Iýmitlenmek we paýlamak mör-möjekleri otlamak we ýaşaýyş taryhy aýratynlyklaryny birleşdirýär. Dürli durmuş etaplarynda belli bir iýmit maddalarynyň ýetmezçiliginiň öwezini dolmak üçin, mör-möjekler goşmaça iýmitlenmek arkaly bu iýmitleri alyp bilerler, mysal üçin, oňurgaly sekresiýalary howuz diýlip atlandyrylýan amalda iýmitlendirip bilerler. Çybyn Anopheles arabiani iýmitlenmedik ýaly görünýär.Iýmitlenmek üçin sygyryň peşewinde arabiensis agitasiýasy durmuş taryhynyň aýratynlyklaryny gowulandyrýar.
Ygtybarlydygyna göz ýetiriň. Arabiensis täze, 24 sagat, 72 sagat we 168 sagatlyk sygyr peşewiniň ysyna çekildi we öý gözleýän we gan bilen iýmitlenýän (48 sagatdan soň nahar) aýallar Y turbasy olfaktometrde ölçenildi, göwreli aýallar süýdemdiriji synagda bahalandyryldy. Gyzzyrma wektorlary üçin goşmaça berhiz, iýmitleniş parametrleri we ýaşaýyş taryhy aýratynlyklary ölçeldi. Sygyr peşewini we esasy azotly birleşýän karbamidini barlamak üçin aýal çybynlaryň paýy we sygyr peşewiniň we karbamidiň mukdary bahalandyryldy. Iýmitlenenden soň aýallar diri galmak, birleşdirilen uçuş we köpelmek üçin baha berildi.
Öý eýesiniň ganyny we iýmitini gözläň. Laboratoriýa we meýdan gözleglerinde araplar täze we garry sygyr peşewiniň tebigy we sintetiki ysyna çekildi. Göwreli aýallar süýdemdiriji ýerlerde sygyr peşewiniň seslenmesine biperwaý garadylar. Öý gözleýän we gan sorýan aýallar sygyr peşewini we karbamidini işjeň siňdirýärler we bu çeşmeleri ömrüň dowamlylygy, fiziologiki ýagdaýy hökmünde bölýärler.
Anopheles arabinis, ömrüň taryhynyň gowulaşmagy üçin sygyr peşewini almak we paýlamak. Sygyr peşewiniň goşmaça iýmitlenmegi gündelik ýaşamagyň we wektoryň dykyzlygyny ýokarlandyrmak arkaly we göni uçuş işjeňligini üýtgetmek arkaly wektor kuwwatyna täsir edýär we şonuň üçin geljekki modellerde göz öňünde tutulmalydyr.
Iýmitlenmek we paýlamak mör-möjekleriň ot-iýmlerini we ýaşaýyş taryhynyň aýratynlyklaryny birleşdirýär [1,2,3] .Mör-möjekler iýmit saýlamaga we edinmäge we iýmitiň barlygyna we ýokumly talaplara esaslanyp öwezini dolmagy üpjün edip biler. 1, 3 we oňurgaly haýwanlaryň we käşirleriň bölünip çykmagy, howuzlar diýlip atlandyrylýan prosesdir [2]. Dürli kebelek we güjük görnüşleri beýan edilse-de, suwaryş deşikleri beýleki mör-möjekleriň sargytlarynda hem ýüze çykýar we bu çeşmeleriň özüne çekilmegi we iýmitlenmegi saglyga we durmuşyň beýleki aýratynlyklaryna ep-esli täsir edip biler [2, 4, 5, 6], 7]. ulular [8], şonuň üçin suwarmak onuň durmuş taryhynda möhüm rol oýnap biler, emma şu wagta çenli bu hereket äsgerilmedi .Bu möhüm ulagda ýokumly maddalary köpeltmegiň serişdesi hökmünde agitasiýa ulanylmagy ünsi çekýär, sebäbi bu epidemiologiki netijelere sebäp bolup biler.
Uly ýaşly aýal Anofel çybynlarynda azot kabul edilmegi, gurçuk basgançagyndan alnan az kaloriki ätiýaçlyklar we gan naharynyň netijesiz ulanylmagy sebäpli çäklendirilýär .Ann. Beýleki mör-möjekleriň görkezişi ýaly uýgunlaşmagy we uçuş hereketini güýçlendirýän azotly birleşmeleri edinmek. [2] .Bu nukdaýnazardan An.-de dogan görnüşleriň biriniň güýçli we tapawutly özüne çekijisi. Gambiýanyň sl görnüşleri toplumy, Anopheles arabinis, täze we garry sygyr peşewi [12,13,14] gyzyklydyr. birleşmeler, karbamid täze peşewdäki azotyň 50-95% -ini emele getirýär [15, 16]. Sygyr peşewiniň ýaşyna görä, mikroorganizmler 24 sagadyň dowamynda azot birleşmeleriniň çylşyrymlylygyny azaltmak üçin bu çeşmelerden peýdalanýarlar. Ammiakyň çalt köpelmegi bilen organiki azotyň azalmagy bilen baglanyşykly, alkogolik mikroorganizmler (köp sanlysy çybynlara zäherli birleşýär). sagat ýa-da ondanam az [13, 14].
