पोषक तत्वको अधिग्रहण र वितरणले कीराको चारा र जीवन इतिहासका विशेषताहरूलाई एकीकृत गर्दछ। विभिन्न जीवन चरणहरूमा विशिष्ट पोषक तत्वहरूमा कमीहरूको पूर्ति गर्न, कीराहरूले पूरक आहार मार्फत यी पोषक तत्वहरू प्राप्त गर्न सक्छन्, उदाहरणका लागि, पुडल्स भनेर चिनिने प्रक्रियामा कशेरुका स्रावहरू खुवाएर। एनोफिलिस अरेबियानी लामखुट्टे कुपोषित देखिन्छ र त्यसैले, चयापचय र प्रजनन दुवैको लागि पोषक तत्वहरू चाहिन्छ। यस अध्ययनको उद्देश्य पोषक तत्वको अधिग्रहणको लागि गाईको मूत्रमा एन. अरेबियान्सिस आन्दोलनले जीवन इतिहासका विशेषताहरूमा सुधार गर्छ कि गर्दैन भनेर मूल्याङ्कन गर्नु थियो।
यो सुरक्षित छ भनी सुनिश्चित गर्नुहोस्।अराबिएन्सिसलाई ताजा, २४-घण्टा, ७२-घण्टा, र १६८-घण्टा पुरानो गाईको मूत्रको गन्धले आकर्षित गरेको थियो, र होस्ट-खोजी गर्ने र रगत खुवाउने (४८-घण्टा रगत खाएपछि) पोथीहरूलाई Y-ट्यूब ओल्फ्याक्टोमिटरमा मापन गरिएको थियो, र गर्भवती पोथीहरूलाई स्प्यानिङ परीक्षणको लागि मूल्याङ्कन गरिएको थियो। त्यसपछि चारै उमेर वर्गहरूमा गाईको मूत्रमा बायोएक्टिभ यौगिकहरू पहिचान गर्न संयुक्त रासायनिक र इलेक्ट्रोफिजियोलोजिकल विश्लेषण प्रयोग गरिएको थियो।Y-ट्यूब र फिल्ड परीक्षणहरूमा बायोएक्टिभ यौगिकहरूको सिंथेटिक मिश्रणहरूको मूल्याङ्कन गरिएको थियो।मलेरिया भेक्टरहरूको लागि सम्भावित पूरक आहारको रूपमा गाईको मूत्र र यसको मुख्य नाइट्रोजन-युक्त यौगिक युरियाको अनुसन्धान गर्न, खुवाउने प्यारामिटरहरू र जीवन इतिहास विशेषताहरू मापन गरिएको थियो।पोथी लामखुट्टेको अनुपात र गाईको मूत्र र युरिया अवशोषित मात्राको मूल्याङ्कन गरिएको थियो।खुवाइ पछि, पोथीहरूलाई बाँच्न, टेथर्ड उडान, र प्रजननको लागि मूल्याङ्कन गरिएको थियो।
होस्टको रगत र पोषण खोज्नुहोस्। प्रयोगशाला र क्षेत्रीय अध्ययनहरूमा, अरबहरू ताजा र पुरानो गाईको मूत्रको प्राकृतिक र कृत्रिम गन्धप्रति आकर्षित भए। गर्भवती महिलाहरू अण्डा प्रजनन स्थलहरूमा गाईको मूत्र प्रतिक्रियाहरूप्रति उदासीन थिए। होस्ट खोज्ने र रगत चुस्ने महिलाहरूले सक्रिय रूपमा गाईको मूत्र र युरिया अवशोषित गर्छन् र उडान, बाँच्न, वा प्रजननको लागि शारीरिक अवस्थाको कार्यको रूपमा जीवन-इतिहास व्यापार-अफ अनुसार यी स्रोतहरू बाँडफाँड गर्छन्।
जीवन इतिहासका विशेषताहरूमा सुधार ल्याउन गाईको मूत्रको अधिग्रहण र वितरण। गाईको मूत्रको पूरक खुवाउँदा दैनिक बाँच्ने क्षमता र भेक्टर घनत्व बढाएर र अप्रत्यक्ष रूपमा उडान गतिविधि परिवर्तन गरेर प्रत्यक्ष रूपमा भेक्टर क्षमतालाई असर गर्छ र त्यसैले भविष्यका मोडेलहरूमा यसलाई विचार गरिनुपर्छ।
पोषक तत्वको अधिग्रहण र वितरणले कीराको चरन र जीवन इतिहासका विशेषताहरूलाई एकीकृत गर्दछ [1,2,3]। कीराहरूले खाना छनौट गर्न र प्राप्त गर्न र खाद्य उपलब्धता र पोषक तत्वको आवश्यकताहरूको आधारमा क्षतिपूर्ति खुवाउन सक्षम हुन्छन् [1, 3]। पोषक तत्वहरूको वितरण जीवन-इतिहास प्रक्रियामा निर्भर गर्दछ र कीराहरूको विभिन्न जीवन चरणहरूमा आहारको गुणस्तर र मात्राको लागि फरक आवश्यकताहरू निम्त्याउन सक्छ [1, 2]। विशिष्ट पोषक तत्वहरूमा कमीहरूको क्षतिपूर्ति गर्न, कीराहरूले पूरक खाना मार्फत यी पोषक तत्वहरू प्राप्त गर्न सक्छन्, जस्तै हिलो, विभिन्न मलमूत्र र कशेरुका जनावरहरूको स्राव, र सवार, जुन प्रक्रियालाई पोखरी भनिन्छ [2]। यद्यपि विभिन्न प्रकारका पुतली र कीरा प्रजातिहरू मुख्य रूपमा वर्णन गरिएको छ, पानीको प्वालहरू अन्य कीराहरूको क्रमहरूमा पनि हुन्छन्, र यी प्रकारका स्रोतहरूप्रति आकर्षण र खुवाउँदा स्वास्थ्य र अन्य जीवन-इतिहासका विशेषताहरूमा महत्त्वपूर्ण प्रभाव पर्न सक्छ [2, 4, 5, 6],7]। औलो लामखुट्टे एनोफिलिस गाम्बिया सेन्सु लाटो (sl) 'कुपोषित' वयस्कको रूपमा देखा पर्दछ [8], त्यसैले पानी पिउनाले भूमिका खेल्न सक्छ यसको जीवन इतिहास विशेषताहरूमा महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ, तर यो व्यवहारलाई अहिलेसम्म बेवास्ता गरिएको छ। यस महत्त्वपूर्ण सवारी साधनमा पोषक तत्वको सेवन बढाउने माध्यमको रूपमा आन्दोलनको प्रयोग ध्यान दिनुपर्छ किनकि यसले महत्त्वपूर्ण महामारी विज्ञान परिणामहरू निम्त्याउन सक्छ।
वयस्क पोथी एनोफिलिस लामखुट्टेमा नाइट्रोजन सेवन सीमित हुन्छ किनभने लार्भा चरणबाट कम क्यालोरी भण्डार र रगतको अकुशल उपयोग हुन्छ [9]। पोथी Ann.gambiae sl ले सामान्यतया पूरक रगतको भोजन [10, 11] लिएर यसको क्षतिपूर्ति गर्छ, जसले गर्दा धेरै मानिसहरूलाई रोग लाग्ने जोखिम हुन्छ र लामखुट्टेले शिकार हुने जोखिम बढी हुन्छ। वैकल्पिक रूपमा, लामखुट्टेले नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरू प्राप्त गर्न कशेरुका मलको पूरक खुवाउन प्रयोग गर्न सक्छन् जसले अनुकूलन र उडान गतिशीलता बढाउँछ, जस्तै अन्य कीराहरू [2] द्वारा प्रदर्शन गरिएको छ। यस सन्दर्भमा, An.Gambian SL प्रजाति जटिल, एनोफिलिस arabinis, ताजा र वृद्ध गाईको मूत्र [12,13,14] भित्रका भाइबहिनी प्रजातिहरू मध्ये एकको बलियो र विशिष्ट आकर्षण रोचक छ। एनोफिलिस arabinis यसको होस्ट प्राथमिकताहरूमा अवसरवादी छ र गाईवस्तुहरूसँग सम्बद्ध र खुवाउन जानिन्छ। गाईको मूत्र नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरूमा धनी स्रोत हो, जसमा युरियाले ताजा पिसाबमा कुल नाइट्रोजनको 50-95% ओगटेको हुन्छ। [१५, १६]।गाईको मूत्रको उमेर बढ्दै जाँदा, सूक्ष्मजीवहरूले २४ घण्टा भित्र नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरूको जटिलता कम गर्न यी स्रोतहरू प्रयोग गर्छन् [१५]।अमोनियामा द्रुत वृद्धिसँगै, जैविक नाइट्रोजनमा गिरावटसँग सम्बन्धित, अल्कालोफिलिक सूक्ष्मजीवहरू (जसमध्ये धेरैले लामखुट्टेलाई विषाक्त यौगिकहरू उत्पादन गर्छन्) फस्टाउँछन् [१५], जुन महिला हुन सक्छ Ann.arabiensis प्राथमिकतामा २४ घण्टा वा कम उमेरको पिसाबमा आकर्षित हुन्छ [१३, १४]।
यस अध्ययनमा, होस्ट र रगत खुवाउने Ans खोजिएको थियो। यसको पहिलो गोनाडोट्रोपिन चक्रको समयमा, मूत्र मिश्रण द्वारा युरिया सहित नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरूको अधिग्रहणको लागि अरबिएन्सिसको मूल्याङ्कन गरिएको थियो। त्यसपछि, पोथी लामखुट्टेहरूले कसरी यो सम्भावित पोषक स्रोतलाई सुधारिएको बाँच्न, प्रजनन र थप चारा खोज्नको लागि आवंटित गर्छन् भनेर मूल्याङ्कन गर्न प्रयोगहरूको एक श्रृंखला सञ्चालन गरिएको थियो। अन्तमा, ताजा र वृद्ध गाईको मूत्रको गन्धले होस्ट र रगत खुवाउने Ans को लागि भरपर्दो संकेतहरू प्रदान गर्दछ कि भनेर निर्धारण गर्न मूल्याङ्कन गरिएको थियो। यो सम्भावित पोषण स्रोतको खोजीमा, अरबिएन्सिसले अवलोकन गरिएको भिन्न आकर्षणको पछाडि रासायनिक सहसम्बन्ध पत्ता लगाए। २४-घण्टा पुरानो पिसाबमा पहिचान गरिएको वाष्पशील जैविक यौगिकहरू (VOCs) को कृत्रिम गन्ध मिश्रणहरू क्षेत्रीय अवस्थाहरूमा थप मूल्याङ्कन गरिएको थियो, प्रयोगशाला अवस्थाहरूमा प्राप्त परिणामहरू विस्तार गर्दै र विभिन्न शारीरिक अवस्थाहरूमा गोवाइन मूत्र गन्धको प्रभाव प्रदर्शन गर्दै। लामखुट्टे आकर्षण। प्राप्त परिणामहरूले पुष्टि गर्दछ कि An. अरबिएन्सिसले जीवन इतिहास विशेषताहरूलाई प्रभाव पार्न कशेरुका पिसाबमा पाइने नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरू प्राप्त गर्दछ र वितरण गर्दछ। यी परिणामहरू सम्भावित महामारी विज्ञान परिणामहरूको सन्दर्भमा र तिनीहरूलाई भेक्टर निगरानी र नियन्त्रणको लागि कसरी प्रयोग गर्न सकिन्छ भन्ने सन्दर्भमा छलफल गरिएको छ।
