింద వివరించిన విధంగా నేరుగా ఆహారాన్ని గానీ, లేదా 10% సుక్రోజ్‌ను యథేచ్ఛగా గానీ అందించారు. ఈ చివరి రకం ఆడ దోమలను ఫ్లైట్ ట్యూబ్ బయోఅస్సేల కోసం ఉపయోగించి ప్రయోగశాలకు తరలించారు, ఆ తర్వాత ప్రయోగానికి 4-6 గంటల ముందు స్వేదన జలాన్ని యథేచ్ఛగా తాగనిచ్చారు.
వయోజన An.Arab ఆడ దోమలలో మూత్రం మరియు యూరియా వినియోగాన్ని లెక్కించడానికి ఆహార పరీక్షలను ఉపయోగించారు. ఆతిథేయి కోసం వెతుకుతున్న మరియు రక్తం తాగిన ఆడ దోమలకు 48 గంటల పాటు, 1% పలుచన చేసిన తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం, వివిధ గాఢతలలో యూరియా, మరియు రెండు నియంత్రణలు (10% సుక్రోజ్ మరియు నీరు) కలిగిన ఆహారాన్ని అందించారు. అదనంగా, ఆహార రంగు (1 mg ml-1 జైలీన్ సైనైడ్ FF; CAS 2650-17-1; సిగ్మా-ఆల్డ్రిచ్, స్టాక్‌హోమ్, SE)ను ఆహారానికి కలిపి, 250 µl మైక్రోసెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్‌లలో (ఆక్సిజెన్ సైంటిఫిక్, యూనియన్ సిటీ, CA, US; చిత్రం 1A) 4 × 4 మ్యాట్రిక్స్‌లో అంచు వరకు (~300 µl) నింపి అందించారు. దోమల మధ్య పోటీని మరియు రంగు యొక్క సంభావ్య ప్రభావాలను నివారించడానికి, 10 దోమలను ఒక పెద్ద పెట్రీ డిష్‌లో (12 సెం.మీ వ్యాసం మరియు 6 సెం.మీ ఎత్తు; సెమాడెని, ఓస్టర్‌ముండిగెన్, CH; చిత్రం 1A) పూర్తిగా ఉంచారు. 25 ± 2 సెం.మీ. °C వద్ద మరియు 65 ± 5% సాపేక్ష ఆర్ద్రతలో చీకటిలో. ఈ ప్రయోగాలు 5 నుండి 10 సార్లు పునరావృతం చేయబడ్డాయి. ఆహారానికి గురిచేసిన తర్వాత, తదుపరి విశ్లేషణ వరకు దోమలను -20 °C వద్ద ఉంచారు.
ఆతిథేయి మరియు రక్తం పీల్చే ఆడ అనోఫెలెస్ అరేబియానస్ ద్వారా శోషించబడిన ఆవు మూత్రం మరియు యూరియా కోసం చూడండి. ఆహార ప్రయోగం (A)లో, ఆడ దోమలకు తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం, వివిధ గాఢతలలో యూరియా, సుక్రోజ్ (10%), మరియు స్వేదన జలం (H2O)తో కూడిన ఆహారం అందించబడింది. ఆతిథేయిని వెతికే (B) మరియు రక్తం తాగిన (C) ఆడ దోమలు పరీక్షించిన ఇతర ఆహారాలన్నింటి కంటే ఎక్కువ సుక్రోజ్‌ను శోషించుకున్నాయి. ఆతిథేయిని వెతికే ఆడ దోమలు 168-గంటల ఆవు మూత్రం (B) కంటే 72-గంటల ఆవు మూత్రాన్ని తక్కువగా శోషించుకున్నాయని గమనించండి. మూత్రంలోని సగటు మొత్తం నత్రజని పరిమాణం (± ప్రామాణిక విచలనం) ఇన్సెట్‌లో సూచించబడింది. ఆతిథేయిని వెతికే (D, F) మరియు రక్తం పీల్చే (E, G) ఆడ దోమలు మోతాదుపై ఆధారపడిన పద్ధతిలో యూరియాను తీసుకుంటాయి. వేర్వేరు అక్షర నామాలతో ఉన్న సగటు పీల్చిన పరిమాణాలు (D, E) ఒకదానికొకటి గణనీయంగా భిన్నంగా ఉన్నాయి (టూకీ యొక్క పోస్ట్ హాక్ విశ్లేషణను ఉపయోగించి వన్-వే ANOVA; p < 0.05). ఎర్రర్ బార్‌లు ప్రామాణిక దోషాన్ని సూచిస్తాయి. సగటు (BE). నిటారుగా ఉన్న చుక్కల గీత లాగ్-లీనియర్ రిగ్రెషన్ లైన్‌ను సూచిస్తుంది (F, G)
గ్రహించిన ఆహారాన్ని విడుదల చేయడానికి, దోమలను ఒక్కొక్కటిగా 230 µl స్వేదన జలం ఉన్న 1.5 ml మైక్రోసెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్‌లలో ఉంచి, డిస్పోజబుల్ పెస్టల్ మరియు కార్డ్‌లెస్ మోటార్ (VWR ఇంటర్నేషనల్, లండ్, SE) ఉపయోగించి కణజాలాన్ని విచ్ఛిన్నం చేశారు, ఆ తర్వాత 10 నిమిషాల పాటు 10 krpm వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేశారు. సూపర్నాటెంట్ (200 µl)ను 96-వెల్ మైక్రోప్లేట్ (సిగ్మా-ఆల్డ్రిచ్)కు బదిలీ చేసి, స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్ ఆధారిత మైక్రోప్లేట్ రీడర్ (స్పెక్ట్రోస్టార్® నానో, BMG ల్యాబ్‌టెక్, ఓర్టెన్‌బర్గ్, DE) ఉపయోగించి అబ్సార్బెన్స్ (λ620 nm)ను నిర్ధారించారు. ప్రత్యామ్నాయంగా, దోమలను 1 ml స్వేదన జలంలో నూరి, అందులో 900 µlను స్పెక్ట్రోఫోటోమెట్రిక్ విశ్లేషణ (λ 620 nm; UV 1800, షిమాడ్జు, కిస్టా, SE) కోసం క్యూవెట్‌కు బదిలీ చేశారు. ఆహార తీసుకోవడాన్ని లెక్కించడానికి, 0.2 దిగుబడినిచ్చే సీరియల్ డైల్యూషన్ ద్వారా ఒక ప్రామాణిక వక్రరేఖను తయారు చేశారు. 1 mg ml-1 జైలీన్ సైనైడ్‌ను 1.5 µl నుండి 2.4 µl వరకు ఇచ్చారు. ఆ తర్వాత, తెలిసిన రంగు గాఢతల యొక్క ఆప్టికల్ డెన్సిటీని ఉపయోగించి, ప్రతి దోమ ఎంత ఆహారాన్ని తీసుకుందో నిర్ధారించారు.
వాల్యూమ్ డేటాను వన్-వే అనాలిసిస్ ఆఫ్ వేరియెన్స్ (ANOVA) ఉపయోగించి విశ్లేషించారు, దీని తరువాత టుకీ యొక్క పోస్ట్ హాక్ జతవారీ పోలికలు జరిగాయి (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). లీనియర్ రిగ్రెషన్ విశ్లేషణలు గాఢతపై ఆధారపడిన యూరియా తీసుకోవడాన్ని వివరించాయి మరియు ఆతిథేయిని వెతికే మరియు రక్తాన్ని పీల్చే దోమల మధ్య ప్రతిస్పందనలను పోల్చాయి (GraphPad Prism v8.0.0 for Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
ప్రతి వయస్సు సమూహం నుండి సుమారు 20 µl మూత్ర నమూనాలను క్రోమోసోర్బ్® W/AW (10 mg 80/100 మెష్, సిగ్మా ఆల్డ్రిచ్) పై బంధించి, టిన్ క్యాప్సూల్స్‌లో (8 mm × 5 mm) పొదిగారు. తయారీదారు ప్రోటోకాల్ ప్రకారం తాజా మరియు పాత మూత్రంలో నత్రజని పరిమాణాన్ని నిర్ధారించడానికి క్యాప్సూల్స్‌ను CHNS/O ఎనలైజర్ (ఫ్లాష్ 2000, థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్, వాల్థమ్, MA, US) యొక్క దహన గదిలోకి ప్రవేశపెట్టారు. ప్రామాణికంగా ఉపయోగించిన తెలిసిన యూరియా సాంద్రతల ఆధారంగా మొత్తం నత్రజని (g N l-1)ని లెక్కించారు.
ఆతిథేయి కోసం వెతకడం మరియు రక్తం పీల్చడం ద్వారా ఆడ దోమల మనుగడపై ఆహారం యొక్క ప్రభావాన్ని అంచనా వేయడానికి, గాలి ప్రసరణ మరియు ఆహార సరఫరా కోసం మూతపై (3 సెం.మీ వ్యాసం గల) జాలీతో కప్పబడిన రంధ్రం ఉన్న పెద్ద పెట్రీ డిష్‌లలో (12 సెం.మీ వ్యాసం మరియు 6 సెం.మీ ఎత్తు; సెమాడెని) దోమలను ఒక్కొక్కటిగా ఉంచారు. 4 రోజుల ప్రయోగం తర్వాత వెంటనే ఆహారాన్ని అందించారు, ఇందులో 1% పలుచన చేసిన తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం, నాలుగు గాఢతలలో యూరియా, మరియు రెండు నియంత్రణలు, 10% సుక్రోజ్ మరియు నీరు ఉన్నాయి. ప్రతి ఆహారాన్ని 5 ml సిరంజి (థర్మో ఫిషర్ సైంటిఫిక్, గోథెన్‌బర్గ్, SE) లోకి చొప్పించిన డెంటల్ టాంపోన్ (DAB డెంటల్ AB, అప్‌లాండ్స్ వాస్బీ, SE) పైకి పైపెట్ చేశారు, ప్లంగర్‌ను తీసివేసి, పెట్రీ డిష్ పైన ఉంచారు (పటం 1).1A). ప్రతిరోజూ మీ ఆహారాన్ని మార్చండి. పైన వివరించిన విధంగా ప్రయోగశాలను నిర్వహించండి. చివరి దోమ చనిపోయే వరకు (ఒక్కోదానికి n = 40) బ్రతికి ఉన్న దోమలను రోజుకు రెండుసార్లు లెక్కించారు, చనిపోయిన దోమలను పారవేశారు. వివిధ రకాల ఆహారాలు తినిపించిన దోమల మనుగడను, ఆహారాల మధ్య మనుగడ పంపిణీ పోలికలను పోల్చడానికి కాప్లాన్-మేయర్ సర్వైవల్ కర్వ్స్ మరియు లాగ్-ర్యాంక్ పరీక్షలను ఉపయోగించి గణాంకపరంగా విశ్లేషించారు (IBM SPSS స్టాటిస్టిక్స్ 24.0.0.0).
