L-akkwist u d-distribuzzjoni tan-nutrijenti jintegraw l-għalf tal-insetti u l-karatteristiċi tal-istorja tal-ħajja. Biex jikkumpensaw għal nuqqasijiet f’nutrijenti speċifiċi fi stadji differenti tal-ħajja, l-insetti jistgħu jiksbu dawn in-nutrijenti permezz ta’ għalf supplimentari, pereżempju, billi jieklu minn tnixxijiet vertebrati fi proċess magħruf bħala għadajjar.arabiensis aġitazzjoni fuq l-awrina tal-baqra għall-akkwist ta 'nutrijenti ttejjeb il-karatteristiċi tal-istorja tal-ħajja.
Kun żgur li huwa safe.arabiensis kien attirat għall-riħa ta frisk, 24-siegħa, 72-siegħa, u 168-siegħa awrina baqra qodma, u ospitanti li jfittxu u mitmugħa bid-demm (48-siegħa wara l-ikla tad-demm) nisa kienu mkejla fl-Y-tube olfactometer, u nisa tqal u analiżi elettrokimika ġew magħquda għall-analiżi spawsing kienu użati biex spawns tqal. Identifika komposti bijoattivi fl-awrina tal-baqra fl-erba’ klassijiet ta’ età. Taħlitiet sintetiċi ta’ komposti bijoattivi ġew evalwati fi provi Y-tube u fuq il-post. Biex jiġu investigati l-awrina tal-baqra u l-urea komposta prinċipali tagħha li fiha nitroġenu bħala dieti supplimentari potenzjali għal vettori tal-malarja, tkejlu l-parametri tal-għalf u l-karatteristiċi tal-istorja tal-ħajja. ġew evalwati għas-sopravivenza, titjira marbuta, u riproduzzjoni.
Fittex għad-demm u n-nutriment tal-ospitanti. Fi studji fil-laboratorju u fuq il-post, l-Għarab kienu miġbuda għar-riħa naturali u sintetika tal-awrina tal-baqra friska u anzjana. , jew riproduzzjoni.
Akkwist ta 'Anopheles arabinis u distribuzzjoni ta' awrina tal-baqra għal karatteristiċi mtejba tal-istorja tal-ħajja. It-tmigħ supplimentari tal-awrina tal-baqra jaffettwa l-kapaċità tal-vettur direttament billi jżid is-sopravivenza ta 'kuljum u d-densità tal-vettur, u indirettament billi jbiddel l-attività tat-titjira u għalhekk għandu jiġi kkunsidrat f'mudelli futuri.
L-akkwist u d-distribuzzjoni tan-nutrijenti jintegraw l-għalf tal-insetti u l-karatteristiċi tal-istorja tal-ħajja [1,2,3]. L-insetti huma kapaċi jagħżlu u jakkwistaw ikel u jwettqu tmigħ kumpensatorju abbażi tad-disponibbiltà tal-ikel u r-rekwiżiti tan-nutrijenti [1, 3]. Id-distribuzzjoni tan-nutrijenti tiddependi fuq il-proċess tal-istorja tal-ħajja u tista 'twassal għal rekwiżiti differenti għall-kwalità u l-kwantità tad-dieta fi stadji differenti tal-ħajja tal-insetti permezz ta' nutrijenti. għalf supplimentari, bħal fuq it-tajn, ħmieġ varji u tnixxijiet ta 'vertebrati, u karru, proċess magħruf bħala għadajjar [2].Għalkemm varjetà ta' speċi ta 'farfett u kamla huma deskritti primarjament, toqob ta' tisqija jseħħu wkoll f'ordnijiet oħra ta 'insetti, u attrazzjoni għal u għalf fuq dawn it-tipi ta' riżorsi jista 'jkollhom effetti sinifikanti fuq is-saħħa u karatteristiċi oħra tal-ħajja [2, 6 ] 4 . nopheles gambiae sensu lato (sl) joħroġ bħala adult 'malnutrit' [8], għalhekk it-tisqija jista' jkollha rwol importanti fil-karatteristiċi tal-istorja tal-ħajja tagħha, iżda din l-imġieba s'issa ġiet traskurata. L-użu tal-aġitazzjoni bħala mezz biex tiżdied il-konsum ta' nutrijenti f'din il-vettura importanti jeħtieġ attenzjoni peress li dan jista' jkollu konsegwenzi epidemjoloġiċi importanti.
It-teħid tan-nitroġenu fin-nemus Anopheles nisa adulti huwa limitat minħabba riżervi ta’ kaloriji baxxi li jinġarru mill-istadju tal-larva u użu ineffiċjenti tal-ikla tad-demm [9].Ann. għalf supplimentari ta excreta vertebrati biex jakkwistaw komposti nitroġenużi li jtejbu l-adattament u l-manuvrabbiltà tat-titjira, kif muri minn insetti oħra [2].F'dan ir-rigward, l-attrazzjoni qawwija u distinta ta 'waħda mill-ispeċi aħwa fi ħdan An.Il-kumpless tal-ispeċi Gambian sl, Anopheles arabinis, awrina tal-baqra friska u anzjana [12,13,14 huwa magħruf li jospita l-preferenzi tagħha huwa magħruf li preferenzi tagħha hija assoċjata. e bi u għalf fuq il-baqar.L-awrina tal-baqra hija riżorsa rikka f'komposti nitroġenużi, bl-urea tammonta għal 50-95% tan-nitroġenu totali fl-awrina friska [15, 16]. Hekk kif l-awrina tal-baqra tixjieħ, il-mikro-organiżmi jużaw dawn ir-riżorsi biex inaqqsu l-kumplessità tal-komposti nitroġeniċi fi żmien 24 siegħa [15]. li minnhom jipproduċu komposti tossiċi għan-nemus) jirnexxu [15], li jistgħu jkunu femminili Ann.arabiensis hija preferenzjali attirata għall-awrina ta’ 24 siegħa jew inqas [13, 14].
F'dan l-istudju, kienu mfittxija Ans ospitanti u mitmugħa bid-demm. Matul l-ewwel ċiklu tagħha ta' gonadotropin, arabiensis ġiet ivvalutata għall-akkwist ta' komposti nitroġenużi, inkluża l-urea, permezz ta' taħlit ta' l-awrina. biex jiddeterminaw jekk dawn ipprovdewx ħjiel affidabbli għall ospitanti u mitmugħa bid-demm An.Fit-tfittxija tagħhom għal din ir-riżors nutrittiv potenzjali, arabiensis skoprew korrelazzjonijiet kimiċi wara l-attrazzjoni differenzjali osservati.Attrazzjoni tan-nemus.Ir-riżultati miksuba jikkonfermaw li An.arabiensis jakkwista u jqassam komposti nitroġenużi misjuba fl-awrina vertebrata biex jinfluwenzaw il-karatteristiċi tal-istorja tal-ħajja. Dawn ir-riżultati huma diskussi fil-kuntest ta 'konsegwenzi epidemjoloġiċi potenzjali u kif jistgħu jintużaw għas-sorveljanza u l-kontroll tal-vettur.
