Nchọpụta na nkesa na-etinye ahụhụ na-enweghị ahụhụ na usoro nri dị iche iche na usoro a na-erite uru. iji chọpụta ma ọ bụ.mkpasu iwe arabiensis na mmamịrị ehi maka inweta nri na-eme ka njirimara akụkọ ndụ dị mma.
Jide n'aka na ọ dị mma.arabiensis dọtara na isi nke ọhụrụ, awa 24, 72-hour, na 168-hour ehi ochie mmamịrị, na onye ọbịa na-achọ na ọbara nri (48-hour post-ọbara nri) ụmụ nwanyị na-atụ na Y-tube olfactometer, na ime nwanyi na-enyocha kemịkalụ n'ihi na ngwakọta nke biophysiw. A na-enyocha mmamịrị n'ime afọ anọ niile. A tụlere ngwakọta nke ngwakọta bioactive n'ime Y-tube na nnwale ubi. Iji nyochaa mmamịrị ehi na isi nitrogen nwere urea dị ka nri nwere ike ime maka ọrịa ịba, a tụrụ nri nri na njirimara akụkọ ndụ ndụ. ụgbọ elu, na mmeputakwa.
Chọọ maka ndị ọbịa ọbara na nourishment.In laabu na ubi ọmụmụ, Arab na-adọrọ mmasị na eke na sịntetik senti nke ọhụrụ na agadi ehi mmamịrị.Pregnant inyom bụ indifferent ka cow mmamịrị nzaghachi na spawning sites.Ọbịa-achọ na ọbara-aṅụ nwanyị ifịk ifịk na-amịkọrọ ehi mmamịrị na urea dị ka ndụ physiological ego dị ka ndụ ọrụ nke ndụ physiological ụgbọ elu na-etinye aka na-etinye aka n'ahụ maka mmamịrị ehi na urea dị ka ndụ ọrụ ndụ. al, ma ọ bụ mmeputakwa.
Anopheles arabinis nnweta na nkesa nke ehi mmamịrị maka mma ndụ akụkọ ihe mere eme character.Supplemental nri nke ehi mmamịrị na-emetụta vector ikike kpọmkwem site na-amụba ndụ kwa ụbọchị na vector njupụta, na udiozi site na-agbanwe ụgbọ elu ọrụ na ya mere a ga-atụle n'ọdịnihu ụdị.
Ịnweta ihe oriri na nkesa na-ejikọta nri ụmụ ahụhụ na njirimara akụkọ ihe mere eme nke ndụ [1,2,3]. Ụmụ ahụhụ na-enwe ike ịhọrọ ma nweta nri ma na-enye nri na-akwụ ụgwọ na-adabere na nnweta nri na ihe ndị na-edozi ahụ [1, 3] . Nkesa nke ihe oriri na-adabere na usoro akụkọ ihe mere eme nke ndụ na nwere ike iduga dị iche iche chọrọ maka nri nri na ọnụọgụgụ dị iche iche na ndụ dị iche iche [1, 3]. nri ndị a site na nri mgbakwunye, dị ka ụrọ, nsị dị iche iche na nzuzo nke vertebrates, na carrion, usoro a maara dị ka puddles [2]. Ọ bụ ezie na a na-akọwapụta ụdị urukurubụba na nla dị iche iche, oghere mmiri na-apụtakwa na iwu ụmụ ahụhụ ndị ọzọ, na mmasị na ịzụ ahịa ụdị ihe onwunwe ndị a nwere ike inwe mmetụta dị ịrịba ama na ahụike na ndụ ndị ọzọ, trary 6. Anopheles gambiae sensu lato (sl) na-apụta dị ka onye toro eto 'na-adịghị eri nri' [8], ya mere, ịgbara mmiri nwere ike ịrụ ọrụ dị mkpa na njirimara akụkọ ihe mere eme nke ndụ ya, ma a na-eleghara omume a anya.
Nri nitrogen n'ime ụmụ nwanyị toro eto Anopheles anwụnta na-ejedebe n'ihi obere caloric nke a na-ebu site na ụgbụ ahụ na iji nri ọbara na-adịghị arụ ọrụ [9]. nwere ike iji mgbakwunye nri nke vertebrate excreta iji nweta ogige nitrogenous nke na-eme ka mgbanwe na mgbanwe ụgbọ elu, dị ka ụmụ ahụhụ ndị ọzọ gosipụtara [2]. N'akụkụ a, mmasị siri ike na nke dị iche iche nke otu n'ime ụdị nwanne dị n'ime An.The Gambian sl species complex, Anopheles arabinis, fresh and agadi mmamịrị ehi [12,13,3,14] bụ ihe na-adọrọ mmasị na arabinism. mara na-akpakọrịta na na-eri nri na ehi.Cow mmamịrị bụ a akụ ọgaranya nitrogenous ogige, na urea na-aza ajụjụ maka 50-95% nke ngụkọta nitrogen na ọhụrụ mmamịrị [15, 16]. Dị ka ehi afọ mmamịrị, microorganisms tinye n'ọrụ ndị a ego iji belata mgbagwoju nke nitrogenous ogige n'ime 24 awa [15 na nitrogen organicism jikọtara ya ngwa ngwa na athmmonium organicism n'ime awa 24 [15]. y nke na-emepụta ogige ndị na-egbu anwụnta) na-eme nke ọma [15], nke nwere ike ịbụ nwanyị Ann.arabiensis na-adọrọ mmasị na mmamịrị gbara awa 24 ma ọ bụ obere [13, 14].
N'ime ọmụmụ ihe a, a na-achọ ndị ọbịa na ndị na-eri nri Ans. N'oge usoro gonadotropin mbụ ya, a na-enyocha arabiensis maka ịnweta ogige nitrogenous, gụnyere urea, site na mmamịrị mixing. N'ikpeazụ, a na-eduzi usoro nyocha iji chọpụta otú anwụnta nwanyị na-ekenye ihe oriri a nwere ike ime ka ọ dịkwuo ndụ, na-eme ka mmepụta nke urine na-emewanyewanye, na-amụbawanye mmepụta ihe. iji chọpụta ma ndị a nyere ndị a pụrụ ịdabere na clues maka ọbịa na ọbara nri An. Na ha search maka nke a nwere nutritional akụ, arabiensis chọpụtara chemical correlations n'azụ hụrụ di iche iche attractiveness.Synthetic odor mixs of volatile organic compounds (VOCs) chọpụtara na 24-hour agadi mmamịrị na-nyochaa enyocha n'okpuru ubi ọnọdụ, ịgbatị nsonaazụ nwetara n'okpuru laabu ọnọdụ nke boutophysical mmetụta na dị iche iche na-ekwu.Mmanya anwụnta. Nsonaazụ enwetara na-akwado na An.arabiensis na-enweta ma na-ekesa ogige nitrogenous dị na mmamịrị vertebrate iji metụta àgwà akụkọ ihe mere eme nke ndụ. A na-atụle nsonaazụ ndị a n'ihe gbasara ọrịa na-akpata ọrịa na otú e nwere ike isi jiri ha mee ihe maka nlekota vector na njikwa.