అట్టిసానో మరియు ఇతరులు[17] ఆధారంగా తయారు చేసిన ఒక కస్టమ్ దోమల ఎగిరే మిల్లు, ముందు మరియు వెనుక ప్యానెల్లు లేకుండా 5 మిమీ మందపాటి స్పష్టమైన యాక్రిలిక్ ప్యానెల్లతో (10 సెం.మీ వెడల్పు x 10 సెం.మీ పొడవు x 10 సెం.మీ ఎత్తు) తయారు చేయబడింది (Fig. 3: పైభాగం). 9 సెం.మీ దూరంలో ఉన్న ఒక జత నియోడైమియం అయస్కాంతాల మధ్య వేలాడదీసిన ఒక కీటక సూదికి చివరలను అంటించిన గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్ (0.25 మిమీ id; 7.5 సెం.మీ పొడవు) తో తయారు చేయబడిన నిలువు గొట్టంతో కూడిన ఒక పివట్ అసెంబ్లీ. అదే పదార్థంతో తయారు చేయబడిన ఒక క్షితిజ సమాంతర గొట్టం (6.5 సెం.మీ పొడవు) నిలువు గొట్టాన్ని రెండుగా విభజించి, ఒక తాడుతో కట్టబడిన చేయి మరియు కాంతి-అంతరాయ సంకేతంగా ఒక చిన్న అల్యూమినియం రేకు ముక్కను మోసే చేయిని ఏర్పరిచింది.
24 గంటల పాటు ఆహారం లేకుండా ఉంచిన ఆడ దోమలకు, వాటిని బంధించడానికి 30 నిమిషాల ముందు పైన పేర్కొన్న ఆహారాన్ని ఇచ్చారు. ఆ తర్వాత, పూర్తిగా ఆహారం తీసుకున్న ఆడ దోమలను ఒక్కొక్కటిగా మంచు మీద 2-3 నిమిషాల పాటు మత్తులోకి తీసుకువచ్చి, తేనె మైనంతో (జోయెల్ స్వెన్సన్స్ వాక్స్‌ఫ్యాబ్రిక్ AB, ముంకా ల్జుంగ్‌బై, SE) కీటకాల పిన్‌లకు అంటించి, ఆపై వాటిని క్షితిజ సమాంతర గొట్టాల చేతులకు కట్టారు. ఫ్లయింగ్ మిల్. ప్రతి ఎగురుటకు ఎన్నిసార్లు తిరిగింది అనే వివరాలను ప్రత్యేకంగా తయారు చేసిన డేటా లాగర్ ద్వారా నమోదు చేసి, ఆపై PC-Lab 2000™ సాఫ్ట్‌వేర్ (v4.01; వెల్లెమాన్, గావెరే, BE) ఉపయోగించి నిల్వ చేసి, ప్రదర్శించారు. ఈ ఫ్లైట్ మిల్లును వాతావరణ నియంత్రిత గదిలో (12 గంటల వెలుగు: 12 గంటల కాంతి: చీకటి, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH) ఉంచారు.
ఎగిరే కార్యకలాపాల నమూనాను దృశ్యమానం చేయడానికి, 24-గంటల వ్యవధిలో గంటకు ఎగిరిన మొత్తం దూరం (మీటర్లలో) మరియు వరుసగా ఎగిరిన కార్యకలాపాల మొత్తం సంఖ్యను లెక్కించారు. అదనంగా, ప్రతి ఆడ జీవి ఎగిరిన సగటు దూరాలను వివిధ చికిత్సల వారీగా పోల్చి, వన్-వే ANOVA మరియు ట్యూకీ యొక్క పోస్ట్ హాక్ విశ్లేషణ (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) ఉపయోగించి విశ్లేషించారు, ఇక్కడ సగటు దూరాన్ని ఆధారిత చరరాశిగా మరియు చికిత్సను స్వతంత్ర కారకంగా పరిగణించారు. ఇంకా, సగటు చుట్ల సంఖ్యను 10-నిమిషాల వ్యవధులలో లెక్కించారు.
An.arabiensis యొక్క పునరుత్పత్తి పనితీరుపై ఆహారం యొక్క ప్రభావాన్ని అంచనా వేయడానికి, ఆరు ఆడ దోమలను (4 dpe) రక్తం సేకరించిన తర్వాత నేరుగా బగ్‌డార్మ్ పంజరాలకు (30 సెం.మీ × 30 సెం.మీ × 30 సెం.మీ) బదిలీ చేసి, ఆపై పైన వివరించిన విధంగా 48 గంటల పాటు ప్రయోగాత్మక ఆహారాన్ని అందించారు. ఆ తర్వాత ఆహారాన్ని తొలగించి, మూడవ రోజున 20 మి.లీ స్వేదన జలంతో నింపిన గుడ్లు పెట్టే కప్పులను (30 మి.లీ; నోలాటో హెర్టిలా) 48 గంటల పాటు అందించారు, ప్రతి 24 గంటలకు నీటిని మారుస్తూ వచ్చారు. ప్రతి ఆహార నియమావళిని 20-50 సార్లు పునరావృతం చేయండి. ప్రతి ప్రయోగాత్మక పంజరంలోని గుడ్లను లెక్కించి నమోదు చేశారు. లైకా కెమెరా (DFC) 320 R2 అమర్చిన Dialux-20 మైక్రోస్కోప్ (DM1000; ఎర్నెస్ట్ లీట్జ్ వెట్జ్లార్, వెట్జ్లార్, DE) ఉపయోగించి, ప్రతి గుడ్డు యొక్క సగటు పరిమాణం మరియు పొడవు వైవిధ్యాలను (ప్రతి ఆహారానికి n ≥ 200) అంచనా వేయడానికి గుడ్ల ఉపనమూనాలను ఉపయోగించారు; మిగిలిన గుడ్లను 24 గంటల పాటు ప్రామాణిక పెంపక పరిస్థితులలో వాతావరణ నియంత్రిత గదిలో ఉంచారు, మరియు ఇటీవల పొదిగిన 1వ దశ లార్వాల ఉపనమూనాను (ప్రతి ఆహారానికి n ≥ 200) పైన వివరించిన విధంగా కొలిచారు. గుడ్ల సంఖ్య మరియు గుడ్లు మరియు లార్వాల పరిమాణాన్ని చికిత్సల మధ్య వన్-వే ANOVA మరియు ట్యూకీ యొక్క పోస్ట్ హాక్ విశ్లేషణ (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) ఉపయోగించి పోల్చారు.
జెబు మరియు అర్సి జాతుల పశువుల నుండి సేకరించిన నమూనాల నుండి, తాజాగా (నమూనా తీసుకున్న 1 గంట తర్వాత), 24 గంటలు, 72 గంటలు మరియు 168 గంటల పాటు నిల్వ ఉంచిన మూత్రంలోని హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర పదార్థాలను సేకరించారు. సౌలభ్యం కోసం, ఆవులు ఇంకా పాకలోనే ఉన్నప్పుడు, ఉదయాన్నే మూత్ర నమూనాలను సేకరించారు. 10 పశువుల నుండి మూత్ర నమూనాలను సేకరించి, ప్రతి నమూనా నుండి 100-200 ml చొప్పున, 3 లీటర్ల మూత ఉన్న వినైల్ క్లోరైడ్ ప్లాస్టిక్ డ్రమ్ములలోని వేర్వేరు పాలిమైడ్ బేకింగ్ బ్యాగులలోకి (టాపిట్స్ కోఫ్రెస్కో, ఫ్రిష్‌హాల్ట్‌ప్రొడక్టే GmbH అండ్ కో., మిండెన్, DE) బదిలీ చేశారు. ప్రతి పశువు మూత్ర నమూనాలోని హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర పదార్థాలను నేరుగా (తాజాగా) లేదా గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 24 గంటలు, 72 గంటలు మరియు 168 గంటల పాటు నిల్వ ఉంచిన తర్వాత సేకరించారు, అంటే ప్రతి మూత్ర నమూనా ప్రతి వయస్సు సమూహానికి ప్రాతినిధ్యం వహించేలా చూశారు.
హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర పదార్థాల సేకరణ కోసం, ఒక డయాఫ్రమ్ వాక్యూమ్ పంప్ (KNF న్యూబర్గర్, ఫ్రీబర్గ్, DE) ఉపయోగించి, యాక్టివేటెడ్ కార్బన్‌తో వడపోసిన వాయు ప్రవాహాన్ని (100 మి.లీ/నిమిషం) ఒక పాలిమైడ్ సంచి ద్వారా అధిశోషణ కాలమ్‌లోకి 2.5 గంటల పాటు ప్రసరింపజేయడానికి ఒక క్లోజ్డ్-లూప్ వ్యవస్థను ఉపయోగించారు. నియంత్రణగా, ఖాళీ పాలిమైడ్ సంచి నుండి హెడ్‌స్పేస్ సేకరణ జరిగింది. అధిశోషణ కాలమ్‌ను, గ్లాస్ వూల్ ప్లగ్‌ల మధ్య 35 మి.గ్రా పోరాపాక్ క్యూ (50/80 మెష్; వాటర్స్ అసోసియేట్స్, మిల్ఫోర్డ్, MA, US) కలిగిన టెఫ్లాన్ ట్యూబింగ్ (5.5 సెం.మీ x 3 మి.మీ లోపలి వ్యాసం)తో తయారు చేశారు. ఉపయోగించడానికి ముందు, కాలమ్‌ను 1 మి.లీ పునఃస్వేదనం చేసిన ఎన్-హెక్సేన్ (మెర్క్, డార్మ్‌స్టాడ్, DE) మరియు 1 మి.లీ పెంటేన్ (99.0% స్వచ్ఛమైన ద్రావకం GC గ్రేడ్, సిగ్మా ఆల్డ్రిచ్)తో ఫ్లష్ చేశారు. అధిశోషించబడిన అస్థిర పదార్థాలను 400 మైక్రోలీటర్ల పెంటేన్‌తో ఎల్యూట్ చేశారు. హెడ్‌స్పేస్ సేకరణలను కలిపి, ఆపై నిల్వ చేశారు. తదుపరి విశ్లేషణ కోసం ఉపయోగించే వరకు -20°C వద్ద ఉంచాలి.