Anopheles arabicans (razza Dongola) inżammu f'25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH u 12:12 h dawl: ċiklu skur. Il-larva kienu mrobbija fi trejs tal-plastik (20 cm × 18 cm × 7 cm) mimlija bl-ilma distillat u mitmugħa Tetramin® ikel tal-ħut (Ml 30 Ml ġew miġbura) lato Hertila, Åstorp, SE) u mbagħad trasferiti għal gaġeġ Bugdorm (30 ċm × 30 ċm × 30 ċm; MegaView Science, Taichung, Tajwan) biex jippermettu l-emerġenza ta 'adulti. L-adulti ġew ipprovduti b'soluzzjoni ta' sukrożju 10% ad libitum sakemm 4 ijiem wara l-emerġenza (dpe), f'liema punt ġew offruti l-esperimenti ta 'l-ilma qabel il-lejl qabel il-mara ġew distillati qabel, kif deskritt hawn taħt.Nisa użati għall-esperimenti tat-tubi tat-titjir kienu ġuħ għal 4-6 sigħat biss bl-ilma ad libitum.Biex jippreparaw nemus li jerdgħu d-demm għal bioassays sussegwenti, nisa 4 dpe ġew ipprovduti b’demm tan-nagħaġ defibrotic (Håtunalab, Bro, SE) bl-użu ta’ sistema ta’ tmigħ bil-membrana (Hemotek Discovery Workshops, Accrlyingtons kienu deskritti direttament bħala nisa deskritti u trasferiti direttament lil nisa fir-Renju Unit). hawn taħt, jew 10% sukrożju ad libitum għal 3 ijiem qabel l-esperimenti deskritti hawn taħt.In-nisa tal-aħħar intużaw għal bioassays tat-tubi tat-titjir u ttrasferiti għal-laboratorju, u mbagħad kellhom ilma distillat ad libitum għal 4-6 sigħat qabel l-esperiment.
Intużaw analiżi tal-għalf biex jikkwantifikaw il-konsum tal-awrina u tal-urea f'nisa An.Arab adulta. In-nisa li jfittxu l-ospiti u mitmugħa bid-demm ġew ipprovduti dieta li fiha 1% awrina tal-baqra friska u maturata dilwita, konċentrazzjonijiet varji ta 'urea, u żewġ kontrolli (10% sukrożju u ilma) għal 48 siegħa. 1; Sigma-Aldrich, Stokkolma, SE) ġie miżjud mad-dieta u fornut f'matriċi 4 × 4 f'tubi mikroċentrifuga ta' 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Figura 1A) Imla sat-tarf (~ 300 µl). f'dijametru u 6 ċm għoli; Semadeni, Ostermundigen, CH; Figura 1A) fid-dlam sħiħ f'25 ± 2 ċm °C u 65 ± 5% umdità relattiva.Dawn l-esperimenti ġew ripetuti 5 sa 10 darbiet.Wara espożizzjoni għad-dieta, in-nemus tqiegħdu f'-20 °C sa aktar analiżi.
Fittex l-awrina bovina u l-urea assorbita mill-mara Anopheles arabianus ospitanti u li terda d-demm. Fil-prova tal-għalf (A), in-nemus femminili ġew ipprovduti b’dieta li tikkonsisti f’awrina tal-baqra friska u maturata, diversi konċentrazzjonijiet ta’ urea, sukrożju (10%), u ilma distillat (H2O). -nisa li jfittxu assorbew awrina tal-baqra ta' 72 siegħa inqas minn awrina tal-baqra ta' 168 siegħa (B).Il-kontenut medju totali ta' nitroġenu (± devjazzjoni standard) ta 'l-awrina huwa rappreżentat fil-parti ta' ġewwa. In-nisa li jfittxu l-ospiti (D, F) u li jerdgħu d-demm (E, G) jieħdu l-urea b'mod dipendenti mid-doża. ANOVA bl-użu tal-analiżi post hoc ta' Tukey, p < 0.05).Il-vireg tal-iżball jirrappreżentaw żball standard tal-medja (BE).Il-linja dritta b'sing tirrappreżenta l-linja ta' rigressjoni log-lineari (F, G)
Biex tirrilaxxa l-ikel assorbit, in-nemus tpoġġew individwalment f'tubi mikroċentrifuga ta' 1.5 ml li kien fihom 230 µl ta' ilma distillat u t-tessut ġie mfixkel bl-użu ta' lida li tintrema u mutur mingħajr fili (VWR International, Lund, SE), segwit minn ċentrifugazzjoni f'10 krpm għal 10 min (20 µl ta' l-ilma). gma-Aldrich) u l-assorbiment (λ620) ġew determinati bl-użu ta 'mikroplate reader ibbażat fuq spettrofotometru (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm).B'mod alternattiv, in-nemus ġew mitħun f'1 ml ta' ilma distillat, li 900 µl minnhom ġew trasferiti għal analiżi ta 'kuvette shiftro20, λ spectrofotometrika għall-UVK1; ista, SE). Biex tikkwantifika l-konsum tad-dieta, ġiet ippreparata kurva standard permezz ta 'dilwizzjoni serjali biex tagħti 0.2 µl sa 2.4 µl ta' 1 mg ml-1 xylene cyanide. Imbagħad, id-densità ottika ta 'konċentrazzjonijiet ta' żebgħa magħrufa ġiet użata biex tiddetermina l-ammont ta 'ikel li kull nemus inġerit.
Id-dejta tal-volum ġiet analizzata bl-użu ta' analiżi ta' varjanza f'direzzjoni waħda (ANOVA) segwita minn paraguni ta' pari post hoc ta' Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). Analiżi ta' rigressjoni lineari ddeskrivew il-konsum tal-urea li jiddependi mill-konċentrazzjoni u t-tweġibiet imqabbla bejn l-hostes-s. 0 għal Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
Madwar 20 µl ta’ kampjuni ta’ awrina minn kull grupp ta’ età kienu marbuta ma’ Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) u inkapsulati f’kapsuli tal-landa (8 mm × 5 mm). rina skont il-protokoll tal-manifattur.Nitroġenu totali (g N l-1) ġie kkwantifikat abbażi tal-konċentrazzjonijiet magħrufa tal-urea użati bħala standard.