A na-edobe arabicans Anopheles (ndụ Dongola) na 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH na 12: 12 h ìhè: okirikiri gbara ọchịchịrị. A na-azụta larvae na trays plastik (20 cm × 18 cm × 7 cm) jupụtara na mmiri mmiri na-ekpo ọkụ ma na-anakọta nri Tetramin® DE, iko mmiri mmiri (Tetramin® DE). Nolato Hertila, Åstorp, SE) wee bufee ya na oghere Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) iji kwe ka ndị okenye pụta. N'okpuru ebe a. Ụmụ nwanyị na-eji maka ule tube ụgbọ elu na-agụ agụụ maka naanị 4-6 awa na mmiri ad libitum. Iji kwadebe anwụnta na-aṅụ ọbara maka bioassays na-esote, 4 dpe nwanyi nyere ọbara atụrụ defibrotic (Håtunalab, Bro, SE) site na iji usoro nri akpụkpọ anụ (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, nke a na-enye ya kpọmkwem n'okpuru ebe a). ma ọ bụ 10% sucrose ad libitum maka ụbọchị 3 tupu nyocha ndị a kọwara n'okpuru ebe a. A na-eji ụmụ nwanyị ndị ikpeazụ mee ihe maka ụgbọ elu ụgbọ elu bioassays ma nyefee ya na ụlọ nyocha, wee nwee mmiri ad libitum distilled maka awa 4-6 tupu nnwale ahụ.
A na-eji nyocha nri na-achọpụta mmamịrị na urea na ndị okenye An.Arab nwanyi. Ndị na-achọ ndị ọbịa na ụmụ nwanyị na-eri ọbara na-enye nri nke nwere 1% diluted mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, ihe dị iche iche nke urea, na njikwa abụọ (10% sucrose na mmiri) maka 48 h. Tụkwasị na nke ahụ, agba agba nri (1 mg-50C); gma-Aldrich, Stockholm, SE) agbakwunyere na nri ma nye ya na 4 × 4 matrix na 250 µl microcentrifuge tubes (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Figure 1A) Jupụta na nsọtụ (~ 300 µl) .Iji zere asọmpi n'etiti anwụnta na mmetụta nwere ike nke 1 n'ime oghere 1 nke dye 1 moto. cm n'ịdị elu; Semadeni, Ostermundigen, CH; Figure 1A) na ọchịchịrị zuru oke na 25 ± 2 cm Celsius C na 65 ± 5% iru mmiri dị nso. A na-emegharị nyocha ndị a ugboro 5 ruo 10. Mgbe ekpughere nri, a na-etinye anwụnta na -20 Celsius C ruo mgbe nyocha ọzọ.
Chọọ maka mmamịrị anụ na urea nke onye ọbịa na-amịkọrọ ọbara na nwanyị na-aṅụ ọbara Anopheles arabianus.N'nnwale nri (A), a na-enye ụmụ nwanyị anwụnta nri nke gụnyere mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, urea dị iche iche, sucrose (10%), na mmiri distilled (H2O) .Ọ dịghị onye na-achọ ihe (B) na-eri anụ ahụ karịa nwanyị. nwanyi etinye obi gị dum 72-hour cow mmamịrị erughị 168-hour ehi mmamịrị (B) .The mean total nitrogen content (± standard deviation) nke mmamịrị na-anọchi anya na inset.Ọbịa-achọ (D, F) na ọbara-aṅụ (E, G) nwanyi na-elu urea na dose-adabere manner.Mean inhaled mpịakọta (D, E) dị iche iche site na iji akwụkwọ ozi ọ bụla dị iche iche (D, E) dị iche iche site na iji aha dị iche iche VA. ; p <0.05) .Ogwe mperi na-anọchite anya njehie ọkọlọtọ nke pụtara (BE) .Akara kwụ ọtọ kwụ ọtọ na-anọchi anya ahịrị nlọghachị log-linear (F, G)
Iji hapụ nri na-etinye uche n'ihe, a na-etinye anwụnta n'otu n'otu n'ime 1.5 ml microcentrifuge tubes nwere 230 µl nke mmiri distilled na anụ ahụ mebiri site na iji pestle na cordless moto (VWR International, Lund, SE), nke na-esote centrifugation na 10 krpm maka 10 min. ma-Aldrich) na absorbance (λ620) kpebisiri ike site na iji spectrophotometer dabeere na microplate reader (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm).N'aka nke ọzọ, a na-agbanye anwụnta na 1 ml nke mmiri distilled, 900 µl nke a na-ebufe ya na 1 nm. 00, Shimadzu, Kista, SE) .Iji chọpụta ihe oriri na-eri nri, a na-edozi usoro ọkọlọtọ site na dilution serial iji nye 0.2 µl ka 2.4 µl nke 1 mg ml-1 xylene cyanide. Mgbe ahụ, a na-eji njupụta anya nke ihe a na-eji agba agba ama ama iji chọpụta ọnụọgụ nri nke anwụnta ọ bụla.
A na-enyocha data olu site na iji nyocha otu ụzọ nke ọdịiche (ANOVA) sochiri Tukey's post hoc pairwise ntụnyere (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007) .Linear regression analyzes kọwara nleba anya na-adabere na urea oriri na atụnyere nzaghachi n'etiti ndị ọbịa-na-eleta urea. 0 maka Mac, Software GraphPad, San Diego, CA, US).
Ihe dị ka 20 µl nke ihe nlele mmamịrị sitere na afọ ọ bụla na-ejikọta na Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) na mkpuchi na capsules tin (8 mm × 5 mm) . , US) iji chọpụta ọdịnaya nitrogen n'ime mmamịrị ọhụrụ na nke merela agadi dịka ụkpụrụ ndị nrụpụta si dị. A na-atụle mkpokọta nitrogen (g N l-1) dabere na mkpokọta urea amaara ejiri dị ka ọkọlọtọ.
Iji chọpụta mmetụta nke nri na-achọ ndị ọbịa na ndụ ụmụ nwanyị na-aṅụ ọbara, a na-etinye anwụnta n'otu n'otu na nnukwu efere Petri (12 cm na dayameta na 6 cm n'ịdị elu; Semadeni) nke nwere oghere na-ekpuchi ntupu na mkpuchi (3 cm na dayameta) na Maka ventilashion na nri nri. A na-enye nri ozugbo mgbe 4 dpe gachara ma tinye 1%, a na-etinye uche n'ime 1% ọhụrụ na 1% diluw. sucrose na mmiri. Onye ọ bụla nri e pipetted na a eze tampon (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) tinye n'ime a 5 ml sirinji (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), na plunger wepụrụ, na-etinye n'elu a petri efere (nọmba 1) .1A).Change gị dietur ugboro abụọ a na-agụ ụbọchị ọ bụla. A na-atụfu anwụnta ruo mgbe anwụnta ikpeazụ nwụrụ (n = 40 kwa ọgwụgwọ) . A na-enyocha ndụ anwụnta na-eri nri na nri dị iche iche site na iji Kaplan-Meyer survival curves na log-rank tests iji tụnyere atụnyere nkesa lanarị n'etiti nri (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
A omenala anwụnta na-efe efe igwe igwe dabere na Attisano et al.[17], mere nke 5 mm oké doro anya acrylic panels (10 cm wide x 10 cm ogologo x 10 cm elu) na-enweghị n'ihu na n'azụ ogwe (Fig. 3: top) .A pivot mgbakọ na a vetikal tube mere nke gas chromatography kọlụm (0.25 mmle mkpagide na njedebe L;) ymium magnets 9 cm iche. Otu tube kwụ ọtọ nke otu ihe ahụ (6.5 cm L) mere ka tube kwụ ọtọ ka ọ bụrụ ogwe aka a na-ejikọta ya na ogwe aka nke na-ebu obere mpempe akwụkwọ aluminom dị ka ihe mgbaàmà na-egbochi ọkụ.
