पोषक तत्वको प्राप्ति र वितरणले कीट घाँस र जीवन इतिहास विशेषताहरूलाई एकीकृत गर्दछ। विभिन्न जीवन चरणहरूमा विशिष्ट पोषक तत्वहरूको कमीको लागि क्षतिपूर्ति गर्न, कीराहरूले पूरक आहारको माध्यमबाट यी पोषकहरू प्राप्त गर्न सक्छन्, उदाहरणका लागि, कशेरुका स्रावहरूलाई खुवाएर पोडल, क्विजलेस र क्विजिङको आवश्यकता पर्दछ। चयापचय र प्रजनन दुवैका लागि पोषक तत्वहरू।यस अध्ययनको उद्देश्य मूल्याङ्कन गर्नु थियो।पोषण प्राप्तिको लागि गाईको मूत्रमा arabiensis आन्दोलनले जीवन इतिहास विशेषताहरू सुधार गर्दछ।
सुनिश्चित गर्नुहोस् कि यो सुरक्षित छ। arabiensis ताजा, 24-घण्टा, 72-घण्टा, र 168-घण्टा पुरानो गाईको पिसाबको गन्धमा आकर्षित भएको थियो, र होस्ट खोज्ने र रगत खुवाउने (48-घण्टा रगत खाएपछि) महिलाहरूलाई Y-tube olfactometer मा नापिएको थियो, र गर्भवती महिलाहरूको लागि इलेक्ट्रोकबिनिङको रूपमा इलेक्ट्रोनिक परीक्षण गरिएको थियो। त्यसपछि चारै उमेरका कक्षाहरूमा गाईको मूत्रमा बायोएक्टिभ यौगिकहरू पहिचान गर्न विश्लेषण प्रयोग गरिएको थियो। बायोएक्टिभ यौगिकहरूको सिंथेटिक मिश्रण Y-ट्यूब र फिल्ड परीक्षणहरूमा मूल्याङ्कन गरिएको थियो। गाईको मूत्र र यसको मुख्य नाइट्रोजन युक्त यौगिक यूरियालाई सम्भावित पूरक आहारको रूपमा अनुसन्धान गर्न मलेरिया रोगीहरूको लागि फिडिङ्विस्टिक चरित्रहरू मापन गरिएको थियो। र गाईको पिसाब र युरिया अवशोषितको मात्रा मूल्याङ्कन गरिएको थियो। खाना खुवाएर, महिलाहरू बाँच्नको लागि, टिथर्ड फ्लाइट र प्रजननका लागि मूल्याङ्कन गरियो।
होस्टको रगत र पोषण खोज्नुहोस्। प्रयोगशाला र क्षेत्रीय अध्ययनहरूमा, अरबहरू ताजा र वृद्ध गाईको मूत्रको प्राकृतिक र सिंथेटिक सुगन्धमा आकर्षित भएका थिए। गर्भवती महिलाहरू स्प्यानिङ साइटहरूमा गाईको मूत्र प्रतिक्रियाप्रति उदासीन थिए। होस्ट-खोज्ने र रगत चुस्ने महिलाहरूले सक्रिय रूपमा यी सबै स्रोतहरू अवशोषित गर्छन् र जीवन-व्यापारको रूपमा जीवनलाई अवशोषित गर्छन्। उडान, अस्तित्व, वा प्रजनन को लागी शारीरिक अवस्था को एक प्रकार्य।
एनोफिलेस अरेबिनिस गाईमूत्रको प्राप्ति र वितरण सुधारिएको जीवन इतिहास विशेषताहरूका लागि।गाईको पिसाबको पूरक आहारले दैनिक जीवन र भेक्टर घनत्व बढाएर प्रत्यक्ष रूपमा भेक्टर क्षमतालाई असर गर्छ, र अप्रत्यक्ष रूपमा उडान गतिविधि परिवर्तन गरेर र त्यसैले भविष्यका मोडेलहरूमा विचार गर्नुपर्छ।
पोषक तत्वको प्राप्ति र वितरणले कीटको चारा र जीवन इतिहास विशेषताहरू एकीकृत गर्दछ [१,२,३]।कीराहरूले खाद्य उपलब्धता र पोषक तत्वहरूको आवश्यकताको आधारमा खाना चयन गर्न र प्राप्त गर्न र क्षतिपूर्ति खुवाउन सक्षम हुन्छन्। 2]।खास पोषक तत्वहरूमा भएको कमीको पूर्ति गर्न, कीराहरूले यी पोषकहरू पूरक आहारबाट प्राप्त गर्न सक्छन्, जस्तै माटोमा, विभिन्न मलमूत्र र कशेरुकाको स्राव, र क्यारियन, जसलाई पोडल भनिन्छ [२]। यद्यपि विभिन्न प्रकारका पुतली र कीराहरूलाई पानीमा आकर्षित गर्ने क्रममा वर्णन गरिएको छ। र यस प्रकारका स्रोतहरू खुवाउँदा स्वास्थ्य र अन्य जीवन-इतिहास विशेषताहरूमा महत्त्वपूर्ण प्रभाव पार्न सक्छ [२, ४, ५, ६], ७]। मलेरिया लामखुट्टे एनोफेलिस गाम्बिया सेन्सु लाटो (sl) एक 'कुपोषित' वयस्कको रूपमा देखा पर्छन् [८], त्यसैले पानी पिउने महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्न सक्छ तर यसको जीवनको इतिहासको विशेषताहरू बढ्दै गएको छ। यस महत्त्वपूर्ण सवारी साधनमा पोषक तत्वको सेवनले ध्यान दिन्छ किनकि यसले महत्त्वपूर्ण महामारी विज्ञान परिणामहरू हुन सक्छ।
वयस्क पोथी एनोफिलिस लामखुट्टेमा नाइट्रोजनको मात्रा लार्भा चरणबाट कम क्यालोरी भण्डारण र रगतको खानाको अकुशल उपयोगको कारणले सीमित हुन्छ। शिकारको जोखिम। वैकल्पिक रूपमा, लामखुट्टेहरूले नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरू प्राप्त गर्न कशेरुका मलको पूरक आहार प्रयोग गर्न सक्छन् जसले अनुकूलन र उडान गतिशीलतालाई बढाउँछ, जस्तै अन्य कीराहरू [२]। र वृद्ध गाईको मूत्र [12,13,14], रोचक छ। एनोफिलिस अरेबिनिस आफ्नो होस्ट प्राथमिकताहरूमा अवसरवादी छ र गाईवस्तुहरूसँग सम्बद्ध र खुवाउन जानिन्छ। गाई मूत्र नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरूले भरिपूर्ण स्रोत हो, यूरियामा कुल 50-95% को 50-95% courine, 15w trogen [1w1w]। उमेरमा, सूक्ष्मजीवहरूले यी स्रोतहरू 24 घण्टा भित्र नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरूको जटिलता कम गर्न प्रयोग गर्छन् [१५]। अमोनियाको तीव्र वृद्धिसँगै, जैविक नाइट्रोजनमा कमीसँग सम्बन्धित, अल्कालोफिलिक सूक्ष्मजीवहरू (जसमध्ये धेरैले लामखुट्टेका लागि विषाक्त यौगिकहरू उत्पादन गर्छन्) महिलाहरूलाई आकर्षित गर्नका लागि थ्रिभिएर हुन सक्छ। 24 घण्टा वा कम उमेरमा [13, 14]।
यस अध्ययनमा, होस्ट र रगतले खुवाउने उत्तरहरू खोजिएको थियो। यसको पहिलो गोनाडोट्रोपिन चक्रको क्रममा, युरिया लगायत नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरूको अधिग्रहणको लागि पिसाब मिसाएर एराबिएनसिसको मूल्याङ्कन गरिएको थियो। त्यसपछि, यो पोथी लामखुट्टेले पुन: उत्पादन गर्ने क्षमतालाई कसरी सुधार गर्छ भन्ने कुराको मूल्याङ्कन गर्न परीक्षणहरूको श्रृंखला सञ्चालन गरियो। वास्तवमा, ताजा र वृद्ध गाईको पिसाबको गन्धले होस्ट र रगतले खुवाएको An को लागि भरपर्दो सुरागहरू प्रदान गरेको छ कि छैन भनेर निर्धारण गर्न मूल्याङ्कन गरिएको थियो। यो सम्भावित पोषण स्रोतको लागि तिनीहरूको खोजीमा, arabiensis ले अवलोकन गरिएको भिन्न आकर्षणको पछाडि रासायनिक सम्बन्ध पत्ता लगाए। सिंथेटिक गन्ध मिश्रणहरू वाष्पशील (Volatile organic 2 OC) मा थप मिश्रित थियो। क्षेत्रीय अवस्थाहरू अन्तर्गत राखिएको, प्रयोगशाला अवस्थाहरू अन्तर्गत प्राप्त परिणामहरू विस्तार गर्दै र विभिन्न शारीरिक अवस्थाहरूमा गोवाइन मूत्र गन्धको प्रभाव प्रदर्शन गर्दै।लामखुट्टेको आकर्षण। प्राप्त नतिजाले पुष्टि गर्छ कि ए.arabiensis ले जीवन इतिहास विशेषताहरूलाई प्रभाव पार्न कशेरुकाको मूत्रमा पाइने नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरू प्राप्त गर्दछ र वितरण गर्दछ। यी नतिजाहरू सम्भावित महामारी विज्ञान परिणामहरूको सन्दर्भमा र कसरी तिनीहरू भेक्टर निगरानी र नियन्त्रणको लागि प्रयोग गर्न सकिन्छ भनेर छलफल गरिन्छ।