एनोफिलिस अरेबिकन्स (डोङ्गोला स्ट्रेन) लाई २५ ± २ डिग्री सेल्सियस, ६५ ± ५% आरएच र १२:१२ घण्टाको प्रकाश: अँध्यारो चक्रमा राखिएको थियो। लार्भालाई प्लास्टिकको ट्रे (२० सेमी × १८ सेमी × ७ सेमी) मा आसुत पानीले भरिएकोमा हुर्काइएको थियो र टेट्रामिन® माछाको खाना (टेट्रा वेर्के, मेले, डे) खुवाइएको थियो। प्युपालाई ३० मिली कप (नोलाटो हर्टिला, आस्टोर्प, एसई) मा सङ्कलन गरिएको थियो र त्यसपछि वयस्कहरूको उदयलाई अनुमति दिन बगडोर्म पिंजराहरू (३० सेमी × ३० सेमी × ३० सेमी; मेगाभ्यू साइन्स, ताइचुङ, ताइवान) मा स्थानान्तरण गरिएको थियो। वयस्कहरूलाई उदय पछि ४ दिन (dpe) सम्म १०% सुक्रोज घोल एड लिबिटम प्रदान गरिएको थियो, जहाँ होस्ट-खोज्ने महिलाहरूलाई प्रयोगको तुरुन्तै आहार प्रदान गरिएको थियो, वा प्रयोगको अघि आसुत पानीले रातभर भोकै राखिएको थियो, तल वर्णन गरिए अनुसार। उडान ट्यूब प्रयोगहरूको लागि प्रयोग गरिएका महिलाहरूलाई भोकै राखिएको थियो। पानीको साथ केवल ४-६ घण्टा। पछिल्ला बायोएसेसको लागि रगत चुस्ने लामखुट्टेहरू तयार गर्न, ४ dpe पोथीहरूलाई झिल्ली खुवाउने प्रणाली (हेमोटेक डिस्कवरी वर्कशप, एक्रिंगटन, युके) प्रयोग गरेर डिफिब्रोटिक भेडाको रगत (हटुनालाब, ब्रो, एसई) प्रदान गरिएको थियो। त्यसपछि पूर्ण रूपमा भीड भएका पोथीहरूलाई व्यक्तिगत पिंजराहरूमा स्थानान्तरण गरियो र तल वर्णन गरिए अनुसार, वा तल वर्णन गरिएका प्रयोगहरू भन्दा ३ दिन अघि १०% सुक्रोज एड लिबिटम प्रदान गरियो। पछिल्ला पोथीहरूलाई फ्लाइट ट्यूब बायोएसेसको लागि प्रयोग गरिएको थियो र प्रयोगशालामा स्थानान्तरण गरिएको थियो, र त्यसपछि प्रयोग गर्नु अघि ४-६ घण्टाको लागि डिस्टिल्ड वाटर एड लिबिटम दिइएको थियो।
वयस्क अरब महिलाहरूमा पिसाब र युरियाको खपतको मात्रा निर्धारण गर्न खुवाउने परीक्षणहरू प्रयोग गरिएको थियो। होस्ट-खोज्ने र रगत खुवाउने महिलाहरूलाई ४८ घण्टाको लागि १% पातलो ताजा र वृद्ध गाईको मूत्र, युरियाको विभिन्न सांद्रता, र दुई नियन्त्रणहरू (१०% सुक्रोज र पानी) भएको आहार प्रदान गरिएको थियो। थप रूपमा, खानाको रंग (१ मिलीग्राम एमएल-१ जाइलिन साइनाइड एफएफ; सीएएस २६५०-१७-१; सिग्मा-एल्ड्रिच, स्टकहोम, एसई) आहारमा थपियो र २५० µl माइक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरूमा ४ × ४ म्याट्रिक्समा आपूर्ति गरियो (अक्सिजन साइन्टिफिक, युनियन सिटी, सीए, अमेरिका; चित्र १ए) किनारमा भर्नुहोस् (~३०० µl)। लामखुट्टेहरू र रङको सम्भावित प्रभावहरू बीचको प्रतिस्पर्धाबाट बच्न, १० वटा लामखुट्टेहरूलाई ठूलो पेट्री डिशमा राख्नुहोस् (१२ सेमी व्यास र ६ सेमी उचाइ; सेमाडेनी, ओस्टरमुन्डिजेन, सीएच; चित्र १ए) २५ ± २ सेमी °C र ६५ ± ५% सापेक्षमा पूर्ण अँध्यारोमा। आर्द्रता। यी प्रयोगहरू ५ देखि १० पटक दोहोर्याइएको थियो। आहारको सम्पर्कमा आएपछि, थप विश्लेषण नभएसम्म लामखुट्टेलाई -२० डिग्री सेल्सियसमा राखिएको थियो।
होस्ट र रगत चुस्ने पोथी एनोफिलिस अरेबियनस द्वारा अवशोषित गाईको पिसाब र युरिया खोज्नुहोस्। खुवाउने परीक्षण (A) मा, पोथी लामखुट्टेहरूलाई ताजा र पुरानो गाईको पिसाब, युरियाको विभिन्न सांद्रता, सुक्रोज (१०%), र आसुत पानी (H2O) समावेश भएको आहार प्रदान गरिएको थियो। होस्ट-खोजी गर्ने (B) र रगत चुस्ने (C) पोथीहरूले परीक्षण गरिएको कुनै पनि अन्य आहार भन्दा बढी सुक्रोज अवशोषित गरे। ध्यान दिनुहोस् कि होस्ट-खोजी गर्ने पोथीहरूले १६८-घण्टा गाईको पिसाब (B) भन्दा कम ७२-घण्टा गाईको पिसाब अवशोषित गरे। पिसाबको औसत कुल नाइट्रोजन सामग्री (± मानक विचलन) इनसेटमा प्रतिनिधित्व गरिएको छ। होस्ट-खोजी गर्ने (D, F) र रगत चुस्ने (E, G) पोथीहरूले खुराक-निर्भर तरिकाले युरिया लिन्छन्। फरक अक्षर नामहरू भएका औसत सास लिने मात्रा (D, E) एकअर्काबाट उल्लेखनीय रूपमा फरक थिए (टुकीको पोस्ट हक विश्लेषण प्रयोग गरेर एकतर्फी ANOVA; p < ०.०५)। त्रुटि बारहरूले औसत (BE) को मानक त्रुटि प्रतिनिधित्व गर्दछ। सीधा ड्यास गरिएको रेखाले लग-रेखीय प्रतिगमन रेखालाई प्रतिनिधित्व गर्दछ। (च, छ)
अवशोषित खाना छोड्नको लागि, लामखुट्टेहरूलाई व्यक्तिगत रूपमा १.५ मिलीलीटर माइक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरूमा राखिएको थियो जसमा २३० µl डिस्टिल्ड पानी थियो र डिस्पोजेबल पेस्टल र कर्डलेस मोटर (VWR इन्टरनेशनल, लुन्ड, SE) प्रयोग गरेर टिस्युलाई अवरोध गरिएको थियो, त्यसपछि १० मिनेटको लागि १० krpm मा सेन्ट्रीफ्यूगेशन गरिएको थियो। सुपरनेटेन्ट (२०० µl) लाई ९६-वेल माइक्रोप्लेट (सिग्मा-एल्ड्रिच) मा स्थानान्तरण गरिएको थियो र स्पेक्ट्रोफोटोमिटर-आधारित माइक्रोप्लेट रिडर (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm प्रयोग गरेर अवशोषण (λ620) निर्धारण गरिएको थियो। वैकल्पिक रूपमा, लामखुट्टेहरूलाई १ मिलीलीटर डिस्टिल्ड पानीमा पिसिएको थियो, जसमध्ये ९०० µl स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विश्लेषणको लागि क्युभेटमा स्थानान्तरण गरिएको थियो (λ ६२० nm; UV १८००, Shimadzu, Kista, SE)। आहार सेवनको मात्रा निर्धारण गर्न, ०.२ µl उत्पादन गर्न क्रमिक कमजोरी द्वारा एक मानक वक्र तयार गरिएको थियो। २.४ µl १ मिलीग्राम मिली-१ जाइलिन साइनाइड। त्यसपछि, प्रत्येक लामखुट्टेले खाएको खानाको मात्रा निर्धारण गर्न ज्ञात रङ सांद्रताको अप्टिकल घनत्व प्रयोग गरियो।
टुकीको पोस्ट हक जोडीवार तुलना (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007) पछि एकतर्फी भिन्नता विश्लेषण (ANOVA) प्रयोग गरेर भोल्युम डेटा विश्लेषण गरिएको थियो। रैखिक प्रतिगमन विश्लेषणले एकाग्रता-निर्भर युरिया सेवनको वर्णन गर्‍यो र होस्ट-खोज्ने र रगत चुस्ने लामखुट्टेहरू बीचको प्रतिक्रियाहरूको तुलना गर्‍यो (Mac को लागि GraphPad Prism v8.0.0, GraphPad Software, San Diego, CA, US)।
प्रत्येक उमेर समूहबाट लगभग २० µl पिसाबका नमूनाहरू क्रोमोसोर्ब® W/AW (१० मिलीग्राम ८०/१०० मेष, सिग्मा एल्ड्रिच) मा बाँधिएका थिए र टिन क्याप्सुल (८ मिमी × ५ मिमी) मा राखिएका थिए। निर्माताको प्रोटोकल अनुसार ताजा र पुरानो पिसाबमा नाइट्रोजन सामग्री निर्धारण गर्न क्याप्सुलहरू CHNS/O विश्लेषक (फ्ल्याश २०००, थर्मो फिशर साइन्टिफिक, वाल्थम, एमए, अमेरिका) को दहन कक्षमा घुसाइएका थिए। मानकको रूपमा प्रयोग गरिएको ज्ञात युरिया सांद्रताको आधारमा कुल नाइट्रोजन (g N l-1) मापन गरिएको थियो।