Bu gözlegde, öý eýesi we gan bilen iýmitlenýän Ans gözlendi. Ilkinji gonadotropin siklinde arabiensis, peşew garyşmagy bilen karbamid ýaly azot birleşmeleriniň alynmagy üçin baha berildi. Indiki döwürde aýal çybynlaryň bu potensial ýokumly çeşmäni gowulaşdyrmak, köpelmek we has köp iýmitlenmek üçin kesgitlenýär. Bu potensial iýmit çeşmesini gözlemek, arabiensis synlanan diferensial özüne çekijiligiň aňyrsynda himiki arabaglanyşyklary ýüze çykardy. 24 sagatlyk peşewde kesgitlenen üýtgäp durýan organiki birleşmeleriň sintetiki ys garyndylary meýdan şertlerinde hasam bahalandyryldy, laboratoriýa şertlerinde alnan netijeleri giňeltdi we iriň peşew ysynyň dürli fiziologiki ýagdaýlara täsirini görkezdi.Çybynlary özüne çekmek. Alnan netijeler An.arabiensis, oňurgaly peşewde tapylan azot birleşmelerini ýaşaýşyň taryhy aýratynlyklaryna täsir etmek üçin alýar we paýlaýar. Bu netijeler epidemiologiki netijeleriň we wektor gözegçiligi we gözegçiligi üçin nähili ulanylyp bilinjekdigi barada maslahat edilýär.
Anofel araplary (Dongola ştammy) 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH we 12:12 sagatda ýagtylyk: garaňky aýlaw. Laralar distillendirilen suw bilen doldurylan plastmassa gaplarda (20 sm × 18 sm × 7 sm) ösdürilip ýetişdirildi we Tetramin® balyk iýmiti bilen iýmitlendi (Tetra Werke, Melle, DE) .Pupertae ýygnaldy kapasalar (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science, Taichung, Taýwan) ululara ýüze çykmagyna rugsat bermek üçin ululara 10% sukroz ergini reklamasy berildi (dpe), şol pursatda öý gözleýän aýal-gyzlara eksperimentiň öňüsyrasynda distillendirilen suw bilen bir gije açlyk çekildi. Soňky bioassaýlar üçin çybynlary emdirýän, 4 dpe urkaçylara membranany iýmitlendirmek ulgamyny (Hemotek açyş ussahanalary, Akkrington, Beýik Britaniýa) ulanyp, defibrotik goýun gany (Håtunalab, Bro, SE) berildi .Düwürtikli aýallar soňra aýratyn kapasalara geçirildi we aşakda görkezilişi ýaly 10 günlük sukroz reklamasy geçirildi. synagdan 4-6 sagat öň kesel suw mahabaty.
Iýmitlendiriş barlaglary uly ýaşly An.Arab aýal-gyzlarda peşew we karbamid sarp edilişini kesgitlemek üçin ulanyldy. Öý gözleýän we gan bilen iýmitlenýän aýallara 48 sagatda 1% suwuklandyrylan täze we garry sygyr peşewi we iki gözegçilik (10% sukroz we suw) berhiz berildi. 250 µl mikrosentrifuge turbalary (Kislorod Ylmy, Union City, CA, ABŞ; 1A surat) Gyrasyna dolduryň (~ 300 µl). Çybynlar we boýag reňkiniň bolup biljek täsirleriniň arasyndaky bäsdeşlikden gaça durmak üçin, uly Petri tagamyna 10 sany çybyny goýuň (diametri 12 sm we beýikligi 6 sm; Semadeni, Ostermundigen, 5 ° C). 10 gezek. Iýmitlenenden soň çybynlar has giňişleýin seljerilýänçä -20 ° C derejesinde goýuldy.
Öý eýesi we gan siňdirýän aýal Anopheles arabianus tarapyndan siňdirilen iriň peşewini we karbamidini gözläň. Iýmitlendiriş synagynda (A) aýal çybynlara täze we garry sygyr peşewinden, dürli karbamid, sukrozadan (10%) we distillendirilen suwdan (H2O) girýän aýal-gyzlardan has köp siňdirilen (C) aýal-gyzlary öz içine alýar. 168 sagatdan az sygyr peşewi (B) .Siýdiniň ortaça azot düzümi (± standart gyşarmasy) insetde görkezilýär. Öý gözleýän (D, F) we gan sorujy (E, G) aýallar karbamid dozasyna bagly görnüşde alýarlar. ). Göni çyzyk çyzykly regressiýa çyzygyny görkezýär (F, G)
Siňdirilen iýmitleri boşatmak üçin çybynlar aýratynlykda 230 µl distillendirilen suwy öz içine alýan 1,5 ml mikrosentrifuga turbalaryna ýerleşdirildi we bir gezek ulanylýan pestle we simsiz hereketlendiriji (VWR International, Lund, SE) ulanylyp, 10 minutda sentrifugasiýa edildi. otometre esaslanan mikroplat okaýjy (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm) .Düwürtik bilen, çybynlar 1 ml distillendirilen suwda ýere gaçdy, 900 µl spektrofotometrik derňew üçin bir kwette geçirildi (λ 620 nm; Şimadzu, standart 2-e deňdir. µl 1 mg ml-1 ksilen sianid. Soňra belli bir boýag konsentrasiýasynyň optiki dykyzlygy her çybynyň iýmit mukdaryny kesgitlemek üçin ulanyldy.
Ses göwrümi üýtgeýşiň (ANOVA) bir taraplaýyn seljermesi arkaly seljerildi, soň bolsa Tukiniň soňky jübüt deňeşdirmeleri (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, ABŞ, 1989–2007) .Linear regressiýa derňewleri konsentrasiýa bagly karbamidiň kabul edilişini beýan etdi we öý gözleýän we gan sorýan çybynlar (GraphPad Pris.
Her ýaş toparyndan takmynan 20 µl peşew nusgasy Hromosorb® W / AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrih) bilen baglanyşdyryldy we galaýy kapsulalarynda (8 mm × 5 mm) kapsulalar CHNS / O analizatorynyň ýanýan kamerasyna (Flash 2000, Termot Fisher Scientific, Waltham, MA) g N l-1) standart hökmünde ulanylýan belli karbamid konsentrasiýalaryna esaslanyp kesgitlenildi.