एनोफिलेस अरेबिकन (डोंगोला स्ट्रेन) लाई २५ ± २ डिग्री सेल्सियस, ६५ ± ५% आरएच र १२:१२ घन्टा प्रकाशमा राखिएको थियो: गाढा चक्र। लार्भालाई प्लास्टिकको ट्रे (२० सेमी × १८ सेमी × ७ सेन्टीमिटर) डिस्टिल्ड वाटर, टेलेल माछा र डब्लुईएइले भरिएको माछाले भरिएको थियो। ३० मिलीलीटर कप (नोलाटो हर्टिला, Åstorp, SE) मा सङ्कलन गरियो र त्यसपछि बगडॉर्म पिंजराहरूमा (३० सेमी × ३० सेमी × ३० सेमी; मेगाभ्यू साइन्स, ताइचुङ, ताइवान) मा हस्तान्तरण गरियो। वयस्कहरूलाई १०% सुक्रोज समाधान प्रदान गरिएको थियो जुन पोइन्ट-होस्ट-पोइन्ट लिबिटम (पोस्ट-होस्ट 4 दिनसम्म)। प्रयोग गर्नु अघि तुरुन्तै आहार प्रस्ताव गरियो, वा तल वर्णन गरिए अनुसार प्रयोग गर्नु अघि डिस्टिल्ड पानीको साथ रातभर भोकै बसियो। फ्लाइट ट्यूब प्रयोगका लागि प्रयोग गरिएका महिलाहरूलाई पानीको विज्ञापन लिबिटमको साथ मात्र 4-6 घण्टाको लागि भोकै बसेको थियो। त्यसपछिको बायोएसेसहरूको लागि रगत चुस्ने लामखुट्टेहरू तयार गर्न, 4 dpe महिलाहरूलाई डिफिएब्रोन फिडिङ प्रणाली प्रयोग गरी (ब्रोब्याटन, रगतको प्रयोग गरेर) प्रदान गरियो। Hemotek Discovery Workshops, Acrington, UK)। पूर्ण भीडभाड भएका महिलाहरूलाई त्यसपछि व्यक्तिगत पिंजराहरूमा सारिएको थियो र तल वर्णन गरिए अनुसार सीधा आहार प्रदान गरियो, वा तल वर्णन गरिएका प्रयोगहरू अघि 3 दिनको लागि 10% सुक्रोज एड लिबिटम प्रदान गरियो। पछिल्ला महिलाहरूलाई फ्लाइट ट्यूब बायोसेसको लागि प्रयोग गरियो र प्रयोगशालामा स्थानान्तरण गरियो, र त्यसपछि 4 घण्टा पहिले पानीको प्रयोगको लागि लिबिटम गरिएको थियो।
वयस्क An.Arab महिलाहरूमा पिसाब र यूरिया खपतको मात्रा निर्धारण गर्न फिडिङ एसेसहरू प्रयोग गरिएको थियो। होस्ट-खोजी र रगत खुवाउने महिलाहरूलाई 1% पातलो ताजा र वृद्ध गाईको मूत्र, यूरियाको विभिन्न सांद्रता, र दुई नियन्त्रणहरू (10% सुक्रोज र पानी) समावेश गरिएको आहार प्रदान गरिएको थियो। 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) आहारमा थपियो र 250 μl माइक्रोसेन्ट्रिफ्यूज ट्यूबहरूमा 4 × 4 म्याट्रिक्समा आपूर्ति गरियो (Axygen Scientific, Union City, CA, US; चित्र 1A) को किनारामा भर्नुहोस् (~ 3 र colors को सम्भाव्यताबाट बच्नको लागि)। एउटा ठूलो पेट्री डिशमा १० लामखुट्टे (१२ सेमी व्यास र ६ सेन्टीमिटर उचाइ; Semadeni, Ostermundigen, CH; चित्र 1A) पूर्ण अन्धकारमा 25 ± 2 cm °C र 65 ± 5% सापेक्षिक आर्द्रतामा राख्नुहोस्। यी प्रयोगहरू दोहोर्याइएको थियो। अर्को विश्लेषण नभएसम्म °C।
होस्ट र रगत चुस्ने महिला एनोफिलिस अरेबियानस द्वारा अवशोषित गोवाइन मूत्र र यूरिया खोज्नुहोस्। फिडिङ ट्रायल (ए) मा, पोथी लामखुट्टेलाई ताजा र बुढो गाईको मूत्र, युरियाको विभिन्न सांद्रता, सुक्रोज (10%), र डिस्टिल्ड वाटर (H2-Os-B) र महिलाको रगत (H2-Of)) समावेश गरिएको आहार प्रदान गरियो। अन्य कुनै पनि आहार परीक्षण गरिएको भन्दा बढी सुक्रोज। ध्यान दिनुहोस् कि होस्ट-खोजी महिलाहरूले 168-घण्टा गोमूत्र (B) भन्दा कम 72-घण्टा गाईको मूत्र अवशोषित गरे। पिसाबको औसत कुल नाइट्रोजन सामग्री (± मानक विचलन) इन्सेटमा प्रतिनिधित्व गरिन्छ। होस्ट-खोजी (D, F) र रगत-उपचारमा निर्भर महिलाहरू। विभिन्न अक्षर नामहरू भएका इनहेल्ड भोल्युमहरू (D, E) एकअर्काबाट उल्लेखनीय रूपमा भिन्न थिए (टुकीको पोस्ट हक विश्लेषण प्रयोग गरेर एकतर्फी ANOVA; p <0.05)। त्रुटि बारहरूले औसत (BE) को मानक त्रुटि प्रतिनिधित्व गर्दछ। सीधा ड्यास गरिएको रेखाले लग-लाइनियर रिग्रेसन लाइन (F, G) लाई प्रतिनिधित्व गर्दछ।
अवशोषित खाना छोड्न, लामखुट्टेहरूलाई व्यक्तिगत रूपमा 1.5 एमएल माइक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरूमा 230 μl डिस्टिल्ड पानी समावेश गरिएको थियो र डिस्पोजेबल पेस्टल र कर्डलेस मोटर (VWR इन्टरनेशनल, लुन्ड, SE) को प्रयोग गरेर टिस्युलाई बाधा पुर्‍याइएको थियो, त्यसपछि सेन्ट्रीफ्यूगेशन 100 μl मा 100 μl मा सुपर 10 मिनेट थियो। 96-वेल माइक्रोप्लेट (Sigma-Aldrich) मा स्थानान्तरण गरियो र absorbance (λ620) लाई स्पेक्ट्रोफोटोमिटरमा आधारित माइक्रोप्लेट रिडर (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm प्रयोग गरेर निर्धारण गरिएको थियो। वैकल्पिक रूपमा, लामखुट्टेहरू भुइँमा राखिएको थियो जसमा 1,00ml को 1,00ml पानीमा डिसेल गरिएको थियो। स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विश्लेषण (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE)। आहार को मात्रा मापन गर्न को लागी, 0.2 µl देखि 2.4 µl को 1 mg ml-1 cylnde को ज्ञात कन्डिसन, cylnde को ज्ञात सीरियल डाइल्युसन द्वारा एक मानक वक्र तयार गरिएको थियो। प्रत्येक लामखुट्टेले खाने खानाको मात्रा निर्धारण गर्न।
भोल्युम डेटा विचरण (ANOVA) को एक-तर्फी विश्लेषण प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो जसको पछि Tukey को post hoc pairwise comparisons (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007)। रेखीय प्रतिगमन विश्लेषण र रगत-निर्भरता बीचको तुलनामा रगत-निर्भरता र प्रतिक्रिया-निर्भरता बीच वर्णन गरिएको विश्लेषण। squitoes (GraphPad Prism v8.0.0 for Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US)।
प्रत्येक उमेर समूहबाट लगभग 20 μl मूत्र नमूनाहरू Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) मा बाँधिएका थिए र टिन क्याप्सुल (8 mm × 5 mm) मा क्याप्सुल गरिएको थियो। Fisher Scientific, Waltham, MA, US) निर्माताको प्रोटोकल अनुसार ताजा र पुरानो पिसाबमा नाइट्रोजन सामग्री निर्धारण गर्न। कुल नाइट्रोजन (g N l-1) मापदण्डको रूपमा प्रयोग गरिएको ज्ञात युरिया सांद्रताको आधारमा परिमाण गरिएको थियो।
