Ang pag-angkon ug pag-apod-apod sa sustansya nag-uban sa pagpangita sa insekto ug mga kinaiya sa kasaysayan sa kinabuhi. Aron mabayran ang mga kakulangan sa piho nga mga sustansya sa lain-laing mga yugto sa kinabuhi, ang mga insekto makakuha niini nga mga sustansya pinaagi sa supplemental feeding, pananglitan, pinaagi sa pagpakaon sa vertebrate secretions sa usa ka proseso nga nailhan nga puddles.arabiensis agitation sa ihi sa baka alang sa nutrient acquisition nagpalambo sa mga kinaiya sa kasaysayan sa kinabuhi.
Siguruha nga luwas kini.arabiensis nadani sa baho sa presko, 24-oras, 72-oras, ug 168-oras nga tigulang nga ihi sa baka, ug ang host-seeking ug gipakaon sa dugo (48-oras nga post-blood meal) nga mga babaye gisukod sa usa ka Y-tube olfactometer, ug ang mga mabdos nga babaye gi-assess alang sa pag-analisar sa biolohikal nga ihi nga gigamit sa pag-combine sa biolohikal nga pag-analisa sa electro. upat ka klase sa edad.Ang mga sintetikong panagsagol sa bioactive compounds gi-evaluate sa Y-tube ug field trials.Aron imbestigahan ang ihi sa baka ug ang nag-unang nitrogen-containing compound urea isip potensyal nga supplemental diets para sa malaria vectors, feeding parameters ug life history nga mga kinaiya gisukod. duction.
Pangitaa ang dugo ug sustansya sa tagbalay.Sa mga pagtuon sa laboratoryo ug sa uma, ang mga Arabo nadani sa natural ug sintetikong baho sa presko ug tigulang nga ihi sa baka.Ang mga mabdos nga babaye walay pagtagad sa mga tubag sa ihi sa baka sa mga dapit sa pagpangitlog.Ang mga babaye nga nangita sa host ug nagsuyop sa dugo aktibong mosuhop sa ihi sa baka ug urea ug maggahin niini nga mga kahinguhaan sumala sa pisyolohikal nga kahimtang.
Anopheles arabinis pag-angkon ug pag-apod-apod sa ihi sa baka alang sa mas maayo nga kasaysayan sa kinabuhi nga mga kinaiya.Supplemental feeding sa baka ihi makaapekto vector kapasidad direkta pinaagi sa pagdugang sa adlaw-adlaw nga survival ug vector density, ug dili direkta pinaagi sa pag-usab sa flight kalihokan ug busa kinahanglan nga konsiderahon sa umaabot nga mga modelo.
Ang pag-angkon ug pag-apod-apod sa sustansya naghiusa sa pagpangita sa insekto ug mga kinaiya sa kasaysayan sa kinabuhi [1,2,3]. Ang mga insekto makahimo sa pagpili ug pag-angkon sa pagkaon ug paghimo sa compensatory feeding base sa pagkaanaa sa pagkaon ug mga kinahanglanon sa sustansya [1, 3]. makakuha niini nga mga sustansya pinaagi sa supplemental feeding, sama sa lapok, nagkalain-laing mga hugaw ug mga sekreto sa mga vertebrates, ug bangkay, usa ka proseso nga nailhan nga puddles [2]. Bisan tuod ang nagkalainlaing matang sa alibangbang ug anunugba sa panguna gihulagway, ang mga buho sa tubig mahitabo usab sa ubang mga order sa insekto, ug ang pagkadani ug pagpakaon niini nga mga matang sa mga kahinguhaan mahimong adunay mahinungdanon nga mga epekto sa panglawas, 4, mga kinaiya sa kinabuhi [5] . squito Anopheles gambiae sensu lato (sl) mitumaw isip usa ka 'malnourished' nga hamtong [8], mao nga ang pagbisibis mahimong adunay importante nga papel sa iyang mga kinaiya sa kasaysayan sa kinabuhi, apan kini nga kinaiya hangtud karon napasagdan .Ang paggamit sa agitation isip usa ka paagi sa pagdugang sa nutrient intake niining importante nga sakyanan nagkinahanglan og pagtagad tungod kay kini adunay importante nga epidemiological nga mga sangputanan.
Limitado ang pag-inom og nitrogen sa hamtong nga baye nga Anopheles nga lamok tungod sa ubos nga mga reserba sa caloric nga gidala gikan sa yugto sa larva ug dili maayo nga paggamit sa pagkaon sa dugo [9]. Ang Babaye nga Ann.gambiae sl kasagarang mobayad niini pinaagi sa pagdugang og supplemental nga mga pagkaon sa dugo [10, 11], sa ingon nagbutang sa mas daghang tawo sa risgo nga mataptan sa sakit nga presko ug mosquito. makagamit sa supplemental feeding sa vertebrate excreta aron makaangkon og nitrogenous compounds nga makapalambo sa adaptation ug flight manioverability, ingon sa gipakita sa ubang mga insekto [2]. Niining bahina, ang lig-on ug lahi nga atraksyon sa usa sa mga igsoon nga espisye sulod sa An.Ang Gambian sl species complex, Anopheles arabinis, presko ug tigulang nga baka nga ihi [12,13,14], nailhan nga hostsobinicia nga ihi [12,13,14]. te with and feed on cattle.Cow urine is a resource rich in nitrogenous compounds, with urea accounting for 50-95% of the total nitrogen in fresh urine [15, 16].Samtang nagkatigulang ang ihi sa baka, ang mga microorganisms mogamit niini nga mga kahinguhaan aron makunhuran ang pagkakomplikado sa nitrogenous compounds sulod sa 24 oras [15]. Uban sa paspas nga pag-usbaw sa mga microorganism nga makahilo sa ammonia, nga may kalabutan sa usa ka compound nga almophilia sa ammonia, nga nakig-uban sa usa ka organikong compound nga nitroheno. squitoes) molambo [15], nga mahimong babaye nga Ann.arabiensis mas gusto nga madani sa ihi nga nag-edad og 24 ka oras o ubos pa [13, 14].