होस्ट-खोज्ने र रगत चुस्ने महिला बाँच्ने क्षमतामा आहारको प्रभावको मूल्याङ्कन गर्न, लामखुट्टेहरूलाई व्यक्तिगत रूपमा ठूला पेट्री भाँडाहरूमा (१२ सेन्टिमिटर व्यास र ६ सेन्टिमिटर उचाइ; सेमाडेनी) राखिएको थियो जसमा ढक्कनमा जालले ढाकिएको प्वाल (३ सेन्टिमिटर व्यास) भेन्टिलेसन र खाना आपूर्तिको लागि राखिएको थियो। आहारहरू ४ dpe पछि सिधै प्रदान गरिएको थियो र १% पातलो ताजा र पुरानो गाईको मूत्र, युरियाको चार सांद्रता, र दुई नियन्त्रणहरू, १०% सुक्रोज र पानी समावेश गरिएको थियो। प्रत्येक आहारलाई डेन्टल ट्याम्पोन (DAB डेन्टल AB, Upplands Väsby, SE) मा पाइपेट गरिएको थियो जुन ५ मिली सिरिन्ज (थर्मो फिशर साइन्टिफिक, गोथेनबर्ग, SE) मा घुसाइएको थियो, प्लन्जर हटाइएको थियो, र पेट्री डिशको माथि राखिएको थियो (चित्र १)।१A)। हरेक दिन आफ्नो आहार परिवर्तन गर्नुहोस्। माथि वर्णन गरिए अनुसार प्रयोगशाला कायम राख्नुहोस्। बाँचेका लामखुट्टेहरू दिनमा दुई पटक गणना गरिन्थ्यो, जबकि अन्तिम लामखुट्टे मर्दासम्म मरेका लामखुट्टेहरू त्यागिन्थ्यो (प्रति उपचार n = ४०)। विभिन्न आहारहरूमा खुवाइएका लामखुट्टेको अस्तित्वको तथ्याङ्कीय विश्लेषण प्रयोग गरेर गरिएको थियो। आहारहरू बीच बाँच्ने वितरण तुलना तुलना गर्न कपलान-मेयर बाँच्ने वक्र र लग-रैंक परीक्षणहरू (IBM SPSS तथ्याङ्क २४.०.०.०)।
Attisano et al.[17] मा आधारित एक अनुकूलित लामखुट्टे उडाउने मिल, अगाडि र पछाडि प्यानल बिना ५ मिमी बाक्लो स्पष्ट एक्रिलिक प्यानल (१० सेमी चौडा x १० सेमी लामो x १० सेमी उचाइ) बाट बनेको (चित्र ३: माथि)। ग्यास क्रोमेटोग्राफी स्तम्भ (०.२५ मिमी आईडी; ७.५ सेमी एल) बाट बनेको ठाडो ट्यूब भएको पिभोट एसेम्बली जसको छेउ ९ सेमी टाढा नियोडिमियम चुम्बकको जोडी बीच झुन्डिएको कीराको सुईमा टाँसिएको थियो। एउटै सामग्री (६.५ सेमी एल) बाट बनेको तेर्सो ट्यूबले ठाडो ट्यूबलाई विभाजित गरी टेथर्ड हात र प्रकाश-बाधा संकेतको रूपमा एल्युमिनियम पन्नीको सानो टुक्रा बोकेको हात बनायो।
२४ घण्टा भोकाएका पोथीहरूलाई नियन्त्रण गर्नुभन्दा ३० मिनेट अगाडि माथिको आहार दिइयो। पूर्ण रूपमा खुवाइएका पोथी लामखुट्टेहरूलाई त्यसपछि २-३ मिनेटको लागि बरफमा व्यक्तिगत रूपमा बेहोस बनाइयो र मोमले कीराको पिनमा जोडियो (जोएल स्वेन्सन्स भ्याक्सफाब्रिक एबी, मुन्का लजुङबी, एसई) र त्यसपछि तेर्सो ट्यूबहरूको हातमा बाँधियो। फ्लाइङ मिल। प्रति उडान क्रान्तिहरू अनुकूलित-निर्मित डेटा लगरद्वारा रेकर्ड गरियो, त्यसपछि PC-Lab 2000™ सफ्टवेयर (v4.01; Velleman, Gavere, BE) प्रयोग गरेर भण्डारण र प्रदर्शन गरियो। उडान मिललाई जलवायु-नियमित कोठामा राखिएको थियो (१२ घण्टा:१२ घण्टा, प्रकाश: अँध्यारो, २५ ± २ °C, ६५ ± ५% RH)।
उडान गतिविधिको ढाँचा कल्पना गर्न, २४-घण्टा अवधिमा प्रति घण्टा उडान गरिएको कुल दूरी (m) र लगातार उडान गतिविधिहरूको कुल संख्या गणना गरिएको थियो। यसको अतिरिक्त, व्यक्तिगत महिलाहरूले उडाएको औसत दूरीहरू उपचारहरूमा तुलना गरिएको थियो र एक-तर्फी ANOVA र टुकीको पोस्ट हक विश्लेषण (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो, जहाँ औसत दूरीलाई निर्भर चर मानिएको थियो, जबकि उपचार एक स्वतन्त्र कारक हो। थप रूपमा, राउन्डहरूको औसत संख्या १०-मिनेट वृद्धिमा गणना गरिन्छ।
An.arabiensis को प्रजनन कार्यसम्पादनमा आहारको प्रभावको मूल्याङ्कन गर्न, रगत सङ्कलन पछि छ पोथी (४ dpe) लाई सिधै बगडोरम पिंजराहरूमा (३० सेमी × ३० सेमी × ३० सेमी) स्थानान्तरण गरिएको थियो र त्यसपछि माथि वर्णन गरिए अनुसार ४८ घण्टाको लागि प्रयोगात्मक आहार प्रदान गरिएको थियो। त्यसपछि आहारहरू हटाइयो र २० मिलीलीटर डिस्टिल्ड पानीले भरिएको स्प्यानिङ कपहरू (३० मिलीलीटर; नोलाटो हर्टिला) तेस्रो दिनमा ४८ घण्टाको लागि प्रदान गरियो, प्रत्येक २४ घण्टामा परिवर्तन गर्दै। प्रत्येक आहार पद्धति २०-५० पटक दोहोर्याउनुहोस्। प्रत्येक प्रयोगात्मक पिंजराको लागि अण्डाहरू गणना र रेकर्ड गरियो। डायलक्स-२० माइक्रोस्कोप (DM1000; अर्न्स्ट लेइट्ज वेट्जलर, वेट्जलर, DE) लेइका क्यामेरा (DFC) ३२० R२ ले सुसज्जित प्रयोग गरेर व्यक्तिगत अण्डाहरूको औसत आकार र लम्बाइ भिन्नता (n ≥ २०० प्रति आहार) मूल्याङ्कन गर्न अण्डाहरूको उप-नमूनाहरू प्रयोग गरियो; लाइका माइक्रोसिस्टम्स लिमिटेड, DE)। बाँकी अण्डाहरूलाई मानक पालनपोषण अवस्था अन्तर्गत २४ घण्टाको लागि जलवायु-नियन्त्रित कोठामा राखिएको थियो, र माथि वर्णन गरिए अनुसार हालै देखा परेको पहिलो इन्स्टार लार्भा (n ≥ २०० प्रति आहार) को उपनमूना मापन गरिएको थियो। अण्डाको संख्या र अण्डा र लार्भाको आकार उपचार र एकतर्फी ANOVA र टुकीको पोस्ट हक विश्लेषण (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) प्रयोग बीच तुलना गरिएको थियो।
आर्सी जातिका जेबु गाईवस्तुबाट सङ्कलन गरिएका नमूनाहरूबाट ताजा (१ घण्टा पछिको नमूना), २४ घण्टा, ७२ घण्टा र १६८ घण्टा पुरानो पिसाबबाट हेडस्पेस वाष्पशील पदार्थहरू सङ्कलन गरिएको थियो। सुविधाको लागि, गाईहरू अझै गोठमा हुँदा बिहान सबेरै पिसाबको नमूनाहरू सङ्कलन गरिएको थियो। १० जना व्यक्तिहरूबाट पिसाबको नमूनाहरू सङ्कलन गरिएको थियो र प्रत्येक नमूनाको १००-२०० मिलीलीटर व्यक्तिगत पोलिमाइड बेकिंग झोलाहरू (टपपिट्स कोफ्रेस्को, फ्रिस्चहाल्टेप्रोडुक्टे जीएमबीएच एण्ड कम्पनी, मिन्डेन, डीई) मा ३ लिटर पोलिमाइडमा भिनिल क्लोराइड प्लास्टिक ड्रमहरूमा स्थानान्तरण गरिएको थियो। प्रत्येक गोवंशीय पिसाबको नमूनाबाट हेडस्पेस वाष्पशील पदार्थहरू सिधै (ताजा) वा परिपक्वता पछि कोठाको तापक्रममा २४ घण्टा, ७२ घण्टा र १६८ घण्टाको लागि सङ्कलन गरिएको थियो, अर्थात् प्रत्येक पिसाबको नमूना प्रत्येक उमेर समूहको प्रतिनिधित्व गर्ने थियो।
हेडस्पेस वाष्पशील पदार्थ सङ्कलनको लागि, डायाफ्राम भ्याकुम पम्प (KNF न्युबर्गर, फ्रेइबर्ग, DE) प्रयोग गरेर पोलिमाइड झोलाबाट सक्रिय कार्बन-फिल्टर गरिएको ग्यास स्ट्रिम (१०० मिलीलीटर न्यूनतम-१) लाई २.५ घण्टाको लागि सोखना स्तम्भमा परिसंचरण गर्न बन्द-लूप प्रणाली प्रयोग गरिएको थियो। नियन्त्रणको रूपमा, खाली पोलिमाइड झोलाबाट हेडस्पेस सङ्कलन गरिएको थियो। सोखना स्तम्भ टेफ्लोन ट्युबिङ (५.५ सेमी x ३ मिमी आईडी) बाट बनेको थियो जसमा ३५ मिलीग्राम पोरापाक क्यू (५०/८० मेष; वाटर्स एसोसिएट्स, मिलफोर्ड, एमए, अमेरिका) गिलास ऊन प्लगहरू बीच थियो। प्रयोग गर्नु अघि, स्तम्भलाई १ मिलीलीटर रिडिस्टिल्ड एन-हेक्सेन (मर्क, डार्मस्ट्याड, DE) र १ मिलीलीटर पेन्टेन (९९.०% शुद्ध विलायक GC ग्रेड, सिग्मा एल्ड्रिच) ले फ्लश गरिएको थियो। सोखना वाष्पशील पदार्थहरूलाई ४०० μl पेन्टेनले एल्युट गरिएको थियो। हेडस्पेस सङ्कलनहरू जम्मा गरियो र त्यसपछि थप विश्लेषणको लागि प्रयोग नगरेसम्म -२०°C मा भण्डारण गरियो।
