Agbogun Ounjẹ ati Pinpin Pinpin Iṣowo ati Itan itan-aye Rutates. .arabiensis agitation lori ito Maalu fun imudara eroja ti o mu awọn abuda itan igbesi aye dara si.
Rii daju pe o jẹ ailewu.arabiensis ni ifamọra si õrùn ti alabapade, 24-wakati, 72-wakati, ati 168-wakati atijọ ito maalu, ati wiwa ogun ati ẹjẹ-jẹ (48-wakati lẹhin-ẹjẹ ounjẹ) awọn obirin ni a wọn ni Y-tube olfactometer, ati awọn aboyun aboyun ni a ṣe ayẹwo ni idapo kemikali ti a ṣe ayẹwo ni idapo ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọran ti o ni imọ-ara ti o ni imọran. ito ni gbogbo awọn kilasi ọjọ ori mẹrin.Awọn idapọpọ sintetiki ti awọn agbo ogun bioactive ni a ṣe ayẹwo ni tube Y-tube ati awọn idanwo aaye.Lati ṣe iwadii ito maalu ati urea ti o ni nitrogen akọkọ rẹ bi awọn ounjẹ afikun afikun fun awọn iṣọn iba, awọn aye ifunni ati awọn abuda itan igbesi aye ni a ṣe iwọn. ofurufu, ati atunse.
Wá fun awọn ogun ká ẹjẹ ati nourishment.In yàrá ati aaye-ẹrọ, Larubawa ni won kale si awọn adayeba ki o si sintetiki lofinda ti titun ati ki o agbalagba ito Maalu.Aboyun obirin wà alainaani si Maalu ito ti şe ni spawning sites.Host-koni ati ẹjẹ-sii mu obinrin actively fa malu ito ati urea, aye-fifisioloji awọn oluşewadi ti o ni ibamu si awọn ohun elo ti o wa ni ipo-aye. al, tabi atunse.
Anopheles arabinis akomora ati pinpin ito Maalu fun imudarasi itan igbesi aye awọn abuda.Ififun ifunni ti ito maalu yoo ni ipa lori agbara fekito taara nipasẹ jijẹ iwalaaye ojoojumọ ati iwuwo fekito, ati ni aiṣe-taara nipasẹ yiyipada iṣẹ-ofurufu ati nitorinaa yẹ ki o gbero ni awọn awoṣe iwaju.
Akomora eroja ati pinpin integrates kokoro foraging ati aye itan abuda [1,2,3] Kokoro wa ni anfani lati yan ati ki o gba ounje ki o si ṣe biinu kikọ sii da lori ounje wiwa ati onje ibeere [1, 3]. Pipin awọn eroja da lori awọn ilana itan-aye ati ki o le ja si yatọ si awọn ibeere fun onje didara ati opoiye ni orisirisi awọn aye ti awọn ipele ti o le san fun awọn aaya 1, 3. awọn ounjẹ wọnyi nipasẹ ifunni afikun, gẹgẹbi lori ẹrẹ, orisirisi awọn itọsi ati awọn ikọkọ ti awọn vertebrates, ati carrion, ilana ti a mọ si awọn puddles [2].Biotilẹjẹpe orisirisi awọn labalaba ati awọn eya moth ti wa ni akọkọ ti a ṣe apejuwe, awọn ihò omi tun waye ni awọn ibere kokoro miiran, ati ifamọra si ati fifun awọn iru awọn ohun elo wọnyi le ni ipa pataki lori ilera ati awọn igbesi aye miiran, 6, 6 quis. Anopheles gambiae sensu lato (sl) farahan bi agbalagba 'aiṣedeede' [8].
Gbigbe Nitrogen ninu agbalagba obinrin Anopheles efon ni opin nitori awọn ifiṣura caloric kekere ti a gbe lati ipele idin ati lilo aiṣedeede ti ounjẹ ẹjẹ [9].Obirin Ann.gambiae sl maa n sanpada fun eyi nipa fifi afikun pẹlu awọn ounjẹ ẹjẹ afikun [10, 11], nitorinaa fifi eniyan diẹ sii sinu eewu ti arun na ati ki o jẹ ki apaniyan lewu. le lo afikun ono ti vertebrate excreta lati gba nitrogenous agbo ti o mu aṣamubadọgba ati flight maneuverability, bi afihan nipa miiran kokoro [2].Ni yi iyi, awọn lagbara ati ki o pato ifamọra ti ọkan ninu awọn sibling eya laarin An.The Gambian sl eya complex, Anopheles arabinis, alabapade ati agbalagba ito Maalu [12,13, isportun. mọ to láti pẹlu ki o si ifunni lori ẹran.Ito Maalu ni a awọn oluşewadi ọlọrọ ni nitrogenous agbo, pẹlu urea iṣiro fun 50-95% ti awọn lapapọ nitrogen ni alabapade ito [15, 16]. Bi Maalu ito ọjọ ori, microorganisms lo awọn wọnyi oro lati din complexity ti nitrogenous yellows laarin 24 wakati [15 pẹlu nitrogen Organic ni nkan ṣe pẹlu ammonia microophils ni a 24 wakati. y ninu eyiti o mu awọn agbo ogun majele si awọn ẹfọn) ṣe rere [15], eyiti o le jẹ obinrin Ann.arabiensis ni ifọkansi ni pataki si ito ti ọjọ ori 24 wakati tabi kere si [13, 14].
Ninu iwadi yii, agbalejo ati awọn Ans ti o jẹ ẹjẹ ni a wa fun. Ni akoko iyipo gonadotropin akọkọ rẹ, a ṣe ayẹwo arabiensis fun gbigba awọn agbo ogun nitrogenous, pẹlu urea, nipasẹ ito ito.Next, a jara ti awọn adanwo ni a ṣe lati ṣe ayẹwo bi awọn efon obirin ṣe n pin awọn ohun elo eroja ti o pọju fun ilọsiwaju ti iwalaaye, atunṣe atunṣe ati atunṣe atunṣe. lati pinnu boya awọn wọnyi ti pese awọn amọran ti o gbẹkẹle fun ogun ati ẹjẹ ti o jẹun An.Ni wiwa wọn fun awọn ohun elo ijẹẹmu ti o pọju, arabiensis ṣe awari awọn atunṣe kemikali lẹhin ti o ṣe akiyesi iyatọ iyatọ ti o ṣe akiyesi.ifamọra Mosquito.Awọn esi ti o gba jerisi pe An.arabiensis gba ati pinpin awọn agbo ogun nitrogenous ti a rii ni ito vertebrate lati ni ipa awọn abuda itan igbesi aye.Awọn abajade wọnyi ni a jiroro ni aaye ti awọn abajade ajakale-arun ti o pọju ati bii wọn ṣe le lo fun iwo-kakiri ati iṣakoso fekito.
Anopheles arabicans (Dongola igara) ti wa ni itọju ni 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH ati imọlẹ 12:12 h: okunkun dudu. Nolato Hertila, Åstorp, SE) ati lẹhinna gbe lọ si Bugdorm cages (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) lati gba awọn agbalagba agbalagba laaye. ni isalẹ.Awọn obinrin ti a lo fun awọn adanwo tube ọkọ ofurufu ni ebi fun awọn wakati 4-6 nikan pẹlu ad libitum omi.Lati ṣeto awọn efon ti nmu ẹjẹ fun awọn bioassays ti o tẹle, awọn obinrin 4 dpe ni a pese pẹlu ẹjẹ agutan defibrotic (Håtunalab, Bro, SE) nipa lilo ilana ifunni awọkan (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK) ti pese taara si awọn idanileko ti ara ẹni. tabi 10% sucrose ad libitum fun awọn ọjọ 3 ṣaaju awọn idanwo ti a ṣalaye ni isalẹ. Awọn obinrin ti o kẹhin ni a lo fun awọn bioassays tube tube ati gbe lọ si yàrá-yàrá, ati lẹhinna ti distilled omi ad libitum fun awọn wakati 4-6 ṣaaju idanwo naa.
