يدمج اكتساب المغذيات وتوزيعها بين البحث عن الحشرات وسمات تاريخ الحياة ، وللتعويض عن النقص في مغذيات معينة في مراحل الحياة المختلفة ، يمكن للحشرات الحصول على هذه العناصر الغذائية من خلال التغذية التكميلية ، على سبيل المثال ، عن طريق التغذية على إفرازات الفقاريات في عملية تعرف باسم البرك ، ويبدو أن البعوض Anopheles arabiani يعاني من سوء التغذية ، وبالتالي يتطلب دراسة ما إذا كانت هذه العناصر الغذائية للتكاثر أم لا.التحريض العربي على بول البقر لاكتساب المغذيات يحسن خصائص تاريخ الحياة.
تأكد من أنها آمنة ، فقد انجذب الأرابينسيس إلى رائحة بول البقر الطازج ، الذي يبلغ عمره 24 ساعة ، و 72 ساعة ، و 168 ساعة ، كما تم قياس الإناث الباحثة عن العائل والمغذيات بالدم (48 ساعة بعد وجبة الدم) في مقياس شمي الأنبوب Y ، وتم تقييم الإناث الحوامل لاختبار التفريخ ، ثم تم استخدام جميع المركبات الكيميائية والفيزيولوجية الكهربية المركبة في فئات عمر البقرة. في التجارب الميدانية والأنابيب Y- لفحص بول البقر واليوريا المركب الرئيسي المحتوي على النيتروجين كوجبات تكميلية محتملة لناقلات الملاريا ، تم قياس معايير التغذية وخصائص تاريخ الحياة ، وتم تقييم نسبة إناث البعوض وكمية بول البقر واليوريا الممتصة ، وبعد الإطعام ، تم تقييم الإناث من أجل البقاء ، والطيران المربوط ، والتكاثر.
البحث عن دم العائل وتغذيته ، في الدراسات المختبرية والميدانية ، انجذب العرب إلى الرائحة الطبيعية والاصطناعية لبول البقر الطازج والمسِن ، وكانت الإناث الحوامل غير مبالية باستجابات بول الأبقار في مواقع التفريخ ، وتمتص الإناث الباحثة عن الضياع وامتصاص الدم بول البقر واليوريا بشكل فعال وتخصص هذه الموارد وفقًا لمقايضات تاريخ الحياة أو حالة البقاء على قيد الحياة أو وظيفة التكاثر.
اكتساب Anopheles arabinis وتوزيع بول البقر لتحسين خصائص تاريخ الحياة. تؤثر التغذية التكميلية لبول البقر على قدرة الناقل بشكل مباشر عن طريق زيادة البقاء اليومي وكثافة الناقلات ، وبشكل غير مباشر عن طريق تغيير نشاط الطيران ، وبالتالي يجب أخذها في الاعتبار في النماذج المستقبلية.
يدمج اكتساب المغذيات وتوزيعها بين البحث عن علف الحشرات وخصائص تاريخ الحياة [1،2،3]. تستطيع الحشرات اختيار الطعام والحصول عليه وإجراء التغذية التعويضية بناءً على توافر الغذاء ومتطلبات المغذيات [1 ، 3]. يعتمد توزيع العناصر الغذائية على عملية تاريخ الحياة وقد يؤدي إلى متطلبات مختلفة لنوعية وكمية النظام الغذائي في مراحل الحياة المختلفة للحشرات [1 ، 2] ويمكن الحصول على العناصر الغذائية من خلال العناصر الغذائية المختلفة لتعويض هذه النقص. عنصر وإفرازات الفقاريات والجيف ، وهي عملية تُعرف باسم البرك. ، لذلك قد يلعب الري دورًا مهمًا في خصائص تاريخ حياته ، ولكن تم إهمال هذا السلوك حتى الآن. استخدام التحريض كوسيلة لزيادة تناول المغذيات في هذه السيارة الهامة يستدعي الانتباه لأن هذا قد يكون له عواقب وبائية مهمة.
إن تناول النيتروجين في إناث بعوض الأنوفيلة محدود بسبب انخفاض احتياطيات السعرات الحرارية المنقولة من مرحلة اليرقات والاستخدام غير الفعال لوجبة الدم. مركبات الأوكس التي تعزز التكيف والقدرة على المناورة للطيران ، كما هو موضح من قبل الحشرات الأخرى [2]. في هذا الصدد ، فإن الجاذبية القوية والمميزة لأحد الأنواع الشقيقة داخل An. مجمع أنواع الأحياء الفقيرة الغامبي ، Anopheles arabinis ، بول البقر الطازج وكبار السن [12 ، 13 ، 14] ، أمر مثير للاهتمام. يمثل 50-95 ٪ من إجمالي النيتروجين في البول الطازج [15 ، 16]. مع تقدم عمر بول البقر ، تستخدم الكائنات الحية الدقيقة هذه الموارد لتقليل تعقيد المركبات النيتروجينية في غضون 24 ساعة [15]. تتراوح أعمارهم بين 24 ساعة أو أقل [13 ، 14].
في هذه الدراسة ، تم البحث عن العائل والمغذيات بالدم ، وخلال الدورة الأولى لموجهة الغدد التناسلية ، تم تقييم Arabiensis لاكتساب المركبات النيتروجينية ، بما في ذلك اليوريا ، عن طريق خلط البول ، وبعد ذلك ، تم إجراء سلسلة من التجارب لتقييم كيفية تخصيص البعوض للإناث هذا المورد المغذي المحتمل لتحسين البقاء على قيد الحياة ، والتكاثر والمزيد من العلف ، تم تقييم هذه العناصر أخيرًا وموثوق بها للبول. في بحثهم عن هذا المورد الغذائي المحتمل ، اكتشف arabiensis الارتباطات الكيميائية وراء الجاذبية التفاضلية الملحوظة. تم تقييم مخاليط الرائحة الاصطناعية من المركبات العضوية المتطايرة (VOCs) التي تم تحديدها في البول بعمر 24 ساعة في ظل الظروف الميدانية ، مما أدى إلى توسيع النتائج التي تم الحصول عليها في ظل الظروف المختبرية وإظهار تأثير رائحة بول الأبقار على الحالات الفسيولوجية المختلفة.تجاذب البعوض النتائج التي تم الحصول عليها تؤكد أن An.arabiensis يكتسب ويوزع المركبات النيتروجينية الموجودة في بول الفقاريات للتأثير على خصائص تاريخ الحياة ، وتناقش هذه النتائج في سياق العواقب الوبائية المحتملة وكيف يمكن استخدامها لمراقبة ناقلات الأمراض ومكافحتها.
