Comhtháthaíonn sealbhú agus dáileadh cothaitheach feithidí sealgaireachta agus tréithe stair na beatha.Chun easnamh i gcothaithigh ar leith ag céimeanna éagsúla saoil a chúiteamh, is féidir le feithidí na cothaithigh seo a fháil trí bheathú forlíontach, mar shampla, trí bheathú ar táil veirteabrach i bpróiseas ar a dtugtar locháin.Feabhsaíonn agitation arabiensis ar fual bó le haghaidh sealbhú cothaitheach saintréithe stair na beatha.
Déan cinnte go bhfuil sé safe.arabiensis bhí mealladh chuig an boladh de úr, 24-uair an chloig, 72-uair an chloig, agus fual bó 168-uair an chloig d'aois, agus ósta-lorg agus fola-chothaithe (48-uair an chloig iar-fola béile) baineannaigh a thomhas i olfactometer Y-feadán, agus baineannaigh torracha a mheas le haghaidh anailíse comhdhúile bithfhisiceach agus urin a aithint. Rinneadh measúnú ar mheascáin shintéiseacha de chomhdhúile bithghníomhacha in Y-feadán agus trialacha allamuigh.Chun imscrúdú a dhéanamh ar fhual bó agus a phríomh-úiré cumaisc ina bhfuil nítrigine mar aistí bia forlíontacha féideartha le haghaidh veicteoirí maláire, tomhaiseadh paraiméadair bheathaithe agus saintréithe staire beatha. Rinneadh measúnú ar chomhréir na mosquitoes baineanna agus ar an méid fual bó agus úiré, do bheathaithe eitilte, d'athionsúiteadh beathaithe baineanna, d'ath-ionsú táirgí eitilte.
I gcás fola agus cothaithe an óstaigh. uction.
Fáil agus dáileadh fual bó Anopheles arabinis le haghaidh saintréithe stair saoil feabhsaithe. Bíonn tionchar ag beathú breise fual bó ar acmhainn veicteora go díreach trí mharthanas laethúil agus dlús veicteora a mhéadú, agus go hindíreach trí ghníomhaíocht eitilte a athrú agus dá bhrí sin ba cheart é a chur san áireamh i samhlacha amach anseo.
Comhtháthaíonn éadáil agus dáileadh cothaitheach feithidí sealgaireachta agus tréithe staire beatha [1,2,3].Tá feithidí in ann bia a roghnú agus a fháil agus beathú cúiteach a dhéanamh bunaithe ar infhaighteacht bia agus riachtanais chothaitheach [1, 3]. beathú forlíontach, mar shampla ar láib, eisfhearadh éagsúla agus táil veirteabraigh, agus carrion, próiseas ar a dtugtar locháin [2].Cé go gcuirtear síos go príomha ar éagsúlacht na speiceas féileacán agus leamhain, tharlaíonn poill uisce freisin in orduithe feithidí eile, agus a mhealladh chuig agus a bheathú ar na cineálacha acmhainní is féidir éifeachtaí suntasacha ar shláinte agus ar shaol eile - a scéal. Tagann Anopheles gambiae sensu lato (sl) chun cinn mar dhuine fásta 'míchothaithe' [8], agus mar sin d'fhéadfadh ról tábhachtach a bheith ag uisce ina shaintréithe stair saoil, ach go dtí seo tá faillí déanta ar an iompar seo. Ní mór aird a thabhairt ar úsáid corraithe mar mhodh chun iontógáil cothaitheach a mhéadú sa fheithicil thábhachtach seo toisc go bhféadfadh iarmhairtí eipidéimeolaíocha tábhachtacha a bheith aige.
Tá iontógáil nítrigine i mná fásta mosquitoes Anopheles teoranta mar gheall ar chúlchistí caloric íseal a iompraítear ó chéim an larbha agus úsáid mí-éifeachtach de mhin fola [9]. Baineann Ann.gambiae sl cúiteamh de ghnáth as seo trí fhorlíonadh le béilí fola forlíonta [10, 11], rud a chuireann níos mó daoine i mbaol conarthach an ghalair agus a chur i mbaol mosquitoes forlíonadh úsáid níos mó. eisfhearadh veirteabrach chun comhdhúile nítrigineacha a fháil a fheabhsaíonn oiriúnú agus maneuverability eitilte, mar atá léirithe ag feithidí eile [2].I dtaca leis seo, a mhealladh láidir agus ar leith de cheann de na speicis sibling laistigh An.The Gambian coimpléasc speiceas, Anopheles arabinis, fual bó úr agus d'aois [12,13,14], is suimiúil é. Is acmhainn shaibhir i gcomhdhúile nítrigineacha é fual bó, le úiré freagrach as 50-95% den iomlán nítrigine i bhfual úr [15, 16]. Mar aois fual bó, úsáideann microorganisms na hacmhainní seo chun castacht na gcomhdhúile nítrigineacha a laghdú laistigh de 24 uair an chloig [15].Leis an méadú tapa ar amóinia, a bhaineann le meath ar mhiocrorgánaigh chomhdhúile a tháirgtear trí mhiocrorgánaigh orgánacha. ve [15], d'fhéadfadh a bheith baineann Ann.arabiensis a mhealladh go fabhrach chun fual 24 uair an chloig nó níos lú [13, 14].
