പോഷക സമ്പാദനവും വിതരണവും പ്രാണികളുടെ തീറ്റ തേടലിന്റെയും ജീവിത ചരിത്രത്തിന്റെയും സവിശേഷതകളെ സംയോജിപ്പിക്കുന്നു. വ്യത്യസ്ത ജീവിത ഘട്ടങ്ങളിലെ പ്രത്യേക പോഷകങ്ങളുടെ കുറവ് നികത്തുന്നതിന്, അനുബന്ധ ഭക്ഷണത്തിലൂടെ പ്രാണികൾക്ക് ഈ പോഷകങ്ങൾ ലഭിക്കും, ഉദാഹരണത്തിന്, പഡിൽസ് എന്നറിയപ്പെടുന്ന ഒരു പ്രക്രിയയിൽ കശേരുക്കളുടെ സ്രവങ്ങൾ ഭക്ഷിക്കുന്നതിലൂടെ. അനോഫിലിസ് അറേബ്യാനി എന്ന കൊതുകിന് പോഷകാഹാരക്കുറവുള്ളതായി കാണപ്പെടുന്നു, അതിനാൽ ഉപാപചയത്തിനും പുനരുൽപാദനത്തിനും പോഷകങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്. പോഷക സമ്പാദനത്തിനായി ഗോമൂത്രത്തിൽ ആൻ. അറബിയൻസിസ് പ്രക്ഷോഭം നടത്തുന്നത് ജീവിത ചരിത്ര സവിശേഷതകൾ മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നുണ്ടോ എന്ന് വിലയിരുത്തുക എന്നതായിരുന്നു ഈ പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യം.
സുരക്ഷിതമാണെന്ന് ഉറപ്പാക്കുക. പുതിയതും 24 മണിക്കൂറും 72 മണിക്കൂറും 168 മണിക്കൂറും പഴക്കമുള്ളതുമായ ഗോമൂത്രത്തിന്റെ ഗന്ധമാണ് അറബിയൻസിസിനെ ആകർഷിച്ചത്, ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് ആൻഡ് ബ്ലഡ് മീൽ (48 മണിക്കൂറിനു ശേഷമുള്ള രക്ത ഭക്ഷണം) പെൺമൃഗങ്ങളെ ഒരു Y- ട്യൂബ് ഓൾഫാക്റ്റോമീറ്ററിൽ അളന്നു, ഗർഭിണികളായ സ്ത്രീകളെ മുട്ടയിടൽ പരിശോധനയ്ക്കായി വിലയിരുത്തി. നാല് പ്രായ വിഭാഗങ്ങളിലും ഗോമൂത്രത്തിലെ ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങൾ തിരിച്ചറിയാൻ ഒരു സംയോജിത രാസ, ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ വിശകലനം ഉപയോഗിച്ചു. Y- ട്യൂബിലും ഫീൽഡ് ട്രയലുകളിലും ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങളുടെ സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതങ്ങൾ വിലയിരുത്തി. മലേറിയ വെക്റ്ററുകൾക്കുള്ള സാധ്യതയുള്ള സപ്ലിമെന്ററി ഡയറ്റുകളായി ഗോമൂത്രവും അതിന്റെ പ്രധാന നൈട്രജൻ അടങ്ങിയ സംയുക്ത യൂറിയയും അന്വേഷിക്കുന്നതിന്, ഭക്ഷണ പാരാമീറ്ററുകളും ജീവിത ചരിത്ര സവിശേഷതകളും അളന്നു. പെൺ കൊതുകുകളുടെ അനുപാതവും ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്ന ഗോമൂത്രത്തിന്റെയും യൂറിയയുടെയും അളവും വിലയിരുത്തി. ഭക്ഷണം നൽകിയ ശേഷം, അതിജീവനം, ടെതർഡ് ഫ്ലൈറ്റ്, പ്രത്യുൽപാദനം എന്നിവയ്ക്കായി സ്ത്രീകളെ വിലയിരുത്തി.
ആതിഥേയന്റെ രക്തവും പോഷണവും തേടുന്നു. ലബോറട്ടറിയിലും ഫീൽഡ് പഠനങ്ങളിലും, അറബികൾ പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രത്തിന്റെ സ്വാഭാവികവും കൃത്രിമവുമായ ഗന്ധത്തിലേക്ക് ആകർഷിക്കപ്പെട്ടു. ഗർഭിണികളായ സ്ത്രീകൾ മുട്ടയിടുന്ന സ്ഥലങ്ങളിൽ ഗോമൂത്ര പ്രതികരണങ്ങളോട് നിസ്സംഗരായിരുന്നു. ആതിഥേയത്വം തേടുന്നവരും രക്തം കുടിക്കുന്നവരുമായ സ്ത്രീകൾ ഗോമൂത്രവും യൂറിയയും സജീവമായി ആഗിരണം ചെയ്യുകയും പറക്കൽ, അതിജീവനം അല്ലെങ്കിൽ പുനരുൽപാദനം എന്നിവയ്ക്കുള്ള ഫിസിയോളജിക്കൽ അവസ്ഥയുടെ പ്രവർത്തനമായി ജീവിത ചരിത്ര ട്രേഡ്-ഓഫുകൾ അനുസരിച്ച് ഈ വിഭവങ്ങൾ അനുവദിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
ജീവിത ചരിത്ര സവിശേഷതകൾ മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നതിനായി അനോഫിലിസ് അറബിൻസ് ഗോമൂത്രം ഏറ്റെടുക്കുകയും വിതരണം ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്നു. ഗോമൂത്രത്തിന്റെ അനുബന്ധ ഭക്ഷണം ദൈനംദിന അതിജീവനവും വെക്റ്റർ സാന്ദ്രതയും വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിലൂടെ നേരിട്ട് വെക്റ്റർ ശേഷിയെ ബാധിക്കുന്നു, പരോക്ഷമായി പറക്കൽ പ്രവർത്തനത്തിൽ മാറ്റം വരുത്തുന്നതിലൂടെയും, അതിനാൽ ഭാവി മോഡലുകളിൽ ഇത് പരിഗണിക്കണം.
പോഷക സമ്പാദനവും വിതരണവും പ്രാണികളുടെ തീറ്റ തേടലിന്റെയും ജീവിത ചരിത്രത്തിന്റെയും സവിശേഷതകളെ സംയോജിപ്പിക്കുന്നു [1,2,3]. ഭക്ഷണ ലഭ്യതയെയും പോഷക ആവശ്യകതകളെയും അടിസ്ഥാനമാക്കി പ്രാണികൾക്ക് ഭക്ഷണം തിരഞ്ഞെടുക്കാനും നേടാനും നഷ്ടപരിഹാരം നൽകാനും കഴിയും [1, 3]. പോഷകങ്ങളുടെ വിതരണം ജീവിത ചരിത്ര പ്രക്രിയയെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ പ്രാണികളുടെ വ്യത്യസ്ത ജീവിത ഘട്ടങ്ങളിൽ ഭക്ഷണത്തിന്റെ ഗുണനിലവാരത്തിനും അളവിനും വ്യത്യസ്ത ആവശ്യകതകളിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാം [1, 2]. നിർദ്ദിഷ്ട പോഷകങ്ങളിലെ കുറവുകൾ നികത്താൻ, ചെളി, വിവിധ വിസർജ്യങ്ങൾ, കശേരുക്കളുടെ സ്രവങ്ങൾ, കുളങ്ങൾ എന്നറിയപ്പെടുന്ന ഒരു പ്രക്രിയയായ ശവം [2] എന്നിവ പോലുള്ള അനുബന്ധ തീറ്റയിലൂടെ പ്രാണികൾക്ക് ഈ പോഷകങ്ങൾ ലഭിക്കും. വിവിധതരം ചിത്രശലഭങ്ങളുടെയും നിശാശലഭങ്ങളുടെയും ഇനങ്ങൾ പ്രാഥമികമായി വിവരിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, മറ്റ് പ്രാണികളുടെ ക്രമങ്ങളിലും ജല ദ്വാരങ്ങൾ സംഭവിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഈ തരത്തിലുള്ള വിഭവങ്ങളിലേക്കുള്ള ആകർഷണവും ഭക്ഷണവും ആരോഗ്യത്തിലും മറ്റ് ജീവിത ചരിത്ര സവിശേഷതകളിലും കാര്യമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തും [2, 4, 5, 6] ,7]. മലേറിയ കൊതുകായ അനോഫിലിസ് ഗാംബിയ സെൻസു ലാറ്റോ (sl) ഒരു 'പോഷകാഹാരക്കുറവുള്ള' മുതിർന്ന മൃഗമായി ഉയർന്നുവരുന്നു [8], അതിനാൽ ജലസേചനം ഒരു പങ്ക് വഹിച്ചേക്കാം അതിന്റെ ജീവിത ചരിത്ര സവിശേഷതകളിൽ ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നുണ്ടെങ്കിലും, ഈ സ്വഭാവം ഇതുവരെ അവഗണിക്കപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. ഈ പ്രധാന വാഹനത്തിൽ പോഷക ഉപഭോഗം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു മാർഗമായി പ്രക്ഷോഭം ഉപയോഗിക്കുന്നത് ശ്രദ്ധ അർഹിക്കുന്നു, കാരണം ഇത് പ്രധാനപ്പെട്ട പകർച്ചവ്യാധി പ്രത്യാഘാതങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കിയേക്കാം.
ലാർവ ഘട്ടത്തിൽ നിന്ന് കൊണ്ടുപോകുന്ന കുറഞ്ഞ കലോറി കരുതൽ ശേഖരവും രക്ത ഭക്ഷണത്തിന്റെ കാര്യക്ഷമമല്ലാത്ത ഉപയോഗവും കാരണം പ്രായപൂർത്തിയായ പെൺ അനോഫിലിസ് കൊതുകുകളിൽ നൈട്രജൻ ഉപഭോഗം പരിമിതമാണ് [9]. പെൺ ആൻ.ഗാംബിയ എസ്എൽ സാധാരണയായി സപ്ലിമെന്റൽ രക്ത ഭക്ഷണം [10, 11] നൽകുന്നതിലൂടെ ഇത് നികത്തുന്നു, അതുവഴി കൂടുതൽ ആളുകളെ രോഗം പിടിപെടാനുള്ള സാധ്യത വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും കൊതുകുകളെ വേട്ടയാടാനുള്ള സാധ്യത വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. പകരമായി, മറ്റ് പ്രാണികൾ തെളിയിക്കുന്നത് പോലെ, പൊരുത്തപ്പെടുത്തലും പറക്കൽ തന്ത്രവും വർദ്ധിപ്പിക്കുന്ന നൈട്രജൻ സംയുക്തങ്ങൾ നേടുന്നതിന് കൊതുകുകൾക്ക് കശേരുക്കളുടെ വിസർജ്ജ്യത്തിന്റെ സപ്ലിമെന്റൽ ഭക്ഷണം ഉപയോഗിക്കാം [2]. ഇക്കാര്യത്തിൽ, ആനിലെ സഹോദര ഇനങ്ങളിൽ ഒന്നിന്റെ ശക്തവും വ്യത്യസ്തവുമായ ആകർഷണം. ഗാംബിയൻ എസ്എൽ സ്പീഷീസ് കോംപ്ലക്സ്, അനോഫിലിസ് അറബിനിസ്, പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രം [12,13,14], രസകരമാണ്. അനോഫിലിസ് അറബിനിസ് അതിന്റെ ആതിഥേയ മുൻഗണനകളിൽ അവസരവാദപരമാണ്, കൂടാതെ കന്നുകാലികളുമായി സഹവസിക്കുകയും ഭക്ഷണം നൽകുകയും ചെയ്യുന്നു. പശു മൂത്രം നൈട്രജൻ സംയുക്തങ്ങളാൽ സമ്പന്നമായ ഒരു വിഭവമാണ്, പുതിയ മൂത്രത്തിലെ മൊത്തം നൈട്രജന്റെ 50-95% യൂറിയയാണ്. [15, 16]. ഗോമൂത്രത്തിന് പ്രായമാകുമ്പോൾ, സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ ഈ വിഭവങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് 24 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ നൈട്രജൻ സംയുക്തങ്ങളുടെ സങ്കീർണ്ണത കുറയ്ക്കുന്നു [15]. അമോണിയയുടെ ദ്രുതഗതിയിലുള്ള വർദ്ധനവ്, ജൈവ നൈട്രജന്റെ കുറവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, ആൽക്കലോഫിലിക് സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ (ഇവയിൽ പലതും കൊതുകുകൾക്ക് വിഷകരമായ സംയുക്തങ്ങൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു) വളരുന്നു [15], ഇത് സ്ത്രീകളായിരിക്കാം ആൻ.അറാബിയൻസിസ് 24 മണിക്കൂറോ അതിൽ കുറവോ പ്രായമുള്ള മൂത്രത്തിലേക്ക് ആകർഷിക്കപ്പെടുന്നു [13, 14].
ഈ പഠനത്തിൽ, ആതിഥേയ, രക്തം കുടിക്കുന്ന ആൻസിനെ അന്വേഷിച്ചു. ആദ്യ ഗോണഡോട്രോപിൻ ചക്രത്തിൽ, മൂത്രം കലർത്തി യൂറിയ ഉൾപ്പെടെയുള്ള നൈട്രജൻ സംയുക്തങ്ങൾ ആഗിരണം ചെയ്യുന്നതിനായി അറബിയൻസിസ് വിലയിരുത്തി. അടുത്തതായി, മെച്ചപ്പെട്ട അതിജീവനത്തിനും പുനരുൽപാദനത്തിനും കൂടുതൽ ഭക്ഷണം കണ്ടെത്തുന്നതിനും പെൺകൊതുകുകൾ ഈ സാധ്യതയുള്ള പോഷക വിഭവം എങ്ങനെ അനുവദിക്കുന്നുവെന്ന് വിലയിരുത്താൻ ഒരു പരമ്പര പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി. ഒടുവിൽ, പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രത്തിന്റെ ഗന്ധം ഹോസ്റ്റിനും രക്തം കുടിക്കുന്ന ആൻക്കും വിശ്വസനീയമായ സൂചനകൾ നൽകുന്നുണ്ടോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ വിലയിരുത്തി. ഈ സാധ്യതയുള്ള പോഷക സ്രോതസ്സിനായുള്ള അവരുടെ തിരയലിൽ, നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ട വ്യത്യസ്ത ആകർഷണത്തിന് പിന്നിലെ രാസ പരസ്പരബന്ധങ്ങൾ അറബിയൻസിസ് കണ്ടെത്തി. 24 മണിക്കൂർ പഴകിയ മൂത്രത്തിൽ തിരിച്ചറിഞ്ഞ അസ്ഥിരമായ ജൈവ സംയുക്തങ്ങളുടെ (VOC-കൾ) സിന്തറ്റിക് ഗന്ധ മിശ്രിതങ്ങൾ ഫീൽഡ് സാഹചര്യങ്ങളിൽ കൂടുതൽ വിലയിരുത്തി, ലബോറട്ടറി സാഹചര്യങ്ങളിൽ ലഭിച്ച ഫലങ്ങൾ വിപുലീകരിക്കുകയും വ്യത്യസ്ത ശാരീരിക അവസ്ഥകളിൽ ഗോമൂത്രത്തിന്റെ ഗന്ധത്തിന്റെ സ്വാധീനം പ്രകടമാക്കുകയും ചെയ്തു. കൊതുകുകളുടെ ആകർഷണം. ലഭിച്ച ഫലങ്ങൾ, ജീവചരിത്ര സവിശേഷതകളെ സ്വാധീനിക്കുന്നതിനായി കശേരുക്കളുടെ മൂത്രത്തിൽ കാണപ്പെടുന്ന നൈട്രജൻ സംയുക്തങ്ങൾ ആൻ അറബിയൻസിസ് ഏറ്റെടുക്കുകയും വിതരണം ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്നുവെന്ന് സ്ഥിരീകരിക്കുന്നു. എപ്പിഡെമിയോളജിക്കൽ സാധ്യതകളുടെ പശ്ചാത്തലത്തിലും വെക്റ്റർ നിരീക്ഷണത്തിനും നിയന്ത്രണത്തിനും അവ എങ്ങനെ ഉപയോഗിക്കാം എന്നതിന്റെ പശ്ചാത്തലത്തിലും ഈ ഫലങ്ങൾ ചർച്ചചെയ്യുന്നു.