Biex jiġi evalwat l-effett tad-dieta fuq is-sopravivenza tan-nisa li jfittxu l-ospitanti u li terda’ d-demm, in-nemus tpoġġew individwalment f’platti Petri kbar (12 ċm fid-dijametru u 6 ċm għoli; Semadeni) b’toqba miksija b’malja fl-għatu (3 ċm fid-dijametru) b’Għall-ventilazzjoni u l-provvista tal-ikel. , u żewġ kontrolli, 10% sukrożju u ilma.Kull dieta kienet pipettata fuq tampon dentali (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) mdaħħla f’siringa ta’ 5 ml (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), il-planġer jitneħħa, u mqiegħda fuq dixx petri (figura 1.1 Surviveting to your deskritti fuq kull jum).1. ġew magħduda darbtejn kuljum, filwaqt li n-nemus mejta ġew mormija sakemm miet l-aħħar nemus (n = 40 għal kull trattament). Is-sopravivenza tan-nemus mitmugħa b’diversi dieti ġiet analizzata statistikament bl-użu ta’ kurvi ta’ sopravivenza Kaplan-Meyer u testijiet ta’ log-rank biex iqabblu t-tqabbil tad-distribuzzjoni tas-sopravivenza bejn id-dieti (IBM SPSS Statistics.004.0).
Mitħna tad-dwana tat-titjir tan-nemus ibbażata fuq Attisano et al.[17], magħmula minn pannelli akriliċi ċari ħoxnin ta’ 5 mm (10 ċm wisa x 10 ċm twil x 10 ċm għoli) mingħajr pannelli ta’ quddiem u ta’ wara (Fig. 3: top). Assemblaġġ tal-pern b’tubu vertikali magħmul minn kolonna tal-kromatografija tal-gass (0.25 mm id; um kalamiti 9 ċm 'il bogħod minn xulxin.Tubu orizzontali magħmul mill-istess materjal (6.5 ċm L) qassam it-tubu vertikali f'biss biex jifforma driegħ marbut u driegħ li kien iġorr biċċa żgħira ta' fojl tal-aluminju bħala sinjal li jinterrompi d-dawl.
In-nisa 24-siegħa bil-ġuħ ingħataw id-dieta ta 'hawn fuq għal 30 minuta qabel it-trażżin. In-nemus femminili mitmugħa kompletament ġew imbagħad anestetizzati individwalment fuq is-silġ għal 2-3 min u mwaħħla ma' labar tal-insetti b'xama' tan-naħal (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) u mbagħad marbuta b'tubu orizzontali mill-mitħna. -built data logger, imbagħad maħżuna u murija bl-użu ta 'softwer PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE).Il-mitħna tat-titjira tqiegħdet f'kamra regolata bil-klima (12 h:12 h, dawl: skur, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Biex tiġi viżwalizzata l-mudell tal-attività tat-titjira, id-distanza totali mtajra (m) u n-numru totali ta 'attivitajiet ta' titjir konsekuttivi ġew ikkalkulati kull siegħa fuq perjodu ta '24 siegħa. ta' rawnds huwa kkalkulat f'żidiet ta' 10 minuti.
Biex jiġi evalwat l-effett tad-dieta fuq il-prestazzjoni riproduttiva ta 'An.arabiensis, sitt nisa (4 dpe) ġew trasferiti direttament għal gaġeġ Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) wara l-ġbir tad-demm u mbagħad ipprovdew id-dieta sperimentali għal 48 siegħa kif deskritt hawn fuq. Id-dieti mbagħad tneħħew u tazzi riproduttivi (30 ml; 30 ml; 24 siegħa.Irrepeti kull reġimen tad-dieta 20-50 darba.Bajd kien magħdud u rreġistrat għal kull gaġġa sperimentali.Intużaw sottokampjuni ta’ bajd biex jevalwaw id-daqs medju u l-varjazzjoni fit-tul ta’ bajd individwali (n ≥ 200 għal kull dieta) bl-użu ta’ mikroskopju Dialux-20 (DM1000; 2;Leica Microsystems Ltd., DE).Il-bajd li kien fadal inżamm f'kamra ikkontrollata bil-klima taħt kundizzjonijiet ta' trobbija standard għal 24 siegħa, u subkampjun ta' larva tal-ewwel stadju li ħarġu reċentement (n ≥ 200 għal kull dieta) ġew imkejla, kif deskritt hawn fuq. JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Inġabru volatili tal-ispazju tar-ras minn awrina friska (siegħa wara t-teħid tal-kampjun), 24 siegħa, 72 siegħa u 168 siegħa minn kampjuni miġbura minn baqar Żebu, razza Arsi. Għall-konvenjenza, kampjuni tal-awrina nġabru kmieni filgħodu waqt li l-baqar kienu għadhom fil-barn. (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) fi 3 l polyamide b'għatu Fi tnabar tal-plastik tal-klorur tal-vinil.Vatili tal-ispazju tar-ras minn kull kampjun ta 'awrina bovina nġabru jew direttament (frisk) jew wara maturazzjoni f'temperatura tal-kamra għal 24 h, 72 h u 168 h, jiġifieri kull kampjun ta' grupp ta 'età ta' l-awrina kien rappreżentattiv.
Għall-ġbir volatili headspace, intużat sistema closed-loop biex tiċċirkola fluss tal-gass iffiltrat bil-karbonju attivat (100 ml min-1) minn borża tal-poliamide għall-kolonna ta 'adsorbiment għal 2.5 sigħat bl-użu ta' pompa tal-vakwu tad-dijaframma (KNF Neuberger, Freiburg, DE). x 3 mm id) li fih 35 mg ta 'Porapak Q (malji 50/80; Waters Associates, Milford, MA, US) bejn plugs tas-suf tal-ħġieġ. μl ta 'pentane.Kollezzjonijiet tal-ispazju tar-ras ġew miġbura flimkien u mbagħad maħżuna f'-20 ° C sakemm intużaw għal aktar analiżi.