होस्ट-खोज्ने र रगत खाने An. को व्यवहारिक प्रतिक्रियाहरू। ताजा, २४-घण्टा, ७२-घण्टा, र १६८-घण्टा-वृद्ध पिसाबबाट सङ्कलन गरिएको हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरू सिधा गिलास ट्यूब ओल्फ्याक्टोमिटर [१८] प्रयोग गरेर अरबिडोप्सिस लामखुट्टेबाट वाष्पशील अर्कहरूको लागि विश्लेषण गरिएको थियो। प्रयोगहरू ZT १३-१५ को समयमा गरिएको थियो, जुन An को घर-खोज्ने गतिविधिको शिखर अवधि थियो।Arab [१९]। एउटा गिलास ट्यूब ओल्फ्याक्टोमिटर (८० सेमी × ९.५ सेमी id) माथिबाट ३ ± १ lx रातो बत्तीले उज्यालो पारिएको थियो। चारकोल फिल्टर गरिएको र आर्द्रतायुक्त हावा प्रवाह (२५ ± २ °C, ६५ ± २% सापेक्षिक आर्द्रता) ले ३० सेमी s-१ मा बायोसे पार गर्यो। स्टेनलेस स्टील जाल स्क्रिनहरूको श्रृंखलाबाट हावा पारित हुन्छ, जसले ल्यामिनार प्रवाह र एक समान प्लम संरचना सिर्जना गर्दछ।दन्त ट्याम्पोन डिस्पेंसर (४ सेमी × १ सेमी; L:D; DAB डेन्टल AB), ५ सेमी कोइलबाट निलम्बित ओल्फ्याक्टोमिटरको हावातिरको छेउ, प्रत्येक ५ मिनेटमा उत्तेजक परिवर्तनहरू सहित। विश्लेषणको लागि, प्रत्येक हेडस्पेस एक्स्ट्र्याक्टको १० μl, १:१० मा पातलो, उत्तेजकको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। नियन्त्रणको रूपमा समान मात्रामा पेन्टेन प्रयोग गरिएको थियो। प्रयोग सुरु हुनुभन्दा २-३ घण्टा अघि व्यक्तिगत होस्ट-खोज्ने वा रगत चुस्ने लामखुट्टेहरूलाई व्यक्तिगत रिलीज पिंजराहरूमा राखिएको थियो। रिलीज पिंजरा ओल्फ्याक्टोमिटरको डाउनवाइन्ड साइडमा राखिएको थियो, र लामखुट्टेहरूलाई १ मिनेटको लागि अनुकूल हुन अनुमति दिइएको थियो, र त्यसपछि पिंजराको पुतली भल्भ रिलीजको लागि खोलिएको थियो। उपचार वा नियन्त्रणप्रति आकर्षणलाई रिलीज भएको ५ मिनेट भित्र स्रोतको सम्पर्कमा आएका लामखुट्टेको अनुपातको रूपमा विश्लेषण गरिएको थियो। प्रत्येक हेडस्पेस वाष्पशील अर्क र नियन्त्रण कम्तिमा ३० पटक दोहोर्याइएको थियो, र कुनै पनि एक दिनको प्रभावबाट बच्न, प्रत्येक प्रयोगात्मक दिनमा समान संख्यामा उपचार र नियन्त्रणहरू परीक्षण गरिएको थियो। होस्ट र रगत खुवाउनेबाट प्रतिक्रियाहरू खोज्नुहोस्। उत्तर: अरबी बनाम हेडस्पेस सेटहरू नाममात्र रसद प्रतिगमन प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो र त्यसपछि विषम अनुपातहरूको लागि जोडीवार तुलना गरिएको थियो। (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.)।
एनको स्पोनिङ प्रतिक्रिया। ताजा र वृद्ध गाईको मूत्रबाट हेडस्पेस अर्कहरू बगडोर्म पिंजराहरूमा विश्लेषण गरिएको थियो (३० सेमी × ३० सेमी × ३० सेमी; मेगाभ्यू साइन्स)। २० एमएल डिस्टिल्ड पानीले भरिएको प्लास्टिक कप (३० एमएल; नोलाटो हर्टिला) ले स्पोनिङ सब्सट्रेट प्रदान गर्‍यो र २४ सेमीको दूरीमा पिंजराको विपरीत कुनामा राखिएको थियो। उपचार कपहरू प्रत्येक हेडस्पेस एक्स्ट्र्याक्टको १० μl सँग १:१० को पातलोपनमा समायोजन गरिएको थियो। नियन्त्रण कप समायोजन गर्न समान मात्रामा पेन्टेन प्रयोग गरिएको थियो। स्थिति प्रभावहरूको नियन्त्रण गर्न प्रत्येक प्रयोग बीच उपचार र नियन्त्रण कपहरू आदानप्रदान गरिएको थियो। दस रगत खुवाउने महिलाहरूलाई ZT 9-11 मा प्रयोगात्मक पिंजराहरूमा छोडियो र कपहरूमा अण्डाहरू २४ घण्टा पछि गणना गरियो। स्पोनिङ सूचकांक गणना गर्ने सूत्र यो हो: (उपचार कपमा राखिएका अण्डाहरूको संख्या - नियन्त्रण कपमा राखिएका अण्डाहरूको संख्या)/(राखिएका अण्डाहरूको कुल संख्या)। प्रत्येक उपचार ८ पटक दोहोर्याइएको थियो।
महिला An.arabiensis को ग्यास क्रोमेटोग्राफिक र इलेक्ट्रोन एन्टेना ढाँचा पत्ता लगाउने (GC-EAD) विश्लेषण पहिले वर्णन गरिए अनुसार गरिएको थियो [20]। संक्षेपमा, ताजा हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरू HP-5 स्तम्भ (30 m × 0.25 mm id, 0.25 μm फिल्म मोटाई, Agilent Technologies) ले सुसज्जित Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) प्रयोग गरेर अलग गरिएको थियो। र पिसाबको उमेर बढ्दै गयो। हाइड्रोजनलाई ४५ सेमी सेकेन्ड-१ को औसत रेखीय प्रवाह दरको साथ मोबाइल चरणको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। प्रत्येक नमूना (२ μl) २२५ डिग्री सेल्सियसको इनलेट तापमानको साथ स्प्लिटलेस मोडमा ३० सेकेन्डको लागि इन्जेक्ट गरिएको थियो। GC ओभनको तापक्रम ३५ डिग्री सेल्सियस (३ मिनेट होल्ड) बाट ३०० डिग्री सेल्सियस (१० मिनेट होल्ड) मा १० डिग्री सेल्सियस न्यूनतम-१ मा प्रोग्राम गरिएको थियो। GC इफ्लुएन्ट स्प्लिटरमा, ४ psi नाइट्रोजन थपियो र १:१ मा Gerstel 3D/2 कम डेड भोल्युम क्रस (Gerstel, Mülheim, DE) मा ज्वाला आयनीकरण डिटेक्टर र EAD बीच विभाजित गरियो। EAD को लागि GC इफ्लुएन्ट केशिका Gerstel ODP-2 स्थानान्तरण लाइन मार्फत पार गरिएको थियो, जसले GC ओभनको तापक्रम प्लस ५ डिग्री सेल्सियस ट्र्याक गर्दछ, गिलास ट्यूब (१० सेमी × ८ मिमी) मा, जहाँ यसलाई कार्बन-फिल्टर गरिएको, आर्द्रतायुक्त हावा (१.५ लिटर न्यूनतम-१) सँग मिसाइएको थियो। एन्टेना ट्यूबको आउटलेटबाट ०.५ सेन्टिमिटर टाढा राखिएको थियो। प्रत्येक व्यक्तिगत लामखुट्टेले एउटा प्रतिकृति बनायो, र होस्ट खोज्ने लामखुट्टेको लागि, प्रत्येक उमेरको पिसाब नमूनाहरूमा कम्तिमा तीन प्रतिकृतिहरू प्रदर्शन गरियो।
७० eV मा इलेक्ट्रोन प्रभाव आयनीकरण मोडमा सञ्चालन हुने GC-EAD विश्लेषणमा एन्टेनल प्रतिक्रियाहरू प्राप्त गर्न संयुक्त GC र मास स्पेक्ट्रोमिटर (GC-MS; 6890 GC र 5975 MS; Agilent Technologies) प्रयोग गरेर ताजा र वृद्ध गोवंशीय मूत्रको हेडस्पेस संग्रहमा जैविक सक्रिय यौगिकहरूको पहिचान। GC HP-5MS UI-लेपित फ्युज्ड सिलिका केशिका स्तम्भ (60 m × 0.25 mm भित्री व्यास, 0.25 μm फिल्म मोटाई) ले सुसज्जित थियो जसलाई हेलियमलाई मोबाइल चरणको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो जसको औसत रेखीय प्रवाह दर ३५ सेमी s-१ थियो। GC-EAD विश्लेषणको लागि जस्तै इन्जेक्टर सेटिङहरू र ओभन तापक्रम प्रयोग गरेर २ μl नमूना इन्जेक्ट गरिएको थियो। कस्टम लाइब्रेरी र NIST14 लाइब्रेरी (Agilent) को तुलनामा तिनीहरूको अवधारण समय (Kovát सूचकांक) र मास स्पेक्ट्राको आधारमा यौगिकहरू पहिचान गरिएको थियो। पहिचान गरिएका यौगिकहरू प्रामाणिक मापदण्डहरू (अतिरिक्त फाइल १: तालिका S2) इंजेक्ट गरेर पुष्टि गरिएको थियो। परिमाणीकरणको लागि, हेप्टाइल एसीटेट (१० एनजी, ९९.८% रासायनिक शुद्धता, एल्ड्रिच) बाह्य मानकको रूपमा इन्जेक्सन गरिएको थियो।
माथिको जस्तै ओल्फ्याक्टोमिटर र प्रोटोकल प्रयोग गरेर ताजा र पुरानो पिसाबमा पहिचान गरिएको जैविक सक्रिय यौगिकहरू मिलेर बनेको सिंथेटिक गन्ध मिश्रणको प्रभावकारिताको मूल्याङ्कन गर्दै, होस्ट-खोज्ने र रगत चुस्ने Ans.arabiensis लाई आकर्षित गर्न। सिंथेटिक मिश्रणहरूले ताजा, २४-घण्टा, ४८-घण्टा, ७२-घण्टा, र १६८-घण्टा पुरानो पिसाबको मिश्रित हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरूमा यौगिकहरूको संरचना र अनुपातको नक्कल गरे (चित्र ५D-G; अतिरिक्त फाइल १: तालिका S2)। विश्लेषणको लागि, होस्ट र रगत चुस्ने लामखुट्टेप्रति आकर्षणको मूल्याङ्कन गर्न लगभग १४०-२४०० ng h-१ सम्मको समग्र रिलीज दरको साथ पूर्ण रूपमा सिंथेटिक मिश्रणको १:१०० पातलोपनको १० μl प्रयोग गर्नुहोस्। त्यसपछि, परीक्षण पूर्ण मिश्रणहरूमा गरिन्छ, जसमा पूर्ण मिश्रणको एकल यौगिकहरूको घटाउने मिश्रणहरू हटाइन्छ। होस्ट र रगत-खुवाउने Ans.अरब बनाम सिंथेटिक र घटाउने मिश्रणहरू नाममात्र रसद प्रतिगमन प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो। विषम अनुपातहरूको लागि जोडीवार तुलना (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.)।
