පෝෂක අත්පත් කර ගැනීම සහ බෙදා හැරීම කෘමීන් ආහාර සොයා ගැනීම සහ ජීවන ඉතිහාස ලක්ෂණ ඒකාබද්ධ කරයි. විවිධ ජීවන අවධීන්හිදී නිශ්චිත පෝෂ්ය පදාර්ථවල ඌනතාවයන් සඳහා වන්දි ගෙවීම සඳහා, කෘමීන්ට මෙම පෝෂ්ය පදාර්ථ අතිරේක පෝෂණය හරහා ලබා ගත හැකිය, උදාහරණයක් ලෙස, පුඩිල්ස් ලෙස හැඳින්වෙන ක්රියාවලියකදී පෘෂ්ඨවංශික ස්රාවයන් පෝෂණය කිරීමෙන්. ඇනොෆිලස් අරාබියානි මදුරුවා මන්දපෝෂණයෙන් පෙළෙන බව පෙනේ, එබැවින් පරිවෘත්තීය හා ප්රජනනය යන දෙකටම පෝෂ්ය පදාර්ථ අවශ්ය වේ. මෙම අධ්යයනයේ අරමුණ වූයේ පෝෂක ලබා ගැනීම සඳහා ගව මුත්රා මත ඇන්. අරාබියන්සිස් කැළඹීම ජීවිත ඉතිහාස ලක්ෂණ වැඩි දියුණු කරන්නේද යන්න තක්සේරු කිරීමයි.
එය ආරක්ෂිත බවට වග බලා ගන්න. arabiensis නැවුම්, පැය 24, පැය 72 සහ පැය 168 පැරණි ගව මුත්රා වල සුවඳට ආකර්ෂණය වූ අතර, සත්කාරක-සොයන සහ රුධිරය පෝෂණය කරන (පැය 48 කට පසු රුධිර ආහාර වේලක්) ගැහැණු සතුන් Y-නල ආඝ්රාණ මාපකයකින් මනින ලද අතර, ගර්භනී කාන්තාවන් බිත්තර දැමීමේ පරීක්ෂණය සඳහා තක්සේරු කරන ලදී. වයස් කාණ්ඩ හතරේම ගව මුත්රා වල ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝග හඳුනා ගැනීම සඳහා ඒකාබද්ධ රසායනික හා විද්යුත් භෞතික විද්යාත්මක විශ්ලේෂණයක් භාවිතා කරන ලදී. Y-නල සහ ක්ෂේත්ර අත්හදා බැලීම් වලදී ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝගවල සංස්ලේෂිත මිශ්රණ ඇගයීමට ලක් කරන ලදී. මැලේරියා වාහකයන් සඳහා විභව අතිරේක ආහාර ලෙස ගව මුත්රා සහ එහි ප්රධාන නයිට්රජන් අඩංගු සංයෝග යූරියා විමර්ශනය කිරීම සඳහා, පෝෂණ පරාමිතීන් සහ ජීවිත ඉතිහාස ලක්ෂණ මනිනු ලැබීය. ගැහැණු මදුරුවන්ගේ අනුපාතය සහ අවශෝෂණය කරන ලද ගව මුත්රා සහ යූරියා ප්රමාණය තක්සේරු කරන ලදී. පෝෂණය කිරීමෙන් පසු, ගැහැණු සතුන් පැවැත්ම, බැඳුණු පියාසර කිරීම සහ ප්රජනනය සඳහා තක්සේරු කරන ලදී.
ධාරකයාගේ රුධිරය සහ පෝෂණය සොයන්න. රසායනාගාර සහ ක්ෂේත්ර අධ්යයනයන්හිදී, අරාබිවරුන් නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා වල ස්වාභාවික හා කෘතිම සුවඳට ආකර්ෂණය විය. ගැබිනි කාන්තාවන් බිත්තර දැමීමේ ස්ථානවල ගව මුත්රා ප්රතිචාර කෙරෙහි උදාසීන විය. ධාරක-සොයන සහ රුධිරය උරා බොන ගැහැණු සතුන් ගව මුත්රා සහ යූරියා ක්රියාකාරීව අවශෝෂණය කර ගන්නා අතර පියාසර කිරීම, පැවැත්ම හෝ ප්රජනනය සඳහා භෞතික විද්යාත්මක තත්වයේ කාර්යයක් ලෙස ජීවිත-ඉතිහාස හුවමාරුවලට අනුව මෙම සම්පත් වෙන් කරයි.
ජීවිත ඉතිහාස ලක්ෂණ වැඩිදියුණු කිරීම සඳහා ඇනොෆිලස් අරාබිනිස් ගව මුත්රා අත්පත් කර ගැනීම සහ බෙදා හැරීම සිදු කරයි. ගව මුත්රා අතිරේකව පෝෂණය කිරීම දෛනික පැවැත්ම සහ දෛශික ඝනත්වය වැඩි කිරීමෙන් සහ වක්රව පියාසර ක්රියාකාරකම් වෙනස් කිරීමෙන් දෛශික ධාරිතාවට සෘජුවම බලපාන අතර එබැවින් අනාගත ආකෘතිවලදී සලකා බැලිය යුතුය.
පෝෂක අත්පත් කර ගැනීම සහ බෙදා හැරීම කෘමීන් ආහාර සොයා ගැනීම සහ ජීවිත ඉතිහාස ලක්ෂණ ඒකාබද්ධ කරයි [1,2,3]. කෘමීන්ට ආහාර තෝරා ගැනීමට සහ ලබා ගැනීමට සහ ආහාර ලබා ගැනීමේ හැකියාව සහ පෝෂණ අවශ්යතා මත පදනම්ව වන්දි පෝෂණය කිරීමට හැකියාව ඇත [1, 3]. පෝෂ්ය පදාර්ථ බෙදා හැරීම ජීවිත ඉතිහාස ක්රියාවලිය මත රඳා පවතින අතර කෘමීන්ගේ විවිධ ජීවන අවධීන්හි ආහාර ගුණාත්මකභාවය සහ ප්රමාණය සඳහා විවිධ අවශ්යතා ඇති විය හැක [1, 2]. නිශ්චිත පෝෂ්ය පදාර්ථවල ඌනතාවයන් සඳහා වන්දි ගෙවීම සඳහා, කෘමීන්ට මෙම පෝෂ්ය පදාර්ථ ලබා ගත හැක්කේ මඩ, විවිධ අසූචි සහ පෘෂ්ඨවංශීන්ගේ ස්රාවයන් සහ පුඩිල්ස් ලෙස හැඳින්වෙන ක්රියාවලියක් වන කැරියන් වැනි අතිරේක පෝෂණය හරහාය [2]. විවිධ සමනල සහ සලබ විශේෂ ප්රධාන වශයෙන් විස්තර කර ඇතත්, ජල සිදුරු අනෙකුත් කෘමි ඇණවුම්වල ද සිදු වන අතර, මෙම වර්ගයේ සම්පත් ආකර්ෂණය කර ගැනීම සහ පෝෂණය කිරීම සෞඛ්යයට සහ අනෙකුත් ජීවිත ඉතිහාස ලක්ෂණ කෙරෙහි සැලකිය යුතු බලපෑමක් ඇති කළ හැකිය [2, 4, 5, 6] ,7]. මැලේරියා මදුරුවා වන ඇනොෆිලස් ගැම්බියා සෙන්සු ලැටෝ (sl) 'මන්දපෝෂණයෙන් පෙළෙන' වැඩිහිටියෙකු ලෙස මතු වේ [8], එබැවින් ජලය දැමීම වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කළ හැකිය එහි ජීවන ඉතිහාස ලක්ෂණ වල වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි, නමුත් මෙම හැසිරීම මෙතෙක් නොසලකා හැර ඇත. මෙම වැදගත් වාහනයේ පෝෂක ප්රමාණය වැඩි කිරීමේ මාධ්යයක් ලෙස කැළඹීම භාවිතා කිරීම අවධානය යොමු කළ යුතුය, මන්ද මෙය වැදගත් වසංගත රෝග ප්රතිවිපාක ඇති කළ හැකිය.
කීට අවධියේ සිට ගෙන යන අඩු කැලරි සංචිත සහ රුධිර ආහාර අකාර්යක්ෂම ලෙස භාවිතා කිරීම හේතුවෙන් වැඩිහිටි ගැහැණු ඇනොෆිලිස් මදුරුවන්ගේ නයිට්රජන් පරිභෝජනය සීමිත වේ [9]. ගැහැණු Ann.gambiae sl සාමාන්යයෙන් මේ සඳහා වන්දි ලබා දෙන්නේ අතිරේක රුධිර ආහාර [10, 11] සමඟ අතිරේකව ලබා දීමෙනි, එමඟින් වැඩි පිරිසක් රෝගය වැළඳීමේ අවදානමට ලක් කරන අතර මදුරුවන් කොල්ලකෑමේ වැඩි අවදානමකට ලක් කරයි. විකල්පයක් ලෙස, අනෙකුත් කෘමීන් විසින් පෙන්නුම් කරන පරිදි, අනුවර්තනය සහ පියාසර කිරීමේ හැකියාව වැඩි දියුණු කරන නයිට්රජන් සංයෝග ලබා ගැනීම සඳහා මදුරුවන්ට පෘෂ්ඨවංශික අසූචි අතිරේකව පෝෂණය කළ හැකිය [2].මේ සම්බන්ධයෙන්, An.Gambian sl විශේෂ සංකීර්ණය, Anopheles arabinis, නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා [12,13,14], සිත්ගන්නා සුළුය.Anopheles arabinis එහි ධාරක මනාපයන් තුළ අවස්ථාවාදී වන අතර ගවයන් සමඟ සම්බන්ධ වී පෝෂණය කිරීමට ප්රසිද්ධය.ගව මුත්රා යනු නයිට්රජන් සංයෝගවලින් පොහොසත් සම්පතක් වන අතර, නැවුම් මුත්රාවල ඇති මුළු නයිට්රජන් වලින් 50-95% ක් යූරියා වේ. [15, 16]. ගව මුත්රා වයසට යත්ම, ක්ෂුද්ර ජීවීන් පැය 24ක් ඇතුළත නයිට්රජන් සංයෝගවල සංකීර්ණත්වය අඩු කිරීම සඳහා මෙම සම්පත් භාවිතා කරයි [15]. කාබනික නයිට්රජන් අඩුවීම හා සම්බන්ධ ඇමෝනියා වේගයෙන් වැඩිවීමත් සමඟ, ඇල්කලෝෆිලික් ක්ෂුද්ර ජීවීන් (ඒවායින් බොහොමයක් මදුරුවන්ට විෂ සහිත සංයෝග නිපදවයි) වර්ධනය වේ [15], එය ගැහැණු සතුන් විය හැකිය. Ann.arabiensis පැය 24ක් හෝ ඊට අඩු මුත්රා වලට වඩාත් කැමති ලෙස ආකර්ෂණය වේ [13, 14].