24-hour agụụ na-agụ ụmụ nwanyị e nyere nri n'elu maka nkeji 30 tupu njide. Anwụnta ụmụ nwanyị na-eri nri zuru oke bụ nke a na-egbutu ya n'otu n'otu na ice maka 2-3 min ma tinye ya na ntụtụ ahụhụ na beeswax (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) wee kegidere ya na tube nke omenala.F. logger, wee chekwaa ma gosipụta ya site na iji PC-Lab 2000 ™ software (v4.01; Velleman, Gavere, BE) .A na-etinye igwe igwe ụgbọ elu n'ime ụlọ na-achịkwa ihu igwe (12 h: 12 h, ìhè: ọchịchịrị, 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH).
Iji jiri anya nke uche hụ usoro nke ọrụ ụgbọ elu, a na-agbakọ ogologo oge (m) na ọnụ ọgụgụ nke ọrụ ụgbọ elu na-aga n'ihu kwa elekere n'ime oge awa 24. Tụkwasị na nke ahụ, a na-atụle nkezi anya nke ụmụ nwanyị n'otu n'otu na-agafe na ọgwụgwọ ma nyochaa site na iji otu ụzọ ANOVA na Tukey's post hoc analysis (JMP Pro, v14.0.0), A na-atụle nkezi ọgwụgwọ SAS, ebe a na-atụle ihe dịpụrụ adịpụ nke ụlọ ọrụ SAS. A na-agbakọ nkezi ọnụọgụ nke okirikiri na nkeji iri.
Iji nyochaa mmetụta nke nri na arụmọrụ ịmụ nwa nke An.arabiensis, a na-ebufe ụmụ nwanyị isii (4 dpe) ozugbo na oghere Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) mgbe nchịkọta ọbara gasịrị ma nyezie nri nnwale maka 48 h dị ka akọwara n'elu. E wepụrụ nri nri na iko spawning (30 ml; Nolato Hertila, nke a na-enye 2 ml nke mmiri na-agbanwe n'ụbọchị nke atọ). 4 awa. Tinyegharịa usoro nri ọ bụla ugboro 20-50. A na-agụkwa akwa ma dekọọ maka ụlọ nyocha ọ bụla. A na-eji ihe atụ nke àkwá mee ihe iji chọpụta nha nha na ogologo mgbanwe dị iche iche nke nsen ọ bụla (n ≥ 200 kwa nri) site na iji microscope Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Leitz Wetzlar, DE) DE Camera 2.Leica Microsystems Ltd., DE) The fọdụrụ nsen nọ na-na a ihu igwe na-achịkwa ụlọ n'okpuru ọkọlọtọ ịzụ ọnọdụ maka 24 h, na a subsample nke na-adịbeghị anya pụta 1st instar larvae (n ≥ 200 kwa nri) e tụrụ, dị ka akọwara n'elu. The ọnụ ọgụgụ nke àkwá na size nke àkwá na larvae e tụnyere n'etiti ọgwụgwọ na iji otu-nyocha proway 1-product (n ≥ 200 kwa nri). , SAS Institute Inc.).
Headspace volatiles si ọhụrụ (1 hr post-sampling), 24 hr, 72 hr na 168 hr agadi mmamịrị na-anakọtara site sample anakọtara site Zebu ehi, Arsi agbụrụ. Maka mma, mmamịrị samples na-anakọtara n'isi ụtụtụ ka cows ka nọ n'ọba. Urine samples na-anakọtara site na 1 ml nke ọ bụla nke 100-100 g. (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH na Co., Minden, DE) na 3 l polyamide na mkpuchi Na vinyl chloride plastic drums.Headspace volatiles si nke ọ bụla bovine mmamịrị sample na-anakọtara ma ozugbo (ọhụrụ) ma ọ bụ mgbe maturation na ụlọ okpomọkụ maka 24 h, 72 h na 168 afọ sample bụ onye nnọchiteanya nke ọ bụla afọ sample.
Maka mkpokọta volatiles nke isi, a na-eji usoro mechiri emechi mee ihe iji gbasaa ikuku carbon carbon-filtered gas (100 ml min-1) na-arụ ọrụ site na akpa polyamide na kọlụm mgbasa ozi maka 2.5 h site na iji mgbapụta mgbapụta diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE) .N'ihi njikwa, a na-eme ka ọ bụrụ ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe. .5 cm x 3 mm id) nwere 35 mg nke Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) n'etiti iko ajị anụ. Tupu eji ya, a na-agbanye kọlụm na 1 ml redistilled n-hexane (Merck, Darmstadt, DE) na 1 ml pentane% 99. ted na 400 μl nke pentane. A na-ejikọta mkpokọta isi ebe a na-echekwa ya na -20 Celsius C ruo mgbe ejiri ya mee nyocha ọzọ.
Azịza omume omume nke ịchọ ndị ọbịa na iri ọbara An.Headspace volatile extracts anakọtara site na ọhụrụ, 24-h, 72-h, na 168-h-aged urine maka ihe ndị na-adịghị agbanwe agbanwe sitere na anwụnta Arabidopsis site na iji tube olfactometer kwụ ọtọ [18] . A na-eme nnwale ndị a na-eme n'ụlọ. 9].A iko tube olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) e illuminated na 3 ± 1 lx nke red ìhè si n'elu.Charcoal filtered na humidified ikuku eruba (25 ± 2 °C, 65 ± 2% ikwu iru mmiri) gafere bioassay na 30 cm s-1.Airless eruba na-eke a usoro nke igwe anaghị agba nchara, igwe anaghị agba nchara a usoro nke igwe anaghị agba nchara. n dispenser (4 cm × 1 cm; L: D; DAB Dental AB), kwụsịtụrụ site na eriri 5 cm na njedebe ikuku nke olfactometer, na-agbanwe ihe na-akpali akpali ọ bụla nkeji 5. Maka nyocha, 10 μl nke isi ihe ọ bụla na-ewepụta, diluted 1:10, na-eji dị ka ihe mkpali. tọhapụrụ cages 2-3 awa tupu mmalite nke nnwale. The ntọhapụ onu e debere na downwind n'akụkụ nke olfactometer, na anwụnta e kwere ka acclimate maka 1 min, na mgbe ahụ, urukurubụba valvụ nke onu e meghere ka release. A na-enyocha mmasị na ọgwụgwọ ma ọ bụ njikwa dị ka oke nke anwụnta nke batara n'ime isi mmalite nke nkeji 5. 30 ugboro, na iji zere mmetụta nke ọ bụla otu ụbọchị, a nwalere otu ọnụ ọgụgụ nke ọgwụgwọ na njikwa n'ụbọchị ọ bụla nnwale.Chọọ nzaghachi sitere n'aka ndị ọbịa na ndị na-eri nri Ans.Arabic versus headspace sets were nyochaa site na iji nominal logistic regression na-esote ụzọ abụọ ntụnyere maka ọnụ ọgụgụ dị njọ (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute).