Risposti ta 'mġieba ta' estratti volatili An.Headspace li jfittxu u jieklu d-demm miġbura minn awrina friska, 24-h, 72-h, u 168-h-aged ġew analizzati għal estratti volatili minn Arabidopsis mosquitoes bl-użu ta 'olfattometru ta' tubu tal-ħġieġ dritta [18]. ].A olfactometer tubu tal-ħġieġ (80 ċm × 9.5 ċm id) kien imdawwal bi 3 ± 1 lx ta 'dawl aħmar minn fuq.Faħam tal-kannol iffiltrat u fluss ta' arja umidifikata (25 ± 2 °C, 65 ± 2% umdità relattiva) għadda l-bioassay fi 30 ċm s-1.Air huwa mgħoddi minn stainless steel serje ta 'fluss ta' skrin tal-uniformi. dispenser tampuni (4 ċm × 1 ċm; L: D; DAB Dental AB), sospiż minn coil ta '5 ċm fuq it-tarf tar-riħ tal-olfattometer, b'bidliet stimulator kull 5 minuti. Għall-analiżi, 10 μl ta' kull estratt headspace, dilwit 1:10, intuża bħala stimulu. gaġeġ 2-3 sigħat qabel il-bidu tal-esperiment.Il-gaġġa tar-rilaxx tpoġġiet fuq in-naħa tar-riħ tal-olfattometer, u n-nemus tħallew jakklimataw għal 1 min, u mbagħad il-valv tal-farfett tal-gaġġa nfetaħ biex jirrilaxxa. L-attrazzjoni għat-trattament jew il-kontroll ġiet analizzata bħala l-proporzjon ta 'nemus li ġew f'kuntatt mal-kontroll ta' l-ispazju 5 minuti, estratt ta 'l-ispazju ta' l-inqas 5 ħinijiet. u biex jiġu evitati l-effetti ta 'kwalunkwe ġurnata waħda, l-istess numru ta' trattamenti u kontrolli ġew ittestjati f'kull jum sperimentali. Fittex tweġibiet minn Ans.Arabic kontra settijiet ta 'headspace ġew analizzati bl-użu ta' rigressjoni loġistika nominali segwit minn paraguni f'pari għal proporzjonijiet fard (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Ir-rispons tat-tbid ta' An. Estratti tal-ispazju tar-ras mill-awrina tal-baqra friska u ta' età ġew analizzati f'gaġeġ Bugdorm (30 ċm × 30 ċm × 30 ċm; MegaView Science) ta' kull estratt headspace f'dilwizzjoni 1:10.Ammont ugwali ta 'pentan intuża biex jaġġusta t-tazza ta' kontroll.Trattament u tazzi ta 'kontroll ġew skambjati bejn kull esperiment biex jikkontrollaw għall-effetti tal-pożizzjoni.Għaxar nisa mitmugħa bid-demm ġew rilaxxati f'gaġeġ sperimentali f'ZT 9-11 u bajd fi tazzi ngħaddu 24 siegħa wara għall-kalkolu. in-numru ta 'bajd imqiegħed fit-tazza tal-kontroll)/(in-numru totali ta' bajd imqiegħed).Kull trattament ġie ripetut 8 darbiet.
Analiżi ta 'skoperta tal-mudell ta' l-antenna tal-gass kromatografika u ta 'elettroni (GC-EAD) ta' An.arabiensis femminili twettqet kif deskritt qabel [20].Fil-qosor, estratti volatili ta 'headspace friski ġew separati bl-użu ta' Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) mgħammra b'kolonna HP-5 (30 m × 0.25 mm id, Agilent Teknoloġiji ħxuna 0.25 mm, μ Agilent film).u awrina li qed tixjieħ.L-idroġenu ntuża bħala l-fażi mobbli b'rata ta 'fluss lineari medja ta' 45 ċm s-1.Kull kampjun (2 μl) ġie injettat għal 30 sekonda f'modalità splitless b'temperatura ta 'dħul ta' 225 °C.It-temperatura tal-forn GC kienet ipprogrammata minn 35 °C (3 minuti hold) għal 300 °C 100 °C f'minuti (100 °C) f'temperatura ta' 100 °C. splitter, 4 psi ta 'nitroġenu ġie miżjud u maqsum 1:1 f'Gerstel 3D/2 salib ta' volum mejjet baxx (Gerstel, Mülheim, DE) bejn id-ditekter tal-jonizzazzjoni tal-fjamma u l-EAD. Il-kapillari tal-effluwent GC għall-EAD kien mgħoddi minn linja ta 'trasferiment Gerstel ODP-2, li jsegwi t-temperatura tal-forn GC flimkien ma' tubu tal-ħġieġ imħallat b'karbonju 5 °C (cm), fejn ġie mħallat 5 °C, 10 mm arja midifikata (1.5 l min-1).L-antenna tqiegħdet 0.5 ċm mill-iżbokk tat-tubu.Kull nemus individwali ammontaw għal replika waħda, u għan-nemus li jfittxu l-ospitanti, saru mill-inqas tliet repliki fuq kampjuni tal-awrina ta 'kull età.
Identifikazzjoni ta’ komposti bijoattivi f’kollezzjonijiet ta’ headspace ta’ awrina bovina friska u matura bl-użu ta’ spettrometru tal-massa u GC kombinat (GC-MS; 6890 GC u 5975 MS; Agilent Technologies) biex iġibu risponsi antennali fl-analiżi GC-EAD, li joperaw f’modalità ta’ jonizzazzjoni b’impatt elettroniku f’70 eV. 25 mm dijametru ta 'ġewwa, 0.25 μm ħxuna tal-film) bl-użu tal-elju bħala l-fażi mobbli b'rata ta' fluss lineari medja ta '35 ċm s-1.A 2 μl kampjun ġie injettat bl-użu tal-istess settings tal-injettur u temperatura tal-forn bħal għall-analiżi GC-EAD. komposti dentifikati ġew ikkonfermati bl-injezzjoni ta 'standards awtentiċi (Fajl Addizzjonali 1: Tabella S2). Għall-kwantifikazzjoni, heptyl acetate (10 ng, 99.8% purità kimika, Aldrich) ġie injettat bħala standard estern.