මෙම අධ්යයනයේදී, ධාරක සහ රුධිරයෙන් පෝෂණය වූ Ans සොයා බලන ලදී. එහි පළමු ගොනඩොට්රොපින් චක්රය තුළ, අරාබියන්සිස් යූරියා ඇතුළු නයිට්රජන් සංයෝග මුත්රා මිශ්ර කිරීමෙන් ලබා ගැනීම සඳහා තක්සේරු කරන ලදී. ඊළඟට, ගැහැණු මදුරුවන් මෙම විභව පෝෂක සම්පත වැඩිදියුණු කළ පැවැත්ම, ප්රජනනය සහ තවදුරටත් ආහාර සෙවීම සඳහා වෙන් කරන්නේ කෙසේද යන්න තක්සේරු කිරීම සඳහා අත්හදා බැලීම් මාලාවක් පවත්වන ලදී. අවසාන වශයෙන්, නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රාවල සුවඳ, මේවා ධාරක සහ රුධිරයෙන් පෝෂණය වූ An සඳහා විශ්වාසදායක ඉඟි ලබා දෙන්නේද යන්න තීරණය කිරීම සඳහා තක්සේරු කරන ලදී. මෙම විභව පෝෂණ සම්පත සෙවීමේදී, අරාබියන්සිස් නිරීක්ෂණය කරන ලද අවකල ආකර්ෂණය පිටුපස රසායනික සහසම්බන්ධතා සොයා ගන්නා ලදී. පැය 24 ක් පැරණි මුත්රාවල හඳුනාගත් වාෂ්පශීලී කාබනික සංයෝග (VOCs) වල කෘතිම ගන්ධ මිශ්රණ ක්ෂේත්ර තත්වයන් යටතේ තවදුරටත් ඇගයීමට ලක් කරන ලද අතර, රසායනාගාර තත්වයන් යටතේ ලබාගත් ප්රතිඵල පුළුල් කරන අතර විවිධ භෞතික විද්යාත්මක තත්වයන් මත ගව මුත්රා ගන්ධයේ බලපෑම පෙන්නුම් කරයි. මදුරු ආකර්ෂණය. ලබාගත් ප්රතිඵල මගින්, ජීවිත ඉතිහාස ලක්ෂණ කෙරෙහි බලපෑම් කිරීම සඳහා ඇ. අරාබියන්සිස් පෘෂ්ඨවංශික මුත්රාවල ඇති නයිට්රජන් සංයෝග ලබාගෙන බෙදා හරින බව තහවුරු කරයි. මෙම ප්රතිඵල විභව වසංගත රෝග ප්රතිවිපාක සහ ඒවා දෛශික නිරීක්ෂණ සහ පාලනය සඳහා භාවිතා කළ හැකි ආකාරය පිළිබඳ සන්දර්භය තුළ සාකච්ඡා කෙරේ.
ඇනොෆිලස් අරාබිකන්ස් (ඩොන්ගෝලා වික්රියාව) 25 ± 2 °C, 65 ± 5% ආර්ද්රතාවය සහ පැය 12:12 ආලෝක:අඳුරු චක්රයක පවත්වා ගන්නා ලදී. කීටයන් ප්ලාස්ටික් තැටි (20 cm × 18 cm × 7 cm) තුළ ආසවනය කළ ජලයෙන් පුරවා ඇති අතර Tetramin® මාළු ආහාර (Tetra Werke, Melle, DE) පෝෂණය කරන ලදී. රූකඩ මිලි ලීටර් 30 කෝප්ප (Nolato Hertila, Åstorp, SE) වලින් එකතු කර පසුව වැඩිහිටි මතුවීමට ඉඩ දීම සඳහා Bugdorm කූඩුවලට (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) මාරු කරන ලදී. වැඩිහිටියන්ට මතුවීමෙන් පසු දින 4 ක් (dpe) දක්වා 10% සුක්රෝස් ද්රාවණයක් නොමිලේ ලබා දෙන ලදී, එම අවස්ථාවේදී සත්කාරක-සොයන ගැහැණු සතුන්ට අත්හදා බැලීමට පෙර වහාම ආහාර ලබා දෙන ලදී, නැතහොත් පහත විස්තර කර ඇති පරිදි අත්හදා බැලීමට පෙර ආසවනය කළ ජලය සමඟ එක රැයකින් කුසගින්නේ තබන ලදී. පියාසර නල අත්හදා බැලීම් සඳහා ගැහැණු සතුන් භාවිතා කරන ලදී. ලිබිටම් ජලය සමඟ පැය 4-6 ක් පමණක් කුසගින්නේ තබා ඇත. පසුකාලීන ජෛව විශ්ලේෂණයන් සඳහා රුධිරය උරා බොන මදුරුවන් සූදානම් කිරීම සඳහා, පටල පෝෂණ පද්ධතියක් (හෙමොටෙක් ඩිස්කවරි වර්ක්ෂොප්ස්, ඇක්රින්ටන්, එක්සත් රාජධානිය) භාවිතා කරමින් ඩීපීඊ ගැහැණු සතුන් 4 දෙනෙකුට ඩිෆයිබ්රොටික් බැටළු රුධිරය (හැටුනලාබ්, බ්රෝ, එස්ඊ) ලබා දෙන ලදී. සම්පූර්ණයෙන්ම තදබදයට පත් ගැහැණු සතුන් පසුව තනි කූඩුවලට මාරු කර පහත විස්තර කර ඇති පරිදි සෘජුවම ආහාර ලබා දෙන ලදී, නැතහොත් පහත විස්තර කර ඇති අත්හදා බැලීම් වලට දින 3 කට පෙර 10% සුක්රෝස් ඇඩ් ලිබිටම් ලබා දෙන ලදී. පසුකාලීන ගැහැණු සතුන් පියාසර නල ජෛව විශ්ලේෂණයන් සඳහා භාවිතා කර රසායනාගාරයට මාරු කරන ලද අතර, පසුව අත්හදා බැලීමට පැය 4-6 කට පෙර ආසවනය කළ ජලය ලිබිටම් ලබා දෙන ලදී.
වැඩිහිටි අරාබි කාන්තාවන් තුළ මුත්රා සහ යූරියා පරිභෝජනය ප්රමාණනය කිරීම සඳහා පෝෂණ පරීක්ෂණ භාවිතා කරන ලදී. සත්කාරක-සොයන සහ රුධිරය-පෝෂිත කාන්තාවන්ට පැය 48 ක් සඳහා 1% තනුක කළ නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා, විවිධ සාන්ද්රණ යූරියා සහ පාලන දෙකක් (10% සුක්රෝස් සහ ජලය) අඩංගු ආහාර වේලක් ලබා දෙන ලදී. ඊට අමතරව, ආහාර වර්ණක (1 mg ml-1 xylene cyanide FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) ආහාරයට එකතු කරන ලද අතර 250 µl ක්ෂුද්ර කේන්ද්රාපසාරී නලවල 4 × 4 අනුකෘතියක සපයන ලදී (ඔක්සිජන් විද්යාත්මක, යුනියන් සිටි, CA, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය; රූපය 1A) දාරයට පුරවන්න (~300 µl). මදුරුවන් අතර තරඟය සහ ඩයි වර්ණයේ විභව බලපෑම් වළක්වා ගැනීම සඳහා, විශාල පෙට්රි කෑමක (විෂ්කම්භය 12 සෙ.මී. සහ උස සෙ.මී. 6; සෙමාඩෙනි, ඔස්ටර්මුන්ඩිජන්, CH; රූපය 1A) මදුරුවන් 10 ක් සම්පූර්ණ අන්ධකාරයේ 25 ± 2 සෙ.මී. °C සහ 65 ± 5% සාපේක්ෂ ආර්ද්රතාවය. මෙම අත්හදා බැලීම් 5 සිට 10 වතාවක් පුනරාවර්තනය කරන ලදී. ආහාර වේලට නිරාවරණය වීමෙන් පසු, වැඩිදුර විශ්ලේෂණය තෙක් මදුරුවන් -20 °C දී තබන ලදී.
ධාරකය සහ රුධිරය උරා බොන ගැහැණු Anopheles arabianus විසින් අවශෝෂණය කරන ලද ගව මුත්රා සහ යූරියා සොයා බලන්න. (A) පෝෂණ අත්හදා බැලීමේදී, ගැහැණු මදුරුවන්ට නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා, විවිධ සාන්ද්රණ යූරියා, සුක්රෝස් (10%) සහ ආසවනය කළ ජලය (H2O) අඩංගු ආහාර වේලක් ලබා දෙන ලදී. ධාරකය සොයන (B) සහ රුධිරය උරා බොන (C) ගැහැණු සතුන් පරීක්ෂා කරන ලද වෙනත් ඕනෑම ආහාරයකට වඩා සුක්රෝස් අවශෝෂණය කර ගත්හ. ධාරකය සොයන ගැහැණු සතුන් පැය 72 ගව මුත්රා පැය 168 ගව මුත්රා (B) ට වඩා අඩුවෙන් අවශෝෂණය කර ගත් බව සලකන්න. මුත්රා වල සාමාන්ය මුළු නයිට්රජන් අන්තර්ගතය (± සම්මත අපගමනය) ඇතුළත් කර ඇත. ධාරකය සොයන (D, F) සහ රුධිරය උරා බොන (E, G) ගැහැණු සතුන් මාත්රාව මත රඳා පවතින ආකාරයෙන් යූරියා ලබා ගනී. විවිධ අකුරු නම් සහිත සාමාන්ය ආශ්වාස පරිමාවන් (D, E) එකිනෙකාගෙන් සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් විය (Tukey ගේ පශ්චාත් කාලීන විශ්ලේෂණය භාවිතා කරමින් ඒකපාර්ශ්වික ANOVA; p < 0.05). දෝෂ තීරු මධ්යන්යයේ (BE) සම්මත දෝෂය නියෝජනය කරයි. සෘජු ඉරි සහිත රේඛාව ලඝු-රේඛීය ප්රතිගාමීත්වය නියෝජනය කරයි. රේඛාව (F, G)
අවශෝෂණය කරන ලද ආහාර මුදා හැරීම සඳහා, මදුරුවන් තනි තනිව 230 µl ආසවනය කළ ජලය අඩංගු 1.5 ml ක්ෂුද්ර කේන්ද්රාපසාරී නලවලට දමා, ඉවත දැමිය හැකි පළිබෝධ සහ රැහැන් රහිත මෝටරයක් (VWR International, Lund, SE) භාවිතයෙන් පටක කඩාකප්පල් කරන ලදී, ඉන්පසු විනාඩි 10 ක් සඳහා 10 krpm හි කේන්ද්රාපසාරී කිරීම සිදු කරන ලදී. සුපිරි ද්රව්යය (200 µl) 96-ළිං ක්ෂුද්ර තහඩුවකට (Sigma-Aldrich) මාරු කරන ලද අතර අවශෝෂණය (λ620) වර්ණාවලීක්ෂ ඡායාරූපමානයක් මත පදනම් වූ ක්ෂුද්ර තහඩු කියවනයක් (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm) භාවිතයෙන් තීරණය කරන ලදී. විකල්පයක් ලෙස, මදුරුවන් ආසවනය කළ ජලය මිලි ලීටර් 1 ක අඹරන ලද අතර, එයින් 900 µl වර්ණාවලීක්ෂ ඡායාරූපමිතික විශ්ලේෂණය සඳහා කුවෙට් එකකට මාරු කරන ලදී (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). ආහාර පරිභෝජනය ප්රමාණනය කිරීම සඳහා, 0.2 අස්වැන්නක් ලබා ගැනීම සඳහා අනුක්රමික තනුක කිරීම මගින් සම්මත වක්රයක් සකස් කරන ලදී. 1 mg ml-1 සයිලීන් සයනයිඩ් වල µl සිට 2.4 µl දක්වා. ඉන්පසුව, දන්නා ඩයි සාන්ද්රණයන්ගේ දෘශ්ය ඝනත්වය භාවිතා කර එක් එක් මදුරුවා ආහාරයට ගන්නා ආහාර ප්රමාණය තීරණය කරන ලදී.
පරිමාව දත්ත ඒකපාර්ශ්වික විචල්යතා විශ්ලේෂණය (ANOVA) භාවිතයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර ඉන් පසුව ටුකීගේ පශ්චාත් කාලීන යුගල වශයෙන් සැසඳීම් (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007) සිදු කරන ලදී. රේඛීය ප්රතිගාමී විශ්ලේෂණයන් මගින් සාන්ද්රණය මත යැපෙන යූරියා පරිභෝජනය සහ ධාරක-සොයන සහ රුධිරය උරා බොන මදුරුවන් අතර සංසන්දනාත්මක ප්රතිචාර විස්තර කරන ලදී (GraphPad Prism v8.0.0 Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US සඳහා).