होस्ट खोज्ने र रगत चुस्ने महिलाको अस्तित्वमा आहारको प्रभावको मूल्याङ्कन गर्न, लामखुट्टेहरूलाई व्यक्तिगत रूपमा ठूला पेट्री डिशहरूमा (१२ सेन्टीमिटर व्यास र ६ सेन्टिमिटर उचाइ; सेमाडेनी) ढक्कनमा जालले ढाकिएको प्वाल (३ सेन्टीमिटर व्यास) सहित राखिएको थियो। गाईको पिसाब, युरियाको चार सांद्रता, र दुई नियन्त्रणहरू, 10% सुक्रोज र पानी। प्रत्येक आहारलाई डेन्टल ट्याम्पोन (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) मा 5 मिलीलीटर सिरिन्ज (थर्मो फिशर साइन्टिफिक, गोथेनबर्ग, डिस्प्ले, डिस्प्ले 1) मा घुसाइयो। क) प्रत्येक दिन आफ्नो आहार परिवर्तन गर्नुहोस्। माथि वर्णन गरिए अनुसार प्रयोगशालालाई कायम राख्नुहोस्। बाँचेको लामखुट्टेहरू दिनमा दुई पटक गनिन्छन्, जबकि अन्तिम लामखुट्टे मर्न नसकेसम्म मरेको लामखुट्टेहरू खारेज गरिएको थियो (n = 40 प्रति उपचार)। विभिन्न आहारहरूमा खुवाइएको लामखुट्टेहरूको बाँच्ने तथ्याङ्कीय रूपमा विश्लेषण गरिएको थियो। आहारहरू बीचको (IBM SPSS तथ्याङ्क 24.0.0.0)।
Attisano et al[17] मा आधारित कस्टम लामखुट्टे फ्लाइङ मिल, अगाडि र पछाडि प्यानल बिना 5 मिमी बाक्लो स्पष्ट एक्रिलिक प्यानल (10 सेमी चौडा x 10 सेमी लामो x 10 सेमी उचाइ) बनेको। s नियोडिमियम म्याग्नेटको एक जोडीको बीचमा 9 सेन्टिमिटरको दूरीमा निलम्बन गरिएको कीटको सुईमा टाँसिएको छ। एउटै सामग्री (6.5 सेमी एल) बाट बनेको तेर्सो ट्यूबले टिथर्ड पाखुरा र एल्युमिनियम पन्नीको सानो टुक्रालाई हल्का संकेतको रूपमा बोकेको हात बनाउन ठाडो ट्यूबलाई विभाजित गर्यो।
24-घण्टा भोकाएका महिलाहरूलाई संयम गर्नु अघि 30 मिनेटको लागि माथिको आहार दिइयो। पूर्ण रूपमा खुवाइएको पोथी लामखुट्टेहरूलाई 2-3 मिनेटको लागि बरफमा व्यक्तिगत रूपमा एनेस्थेटाइज गरिएको थियो र मोम (जोएल स्वेन्ससन भाक्सफ्याब्रिक एबी, मुन्का लिजङ्गबी) र ट्युबिङ्गोनफको ट्युबिङ्टोल आर्मसँग जोडिएको थियो। मिल। प्रति उडान रिभोलुसनहरू कस्टम-बिल्ट डेटा लगगरद्वारा रेकर्ड गरिएको थियो, त्यसपछि PC-Lab 2000™ सफ्टवेयर (v4.01; Velleman, Gavere, BE) प्रयोग गरेर भण्डारण र प्रदर्शन गरिएको थियो। उडान मिललाई जलवायु-नियमित कोठामा राखिएको थियो (12 h:12 h, प्रकाश: अँध्यारो, 25 ± 6 % 5 ± %H±)।
उडान गतिविधिको ढाँचाको कल्पना गर्न, कुल दूरी (m) र लगातार उडान गतिविधिहरूको कुल संख्या 24-घण्टा अवधिमा प्रति घण्टा गणना गरिएको थियो। साथै, व्यक्तिगत महिलाहरूले उडान गरेको औसत दूरीलाई उपचारहरूमा तुलना गरी एक-तर्फी ANOVA र Tukey को पोस्ट हक विश्लेषण प्रयोग गरी विश्लेषण गरिएको थियो। , जबकि उपचार एक स्वतन्त्र कारक हो। थप रूपमा, राउन्डहरूको औसत संख्या 10-मिनेट वृद्धिमा गणना गरिन्छ।
An.arabiensis को प्रजनन कार्यसम्पादनमा आहारको प्रभाव मूल्याङ्कन गर्न, छ जना महिला (4 dpe) लाई रगत सङ्कलन पछि सिधै बगडर्म पिंजरा (30 cm × 30 cm × 30 cm) मा स्थानान्तरण गरियो र त्यसपछि माथि वर्णन गरिए अनुसार 48 घण्टाको लागि प्रयोगात्मक आहार प्रदान गरियो। त्यसपछि आहारहरू हटाइयो र स्प्यानिङ कपहरू (30 ml 20 ml 20 ml पानीमा भरिएको 30 ml; 30 ml 30 cm)। दिन 48 घण्टाको लागि, हरेक 24 घण्टामा परिवर्तन गर्नुहोस्। प्रत्येक आहारको आहार 20-50 पटक दोहोर्याउनुहोस्। प्रत्येक प्रयोगात्मक पिंजराको लागि अण्डाहरू गनियो र रेकर्ड गरियो। अण्डाहरूको उप-नमुनाहरू एक Dialux-20 प्रयोग गरेर व्यक्तिगत अण्डाहरूको औसत आकार र लम्बाइ भिन्नता (n ≥ 200 प्रति आहार) को मूल्याङ्कन गर्न प्रयोग गरियो। एक Leica क्यामेरा (DFC) 320 R2;Leica Microsystems Ltd., DE)।बाँकी अण्डाहरूलाई 24 घण्टाको लागि मानक पालनको अवस्थामा जलवायु-नियन्त्रित कोठामा राखिएको थियो, र माथि वर्णन गरिए अनुसार हालै देखा परेको पहिलो इन्स्टार लार्भा (n ≥ 200 प्रति आहार) को उपनमूना मापन गरिएको थियो। अण्डाहरूको संख्या र आकारको तुलनामा अण्डाको संख्या र टु-लार्भाना उपचार र ए-लार्भाना बीचको तुलना गरिएको थियो। sis (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.)।
हेडस्पेस वाष्पशील ताजा (1 घन्टा नमूना पछि), 24 घण्टा, 72 घण्टा र 168 घण्टा पुरानो पिसाब जेबु गाईवस्तु, अरसी रेसहरूबाट संकलन गरिएको नमूनाहरूबाट सङ्कलन गरिएको थियो। सुविधाको लागि, पिसाब नमूनाहरू बिहान सबेरै सङ्कलन गरिएको थियो जबकि गाईहरू अझै गोदाममा थिए। प्रत्येक नमूनाबाट पिसाबको नमूना सङ्कलन गरिएको थियो। रातो देखि व्यक्तिगत पोलिमाइड बेकिंग झोला (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) ढक्कन सहित 3 l पोलिमाइड मा विनाइल क्लोराइड प्लास्टिक ड्रममा। प्रत्येक गोवाइन पिसाब नमूनाबाट हेडस्पेस वाष्पशीलहरू या त सीधा (ताजा) सङ्कलन गरिएको थियो वा प्रत्येक कोठाको 2 घन्टा 2 घन्टाको तापक्रम पछि। ine नमूना प्रत्येक उमेर समूह को प्रतिनिधि थियो।
हेडस्पेस वाष्पशीलहरू सङ्कलनका लागि, एक सक्रिय कार्बन-फिल्टर गरिएको ग्यास स्ट्रिम (100 एमएल मिन-1) लाई एक डायफ्राम भ्याकुम पम्प (KNF Neuberger, Freiburg, DE, DE, DE, DE, DE बाट नियन्त्रण गरिएको संग्रहबाट KNF Neuberger, Freiburg, DE, 2.5 घन्टाको लागि शोषण स्तम्भमा पोलिमाइड झोला मार्फत 2.5 घन्टा सम्म सोख्ने स्तम्भमा परिचालित गर्न बन्द-लूप प्रणाली प्रयोग गरिएको थियो। orption स्तम्भ Teflon ट्युबिङ (5.5 cm x 3 mm id) बाट बनेको थियो जसमा 35 mg Porapak Q (50/80 mesh; वाटर्स एसोसिएट्स, Milford, MA, US) ग्लास ऊन प्लगहरू बीचमा थियो। प्रयोग गर्नु अघि, स्तम्भलाई 1 ml- redisten, 1 ml redister, dm, 1 ml, 1 ml redisted, 1 ml बाट फ्लश गरिएको थियो। entane (99.0% शुद्ध विलायक GC ग्रेड, Sigma Aldrich)। adsorbed वाष्पशीलहरू 400 μl पेन्टेनको साथ एल्युट गरिएको थियो। हेडस्पेस संग्रहहरू जम्मा गरियो र त्यसपछि थप विश्लेषणको लागि प्रयोग नगरिएसम्म -20 डिग्री सेल्सियसमा भण्डारण गरियो।