Evalwazzjoni tal-effikaċja ta' taħlita ta' riħa sintetika li tikkonsisti f'komposti bijoattivi identifikati f'awrina friska u matura biex tattira Ans.arabiensis li jfittxu l-ospitanti u li terda' d-demm, bl-użu tal-istess olfattometru u protokoll bħal hawn fuq. It-taħlitiet sintetiċi imitaw il-kompożizzjoni u l-proporzjonijiet tal-komposti f'estratti volatili mħallta tal-ispazju tar-ras ta' frisk, 248-hour, 248-hour u 248-hour. Ur awrina anzjana (Figura 5D-G; Fajl Addizzjonali 1: Tabella S2). Għall-analiżi, uża 10 μl ta 'dilwizzjoni 1:100 tat-taħlita kompletament sintetika, b'rata ta' rilaxx ġenerali li tvarja minn madwar 140-2400 ng h-1, għall-valutazzjoni tal-attrazzjoni għall-ospitanti u l-irdigħ tad-demm. komposti singoli tat-taħlita sħiħa huma mneħħija.Fittex tweġibiet minn ospitanti u mitmugħa bid-demm Ans.Arab vs taħlitiet sintetiċi u sottrattivi ġew analizzati bl-użu ta 'rigressjoni loġistika nominali segwit minn paraguni f'pari għal proporzjonijiet fard (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Biex jiġi vvalutat jekk l-awrina tal-baqra setgħetx isservi bħala sinjal ta 'ħabitat ospitanti għan-nemus tal-malarja, l-awrina tal-baqra friska u anzjana, miġbura kif deskritt hawn fuq, u l-ilma tqiegħdu f'bramel b'malji ta' 3 l (100 ml) u stabbiliti f'nases tal-lixka ospitanti.(Verżjoni BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE). Għaxar nases imqiegħda 50 m 'il bogħod minn xulxin fil-mergħa, 400 m mill-komunità tar-raħal (Silay, Etjopja, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) u l-ebda baqar, f'postijiet ta' trobbija permanenti u rħula. imdawra filgħaxija għal total ta 'ħames iljieli.Numri tan-nemus maqbuda f'nases lixka bl-awrina ta' etajiet differenti tqabblu bl-użu ta 'rigressjoni loġistika b'distribuzzjoni binomjali beta (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
F'raħal endemiku tal-malarja ħdejn il-belt ta' Maki, ir-reġjun ta' Oromia, l-Etjopja (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Figura 6A). L-istudju sar bejn nofs Awissu u nofs Settembru qabel il-bexx residwu annwali ta’ ġewwa, flimkien ma’ staġun tax-xita twil ta’ raħal 50. magħżula għall-istudju (Fig. 6A).Il-kriterji użati biex jintgħażlu d-djar kienu: l-ebda annimali permessi fid-dar, l-ebda tisjir fuq ġewwa (tpinġija ħatab jew faħam) ma kien permess (mill-inqas matul il-perjodu ta 'prova), u djar b'massimu ta' żewġ abitanti, jorqdu f'uninsettiċidi.taħt in-nemus trattati. Approvazzjoni etika ngħatat mill-Bord ta’ Reviżjoni tal-Etika tar-Riċerka Istituzzjonali (IRB/022/2016) tal-Fakultà tax-Xjenzi Naturali (CNS-IRB), Università ta’ Addis Ababa, skont il-linji gwida stabbiliti mid-Dikjarazzjoni tal-Assoċjazzjoni Medika Dinjija ta’ Helsinki. "kebele"). Id-disinn sperimentali segwa disinn kwadru Latin 2 × 2, li fih taħlitiet sintetiċi u kontrolli ġew assenjati għal djar paired fl-ewwel lejl u skambjati bejn djar fil-lejl sperimentali li jmiss.Dan il-proċess ġie ripetut għaxar darbiet.
Taħlita sintetika li fiha sitt komposti bijoattivi ġiet maħlula fl-heptane (97.0% solvent GC grad, Sigma Aldrich) u rilaxxata f'140 ng H-1 bl-użu ta 'dispenser tal-qasab tal-qoton [20]. Id-dispenser tal-qasab ippermetta li l-komposti kollha jiġu rilaxxati fi proporzjonijiet kostanti matul it-12-il siegħa. (CDC) Nassa ħafifa (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Figura 6A). In-nases kienu mdendlin 0.8 - 1 m 'il fuq mill-art, ħdejn is-sieq tas-sodda, u voluntier raqdu taħt xibka tan-nemus mhux trattati u operaw bejn is-sess u l-istat tas-sess u 06 Bl-użu ta 'analiżi ta' reazzjoni fil-katina tal-polimerażi (PCR) biex tidentifika l-ispeċi identifikata morfoloġikament bħala A. gambiae SL. Membri tal-kumpless [23]. Fl-istudju fuq il-post, l-insib tan-nassa ta 'djar imqabbla ġie analizzat bl-użu ta' mudell ta 'tajbin loġistiku nominali, fejn l-attrazzjoni kienet il-varjabbli u t-trattament dipendenti (taħlita sintetika vs kontroll) kien l-effett fiss (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.).Hawnhekk, nirrapportaw il-valuri χ2 u p mit-test tal-proporzjon tal-probabbiltà.
Evalwa jekk huwiex sigur.arabiensis setgħet tikseb l-awrina, is-sors ewlieni tagħha ta’ nitroġenu, urea, permezz ta’ tmigħ dirett, fi żmien 48 siegħa mill-amministrazzjoni għal 4 ijiem wara (dpe) provi ta’ tmigħ tan-nisa li jfittxu l-ospitanti u mitmugħa bid-demm (Fig. 1A). 0001 u F (5,299) = 56.00, p < 0.0001, rispettivament, Fig. ed għall-konċentrazzjonijiet u l-ilma l-oħra kollha, filwaqt li ma jistgħux jintgħarfu minn 10% sukrożju (F(10,813) = 15.72, p <0.0001; Figura 1D).Dan kien b'kuntrast mar-rispons ta 'nisa mitmugħa bid-demm, li tipikament assorbit b'mod sinifikanti aktar dieti li fihom l-urea minn ilma, għalkemm (170% inqas sucrose, 170% b'mod sinifikanti). 5, p < 0.0001; Figura 1).1E).Barra minn hekk, meta tqabbel bejn iż-żewġ stati fiżjoloġiċi, in-nisa flebotomizzati assorbew aktar urea minn nisa li jfittxu l-ospitanti fl-inqas konċentrazzjonijiet, u dawn in-nisa assorbew ammonti simili ta 'urea f'konċentrazzjonijiet ogħla (F (1,953) = 70.80.Fig. 1F, G). Filwaqt li l-konsum minn dieta li fiha l-urea deher li kellu valuri ottimali (Fig. 1D, E), in-nisa fiż-żewġ stati fiżjoloġiċi setgħu jimmodulaw l-ammont ta 'urea assorbita fuq il-firxa kollha ta' konċentrazzjonijiet ta 'urea b'mod log-lineari (Fig. 1F, G).). Bl-istess mod, in-nemus jidhru li jikkontrollaw l-assorbiment tan-nitroġenu tagħhom billi jirregolaw l-ammont ta 'awrina assorbit, peress li l-ammont ta' nitroġenu fl-awrina huwa rifless fl-ammont assorbit (Figura 1B, C u B insets).