मलेरिया लामखुट्टेको लागि गाईको मूत्रले आश्रयस्थलको संकेतको रूपमा काम गर्न सक्छ कि सक्दैन भनेर मूल्याङ्कन गर्न, माथि वर्णन गरिए अनुसार सङ्कलन गरिएको ताजा र वृद्ध गाईको मूत्र र पानीलाई जालीदार ३ लिटर बाल्टिन (१०० मिली) मा राखियो र होस्ट ब्याट ट्र्यापमा राखियो। (BG-HDT संस्करण; बायोजेन्ट्स, रेजेन्सबर्ग, DE)। दसवटा पासोहरू ५० मिटरको दूरीमा, गाउँ समुदायबाट ४०० मिटर टाढा (सिले, इथियोपिया, ५°५३´२४´उत्तर, ३७°२९´२४´पूर्व) र कुनै पनि गाईवस्तु स्थायी प्रजनन स्थल र गाउँहरूमा राखियो। होस्टको उपस्थिति अनुकरण गर्न पाँचवटा पासोहरू तताइएको थियो, जबकि पाँचवटा पासोहरू नतातो छोडिएको थियो। प्रत्येक उपचार स्थानलाई कुल पाँच रातको लागि रातभर घुमाइन्छ। विभिन्न उमेरका पिसाबले प्रलोभनमा पारिएका पासोहरूमा कैद गरिएका लामखुट्टेको संख्यालाई बीटा द्विपद वितरण (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) सँग लजिस्टिक रिग्रेसन प्रयोग गरेर तुलना गरिएको थियो।
इथियोपियाको ओरोमिया क्षेत्रको माकी शहर नजिकैको औलो-स्थानीय गाउँमा (८° ११′ ०८″ उत्तर, ३८° ८१′ ७०″ पूर्व; चित्र ६क)। यो अध्ययन अगस्टको मध्य र सेप्टेम्बरको मध्य बीचमा वार्षिक इनडोर अवशिष्ट स्प्रेइङ, लामो वर्षायामसँगै गरिएको थियो। अध्ययनको लागि गाउँको बाहिरी भागमा अवस्थित पाँच जोडी घरहरू (२०-५० मिटरको दूरीमा) छनोट गरिएको थियो (चित्र ६क)। घरहरू छनौट गर्न प्रयोग गरिने मापदण्डहरू यस प्रकार थिए: घरमा कुनै जनावरलाई अनुमति छैन, घरभित्र खाना पकाउन (दाउरा वा कोइला तान्न) अनुमति छैन (कम्तिमा परीक्षण अवधिमा), र अधिकतम दुई बासिन्दा भएका घरहरू, कीटनाशक औषधिमा सुतिरहेका। उपचार गरिएको लामखुट्टेको झुल अन्तर्गत। हेलसिंकीको विश्व चिकित्सा संघ घोषणापत्रद्वारा स्थापित दिशानिर्देशहरू अनुसार, आदिस अबाबा विश्वविद्यालयको प्राकृतिक विज्ञान संकाय (CNS-IRB) को संस्थागत अनुसन्धान नैतिकता समीक्षा बोर्ड (IRB/022/2016) द्वारा नैतिक स्वीकृति प्रदान गरिएको छ। स्वास्थ्य विस्तार कर्मचारीहरूको सहयोगमा प्रत्येक घरमूलीबाट सहमति प्राप्त गरिएको थियो। सम्पूर्ण प्रक्रियालाई जिल्ला र वार्ड ('केबेले') स्तरमा स्थानीय प्रशासनहरूले समर्थन गर्दछ। प्रयोगात्मक डिजाइनले २ × २ ल्याटिन वर्ग डिजाइनलाई पछ्यायो, जसमा पहिलो रात जोडी घरहरूमा सिंथेटिक मिश्रण र नियन्त्रणहरू तोकिएको थियो र अर्को प्रयोगात्मक रातमा घरहरू बीच साटासाट गरिएको थियो। यो प्रक्रिया दस पटक दोहोर्याइएको थियो। थप रूपमा, चयन गरिएका घरहरूमा लामखुट्टेको गतिविधि अनुमान गर्न, CDC पासोहरू दिनको एकै समयमा फिल्ड ट्रायलको सुरु, मध्य र अन्त्यमा लगातार पाँच रात चलाउन सेट गरिएको थियो।
छ वटा बायोएक्टिभ यौगिकहरू भएको सिंथेटिक मिश्रणलाई हेप्टेन (९७.०% विलायक GC ग्रेड, सिग्मा एल्ड्रिच) मा घोलिएको थियो र कपास विक डिस्पेंसर [२०] प्रयोग गरेर १४० एनजी एच-१ मा छोडिएको थियो। विक डिस्पेंसरले १२ घण्टाको प्रयोगभरि सबै यौगिकहरूलाई स्थिर अनुपातमा छोड्न अनुमति दियो। हेप्टेनलाई नियन्त्रणको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। रोग नियन्त्रण र रोकथाम केन्द्र (सीडीसी) प्रकाश जाल (जोन डब्ल्यू. हक कम्पनी, गेन्सभिल, FL, अमेरिका; चित्र ६A) को प्रवेश बिन्दुको छेउमा शीशीलाई निलम्बन गरिएको थियो। पासोहरू ओछ्यानको खुट्टा नजिकै जमिनबाट ०.८ - १ मिटर माथि झुण्ड्याइएको थियो, र एक स्वयंसेवक उपचार नगरिएको लामखुट्टेको जालमुनि सुते र १८:०० र ०६:३० को बीचमा सञ्चालन गरिएको थियो। लिङ्ग र शारीरिक स्थिति (खुवाइएको, खुवाइएको, अर्ध-गर्भवती, र गर्भवती [२१] द्वारा कब्जा गरिएका लामखुट्टेहरू पछि पोलिमरेज चेन रियाक्सन (PCR) विश्लेषण प्रयोग गरेर A. gambiae sl को रूपमा रूपात्मक रूपमा पहिचान गरिएका प्रजातिहरू पहिचान गर्न स्क्रिन गरिएको थियो। जटिलका सदस्यहरू [23]। क्षेत्र अध्ययनमा, जोडी घरहरूको पासो ट्र्यापिङलाई नाममात्र रसद फिट मोडेल प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो, जहाँ आकर्षण निर्भर चर थियो र उपचार (सिंथेटिक मिश्रण बनाम नियन्त्रण) निश्चित प्रभाव थियो (JMP® 14.0. 0. SAS इन्स्टिच्युट इंक।)। यहाँ, हामी सम्भावना अनुपात परीक्षणबाट χ2 र p-मानहरू रिपोर्ट गर्छौं।
यो सुरक्षित छ कि छैन भनेर मूल्याङ्कन गर्नुहोस्। अरबिएन्सिसले ४ दिन पछि (dpe) होस्ट-खोज्ने र रगत-खोज्ने महिला खुवाउने परीक्षणहरू (चित्र १A) को लागि प्रशासनको ४८ घण्टा भित्र प्रत्यक्ष खुवाएर पिसाब, यसको मुख्य नाइट्रोजन स्रोत, युरिया प्राप्त गर्न सक्षम भयो। होस्ट-खोज्ने र रगत-चूसने महिला दुवैले अन्य कुनै पनि आहार वा पानी भन्दा उल्लेखनीय रूपमा बढी सुक्रोज अवशोषित गरे (F(५,४२६) = २०.१५, p < ०.०००१ र F(५,२९९) = ५६.००, p < ०.०००१, क्रमशः; चित्र १B,C)। यसबाहेक, होस्ट-खोज्ने महिलाहरूले १६८ घण्टामा पिसाबको तुलनामा ७२ घण्टामा पिसाबमा कम खाए (चित्र १B)। युरिया भएको आहार प्रस्ताव गर्दा, होस्ट-खोज्ने महिलाहरूले अन्य सबै सांद्रता र पानीको तुलनामा २.६९ mM मा युरियाको उल्लेखनीय रूपमा बढी मात्रामा अवशोषित गरे, जबकि १०% सुक्रोजबाट अलग गर्न सकिँदैन। (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; चित्र 1D)। यो रगत पिउने महिलाहरूको प्रतिक्रियाको विपरीत थियो, जसले सामान्यतया पानी भन्दा उल्लेखनीय रूपमा बढी युरिया युक्त आहारहरू अवशोषित गर्थे, यद्यपि 10% भन्दा कम सुक्रोज (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; चित्र 1)।1E)। यसबाहेक, दुई शारीरिक अवस्थाहरू बीच तुलना गर्दा, फ्लेबोटोमाइज्ड महिलाहरूले सबैभन्दा कम सांद्रतामा होस्ट-खोज्ने महिलाहरू भन्दा बढी युरिया अवशोषित गरे, र यी महिलाहरूले उच्च सांद्रतामा समान मात्रामा युरिया अवशोषित गरे (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; चित्र 1F, G)। युरिया युक्त आहारबाट सेवन गर्दा इष्टतम मानहरू देखा परे (चित्र 1D, E), दुवै शारीरिक अवस्थाहरूमा महिलाहरूले लग-रैखिक फेसनमा युरिया सांद्रताको सम्पूर्ण दायरामा अवशोषित युरियाको मात्रा परिमार्जन गर्न सक्षम थिए (चित्र 1F, G)। )। त्यसैगरी, लामखुट्टेले पिसाबमा रहेको नाइट्रोजनको मात्रा अवशोषित मात्रामा प्रतिबिम्बित हुने भएकोले पिसाबको मात्रालाई नियमन गरेर आफ्नो नाइट्रोजन अवशोषणलाई नियन्त्रण गर्ने देखिन्छ (चित्र १B, C र B इन्सेटहरू)।