Iýmitlenýän we gan sorýan aýal-gyzlaryň diri galmagyna edýän täsirine baha bermek üçin çybynlar aýratyn Petri tagamlaryna (diametri 12 sm we beýikligi 6 sm; Semadeni) howa çalşygy we iýmit üpjünçiligi üçin ýapyk deşikli (diametri 3 sm) ýerleşdirildi. Dietler gönüden-göni 4 dpe bilen üpjün edildi we 1% suwuklandyrylan täze we garry sygyr peşewi, dört sany suwuk we karbamid suwy. diş tampony (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) 5 ml şpris (Thermo Fisher Scientific, Göteborg, SE) içine goýuldy, plunjer aýryldy we petri tagamynyň üstünde goýuldy (1-nji surat) .1A) Her gün iýmitlenişiňizi üýtgediň. Çybynlar ölmän ölýärdi. = Bejergi üçin 40). Dürli berhizler bilen iýmitlenýän çybynlaryň diri galmagy, dietalaryň arasynda diri galmagyň paýlanyşyny deňeşdirmek üçin Kaplan-Maýeriň diri galmak egrileri we sanaw derejesi synaglary arkaly statistik taýdan seljerildi (IBM SPSS Statistika 24.0.0.0).
Öň we yzky panelleri (3-nji surat: ýokarky) 5 mm galyňlykdaky akril panellerden (10 sm ini 10 sm uzynlygy 10 sm) ýasalan adaty çybyn uçýan degirmen (bir sany jübüt sm ) ýeňil kesýän signal hökmünde birleşdirilen el we alýumin folga bölejigini göterýän gol emele getirmek üçin dik turbany böldi.
24 sagat açlyk çekýän aýal-gyzlara päsgelçilikden 30 minut öň ýokardaky berhiz berildi. Doly iýmitlenýän aýal çybynlar 2-3 minutda buzda aýratyn anestizasiýa edildi we ary baly (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) we soňra gorizontal turbalaryň gollary bilen baglanyşdyryldy. .
Uçuş işjeňliginiň görnüşini göz öňüne getirmek üçin uçýan umumy aralyk (m) we yzygiderli uçuş çäreleriniň umumy sany 24 sagadyň dowamynda sagatda hasaplandy. Mundan başga-da, aýry-aýry aýallar tarapyndan uçýan ortaça aralyklar bejergiler boýunça deňeşdirildi we bir taraplaýyn ANOVA we Tukiniň soňky derňewi (JMP Pro, v14.0.0, SAS instituty Inc.) hasaplanýar, ortaça aralyk garaşly hasaplanýar, ortaça aralyk garaşsyz hasaplanýar. .
Iýmitiň An.arabiensisiň öndürijilik öndürijiligine edýän täsirini bahalandyrmak üçin alty sany aýal (4 dpe) gan ýygnanandan soň göni Bugdorm kapasalaryna (30 sm × 30 sm × 30 sm) geçirildi we soňra ýokarda görkezilişi ýaly 48 sagat synag synag dietasy bilen üpjün edildi. Soňra naharlar aýryldy we her gün 20 sagat üýtgäp durdy. Her ýumurtga sanaldy we her bir synag kafesi üçin hasaba alyndy. Leýka kamerasy (DFC) 320 R2 bilen enjamlaşdyrylan Dialux-20 mikroskopy (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) ulanyp, ýumurtgalaryň nusgalary aýry-aýry ýumurtgalaryň ortaça ululygyna we uzynlygynyň üýtgemegine baha bermek üçin ulanyldy;Leica Microsystems Ltd., DE). Galan ýumurtgalar 24 sagadyň dowamynda adaty terbiýe şertlerinde howanyň gözegçiligindäki otagda saklandy we ýokarda görkezilişi ýaly ýaňy-ýakynda ýüze çykan 1-nji instar liçinkalarynyň bir nusgasy ölçeldi. Eggsumurtgalaryň sany we ýumurtga we liçinkalaryň ululygy bejergiler bilen deňeşdirildi we ANOVA we Tukey Inc.
Zebu mallaryndan, Arsi ýaryşlaryndan ýygnanan nusgalardan täze (1 sagatdan soň synag), 24 sagat, 72 sagat we 168 sagatlyk peşew ýygnaldy. Amatlylyk üçin, sygyrlar henizem ammarda bolanda peşew nusgalary ýygnaldy. Her bir nusganyň 100-200 ml-si aýry-aýry poliamid Crischre Gmb DE) gapagy bilen 3 l poliamidde winil hlorid plastik depreklerde. Her bir peşew peşewiniň nusgasyndaky giňişlik üýtgemeleri göni (täze) ýa-da otag temperaturasynda 24 sagatda, 72 sagatda we 168 sagatda ýygnaldy, ýagny her peşew nusgasy her ýaş toparynyň wekili boldy.
Nauşnik üýtgemelerini ýygnamak üçin, diafragma vakuum nasosyny (KNF Neuberger, Freiburg, DE) ulanyp, poliamid halta arkaly işjeňleşdirilen uglerod süzgüçli gaz akymyny (100 ml min-1) 2,5 sagadyň dowamynda adsorbsion sütünine aýlamak üçin ýapyk halkaly ulgam ulanyldy. Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, ABŞ) aýna ýüň wilkalaryň arasynda. Ulanylmazdan ozal sütün 1 ml üýtgedilen n-heksan (Merk, Darmştadt, DE) we 1 ml pentan (99.0% arassa çözüji GC derejesi, Sigma Aldrih) saklandy. Goşmaça derňew üçin ulanylýança C.