Awọn idanwo ifunni ni a lo lati ṣe iwọn ito ati lilo urea ni agbalagba An.Arab obinrin.Onilaaye-wiwa ati awọn obinrin ti o jẹ ẹjẹ ni a pese ounjẹ ti o ni 1% ti a ti fomi titun ati ito malu ti ogbo, awọn ifọkansi ti urea, ati awọn iṣakoso meji (10% sucrose ati omi) fun 48 h. Ni afikun, awọ ounje (1 mg-xy acid 1 mg-2 C) (1 mg xy-2) C, 1 mg-5 C, 1 mg-2 C, FF xy-1. gma-Aldrich, Stockholm, SE) ni a fi kun si ounjẹ ati ti a pese ni 4 × 4 matrix ni 250 µl microcentrifuge tubes (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Figure 1A) Fọwọsi si eti (~ 300 µl) .Lati yago fun idije laarin awọn efon ati awọn ipa ti o pọju ti 1 mosquitoes 6 ati awọn ipa ti o pọju ti dye 1 cm 1. cm ni giga; Semadeni, Ostermundigen, CH; Nọmba 1A) ni okunkun pipe ni 25 ± 2 cm ° C ati 65 ± 5% ọriniinitutu ojulumo. Awọn adanwo wọnyi tun ṣe ni 5 si awọn akoko 10. Lẹhin ifihan si ounjẹ, a gbe awọn ẹfọn si -20 °C titi di imọran siwaju sii.
Wa ito eran ati urea ti o gba nipasẹ agbalejo ati abo ti nmu ẹjẹ jẹ Anopheles arabianus.Ni idanwo ifunni (A), awọn ẹfọn abo ni a pese pẹlu ounjẹ ti o wa ninu ito maalu titun ati ti ogbo, orisirisi awọn ifọkansi ti urea, sucrose (10%), ati omi distilled (H2O) .Onirun-gbalejo (B) ati idanwo ẹjẹ miiran ti o jẹun (B) obinrin gba 72-wakati Maalu ito kere ju 168-wakati Maalu ito (B) .The tumosi lapapọ nitrogen akoonu (± boṣewa iyapa) ti ito wa ni ipoduduro ninu inset.Host-koni (D, F) ati ẹjẹ-siimu (E, G) obinrin gba soke urea ni a iwọn lilo-ti o gbẹkẹle ona.Mean inhaled iwọn didun (D, E) kọọkan miiran ti o yatọ si onínọmbà awọn orukọ ti o yatọ si awọn orukọ (D, E) pẹlu o yatọ si awọn orukọ ti o yatọ si VA. ; p <0.05) .Awọn ọpa aṣiṣe jẹ aṣoju aṣiṣe boṣewa ti itumọ (BE) .Laini ti o taara duro fun laini ipadasẹhin log-linear (F, G)
Lati tu ounjẹ ti o gba silẹ, awọn efon ni a gbe lọkọọkan sinu awọn tubes microcentrifuge 1.5 milimita ti o ni 230 µl ti omi distilled ati tissu naa ti daru nipa lilo pestle isọnu ati mọto ti ko ni okun (VWR International, Lund, SE), atẹle nipa centrifugation ni 10 krpm fun 10 krpm fun iṣẹju mẹwa 10 (2000) supernat 10 min. ma-Aldrich) ati gbigba (λ620) ti pinnu nipa lilo oluka microplate ti o da lori spectrophotometer (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm) . 00, Shimadzu, Kista, SE) .Lati ṣe iwọn gbigbemi ti ijẹunjẹ, a ti pese iyipo boṣewa nipasẹ dilution tẹlentẹle lati mu 0.2 µl si 2.4 µl ti 1 mg ml-1 xylene cyanide.Lẹhinna, iwuwo opitika ti awọn ifọkansi dye ti a mọ ni a lo lati pinnu iye ounjẹ ti ẹfọn kọọkan ninu.
A ṣe atupale data iwọn didun nipa lilo itupalẹ ọna kan ti iyatọ (ANOVA) ti o tẹle pẹlu Tukey's post hoc pairwise awọn afiwera (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007) . Awọn itupalẹ ifasilẹ ti laini ti ṣapejuwe gbigbemi urea ti o gbẹkẹle ifọkansi ati awọn ifọkansi-ti o rii. 0 fun Mac, Software GraphPad, San Diego, CA, US).
O fẹrẹ to 20 µl ti awọn ayẹwo ito lati ẹgbẹ ọjọ-ori kọọkan ni a dè lori Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) ati ti a fi sinu awọn capsules tin (8 mm × 5 mm) . , US) lati pinnu akoonu nitrogen ninu ito titun ati ti ogbo ni ibamu si ilana ilana olupese. Apapọ nitrogen (g N l-1) jẹ iwọn ti o da lori awọn ifọkansi urea ti a mọ ti a lo gẹgẹbi idiwọn.
Lati ṣe ayẹwo ipa ti ounjẹ lori wiwa-ogun ati iwalaaye obirin ti o nfa ẹjẹ, awọn efon ni a gbe ni ọkọọkan ni awọn ounjẹ Petri nla (12 cm ni iwọn ila opin ati 6 cm ni giga; Semadeni) pẹlu iho ti a fi awọ ṣe ni ideri (3 cm ni iwọn ila opin) pẹlu Fun ventilation ati ipese ounje. Awọn ounjẹ ti a pese taara lẹhin 4 dpe ati pẹlu 1% ti a fi omi ṣan pẹlu 1% ti a fi omi ṣan pẹlu 1% diluted, 1% diluted u sucrose ati water.Each onje ti a pipetted pẹlẹpẹlẹ a ehín tampon (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) fi sii sinu kan 5 milimita syringe (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), awọn plunger kuro, ati ki o gbe lori oke kan ti a ti petri satelaiti (nọmba 1) .1A) . Change rẹ dietur lemeji ni ọjọ gbogbo ọjọ. awọn efon ni a da silẹ titi ti efon ti o kẹhin ti ku (n = 40 fun itọju) .Iwalaaye ti awọn efon ti o jẹun lori awọn ounjẹ oniruuru ni a ṣe ayẹwo ni iṣiro nipa lilo awọn igbiyanju iwalaaye Kaplan-Meyer ati awọn idanwo ipo-iwọle lati ṣe afiwe awọn afiwe pinpin iwalaaye laarin awọn ounjẹ (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
A aṣa mosquito flying ọlọ da lori Attisano et al.[17], ṣe ti 5 mm nipọn ko akiriliki paneli (10 cm fife x 10 cm gun x 10 cm ga) lai iwaju ati ru paneli (Fig. 3: oke) .A pivot ijọ pẹlu kan inaro tube ṣe ti a gaasi chromatography iwe (0.25 mmle 7.5 mm) ti a ti daduro fun idii L. ymium magnets 9 cm yato si. tube petele ti a ṣe ti awọn ohun elo kanna (6.5 cm L) ti pin tube ti o ni inaro lati ṣe apa ti o ni asopọ ati apa ti o gbe kekere kan ti alumini bankanje bi ifihan idilọwọ ina.