A na-enyocha ihe ndị na-esi na mmamịrị ehi ọhụrụ na nke merela agadi n'ime oghere Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Iko plastik (30 ml; Nolato Hertila) jupụtara na 20 ml nke mmiri na-ekpo ọkụ na-enye mkpụrụ osisi na-agbapụta ma tinye ya na akụkụ dị iche iche nke iko 1.4. l nke ọ bụla headspace wepụ na 1: 10 dilution. Otu nha nha nke pentane iji dozie iko nchịkwa. A na-agbanwe ọgwụgwọ na iko nchịkwa n'etiti nnwale ọ bụla iji chịkwaa mmetụta ọnọdụ. iko iko)/(ngụkọta ọnụ ọgụgụ nke àkwá tọgbọrọ). A na-emeghachi ọgwụgwọ ọ bụla ugboro 8.
Gas chromatographic na electron antenna pattern detection (GC-EAD) nyocha nke nwanyị An.arabiensis ka a rụrụ dị ka akọwara mbụ [20] .Na nkenke, ọhụrụ headspace volatile extracts e kewapụrụ site na iji Agilent Teknụzụ 6890 GC (Santa Clara, CA, US) onwem na HP-5 (30 m × 0.0.25 mm kọlụm, Id Teknụzụ).na mmamịrị ịka nká. A na-eji hydrogen dị ka usoro mkpanaka na nkezi linear eruba ọnụego nke 45 cm s-1. Onye ọ bụla sample (2 μl) e injected maka 30 sekọnd na splitless mode na ihe ntinye okpomọkụ nke 225 Celsius C. The GC oven okpomọkụ e kenyere si 35 °C (3 nkeji njide) ka 300 Celsius C (10.0 nkeji njide) na 10.0C. A na-agbakwụnye 4 psi nke nitrogen ma kewaa 1: 1 na Gerstel 3D / 2 obere cross cross (Gerstel, Mülheim, DE) n'etiti ọkụ ọkụ ionization detector na EAD. The GC effluent capillary maka EAD gafere site Gerstel ODP-2 nyefe akara, nke tracks GC oven okpomọkụ gbakwunyere 5 × 1 cm, n'etiti huru n'ime ya na 5 ° C. ikuku (1.5 l min-1) .A na-etinye antenna 0.5 cm site na ntinye nke tube ahụ. Anwụnta ọ bụla na-agụta otu oyiri, na maka anwụnta na-achọ ndị ọbịa, ọ dịkarịa ala ugboro atọ ka a na-eme n'ụdị mmamịrị nke afọ ọ bụla.
Nchọpụta nke ogige bioactive na nchịkọta isi nke mmamịrị bovine ọhụrụ na agadi site na iji GC jikọtara ọnụ na spectrometer (GC-MS; 6890 GC na 5975 MS; Agilent Teknụzụ) iji nweta nzaghachi antennal na nyocha GC-EAD, na-arụ ọrụ na ọnọdụ ionization electron na 70 eV.GC-5 nwere ihe mkpuchi mkpuchi si UI na HP-6. × 0.25 mm n'ime dayameta, 0,25 μm film ọkpụrụkpụ) iji helium dị ka mobile na-adọ na nkezi linear eruba ọnụego nke 35 cm s-1.A 2 μl sample e igbanye iji otu injector ntọala na oven okpomọkụ dị ka GC-EAD analysis.Compounds e chọpụtara dabeere na ha njide oge (Kovát spectral Library) Ntụle Ntụle Ntụle Ntụle N'iji otu injector ntọala. A kwadoro ogige site n'ịgbanye ụkpụrụ ndị ziri ezi (Njikwa Mgbakwunye 1: Tebụl S2) .N'ihi na ọnụọgụgụ, heptyl acetate (10 ng, 99.8% kemịkalụ kemịkalụ, Aldrich) na-agbanye dị ka ọkọlọtọ mpụga.
Ịtụle irè nke a sịntetik isi ngwakọta mejupụtara bioactive ogige mara na ọhụrụ na agadi mmamịrị na-adọta ndị ọbịa-achọ na ọbara-aṅụ Ans.arabiensis, na-eji otu olfactometer na protocol dị ka above.Synthetic ngwakọta mimicked na mejupụtara na nha nke ogige na ngwakọta headspace24-hour, 8 extracts nke freshhour, 8-hour, 12-hour, 7-hour, 2-hour. 8-hour agadi mmamịrị (Figure 5D-G; Faịlụ Mgbakwunye 1: Tebụl S2) .N'ihi nyocha, jiri 10 μl nke 1: 100 dilution nke ngwakọta synthetic zuru oke, na mkpokọta ntọhapụ sitere na ihe dịka 140-2400 ng h-1, maka nyochaa ịma mma na-adọrọ mmasị na ndị ọbịa na nke na-aṅụ ọbara, na-eme ka ngwakọta nke ihe na-emepụta ihe na-eme ka ọ bụrụ ihe mgbagwoju anya. A na-ewepụ ngwakọta zuru ezu.Chọọ nzaghachi sitere n'aka ndị ọbịa na ndị na-enye ọbara Ans.Arab vs synthetic na subtractive ngwakọta e nyochara site nominal logistic regression sochiri pairwise ntụnyere maka odd ratios (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Iji chọpụta ma mmamịrị ehi ọ ga-abụ ebe obibi maka anwụnta ịba, mmamịrị ehi ọhụrụ na nke merela agadi, nke anakọtara dịka akọwara n'elu, ma tinye mmiri n'ime bọket 3 l (100 ml) ma tinye ya n'ọnyà ndị ọbịa.(BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE) .Iri ọnyà enịm 50 m iche na ịta nri, 400 m si obodo obodo (Silay, Ethiopia, 5°53′24′N, 37°29′24′′E) na ọ dịghị anụ ụlọ, na-adịgide adịgide ozuzu mgbakwasị na obodo nta. Ise ọnyà na-ahapụ ndị ọbịa nke simuch ọnụnọ nke simuch ebe a na-ekpo ọkụ n'ụzọ ise. A na-eri nri abalị kwa abalị maka ngụkọta abalị ise. A na-atụnyere ọnụọgụ anwụnta ejidere na ọnyà nke mmamịrị afọ dị iche iche na-eji ntụgharị logistic na nkesa beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
N'ime obodo ịba-ndemic nke dị nso na obodo Maki, mpaghara Oromia, Etiopia (8 ° 11' 08 ″ N, 38° 81′ 70″ E; Figure 6A) . A na-eduzi ọmụmụ ihe n'etiti etiti August na etiti Septemba tupu ịgbanye ụlọ ime ụlọ kwa afọ, yana ogologo oge mmiri ozuzo. Akụkụ ise-5 nke dị n'ime ime obodo a họọrọ. 6A) .Njikere eji ahọpụta ụlọ bụ: ọ dịghị anụ ụlọ a na-anabata n'ime ụlọ, ọ dịghị nri ime ụlọ (isere nkụ ma ọ bụ unyi) (ma ọ dịkarịa ala n'oge oge ikpe), na ụlọ nwere ihe karịrị mmadụ abụọ, na-ehi ụra n'enweghị ihe mgbochi.n'okpuru a na-emeso anwụnta net.Ethical nkwenye e nyere site Institutional Research Ethics Review Board (IRB/022/2016) nke Faculty of Natural Sciences (CNS-IRB), Addis Ababa University, dị ka ụkpụrụ guzosie ike site World Medical Association Nkwupụta nke Helsinki.Consent si onye ọ bụla isi ezinụlọ e nwetara site n'enyemaka nke nlekọta ahụike district (CNS-IRB), Addis Ababa University, dị ka ụkpụrụ guzosie ike site World Medical Association Declaration nke Helsinki.Consent si onye ọ bụla isi nke ezinụlọ e nwetara site n'enyemaka nke nlekọta ahụike mpaghara na njedebe nke ndị ọrụ mpaghara. larịị .Nchọpụta nnwale ahụ gbasoro nhazi square 2 × 2 Latin, nke a na-ekenye ngwakọta synthetic na njikwa na-ejikọta ọnụ ụlọ n'abalị mbụ ma gbanwee n'etiti ụlọ na abalị nnwale ọzọ. A na-emegharị usoro a ugboro iri. Ọzọkwa, iji chọpụta ọrụ anwụnta n'ime ụlọ ndị ahọpụtara, a na-edozi ọnyà CDC ka ọ na-agba ọsọ abalị ise n'usoro n'abalị n'oge mmalite nke etiti ehihie na njedebe nke ubi.