ఆతిథేయిని వెతికే మరియు రక్తాన్ని తాగే An యొక్క ప్రవర్తనా ప్రతిస్పందనలు. తాజా, 24-గంటలు, 72-గంటలు, మరియు 168-గంటల వయస్సు గల మూత్రం నుండి సేకరించిన హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర సారాలను అరాబిడోప్సిస్ దోమల నుండి అస్థిర సారాల కోసం ఒక సరళ గాజు గొట్టం ఓల్ఫాక్టోమీటర్ [18] ఉపయోగించి విశ్లేషించారు. ఈ ప్రయోగాలు ZT 13-15 సమయంలో, అంటే An యొక్క గృహ-అన్వేషణ కార్యకలాపాల గరిష్ట కాలంలో నిర్వహించబడ్డాయి. అరబ్ [19]. ఒక గాజు గొట్టం ఓల్ఫాక్టోమీటర్ (80 సెం.మీ × 9.5 సెం.మీ లోపలి వ్యాసం) పై నుండి 3 ± 1 lx ఎరుపు కాంతితో ప్రకాశింపజేయబడింది. బొగ్గుతో వడపోసిన మరియు తేమతో కూడిన గాలి ప్రవాహం (25 ± 2 °C, 65 ± 2% సాపేక్ష ఆర్ద్రత) 30 సెం.మీ సెకను-1 వద్ద బయోఅస్సే గుండా ప్రవహించింది. గాలిని స్టెయిన్‌లెస్ స్టీల్ మెష్ స్క్రీన్‌ల శ్రేణి గుండా పంపడం ద్వారా, ఒక లామినార్ ప్రవాహం మరియు ఏకరీతి ప్లూమ్ నిర్మాణం సృష్టించబడింది. డెంటల్ టాంపోన్ డిస్పెన్సర్ (4 సెం.మీ × 1 సెం.మీ; L:D; DAB డెంటల్ AB), ఓల్ఫాక్టోమీటర్ యొక్క గాలి వీచే వైపున ఉన్న 5 సెం.మీ. కాయిల్ నుండి వేలాడదీయబడింది, ప్రతి 5 నిమిషాలకు స్టిమ్యులేటర్‌ను మారుస్తూ ఉన్నారు. విశ్లేషణ కోసం, ప్రతి హెడ్‌స్పేస్ ఎక్స్‌ట్రాక్ట్ నుండి 10 μl ను, 1:10 నిష్పత్తిలో పలుచగా చేసి, స్టిమ్యులస్‌గా ఉపయోగించారు. అంతే పరిమాణంలో పెంటేన్‌ను కంట్రోల్‌గా ఉపయోగించారు. ప్రయోగం ప్రారంభించడానికి 2-3 గంటల ముందు, ఆతిథేయి కోసం వెతికే లేదా రక్తం పీల్చే దోమలను ఒక్కొక్కటిగా విడుదల చేసే బోనులలో ఉంచారు. విడుదల చేసే బోనును ఓల్ఫాక్టోమీటర్ యొక్క గాలి వీచే వ్యతిరేక వైపున ఉంచారు, మరియు దోమలను 1 నిమిషం పాటు అక్కడి వాతావరణానికి అలవాటు పడనిచ్చారు, ఆ తర్వాత విడుదల చేయడానికి బోను యొక్క బటర్‌ఫ్లై వాల్వ్‌ను తెరిచారు. విడుదలైన 5 నిమిషాలలోపు మూలాన్ని తాకిన దోమల నిష్పత్తిగా ట్రీట్‌మెంట్ లేదా కంట్రోల్‌కు ఆకర్షణను విశ్లేషించారు. ప్రతి హెడ్‌స్పేస్ వోలటైల్ ఎక్స్‌ట్రాక్ట్ మరియు కంట్రోల్‌ను కనీసం 30 సార్లు పునరావృతం చేశారు, మరియు ఏ ఒక్క రోజు ప్రభావాలను నివారించడానికి, ప్రతి ప్రయోగాత్మక రోజున సమాన సంఖ్యలో ట్రీట్‌మెంట్‌లు మరియు కంట్రోల్‌లను పరీక్షించారు. ఆతిథేయి మరియు రక్తం తాగిన దోమల నుండి వెతికే ప్రతిస్పందనలు. జవాబు. అరబిక్ మరియు హెడ్‌స్పేస్ సెట్‌లను నామినల్ లాజిస్టిక్ రిగ్రెషన్ ఉపయోగించి విశ్లేషించారు, ఆ తర్వాత ఆడ్ రేషియోల కోసం జతవారీ పోలికలు జరిపారు (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
ఆన్ యొక్క గుడ్లు పెట్టే ప్రతిస్పందన. తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం నుండి తీసిన హెడ్‌స్పేస్ ఎక్స్‌ట్రాక్ట్‌లను బగ్‌డార్మ్ పంజరాలలో (30 సెం.మీ × 30 సెం.మీ × 30 సెం.మీ; మెగావ్యూ సైన్స్) విశ్లేషించారు. 20 మి.లీ స్వేదన జలంతో నింపిన ప్లాస్టిక్ కప్పులను (30 మి.లీ; నోలాటో హెర్టిలా) గుడ్లు పెట్టే ఉపరితలంగా ఉపయోగించారు మరియు వాటిని పంజరం యొక్క ఎదురెదురు మూలల్లో, 24 సెం.మీ దూరంలో ఉంచారు. ట్రీట్‌మెంట్ కప్పులను ప్రతి హెడ్‌స్పేస్ ఎక్స్‌ట్రాక్ట్ నుండి 10 మైక్రోలీటర్లతో 1:10 పలుచనలో సర్దుబాటు చేశారు. కంట్రోల్ కప్పును సర్దుబాటు చేయడానికి సమాన పరిమాణంలో పెంటేన్‌ను ఉపయోగించారు. స్థాన ప్రభావాలను నియంత్రించడానికి ప్రతి ప్రయోగం మధ్యలో ట్రీట్‌మెంట్ మరియు కంట్రోల్ కప్పులను మార్చుకున్నారు. రక్తం తాగిన పది ఆడ ఈగలను ZT 9-11 వద్ద ప్రయోగాత్మక పంజరాలలోకి వదిలారు మరియు 24 గంటల తర్వాత కప్పులలోని గుడ్లను లెక్కించారు. గుడ్లు పెట్టే సూచికను లెక్కించే సూత్రం: (ట్రీట్‌మెంట్ కప్పులో పెట్టిన గుడ్ల సంఖ్య – కంట్రోల్ కప్పులో పెట్టిన గుడ్ల సంఖ్య)/(పెట్టిన మొత్తం గుడ్ల సంఖ్య). ప్రతి ట్రీట్‌మెంట్‌ను పునరావృతం చేశారు. 8 సార్లు.
గతంలో వివరించిన విధంగా [20] ఆడ An.arabiensis యొక్క గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రాఫిక్ మరియు ఎలక్ట్రాన్ యాంటెన్నా నమూనా గుర్తింపు (GC-EAD) విశ్లేషణ నిర్వహించబడింది. క్లుప్తంగా, HP-5 కాలమ్ (30 మీ × 0.25 మిమీ id, 0.25 μm ఫిల్మ్ మందం, అజిలెంట్ టెక్నాలజీస్) అమర్చిన అజిలెంట్ టెక్నాలజీస్ 6890 GC (శాంటా క్లారా, CA, US) ఉపయోగించి తాజా హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర సారాలను వేరు చేశారు. మరియు పాతబడిన మూత్రం. హైడ్రోజన్‌ను మొబైల్ ఫేజ్‌గా ఉపయోగించారు, దీని సగటు లీనియర్ ఫ్లో రేట్ 45 cm s-1. ప్రతి నమూనా (2 μl)ను 225 °C ఇన్లెట్ ఉష్ణోగ్రతతో స్ప్లిట్‌లెస్ మోడ్‌లో 30 సెకన్ల పాటు ఇంజెక్ట్ చేశారు. GC ఓవెన్ ఉష్ణోగ్రతను 35 °C (3 నిమిషాల హోల్డ్) నుండి 300 °C (10 నిమిషాల హోల్డ్) వరకు 10 °C min-1 చొప్పున ప్రోగ్రామ్ చేశారు. GC ఎఫ్లూయెంట్ స్ప్లిటర్‌లో, 4 psi నైట్రోజన్‌ను జోడించి, ఫ్లేమ్ అయనైజేషన్ డిటెక్టర్ మరియు EAD మధ్య ఉన్న గెర్‌స్టెల్ 3D/2 లో డెడ్ వాల్యూమ్ క్రాస్ (గెర్‌స్టెల్, ముల్హీమ్, DE)లో 1:1 నిష్పత్తిలో విభజించారు. EAD కోసం ఉద్దేశించిన GC ఎఫ్లూయెంట్ క్యాపిల్లరీని, GC ఓవెన్ ఉష్ణోగ్రతకు 5 °C అదనంగా ట్రాక్ చేసే గెర్‌స్టెల్ ODP-2 ట్రాన్స్‌ఫర్ లైన్ ద్వారా ఒక గాజు గొట్టంలోకి (10 cm × 8 mm) పంపారు, అక్కడ దానిని కార్బన్-ఫిల్టర్ చేసిన, తేమతో కూడిన గాలితో (1.5 l) కలిపారు. నిమిషం−1). యాంటెన్నాను ట్యూబ్ అవుట్‌లెట్ నుండి 0.5 సెం.మీ దూరంలో ఉంచారు. ప్రతి ఒక్క దోమ ఒక పునరావృత్తిగా పరిగణించబడింది మరియు ఆతిథేయి కోసం వెతికే దోమల విషయంలో, ప్రతి వయస్సు మూత్ర నమూనాలపై కనీసం మూడు పునరావృత్తులు నిర్వహించబడ్డాయి.