पिसाब र युरियाले होस्ट-खोज्ने र रगत चुस्ने लामखुट्टेको बाँच्ने क्षमतामा पार्ने प्रभावको मूल्याङ्कन गर्न, महिलाहरूलाई चारै उमेरका (ताजा, २४ घण्टा, ७२ घण्टा, र १६८ घण्टा जम्मा भएपछि) पिसाब खुवाइयो र युरिया सांद्रताको दायरा, साथै आसुत पानी र १०% सुक्रोज नियन्त्रणको रूपमा प्रयोग गरियो (चित्र २A)। यो बाँच्ने विश्लेषणले देखाएको छ कि आहारले होस्ट-खोज्ने महिलाहरूमा समग्र बाँच्ने क्षमतामा महत्त्वपूर्ण प्रभाव पारेको छ (पिसाब: χ2 = १०८.५, df = ५, p < ०.०००१; युरिया: χ२ = १२२.८, df = ५, p < ०.०००१; चित्र २B, C) र रगत चुस्ने महिलाहरू (पिसाब: χ२ = ९३.०, df = ५, p < ०.०००१; युरिया: χ२ = १३७.९, df = ५, p < ०.०००१; चित्र २D,E)। सबै प्रयोगहरूमा, पिसाब, युरिया र पानीको आहार खुवाउने महिलाहरूले सुक्रोज आहार खुवाउने महिलाहरूको तुलनामा बाँच्ने दर उल्लेखनीय रूपमा कम थियो (चित्र २B-E)। ताजा र बासी पिसाब खुवाउने महिलाहरूले फरक बाँच्ने दरहरू प्रदर्शन गरे, ७२-घण्टा बासी पिसाब (p = ०.०१६) खुवाउनेहरूमा बाँच्ने सम्भावना सबैभन्दा कम थियो (चित्र २B)। यसबाहेक, १३५ मिलिमिटर युरिया खुवाउने महिलाहरू पानी नियन्त्रणहरू (p < ०.०४) भन्दा लामो समयसम्म बाँचे (चित्र २C)। पानीको तुलनामा, ताजा पिसाब र २४-घण्टा पिसाब खुवाउने महिलाहरू लामो समयसम्म बाँचे (p = ०.००१ र p = ०.०१२, क्रमशः; चित्र २D), जबकि ७२-घण्टा पिसाब खुवाउने महिलाहरू खुवाउने महिलाहरू छोटो ताजा पिसाब र २४-घण्टा पुरानो पिसाब (p < ०.०००१ र p = ०.०१३, क्रमशः; चित्र २D)। खुवाउँदा १३५ मिलिमिटर युरिया, रगत खुवाउने महिलाहरू युरिया र पानीको अन्य सबै सांद्रताहरू भन्दा लामो समयसम्म बाँचे (p < ०.०१३; चित्र २E)।
गाईको मूत्र र युरिया खाने आश्रयदाता र रगत चुस्ने पोथी एनोफिलिस अराबिनिसको बाँच्ने क्षमता। जैव परीक्षण (A) मा, पोथी लामखुट्टेलाई ताजा र पुरानो गाईको मूत्र, युरियाको विभिन्न सांद्रता, सुक्रोज (१०%) र आसुत पानी (H2O) मिलेर बनेको आहार प्रदान गरिएको थियो। पिसाब (B, D) र युरिया (C, E) मा खुवाइएका सबै पोथीहरू र नियन्त्रण, सुक्रोज र पानी मर्दासम्म प्रत्येक १२ घण्टामा होस्ट-खोज्ने (B, C) र रगत चुस्ने (D, E) लामखुट्टेको बाँच्ने क्षमता रेकर्ड गरिएको थियो।
२४ घण्टाको अवधिमा फ्लाइट मिल परीक्षणमा निर्धारण गरिएको कुल दूरी र राउन्डको संख्या होस्ट-खोज्ने र रगत चुस्ने लामखुट्टेहरू बीच फरक थियो, जसले समग्रमा कम उडान गतिविधि देखायो (चित्र ३)। ताजा र पुरानो पिसाब वा सुक्रोज र पानी प्रदान गर्ने होस्ट-खोज्ने लामखुट्टेहरूले फरक उडान ढाँचाहरू देखाए (चित्र ३), ताजा पिसाबमा खुवाउने पोथीहरू बिहानको समयमा बढी सक्रिय थिए, जबकि २४ र १६८ घण्टा उमेरका पिसाबमा खुवाउने लामखुट्टेहरूले फरक उडान ढाँचाहरू प्रदर्शन गरे र मुख्यतया दैनिक थिए। सुक्रोज वा ७२ घण्टा पिसाब प्रदान गर्ने पोथी लामखुट्टेहरूले २४ घण्टाको अवधिभर गतिविधि देखाए, जबकि पानी प्रदान गर्ने पोथीहरू मध्य-अवधिमा बढी सक्रिय थिए। सुक्रोजमा खुवाइएका लामखुट्टेहरूले राति अबेर र बिहान सबेरै गतिविधिको उच्चतम स्तर प्रदर्शन गरे, जबकि ७२ घण्टा उमेरको पिसाब सेवन गर्नेहरूले २४ घण्टामा गतिविधिमा स्थिर गिरावट अनुभव गरे (चित्र ३)।
शिकारी खोज्ने रगत चुस्ने पोथी एनोफिलिस अराबिनिसले गाईको मूत्र र युरिया खाने गरेको उडान प्रदर्शन। उडान मिल परीक्षणमा, ताजा र वृद्ध गाईको मूत्र, युरिया, सुक्रोज (१०%), र आसुत पानी (H2O) को विभिन्न सांद्रतामा खुवाइएका पोथी लामखुट्टेहरूलाई तेर्सो, स्वतन्त्र रूपमा घुम्ने हातहरू (माथि) मा बाँधिएको थियो। होस्ट-खोजी गर्ने (बायाँ) र रगत चुस्ने (दायाँ) पोथीहरूको लागि, २४-घण्टा अवधिमा प्रत्येक आहारको लागि प्रति घण्टा कुल दूरी र उडानहरूको संख्या रेकर्ड गरिएको थियो (गाढा: खैरो; हल्का: सेतो)। सर्काडियन गतिविधि ग्राफको दायाँतिर औसत दूरी र बाउटहरूको औसत संख्या देखाइएको छ। त्रुटि बारहरूले औसतको मानक त्रुटि प्रतिनिधित्व गर्दछ। तथ्याङ्कीय विश्लेषण पाठ हेर्नुहोस्
सामान्यतया, होस्ट खोज्ने महिलाहरूको समग्र उडान गतिविधि २४ घण्टाको अवधिमा उडान दूरीको जस्तै ढाँचा पछ्याउँछ। औसत उडान दूरी सेवन गरिएको आहार (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001) द्वारा उल्लेखनीय रूपमा प्रभावित भएको थियो, र होस्ट खोज्ने महिलाहरूले ७२ घण्टा पिसाब सेवन गरेको अन्य सबै आहारहरू (p < 0.0001) को तुलनामा उल्लेखनीय रूपमा लामो दूरी उडान गरेको थियो, र सुक्रोज-खुवाइएको लामखुट्टेहरू ताजा (p = 0.022) र २४ घण्टा-उमेरको पिसाब (p = 0.022) खुवाइएको लामखुट्टेहरू भन्दा लामो उडान गरेको थियो। पिसाब आहारद्वारा वर्णन गरिएको उडान गतिविधि ढाँचाको विपरीत, युरिया-खुवाइएको होस्ट खोज्ने महिलाहरूले २४ घण्टाको अवधिमा निरन्तर उडान गतिविधि प्रदर्शन गरे, अँध्यारो चरणको दोस्रो आधामा शिखरमा पुगे (चित्र ३)। यद्यपि गतिविधि ढाँचाहरू समान थिए, युरिया खुवाउने महिलाहरूले अवशोषित सांद्रता (F(5, 138) = 1310.91, p) मा निर्भर गर्दै औसत उडान दूरी उल्लेखनीय रूपमा बढाए। < ०.०००१)। होस्ट खोज्ने महिलाहरूले पानी वा सुक्रोज खुवाउने महिलाहरू भन्दा युरियाको कुनै पनि सांद्रता खुवाउने समय बढी थियो (p < ०.०३)।
रगत चुस्ने लामखुट्टेको समग्र उडान गतिविधि सबै आहारहरूमा २४ घण्टासम्म स्थिर र निरन्तर रह्यो, पानीमा खुवाइएका महिलाहरूका लागि अँध्यारो अवधिको दोस्रो आधा समयमा पिसाब गतिविधि बढेको थियो र साथै ताजा र २४ घण्टा पुरानो खुवाइएका महिलाहरूमा पनि पिसाबको गतिविधि बढेको थियो (छवि ३)। रगत खुवाइएका महिलाहरूमा पिसाबको आहारले औसत उडान दूरीलाई उल्लेखनीय रूपमा असर गर्यो (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), युरिया आहारले (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) गरेन। अन्य मूत्र र नियन्त्रण आहारको साथ (ताजा, p = 0.0091; 72 घण्टा, p = 0.0022; 168 घण्टा, p = 0.001; सुक्रोज, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036)।
पिसाब र युरिया खुवाउने प्रजनन मापदण्डहरूमा पर्ने प्रभावहरू अण्डा दिने बायोएसे (चित्र ४ए) मा मूल्याङ्कन गरिएको थियो र प्रत्येक पोथीले राखेको अण्डाको संख्या, अण्डाको आकार र भर्खरै निस्केको पहिलो इन्स्टार लार्भाको आधारमा अनुसन्धान गरिएको थियो। अण्डा दिने संख्या। पिसाब खुवाउने अरब पोथीहरू आहार अनुसार फरक हुन्छन् (F(५,२२२) = ४.३८, p = ०.०००८; चित्र ४बी)। महिलाहरूले २४-घण्टा पिसाब खुवाउने, रगतको खानाले अन्य पिसाब आहार खुवाउने महिलाहरूको तुलनामा उल्लेखनीय रूपमा बढी अण्डा दिन्छन् र सुक्रोज खुवाउने महिलाहरू जस्तै थिए (चित्र ४बी)। त्यस्तै गरी, पिसाब खुवाउने महिलाहरूले राखेको अण्डाको आकार आहार अनुसार फरक हुन्छ (F(५, २०९) = १२.८५, p < ०.०००१), २४-घण्टा पिसाब र सुक्रोज खुवाउने महिलाहरूले पानी खुवाउने महिलाहरूको तुलनामा उल्लेखनीय रूपमा ठूला अण्डा दिन्छन्, जबकि १६८ घण्टा पिसाब खुवाउने महिलाहरूको अण्डा उल्लेखनीय रूपमा सानो थियो (चित्र ४सी)। थप रूपमा, पिसाबको आहारले लार्भालाई उल्लेखनीय रूपमा असर गर्छ आकार (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), जसमा अण्डा लार्भाबाट राखिएको अण्डा भन्दा २४ र ७२ घण्टा पुरानो पिसाब खुवाउने पोथीहरूले राखेको अण्डाबाट उल्लेखनीय रूपमा ठूला लार्भा निस्किएका छन्। पानी खुवाउने र १६८ घण्टा पिसाब खुवाउने पोथीहरू (चित्र ४D)।