അനോഫിലിസ് അറബിക്കൻസിനെ (ഡോംഗോള സ്ട്രെയിൻ) 25 ± 2 °C, 65 ± 5% ആർഎച്ച്, 12:12 മണിക്കൂർ പ്രകാശ-ഇരുട്ട് ചക്രം എന്നിവയിൽ നിലനിർത്തി. ലാർവകളെ പ്ലാസ്റ്റിക് ട്രേകളിൽ (20 സെ.മീ × 18 സെ.മീ × 7 സെ.മീ) വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം നിറച്ച് വളർത്തി ടെട്രാമിൻ® മത്സ്യ ഭക്ഷണം (ടെട്ര വെർക്ക്, മെല്ലെ, ഡിഇ) നൽകി. പ്യൂപ്പകളെ 30 മില്ലി കപ്പുകളിൽ (നോളാറ്റോ ഹെർട്ടില, ആസ്റ്റോർപ്പ്, എസ്ഇ) ശേഖരിച്ച് മുതിർന്നവരുടെ ആവിർഭാവം അനുവദിക്കുന്നതിനായി ബഗ്ഡോർം കൂടുകളിലേക്ക് (30 സെ.മീ × 30 സെ.മീ × 30 സെ.മീ; മെഗാവ്യൂ സയൻസ്, തായ്‌ചുങ്, തായ്‌വാൻ) മാറ്റി. ആവിർഭാവത്തിനുശേഷം 4 ദിവസം വരെ (ഡിപിഇ) മുതിർന്നവർക്ക് 10% സുക്രോസ് ലായനി അഡ് ലിബിറ്റം നൽകി, ആ ഘട്ടത്തിൽ ഹോസ്റ്റ്-അന്വേഷകരായ പെൺമൃഗങ്ങൾക്ക് പരീക്ഷണത്തിന് തൊട്ടുമുമ്പ് ഭക്ഷണക്രമം വാഗ്ദാനം ചെയ്തു, അല്ലെങ്കിൽ പരീക്ഷണത്തിന് തൊട്ടുമുമ്പ് വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് രാത്രി മുഴുവൻ പട്ടിണി കിടന്നു. ഫ്ലൈറ്റ് ട്യൂബ് പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് സ്ത്രീകളെ ഉപയോഗിച്ചു. ലിബിറ്റം വാട്ടർ ഉപയോഗിച്ച് 4-6 മണിക്കൂർ മാത്രമേ പട്ടിണി കിടന്നിരുന്നുള്ളൂ. തുടർന്നുള്ള ബയോഅസെകൾക്കായി രക്തം കുടിക്കുന്ന പെൺകൊതുകുകളെ തയ്യാറാക്കാൻ, മെംബ്രൻ ഫീഡിംഗ് സിസ്റ്റം (ഹെമോടെക് ഡിസ്കവറി വർക്ക്ഷോപ്പുകൾ, അക്രിംഗ്ടൺ, യുകെ) ഉപയോഗിച്ച് 4 ഡിപിഇ പെൺകൊതുകുകൾക്ക് ഡീഫൈബ്രോട്ടിക് ആടുകളുടെ രക്തം (ഹാറ്റുനലാബ്, ബ്രോ, എസ്ഇ) നൽകി. പൂർണ്ണമായും തിങ്ങിനിറഞ്ഞ പെൺകൊതുകുകളെ പിന്നീട് വ്യക്തിഗത കൂടുകളിലേക്ക് മാറ്റി, താഴെ വിവരിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ നേരിട്ട് ഭക്ഷണക്രമം നൽകി, അല്ലെങ്കിൽ താഴെ വിവരിച്ചിരിക്കുന്ന പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് 3 ദിവസം മുമ്പ് 10% സുക്രോസ് ആഡ് ലിബിറ്റം നൽകി. പിന്നീടുള്ള പെൺകൊതുകുകളെ ഫ്ലൈറ്റ് ട്യൂബ് ബയോഅസെകൾക്കായി ഉപയോഗിക്കുകയും ലബോറട്ടറിയിലേക്ക് മാറ്റുകയും ചെയ്തു, തുടർന്ന് പരീക്ഷണത്തിന് 4-6 മണിക്കൂർ മുമ്പ് വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം അഡ് ലിബിറ്റം നൽകി.
പ്രായപൂർത്തിയായ അറബ് സ്ത്രീകളിൽ മൂത്രത്തിന്റെയും യൂറിയയുടെയും ഉപഭോഗം അളക്കാൻ ഫീഡിംഗ് അസ്സേകൾ ഉപയോഗിച്ചു. ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ്, രക്തം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾക്ക് 48 മണിക്കൂർ നേരത്തേക്ക് 1% നേർപ്പിച്ച പുതിയതും പ്രായമായതുമായ ഗോമൂത്രം, വിവിധ സാന്ദ്രതയിലുള്ള യൂറിയ, രണ്ട് നിയന്ത്രണങ്ങൾ (10% സുക്രോസും വെള്ളവും) എന്നിവ അടങ്ങിയ ഒരു ഭക്ഷണക്രമം നൽകി. കൂടാതെ, ഭക്ഷണ നിറം (1 mg ml-1 സൈലീൻ സയനൈഡ് FF; CAS 2650-17-1; സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച്, സ്റ്റോക്ക്ഹോം, SE) ഭക്ഷണത്തിൽ ചേർത്ത് 250 µl മൈക്രോസെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകളിൽ 4 × 4 മാട്രിക്സിൽ വിതരണം ചെയ്തു (ഓക്സിജൻ സയന്റിഫിക്, യൂണിയൻ സിറ്റി, CA, US; ചിത്രം 1A) അരികിൽ നിറയ്ക്കുക (~300 µl). കൊതുകുകൾ തമ്മിലുള്ള മത്സരവും ഡൈ നിറത്തിന്റെ സാധ്യതയുള്ള ഫലങ്ങളും ഒഴിവാക്കാൻ, 10 ​​കൊതുകുകളെ ഒരു വലിയ പെട്രി ഡിഷിൽ (12 സെന്റീമീറ്റർ വ്യാസവും 6 സെന്റീമീറ്റർ ഉയരവും; സെമാഡെനി, ഓസ്റ്റർമുണ്ടിജൻ, CH; ചിത്രം 1A) പൂർണ്ണ ഇരുട്ടിൽ 25 ± 2 സെന്റീമീറ്റർ °C യിൽ വയ്ക്കുക. 65 ± 5% ആപേക്ഷിക ആർദ്രത. ഈ പരീക്ഷണങ്ങൾ 5 മുതൽ 10 തവണ വരെ ആവർത്തിച്ചു. ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ ഏർപ്പെട്ടതിനുശേഷം, കൂടുതൽ വിശകലനം വരെ കൊതുകുകളെ -20 °C ൽ വച്ചു.
ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് (B) ഉം രക്തം കുടിക്കുന്ന (E, G) ഉം കഴിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾ ആഗിരണം ചെയ്യുന്ന പശു മൂത്രവും യൂറിയയും ആതിഥേയരും രക്തം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകളും ശ്രദ്ധിക്കുക. ഫീഡിംഗ് ട്രയലിൽ (A), പെൺ കൊതുകുകൾക്ക് പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രം, വിവിധ സാന്ദ്രതകളിൽ യൂറിയ, സുക്രോസ് (10%), വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം (H2O) എന്നിവ അടങ്ങിയ ഭക്ഷണക്രമം നൽകി. ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് (B) ഉം രക്തം കുടിക്കുന്ന (C) ഉം ഉള്ള പെൺ കൊതുകുകൾ പരീക്ഷിച്ച മറ്റേതൊരു ഭക്ഷണക്രമത്തേക്കാളും കൂടുതൽ സുക്രോസ് ആഗിരണം ചെയ്തു. ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് (B) ഉം കഴിക്കുന്ന (C) പെൺ കൊതുകുകൾ 72 മണിക്കൂർ ഗോമൂത്രം 168 മണിക്കൂർ ഗോമൂത്രത്തിൽ (B) കുറവാണെന്ന് ശ്രദ്ധിക്കുക. മൂത്രത്തിന്റെ ശരാശരി മൊത്തം നൈട്രജൻ ഉള്ളടക്കം (± സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡീവിയേഷൻ) ഇൻസെറ്റിൽ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് (D, F) ഉം രക്തം കുടിക്കുന്ന (E, G) പെൺ കൊതുകുകളും ഡോസ്-ആശ്രിത രീതിയിൽ യൂറിയ എടുക്കുന്നു. വ്യത്യസ്ത അക്ഷര നാമങ്ങളുള്ള ശരാശരി ഇൻഹേൽഡ് വോള്യങ്ങൾ (D, E) പരസ്പരം ഗണ്യമായി വ്യത്യസ്തമായിരുന്നു (ടുകിയുടെ പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് വിശകലനം ഉപയോഗിച്ച് വൺ-വേ ANOVA; p < 0.05). പിശക് ബാറുകൾ ശരാശരി (BE) യുടെ സ്റ്റാൻഡേർഡ് പിശകിനെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. നേർരേഖയിലുള്ള വര ലോഗ്-ലീനിയർ റിഗ്രഷനെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. ലൈൻ (F, G)
ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്ന ഭക്ഷണം പുറത്തുവിടുന്നതിനായി, കൊതുകുകളെ 230 µl വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം അടങ്ങിയ 1.5 മില്ലി മൈക്രോസെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകളിൽ വ്യക്തിഗതമായി സ്ഥാപിക്കുകയും ഒരു ഡിസ്പോസിബിൾ പെസ്റ്റലും കോർഡ്‌ലെസ് മോട്ടോറും (VWR ഇന്റർനാഷണൽ, ലണ്ട്, SE) ഉപയോഗിച്ച് ടിഷ്യു വിഘടിപ്പിക്കുകയും തുടർന്ന് 10 krpm-ൽ 10 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ നടത്തുകയും ചെയ്തു. സൂപ്പർനേറ്റന്റ് (200 µl) 96-കിണർ മൈക്രോപ്ലേറ്റിലേക്ക് (സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച്) മാറ്റി, സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമീറ്റർ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള മൈക്രോപ്ലേറ്റ് റീഡർ (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm ഉപയോഗിച്ച് ആഗിരണം (λ620) നിർണ്ണയിക്കുകയും ചെയ്തു. പകരമായി, കൊതുകുകളെ 1 മില്ലി വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ പൊടിച്ചു, അതിൽ 900 µl സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് വിശകലനത്തിനായി ഒരു കുവെറ്റിലേക്ക് മാറ്റി (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). ഭക്ഷണക്രമം അളക്കുന്നതിന്, സീരിയൽ നേർപ്പിക്കൽ വഴി ഒരു സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവ് തയ്യാറാക്കി 0.2 ലഭിക്കും. 1 mg ml-1 സൈലീൻ സയനൈഡിന്റെ µl മുതൽ 2.4 µl വരെ. തുടർന്ന്, ഓരോ കൊതുകും കഴിക്കുന്ന ഭക്ഷണത്തിന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കാൻ അറിയപ്പെടുന്ന ഡൈ സാന്ദ്രതയുടെ ഒപ്റ്റിക്കൽ സാന്ദ്രത ഉപയോഗിച്ചു.
വൺ-വേ അനാലിസിസ് ഓഫ് വേരിയൻസ് (ANOVA) ഉപയോഗിച്ച് വോളിയം ഡാറ്റ വിശകലനം ചെയ്തു, തുടർന്ന് ടുക്കിയുടെ പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് പെയർവൈസ് താരതമ്യങ്ങൾ (JMP Pro, v14.0.0, SAS ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഇൻ‌കോർപ്പറേറ്റഡ്, കാരി, NC, US, 1989–2007) നടത്തി. ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ വിശകലനങ്ങൾ സാന്ദ്രതയെ ആശ്രയിച്ചുള്ള യൂറിയ ഉപഭോഗത്തെയും ഹോസ്റ്റ്-അന്വേഷകരും രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകളും തമ്മിലുള്ള പ്രതികരണങ്ങളുടെ താരതമ്യത്തെയും വിവരിച്ചു (Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US-നുള്ള GraphPad Prism v8.0.0).
ഓരോ പ്രായ വിഭാഗത്തിൽ നിന്നുമുള്ള ഏകദേശം 20 µl മൂത്ര സാമ്പിളുകൾ Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) ഉപയോഗിച്ച് ബന്ധിപ്പിച്ച് ടിൻ കാപ്സ്യൂളുകളിൽ (8 mm × 5 mm) പൊതിഞ്ഞു. നിർമ്മാതാവിന്റെ പ്രോട്ടോക്കോൾ അനുസരിച്ച് പുതിയതും പഴകിയതുമായ മൂത്രത്തിലെ നൈട്രജന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കാൻ ഒരു CHNS/O അനലൈസറിന്റെ (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, US) ജ്വലന അറയിലേക്ക് കാപ്സ്യൂളുകൾ തിരുകി. ഒരു മാനദണ്ഡമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന അറിയപ്പെടുന്ന യൂറിയ സാന്ദ്രതയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ് മൊത്തം നൈട്രജൻ (g N l-1) കണക്കാക്കിയത്.