होस्ट खोज्ने र रगत खाने An.Headspace वाष्पशील अर्कहरू ताजा, 24-घण्टा, 72-घन्टा, र 168-घण्टा उमेरको पिसाबबाट सङ्कलन गरिएको व्यवहार प्रतिक्रियाहरू Arabidopsis लामखुट्टेबाट वाष्पशील अर्कहरूको लागि विश्लेषण गरिएको थियो। एनको घर खोज्ने गतिविधिको अवधि।अरब [१९]।एउटा गिलास ट्यूब ओल्फ्याक्टोमिटर (८० सेमी × ९.५ सेमी आईडी) माथिबाट ३ ± १ lx रातो बत्तीले उज्यालो भएको थियो। चारकोल फिल्टर गरिएको र आर्द्रतायुक्त हावा प्रवाह (25 ± 2 °C, 65 सेमी सापेक्षिक ± 65 सेमी, 65 सेन्टीमिटरमा 65 सेमी) सापेक्षिक पारियो। ir लाई स्टेनलेस स्टीलको जाल स्क्रिनको शृङ्खलाबाट पार गरिन्छ, लेमिनार प्रवाह र एक समान प्लुम संरचना सिर्जना गर्दछ। डेन्टल ट्याम्पोन डिस्पेन्सर (4 सेमी × 1 सेमी; L:D; DAB डेन्टल AB), ओल्फ्याक्टोमिटरको विन्डवर्ड छेउमा रहेको 5 सेमी कुण्डलबाट निलम्बित, प्रत्येक μl 1 मिनेटमा प्रत्येक हेडको स्ट्र्याक्ट वा स्टिम्युलसेटर परिवर्तनहरू। , पातलो 1:10, एक उत्तेजकको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। नियन्त्रणको रूपमा पेन्टेनको बराबर मात्रा प्रयोग गरिएको थियो। व्यक्तिगत होस्ट खोज्ने वा रगत चुस्ने लामखुट्टेहरू प्रयोग सुरु हुनुभन्दा २-३ घण्टा अघि अलग-अलग रिलिज पिंजराहरूमा राखिएको थियो। रिलिज पिंजराको डाउनविन्ड साइडमा राखिएको थियो तर olfactometer को लागि अनुमति दिइएको थियो, र त्यसपछि moctometer, 1. पिंजराको भल्भ रिलिज गर्न खोलिएको थियो। उपचार वा नियन्त्रणको आकर्षणलाई रिलीज भएको 5 मिनेट भित्र स्रोतको सम्पर्कमा आएका लामखुट्टेको अनुपातको रूपमा विश्लेषण गरिएको थियो। प्रत्येक हेडस्पेस वाष्पशील निकासी र नियन्त्रणलाई कम्तिमा 30 पटक दोहोर्याइएको थियो, र कुनै पनि एक दिनको प्रभावबाट बच्नको लागि, प्रत्येक दिनमा एउटै संख्यामा उपचार र रगत परीक्षणको परीक्षण र नियन्त्रणहरूबाट एक-एक दिनको परीक्षण र प्रतिक्रियाहरू थिए। ic बनाम हेडस्पेस सेटहरू नाममात्र लजिस्टिक रिग्रेसन प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो र त्यसपछि विषम अनुपातहरू (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) को लागि जोडीवाइज तुलनाहरू।
An's spawning response.Bugdorm पिंजराहरूमा ताजा र बूढो गाईको पिसाबबाट निस्कने हेडस्पेस निष्कर्षहरू विश्लेषण गरियो (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science)।प्लास्टिक कपहरू (30 mL; Nolato Hertila) 20 mL डिस्टिल्ड पानीले भरिएको थियो। प्रत्येक हेडस्पेस एक्स्ट्र्याक्टको 10 μl 1:10 dilution मा उपचार कपहरू समायोजन गरियो। नियन्त्रण कप समायोजन गर्न समान मात्रामा पेन्टेन प्रयोग गरियो। स्थिति प्रभावहरू नियन्त्रण गर्न प्रत्येक प्रयोगको बीचमा उपचार र नियन्त्रण कपहरू आदानप्रदान गरियो। दश रगत पिउने महिलाहरूलाई ZT 9-11 मा प्रयोगात्मक पिंजराहरूमा छोडियो। : (उपचार कपमा राखिएको अण्डाहरूको संख्या - नियन्त्रण कपमा राखिएको अण्डाहरूको संख्या) / (अण्डा राखिएको कुल संख्या)। प्रत्येक उपचार 8 पटक दोहोर्याइएको थियो।
महिला An.arabiensis को ग्यास क्रोमेटोग्राफिक र इलेक्ट्रोन एन्टेना ढाँचा पत्ता लगाउने (GC-EAD) विश्लेषण पहिले वर्णन गरिए अनुसार प्रदर्शन गरिएको थियो [२०]।संक्षेपमा, ताजा हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरू एक Agilent टेक्नोलोजी 6890 GC (Santa Clara, CApped CA, 5m-5mm, US3) को प्रयोग गरेर अलग गरिएको थियो। id, 0.25 μm फिल्म मोटाई, Agilent टेक्नोलोजीहरू)।र बुढ्यौली पिसाब। हाइड्रोजन 45 सेमी s-1 को औसत रैखिक प्रवाह दरको साथ मोबाइल चरणको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। प्रत्येक नमूना (2 μl) 225 °C को इनलेट तापमानको साथ 30 सेकेन्डको लागि स्प्लिटलेस मोडमा इन्जेक्ट गरिएको थियो। GC ओभनको तापमान 35 °C (3 °C 0 0 मिनेट 01 मिनेट होल्ड) मा प्रोग्राम गरिएको थियो। -1.GC फ्लुएन्ट स्प्लिटरमा, 4 psi नाइट्रोजन थपियो र 1:1 लाई Gerstel 3D/2 कम डेड भोल्युम क्रस (Gerstel, Mülheim, DE) मा फ्लेम आयनाइजेसन डिटेक्टर र EAD बीच विभाजित गरियो। EAD को लागि GC फ्लुएन्ट केशिका Gerstel °C बाट पारिएको थियो जुन Gerstel °C लाई Gerstel, o5 °C लाई तापमान स्थानान्तरण गर्दछ। ट्यूब (10 सेमी × 8 मिमी), जहाँ यसलाई कार्बन फिल्टर गरिएको, आर्द्रतायुक्त हावा (1.5 l min−1) सँग मिसाइएको थियो। एन्टेनालाई ट्यूबको आउटलेटबाट 0.5 सेन्टीमिटर टाढा राखिएको थियो। प्रत्येक व्यक्तिगत लामखुट्टेले एक प्रतिकृतिको रूपमा लेखेको थियो, र होस्ट खोज्ने लामखुट्टेहरूका लागि, कम्तिमा पनि तीनवटा नमूनाहरू प्रदर्शन गरिएको थियो।
संयुक्त GC र मास स्पेक्ट्रोमिटर (GC-MS; 6890 GC र 5975 MS; Agilent Technologies) को प्रयोग गरी ताजा र वृद्ध गोजातीय मूत्रको हेडस्पेस संग्रहमा बायोएक्टिभ यौगिकहरूको पहिचान GC-EAD विश्लेषणमा एन्टेनल प्रतिक्रियाहरू निकाल्नको लागि, GC-EAD विश्लेषणमा E-VP इम्प्याक्ट मोडमा सञ्चालन गरिएको थियो। 5MS UI-लेपित फ्यूज्ड सिलिका केशिका स्तम्भ (60 m × 0.25 mm भित्री व्यास, 0.25 μm फिल्म मोटाई) मोबाइल चरणको रूपमा 35 सेमी s-1.A 2 μl नमूनाको औसत रैखिक प्रवाह दरको साथ मोबाइल चरणको रूपमा प्रयोग गरी इन्जेक्सन गरिएको थियो समान इन्जेक्टर प्रयोग गरेर इन्जेक्सन गरिएको थियो। समय (Kovát अनुक्रमणिका) र कस्टम पुस्तकालय र NIST14 पुस्तकालय (Agilent) को तुलनामा मास स्पेक्ट्रा। पहिचान गरिएका यौगिकहरू प्रमाणिक मानकहरू (अतिरिक्त फाइल 1: तालिका S2) इन्जेक्सन गरेर पुष्टि गरियो। परिमाणको लागि, हेप्टाइल एसीटेट (10 ng, 99.8%) एक्सटेर्नल रासायनिक मानकको रूपमा थियो।