Awọn obirin ti ebi npa 24-wakati ni a fun ni ounjẹ ti o wa loke fun awọn iṣẹju 30 ṣaaju ki o to ni idaduro. logger, lẹhinna ti o ti fipamọ ati ifihan nipa lilo PC-Lab 2000 ™ software (v4.01; Velleman, Gavere, BE) .A gbe ọlọ ọkọ ofurufu sinu yara ti o ni iṣakoso afefe (12 h: 12 h, ina: dudu, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Lati ṣe akiyesi apẹrẹ ti iṣẹ-ṣiṣe ọkọ ofurufu, apapọ ijinna ti o fò (m) ati apapọ nọmba awọn iṣẹ-ṣiṣe ti o tẹle ni a ṣe iṣiro fun wakati kan lori akoko wakati 24. Ni afikun, awọn ijinna apapọ ti awọn obirin kọọkan ni a ṣe afiwe awọn itọju ati ti a ṣe ayẹwo ni lilo ọna kan ANOVA ati Tukey's post hoc analysis (JMP Pro, v14.0.0), A ti ṣe akiyesi aaye ti o niiṣe ti o niiṣe ti SAS, ni ibi ti a ṣe akiyesi aaye ti o niiṣe ti o niiṣe ti o niiṣe pẹlu aaye ti o niiṣe pẹlu SAS. apapọ nọmba awọn iyipo ti wa ni iṣiro ni awọn iṣẹju 10-iṣẹju.
Lati ṣe ayẹwo ipa ti ounjẹ lori iṣẹ ibisi ti An.arabiensis, awọn obirin mẹfa (4 dpe) ni a gbe lọ taara si awọn ile-iṣẹ Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) lẹhin igbasilẹ ẹjẹ ati lẹhinna pese ounjẹ idanwo fun 48 h gẹgẹbi a ti salaye loke. Awọn ounjẹ ti a ti yọ kuro ati awọn agolo spawning (30 milimita; Nolato Hertila, milimita 20 ti a pese ni gbogbo ọjọ 8 distilled) ti a pese pẹlu distilled. Awọn wakati 4. Tun ṣe ilana ijọba ounjẹ kọọkan ni awọn akoko 20-50. Awọn ẹyin ti a kà ati ki o gba silẹ fun ẹyẹ idanwo kọọkan. Awọn apẹẹrẹ ti awọn ẹyin ni a lo lati ṣe ayẹwo iwọn iwọn ati iyatọ gigun ti awọn ẹyin kọọkan (n ≥ 200 fun ounjẹ kọọkan) nipa lilo microscope Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, LeFC2) Camera;Leica Microsystems Ltd., DE) .Awọn eyin ti o ku ni a tọju ni yara iṣakoso afefe labẹ awọn ipo ti o tọ fun awọn wakati 24, ati apẹẹrẹ ti laipe laipe 1st instar idin (n ≥ 200 fun onje) ni a wọn, gẹgẹbi a ti salaye loke. Nọmba awọn ẹyin ati iwọn awọn eyin ati idin ti a fiwewe laarin awọn itọju ati lilo ọkan-itupalẹ 1-itupalẹ AJ0. , SAS Institute Inc.).
Headspace volatiles lati alabapade (1 hr post-sampling), 24 hr, 72 hr ati 168 hr aged ito won gba lati awọn ayẹwo ti a gba lati Zebu ẹran, Arsi races.Fun wewewe, ito awọn ayẹwo won gba ni kutukutu owurọ nigba ti awọn malu wà si tun ni awọn abà.Urine samples won gba lati kọọkan 1000 milimita Bata 100 g. (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH ati Co., Minden, DE) ni 3 l polyamide pẹlu ideri Ni fainali kiloraidi ṣiṣu drums.Headspace volatiles lati kọọkan bovine ito ayẹwo ti a gba boya taara (alabapade) tabi lẹhin maturation ni yara otutu fun 24 h, 72 h ati 168 ọjọ ori awọn ayẹwo ti kọọkan ẹgbẹ.
Fun gbigba awọn volatiles headspace, a ti lo eto eto-pipade lati tan kaakiri ṣiṣan carbon-filtered carbon ti a ti mu ṣiṣẹ (100 milimita min-1) nipasẹ apo polyamide kan si iwe adsorption fun 2.5 h nipa lilo diaphragm vacuum pump (KNF Neuberger, Freiburg, DE).Gẹgẹbi iṣakoso, gbigba agbedemeji headspace5 ti ṣofo ni a ṣe lati inu iwe-ipamọ ti o ṣofo. .5 cm x 3 mm id) ti o ni 35 miligiramu ti Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) laarin awọn plugs wool gilasi. Ṣaaju lilo, a ti fọ ọwọn naa pẹlu 1 milimita ti a tun ṣe n-hexane (Merck, Darmstadt, DE) ati 1 ml pentane% 99. ted pẹlu 400 μl ti pentane. Awọn akojọpọ ori aaye ti wa ni idapọ ati lẹhinna ti a fipamọ si -20 ° C titi ti a fi lo fun imọran siwaju sii.
Awọn idahun ihuwasi ti wiwa ogun ati jijẹ ẹjẹ An.Headspace awọn iyọkuro iyipada ti a gba lati alabapade, 24-h, 72-h, ati ito 168-h-ar ti wa ni atupale fun awọn iyọkuro iyipada lati awọn efon Arabidopsis nipa lilo olfactometer ti o taara gilasi gilasi [18] Awọn adanwo naa ni a ṣe ni akoko 13-13 ti ile-iṣẹ ti ZT5. 9.A gilasi tube olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) ti wa ni itana pẹlu 3 ± 1 lx ti pupa ina lati loke.Charcoal filtered ati humidified air sisan (25 ± 2 °C, 65 ± 2% ojulumo ọriniinitutu) koja awọn bioassay ni 30 cm s-1. Airless ti wa ni ti o ti kọja kan lẹsẹsẹ ti iboju irin alagbara, irin alagbara, irin alagbara, irin ati awọn irin-irin irin alagbara be. n dispenser (4 cm × 1 cm; L: D; DAB Dental AB), ti a daduro lati inu okun 5 cm kan lori opin afẹfẹ ti olfactometer, pẹlu awọn iyipada ti o nfa ni gbogbo iṣẹju 5. Fun itupalẹ, 10 μl ti aaye ori kọọkan ti a gbe, ti fomi 1: 10, ni a lo bi ohun iwuri. An lo deede iye ti pentane-host. tu cages 2-3 wakati ṣaaju ki awọn ibere ti awọn ṣàdánwò.The Tu ẹyẹ ti a gbe lori downwind ẹgbẹ ti awọn olfactometer, ati awọn efon won laaye lati acclimate fun 1 min, ati ki o si awọn labalaba àtọwọdá ti awọn ẹyẹ ti a la lati tu.Attraction to itọju tabi iṣakoso ti a atupale bi awọn ipin ti awọn efon ti o wá sinu olubasọrọ pẹlu awọn iṣẹju ti o kere ju volplicati ti o wa ni ori aaye 5. Awọn akoko 30, ati lati yago fun awọn ipa ti eyikeyi ọjọ kan, nọmba kanna ti awọn itọju ati awọn iṣakoso ni idanwo ni ọjọ idanwo kọọkan.Wa awọn idahun lati ọdọ agbalejo ati ẹjẹ ti o jẹun Ans.Arabic dipo headspace ṣeto ti a ṣe atupale nipa lilo iṣipopada logistic ipin ti o tẹle pẹlu awọn afiwera meji-meji fun awọn ipin ti odd (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute).