تم الحفاظ على Anopheles arabicans (سلالة دنقلا) عند 25 ± 2 درجة مئوية ، 65 ± 5٪ رطوبة نسبية وضوء 1212 ساعة: دورة مظلمة. تم تربيتها في صواني بلاستيكية (20 سم × 18 سم × 7 سم) مملوءة بالماء المقطر وتغذى على طعام أسماك Tetramin® (Tetra Werke ، Melle ، DE). 30 سم × 30 سم × 30 سم ؛ MegaView Science ، Taichung ، تايوان) للسماح بظهور البالغين. تم تزويد البالغين بمحلول سكروز بنسبة 10 ٪ للشهرة حتى 4 أيام بعد الظهور (dpe) ، وعند هذه النقطة تم تقديم نظام غذائي للإناث الباحثات عن مضيف قبل التجربة مباشرة ، أو تم تجويعهن طوال الليل بالماء المقطر قبل التجربة ، كما هو موضح أدناه. البعوض للمقايسات الحيوية اللاحقة ، تم تزويد 4 إناث dpe بدم الأغنام مزيل الرجفان (Håtunalab ، Bro ، SE) باستخدام نظام تغذية الغشاء (ورش عمل Hemotek Discovery Workshops ، أكرينجتون ، المملكة المتحدة) ، ثم تم نقل الإناث المزدحمة بالكامل إلى أقفاص فردية وقدمت نظامًا غذائيًا مباشرًا ، كما هو موضح أدناه ، أو 10٪ تم استخدام أنبوب الكتلة الموصوفة للإناث أدناه ، ثم تم نقل التجارب المعملية للإناث قبل 3 أيام. كان لديه ماء مقطر بالشهرة لمدة 4-6 ساعات قبل التجربة.
تم استخدام مقايسات التغذية لقياس استهلاك البول واليوريا عند البالغات الأنثى العربية. تم تزويد الإناث الباحثات عن المضيفات والمغذيات بالدم بنظام غذائي يحتوي على 1 ٪ من بول بقري طازج وكبير السن ، وتركيزات مختلفة من اليوريا ، واثنين من الضوابط (10 ٪ سكروز وماء) لمدة 48 ساعة ، بالإضافة إلى تلوين الطعام (1 مجم مل -1 زيلين سيانيد FF ؛ تم إضافة CAS 26 ، ستوكهولم ، 17 سيانيد FF ؛ CAS 2650 ، CAS ، CAS 26) × 4 مصفوفة في 250 ميكرولتر من أنابيب الطرد المركزي الدقيقة (Axygen Scientific ، Union City ، CA ، US ؛ الشكل 1A) املأ إلى الحافة (~ 300 ميكرولتر) لتجنب المنافسة بين البعوض والتأثيرات المحتملة للون الصبغة ، ضع 10 بعوض في طبق بتري كبير (قطر 12 سم و 6 سم في الارتفاع ؛ ± درجة رطوبة نسبية 1 ، درجة مئوية) في الشكل 2 سم ؛ تكررت العشرات من 5 إلى 10 مرات ، وبعد التعرض للنظام الغذائي ، تم وضع البعوض في درجة حرارة -20 درجة مئوية حتى مزيد من التحليل.
ابحث عن البول البقري واليوريا اللذان يمتصهما العائل والأنثى الماصة للدم Anopheles arabianus. في تجربة التغذية (A) ، تم تزويد إناث البعوض بنظام غذائي يتكون من بول بقري طازج وكبير السن ، وتركيزات مختلفة من اليوريا ، والسكروز (10٪) ، والماء المقطر (H2O). بول بقري أقل من 168 ساعة من بول بقري (B) ، ويمثل متوسط ​​محتوى النيتروجين الكلي (± الانحراف المعياري) للبول في الشكل الداخلي ، أما الإناث الباحثة عن المضيف (D ، F) والإناث المصاصات للدم (E ، G) فتتناول اليوريا بطريقة تعتمد على الجرعة. المتوسط ​​(BE): يمثل الخط المتقطع المستقيم خط الانحدار اللوغاريتمي الخطي (F ، G)
لإطلاق الطعام الممتص ، تم وضع البعوض بشكل فردي في 1.5 مل من أنابيب الطرد المركزي الدقيقة التي تحتوي على 230 ميكرولتر من الماء المقطر وتعطل النسيج باستخدام مدقة يمكن التخلص منها ومحرك لاسلكي (VWR International ، Lund ، SE) ، متبوعًا بالطرد المركزي عند 10 krpm لمدة 10 دقائق. قارئ صفيحة ميكروية قائم على مقياس الطيف الضوئي (SPECTROStar® Nano ، BMG Labtech ، Ortenberg ، DE) نانومتر) وبدلاً من ذلك ، تم طحن البعوض في 1 مل من الماء المقطر ، تم نقل 900 ميكرولتر منها إلى كوفيت للتحليل الطيفي (λ 620 نانومتر ؛ الأشعة فوق البنفسجية 1800 ، نظام غذائي ، تم تحضير محصول Kista. ميكرولتر إلى 2.4 ميكرولتر من 1 ملجم مل -1 سيانيد زيلين ، ثم تم استخدام الكثافة البصرية لتركيزات الصبغة المعروفة لتحديد كمية الطعام التي تتناولها كل بعوضة.
تم تحليل بيانات الحجم باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) متبوعًا بمقارنات Tukey اللاحقة الزوجية (JMP Pro ، الإصدار 14.0.0 ، SAS Institute Inc. ، كاري ، نورث كارولاينا ، الولايات المتحدة ، 1989-2007). وصفت تحليلات الانحدار الخطي تناول اليوريا المعتمد على التركيز ومقارنة الاستجابات بين البعوض الباحث عن المضيف وامتصاص الدم ، و.
تم ربط ما يقرب من 20 ميكرولتر من عينات البول من كل فئة عمرية على Chromosorb® W / AW (10 مجم 80/100 شبكة ، Sigma Aldrich) ومغلفة في كبسولات من الصفيح (8 مم × 5 مم) ، تم إدخال الكبسولات في غرفة الاحتراق لمحلل CHNS / O (Flash 2000، Thermo Fisher Scientific، Waltham، MA، US) لتحديد محتوى العمر. -1) على أساس تركيزات اليوريا المعروفة المستخدمة كمعيار.