Sa staidéar seo, lorgaíodh Ans óstaigh agus a chothaítear le fuil.Le linn a chéad timthriall gonadotropin, rinneadh measúnú ar arabiensis chun comhdhúile nítrigineacha a fháil, lena n-áirítear úiré, trí mheascadh fuail. Ar deireadh, rinneadh sraith turgnaimh chun measúnú a dhéanamh ar conas a leithdháileann mosquitoes baineanna an acmhainn chothaitheach fhéideartha seo le haghaidh marthanais fheabhsaithe, atáirgeadh agus tuilleadh sealgaireachta. Ar deireadh, rinneadh measúnú ar na hóstach agus urrún úr chun na hóstach úra seo a mheas chun na clóirín úra seo a sholáthar agus a n-óstach a chinneadh. Agus iad ag cuardach na hacmhainne cothaitheacha féideartha seo, d'aimsigh arabiensis comhghaolta ceimiceacha taobh thiar den mhealltacht dhifreálach a breathnaíodh. Rinneadh measúnú breise ar mheascáin shintéiseacha de chomhdhúile orgánacha so-ghalaithe (VOCanna) a aithníodh i bhfual aois 24 uair an chloig faoi choinníollacha allamuigh, ag leathnú na dtorthaí a fuarthas faoi choinníollacha saotharlainne agus ag léiriú éifeacht boladh fual buaibheach ar stáit éagsúla fiseolaíocha.Mealladh mosquito. Deimhníonn na torthaí a fuarthas go bhfuil An.Faigheann agus dáileann arabiensis comhdhúile nítrigineacha a fhaightear i bhfual veirteabrach chun tionchar a imirt ar shaintréithe stair an tsaoil.
Coinníodh Anopheles arabicans (sruth Dongola) ag 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH agus timthriall dorcha 12:12 h. Tógadh larbhaí i tráidirí plaisteacha (20 cm × 18 cm × 7 cm) líonta le huisce driogtha agus chothaigh siad bia éisc Tetramin®, Bailíodh Tetramin® 3 ml (Tetramin® Wedkeups). Hertila, Åstorp, SE) agus ansin aistríodh chuig cages Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Eolaíochta, Taichung, Taiwan) chun cead a thabhairt chun cinn fásta.Soláthraíodh daoine fásta le tuaslagán siúcrós 10% ad libitum go dtí 4 lá tar éis teacht chun cinn (dpe), ag an bpointe sin óstach-iarraidh ar an turgnamh le huisce réiltín roimh ré ar fáil láithreach ar aiste bia roimh ré, tar éis an turgnaimh a chur ar fáil ar an oíche roimh ré le hóstach ar aiste bia. Cur síos orthu below.Bain a úsáidtear le haghaidh turgnaimh feadán eitilte ghann ar feadh 4-6 uair an chloig amháin le huisce ad libitum.Chun ullmhú fola-sucking mosquitoes le haghaidh bithmheasúnú ina dhiaidh sin, 4 dpe baineannaigh ar fáil le fuil caorach defibrotic (Håtunalab, Bro, SE) ag baint úsáide as córas beathú membrane (Hemotek Discovery Ceardlanna Fionnachtana, Accrington, UK aistríodh go díreach mar a aistríodh aistí bia aonair, agus cnáimhseacha aonair mar a aistríodh go díreach chuig an aiste bia baineann, Accrington, UK). 10% de shiúcrós ad libitum ar feadh 3 lá roimh na turgnaimh a bhfuil cur síos orthu thíos. Úsáideadh na baineannaigh dheireanacha le haghaidh bith-thástálacha feadáin eitilte agus aistríodh chuig an tsaotharlann iad, agus ansin bhí uisce driogtha ad libitum acu ar feadh 4-6 huaire roimh an turgnamh.
Baineadh úsáid as measúnachtaí beathaithe chun tomhaltas fual agus úiré a chainníochtú i mná fásta An.Arabach baineann.Host-lorg agus fola-chothaithe baineannaigh ar fáil ar aiste bia ina raibh 1% caolaithe fual bó úr agus d'aois, tiúchain éagsúla úiré, agus dhá rialú (10% siúcrós agus uisce) le haghaidh 48 h. Ina theannta sin, dathú bia (1 mg cyanide-1 CAS-1; 1 mg-1 mg; ma-Aldrich, Stócólm, SE) a chur leis an aiste bia agus a sholáthar i maitrís 4 × 4 i feadáin microcentrifuge 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, SAM; Fíor 1A) Líon isteach go dtí an imeall (~ 300 µl). , Ostermundigen, CH;Figiúr 1A) sa dorchadas iomlán ag 25 ± 2 cm °C agus 65 ± 5% taiseachas coibhneasta. Rinneadh na turgnaimh seo arís 5 go 10 n-uaire. Tar éis nochtadh do aiste bia, cuireadh mosquitoes ag -20 ° C go dtí go ndéanfar anailís bhreise.