Öý eýesi gözleýän we gan iýýän An.Headspace üýtgäp durýan ekstraktlar, 24 sagatda, 72 sagatda we 168 sagatlyk peşewden ýygnanan göni araba turbasy olfaktometr [18] ulanyp, arapidopsis çybynlaryndan üýtgäp durýan ekstraktlar üçin seljerildi. Synaglar ZT 13-15 döwründe geçirildi. ýokardan 3 ± 1 lx gyzyl çyra bilen yşyklandyrylýar. Kömür süzülen we çygly howa akymy (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% çyglylyk) bioassaýy 30 sm s-1-den geçdi, laminar akym we birmeňzeş erik gurluşy döredildi. Olfaktometr, her 5 minutda stimulýator üýtgeýär. Derňew üçin, her nauşnik ekstraktynyň 10 μl, 1:10 suwuklandyryldy, stimul hökmünde ulanyldy. Gözegçilik hökmünde deň mukdarda pentan ulanyldy. Hususy öý gözleýän ýa-da gan sorýan çybynlar eksperiment başlamazdan 2-3 sagat öň aýryldy. 1 minutlap, soň bolsa kapasanyň kebelek klapany açyldy. Bejergi ýa-da gözegçilik etmek, goýberilenden 5 minutyň içinde çeşme bilen gatnaşyga giren çybynlaryň paýy hökmünde seljerildi. Her kelläniň üýtgäp durýan ekstrakty we gözegçiligi azyndan 30 gezek köpeldildi we haýsydyr bir günüň täsirinden gaça durmak üçin her bir synag gününde analiz edildi. soň täsin gatnaşyklar üçin jübüt deňeşdirmeler (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Tüweleýiň jogaby. Täze we garry sygyr peşewinden boşluk ekstraktlary Bugdorm kapasalarynda (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science) seljerildi .Plastik käseler (30 ml; Nolato Hertila) 20 ml distillendirilen suw bilen dolduryldy we her kapasanyň ters burçlarynda ýerleşdirildi. pentan gözegçilik käsesini sazlamak üçin ulanyldy. positioner täsirine gözegçilik etmek üçin her synagyň arasynda bejeriş we gözegçilik käseleri çalşyldy. Gan bilen iýmitlenýän on aýal ZT 9-11-de tejribe kapasalaryna goýberildi we käselerdäki ýumurtgalar 24 sagatdan soň sanaldy. Tohum indeksini hasaplamagyň formulasy: (bejeriş käsesinde goýlan ýumurtgalaryň sany - bejerginiň käsesinde goýlan ýumurtgalaryň sany).
Zenan An.arabiensisiň gaz hromatografiki we elektron antenna nagşyny kesgitlemek (GC-EAD) derňewi öň beýan edilişi ýaly geçirildi [20]. Gysgaça, HP-5 sütüni (30 m × 0,25 mm id, 0,25 μm film galyňlygy, Agilent Technologies) bilen enjamlaşdyrylan Agilent Technologies 6890 GC (Santa Klara, CA, ABŞ) kömegi bilen täze nauşnik üýtgäp durýan ekstraktlar aýryldy.Gidrogen ortaça çyzykly akym tizligi 45 sm s-1 bolan göçme faza hökmünde ulanyldy. Her nusga (2 μl) giriş temperaturasy 225 ° C bilen bölünmedik tertipde 30 sekuntda sanjym edildi. GC peçiniň temperaturasy 35 ° C (3 minutlyk tutum) -dan 300 ° C (10 minutlyk tutma) 10 ° C minus 1-e deň boldy. Gerstel, Mülheim, DE) ýalyn ionlaşdyryjy detektor bilen EAD arasynda. EAD üçin GC akymly kapilýar, GC peçiniň temperaturasyny we 5 ° C-ni yzarlaýan Gerstel ODP-2 geçiriji liniýadan aýna turbasyna (10 sm × 8 mm) geçdi, bu ýerde bir uglerod süzülen, çygly howa (1,5 l min - antenna) ýerleşdirildi. we öý gözleýän çybynlar üçin her ýaşdaky peşew nusgalarynda azyndan üç sany göçürme geçirildi.
GC-EAD derňewinde antenna jogaplaryny almak üçin birleşdirilen GC we köpçülik spektrometrini (GC-MS; 6890 GC we 5975 MS; Agilent Technologies) ulanyp, täze we garry süýt peşewleriniň nauşnik kolleksiýalarynda bioaktiw birleşmeleri kesgitlemek. GC eAD analizinde antenna jogaplaryny almak üçin. Ortaça çyzykly akym tizligi 35 sm s-1.A 2 μl nusga, GC-EAD derňewi ýaly injektor sazlamalary we peç temperaturasy bilen sanjym edildi. Toplumlar saklanyş wagtyna (Kovát indeksine) we adaty kitaphana we NIST14 kitaphanasy (Agilent) bilen deňeşdirilende köpçülik spektrleri kesgitlenildi. Aldrih) daşarky standart hökmünde sanjym edildi.