GC-EAD విశ్లేషణలో యాంటెనల్ ప్రతిస్పందనలను ప్రేరేపించడానికి, 70 eV వద్ద ఎలక్ట్రాన్ ఇంపాక్ట్ అయనైజేషన్ మోడ్‌లో పనిచేసే ఒక సంయుక్త GC మరియు మాస్ స్పెక్ట్రోమీటర్ (GC-MS; 6890 GC మరియు 5975 MS; అజిలెంట్ టెక్నాలజీస్)ను ఉపయోగించి, తాజా మరియు పాతబడిన ఆవు మూత్రం యొక్క హెడ్‌స్పేస్ సేకరణలలోని జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాలను గుర్తించడం జరిగింది. GCకి HP-5MS UI-కోటెడ్ ఫ్యూజ్డ్ సిలికా క్యాపిల్లరీ కాలమ్ (60 మీ × 0.25 మిమీ లోపలి వ్యాసం, 0.25 μm ఫిల్మ్ మందం) అమర్చబడింది. దీనిలో హీలియంను మొబైల్ ఫేజ్‌గా, సగటు లీనియర్ ఫ్లో రేట్ 35 cm s-1తో ఉపయోగించారు. GC-EAD విశ్లేషణ కోసం ఉపయోగించిన అవే ఇంజెక్టర్ సెట్టింగ్‌లు మరియు ఓవెన్ ఉష్ణోగ్రతను ఉపయోగించి 2 μl నమూనాను ఇంజెక్ట్ చేశారు. కస్టమ్ లైబ్రరీ మరియు NIST14 లైబ్రరీ (అజిలెంట్)తో పోల్చి, వాటి రిటెన్షన్ టైమ్ (కోవాట్ ఇండెక్స్) మరియు మాస్ స్పెక్ట్రా ఆధారంగా సమ్మేళనాలను గుర్తించారు. గుర్తించిన సమ్మేళనాలను ప్రామాణిక స్టాండర్డ్స్‌ను (అదనపు ఫైల్ 1: టేబుల్ S2) ఇంజెక్ట్ చేయడం ద్వారా నిర్ధారించారు. పరిమాణ నిర్ధారణ కోసం, హెప్టిల్ అసిటేట్ (10 ng, 99.8% రసాయన స్వచ్ఛత, ఆల్డ్రిచ్)ను బాహ్య ప్రమాణంగా ఇంజెక్ట్ చేశారు.
ఆతిథేయి కోసం వెతికే మరియు రక్తం పీల్చే ఆన్స్.అరాబియెన్సిస్‌ను ఆకర్షించడానికి, తాజా మరియు పాత మూత్రంలో గుర్తించిన జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాలతో కూడిన ఒక కృత్రిమ వాసన మిశ్రమం యొక్క ప్రభావాన్ని, పైన పేర్కొన్న అదే ఓల్ఫాక్టోమీటర్ మరియు ప్రోటోకాల్‌ను ఉపయోగించి మూల్యాంకనం చేయడం. ఈ కృత్రిమ మిశ్రమాలు, తాజా, 24-గంటలు, 48-గంటలు, 72-గంటలు, మరియు 168-గంటల పాత మూత్రం యొక్క మిశ్రమ హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర సారాలలోని సమ్మేళనాల కూర్పు మరియు నిష్పత్తులను అనుకరించాయి (పటం 5D-G; అదనపు ఫైల్ 1: పట్టిక S2). విశ్లేషణ కోసం, ఆతిథేయి మరియు రక్తం పీల్చే దోమలకు ఆకర్షణను అంచనా వేయడానికి, సుమారుగా 140-2400 ng h-1 పరిధిలో మొత్తం విడుదల రేటు కలిగిన, పూర్తిగా కృత్రిమ మిశ్రమం యొక్క 1:100 పలుచన నుండి 10 μl ఉపయోగించండి. ఆ తర్వాత, పూర్తి మిశ్రమాలపై పరీక్ష నిర్వహించబడుతుంది, దీనిలో పూర్తి మిశ్రమంలోని ఏక సమ్మేళనాల సబ్‌ట్రాక్టివ్ మిశ్రమాలు తొలగించబడతాయి. ఆతిథేయి మరియు రక్తం తాగిన ఆన్స్.అరాబియెన్సిస్ నుండి ప్రతిస్పందనలను కృత్రిమ మరియు సబ్‌ట్రాక్టివ్ మిశ్రమాలతో పోల్చి చూడటం. మిశ్రమాలను నామినల్ లాజిస్టిక్ రిగ్రెషన్ ఉపయోగించి విశ్లేషించారు, ఆ తర్వాత ఆడ్ రేషియోల కోసం జతవారీ పోలికలు జరిపారు (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
మలేరియా దోమలకు ఆవు మూత్రం ఆతిథ్య ఆవాస సూచనగా పనిచేస్తుందో లేదో అంచనా వేయడానికి, పైన వివరించిన విధంగా సేకరించిన తాజా మరియు పాతబడిన ఆవు మూత్రం, మరియు నీటిని జాలీలు గల 3 లీటర్ల బకెట్లలో (100 మి.లీ) ఉంచి, ఆతిథ్య ఎర ఉచ్చులలో అమర్చారు. (BG-HDT వెర్షన్; బయోజెంట్స్, రెగెన్స్‌బర్గ్, DE). పది ఉచ్చులను పశువులు లేని పచ్చిక బయళ్లలో, శాశ్వత సంతానోత్పత్తి ప్రదేశాలు మరియు గ్రామాలలో, గ్రామ సమాజానికి (సిలే, ఇథియోపియా, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) 400 మీటర్ల దూరంలో, 50 మీటర్ల దూరంలో ఉంచారు. ఆతిథ్య జీవి ఉనికిని అనుకరించడానికి ఐదు ఉచ్చులను వేడి చేయగా, మిగిలిన ఐదు ఉచ్చులను వేడి చేయకుండా వదిలేశారు. ప్రతి చికిత్సా ప్రదేశాన్ని మొత్తం ఐదు రాత్రుల పాటు ప్రతి రాత్రి మార్చారు. వివిధ వయస్సుల మూత్రంతో ఎర వేసిన ఉచ్చులలో పట్టుబడిన దోమల సంఖ్యను బీటా బైనామియల్ డిస్ట్రిబ్యూషన్‌తో లాజిస్టిక్ రిగ్రెషన్ ఉపయోగించి పోల్చారు (JMP Pro, v14.0.0, SAS ఇన్‌స్టిట్యూట్ ఇంక్.).
ఇథియోపియాలోని ఒరోమియా ప్రాంతంలో, మాకి పట్టణానికి సమీపంలో ఉన్న మలేరియా ప్రబలంగా ఉన్న ఒక గ్రామంలో (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; చిత్రం 6A). ఈ అధ్యయనం వార్షిక గృహ అవశేష పిచికారీకి ముందు, ఆగస్టు మధ్య నుండి సెప్టెంబర్ మధ్య వరకు, సుదీర్ఘ వర్షాకాలంతో పాటు నిర్వహించబడింది. అధ్యయనం కోసం గ్రామ శివార్లలో ఉన్న ఐదు జతల ఇళ్లను (20–50 మీటర్ల దూరంలో) ఎంపిక చేశారు (చిత్రం 6A). ఇళ్లను ఎంపిక చేయడానికి ఉపయోగించిన ప్రమాణాలు: ఇంట్లోకి జంతువులను అనుమతించకపోవడం, ఇంట్లో వంట చేయడానికి (కట్టెలు లేదా బొగ్గును ఉపయోగించి) అనుమతి లేకపోవడం (కనీసం ప్రయోగావస్థలోనైనా), మరియు ఇళ్లలో గరిష్టంగా ఇద్దరు నివాసులు ఉండటం, పురుగుమందులు లేని ప్రదేశాలలో నిద్రించడం. శుద్ధి చేసిన దోమల వల కింద. వరల్డ్ మెడికల్ అసోసియేషన్ డిక్లరేషన్ ఆఫ్ హెల్సింకి ద్వారా స్థాపించబడిన మార్గదర్శకాలకు అనుగుణంగా, అడిస్ అబాబా విశ్వవిద్యాలయం, ఫ్యాకల్టీ ఆఫ్ నేచురల్ సైన్సెస్ (CNS-IRB) యొక్క ఇన్‌స్టిట్యూషనల్ రీసెర్చ్ ఎథిక్స్ రివ్యూ బోర్డ్ (IRB/022/2016) ద్వారా నైతిక ఆమోదం మంజూరు చేయబడింది. ఆరోగ్య విస్తరణ సిబ్బంది సహాయంతో ప్రతి ఇంటి పెద్ద నుండి సమ్మతి పొందబడింది. ఈ మొత్తం ప్రక్రియ జిల్లా మరియు వార్డు ('కెబెలే') స్థాయిలో స్థానిక పరిపాలనలచే ఆమోదించబడింది. ప్రయోగాత్మక రూపకల్పన 2 × 2 లాటిన్ స్క్వేర్ డిజైన్‌ను అనుసరించింది, దీనిలో మొదటి రాత్రి జతగా ఉన్న ఇళ్లకు సింథటిక్ మిశ్రమాలు మరియు నియంత్రణలు కేటాయించబడ్డాయి మరియు తదుపరి ప్రయోగాత్మక రాత్రి ఇళ్ల మధ్య మార్పిడి చేయబడ్డాయి. ఈ ప్రక్రియ పదిసార్లు పునరావృతమైంది. అదనంగా, ఎంపిక చేసిన ఇళ్లలో దోమల కార్యకలాపాలను అంచనా వేయడానికి, ఫీల్డ్ ట్రయల్ ప్రారంభంలో, మధ్యలో మరియు చివరిలో వరుసగా ఐదు రాత్రులు ఒకే సమయంలో CDC ట్రాప్‌లు పనిచేసేలా ఏర్పాటు చేయబడ్డాయి.