ആതിഥേയരെ തേടുന്ന, രക്തം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകളുടെ അതിജീവനത്തിൽ ഭക്ഷണത്തിന്റെ സ്വാധീനം വിലയിരുത്തുന്നതിന്, കൊതുകുകളെ വലിയ പെട്രി ഡിഷുകളിൽ (12 സെന്റീമീറ്റർ വ്യാസവും 6 സെന്റീമീറ്റർ ഉയരവും; സെമാഡെനി) വെന്റിലേഷനും ഭക്ഷണ വിതരണത്തിനുമായി മൂടിയിൽ ഒരു മെഷ് പൊതിഞ്ഞ ദ്വാരം (3 സെന്റീമീറ്റർ വ്യാസവും) വ്യക്തിഗതമായി സ്ഥാപിച്ചു. 4 dpe-ക്ക് ശേഷം നേരിട്ട് ഭക്ഷണക്രമം നൽകി, അതിൽ 1% നേർപ്പിച്ച പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രം, നാല് സാന്ദ്രത യൂറിയ, രണ്ട് നിയന്ത്രണങ്ങൾ, 10% സുക്രോസ്, വെള്ളം എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു. ഓരോ ഡയറ്റും 5 മില്ലി സിറിഞ്ചിൽ (തെർമോ ഫിഷർ സയന്റിഫിക്, ഗോഥെൻബർഗ്, SE) തിരുകിയ ഒരു ഡെന്റൽ ടാംപോണിലേക്ക് (DAB ഡെന്റൽ AB, Upplands Väsby, SE) പൈപ്പ് ചെയ്തു, പ്ലങ്കർ നീക്കം ചെയ്ത് ഒരു പെട്രി ഡിഷിന്റെ മുകളിൽ വച്ചു (ചിത്രം 1).1A). എല്ലാ ദിവസവും നിങ്ങളുടെ ഭക്ഷണക്രമം മാറ്റുക. മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ ലാബ് പരിപാലിക്കുക. അതിജീവിക്കുന്ന കൊതുകുകളെ ദിവസത്തിൽ രണ്ടുതവണ എണ്ണി, അവസാന കൊതുക് മരിക്കുന്നതുവരെ ചത്ത കൊതുകുകളെ ഉപേക്ഷിച്ചു (ചികിത്സയ്ക്ക് n = 40). വിവിധ ഡയറ്റുകളിൽ നൽകുന്ന കൊതുകുകളുടെ അതിജീവനം സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കനുസരിച്ച് വിശകലനം ചെയ്തു. ഭക്ഷണക്രമങ്ങൾ തമ്മിലുള്ള അതിജീവന വിതരണ താരതമ്യങ്ങൾ താരതമ്യം ചെയ്യുന്നതിനുള്ള കപ്ലാൻ-മെയർ സർവൈവൽ കർവുകളും ലോഗ്-റാങ്ക് ടെസ്റ്റുകളും (IBM SPSS സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്സ് 24.0.0.0).
ആറ്റിസാനോ തുടങ്ങിയവരെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ഒരു കസ്റ്റം കൊതുക് പറത്തൽ മിൽ[17], മുന്നിലും പിന്നിലും പാനലുകൾ ഇല്ലാതെ 5 മില്ലീമീറ്റർ കട്ടിയുള്ള ക്ലിയർ അക്രിലിക് പാനലുകൾ (10 സെ.മീ വീതി x 10 സെ.മീ നീളം x 10 സെ.മീ ഉയരം) കൊണ്ട് നിർമ്മിച്ചത് (ചിത്രം 3: മുകളിൽ). ഗ്യാസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി കോളം (0.25 എംഎം ഐഡി; 7.5 സെ.മീ എൽ) കൊണ്ട് നിർമ്മിച്ച ലംബ ട്യൂബുള്ള ഒരു പിവറ്റ് അസംബ്ലി, 9 സെന്റിമീറ്റർ അകലത്തിൽ ഒരു ജോഡി നിയോഡൈമിയം കാന്തങ്ങൾക്കിടയിൽ തൂക്കിയിട്ടിരിക്കുന്ന ഒരു പ്രാണി സൂചിയിൽ അറ്റങ്ങൾ ഒട്ടിച്ചിരിക്കുന്നു. ഒരേ മെറ്റീരിയൽ (6.5 സെ.മീ എൽ) കൊണ്ട് നിർമ്മിച്ച ഒരു തിരശ്ചീന ട്യൂബ് ലംബ ട്യൂബിനെ വിഭജിച്ച് ഒരു ടെതർ ചെയ്ത ഭുജവും ഒരു ചെറിയ കഷണം അലുമിനിയം ഫോയിൽ വഹിക്കുന്ന ഒരു ഭുജവും രൂപപ്പെടുത്തി, അത് പ്രകാശത്തെ തടസ്സപ്പെടുത്തുന്ന സിഗ്നലായി രൂപപ്പെടുത്തി.
24 മണിക്കൂർ പട്ടിണി കിടക്കുന്ന പെൺകൊതുകുകൾക്ക് നിയന്ത്രണത്തിന് മുമ്പ് 30 മിനിറ്റ് മുകളിൽ പറഞ്ഞ ഭക്ഷണക്രമം നൽകി. പൂർണ്ണമായി ഭക്ഷണം നൽകിയ പെൺകൊതുകുകളെ പിന്നീട് 2-3 മിനിറ്റ് ഐസിൽ വ്യക്തിഗതമായി അനസ്തേഷ്യ നൽകി, ബീസ് വാക്സ് (ജോയൽ സ്വെൻസൺസ് വാക്സ്ഫാബ്രിക് എബി, മുൻക ലുങ്ബി, എസ്ഇ) ഉപയോഗിച്ച് പ്രാണികളുടെ പിന്നുകളിൽ ഘടിപ്പിച്ചു, തുടർന്ന് തിരശ്ചീന ട്യൂബുകളുടെ കൈകളിൽ ബന്ധിച്ചു. ഫ്ലൈയിംഗ് മിൽ. ഓരോ ഫ്ലൈറ്റിനും വിപ്ലവങ്ങൾ ഒരു കസ്റ്റം-ബിൽറ്റ് ഡാറ്റ ലോഗർ റെക്കോർഡുചെയ്‌തു, തുടർന്ന് പിസി-ലാബ് 2000™ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ (v4.01; വെല്ലെമാൻ, ഗാവെരെ, ബിഇ) ഉപയോഗിച്ച് സംഭരിക്കുകയും പ്രദർശിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. ഫ്ലൈറ്റ് മിൽ ഒരു കാലാവസ്ഥാ നിയന്ത്രിത മുറിയിലാണ് സ്ഥാപിച്ചത് (12 മണിക്കൂർ:12 മണിക്കൂർ, വെളിച്ചം: ഇരുണ്ടത്, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% ആർഎച്ച്).
പറക്കൽ പ്രവർത്തനത്തിന്റെ പാറ്റേൺ ദൃശ്യവൽക്കരിക്കുന്നതിന്, 24 മണിക്കൂർ കാലയളവിൽ ഒരു മണിക്കൂറിൽ പറന്ന ആകെ ദൂരവും (മീ) തുടർച്ചയായ പറക്കൽ പ്രവർത്തനങ്ങളുടെ ആകെ എണ്ണവും കണക്കാക്കി. കൂടാതെ, വ്യക്തിഗത സ്ത്രീകൾ പറന്ന ശരാശരി ദൂരങ്ങൾ ചികിത്സകളിലുടനീളം താരതമ്യം ചെയ്യുകയും വൺ-വേ ANOVA, ട്യൂക്കിയുടെ പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് വിശകലനം (JMP Pro, v14.0.0, SAS ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഇൻക്.) എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് വിശകലനം ചെയ്യുകയും ചെയ്തു, അവിടെ ശരാശരി ദൂരം ഒരു ആശ്രിത വേരിയബിളായി കണക്കാക്കി, ചികിത്സ ഒരു സ്വതന്ത്ര ഘടകമാണ്. കൂടാതെ, ശരാശരി റൗണ്ടുകളുടെ എണ്ണം 10 മിനിറ്റ് ഇൻക്രിമെന്റുകളിൽ കണക്കാക്കുന്നു.
അൻ.അറാബിയൻസിസിന്റെ പ്രത്യുത്പാദന പ്രകടനത്തിൽ ഭക്ഷണക്രമത്തിന്റെ സ്വാധീനം വിലയിരുത്തുന്നതിന്, രക്തശേഖരണത്തിന് ശേഷം ആറ് പെൺമൃഗങ്ങളെ (4 dpe) നേരിട്ട് ബഗ്‌ഡോം കൂടുകളിലേക്ക് (30 സെ.മീ × 30 സെ.മീ × 30 സെ.മീ) മാറ്റി, തുടർന്ന് മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ 48 മണിക്കൂർ പരീക്ഷണാത്മക ഭക്ഷണക്രമം നൽകി. തുടർന്ന് ഭക്ഷണക്രമം നീക്കം ചെയ്യുകയും 20 മില്ലി വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം നിറച്ച സ്‌പോണിംഗ് കപ്പുകൾ (30 മില്ലി; നോളാറ്റോ ഹെർട്ടില) മൂന്നാം ദിവസം 48 മണിക്കൂർ നൽകി, ഓരോ 24 മണിക്കൂറിലും മാറ്റം വരുത്തുകയും ചെയ്തു. ഓരോ ഭക്ഷണക്രമവും 20-50 തവണ ആവർത്തിക്കുക. ഓരോ പരീക്ഷണ കൂട്ടിനും മുട്ടകൾ എണ്ണുകയും രേഖപ്പെടുത്തുകയും ചെയ്തു. ലെയ്‌ക ക്യാമറ (DFC) 320 R2 ഘടിപ്പിച്ച ഡയലക്‌സ്-20 മൈക്രോസ്‌കോപ്പ് (DM1000; ഏണസ്റ്റ് ലീറ്റ്‌സ് വെറ്റ്‌സ്‌ലാർ, വെറ്റ്‌സ്‌ലാർ, DE) ഉപയോഗിച്ച് വ്യക്തിഗത മുട്ടകളുടെ ശരാശരി വലുപ്പത്തിലും നീളത്തിലുമുള്ള വ്യത്യാസം (n ≥ 200 ഓരോ ഭക്ഷണക്രമത്തിലും) വിലയിരുത്താൻ മുട്ടകളുടെ ഉപസാമ്പിളുകൾ ഉപയോഗിച്ചു; ലെയ്ക മൈക്രോസിസ്റ്റംസ് ലിമിറ്റഡ്, ഡിഇ). ബാക്കിയുള്ള മുട്ടകൾ 24 മണിക്കൂർ സ്റ്റാൻഡേർഡ് വളർത്തൽ സാഹചര്യങ്ങളിൽ കാലാവസ്ഥാ നിയന്ത്രിത മുറിയിൽ സൂക്ഷിച്ചു, മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ, അടുത്തിടെ ഉയർന്നുവന്ന ഒന്നാം ഇൻസ്റ്റാർ ലാർവകളുടെ (ഒരു ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ n ≥ 200) ഒരു ഉപസാമ്പിൾ അളന്നു. മുട്ടകളുടെ എണ്ണവും മുട്ടകളുടെയും ലാർവകളുടെയും വലുപ്പവും ചികിത്സകൾക്കിടയിലും വൺ-വേ ANOVA, ടുക്കിയുടെ പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് വിശകലനം (JMP Pro, v14.0.0, SAS ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഇൻക്.) ഉപയോഗിച്ചും താരതമ്യം ചെയ്തു.
സെബു കന്നുകാലികളിൽ നിന്നും ആർസി ഇനങ്ങളിൽ നിന്നുമുള്ള പുതിയ (1 മണിക്കൂർ കഴിഞ്ഞ് സാമ്പിൾ ചെയ്തതിനു ശേഷം), 24 മണിക്കൂർ, 72 മണിക്കൂർ, 168 മണിക്കൂർ പഴക്കമുള്ള മൂത്രം എന്നിവയിൽ നിന്നും ശേഖരിച്ച സാമ്പിളുകളിൽ നിന്നും ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ബാഷ്പീകരണ വസ്തുക്കൾ ശേഖരിച്ചു. സൗകര്യാർത്ഥം, പശുക്കൾ തൊഴുത്തിൽ ആയിരിക്കുമ്പോൾ തന്നെ അതിരാവിലെ മൂത്ര സാമ്പിളുകൾ ശേഖരിച്ചു. 10 വ്യക്തികളിൽ നിന്ന് മൂത്ര സാമ്പിളുകൾ ശേഖരിച്ച് ഓരോ സാമ്പിളിന്റെയും 100-200 മില്ലി വ്യക്തിഗത പോളിമൈഡ് ബേക്കിംഗ് ബാഗുകളിലേക്ക് (ടോപ്പിറ്റ്സ് കോഫ്രെസ്കോ, ഫ്രിഷാൾട്ടെപ്രൊഡക്റ്റെ ജിഎംബിഎച്ച് ആൻഡ് കമ്പനി, മിൻഡൻ, ഡിഇ) 3 ലിറ്റർ പോളിമൈഡിൽ മൂടിയ നിലയിൽ വിനൈൽ ക്ലോറൈഡ് പ്ലാസ്റ്റിക് ഡ്രമ്മുകളിൽ. ഓരോ കന്നുകാലി മൂത്ര സാമ്പിളിൽ നിന്നുമുള്ള ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ബാഷ്പീകരണ വസ്തുക്കൾ നേരിട്ടോ (പുതിയത്) അല്ലെങ്കിൽ 24 മണിക്കൂർ, 72 മണിക്കൂർ, 168 മണിക്കൂർ മുറിയിലെ താപനിലയിൽ പാകമായതിന് ശേഷമോ ശേഖരിച്ചു, അതായത് ഓരോ മൂത്ര സാമ്പിളും ഓരോ പ്രായ വിഭാഗത്തെയും പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു.
ഹെഡ്‌സ്‌പെയ്‌സ് വോളറ്റൈൽസ് ശേഖരണത്തിനായി, ഒരു ഡയഫ്രം വാക്വം പമ്പ് (കെ‌എൻ‌എഫ് ന്യൂബർഗർ, ഫ്രീബർഗ്, ഡിഇ) ഉപയോഗിച്ച് ഒരു പോളിമൈഡ് ബാഗിലൂടെ ആക്റ്റിവേറ്റഡ് കാർബൺ-ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത ഗ്യാസ് സ്ട്രീം (100 മില്ലി മിനിറ്റ്-1) 2.5 മണിക്കൂർ അഡോർപ്ഷൻ കോളത്തിലേക്ക് പ്രചരിക്കാൻ ഒരു ക്ലോസ്ഡ്-ലൂപ്പ് സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ചു. ഒരു ഡയഫ്രം വാക്വം പമ്പ് (കെ‌എൻ‌എഫ് ന്യൂബർഗർ, ഫ്രീബർഗ്, ഡിഇ) ഉപയോഗിച്ച് ഹെഡ്‌സ്‌പെയ്‌സ് ശേഖരണം നടത്തി. ഒരു നിയന്ത്രണമെന്ന നിലയിൽ, ഒരു ശൂന്യമായ പോളിമൈഡ് ബാഗിൽ നിന്ന് ഹെഡ്‌സ്‌പെയ്‌സ് ശേഖരണം നടത്തി. ഗ്ലാസ് കമ്പിളി പ്ലഗുകൾക്കിടയിൽ 35 മില്ലിഗ്രാം പൊറാപാക് ക്യു (50/80 മെഷ്; വാട്ടേഴ്‌സ് അസോസിയേറ്റ്‌സ്, മിൽഫോർഡ്, എം‌എ, യുഎസ്) അടങ്ങിയ ടെഫ്ലോൺ ട്യൂബിംഗ് (5.5 സെ.മീ x 3 എംഎം ഐഡി) ഉപയോഗിച്ചാണ് അഡോർപ്ഷൻ കോളം നിർമ്മിച്ചത്. ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ്, കോളം 1 മില്ലി റീഡിസ്റ്റിൽഡ് എൻ-ഹെക്‌സെയ്‌നും (മെർക്ക്, ഡാർംസ്റ്റാഡ്, ഡിഇ) 1 മില്ലി പെന്റെയ്‌നും (99.0% ശുദ്ധമായ ലായക ജിസി ഗ്രേഡ്, സിഗ്മ ആൽഡ്രിച്ച്) ഉപയോഗിച്ച് ഫ്ലഷ് ചെയ്തു. അഡോർപ്ഡ് വോളറ്റൈൽസ് 400 μl പെന്റെയ്‌ൻ ഉപയോഗിച്ച് എല്യൂട്ടുചെയ്‌തു. ഹെഡ്‌സ്‌പെയ്‌സ് ശേഖരണങ്ങൾ പൂൾ ചെയ്‌ത് കൂടുതൽ ഉപയോഗത്തിനായി -20°C-ൽ സൂക്ഷിച്ചു. വിശകലനം.