Cuardaigh le haghaidh fual buaibheach agus úiré absorbed ag an ósta agus fola-sucking baineann Anopheles arabianus.I dtriail bheathú (A), cuireadh mosquitoes baineann ar fáil le aiste bia comhdhéanta de úr agus d'aois bó fual, tiúchain éagsúla úiré, sucrose (10%), agus uisce driogtha (H2O).Host-lorg (B) óstach-lorg aiste bia (B) agus fola-chothaithe níos mó ná aon aiste bia baineann siúcrós. s absorbed fual bó 72-uair an chloig níos lú ná 168-uair an chloig fual bó (B).Tá an cion nítrigine meán iomlán (± diall caighdeánach) fuail ionadaíocht sa inset.Host-lorg (D, F) agus fuil-sucking (E, G) baineannaigh i mbun úiré ar bhealach dáileog-spleách.Mean i Tuairim ainmneacha éagsúla go suntasach (D. anailís; p < 0.05). Is ionann barraí earráide agus earráid chaighdeánach an mheáin (BE). Seasann an líne dhíreach bhriste don líne aischéimnithe log-líneach (F, G)
Chun bia súite a scaoileadh, cuireadh mosquitoes ina n-aonar i bhfeadáin microcentrifuge 1.5 ml ina raibh 230 µl d'uisce driogtha agus cuireadh isteach ar an bhfíochán trí úsáid a bhaint as mótair pestle agus gan sreang indiúscartha (VWR International, Lund, SE), agus ina dhiaidh sin lártheifneoiriú ag 10 krpm ar feadh 10 nóiméad. Saibhir) agus ionsúiteacht (λ620) ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta speictrophotometer-bhunaithe (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Mar mhalairt air sin, meilte na mosquitoes i 1 ml d'uisce driogtha, agus aistríodh 900 µl de go cuvette le haghaidh anailíse speictrophotometer, λ, λsta 6 nm). ionghabháil chothaithe, ullmhaíodh cuar caighdeánach trí chaolú sraitheach chun 0.2 µl go 2.4 µl de 1 mg ml-1 ciainíd xiléin a tháirgeadh. Ansin, úsáideadh dlús optúil na dtiúchan ruaime aitheanta chun an méid bia a ionghabháil gach mosquito a chinneadh.
Rinneadh anailís ar shonraí toirte ag baint úsáide as anailís aontreo ar athraitheacht (ANOVA) agus comparáidí iar-hoc Tukey ina dhiaidh sin (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, SAM, 1989–2007). Chuir anailísí aischéimniúcháin líneacha síos ar iontógáil úiré a bhí ag brath ar thiúchan agus chuir siad i gcomparáid le freagairtí idir óstach-lorg agus fola-suíomh. , San Diego, CA, SAM).
Ceanglaíodh thart ar 20 µl de shamplaí fuail ó gach aoisghrúpa ar Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mogalra, Sigma Aldrich) agus cuimsithe i capsúil stáin (8 mm × 5 mm). ábhar i bhfual úr agus sean de réir phrótacal an mhonaróra.Cainníochtaíodh an nítrigin iomlán (g N l-1) bunaithe ar thiúchan úiré aitheanta a úsáideadh mar chaighdeán.
Chun measúnú a dhéanamh ar an éifeacht aiste bia ar ósta-lorg agus fola-sucking marthanais baineann, mosquitoes a chur ina n-aonar i miasa Petri mór (12 cm ar trastomhas agus 6 cm ar airde; Semadeni) le poll mogalra-clúdaithe sa lid (3 cm ar trastomhas) le haghaidh aerála agus soláthar bia. Soláthraíodh aistí bia go díreach tar éis 4 dpe agus san áireamh 1% caolaithe comhchruinnithe de urc, ceithre comhchruinnithe úra agus agurea, 10% caolaithe agus agurec úr, agu00 caolaithe agus agurec úr, agu00 caolaithe. ardaigh agus uisce.Piped gach aiste bia ar tampon fiaclóireachta (DAB Fiaclóireachta AB, Upplands Väsby, SE) a cuireadh isteach i steallaire 5 ml (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), an plunger bhaint, agus a chur ar bharr mhias Petri (figiúr 1).1A).Athraigh d'aiste bia gach lá.Athraigh an lá a thuairiscítear marbh moquitoes. ed go dtí go bhfuair an mosquito deireanach bás (n = 40 in aghaidh na cóireála). Rinneadh anailís staitistiúil ar mharthanacht mosquitoes a chothaítear ar aistí bia éagsúla ag baint úsáide as cuair marthanais Kaplan-Meyer agus tástálacha céim log chun comparáidí dáilte marthanais idir aistí bia a chur i gcomparáid (Staitistic IBM SPSS 24.0.0.0).