Öý gözleýän we gan sorýan Ans.arabiensis-i özüne çekmek üçin täze we garry peşewde ýüze çykarylan bioaktiw birleşmelerden ybarat sintetiki ys garyndysynyň netijeliligine baha bermek, ýokardaky ýaly bir olfaktometr we protokol ulanyp. Sintetiki garyndylar garyşyk nauşnikdäki birleşmeleriň düzümini we deňeşdirmelerini deňeşdirdi: 24 sagatlyk, 48 sagatlyk S-2, G-2 sagat, 48 sagat Derňew üçin, sintetik garyndynyň 1: 100 eritmesinden 10 μl ulanyň, umumy çykaryş tizligi takmynan 140-2400 ng h-1 aralygynda bolup biler we gan siňdirýän çybynlaryň özüne çekijiligini bahalandyrmak üçin. Soňra synag doly garyndylarda geçirilýär, onda doly garyndynyň ýeke-täk birleşmeleriniň aýrylan garyndylary aýrylýar. täsin gatnaşyklar üçin jübüt deňeşdirmeler (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Sygyr peşewiniň gyzzyrma çybynlary, täze we garry sygyr peşewleri üçin ýokarda görkezilişi ýaly ýygnalan ýer bolup hyzmat edip biljekdigini ýa-da ýokdugyny kesgitlemek üçin suw 3 l çelekde (100 ml) goýlup, çeňňek duzaklaryna salnypdyr.. Dürli ýaşdaky peşew bilen duzakda tutulan ito sanlary logiki regressiýany beta binomial paýlamak bilen deňeşdirildi (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Efiopiýanyň Oromiýa sebitiniň Maki şäherçesiniň golaýyndaky gyzzyrma-endemiki obada (8 ° 11 ′ 08 ″ N, 38 ° 81 ′ 70 ″ E; 6A surat). Gözleg awgust aýynyň ortalaryndan sentýabryň ortalaryna çenli her ýyl ýapyk galyndy sepilmezden ozal geçirildi. Uzak ýagyş möwsümi bilen bir hatarda (obanyň 20-den 50 m aralygy) saýlandy. öýde haýwanlara rugsat berilýär, içerde nahar bişirmäge (odun ýa-da kömür çekmäge) rugsat berilmedi (iň bolmanda synag döwründe) we iň köp iki ilatly öýler, kesel ýokaşan ýerlerde uklaýarlar.Bejergi çybyn torunyň aşagynda. Addis Ababa uniwersitetiniň Tebigy ylymlar fakultetiniň (CNS-IRB) institusional gözleg etikasyna gözegçilik geňeşi (IRB / 022/2016) tarapyndan tassyklandy, Helsinki Bütindünýä lukmançylyk birleşiginiň jarnamasy tarapyndan kesgitlenen görkezmelere laýyklykda. tejribe dizaýny 2 × 2 latyn inedördül dizaýnyna eýerdi, onda ilkinji gije jübütlenen jaýlara sintetiki garyndylar we dolandyryşlar bellendi we indiki synag gijesinde jaýlaryň arasynda çalşyldy. Bu proses on gezek gaýtalandy. Mundan başga-da, saýlanan jaýlarda çybynlaryň işine baha bermek üçin CDC duzaklary meýdan synagynyň başynda, ortasynda we ahyrynda yzly-yzyna bäş gije işlemeli boldy.
Alty bioaktiw birleşmäni öz içine alýan sintetiki garyndy heptanda (97,0% çözüji GC derejesi, Sigma Aldrih) eritildi we pagta süýümi dispenseri ulanyp 140 ng h-1-de goýberildi. 20 sagat synag wagtynda ähli birleşmeleriň hemişelik mukdarda bölünip çykmagyna rugsat berdi. Gaýneswil, FL, ABŞ; 6A surat) .Gaplar ýerden 0,8 - 1 m ýokarda, düşegiň aýagynda asyldy we meýletinçi bejerilmedik çybyn torunyň aşagynda ýatdy we 18: 00-dan 06: 30 aralygynda işledi. Jyns we fiziologiki ýagdaýlar bilen ele salnan çybynlar (polimeriýa zynjyrynyň genleri hökmünde kesgitlenildi). Meýdan gözleginde, jübütlenen jaýlaryň duzaga düşmegi nominal logistik laýyk modeliň kömegi bilen derňeldi, bu ýerde özüne çekiji garaşly üýtgeýji we bejergi (sintetiki garyndy vs gözegçilik) kesgitlenen täsir boldy (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.).Bu ýerde, ähtimallyk derejesiniň synagyndan χ2 we p-bahalary habar berýäris.
Ygtyýarly.Anabiensisiň peşewini, esasy ajaýyp çeşmesini (dpe) -nyň 4 günlük iýmit ýa-da suw iýmitlendirmek synaglary başga bir iýmitlenýär (F (5,426). 20.15, p <0.0001 we F ( 5,299) = 56,00, P <0.00-nji surat (C). Urit-Suratda (1b. 1b). Lower 10% surroza (f (10,72) = 15,72, p <0.0001; p <0,557) .1e) .1e) .1E) .F) .1E). Iki fizo bilen deňeşdirilende logiki ştat, planbotomiki aýallar, useratomarment aýal-gyzlar has ýokary konsentrasiýadan has köp Uatelleri has ýokary konsentratda sortlaýar we 78.82, p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001 p <0.0001;1F, G) .Biz karbamidli iýmitden kabul etmek iň amatly bahalara eýe bolsa-da (1D, E), iki fiziologiki ýagdaýdaky aýallar karbamid konsentrasiýasynyň ähli diapazonyna siňdirilen karbamidiň mukdaryny çyzykly görnüşde modulirlemegi başardylar (1F, G).) .Şuňa meňzeşlikde, çybynlar azotyň siňdirilişini gözegçilikde saklaýana meňzeýär, sebäbi peşewdäki azotyň mukdary sorulýan mukdarda görkezilýär (1B, C we B suratlar).