ആതിഥേയ-തിരയലിന്റെയും രക്തം ഭക്ഷിക്കുന്നതിന്റെയും പെരുമാറ്റ പ്രതികരണങ്ങൾ. പുതിയ, 24-മണിക്കൂർ, 72-മണിക്കൂർ, 168-മണിക്കൂർ പ്രായമുള്ള മൂത്രത്തിൽ നിന്ന് ശേഖരിച്ച ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് വറ്റാലിറ്റി സത്തുകൾ, ഒരു നേരായ ഗ്ലാസ് ട്യൂബ് ഓൾഫാക്റ്റോമീറ്റർ ഉപയോഗിച്ച് അറബിഡോപ്സിസ് കൊതുകുകളിൽ നിന്നുള്ള വറ്റാലിറ്റി സത്തുകൾക്കായി വിശകലനം ചെയ്തു [18]. ആന്റെ ഹോം-സീക്കിംഗ് പ്രവർത്തനത്തിന്റെ ഏറ്റവും ഉയർന്ന കാലഘട്ടമായ ZT 13-15 കാലഘട്ടത്തിലാണ് പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തിയത്. അറബ് [19]. മുകളിൽ നിന്ന് 3 ± 1 ലക്ഷം ചുവന്ന വെളിച്ചം ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ഗ്ലാസ് ട്യൂബ് വറ്റാലിറ്റി മീറ്റർ (80 സെ.മീ × 9.5 സെ.മീ ഐഡി) പ്രകാശിപ്പിച്ചു. ചാർക്കോൾ ഫിൽട്ടർ ചെയ്‌തതും ഈർപ്പമുള്ളതുമായ വായു പ്രവാഹം (25 ± 2 °C, 65 ± 2% ആപേക്ഷിക ആർദ്രത) 30 സെ.മീ-1-ൽ ബയോഅസെയിൽ വിജയിച്ചു. വായു സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ മെഷ് സ്‌ക്രീനുകളുടെ ഒരു പരമ്പരയിലൂടെ കടന്നുപോകുന്നു, ഇത് ഒരു ലാമിനാർ പ്രവാഹവും ഒരു ഏകീകൃത പ്ലൂം ഘടനയും സൃഷ്ടിക്കുന്നു. ഡെന്റൽ ടാംപൺ ഡിസ്പെൻസർ (4 സെ.മീ × 1 സെ.മീ; എൽ:ഡി; ഡിഎബി ഡെന്റൽ എബി), 5 സെ.മീ യിൽ നിന്ന് സസ്പെൻഡ് ചെയ്‌തു. ഓൾഫാക്റ്റോമീറ്ററിന്റെ കാറ്റിന്റെ ദിശയിലുള്ള അറ്റത്തുള്ള കോയിൽ, ഓരോ 5 മിനിറ്റിലും സ്റ്റിമുലേറ്റർ മാറുന്നു. വിശകലനത്തിനായി, 1:10 എന്ന അനുപാതത്തിൽ നേർപ്പിച്ച ഓരോ ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് സത്തിന്റെയും 10 μl ഒരു ഉത്തേജകമായി ഉപയോഗിച്ചു. തുല്യ അളവിൽ പെന്റെയ്ൻ ഒരു നിയന്ത്രണമായി ഉപയോഗിച്ചു. പരീക്ഷണം ആരംഭിക്കുന്നതിന് 2-3 മണിക്കൂർ മുമ്പ് വ്യക്തിഗത ഹോസ്റ്റ്-അന്വേഷിക്കുന്ന അല്ലെങ്കിൽ രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകളെ വ്യക്തിഗത റിലീസ് കൂടുകളിൽ സ്ഥാപിച്ചു. ഓൾഫാക്റ്റോമീറ്ററിന്റെ കാറ്റിന്റെ ദിശയിൽ 1 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് കൊതുകുകളെ പൊരുത്തപ്പെടാൻ അനുവദിച്ചു, തുടർന്ന് കൂടിന്റെ ബട്ടർഫ്ലൈ വാൽവ് പുറത്തുവിടാൻ തുറന്നു. ചികിത്സയിലേക്കോ നിയന്ത്രണത്തിലേക്കോ ഉള്ള ആകർഷണം, പുറത്തിറങ്ങിയതിന് 5 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ ഉറവിടവുമായി സമ്പർക്കം പുലർത്തിയ കൊതുകുകളുടെ അനുപാതമായി വിശകലനം ചെയ്തു. ഓരോ ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് വോളറ്റൈസ് സത്തും നിയന്ത്രണവും കുറഞ്ഞത് 30 തവണയെങ്കിലും പകർത്തി, ഏതെങ്കിലും ഒരു ദിവസത്തെ ഫലങ്ങൾ ഒഴിവാക്കാൻ, ഓരോ പരീക്ഷണ ദിവസവും ഒരേ എണ്ണം ചികിത്സകളും നിയന്ത്രണങ്ങളും പരീക്ഷിച്ചു. ഹോസ്റ്റിൽ നിന്നും രക്തം കുടിക്കുന്നവരിൽ നിന്നും പ്രതികരണങ്ങൾ തേടുക ഉത്തരം. അറബിക് വേഴ്സസ് ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് സെറ്റുകളിൽ നാമമാത്ര ലോജിസ്റ്റിക് റിഗ്രഷൻ ഉപയോഗിച്ച് വിശകലനം ചെയ്തു, തുടർന്ന് ജോഡിവൈസ് താരതമ്യങ്ങൾ നടത്തി. ഒറ്റ അനുപാതങ്ങൾക്ക് (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
ആന്റെ മുട്ടയിടൽ പ്രതികരണം. പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രത്തിൽ നിന്നുള്ള ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് സത്ത് ബഗ്‌ഡോം കൂടുകളിൽ വിശകലനം ചെയ്തു (30 സെ.മീ × 30 സെ.മീ × 30 സെ.മീ; മെഗാവ്യൂ സയൻസ്). 20 മില്ലി വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം നിറച്ച പ്ലാസ്റ്റിക് കപ്പുകൾ (30 മില്ലി; നോളാറ്റോ ഹെർട്ടില) മുട്ടയിടൽ അടിവസ്ത്രം നൽകുകയും കൂടിന്റെ എതിർ കോണുകളിൽ 24 സെ.മീ അകലത്തിൽ സ്ഥാപിക്കുകയും ചെയ്തു. ട്രീറ്റ്‌മെന്റ് കപ്പുകൾ ഓരോ ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് സത്തിന്റെയും 10 μl ഉപയോഗിച്ച് 1:10 നേർപ്പിക്കലിൽ ക്രമീകരിച്ചു. കൺട്രോൾ കപ്പ് ക്രമീകരിക്കാൻ തുല്യ അളവിൽ പെന്റെയ്ൻ ഉപയോഗിച്ചു. സ്ഥാന ഇഫക്റ്റുകൾ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനായി ഓരോ പരീക്ഷണത്തിനും ഇടയിൽ ട്രീറ്റ്‌മെന്റും കൺട്രോൾ കപ്പുകളും കൈമാറി. രക്തം കുടിക്കുന്ന പത്ത് പെൺമൃഗങ്ങളെ ZT 9-11-ൽ പരീക്ഷണ കൂടുകളിലേക്ക് വിടുകയും കപ്പുകളിലെ മുട്ടകൾ 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം എണ്ണുകയും ചെയ്തു. സ്‌പോണിംഗ് സൂചിക കണക്കാക്കുന്നതിനുള്ള സൂത്രവാക്യം ഇതാണ്: (ട്രീറ്റ്‌മെന്റ് കപ്പിൽ ഇട്ട മുട്ടകളുടെ എണ്ണം - കൺട്രോൾ കപ്പിൽ ഇട്ട മുട്ടകളുടെ എണ്ണം)/(ഇട്ട ആകെ മുട്ടകളുടെ എണ്ണം). ഓരോ ചികിത്സയും 8 തവണ ആവർത്തിച്ചു.
മുമ്പ് വിവരിച്ചതുപോലെ സ്ത്രീ An.arabiensis ന്റെ ഗ്യാസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക്, ഇലക്ട്രോൺ ആന്റിന പാറ്റേൺ ഡിറ്റക്ഷൻ (GC-EAD) വിശകലനം നടത്തി [20]. ചുരുക്കത്തിൽ, HP-5 കോളം (30 m × 0.25 mm id, 0.25 μm ഫിലിം കനം, Agilent Technologies) സജ്ജീകരിച്ചിരിക്കുന്ന Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) ഉപയോഗിച്ച് പുതിയ ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് വോളറ്റൈൽ സത്തുകൾ വേർതിരിച്ചു. 45 സെ.മീ. സെക്കൻഡ്-1 ശരാശരി ലീനിയർ ഫ്ലോ റേറ്റ് ഉള്ള മൊബൈൽ ഘട്ടമായി ഹൈഡ്രജൻ ഉപയോഗിച്ചു. ഓരോ സാമ്പിളും (2 μl) 225 °C ഇൻലെറ്റ് താപനിലയിൽ സ്പ്ലിറ്റ്ലെസ് മോഡിൽ 30 സെക്കൻഡ് കുത്തിവച്ചു. ജിസി ഓവൻ താപനില 10 °C മിനിറ്റിൽ 35 °C (3 മിനിറ്റ് ഹോൾഡ്) മുതൽ 300 °C (10 മിനിറ്റ് ഹോൾഡ്) വരെ പ്രോഗ്രാം ചെയ്തു. ജിസി എഫ്ലുവന്റ് സ്പ്ലിറ്ററിൽ, 4 പിഎസ്ഐ നൈട്രജൻ ചേർത്ത് ഫ്ലേം അയോണൈസേഷൻ ഡിറ്റക്ടറിനും ഇഎഡിക്കും ഇടയിൽ ഒരു ഗെർസ്റ്റൽ 3D/2 ലോ ഡെഡ് വോളിയം ക്രോസിൽ (ഗെർസ്റ്റൽ, മൾഹൈം, ഡിഇ) 1:1 എന്ന അനുപാതത്തിൽ വിഭജിച്ചു. ഇഎഡിക്കുള്ള ജിസി എഫ്ലുവന്റ് കാപ്പിലറി ഒരു ഗെർസ്റ്റൽ ഒഡിപി-2 ട്രാൻസ്ഫർ ലൈനിലൂടെ കടത്തിവിട്ടു, ഇത് ജിസി ഓവൻ താപനിലയും 5 °C ഉം ട്രാക്ക് ചെയ്യുന്നു, ഇത് ഒരു ഗ്ലാസ് ട്യൂബിലേക്ക് (10 സെ.മീ × 8 മില്ലീമീറ്റർ) കടത്തിവിട്ടു, അവിടെ അത് കാർബൺ-ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത, ഈർപ്പമുള്ള വായുവുമായി (1.5 ലിറ്റർ) കലർത്തി. min−1). ട്യൂബിന്റെ ഔട്ട്‌ലെറ്റിൽ നിന്ന് 0.5 സെന്റീമീറ്റർ അകലെയാണ് ആന്റിന സ്ഥാപിച്ചത്. ഓരോ കൊതുകിനും ഒരു പകർപ്പ് ഉണ്ടായിരുന്നു, ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് കൊതുകുകൾക്ക്, ഓരോ പ്രായത്തിലുമുള്ള മൂത്ര സാമ്പിളുകളിൽ കുറഞ്ഞത് മൂന്ന് പകർപ്പുകളെങ്കിലും നടത്തി.
70 eV-യിൽ ഇലക്ട്രോൺ ഇംപാക്ട് അയോണൈസേഷൻ മോഡിൽ പ്രവർത്തിക്കുന്ന, GC-EAD വിശകലനത്തിൽ ആന്റിന പ്രതികരണങ്ങൾ ഉണർത്തുന്നതിനായി, സംയോജിത GC, മാസ് സ്പെക്ട്രോമീറ്റർ (GC-MS; 6890 GC, 5975 MS; Agilent Technologies) ഉപയോഗിച്ച് പുതിയതും പ്രായമായതുമായ ഗോമൂത്രത്തിന്റെ ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ശേഖരണങ്ങളിലെ ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങളുടെ തിരിച്ചറിയൽ. 35 സെ.മീ. s-1 എന്ന ശരാശരി ലീനിയർ ഫ്ലോ റേറ്റ് ഉള്ള, മൊബൈൽ ഘട്ടമായി ഹീലിയം ഉപയോഗിക്കുന്ന HP-5MS UI- പൂശിയ ഫ്യൂസ്ഡ് സിലിക്ക കാപ്പിലറി കോളം (60 m × 0.25 mm ആന്തരിക വ്യാസം, 0.25 μm ഫിലിം കനം) GC-യിൽ സജ്ജീകരിച്ചിരിക്കുന്നു. GC-EAD വിശകലനത്തിനായുള്ള അതേ ഇൻജക്ടർ ക്രമീകരണങ്ങളും ഓവൻ താപനിലയും ഉപയോഗിച്ച് 2 μl സാമ്പിൾ കുത്തിവച്ചു. കസ്റ്റം ലൈബ്രറിയുമായും NIST14 ലൈബ്രറിയുമായും (Agilent) താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ അവയുടെ നിലനിർത്തൽ സമയം (Kovát സൂചിക), മാസ് സ്പെക്ട്ര എന്നിവയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ് സംയുക്തങ്ങൾ തിരിച്ചറിഞ്ഞത്. ആധികാരിക മാനദണ്ഡങ്ങൾ കുത്തിവച്ചാണ് തിരിച്ചറിഞ്ഞ സംയുക്തങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിച്ചത് (അധിക ഫയൽ 1: പട്ടിക S2). അളവ് നിർണ്ണയിക്കലിനായി, ഹെപ്റ്റൈൽ അസറ്റേറ്റ് (10 ng, 99.8% രാസ ശുദ്ധി, ആൽഡ്രിച്ച്) ഒരു ബാഹ്യ മാനദണ്ഡമായി കുത്തിവച്ചു.