Muileann eitilte mosquito saincheaptha bunaithe ar Attisano et al.[17], déanta as painéil aicrileach soiléir 5 mm tiubh (10 cm ar leithead x 10 cm ar fad x 10 cm ar airde) gan painéil tosaigh agus cúil (Fig. 3: barr). Cóimeáil mhaighdeog le feadán ingearach déanta as colún crómatagrafaíocht gháis (0.25 mm id. 75 mm ar fionraí); maighnéid iam 9 cm óna chéile.Déroinn feadán cothrománach déanta as an ábhar céanna (6.5 cm L) an feadán ingearach chun lámh ceangailte agus lámh a dhéanamh a d'iompair píosa beag scragall alúmanaim mar chomhartha a chuirfeadh isteach ar an tsolais.
Tugadh an aiste bia thuas do mhná a raibh ocras orthu 24 uair an chloig ar feadh 30 nóiméad roimh srianadh. Ansin rinneadh mosquitoes mná a bhí lán-chothaithe a ainéistéisiú ina n-aonar ar oighear ar feadh 2-3 nóiméad agus ceanglaíodh iad le bioráin feithidí le céir bheach (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) agus ansin rinneadh taifeadadh ar na heitiltí cothrománacha ag Millvo. Logálaí sonraí saincheaptha, ansin stóráilte agus taispeáint ag baint úsáide as bogearraí PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Cuireadh an muileann eitilte i seomra rialaithe aeráide (12 h: 12 h, solas: dorcha, 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH).
Chun patrún na gníomhaíochta eitilte a shamhlú, ríomhadh an t-achar iomlán a eitlíodh (m) agus líon iomlán na ngníomhaíochtaí eitilte as a chéile in aghaidh na huaire thar thréimhse 24 uair an chloig. Ina theannta sin, rinneadh comparáid idir na meánachar a d'eitil baineannaigh aonair ar fud cóireálacha agus rinneadh anailís orthu trí úsáid a bhaint as ANOVA aon-bhealach agus anailís post hoc Tukey (JMP Pro, v14.0,, spleách ar an meán-achair SAS Inc.), cé gur measadh go raibh an meán-achar spleách ar an meán-achair neamhspleách, SAS Institute Inc. ríomhtar líon na mbabhtaí in incrimintí 10 nóiméad.
Chun measúnú a dhéanamh ar éifeacht an aiste bia ar fheidhmíocht atáirgthe An.arabiensis, aistríodh seisear baineann (4 dpe) go díreach chuig cages Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) tar éis bailiú fola agus ansin chuir siad an aiste bia turgnamhach ar fáil ar feadh 48 h mar a thuairiscítear thuas. Baineadh aistí bia ansin agus cuireadh cupáin sceathraí (30 ml; 30 ml; Nolato Hertila ag athrú 30 uair an chloig ar an tríú lá) líonta le haghaidh uisce distila 30 ml gach lá le haghaidh 30 uair an chloig ag athrú gach lá líonta le haghaidh distila 4 4 ) líonta le haghaidh gach lá ag athrú Nolato Hertila. 24 uair an chloig.Déan gach regimen aiste bia arís 20-50 uair.Rinneadh uibheacha a chomhaireamh agus a thaifeadadh do gach cage turgnamhach. Baineadh úsáid as foshamplaí uibheacha chun meánmhéid agus éagsúlacht faid uibheacha aonair a mheas (n ≥ 200 in aghaidh an aiste bia) ag baint úsáide as micreascóp Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE23);Leica Microsystems Ltd., DE). Coinníodh na huibheacha a bhí fágtha i seomra aeráid-rialaithe faoi choinníollacha tógála caighdeánacha ar feadh 24 h, agus tomhaiseadh foshampla de larbhaí instar 1 a tháinig chun cinn le déanaí (n ≥ 200 in aghaidh an aiste bia), mar a thuairiscítear thuas. Rinneadh comparáid idir líon na n-uibheacha agus méid na n-uibheacha agus na larbhaí idir cóireálacha agus úsáid a bhaint as anailís aon-bhealaigh ANO, SAMP.0, Prov. ).
Bailíodh so-ghalaithe Headspace ó úr (1 uair iar-shampláil), 24 hr, 72 hr agus 168 hr d’aois fual ó shamplaí a bailíodh ó eallach Zebu, rásaí Arsi.Ar mhaithe le caoithiúlacht, bailíodh samplaí fuail go luath ar maidin agus na ba fós sa scioból. teprodukte GmbH and Co., Minden, DE) i 3 l polaimíd le clúdach I plaisteach clóiríd vinil drumaí. Bailíodh volatiles Headspace ó gach sampla fuail bó go díreach (úr) nó tar éis aibithe ag teocht an tseomra ar feadh 24 h, 72 h agus 168 h, ie bhí gach sampla fuail ionadaíoch do gach aoisghrúpa.