සෑම වයස් කාණ්ඩයකින්ම ආසන්න වශයෙන් මුත්රා සාම්පල 20 µl ක් Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 දැලක්, Sigma Aldrich) මත බැඳ ටින් කැප්සියුල (8 mm × 5 mm) තුළට කැප්සියුල කරන ලදී. නිෂ්පාදකයාගේ ප්රොටෝකෝලයට අනුව නැවුම් සහ වයස්ගත මුත්රාවල නයිට්රජන් අන්තර්ගතය තීරණය කිරීම සඳහා CHNS/O විශ්ලේෂකයක (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, US) දහන කුටියට කැප්සියුල ඇතුළු කරන ලදී. සම්මතයක් ලෙස භාවිතා කරන දන්නා යූරියා සාන්ද්රණයන් මත පදනම්ව මුළු නයිට්රජන් (g N l-1) ප්රමාණනය කරන ලදී.
සත්කාරක-සොයන සහ රුධිරය උරා බොන ගැහැණු පැවැත්මට ආහාරයේ බලපෑම තක්සේරු කිරීම සඳහා, මදුරුවන් තනි තනිව විශාල පෙට්රි දීසි (විෂ්කම්භය 12 සෙ.මී. සහ උස සෙ.මී. 6; සෙමාඩෙනි) තුළ පියනේ දැලකින් ආවරණය කරන ලද සිදුරක් (විෂ්කම්භය 3 සෙ.මී.) සමඟ වාතාශ්රය සහ ආහාර සැපයුම සඳහා තබා ඇත. ආහාර වේල් 4 කට පසු කෙලින්ම ලබා දෙන ලද අතර 1% තනුක කළ නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා, යූරියා සාන්ද්රණ හතරක් සහ පාලන දෙකක්, 10% සුක්රෝස් සහ ජලය ඇතුළත් විය. සෑම ආහාර වේලක්ම දන්ත ටැම්පොන් එකකට (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) පයිප්පයකින් පයිප්පයකින් බහා මිලි ලීටර් 5 සිරින්ජයකට (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) ඇතුළු කරන ලදී, ජලනල ඉවත් කර පෙට්රි දීසියක් මත තබා ඇත (රූපය 1).1A).සෑම දිනකම ඔබේ ආහාර වේල වෙනස් කරන්න.ඉහත විස්තර කර ඇති පරිදි රසායනාගාරය පවත්වා ගන්න. දිවි ගලවා ගත් මදුරුවන් දිනකට දෙවරක් ගණන් කරන ලද අතර, අවසාන මදුරුවා මිය යන තෙක් මියගිය මදුරුවන් ඉවත දමන ලදී (ප්රතිකාරයකට n = 40).විවිධ ආහාර වේලෙහි පෝෂණය වන මදුරුවන්ගේ පැවැත්ම සංඛ්යානමය වශයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලදී. ආහාර වේල් අතර පැවැත්මේ ව්යාප්තිය සංසන්දනය කිරීම සඳහා කැප්ලාන්-මෙයර් පැවැත්මේ වක්ර සහ ලොග්-ශ්රේණි පරීක්ෂණ (IBM SPSS සංඛ්යාලේඛන 24.0.0.0).
Attisano et al [17] මත පදනම් වූ අභිරුචි මදුරු පියාසර මෝලක්, ඉදිරිපස සහ පසුපස පැනල් නොමැතිව 5 mm ඝනකම පැහැදිලි ඇක්රිලික් පැනල් (10 cm පළල x 10 cm දිග x 10 cm උස) වලින් සාදා ඇත (රූපය 3: ඉහළ). ගෑස් වර්ණදේහ තීරුවකින් (0.25 mm id; 7.5 cm L) සාදන ලද සිරස් නළයක් සහිත හැරවුම් එකලස් කිරීම, සෙන්ටිමීටර 9 ක් දුරින් නියෝඩියමියම් චුම්බක යුගලයක් අතර එල්ලා ඇති කෘමි ඉඳිකටුවකට කෙළවර ඇලවූ. එකම ද්රව්යයෙන් (6.5 cm L) සාදන ලද තිරස් නළයක් සිරස් නළය දෙකඩ කර බැඳුණු අතක් සහ ආලෝකයට බාධා කරන සංඥාවක් ලෙස කුඩා ඇලුමිනියම් තීරු කැබැල්ලක් රැගෙන යන අතක් සාදයි.
පැය 24 පුරාම කුසගින්නේ සිටි ගැහැණු සතුන්ට සීමා කිරීමට පෙර මිනිත්තු 30 ක් ඉහත ආහාර වේල ලබා දෙන ලදී. සම්පූර්ණයෙන්ම පෝෂණය වූ ගැහැණු මදුරුවන්ට පසුව අයිස් මත මිනිත්තු 2-3 ක් නිර්වින්දනය කර මී මැස්සන් (ජොයෙල් ස්වෙන්සන්ස් වැක්ස්ෆැබ්රික් ඒබී, මුන්කා ලුන්ග්බි, එස්ඊ) සමඟ කෘමි අල්ෙපෙනතිවලට සම්බන්ධ කර තිරස් නලවල අත්වලට බැඳ තබන ලදී. පියාඹන මෝල. පියාසැරියකට විප්ලව අභිරුචි-සාදන ලද දත්ත ලොගරයක් මගින් පටිගත කරන ලද අතර, පසුව PC-Lab 2000™ මෘදුකාංගය භාවිතයෙන් ගබඩා කර ප්රදර්ශනය කරන ලදී (v4.01; වෙලේමන්, ගවරේ, බීඊ). පියාසැරි මෝල දේශගුණය නියාමනය කරන ලද කාමරයක තබා ඇත (පැය 12:12, ආලෝකය: අඳුරු, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% ආර්ද්රතාවය).
පියාසැරි ක්රියාකාරකම් රටාව දෘශ්යමාන කිරීම සඳහා, පැය 24ක කාලයක් තුළ පැයකට පියාසර කළ මුළු දුර (m) සහ අඛණ්ඩ පියාසැරි ක්රියාකාරකම් ගණන ගණනය කරන ලදී. ඊට අමතරව, තනි කාන්තාවන් විසින් පියාසර කළ සාමාන්ය දුර ප්රතිකාර හරහා සංසන්දනය කර ඒකපාර්ශ්වික ANOVA සහ Tukey's post hoc විශ්ලේෂණය (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) භාවිතයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලදී, එහිදී සාමාන්ය දුර යැපෙන විචල්යයක් ලෙස සලකනු ලැබූ අතර ප්රතිකාරය ස්වාධීන සාධකයකි. අතිරේකව, සාමාන්ය වට ගණන මිනිත්තු 10 ක වර්ධක වලින් ගණනය කෙරේ.
An.arabiensis හි ප්රජනක ක්රියාකාරිත්වයට ආහාරයේ බලපෑම තක්සේරු කිරීම සඳහා, රුධිර එකතු කිරීමෙන් පසු ගැහැණු සතුන් හය දෙනෙකු (4 dpe) කෙලින්ම Bugdorm කූඩුවලට (30 cm × 30 cm × 30 cm) මාරු කරන ලද අතර, ඉහත විස්තර කර ඇති පරිදි පැය 48 ක් සඳහා පර්යේෂණාත්මක ආහාර වේල ලබා දෙන ලදී. ඉන්පසු ආහාර ඉවත් කරන ලද අතර, ආසවනය කළ ජලය මිලි ලීටර් 20 කින් පුරවා ඇති බිත්තර කෝප්ප (30 ml; Nolato Hertila) තුන්වන දින පැය 48 ක් සඳහා ලබා දෙන ලදී, එය සෑම පැය 24 කට වරක් වෙනස් වේ. සෑම ආහාර වේලක්ම 20-50 වතාවක් නැවත නැවත කරන්න. එක් එක් පර්යේෂණාත්මක කූඩුව සඳහා බිත්තර ගණන් කර වාර්තා කරන ලදී. Dialux-20 අන්වීක්ෂයක් (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) Leica කැමරාවක් (DFC) 320 R2 සහිත තනි බිත්තරවල සාමාන්ය ප්රමාණය සහ දිග විචලනය (n ≥ 200 ආහාර වේලකට) තක්සේරු කිරීමට බිත්තර උප සාම්පල භාවිතා කරන ලදී; Leica Microsystems Ltd., DE).ඉතිරි බිත්තර පැය 24ක් සම්මත වගා තත්වයන් යටතේ දේශගුණික පාලිත කාමරයක තබා ඇති අතර, ඉහත විස්තර කර ඇති පරිදි මෑතකදී මතු වූ පළමු ක්ෂණික කීටයන්ගේ (ආහාර වේලකට n ≥ 200) උප නියැදියක් මනින ලදී.ප්රතිකාර සහ ඒකපාර්ශ්වික ANOVA සහ Tukey's post hoc විශ්ලේෂණය භාවිතා කිරීම අතර බිත්තර ගණන සහ බිත්තර සහ කීටයන්ගේ ප්රමාණය සංසන්දනය කරන ලදී (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
නැවුම් (පැය 1 කට පසු නියැදීම), පැය 24, පැය 72 සහ පැය 168 වයස්ගත මුත්රා වලින් ලබාගත් හෙඩ්ස්පේස් වාෂ්පශීලී ද්රව්ය සෙබු ගවයින්ගෙන් සහ ආර්සි තරඟ වලින් ලබාගත් සාම්පල වලින් එකතු කරන ලදී. පහසුව සඳහා, එළදෙනුන් තවමත් ගබඩාවේ සිටියදී උදෑසන මුත්රා සාම්පල එකතු කරන ලදී. පුද්ගලයින් 10 දෙනෙකුගෙන් මුත්රා සාම්පල එකතු කරන ලද අතර එක් එක් සාම්පලයෙන් මිලි ලීටර් 100-200 ක් තනි පොලිමයිඩ් ෙබ්කිං බෑග් (ටොපිට්ස් කොෆ්රෙස්කෝ, ෆ්රිෂ්හාල්ටෙප්රොඩක්ටේ ජීඑම්බීඑච් සහ සමාගම, මින්ඩන්, ඩීඊ) වෙත මාරු කරන ලදී. වයිනයිල් ක්ලෝරයිඩ් ප්ලාස්ටික් බෙර වල. සෑම ගව මුත්රා සාම්පලයකින්ම හිස් අවකාශයේ වාෂ්පශීලී ද්රව්ය සෘජුවම (නැවුම්) හෝ කාමර උෂ්ණත්වයේ දී පැය 24, පැය 72 සහ පැය 168 සඳහා පරිණත වීමෙන් පසුව එකතු කරන ලදී, එනම් සෑම මුත්රා සාම්පලයක්ම එක් එක් වයස් කාණ්ඩය නියෝජනය කළේය.
හිස් අවකාශ වාෂ්පශීලී ද්රව්ය එකතු කිරීම සඳහා, ප්රාචීර රික්ත පොම්පයක් (KNF නියුබර්ගර්, ෆ්රීබර්ග්, DE) භාවිතා කරමින්, සක්රිය කාබන්-පෙරහන් කළ වායු ප්රවාහයක් (100 ml min-1) පොලිමයිඩ් බෑගයක් හරහා පැය 2.5 ක් අවශෝෂණ තීරුවට සංසරණය කිරීම සඳහා සංවෘත-ලූප් පද්ධතියක් භාවිතා කරන ලදී. පාලනයක් ලෙස, හිස් පොලිමයිඩ් බෑගයකින් හිස් අවකාශ එකතු කිරීම සිදු කරන ලදී. අවශෝෂණ තීරුව වීදුරු ලොම් ප්ලග් අතර පෝරපැක් Q (50/80 දැලක්; වෝටර්ස් ඇසෝසියේට්ස්, මිල්ෆර්ඩ්, MA, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) මිලිග්රෑම් 35 ක් අඩංගු ටෙෆ්ලෝන් නල (5.5 සෙ.මී. x 3 මි.මී. id) වලින් සාදා ඇත. භාවිතයට පෙර, තීරුව නැවත ආසවනය කළ n-හෙක්සේන් (මර්ක්, ඩාර්ම්ස්ටැඩ්, DE) සහ පෙන්ටේන් මිලි ලීටර් 1 (99.0% පිරිසිදු ද්රාවක GC ශ්රේණිය, සිග්මා ඕල්ඩ්රිච්) සමඟ ෆ්ලෂ් කරන ලදී. අවශෝෂණය කළ වාෂ්පශීලී ද්රව්ය පෙන්ටේන් 400 μl සමඟ ඉවත් කරන ලදී. හිස් අවකාශ එකතු කිරීම් සංචිත කර පසුව තවදුරටත් භාවිතා කරන තෙක් -20°C හි ගබඩා කරන ලදී. විශ්ලේෂණය.