ആതിഥേയ-തിരയുന്നവയെയും രക്തം കുടിക്കുന്നവയെയും ആകർഷിക്കുന്നതിനായി പുതിയതും പഴകിയതുമായ മൂത്രത്തിൽ തിരിച്ചറിഞ്ഞ ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങൾ അടങ്ങിയ ഒരു സിന്തറ്റിക് ദുർഗന്ധ മിശ്രിതത്തിന്റെ ഫലപ്രാപ്തി വിലയിരുത്തുന്നു. മുകളിൽ പറഞ്ഞ അതേ ഓൾഫാക്റ്റോമീറ്ററും പ്രോട്ടോക്കോളും ഉപയോഗിച്ച് അറബിയൻസിസ്. പുതിയ, 24 മണിക്കൂർ, 48 മണിക്കൂർ, 72 മണിക്കൂർ, 168 മണിക്കൂർ പഴകിയ മൂത്രത്തിന്റെ മിക്സഡ് ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ബാഷ്പശീല സത്തകളിലെ സംയുക്തങ്ങളുടെ ഘടനയും അനുപാതവും സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതങ്ങൾ അനുകരിച്ചു (ചിത്രം 5D-G; അധിക ഫയൽ 1: പട്ടിക S2). വിശകലനത്തിനായി, ഹോസ്റ്റ്, രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകളോടുള്ള ആകർഷണം വിലയിരുത്തുന്നതിന്, ഏകദേശം 140-2400 ng h-1 വരെയുള്ള മൊത്തത്തിലുള്ള റിലീസ് നിരക്കിൽ, പൂർണ്ണമായും സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതത്തിന്റെ 1:100 നേർപ്പിക്കലിന്റെ 10 μl ഉപയോഗിക്കുക. അതിനുശേഷം, പൂർണ്ണ മിശ്രിതങ്ങളിൽ പരിശോധന നടത്തുന്നു, അതിൽ പൂർണ്ണ മിശ്രിതത്തിന്റെ ഒറ്റ സംയുക്തങ്ങളുടെ കുറയ്ക്കൽ മിശ്രിതങ്ങൾ നീക്കം ചെയ്യപ്പെടുന്നു. ഹോസ്റ്റിൽ നിന്നും രക്തം കുടിക്കുന്നവരിൽ നിന്നും പ്രതികരണങ്ങൾ തേടുക ഉത്തരം. അറബ് vs സിന്തറ്റിക്, കുറയ്ക്കൽ മിശ്രിതങ്ങൾ നാമമാത്ര ലോജിസ്റ്റിക് റിഗ്രഷൻ ഉപയോഗിച്ച് വിശകലനം ചെയ്തു, തുടർന്ന് ഒറ്റയിനം കൊതുകുകൾക്കുള്ള ജോഡിവൈസ് താരതമ്യങ്ങൾ നടത്തി. അനുപാതങ്ങൾ (JMP Pro, v14.0.0, SAS ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഇൻക്.).
മലേറിയ കൊതുകുകൾക്ക് ആതിഥേയ ആവാസ വ്യവസ്ഥയുടെ സൂചനയായി ഗോമൂത്രം പ്രവർത്തിക്കുമോ എന്ന് വിലയിരുത്താൻ, മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രം ശേഖരിച്ച്, വെള്ളവും 3 ലിറ്റർ ബക്കറ്റുകളിൽ (100 മില്ലി) മെഷ് ചെയ്തതും ഹോസ്റ്റ് ബെയ്റ്റ് കെണികളിൽ സ്ഥാപിച്ചു. (BG-HDT പതിപ്പ്; ബയോജെന്റ്സ്, റീജൻസ്ബർഗ്, DE). ഗ്രാമ സമൂഹത്തിൽ നിന്ന് 400 മീറ്റർ അകലെ (സിലേ, എത്യോപ്യ, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) മേച്ചിൽപ്പുറങ്ങളിൽ 50 മീറ്റർ അകലത്തിൽ പത്ത് കെണികൾ സ്ഥാപിച്ചു, കന്നുകാലികളില്ലാതെ, സ്ഥിരമായ പ്രജനന കേന്ദ്രങ്ങളിലും ഗ്രാമങ്ങളിലും. ഒരു ഹോസ്റ്റിന്റെ സാന്നിധ്യം അനുകരിക്കാൻ അഞ്ച് കെണികൾ ചൂടാക്കി, അഞ്ച് കെണികൾ ചൂടാക്കാതെ വിട്ടു. ഓരോ ചികിത്സാ സ്ഥലവും ആകെ അഞ്ച് രാത്രികളിൽ രാത്രിയിൽ തിരിക്കുന്നു. വ്യത്യസ്ത പ്രായത്തിലുള്ള മൂത്രം ഉപയോഗിച്ച് ചൂണ്ടയിട്ട കെണികളിൽ പിടിച്ചിരിക്കുന്ന കൊതുകുകളുടെ എണ്ണത്തെ ലോജിസ്റ്റിക് റിഗ്രഷൻ ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ബീറ്റാ ബൈനോമിയൽ ഡിസ്ട്രിബ്യൂഷൻ ഉപയോഗിച്ച് താരതമ്യം ചെയ്തു (JMP Pro, v14.0.0, SAS ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഇൻക്.).
എത്യോപ്യയിലെ ഒറോമിയ മേഖലയിലെ മാക്കി പട്ടണത്തിനടുത്തുള്ള ഒരു മലേറിയ ബാധിത ഗ്രാമത്തിൽ (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; ചിത്രം 6A). വാർഷിക ഇൻഡോർ അവശിഷ്ട തളിക്കലിന് മുമ്പ് ഓഗസ്റ്റ് മധ്യത്തിനും സെപ്റ്റംബർ മധ്യത്തിനും ഇടയിലാണ് പഠനം നടത്തിയത്, അതോടൊപ്പം ഒരു നീണ്ട മഴക്കാലവും. ഗ്രാമത്തിന്റെ പ്രാന്തപ്രദേശത്ത് സ്ഥിതി ചെയ്യുന്ന അഞ്ച് ജോഡി വീടുകൾ (20–50 മീറ്റർ അകലം) പഠനത്തിനായി തിരഞ്ഞെടുത്തു (ചിത്രം 6A). വീടുകൾ തിരഞ്ഞെടുക്കാൻ ഉപയോഗിച്ച മാനദണ്ഡങ്ങൾ ഇവയായിരുന്നു: വീട്ടിൽ മൃഗങ്ങളെ അനുവദിക്കില്ല, അകത്ത് പാചകം ചെയ്യാൻ പാടില്ല (വിറക് അല്ലെങ്കിൽ കരി എടുക്കുന്നത്) പാടില്ല (കുറഞ്ഞത് പരീക്ഷണ കാലയളവിലെങ്കിലും), കീടനാശിനികളില്ലാത്ത സ്ഥലങ്ങളിൽ ഉറങ്ങുന്ന പരമാവധി രണ്ട് നിവാസികളുള്ള വീടുകൾ. ചികിത്സിച്ച കൊതുകുവലയ്ക്ക് കീഴിൽ. ഹെൽസിങ്കിയിലെ വേൾഡ് മെഡിക്കൽ അസോസിയേഷൻ ഡിക്ലറേഷൻ സ്ഥാപിച്ച മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾക്കനുസൃതമായി, അഡിസ് അബാബ സർവകലാശാലയിലെ ഫാക്കൽറ്റി ഓഫ് നാച്ചുറൽ സയൻസസിന്റെ (CNS-IRB) ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂഷണൽ റിസർച്ച് എത്തിക്സ് റിവ്യൂ ബോർഡ് (IRB/022/2016) ധാർമ്മിക അംഗീകാരം നൽകിയിട്ടുണ്ട്. ആരോഗ്യ വിപുലീകരണ ജീവനക്കാരുടെ സഹായത്തോടെ ഓരോ കുടുംബനാഥനിൽ നിന്നും സമ്മതം ലഭിച്ചു. മുഴുവൻ പ്രക്രിയയും ജില്ലാ, വാർഡ് ('കെബെലെ') തലത്തിലുള്ള പ്രാദേശിക ഭരണകൂടങ്ങൾ അംഗീകരിച്ചിട്ടുണ്ട്. പരീക്ഷണാത്മക രൂപകൽപ്പന 2 × 2 ലാറ്റിൻ ചതുരാകൃതിയിലുള്ള രൂപകൽപ്പന പിന്തുടർന്നു, അതിൽ ആദ്യ രാത്രിയിൽ ജോടിയാക്കിയ വീടുകൾക്ക് സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതങ്ങളും നിയന്ത്രണങ്ങളും നൽകുകയും അടുത്ത പരീക്ഷണ രാത്രിയിൽ വീടുകൾക്കിടയിൽ മാറ്റുകയും ചെയ്തു. ഈ പ്രക്രിയ പത്ത് തവണ ആവർത്തിച്ചു. കൂടാതെ, തിരഞ്ഞെടുത്ത വീടുകളിൽ കൊതുക് പ്രവർത്തനം കണക്കാക്കുന്നതിന്, ഫീൽഡ് ട്രയലിന്റെ ആരംഭത്തിലും മധ്യത്തിലും അവസാനത്തിലും തുടർച്ചയായി അഞ്ച് രാത്രികൾ പകൽ സമയത്ത് പ്രവർത്തിപ്പിക്കാൻ CDC കെണികൾ സജ്ജമാക്കി.
ആറ് ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങൾ അടങ്ങിയ ഒരു സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതം ഹെപ്റ്റെയ്നിൽ (97.0% ലായക ജിസി ഗ്രേഡ്, സിഗ്മ ആൽഡ്രിച്ച്) ലയിപ്പിച്ച് 140 ng h-1 ൽ ഒരു കോട്ടൺ വിക്ക് ഡിസ്പെൻസർ ഉപയോഗിച്ച് പുറത്തിറക്കി [20]. 12 മണിക്കൂർ നീണ്ടുനിന്ന പരീക്ഷണത്തിലുടനീളം എല്ലാ സംയുക്തങ്ങളെയും സ്ഥിരമായ അനുപാതത്തിൽ പുറത്തുവിടാൻ വിക്ക് ഡിസ്പെൻസർ അനുവദിച്ചു. ഹെപ്റ്റെയ്ൻ ഒരു നിയന്ത്രണമായി ഉപയോഗിച്ചു. സെന്റർസ് ഫോർ ഡിസീസ് കൺട്രോൾ ആൻഡ് പ്രിവൻഷൻ (സിഡിസി) ലൈറ്റ് ട്രാപ്പിന്റെ (ജോൺ ഡബ്ല്യു. ഹോക്ക് കമ്പനി, ഗെയ്‌ൻസ്‌വില്ലെ, ഫ്ലോറിഡ, യുഎസ്; ചിത്രം 6A) എൻട്രി പോയിന്റിനടുത്താണ് വിയൽ താൽക്കാലികമായി നിർത്തിവച്ചിരുന്നത്. കെണികൾ നിലത്തുനിന്ന് 0.8 - 1 മീറ്റർ ഉയരത്തിൽ, കിടക്കയുടെ ചുവട്ടിൽ തൂക്കിയിട്ടു, ഒരു വളണ്ടിയർ ചികിത്സിക്കാത്ത കൊതുക് വലയ്ക്ക് കീഴിൽ ഉറങ്ങുകയും 18:00 നും 06:30 നും ഇടയിൽ പ്രവർത്തിക്കുകയും ചെയ്തു. ലൈംഗികത, ശാരീരിക അവസ്ഥ (ഭക്ഷണം നൽകാത്തത്, ഭക്ഷണം നൽകാത്തത്, അർദ്ധ ഗർഭിണി, ഗർഭിണി [21] എന്നിവയാൽ പിടിക്കപ്പെട്ട കൊതുകുകളെ പിന്നീട് പോളിമറേസ് ചെയിൻ റിയാക്ഷൻ (പിസിആർ) വിശകലനം ഉപയോഗിച്ച് പരിശോധിച്ചു, രൂപശാസ്ത്രപരമായി എ. ഗാംബിയ എസ്എൽ എന്ന് തിരിച്ചറിഞ്ഞ ഇനങ്ങളെ തിരിച്ചറിയാൻ. സമുച്ചയത്തിലെ അംഗങ്ങൾ. [23]. ഫീൽഡ് പഠനത്തിൽ, ജോടിയാക്കിയ വീടുകളുടെ ട്രാപ്പ് ട്രാപ്പിംഗ് ഒരു നാമമാത്ര ലോജിസ്റ്റിക് ഫിറ്റ് മോഡൽ ഉപയോഗിച്ച് വിശകലനം ചെയ്തു, അവിടെ ആകർഷണം ആശ്രിത വേരിയബിളും ചികിത്സ (സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതം vs നിയന്ത്രണം) സ്ഥിരമായ ഫലവുമായിരുന്നു (JMP® 14.0. 0. SAS ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഇൻക്.). ഇവിടെ, സാധ്യതാ അനുപാത പരിശോധനയിൽ നിന്നുള്ള χ2, p- മൂല്യങ്ങൾ ഞങ്ങൾ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നു.
ഇത് സുരക്ഷിതമാണോ എന്ന് വിലയിരുത്തുക. (dpe) ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ്, രക്തം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകളുടെ ഫീഡിംഗ് പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് ശേഷം 4 ദിവസത്തേക്ക്, അറേബിയൻസിസിന് നേരിട്ട് ഭക്ഷണം നൽകുന്നതിലൂടെ മൂത്രം, അതിന്റെ പ്രധാന നൈട്രജൻ സ്രോതസ്സായ യൂറിയ ലഭിക്കാൻ കഴിഞ്ഞു (ചിത്രം 1A). ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ്, രക്തം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾ മറ്റ് ഏതൊരു ഭക്ഷണക്രമത്തേക്കാളും വെള്ളത്തേക്കാളും ഗണ്യമായി കൂടുതൽ സുക്രോസ് ആഗിരണം ചെയ്തു (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 ഉം F(5,299) = 56.00, p < 0.0001 ഉം യഥാക്രമം; ചിത്രം 1B,C). കൂടാതെ, ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് സ്ത്രീകൾ 168 മണിക്കൂറിൽ മൂത്രം കഴിച്ചതിനേക്കാൾ 72 മണിക്കൂറിൽ മൂത്രത്തിൽ കുറവ് കഴിച്ചു (ചിത്രം 1B). യൂറിയ അടങ്ങിയ ഒരു ഡയറ്റ് നൽകുമ്പോൾ, ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് സ്ത്രീകൾ മറ്റ് എല്ലാ സാന്ദ്രതകളെയും വെള്ളത്തെയും അപേക്ഷിച്ച് 2.69 mM ൽ ഗണ്യമായി കൂടുതൽ യൂറിയ ആഗിരണം ചെയ്തു, അതേസമയം 10% സുക്രോസിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചറിയാൻ കഴിയില്ല (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; ചിത്രം 1D). രക്തം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകളുടെ പ്രതികരണത്തിന് വിപരീതമായിരുന്നു ഇത്, അവർ സാധാരണയായി വെള്ളത്തേക്കാൾ കൂടുതൽ യൂറിയ അടങ്ങിയ ഭക്ഷണക്രമം ആഗിരണം ചെയ്തു, എന്നിരുന്നാലും 10% സുക്രോസിൽ വളരെ കുറവായിരുന്നു (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; ചിത്രം 1).1E).കൂടാതെ, രണ്ട് ഫിസിയോളജിക്കൽ അവസ്ഥകൾ തമ്മിൽ താരതമ്യം ചെയ്യുമ്പോൾ, ഫ്ളെബോടോമിസ് ചെയ്ത സ്ത്രീകൾ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രതയിൽ ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് സ്ത്രീകളേക്കാൾ കൂടുതൽ യൂറിയ ആഗിരണം ചെയ്തു, കൂടാതെ ഈ സ്ത്രീകൾ ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയിൽ സമാനമായ അളവിൽ യൂറിയ ആഗിരണം ചെയ്തു (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; ചിത്രം 1F, G). യൂറിയ അടങ്ങിയ ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ നിന്നുള്ള ഉപഭോഗത്തിന് ഒപ്റ്റിമൽ മൂല്യങ്ങൾ ഉള്ളതായി കാണപ്പെട്ടെങ്കിലും (ചിത്രം 1D,E), രണ്ട് ഫിസിയോളജിക്കൽ അവസ്ഥകളിലെയും സ്ത്രീകൾക്ക് ലോഗ്-ലീനിയർ രീതിയിൽ യൂറിയ സാന്ദ്രതയുടെ മുഴുവൻ ശ്രേണിയിലും ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്ന യൂറിയയുടെ അളവ് മോഡുലേറ്റ് ചെയ്യാൻ കഴിഞ്ഞു (ചിത്രം 1F,G). ).അതുപോലെ, മൂത്രത്തിലെ നൈട്രജന്റെ അളവ് ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്ന അളവിൽ പ്രതിഫലിക്കുന്നതിനാൽ, ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്ന മൂത്രത്തിന്റെ അളവ് നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലൂടെ കൊതുകുകൾ അവയുടെ നൈട്രജൻ ആഗിരണം നിയന്ത്രിക്കുന്നതായി കാണപ്പെടുന്നു (ചിത്രം 1B, C, B ഇൻസെറ്റുകൾ).