An's spawning reply.Headspace ayokuro lati alabapade ati ti ogbo ito Maalu ni won atupale ni Bugdorm cages (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Imọ). l ti kọọkan headspace jade ni a 1: 10 dilution. An dogba iye ti pentane ti a lo lati ṣatunṣe awọn iṣakoso ife.Treatment ati iṣakoso agolo won paarọ laarin kọọkan ṣàdánwò lati sakoso fun ipo ipa.Mẹwa ẹjẹ-je obirin won tu sinu esiperimenta cages ni ZT 9-11 ati eyin ni agolo ti a kà 24 wakati nigbamii. Awọn agbekalẹ fun isiro awọn ẹyin ti awọn spawn (la ti wa ni awọn nọmba ti awọn ẹyin ti o wa ni titọka). ago iṣakoso)/(apapọ nọmba awọn eyin ti a gbe) .Itọju kọọkan ni a tun ṣe ni igba 8.
Gas chromatographic ati elekitironi ilana erin (GC-EAD) igbekale ti obinrin An.arabiensis ti a ṣe bi tẹlẹ ṣàpèjúwe [20] . Ni soki, alabapade headspace iyipada ayokuro ti a yapa nipa lilo ohun Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) ni ipese pẹlu HP-5 kan (30 m × 0.0.25 mm aworan, Idgi Fiimu, 0.25 mm 5.ati ito ti ogbo.Hydrogen ti a lo gẹgẹbi alakoso alagbeka pẹlu iwọn oṣuwọn laini laini ti 45 cm s-1. Ayẹwo kọọkan (2 μl) ni abẹrẹ fun awọn aaya 30 ni ipo ti ko ni pipin pẹlu iwọn otutu inlet ti 225 °C. Iwọn otutu GC ti a ṣe eto lati 35 °C (3 iṣẹju idaduro) si 300 °C ni idaduro iṣẹju 100 C ni iṣẹju 100 C ni iṣẹju G-100 4 psi ti nitrogen ni a fi kun ati pin 1: 1 ni Gerstel 3D / 2 kekere agbelebu iwọn didun ti o ku (Gerstel, Mülheim, DE) laarin awọn aṣawari ionization ina ati EAD. GC effluent capillary for EAD ti kọja nipasẹ Gerstel ODP-2 gbigbe ila, eyi ti awọn orin ti GC adiro otutu sinu kan 5 °C tube (mm) ti a ti dapọ pẹlu 5 °C, laarin 5 °C, aarin pẹlu 5 °C. afẹfẹ (1.5 l min-1) .A ti gbe eriali naa 0.5 cm lati inu iṣan ti tube. Efon kọọkan kọọkan ṣe iṣiro fun ẹda kan, ati fun awọn efon ti n wa ogun, o kere ju awọn atunṣe mẹta ni a ṣe lori awọn ayẹwo ito ti ọjọ ori kọọkan.
Idanimọ ti awọn agbo ogun bioactive ninu awọn ikojọpọ ori aye ti ito egbo tuntun ati ti ogbo nipa lilo GC ni idapo ati spectrometer pupọ (GC-MS; 6890 GC ati 5975 MS; Awọn Imọ-ẹrọ Agilent) lati mu awọn idahun eriali han ni itupalẹ GC-EAD, ti n ṣiṣẹ ni ipo ionization ikolu elekitironi ni 70 eVMS a ti ni ipese ti GC 6 capillary si UI-5. × 0.25 mm iwọn ila opin ti inu, 0.25 μm fiimu sisanra) lilo helium bi alakoso alagbeka pẹlu iwọn oṣuwọn laini laini apapọ ti 35 cm s-1.A 2 μl sample ti a itasi ni lilo awọn eto injector kanna ati iwọn otutu adiro gẹgẹbi fun GC-EAD onínọmbà.Compounds ti a mọ ti o da lori akoko idaduro wọn (Iwe-ikawe Kovát spect4) ati ti a fiwewe si Nkan 1. Awọn agbo ogun ni a fi idi rẹ mulẹ nipasẹ abẹrẹ awọn iṣedede otitọ (Faili afikun 1: Table S2) .Fun titobi, heptyl acetate (10 ng, 99.8% kemikali ti nw, Aldrich) ni abẹrẹ gẹgẹbi idiwọn ita.
Ṣiṣayẹwo ipa ti olfato sintetiki ti o ni awọn agbo ogun bioactive ti a mọ ni ito tuntun ati ti ogbo lati fa wiwa ogun ati mimu ẹjẹ Ans.arabiensis, lilo olfactometer kanna ati ilana bi loke. Awọn idapọmọra synthetic mimicked the tiwqn ati awọn ipin ti awọn agbo ogun ni adalu headspace 4-hour, 8 extracts of fresh-hour, 8 ati awọn ayokuro 2 hour-hour 1, 4-hour, 8 ati awọn ayokuro 4-hour. 8-wakati ti ogbo ito (Figure 5D-G; Afikun Faili 1: Table S2) .Fun onínọmbà, lo 10 μl ti 1: 100 dilution ti adalu sintetiki ni kikun, pẹlu iwọn idasilẹ gbogbogbo ti o wa lati isunmọ 140-2400 ng h-1, fun ṣiṣe ayẹwo ifamọra si alejo gbigba ati idanwo ẹjẹ ti o jẹ alapọpọ ti o jẹ alapọpọ ti o jẹ alapọpọ ti o wa ni abẹlẹ ti o ni kikun. A ti yọkuro adalu pipe naa.Wa awọn idahun lati ọdọ agbalejo ati ti o jẹ ẹjẹ Ans.Arab vs sintetiki ati awọn apopọ iyokuro ni a ṣe atupale nipa lilo ipadasẹhin logistic ipin ti o tẹle pẹlu awọn afiwera meji-meji fun awọn ipin odd (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Lati ṣe ayẹwo boya ito maalu le ṣe iṣẹ bi aaye ibugbe alejo fun awọn ẹfọn iba, ito maalu titun ati ti ogbo, ti a gba gẹgẹbi a ti salaye loke, ati omi ti a gbe sinu awọn buckets 3 l (100 milimita) ati ti a ṣeto sinu awọn ẹgẹ idẹ ogun.(BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE) .Mẹwa ẹgẹ gbe 50 m yato si ni àgbegbe, 400 m lati abule awujo (Silay, Ethiopia, 5°53′24′N, 37°29′24′′E) ko si si ẹran, lori yẹ ibisi aaye ati awọn abule.Marun ẹgẹ won kikan niwaju ti a simuch ipo marun. ated nightly fun a lapapọ ti marun night.Mosquito awọn nọmba sile ni ẹgẹ baited pẹlu ito ti o yatọ si ọjọ ori won akawe nipa lilo logistic ifaseyin pẹlu kan beta binomial pinpin (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Ni a iba-endemic abule nitosi ilu ti Maki, Oromia ekun, Ethiopia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Figure 6A) .Iwadi naa waiye laarin aarin Oṣu Kẹjọ ati aarin Oṣu Kẹsan ṣaaju ifasilẹ inu ile lododun, pẹlu akoko ojo gigun. Awọn bata meji-5 ti a ti yan ni abule ti a ti yan (Figive pairs) ti a ti yan ni abule m20. 6A) Awọn ilana ti a lo lati yan awọn ile ni: ko si ẹranko laaye ninu ile, ko si sise inu ile (yiya igi ina tabi eedu) ti a gba laaye (o kere ju lakoko akoko idanwo), ati awọn ile ti o pọju awọn olugbe meji, ti o sùn ni awọn ohun elo alaiwu.labẹ awọn itọju efon net.Ethical ìtẹwọgbà ti a ti funni nipasẹ awọn Institutional Research Ethics Review Board (IRB/022/2016) ti awọn Oluko ti Natural Sciences (CNS-IRB), Addis Ababa University, ni ibamu pẹlu awọn itọnisọna mulẹ nipasẹ awọn World Medical Association Declaration ti Helsinki.Consent lati kọọkan olori ti ile ti a gba pẹlu awọn iranlowo ti awọn osise agbegbe ti ilera itẹsiwaju (CNS-IRB), ni ibamu si awọn ilana ti iṣeto nipasẹ World Medical Association Declaration of Helsinki.Consent lati kọọkan olori ile ti a gba pẹlu awọn iranlowo ti awọn osise agbegbe ti ilera itẹsiwaju. level.The experimental design follow a 2 × 2 Latin square design, ninu eyi ti awọn apapo sintetiki ati awọn iṣakoso ti a sọtọ si awọn ile ti a ti so pọ ni alẹ akọkọ ati ti a fipapọ laarin awọn ile ni alẹ idanwo ti o tẹle.Ti a tun ṣe ilana yii ni igba mẹwa. Pẹlupẹlu, lati ṣe iṣiro iṣẹ-ṣiṣe efon ni awọn ile ti a ti yan, awọn ẹgẹ CDC ti ṣeto lati ṣiṣe awọn alẹ marun ni itẹlera ni ibẹrẹ akoko, aarin ati opin akoko kanna ni aaye akoko idanwo aarin ati opin.