لتقييم تأثير النظام الغذائي على بقاء الإناث الباحثة عن مضيف وامتصاص الدم ، تم وضع البعوض بشكل فردي في أطباق بتري كبيرة (قطرها 12 سم وارتفاعها 6 سم ؛ Semadeni) مع فتحة مغطاة بالشبكة في الغطاء (قطرها 3 سم) مع للتهوية والإمداد الغذائي ، تم توفير الحمالات مباشرة بعد 4 dpe وتضمنت 1 ٪ مخففة من البقرة الطازجة وعديمة التركيز ، و 4 ٪ من السكريات ، و 4 ٪ من السكريات ، و 4 ٪ من السكر. سدادة أسنان (DAB Dental AB، Upplands Väsby، SE) يتم إدخالها في حقنة 5 مل (Thermo Fisher Scientific، Gothenburg، SE) وإزالة المكبس ووضعها فوق طبق بتري (الشكل 1). تم تحليل vival من البعوض الذي يتغذى على أنظمة غذائية مختلفة إحصائيًا باستخدام منحنيات بقاء Kaplan-Meyer واختبارات ترتيب السجل لمقارنة مقارنات توزيع البقاء على قيد الحياة بين الأنظمة الغذائية (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
طاحونة طيارة مخصصة للبعوض مبنية على Attisano et al. [17] ، مصنوعة من ألواح أكريليك شفافة بسمك 5 مم (عرض 10 سم × 10 سم طول × 10 سم) بدون الألواح الأمامية والخلفية (الشكل 3: أعلى) مجموعة محورية مع أنبوب رأسي مصنوع من عمود كروماتوجرافي غازي (0.25 مم معرف ؛ 7.5 سم L) مع نهايات ملتصقة بإبرة حشرة منفصلة بين زوج من المواد المغناطيسية. أنبوب عمودي لتشكيل ذراع مربوط وذراع يحمل قطعة صغيرة من رقائق الألومنيوم كإشارة مقاطعة للضوء.
تم إعطاء الإناث المتعطشة لمدة 24 ساعة النظام الغذائي المذكور أعلاه لمدة 30 دقيقة قبل ضبط النفس ، ثم تم تخدير إناث البعوض التي تتغذى بشكل كامل على الجليد لمدة 2-3 دقائق وربطها بمسامير حشرات بشمع العسل (Joel Svenssons Vaxfabrik AB ، Munka Ljungby ، SE) ثم تم ربطها بأذرع الأنابيب الأفقية المسجلة ، ثم تم إنشاء مطحنة. ™ برمجيات (v4.01؛ Velleman، Gavere، BE). تم وضع طاحونة الطيران في غرفة منظمة للمناخ (12 ساعة: 12 ساعة ، فاتح: مظلم ، 25 ± 2 درجة مئوية ، 65 ± 5٪ رطوبة نسبية).
لتصور نمط نشاط الطيران ، تم حساب إجمالي المسافة المقطوعة (م) والعدد الإجمالي لأنشطة الطيران المتتالية في الساعة على مدار 24 ساعة ، بالإضافة إلى ذلك ، تمت مقارنة متوسط ​​المسافات التي قطعتها الإناث الفردية عبر العلاجات وتحليلها باستخدام تحليل ANOVA أحادي الاتجاه والتحليل اللاحق لـ Tukey (JMP Pro ، v14.0.0 ، SAS Institute Inc. الزيادات.
لتقييم تأثير النظام الغذائي على الأداء الإنجابي لنوع An.arabiensis ، تم نقل ست إناث (4 dpe) مباشرة إلى أقفاص Bugdorm (30 سم × 30 سم × 30 سم) بعد جمع الدم ، ثم تم توفير النظام الغذائي التجريبي لمدة 48 ساعة كما هو موضح أعلاه ، ثم تم إزالة الأغطية وأكواب التفريخ (30 مل ؛ Nolato Hertila) مملوءة ب 20 مل من كل يوم ثالث من الماء المقطر لمدة 48 ساعة. تم عد البيض وتسجيله لكل قفص تجريبي ، واستخدمت عينات فرعية من البيض لتقييم متوسط ​​حجم وطول البيض الفردي (ن ≥ 200 لكل غذاء) باستخدام مجهر Dialux-20 (DM1000 ؛ Ernst Leitz Wetzlar ، Wetzlar ، DE) مزود بكاميرا لايكا (DFC) 320 R2 ؛Leica Microsystems Ltd.، DE) تم الاحتفاظ بالبيض المتبقي في غرفة يتم التحكم فيها بالمناخ في ظل ظروف تربية قياسية لمدة 24 ساعة ، وتم قياس عينة فرعية من يرقات المرحلة الأولى التي ظهرت مؤخرًا (n ≥ 200 لكل نظام غذائي) ، كما هو موضح أعلاه. تمت مقارنة عدد البيض وحجم البيض واليرقات بين العلاجات وباستخدام ANOVA أحادي الاتجاه والتحليل اللاحق لـ Tukey (JMP، Pro، Tukey).
تم جمع المواد المتطايرة في مساحة الرأس من البول الطازج (ساعة واحدة بعد أخذ العينات) ، 24 ساعة ، 72 ساعة و 168 ساعة من البول من العينات التي تم جمعها من أبقار Zebu ، سلالات Arsi ، للراحة ، تم جمع عينات البول في الصباح الباكر بينما كانت الأبقار لا تزال في الحظيرة. en، DE) في 3 لتر من البولي أميد مع غطاء في براميل بلاستيكية كلوريد الفينيل. تم جمع المواد المتطايرة من كل عينة بول بقري إما مباشرة (طازجة) أو بعد النضج في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة و 72 ساعة و 168 ساعة ، أي أن كل عينة بول تمثل كل فئة عمرية.
لجمع المواد المتطايرة ذات مساحة الرأس ، تم استخدام نظام الحلقة المغلقة لتوزيع تيار غاز مُنشط مُصفى بالكربون (100 مل دقيقة -1) من خلال كيس بولي أميد إلى عمود الامتزاز لمدة 2.5 ساعة باستخدام مضخة فراغ غشاء (KNF Neuberger ، Freiburg ، DE). شبكة 50/80 ؛ ووترز أسوشيتس ، ميلفورد ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة) بين سدادات من الصوف الزجاجي. قبل الاستخدام ، تم مسح العمود باستخدام 1 مل من الهكسان المعاد تقطيره (Merck ، Darmstadt ، DE) و 1 مل من البنتان (99.0 ٪ من المذيب النقي بدرجة GC ، Sigma Aldrich).
تم تحليل الاستجابات السلوكية لمقتطفات An.Headspace المتطايرة التي تبحث عن المضيف وأكل الدم التي تم جمعها من بول طازج ، 24 ساعة ، 72 ساعة ، و 168 ساعة من أجل مقتطفات متطايرة من بعوض Arabidopsis باستخدام مقياس شمي أنبوب زجاجي مستقيم [18]. أجريت التجارب خلال ZT 13-15 ، وهي فترة الذروة لنشاط Anab الزجاجي [19]. يمر ± 1 lx من الضوء الأحمر من الأعلى ، وتدفق الهواء المرطب والمُفلتر بالفحم (25 ± 2 درجة مئوية ، 65 ± 2٪ رطوبة نسبية) اجتاز المقايسة الحيوية عند 30 سم ثانية -1 ، يتم تمرير الهواء عبر سلسلة من الشاشات الشبكية المصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ ، مما يخلق تدفقًا رقائقيًا وهيكل عمود موحد. 5 دقائق للتحليل ، تم استخدام 10 ميكرولتر من كل مستخلص فراغ الرأس ، مخفف بنسبة 1:10 ، كمحفز. تم استخدام كمية متساوية من البنتان كعنصر تحكم. تم وضع البعوض الفردي الباحث عن مضيف أو ماص للدم في أقفاص إطلاق فردية قبل 2-3 ساعات من بدء التجربة ، وتم وضع قفص الإطلاق على جانب الريح المفتوح لمقياس الشم ، ثم تم السماح للبعوض بالتكيف مع الفراشة ، ثم سمح للبعوض بالضغط على البعوض 1 ، ثم سمح للبعوض بمقياس الشم 1. تم تحليل الانجذاب إلى العلاج أو السيطرة على أنه نسبة البعوض التي تلامس مع المصدر في غضون 5 دقائق من إطلاقه. تم تكرار كل مستخلص متقلب في مساحة الرأس والتحكم فيه 30 مرة على الأقل ، ولتجنب تأثيرات أي يوم واحد ، تم اختبار نفس العدد من العلاجات والضوابط في كل يوم تجريبي. معهد ساس).