ആതിഥേയ കൊതുകുകളുടെയും രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകളുടെയും അതിജീവനത്തിൽ മൂത്രത്തിന്റെയും യൂറിയയുടെയും സ്വാധീനം വിലയിരുത്തുന്നതിന്, നാല് പ്രായത്തിലുമുള്ള (പുതിയ, 24 മണിക്കൂർ, 72 മണിക്കൂർ, 168 മണിക്കൂർ നിക്ഷേപത്തിനു ശേഷമുള്ള) സ്ത്രീകൾക്ക് മൂത്രം നൽകി, കൂടാതെ വിവിധ യൂറിയ സാന്ദ്രതകളും, വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളവും 10% സുക്രോസും നിയന്ത്രണമായി നൽകി (ചിത്രം 2A). ഈ അതിജീവന വിശകലനം കാണിക്കുന്നത് ആതിഥേയ കൊതുകുകളുടെ മൊത്തത്തിലുള്ള അതിജീവനത്തിൽ ഭക്ഷണക്രമം കാര്യമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നു എന്നാണ് (മൂത്രം: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; യൂറിയ: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; ചിത്രം. 2B, C) രക്തം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകളിൽ (മൂത്രം: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; യൂറിയ: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; ചിത്രം 2D,E). എല്ലാ പരീക്ഷണങ്ങളിലും, മൂത്രം, യൂറിയ, വെള്ളം എന്നിവ അടങ്ങിയ ഭക്ഷണം നൽകിയ സ്ത്രീകൾക്ക് സുക്രോസ് ഡയറ്റ് നൽകിയ സ്ത്രീകളെ അപേക്ഷിച്ച് അതിജീവന നിരക്ക് വളരെ കുറവായിരുന്നു (ചിത്രം 2B-E). പുതിയതും പഴകിയതുമായ മൂത്രം നൽകിയ ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് സ്ത്രീകൾക്ക് വ്യത്യസ്ത അതിജീവന നിരക്കുകൾ ഉണ്ടായിരുന്നു, 72-h പഴകിയ മൂത്രം നൽകിയവർക്ക് (p = 0.016) ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ അതിജീവന സാധ്യത (ചിത്രം 2B). കൂടാതെ, 135 mM യൂറിയ നൽകിയ ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് സ്ത്രീകൾ ജല നിയന്ത്രണങ്ങളേക്കാൾ കൂടുതൽ കാലം അതിജീവിച്ചു (p < 0.04) (ചിത്രം 2C). വെള്ളവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, പുതിയ മൂത്രവും 24-h മൂത്രവും നൽകിയ സ്ത്രീകൾ കൂടുതൽ കാലം അതിജീവിച്ചു (p = 0.001 ഉം p = 0.012 ഉം, യഥാക്രമം; ചിത്രം 2D), അതേസമയം 72-h മൂത്രം നൽകിയ സ്ത്രീകൾ ചെറിയ പുതിയ മൂത്രവും 24-h പഴകിയ മൂത്രവും നൽകിയവരേക്കാൾ കൂടുതൽ കാലം അതിജീവിച്ചു (p < 0.0001 ഉം, p = 0.013 ഉം, യഥാക്രമം; ചിത്രം 2D). 135 mM യൂറിയ നൽകിയപ്പോൾ, രക്തം നൽകിയ സ്ത്രീകൾക്ക് രക്തം നൽകിയ സ്ത്രീകൾക്ക് കൂടുതൽ കാലം അതിജീവിച്ചു. യൂറിയയുടെയും വെള്ളത്തിന്റെയും മറ്റെല്ലാ സാന്ദ്രതകളേക്കാളും കൂടുതൽ കാലം അതിജീവിച്ചു (p < 0.013; ചിത്രം 2E).
ഗോമൂത്രവും യൂറിയയും ഭക്ഷിക്കുന്ന ആതിഥേയ പെൺ അനോഫിലിസ് അറബിനിസിന്റെയും അതിജീവനം. ബയോഅസേ (എ)യിൽ, പെൺകൊതുകുകൾക്ക് പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രം, വിവിധ സാന്ദ്രതകളിൽ യൂറിയ, സുക്രോസ് (10%), വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം (H2O) എന്നിവ അടങ്ങിയ ഭക്ഷണക്രമം നൽകി. ആതിഥേയ-അന്വേഷക (ബി, സി) കൊതുകുകളുടെയും രക്തം കുടിക്കുന്ന (ഡി, ഇ) കൊതുകുകളുടെയും അതിജീവനം ഓരോ 12 മണിക്കൂറിലും രേഖപ്പെടുത്തി, മൂത്രം (ബി, ഡി) ഉം യൂറിയയും (സി, ഇ) ഉം ഭക്ഷിക്കുന്ന എല്ലാ പെൺകൊതുകുകളും സുക്രോസും വെള്ളവും കഴിക്കുന്നതുവരെ.
24 മണിക്കൂർ കാലയളവിൽ ഫ്ലൈറ്റ് മിൽ പരിശോധനയിൽ നിശ്ചയിച്ച ആകെ ദൂരവും റൗണ്ടുകളുടെ എണ്ണവും ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് കൊതുകുകൾക്കും രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകൾക്കും ഇടയിൽ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നു, ഇത് മൊത്തത്തിൽ കുറഞ്ഞ പറക്കൽ പ്രവർത്തനം കാണിച്ചു (ചിത്രം 3). പുതിയതും പഴകിയതുമായ മൂത്രമോ സുക്രോസും വെള്ളവും നൽകിയ ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് കൊതുകുകൾ വ്യത്യസ്തമായ പറക്കൽ രീതികൾ കാണിച്ചു (ചിത്രം 3), പുതിയ മൂത്രം ഭക്ഷിക്കുന്ന പെൺകൊതുകുകൾ പുലർച്ചെ കൂടുതൽ സജീവമായിരുന്നു, അതേസമയം 24-ഉം 168-ഉം മണിക്കൂർ പ്രായമുള്ള മൂത്രം ഭക്ഷിക്കുന്ന കൊതുകുകൾ വ്യത്യസ്ത പറക്കൽ രീതികൾ പ്രകടിപ്പിച്ചു, പ്രധാനമായും പകൽ സമയങ്ങളിൽ. സുക്രോസ് അല്ലെങ്കിൽ 72 മണിക്കൂർ മൂത്രം നൽകിയ പെൺകൊതുകുകൾ 24 മണിക്കൂർ കാലയളവിൽ പ്രവർത്തനം കാണിച്ചു, അതേസമയം വെള്ളം നൽകിയ പെൺകൊതുകുകൾ മധ്യ കാലയളവിൽ കൂടുതൽ സജീവമായിരുന്നു. സുക്രോസ് കഴിച്ച കൊതുകുകൾ രാത്രി വൈകിയും അതിരാവിലെയും ഏറ്റവും ഉയർന്ന അളവിലുള്ള പ്രവർത്തനം പ്രകടിപ്പിച്ചു, അതേസമയം 72 മണിക്കൂർ പ്രായമുള്ള മൂത്രം കഴിച്ചവ 24 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ പ്രവർത്തനത്തിൽ സ്ഥിരമായ കുറവ് അനുഭവിച്ചു (ചിത്രം 3).
വേട്ടക്കാരായ രക്തം കുടിക്കുന്ന പെൺ അനോഫിലിസ് അറബിനിസിന്റെ പറക്കൽ പ്രകടനം, ഗോമൂത്രവും യൂറിയയും ഭക്ഷിക്കുന്നവ. ഫ്ലൈറ്റ് മിൽ പരിശോധനയിൽ, പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രം, വിവിധ സാന്ദ്രതകളിൽ യൂറിയ, സുക്രോസ് (10%), വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം (H2O) എന്നിവ ഭക്ഷിച്ച പെൺകൊതുകുകളെ തിരശ്ചീനവും സ്വതന്ത്രമായി കറങ്ങുന്നതുമായ കൈകളിൽ (മുകളിൽ) ബന്ധിപ്പിച്ചു. ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് (ഇടത്) ഉം രക്തം കുടിക്കുന്ന (വലത്) ഉം ഉള്ള പെൺകൊതുകുകൾക്ക്, 24 മണിക്കൂർ കാലയളവിൽ ഓരോ ഡയറ്റിനും മണിക്കൂറിൽ ആകെ ദൂരവും പറക്കലുകളുടെ എണ്ണവും രേഖപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട് (ഇരുണ്ടത്: ചാരനിറം; ഇളം: വെള്ള). സർക്കാഡിയൻ പ്രവർത്തന ഗ്രാഫിന്റെ വലതുവശത്ത് ശരാശരി ദൂരവും ശരാശരി പോരാട്ടങ്ങളുടെ എണ്ണവും കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. പിശക് ബാറുകൾ ശരാശരിയുടെ സ്റ്റാൻഡേർഡ് പിശകിനെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. സ്ഥിതിവിവരക്കണക്ക് വിശകലനം വാചകം കാണുക.
പൊതുവേ, ആതിഥേയരെ തേടുന്ന സ്ത്രീകളുടെ മൊത്തത്തിലുള്ള പറക്കൽ പ്രവർത്തനം 24 മണിക്കൂർ കാലയളവിൽ പറക്കൽ ദൂരത്തിന് സമാനമായ ഒരു പാറ്റേൺ പിന്തുടർന്നു. ശരാശരി പറക്കൽ ദൂരത്തെ കഴിച്ച ഭക്ഷണക്രമം (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001) സാരമായി ബാധിച്ചു, കൂടാതെ 72 മണിക്കൂർ മൂത്രം കഴിച്ച ഹോസ്റ്റ്-അന്വേഷിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾ മറ്റ് എല്ലാ ഭക്ഷണക്രമങ്ങളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ (p < 0.0001) ഗണ്യമായി കൂടുതൽ ദൂരം പറന്നു, സുക്രോസ് കഴിച്ച കൊതുകുകൾ പുതിയ (p = 0.022) ഉം 24 മണിക്കൂർ പ്രായമുള്ള മൂത്രം (p = 0.022) ഉം കഴിച്ച കൊതുകുകളേക്കാൾ കൂടുതൽ ദൂരം പറന്നു. മൂത്ര ഭക്ഷണക്രമം വിവരിച്ച പറക്കൽ പ്രവർത്തന രീതിക്ക് വിപരീതമായി, യൂറിയ കഴിച്ച ഹോസ്റ്റ്-അന്വേഷിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾ 24 മണിക്കൂർ കാലയളവിൽ സ്ഥിരമായ പറക്കൽ പ്രവർത്തനം പ്രകടമാക്കി, ഇരുണ്ട ഘട്ടത്തിന്റെ രണ്ടാം പകുതിയിൽ (ചിത്രം 3) ഉച്ചസ്ഥായിയിലെത്തി. പ്രവർത്തന രീതികൾ സമാനമായിരുന്നെങ്കിലും, ഹോസ്റ്റ്-അന്വേഷിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾ ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെട്ട സാന്ദ്രതയെ ആശ്രയിച്ച് ശരാശരി പറക്കൽ ദൂരം ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിച്ചു (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). ഏതെങ്കിലും സാന്ദ്രതയിലുള്ള യൂറിയ നൽകുന്ന ഹോസ്റ്റ്-സീക്ക് പെൺ വർഗ്ഗങ്ങൾ വെള്ളമോ സുക്രോസോ നൽകുന്ന പെൺ വർഗ്ഗങ്ങളെ അപേക്ഷിച്ച് കൂടുതൽ സമയം പറന്നു (p < 0.03).
എല്ലാ ഭക്ഷണക്രമങ്ങളിലും രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകളുടെ മൊത്തത്തിലുള്ള പറക്കൽ പ്രവർത്തനം സ്ഥിരതയുള്ളതും 24 മണിക്കൂറിലധികം നീണ്ടുനിൽക്കുന്നതുമായിരുന്നു, വെള്ളം കുടിക്കുന്ന പെൺകൊതുകുകളിലും പുതുതായി ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്ന പെൺകൊതുകുകളിലും ഇരുണ്ട കാലഘട്ടത്തിന്റെ രണ്ടാം പകുതിയിൽ മൂത്രത്തിന്റെ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിച്ചു (ചിത്രം 3). രക്തം കുടിക്കുന്ന പെൺകൊതുകുകളിൽ മൂത്ര ഭക്ഷണക്രമം ശരാശരി പറക്കൽ ദൂരത്തെ സാരമായി ബാധിച്ചെങ്കിലും (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), യൂറിയ ഭക്ഷണക്രമം (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24). മറ്റ് മൂത്ര, നിയന്ത്രണ ഭക്ഷണക്രമങ്ങളിൽ (ഫ്രഷ്, p = 0.0091; 72 മണിക്കൂർ, p = 0.0022; 168 മണിക്കൂർ, p = 0.001; സുക്രോസ്, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
മുട്ടയിടുന്ന ബയോഅസെകളിൽ (ചിത്രം 4A) മൂത്രവും യൂറിയയും നൽകുന്നതിന്റെ പ്രത്യുൽപാദന പാരാമീറ്ററുകളിലെ ഫലങ്ങൾ വിലയിരുത്തി, ഓരോ പെൺ പക്ഷിയും ഇടുന്ന മുട്ടകളുടെ എണ്ണം, മുട്ടയുടെ വലുപ്പം, പുതുതായി വിരിഞ്ഞ ആദ്യ ഇൻസ്റ്റാർ ലാർവകൾ എന്നിവ അനുസരിച്ച് പരിശോധിച്ചു. മുട്ടയിടുന്ന മുട്ടകളുടെ എണ്ണം. മൂത്രം കഴിക്കുന്ന അറബ് പെൺ പക്ഷികൾ ഭക്ഷണക്രമം അനുസരിച്ച് വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; ചിത്രം 4B). 24 മണിക്കൂർ മൂത്രം കഴിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾ, മറ്റ് മൂത്രം കഴിക്കുന്ന സ്ത്രീകളെ അപേക്ഷിച്ച് രക്ത ഭക്ഷണം ഗണ്യമായി കൂടുതൽ മുട്ടകൾ ഇടുന്നു, കൂടാതെ സുക്രോസ് കഴിക്കുന്നവർക്ക് സമാനവുമാണ് (ചിത്രം 4B). അതുപോലെ, മൂത്രം കഴിക്കുന്ന പെൺ പക്ഷികൾ ഇടുന്ന മുട്ടകളുടെ വലുപ്പം ഭക്ഷണക്രമം അനുസരിച്ച് വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), 24 മണിക്കൂർ മൂത്രവും സുക്രോസ് കഴിക്കുന്ന പെൺ പക്ഷികളും വെള്ളം കുടിക്കുന്ന പെൺ പക്ഷികളേക്കാൾ വളരെ വലിയ മുട്ടകൾ ഇടുന്നു, അതേസമയം 168 മണിക്കൂർ മൂത്രം കഴിക്കുന്ന പെൺ പക്ഷികളുടെ മുട്ടകൾ ഗണ്യമായി ചെറുതായിരുന്നു (ചിത്രം 4C). കൂടാതെ, മൂത്ര ഭക്ഷണക്രമം ഗണ്യമായി ബാധിച്ചു. ലാർവ വലുപ്പം (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), 24-ഉം 72-ഉം മണിക്കൂർ പ്രായമുള്ള മൂത്രം കുടിക്കുന്ന പെൺമൃഗങ്ങൾ ഇടുന്ന മുട്ടകളിൽ നിന്ന് മുട്ട ലാർവകളിൽ നിന്ന് ഇടുന്ന മുട്ടകളേക്കാൾ ഗണ്യമായി വലിയ ലാർവകൾ പുറത്തുവരുന്നു. വെള്ളം കുടിക്കുന്നതും 168-മണിക്കൂർ മൂത്രം കുടിക്കുന്ന പെൺമൃഗങ്ങളും (ചിത്രം 4D).