गाईको मूत्र र युरियामा खुवाउने पोथी एनोफिलिस अरबिनिसको प्रजनन कार्यसम्पादन। रगत खुवाउने पोथी लामखुट्टेहरूलाई बायोसेमा राख्नु र अण्डा दिने सब्सट्रेटहरू प्राप्त गर्नु अघि ४८ घण्टासम्म ताजा र पुरानो गाईको मूत्र, युरियाको विभिन्न सांद्रता, सुक्रोज (१०%), र आसुत पानी (H2O) मिलेर बनेको आहार खुवाइयो। ४८ घण्टा (A)। अण्डा संख्या (B, E), अण्डाको आकार (C, F) र लार्भाको आकार (D, G) प्रदान गरिएको आहारबाट उल्लेखनीय रूपमा प्रभावित भए (गाईको मूत्र: BD; युरिया: EG)। फरक अक्षर नामहरू प्रयोग गरेर मापन गरिएको प्रत्येक प्यारामिटरको लागि मापन एकअर्काबाट उल्लेखनीय रूपमा फरक थियो (टुकीको पोस्ट हक विश्लेषण प्रयोग गरेर एकतर्फी ANOVA; p < ०.०५)। त्रुटि बारहरूले औसतको मानक त्रुटि प्रतिनिधित्व गर्दछ।
पिसाबको प्रमुख नाइट्रोजनयुक्त घटकको रूपमा, युरिया, जब रगत खुवाउने महिलाहरूलाई आहारको रूपमा प्रदान गरिन्छ, सबै अध्ययनहरूमा प्रजनन मापदण्डहरूलाई उल्लेखनीय रूपमा असर गर्छ। युरिया सांद्रता (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001) मा निर्भर गर्दै, रगत खाना पछि युरिया खुवाइएका महिलाहरूले राखेका अण्डाहरूको संख्या, १३४ µM र १.३४ mM बीचको युरिया सांद्रता खुवाइएका महिलाहरूले बढी अण्डा दिन्छन् (चित्र ४E)। १३४ µM वा सोभन्दा माथिको युरिया सांद्रतामा खुवाइएका महिलाहरूले पानीमा खुवाइएका महिलाहरू भन्दा ठूला अण्डा दिन्छन् (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; चित्र ४F), र लार्भाको आकार, यद्यपि आमाहरूमा युरियाको समान सांद्रताबाट प्रभावित (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) बढी परिवर्तनशील थियो (चित्र ४G)।
होस्ट-खोज्ने गोजातीय मूत्र हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरू प्रति समग्र आकर्षण। गिलास ट्यूब ओल्फ्याक्टोमिटर (चित्र 5A) मा मूल्याङ्कन गरिएको एरेबियन्सिस पिसाबको उमेर (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; चित्र 5B) द्वारा उल्लेखनीय रूपमा प्रभावित भएको थियो। पोस्ट हक विश्लेषणले देखाएको छ कि 24 घण्टामा बासी पिसाबको गन्धले अन्य सबै उपचारहरूको तुलनामा आकर्षणको स्तर उल्लेखनीय रूपमा उच्च बनाएको छ (72 घण्टा: p = 0.0060, 168 घण्टा: p = 0.012, पेन्टेन: p = 0.00070), ताजा पिसाबको गन्ध बाहेक (p = 0.13; चित्र 5B)। यद्यपि रगत चुस्ने लामखुट्टेको पिसाबको गन्ध प्रति समग्र आकर्षण उल्लेखनीय रूपमा फरक थिएन (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; चित्र 5C), यी पोथीहरू 72-घण्टा पुरानो पिसाबको तुलनामा हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरू प्रति उल्लेखनीय रूपमा बढी आकर्षक पाइयो। नियन्त्रणहरूको तुलनामा (p = ०.००६६; चित्र ५C)।
होस्ट र रगतले खुवाउने एनोफिलिस अरेबियनसको खोजीमा प्राकृतिक र कृत्रिम गाईको मूत्र गन्धको व्यवहारिक प्रतिक्रियाहरू। गिलास ट्यूब ओल्फ्याक्टोमिटर (A) को योजनाबद्ध। ताजा र पुरानो गाईको मूत्रबाट होस्ट (B) र रगत चुस्ने (C) लामखुट्टेमा हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरूको आकर्षण। प्रभु एनको टेन्टाकल प्रतिक्रिया पत्ता लगाउनुहोस्। ताजा (D), 24-घण्टा (E), 72-घण्टा (F), र 168-घण्टा (G) पुरानो गाईको मूत्रबाट अलग गरिएको हेडस्पेस अर्कहरू देखाइएका छन्। इलेक्ट्रोनिक एन्टेना पत्ता लगाउने (EAD) ट्रेसहरूले ग्यास क्रोमेटोग्राफबाट निकालिएको र ज्वाला आयनीकरण डिटेक्टर (FID) द्वारा पत्ता लगाइएको हेडस्पेसमा जैविक सक्रिय यौगिकहरूको प्रतिक्रियामा भोल्टेज परिवर्तनहरू देखाउँछन्। स्केल बारले प्रतिक्रिया आयाम (mV) बनाम अवधारण समय (हरू) लाई प्रतिनिधित्व गर्दछ। जैविक रूपमा सक्रिय यौगिकहरूको गुणहरू र रिलीज दरहरू (µg h-1) देखाइएका छन्। एकल तारा (**) ले एक सुसंगत कम-आयाम प्रतिक्रियालाई संकेत गर्दछ। डबल तारा (**) ले पुनरुत्पादन गर्न नसकिने संकेत गर्दछ। प्रतिक्रियाहरू।होस्ट (H) र रगत चुस्ने (I) पत्ता लगाउनुहोस्। An.arabiensis को ताजा र पुरानो गाईको मूत्र गन्धको सिंथेटिक मिश्रणमा फरक अपील छ। फरक अक्षर नामहरूमा आकर्षित लामखुट्टेको औसत अनुपात एकअर्काबाट उल्लेखनीय रूपमा फरक थियो (टुकीको पोस्ट हक विश्लेषण प्रयोग गरेर एकतर्फी ANOVA; p < ०.०५)।त्रुटि बारहरूले स्केलको मानक त्रुटि प्रतिनिधित्व गर्दछ।
रगत खाएपछि ७२ घण्टा र १२० घण्टामा, महिला Ann.arabiensis, स्प्यानिङको समयमा, पेन्टेन नियन्त्रणहरूको तुलनामा ताजा र पुरानो गाईको मूत्रबाट हेडस्पेस वाष्पशील अर्कहरूको लागि कुनै प्राथमिकता देखाइएको थिएन (χ2 = 3.07, p > 0.05; अतिरिक्त फाइल १: चित्र S1)।
महिला Ann.arabiensis को लागि, GC-EAD र GC-MS विश्लेषणहरूले आठ, छ, तीन र तीन जैविक सक्रिय यौगिकहरू पहिचान गरे (चित्र 5D-G)। यद्यपि इलेक्ट्रोफिजियोलोजिकल प्रतिक्रियाहरू उत्तेजित गर्ने यौगिकहरूको संख्यामा भिन्नताहरू अवलोकन गरिएको थियो, यी यौगिकहरू मध्ये धेरैजसो ताजा र पुरानो पिसाबबाट सङ्कलन गरिएको प्रत्येक हेडस्पेस वाष्पशील अर्कमा उपस्थित थिए। त्यसकारण, प्रत्येक अर्कको लागि, थ्रेसहोल्ड माथि महिला एन्टेनाबाट शारीरिक प्रतिक्रिया उत्पादन गर्ने यौगिकहरू मात्र थप विश्लेषणहरूमा समावेश गरिएको थियो।
हेडस्पेस सङ्कलनमा बायोएक्टिभ यौगिकहरूको कुल अस्थिर रिलिज दर ताजा पिसाबमा २९ µg h-१ बाट बढेर १६८-घण्टा पुरानो पिसाबमा २४२ µg h-१ पुगेको छ, मुख्यतया p-cresol र m-formaldehyde Phenol साथै phenol को वृद्धिको कारणले। यसको विपरित, २-साइक्लोहेक्सेन-१-वन र डेकानल जस्ता अन्य यौगिकहरूको रिलिज दरहरू बढ्दो पिसाबको उमेरसँगै घट्यो, जुन क्रोमेटोग्राम (चित्र ५D)-G बायाँ प्यानल) मा संकेत तीव्रता (प्रचुरता) मा देखिएको कमी र यी यौगिकहरूमा शारीरिक प्रतिक्रियाहरू (चित्र ५D-G दायाँ प्यानल) सँग सम्बन्धित छ।
समग्रमा, सिंथेटिक मिश्रणमा ताजा र पुरानो पिसाब हेडस्पेसको वाष्पशील अर्कमा पहिचान गरिएको जैविक सक्रिय यौगिकहरूको समान प्राकृतिक अनुपात थियो (चित्र 5D–G) र होस्ट (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; चित्र 5H) वा रगत चुस्ने लामखुट्टे (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; चित्र 5I) को खोजीमा उल्लेखनीय आकर्षण उत्पन्न भएको देखिएन। यद्यपि, उपचारहरू बीचको पोस्ट हक जोडीवार तुलनाले देखाएको छ कि होस्ट खोज्ने लामखुट्टेहरू पेन्टेन नियन्त्रणहरूको तुलनामा 24-घण्टा पुरानो पिसाबको सिंथेटिक मिश्रणमा उल्लेखनीय रूपमा आकर्षक थिए (p = 0.0086; चित्र 5H)।