استجابة التفريخ: تم تحليل مستخلصات فضاء الرأس من بول البقر الطازج والمسن في أقفاص بوجدورم (30 سم × 30 سم × 30 سم ؛ MegaView Science). تمتلئ أكواب بلاستيكية (30 مل ؛ Nolato Hertila) بـ 20 مل من الماء المقطر وتم وضع ركيزة التفريخ في زوايا متقابلة من القفص ، تم تعديل كل منها بمقدار 10 ميكرون. تم استخدام كمية متساوية من البنتان لضبط كوب التحكم ، وتم تبادل أكواب المعالجة والتحكم بين كل تجربة للسيطرة على تأثيرات الوضع ، وتم إطلاق عشر إناث متغذيات بالدم في أقفاص تجريبية عند ZT 9-11 وتم عد البيض في الكؤوس بعد 24 ساعة ، وكانت صيغة حساب مؤشر التفريخ هي: (عدد البيض الموضوعة في كوب المعالجة - عدد البيض الذي تم وضعه في الكأس الضابطة) تم تكرار (8) عدد البيض الذي تم وضعه في الكأس الضابطة.
تم إجراء تحليل كروماتوغرافيا الغاز واكتشاف نمط هوائي الإلكترون (GC-EAD) للإناث An.arabiensis كما هو موصوف سابقًا [20]. باختصار ، تم فصل المستخلصات المتطايرة ذات مساحة الرأس الجديدة باستخدام Agilent Technologies 6890 GC (سانتا كلارا ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة) المجهزة بعمود HP-5 (30 م × 0.25 مم ، سمك فيلم 0.25 ميكرون ، Agilent Technologies).تم استخدام الهيدروجين كمرحلة متنقلة بمتوسط ​​معدل تدفق خطي يبلغ 45 سم ثانية -1 تم حقن كل عينة (2 ميكرولتر) لمدة 30 ثانية في وضع عدم الانقسام مع درجة حرارة مدخل 225 درجة مئوية ، تمت برمجة درجة حرارة فرن GC من 35 درجة مئوية (3 دقائق من الانتظار) إلى 300 درجة مئوية (10 دقائق الانتظار) عند 10 درجة مئوية دقيقة -1. (Gerstel ، Mülheim ، DE) بين كاشف التأين باللهب و EAD. تم تمرير الشعيرات الدموية السائلة GC لـ EAD عبر خط نقل Gerstel ODP-2 ، الذي يتتبع درجة حرارة فرن GC بالإضافة إلى 5 درجات مئوية ، في أنبوب زجاجي (10 سم × 8 مم) ، حيث تم خلطه مع الهواء المرطب المرشح بالكربون (1.5 لتر من الأنبوب الفردي. وبالنسبة للبعوض الباحث عن العائل ، تم إجراء ما لا يقل عن ثلاث مكررات على عينات بول من كل عمر.
تحديد المركبات النشطة بيولوجيًا في مجموعات فضاء الرأس من بول الأبقار الطازج والمسن باستخدام مقياس طيف الكتلة والكتلة (GC-MS ؛ 6890 GC و 5975 MS ؛ Agilent Technologies) للحصول على استجابات هوائي في تحليل GC-EAD ، تعمل في وضع تأين تأثير الإلكترون عند 70 فولت. الطور المتحرك بمتوسط ​​معدل تدفق خطي يبلغ 35 سم ثانية -1 تم حقن عينة 2 ميكرولتر باستخدام نفس إعدادات الحاقن ودرجة حرارة الفرن كما هو الحال في تحليل GC-EAD. تم تحديد المركبات بناءً على وقت الاحتفاظ بها (مؤشر Kovát) وأطياف الكتلة مقارنة بالمكتبة المخصصة ومكتبة NIST14 (Agilent). النقاء الكيميائي ، Aldrich) كمعيار خارجي.
تقييم فعالية خليط الرائحة الاصطناعية الذي يتكون من مركبات نشطة بيولوجيًا تم تحديدها في البول الطازج والمسنين لجذب Ans.arabiensis الباحث عن مضيف وامتصاص الدم ، باستخدام نفس مقياس الشم والبروتوكول كما هو مذكور أعلاه. تحاكي الخلائط الاصطناعية تكوين ونسب المركبات في مستخلصات متطايرة مختلطة من فضاء الرأس المختلط ؛ 2 ، الطازجة ، 168 ساعة ، 48 ساعة ، الشكل 1 ساعة ؛ استخدم 10 ميكرولتر من تخفيف 1: 100 من الخليط الاصطناعي بالكامل ، مع معدل إطلاق إجمالي يتراوح من 140-2400 نانوغرام في الساعة تقريبًا ، لتقييم جاذبية البعوض المضيف والبعوض الماص للدم ، وبعد ذلك ، يتم إجراء الاختبار على مخاليط كاملة ، حيث يتم إزالة خليط مطروح من المركبات المفردة من الخليط الكامل ، ثم تتبع استجابات من العائل والبعوض الماص للدم. نسب d (JMP Pro ، الإصدار 14.0.0 ، SAS Institute Inc.).
لتقييم ما إذا كان بول البقر يمكن أن يكون بمثابة إشارة موطن مضيف لبعوض الملاريا ، تم جمع بول البقر الطازج وكبير السن ، كما هو موضح أعلاه ، وتم وضع الماء في دلاء شبكية سعة 3 لتر (100 مل) ووضعها في مصائد طعم مضيف.(نسخة BG-HDT ؛ BioGents ، Regensburg ، DE) ، تم وضع عشر مصائد على بعد 50 مترًا في المراعي ، و 400 متر من مجتمع القرية (Silay ، إثيوبيا ، 5 ° 53´24´´ شمالًا ، 37 ° 29´24´´ شرقًا) ولا أبقار ، في مناطق التكاثر الدائم والقرى. تمت مقارنة ps مع طعم بول من مختلف الأعمار باستخدام الانحدار اللوجستي مع توزيع بيتا ذي الحدين (JMP Pro ، v14.0.0 ، SAS Institute Inc.).