പശു മൂത്രവും യൂറിയയും കഴിക്കുന്ന പെൺ അനോഫിലിസ് അറബിനിസിന്റെ പ്രത്യുത്പാദന പ്രകടനം. രക്തം കുടിക്കുന്ന പെൺ കൊതുകുകൾക്ക് പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രം, വിവിധ സാന്ദ്രതയിലുള്ള യൂറിയ, സുക്രോസ് (10%), വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം (H2O) എന്നിവ അടങ്ങിയ ഭക്ഷണക്രമം 48 മണിക്കൂർ നൽകി, തുടർന്ന് ബയോഅസെകളിൽ സ്ഥാപിച്ച് മുട്ടയിടുന്ന അടിവസ്ത്രങ്ങൾ 48 മണിക്കൂർ (A) നേടി. മുട്ടയുടെ എണ്ണം (B, E), മുട്ടയുടെ വലിപ്പം (C, F), ലാർവകളുടെ വലിപ്പം (D, G) എന്നിവയെ നൽകിയ ഭക്ഷണക്രമം (പശു മൂത്രം: BD; യൂറിയ: EG) സാരമായി ബാധിച്ചു. വ്യത്യസ്ത അക്ഷര നാമങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് അളക്കുന്ന ഓരോ പാരാമീറ്ററിന്റെയും ശരാശരി പരസ്പരം ഗണ്യമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നു (ടുകിയുടെ പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് വിശകലനം ഉപയോഗിച്ച് വൺ-വേ ANOVA; p < 0.05). പിശക് ബാറുകൾ ശരാശരിയുടെ സ്റ്റാൻഡേർഡ് പിശകിനെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു.
മൂത്രത്തിലെ പ്രധാന നൈട്രജൻ ഘടകമായ യൂറിയ, രക്തം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾക്ക് ഭക്ഷണമായി നൽകുമ്പോൾ, എല്ലാ പഠനങ്ങളിലും പ്രത്യുൽപാദന പാരാമീറ്ററുകളെ സാരമായി ബാധിച്ചു. യൂറിയയുടെ സാന്ദ്രതയെ ആശ്രയിച്ച്, രക്ത ഭക്ഷണത്തിന് ശേഷം യൂറിയ കഴിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾ ഇടുന്ന മുട്ടകളുടെ എണ്ണം (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), 134 µM നും 1.34 mM നും ഇടയിൽ യൂറിയ സാന്ദ്രത നൽകുന്ന സ്ത്രീകൾ കൂടുതൽ മുട്ടകൾ ഇടുന്നു (ചിത്രം 4E). 134 µM അല്ലെങ്കിൽ അതിൽ കൂടുതൽ യൂറിയ സാന്ദ്രത കഴിക്കുന്ന സ്ത്രീകൾ വെള്ളം കുടിക്കുന്ന സ്ത്രീകളെ അപേക്ഷിച്ച് വലിയ മുട്ടകൾ ഇടുന്നു (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; ചിത്രം 4F), ലാർവ വലുപ്പം, എന്നിരുന്നാലും അമ്മമാരിൽ സമാനമായ യൂറിയ സാന്ദ്രത ബാധിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിലും (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) കൂടുതൽ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (ചിത്രം 4G).
ആതിഥേയരെ തേടുന്ന പശുക്കളുടെ മൂത്രത്തിന്റെ ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ബാഷ്പശീല സത്തുകളോടുള്ള മൊത്തത്തിലുള്ള ആകർഷണം. ഗ്ലാസ് ട്യൂബ് ഓൾഫാക്റ്റോമീറ്ററിൽ (ചിത്രം 5A) വിലയിരുത്തിയ അറബിയൻസിസിനെ മൂത്രത്തിന്റെ പ്രായം സാരമായി ബാധിച്ചു (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; ചിത്രം 5B). പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് വിശകലനം കാണിക്കുന്നത് 24 മണിക്കൂറിലെ പഴകിയ മൂത്രത്തിന്റെ ദുർഗന്ധം മറ്റ് എല്ലാ ചികിത്സകളേക്കാളും (72 മണിക്കൂർ: p = 0.0060, 168 മണിക്കൂർ: p = 0.012, പെന്റെയ്ൻ: p = 0.00070) ഉയർന്ന ആകർഷണീയതയ്ക്ക് കാരണമായതായി, പുതിയ മൂത്രത്തിന്റെ ഗന്ധം ഒഴികെ (p = 0.13; ചിത്രം 5B). രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകളെ മൂത്രത്തിന്റെ ഗന്ധത്തിലേക്കുള്ള മൊത്തത്തിലുള്ള ആകർഷണം കാര്യമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നില്ലെങ്കിലും (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; ചിത്രം 5C), 72 മണിക്കൂർ പഴക്കമുള്ള മൂത്രവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഈ പെൺ കൊതുകുകൾ ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ബാഷ്പശീല സത്തകളോട് കൂടുതൽ ആകർഷകമാണെന്ന് കണ്ടെത്തി. നിയന്ത്രണങ്ങളുമായി താരതമ്യം ചെയ്യുമ്പോൾ (p = 0.0066; ചിത്രം 5C).
ആതിഥേയനും രക്തം കുടിക്കുന്നതുമായ അനോഫിലിസ് അറേബ്യാനസിനു വേണ്ടിയുള്ള തിരയലിൽ പ്രകൃതിദത്തവും കൃത്രിമവുമായ ഗോമൂത്ര ഗന്ധങ്ങളോടുള്ള പെരുമാറ്റ പ്രതികരണങ്ങൾ. ഗ്ലാസ് ട്യൂബ് ഓൾഫാക്റ്റോമീറ്ററിന്റെ (എ) സ്കീമാറ്റിക്. പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രത്തിൽ നിന്ന് ഹോസ്റ്റ് (ബി) യിലേക്കും രക്തം കുടിക്കുന്ന (സി) കൊതുകുകളിലേക്കും ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ബാഷ്പശീലമായ സത്തകളുടെ ആകർഷണം. ലോർഡ് ആന്റെ ടെന്റക്കിൾ പ്രതികരണം കണ്ടെത്തുക. പുതിയ (ഡി), 24-മണിക്കൂർ (ഇ), 72-മണിക്കൂർ (എഫ്), 168-മണിക്കൂർ (ജി) പഴകിയ ഗോമൂത്രത്തിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് സത്തുകൾ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. ഗ്യാസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്തതും ജ്വാല അയോണൈസേഷൻ ഡിറ്റക്ടർ (എഫ്‌ഐഡി) കണ്ടെത്തിയതുമായ ഹെഡ്‌സ്‌പേസിലെ ബയോആക്റ്റീവ് സംയുക്തങ്ങളോടുള്ള പ്രതികരണത്തിൽ ഇലക്ട്രോൺ ആന്റിന ഡിറ്റക്ഷൻ (ഇഎഡി) ട്രെയ്‌സുകൾ വോൾട്ടേജ് മാറ്റങ്ങൾ കാണിക്കുന്നു. സ്കെയിൽ ബാർ പ്രതികരണ വ്യാപ്‌തി (എംവി) നിലനിർത്തൽ സമയത്തെ (എംവി) പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. ജൈവശാസ്ത്രപരമായി സജീവമായ സംയുക്തങ്ങളുടെ ഗുണങ്ങളും റിലീസ് നിരക്കുകളും (µg h-1) കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. ഒരൊറ്റ നക്ഷത്രചിഹ്നം (*) സ്ഥിരമായ കുറഞ്ഞ വ്യാപ്‌തി പ്രതികരണത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ഇരട്ട നക്ഷത്രചിഹ്നങ്ങൾ (**) പുനർനിർമ്മിക്കാനാവാത്തതിനെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. പ്രതികരണങ്ങൾ. ഹോസ്റ്റ് (H) ഉം രക്തം കുടിക്കുന്ന (I) ഉം കണ്ടെത്തുക. അൻ.അറാബിയൻസിസിന് പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്ര ഗന്ധങ്ങളുടെ സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതങ്ങളോട് വ്യത്യസ്ത ആകർഷണങ്ങളുണ്ട്. വ്യത്യസ്ത അക്ഷര നാമങ്ങളിലേക്ക് ആകർഷിക്കപ്പെടുന്ന കൊതുകുകളുടെ ശരാശരി അനുപാതങ്ങൾ പരസ്പരം ഗണ്യമായി വ്യത്യസ്തമായിരുന്നു (ടുക്കിയുടെ പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് വിശകലനം ഉപയോഗിച്ചുള്ള വൺ-വേ ANOVA; p < 0.05). പിശക് ബാറുകൾ സ്കെയിലിന്റെ സ്റ്റാൻഡേർഡ് പിശകിനെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു.
പെൺ ആൻ.അറാബിയൻസിസ്, രക്തഭക്ഷണത്തിന് 72 മണിക്കൂറും 120 മണിക്കൂറും കഴിഞ്ഞ്, മുട്ടയിടുന്ന സമയത്ത്, പെന്റെയ്ൻ നിയന്ത്രണങ്ങളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ പുതിയതും പഴകിയതുമായ ഗോമൂത്രത്തിൽ നിന്നുള്ള ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ബാഷ്പശീല സത്തകൾക്ക് മുൻഗണന കാണിച്ചില്ല (χ2 = 3.07, p > 0.05; അധിക ഫയൽ 1: ചിത്രം. S1).
സ്ത്രീ ആൻ.അറബിയൻസിസിന്, ജിസി-ഇഎഡി, ജിസി-എംഎസ് വിശകലനങ്ങൾ എട്ട്, ആറ്, മൂന്ന്, മൂന്ന് ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങൾ തിരിച്ചറിഞ്ഞു (ചിത്രം 5D-G). ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾക്ക് കാരണമായ സംയുക്തങ്ങളുടെ എണ്ണത്തിൽ വ്യത്യാസങ്ങൾ നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, ഈ സംയുക്തങ്ങളിൽ ഭൂരിഭാഗവും പുതിയതും പഴകിയതുമായ മൂത്രത്തിൽ നിന്ന് ശേഖരിച്ച ഓരോ ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് അസ്ഥിര സത്തിലും ഉണ്ടായിരുന്നു. അതിനാൽ, ഓരോ സത്തിനും, പരിധിക്ക് മുകളിലുള്ള സ്ത്രീ ആന്റിനയിൽ നിന്ന് ഫിസിയോളജിക്കൽ പ്രതികരണം ഉളവാക്കുന്ന സംയുക്തങ്ങൾ മാത്രമേ കൂടുതൽ വിശകലനങ്ങളിൽ ഉൾപ്പെടുത്തിയിട്ടുള്ളൂ.
ഹെഡ്‌സ്‌പേസ് ശേഖരത്തിലെ ബയോആക്റ്റീവ് സംയുക്തങ്ങളുടെ ആകെ ബാഷ്പീകരണ പ്രകാശന നിരക്ക് പുതിയ മൂത്രത്തിൽ 29 µg h-1 ൽ നിന്ന് 168 മണിക്കൂർ പഴക്കമുള്ള മൂത്രത്തിൽ 242 µg h-1 ആയി വർദ്ധിച്ചു, പ്രധാനമായും p-cresol, m-formaldehyde Fenol, Phenol എന്നിവയുടെ വർദ്ധനവ് കാരണം. ഇതിനു വിപരീതമായി, 2-സൈക്ലോഹെക്സെൻ-1-വൺ, ഡെക്കനൽ തുടങ്ങിയ മറ്റ് സംയുക്തങ്ങളുടെ പ്രകാശന നിരക്കുകൾ മൂത്രത്തിന്റെ പ്രായം കൂടുന്നതിനനുസരിച്ച് കുറഞ്ഞു, ഇത് ക്രോമാറ്റോഗ്രാമിലെ സിഗ്നൽ തീവ്രത (സമൃദ്ധി) യിലെ കുറവുമായും (ചിത്രം 5D) -G ഇടത് പാനൽ) ഈ സംയുക്തങ്ങളോടുള്ള ഫിസിയോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങളുമായും ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (ചിത്രം 5D-G വലത് പാനൽ).
മൊത്തത്തിൽ, സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതത്തിന് പുതിയതും പഴകിയതുമായ മൂത്രത്തിന്റെ ഹെഡ്‌സ്‌പെയ്‌സുകളുടെ ബാഷ്പശീലമായ സത്തകളിൽ തിരിച്ചറിഞ്ഞ ജൈവ സജീവ സംയുക്തങ്ങളുടെ സമാനമായ സ്വാഭാവിക അനുപാതം ഉണ്ടായിരുന്നു (ചിത്രം 5D–G) കൂടാതെ ഒരു ഹോസ്റ്റ് (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; ചിത്രം 5H) അല്ലെങ്കിൽ രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകൾ (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; ചിത്രം 5I) എന്നിവയ്‌ക്കായുള്ള തിരയലിൽ കാര്യമായ ആകർഷണം ഉളവാക്കുന്നതായി തോന്നിയില്ല. എന്നിരുന്നാലും, ചികിത്സകൾ തമ്മിലുള്ള പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് ജോഡിവൈസ് താരതമ്യങ്ങൾ പെന്റെയ്ൻ നിയന്ത്രണങ്ങളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് കൊതുകുകൾ 24-മണിക്കൂർ പഴകിയ മൂത്രത്തിന്റെ സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതത്തിന് ഗണ്യമായി ആകർഷകമാണെന്ന് കാണിച്ചു (p = 0.0086; ചിത്രം 5H).