Siýdiniň we karbamidiň öý gözleýän we gan sorýan çybynlaryň diri galmagyna edýän täsirine baha bermek üçin aýallara dört ýaşdaky peşew (täze, 24 sagatda, 72 sagatda we 168 sagatdan soň) iýmitlenýär we karbamid konsentrasiýasynyň bir bölegi, distillendirilen suw we 10% sukroz gözegçilik hökmünde hyzmat edýär (2A surat). 1; karbamid: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; 2B, C surat) we gan bilen iýmitlenýän aýallar (peşew: χ2 = 93.0, df = 5, p <0.0001; karbamid: χ2 = 137.9, df = 5, p <0.0001; 2D, E surat). E). Täze we köne peşew bilen iýmitlenýän aýallar 72 sagatlyk peşew (p = 0.016) bilen ýaşamagyň iň pes ähtimallygyna eýe bolup, diri galmagyň dürli derejesini görkezdi (2B-nji surat). Mundan başga-da, 135 m karbamid bilen iýmitlenýän aýal-gyzlar suw gözegçiliginden has uzak ýaşadylar (p <0.04).2c). Suw bilen iýmitlenen aýallar bilen birleşdirildi; 2-nji surat (P <001001), 72 sagatlap, iki sagatlyk sruze Ureanyň we suwuň raçalary (p <.013); şekil 2e).
Sygyr peşewi we karbamid bilen iýmitlenýän Anopheles arabinisiň diri galmagy. Bioassaýda (A) aýal çybynlara täze we garry sygyr peşewinden, dürli karbamid, sukrozadan (10%) we distillendirilen suwdan (H2O) iýmitlenýär. ) we karbamid (C, E) we gözegçilikler, Sukroza we suw öldi
Uçuş fabriginiň synagynda 24 sagadyň dowamynda kesgitlenen umumy aralyk we sany, uçuş işjeňligini az görkezýän öý eýesi gözleýän we gan sorýan çybynlaryň arasynda tapawutlanýar (3-nji surat). Täze we garry peşew ýa-da sukroz we suw üpjün edýän öý çybynlary dürli uçuş görnüşlerini görkezýärdi (3-nji surat). urnal.Sakroza ýa-da 72 sagatlyk peşew bilen üpjün edýän aýal çybynlar 24 sagadyň dowamynda işjeňlik görkezýärdi, suw bilen üpjün edýän aýallar bolsa orta döwürde has işjeň bolýardy. Sakaroza bilen iýmitlenýän çybynlar gijäniň bir wagty we irden iň ýokary işjeňlik görkezýärdi, 72 sagatlyk peşew iýenler bolsa 24 sagadyň dowamynda yzygiderli peselýär (3-nji surat).
Aw gözleýän gan sorýan aýal Anofel arabininiň sygyr peşewi we karbamid bilen iýmitlenmegi. Uçuş fabriginiň synagynda täze we garry sygyr peşewi bilen iýmitlenýän aýal çybynlar, karbamid, sukroz (10%) we distillendirilen suw (H2O) her bir sagadyň dowamynda gorizontal, erkin aýlanýan gollar (ýokarda) we sag aralykdaky gan (sag) 24 sagatlyk döwür ýazga alyndy (garaňky: çal; açyk: ak) .Serkadanyň işjeňlik grafiginiň sag tarapynda ortaça aralyk we ortaça sany görkezilýär. Roralňyşlyklar çyzgylary ortaça adaty ýalňyşlygy görkezýär. Statistik derňew tekste serediň
Umuman alanyňda, gözleýän aýal-gyzlaryň umumy uçuş işjeňligi 24 sagadyň dowamynda uçuş aralygyna meňzeş bir tertibe eýerdi. Uçuş aralygy iýmitlenýän iýmitlere ep-esli täsir etdi (F (5, 138) = 28.27, p <0.0001) we öý gözleýän aýal-gyzlar 72 sagat peşew iýdi, beýleki diyetlere garanyňda has uzak aralyklara uçdy (p <0.0001) we sukroza. (sah. karbamid suw ýa-da sukroz bilen iýmitlenýän aýallardan has uzak uçdy (p <0.03).
Gan sorýan çybynlaryň umumy uçuş işjeňligi durnukly we ähli berhizlerde 24 sagadyň dowamynda dowam etdirildi, suw bilen iýmitlenýän aýallar, şeýle hem täze we 24 sagat iýmitlenýän aýallar üçin peşew işjeňliginiň ýokarlanmagy bilen (3-nji surat) .Siýdik iýmitlenmegi gan bilen iýmitlenýän aýallarda uçuş aralygyna ep-esli täsir edýärdi (F (5, 138) = 4.83, p = 0.0004) we iýmitlenişe gözegçilik etmek (täze, p = 0.0091; 72 sagat, p = 0.0022; 168 sagat, p = 0,001; sukroz, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
Siýdik we karbamid bilen iýmitlenmegiň köpeliş parametrlerine edýän täsiri ýumurtga goýýan bioassaýlarda (4A surat) bahalandyryldy we her bir aýal tarapyndan goýlan ýumurtganyň sanyna, ýumurtganyň ululygyna we täze çykan ilkinji instar liçinkalaryna görä gözlenildi. Uryumurtga bilen iýmitlenýän arap urkaçylary diýeta bilen tapawutlanýar (F (5,222) = peşewler, 24 sagat). we sakroza bilen iýmitlenýänlere meňzeýärdi (4B-nji surat). Şeýle-de, peşew bilen iýmitlenýän urkaçylaryň goýýan ýumurtgalarynyň ululygy (F (5, 209) = 12.85, p <0.0001) bilen üýtgeýär, 24 sagatlyk peşew we sukroz bilen iýmitlenýän aýallar suw bilen iýmitlenýän aýallara garanyňda ep-esli uly ýumurtga goýýar (168-nji surat). 0.0001), 24 we 72 sagatlyk peşew bilen iýmitlenýän urkaçylaryň ýumurtgalaryndan çykýan ýumurtgalardan ep-esli uly liçinkalar ýüze çykýar. Suw bilen iýmitlenýän we 168 sagatlyk peşew bilen iýmitlenýän aýallar (4D-nji surat).