होस्ट खोज्ने र रगत चुसाउने Ans.arabiensis लाई आकर्षित गर्न ताजा र बुढो पिसाबमा पहिचान गरिएको बायोएक्टिभ यौगिकहरू समावेश भएको सिंथेटिक गन्ध मिश्रणको प्रभावकारिताको मूल्याङ्कन गर्दै, माथिको जस्तै ओल्फ्याक्टोमिटर र प्रोटोकल प्रयोग गरी। सिंथेटिक मिश्रणले मिश्रणको नक्कल गर्‍यो। घण्टा, 48-घण्टा, 72-घण्टा, र 168-घण्टा पुरानो पिसाब (चित्र 5D-G; अतिरिक्त फाइल 1: तालिका S2)। विश्लेषणको लागि, पूर्ण सिंथेटिक मिश्रणको 10 μl को 1:100 पातलो प्रयोग गर्नुहोस्, एक समग्र रिलीज दर संग approximately h40001-4001 को लागि आकर्षित गर्न को लागी। होस्ट र रगत चुस्ने लामखुट्टेहरू। त्यसपछि, परीक्षण पूर्ण मिश्रणहरूमा गरिन्छ, जसमा पूर्ण मिश्रणको एकल यौगिकहरूको घटाउने मिश्रणहरू हटाइन्छ। होस्ट र रगतले खुवाइएको प्रतिक्रियाहरू खोज्नुहोस्। अरब बनाम सिंथेटिक र घटाउने मिश्रणहरू नाममात्र प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो। v14.0.0, SAS Institute Inc.)।
गाईको मूत्रले मलेरिया लामखुट्टेहरूको लागि होस्ट बासस्थान संकेतको रूपमा काम गर्न सक्छ कि भनेर मूल्याङ्कन गर्न, ताजा र वृद्ध गाईको मूत्र, माथि वर्णन गरिए अनुसार सङ्कलन गरिएको थियो, र पानी 3 एल बाल्टिन (100 एमएल) मा राखिएको थियो र होस्ट ब्याट ट्र्यापमा राखिएको थियो।(BG-HDT संस्करण; BioGents, Regensburg, DE) चरनमा 50 मिटर टाढा राखिएको दस पासो, गाउँ समुदायबाट 400 मिटर (सिलय, इथियोपिया, 5°53´24´N, 37°29´24´E) र कुनै पनि गाईवस्तु, स्थायी प्रजनन मैदानमा र पाँचवटा तातो ट्राफिक ग्राउन्डहरू, गाँउहरूमा ट्र्यापको उपस्थिति थियो। तातो छोडिएको छैन। प्रत्येक उपचार स्थानलाई कुल पाँच रातको लागि रातमा घुमाइन्छ। विभिन्न उमेरकाहरूको पिसाबले प्रलोभनमा राखिएको जालमा कैद गरिएका लामखुट्टे संख्याहरूलाई बीटा द्विपदीय वितरण (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) सँग लजिस्टिक रिग्रेसन प्रयोग गरेर तुलना गरिएको थियो।
माकी, ओरोमिया क्षेत्र, इथियोपिया शहर नजिकैको मलेरिया-स्थानीय गाउँमा (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; चित्र 6A)। अध्ययन अगस्टको मध्य र मध्य सेप्टेम्बरको बीचमा वार्षिक इनडोर वर्षाको साथमा गरिएको थियो। भाग) गाउँको बाहिरी भागमा रहेको अध्ययनको लागि छनोट गरिएको थियो (चित्र 6A)। घरहरू छनोट गर्न प्रयोग गरिने मापदण्डहरू थिए: घरमा जनावरहरूलाई अनुमति छैन, भित्री खाना पकाउन (दाउरा वा कोइला कोर्ने) अनुमति थिएन (कम्तिमा परीक्षण अवधिमा), र अधिकमा दुई जना बासिन्दा भएका घरहरू, कीटनाशक औषधिमा सुतिरहेका थिए।उपचार गरिएको लामखुट्टे नेट अन्तर्गत। प्राकृतिक विज्ञान संकाय (CNS-IRB), एडिस अबाबा विश्वविद्यालयको संस्थागत अनुसन्धान नैतिक समीक्षा बोर्ड (IRB/022/2016) द्वारा नैतिक स्वीकृति प्रदान गरिएको छ, विश्व मेडिकल एसोसिएसन घोषणाद्वारा स्थापित दिशानिर्देशहरू अनुसार प्रत्येक हेलसिंकीको हेलसिन्कीको हेलसिन्कीको एक्सटेन्सन हाउस अफ हेलसिन्कीको एक्सटेन्सन स्टाफ थियो। सम्पूर्ण प्रक्रियालाई जिल्ला र वडा ('केबेले') स्तरमा स्थानीय प्रशासनले समर्थन गरेको छ। प्रयोगात्मक डिजाइनले 2 × 2 ल्याटिन स्क्वायर डिजाइनलाई पछ्याएको छ, जसमा सिंथेटिक मिश्रण र नियन्त्रणहरू जोडी घरहरूलाई पहिलो रातमा तोकिएको थियो र अर्को प्रयोगात्मक रातमा घरहरू बीच अदलाबदली गरिएको थियो। यो प्रक्रिया दस पटक दोहोर्याइएको थियो। अतिरिक्त रूपमा CDC मा अनुमानित गतिविधिहरू सेट गर्नका लागि सेट गरिएको थियो। दिनको एकै समयमा फिल्ड ट्रायलको सुरु, मध्य र अन्त्यमा रातहरू।
छ बायोएक्टिभ यौगिकहरू भएको एक सिंथेटिक मिश्रण हेप्टेन (97.0% विलायक GC ग्रेड, सिग्मा एल्डरिच) मा भंग गरियो र 140 ng h-1 मा कपास विक डिस्पेन्सर [20] प्रयोग गरी छोडियो। विक डिस्पेन्सरले सबै यौगिकहरूलाई निरन्तर अनुपातमा जारी गर्न अनुमति दियो। अर्को 12 घण्टा सम्म प्रयोग गरिएको थियो। सेन्टर फर डिजिज कन्ट्रोल एन्ड प्रिभेन्सन (CDC) लाईट ट्र्याप (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Figure 6A) को ry प्वाइन्ट। जालहरू जमिनबाट ०.८ - १ मिटर माथि ओछ्यानको खुट्टाको छेउमा झुण्ड्याइएको थियो, र एक स्वयंसेवकलाई उपचार नगरिएको लामखुट्टेको मुनि सुतेको थियो। लिङ्ग र शारीरिक स्थिति द्वारा ed (अनफेड, खुवाइएको, अर्ध-गर्भवती, र गर्भवती [21] पछि पोलिमरेज चेन रियाक्सन (PCR) विश्लेषण प्रयोग गरी ए. गाम्बिया sl. जटिलका सदस्यहरू [२३] को रूपमा पहिचान गरिएको प्रजाति पहिचान गर्नको लागि परीक्षण गरिएको थियो। निर्भर चर र उपचार (सिंथेटिक मिश्रण बनाम नियन्त्रण) निश्चित प्रभाव थियो (JMP® 14.0।0. SAS संस्थान इंक)।यहाँ, हामी सम्भावना अनुपात परीक्षणबाट χ2 र p-मानहरू रिपोर्ट गर्छौं।
यो सुरक्षित छ कि छैन भनेर मूल्याङ्कन गर्नुहोस्। arabiensis ले पिसाब, यसको मुख्य नाइट्रोजन स्रोत, यूरिया, प्रत्यक्ष खुवाएर, प्रशासनको 48 घण्टा भित्र 4 दिन पोस्ट (dpe) होस्ट खोज्ने र रगत खुवाउने महिला खुवाउने परीक्षणहरू (चित्र 1A) प्राप्त गर्न सक्षम थियो। दुवै होस्ट-खोज्ने र रगत-चुस्ने महिलाहरू (अन्य आहारहरू भन्दा बढी) ) = 20.15, p <0.0001 र F(5,299) = 56.00, p <0.0001, क्रमशः; Fig. 1B, C)। यसबाहेक, होस्ट खोज्ने महिलाहरूले 168 घण्टामा पिसाबको तुलनामा 72 घण्टामा कम पिसाब खान्थे। 10% सुक्रोज (F(10,813) = 15.72, p <0.0001; चित्र 1D) बाट अविभाज्य हुँदा 2.69 mM मा यूरिया को एक धेरै ठूलो मात्रा अन्य सबै सांद्रता र पानी को तुलना मा छर्ने। यो महिला को प्रतिक्रिया को विपरीत थियो, रगत-युक्त आहार को तुलना मा महिला को प्रतिक्रिया को विपरीत थियो। पानी, 10% भन्दा कम सुक्रोज (F(10,557) = 78.35, p <0.0001; चित्र 1.1E)। यसबाहेक, दुई शारीरिक अवस्थाहरू बीचको तुलना गर्दा, फ्लेबोटोमाइज्ड महिलाहरूले होस्ट-खोज्ने महिलाहरूको तुलनामा धेरै युरिया अवशोषित गरे, यी महिलाहरूको कम मात्रामा समानता खोज्छन्। उच्च सांद्रतामा (F(1,953) = 78.82, p <0.0001;Fig. 1F, G)। यूरिया युक्त आहारबाट सेवन गर्दा इष्टतम मानहरू (चित्र 1D,E) देखिन थालेको थियो, दुवै शारीरिक अवस्थाहरूमा महिलाहरूले लग-लाइनर फेसनमा यूरिया सांद्रताको सम्पूर्ण दायरामा अवशोषित यूरियाको मात्रा परिमार्जन गर्न सक्षम थिए (Fig1)।त्यसै गरी, लामखुट्टेहरूले पिसाबमा नाइट्रोजनको मात्रा अवशोषित मात्रामा प्रतिबिम्बित हुने हुनाले पिसाब अवशोषित गर्ने मात्रालाई नियमन गरेर आफ्नो नाइट्रोजनको खपतलाई नियन्त्रण गर्ने देखिन्छ (चित्र 1B, C र B इन्सेटहरू)।