Adalu sintetiki ti o ni awọn agbo ogun bioactive mẹfa ni a tuka ni heptane (97.0% epo GC grade, Sigma Aldrich) ati pe o ti tu silẹ ni 140 ng h-1 nipa lilo apanirun wick owu [20]. Olupin wick ti gba gbogbo awọn agbo ogun laaye lati tu silẹ ni awọn iwọn deede ni gbogbo igba idanwo wakati 12. Heptane si ti daduro fun igbaradi Iṣakoso ile-iṣẹ ti o tẹle. (CDC) pakute ina (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Figure 6A) . Awọn ẹgẹ naa ni a gbe soke 0.8 - 1 m loke ilẹ, nitosi ẹsẹ ti ibusun, ati oluyọọda kan ti sùn labẹ apo-ẹfọ ti ko ni itọju ati ṣiṣẹ laarin 18: 00 ati 06: 30. Mosquitoes ati aboyun, ti a gba nipasẹ aboyun 2, ti a gba nipasẹ ibalopo 2. A ṣe ayẹwo ni atẹle nipa lilo itupalẹ polymerase chain reaction (PCR) lati ṣe idanimọ iru ẹda ti a mọ bi A. gambiae sl. Awọn ọmọ ẹgbẹ ti eka naa [23]. Ninu iwadi aaye, idẹkùn pakute ti awọn ile ti a so pọ ni a ṣe atupale nipa lilo awoṣe ibamu logistic kan, nibiti ifamọra jẹ iyipada ti o gbẹkẹle ati itọju (adapọ synthetic vs iṣakoso) jẹ ipa ti o wa titi (J.MP1).0. SAS Institute Inc.).Nibi, a ṣe ijabọ χ2 ati awọn iye p lati inu idanwo ipin iṣeeṣe.
Ṣe ayẹwo boya o jẹ ailewu.arabiensis ni anfani lati gba ito, orisun nitrogen akọkọ rẹ, urea, nipasẹ ifunni taara, laarin 48 h ti iṣakoso fun awọn ọjọ 4 post (dpe) wiwa ogun ati awọn idanwo ifunni awọn obinrin ti o jẹ ẹjẹ (Fig. 1A) mejeeji ti n wa ogun ati awọn obinrin ti o mu ẹjẹ gba = significantly diẹ sii sucrose ju eyikeyi ounjẹ miiran 5 tabi omi (F.02.0). ati F (5,299) = 56.00, p <0.0001, lẹsẹsẹ; Fig. 1B, C) .Pẹlupẹlu, awọn obirin ti n wa ogun jẹ diẹ ninu ito ni awọn wakati 72 ti a fiwewe si ito ni awọn wakati 168 (Fig. 1B) .Nigbati a ba funni ni ounjẹ ti o ni urea, ogun-wiwa awọn obirin ti o pọju ni iwọn 6 ti o pọju ni ifọkansi ti 9 M ni iye miiran ti omi 9 ti a fiwera ni iwọn 6 M. Iyatọ lati 10% sucrose (F (10,813) = 15.72, p <0.0001; Figure 1D) .Eyi jẹ iyatọ si esi ti awọn obirin ti o jẹ ẹjẹ, ti o gba diẹ sii awọn ounjẹ ti o ni urea ju omi lọ, botilẹjẹpe o kere ju 10% sucrose (F (10, 50.0). 1.1E) .Pẹlupẹlu, nigba ti a ba ṣe afiwe laarin awọn ipinle ti ẹkọ-ara meji, awọn obirin phlebotomized gba urea diẹ sii ju awọn obirin ti n wa ogun ni awọn ifọkansi ti o kere julọ, ati pe awọn obirin wọnyi gba iru iye urea ni awọn ifọkansi ti o ga julọ (F(1,953)= 78.82, p <0.0001;1F, G) Lakoko ti gbigbemi lati inu ounjẹ ti o ni urea han lati ni awọn iye ti o dara julọ (Fig. 1D, E), awọn obinrin ni awọn ipinlẹ ti ẹkọ nipa ẹkọ ẹkọ ẹkọ ẹkọ ẹkọ ti ara ni anfani lati ṣe iyipada iye urea ti o gba lori gbogbo awọn ifọkansi urea ni aṣa log-linear (Fig. 1F, G)..Bakanna, awọn efon han lati ṣakoso gbigba nitrogen wọn nipa ṣiṣe ilana iye ito ti o gba, bi iye nitrogen ninu ito ṣe afihan ni iye ti o gba (Figure 1B, C ati B insets).
Lati ṣe ayẹwo awọn ipa ti ito ati urea lori wiwa agbalejo ati iwalaaye ẹfọn-ẹjẹ, awọn obinrin ni wọn jẹ ito ti gbogbo awọn ọjọ-ori mẹrin (tuntun, 24 h, 72 h, ati 168 h post-deposition) ati ọpọlọpọ awọn ifọkansi urea, bakanna bi omi distilled ati 10% 10% sucrose ti yoo ṣiṣẹ bi igbekalẹ agbalejo kan ti o fihan pe iwalaaye gbogbogbo ti a fihan. -wá obinrin (ito: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; Fig. 2B, C) ati awọn obinrin ti o jẹ ẹjẹ ( ito: χ2 = 0.0, p = 93; p = 0.0 = 93. 2 = 137.9, df = 5, p <0.0001; Figure 2D,E).Ni gbogbo awọn adanwo, awọn obirin jẹun ounjẹ ito, urea, ati omi ni awọn oṣuwọn iwalaaye ti o dinku ni pataki ti a fiwera si awọn obirin ti o jẹ ounjẹ sucrose (Figure 2B-E) . Awọn obirin ti n wa ile-iṣẹ = Awọn obirin ti o wa ni agbalejo jẹun titun ati awọn ito ti o yatọ si ito ti o yatọ, ti o yatọ si ito ti o pọju 2. .016) nini iṣeeṣe iwalaaye ti o kere julọ (Fig. 2B) .Pẹlupẹlu, awọn obirin ti n wa ogun ti o jẹun 135 mM urea ti ye diẹ sii ju awọn iṣakoso omi lọ (p <0.04) (Fig.2C) .Ti a bawe pẹlu omi, awọn obirin ti o jẹun pẹlu ito titun ati ito 24-wakati ti wa laaye gun (p = 0.001 ati p = 0.012, lẹsẹsẹ; Nọmba 2D), lakoko ti awọn obirin ti o jẹun pẹlu ito 72-wakati ti wa laaye ju awọn ti o jẹun Female kukuru titun ito ati 24-wakati ti ogbo ito, 2.000000 (Prive) D) .Nigbati o ba jẹ 135 mM urea, awọn obirin ti o jẹ ẹjẹ ti o wa laaye ju gbogbo awọn ifọkansi miiran ti urea ati omi (p <0.013; Figure 2E).