Sa kini nga pagtuon, gipangita ang host ug gipakaon sa dugo nga mga Ans. Sa panahon sa una nga siklo sa gonadotropin, ang arabiensis gisusi alang sa pagkuha sa mga nitrogenous compound, lakip ang urea, pinaagi sa pagsagol sa ihi. Sunod, usa ka serye sa mga eksperimento ang gihimo aron mahibal-an kung giunsa ang mga lamok nga babaye naggahin niini nga potensyal nga kapanguhaan sa sustansya alang sa pag-ayo sa pagkaluwas, pag-uswag sa ihi ug pagtino kung ang lab-as nga pagpanganak ug pag-uswag sa ihi. naghatag kini ug kasaligang mga timailhan alang sa host ug gipakaon sa dugo nga An.Sa ilang pagpangita niining potensyal nga nutritional resource, ang arabiensis nakadiskubre sa kemikal nga mga correlasyon luyo sa naobserbahang differential attractiveness.Synthetic odor mixtures of volatile organic compounds (VOCs) nga giila sa 24-hour nga tigulang nga ihi dugang nga gisusi ubos sa mga kondisyon sa uma, nga nagpalugway sa mga resulta nga nakuha ubos sa mga kondisyon sa laboratoryo ug nagpakita sa bovine nga baho sa estado nga epekto sa lain-laing mga kahimtang sa laboratoryo ug nagpakita sa baho sa ihi sa bovine.Atraksyon sa lamok.Ang resulta nga nakuha nagpamatuod nga si An.Ang arabiensis nagkuha ug nag-apod-apod sa mga nitrogenous compound nga makita sa vertebrate urine aron maimpluwensyahan ang mga kinaiya sa kasaysayan sa kinabuhi. Kini nga mga resulta gihisgutan sa konteksto sa potensyal nga epidemiological nga mga sangputanan ug kung giunsa kini magamit alang sa pag-monitor ug pagkontrol sa vector.
Ang Anopheles arabicans (Dongola strain) gipadayon sa 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH ug usa ka 12:12 h nga kahayag: ngitngit nga siklo. Ang mga ulod gipadako sa mga plastik nga tray (20 cm × 18 cm × 7 cm) nga puno sa distilled nga tubig ug gipakaon sa Tetramin® nga pagkaon sa isda (Tetramin® 0 nga pagkaon sa isda nga nakolekta (Tetramin® 0 nga pagkaon) (Tetramin® 0 nga mga isda nga nakolekta) (Tetramin® 0 nga pagkaon nga nakolekta sa Tetramin®, Melato) rtila, Åstorp, SE) ug dayon gibalhin ngadto sa Bugdorm cages (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) aron tugotan ang hamtong nga pagtungha. Ang mga hamtong gihatagan og 10% sucrose solution ad libitum hangtud 4 ka adlaw human sa pagtumaw (dpe), diin ang host-seeking nga mga babaye gitanyag sa ibabaw sa eksperimento, o sa ubos sa wala pa ang tubig. Ang mga babaye nga gigamit alang sa mga eksperimento sa flight tube gigutom sulod lamang sa 4-6 ka oras nga adunay tubig ad libitum.Aron sa pag-andam sa mga lamok nga nagsuyop sa dugo alang sa sunod nga bioassays, ang 4 ka dpe nga mga babaye gihatagan og defibrotic nga dugo sa karnero (Håtunalab, Bro, SE) gamit ang sistema sa pagpakaon sa lamad (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK o diretso nga gibalhin ngadto sa mga babaye nga gihubit sa ubos, ang mga indibidwal nga gihubit sa ubos o 0 nga mga babaye). % sucrose ad libitum alang sa 3 ka adlaw sa wala pa ang mga eksperimento nga gihulagway sa ubos. Ang ulahi nga mga babaye gigamit alang sa flight tube bioassays ug gibalhin sa laboratoryo, ug dayon adunay distilled water ad libitum alang sa 4-6 ka oras sa wala pa ang eksperimento.
Ang feeding assays gigamit sa pag-ihap sa konsumo sa ihi ug urea sa hamtong nga An.Arab nga babaye.Ang host-seeking ug gipakaon sa dugo nga mga babaye gihatagan og pagkaon nga adunay 1% nga lasaw nga presko ug tigulang nga ihi sa baka, nagkalain-laing konsentrasyon sa urea, ug duha ka kontrol (10% sucrose ug tubig) sulod sa 48 h.Dugang pa, food coloring (1 mgSml-1 FF5LD; rich, Stockholm, SE) gidugang sa pagkaon ug gihatag sa usa ka 4 × 4 matrix sa 250 µl microcentrifuge tubes (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Figure 1A) Pun-a sa ngilit (~ 300 µl) . gitas-on;Semadeni, Ostermundigen, CH; Figure 1A) sa bug-os nga kangitngit sa 25 ± 2 cm °C ug 65 ± 5% paryente humidity.Kini nga mga eksperimento gisubli 5 ngadto sa 10 ka beses. Human sa pagkaladlad sa pagkaon, ang mga lamok gibutang sa -20 °C hangtud sa dugang pagtuki.
Pangitaa ang ihi sa baka ug urea nga masuhop sa host ug babaye nga nagsuso sa dugo nga Anopheles arabianus.Sa pagsulay sa pagpakaon (A), ang mga babaye nga lamok gihatagan usa ka pagkaon nga gilangkoban sa presko ug tigulang nga ihi sa baka, lainlaing mga konsentrasyon sa urea, sucrose (10%), ug distilled nga tubig (H2O). ed 72-oras nga ihi sa baka nga ubos pa sa 168-oras nga ihi sa baka (B). Ang mean nga kinatibuk-ang nitroheno nga sulod (± standard deviation) sa ihi girepresentahan sa inset.Ang host-seeking (D, F) ug blood-supsop (E, G) nga mga babaye mokuha ug urea sa dose-dependent nga paagi. 0.05) Ang mga error bar nagrepresentar sa standard error sa mean (BE). Ang tul-id nga dashed nga linya nagrepresentar sa log-linear regression line (F, G)
Aron buhian ang nasuhop nga pagkaon, ang mga lamok tagsa-tagsa nga gibutang sa 1.5 ml nga microcentrifuge nga mga tubo nga adunay sulod nga 230 µl nga distilled nga tubig ug ang tisyu gibalda gamit ang usa ka disposable pestle ug cordless motor (VWR International, Lund, SE), gisundan sa centrifugation sa 10 krpm sulod sa 10 min. -Aldrich) ug absorbance (λ620) gitino gamit ang spectrophotometer-based microplate reader (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm) Aron ma-quantify ang pagkaon sa pagkaon, usa ka standard curve ang giandam pinaagi sa serial dilution aron makahatag og 0.2 µl ngadto sa 2.4 µl sa 1 mg ml-1 xylene cyanide. Unya, ang optical density sa nahibal-an nga mga konsentrasyon sa tina gigamit aron mahibal-an ang gidaghanon sa pagkaon sa matag lamok nga gikaon.
Ang datos sa gidaghanon gi-analisa gamit ang one-way analysis of variance (ANOVA) nga gisundan sa post hoc pairwise nga pagtandi ni Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007). , GraphPad Software, San Diego, CA, US).
Gibana-bana nga 20 µl sa mga sample sa ihi gikan sa matag grupo sa edad ang gigapos sa Chromosorb® W / AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) ug gisulod sa tin capsules (8 mm × 5 mm). ug tigulang nga ihi sumala sa protocol sa tiggama. Ang kinatibuk-ang nitrogen (g N l-1) gi-quantified base sa nahibal-an nga mga konsentrasyon sa urea nga gigamit isip usa ka sumbanan.