Chun so-ghalaithe ceannspáis a bhailiú, baineadh úsáid as córas lúb dúnta chun sruth gáis gníomhachtaithe carbóin-scagtha (100 ml min-1) a scaipeadh trí mhála polaimíde go dtí an colún asaithe ar feadh 2.5 h trí úsáid a bhaint as caidéal folúis scairt (KNF Neuberger, Freiburg, DE). Mar rialú, rinneadh an colún ceannspáis a bhailiú ó pholaimíd x5 cm de thiúbán (mála fholamh de pholaimíd 5 cm). 3 mm id) ina bhfuil 35 mg de Porapak Q (50/80 mogalra; Waters Associates, Baile na nGallóglach, MA, SAM) idir olann gloine plugs.Before úsáid, bhí flushed an colún le 1 ml athdhriogadh n-hexane (Merck, Darmstadt, DE) agus 1 ml pentane (99.0% tuaslagóirí volta 40,000 Algorma 4). μl pentane.Comhthiomsaíodh bailiúcháin Headspace agus ansin stóráiltear iad ag -20°C go dtí go n-úsáidfí iad le haghaidh tuilleadh anailíse.
Rinneadh anailís ar fhreagraí iompraíochta ó ósta-lorg agus ithe fola An.Headspace sleachta so-ghalaithe a bailíodh ó úr, 24-h, 72-h, agus fual 168-h-aois le haghaidh sleachta so-ghalaithe ó mosquitoes Arabidopsis ag baint úsáide as olfactometer feadán gloine díreach [18].Rinneadh na turgnaimh le linn na tréimhse buaic ZT, 13-19-A. olfactometer feadán gloine (80 cm × 9.5 cm id) soilsithe le 3 ± 1 lx de solas dearg ó above.Charcoal scagtha agus humidified sreabhadh aeir (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% taiseachas coibhneasta) ritheadh ​​​​an bhithmheasúnú ag 30 cm s-1.Aeir sreabhadh trí shraith plume cruach dhosmálta. dáileoir tampon ental (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Fiaclóireachta AB), ar fionraí ó corna 5 cm ar an deireadh windward an olfactometer, le hathruithe stimulator gach 5 minutes.For anailís, 10 μl de gach sliocht headspace, caolaithe 1:10, baineadh úsáid as mar spreagadh.Úsáideadh an méid céanna de óstach-smacht a scaoileadh indibhidiúil instealladh fola nó instiúrtha indibhidiúla. cages 2-3 uair an chloig roimh thús an experiment.The cage scaoileadh a chur ar an taobh downwind an olfactometer, agus ceadaíodh na mosquitoes a acclimate ar feadh 1 nóiméad, agus ansin an comhla féileacán an Cage a osclaíodh a release.Attraction chun cóireáil nó rialú Rinneadh anailís ar an cion de mosquitoes a tháinig i dteagmháil leis an bhfoinse laistigh de 5 nóiméad rialaithe agus sleachta reáchtáladh ar a laghad a bhí 5 nóiméad reáchtála agus foluiteacha scaoileadh. éifeachtaí aon lá amháin, rinneadh tástáil ar an líon céanna cóireálacha agus rialuithe ar gach lá turgnamhach. Rinneadh anailís ar fhreagraí a lorg ó thacair Ans.Arabic versus headspace óstach agus fola-chothaithe ag baint úsáide as aischéimniú loighisticice ainmniúil agus ina dhiaidh comparáidí péirewise le haghaidh cóimheasa corr (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Rinneadh anailís ar sleachta sceite ó fhual bó úr agus d'aois ó fhual bó úr agus d'aois i cages Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Líonadh cupáin plaisteacha (30 ml; Nolato Hertila) le 20 ml d'uisce driogtha an tsubstráit sceathraí agus cuireadh i gcoirnéil os coinne an chupáin 1 μ μ. l de gach sliocht headspace ag caolú 1:10.Úsáideadh an méid céanna de pentane a choigeartú an cupáin rialú.Cóireála agus malartaíodh cupáin rialaithe idir gach turgnamh chun rialú le haghaidh éifeachtaí suímh. Scaoileadh deich baineannaigh fola-chothaithe i cages turgnamhacha ag ZT 9-11 agus comhaireamh uibheacha i cupáin 24 uair an chloig ina dhiaidh sin. líon iomlán na n-uibheacha a leagtar).Déanadh gach cóireáil arís agus arís eile 8 n-uaire.