होस्ट खोज्ने र रगत चुस्ने लामखुट्टेको अस्तित्वमा पिसाब र यूरियाको प्रभावहरूको मूल्याङ्कन गर्न, महिलाहरूलाई चारै उमेरका (ताजा, 24 घन्टा, 72 घन्टा, र 168 घन्टा पोस्ट-पोजिसन) र यूरिया सांद्रताको दायरा, साथसाथै डिस्टिल्ड वाटर र sucrose20% नियन्त्रण (%) को पिसाब खुवाइयो। lysis ले देखाएको छ कि आहारले होस्ट खोज्ने महिलाहरूमा समग्र अस्तित्वमा महत्त्वपूर्ण प्रभाव पारेको थियो (मूत्र: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; यूरिया: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; Fig: 32, Fig: 32 महिलाहरू; df = 5, p < 0.0001; यूरिया: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; चित्र 2D, E)। सबै प्रयोगहरूमा, महिलाहरूले पिसाब, यूरिया, र पानीको आहार खुवाएमा महिलाहरूले f-st-s-f-fed-fed-fed-fed-feded आहारको तुलनामा धेरै कम बाँच्ने दरहरू थिए। ale पिसाबले विभिन्न बाँच्ने दरहरू प्रदर्शन गर्‍यो, जसमा 72-h बासी पिसाब (p = 0.016) सबैभन्दा कम बाँच्नको सम्भावना रहेको छ (चित्र 2B)। यसबाहेक, होस्ट खोज्ने महिलाहरूलाई 135 mM युरिया खुवाइने पानी नियन्त्रण (p होस्ट र रगत चुस्ने महिला एनोफिलिस अरेबिनिसको अस्तित्व गाईको पिसाब र यूरियामा खुवाउने। बायोएसे (ए) मा पोथी लामखुट्टेलाई ताजा र बूढो गाईको पिसाब, युरियाको विभिन्न सांद्रता, सुक्रोज (10%) र डिस्टिल्ड वाटर (H2O) को आहार प्रदान गरिएको थियो। सबै महिलाहरूले पिसाब (बी, डी) र युरिया (सी, ई), र नियन्त्रणहरू, सुक्रोज र पानी, मरेको नभएसम्म प्रत्येक 12 घण्टामा स्क्विटोहरू रेकर्ड गरिएको थियो।
24-घण्टा अवधिमा उडान मिल परीक्षणमा निर्धारित कुल दूरी र राउन्डहरूको संख्या होस्ट खोज्ने र रगत चुस्ने लामखुट्टेहरू बीच भिन्न थियो, जसले समग्रमा कम उडान गतिविधि देखाउँदछ (चित्र 3)। होस्ट खोज्ने लामखुट्टे जसले ताजा र बुढो पिसाब वा सुक्रोज र पानी प्रदान गर्दछ। ताजा उडान 3 मा फिड फिड 3 मा फरक सक्रिय हुँदा, Fwn फ्लाइट 3 मा सक्रिय फिड। पिसाब खुवाउने २४- र १६८-घण्टा उमेरका लामखुट्टेहरूले विभिन्न उडान ढाँचाहरू प्रदर्शन गरे र मुख्य रूपमा दैनिक थिए। सुक्रोज वा 72-घण्टा पिसाब दिने महिला लामखुट्टेहरूले 24-घण्टा अवधिभर गतिविधि देखाए, जबकि पानी प्रदान गर्ने महिलाहरू सुक्रोजको बीचमा उच्च गतिविधिमा बढी सक्रिय थिए। राति ढिलो र बिहान सबेरै, जबकि 72-घण्टा-उमेरको पिसाब सेवन गर्नेहरूले 24 घण्टामा गतिविधिमा स्थिर गिरावट अनुभव गरे (चित्र 3)।
गाईको पिसाब र युरिया खुवाउने शिकारी रगत चुस्ने महिला एनोफिलिस अरेबिनिसको उडान प्रदर्शन। उडान मिल परीक्षणमा, पोथी लामखुट्टेलाई ताजा र वृद्ध गाईको पिसाब, युरिया, सुक्रोज (10%), र डिस्टिल्ड वाटर (H2O) को विभिन्न सांद्रतामा खुवाइएको थियो। खोज्ने (बायाँ) र रगत चुस्ने (दायाँ) महिलाहरू, 24-घण्टा अवधिमा प्रत्येक आहारको लागि प्रति घण्टा उडानहरूको कुल दूरी र संख्या रेकर्ड गरिएको थियो (गाढा: खैरो; हल्का: सेतो)। औसत दूरी र बाउटहरूको औसत संख्या सर्काडियन गतिविधि ग्राफको दायाँतिर देखाइएको छ। त्रुटि बारहरूले अर्थको मानक त्रुटि प्रतिनिधित्व गर्दछ। तथ्याङ्कीय पाठ हेर्नुहोस्।
सामान्यतया, होस्ट खोज्ने महिलाहरूको समग्र उडान गतिविधिले 24-घण्टा अवधिमा उडान दूरीको जस्तै ढाँचा पछ्यायो। औसत उडान दूरी महत्त्वपूर्ण रूपमा इन्जेस्ट गरिएको आहार (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001) द्वारा प्रभावित भएको थियो, र होस्ट-खोजी महिलाहरूले 72 घण्टा लामो दूरीको तुलनामा f1w अन्य 0p भन्दा लामो दूरीको खाना खाए। ), र सुक्रोज खुवाइने लामखुट्टेहरू ताजा (p = 0.022) र 24-घण्टा-उमेरको पिसाब (p = 0.022) खुवाइने लामखुट्टेहरू भन्दा लामो उडान गरे। पिसाब आहार द्वारा वर्णन गरिएको उडान गतिविधि ढाँचाको विपरित, यूरिया खुवाइने होस्ट-खोज्ने महिलाहरूले दोस्रो उडान अवधिमा आधा गतिविधि प्रदर्शन गरेका छन्। 3).यद्यपि गतिविधि ढाँचाहरू समान थिए, होस्ट-खोजी महिलाहरूले यूरिया खुवाए, अवशोषित एकाग्रता (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) को आधारमा महत्त्वपूर्ण रूपमा उडान दूरी बढ्यो। होस्ट-खोजी महिलाहरूले युरिया flese00 वा महिला flese00 भन्दा लामो पानीको कुनै पनि एकाग्रता खुवाए।
रगत चुस्ने लामखुट्टेको समग्र उडान गतिविधि सबै आहारहरूमा 24 घण्टा भन्दा बढी स्थिर र निरन्तर रह्यो, पानी पिउने महिलाहरूको लागि कालो अवधिको दोस्रो आधामा साथै ताजा र 24 घण्टा पुरानो खुवाउने महिलाहरूमा पिसाब गतिविधि बढेको थियो (छवि 3)। जबकि मूत्र आहारले रगत खुवाउने महिलाहरूमा उडान दूरीमा महत्त्वपूर्ण असर पारेको छ, p 30 = 40 (40 = 40)। यूरिया आहार (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .अन्य पिसाब र नियन्त्रण आहारको साथ (ताजा, p = 0.0091; 72 घण्टा, p = 0.0022; 168 घण्टा, p = 0.001; sucrose, p = 0.001; sucrose, p = 0.001; 0.24 = 0.24)।
प्रजनन मापदण्डहरूमा पिसाब र युरिया खुवाउने प्रभावहरू अण्डा दिने बायोसेस (चित्र 4A) मा मूल्याङ्कन गरिएको थियो र प्रत्येक पोथी, अण्डाको आकार, र भर्खरै निस्केको पहिलो इनस्टार लार्भाले राखेको अण्डाहरूको संख्याको आधारमा अनुसन्धान गरिएको थियो। अण्डाहरूको संख्या। पिसाब खुवाइने अरबी महिलाहरू (p. 0 = 2, 2 आहार = 3, 0 द्वारा भिन्न)। 8; चित्र 4B)।महिलाहरूले 24-घण्टा पिसाब खुवाए, रगतको खानाले महिलाहरूले अन्य मूत्र आहारहरू भन्दा धेरै अण्डाहरू हालेका थिए र खुवाइएका सुक्रोज जस्तै थिए (चित्र 4B)। त्यसैगरी, पिसाब खुवाउने महिलाहरूले राखेका अण्डाहरूको आकार आहार अनुसार फरक हुन्छ (F. 1 0, 520 = 0, 9 0, 8 0, 8 0)। -घण्टा पिसाब र सुक्रोज खुवाइने महिलाहरूले पानी पिउने महिलाहरूको तुलनामा उल्लेखनीय रूपमा ठूला अण्डाहरू दिन्छन्, जबकि 168 घन्टा पिसाब खुवाउने महिलाहरूको अण्डाहरू उल्लेखनीय रूपमा सानो थिए (चित्र 4C)। साथै, मूत्र आहारले लार्भा साइजलाई असर गर्छ (F(5, 187) = 7.80, 7.80, p, 100, 7.80, p. 24- र 72-घण्टा पिसाब खुवाइने महिलाहरूले अण्डाको लार्भाबाट हालेको अण्डाको तुलनामा।पानी खुवाउने र 168-घन्टा पिसाब खुवाउने महिलाहरू (चित्र 4D)।