Sygyr peşewi we karbamid bilen iýmitlenýän Anopheles arabinis zenanlarynyň öndürijilik öndürijiligi. Gan bilen iýmitlenýän aýal çybynlara täze we garry sygyr peşewinden, karbamid, sukrozadan (10%) we distillendirilen suwdan (H2O) 48 sagatlap bioassaýa goýmazdan we ýumurtga goýýan substratlar (D), ýumurtga goýýan substratlar (D), ýumurtga goýýan substratlar 48 sagat (A), ýumurtga goýýan substratlar (D), ýumurtga goýýan substratlar 48 sagat (A) boldy. Berlen berhiz ep-esli derejede täsir etdi (sygyr peşewi: BD; karbamid: EG) .Dürli harp atlary bilen ölçenen her bir parametr üçin manylar biri-birinden düýpgöter tapawutlanýardy (Tukiniň post analizini ulanyp bir taraplaýyn ANOVA; p <0.05). roralňyşlyklar barlary ortaça adaty ýalňyşlygy görkezýär;
Siýdiniň esasy azot düzümi hökmünde karbamid, gan bilen iýmitlenýän urkaçylara berhiz hökmünde berlende, ähli gözleglerde köpeliş parametrlerine ep-esli täsir etdi. Karbamidiň iýmitlenmeginden soň, karbamid konsentrasiýasyna baglylykda (F (11, 360) = 4.69; p <0.0001), aýallar karbamid konsentrasiýasy 134 µM we 1334 mM has köp ýumurtga goýýar. suwlar (F (10, 4245) = 36.7; p <0.0001; 4F surat) we liçinkalaryň ululygy, enelerde karbamidiň şuňa meňzeş konsentrasiýasyna täsir eden hem bolsa (F (10, 3305) = 37.9; p <0.0001) has üýtgeýärdi (4G surat).
Öýjükli peşew peşewiniň gulak giňişliginiň üýtgäp durýan ekstraktlaryna umumy özüne çekiji. Aýna turba olfaktometrinde (5A surat) bahalandyrylan arabiensis, peşew ýaşyna ep-esli derejede täsir etdi (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; 5B surat) p = 0.00070), Täze peşewiň ysyndan başga (p = 0.13; 5B surat) .Gan sorýan çybynlaryň peşew ysyna umumy çekilmegi düýpgöter tapawutly bolmasa-da (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; 5C surat), bu ululykdaky ululykdaky süzgüçler bilen deňeşdirilende has täsirli bolýar (5C surat).
Öý eýesi we gan bilen iýmitlenýän Anopheles arabianus gözlemekde tebigy we sintetik sygyr peşewiniň yslaryna özüňi alyp barşyň jogaplary. Aýna turba olfaktometriniň shemasy. F. Jogap. Iki ýyldyzjyk (**) öndürijiliksiz jogaplary görkezýär. Öý eýesini (H) we gan sorujy (I) An.arabiensisiň täze we garry sygyr peşewiniň yslarynyň sintetiki garyndylaryna dürli ýüzlenmeleri tapyň. Dürli harp atlaryna çekilen çybynlaryň ortaça mukdary biri-birinden düýpgöter tapawutlanýar (Tukey-den peýdalanýan ANOVA;p <0.05). roralňyşlyklar paneli şkalanyň standart ýalňyşlygyny görkezýär
Zenan Ann.arabiensis, gan naharyndan soň 72 sagatda we 120 sagatda, süýdemdirilende, pentan gözegçilikleri bilen deňeşdirilende täze we garry sygyr peşewinden gulagyň üýtgäp durýan ekstraktlaryna artykmaçlyk görkezilmedi (χ2 = 3.07, p> 0.05; Goşmaça faýl 1: S1 surat).
Zenan Ann.arabiensis üçin GC-EAD we GC-MS analizleri sekiz, alty, üç we üç bioaktiw birleşmäni kesgitledi (5D-G surat) .El elektrofiziologiki täsirleri döredýän birleşmeleriň sanynyň tapawudyna garamazdan, bu birleşmeleriň köpüsi täze we garry peşewden ýygnanan üýtgäp durýan ekstraktda bar.
Nauşnik ýygnamakdaky bioaktiw birleşmeleriň umumy üýtgäp durýan tizligi, täze peşewdäki 29 µg h-1-den 168 sagatlyk peşewde 242 µg h-1-e çenli ýokarlandy, esasan p-kresol we m-formaldegid Fenol hem fenol sebäpli ýokarlanýar. Munuň tersine, 2-sikloheksen-1-iň peselmegi we peselmegi bilen peselýän hrom bilen peselýär. atogram (5D-nji surat) -G çep panel) we bu birleşmelere fiziologiki jogaplar (5D-G sag panel).
Umuman alanyňda, sintetiki garyndynyň täze we garry peşew gulaklarynyň üýtgäp durýan ekstraktlarynda ýüze çykarylan bioaktiw birleşmeleriň şuňa meňzeş gatnaşygy bardy (5D - G) we öý eýesini gözlemekde ep-esli täsir etmedi (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; 5H-nji surat) ýa-da jübüt (4) bejergileriň arasyndaky deňeşdirmeler, öý gözleýän çybynlaryň pentan dolandyryşlary bilen deňeşdirilende 24 sagatlyk peşewiň sintetiki garyndysyna ep-esli özüne çekijidigini görkezdi (p = 0.0086; 5H surat).