ఆరు జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాలను కలిగి ఉన్న ఒక కృత్రిమ మిశ్రమాన్ని హెప్టేన్ (97.0% సాల్వెంట్ GC గ్రేడ్, సిగ్మా ఆల్డ్రిచ్)లో కరిగించి, దూది వత్తి డిస్పెన్సర్ [20] ఉపయోగించి 140 ng h-1 వద్ద విడుదల చేశారు. ఈ వత్తి డిస్పెన్సర్ 12 గంటల ప్రయోగం అంతటా అన్ని సమ్మేళనాలను స్థిరమైన నిష్పత్తిలో విడుదల చేయడానికి అనుమతించింది. హెప్టేన్‌ను నియంత్రణగా ఉపయోగించారు. సెంటర్స్ ఫర్ డిసీజ్ కంట్రోల్ అండ్ ప్రివెన్షన్ (CDC) లైట్ ట్రాప్ (జాన్ W. హాక్ కంపెనీ, గెయిన్స్‌విల్లే, FL, US; చిత్రం 6A) యొక్క ప్రవేశ ద్వారం పక్కన సీసాను వేలాడదీశారు. ట్రాప్‌లను నేల నుండి 0.8 – 1 మీటర్ల ఎత్తులో, మంచం పాదాల దగ్గర వేలాడదీశారు, మరియు ఒక వాలంటీర్ చికిత్స చేయని దోమల వల కింద నిద్రించి, 18:00 మరియు 06:30 మధ్య దీనిని ఆపరేట్ చేశారు. పట్టుబడిన దోమలను వాటి లింగం మరియు శారీరక స్థితి (ఆహారం తీసుకోని, ఆహారం తీసుకున్న, పాక్షిక గర్భవతి, మరియు గర్భవతి [21]) ఆధారంగా వర్గీకరించి, తరువాత పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్ (PCR) విశ్లేషణను ఉపయోగించి A. జాతిగా రూపాత్మకంగా గుర్తించబడిన వాటిని గుర్తించారు. gambiae sl. సంక్లిష్ట సభ్యులు [23]. క్షేత్ర అధ్యయనంలో, జత గృహాల ఉచ్చులను నామినల్ లాజిస్టిక్ ఫిట్ మోడల్‌ను ఉపయోగించి విశ్లేషించారు, ఇక్కడ ఆకర్షణ అనేది ఆధారిత వేరియబుల్ మరియు చికిత్స (సింథటిక్ మిశ్రమం వర్సెస్ నియంత్రణ) స్థిర ప్రభావం (JMP® 14.0. 0. SAS ఇన్‌స్టిట్యూట్ ఇంక్.). ఇక్కడ, మేము లైక్లిహుడ్ రేషియో పరీక్ష నుండి χ2 మరియు p-విలువలను నివేదిస్తున్నాము.
ఇది సురక్షితమేనా అని అంచనా వేయండి. ఆతిథేయిని వెతికే మరియు రక్తం పీల్చే ఆడ కీటకాల ఆహార ప్రయోగాలలో (4 రోజుల పోస్ట్ పోస్ట్ - dpe), అరబియెన్సిస్ ఆహారం ఇచ్చిన 48 గంటలలోపు, దాని ప్రధాన నత్రజని వనరైన యూరియాను నేరుగా ఆహారంగా తీసుకోవడం ద్వారా పొందగలిగింది (పటం 1A). ఆతిథేయిని వెతికే మరియు రక్తం పీల్చే ఆడ కీటకాలు రెండూ, ఇతర ఏ ఆహారం లేదా నీటి కంటే సుక్రోజ్‌ను గణనీయంగా ఎక్కువగా శోషించుకున్నాయి (వరుసగా F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 మరియు F(5,299) = 56.00, p < 0.0001; పటం 1B,C). అంతేకాకుండా, ఆతిథేయిని వెతికే ఆడ కీటకాలు 168 గంటల వద్ద ఉన్న మూత్రంతో పోలిస్తే 72 గంటల వద్ద ఉన్న మూత్రంలో తక్కువగా తిన్నాయి (పటం 1B). యూరియా కలిగిన ఆహారాన్ని అందించినప్పుడు, ఆతిథేయిని వెతికే ఆడ కీటకాలు ఇతర అన్ని గాఢతలు మరియు నీటితో పోలిస్తే 2.69 mM వద్ద గణనీయంగా ఎక్కువ మొత్తంలో యూరియాను శోషించుకున్నాయి, అయితే 10% గాఢతతో పోలిస్తే తేడాను గుర్తించలేనంతగా శోషించుకున్నాయి. సుక్రోజ్ (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; చిత్రం 1D). ఇది రక్తం తాగిన ఆడవాళ్ల ప్రతిస్పందనకు విరుద్ధంగా ఉంది, వారు సాధారణంగా నీటి కంటే యూరియా ఉన్న ఆహారాన్ని గణనీయంగా ఎక్కువగా శోషించుకున్నారు, అయినప్పటికీ 10% కంటే తక్కువ సుక్రోజ్‌ను శోషించుకున్నారు (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; చిత్రం 1E). అంతేకాకుండా, రెండు శారీరక స్థితులను పోల్చినప్పుడు, అతి తక్కువ గాఢతలలో, ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడవాళ్ల కంటే రక్తం తీసిన ఆడవాళ్లు ఎక్కువ యూరియాను శోషించుకున్నారు, మరియు అధిక గాఢతలలో ఈ ఆడవాళ్లు దాదాపు సమాన మొత్తంలో యూరియాను శోషించుకున్నారు (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; చిత్రం 1F, G). యూరియా ఉన్న ఆహారం నుండి తీసుకున్నది సరైన విలువలను కలిగి ఉన్నట్లు కనిపించినప్పటికీ (చిత్రం 1D,E), రెండు శారీరక స్థితులలోని ఆడవాళ్లు కూడా చేయగలిగారు యూరియా గాఢతల మొత్తం పరిధిలో శోషించబడిన యూరియా మొత్తాన్ని లాగ్-లీనియర్ పద్ధతిలో మాడ్యులేట్ చేస్తాయి (Fig. 1F,G). అదేవిధంగా, దోమలు శోషించబడిన మూత్రం మొత్తాన్ని నియంత్రించడం ద్వారా వాటి నత్రజని గ్రహణాన్ని నియంత్రిస్తున్నట్లు కనిపిస్తుంది, ఎందుకంటే మూత్రంలోని నత్రజని మొత్తం శోషించబడిన మొత్తంలో ప్రతిబింబిస్తుంది (Figure 1B, C మరియు B ఇన్సెట్‌లు).
ఆతిథేయి కోసం వెతికే మరియు రక్తం పీల్చే దోమల మనుగడపై మూత్రం మరియు యూరియా ప్రభావాలను అంచనా వేయడానికి, ఆడ దోమలకు నాలుగు వయస్సుల (తాజా, 24 గంటలు, 72 గంటలు, మరియు 168 గంటల తర్వాత) మూత్రాన్ని మరియు వివిధ గాఢతలలో యూరియాను ఆహారంగా ఇచ్చారు. అలాగే, నియంత్రణగా స్వేదన జలం మరియు 10% సుక్రోజ్‌ను కూడా ఉపయోగించారు (పటం 2A). ఈ మనుగడ విశ్లేషణలో, ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడ దోమల (మూత్రం: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; యూరియా: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; పటం 2B, C) మరియు రక్తం పీల్చే ఆడ దోమల (మూత్రం: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; యూరియా: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001) మొత్తం మనుగడపై ఆహారం గణనీయమైన ప్రభావాన్ని చూపిందని వెల్లడైంది. 0.0001; పటం 2D,E). అన్ని ప్రయోగాలలో, సుక్రోజ్ ఆహారం తిన్న ఆడవాళ్లతో పోలిస్తే, మూత్రం, యూరియా మరియు నీటితో కూడిన ఆహారం తిన్న ఆడవాళ్ల మనుగడ రేట్లు గణనీయంగా తక్కువగా ఉన్నాయి (పటం 2B-E). తాజా మరియు నిల్వ ఉన్న మూత్రం తిన్న ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడవాళ్లు వేర్వేరు మనుగడ రేట్లను ప్రదర్శించాయి, 72-గంటల నిల్వ ఉన్న మూత్రం తిన్నవాటికి (p = 0.016) అత్యల్ప మనుగడ సంభావ్యత ఉంది (పటం 2B). అంతేకాకుండా, 135 mM యూరియా తిన్న ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడవాళ్లు నీటి నియంత్రణల కంటే ఎక్కువ కాలం జీవించారు (p < 0.04) (పటం 2C). నీటితో పోలిస్తే, తాజా మూత్రం మరియు 24-గంటల మూత్రం తిన్న ఆడవాళ్లు ఎక్కువ కాలం జీవించారు (వరుసగా p = 0.001 మరియు p = 0.012; పటం 2D), అయితే 72-గంటల మూత్రం తిన్న ఆడవాళ్లు తాజా మూత్రం మరియు 24-గంటల నిల్వ ఉన్న మూత్రం తిన్నవాటి కంటే ఎక్కువ కాలం జీవించారు (వరుసగా p < 0.0001 మరియు p = 0.013; (పటం 2D). 135 mM యూరియా తినిపించినప్పుడు, రక్తం తాగిన ఆడ జీవులు యూరియా మరియు నీటి యొక్క అన్ని ఇతర గాఢతల కంటే ఎక్కువ కాలం జీవించాయి (p < 0.013; పటం 2E).
ఆవు మూత్రం మరియు యూరియాను ఆహారంగా తీసుకునే ఆతిథేయి మరియు రక్తాన్ని పీల్చే ఆడ అనోఫెలెస్ అరబినిస్ దోమల మనుగడ. బయోఅస్సే (A)లో, ఆడ దోమలకు తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం, వివిధ గాఢతలలో యూరియా, సుక్రోజ్ (10%) మరియు స్వేదన జలం (H2O) కలిగిన ఆహారాన్ని అందించారు. మూత్రం (B, D) మరియు యూరియా (C, E) తిన్న ఆడ దోమలు, మరియు నియంత్రణ సమూహాలైన సుక్రోజ్ మరియు నీరు అన్నీ చనిపోయే వరకు, ఆతిథేయిని వెతుక్కునే (B, C) మరియు రక్తాన్ని పీల్చే (D, E) దోమల మనుగడను ప్రతి 12 గంటలకు నమోదు చేశారు.