24 മണിക്കൂർ പ്രായമുള്ള മൂത്രത്തിന്റെ സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതങ്ങളിൽ വ്യക്തിഗത ഘടകങ്ങളുടെ പങ്ക് വിലയിരുത്തുന്നതിന്, Y- ട്യൂബ് അസ്സേയിൽ പൂർണ്ണ മിശ്രിതങ്ങളുമായി താരതമ്യം ചെയ്ത് ആറ് സബ്ട്രാക്റ്റീവ് മിശ്രിതങ്ങൾ വിലയിരുത്തി, അതിൽ വ്യക്തിഗത സംയുക്തങ്ങൾ നീക്കം ചെയ്തു. ഹോസ്റ്റ്-സീക്കിംഗ് കൊതുകുകൾക്ക്, പൂർണ്ണ മിശ്രിതത്തിൽ നിന്ന് വ്യക്തിഗത സംയുക്തങ്ങൾ കുറയ്ക്കുന്നത് പെരുമാറ്റ പ്രതികരണങ്ങളിൽ കാര്യമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തി (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; അധിക ഫയൽ 1: ചിത്രം S2A), എല്ലാ സബ്ട്രാക്റ്റീവ് മിശ്രിതങ്ങളും പൂർണ്ണ മിശ്രിതത്തേക്കാൾ ചെറുതാണ് എന്നതിനേക്കാൾ കൂടുതൽ ആകർഷകമായിരുന്നു. വിപരീതമായി, പൂർണ്ണമായും സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതത്തിൽ നിന്ന് വ്യക്തിഗത സംയുക്തങ്ങൾ നീക്കം ചെയ്യുന്നത് രക്തം കുടിക്കുന്ന കൊതുകുകളുടെ പെരുമാറ്റ പ്രതികരണങ്ങളെ ബാധിച്ചില്ല (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), ഡെക്കനൽ ഒഴികെ, ഇത് പൂർണ്ണ മിശ്രിത ആകർഷണവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ താഴ്ന്ന നിലയിലേക്ക് നയിച്ചു (p = 0.022; അധിക ഫയൽ 1: ചിത്രം S2B).
എത്യോപ്യയിലെ ഒരു മലേറിയ ബാധിത ഗ്രാമത്തിൽ, 24 മണിക്കൂർ ഗോമൂത്രം കലർന്ന ഒരു സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതത്തിന്റെ ഫലപ്രാപ്തി പത്ത് രാത്രികളിൽ വിലയിരുത്തി (ചിത്രം 6A). ആകെ 4,861 കൊതുകുകളെ പിടികൂടി തിരിച്ചറിഞ്ഞു, അതിൽ 45.7% ആന്ത്രോപസ്.ഗാംബിയ എസ്എൽ ആയിരുന്നു, 18.9% അനോഫിലിസ് ഫറോയൻസിസും 35.4% ക്യൂലെക്സ് എസ്പിപിയും ആയിരുന്നു. (അധിക ഫയൽ 1: പട്ടിക എസ്1). പിസിആർ വിശകലനം വഴി തിരിച്ചറിഞ്ഞ ആൻ.ഗാംബിയൻ സ്പീഷീസ് കോംപ്ലക്സിലെ ഏക അംഗം അനോഫിലിസ് അറബിനിസ് ആണ്. ശരാശരി, ഒരു രാത്രിയിൽ 320 കൊതുകുകളെ പിടികൂടി, ആ സമയത്ത് സിന്തറ്റിക് മിശ്രിത ഭോഗങ്ങളുള്ള കെണികൾ മിശ്രിതമില്ലാത്ത ജോടിയാക്കിയ കെണികളേക്കാൾ കൂടുതൽ കൊതുകുകളെ പിടികൂടി (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). പരീക്ഷണത്തിന്റെ ആരംഭത്തിലും മധ്യത്തിലും അവസാനത്തിലും അഞ്ച് നിയന്ത്രണ രാത്രികളിൽ ഓരോന്നിലും നോൺ-ബൈറ്റ്ഡ് കെണികൾ സ്ഥാപിച്ചു. സമാനമായ എണ്ണം കൊതുകുകൾ ഉണ്ടായിരുന്നു. ഓരോ ജോഡി കെണികളിലും പിടിച്ചെടുക്കപ്പെട്ടവ, വീടുകൾക്കിടയിൽ പക്ഷപാതമില്ലെന്നും (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) പഠന കാലയളവിൽ ജനസംഖ്യയിൽ കുറവില്ലെന്നും സൂചിപ്പിക്കുന്നു. നിയന്ത്രണ കെണികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതം അടങ്ങിയ കെണികളിൽ പിടിക്കപ്പെട്ട കൊതുകുകളുടെ എണ്ണം ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു: ഹോസ്റ്റ് സീക്കിംഗ് (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), സമീപകാല രക്തദാനം (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001), ഗർഭം (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; അധിക ഫയൽ 1: പട്ടിക S1). പിടികൂടിയ ആകെ കൊതുകുകളുടെ എണ്ണത്തിലും ഇത് പ്രതിഫലിക്കുന്നു: ഹോസ്റ്റ് സീക്കിംഗ് > രക്തം കുടിക്കുന്നവർ > ഗർഭിണികൾ > അർദ്ധ ഗർഭിണികൾ > പുരുഷന്മാർ.
24 മണിക്കൂർ പ്രവർത്തിക്കുന്ന സിന്തറ്റിക് ഗോമൂത്ര ഗന്ധ മിശ്രിതത്തിന്റെ ഫലപ്രാപ്തിയുടെ ഫീൽഡ് വിലയിരുത്തൽ. മാകിയുടെ (ഇൻസേർട്ട്) പട്ടണത്തിനടുത്തുള്ള തെക്കൻ-മധ്യ എത്യോപ്യയിൽ (ഭൂപടം) ഫീൽഡ് പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി, ജോടിയാക്കിയ വീടുകളിൽ സെന്റർസ് ഫോർ ഡിസീസ് കൺട്രോൾ (സിഡിസി) ലൈറ്റ് ട്രാപ്പ് (വലത്) ഉപയോഗിച്ച്, ലാറ്റിൻ ചതുരാകൃതിയിലുള്ള രൂപകൽപ്പന (ഏരിയൽ ഇമേജ്) ഉപയോഗിച്ച് (എ). സിന്തറ്റിക് ഗന്ധം-ബെയ്റ്റഡ് സിഡിസി ഫോട്ടോട്രാപ്പുകൾ പെൺ അനോഫിലിസ് അറബെസ്‌ക്യൂസിനെ (ബി) ആകർഷിക്കുകയും പിടിച്ചെടുക്കുകയും ചെയ്യുന്നു, പക്ഷേ അനോഫിലിസ് ഫാറോസിനെ (സി) ആകർഷിക്കുന്നില്ല, വ്യത്യസ്തമായ രീതിയിൽ, ഒരു ഫിസിയോളജിക്കൽ സ്റ്റേറ്റ്-ആശ്രിത പ്രഭാവം. കൂടാതെ, ഈ കെണികൾ ഹോസ്റ്റ് ക്യൂലക്സ് കൊതുകുകളുടെ എണ്ണം ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു. (ഡി) നിയന്ത്രണവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ. ഇടതുവശത്തുള്ള ബാറുകൾ ദുർഗന്ധം വമിക്കുന്ന ഭോഗങ്ങളിൽ (പച്ച) ജോഡികളിലും നിയന്ത്രണ (തുറന്ന) ട്രാപ്പുകളിലും (N = 10) പിടിക്കപ്പെടുന്ന കൊതുകുകളുടെ ശരാശരി തിരഞ്ഞെടുപ്പ് സൂചികയെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു, അതേസമയം വലതുവശത്തുള്ള ബാറുകൾ നിയന്ത്രണ ട്രാപ്പുകളുടെ ജോഡികളിലെ ശരാശരി തിരഞ്ഞെടുപ്പ് സൂചികയെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു (തുറന്ന; N = 5). ).സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ സിഗ്നിഫിക്കൻസ് ലെവലുകളെ നക്ഷത്രചിഹ്നങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു (*p = 0.01 ഉം ***p < 0.0001 ഉം)
സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതങ്ങൾ അടങ്ങിയ കെണികളിലാണ് മൂന്ന് ഇനങ്ങളെയും വ്യത്യസ്തമായി പിടികൂടിയത്. ഹോസ്റ്റിനെ തിരയുന്നു (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), രക്തം കുടിക്കൽ (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001), ഗർഭം (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) a .അറാബിയൻസിസ് സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതം പുറത്തുവിടുന്ന കെണിയിൽ കുടുങ്ങി (ചിത്രം 6B), അതേസമയം An ന്റെ അളവിൽ വ്യത്യാസമൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല. വ്യത്യസ്ത ശാരീരിക അവസ്ഥകളിലുള്ള ഫറോയൻസിസ് കണ്ടെത്തി (ചിത്രം 6C). ക്യൂലെക്സിന്, സിന്തറ്റിക് മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ച് ചൂണ്ടയിടുന്ന കെണികളിൽ ഹോസ്റ്റുകളെ തേടുന്ന കൊതുകുകളുടെ എണ്ണത്തിൽ ഗണ്യമായ വർദ്ധനവ് മാത്രമേ കണ്ടെത്തിയിട്ടുള്ളൂ (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; ചിത്രം 6D), നിയന്ത്രണ കെണികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ.
എത്യോപ്യയിലെ പ്രജനന കേന്ദ്രങ്ങൾക്കും ഗ്രാമീണ സമൂഹങ്ങൾക്കും ഇടയിൽ സാധ്യതയുള്ള ആതിഥേയരുടെ പുറത്ത് സ്ഥാപിച്ചിട്ടുള്ള ആതിഥേയ ചൂണ്ടക്കെണികൾ, മലേറിയ കൊതുകുകൾ ഗോമൂത്രത്തിന്റെ ഗന്ധം ഒരു ആവാസ വ്യവസ്ഥയുടെ സൂചനയായി ഉപയോഗിക്കുന്നുണ്ടോ എന്ന് വിലയിരുത്താൻ ഉപയോഗിച്ചു. ആതിഥേയ സൂചനകളുടെ അഭാവത്തിൽ, ചൂട്, ഗോമൂത്രത്തിന്റെ ഗന്ധം ഉണ്ടെങ്കിലും ഇല്ലെങ്കിലും, കൊതുകുകളെ പിടികൂടിയില്ല (അധിക ഫയൽ 1: ചിത്രം S3). എന്നിരുന്നാലും, ഉയർന്ന താപനിലയുടെയും ഗോമൂത്രത്തിന്റെ ഗന്ധത്തിന്റെയും സാന്നിധ്യത്തിൽ, പെൺ മലേറിയ കൊതുകുകളെ ആകർഷിക്കുകയും പിടിക്കുകയും ചെയ്തു, എന്നിരുന്നാലും ചെറിയ സംഖ്യകളിൽ, മൂത്രത്തിന്റെ പ്രായം കണക്കിലെടുക്കാതെ (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; അധിക ഫയൽ 1: ചിത്രം S3). ഇതിനു വിപരീതമായി, ജല നിയന്ത്രണങ്ങൾ ഉയർന്ന താപനിലയിൽ മലേറിയ കൊതുകുകളെ പിടികൂടിയില്ല (അധിക ഫയൽ 1: ചിത്രം S3).
മറ്റ് പ്രാണികളെപ്പോലെ ജീവിത ചരിത്ര സവിശേഷതകൾ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനായി, ഗോമൂത്രം (അതായത്, കുളങ്ങൾ) ഉപയോഗിച്ച് നഷ്ടപരിഹാരമായി ഭക്ഷണം നൽകുന്നതിലൂടെ മലേറിയ കൊതുകുകൾ നൈട്രജൻ അടങ്ങിയ സംയുക്തങ്ങൾ സ്വായത്തമാക്കുകയും വിതരണം ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്നു [2, 4, 24, 25, 26]. പശു മൂത്രം എളുപ്പത്തിൽ ലഭ്യമായ പുനരുപയോഗിക്കാവുന്ന ഒരു വിഭവമാണ്, ഇത് മലേറിയ രോഗകാരികളുടെ വിശ്രമ സ്ഥലങ്ങളായ പശുത്തൊഴുത്തുകൾ, ഗ്രാമീണ വീടുകൾക്കും മുട്ടയിടുന്ന സ്ഥലങ്ങൾക്കും സമീപമുള്ള ഉയരമുള്ള സസ്യങ്ങൾ എന്നിവയുമായി അടുത്ത ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. പെൺ കൊതുകുകൾ ഈ വിഭവത്തെ ഗന്ധം വഴി കണ്ടെത്തുകയും മൂത്രത്തിലെ പ്രധാന നൈട്രജൻ ഘടകമായ യൂറിയ ഉൾപ്പെടെയുള്ള മൂത്രത്തിലെ നൈട്രജൻ സംയുക്തങ്ങളുടെ ആഗിരണം നിയന്ത്രിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു [15, 16]. പെൺ കൊതുകിന്റെ ശാരീരിക അവസ്ഥയെ ആശ്രയിച്ച്, ആതിഥേയരെ തേടുന്ന പെൺ കൊതുകുകളുടെ പറക്കൽ പ്രവർത്തനവും അതിജീവനവും വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും, ആദ്യത്തെ ഗൊണഡോട്രോപിക് ചക്രത്തിൽ രക്തം കുടിക്കുന്ന വ്യക്തികളുടെ അതിജീവനവും പ്രത്യുൽപാദന സവിശേഷതകളും വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും മൂത്രത്തിലെ പോഷകങ്ങൾ അനുവദിക്കപ്പെടുന്നു. അതിനാൽ, പോഷകാഹാരക്കുറവുള്ള മുതിർന്നവരെപ്പോലെ അടഞ്ഞിരിക്കുന്ന മലേറിയ വെക്റ്ററുകൾക്ക് മൂത്ര മിശ്രിതം ഒരു പ്രധാന പോഷക പങ്ക് വഹിക്കുന്നു [8], കാരണം ഇത് കുറഞ്ഞ അപകടസാധ്യതയുള്ള ഭക്ഷണത്തിൽ ഏർപ്പെടുന്നതിലൂടെ പ്രധാനപ്പെട്ട നൈട്രജൻ സംയുക്തങ്ങൾ നേടാനുള്ള കഴിവ് പെൺ കൊതുകുകൾക്ക് നൽകുന്നു. ഈ കണ്ടെത്തലിന് കാര്യമായ എപ്പിഡെമോളജിക്കൽ ഉണ്ട്. സ്ത്രീകളുടെ ആയുർദൈർഘ്യം, പ്രവർത്തനം, പ്രത്യുൽപാദന ഉൽപ്പാദനം എന്നിവ വർദ്ധിക്കുമ്പോൾ ഉണ്ടാകുന്ന അനന്തരഫലങ്ങൾ, ഇവയെല്ലാം വെക്റ്റർ ശേഷിയെ ബാധിക്കുന്നു. കൂടാതെ, ഈ സ്വഭാവം ഭാവിയിലെ വെക്റ്റർ മാനേജ്മെന്റ് പ്രോഗ്രാമുകളുടെ ലക്ഷ്യമായിരിക്കാം.