२४-घण्टा-वृद्ध पिसाबको सिंथेटिक मिश्रणमा व्यक्तिगत घटकहरूको भूमिकाको मूल्याङ्कन गर्न, Y-ट्यूब परखमा पूर्ण मिश्रणहरू विरुद्ध छवटा घटाउने मिश्रणहरूको मूल्याङ्कन गरिएको थियो, जसमा व्यक्तिगत यौगिकहरू हटाइएका थिए। होस्ट-खोज्ने लामखुट्टेको लागि, पूर्ण मिश्रणबाट व्यक्तिगत यौगिकहरू घटाउँदा व्यवहारिक प्रतिक्रियाहरूमा महत्त्वपूर्ण प्रभाव पर्यो (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; अतिरिक्त फाइल १: चित्र S2A), सबै घटाउने मिश्रणहरू पूर्ण रूपमा मिश्रित भन्दा सानो भन्दा बढी आकर्षक थिए। यसको विपरीत, पूर्ण रूपमा सिंथेटिक मिश्रणबाट व्यक्तिगत यौगिकहरू हटाउनाले रगत चुस्ने लामखुट्टेको व्यवहारिक प्रतिक्रियाहरूलाई असर गरेन (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), डेकानलको अपवाद बाहेक, जसले गर्दा पूर्ण मिश्रण आकर्षणको तुलनामा कम स्तरहरू देखा परे (p = 0.022; अतिरिक्त फाइल १: चित्र S2B)।
इथियोपियाको एक मलेरिया-स्थानीय गाउँमा, खेतको अवस्थामा लामखुट्टेलाई आकर्षित गर्न २४-घण्टा गाईमूत्रको सिंथेटिक मिश्रणको प्रभावकारिता दस रातको लागि मूल्याङ्कन गरिएको थियो (चित्र ६A)। कुल ४,८६१ लामखुट्टेहरू समातेर पहिचान गरियो, जसमध्ये ४५.७% एन्थ्रोपस.गाम्बिया एसएल, १८.९% एनोफिलिस फेरोएन्सिस र ३५.४% क्युलेक्स एसपीपी थिए। (अतिरिक्त फाइल १: तालिका S1)। एनोपेलिस अराबिनिस पीसीआर विश्लेषणद्वारा पहिचान गरिएको एन.गाम्बियन प्रजाति जटिलको एक मात्र सदस्य हो। औसतमा, प्रति रात ३२० लामखुट्टेहरू समातिएका थिए, जसको अवधिमा सिंथेटिक मिश्रण चारा भएका समय पासोहरूले मिश्रण बिना जोडी पासोहरू भन्दा बढी लामखुट्टेहरू समातेका थिए (χ२(०, ३१९६) = १७०.०, p < ०.०००१)। परीक्षणको सुरु, मध्य र अन्त्यमा पाँच नियन्त्रण रातहरू मध्ये प्रत्येकमा गैर-चाउरी पासोहरू सेट गरिएका थिए। लामखुट्टेको समान संख्या थियो। प्रत्येक जोडी पासोमा कैद गरिएको, जसले घरहरू बीच कुनै पूर्वाग्रह नभएको र अध्ययन अवधिमा जनसंख्यामा कुनै गिरावट नभएको संकेत गर्दछ। नियन्त्रण पासोको तुलनामा, सिंथेटिक मिश्रण भएको पासोमा समातिएका लामखुट्टेको संख्या उल्लेखनीय रूपमा बढेको थियो: होस्ट खोजी (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), हालसालै रगत खुवाउने (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) र गर्भावस्था (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; अतिरिक्त फाइल १: तालिका S1)। यो कब्जा गरिएका लामखुट्टेको कुल संख्यामा पनि प्रतिबिम्बित हुन्छ: होस्ट खोजी > रगत चुस्ने > गर्भवती > अर्ध-गर्भवती > पुरुष।
२४-घण्टा सिंथेटिक गाईको मूत्र गन्ध मिश्रणको प्रभावकारिताको क्षेत्र मूल्याङ्कन। दक्षिण-मध्य इथियोपिया (नक्सा), माकी शहर नजिकै (घुसाउनुहोस्) क्षेत्र परीक्षणहरू सञ्चालन गरिएको थियो, रोग नियन्त्रण केन्द्र (CDC) प्रकाश जाल (दायाँ) जोडी घरहरूमा प्रयोग गरिएको थियो, ल्याटिन वर्ग डिजाइन (हवाई छवि) (A) सहित। कृत्रिम गन्ध-प्रलोभित CDC फोटोट्र्यापहरूले महिला एनोफिलिस अरबेस्क (B) लाई आकर्षित गर्छन् र कैद गर्छन्, तर एनोफिलिस फारोस (C) होइन, फरक तरिकाले, शारीरिक अवस्था-निर्भर प्रभाव। थप रूपमा, यी पासोहरूले होस्ट क्युलेक्स लामखुट्टेको संख्यामा उल्लेखनीय रूपमा वृद्धि भएको कब्जा गरे।(D) नियन्त्रणसँग तुलना।बायाँ पट्टीहरूले गन्धयुक्त चारा (हरियो) र नियन्त्रण (खुला) पासो (N = १०) को जोडीमा समातिएका लामखुट्टेको औसत चयन सूचकांक प्रतिनिधित्व गर्दछ, जबकि दायाँ पट्टीहरूले नियन्त्रण जालहरूको जोडीमा औसत चयन सूचकांक प्रतिनिधित्व गर्दछ (खुला; N = ५)। ताराहरूले सांख्यिकीय महत्त्व स्तरहरू संकेत गर्दछ (*p = ०.०१ र ***p < ०.०००१)
तीन प्रजातिहरूलाई सिंथेटिक मिश्रण भएको पासोमा फरक-फरक रूपमा समातिएको थियो। होस्ट (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), रगत खुवाउने (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) र गर्भावस्था (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) खोज्दै गर्दा a .arabiansis सिंथेटिक मिश्रण छोड्ने पासोमा फसेको थियो (चित्र 6B), जबकि An को मात्रा फरक थिएन। विभिन्न शारीरिक अवस्थाहरूमा Pharoensis फेला पर्यो (चित्र 6C)। Culex को लागि, नियन्त्रण पासोको तुलनामा सिंथेटिक मिश्रण (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; चित्र 6D) ले प्रलोभनमा पारिएको पासोमा होस्ट खोज्ने लामखुट्टेको संख्यामा मात्र उल्लेखनीय वृद्धि भएको पाइयो।
इथियोपियामा प्रजनन स्थलहरू र ग्रामीण समुदायहरू बीच सम्भावित होस्टहरू बाहिर अवस्थित होस्ट ब्याट ट्र्यापहरू प्रयोग गरियो कि मलेरिया लामखुट्टेहरूले होस्ट बासस्थान संकेतको रूपमा गाईको मूत्र गन्ध प्रयोग गर्छन् कि गर्दैनन् भनेर मूल्याङ्कन गर्न। होस्ट संकेतहरूको अभावमा, गर्मी, र गाईको मूत्र गन्धको उपस्थिति बिना वा बिना, कुनै पनि लामखुट्टे समातिएनन् (अतिरिक्त फाइल १: चित्र S3)। यद्यपि, उच्च तापक्रम र गाईको मूत्र गन्धको उपस्थितिमा, पोथी औलो लामखुट्टेहरू आकर्षित भए र समातिए, यद्यपि थोरै संख्यामा, पिसाबको उमेरबाट स्वतन्त्र (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; अतिरिक्त फाइल १: चित्र S3)। यसको विपरीत, पानी नियन्त्रणहरूले उच्च तापक्रममा मलेरिया लामखुट्टेहरू समातेनन् (अतिरिक्त फाइल १: चित्र S3)।
मलेरिया लामखुट्टेले अन्य कीराहरू जस्तै जीवन-इतिहासका विशेषताहरू बढाउन गाईको मूत्र (अर्थात्, पोखरी) मा क्षतिपूर्ति खुवाएर नाइट्रोजन युक्त यौगिकहरू प्राप्त गर्दछ र वितरण गर्दछ [२, ४, २४, २५, २६]। गाईको मूत्र सजिलै उपलब्ध नवीकरणीय स्रोत हो जुन मलेरिया भेक्टरहरूको लागि आराम गर्ने ठाउँहरूसँग नजिकबाट सम्बन्धित छ, जस्तै गाईको गोठ र ​​ग्रामीण घरहरू र अण्डा दिने ठाउँहरू नजिकको अग्लो वनस्पति। पोथी लामखुट्टेहरूले यो स्रोत गन्धद्वारा पत्ता लगाउँछन् र पिसाबमा नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरूको अवशोषणलाई नियमन गर्न सक्षम हुन्छन्, जसमा पिसाबमा प्रमुख नाइट्रोजनयुक्त घटक युरिया समावेश छ [१५, १६]। पोथी लामखुट्टेको शारीरिक अवस्थाको आधारमा, पिसाबमा पोषक तत्वहरू होस्ट-खोज्ने पोथी लामखुट्टेको उडान गतिविधि र अस्तित्व बढाउनको लागि आवंटित गरिन्छ, साथै पहिलो गोनाडोट्रोपिक चक्रको समयमा रगत खुवाउने व्यक्तिहरूको अस्तित्व र प्रजनन विशेषताहरू। त्यसकारण, कुपोषित वयस्कहरू जस्तै बन्द रहेका मलेरिया भेक्टरहरूको लागि पिसाब मिश्रणले महत्त्वपूर्ण पोषण भूमिका खेल्छ [८], किनकि यसले पोथी लामखुट्टेहरूलाई कम जोखिमयुक्त खुवाउने काममा संलग्न भएर महत्त्वपूर्ण नाइट्रोजनयुक्त यौगिकहरू प्राप्त गर्ने क्षमता प्रदान गर्दछ। यो खोजमा महत्त्वपूर्ण छ महामारी विज्ञानको परिणाम, किनकि महिलाहरूले आफ्नो आयु, गतिविधि र प्रजनन उत्पादन बढाउँछन्, यी सबैले भेक्टर क्षमतालाई असर गर्छ। यसबाहेक, यो व्यवहार भविष्यका भेक्टर व्यवस्थापन कार्यक्रमहरूको लक्ष्य हुन सक्छ।