في قرية موبوءة بالملاريا بالقرب من بلدة ماكي ، منطقة أوروميا ، إثيوبيا (8 ° 11 ′ 08 شمالًا ، 38 ° 81 70 شرقًا ؛ الشكل 6 أ) أجريت الدراسة بين منتصف أغسطس ومنتصف سبتمبر قبل الرش المتبقي الداخلي السنوي ، جنبًا إلى جنب مع موسم ممطر طويل ، وكانت خمسة أزواج من المنازل (20-50 مترًا متباعدة) تقع على مشارف القرية. في المنزل ، لا يُسمح بالطهي في الأماكن المغلقة (سحب الحطب أو الفحم) (على الأقل خلال الفترة التجريبية) ، والمنازل التي لا يزيد عدد سكانها عن شخصين ، تنام في مبيدات الحشرات.تم منح الموافقة الأخلاقية من قبل مجلس مراجعة أخلاقيات البحث المؤسسي (IRB / 022/2016) التابع لكلية العلوم الطبيعية (CNS-IRB) ، جامعة أديس أبابا ، وفقًا للإرشادات التي وضعها إعلان الجمعية الطبية العالمية في هلسنكي ، وتم الحصول على موافقة من كل رب أسرة بمساعدة طاقم الإرشاد الصحي. ، حيث تم تخصيص الخلطات الاصطناعية والضوابط للمنازل المزدوجة في الليلة الأولى وتبديلها بين المنازل في الليلة التجريبية التالية ، وتكررت هذه العملية عشر مرات بالإضافة إلى ذلك ، لتقدير نشاط البعوض في منازل مختارة ، تم تعيين مصائد CDC لتعمل خمس ليال متتالية في بداية ومنتصف ونهاية التجربة الميدانية في نفس الوقت من اليوم.
تم إذابة خليط اصطناعي يحتوي على ستة مركبات نشطة بيولوجيًا في الهبتان (97.0٪ مذيب من الدرجة GC ، Sigma Aldrich) وتم إطلاقه عند 140 نانوغرام في الساعة باستخدام موزع فتيل قطني [20]. سمح موزع الفتيل بإطلاق جميع المركبات بنسب ثابتة طوال فترة التجربة التي استمرت 12 ساعة ، وتم استخدام الهيبتان كعنصر تحكم ، وتم تعليق القارورة بجوار نقطة دخول شركة جون دبليو. ، FL ، الولايات المتحدة ، الشكل 6 أ). تم تعليق المصائد على ارتفاع 0.8 - 1 متر فوق الأرض ، بالقرب من سفح السرير ، ونام أحد المتطوعين تحت ناموسية غير معالجة وتشغيله بين الساعة 18:00 والساعة 06:30 ، وتم التقاط البعوض حسب الجنس والحالة الفسيولوجية (غير مغذى ، ومغذٍ ، وشبه حامل ، وحامل [21] تم فحصه لاحقًا باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل لتحديد النوع المعقد من البوليميراز). في الدراسة الميدانية ، تم تحليل مصائد المنازل المزدوجة باستخدام نموذج ملائم لوجستي اسمي ، حيث كان التجاذب هو المتغير التابع والمعالجة (المزيج الاصطناعي مقابل التحكم) كان التأثير الثابت (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.).هنا ، نقوم بالإبلاغ عن قيم χ2 و p من اختبار نسبة الاحتمالية.
قم بتقييم ما إذا كان آمنًا أم لا ، فقد استطاع arabiensis الحصول على البول ، مصدر النيتروجين الرئيسي ، اليوريا ، عن طريق التغذية المباشرة ، خلال 48 ساعة من الإعطاء لمدة 4 أيام بعد (Dpe) تجارب التغذية للإناث التي تتغذى بالدم وتلك التي تتغذى بالدم (الشكل 1 أ). الشكل 1 ب ، ج) علاوة على ذلك ، أكلت الإناث الباحثات عن مضيف أقل في البول في 72 ساعة مقارنة بالبول عند 168 ساعة (الشكل 1 ب). عند تقديم نظام غذائي يحتوي على اليوريا ، تمتص الإناث الباحثات عن المضيف كمية أكبر بكثير من اليوريا عند 2.69 ملي مول مقارنة بجميع التركيزات الأخرى والماء ، بينما لا يمكن تمييزها عن 10٪ من الورد (F (10،7 ، p = 0)). تتغذى الإناث ، اللائي يمتصن عادة وجبات تحتوي على اليوريا أكثر بكثير من الماء ، وإن كان أقل بكثير من 10٪ سكروز (F (10557) = 78.35 ، p <0.0001 ؛ الشكل 1). 2، p <0.0001؛الشكل 1 و ، ز): بينما يبدو أن المدخول من نظام غذائي يحتوي على اليوريا له قيم مثالية (الشكل 1 د ، هـ) ، كانت الإناث في كلتا الحالتين الفسيولوجية قادرة على تعديل كمية اليوريا الممتصة عبر النطاق الكامل لتركيزات اليوريا بطريقة لوغاريتمية خطية (الشكل 1F ، G).وبالمثل ، يبدو أن البعوض يتحكم في امتصاصه للنيتروجين من خلال تنظيم كمية البول الممتصة ، حيث تنعكس كمية النيتروجين في البول في الكمية الممتصة (الشكل 1B ، C و B).
لتقييم آثار البول واليوريا على بقاء البعوض الذي يبحث عن المضيف وامتصاص الدم ، تم تغذية الإناث بالبول من جميع الأعمار الأربعة (طازج ، 24 ساعة ، 72 ساعة ، و 168 ساعة بعد الترسيب) ومجموعة من تركيزات اليوريا ، وكذلك الماء المقطر و 10 ٪ سكروز بمثابة عنصر تحكم (الشكل 2 أ) ، أظهر تحليل البقاء هذا أن النظام الغذائي كان له تأثير كبير على مضيف 5 د = χ 5 = الإناث. .0001 ؛ اليوريا: χ2 = 122.8 ، df = 5 ، p <0.0001 ؛ الشكل 2 ب ، ج) والإناث التي تتغذى بالدم (البول: χ2 = 93.0 ، df = 5 ، p <0.0001 ؛ اليوريا: χ2 = 137.9 ، df = 5 ، p <0.0001 ؛ الشكل 2D ، E). 2B-E): أظهرت الإناث الباحثات عن المضيف اللواتي تلقين بولًا طازجًا وبائسًا معدلات بقاء مختلفة ، حيث كان لدى أولئك الذين غذوا بولًا قديمًا لمدة 72 ساعة (P = 0.016) أقل احتمال للبقاء (الشكل 2 ب) ، علاوة على ذلك ، نجت الإناث الباحثات عن المضيف التي تتغذى على 135 ملي مولار من اليوريا لفترة أطول من عناصر التحكم في الماء (P <0.04) (الشكل.بالمقارنة مع الماء ، نجت النساء اللائي تم تغذيتهن بالبول الطازج والبول لمدة 24 ساعة لفترة أطول (p = 0.001 و p = 0.012 ، على التوالي ؛ الشكل 2D) ، بينما نجت النساء اللائي يتغذيان من البول لمدة 72 ساعة أطول من أولئك الذين يتغذون على بول طازج قصير و 24 ساعة من البول (p <0.0001 و p = 0.013 ، على التوالي ؛ الشكل 2D). ؛ الشكل 2E).