ධාරක-සොයන සහ රුධිරය අනුභව කරන An. නැවුම්, පැය 24, පැය 72 සහ පැය 168 වයස්ගත මුත්රා වලින් එකතු කරන ලද හෙඩ්ස්පේස් වාෂ්පශීලී සාරය සෘජු වීදුරු නල ඕල්ෆැක්ටෝමීටරයක් භාවිතා කර අරාබිඩොප්සිස් මදුරුවන්ගෙන් වාෂ්පශීලී සාරය සඳහා විශ්ලේෂණය කරන ලදී [18]. අත්හදා බැලීම් සිදු කරන ලද්දේ ZT 13-15 කාලය තුළ, ඇන්ගේ නිවස සොයන ක්රියාකාරකම්වල උච්චතම කාලයයි. අරාබි [19]. වීදුරු නල ඕල්ෆැක්ටෝමීටරයක් (80 cm × 9.5 cm id) ඉහළින් රතු ආලෝකයේ 3 ± 1 lx සමඟ ආලෝකමත් කරන ලදී. අඟුරු පෙරන ලද සහ තෙතමනය කළ වායු ප්රවාහය (25 ± 2 °C, 65 ± 2% සාපේක්ෂ ආර්ද්රතාවය) 30 cm s-1 දී ජෛව විශ්ලේෂණය සමත් විය. වාතය මල නොබැඳෙන වානේ දැල් තිර මාලාවක් හරහා ගමන් කර, ලැමිනාර් ප්රවාහයක් සහ ඒකාකාර පිහාටු ව්යුහයක් නිර්මාණය කරයි. දන්ත ටැම්පොන් ඩිස්පෙන්සර් (4 cm × 1 cm; L:D; DAB දන්ත AB), 5 cm සිට අත්හිටුවන ලදී. ආඝ්රාණ මාපකයේ සුළං දිශාවට කෙළවරේ දඟරයක්, සෑම මිනිත්තු 5 කට වරක් උත්තේජක වෙනස්කම් සහිතව. විශ්ලේෂණය සඳහා, 1:10 තනුක කරන ලද එක් එක් හිස් අවකාශයේ සාරය 10 μl උත්තේජකයක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී. පාලනයක් ලෙස පෙන්ටේන් සමාන ප්රමාණයක් භාවිතා කරන ලදී. අත්හදා බැලීම ආරම්භ වීමට පැය 2-3 කට පෙර තනි ධාරක-සොයන හෝ රුධිරය උරා බොන මදුරුවන් තනි මුදා හැරීමේ කූඩුවල තබා ඇත. මුදා හැරීමේ කූඩුව ආඝ්රාණ මාපකයේ පහළට සුළං පැත්තේ තබා ඇති අතර, මදුරුවන්ට මිනිත්තු 1 ක් හුරු වීමට ඉඩ දී ඇති අතර, පසුව කූඩුවේ සමනල කපාටය මුදා හැරීමට විවෘත කරන ලදී. ප්රතිකාර හෝ පාලනය සඳහා ආකර්ෂණය විශ්ලේෂණය කරන ලද්දේ මුදා හැරීමෙන් මිනිත්තු 5 ක් ඇතුළත ප්රභවය සමඟ සම්බන්ධ වූ මදුරුවන්ගේ අනුපාතය ලෙස ය. සෑම හිස් අවකාශයක්ම වාෂ්පශීලී සාරය සහ පාලනය අවම වශයෙන් 30 වතාවක් ප්රතිවර්තනය කරන ලද අතර, ඕනෑම දිනක බලපෑම් වළක්වා ගැනීම සඳහා, සෑම අත්හදා බැලීමේ දිනකම එකම ප්රතිකාර සහ පාලන සංඛ්යාවක් පරීක්ෂා කරන ලදී. ධාරක සහ රුධිරය පෝෂණය කරන ලද ප්රතිචාර සොයන්න පිළිතුර. අරාබි එදිරිව හිස් අවකාශය කට්ටල නාමික ලොජිස්ටික් ප්රතිගමනය භාවිතයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර පසුව යුගල වශයෙන් සැසඳීම් සිදු කරන ලදී. ඔත්තේ අනුපාත සඳහා (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
An ගේ බිත්තර දැමීමේ ප්රතිචාරය. නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා වලින් ලබාගත් හිස් අවකාශයේ සාරය Bugdorm කූඩුවල (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science) විශ්ලේෂණය කරන ලදී. ආසවනය කළ ජලය මිලි ලීටර් 20 කින් පුරවා ඇති ප්ලාස්ටික් කෝප්ප (30 mL; Nolato Hertila) බිත්තර දැමීමේ උපස්ථරය සපයන ලද අතර කූඩුවේ ප්රතිවිරුද්ධ කොන් වල සෙන්ටිමීටර 24 ක් දුරින් තබා ඇත. ප්රතිකාර කෝප්ප 1:10 තනුක කිරීමකදී එක් එක් හිස් අවකාශයේ සාරය 10 μl සමඟ සකස් කරන ලදී. පාලන කෝප්පය සකස් කිරීම සඳහා පෙන්ටේන් සමාන ප්රමාණයක් භාවිතා කරන ලදී. ස්ථාන බලපෑම් පාලනය කිරීම සඳහා එක් එක් අත්හදා බැලීම අතර ප්රතිකාර සහ පාලන කෝප්ප හුවමාරු කරන ලදී. ZT 9-11 හිදී රුධිරයෙන් පෝෂණය වූ ගැහැණු සතුන් දස දෙනෙකු පර්යේෂණාත්මක කූඩුවලට මුදා හරින ලද අතර කෝප්පවල බිත්තර පැය 24 කට පසුව ගණන් කරන ලදී. බිත්තර දැමීමේ දර්ශකය ගණනය කිරීමේ සූත්රය වන්නේ: (ප්රතිකාර කෝප්පයේ තැබූ බිත්තර ගණන - පාලන කෝප්පයේ තැබූ බිත්තර ගණන)/(තැබූ මුළු බිත්තර ගණන). සෑම ප්රතිකාරයක්ම 8 වතාවක් පුනරාවර්තනය කරන ලදී.
කලින් විස්තර කර ඇති පරිදි [20] ගැහැණු An.arabiensis හි වායු වර්ණදේහ සහ ඉලෙක්ට්රෝන ඇන්ටෙනා රටා හඳුනාගැනීමේ (GC-EAD) විශ්ලේෂණය සිදු කරන ලදී. කෙටියෙන් කිවහොත්, HP-5 තීරුවකින් (30 m × 0.25 mm id, 0.25 μm පටල ඝණකම, Agilent Technologies) සමන්විත Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) භාවිතයෙන් නැවුම් හිස් අවකාශයේ වාෂ්පශීලී සාරය වෙන් කරන ලදී. සහ වයසට යාමේ මුත්රා. ජංගම අවධිය ලෙස හයිඩ්රජන් භාවිතා කරන ලදී, සාමාන්ය රේඛීය ප්රවාහ අනුපාතය 45 cm s-1. සෑම සාම්පලයක්ම (2 μl) තත්පර 30ක් සඳහා බෙදීම් රහිත ආකාරයෙන් 225 °C ආදාන උෂ්ණත්වයක් සහිතව එන්නත් කරන ලදී. GC උඳුනේ උෂ්ණත්වය 10 °C min-1 දී 35 °C (මිනිත්තු 3ක් රඳවා තබා ගැනීම) සිට 300 °C (මිනිත්තු 10ක් රඳවා ගැනීම) දක්වා වැඩසටහන්ගත කරන ලදී. GC අපජල විභේදකයේ, නයිට්රජන් 4 psi එකතු කර ගිනි අයනීකරණ අනාවරකය සහ EAD අතර Gerstel 3D/2 අඩු මළ පරිමා හරස්කඩක (Gerstel, Mülheim, DE) 1:1 ට බෙදන ලදී. EAD සඳහා GC අපජල කේශනාලිකා, Gerstel ODP-2 හුවමාරු රේඛාවක් හරහා, GC උඳුනේ උෂ්ණත්වය සහ 5 °C නිරීක්ෂණය කරන වීදුරු නළයකට (10 cm × 8 mm) යවන ලදී, එහිදී එය කාබන්-පෙරහන් කළ, තෙතමනය කළ වාතය (1.5 l) සමඟ මිශ්ර කරන ලදී. min−1).ඇන්ටෙනාව නලයේ පිටවීමේ සිට 0.5 සෙ.මී. දුරින් තබා ඇත. සෑම මදුරුවෙකුටම එක් අනුරුවක් ඇති අතර, ධාරක-සොයන මදුරුවන් සඳහා, එක් එක් වයස්වල මුත්රා සාම්පල මත අවම වශයෙන් අනුරූ තුනක් සිදු කරන ලදී.
70 eV හි ඉලෙක්ට්රෝන බලපෑම් අයනීකරණ මාදිලියේ ක්රියාත්මක වන, GC-EAD විශ්ලේෂණයේදී ඇන්ටෙනල් ප්රතිචාර ලබා ගැනීම සඳහා ඒකාබද්ධ GC සහ ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂයක් (GC-MS; 6890 GC සහ 5975 MS; Agilent Technologies) භාවිතා කරමින් නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා එකතු කිරීමේ ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝග හඳුනා ගැනීම. GC ජංගම අවධිය ලෙස හීලියම් භාවිතා කරමින් HP-5MS UI-ආලේපිත විලයන සිලිකා කේශනාලිකා තීරුවකින් (60 m × 0.25 mm අභ්යන්තර විෂ්කම්භය, 0.25 μm පටල ඝණකම) සමන්විත විය. GC-EAD විශ්ලේෂණය සඳහා සමාන ඉන්ජෙක්ටර් සැකසුම් සහ උඳුනේ උෂ්ණත්වය භාවිතා කරමින් 2 μl සාම්පලයක් එන්නත් කරන ලදී. අභිරුචි පුස්තකාලය සහ NIST14 පුස්තකාලය (Agilent) හා සසඳන විට ඒවායේ රඳවා ගැනීමේ කාලය (Kovát දර්ශකය) සහ ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය මත පදනම්ව සංයෝග හඳුනා ගන්නා ලදී. හඳුනාගත් සංයෝග සත්ය ප්රමිතීන් එන්නත් කිරීමෙන් තහවුරු කරන ලදී (අතිරේක ගොනුව 1: වගුව S2). ප්රමාණනය සඳහා, හෙප්ටයිල් බාහිර ප්රමිතියක් ලෙස ඇසිටේට් (10 ng, 99.8% රසායනික සංශුද්ධතාවය, ඕල්ඩ්රිච්) එන්නත් කරන ලදී.