गाईको पिसाब र युरिया खुवाउने महिला एनोफिलिस अरेबिनिसको प्रजनन क्षमता। रगत खुवाउने पोथी लामखुट्टेलाई ताजा र बुढो गाईको पिसाब, विभिन्न सांद्रता युरिया, सुक्रोज (10%), र डिस्टिल्ड वाटर (H2O) 48 घण्टासम्म खुवाइएको थियो। , E), अण्डाको आकार (C, F) र लार्भा साइज (D, G) प्रदान गरिएको आहारबाट महत्त्वपूर्ण रूपमा प्रभावित भएको थियो (गाईको मूत्र: BD; यूरिया: EG)। विभिन्न अक्षर नामहरू प्रयोग गरेर मापन गरिएको प्रत्येक प्यारामिटरको लागि अर्थहरू एकअर्काबाट उल्लेखनीय रूपमा फरक थिए (टुकीको पोस्ट हक विश्लेषण प्रयोग गरेर एकतर्फी ANOVA; p < 0.05 को मानक त्रुटिको अर्थ प्रतिनिधित्व गर्दछ।
पिसाबको प्रमुख नाइट्रोजनयुक्त घटकको रूपमा, युरिया, रगत खुवाउने महिलाहरूलाई आहारको रूपमा प्रदान गर्दा, सबै अध्ययनहरूमा प्रजनन मापदण्डहरूमा उल्लेखनीय प्रभाव पार्छ। युरियाको सांद्रता (F(11, 360) = 4.60 11, 4.60; महिलाहरू बीचमा युरिया खाएपछि युरिया खुवाइएको अण्डाहरूको संख्यामा निर्भर गर्दछ। µM र 1.34 mM ले बढी अण्डाहरू पारे (चित्र 4E)। 134 µM वा सोभन्दा माथिको युरिया सांद्रतामा खुवाइएका महिलाहरूले पानीमा खुवाइएका महिलाहरूको तुलनामा ठूला अण्डा दिन्छन् (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001), र मातृको आकार 4 सेन्ट, माताको आकारमा उस्तै मात्रामा असर भएको छ। (F(10, 3305) = 37.9; p <0.0001) अधिक चर थियो (चित्र 4G)।
होस्ट-खोजी गोवाइन मूत्र हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरूको लागि समग्र आकर्षण। गिलास ट्यूब ओल्फ्याक्टोमिटर (चित्र 5A) मा मूल्याङ्कन गरिएको arabiensis मूत्र उमेर (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032) द्वारा महत्त्वपूर्ण रूपमा प्रभावित भएको थियो। 24 घण्टाले अन्य सबै उपचारहरूको तुलनामा उल्लेखनीय रूपमा उच्च स्तरको आकर्षण निम्त्यायो (72 घण्टा: p = 0.0060, 168 घण्टा: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), ताजा पिसाबको गन्ध बाहेक (p = 0.13; चित्र 5B) रगतको लागि महत्त्वपूर्ण थिएन। ly फरक (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Fig. 5C), यी महिलाहरूलाई नियन्त्रणको तुलनामा 72-घण्टा उमेरको पिसाबको तुलनामा हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरूको लागि उल्लेखनीय रूपमा बढी आकर्षक भेटियो (p = 0.0066; चित्र 5C)।
होस्ट र रगतले खुवाउने एनोफिलिस अरबियनसको खोजीमा प्राकृतिक र सिंथेटिक गाईमूत्र गन्धको व्यवहार प्रतिक्रिया। गिलास ट्यूब ओल्फ्याक्टोमिटर (ए) को योजनाबद्ध। ताजा र वृद्ध गाईको मूत्रबाट होस्ट (बी) र रगत-चुस्ने प्रतिक्रिया (सी) मा रगत-चुस्ने प्रतिक्रिया (सी) मा। s ताजा (D), 24-घण्टा (E), 72-घण्टा (F), र 168-घण्टा (G) उमेरको गाईको मूत्र देखाइन्छ। इलेक्ट्रोन एन्टेना पत्ता लगाउने (EAD) ट्रेसहरूले हेडस्पेसमा बायोएक्टिभ यौगिकहरूको प्रतिक्रियामा भोल्टेज परिवर्तनहरू देखाउँछन्। de (mV) बनाम प्रतिधारण समय (हरू)। जैविक रूपमा सक्रिय यौगिकहरूको गुण र रिलीज दरहरू (µg h-1) देखाइन्छ। एकल एस्टेरिस्क (*) ले एक सुसंगत कम-एम्प्लिच्युड प्रतिक्रियालाई संकेत गर्छ। डबल एस्टेरिस्क (**)ले पुन: उत्पादन गर्न नसकिने प्रतिक्रियाहरू संकेत गर्दछ। होस्ट फेला पार्नुहोस् (H) र रगतमा विभिन्न अपीलहरू छन्। र पुरानो गाईको मूत्र गन्ध। विभिन्न अक्षर नामहरूमा आकर्षित हुने लामखुट्टेहरूको औसत अनुपात एकअर्काबाट उल्लेखनीय रूपमा फरक थियो (टुकीको पोस्ट हक विश्लेषण प्रयोग गरेर एकतर्फी ANOVA;p <0.05)। त्रुटि बारहरूले मापनको मानक त्रुटि प्रतिनिधित्व गर्दछ
महिला Ann.arabiensis, 72 घन्टा र 120 घन्टा रगत खाए पछि, स्प्यानिङको समयमा, पेन्टेन नियन्त्रणहरू (χ2 = 3.07, p > 0.05; अतिरिक्त फाइल 1: Fig. S1) को तुलनामा ताजा र वृद्ध गाईको मूत्रबाट हेडस्पेस वाष्पशील अर्कको लागि कुनै प्राथमिकता देखाइएको छैन।
महिला Ann.arabiensis को लागि, GC-EAD र GC-MS विश्लेषणहरूले आठ, छ, तीन र तीन बायोएक्टिभ यौगिकहरू (चित्र 5D-G) पहिचान गरे। यद्यपि इलेक्ट्रोफिजियोलोजिकल प्रतिक्रियाहरू प्राप्त गर्ने यौगिकहरूको संख्यामा भिन्नताहरू अवलोकन गरियो, यी अधिकांश यौगिकहरू प्रत्येक हेडस्पेसमा उपस्थित थिए। d थ्रेसहोल्ड माथि महिला एन्टेनाबाट एक शारीरिक प्रतिक्रिया थप विश्लेषणहरूमा समावेश गरिएको थियो।
हेडस्पेस संग्रहमा बायोएक्टिभ यौगिकहरूको कुल अस्थिर रिलीज दर ताजा पिसाबमा 29 µg h-1 बाट 168-घण्टा पुरानो पिसाबमा 242 µg h-1 मा बढ्यो, मुख्यतया p-cresol र m-formaldehyde Phenol को कारणले बढ्छ साथै phenol। रिलिज दर र अन्य कम्पाउन्डको विपरित, कम्पाउन्ड 2-1 को विपरीत। नहर, बढ्दो पिसाब उमेर संग घट्यो, जुन क्रोमेटोग्राम (चित्र 5D)-G बायाँ प्यानल) र यी यौगिकहरु (चित्र 5D-G दायाँ प्यानल) को शारीरिक प्रतिक्रियाहरु मा संकेत तीव्रता (प्रचुरता) मा परेको कमी संग सम्बन्धित छ।
समग्रमा, सिंथेटिक मिश्रणमा ताजा र वृद्ध पिसाब हेडस्पेस (चित्र 5D–G) को वाष्पशील अर्कहरूमा पहिचान गरिएको बायोएक्टिभ यौगिकहरूको समान प्राकृतिक अनुपात थियो र होस्ट (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.05s) वा moquis = 0.08 (mouquis) को खोजीमा महत्त्वपूर्ण अपील देखा परेन। 4.91, df = 4, p = 0.30; Fig. 5I)। यद्यपि, उपचारहरू बीचको पोस्ट-हक जोडी तुलनाले देखाएको छ कि होस्ट खोज्ने लामखुट्टेहरू पेन्टेन नियन्त्रणहरू (p = 6; H500) को तुलनामा 24-घन्टा उमेरको पिसाबको सिंथेटिक मिश्रणमा उल्लेखनीय रूपमा आकर्षक थिए।