Aron mahibal-an ang epekto sa pagkaon sa pagpangita sa host ug pagsuso sa dugo nga babaye nga survival, ang mga lamok tagsa-tagsa nga gibutang sa dagkong mga plato sa Petri (12 cm ang diametro ug 6 cm ang gitas-on; Semadeni) nga adunay usa ka mesh-covered hole sa taklob (3 cm ang diametro) nga adunay Alang sa bentilasyon ug suplay sa pagkaon. Ang mga pagkaon gihatag direkta human sa 4 dpe ug gilakip ug usa ka konsentrasyon nga 1% nga natunaw nga lab-as nga kontrol, duha ka 1% nga natunaw nga kontrol. sucrose ug tubig.Ang matag pagkaon gipipette ngadto sa dental tampon (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) gisulod sa 5 ml syringe (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), gikuha ang plunger, ug gibutang sa ibabaw sa petri dish (numero 1).1A). ang mga lamok gilabay hangtod nga namatay ang kataposang lamok (n = 40 kada pagtambal).
Usa ka custom nga mosquito flying mill nga gibase sa Attisano et al.[17], ginama sa 5 mm nga gibag-on nga tin-aw nga acrylic panels (10 cm ang gilapdon x 10 cm ang gitas-on x 10 cm ang gitas-on) nga walay atubangan ug likod nga mga panel (Fig. 3: ibabaw).Usa ka pivot assembly nga adunay vertical nga tubo nga ginama sa gas chromatography cm (0.25 mm id) ngadto sa 7.5 mm nga gisuspinde sa usa ka paid sa usa ka gisuspinde nga glued sa 7.5 mm. neodymium magnets nga 9 cm ang gilay-on.Usa ka pinahigda nga tubo nga hinimo sa parehas nga materyal (6.5 cm L) ang nagbahinbahin sa bertikal nga tubo aron mahimong usa ka gihigot nga bukton ug usa ka bukton nga nagdala usa ka gamay nga piraso sa aluminum foil ingon usa ka signal nga makabalda sa kahayag.
Ang 24-oras nga gigutom nga mga babaye gihatagan sa pagkaon sa ibabaw sulod sa 30 minutos sa wala pa ang pagpugong. Ang bug-os nga gipakaon nga babaye nga mga lamok dayon tagsa-tagsa nga gi-anesthetize sa yelo sulod sa 2-3 ka minuto ug gilakip sa mga insekto nga mga pin nga adunay beeswax (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) ug dayon gihigot sa usa ka pinahigda nga tubo. -built data logger, unya gitipigan ug gipakita gamit ang PC-Lab 2000 ™ software (v4.01; Velleman, Gavere, BE).Ang galingan sa paglupad gibutang sa usa ka lawak nga gikontrolar sa klima (12 h: 12 h, kahayag: ngitngit, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Aron mahanduraw ang sumbanan sa kalihokan sa paglupad, ang kinatibuk-ang gilay-on nga gilupad (m) ug ang kinatibuk-ang ihap sa sunud-sunod nga mga kalihokan sa paglupad gikalkula kada oras sulod sa 24-oras nga yugto. sa mga hugna gikalkulo sa 10-minutos nga mga pag-uswag.
Aron masusi ang epekto sa pagkaon sa reproductive performance sa An.arabiensis, unom ka mga babaye (4 dpe) ang gibalhin direkta sa Bugdorm cages (30 cm × 30 cm × 30 cm) human sa pagkolekta sa dugo ug dayon gihatag ang eksperimento nga pagkaon sulod sa 48 ka oras sama sa gihulagway sa ibabaw. Ang mga pagkaon gikuha dayon ug ang mga spawning cups (30 ml; Nolato Hertila) nga napuno sa 2 ka oras nga distill, gipuno sa 2 ka adlaw nga Nolato Hertila. 4 ka oras. Balika ang matag regimen sa pagdiyeta 20-50 ka beses. Ang mga itlog giihap ug girekord alang sa matag eksperimento nga hawla. Ang mga subsample sa mga itlog gigamit sa pagtimbang-timbang sa gipasabot nga gidak-on ug gitas-on nga kausaban sa tagsa-tagsa nga mga itlog (n ≥ 200 kada pagkaon) gamit ang Dialux-20 nga mikroskopyo (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, DE 3, 2010; Ernst Leitz Wetzlar, DE 2002) CameraLeica Microsystems Ltd., DE).Ang nahabilin nga mga itlog gitipigan sa usa ka lawak nga kontrolado sa klima ubos sa standard nga kondisyon sa pagpadako sulod sa 24 ka oras, ug usa ka subsample sa bag-o lang nga mitumaw nga 1st instar larvae (n ≥ 200 kada pagkaon) gisukod, ingon sa gihulagway sa ibabaw.Ang gidaghanon sa mga itlog ug ang gidak-on sa mga itlog ug mga ulod gitandi tali sa mga pagtambal ug paggamit sa one-way nga v. SAS Institute Inc.).
Ang headspace volatiles gikan sa presko (1 hr post-sampling), 24 hr, 72 hr ug 168 hr aged nga ihi gikolekta gikan sa sample nga nakolekta gikan sa Zebu cattle, Arsi races.Alang sa kasayon, urine samples nakolekta sayo sa buntag samtang ang mga baka anaa pa sa kamalig.Urine samples gikolekta gikan sa 10 ka indibidwal ug 1000 ml nga mga sampol sa mga polyethylene ngadto sa 1000 nga mga indibidwal. sco, Frischhalteprodukte GmbH ug Co., Minden, DE) sa 3 l polyamide uban sa taklob Sa vinyl chloride plastic drums.Headspace volatiles gikan sa matag bovine ihi sample nakolekta bisan direkta (presko) o human sa maturation sa lawak temperatura alang sa 24 h, 72 h ug 168 h, ie matag ihi sample mao ang representante sa matag grupo sa edad.
Alang sa pagkolekta sa headspace volatiles, usa ka closed-loop system ang gigamit sa pag-circulate sa usa ka activated carbon-filtered gas stream (100 ml min-1) pinaagi sa polyamide bag ngadto sa adsorption column sulod sa 2.5 ka oras pinaagi sa paggamit sa diaphragm vacuum pump (KNF Neuberger, Freiburg, DE). 3 mm id) nga adunay sulod nga 35 mg sa Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) tali sa glass wool plugs.Sa wala pa gamiton, ang kolum gi-flush sa 1 ml nga redistilled n-hexane (Merck, Darmstadt, DE) ug 1 ml pentane (99.0% nga lunsay nga solvent nga Alglubed nga 99.0% nga lunsay nga solvent nga Alglubed). sa pentane.Ang mga koleksyon sa headspace gipundok ug dayon gitipigan sa -20°C hangtod magamit alang sa dugang nga pagtuki.