නැවුම් සහ වයස්ගත මුත්රා වල හඳුනාගත් ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝග වලින් සමන්විත කෘතිම ගන්ධ මිශ්රණයක කාර්යක්ෂමතාව තක්සේරු කිරීම, ධාරක-සොයන සහ රුධිරය උරා බොන අය ආකර්ෂණය කර ගැනීම සඳහා ඉහත සඳහන් කළ පරිදිම ආඝ්රාණ මාපකය සහ ප්රොටෝකෝලය භාවිතා කරමින්. කෘතිම මිශ්රණ, නැවුම්, පැය 24, පැය 48, පැය 72 සහ පැය 168 වයස්ගත මුත්රා වල මිශ්ර හිස් අවකාශයේ වාෂ්පශීලී සාරයන්හි සංයෝගවල සංයුතිය සහ අනුපාතය අනුකරණය කළේය (රූපය 5D-G; අතිරේක ගොනුව 1: වගුව S2). විශ්ලේෂණය සඳහා, ධාරක සහ රුධිරය උරා බොන මදුරුවන්ගේ ආකර්ෂණය තක්සේරු කිරීම සඳහා, සම්පූර්ණ කෘතිම මිශ්රණයේ 1:100 තනුක කිරීමෙන් 10 μl භාවිතා කරන්න, සමස්ත මුදා හැරීමේ අනුපාතය ආසන්න වශයෙන් 140-2400 ng h-1 දක්වා පරාසයක පවතී. ඉන්පසු, සම්පූර්ණ මිශ්රණ මත පරීක්ෂණය සිදු කරනු ලබන අතර, එහිදී සම්පූර්ණ මිශ්රණයේ තනි සංයෝගවල අඩු කිරීමේ මිශ්රණ ඉවත් කරනු ලැබේ. ධාරක සහ රුධිරය පෝෂණය කරන අයගෙන් ප්රතිචාර සොයන්න. අරාබි එදිරිව කෘතිම සහ අඩු කිරීමේ මිශ්රණ නාමික ලොජිස්ටික් ප්රතිගාමීත්වය භාවිතයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර ඉන් පසුව අමුතු සඳහා යුගල වශයෙන් සැසඳීම් සිදු කරන ලදී. අනුපාත (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
මැලේරියා මදුරුවන් සඳහා ධාරක වාසස්ථාන ඉඟියක් ලෙස ගව මුත්රා ක්රියා කළ හැකිද යන්න තක්සේරු කිරීම සඳහා, ඉහත විස්තර කර ඇති පරිදි නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා එකතු කර, ජලය දැල් කළ ලීටර් 3 බාල්දි (මිලි ලීටර් 100) තුළ තබා ධාරක ඇම උගුල්වල සවි කරන ලදී. (BG-HDT අනුවාදය; BioGents, Regensburg, DE). ගම් ප්රජාවෙන් මීටර් 400 ක් දුරින්, තණබිම්වල මීටර් 50 ක් දුරින් (සිලේ, ඉතියෝපියාව, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) සහ ගවයින් නොමැතිව, ස්ථිර අභිජනන භූමියක සහ ගම්වල උගුල් දහයක් තබා ඇත. ධාරකයෙකුගේ පැවැත්ම අනුකරණය කිරීම සඳහා උගුල් පහක් රත් කරන ලද අතර, උගුල් පහක් රත් නොකර තබා ඇත. සෑම ප්රතිකාර ස්ථානයක්ම මුළු රාත්රී පහක් සඳහා රාත්රියේ භ්රමණය වේ. විවිධ වයස්වල මුත්රා සමඟ ඇමක් කරන ලද උගුල්වල අල්ලා ගන්නා ලද මදුරු සංඛ්යා බීටා ද්විපද ව්යාප්තියක් සහිත ලොජිස්ටික් ප්රතිගාමීත්වය භාවිතයෙන් සංසන්දනය කරන ලදී (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
ඉතියෝපියාවේ ඔරොමියා කලාපයේ මාකි නගරය අසල මැලේරියා-ආවේණික ගම්මානයක (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; රූපය 6A). වාර්ෂික ගෘහස්ථ අවශේෂ ඉසීමට පෙර අගෝස්තු මැද සිට සැප්තැම්බර් මැද දක්වා කාලය තුළ මෙම අධ්යයනය සිදු කරන ලද අතර දිගු වැසි සමයක් ද ඇත. ගමේ මායිමේ පිහිටි නිවාස යුගල පහක් (මීටර් 20-50 දුරින්) අධ්යයනය සඳහා තෝරා ගන්නා ලදී (රූපය 6A). නිවාස තෝරා ගැනීමට භාවිතා කරන ලද නිර්ණායක වූයේ: නිවස තුළ සතුන්ට අවසර නැත, ගෘහස්ථ ආහාර පිසීම (දර හෝ අඟුරු ඇඳීම) අවසර නැත (අවම වශයෙන් අත්හදා බැලීමේ කාලය තුළ), සහ කෘමිනාශක නොමැති ස්ථානයක නිදා සිටින උපරිම පදිංචිකරුවන් දෙදෙනෙකු සිටින නිවාස. ප්රතිකාර කළ මදුරු දැල යටතේ.හෙල්සින්කි ලෝක වෛද්ය සංගම් ප්රකාශනය මගින් ස්ථාපිත කර ඇති මාර්ගෝපදේශවලට අනුකූලව, අඩිස් අබාබා විශ්ව විද්යාලයේ ස්වාභාවික විද්යා පීඨයේ (CNS-IRB) ආයතනික පර්යේෂණ ආචාර ධර්ම සමාලෝචන මණ්ඩලය (IRB/022/2016) විසින් සදාචාරාත්මක අනුමැතිය ලබා දී ඇත. සෞඛ්ය ව්යාප්ති කාර්ය මණ්ඩලයේ සහාය ඇතිව සෑම ගෘහ ප්රධානියෙකුගෙන්ම කැමැත්ත ලබා ගන්නා ලදී. සමස්ත ක්රියාවලියම දිස්ත්රික් සහ වාට්ටු ('කෙබෙල්') මට්ටමින් ප්රාදේශීය පරිපාලනය විසින් අනුමත කරනු ලැබේ. අත්හදා බැලීමේ සැලසුම 2 × 2 ලතින් හතරැස් සැලසුමක් අනුගමනය කළ අතර, එහිදී පළමු රාත්රියේ යුගලනය කරන ලද නිවාස සඳහා කෘතිම මිශ්රණ සහ පාලනයන් පවරන ලද අතර ඊළඟ අත්හදා බැලීමේ රාත්රියේදී නිවාස අතර හුවමාරු විය. මෙම ක්රියාවලිය දස වතාවක් පුනරාවර්තනය විය. මීට අමතරව, තෝරාගත් නිවාසවල මදුරු ක්රියාකාරකම් තක්සේරු කිරීම සඳහා, CDC උගුල් ක්ෂේත්ර අත්හදා බැලීමේ ආරම්භයේ, මැද සහ අවසානයේ දිවා කාලයේ එකම වේලාවක අඛණ්ඩව රාත්රී පහක් ක්රියාත්මක කිරීමට සකසා ඇත.
ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝග හයක් අඩංගු කෘතිම මිශ්රණයක් හෙප්ටේන් (97.0% ද්රාවක GC ශ්රේණිය, සිග්මා ඕල්ඩ්රිච්) හි දියකර කපු වික් ඩිස්පෙන්සරයක් භාවිතා කර 140 ng h-1 ට මුදා හරින ලදී [20]. වික් ඩිස්පෙන්සරය පැය 12 ක අත්හදා බැලීම පුරාවටම සියලුම සංයෝග නියත අනුපාතයකින් මුදා හැරීමට ඉඩ දුන්නේය. හෙප්ටේන් පාලනයක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී. රෝග පාලන හා වැළැක්වීමේ මධ්යස්ථාන (CDC) ආලෝක උගුලේ පිවිසුම් ස්ථානය අසල කුප්පිය අත්හිටුවන ලදී (ජෝන් ඩබ්ලිව්. හොක් සමාගම, ගයින්ස්විල්, එෆ්එල්, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය; රූපය 6A). උගුල් බිම සිට මීටර් 0.8 - 1 ක් උසින්, ඇඳේ පාදය අසල එල්ලා ඇති අතර, ස්වේච්ඡා සේවකයෙකු ප්රතිකාර නොකළ මදුරු දැලක් යට නිදාගෙන 18:00 සහ 06:30 අතර ක්රියාත්මක විය. ලිංගිකත්වය සහ කායික තත්ත්වය (පෝෂණය නොකළ, පෝෂණය කළ, අර්ධ-ගැබිනි සහ ගැබිනි [21] විසින් අල්ලා ගන්නා ලද මදුරුවන් පසුව පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියා (PCR) විශ්ලේෂණය භාවිතයෙන් පරීක්ෂා කරන ලද අතර A. ගැම්බියා ලෙස රූප විද්යාත්මකව හඳුනාගත් විශේෂ හඳුනා ගැනීම සඳහා සංකීර්ණයේ සාමාජිකයින්. [23]. ක්ෂේත්ර අධ්යයනයේ දී, යුගල නිවාසවල උගුල් අල්ලා ගැනීම නාමික සැපයුම් යෝග්යතා ආකෘතියක් භාවිතයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර, එහිදී ආකර්ෂණය යැපෙන විචල්යය වූ අතර ප්රතිකාරය (කෘතිම මිශ්රණය vs පාලනය) ස්ථාවර බලපෑම විය (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc.). මෙහිදී, අපි සම්භාවිතා අනුපාත පරීක්ෂණයෙන් χ2 සහ p-අගය වාර්තා කරමු.
එය ආරක්ෂිතද යන්න තක්සේරු කරන්න. (dpe) ධාරක-සොයන සහ රුධිරය-පොවන කාන්තා පෝෂණ අත්හදා බැලීම් වලින් පසු දින 4ක් ඇතුළත පරිපාලනයෙන් පැය 48ක් ඇතුළත, සෘජු පෝෂණය මගින් arabiensis හට එහි ප්රධාන නයිට්රජන් ප්රභවය වන යූරියා මුත්රා ලබා ගැනීමට හැකි විය (රූපය 1A). ධාරක-සොයන සහ රුධිරය-උරා බොන කාන්තාවන් දෙදෙනාම වෙනත් ඕනෑම ආහාර වේලක් හෝ ජලයකට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස සුක්රෝස් අවශෝෂණය කර ගත්හ (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 සහ F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, පිළිවෙලින්; රූපය 1B,C). තවද, ධාරක-සොයන කාන්තාවන් පැය 168 දී මුත්රා වලට සාපේක්ෂව පැය 72 දී මුත්රා වල අඩුවෙන් ආහාරයට ගත්හ (රූපය 1B). යූරියා අඩංගු ආහාර වේලක් පිරිනමන විට, ධාරක-සොයන කාන්තාවන් අනෙකුත් සියලුම සාන්ද්රණයන් සහ ජලය හා සසඳන විට 2.69 mM දී සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි යූරියා ප්රමාණයක් අවශෝෂණය කර ගත් අතර, 10% සුක්රෝස් (F(10,813) = ට වඩා වෙන්කර හඳුනාගත නොහැකි විය. 15.72, p < 0.0001; රූපය 1D).මෙය රුධිරය පෝෂණය කරන කාන්තාවන්ගේ ප්රතිචාරයට වෙනස් වූ අතර, ඔවුන් සාමාන්යයෙන් ජලයට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස යූරියා අඩංගු ආහාර අවශෝෂණය කර ගත් අතර, සුක්රෝස් 10% ට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වුවද (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; රූපය 1).1E).තවද, භෞතික විද්යාත්මක තත්වයන් දෙක අතර සංසන්දනය කිරීමේදී, ෆ්ලෙබෝටොමිස් කරන ලද කාන්තාවන් අවම සාන්ද්රණයන්හි සත්කාරක-සොයන කාන්තාවන්ට වඩා යූරියා වැඩි ප්රමාණයක් අවශෝෂණය කර ගත් අතර, මෙම කාන්තාවන් ඉහළ සාන්ද්රණයන්හි සමාන ප්රමාණයක් යූරියා අවශෝෂණය කර ගත්හ (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; රූපය 1F, G).යූරියා අඩංගු ආහාර වේලකින් ලබා ගැනීම ප්රශස්ත අගයන් ඇති බව පෙනෙන්නට තිබුණද (රූපය 1D, E), භෞතික විද්යාත්මක තත්වයන් දෙකෙහිම කාන්තාවන්ට ලොග්-රේඛීය ආකාරයෙන් යූරියා සාන්ද්රණයේ සම්පූර්ණ පරාසය පුරා අවශෝෂණය කරන ලද යූරියා ප්රමාණය මොඩියුලේට් කිරීමට හැකි විය (රූපය 1F,G). ).ඒ හා සමානව, මදුරුවන් අවශෝෂණය කරන මුත්රා ප්රමාණය නියාමනය කිරීමෙන් ඔවුන්ගේ නයිට්රජන් අවශෝෂණය පාලනය කරන බව පෙනේ, මන්ද මුත්රාවල ඇති නයිට්රජන් ප්රමාණය අවශෝෂණය කරන ප්රමාණයෙන් පිළිබිඹු වන බැවිනි (රූපය 1B, C සහ B ඇතුළත් කිරීම්).