24-घण्टा-उमेरको मूत्रको सिंथेटिक मिश्रणमा व्यक्तिगत घटकहरूको भूमिका मूल्याङ्कन गर्न, Y-ट्यूब परखमा पूर्ण मिश्रणहरू विरुद्ध छ घटाउने मिश्रणहरू मूल्याङ्कन गरियो, जसमा व्यक्तिगत यौगिकहरू हटाइयो। होस्ट-खोजी लामखुट्टेहरूको लागि, व्यक्तिगत यौगिकहरू घटाएर पूर्ण मिश्रण = 92f व्यवहारमा महत्त्वपूर्ण प्रभाव = 962 प्रतिक्रिया थियो। 6, p = 0.0032; अतिरिक्त फाइल 1: चित्र S2A), सबै घटाउने मिश्रणहरू पूर्ण रूपमा मिश्रित भन्दा सानो भन्दा बढी आकर्षक थिए। यसको विपरित, पूर्णतया सिंथेटिक मिश्रणबाट व्यक्तिगत यौगिकहरू हटाउनाले रगत चुस्ने लामखुट्टेहरूको व्यवहार प्रतिक्रियालाई असर गर्दैन (χ2 = 1,78 = de.78 बाहेक)। नहर, जसले पूर्ण मिश्रण आकर्षण (p = 0.022; अतिरिक्त फाइल 1: चित्र S2B) को तुलनामा निम्न स्तरहरूमा परिणाम दिन्छ।
इथियोपियाको एउटा मलेरिया-स्थानीय गाउँमा, क्षेत्रको अवस्थामा लामखुट्टेलाई आकर्षित गर्न 24-घण्टा गाईको पिसाबको सिंथेटिक मिश्रणको प्रभावकारिता दस रात (चित्र 6A) को लागि मूल्याङ्कन गरिएको थियो। कुल 4,861 लामखुट्टेहरू समातिए र पहिचान गरियो, जसमा 45.19% एनथ्रोपिया थिए। फरोएन्सिस र ३५.४% क्युलेक्स एसपीपी थिए।(अतिरिक्त फाइल १: तालिका S1)। एनोफिलिस अरेबिनिस एनोफिलेस एराबिनिस एएन गाम्बियन प्रजातिको कम्प्लेक्सको एक मात्र सदस्य हो जुन PCR विश्लेषणद्वारा पहिचान गरिएको थियो। औसतमा, प्रति रात 320 लामखुट्टेहरू समातिएका थिए, यस अवधिमा सिंथेटिक मिक्सरहरू बिना सिन्थेटिक मिक्स्चरको पासोमा जालहरू (बनाई) (0, 3196) = 170.0, p < 0.0001) .परीक्षणको शुरुवात, मध्य र अन्त्यमा प्रत्येक पाँच नियन्त्रण रातहरूमा गैर-बाइटेड जालहरू सेट गरिएको थियो। प्रत्येक जोडा जालहरूमा समान संख्यामा लामखुट्टेहरू समातिएका थिए, घरहरू बीच कुनै पूर्वाग्रह नभएको संकेत गर्दै, p >02 = 0.0001) ०.०५) र अध्ययन अवधिमा जनसंख्या घटेको छैन। नियन्त्रण जालको तुलनामा, सिंथेटिक मिश्रण भएको पासोमा समातिएका लामखुट्टेहरूको संख्या उल्लेखनीय रूपमा बढेको थियो: होस्ट खोज्ने (χ2(0, 2107) = 138.7, p <0.0001), हालैको रगत खुवाउने (0.20, 0.02, 0.02, 0.5) ) र गर्भावस्था (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123;अतिरिक्त फाइल 1: तालिका S1)। यो लामखुट्टेको कुल संख्यामा पनि प्रतिबिम्बित हुन्छ: होस्ट खोज्ने > रगत चुस्ने > गर्भवती > अर्ध-गर्भवती > पुरुष।
24-घण्टा सिंथेटिक गाईमूत्र गन्धको मिश्रणको प्रभावकारिताको फिल्ड मूल्याङ्कन। फिल्ड परीक्षणहरू दक्षिण-मध्य इथियोपिया (नक्सा), माकी सहर नजिकै (इनसर्ट), रोग नियन्त्रण केन्द्र (CDC) प्रकाश जाल (दायाँ) जोडी घरहरूमा प्रयोग गरी आयोजित गरिएको थियो। फोटोट्र्यापले महिला एनोफिलिस अरेबेस्क (बी) लाई आकर्षित गर्दछ र खिच्दछ, तर एनोफिलिस फारोस (सी) होइन, फरक तरिकामा, एक शारीरिक अवस्था-निर्भर प्रभाव। साथै, यी पासोहरूले होस्ट क्युलेक्स लामखुट्टेहरूको संख्यामा उल्लेखनीय रूपमा कब्जा गर्दछ। (डी) नियन्त्रणको तुलनामा। बायाँपट्टिको पट्टीहरूले औसत चयन र मोक्वीट इंडेक्स (caught greece) को औसत चयनको प्रतिनिधित्व गर्दछ। ) जालहरू (N = 10), जबकि दायाँ पट्टीहरूले नियन्त्रण जालहरू (खुला; N = 5) को जोडीहरूमा औसत चयन सूचकांक प्रतिनिधित्व गर्दछ।तारा चिन्हहरूले सांख्यिकीय महत्व स्तरहरू (*p = 0.01 र ***p < 0.0001) संकेत गर्दछ।
तीन प्रजातिहरूलाई सिंथेटिक मिश्रण भएको पासोमा फरक तरिकाले कैद गरिएको थियो।होस्ट (χ2(1, 1345) = 71.7, p <0.0001), रगत खुवाउने (χ2(1, 517) = 16.7, p <0.0001) र गर्भावस्था (χ1 = 0.10) र गर्भावस्था (χ1 = 0.10)। 4) a .arabiensis लाई सिंथेटिक मिश्रण (चित्र 6B) छोड्ने जालमा फसेको थियो, जबकि An को मात्रा फरक थिएन। विभिन्न शारीरिक अवस्थाहरूमा Pharoensis फेला पर्यो (चित्र 6C)। Culex को लागि, होस्ट खोज्ने लामखुट्टेहरूको संख्यामा मात्र उल्लेखनीय वृद्धि भएको थियो। 12.6, p = 0.0004; चित्र 6D), नियन्त्रण जालको तुलनामा।
इथियोपियामा प्रजनन साइटहरू र ग्रामीण समुदायहरू बीचको सम्भावित होस्टहरू बाहिर अवस्थित होस्ट चारा जालहरू मलेरिया लामखुट्टेहरूले गाईको पिसाबको गन्धलाई होस्ट बासस्थान क्यूको रूपमा प्रयोग गर्छन् कि गर्दैनन् भनेर मूल्याङ्कन गर्न प्रयोग गरियो। होस्ट संकेतहरूको अनुपस्थितिमा, तातो, र गाईको मूत्रको उपस्थिति बिना वा बिना गाईको पिसाबको गन्ध थियो। यद्यपि, उच्च तापक्रम र गाईको पिसाबको गन्धको उपस्थितिमा, पोथी मलेरिया लामखुट्टेहरू आकर्षित र समातिएका थिए, थोरै संख्यामा भए पनि, पिसाबको उमेर (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; अतिरिक्त फाइल 1: चित्र S3)। : चित्र S3)।
मलेरिया लामखुट्टेहरूले अन्य कीराहरू जस्तै जीवन-इतिहास विशेषताहरू बढाउन गाईको मूत्र (जस्तै, पोडलहरू) मा क्षतिपूर्ति खुवाएर नाइट्रोजन युक्त यौगिकहरू प्राप्त गर्छन् र वितरण गर्छन्। र ग्रामीण घरहरू र स्पौन साइटहरू नजिकै अग्लो वनस्पति। पोथी लामखुट्टेहरूले गन्धद्वारा यो स्रोत पत्ता लगाउँछन् र मूत्रमा नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरू, यूरिया सहित, पिसाबमा मुख्य नाइट्रोजनयुक्त घटकको शोषणलाई विनियमित गर्न सक्षम हुन्छन् [१५, १६]। उडान गतिविधि र होस्ट खोज्ने पोथी लामखुट्टेहरूको अस्तित्व, साथै पहिलो गोनाडोट्रोपिक चक्रमा रगत खुवाउने व्यक्तिहरूको बाँच्न र प्रजनन विशेषताहरू बृद्धि गर्न प्रयोग गरिन्छ। त्यसैले, पिसाब मिसाइने मलेरिया भ्याक्टरहरूका लागि महत्त्वपूर्ण पोषण भूमिका खेल्छ जुन कुपोषित महिलाहरू जस्तै कुपोषित महिलाहरूलाई प्रदान गर्दछ। कम-जोखिम खुवाउने कार्यमा संलग्न भएर ट्रोजेनस यौगिकहरू। यो खोजले महत्त्वपूर्ण महामारी विज्ञान परिणामहरू छन्, किनकि महिलाहरूले आफ्नो जीवन प्रत्याशा, गतिविधि र प्रजनन उत्पादन बढाउँछन्, ती सबैले भेक्टर क्षमतालाई असर गर्छ। यसबाहेक, यो व्यवहार भविष्यको भेक्टर व्यवस्थापन कार्यक्रमहरूको लक्ष्य हुन सक्छ।