Mga tubag sa pamatasan sa pagpangita sa host ug pagkaon sa dugo nga An.Headspace volatile extracts nga nakolekta gikan sa presko, 24-h, 72-h, ug 168-h-aged nga ihi gi-analisa alang sa dali nga mga kinuha gikan sa Arabidopsis nga mga lamok gamit ang usa ka tul-id nga glass tube olfactometer [18]. Ang mga eksperimento gipahigayon sa panahon sa ZT'9rabk-15. tube olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) gilamdagan uban sa 3 ± 1 lx sa pula nga kahayag gikan sa ibabaw. Uling sinala ug humidified air flow (25 ± 2 °C, 65 ± 2% relatibong humidity) miagi sa bioassay sa 30 cm s-1.Ang hangin nagmugna pinaagi sa usa ka serye sa aspennar nga gambalay sa stainless steel ug atamponar. (4 cm × 1 cm; L: D; DAB Dental AB), gisuspinde gikan sa usa ka 5 cm coil sa hangin nga tumoy sa olfactometer, uban sa stimulator kausaban sa matag 5 minutos.Alang sa pag-analisar, 10 μl sa matag headspace extract, lasaw 1:10, gigamit ingon nga usa ka stimulus.Ang usa ka patas nga gidaghanon sa pentane gigamit ingon nga usa ka host-seeking sa pag-release sa dugo nga gigamit ingon nga usa ka control-seeking-2 nga pagpangita sa dugo. 3 ka oras sa wala pa magsugod ang eksperimento.Ang release cage gibutang sa downwind nga bahin sa olfactometer, ug ang mga lamok gitugotan sa acclimate alang sa 1 min, ug unya ang alibangbang balbula sa hawla giablihan sa release.Attraction sa pagtambal o pagkontrolar gi-analisa ingon nga ang proporsyon sa mga lamok nga miabut sa kontak uban sa tinubdan sa labing menos 5 minutos sa pagpugong sa pagpagawas sa sulod sa 5 minutos sa pag-release. sa bisan unsa nga usa ka adlaw, ang sama nga gidaghanon sa mga pagtambal ug mga kontrol gisulayan sa matag eksperimento nga adlaw.Pangitaa ang mga tubag gikan sa host ug gipakaon sa dugo nga Ans.Arabic versus headspace sets gisusi gamit ang nominal logistic regression gisundan sa pairwise nga pagtandi alang sa odd ratios (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Ang tubag sa pagpangitlog ni An. Ang mga extract sa headspace gikan sa presko ug tigulang nga ihi sa baka gi-analisa sa mga hawla sa Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Ang mga plastik nga tasa (30 mL; Nolato Hertila) nga puno sa 20 mL nga distilled nga tubig nga gihatag ang spawning substrate ug gibutang sa atbang nga 20 cm nga mga kanto sa mga kanto sa 20 cm. μl sa matag headspace extract sa 1:10 dilution.Parehas nga gidaghanon sa pentane ang gigamit sa pag-adjust sa control cup.Treatment ug control cups ang giilisan tali sa matag eksperimento aron makontrol ang mga epekto sa posisyon.Napulo ka gipakaon sa dugo nga mga babaye ang gipagawas sa experimental cages sa ZT 9-11 ug ang mga itlog sa mga tasa giihap 24 oras ang milabay. gibutang sa control cup)/(ang kinatibuk-ang gidaghanon sa mga itlog nga gibutang).Ang matag pagtambal gisubli 8 ka beses.
Ang gas chromatographic ug electron antenna pattern detection (GC-EAD) nga pag-analisar sa babaye nga An.arabiensis gihimo sama sa gihulagway kaniadto [20]. Sa mubo, ang presko nga headspace volatile extracts gibulag gamit ang Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) nga adunay HP-5 column (30 m × 0.25 mm nga gibag-on, Technologies 25 mm id).ug nagkatigulang nga ihi.Ang hydrogen gigamit isip mobile phase nga adunay average linear flow rate nga 45 cm s-1.Ang matag sample (2 μl) gi-injected sulod sa 30 segundos sa splitless mode nga adunay inlet temperature nga 225 °C. Ang GC oven temperature giprograma gikan sa 35 °C (3 minute hold) ngadto sa 300 °C nga pagkupot sa 100 °C sa 100 °C sa 100 °C. Ang 4 psi nga nitrogen gidugang ug gibahin ang 1: 1 sa usa ka Gerstel 3D / 2 ubos nga patay nga volume nga krus (Gerstel, Mülheim, DE) tali sa flame ionization detector ug sa EAD. 1.5 l min−1).Ang antenna gibutang 0.5 cm gikan sa outlet sa tubo.Ang matag indibidwal nga lamok nag-isip alang sa usa ka replikado, ug alang sa host-seeking nga mga lamok, labing menos tulo ka mga replika ang gihimo sa mga sample sa ihi sa matag edad.
Ang pag-ila sa mga bioactive compound sa mga koleksyon sa headspace sa presko ug tigulang nga ihi sa bovine gamit ang hiniusa nga GC ug mass spectrometer (GC-MS; 6890 GC ug 5975 MS; Agilent Technologies) aron makuha ang mga tubag sa antennal sa GC-EAD analysis, nga naglihok sa electron impact ionization mode sa 70 eVUI. 0.25 mm inner diameter, 0.25 μm film gibag-on) gamit ang helium isip mobile phase nga adunay average linear flow rate nga 35 cm s-1.A 2 μl sample ang gi-injected gamit ang parehas nga injector settings ug oven temperature sama sa GC-EAD analysis. Compounds giila base sa ilang retention time (Kovát spectraified nga librarya ug A index sa NIST1). gipamatud-an pinaagi sa pag-inject sa tinuod nga mga sumbanan (Dugang nga File 1: Table S2) .Alang sa quantification, ang heptyl acetate (10 ng, 99.8% nga kemikal nga kaputli, Aldrich) gi-injected isip usa ka eksternal nga sumbanan.