ධාරක-සොයන සහ රුධිරය උරා බොන මදුරුවන්ගේ පැවැත්මට මුත්රා සහ යූරියා වල බලපෑම තක්සේරු කිරීම සඳහා, ගැහැණු සතුන්ට වයස් හතරේම (නැවුම්, පැය 24, පැය 72 සහ පැය 168 පසු තැන්පත් වීම) මුත්රා ලබා දෙන ලද අතර යූරියා සාන්ද්රණ පරාසයක් මෙන්ම ආසවනය කළ ජලය සහ 10% සුක්රෝස් පාලනයක් ලෙස සේවය කරන ලදී (රූපය 2A). මෙම පැවැත්මේ විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ ආහාර වේල ධාරක-සොයන කාන්තාවන්ගේ සමස්ත පැවැත්මට සැලකිය යුතු බලපෑමක් ඇති කළ බවයි (මුත්රා: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; යූරියා: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; රූපය 2B, C) සහ රුධිරය පෝෂණය කරන කාන්තාවන් (මුත්රා: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; යූරියා: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; රූපය 2D,E).සියලුම අත්හදා බැලීම් වලදී, මුත්රා, යූරියා සහ ජලය අඩංගු ආහාර ලබා ගත් කාන්තාවන් සුක්රෝස් ආහාර ලබා දුන් කාන්තාවන්ට සාපේක්ෂව සැලකිය යුතු ලෙස අඩු පැවැත්මේ අනුපාත පෙන්නුම් කළේය (රූපය 2B-E).නැවුම් සහ පරණ මුත්රා ලබා දුන් සත්කාරක-සොයන කාන්තාවන් විවිධ පැවැත්මේ අනුපාත පෙන්නුම් කළ අතර, පැය 72 ක පරණ මුත්රා (p = 0.016) ලබා දුන් සත්කාරක-සොයන කාන්තාවන් අවම පැවැත්මේ සම්භාවිතාවක් ඇත (රූපය 2B).තවද, 135 mM යූරියා ලබා දුන් සත්කාරක-සොයන කාන්තාවන් ජල පාලකයන්ට වඩා දිගු කාලයක් ජීවත් විය (p < 0.04) (රූපය 2C).ජලය හා සසඳන විට, නැවුම් මුත්රා සහ පැය 24 ක මුත්රා ලබා දුන් කාන්තාවන් දිගු කාලයක් ජීවත් විය (p = 0.001 සහ p = 0.012, පිළිවෙලින්; රූපය 2D), පැය 72 ක මුත්රා ලබා ගත් කාන්තාවන් ගැහැණු කෙටි නැවුම් මුත්රා සහ පැය 24 ක වයස්ගත මුත්රා ලබා දුන් අයට වඩා දිගු කාලයක් ජීවත් විය (p < 0.0001 සහ p = 0.013, පිළිවෙලින්; රූපය 2D).135 mM යූරියා ලබා දුන් විට, රුධිරය ලබා දුන් කාන්තාවන් යූරියා සහ ජලයේ අනෙකුත් සියලුම සාන්ද්රණයන්ට වඩා දිගු කාලයක් පැවතුනි (p < 0.013; රූපය 2E).
ගව මුත්රා සහ යූරියා ආහාරයට ගන්නා ධාරක සහ රුධිරය උරා බොන ගැහැණු ඇනොෆිලස් අරාබිනිස්ගේ පැවැත්ම. ජෛව විශ්ලේෂණය (A) හි දී, ගැහැණු මදුරුවන්ට නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා, විවිධ සාන්ද්රණයන් වන යූරියා, සුක්රෝස් (10%) සහ ආසවනය කළ ජලය (H2O) අඩංගු ආහාර වේලක් ලබා දෙන ලදී. ධාරක-සොයන (B, C) සහ රුධිරය උරා බොන (D, E) මදුරුවන්ගේ පැවැත්ම සෑම පැය 12 කට වරක් වාර්තා කරන ලද අතර, මුත්රා (B, D) සහ යූරියා (C, E) පෝෂණය කරන සියලුම ගැහැණු සතුන් මිය යන තෙක් සහ සුක්රෝස් සහ ජලය පාලනය කරන සතුන් මිය යන තෙක්.
පැය 24ක කාලයක් තුළ පියාසැරි මෝල් පරීක්ෂණයේදී තීරණය කරන ලද මුළු දුර සහ වට ගණන, සත්කාරක-සොයන සහ රුධිරය උරා බොන මදුරුවන් අතර වෙනස් වූ අතර, එය සමස්තයක් ලෙස අඩු පියාසර ක්රියාකාරකම් පෙන්නුම් කළේය (රූපය 3). නැවුම් සහ වයස්ගත මුත්රා හෝ සුක්රෝස් සහ ජලය ලබා දුන් සත්කාරක-සොයන මදුරුවන් පැහැදිලි පියාසැරි රටා පෙන්නුම් කළහ (රූපය 3), නැවුම් මුත්රා අනුභව කරන ගැහැණු සතුන් අලුයම වඩාත් ක්රියාශීලී වන අතර, පැය 24 සහ 168 වයසැති මුත්රා අනුභව කරන මදුරුවන් විවිධ පියාසැරි රටා ප්රදර්ශනය කළ අතර ප්රධාන වශයෙන් දිවා කාලයේ ජීවත් වූහ. සුක්රෝස් හෝ පැය 72ක මුත්රා ලබා දුන් ගැහැණු මදුරුවන් පැය 24ක කාලය පුරා ක්රියාකාරීත්වයක් පෙන්නුම් කළ අතර, ජලය සපයන ගැහැණු සතුන් මැද කාල පරිච්ඡේදයේදී වඩාත් ක්රියාශීලී විය. සුක්රෝස් අනුභව කරන මදුරුවන් රාත්රියේ අගභාගයේ සහ අලුයම ඉහළම ක්රියාකාරකම් මට්ටම් පෙන්නුම් කළ අතර, පැය 72ක මුත්රා පානය කළ අය පැය 24ක් පුරා ක්රියාකාරිත්වයේ ස්ථාවර අඩුවීමක් අත්විඳිති (රූපය 3).
ගව මුත්රා සහ යූරියා ආහාරයට ගන්නා දඩයම්-සොයන ලේ උරා බොන ගැහැණු ඇනොෆිලස් අරාබිනිස්ගේ පියාසැරි කාර්ය සාධනය. පියාසැරි මෝල් පරීක්ෂණයේදී, නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා, විවිධ සාන්ද්රණයන් වන යූරියා, සුක්රෝස් (10%) සහ ආසවනය කළ ජලය (H2O) වලින් පෝෂණය වූ ගැහැණු මදුරුවන් තිරස් අතට නිදහසේ භ්රමණය වන බාහුවලට (ඉහළ) බැඳ තබන ලදී. ධාරක-සොයන (වමේ) සහ රුධිරය උරා බොන (දකුණේ) ගැහැණු සතුන් සඳහා, පැය 24 ක කාලයක් තුළ එක් එක් ආහාර වේල සඳහා පැයකට මුළු දුර සහ පියාසැරි ගණන සටහන් කරන ලදී (අඳුරු: අළු; සැහැල්ලු: සුදු). සාමාන්ය දුර සහ සාමාන්ය පහරදීම් ගණන සර්කැඩියානු ක්රියාකාරකම් ප්රස්ථාරයේ දකුණට දක්වා ඇත. දෝෂ තීරු මධ්යන්යයේ සම්මත දෝෂය නියෝජනය කරයි. සංඛ්යානමය විශ්ලේෂණය පෙළ බලන්න
සාමාන්යයෙන්, සත්කාරක-සොයන කාන්තාවන්ගේ සමස්ත පියාසැරි ක්රියාකාරකම් පැය 24ක කාලයක් තුළ පියාසර දුරකට සමාන රටාවක් අනුගමනය කළහ. මධ්යන්ය පියාසැරි දුර සැලකිය යුතු ලෙස බලපාන ලද්දේ ආහාර ගැනීමෙන් (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), සහ සත්කාරක-සොයන කාන්තාවන් පැය 72ක් මුත්රා ගැනීමෙන් අනෙකුත් සියලුම ආහාර වේලට සාපේක්ෂව සැලකිය යුතු ලෙස දිගු දුරක් පියාසර කළ අතර (p < 0.0001), සුක්රෝස්-පොෂිත මදුරුවන් නැවුම් (p = 0.022) සහ පැය 24ක් වයසැති මුත්රා (p = 0.022)-පොෂිත මදුරුවන්ට වඩා දිගු දුරක් පියාසර කළහ. මුත්රා ආහාර වේලෙහි විස්තර කර ඇති පියාසැරි ක්රියාකාරකම් රටාවට ප්රතිවිරුද්ධව, යූරියා-පොෂිත සත්කාරක-සොයන කාන්තාවන් පැය 24ක කාලයක් පුරා අඛණ්ඩ පියාසැරි ක්රියාකාරකම් පෙන්නුම් කළ අතර එය අඳුරු අවධියේ දෙවන භාගයේදී උපරිමයට පැමිණියේය (රූපය 3). ක්රියාකාරකම් රටා සමාන වුවද, යූරියා-සොයන කාන්තාවන් අවශෝෂණය කරන ලද සාන්ද්රණය (F(5, 138) = 1310.91, p) මත පදනම්ව සාමාන්ය පියාසැරි දුර සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි කළහ. < 0.0001).යුරියා සාන්ද්රණයක් ලබා ගත් සත්කාරක-සොයන ගැහැණු සතුන් ජලය හෝ සුක්රෝස් ලබා දුන් ගැහැණු සතුන්ට වඩා දිගු කාලයක් පියාසර කළහ (p < 0.03).
සියලුම ආහාර වේල් හරහා රුධිරය උරා බොන මදුරුවන්ගේ සමස්ත පියාසැරි ක්රියාකාරිත්වය ස්ථාවර වූ අතර පැය 24 කට වඩා පැවතුනි, අඳුරු කාල පරිච්ඡේදයේ දෙවන භාගයේදී ජලයෙන් පෝෂණය වූ ගැහැණු සතුන් සඳහා මෙන්ම නැවුම් සහ පැය 24 ක් වයසැති ගැහැණු සතුන් සඳහා මුත්රා ක්රියාකාරිත්වය වැඩි විය (රූපය 3). රුධිරය ලබා ගත් කාන්තාවන්ගේ සාමාන්ය පියාසැරි දුර (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004) මුත්රා ආහාර සැලකිය යුතු ලෙස බලපෑවද, යූරියා ආහාර වෙනත් මුත්රා සහ පාලන ආහාර සමඟ (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) එසේ නොවීය. (නැවුම්, p = 0.0091; පැය 72, p = 0.0022; පැය 168, p = 0.001; සුක්රෝස්, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
ප්රජනක පරාමිතීන් කෙරෙහි මුත්රා සහ යූරියා පෝෂණය කිරීමේ බලපෑම බිත්තර දැමීමේ ජෛව විශ්ලේෂණයන්හිදී තක්සේරු කරන ලදී (රූපය 4A) සහ එක් එක් ගැහැණු සතා විසින් දමන ලද බිත්තර ගණන, බිත්තර ප්රමාණය සහ අලුතින් පැටවුන් බිහි කළ පළමු ක්ෂණික කීටයන් අනුව විමර්ශනය කරන ලදී. දැමූ බිත්තර ගණන. මුත්රා පෝෂණය කරන අරාබි ගැහැණු සතුන් ආහාර වේල අනුව වෙනස් වේ (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; රූපය 4B). පැය 24ක මුත්රා පෝෂණය කරන ලද කාන්තාවන්, රුධිර ආහාර වේල අනෙකුත් මුත්රා ආහාර ලබා දෙන කාන්තාවන්ට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස බිත්තර දැමූ අතර සුක්රෝස් පෝෂණය කරන ලද අයට සමාන විය (රූපය 4B). ඒ හා සමානව, මුත්රා පෝෂණය කරන ගැහැණු සතුන් විසින් දමන ලද බිත්තර ප්රමාණය ආහාර වේල අනුව වෙනස් වේ (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), පැය 24ක මුත්රා සහ සුක්රෝස් පෝෂණය කරන ගැහැණු සතුන් ජලය පෝෂණය කරන ගැහැණු සතුන්ට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස විශාල බිත්තර දමන අතර, පැය 168ක මුත්රා පෝෂණය කරන ගැහැණු සතුන්ගේ බිත්තර සැලකිය යුතු ලෙස කුඩා විය (රූපය 4C). ඊට අමතරව, මුත්රා ආහාර වේල සැලකිය යුතු ලෙස බලපායි කීට ප්රමාණය (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), බිත්තර කීටයන්ගෙන් දැමූ බිත්තරවලට වඩා පැය 24 සහ 72 වයසැති මුත්රා පෝෂණය කරන ගැහැණු සතුන් විසින් දැමූ බිත්තර වලින් සැලකිය යුතු ලෙස විශාල කීටයන් මතු වේ. ජලයෙන් පෝෂණය වන සහ පැය 168 මුත්රා පෝෂණය කරන ගැහැණු සතුන් (රූපය 4D).