A na-agbaze ngwakọta sịntetik nke nwere ogige isii bioactive na heptane (97.0% mgbaze GC grade, Sigma Aldrich) wee wepụta ya na 140 ng h-1 site na iji owu wick dispenser [20]. (CDC) ọnyà ọkụ (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Figure 6A) . A na-atụkwasị ọnyà ndị ahụ 0.8 - 1 m n'elu ala, n'akụkụ ụkwụ nke ihe ndina, na onye ọrụ afọ ofufo na-ehi ụra n'okpuru ụgbụ anwụnta na-adịghị edozi ma na-arụ ọrụ n'etiti 18: 00 na 06: 30. Monsquitoes na 06: 30. Monsquitoes na physiological na-ejide, na-ejide onwe ya site na mmekọahụ. E mechara enyocha ya site na iji polymerase chain reaction (PCR) analysis iji mata ụdị ọdịdị nke a na-amata dị ka A. gambiae sl. Ndị otu mgbagwoju anya [23]. N'ọmụmụ ihe ubi, a na-enyocha ọnyà nke ụlọ ndị jikọtara ọnụ site na iji ihe nrịbama logistic dabara nke ọma, ebe mma bụ mgbanwe dabere na ọgwụgwọ (synthetic mix vs control) bụ ihe edoziri (J.MP1).0. SAS Institute Inc.).N'ebe a, anyị na-akọ χ2 na p-values ​​site na ule nke nwere ike ime.
Nyochaa ma ọ bụ safe.arabiensis nwere ike nweta mmamịrị, isi iyi nitrogen ya, urea, site na nri nri kpọmkwem, n'ime 48 h nke nchịkwa maka 4 ụbọchị post (dpe) na-achọ ndị ọbịa na ọbara na-eri nri ụmụ nwanyị na-eri nri (Fig 1A) .Ma ndị na-achọ ụlọ na ndị na-aṅụ ọbara na-etinye uche n'ahụ = nnukwu ihe oriri karịa ihe ọ bụla ọzọ 5 ma ọ bụ mmiri .02 (F.02). na F (5,299) = 56.00, p <0.0001, n'otu n'otu; Fig. 1B, C) . Ọzọkwa, ụmụ nwanyị na-achọ ndị ọbịa na-eri obere mmamịrị na 72 awa ma e jiri ya tụnyere mmamịrị na 168 awa (Fig 1B) .Mgbe a na-enye nri nwere urea, ndị ọbịa-na-achọ ndị inyom na-etinye uche na mmiri 2 nke ukwuu mgbe ọ na-etinye uche na 6 ọzọ na m. dị iche na 10% sucrose (F (10,813) = 15.72, p <0.0001; Figure 1D) .Nke a dị iche na nzaghachi nke ụmụ nwanyị na-eri ọbara, bụ ndị na-ejikarị urea na-eri nri karịa mmiri, ọ bụ ezie na ọ bụ ihe na-erughị 10% sucrose (F (10.0.0.0). 1.1E).Ọzọkwa, mgbe atụnyere n'etiti abụọ physiological steeti, ụmụ nwanyị phlebotomized na-etinyekwu urea karịa ụmụ nwanyị na-achọ nnabata na mkpokọta kacha ala, ụmụ nwanyị ndị a na-etinyekwa urea yiri nke ahụ na ọkwa dị elu (F(1,953)= 78.82, p <0.0001;Fig. 1F, G) Mgbe oriri si a urea-nwere nri pụtara nwere ezigbo ụkpụrụ (Fig. 1D, E), ụmụ nwanyị na ma physiological steeti nwere ike modulate ego nke urea etinye obi gị dum n'ime dum nso nke urea ịta n'ime log-linear ejiji (Fig. 1F, G)..N'otu aka ahụ, anwụnta na-egosi na ọ na-achịkwa ntinye nitrogen ha site n'ịchịkwa ọnụ ọgụgụ nke mmamịrị na-etinye n'ime ya, dịka ọnụọgụ nitrogen dị na mmamịrị na-egosipụta na ọnụọgụ nke etinyere (Figure 1B, C na B insets).
Iji chọpụta mmetụta nke mmamịrị na urea na-achọ ndị ọbịa na anwụnta na-aṅụ ọbara, a na-enye ụmụ nwanyị nri mmamịrị nke afọ anọ niile (ọhụrụ, 24 h, 72 h, na 168 h post-deposition) na ọnụọgụ urea dị iche iche, yana mmiri mmiri na-ekpo ọkụ na 10 % sucrose na-arụ ọrụ dị ka nchịkọta dị ịrịba ama na ndụ 2 nke ihe oriri na-egosi. -achọ ụmụ nwanyị (mmamịrị: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; Fig. 2B, C) na ụmụ nwanyị na-eri ọbara (drine: χ0, 0 = 93; p = 0.0 = fχ0. 2 = 137.9, df = 5, p <0.0001; Figure 2D,E) .N'ime nyocha niile, ụmụ nwanyị na-eri nri nke mmamịrị, urea, na mmiri na-eri nri dị ala karịa ụmụ nwanyị na-eri nri sucrose (Figure 2B-E) . Ndị na-achọ ndị ọbịa = ụmụ nwanyị na-achọ nri na-eri nri ọhụrụ na nke siri ike 2 na urine dị iche iche na-eme ka urine dị iche iche na-eri nri. .016) inwe ihe puru omume nke kachasi ala (Fig 2B) . Ọzọkwa, ụmụ nwanyị na-achọ ndị ọbịa na-eri nri 135 mM urea dị ndụ karịa njikwa mmiri (p <0.04) (Fig.2C) .Tụnyere mmiri, ndị inyom na-eri nri na mmamịrị ọhụrụ na 24-hour mmamịrị na-adị ndụ ogologo oge (p = 0.001 na p = 0.012, n'otu n'otu; Ọnụ ọgụgụ 2D), ebe ndị inyom na-eri nri na 72-hour mmamịrị na-adị ndụ karịa ndị na-eri nri Female obere mmamịrị ọhụrụ na 24-hour mmamịrị 24-hour na-asọpụrụ 0.00 prine (prine). D) Mgbe a na-eri nri 135 mM urea, ụmụ nwanyị na-eri ọbara na-adị ndụ ogologo oge karịa ihe ndị ọzọ niile nke urea na mmiri (p <0.013; Figure 2E).