Pagtimbang-timbang sa kaepektibo sa usa ka sintetikong baho sagol nga gilangkoban sa bioactive compounds nga giila sa presko ug tigulang nga ihi aron sa pagdani sa host-seeking ug dugo-nagsuyop Ans.arabiensis, gamit ang sama nga olfactometer ug protocol sama sa ibabaw.Sintetikong mga sagol nga gisundog ang komposisyon ug proporsyon sa mga compounds sa mixed headspace dali moalisngaw extracts sa presko, 24-oras, 72-oras, 72-oras, 72-oras. 5D-G; Dugang nga File 1: Talaan S2) Alang sa pagtuki, gamita ang 10 μl sa usa ka 1:100 nga pagtunaw sa hingpit nga sintetikong sagol, nga adunay kinatibuk-ang rate sa pagpagawas gikan sa gibana-bana nga 140-2400 ng h-1, alang sa pagsusi sa pagkamadanihon sa host ug mga lamok nga nagsuyop sa dugo. Ang gipakaon sa dugo nga Ans.Arab vs synthetic ug subtractive mixtures gisusi gamit ang nominal logistic regression nga gisundan sa pairwise nga pagtandi alang sa odd ratios (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Aron masusi kung ang ihi sa baka mahimong magsilbi nga host habitat cue alang sa malaria nga mga lamok, presko ug tigulang nga ihi sa baka, nga gikolekta sama sa gihulagway sa ibabaw, ug ang tubig gibutang sa 3 ka litro nga balde (100 ml) ug gibutang sa host bait traps.(BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE).Napulo ka lit-ag nga gibutang 50 m ang gilay-on sa sibsibanan, 400 m gikan sa komunidad sa baryo (Silay, Ethiopia, 5°53′24′′N, 37°29′24′′E) ug walay baka, sa permanenteng breeding grounds ug mga baryo. kinatibuk-an nga lima ka gabii. Ang mga numero sa lamok nga nakuha sa mga lit-ag nga gipaon sa ihi nga lainlaig edad gitandi gamit ang logistic regression nga adunay beta binomial distribution (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Sa usa ka malaria-endemic nga balangay duol sa lungsod sa Maki, Oromia nga rehiyon, Ethiopia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Figure 6A). ang pagtuon (Fig. 6A).Ang mga criteria nga gigamit sa pagpili sa mga balay mao ang: walay mga mananap nga gitugotan sa balay, walay sulod nga pagluto (pagdrowing og sugnod o uling) gitugotan (labing menos sa panahon sa pagsulay), ug mga balay nga adunay maximum nga duha ka mga lumulupyo, natulog sa unsecticides.ubos sa gitambalan nga mosquito net.Ethical approval has been granted by the Institutional Research Ethics Review Board (IRB/022/2016) of the Faculty of Natural Sciences (CNS-IRB), Addis Ababa University, subay sa mga guidelines nga gitukod sa World Medical Association Declaration of Helsinki.Consent gikan sa matag ulo sa proseso sa panglawas ang nakuha sa local nga pag-endorso sa mga kawani sa pagpadako sa panglawas. ('kebele') nga lebel.Ang eksperimento nga disenyo misunod sa 2 × 2 Latin square nga disenyo, diin ang sintetikong mga sagol ug mga kontrol gi-assign ngadto sa gipares nga mga balay sa unang gabii ug gibayloan tali sa mga balay sa sunod nga eksperimento nga gabii. Kini nga proseso gisubli sa napulo ka beses.
Usa ka sintetikong sagol nga adunay unom ka bioactive compounds ang natunaw sa heptane (97.0% solvent GC grade, Sigma Aldrich) ug gibuhian sa 140 ng h-1 gamit ang cotton wick dispenser [20]. Ang wick dispenser nagtugot sa tanan nga compounds nga ipagawas sa kanunay nga proporsyon sa tibuok 12 ka oras nga eksperimento. Ang Heptane gigamit isip usa ka kontrol sa Prevention ug ang Vic. light trap (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Figure 6A).Ang mga lit-ag gibitay 0.8 - 1 m ibabaw sa yuta, duol sa tiilan sa higdaanan, ug ang usa ka boluntaryo natulog ubos sa wala matambalan nga mosquito net ug gioperahan tali sa 18:00 ug 06:30. Ang mga lamok nadakpan, gisabak, wala'y pisyolohikal nga kahimtang (wala'y pisyolohikal nga kahimtang nga nakuha pinaagi sa sekso, wala'y sekso)2. sunod nga gi-screen gamit ang polymerase chain reaction (PCR) analysis aron mailhan ang mga espisye nga morphologically giila nga A. gambiae sl. Mga miyembro sa complex [23]. Sa field study, ang trap trapping sa gipares nga mga balay gi-analisar gamit ang nominal logistic fit model, diin ang atraksyon mao ang dependent variable ug ang pagtambal (synthetic mixture vs control) mao ang fixed effect (JMP.0® 14.0. SAS Institute Inc.).Dinhi, among gitaho ang χ2 ug p-values ​​​​gikan sa probibilidad nga pagsulay sa ratio.
Timbang-timbanga kon kini luwas ba.arabiensis nakahimo sa pagkuha sa ihi, ang nag-unang nitrogen tinubdan niini, urea, pinaagi sa direkta nga pagpakaon, sulod sa 48 ka oras sa administrasyon alang sa 4 ka adlaw post (dpe) host-seeking ug gipakaon sa dugo nga babaye nga mga pagsulay sa pagpakaon (Fig. 1A). 1 ug F (5,299) = 56.00, p <0.0001, matag usa; Fig. 1B, C). Dugang pa, ang host-seeking nga mga babaye mokaon og gamay sa ihi sa 72 ka oras kumpara sa ihi sa 168 ka oras (Fig. 1B) .Sa dihang gitanyag ang usa ka pagkaon nga adunay urea, ang host-seeking nga mga babaye mas gamay sa ihi sa 72 ka oras kon itandi sa ihi sa 168 ka oras (Fig. 1B). dili mailhan gikan sa 10% sucrose (F(10,813) = 15.72, p <0.0001; Figure 1D) . Sukwahi kini sa tubag sa gipakaon sa dugo nga mga babaye, kinsa kasagarang mosuhop sa mas daghang urea nga adunay mga diyeta kay sa tubig, bisan pa nga mas ubos sa 10, 0.8 = 5,0. 001; Figure 1) .1E). Dugang pa, kung itandi ang duha nga mga estado sa pisyolohikal, ang mga phlebotomised nga mga babaye nagsuhop sa daghang urea kaysa mga babaye nga nangita sa host sa labing ubos nga konsentrasyon, ug kini nga mga babaye nagsuhop sa parehas nga kantidad sa urea sa mas taas nga konsentrasyon (F (1,953) = 78.82, p <10.82, p < .Fig. 1F, G).Samtang ang pag-inom gikan sa usa ka pagkaon nga adunay urea nagpakita nga adunay labing maayo nga mga kantidad (Fig. 1D, E), ang mga babaye sa duha ka physiological nga mga estado nakahimo sa pag-modulate sa gidaghanon sa urea nga masuhop sa tibuok nga han-ay sa mga konsentrasyon sa urea sa usa ka log-linear nga paagi (Fig. 1F, G).).Sa susama, ang mga lamok mopatim-aw nga nagkontrolar sa ilang nitrogen uptake pinaagi sa pag-regulate sa gidaghanon sa ihi nga masuhop, tungod kay ang gidaghanon sa nitroheno sa ihi makita sa gidaghanon nga masuhop (Figure 1B, C ug B insets).