24 ýaşly peşewiň sintetiki garyndylarynda aýry-aýry komponentleriň roluna baha bermek üçin, aýry-aýry birleşmeler aýrylan Y-turba analizindäki doly garyndylara garşy alty sany çekiji garyndy bahalandyryldy. Öý eýesi gözleýän çybynlar üçin, doly garyndydan aýry-aýry birleşmeleri aýyrmak özüni alyp barşyň täsirine ep-esli täsir etdi (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032) garyşyk. Munuň tersine, doly sintetiki garyndydan aýry birleşmeleriň aýrylmagy, garyndynyň doly garyndysy bilen deňeşdirilende pes derejelere sebäp bolan dekanaldan başga, gan sorýan çybynlaryň (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077) özüni alyp barşyna täsir etmedi (p = 0.022; Goşmaça faýl 1: S2B surat).
Efiopiýanyň gyzzyrma-endemiki obasynda 24 gije sygyr peşewiniň sintetik garyndysynyň meýdan şertlerinde çybynlary çekmegiň netijeliligine on gije baha berildi (6A-njy surat). Jemi 4861 çybyn tutuldy we kesgitlenildi, şolardan 45,7% Antropus.gambiae sl, 18,9% Anopheles soplar. heles arabinis, PCR derňewi bilen kesgitlenen An.Gambiýa görnüşler toplumynyň ýeke-täk agzasydyr. Ortaça bir gije 320 sany çybyn tutuldy, şol döwürde sintetiki garyndy çeňňekleri duzaklar garyşyksyz duzaklardan has köp çybyn tutdy (χ2 (0, 3196) = 170.0, p <0.0001). öýleriň arasynda (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p> 0.05) hiç hili gapma-garşylygyň ýokdugyny we okuw döwründe ilatyň azalmaýandygyny görkezýän duzaklaryň her birinde tutuldy. Dolandyryş duzaklary bilen deňeşdirilende, sintetiki garyndyny öz içine alýan duzaklarda tutulan çybynlaryň sany ep-esli artdy: öý eýesi (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001) (χ2 (0, 228) = 6.27, p = 0.0123;Goşmaça faýl 1: S1 tablisa) .Bu tutulan çybynlaryň umumy sanynda-da öz beýanyny tapdy: öý eýesi> gan dökmek> göwreli> ýarym göwreli> erkek.
24 sagatlyk sintetik sygyr peşew ysynyň garyndysynyň netijeliligine meýdan bahalandyrmasy. Meýdan synaglary, günorta-merkezi Efiopiýada (karta), Maki şäherçesiniň golaýynda, jübüt öýlerde Kesellere gözegçilik merkeziniň (sagda) ýeňil duzagy (sagda), latyn inedördül dizaýny (howa şekili) (A). kökler (C) başgaça, fiziologiki döwlete bagly täsir. Mundan başga-da, bu duzaklar öý eýesi Culex çybynlarynyň sanyny ep-esli artdyrdy. (D) Dolandyryş bilen deňeşdirilende. Çep tarapdaky barlar ysly çeňňek (ýaşyl) jübütde tutulan çybynlaryň ortaça saýlama indeksini görkezýär (N = 10);) .Asterisks statistiki ähmiýet derejesini görkezýär (* p = 0.01 we *** p <0.0001)
Üç görnüş sintetiki garyndylary öz içine alýan duzaklarda başgaça tutuldy. Hoster eýesine (χ2 (1, 1345) = 71,7, p <0.0001), gan iýmitlendirmek (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) we göwrelilik (χ2 (1, 180) = 6.11, p = 0.0134) sarantik garyndysy. Dürli fiziologiki ýagdaýlarda haroensis tapyldy (6C-nji surat) .Kulex üçin gözegçilik duzaklary bilen deňeşdirilende sintetiki garyndy (χ2 (1,1319) = 12.6, p = 0.0004; 6D surat) öý eýelerini gözleýän çybynlaryň sanynyň ep-esli artmagy tapyldy.
Efiopiýadaky köpelýän ýerler bilen oba jemgyýetleriniň arasynda potensial ýer eýeleriniň daşynda ýerleşýän ýyrtyjy duzaklar, ysytma çybynlarynyň sygyr peşewiniň ysyny kabul ediş mekany hökmünde ulanýandygyna ýa-da ýokdugyna baha bermek üçin ulanyldy. Öýjükli yslar, ýylylyk ýok bolsa ýa-da sygyr peşewiniň ysy ýok bolsa, çybynlar tutulmady we sygyrlaryň ýokaşmagy, sosinanyň ýoklugy. , az mukdarda bolsa-da, peşew ýaşyna garaşsyz (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Goşmaça faýl 1: S3 surat). Munuň tersine, suw gözegçiligi ýokary temperaturada gyzzyrma çybynlaryny tutmady (Goşmaça faýl 1: S3 surat).
Gyzzyrma çybynlary, beýleki mör-möjeklere meňzeş sygyr peşewine (ýagny, howuzlara) öwezini dolmak arkaly azot saklaýan birleşmeleri satyn alýar we paýlaýar. 2, 4, 24, 25, 26 peşewdäki azotly birleşmeleriň, şol sanda peşewdäki esasy azotly komponentiň karbamidiň kabul edilmegi [15, 16]. Aýal çybynyň fiziologiki ýagdaýyna baglylykda, peşewdäki iýmit maddalary uçuş işjeňligini we öý gözleýän aýal çybynlaryň ýaşamagyny we köpelmegini öz içine alýar. ýeterlik iýmitlenmedik ulular [8], sebäbi aýal çybynlara az töwekgelçilikli iýmitlenmek bilen möhüm azot birleşmelerini edinmek mümkinçiligini berýär. Bu tapyndy epidemiologiki netijelere eýe, sebäbi aýallaryň ömri, işjeňligi we köpeliş netijesi ýokarlanýar, bularyň hemmesi wektor kuwwatyna täsir edýär. Mundan başga-da, bu hereket geljekki wektor dolandyryş programmalarynyň maksady bolup biler.