البقاء على قيد الحياة لعائل أنوفيليس أرابينيس الماصة والدم يتغذى على بول البقر واليوريا. في الاختبار الحيوي (أ) ، تم تزويد إناث البعوض بنظام غذائي يتكون من بول بقري طازج وكبير السن ، وتركيزات مختلفة من اليوريا ، والسكروز (10٪) والماء المقطر (H2O) ، وتم تسجيل بقاء البعوض الباحث عن مضيف (B ، C) ، وتم تغذية البعوض بالدم لمدة 12 ساعة حتى تم تغذية البعوض (B ، C) والدم (E). ) واليوريا (C ، E) ، والضوابط ، والسكروز والماء ، ماتت
اختلفت المسافة الإجمالية وعدد الجولات المحددة في اختبار طاحونة الطيران على مدار 24 ساعة بين البعوض الباحث عن المضيف والبعوض الماص للدم ، والذي أظهر نشاط طيران أقل بشكل عام (الشكل 3). أظهرت إناث البعوض التي قدمت السكروز أو البول لمدة 72 ساعة نشاطًا طوال فترة الـ 24 ساعة ، بينما كانت الإناث التي قدمت الماء أكثر نشاطًا خلال منتصف الفترة ، وأظهر البعوض الذي يتغذى على السكروز أعلى مستويات النشاط في وقت متأخر من الليل وفي الصباح الباكر ، في حين أن أولئك الذين تناولوا بولًا عمره 72 ساعة شهدوا انخفاضًا ثابتًا في النشاط على مدار 24 ساعة (الشكل 3).
أداء الطيران لإناث الأنوفيليس أرابينيس الباحثة عن الصيد والتي تمتص الدم وتتغذى على بول البقر واليوريا. في اختبار طاحونة الطيران ، تتغذى إناث البعوض على بول بقري طازج وكبير السن ، تم ربط تركيزات مختلفة من اليوريا والسكروز (10٪) والماء المقطر (H2O) بأذرع أفقية تدور بحرية (أعلاه) لإجمالي عدد النساء اللواتي يبحثن عن الدم (على اليسار) لكل عدد من النساء اللواتي يبحثن عن الدم (على اليسار). - تم تسجيل الفترة الزمنية (داكن: رمادي ، فاتح: أبيض) ، متوسط ​​المسافة ومتوسط ​​عدد النوبات على يمين الرسم البياني للنشاط اليومي ، وتمثل أشرطة الخطأ الخطأ المعياري للمتوسط ​​، التحليل الإحصائي انظر النص
بشكل عام ، اتبع نشاط الطيران الإجمالي للإناث الباحثات عن مضيف نمطًا مشابهًا لمسافة الطيران على مدى فترة 24 ساعة. تأثرت مسافة الرحلة المتوسطة بشكل كبير بالنظام الغذائي المبتلع (F (5 ، 138) = 28.27 ، p <0.0001) ، والإناث الباحثات عن مضيف تناولن 72 ساعة من البول طارت مسافات أطول بكثير مقارنة بجميع الوجبات الغذائية الأخرى (p <0.0001) ، والسكروز الطازج = 0.022 ساعة). = 0.022) بعوض يتغذى. على النقيض من نمط نشاط الطيران الموصوف في النظام الغذائي للبول ، أظهرت الإناث التي تتغذى من اليوريا والتي تبحث عن مضيف نشاط طيران مستمر على مدار 24 ساعة ، وبلغ ذروته خلال النصف الثاني من المرحلة المظلمة (الشكل 3) ، وعلى الرغم من أن أنماط النشاط كانت متشابهة ، إلا أن الإناث الباحثات عن مضيف تغذيات اليوريا زادت بشكل ملحوظ من متوسط ​​مسافة الرحلة اعتمادًا على التركيز الممتص من اليوريا (F (5 ، 138.9). طار أطول من الإناث التي تتغذى إما بالماء أو السكروز (P <0.03).
كان نشاط الطيران العام للبعوض الماص للدم مستقرًا ومستمرًا على مدار 24 ساعة في جميع الأنظمة الغذائية ، مع زيادة نشاط البول خلال النصف الثاني من الفترة المظلمة للإناث التي تتغذى على الماء وكذلك في الإناث التي تتغذى طازجة وعمر 24 ساعة (الصورة 3) ، بينما أثر نظام البول بشكل كبير على متوسط ​​مسافة الرحلة في الإناث التي تتغذى بالدم (F (5 ، 138) = 4.83 ، البازلاء = 0.0004) ، البول = 0.0004. ونظام التحكم (طازج ، p = 0.0091 ؛ 72 ساعة ، p = 0.0022 ؛ 168 ساعة ، p = 0.001 ؛ السكروز ، p = 0.0017 ؛ dH2O ، p = 0.036).
تم تقييم آثار تغذية البول واليوريا على معايير التكاثر في المقايسات الحيوية لوضع البيض (الشكل 4 أ) وتم فحصها وفقًا لعدد البيض الذي تضعه كل أنثى ، وحجم البويضة ، واليرقات التي تفقس حديثًا في المرحلة الأولى ، وعدد البيض الذي تم وضعه ، وتباينت الإناث العربية التي تتغذى بالبول حسب النظام الغذائي (F (5،222) = 4.38 ، p = 0.0008 ؛ تغذى الإناث أكثر من البول ، 24 ب). وكانت مماثلة لتلك التي تتغذى على السكروز (الشكل 4 ب). وبالمثل ، فإن حجم البيض الذي تضعه الإناث التي تتغذى بالبول يختلف باختلاف النظام الغذائي (F (5 ، 209) = 12.85 ، P <0.0001) ، مع البول على مدار 24 ساعة والإناث التي تتغذى على السكروز تضع بيضًا أكبر بكثير من الإناث التي تتغذى بالماء ، بينما يتأثر بيض الإناث التي تتغذى على 168 ساعة من البول. ) = 7.86، p <0.0001) ، مع ظهور يرقات أكبر بكثير من البيض الذي وضعته إناث تتغذى بالبول بعمر 24 و 72 ساعة مقارنة بالبيض الملقى من يرقات البيض.