Ịlanahụ nke onye ọbịa na nwanyị na-aṅụ ọbara Anopheles arabinis na-eri nri na mmamịrị ehi na urea.Na bioassay (A), a na-enye anwụnta nwanyị nri nke gụnyere mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, ọkwa dị iche iche nke urea, sucrose (10%) na mmiri distilled (H2O) .The nlanarị nke onye ọbịa-achọ na ọbara (B) ọ bụla (B) moquis e dekọrọ. ụmụ nwanyị niile na-eri nri na mmamịrị (B, D) na urea (C, E), na njikwa, Sucrose na mmiri, anwụọla.
Ngụkọta anya na ọnụ ọgụgụ nke okirikiri kpebisiri ike na ule igwe igwe ụgbọ elu n'elu oge 24 dị iche n'etiti ndị na-achọ ndị ọbịa na anwụnta na-aṅụ ọbara, nke gosipụtara obere ọrụ ụgbọ elu n'ozuzu ya (Fig 3) .Ọnwụ anwụnta na-achọ ndị ọbịa nke na-enye mmamịrị ọhụrụ na agadi mmamịrị ma ọ bụ sucrose na mmiri gosipụtara ụdị ụgbọ elu dị iche iche (Fig 3), na ụmụ nwanyị na-eri nri mgbe ha na-eri nri na-arụ ọrụ na 6 na-arụ ọrụ n'afọ 6. ged anwụnta na-eri nri na mmamịrị na-egosipụta ụdị ụgbọ elu dị iche iche na bụ isi diurnal. Ụmụ nwanyị anwụnta nke na-enye sucrose ma ọ bụ 72-hour mmamịrị gosipụtara ọrụ n'ime oge 24-hour, ebe ụmụ nwanyị na-enye mmiri na-arụsi ọrụ ike n'oge etiti oge. anwụnta na-eri nri na sucrose gosipụtara n'ụtụtụ na n'oge 2 na-arụ ọrụ n'oge na-adịghị arụ ọrụ. Mbelata ọrụ na-aga n'ihu karịa awa 24 (Nkeji 3).
Ụgbọ elu arụmọrụ nke dinta na-achọ ọbara na-aṅụ nwanyị Anopheles arabinis na-eri nri na mmamịrị ehi na urea.N'ime ule igwe igwe ụgbọ elu, anwụnta nwanyị na-eri nri na mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, ihe dị iche iche nke urea, sucrose (10%), na mmiri distilled (H2O) na-ejikọta ya na kwụ ọtọ, nke na-agbagharị agbagharị (hụ ọbara nwanyị). ngụkọta anya na ọnụ ọgụgụ nke ụgbọ elu kwa elekere maka nri ọ bụla n'ime awa 24 ka e dekọrọ (ọchịchịrị: isi awọ; ìhè: ọcha) .A na-egosi na nkezi anya na nkezi ọnụ ọgụgụ nke bouts n'aka nri nke graph ọrụ circadian. Ogwe njehie na-anọchite anya njehie ọkọlọtọ nke ihe ọ pụtara. Nyocha nchịkọta akụkọ lee ederede.
N'ozuzu, ọrụ ụgbọ elu nke ụmụ nwanyị na-achọ ndị ọbịa na-agbaso ụkpụrụ yiri nke ụgbọ elu ụgbọ elu n'ime oge awa 24. Ogologo ụgbọ elu na-emetụta nke ọma site na nri nri (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001), na ụmụ nwanyị na-achọ ndị ọbịa na-abanye 72 awa mmamịrị na-efe efe na-efe efe karịa ogologo oge 0.0. quitoes na-efe efe ogologo oge karịa ọhụrụ (p = 0.022) na 24-h-aged (p = 0.022) anwụnta na-eri nri. N'adịghị ka usoro ọrụ ụgbọ elu kọwara site na nri mmamịrị, ndị na-achọ ndị na-achọ urea na-eri nri na-egosiputa ọrụ ụgbọ elu na-adịgide adịgide n'ime oge 24-h, peaking nke ọkara nke abụọ. d urea budata ụbara ịdị anya ụgbọ elu dabere na ntinye uche (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) .Ụmụ nwanyị na-achọ ọbịa na-eri nri ọ bụla nke urea na-efe ogologo karịa ụmụ nwanyị na-eri nri ma ọ bụ mmiri ma ọ bụ sucrose (p <0.03).
N'ozuzu ọrụ ụgbọ elu nke anwụnta na-aṅụ ọbara na-eguzosi ike ma na-adịgide adịgide n'elu 24 awa n'ofe nri niile, na-amụba ọrụ mmamịrị n'oge ọkara nke abụọ nke oge ọchịchịrị maka ụmụ nwanyị na-eri nri na mmiri nakwa na ụmụ nwanyị na-eri nri ọhụrụ na 24 awa (onyinyo 3) . Mgbe nri mmamịrị na-emetụta pụtara anya ụgbọ elu n'ime ọbara na-eri nri = ụmụ nwanyị (F (5, 4.0). F (5, 138) = 1.36, p = 0.24) . na mmamịrị ndị ọzọ na nri nchịkwa (ọhụrụ, p = 0.0091; 72 awa, p = 0.0022; 168 awa, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; dH2O.3, p.
A na-enyocha mmetụta nke mmamịrị na urea na-eri nri na usoro ọmụmụ na bioassays na-edozi akwa (Njirimara 4A) wee nyochaa ya dị ka ọnụ ọgụgụ nke àkwá nke nwanyị ọ bụla tọrọ, nha akwa, na nwa ọhụrụ a kpụpụtara ọhụrụ larvae. Ọnụ ọgụgụ nke àkwá tọrọ. Ụmụ nwanyị Arab na-eri nri mmamịrị dịgasị iche iche = F(5,4.03). Emales na-enye mmamịrị awa 24, nri ọbara tọgbọrọ nsen karịa ka ụmụ nwanyị na-eri nri mmamịrị ndị ọzọ ma dị ka ndị a na-eri nri sucrose (Fig 4B) .N'otu aka ahụ, nha akwa nke ụmụ nwanyị na-eri mmamịrị dịgasị iche iche site na nri (F (5, 209) = 12.85, p <1-002) na urine ka ukwuu. akwa karịa ụmụ nwanyị na-eri nri, ebe akwa nke ụmụ nwanyị na-eri nri na 168 h nke mmamịrị dị ntakịrị ntakịrị (Fig 4C) . Tụkwasị na nke ahụ, nri mmamịrị na-emetụta oke nha (F (5, 187) = 7.86, p <0.0001), na nnukwu larvae na-apụta site na nsen nke 2-4 na-esi na akwa ụmụ nwanyị na-esi na akwa 2-4-7. .Mmiri na-eri nri na ụmụ nwanyị na-eri mmamịrị 168-h (Njirimara 4D).