24 గంటల వ్యవధిలో ఫ్లైట్ మిల్ పరీక్షలో నిర్ధారించబడిన మొత్తం దూరం మరియు ప్రదక్షిణల సంఖ్య, ఆతిథేయిని వెతికే మరియు రక్తాన్ని పీల్చే దోమల మధ్య భిన్నంగా ఉన్నాయి, ఇవి మొత్తం మీద తక్కువ ఎగిరే చురుకుదనాన్ని చూపించాయి (పటం 3). తాజా మరియు పాత మూత్రం లేదా సుక్రోజ్ మరియు నీటిని అందించిన ఆతిథేయిని వెతికే దోమలు విభిన్నమైన ఎగిరే నమూనాలను చూపించాయి (పటం 3), తాజా మూత్రాన్ని తాగిన ఆడ దోమలు తెల్లవారుజామున మరింత చురుకుగా ఉండగా, 24 మరియు 168 గంటల పాత మూత్రాన్ని తాగినవి తక్కువ ఎగిరే నమూనాలను ప్రదర్శించాయి మరియు ప్రధానంగా పగటిపూట చురుకుగా ఉన్నాయి. సుక్రోజ్ లేదా 72 గంటల మూత్రాన్ని అందించిన ఆడ దోమలు 24 గంటల వ్యవధిలో చురుకుగా ఉండగా, నీటిని అందించిన ఆడ దోమలు మధ్యకాలంలో మరింత చురుకుగా ఉన్నాయి. సుక్రోజ్‌ను తాగిన దోమలు అర్ధరాత్రి మరియు తెల్లవారుజామున అత్యధిక స్థాయిలో చురుకుదనాన్ని ప్రదర్శించగా, 72 గంటల పాత మూత్రాన్ని తాగినవి 24 గంటల వ్యవధిలో వాటి చురుకుదనం క్రమంగా తగ్గడాన్ని అనుభవించాయి (పటం 3).
ఆవు మూత్రం మరియు యూరియాను ఆహారంగా తీసుకునే, వేటాడి రక్తాన్ని పీల్చే ఆడ అనోఫెలెస్ అరబినిస్ దోమల ఎగిరే తీరు. ఫ్లైట్ మిల్ పరీక్షలో, తాజా మరియు పాతబడిన ఆవు మూత్రం, వివిధ గాఢతలలో యూరియా, సుక్రోజ్ (10%), మరియు స్వేదన జలం (H2O) ఆహారంగా తీసుకున్న ఆడ దోమలను, అడ్డంగా, స్వేచ్ఛగా తిరిగే చేతులకు (పైన) కట్టి ఉంచారు. ఆతిథేయిని వెతికే (ఎడమ) మరియు రక్తాన్ని పీల్చే (కుడి) ఆడ దోమల కోసం, 24 గంటల వ్యవధిలో ప్రతి ఆహారానికి గంటకు ప్రయాణించిన మొత్తం దూరం మరియు ప్రయాణాల సంఖ్యను నమోదు చేశారు (ముదురు: బూడిద రంగు; లేత: తెలుపు). సగటు దూరం మరియు సగటు ప్రయాణాల సంఖ్య సిర్కాడియన్ యాక్టివిటీ గ్రాఫ్‌కు కుడి వైపున చూపబడ్డాయి. ఎర్రర్ బార్‌లు సగటు యొక్క ప్రామాణిక దోషాన్ని సూచిస్తాయి. గణాంక విశ్లేషణ కోసం పాఠాన్ని చూడండి.
సాధారణంగా, ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడ దోమల మొత్తం ఎగిరే తీరు, 24 గంటల వ్యవధిలో అవి ప్రయాణించిన దూరం మాదిరిగానే ఒక నమూనాను అనుసరించింది. సగటు ఎగిరే దూరం, తీసుకున్న ఆహారం ద్వారా గణనీయంగా ప్రభావితమైంది (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), మరియు 72 గంటల పాటు నిల్వ ఉంచిన మూత్రాన్ని తీసుకున్న ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడ దోమలు, మిగతా అన్ని ఆహారాలతో పోలిస్తే గణనీయంగా ఎక్కువ దూరం ప్రయాణించాయి (p < 0.0001), మరియు సుక్రోజ్ తిన్న దోమలు, తాజా (p = 0.022) మరియు 24 గంటల పాటు నిల్వ ఉంచిన మూత్రాన్ని (p = 0.022) తిన్న దోమల కంటే ఎక్కువ దూరం ప్రయాణించాయి. మూత్రం ఆహారం ద్వారా వివరించబడిన ఎగిరే తీరు నమూనాకు విరుద్ధంగా, యూరియా తిన్న ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడ దోమలు 24 గంటల వ్యవధిలో నిరంతర ఎగిరే తీరును ప్రదర్శించాయి, ఇది చీకటి దశ యొక్క రెండవ భాగంలో గరిష్ట స్థాయికి చేరుకుంది (పటం 3). కార్యకలాపాల నమూనాలు ఒకే విధంగా ఉన్నప్పటికీ, యూరియా తిన్న ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడ దోమలు, గ్రహించిన గాఢతను బట్టి సగటు ఎగిరే దూరాన్ని గణనీయంగా పెంచాయి (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001). 138) = 1310.91, p < 0.0001). నీరు లేదా సుక్రోజ్ తినిపించిన ఆడ ఈగల కంటే, ఏ గాఢతలో యూరియా తినిపించినా ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడ ఈగలు ఎక్కువసేపు ఎగిరాయి (p < 0.03).
అన్ని రకాల ఆహారాలలోనూ, రక్తం పీల్చే దోమల మొత్తం ఎగిరే కార్యకలాపాలు 24 గంటల పాటు స్థిరంగా మరియు నిలకడగా ఉన్నాయి. నీటిని తిన్న ఆడ దోమలలో, అలాగే తాజాగా మరియు 24 గంటల పాత మూత్రాన్ని తిన్న ఆడ దోమలలో చీకటి కాలం యొక్క రెండవ భాగంలో మూత్ర కార్యకలాపాలు పెరిగాయి (చిత్రం 3). రక్తం తాగిన ఆడ దోమలలో మూత్రం ఆహారం సగటు ఎగిరే దూరాన్ని గణనీయంగా ప్రభావితం చేయగా (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), యూరియా ఆహారం ప్రభావితం చేయలేదు (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24). ఇతర మూత్రం మరియు నియంత్రణ ఆహారంతో పోలిస్తే (తాజా, p = 0.0091; 72 గంటలు, p = 0.0022; 168 గంటలు, p = 0.001; సుక్రోజ్, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
పునరుత్పత్తి పారామితులపై మూత్రం మరియు యూరియా దాణా యొక్క ప్రభావాలను గుడ్లు పెట్టే బయోఅస్సేలలో (పటం 4A) అంచనా వేశారు మరియు ప్రతి ఆడ తాబేలు పెట్టిన గుడ్ల సంఖ్య, గుడ్డు పరిమాణం మరియు కొత్తగా పొదిగిన మొదటి దశ లార్వాల ప్రకారం పరిశోధించారు. పెట్టిన గుడ్ల సంఖ్య. మూత్రం తినిపించిన అరబ్ ఆడ తాబేళ్లు ఆహారాన్ని బట్టి విభిన్నంగా ఉన్నాయి (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; పటం 4B). 24 గంటల మూత్రం, రక్త భోజనం తినిపించిన ఆడ తాబేళ్లు ఇతర మూత్ర ఆహారాలు తినిపించిన ఆడ తాబేళ్ల కంటే గణనీయంగా ఎక్కువ గుడ్లు పెట్టాయి మరియు సుక్రోజ్ తినిపించిన వాటితో సమానంగా ఉన్నాయి (పటం 4B). అదేవిధంగా, మూత్రం తినిపించిన ఆడ తాబేళ్లు పెట్టిన గుడ్ల పరిమాణం ఆహారాన్ని బట్టి విభిన్నంగా ఉంది (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), 24 గంటల మూత్రం మరియు సుక్రోజ్ తినిపించిన ఆడ తాబేళ్లు నీరు తినిపించిన ఆడ తాబేళ్ల కంటే గణనీయంగా పెద్ద గుడ్లు పెట్టాయి, అయితే 168 గంటల మూత్రం తినిపించిన ఆడ తాబేళ్ల గుడ్లు గణనీయంగా చిన్నవిగా ఉన్నాయి. (పటం 4C). అదనంగా, మూత్రం ఆహారం లార్వా పరిమాణాన్ని గణనీయంగా ప్రభావితం చేసింది (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), నీరు మరియు 168 గంటల పాటు మూత్రం తినిపించిన ఆడ ఈగలు పెట్టిన గుడ్ల నుండి వచ్చిన లార్వాల కంటే, 24 మరియు 72 గంటల పాటు మూత్రం తినిపించిన ఆడ ఈగలు పెట్టిన గుడ్ల నుండి గణనీయంగా పెద్ద లార్వాలు వచ్చాయి (పటం 4D).
ఆవు మూత్రం మరియు యూరియాను ఆహారంగా తీసుకునే ఆడ అనోఫెలెస్ అరబినిస్ యొక్క పునరుత్పత్తి సామర్థ్యం. రక్తం తాగిన ఆడ దోమలకు, బయోఅస్సేలలో ఉంచి గుడ్లు పెట్టే సబ్‌స్ట్రేట్‌లను పొందే ముందు, 48 గంటల పాటు తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం, వివిధ గాఢతలలో యూరియా, సుక్రోజ్ (10%), మరియు స్వేదన జలం (H2O) కలిగిన ఆహారాన్ని తినిపించారు (A). అందించిన ఆహారం (ఆవు మూత్రం: BD; యూరియా: EG) గుడ్ల సంఖ్య (B, E), గుడ్డు పరిమాణం (C, F) మరియు లార్వా పరిమాణం (D, G)పై గణనీయంగా ప్రభావం చూపింది. వేర్వేరు అక్షర నామాలను ఉపయోగించి కొలిచిన ప్రతి పరామితి యొక్క సగటులు ఒకదానికొకటి గణనీయంగా భిన్నంగా ఉన్నాయి (టూకీ యొక్క పోస్ట్ హాక్ విశ్లేషణను ఉపయోగించి వన్-వే ANOVA; p < 0.05). ఎర్రర్ బార్‌లు సగటు యొక్క ప్రామాణిక దోషాన్ని సూచిస్తాయి.
మూత్రంలోని ప్రధాన నత్రజని భాగమైన యూరియాను, రక్తం తాగిన ఆడ ఈగలకు ఆహారంగా అందించినప్పుడు, అది అన్ని అధ్యయనాలలోనూ పునరుత్పత్తి పారామితులను గణనీయంగా ప్రభావితం చేసింది. రక్తాహారం తర్వాత యూరియా తినిపించిన ఆడ ఈగలు పెట్టిన గుడ్ల సంఖ్య, యూరియా గాఢతపై ఆధారపడి ఉంది (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001). 134 µM మరియు 1.34 mM మధ్య యూరియా గాఢతలను తిన్న ఆడ ఈగలు ఎక్కువ గుడ్లు పెట్టాయి (పటం 4E). నీటిని తిన్న ఆడ ఈగలతో పోలిస్తే, 134 µM లేదా అంతకంటే ఎక్కువ యూరియా గాఢతలను తిన్న ఆడ ఈగలు పెద్ద గుడ్లు పెట్టాయి (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; పటం 4F), మరియు లార్వా పరిమాణం, తల్లులలో ఒకే విధమైన యూరియా గాఢతల ద్వారా ప్రభావితమైనప్పటికీ (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001), మరింత వైవిధ్యంగా ఉంది (పటం 4G).
ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆవు మూత్రం హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర సారాల పట్ల మొత్తం ఆకర్షణ. గాజు గొట్టం ఓల్ఫాక్టోమీటర్‌లో (పటం 5A) అంచనా వేయబడిన అరాబియెన్సిస్, మూత్రం వయస్సు ద్వారా గణనీయంగా ప్రభావితమైంది (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; పటం 5B). పోస్ట్ హాక్ విశ్లేషణలో, తాజా మూత్రం వాసన మినహా (p = 0.13; పటం 5B), మిగతా అన్ని చికిత్సలతో పోలిస్తే 24 గంటల పాత మూత్రం వాసన గణనీయంగా అధిక స్థాయి ఆకర్షణకు కారణమైందని తేలింది (72 గంటలు: p = 0.0060, 168 గంటలు: p = 0.012, పెంటేన్: p = 0.00070). రక్తం పీల్చే దోమలకు మూత్రం వాసన పట్ల మొత్తం ఆకర్షణలో గణనీయమైన తేడా లేనప్పటికీ (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; పటం 5C), ఈ ఆడ దోమలు హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర సారాల పట్ల గణనీయంగా ఎక్కువ ఆకర్షణీయంగా ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది. నియంత్రణలతో పోల్చినప్పుడు 72 గంటల వయస్సు గల మూత్రం (p = 0.0066; చిత్రం 5C).
ఆతిథేయి మరియు రక్తం తాగిన అనోఫెలెస్ అరేబియానస్ కోసం అన్వేషణలో సహజ మరియు కృత్రిమ ఆవు మూత్రపు వాసనలకు ప్రవర్తనా ప్రతిస్పందనలు. గాజు గొట్టం ఆల్ఫాక్టోమీటర్ యొక్క రేఖాచిత్రం (A). తాజా మరియు పాతబడిన ఆవు మూత్రం నుండి హెడ్‌స్పేస్‌లోని అస్థిర సారాలు ఆతిథేయి (B) మరియు రక్తం పీల్చే (C) దోమలను ఆకర్షించడం. లార్డ్ ఆన్ యొక్క స్పర్శకాల ప్రతిచర్యను కనుగొనండి. తాజా (D), 24-గంటల (E), 72-గంటల (F), మరియు 168-గంటల (G) పాతబడిన ఆవు మూత్రం నుండి వేరుచేయబడిన హెడ్‌స్పేస్ సారాలు చూపబడ్డాయి. గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రాఫ్ నుండి వెలువడిన మరియు ఫ్లేమ్ అయనైజేషన్ డిటెక్టర్ (FID) ద్వారా గుర్తించబడిన హెడ్‌స్పేస్‌లోని జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాలకు ప్రతిస్పందనగా వోల్టేజ్ మార్పులను ఎలక్ట్రాన్ యాంటెన్నా డిటెక్షన్ (EAD) ట్రేస్‌లు చూపుతాయి. స్కేల్ బార్ ప్రతిస్పందన వ్యాప్తిని (mV) మరియు నిలుపుదల సమయాన్ని (s) సూచిస్తుంది. జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాల లక్షణాలు మరియు విడుదల రేట్లు (µg h-1) చూపబడ్డాయి. ఒకే నక్షత్రం (*) స్థిరమైన తక్కువ-వ్యాప్తి ప్రతిస్పందనను సూచిస్తుంది. రెండు నక్షత్రాలు (**) పునరుత్పత్తి చేయలేని ప్రతిస్పందనలను సూచిస్తాయి. ఆతిథేయి (H) మరియు రక్త పీల్చే (I) దోమను కనుగొనండి. తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రపు వాసనల కృత్రిమ మిశ్రమాలకు An.arabiensis వేర్వేరు ఆకర్షణలను కలిగి ఉంటుంది. వేర్వేరు అక్షర నామాలకు ఆకర్షించబడిన దోమల సగటు నిష్పత్తులు ఒకదానికొకటి గణనీయంగా భిన్నంగా ఉన్నాయి (టూకీ యొక్క పోస్ట్ హాక్ విశ్లేషణను ఉపయోగించి వన్-వే ANOVA; p < 0.05). ఎర్రర్ బార్‌లు స్కేల్ యొక్క ప్రామాణిక దోషాన్ని సూచిస్తాయి.
ఆడ Ann.arabiensis, రక్త భోజనం చేసిన 72 గంటలు మరియు 120 గంటల తర్వాత, గుడ్లు పెట్టే సమయంలో, పెంటేన్ నియంత్రణలతో పోలిస్తే తాజా మరియు పాత ఆవు మూత్రం నుండి తీసిన హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర సారాల పట్ల ఎటువంటి ప్రాధాన్యతను చూపించలేదు (χ2 = 3.07, p > 0.05; అదనపు ఫైల్ 1: Fig. S1).
ఆడ Ann.arabiensis లో, GC-EAD మరియు GC-MS విశ్లేషణలు వరుసగా ఎనిమిది, ఆరు, మూడు మరియు మూడు జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాలను గుర్తించాయి (పటం 5D-G). విద్యుత్-శారీరక ప్రతిస్పందనలను ప్రేరేపించిన సమ్మేళనాల సంఖ్యలో తేడాలు గమనించినప్పటికీ, ఈ సమ్మేళనాలలో చాలా వరకు తాజా మరియు పాత మూత్రం నుండి సేకరించిన ప్రతి హెడ్‌స్పేస్ అస్థిర సారంలో ఉన్నాయి. అందువల్ల, ప్రతి సారంలో, ఆడ కీటకం యొక్క యాంటెన్నాల నుండి నిర్దేశిత పరిమితి కంటే ఎక్కువ శారీరక ప్రతిస్పందనను కలిగించిన సమ్మేళనాలను మాత్రమే తదుపరి విశ్లేషణలలో చేర్చారు.
హెడ్‌స్పేస్ సేకరణలో జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాల మొత్తం అస్థిర విడుదల రేటు తాజా మూత్రంలో 29 µg h-1 నుండి 168 గంటల వయస్సు గల మూత్రంలో 242 µg h-1 కి పెరిగింది, దీనికి ప్రధాన కారణం పి-క్రెసోల్, ఎం-ఫార్మాల్డిహైడ్ మరియు ఫినాల్ పెరుగుదల. దీనికి విరుద్ధంగా, 2-సైక్లోహెక్సెన్-1-ఓన్ మరియు డెకానాల్ వంటి ఇతర సమ్మేళనాల విడుదల రేట్లు మూత్రం వయస్సు పెరిగే కొద్దీ తగ్గాయి, ఇది క్రోమాటోగ్రామ్‌లో (Fig. 5D-G ఎడమ ప్యానెల్) గమనించిన సిగ్నల్ తీవ్రత (సమృద్ధి) తగ్గుదలతో మరియు ఈ సమ్మేళనాలకు శారీరక ప్రతిస్పందనలతో (Fig. 5D-G కుడి ప్యానెల్) పరస్పర సంబంధం కలిగి ఉంది.
మొత్తం మీద, ఈ కృత్రిమ మిశ్రమం, తాజా మరియు పాతబడిన మూత్రపు హెడ్‌స్పేస్‌ల యొక్క అస్థిర సారాలలో గుర్తించబడిన జీవక్రియాశీల సమ్మేళనాల సహజ నిష్పత్తిని పోలి ఉంది (పటం 5D–G) మరియు ఆతిథేయి కోసం వెతకడంలో (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; పటం 5H) లేదా రక్తం పీల్చే దోమలలో (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; పటం 5I) గణనీయమైన ఆకర్షణను కలిగించినట్లు కనిపించలేదు. అయితే, చికిత్సల మధ్య పోస్ట్ హాక్ జతవారీ పోలికలు, పెంటేన్ నియంత్రణలతో పోలిస్తే, ఆతిథేయి కోసం వెతికే దోమలు 24-గంటల పాతబడిన మూత్రం యొక్క కృత్రిమ మిశ్రమానికి గణనీయంగా ఆకర్షణీయంగా ఉన్నాయని చూపించాయి (p = 0.0086; పటం 5H).
24 గంటల పాటు నిల్వ ఉంచిన మూత్రం యొక్క కృత్రిమ మిశ్రమాలలో వ్యక్తిగత భాగాల పాత్రను అంచనా వేయడానికి, వ్యక్తిగత సమ్మేళనాలను తొలగించిన ఆరు సబ్‌ట్రాక్టివ్ మిశ్రమాలను Y-ట్యూబ్ పరీక్షలో పూర్తి మిశ్రమాలతో పోల్చి మూల్యాంకనం చేశారు. ఆతిథేయి కోసం వెతికే దోమల విషయంలో, పూర్తి మిశ్రమం నుండి వ్యక్తిగత సమ్మేళనాలను తీసివేయడం వాటి ప్రవర్తనా ప్రతిస్పందనలపై గణనీయమైన ప్రభావాన్ని చూపింది (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; అదనపు ఫైల్ 1: చిత్రం S2A), అన్ని సబ్‌ట్రాక్టివ్ మిశ్రమాలు పూర్తిగా కలిపిన వాటి కంటే ఎక్కువ ఆకర్షణీయంగా ఉన్నాయి. దీనికి విరుద్ధంగా, పూర్తిగా కృత్రిమ మిశ్రమం నుండి వ్యక్తిగత సమ్మేళనాలను తొలగించడం రక్తం పీల్చే దోమల ప్రవర్తనా ప్రతిస్పందనలను ప్రభావితం చేయలేదు (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), అయితే డెకానాల్ విషయంలో మాత్రం పూర్తి మిశ్రమంతో పోలిస్తే ఆకర్షణ స్థాయిలు తక్కువగా ఉన్నాయి (p = 0.022; అదనపు ఫైల్ 1: చిత్రం S2B).