Iwalaaye ti ogun ati awọn obinrin ti o nmu ẹjẹ jẹ Anopheles arabinis ti o jẹun lori ito maalu ati urea.Ninu bioassay (A), awọn wakati abo abo ni a pese ounjẹ ti o wa ninu ito malu titun ati ti ogbo, awọn ifọkansi ti urea, sucrose (10%) ati omi distilled (H2O) .The iwalaaye ti ogun-wiwa (B) gbogbo ẹjẹ (B) moquitos (B) ni gbogbo igba ti ẹjẹ (B) . gbogbo awọn obinrin ti a jẹ lori ito (B, D) ati urea (C, E), ati awọn iṣakoso, Sucrose ati omi, ti ku.
Lapapọ ijinna ati nọmba ti awọn iyipo ti a pinnu ni idanwo ọlọ ọkọ ofurufu lori akoko 24-wakati kan yatọ laarin wiwa-ogun ati awọn efon-ẹjẹ-ẹjẹ, eyiti o ṣe afihan iṣẹ-ṣiṣe ti o kere ju ni apapọ (Fig. 3) . Awọn efon ti o n wa ogun ti o pese ito titun ati ti ogbo tabi sucrose ati omi fihan awọn ilana flight pato (Fig. 3), pẹlu awọn obirin ti o jẹun diẹ sii lori 6 ti o jẹ alabapade ti o wa ni oju-ifun 1. ged Mosquitoes ti o jẹun lori ito ṣe afihan awọn ilana ọkọ ofurufu ti o yatọ ati ni akọkọ diurnal.Awọn ẹfọn obinrin ti o pese sucrose tabi ito wakati 72 ṣe afihan iṣẹ-ṣiṣe ni gbogbo akoko 24-wakati, lakoko ti awọn obinrin ti o pese omi ni o ṣiṣẹ diẹ sii lakoko aarin-akoko.Mosquitoes feeds on sucrose fi han ni awọn ipele ti o ga julọ ti alẹ-alẹ ati inhour 2 ti o ni iriri ni kutukutu owurọ. idinku iduro ni iṣẹ ṣiṣe ju wakati 24 lọ (Aworan 3).
Ofurufu iṣẹ ti ode-nwa ẹjẹ-mu obinrin Anopheles arabinis ono on malu ito ati urea.Ni awọn flight ọlọ igbeyewo, obinrin efon je lori alabapade ati ti ogbo ito Maalu, orisirisi awọn ifọkansi ti urea, sucrose (10%), ati distilled omi (H2O) won tethered to petele, larọwọto yiyi apá (wo awọn obinrin ti o ni ẹtọ) ogun (wo awọn obinrin ti o ni ẹtọ) lapapọ ijinna ati nọmba ti ofurufu fun wakati kan fun kọọkan onje lori kan 24-wakati akoko won gba silẹ (dudu: grẹy; ina: funfun).Apapọ ijinna ati apapọ nọmba ti bouts ti wa ni han si awọn ọtun ti awọn ti sakediani graph.
Ni gbogbogbo, iṣẹ-ofurufu gbogbogbo ti awọn obinrin ti n wa agbalejo tẹle ilana ti o jọra si ti ijinna ọkọ ofurufu lori akoko wakati 24. Itumọ ijinna ọkọ ofurufu ti ni ipa pataki nipasẹ ounjẹ ti o jẹ ingested (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001), ati awọn obinrin ti n wa ogun ti gba awọn wakati 72 ti ito fò pẹlu awọn ijinna diẹ sii ju 0 0. quitoes fò to gun ju alabapade (p = 0.022) ati 24-h-ori ito (p = 0.022) -Fed mosquitoes.Ni idakeji si awọn flight iṣẹ Àpẹẹrẹ ṣàpèjúwe nipasẹ awọn ito onje, urea-je alejo-koni obinrin ti o han jubẹẹlo flight aṣayan iṣẹ-ṣiṣe lori kan 24-h akoko, peaking ti awọn obirin ni idaji awọn ipele keji. d urea significantly pọ si ọna ijinna ofurufu ti o da lori ifọkansi ti o gba (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001).
Iwoye iṣẹ flight ti awọn efon ti nmu ẹjẹ jẹ iduroṣinṣin ati idaduro lori awọn wakati 24 ni gbogbo awọn ounjẹ, pẹlu iṣẹ ito ti o pọ sii ni akoko idaji keji ti akoko dudu fun awọn obirin ti o jẹun lori omi bi daradara bi ninu awọn obirin ti o jẹun titun ati awọn wakati 24 (aworan 3) . Lakoko ti ounjẹ ito ti o ni ipa ti o ni ipa ti o tumọ si ijinna ofurufu ni ẹjẹ-jẹ = awọn obirin (F (5, 4.0). F (5, 138) = 1.36, p = 0.24) .pẹlu ito miiran ati ounjẹ iṣakoso (alabapade, p = 0.0091; 72 wakati, p = 0.0022; 168 wakati, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; dH2O.3, p).
Awọn ipa ti ito ati ifunni urea lori awọn aye ibisi ni a ṣe ayẹwo ni awọn bioassays ti ẹyin (Nọmba 4A) ati pe a ṣe iwadii ni ibamu si nọmba awọn eyin ti obinrin kọọkan gbe, iwọn ẹyin, ati awọn idin ti o ṣẹṣẹ bẹrẹ. emales je kan 24-wakati ito, ẹjẹ onje gbe significantly siwaju sii eyin ju awọn obirin je miiran ito awọn ounjẹ ati awọn ti o wà iru si awon ti je sucrose (Fig. 4B) .Bakanna, awọn iwọn ti awọn eyin gbe nipa ito-je obirin orisirisi nipa onje (F (5, 209) = 12.85, p <0002) ti o tobi ju ti awọn obirin ti o wa ni ito. eyin ju awọn obirin ti o jẹ omi ti omi, nigba ti awọn ẹyin ti awọn obirin ti o jẹun pẹlu 168 h ti ito ni o kere pupọ (Fig. 4C) .Ni afikun, ounjẹ ito ni ipa pupọ ni iwọn idin (F (5, 187) = 7.86, p <0.0001), pẹlu awọn idin ti o tobi pupọ ti o nwaye lati awọn ẹyin ti o gbe nipasẹ 2-hof larvae. .Omi-jẹ ati 168-h awọn obirin ti o ni ito ito (Figure 4D).