Rinneadh anailís ar bhrath patrún crómatagrafaíochta gáis agus antenna leictreon (GC-EAD) ar An.arabiensis baineann mar a thuairiscítear roimhe seo [20]. Go hachomair, scartha sleachta so-ghalaithe headspace úra ag baint úsáide as Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, SAM) atá feistithe le colún HP-5 (30 m × 0.25 mm id, Agilent scannán id, 0.25 mm), tiús Agilent Technologies, 0.0m.agus fual ag dul in aois. Baineadh úsáid as hidrigin mar chéim shoghluaiste le meánráta sreafa líneach de 45 cm s-1.Instealladh gach sampla (2 μl) ar feadh 30 soicind i mód scoilte le teocht ionraoin de 225 ° C. Cláraíodh teocht an oigheann GC ó 35 ° C (sealbhú 3 nóiméad) go 300 ° C (sealbhú 3 nóiméad) go 300 ° C ag 300 ° C. Cuireadh 4 psi de nítrigin leis agus scoilt 1:1 i gcrosaire íseal toirte marbh Gerstel 3D/2 (Gerstel, Mülheim, DE) idir an brathadóir ianúcháin lasair agus an ribeach eisilteach EAD.The GC do EAD trí líne aistrithe Gerstel ODP-2, a rianaíonn an teocht oigheann GC móide 5 ° C, áit a raibh sé measctha le feadán carbóin humid-8 (mm-8), isteach i bhfeadán gloine humided, mm-8. .5 l nóim−1).Cuireadh an t-aintéin 0.5 cm ó asraon an fheadáin.Chuir gach mosquito aonair cuntas ar mhacasamhlú amháin, agus i gcás mosquitoes a bhí á lorg ag óstach, rinneadh ar a laghad trí mhacasamhlú ar shamplaí fuail de gach aois.
Comhdhúile bithghníomhacha a shainaithint i mbailiúcháin ceannspáis fuail bhólachta úr agus aosta ag baint úsáide as GC agus mais-speictriméadar (GC-MS; 6890 GC agus 5975 MS; Agilent Technologies) chun freagairtí aeróige a fháil in anailís GC-EAD, ag feidhmiú i mód ianaithe tionchair leictreoin ag 70 eV. mm trastomhas istigh, tiús scannán 0.25 μm) ag baint úsáide as héiliam mar an chéim shoghluaiste le meánráta sreafa líneach de 35 cm s-1.A 2 μl sampla a instealladh ag baint úsáide as na socruithe injector céanna agus teocht oigheann mar a bhí le haghaidh an GC-EAD analysis.Compounds Aithníodh bunaithe ar a n-am coinneála (Kovát innéacs) agus deimhnithe mais-speictream leabharlainne i gcomparáid le NIST4 leabharlann barántúla. caighdeáin (Comhad Breise 1: Tábla S2). Le haghaidh cainníochtaithe, instealladh aicéatáit heiptil (10 ng, íonacht cheimiceach 99.8%, Aldrich) mar chaighdeán seachtrach.
Measúnú a dhéanamh ar éifeachtúlacht meascán boladh sintéiseach comhdhéanta de chomhdhúile bithghníomhacha a aithníodh i bhfual úr agus d'aois chun ósta-lorg agus fola-sucking Ans.arabiensis a mhealladh, ag baint úsáide as an olfactometer céanna agus prótacal mar above.Synthetic meascáin mimiced comhdhéanamh agus comhréireanna na gcomhdhúile i headspace measctha sleachta so-ghalaithe de úr, 24-uair, 47-uair an chloig, 42-uair an chloig, agus 42 uair an chloig urine. (Fíor 5D-G; Comhad Breise 1: Tábla S2).Chun anailís a dhéanamh, bain úsáid as 10 μl de chaolú 1:100 den mheascán iomlán sintéiseach, le ráta scaoilte foriomlán idir thart ar 140-2400 ng h-1, chun mealltacht a mheas do mosquitoes óstaigh agus fola-sucking. Ina dhiaidh sin, déantar an tástáil ar mheascáin iomlána de mheascáin iomlána agus de mheascáin óstacha. -fed Ans.Arab vs meascáin shintéiseacha agus dealaitheacha ag baint úsáide as aischéimnithí loighisticiúla ag baint úsáide as ainmniúil comparáidí le haghaidh cóimheasa corr (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Chun measúnú a dhéanamh an bhféadfadh fual bó feidhmiú mar ghnáthóg óstach do mosquitoes maláire, fual bó úr agus d'aois, a bailíodh mar a thuairiscítear thuas, agus cuireadh uisce i mbuicéid meshed 3 l (100 ml) agus a leagtar i gaistí bhaoite óstach.(Leagan BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE).Deich gaistí curtha 50 m óna chéile i bhféarach, 400 m ó phobal an tsráidbhaile (Sile, an Aetóip, 5°53’24’´N, 37°29´24´E) agus gan aon eallach, ar thailte pórúcháin buana agus láithreacht sráidbhailte.Téiteodh cúig ghaistí insamhail na n-óstach go dtí an oíche gan teas. ly ar feadh cúig oíche san iomlán.Rinneadh comparáid idir na huimhreacha mosquito a gabhadh i gaistí le fual d'aoiseanna difriúla ag baint úsáide as aischéimniú lóistíochta le dáileadh béite-dhé-bhreithe (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