Biex jiġu evalwati l-effetti ta 'l-awrina u l-urea fuq is-sopravivenza tan-nemus li jfittxu u li jirdgħu d-demm, in-nisa ġew mitmugħa awrina ta' l-erba 'etajiet kollha (frisk, 24 h, 72 h, u 168 h wara d-depożizzjoni) u firxa ta' konċentrazzjonijiet ta 'urea, kif ukoll ilma distillat u 10 % sukrożju servew bħala analiżi ta' sopravivenza sinifikanti (Figura 2). fin-nisa li jfittxu l-ospitanti (awrina: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Fig. 2B, C) u nisa mitmugħa bid-demm (awrina: χ2 = 0.0001 = p. 2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Figura 2D, E).Fl-esperimenti kollha, in-nisa mitmugħa dieta ta 'awrina, urea, u ilma kellhom rati ta' sopravivenza sinifikament aktar baxxi meta mqabbla ma 'nisa mitmugħa dieta sukrożju (Figura 2B-E). 0.016) li għandhom l-inqas probabbiltà ta 'sopravivenza (Fig. 2B). Barra minn hekk, nisa li jfittxu ospitanti mitmugħa 135 mM urea baqgħu ħajjin itwal mill-kontrolli tal-ilma (p <0.04) (Fig.2C).Imqabbla mal-ilma, in-nisa mitmugħa b'awrina friska u awrina ta '24 siegħa baqgħu ħajjin itwal (p = 0.001 u p = 0.012, rispettivament; Figura 2D), filwaqt li n-nisa mitmugħa b'awrina ta' 72 siegħa baqgħu ħajjin itwal minn dawk mitmugħa Awrina friska qasira femminili u awrina ta 'età ta' 24 siegħa =, 0.001 u p. mt mitmugħa 135 mM urea, nisa mitmugħa bid-demm baqgħu ħajjin itwal mill-konċentrazzjonijiet l-oħra kollha ta 'urea u ilma (p <0.013; Figura 2E).
Sopravivenza ta' Anopheles arabinis femminili ospitanti u li terda' d-demm li jieklu bl-awrina tal-baqra u l-urea. Fil-bijoassay (A), in-nemus nisa ngħataw dieta li tikkonsisti f'awrina tal-baqra friska u matura, konċentrazzjonijiet varji ta' urea, sukrożju (10%) u ilma distillat (H2O). nisa mitmugħa bl-awrina (B, D) u l-urea (C, E), u l-kontrolli, Sukrożju u ilma, huma mejta
Id-distanza totali u n-numru ta 'rawnds determinati fit-test tal-mitħna tat-titjira fuq perjodu ta' 24 siegħa kienu differenti bejn in-nemus li jfittxu l-ospiti u dawk li jerdgħu d-demm, li wrew inqas attività ta 'titjira b'mod ġenerali (Fig. 3). Nemus ta' età ta' 68 siegħa li kienu mitmugħa bl-awrina urew xejriet ta' titjir differenti u kienu primarjament matul il-ġurnata. In-nemus femminili li pprovdew sukrożju jew awrina ta' 72 siegħa wrew attività matul il-perjodu ta' 24 siegħa, filwaqt li n-nisa li pprovdew l-ilma kienu aktar attivi matul il-perjodu ta' nofs. awrina ur-aged esperjenzat tnaqqis kostanti fl-attività fuq 24 siegħa (Figura 3).
Prestazzjoni tat-titjira ta 'Anopheles arabinis femminili li terda' demm li jfittxu l-kaċċaturi li jieklu l-awrina tal-baqra u l-urea. Fit-test tal-mitħna tat-titjir, in-nemus femminili mitmugħa b'awrina tal-baqra friska u anzjana, diversi konċentrazzjonijiet ta 'urea, sukrożju (10%), u ilma distillat (H2O) kienu marbuta ma' orizzontali, li jduru liberament (Għal armi hostleft ()abeight) u d-demm. id-distanza u n-numru ta’ titjiriet fis-siegħa għal kull dieta fuq perjodu ta’ 24 siegħa ġew irreġistrati (dlam: griż; dawl: abjad). Id-distanza medja u n-numru medju ta’ attakki huma murija fuq il-lemin tal-grafika tal-attività ċirkadjana. Il-vireg tal-iżball jirrappreżentaw żball standard tal-medja.Analiżi statistika ara t-test
B'mod ġenerali, l-attività ġenerali tat-titjira tan-nisa li qed ifittxu l-ospitanti segwiet mudell simili għal dak tad-distanza tat-titjira fuq perjodu ta’ 24 siegħa. nemus mitmugħa crose tellgħu itwal minn frisk (p = 0.022) u awrina 24-siegħa (p = 0.022) mitmugħa nemus.B'kuntrast mal-mudell ta 'attività tat-titjira deskritta mid-dieta ta' l-awrina, nisa li jfittxu ospitanti mitmugħa bl-urea urew attività ta 'titjira persistenti fuq 24-siegħa attività ta' titjira. -nisa li jfittxu mitmugħa urea żiedu b'mod sinifikanti d-distanza medja tat-titjira skont il-konċentrazzjoni assorbita (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001).Nisa li jfittxu host mitmugħa kwalunkwe konċentrazzjoni ta 'urea tellgħu itwal minn nisa mitmugħa jew ilma jew sukrożju (p <0.03).
L-attività ġenerali tat-titjira tan-nemus li jerdgħu d-demm kienet stabbli u sostnuta fuq 24 siegħa fid-dieti kollha, b'żieda fl-attività tal-awrina matul it-tieni nofs tal-perjodu mudlam għan-nisa mitmugħa bl-ilma kif ukoll fin-nisa mitmugħa friski u 24 siegħa (immaġni 3). ma (F (5, 138) = 1.36, p = 0.24) .ma 'l-awrina oħra u dieta ta' kontroll (frisk, p = 0.0091; 72 siegħa, p = 0.0022; 168 siegħa, p = 0.001; sukrożju, p = 0.0017; p = 0.0017; dH).
L-effetti ta 'l-awrina u l-għalf ta' l-urea fuq il-parametri riproduttivi ġew evalwati f'bioassays li jbidu l-bajd (Figura 4A) u ġew investigati skond in-numru ta 'bajd imqiegħda minn kull mara, daqs tal-bajd, u larva ta' l-ewwel stadju li għadhom kif ifaqqsu. In-numru ta 'bajd imqiegħed. Fig. 4B). In-nisa mitmugħa awrina ta’ 24 siegħa, ikla tad-demm poġġew bajd b’mod sinifikanti aktar minn nisa mitmugħa dieti oħra tal-awrina u kienu simili għal dawk mitmugħa sukrożju (Fig. 4B). nisa mitmugħa bis-sukrożju li jbid bajd akbar minn nisa mitmugħa bl-ilma, filwaqt li l-bajd tan-nisa mitmugħa b'168 siegħa ta 'awrina kienu iżgħar b'mod sinifikanti (Fig. 4C). Barra minn hekk, id-dieta tal-awrina affettwat b'mod sinifikanti d-daqs tal-larva (F (5, 187) = 7.86, p < 0.0000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000 Nisa mitmugħa bl-awrina ta' 72 siegħa milli minn bajd imqiegħed minn larva tal-bajd. Nisa mitmugħa bl-ilma u 168 siegħa mitmugħa bl-awrina (Figura 4D).