Nrụpụta arụmọrụ nke nwanyị Anopheles arabinis na-eri nri na mmamịrị ehi na urea.Ụnwụnta ndị na-eri ọbara na-eri nri ndị mejupụtara mmamịrị ehi ọhụrụ na agadi, ọkwa dị iche iche nke urea, sucrose (10%), na mmiri distilled (H2O) maka awa 48 tupu etinye na bioassays na 48 awa (Egg size), Egg size (Egg size). , F) na larvae size (D, G) na-emetụta nke ukwuu site na nri nyere (mmamịrị ehi: BD; urea: EG) .Means maka parameter ọ bụla a tụrụ site na iji aha mkpụrụedemede dị iche iche dị iche na ibe ha (otu ụzọ ANOVA site na iji Tukey's post hoc analysis; p <0.05) .Error Ogwe na-anọchite anya njehie ọkọlọtọ nke pụtara.
Dị ka isi nitrogenous akụrụngwa nke mmamịrị, urea, mgbe enyere dị ka nri na-eri ọbara ụmụ nwanyị, budata emetụta ọmụmụ parameters na niile ọmụmụ.The ọnụ ọgụgụ nke àkwá tọgbọrọ ụmụ nwanyị nri urea, mgbe a ọbara nri, dabere na urea ịta ahụhụ (F(11, 360) = 4.69; p <0.0001), nwanyị na-eri nri n'etiti 3 m 3. (Njirimara 4E) .Ụmụ nwanyị na-eri nri na urea nke 134 µM ma ọ bụ n'elu dina nsen buru ibu karịa ụmụ nwanyị na-eri nri na mmiri (F (10, 4245) = 36.7; p <0.0001; Figure 4F), na nha nha nha, ọ bụ ezie na ọ na-emetụta nha nha nke urea na ndị nne (33.0.0). mgbanwe (Fig. 4G).
N'ozuzu mmasị ka host-achọ bovine mmamịrị headspace volatile extracts.The arabiensis enyocha na iko tube olfactometer (Fig. 5A) na-emetụta nke ukwuu site na mmamịrị afọ (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fig. 5B).Post hoc analysis mere ka ọ dị elu karịa awa abụọ ọgwụgwọ awa 7 na-adọrọ mmasị karịa awa 7. = 0.0060, 168 awa: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Ewezuga isi nke mmamịrị ọhụrụ (p = 0.13; Figure 5B) .Ọ bụ ezie na n'ozuzu mmasị nke anwụnta na-aṅụ ọbara na ísì mmamịrị abụghị nke dị iche iche = χ2, 5 . Achọpụtara na s na-adọrọ mmasị nke ukwuu na mpụta ndị na-agbanwe agbanwe nke isi ma e jiri ya tụnyere mmamịrị awa 72 ma e jiri ya tụnyere njikwa (p = 0.0066; Figure 5C).
Azịza omume na-esi ísì mmamịrị ehi eke na sịntetik na-achọ onye ọbịa na nri ọbara Anopheles arabianus.Schematic of the glass tube olfactometer (A) .mmanụ headspace volatile extracts from fresh and aged cow urine to host (B) na ọbara na-aṅụ (C) anwụnta. Chọta nke Oghere 4 Ọ dị ọhụrụ tenthol D. ur (E), 72-hour (F), na 168-hour (G) mmamịrị ehi merela agadi. Nchọpụta antenna Electron (EAD) egosi mgbanwe voltaji na nzaghachi bioactive ogige na headspace eluted si gas chromatograph na achọpụtara site ire ọkụ ionization detector (FID) .The ọnụ ọgụgụ mmanya na-anọchi anya nzaghachi oge (Veg) ntọhapụ Properties (mpe). nke biologically arụ ọrụ ogige na-egosi.A otu akara mmuke (*) na-egosi a na-agbanwe agbanwe ala-amplitude nzaghachi.Double asterisks (**) egosi unreproducible nzaghachi. Chọta ndị ọbịa (H) na ọbara-aṅụ (I) An.arabiensis nwere dị iche iche na-arịọ ka sịntetik mixs nke ọhụrụ na agadi ehi pụtara mmamịrị dị iche iche na-adọta ọ bụla ọzọ na-esi ísì ụtọ nke dị iche iche nke moquid aha. ANOVA na-eji Tukey's post hoc analysis;p <0.05).Ogwe mperi na-anọchi anya njehie ọkọlọtọ nke ọnụ ọgụgụ
Nwanyị Ann.arabiensis, 72 h na 120 h mgbe nri ọbara gasịrị, n'oge spawning, ọ dịghị mmasị e gosiri maka headspace mgbanwe extracts si ọhụrụ na agadi ehi mmamịrị ma e jiri ya tụnyere pentane njikwa (χ2 = 3.07, p> 0.05; Mgbakwunye faịlụ 1: Fig. S1).
N'ihi na nwanyi Ann.arabiensis, GC-EAD na GC-MS nyochaa chọpụtara asatọ, isii, atọ na atọ bioactive ogige (Figure 5D-G) .Ọ bụ ezie na ọdịiche dị na ọnụ ọgụgụ nke ogige nke na-eme ka electrophysiological zaa hụrụ, ọtụtụ n'ime ndị a ogige dị na onye ọ bụla headspace volatile wepụ anakọtara site ọhụrụ na agadi mmamịrị. Ya mere, nanị physiological nke na-emepụta ihe nke ọ bụla n'ime ihe ndị na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta ihe na-emepụta site na mmamịrị ọhụrụ na agadi. gụnyere na nyocha ndị ọzọ.
Mkpokọta ntọhapụ na-agbanwe agbanwe nke ogige bioactive na mkpokọta headspace mụbara site na 29 µg h-1 na mmamịrị ọhụrụ ruo 242 µg h-1 na mmamịrị 168-hour, tumadi n'ihi p-cresol na m-formaldehyde Phenol na-abawanye yana phenol. afọ mmamịrị, nke jikọtara ya na nhụta mbelata nke mgbaàmà siri ike (ọtụtụ) na chromatogram (Fig 5D) -G aka ekpe) na nzaghachi physiological na ogige ndị a (Fig. 5D-G ogwe aka nri).
N'ozuzu, ngwakọta sịntetik nwere ihe yiri nke ahụ nke ogige bioactive nke a chọpụtara na mpụta na-agbanwe agbanwe nke oghere isi mmamịrị ọhụrụ na nke ochie (Fig 5D-G) na ọ pụtaghị na ọ na-adọrọ mmasị na-achọ onye ọbịa (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Fig. 5H) ma ọ bụ ọbara-sucking 1. = 0.30; Fig. 5I) Otú ọ dị, post hoc atụnyere n'etiti ọgwụgwọ gosiri na anwụnta na-achọ ndị ọbịa na-adọrọ mmasị nke ukwuu na ngwakọta sịntetik nke 24-h afọ mmamịrị ma e jiri ya tụnyere njikwa pentane (p = 0.0086; Figure 5H).
Iji nyochaa ọrụ nke onye ọ bụla n'ime ihe ndị dị na ngwakọta sịntetik nke mmamịrị 24-h, a na-enyocha ngwakọta isii na-emepụta ihe megide ngwakọta zuru ezu na nyocha Y-tube, bụ nke e wepụrụ ogige nke onye ọ bụla. Maka anwụnta na-achọ ndị ọbịa, ịwepụ ihe ndị dị n'otu n'otu site na ngwakọta zuru ezu nwere mmetụta dị ukwuu na nzaghachi omume (χ2 = 19.60, p19.63, p 19.63, p. ), Ngwakọta niile na-ewepụ ihe na-adọrọ adọrọ karịa Obere karịa n'ụzọ zuru ezu. N'ụzọ dị iche, mwepụ nke ogige ndị mmadụ n'otu n'otu site na ngwakọta synthetic zuru oke emetụtaghị nzaghachi omume nke anwụnta na-aṅụ ọbara (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), ma e wezụga decanal, nke mere ka ọ dị ala ma e jiri ya tụnyere: 2 Ngwakọta .