Iṣẹ ibisi ti obinrin Anopheles arabinis ti o jẹun lori ito maalu ati urea.Awọn efon obinrin ti o jẹ ẹjẹ ni wọn jẹ ounjẹ ti o wa ninu ito malu tuntun ati ti ogbo, ọpọlọpọ awọn ifọkansi ti urea, sucrose (10%), ati omi distilled (H2O) fun awọn wakati 48 ṣaaju ki o to gbe ni bioassays-nọmba ati awọn ẹyin ti o gba awọn wakati Egg 4 (Eyin iwọn Egg) 4. , F) ati iwọn idin (D, G) ni ipa pataki nipasẹ ounjẹ ti a pese (ito maalu: BD; urea: EG) . Awọn ọna fun paramita kọọkan ti a ṣe ni lilo awọn orukọ lẹta ti o yatọ si yatọ si ara wọn (ọna kan ANOVA ti o nlo Tukey's post hoc analysis; p <0.05) . Awọn ọpa aṣiṣe jẹ aṣoju aṣiṣe boṣewa ti itumọ.
Gẹgẹbi paati nitrogenous pataki ti ito, urea, nigba ti a pese bi ounjẹ si awọn obinrin ti o jẹun ti ẹjẹ, ni pataki ni ipa awọn igbelewọn ibisi ni gbogbo awọn ẹkọ. Nọmba awọn ẹyin ti awọn obinrin ti jẹun urea, lẹhin ounjẹ ẹjẹ, ti o da lori ifọkansi urea (F (11, 360) = 4.69; p <0.0001), awọn obinrin 4 diẹ sii laarin awọn ẹyin 3 ati 3M. (Nọmba 4E) . Awọn obirin ti o jẹun lori awọn ifọkansi urea ti 134 µM tabi loke dubulẹ awọn ẹyin ti o tobi ju awọn obirin ti o jẹun lori omi (F (10, 4245) = 36.7; p <0.0001; Nọmba 4F), ati iwọn idin, biotilejepe o ni ipa nipasẹ awọn ifọkansi ti urea ti urea ni awọn iya (3310.0) diẹ sii (3310.0). oniyipada (olusin 4G).
Ìwò ifamọra si alejo-wá ito bovine headspace iyipada ayokuro.The arabiensis ti a ṣe ayẹwo ni gilasi tube olfactometer (Fig. 5A) ti a significantly fowo nipasẹ ito ori (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fig. 5B) . Post hoc onínọmbà ti o ṣẹlẹ ni awọn ipele 2 ti o ga julọ ti o ṣe afiwe awọn wakati 2 ti o ga julọ ti o ṣe afiwe awọn wakati 7 ti o dara julọ ti ito odor 2. = 0.0060, 168 wakati: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Ayafi fun olfato ti ito titun (p = 0.13; Figure 5B) .Biotilẹjẹpe ifamọra gbogbogbo ti awọn efon-mu-ẹjẹ si õrùn ito ko yatọ si pataki = χ2, 5 80.8 C = C = 804.0.0. s ni a rii pe o wuyi pupọ diẹ sii si awọn ayokuro iyipada ori aaye ni akawe pẹlu ito ti wakati 72 ni akawe si awọn idari (p = 0.0066; olusin 5C).
Ihuwasi idahun si adayeba ki o si sintetiki ito Maalu odors ni search fun ogun ati ẹjẹ-je Anopheles arabianus.Schematic of the glass tube olfactometer (A).Attraction of headspace volatile extracts from fresh and aged cow ito to host (B) and blood-sucking (C) mosquitoes.Find thespace Anhool 2/Find the Lord tentacle.D ur (E), 72-wakati (F), ati 168-wakati (G) ito Maalu ti ogbo ni a fihan. Wiwa eriali itanna (EAD) ṣe afihan awọn iyipada foliteji ni idahun si awọn agbo ogun bioactive ninu aaye ori ti o yọ kuro lati chromatograph gaasi ati ti rii nipasẹ aṣawari ionization ina (FID) .Apapọ iwọn naa duro fun awọn ohun-ini itusilẹ ti akoko Vg (awọn ohun-ini itusilẹ 1). ti awọn biologically lọwọ agbo ti wa ni han.A nikan aami akiyesi (*) tọkasi a dédé kekere-iwọn replitude.Double asterisks (*). ANOVA lilo Tukey's post hoc onínọmbà;p <0.05) .Awọn ọpa aṣiṣe jẹ aṣoju aṣiṣe boṣewa ti iwọn
Obirin Ann.arabiensis, 72 h ati 120 h lẹhin ounjẹ ẹjẹ, lakoko fifun, ko si ààyò ti a fihan fun awọn iyọkuro iyipada ti ori aaye lati inu ito malu titun ati ti ogbo ti a fiwewe pẹlu awọn iṣakoso pentane (χ2 = 3.07, p> 0.05; Afikun faili 1: Fig. S1).
Fun obinrin Ann.arabiensis, GC-EAD ati GC-MS itupale mọ mẹjọ, mefa, mẹta ati mẹta bioactive agbo (Figure 5D-G) .Biotilẹjẹpe iyato ninu awọn nọmba ti agbo ti o elicited electrophysiological ti şe won woye, julọ ti awọn wọnyi agbo ni o wa ni kọọkan headspace iyipada jade ti a gba lati alabapade ati ti ogbo ito.Nitorina, nikan physiological ti a ṣe jade lati inu ito ito ti ogbo ti o jẹ pe awọn obirin ti o wa loke ti o wa loke ti ara-ara ti o wa loke ti awọn obirin ti o wa ni oke ti o wa loke. to wa ninu siwaju itupale.
Iwọn idasilẹ iyipada lapapọ ti awọn agbo ogun bioactive ninu gbigba ori aaye pọ si lati 29 µg h-1 ninu ito tuntun si 242 µg h-1 ni ito ọjọ-wakati 168, nipataki nitori p-cresol ati m-formaldehyde Phenol n pọ si bi daradara bi phenol.Ni ifiwera, awọn iwọn idasilẹ ti awọn iwọn-itumọ ti 2 miiran ti n pọ si bi 2-epo-2. ọjọ ori ito, eyiti o ni ibamu pẹlu idinku ti a ṣe akiyesi ni kikankikan ifihan (ọpọlọpọ) ninu chromatogram (Fig. 5D) -G apa osi) ati awọn idahun ti ẹkọ-ara si awọn agbo ogun wọnyi (Fig. 5D-G apa ọtun).
Lapapọ, adalu sintetiki ni ipin adayeba ti o jọra ti awọn agbo ogun bioactive ti a damọ ni awọn iyọkuro iyipada ti awọn aaye ori ito tuntun ati ti ogbo (Ọpọtọ 5D–G) ko si han pe o fa afilọ pataki ninu wiwa agbalejo kan (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; quito. 5H, χ4) = 0.30; Fig. 5I).Sibẹsibẹ, awọn afiwera post hoc ni meji laarin awọn itọju fihan pe awọn efon ti n wa ogun jẹ iwunilori pupọ si adalu sintetiki ti ito ọjọ-ori 24-h ni akawe pẹlu awọn iṣakoso pentane (p = 0.0086; Figure 5H).