ගව මුත්රා සහ යූරියා ආහාරයට ගන්නා ගැහැණු ඇනොෆිලස් අරාබිනිස්ගේ ප්රජනන ක්රියාකාරිත්වය. රුධිරයෙන් පෝෂණය වන ගැහැණු මදුරුවන්ට නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා, විවිධ සාන්ද්රණයන් වන යූරියා, සුක්රෝස් (10%) සහ ආසවනය කළ ජලය (H2O) අඩංගු ආහාර වේලක් පැය 48ක් ලබා දෙන ලදී. ජෛව පරීක්ෂණවලට ඇතුළත් කර බිත්තර දැමීමේ උපස්ථර ලබා ගැනීමට පෙර පැය 48ක් (A). බිත්තර අංකය (B, E), බිත්තර ප්රමාණය (C, F) සහ කීට ප්රමාණය (D, G) සපයන ලද ආහාර මගින් සැලකිය යුතු ලෙස බලපෑවේය (ගව මුත්රා: BD; යූරියා: EG). විවිධ අකුරු නම් භාවිතයෙන් මනින ලද එක් එක් පරාමිතිය සඳහා මධ්යන්යයන් එකිනෙකට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් විය (ටුකීගේ පශ්චාත් කාලීන විශ්ලේෂණය භාවිතා කරමින් ඒකපාර්ශ්වික ANOVA; p < 0.05). දෝෂ තීරු සාමාන්යයේ සම්මත දෝෂය නියෝජනය කරයි.
මුත්රා වල ප්රධාන නයිට්රජන් සංරචකය වන යූරියා, රුධිරයෙන් පෝෂණය වන කාන්තාවන්ට ආහාරයක් ලෙස ලබා දුන් විට, සියලුම අධ්යයනයන්හි ප්රජනක පරාමිතීන්ට සැලකිය යුතු ලෙස බලපෑවේය. යූරියා ලබා දෙන කාන්තාවන් රුධිර ආහාර වේලකට පසු දමන ලද බිත්තර ගණන, යූරියා සාන්ද්රණය (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), යූරියා සාන්ද්රණය 134 µM සහ 1.34 mM අතර ප්රමාණයකින් ලබා දුන් ගැහැණු සතුන් වැඩිපුර බිත්තර දැමූහ (රූපය 4E). යූරියා සාන්ද්රණය 134 µM හෝ ඊට වැඩි ප්රමාණයක් ලබා දුන් ගැහැණු සතුන් ජලයෙන් පෝෂණය වන ගැහැණු සතුන්ට වඩා විශාල බිත්තර දමයි (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; රූපය 4F), සහ කීට ප්රමාණය, මව්වරුන් තුළ සමාන යූරියා සාන්ද්රණයන් (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) මගින් බලපෑමට ලක් වුවද, වඩාත් විචල්ය විය (රූපය 4G).
සත්කාරක-සොයන ගව මුත්රා හිස් අවකාශයේ වාෂ්පශීලී සාරය සඳහා සමස්ත ආකර්ෂණය. වීදුරු නල ආඝ්රාණ මාපකයේ (රූපය 5A) තක්සේරු කරන ලද අරාබියන්සිස් මුත්රා වයස මගින් සැලකිය යුතු ලෙස බලපා ඇත (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; රූපය 5B).පසුකාලීන විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ පැය 24 තුළ පරණ මුත්රා ගන්ධය අනෙකුත් සියලුම ප්රතිකාර හා සසඳන විට සැලකිය යුතු ලෙස ඉහළ ආකර්ශනීය මට්ටම් ඇති කළ බවයි (පැය 72: p = 0.0060, පැය 168: p = 0.012, පෙන්ටේන්: p = 0.00070), නැවුම් මුත්රා සුවඳ හැර (p = 0.13; රූපය 5B).ලේ උරා බොන මදුරුවන් මුත්රා ගන්ධයට ඇති සමස්ත ආකර්ෂණය සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් නොවූවත් (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; රූපය 5C), මෙම ගැහැණු සතුන් පැය 72-වයස්ගත මුත්රා හා සසඳන විට හිස් අවකාශයේ වාෂ්පශීලී සාරය සඳහා සැලකිය යුතු ලෙස වඩාත් ආකර්ශනීය බව සොයා ගන්නා ලදී. පාලන සමඟ සසඳන විට (p = 0.0066; රූපය 5C).
ධාරක සහ රුධිරයෙන් පෝෂණය වූ ඇනොෆිලස් අරාබියන් සෙවීමේදී ස්වාභාවික හා කෘතිම ගව මුත්රා ගන්ධයන්ට හැසිරීම් ප්රතිචාර. වීදුරු නල ඕල්ෆැක්ටෝමීටරයේ (A) ක්රමානුරූප සටහන. නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා වලින් ධාරක (B) සහ රුධිරය උරා බොන (C) මදුරුවන්ට හිස් අවකාශයේ වාෂ්පශීලී සාරය ආකර්ෂණය කර ගැනීම. ලෝඩ් ඇන් හි කූඩාරම් ප්රතික්රියාව සොයා ගන්න. නැවුම් (D), පැය 24 (E), පැය 72 (F) සහ පැය 168 (G) වයස්ගත ගව මුත්රා වලින් හුදකලා කරන ලද හිස් අවකාශයේ සාරය පෙන්වා ඇත. ඉලෙක්ට්රෝන ඇන්ටෙනා හඳුනාගැනීමේ (EAD) සලකුණු මඟින් වායු වර්ණදේහයෙන් ඉවත් කරන ලද සහ ගිනි අයනීකරණ අනාවරකයක් (FID) මගින් අනාවරණය කරන ලද හිස් අවකාශයේ ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝගවලට ප්රතිචාර වශයෙන් වෝල්ටීයතා වෙනස්කම් පෙන්වයි. පරිමාණ තීරුව ප්රතිචාර විස්තාරය (mV) එදිරිව රඳවා ගැනීමේ කාලය (s) නියෝජනය කරයි. ජීව විද්යාත්මකව ක්රියාකාරී සංයෝගවල ගුණාංග සහ මුදා හැරීමේ අනුපාත (µg h-1) පෙන්වා ඇත. තනි තරු ලකුණක් (*) ස්ථාවර අඩු විස්තාර ප්රතිචාරයක් දක්වයි. ද්විත්ව තරු ලකුණු (**) ප්රතිනිෂ්පාදනය කළ නොහැකි බව දක්වයි. ප්රතිචාර. ධාරකය (H) සහ රුධිරය උරා බොන (I) සොයා ගන්න. අරාබියන්සිස් නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා ගන්ධයන්ගේ කෘතිම මිශ්රණ සඳහා විවිධ ආයාචනා ඇත. විවිධ අකුරු නම් වලට ආකර්ෂණය වන මදුරුවන්ගේ සාමාන්ය අනුපාතයන් එකිනෙකට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් විය (ටුකීගේ පශ්චාත් කාලීන විශ්ලේෂණය භාවිතා කරමින් ඒකපාර්ශ්වික ANOVA; p < 0.05). දෝෂ තීරු පරිමාණයේ සම්මත දෝෂය නියෝජනය කරයි.
රුධිර ආහාර වේලකට පැය 72 කට පසු සහ පැය 120 කට පසු, බිත්තර දැමීමේදී, පෙන්ටේන් පාලන සමඟ සසඳන විට නැවුම් සහ වයස්ගත ගව මුත්රා වලින් හිස් අවකාශයේ වාෂ්පශීලී සාරය සඳහා මනාපයක් පෙන්වා නොතිබුණි (χ2 = 3.07, p > 0.05; අතිරේක ගොනුව 1: රූපය S1).
ගැහැණු Ann.arabiensis සඳහා, GC-EAD සහ GC-MS විශ්ලේෂණයන් ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝග අටක්, හය, තුන සහ තුන හඳුනාගෙන ඇත (රූපය 5D-G). විද්යුත් භෞතික විද්යාත්මක ප්රතිචාර ඇති කළ සංයෝග සංඛ්යාවේ වෙනස්කම් නිරීක්ෂණය කළද, මෙම සංයෝග බොහොමයක් නැවුම් සහ වයස්ගත මුත්රා වලින් එකතු කරන ලද එක් එක් හිස් අවකාශයේ වාෂ්පශීලී සාරය තුළ පැවතුනි. එබැවින්, එක් එක් සාරය සඳහා, එළිපත්තට ඉහළින් ඇති කාන්තා ඇන්ටෙනාවෙන් භෞතික විද්යාත්මක ප්රතිචාරයක් ඇති කළ සංයෝග පමණක් වැඩිදුර විශ්ලේෂණයන්ට ඇතුළත් කරන ලදී.
ප්රධාන වශයෙන් p-ක්රෙසෝල් සහ m-ෆෝමල්ඩිහයිඩ් ෆීනෝල් මෙන්ම ෆීනෝල් වැඩි වීම හේතුවෙන්, හෙඩ්ස්පේස් එකතුවේ ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝගවල මුළු වාෂ්පශීලී මුදා හැරීමේ අනුපාතය නැවුම් මුත්රාවල 29 µg h-1 සිට පැය 168ක් පැරණි මුත්රාවල 242 µg h-1 දක්වා වැඩි විය. ඊට වෙනස්ව, 2-සයික්ලොහෙක්සන්-1-වන් සහ ඩෙකනල් වැනි අනෙකුත් සංයෝගවල මුදා හැරීමේ අනුපාත, මුත්රා වයස වැඩිවීමත් සමඟ අඩු විය, එය වර්ණදේහයේ සංඥා තීව්රතාවයේ (බහුලත්වය) නිරීක්ෂණය කරන ලද අඩුවීම සමඟ සහසම්බන්ධ විය (රූපය 5D)-G වම් පුවරුව) සහ මෙම සංයෝග සඳහා භෞතික විද්යාත්මක ප්රතිචාර (රූපය 5D-G දකුණු පුවරුව).
සමස්තයක් වශයෙන්, කෘත්රිම මිශ්රණයට නැවුම් සහ වයස්ගත මුත්රා හිස් අවකාශයන්හි වාෂ්පශීලී සාරයන්හි හඳුනාගත් ජෛව ක්රියාකාරී සංයෝගවල සමාන ස්වාභාවික අනුපාතයක් තිබුණි (රූපය 5D-G) සහ ධාරකයෙකු (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; රූපය 5H) හෝ රුධිරය උරා බොන මදුරුවන් (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; රූපය 5I) සෙවීමේදී සැලකිය යුතු ආකර්ෂණයක් ඇති කළ බවක් නොපෙනුණි. කෙසේ වෙතත්, ප්රතිකාර අතර පශ්චාත් කාලීන යුගල වශයෙන් සංසන්දනය කිරීමෙන් පෙන්ටේන් පාලනයන් සමඟ සසඳන විට ධාරක-සොයන මදුරුවන් පැය 24 වයස්ගත මුත්රාවල කෘතිම මිශ්රණයට සැලකිය යුතු ලෙස ආකර්ශනීය බව පෙන්නුම් කළේය (p = 0.0086; රූපය 5H).