N'ime obodo ịba-ndemic nke dị na Etiopia, a na-enyocha arụmọrụ nke ngwakọta sịntetik nke mmamịrị ehi nke awa 24 na-adọta anwụnta n'okpuru ọnọdụ ubi maka abalị iri (Fig 6A) .E jidere 4,861 anwụnta ma chọpụta, nke 45.7% bụ Anthropus.gambiaen .5% na Anthropus. bụ Culex spp. (Nkọwa mgbakwunye 1: Isiokwu S1) .Anopheles arabinis bụ nanị onye òtù An.Gambian ụdị mgbagwoju anya nke PCR analysis chọpụtara.N nkezi, 320 anwụnta e weghaara kwa abalị, n'oge a ọnyà na sịntetik ngwakọta baits jidere ọzọ anwụnta karịa paired ọnyà na-enweghị ngwakọta (χ12 (6).0.0 = 1.0 = 320. A na-etinye ọnyà n-baited na nke ọ bụla n'ime abalị nchịkwa ise na mmalite, n'etiti, na njedebe nke ikpe ahụ. A na-ejide ọnụ ọgụgụ ndị dị otú ahụ nke anwụnta na ọnyà ọ bụla nke ọnyà, na-egosi enweghị mmasị n'etiti ụlọ (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p> 0.05) na ọ dịghị ọnụ ọgụgụ na-adaba n'oge ọnụọgụ nke traps nke traps nke oge ọmụmụ. Ngwakọta tic mụbara nke ukwuu: ịchọ onye ọbịa (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), nri ọbara na-adịbeghị anya (χ2 (0, 650) = 32.2, p <0.0001) na ime (χ2 (0, 228) = 6.27, p23;Mgbakwunye faịlụ 1: Tebụl S1) .Nke a na-egosipụtakwa na ọnụ ọgụgụ anwụnta ejidere: onye ọbịa na-achọ> ịmị ọbara> ime> ime ime> ọkara ime> nwoke.
Ntụle ubi nke ịdị irè nke mmamịrị mmamịrị 24-hour sịntetik na-esi ísì ụtọ. A na-eduzi ule ubi na South-central Ethiopia (map), na nso obodo Maki (tinye), na-eji Ụlọ Ọrụ maka Nchịkwa Ọrịa (CDC) ọkụ ọkụ (n'aka nri) n'ime ụlọ ndị jikọtara ọnụ, na Latin square design (ihe oyiyi ikuku) (Adortrapsthetic CDC) . ma ọ bụghị Anopheles farroes (C), na a dị iche iche n'ụzọ, a physiological ala-adabere mmetụta. Tụkwasị na nke a, ndị a ọnyà weghaara budata ụba ọnụ ọgụgụ nke usu Culex anwụnta.(D) Tụnyere njikwa. The Ogwe na n'aka ekpe na-anọchi anya nkezi nhọrọ index nke anwụnta jidere na ụzọ abụọ nke odorant bait (green) na njikwa (na-emeghe) ọnyà na nkezi, mgbe 1 ụzọ na-achịkwa ọnyà 0), ps (emeghe; N = 5)..Asterisks na-egosi ọkwa ngụkọ ọnụ ọgụgụ (*p = 0.01 na ***p <0.0001)
E jidere ụdị atọ ahụ dị iche iche na ọnyà nwere ngwakọta sịntetik. Na-achọ onye ọbịa (χ2 (1, 1345) = 71.7, p <0.0001), nri ọbara (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) na ime ime (χ2 (1, 1.345) = 1.8 p. nsis na-ejide n'ime ọnyà ahụ na-ahapụ ngwakọta sịntetik (Fig 6B), ebe ọnụọgụ nke An adịghị iche. Pharoensis dị na steeti physiological dị iche iche (Fig 6C) . Maka Culex, ọ bụ naanị mmụba dị ịrịba ama na ọnụ ọgụgụ nke anwụnta na-achọ ndị ọbịa ka a chọtara na ọnyà gbanyere na ngwakọta synthetic (χ12 (1), 13 . D), ma e jiri ya tụnyere ọnyà njikwa.
A na-eji ọnyà ọnyà ndị ọbịa dị n'èzí nke ndị ọbịa nwere ike n'etiti ebe a na-azụ anụ na obodo ime obodo dị na Etiopia iji chọpụta ma anwụnta ịba na-eji ísì mmamịrị ehi dị ka ebe obibi ndị ọbịa. N'ịbụ ndị na-enweghị ihe ngosi nke ndị ọbịa, okpomọkụ, na na ma ọ bụ na-enweghị ọnụnọ nke mmamịrị ehi, ọ dịghị anwụnta e jidere (Mgbakwunye faịlụ 1: Figure S3 na-adọrọ mmasị n'ebe ọ bụla ọ dị elu). ed na weghara, n'agbanyeghị na ọnụ ọgụgụ dị nta, na-adabere na afọ mmamịrị (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Mgbakwunye faịlụ 1: Figure S3) .N'ụzọ dị iche, njikwa mmiri ejideghị anwụnta ịba na okpomọkụ dị elu (Faịlụ Mgbakwunye 1: Foto S3).
Anwụnta ịba na-enweta ma na-ekesa ogige ndị nwere nitrogen site na inye nri na-akwụ ụgwọ na mmamịrị ehi (ya bụ, puddles) iji kwalite àgwà akụkọ ndụ, dị ka ụmụ ahụhụ ndị ọzọ [2, 4, 24, 25, 26].Mmiri ehi bụ ihe eji emeghari ngwa ngwa nke nwere njikọ chiri anya na ebe izu ike maka ebe obibi ịba na ebe a na-ekpo ọkụ. anwụnta emale na-achọta ebe a site na isi ma nwee ike ịhazi nnabata nke ogige nitrogen na mmamịrị, gụnyere urea, ihe bụ isi nitrogen na mmamịrị [15, 16] dabere na ọnọdụ ahụike anwụnta nke nwanyị, a na-ekenye nri dị na mmamịrị iji welie ọrụ ụgbọ elu na ịdị ndụ nke ndị ọbịa na-achọ mma dị ka nwanyị na-achọ ndụ nke ọma dị ka onye na-ahụ maka ndụ nke nwanyị na-achọ mma dị ka onye na-achọ ndụ nke ọma. mbụ gonadotropic cycle.Ya mere, mmamịrị ịgwakọta na-arụ ọrụ dị mkpa nutritional ọrụ maka ịba vectors nke mechiri emechi dị ka ndị okenye na-adịghị eri nri [8], dị ka ọ na-enye ụmụ nwanyị anwụnta ikike iji nweta ihe dị mkpa nitrogenous ogige site na-ekere òkè na obere ize ndụ nri. Nke a nchoputa nwere ịrịba epidemiological pụta, dị ka ụmụ nwanyị na-amụba ndụ ha ogologo ndụ, mmepụta, na-akpa àgwà nke veproduur nwere ike na-emetụta ọdịnihu ha. mmemme njikwa ihe nkiri.