Prestazzjoni riproduttiva tan-nisa Anopheles arabinis għalf bl-awrina tal-baqra u l-urea.Nemus nisa mitmugħa bid-demm kienu mitmugħa dieti li jikkonsistu f'awrina tal-baqra friska u anzjana, konċentrazzjonijiet varji ta 'urea, sukrożju (10%), u ilma distillat (H2O) għal 48 siegħa qabel ma tqiegħdu f'bioassays u kisbu numru ta' bajd (B, E48) sigħat (B, E sottostrati) daqs rvae (D, G) kienu affettwati b'mod sinifikanti mid-dieta pprovduta (awrina tal-baqra: BD; urea: EG).Mezzi għal kull parametru mkejla bl-użu ta 'ismijiet ta' ittri differenti kienu differenti b'mod sinifikanti minn xulxin (ANOVA f'direzzjoni waħda bl-użu ta 'analiżi post hoc ta' Tukey; p < 0.05). Il-vireg ta 'żball jirrappreżentaw żball standard tal-medja
Bħala l-komponent tan-nitroġenu ewlieni tal-awrina, l-urea, meta pprovduta bħala dieta lil nisa mitmugħa bid-demm, affettwat b'mod sinifikanti l-parametri riproduttivi fl-istudji kollha. poġġew aktar bajd (Figura 4E).Nisa mitmugħa b’konċentrazzjonijiet ta’ urea ta’ 134 µM jew aktar ibidu bajd akbar minn nisa mitmugħa bl-ilma (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Figura 4F), u daqs tal-larva, għalkemm affettwati minn konċentrazzjonijiet simili ta’ urea (3.0.1; 0001) kien aktar varjabbli (Fig. 4G).
Attrazzjoni ġenerali għal estratti volatili ta 'l-ispazju tar-ras ta' l-awrina bovina li qed ifittxu. L-arabienis evalwat fl-olfattometru tat-tubu tal-ħġieġ (Fig. 5A) kien affettwat b'mod sinifikanti mill-età ta 'l-awrina (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fig. 5B). trattamenti oħra (72 siegħa: p = 0.0060, 168 siegħa: p = 0.012, pentan: p = 0.00070), Ħlief għar-riħa ta 'awrina friska (p = 0.13; Figura 5B) .Għalkemm l-attrazzjoni ġenerali ta 'nemus li jerdgħu d-demm ma kienx = lyuri riħa differenti = 84 χ 0. .067; Fig. 5C), dawn in-nisa nstabu li huma sinifikament aktar attraenti għall-estratti volatili headspace meta mqabbla ma 'l-awrina ta' 72 siegħa meta mqabbla mal-kontrolli (p = 0.0066; Figura 5C).
Reazzjonijiet komportamentali għall-irwejjaħ naturali u sintetiċi tal-awrina tal-baqra fit-tfittxija għal Anopheles arabianus ospitanti u mitmugħa bid-demm. L-awrina tal-baqra ta' età ta' 72 siegħa (F), u 168 siegħa (G) huma murija. It-traċċi ta' sejbien tal-antenna tal-elettron (EAD) juru bidliet fil-vultaġġ b'rispons għal komposti bijoattivi fl-ispazju tar-ras eluż mill-kromatografu tal-gass u misjuba minn detector tal-jonizzazzjoni tal-fjamma (FID). komposti huma murija.Asterisk wieħed (*) jindika rispons konsistenti ta 'amplitudni baxxa.Asterisks doppji (**) jindikaw tweġibiet mhux riproduċibbli.Sib l-ospitanti (H) u l-irdigħ tad-demm (I) An.arabiensis għandha appelli differenti għal taħlitiet sintetiċi ta' rwejjaħ ta 'awrina tal-baqra friska u ta' età. c analiżi;p < 0.05). Il-vireg tal-iżball jirrappreżentaw żball standard tal-iskala
Female Ann.arabiensis, 72 h u 120 h wara ikla tad-demm, waqt it-tnissil, ma ntweriet l-ebda preferenza għal estratti volatili headspace minn awrina tal-baqra friska u anzjana meta mqabbla ma 'kontrolli tal-pentan (χ2 = 3.07, p> 0.05; Fajl addizzjonali 1: Fig. S1).
Għal analiżi femminili Ann.arabiensis, GC-EAD u GC-MS identifikaw tmien, sitt, tlieta u tliet komposti bijoattivi (Figura 5D-G). hold ġew inklużi f'analiżi ulterjuri.
Ir-rata totali ta 'rilaxx volatili ta' komposti bijoattivi fil-kollezzjoni headspace żdiedet minn 29 µg h-1 fl-awrina friska għal 242 µg h-1 f'awrina maqdem 168 siegħa, prinċipalment minħabba p-cresol u m-formaldehyde Phenol żidiet kif ukoll phenol. lated bit-tnaqqis osservat fl-intensità tas-sinjal (abbundanza) fil-kromatogramma (Fig. 5D) -G panel tax-xellug) u risponsi fiżjoloġiċi għal dawn il-komposti (Fig. 5D-G panel tal-lemin).
B'mod ġenerali, it-taħlita sintetika kellha proporzjon naturali simili ta 'komposti bijoattivi identifikati f'estratti volatili ta' headspaces ta 'l-awrina friska u antika (Fig. 5D-G) u ma dehritx li tqanqal appell sinifikanti fit-tfittxija għal ospitanti (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Fig. 5H ) jew demm = 4 = 4. = 0.30; Fig. 5I).Madankollu, paraguni post hoc pairwise bejn it-trattamenti wrew li n-nemus li jfittxu l-ospitanti kienu attraenti b'mod sinifikanti għat-taħlita sintetika ta 'l-awrina ta' 24 siegħa meta mqabbla mal-kontrolli tal-pentan (p = 0.0086; Figura 5H).