ఇథియోపియాలోని మలేరియా ప్రబలంగా ఉన్న ఒక గ్రామంలో, క్షేత్ర పరిస్థితులలో దోమలను ఆకర్షించడంలో 24 గంటల ఆవు మూత్రం యొక్క కృత్రిమ మిశ్రమం యొక్క సామర్థ్యాన్ని పది రాత్రుల పాటు మూల్యాంకనం చేశారు (పటం 6A). మొత్తం 4,861 దోమలను పట్టుకుని గుర్తించారు, వాటిలో 45.7% ఆంత్రోపస్.గాంబియే sl, 18.9% అనోఫెలెస్ ఫారోయెన్సిస్ మరియు 35.4% క్యూలెక్స్ spp. ఉన్నాయి (అదనపు ఫైల్ 1: పట్టిక S1). PCR విశ్లేషణ ద్వారా గుర్తించబడిన An.గాంబియన్ జాతుల సముదాయంలో అనోఫెలెస్ అరబినిస్ మాత్రమే సభ్యుడు. సగటున, ప్రతి రాత్రి 320 దోమలు పట్టుబడ్డాయి, ఈ సమయంలో కృత్రిమ మిశ్రమం ఎరగా ఉన్న ఉచ్చులు, మిశ్రమం లేని జత ఉచ్చుల కంటే ఎక్కువ దోమలను పట్టుకున్నాయి (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). ఐదు నియంత్రణ రాత్రులలో ప్రతి రాత్రి ప్రారంభంలో, మధ్యలో మరియు చివరిలో ఎర లేని ఉచ్చులను ఏర్పాటు చేశారు. ప్రయోగంలో, ప్రతి జత ఉచ్చులలో దాదాపు సమాన సంఖ్యలో దోమలు పట్టుబడ్డాయి, ఇది ఇళ్ల మధ్య ఎలాంటి పక్షపాతం లేదని (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) మరియు అధ్యయన కాలంలో జనాభా క్షీణత లేదని సూచిస్తుంది. నియంత్రణ ఉచ్చులతో పోలిస్తే, కృత్రిమ మిశ్రమం ఉన్న ఉచ్చులలో పట్టుబడిన దోమల సంఖ్య గణనీయంగా పెరిగింది: ఆతిథేయి కోసం వెతకడం (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), ఇటీవల రక్తం తాగడం (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) మరియు గర్భం (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; అదనపు ఫైల్ 1: పట్టిక S1). ఇది పట్టుబడిన మొత్తం దోమల సంఖ్యలో కూడా ప్రతిబింబిస్తుంది: ఆతిథేయి కోసం వెతకడం > రక్తం తాగేవి > గర్భవతి > పాక్షిక గర్భవతి > మగ.
24-గంటల కృత్రిమ ఆవు మూత్రపు వాసన మిశ్రమం యొక్క ప్రభావశీలతపై క్షేత్రస్థాయి మూల్యాంకనం. దక్షిణ-మధ్య ఇథియోపియాలో (పటం), మాకి పట్టణానికి (ఇన్సర్ట్), సెంటర్స్ ఫర్ డిసీజ్ కంట్రోల్ (CDC) లైట్ ట్రాప్ (కుడివైపు) ఉపయోగించి, లాటిన్ స్క్వేర్ డిజైన్ (వైమానిక చిత్రం) (A)తో జంట ఇళ్లలో క్షేత్రస్థాయి ప్రయోగాలు నిర్వహించబడ్డాయి. కృత్రిమ వాసన ఎరగా ఉన్న CDC ఫోటోట్రాప్‌లు ఆడ అనోఫెలెస్ అరబెస్క్‌లను (B) ఆకర్షించి పట్టుకుంటాయి, కానీ అనోఫెలెస్ ఫారోలను (C) వేరే పద్ధతిలో ఆకర్షించవు, ఇది శారీరక స్థితిపై ఆధారపడిన ప్రభావం. అదనంగా, ఈ ట్రాప్‌లు హోస్ట్ క్యూలెక్స్ దోమల సంఖ్యను గణనీయంగా పెంచి పట్టుకున్నాయి.(D) నియంత్రణతో పోలిస్తే. ఎడమవైపు ఉన్న బార్‌లు వాసన ఎర (ఆకుపచ్చ) మరియు నియంత్రణ (ఖాళీ) ట్రాప్‌ల జంటలలో (N = 10) పట్టుబడిన దోమల సగటు ఎంపిక సూచికను సూచిస్తాయి, అయితే కుడివైపు ఉన్న బార్‌లు నియంత్రణ ట్రాప్‌ల జంటలలో (ఖాళీ; N = 5) సగటు ఎంపిక సూచికను సూచిస్తాయి. నక్షత్ర గుర్తులు గణాంక ప్రాముఖ్యత స్థాయిలను సూచిస్తాయి (*p = 0.01 మరియు ***p < 0.0001)
కృత్రిమ మిశ్రమాలు ఉన్న ఉచ్చులలో ఈ మూడు జాతులు వేర్వేరుగా పట్టుబడ్డాయి. ఆతిథేయి కోసం వెతకడం (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), రక్త పానము (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) మరియు గర్భధారణ (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) వంటి వాటిలో, కృత్రిమ మిశ్రమాన్ని విడుదల చేసిన ఉచ్చులో a.arabiensis చిక్కుకుంది (పటం 6B), అయితే An.Pharoensis పరిమాణంలో తేడా లేదు. వివిధ శారీరక స్థితులలో ఉన్నవి కనుగొనబడ్డాయి (పటం 6C). క్యూలెక్స్ విషయానికొస్తే, నియంత్రణ ఉచ్చులతో పోలిస్తే, కృత్రిమ మిశ్రమాన్ని ఎరగా పెట్టిన ఉచ్చులలో మాత్రమే ఆతిథేయి కోసం వెతుకుతున్న దోమల సంఖ్యలో గణనీయమైన పెరుగుదల కనుగొనబడింది (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; పటం 6D).
ఇథియోపియాలో, సంతానోత్పత్తి ప్రదేశాలు మరియు గ్రామీణ సమాజాల మధ్య, ఆతిథ్యమిచ్చే అవకాశం ఉన్న జీవులకు వెలుపల ఏర్పాటు చేసిన ఎర ఉచ్చులను ఉపయోగించి, మలేరియా దోమలు ఆవు మూత్రం వాసనను ఆతిథ్య జీవి నివాస సూచనగా ఉపయోగిస్తాయో లేదో అంచనా వేశారు. ఆతిథ్య జీవి సూచనలు, వేడి లేనప్పుడు, మరియు ఆవు మూత్రం వాసన ఉన్నా లేకపోయినా, ఒక్క దోమ కూడా పట్టుబడలేదు (అదనపు ఫైల్ 1: చిత్రం S3). అయితే, అధిక ఉష్ణోగ్రత మరియు ఆవు మూత్రం వాసన ఉన్నప్పుడు, మూత్రం వయస్సుతో సంబంధం లేకుండా, ఆడ మలేరియా దోమలు ఆకర్షించబడి, తక్కువ సంఖ్యలోనైనా పట్టుబడ్డాయి (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; అదనపు ఫైల్ 1: చిత్రం S3). దీనికి విరుద్ధంగా, అధిక ఉష్ణోగ్రతల వద్ద నీటి నియంత్రణ ఉచ్చులలో మలేరియా దోమలు పట్టుబడలేదు (అదనపు ఫైల్ 1: చిత్రం S3).
ఇతర కీటకాల మాదిరిగానే, మలేరియా దోమలు కూడా తమ జీవిత-చరిత్ర లక్షణాలను మెరుగుపరచుకోవడానికి ఆవు మూత్రాన్ని (అంటే, నీటి గుంటలను) పరిహారంగా ఆహారంగా తీసుకోవడం ద్వారా నత్రజని కలిగిన సమ్మేళనాలను పొంది, పంపిణీ చేస్తాయి [2, 4, 24, 25, 26]. ఆవు మూత్రం సులభంగా లభించే పునరుత్పాదక వనరు. ఇది గ్రామీణ గృహాలు మరియు గుడ్లు పెట్టే ప్రదేశాలకు సమీపంలో ఉండే పశువుల కొట్టాలు, పొడవైన వృక్షసంపద వంటి మలేరియా వాహకాల విశ్రాంతి స్థలాలతో దగ్గరి సంబంధం కలిగి ఉంటుంది. ఆడ దోమలు వాసన ద్వారా ఈ వనరును గుర్తించి, మూత్రంలోని ప్రధాన నత్రజని భాగమైన యూరియాతో సహా, మూత్రంలోని నత్రజని సమ్మేళనాల గ్రహణాన్ని నియంత్రించుకోగలుగుతాయి [15, 16]. ఆడ దోమ యొక్క శారీరక స్థితిని బట్టి, ఆతిథేయి కోసం వెతికే ఆడ దోమల ఎగిరే సామర్థ్యాన్ని మరియు మనుగడను మెరుగుపరచడానికి, అలాగే మొదటి గోనాడోట్రోపిక్ చక్రంలో రక్తం తాగిన దోమల మనుగడ మరియు పునరుత్పత్తి లక్షణాలను మెరుగుపరచడానికి మూత్రంలోని పోషకాలు కేటాయించబడతాయి. అందువల్ల, పోషకాహార లోపంతో ఉన్న పెద్ద దోమల వలె మూసుకుపోయిన మలేరియా వాహకాలకు మూత్రం కలపడం ఒక ముఖ్యమైన పోషక పాత్రను పోషిస్తుంది [8], ఎందుకంటే ఇది ఆడ దోమలకు తక్కువ-ప్రమాదకరమైన పద్ధతిలో ముఖ్యమైన నత్రజని సమ్మేళనాలను పొందే సామర్థ్యాన్ని అందిస్తుంది. ఆహారం తీసుకోవడం. ఈ ఆవిష్కరణకు ముఖ్యమైన వ్యాధిశాస్త్ర పరిణామాలు ఉన్నాయి, ఎందుకంటే ఆడ కీటకాలు వాటి ఆయుర్దాయం, చురుకుదనం మరియు పునరుత్పత్తి సామర్థ్యాన్ని పెంచుకుంటాయి, ఇవన్నీ వ్యాధి వాహక సామర్థ్యాన్ని ప్రభావితం చేస్తాయి. అంతేకాకుండా, ఈ ప్రవర్తన భవిష్యత్ వ్యాధి వాహక నిర్వహణ కార్యక్రమాలకు లక్ష్యం కావచ్చు.