أداء التكاثر لإناث الأنوفيلة العربية التي تتغذى على بول البقر واليوريا ، تم تغذية إناث البعوض التي تتغذى بالدم على أغذية تتكون من بول بقري طازج وكبير السن ، بتركيزات مختلفة من اليوريا ، السكروز (10٪) ، والماء المقطر (H2O) لمدة 48 ساعة قبل وضعها في المقايسات الحيوية والحصول على ركائز وضع البيض (48 ساعة ، حجم (B ، E). تتأثر بشكل كبير بالنظام الغذائي المقدم (بول البقر: BD ، اليوريا: EG). كانت الوسائل المقاسة لكل معلمة باستخدام أسماء أحرف مختلفة مختلفة اختلافًا كبيرًا عن بعضها البعض (ANOVA أحادي الاتجاه باستخدام تحليل Tukey اللاحق ؛ p <0.05). تمثل أشرطة الخطأ الخطأ المعياري للمتوسط
كمكوِّن نيتروجيني رئيسي في البول ، فإن اليوريا ، عند تقديمها كغذاء للإناث التي تتغذى بالدم ، أثرت بشكل كبير على المعلمات الإنجابية في جميع الدراسات. وضع عدد البيض الذي تضعه الإناث التي تتغذى على اليوريا ، بعد وجبة الدم ، اعتمادًا على تركيز اليوريا (F (11 ، 360) = 4.69 ؛ P <0.0001) ، تغذت الإناث بتركيزات أكبر من اليوريا بين 134 ميكرومتر و 1.34 ملي مولار من البيض. تتغذى الإناث على الماء (F (10 ، 4245) = 36.7 ؛ p <0.0001 ؛ الشكل 4F) ، وحجم اليرقات ، على الرغم من تأثرها بتركيزات مماثلة من اليوريا في الأمهات (F (10 ، 3305) = 37.9 ؛ p <0.0001) كان أكثر تنوعًا (الشكل 4 جرام).
الانجذاب العام إلى المستخلصات المتطايرة التي تبحث عن مضيف في البول البقري. أظهر التحليل المخصص أن رائحة البول التي لا معنى لها في مقياس شم الأنبوب الزجاجي (الشكل 5 أ) تأثرت بشكل كبير بعمر البول (χ2 = 15.9 ، df = 4 ، p = 0.0032 ؛ الشكل 5 ب) ، أظهر التحليل اللاحق أن رائحة البول البائسة في 24 ساعة تسببت في مستويات أعلى بكثير من الجاذبية ، = 0.00 ساعة ، pent = 0.00 ساعة: 70) ، باستثناء رائحة البول الطازج (ع = 0.13 ؛ الشكل 5 ب). على الرغم من أن الانجذاب العام للبعوض الماص للدم لرائحة البول لم يكن مختلفًا بشكل كبير (χ2 = 8.78 ، df = 4 ، p = 0.067 ؛ الشكل 5 ج) ، تم العثور على هؤلاء الإناث أكثر جاذبية بشكل ملحوظ للمستخلصات المتطايرة بفراغ الرأس مقارنة بالبول الذي يبلغ عمره 72 ساعة ؛
الاستجابات السلوكية لرائحة بول البقر الطبيعية والاصطناعية في البحث عن العائل والدم Anopheles arabianus. مخطط مقياس شدة الأنبوب الزجاجي (A). سحب المستخلصات المتطايرة من بول البقر الطازج وكبار السن لاستضافة البعوض (B) والبعوض الماص للدم (C). يظهر بول بقري عمره 168 ساعة (G). تظهر آثار اكتشاف الهوائي الإلكتروني (EAD) تغيرات الجهد استجابةً للمركبات النشطة بيولوجيًا في مساحة الرأس المستخرجة من كروماتوجراف الغاز والتي تم اكتشافها بواسطة كاشف تأين اللهب (FID) ، ويمثل شريط المقياس سعة الاستجابة (mV) مقابل زمن (فترات) الاحتفاظ. itude response. تشير العلامات النجمية المزدوجة (**) إلى استجابات غير قابلة للتكرار. ابحث عن المضيف (H) وامتصاص الدم (I) An.arabiensis لهما نداءات مختلفة للخلطات الاصطناعية من روائح بول البقر الطازجة والعتيقة.p <0.05). تمثل أشرطة الخطأ الخطأ المعياري للمقياس
أنثى Ann.arabiensis ، 72 ساعة و 120 ساعة بعد وجبة الدم ، أثناء التفريخ ، لم يُظهر أي تفضيل للمستخلصات المتطايرة ذات مساحة الرأس من بول البقر الطازج والمسن مقارنة بعناصر التحكم في البنتان (χ2 = 3.07 ، p> 0.05 ؛ ملف إضافي 1: الشكل S1).
بالنسبة إلى أنثى Ann.Arabiensis ، تم تحديد تحليلات GC-EAD و GC-MS ثمانية ، ستة وثلاثة وثلاثة مركبات نشطة حيوياً (الشكل 5D-G) تم تضمين هوائيات فوق العتبة في مزيد من التحليلات.
زاد إجمالي معدل الإطلاق المتطاير للمركبات النشطة بيولوجيًا في مجموعة فراغ الرأس من 29 ميكروغرام في الساعة في البول الطازج إلى 242 ميكروغرام في الساعة في البول الذي يبلغ عمره 168 ساعة ، ويرجع ذلك أساسًا إلى زيادة الفينول p-cresol و m- الفورمالديهايد بالإضافة إلى الفينول. undance) في اللوني (الشكل 5D) -G اللوحة اليسرى) والاستجابات الفسيولوجية لهذه المركبات (الشكل 5D-G اللوحة اليمنى).
بشكل عام ، كان للخليط الاصطناعي نسبة طبيعية مماثلة من المركبات النشطة بيولوجيًا المحددة في المستخلصات المتطايرة من فضاءات البول الطازجة والمسنين (الشكل 5D-G) ولا يبدو أنه يثير جاذبية كبيرة في البحث عن مضيف (χ2 = 8.15 ، df = 4 ، p = 0.083 ؛ الشكل 5H) أو مقارنة البعوض الماص للدم (χ2 = 4.91 ، d = h). بين العلاجات أظهرت أن البعوض الباحث عن العائل كان جذابًا بشكل كبير للمزيج الاصطناعي للبول الذي يبلغ عمره 24 ساعة مقارنةً بضوابط البنتان (ع = 0.0086 ؛ الشكل 5 ح).