Lati ṣe ayẹwo ipa ti awọn ẹya ara ẹni kọọkan ninu awọn apopọ sintetiki ti ito ti ogbo 24-h, awọn idapọ iyokuro mẹfa ni a ṣe ayẹwo lodi si awọn apopọ pipe ni ayẹwo Y-tube, ninu eyiti a ti yọ awọn agbo ogun kọọkan kuro.Fun awọn efon ti o n wa ogun, iyokuro awọn agbo ogun kọọkan lati apapo pipe ni ipa ti o pọju lori awọn idahun ihuwasi (χ2 = 19.60, p 19.63, p 19.2 , p 1 , p = 19.0 , p 1 , p = 2 , p 19.0 , p. ), gbogbo awọn apapo iyokuro jẹ wuni diẹ sii ju Kere ju ti a dapọ ni kikun.Ni idakeji, yiyọkuro awọn agbo-ara ẹni kọọkan lati inu adalu sintetiki ni kikun ko ni ipa awọn idahun ihuwasi ti awọn efon ti nmu ẹjẹ (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), pẹlu ayafi ti decanal, eyi ti o mu ki awọn ipele kekere ti a fiwe si (P2) ni afikun si awọn ipele 2 ti o pọju (P2).
Ni abule ti o ni aarun iba-ẹjẹ ni Etiopia, ipa ti adalu sintetiki ti ito malu 24-wakati ni fifamọra awọn efon labẹ awọn ipo aaye ni a ṣe ayẹwo fun awọn alẹ mẹwa (Fig. 6A) .Apapọ 4,861 efon ni a gba ati ti a mọ, eyiti 45.7% jẹ Anthropus.gambiaen .5% . were Culex spp. (Afikun faili 1: Table S1) .Anopheles arabinis jẹ ọmọ ẹgbẹ kanṣoṣo ti eka eya An.Gambian ti a ṣe idanimọ nipasẹ itupalẹ PCR. Ni apapọ, awọn efon 320 ni a mu ni alẹ kan, lakoko eyiti awọn ẹgẹ akoko pẹlu awọn baits idapọmọra sintetiki mu awọn ẹfọn diẹ sii ju awọn ẹgẹ ti a so pọ laisi adalu (χ12(6)0.0.0.0. Awọn ẹgẹ n-baited ni a ṣeto lori ọkọọkan awọn alẹ iṣakoso marun ni ibẹrẹ, arin, ati opin idanwo naa.Awọn nọmba ti o jọra ti awọn efon ni a mu ni awọn ẹgẹ kọọkan, ti o ṣe afihan ko si iyasọtọ laarin awọn ile (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p> 0.05) ati pe ko si awọn eniyan ti o kọ silẹ ni akoko ti awọn traps ti o wa ninu awọn traps ti awọn traps. adalu tic ti pọ si ni pataki: wiwa alejo (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), ifunni ẹjẹ aipẹ (χ2 (0, 650) = 32.2, p <0.0001) ati oyun (χ2 (0, 228) = 6.27, p23;Afikun faili 1: Table S1) .Eyi tun ṣe afihan ni apapọ nọmba awọn efon ti a mu: wiwa ogun> mimu ẹjẹ> aboyun> aboyun ologbele> akọ.
Agbeyewo aaye ti ipa ti 24-wakati sintetiki ito ito olfato.Awọn idanwo aaye ni a ṣe ni gusu-aringbungbun Ethiopia (maapu), nitosi ilu Maki (fi sii), lilo awọn ile-iṣẹ fun Iṣakoso Arun (CDC) pakute ina (ọtun) ni awọn ile ti a ti so pọ, pẹlu apẹrẹ square Latin kan (aworan eriali) (Adorrapsthetic CDC) ti o ni imọran ti ara ẹni (Adortrapsthetic CDC) . ṣugbọn kii ṣe Anopheles farroes (C), ni ọna ti o yatọ, ipa-igbẹkẹle ti ẹkọ iṣe-ara-ara kan.Ni afikun, awọn ẹgẹ wọnyi ṣe afihan awọn nọmba ti o pọ si pataki ti awọn efon Culex ogun. ps (ṣii; N = 5)..Asterisks tọkasi awọn ipele pataki iṣiro (*p = 0.01 ati *** p <0.0001)
Awọn eya mẹta ni a mu ni oriṣiriṣi ni awọn ẹgẹ ti o ni awọn apopọ sintetiki. Wiwa fun ogun (χ2 (1, 1345) = 71.7, p <0.0001), ifunni ẹjẹ (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) = oyun (χ2 (1, 6. 1.8) p. nsis ti wa ni idẹkùn ni itusilẹ adalu sintetiki (Fig. 6B), lakoko ti iye An ko yatọ.Pharoensis ni orisirisi awọn ẹya-ara ti ẹkọ-ara ni a ri (Fig. 6C) .Fun Culex, nikan ni ilosoke pataki ninu nọmba awọn efon ti n wa awọn ọmọ-ogun ni a ri ni awọn ẹgẹ baited pẹlu adalu sintetiki (χ12 (1), 13.0.0. D), akawe pẹlu awọn ẹgẹ iṣakoso.
Awọn ẹgẹ bait ogun ti o wa ni ita ti awọn ogun ti o pọju laarin awọn aaye ibisi ati awọn agbegbe igberiko ni Ethiopia ni a lo lati ṣe ayẹwo boya awọn apanirun iba lo õrùn ito maalu bi aaye ibugbe ogun.Ni aini ti awọn ifẹnukonu agbalejo, ooru, ati pẹlu tabi laisi niwaju õrùn ito maalu, ko si awọn efon ti a gba (Fifii faili 1: Figure S3 niwaju iwọn otutu ti o ga, dormoria) ti o ga julọ. ed ati ki o gba, botilẹjẹpe ni awọn nọmba kekere, ominira ti ọjọ ori ito (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Afikun faili 1: Figure S3) .Ni idakeji, awọn iṣakoso omi ko gba awọn efon iba ni awọn iwọn otutu ti o ga julọ (Fifii 1: Figure S3).
Awọn efon iba gba ati pin kaakiri awọn agbo ogun ti o ni nitrogen nipasẹ ifunni isanpada lori ito Maalu (ie, puddles) lati jẹki awọn ami itan-akọọlẹ igbesi aye, ti o jọra si awọn kokoro miiran [2, 4, 24, 25, 26]. Ito Maalu jẹ orisun isọdọtun ti o wa ni imurasilẹ ti o ni ibatan pẹkipẹki pẹlu awọn aaye isinmi fun awọn ibi-itọju iba, ati awọn ibi isunmi ti o wa ni isunmọtosi, ati bii awọn ibi isunmi fun ibi-itọju iba. Awọn efon emale wa orisun yii nipasẹ olfato ati pe o ni anfani lati ṣe ilana gbigba ti awọn agbo ogun nitrogenous ninu ito, pẹlu urea, paati nitrogenous pataki ninu ito [15, 16].Ti o da lori ipo eto ẹkọ ẹkọ ẹkọ ẹkọ ẹkọ ẹkọ obinrin, awọn ounjẹ ti o wa ninu ito ni a pin lati jẹki iṣẹ ọkọ ofurufu ati iwalaaye ti iwalaaye ti awọn eniyan ti o wa laaye lakoko awọn abuda ti agbalejo ati iwalaaye ti obinrin ti n wa daradara bi obinrin akọkọ gonadotropic cycle.Nitorina, ito dapọ yoo ohun pataki onje ipa fun iba vectors ti o ti wa ni pipade bi aito agbalagba [8], bi o ti pese awọn obinrin efon pẹlu awọn agbara lati gba pataki nitrogenous agbo nipa lowosi ninu kekere-ewu feeding.This wiwa ni o ni significant epidemiological gaju, bi awọn obirin mu wọn aye expectancy, o wu ki o si awọn iṣẹ-ṣiṣe ti awọn veproduur iwa ti ojo iwaju le ni ipa lori awọn iwa ti o ni ipa ti awọn iṣẹ-ṣiṣe ti ojo iwaju. ctor isakoso eto.