Aron masusi ang mga epekto sa ihi ug urea sa pagpangita sa host ug pagsuyop sa dugo sa lamok nga mabuhi, ang mga babaye gipakaon sa ihi sa tanan nga upat ka edad (presko, 24 h, 72 h, ug 168 h post-deposition) ug usa ka lainlaing mga konsentrasyon sa urea, ingon man ang distilled nga tubig ug 10% nga sucrose nagsilbing usa ka kontrol (Kini nga pagtan-aw sa kinatibuk-ang pag-analisa sa pagkaluwas sa babaye adunay epekto sa pagkaluwas sa babaye). : χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Fig. 2B, C) ug mga babaye nga gipakaon sa dugo (ihi: χ2 = 93.0, χ2 = <93.0, χ2 = 93.0, χ2 = 93.0, χ2 = 0.0. , df = 5, p <0.0001; Figure 2D, E).Sa tanan nga mga eksperimento, ang mga babaye nga gipakaon sa usa ka pagkaon sa ihi, urea, ug tubig adunay mas ubos nga survival rate kumpara sa mga babaye nga gipakaon sa sucrose diet (Figure 2B-E). (Fig. 2B) .Dugang pa, ang mga babaye nga nangita sa host nga gipakaon sa 135 mM urea naluwas nga mas dugay kaysa mga kontrol sa tubig (p <0.04) (Fig.2C) .Kon itandi sa tubig, ang mga babaye nga gipakaon sa presko nga ihi ug 24-oras nga ihi nakalahutay og mas dugay (p = 0.001 ug p = 0.012, matag usa; Figure 2D), samtang ang mga babaye nga gipakaon sa 72-oras nga ihi naluwas nga mas taas kay sa gipakaon nga Babaye nga mugbo nga presko nga ihi ug 24-oras nga tigulang nga ihi (p <0.000.001). Ang 135 mM urea, ang mga babaye nga gipakaon sa dugo naluwas nga mas taas kaysa sa tanan nga ubang mga konsentrasyon sa urea ug tubig (p <0.013; Figure 2E).
Survival sa host ug nagsuso sa dugo nga babaye nga Anopheles arabinis nga nagpakaon sa ihi sa baka ug urea.Sa bioassay (A), ang mga babaye nga lamok gihatagan ug pagkaon nga gilangkoban sa presko ug tigulang nga ihi sa baka, lain-laing konsentrasyon sa urea, sucrose (10%) ug distilled water (H2O). d sa ihi (B, D) ug urea (C, E), ug mga kontrol, Sucrose ug tubig, patay
Ang kinatibuk-ang gilay-on ug gidaghanon sa mga round nga gitino sa pagsulay sa galingan sa paglupad sulod sa 24-oras nga panahon lahi tali sa host-seeking ug blood-supsop nga mga lamok, nga nagpakita nga gamay ra ang kalihokan sa paglupad sa kinatibuk-an (Fig. 3). Ang host-seeking nga mga lamok nga naghatag og presko ug tigulang nga ihi o sucrose ug tubig nagpakita sa lahi nga mga pattern sa paglupad (Fig. 3), nga ang mga babaye mas aktibo nga gipakaon sa 6 ka oras sa kaadlawon 6. Ang mga lamok nga gipakaon sa ihi nagpakita sa lain-laing mga paagi sa paglupad ug nag-una sa diurnal. Ang mga lamok nga babaye nga naghatag og sucrose o 72-oras nga ihi nagpakita sa kalihokan sa tibuok 24-oras nga panahon, samtang ang mga babaye nga naghatag og tubig mas aktibo sa tunga-tunga sa panahon. Ang mga lamok nga gipakaon sa sucrose nagpakita sa pinakataas nga lebel sa kalihokan sa gabii, samtang ang mga lamok nga gipakaon sa sucrose nagpakita sa pinakataas nga lebel sa kalihokan sa gabii, samtang ang mga lamok nga nagpakaon sa sucrose nagpakita sa pinakataas nga lebel sa kalihokan sa gabii, samtang ang mga lamok nga nagpakaon sa sucrose nagpakita sa pinakataas nga lebel sa kalihokan sa gabii, samtang ang mga lamok nga nagpakaon og sucrose nagpakita sa pinakataas nga lebel sa kalihokan sa gabii, samtang ang mga lamok nga nag-inom sa sayo sa kabuntagon. 24 ka oras (Figure 3).
Ang flight performance sa mangangayam nga nangita og dugo nga babaye nga Anopheles arabinis nga nagpakaon sa ihi ug urea sa baka. Sa flight mill test, ang mga babaye nga lamok nga gipakaon sa presko ug tigulang nga ihi sa baka, lain-laing mga konsentrasyon sa urea, sucrose (10%), ug distilled water (H2O) gihigot ngadto sa horizontal, freely rotating arms (suft-duong nga gilay-on) (sa taas-taas nga mga bukton) ug sa babaye. gidaghanon sa mga flight kada oras alang sa matag pagkaon sulod sa 24-oras nga panahon ang natala (dark: gray; kahayag: puti).Average nga gilay-on ug average nga gidaghanon sa mga bouts gipakita sa tuo sa circadian activity graph. Error bars nagrepresentar sa standard error sa mean.Statistical analysis tan-awa ang text
Sa kinatibuk-an, ang kinatibuk-ang kalihokan sa paglupad sa mga babaye nga nangita sa host nagsunod sa usa ka sumbanan nga susama sa gilay-on sa paglupad sulod sa 24 ka oras nga panahon. Ang mga quitoes milupad nga mas taas kaysa presko (p = 0.022) ug 24-h-aged nga ihi (p = 0.022) nga gipakaon sa mga lamok. Sukwahi sa pattern sa kalihokan sa paglupad nga gihulagway sa pagkaon sa ihi, ang mga babaye nga nangita sa host nga gipakaon sa urea nagpakita sa padayon nga kalihokan sa paglupad sa usa ka 24-h nga panahon, ang peaking sa panahon sa ikaduha nga katunga sa kalihokan sa host3. Ang urea mahinungdanon nga mitaas ang gilay-on nga gilay-on sa paglupad depende sa masuhop nga konsentrasyon (F (5, 138) = 1310.91, p <0.0001).
Ang kinatibuk-ang kalihokan sa paglupad sa mga lamok nga nagsuso sa dugo lig-on ug gipadayon sa mga oras nga 24 sa tanan nga mga diyeta, nga adunay dugang nga kalihokan sa ihi sa panahon sa ikaduha nga katunga sa ngitngit nga panahon alang sa mga babaye nga gipakaon sa tubig ingon man sa mga babaye nga gipakaon nga presko ug 24 ka oras ang edad (larawan 3) . wala (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .uban sa uban pang ihi ug pagkontrol sa pagkaon (lab-as, p = 0.0091; 72 ka oras, p = 0.0022; 168 ka oras, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; p = 0.0017; dH2O, 3).
Ang mga epekto sa pagpakaon sa ihi ug urea sa reproductive parameters gisusi sa egg-laying bioassays (Figure 4A) ug gisusi sumala sa gidaghanon sa mga itlog nga gibutang sa matag baye, gidak-on sa itlog, ug bag-ong napusa nga unang instar larvae.Ang gidaghanon sa mga itlog nga gibutang.Ang gipakaon sa ihi nga Arabong babaye lainlain-lain sa pagkaon (F = 40.8 p. B).Ang mga babaye nagpakaon og 24-oras nga ihi, ang pagkaon sa dugo nagbutang ug mas daghan nga mga itlog kay sa mga babaye nga gipakaon sa ubang mga diyeta sa ihi ug susama sa gipakaon nga sucrose (Fig. 4B). Sa samang paagi, ang gidak-on sa mga itlog nga gipakaon sa mga babaye nga gipakaon sa ihi nagkalainlain sa pagkaon (F(5, 209) = 12.85, p <0.004 nga mga itlog nga mas dako kay sa mga babaye nga gipakaon sa ihi ug sucrose nga 12.85, p <0.004 mga babaye nga gipakaon sa tubig, samtang ang mga itlog sa mga babaye nga gipakaon sa 168 ka oras nga ihi mas gamay (Fig. 4C). gipakaon ug 168-h nga mga babaye nga gipakaon sa ihi (Figure 4D).