لتقييم دور المكونات الفردية في الخلائط الاصطناعية للبول بعمر 24 ساعة ، تم تقييم ستة مخاليط مطروحة مقابل الخلائط الكاملة في مقايسة أنبوب Y ، حيث تمت إزالة المركبات الفردية بالنسبة للبعوض الباحث عن المضيف ، كان لطرح المركبات الفردية من الخليط الكامل تأثير كبير على الاستجابات السلوكية (χ2 = 19.63 ، تم طرح ملف إضافي = 6 ، ع = 0.0032 ؛ في المقابل ، لم تؤثر إزالة المركبات الفردية من الخليط الاصطناعي بالكامل على الاستجابات السلوكية للبعوض الماص للدم (χ2 = 11.38 ، df = 6 ، p = 0.077) ، باستثناء decanal ، مما أدى إلى مستويات أقل مقارنة بالمزيج الكامل الجذب (p = 0.022 ؛ ملف إضافي 1: الشكل S2B).
في قرية موبوءة بالملاريا في إثيوبيا ، تم تقييم فعالية خليط اصطناعي من بول بقري على مدار 24 ساعة في جذب البعوض تحت الظروف الحقلية لمدة عشر ليالٍ (الشكل 6 أ). تم التقاط وتحديد 4861 بعوضة ، منها 45.7٪ من Anthropus.gambiae sl ، و 18.9٪ كانت Anopheles pharoensis 1: ملف إضافي من نوع Anopheles pharoensis و 35.4٪. العضو الوحيد في مجمع الأنواع الغامبية الذي تم تحديده من خلال تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل. في المتوسط ​​، تم التقاط 320 بعوضة في الليلة ، وخلال هذه الفترة اصطادت الفخاخ ذات الطعم المخلوط الاصطناعي البعوض أكثر من المصائد المزدوجة بدون خليط (χ2 (0 ، 3196) = 170.0 ، p <0.0001). لا يوجد تحيز بين المنازل (χ2 (0 ، 1665) = 9 × 10-13 ، p> 0.05) ولا يوجد انخفاض في عدد السكان خلال فترة الدراسة ، وبالمقارنة مع مصائد التحكم ، تم زيادة عدد البعوض الذي تم اصطياده في الفخاخ التي تحتوي على الخليط الصناعي بشكل كبير: البحث عن مضيف (χ2 (0 ، 2107) = 138.7 ، p <0.0001) ، تغذية دم حديثة (2 (0.2) ، حمل 650 = (2 (0) و 650) ص = 0.0123 ؛الملف الإضافي 1: الجدول S1) ينعكس هذا أيضًا في العدد الإجمالي للبعوض الذي تم أسره: مضيف يبحث عن> مص الدماء> حامل> شبه حامل> ذكر.
تقييم ميداني لفعالية خليط رائحة بول البقر الاصطناعية لمدة 24 ساعة. أجريت تجارب ميدانية في جنوب وسط إثيوبيا (خريطة) ، بالقرب من مدينة ماكي (إدراج) ، باستخدام مصيدة ضوئية لمراكز السيطرة على الأمراض (CDC) (يمين) في منازل مزدوجة ، بتصميم مربع لاتيني (صورة جوية) (A). ، بطريقة مختلفة ، تأثير فسيولوجي يعتمد على الحالة. بالإضافة إلى ذلك ، استحوذت هذه المصائد على أعداد متزايدة بشكل كبير من بعوض Culex المضيف. (D) مقارنة مع التحكم ، تمثل القضبان الموجودة على اليسار متوسط ​​مؤشر اختيار البعوض الذي تم اصطياده في أزواج من الطعم الرائحة (الأخضر) ومصائد التحكم (المفتوحة) (N = 10) ، بينما تمثل القضبان الموجودة على اليمين متوسط ​​مؤشر الاختيار في أزواج N =.تشير العلامات النجمية إلى مستويات الأهمية الإحصائية (* p = 0.01 و *** p <0.0001)
تم التقاط الأنواع الثلاثة بشكل مختلف في المصائد التي تحتوي على مخاليط اصطناعية. البحث عن العائل (χ2 (1 ، 1345) = 71.7 ، p <0.0001) ، تغذية الدم (χ2 (1 ، 517) = 16.7 ، p <0.0001) والحمل (χ2 (1 ، 180) = 6.11 ، p = 0.0134) أ. في حالات فسيولوجية مختلفة تم العثور عليها (الشكل 6 ج). بالنسبة لـ Culex ، تم العثور على زيادة كبيرة فقط في عدد البعوض الذي يبحث عن مضيفين في الفخاخ المزودة بطعم بالمزيج الاصطناعي (χ2 (1119) = 12.6 ، p = 0.0004 ؛ الشكل 6D) ، مقارنة بمصائد التحكم.
تم استخدام مصائد الطعم العائل الموجودة خارج المضيفين المحتملين بين مواقع التكاثر والمجتمعات الريفية في إثيوبيا لتقييم ما إذا كان بعوض الملاريا يستخدم رائحة بول البقر كموطن مضيف أم لا ، وفي حالة عدم وجود إشارات للمضيف والحرارة ووجود رائحة بول البقر أو بدونها ، لم يتم التقاط أي بعوض (ملف إضافي 1: الشكل S3). بغض النظر عن عمر البول (χ2 (5 ، 25) = 2.29 ، p = 0.13 ؛ ملف إضافي 1: الشكل S3). في المقابل ، لم تلتقط أدوات التحكم في المياه بعوض الملاريا في درجات حرارة عالية (ملف إضافي 1: الشكل S3).
يكتسب بعوض الملاريا المركبات المحتوية على النيتروجين ويوزعها من خلال التغذية التعويضية لبول البقر (أي البرك) لتعزيز سمات تاريخ الحياة ، على غرار الحشرات الأخرى [2 ​​، 4 ، 24 ، 25 ، 26]. بول البقر هو مورد متجدد متاح بسهولة ويرتبط ارتباطًا وثيقًا بأماكن الراحة لنواقل الملاريا ، مثل مواضع الأبقار والنباتات الطويلة بالقرب من المنازل الريفية. امتصاص المركبات النيتروجينية في البول ، بما في ذلك اليوريا ، المكون النيتروجيني الرئيسي في البول [15 ، 16] اعتمادًا على الحالة الفيزيولوجية للإناث البعوض ، يتم تخصيص العناصر الغذائية في البول لتعزيز نشاط الطيران والبقاء على قيد الحياة لإناث البعوض الباحثة عن العائل ، بالإضافة إلى البقاء على قيد الحياة والخصائص التناسلية للأفراد الذين يتغذون بالدم خلال دور الغدد التناسلية المغلق. البالغون [8] ، لأنه يزود إناث البعوض بالقدرة على اكتساب مركبات نيتروجينية مهمة من خلال الانخراط في تغذية منخفضة المخاطر ، ولهذه النتيجة عواقب وبائية كبيرة ، حيث تزيد الإناث من متوسط ​​العمر المتوقع ، والنشاط ، والإنتاج الإنجابي ، وكلها تؤثر على قدرة النواقل ، علاوة على ذلك ، قد يكون هذا السلوك هدفًا لبرامج إدارة النواقل المستقبلية.