පැය 24ක් වයසැති මුත්රා වල කෘතිම මිශ්රණවල තනි සංරචකවල කාර්යභාරය තක්සේරු කිරීම සඳහා, Y-නල විශ්ලේෂණයේදී සම්පූර්ණ මිශ්රණවලට එරෙහිව අඩු කිරීමේ මිශ්රණ හයක් ඇගයීමට ලක් කරන ලද අතර, එහිදී තනි සංයෝග ඉවත් කරන ලදී. ධාරක-සොයන මදුරුවන් සඳහා, සම්පූර්ණ මිශ්රණයෙන් තනි සංයෝග අඩු කිරීම හැසිරීම් ප්රතිචාර කෙරෙහි සැලකිය යුතු බලපෑමක් ඇති කළේය (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; අතිරේක ගොනුව 1: රූපය S2A), සියලුම අඩු කිරීමේ මිශ්රණ සම්පූර්ණයෙන්ම මිශ්ර වීමට වඩා කුඩා ඒවාට වඩා ආකර්ශනීය විය. ඊට වෙනස්ව, සම්පූර්ණයෙන්ම කෘතිම මිශ්රණයෙන් තනි සංයෝග ඉවත් කිරීම රුධිරය උරා බොන මදුරුවන්ගේ හැසිරීම් ප්රතිචාරවලට බලපෑවේ නැත (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), decanal හැර, සම්පූර්ණ මිශ්රණයට සාපේක්ෂව අඩු මට්ටම් ඇති කළේය ආකර්ෂණය (p = 0.022; අතිරේක ගොනුව 1: රූපය S2B).
ඉතියෝපියාවේ මැලේරියා ආවේණික ගම්මානයක, ක්ෂේත්ර තත්වයන් යටතේ මදුරුවන් ආකර්ෂණය කර ගැනීම සඳහා පැය 24 පුරාම ගව මුත්රා යොදා ගනිමින් සකස් කරන ලද කෘතිම මිශ්රණයක කාර්යක්ෂමතාව රාත්රී දහයක් සඳහා ඇගයීමට ලක් කරන ලදී (රූපය 6A). මුළු මදුරුවන් 4,861 ක් අල්ලා හඳුනා ගන්නා ලද අතර, ඉන් 45.7% ක් Anthropus.gambiae sl, 18.9% ක් Anopheles pharoensis සහ 35.4% ක් Culex spp විය. (අතිරේක ගොනුව 1: වගුව S1). PCR විශ්ලේෂණය මගින් හඳුනාගත් An.Gambian විශේෂ සංකීර්ණයේ එකම සාමාජිකයා Anopheles arabinis ය. සාමාන්යයෙන්, රාත්රියකට මදුරුවන් 320 ක් අල්ලා ගන්නා ලද අතර, එම කාලය තුළ මිශ්රණයකින් තොරව යුගල කළ උගුල්වලට වඩා කෘතිම මිශ්ර ඇමක් සහිත උගුල් වැඩි මදුරුවන් අල්ලා ගන්නා ලදී (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). අත්හදා බැලීමේ ආරම්භයේ, මැද සහ අවසානයේ පාලන රාත්රී පහෙන් එක් එක් පාලන රාත්රී පහෙහි ඇමක් නොමැති උගුල් අටවන ලදී. සමාන මදුරුවන් සංඛ්යාවක් සිටියහ. එක් එක් උගුල් යුගලයේ අල්ලා ගන්නා ලද අතර, නිවාස අතර පක්ෂග්රාහීත්වයක් නොමැති බව පෙන්නුම් කරයි (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) සහ අධ්යයන කාලය තුළ ජනගහන අඩුවීමක් නොමැත. පාලන උගුල් හා සසඳන විට, කෘතිම මිශ්රණය අඩංගු උගුල්වලට හසු වූ මදුරුවන් සංඛ්යාව සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය: ධාරක සෙවීම (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), මෑත කාලීන රුධිර පෝෂණය (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) සහ ගැබ් ගැනීම (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; අතිරේක ගොනුව 1: වගුව S1). අල්ලා ගන්නා ලද මුළු මදුරුවන් සංඛ්යාවෙන් ද මෙය පිළිබිඹු වේ: ධාරක සෙවීම > ලේ උරා බොන > ගර්භනී > අර්ධ ගර්භනී > පිරිමි.
පැය 24 පුරා ක්රියාත්මක වන කෘතිම ගව මුත්රා ගන්ධ මිශ්රණයක කාර්යක්ෂමතාව පිළිබඳ ක්ෂේත්ර ඇගයීම. මාකි නගරයට ආසන්නව දකුණු-මැද ඉතියෝපියාවේ (සිතියම) (ඇතුළත් කරන්න) ක්ෂේත්ර අත්හදා බැලීම් සිදු කරන ලද අතර, ලතින් හතරැස් මෝස්තරයක් (ගුවන් රූපය) (A) සමඟ යුගල නිවාසවල රෝග පාලන මධ්යස්ථාන (CDC) ආලෝක උගුලක් (දකුණේ) භාවිතා කරන ලදී. කෘතිම ගන්ධ-ඇමුණු CDC ෆොටෝට්රැප් ගැහැණු ඇනොෆිලිස් අරාබිස් (B) ආකර්ෂණය කර අල්ලා ගනී, නමුත් ඇනොෆිලිස් ෆාරෝස් (C) නොවේ, වෙනස් ආකාරයකින්, භෞතික විද්යාත්මක තත්ත්වය මත යැපෙන බලපෑමකි. ඊට අමතරව, මෙම උගුල් ධාරක කූලෙක්ස් මදුරුවන් සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි සංඛ්යාවක් අල්ලා ගත්තේය.(D) පාලනය සමඟ සසඳන විට.වම් පස ඇති තීරු ගන්ධ ඇමක් (කොළ) සහ පාලන (විවෘත) උගුල් (N = 10) යුගලවලට හසු වූ මදුරුවන්ගේ සාමාන්ය තේරීම් දර්ශකය නියෝජනය කරන අතර, දකුණු පස ඇති තීරු පාලන උගුල් යුගලවල (විවෘත; N = 5) සාමාන්ය තේරීම් දර්ශකය නියෝජනය කරයි. ).තරු ලකුණු මඟින් සංඛ්යානමය වැදගත්කම මට්ටම් දක්වයි (*p = 0.01 සහ ***p < 0.0001)
කෘතිම මිශ්රණ අඩංගු උගුල් වල මෙම විශේෂ තුන වෙනස් ලෙස අල්ලා ගන්නා ලදී. ධාරකය සොයමින් (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), රුධිර පෝෂණය (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) සහ ගැබ් ගැනීම (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) a .arabiensis කෘතිම මිශ්රණය මුදා හරින උගුලේ සිරවී ඇත (රූපය 6B), නමුත් An ප්රමාණය වෙනස් නොවීය. විවිධ භෞතික විද්යාත්මක තත්වයන්හි Pharoensis සොයා ගන්නා ලදී (රූපය 6C).Culex සඳහා, කෘතිම මිශ්රණය (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; රූපය 6D) සමඟ ඇමක් කරන ලද උගුල් වල ධාරකයන් සොයන මදුරුවන් සංඛ්යාවේ සැලකිය යුතු වැඩි වීමක් පමණක් දක්නට ලැබුණි, පාලන උගුල් සමඟ සසඳන විට.
ඉතියෝපියාවේ අභිජනන ස්ථාන සහ ග්රාමීය ප්රජාවන් අතර විභව ධාරකයන්ගෙන් පිටත පිහිටා ඇති ධාරක ඇම උගුල් භාවිතා කරන ලද්දේ මැලේරියා මදුරුවන් ධාරක වාසස්ථාන ඉඟියක් ලෙස ගව මුත්රා ගන්ධය භාවිතා කරන්නේද යන්න තක්සේරු කිරීමට ය. ධාරක ඉඟි නොමැති විට, තාපය සහ ගව මුත්රා ගන්ධය තිබීම හෝ නොතිබීම, මදුරුවන් අල්ලා නොගත් විට (අතිරේක ගොනුව 1: රූපය S3). කෙසේ වෙතත්, ඉහළ උෂ්ණත්වය සහ ගව මුත්රා ගන්ධය තිබියදී, ගැහැණු මැලේරියා මදුරුවන් ආකර්ෂණය වී අල්ලා ගන්නා ලදී, නමුත් කුඩා සංඛ්යාවකින්, මුත්රා වයසෙන් ස්වාධීනව (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; අතිරේක ගොනුව 1: රූපය S3). ඊට වෙනස්ව, ජල පාලනයන් ඉහළ උෂ්ණත්වවලදී මැලේරියා මදුරුවන් අල්ලා ගත්තේ නැත (අතිරේක ගොනුව 1: රූපය S3).
මැලේරියා මදුරුවන් නයිට්රජන් අඩංගු සංයෝග ලබාගෙන බෙදා හරිනු ලබන්නේ ගව මුත්රා (එනම්, පොකුණු) මගින් වන්දි ලබා දීමෙනි, එමඟින් ජීවන ඉතිහාස ලක්ෂණ වැඩි දියුණු කරයි, අනෙකුත් කෘමීන්ට සමානව [2, 4, 24, 25, 26]. ගව මුත්රා යනු මැලේරියා වාහකයන්ගේ විවේක ස්ථාන, එනම් ගව මඩු සහ ග්රාමීය නිවාස සහ බිත්තර දැමීමේ ස්ථාන සමඟ සමීපව සම්බන්ධ වී ඇති පහසුවෙන් ලබා ගත හැකි පුනර්ජනනීය සම්පතකි. ගැහැණු මදුරුවන් මෙම සම්පත සුවඳින් සොයා ගන්නා අතර මුත්රා වල ප්රධාන නයිට්රජන් සංරචකය වන යූරියා ඇතුළු මුත්රා වල නයිට්රජන් සංයෝග අවශෝෂණය නියාමනය කිරීමට සමත් වේ [15, 16]. ගැහැණු මදුරුවාගේ භෞතික විද්යාත්මක තත්ත්වය මත පදනම්ව, පළමු ගොනඩොට්රොපික් චක්රය තුළ ධාරක-සොයන ගැහැණු මදුරුවන්ගේ පියාසර ක්රියාකාරිත්වය සහ පැවැත්ම මෙන්ම රුධිරය පෝෂණය කරන පුද්ගලයින්ගේ පැවැත්ම සහ ප්රජනන ලක්ෂණ වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා මුත්රා වල පෝෂ්ය පදාර්ථ වෙන් කරනු ලැබේ. එමනිසා, මන්දපෝෂණයෙන් පෙළෙන වැඩිහිටියන් මෙන් වසා ඇති මැලේරියා වාහකයන් සඳහා මුත්රා මිශ්ර කිරීම වැදගත් පෝෂණ කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි [8], මන්ද එය අඩු අවදානම් සහිත ආහාර සැපයීමේ යෙදීමෙන් වැදගත් නයිට්රජන් සංයෝග ලබා ගැනීමේ හැකියාව ගැහැණු මදුරුවන්ට ලබා දෙයි. මෙම සොයා ගැනීම සැලකිය යුතු වසංගත රෝග විද්යාත්මක වේ. කාන්තාවන්ගේ ආයු අපේක්ෂාව, ක්රියාකාරකම් සහ ප්රජනන ප්රතිදානය වැඩි වන විට, මේ සියල්ල දෛශික ධාරිතාවට බලපායි. තවද, මෙම හැසිරීම අනාගත දෛශික කළමනාකරණ වැඩසටහන් වල ඉලක්කය විය හැකිය.
පළ කිරීමේ කාලය: ජූනි-15-2022