Reproductive performance sa baye nga Anopheles arabinis nga nagpakaon sa ihi sa baka ug urea.Ang gipakaon sa dugo nga baye nga lamok gipakaon sa mga diet nga gilangkoban sa presko ug tigulang nga ihi sa baka, lain-laing mga konsentrasyon sa urea, sucrose (10%), ug distilled water (H2O) sulod sa 48 ka oras sa wala pa ibutang sa bioassays ug pagkuha sa Egg-laying nga gidaghanon (B) nga gidaghanon (mga oras nga Egg-layer) (B) nga gidaghanon (B) nga substrate (Egg-laying nga mga oras). ug ang gidak-on sa ulod (D, G) dako kaayog epekto sa pagkaon nga gihatag (ihi sa baka: BD; urea: EG). Ang mga paagi sa matag parameter nga gisukod gamit ang lain-laing mga ngalan sa letra lahi kaayo sa usag usa (one-way ANOVA gamit ang post hoc analysis ni Tukey; p <0.05). Ang mga error bar nagrepresentar sa standard error sa mean.
Ingon nga mayor nga nitrogenous nga bahin sa ihi, urea, kon gihatag ingon nga usa ka pagkaon sa mga babaye nga gipakaon sa dugo, mahinungdanon nga nakaapekto sa mga parameter sa pagsanay sa tanan nga mga pagtuon.Ang gidaghanon sa mga itlog nga gibutang sa mga babaye nga gipakaon sa urea, human sa usa ka pagkaon sa dugo, depende sa urea nga konsentrasyon (F(11, 360) = 4.69; p <0.0001, ang mga babaye nga gipakaon sa 3 µM ug 4 M labaw pa nga konsentrasyon mga itlog (Figure 4E).Ang mga babaye nga gipakaon sa urea nga mga konsentrasyon nga 134 µM o labaw pa mangitlog mas dako kay sa mga babaye nga gipakaon sa tubig (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001; Figure 4F), ug larval size, bisan pa apektado sa susamang konsentrasyon sa Furea sa mga inahan, = 30. 1) mao ang mas variable (Fig. 4G).
Kinatibuk-ang atraksyon ngadto sa host-seeking bovine urine headspace volatile extracts.Ang arabiensis nga gi-assess sa glass tube olfactometer (Fig. 5A) naapektuhan pag-ayo sa edad sa ihi (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fig. 5B) . Ang post hoc nga pag-analisar nagpakita nga ang tanan nga p24 nga pag-analisar sa ihi nagpakita nga ang tanan nga mas taas nga baho sa ihi nga gipahinabo sa p224 nga mas taas nga baho sa ihi = 224 nga pag-analisar nga gipahinabo nga mas taas nga lebel sa p224 nga pagtambal 0.0060, 168 ka oras: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Gawas sa baho sa presko nga ihi (p = 0.13; Figure 5B) .Bisan tuod ang kinatibuk-ang atraksyon sa mga lamok nga nagsuyop sa dugo sa baho sa ihi dili kaayo lahi (χ2 = 8.78, kini nga mga babaye). nakit-an nga labi ka labi ka madanihon sa mga sulud sa ulo nga dali moalisngaw kumpara sa 72-oras nga tigulang nga ihi kumpara sa mga kontrol (p = 0.0066; Figure 5C).
Mga tubag sa pamatasan sa natural ug sintetikong baho sa ihi sa baka sa pagpangita alang sa host ug gipakaon sa dugo nga Anopheles arabianus.Schematic sa glass tube olfactometer (A).Attraction of headspace volatile extracts gikan sa presko ug tigulang nga ihi sa baka ngadto sa host (B) ug nagsuso sa dugo (C) nga mga lamok.Pangitaa ang tentacleHead nga reaksyon sa Ginoo nga an.2hours, (D) -hour (F), ug 168-hour (G) nga tigulang nga ihi sa baka gipakita. Ang mga pagsubay sa electron antenna detection (EAD) nagpakita sa mga pagbag-o sa boltahe agig tubag sa bioactive compounds sa headspace nga gipagawas gikan sa gas chromatograph ug namatikdan sa flame ionization detector (FID). .Ang usa ka asterisk (*) nagpakita sa usa ka makanunayon nga low-amplitude nga tubag.Doble nga mga asterisk (**) nagpaila sa dili mabag-o nga mga tubag. Pangitaa ang host (H) ug ang nagsuyop sa dugo (I) An.arabiensis adunay lain-laing mga pagdani sa sintetikong mga sagol sa presko ug tigulang nga baka nga baho sa ihi. pagtuki;p <0.05) Ang mga error bar nagrepresentar sa standard error sa timbangan
Babaye nga Ann.arabiensis, 72 h ug 120 h human sa pagkaon sa dugo, sa panahon sa spawning, walay gipalabi nga gipakita alang sa headspace volatile extracts gikan sa presko ug tigulang nga ihi sa baka kon itandi sa pentane controls (χ2 = 3.07, p> 0.05; Dugang file 1: Fig. S1).
Alang sa babaye nga Ann.arabiensis, GC-EAD ug GC-MS nga pag-analisar giila nga walo, unom, tulo ug tulo ka bioactive compounds (Figure 5D-G). gilakip sa dugang nga pag-analisar.
Ang kinatibuk-ang volatile release rate sa bioactive compounds sa headspace collection misaka gikan sa 29 µg h-1 sa lab-as nga ihi ngadto sa 242 µg h-1 sa 168-hour nga edad nga ihi, nag-una tungod sa p-cresol ug m-formaldehyde Phenol pagtaas ingon man sa phenol. nga may kalabutan sa naobserbahan nga pagkunhod sa signal intensity (abundance) sa chromatogram (Fig. 5D) -G left panel) ug physiological nga mga tubag niini nga mga compound (Fig. 5D-G right panel).
Sa kinatibuk-an, ang sintetikong sagol adunay susama nga natural nga ratio sa bioactive compounds nga giila sa dali moalisngaw nga mga kinuha sa presko ug tigulang nga mga ulo sa ihi (Fig. 5D-G) ug wala makita nga nagkuha og mahinungdanong pag-apelar sa pagpangita sa usa ka panon (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Fig. 5H, χ2 = χ2 = mocking = χ2 = χ2 = χ2 = χ4 = mocking = χ2 = χ2 = 9 0.30; Fig. 5I) .Bisan pa, ang post hoc pairwise nga pagtandi tali sa mga pagtambal nagpakita nga ang mga lamok nga nangita sa host labi ka madanihon sa sintetikong pagsagol sa 24-h nga edad nga ihi kumpara sa mga kontrol sa pentane (p = 0.0086; Figure 5H).