I sráidbhaile maláire-eindéimeach in aice le baile Maki, réigiún Oromia, an Aetóip (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ Soir; Fíor 6A).Rinneadh an staidéar idir lár mhí Lúnasa agus lár mhí Mheán Fómhair roimh an spraeáil iarmharach laistigh bliantúil, mar aon le péireanna fada de shéasúr na báistí ar feadh tréimhse fada de shéasúr na báistí (205). Roghnaíodh sráidbhaile le haghaidh an staidéir (Fíor 6A).Ba iad na critéir a úsáideadh chun na tithe a roghnú ná: níor ceadaíodh aon ainmhithe sa teach, níor ceadaíodh aon chócaireacht faoi dhíon (lonadh tine nó gualaigh a tharraingt) (ar a laghad le linn na tréimhse trialach), agus tithe le dhá áitritheoir ar a mhéad, ag codladh i uninsecticides.Faoin mosquito cóireáilte net.Ethical ceadaithe ag an mBord Athbhreithnithe Eitice Taighde Institiúideach (IRB/022/2016) de Dhámh na nEolaíochtaí Nádúrtha (CNS-IRB), Ollscoil Addis Ababa, i gcomhréir leis na treoirlínte arna mbunú ag an gCumann Domhanda Míochaine Dearbhú Helsinki.Consent ó gach ceann teaghlaigh a fuarthas le cúnamh ó fhoireann riaracháin áitiúil ar leibhéal na barda. Lean an dearadh turgnamhach dearadh cearnach Laidineach 2 × 2, inar sannadh meascáin shintéiseacha agus rialuithe do thithe péireáilte ar an gcéad oíche agus a mhalartú idir tithe ar an gcéad oíche turgnamhach eile. Rinneadh an próiseas seo arís agus arís eile deich n-uaire.
Tuaslagadh meascán sintéiseach ina bhfuil sé chomhdhúile bithghníomhacha i heptane (97.0% tuaslagóir grád GC, Sigma Aldrich) agus scaoileadh ag 140 ng h-1 ag baint úsáide as dáileoir wick cadáis [20].The dáileoir wick cheadaítear gach comhdhúile a scaoileadh i gcomhréireanna tairiseach ar fud an turgnamh 12 uair an chloig. Baineadh úsáid as Heptane mar rialú. Hock Company, Gainesville, FL, SAM; Fíor 6A). Crochadh na gaistí 0.8 - 1 m os cionn na talún, in aice le bun na leapa, agus chodail oibrí deonach faoi líontán mosquito neamhchóireáilte agus d'oibrigh sé idir 18:00 agus 06:30. Gabhadh mosquitoes de réir gnéis agus stádas fiseolaíoch (neamhchothaithe, beathú 1) agus anailís polaiméire (neamhchothaithe, cothú 2), agus ina dhiaidh sin ag baint úsáide as scagadh polaiméire ag iompar clainne, agus ag úsáid anailíse polaiméire ag iompar clainne. na speicis a aithníodh go moirfeolaíoch mar A. gambiae sl Baill den choimpléasc [23] Sa staidéar allamuigh, rinneadh anailís ar ghaistín tithe péireáilte ag baint úsáide as samhail oiriúnach loighisticice ainmniúil, áit a raibh an t-athróg spleách ar an mhealladh agus ba é an éifeacht sheasta cóireáil (meascán sintéiseach vs rialú) (JMP® 14.0.0. Institiúid SAS Inc.).Anseo, tuairiscímid na luachanna χ2 agus p ón tástáil cóimheas dóchúlachta.
Measúnú a dhéanamh ar cibé an bhfuil sé sábháilte. . Crose (F (10,813) = 15.72, p <0.0001; Figiúr 1d). Bhí sé seo i gcodarsnacht le freagairt na mban a chothaítear le fuil, a ghlac go hiondúil le haistí bia ina bhfuil úiré ná uisce, cé go bhfuil siad níos lú ná 10% sucrose (F (10,557). Ghlac baineannaigh phlebotomized níos mó úiré ná mná a bhí ag lorg óstach ag na comhchruinnithe is ísle, agus ghlac na baineannaigh seo méideanna comhchosúla úiré ag tiúchan níos airde (F (1,953) = 78.82, p <0.0001;Fig. 1F, G).Cé gur dealraitheach go raibh luachanna barrmhaithe ag iontógáil ó aiste bia ina raibh úiré (Fíor 1D,E), bhí baineannaigh sa dá stát fiseolaíocha in ann an méid úiré a ionsúitear thar raon iomlán na dtiúchan úiré a mhodhnú ar bhealach log-líneach (Fíor 1F, G).Ar an gcaoi chéanna, is cosúil go rialaíonn mosquitoes a n-iontógáil nítrigine trí rialú a dhéanamh ar an méid fual a shúitear, mar go léirítear an méid nítrigine i bhfual sa mhéid a shúitear (Insets Fíor 1B, C agus B).