Biex jiġi evalwat ir-rwol ta 'komponenti individwali f'taħlitiet sintetiċi ta' awrina ta' 24 siegħa, ġew evalwati sitt taħlitiet sottrattivi kontra taħlitiet kompluti fl-assaġġ tat-tubu Y, li fih tneħħew komposti individwali. Għal nemus li jfittxu l-ospitanti, it-tnaqqis ta 'komposti individwali mit-taħlita sħiħa kellu effett sinifikanti fuq tweġibiet ta' mġiba (χ62 =. : Figura S2A), it-taħlitiet kollha sottrattivi kienu aktar attraenti minn Żgħar milli kompletament imħallat.B'kuntrast, it-tneħħija ta 'komposti individwali mit-taħlita kompletament sintetika ma affettwax ir-risponsi tal-imġieba tan-nemus li jerdgħu d-demm (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), bl-eċċezzjoni ta' riżultat imqabbel f'livell 0.0.077. 22; Fajl Addizzjonali 1: Figura S2B).
F'raħal endemiku tal-malarja fl-Etjopja, l-effikaċja ta 'taħlita sintetika ta' awrina tal-baqra ta '24 siegħa biex tattira nemus taħt kundizzjonijiet tal-post ġiet evalwata għal għaxart iljieli (Fig. 6A). Total ta' 4,861 nemus ġew maqbuda u identifikati, li minnhom 45.7% kienu Anthrophes .gambiae. 35.4% kienu Culex spp.(Fajl addizzjonali 1: Tabella S1).Anopheles arabinis huwa l-uniku membru tal-kumpless ta 'speċi An.Gambian identifikat permezz ta' analiżi PCR.Bla medja, 320 nemus inqabdu kull lejl, li matulu n-nases ta 'żmien b'lixki ta' taħlita sintetika qabdu aktar nemus minn taħlita, χ190(0) = nases pari, χ196(0) 0.0001) .Neses mhux lixka ġew stabbiliti fuq kull wieħed mill-ħames iljieli ta 'kontroll fil-bidu, nofs, u t-tmiem tal-prova.Numri simili ta' nemus ġew maqbuda f'kull par ta 'nases, li jindika l-ebda preġudizzju bejn id-djar (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05 ta 'kontroll tal-perjodu ta' kontroll matul l-istudju. quitoes maqbuda fin-nases li fihom it-taħlita sintetika żdiedet b'mod sinifikanti: it-tfittxija tal-ospitanti (χ2(0, 2107) = 138.7, p <0.0001), għalf riċenti tad-demm (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) u tqala = 0.20, 2.2 = 2.2. ;Fajl addizzjonali 1: Tabella S1).Dan huwa rifless ukoll fin-numru totali ta 'nemus maqbuda: ospitanti li jfittxu > irdaq id-demm > tqila > semi-tqala > raġel.
Valutazzjoni fuq il-post ta 'l-effikaċja ta' taħlita ta 'riħa ta' awrina tal-baqra sintetika ta' 24 siegħa. Twettqu provi fuq il-post fin-Nofsinhar tal-Etjopja (mappa), ħdejn il-belt ta 'Maki (daħħal), bl-użu ta' nassa tad-dawl taċ-Ċentri għall-Kontroll tal-Mard (CDC) (lemin) fi djar imqabbda, b'disinn kwadru Latin (aerial cattured CDC) . nopheles arabesques (B), iżda mhux Anopheles farroes (C), b'mod differenti, effett fiżjoloġiku dipendenti fuq l-istat. Barra minn hekk, dawn in-nases qabdu numri miżjuda b'mod sinifikanti tan-nemus Culex ospitanti. fuq il-lemin jirrappreżentaw l-indiċi ta 'għażla medju f'pari ta' nases ta 'kontroll (miftuħa; N = 5).).L-asterisks jindikaw livelli ta' sinifikat statistiku (*p = 0.01 u ***p < 0.0001)
It-tliet speċi nqabdu b'mod differenti f'nases li fihom taħlitiet sintetiċi. Fittex għall-ospitanti (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), għalf tad-demm (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) u tqala =, χ81. .arabiensis kienet maqbuda fin-nassa li tirrilaxxa t-taħlita sintetika (Fig. 6B), filwaqt li l-ammont ta 'An ma kienx differenti.Pharoensis fi stati fiżjoloġiċi differenti nstabu (Fig. 6C).Għal Culex, biss żieda sinifikanti fin-numru ta' nemus li jfittxu hosts instabet f'nases lixka bit-taħlita sintetika (13χ129). 4; Fig. 6D), meta mqabbla ma 'nases ta' kontroll.
Nases tal-lixka ospitanti li jinsabu barra mill-ospiti potenzjali bejn is-siti tat-tnissil u l-komunitajiet rurali fl-Etjopja ntużaw biex jivvalutaw jekk in-nemus tal-malarja użawx riħa tal-awrina tal-baqra bħala sinjal tal-ħabitat ospitanti. sieq ġew attirati u maqbuda, għalkemm f'numri żgħar, indipendenti mill-età tal-awrina (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Fajl addizzjonali 1: Figura S3 ).B'kuntrast, il-kontrolli tal-ilma ma qabdux nemus tal-malarja f'temperaturi għoljin (Fajl Addizzjonali 1: Figura S3).
In-nemus tal-malarja jakkwistaw u jqassmu komposti li fihom in-nitroġenu permezz ta’ għalf kompensatorju fuq l-awrina tal-baqra (jiġifieri għadajjar) biex itejbu l-karatteristiċi tal-istorja tal-ħajja, simili għal insetti oħra [2, 4, 24, 25, 26]. in-nemus jillokalizza din ir-riżorsa bir-riħa u kapaċi jirregolaw l-assorbiment ta’ komposti nitroġenużi fl-awrina, inkluża l-urea, il-komponent ewlieni tan-nitroġenu fl-awrina [15, 16]. Skont l-istat fiżjoloġiku tan-nemus femminili, in-nutrijenti fl-awrina huma allokati biex itejbu l-attività tat-titjira u s-sopravivenza ta’ individwi li jsaħħu l-ospituri tad-demm kif ukoll is-sopravivenza ta’ individwi riproduttivi. Matul l-ewwel ċiklu gonadotropiku. Għalhekk, it-taħlit ta 'l-awrina għandu rwol nutrittiv importanti għal vettori tal-malarja li huma magħluqa bħall-adulti malnutriti [8], peress li jipprovdi lin-nemus nisa bil-kapaċità li jakkwistaw komposti nitroġenużi importanti billi jidħlu f'għalf b'riskju baxx. Din is-sejba għandha konsegwenzi epidemjoloġiċi sinifikanti. jista' jkun il-mira ta' programmi futuri ta' ġestjoni tal-vettur.