To assess the role of individual components in synthetic mixtures of 24-h-aged urine, six subtractive mixtures were evaluated against complete mixtures in the Y-tube assay, in which individual compounds were removed.For host-seeking mosquitoes, subtracting individual compounds from the complete mixture had a significant effect on behavioral responses (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; Additional file 1: Figure S2A), all subtractive mixtures were more attractive than Smaller than fully mixed.In contrast, removal of individual compounds from the fully synthetic mixture did not affect the behavioral responses of blood-sucking mosquitoes (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), with the exception of decanal, which resulted in lower levels compared to the complete mixture Attraction (p = 0.022; Additional File 1: Figure S2B).
Sa usa ka balangay nga malaria-endemic sa Ethiopia, ang kaepektibo sa usa ka sintetikong sagol sa 24-oras nga ihi sa baka sa pagdani sa mga lamok ubos sa mga kondisyon sa uma gi-evaluate sulod sa napulo ka gabii (Fig. 6A).Sa kinatibuk-an nga 4,861 ka lamok ang nakuha ug giila, diin 45.7% ang Anthropus.gambiae . lex spp.(Dugang payl 1: Table S1).Ang Anopheles arabinis mao lamang ang miyembro sa An.Gambian species complex nga giila pinaagi sa PCR analysis.Sa aberids, 320 ka lamok ang nadakpan kada gabii, diin ang mga lit-ag nga adunay sintetikong sagol nga mga paon nakakuha ug mas daghang lamok kaysa gipares nga mga lit-ag nga walay sagol (χ2(0, 0.0.N). Ang mga lit-ag gibutang sa matag usa sa lima ka kontrol nga mga gabii sa sinugdanan, tunga-tunga, ug katapusan sa pagsulay. Susama nga gidaghanon sa mga lamok ang nakuha sa matag parisan sa mga lit-ag, nga nagpakita nga walay pagpihig tali sa mga balay (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) ug walay pagkunhod sa populasyon sa mga lit-ag sa panahon sa pagtuon. dako nga pagtaas: pagpangita sa host (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), bag-o nga pagpakaon sa dugo (χ2 (0, 650) = 32.2, p <0.0001) ug pagmabdos (χ2 (0, 228) = 6.27, p = 0.Dugang nga file 1: Talaan S1). Makita usab kini sa kinatibuk-ang gidaghanon sa mga lamok nga nadakpan: host nga nangita > nagsuyop og dugo > mabdos > semi-buntis > lalaki.
Field evaluation sa kaepektibo sa usa ka 24-hour synthetic cow urine odor mixture.Field trials gipahigayon sa south-central Ethiopia (mapa), duol sa lungsod sa Maki (insert), gamit ang Centers for Disease Control (CDC) light trap (tuo) sa gipares nga mga balay, nga adunay Latin square design (aerial image) (A). (C), sa usa ka lahi nga paagi, usa ka physiological state-dependent nga epekto.Dugang pa, kini nga mga lit-ag nakuha sa kamahinungdanon nga pagtaas sa gidaghanon sa host Culex nga mga lamok.(D) Kung itandi sa kontrol.Ang mga bar sa wala nagrepresentar sa kasagaran nga indeks sa pagpili sa mga lamok nga nakuha sa mga parisan sa baho nga paon (berde) ug kontrol (bukas) nga mga lit-ag (N = 10) 5).).Ang mga asterisk nagpaila sa lebel sa kahulogan sa istatistika (*p = 0.01 ug ***p <0.0001)
Ang tulo ka mga espisye nakuha nga lahi sa mga lit-ag nga adunay sulud nga sintetikong mga sagol. Nangita alang sa host (χ2 (1, 1345) = 71.7, p <0.0001), pagpakaon sa dugo (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) ug pagmabdos (χ2 (1.40.1) s natanggong sa lit-ag nga nagpagawas sa synthetic mixture (Fig. 6B), samtang ang gidaghanon sa An wala magkalahi.Pharoensis sa lain-laing physiological states nakit-an (Fig. 6C).Alang sa Culex, usa lamang ka mahinungdanon nga pagtaas sa gidaghanon sa mga lamok nga nangita og host ang nakit-an sa mga lit-ag nga gipaon sa sintetikong sagol (χ2(1,10). ), itandi sa control traps.
Ang mga lit-ag sa paon sa host nga nahimutang sa gawas sa mga potensyal nga host tali sa mga breeding site ug mga komunidad sa kabanikanhan sa Ethiopia gigamit aron masusi kung ang mga lamok sa malaria naggamit ba sa baho sa ihi sa baka isip usa ka cue nga puy-anan sa host. Kung wala ang host cues, kainit, ug adunay o wala ang presensya sa baho sa ihi sa baka, walay lamok nga nadakpan (Dugang file 1: Figure S3 ang presensya sa mga babaye nga malaria, bisan unsa pa man ang presensya sa malaw-ay nga temperatura, ang presensya sa ihi sa babaye). ug nadakpan, bisan pa sa gamay nga gidaghanon, independente sa edad sa ihi (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Dugang nga file 1: Figure S3 ).Sa kasukwahi, ang mga kontrol sa tubig wala makadakop sa mga lamok sa malaria sa taas nga temperatura (Dugang nga File 1: Figure S3).
Ang mga lamok sa malaria nagkuha ug nag-apod-apod sa mga compound nga adunay nitrogen pinaagi sa bayad nga pagpakaon sa ihi sa baka (ie, mga lim-aw) aron mapalambo ang mga kinaiya sa kasaysayan sa kinabuhi, susama sa ubang mga insekto [2, 4, 24, 25, 26]. .Ang mga babaye nga lamok nangita niini nga kahinguhaan pinaagi sa baho ug makahimo sa pag-regulate sa pagsuyup sa nitrogenous compounds sa ihi, lakip na ang urea, ang mayor nga nitrogenous component sa ihi [15, 16]. Depende sa pisyolohikal nga kahimtang sa babaye nga lamok, ang mga sustansya sa ihi gigahin aron sa pagpalambo sa kalihokan sa paglupad ug pagkaluwas sa host-seeking nga mga lamok nga babaye ug sa unang mga produkto sa lamok sa dugo. Busa, ang pagsagol sa ihi adunay importante nga nutritional nga papel alang sa malaria vectors nga sirado sama sa malnourished adults [8], tungod kay kini naghatag sa mga babaye nga lamok og abilidad sa pag-angkon og importante nga nitrogenous compounds pinaagi sa pag-apil sa ubos nga risgo nga pagpakaon.Kini nga pagpangita adunay mahinungdanon nga epidemiological nga mga sangputanan, tungod kay ang mga babaye nagdugang sa ilang gitas-on sa kinabuhi, kalihokan ug reproductive output, nga ang tanan mahimong makaapekto sa target nga pagdumala sa vector sa umaabot.