Chun measúnú a dhéanamh ar éifeachtaí fuail agus úiré ar mharthanas mosquito a lorg óstaigh agus a tharraingíonn fola, tugadh fual do mhná de na ceithre aois (úr, 24 h, 72 h, agus 168 h iar-sheileadh) agus raon tiúchan úiré, chomh maith le huisce driogtha agus 10 % de shiúcrós óstach mar rialú iomlán (Léirigh an anailís mharthanais 2% san aiste bia baineann). (fual: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; úiré: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Fíor 2B, C) agus baineannaigh a chothaítear le fuil (fual: χ2 = 93.0, d 1 = χ2 = 93.0, d 1 = χ2 = 93.0, d 1 = χ2 = 93.0, d 1 = χ2 = 93.0, df = 0. .9, df = 5, p < 0.0001; Fíor 2D,E).I ngach turgnaimh, chothaigh baineannaigh aiste bia fual, úiré, agus uisce go raibh rátaí marthanais i bhfad níos ísle i gcomparáid le baineannaigh a chothaigh aiste bia siúcrós (Fíor 2B-E). Bhí na rátaí marthanais is ísle ag baint le hóst-iarracht a chothaigh fual úr agus stale 7006 (bíodh na rátaí marthanais is ísle) ag urine = 106 cothaithe, agus bhí na rátaí marthanais is ísle cothaithe ag urine = 1.6. cumas (Fíor 2B). Ina theannta sin, mhair óstaigh a bhí ag lorg baineannaigh úiré 135 mm níos faide ná rialuithe uisce (p < 0.04) (Fíor.2C).I gcomparáid le huisce, mhair mná a chothaíodh le fual úr agus fual 24 uair an chloig níos faide (p = 0.001 agus p = 0.012, faoi seach; Fíor 2D), agus mhair mná a chothaíodh le fual 72 uair níos faide ná iad siúd a chothaíodh fual úr gearr baineann agus fual 24 uair an chloig d'aois (p. 2 = 1,00 agus 24 uair an chloig d'aois). úiré chothaithe 135 mM, mhair baineannaigh chothaithe fola níos faide ná gach tiúchan eile úiré agus uisce (p < 0.013; Fíor 2E).
Marthanas baineann óstach agus fola-sucking Anopheles arabinis beathú ar fual bó agus úiré.Sa bithmheasúnú (A), cuireadh mosquitoes baineann ar fáil ar aiste bia comhdhéanta de úr agus d'aois fual bó, tiúchain éagsúla úiré, siúcrós (10%) agus uisce driogtha (H2O). Taifeadadh maireachtáil ósta-iarraidh (B, fola) gach uair an chloig moquitoes (B, 1) agus moquitoes moquitoes (B, 1) gach uair an chloig mosquitoes. chothaithe ar fhual (B, D) agus úiré (C, E), agus rialtáin, Siúcrós agus uisce, marbh
Bhí difríocht idir an t-achar iomlán agus líon na mbabhtaí a socraíodh sa tástáil muileann eitilte thar thréimhse 24 uair an chloig idir mosquitoes ósta-lorg agus fola-sucking, rud a léirigh gníomhaíocht eitilte níos lú ar an iomlán (Fíor 3). Léirigh mosquitoes óstach a sholáthair fual úr agus sean nó shiúcrós agus uisce patrúin eitilte ar leith (Fig. 3), le baineannaigh ag beathú ar fual úr-16 uair an chloig agus fual-16 níos gníomhaí. Thaispeáin cítos a chothaíodh ar fhual patrúin eitilte éagsúla agus b’in laethúil iad go príomha. Léirigh mosquitoes baineann a sholáthair siúcrós nó fual 72 uair an chloig gníomhaíocht ar feadh na tréimhse 24 uair an chloig, agus bhí baineannaigh a chuir uisce ar fáil níos gníomhaí le linn na tréimhse lár-thréimhse. 24 uair an chloig (Fíor 3).
Feidhmíocht eitilte sealgair-lorg fola-sucking baineann Anopheles arabinis bheathú ar fual bó agus úiré.Sa tástáil muileann eitilte, mosquitoes baineann chothaithe ar fual bó úr agus d'aois, bhí comhchruinnithe éagsúla úiré, siúcrós (10%), agus uisce driogtha (H2O) ceangailte le cothrománach, faoi shaoirse rothlú airm (thuas) agus airm eitilte (thuas). Taifeadadh s in aghaidh na huaire do gach aiste bia thar thréimhse 24 uair an chloig (dorcha: liath; solas: bán).Taispeántar meánfhad agus meánlíon babhtaí ar thaobh na láimhe deise den ghraf gníomhaíochta circadian. Léiríonn barraí earráide earráid chaighdeánach an mheáin.Anailís staidrimh féach an téacs
Go ginearálta, lean gníomhaíocht eitilte iomlán na mban ósta-lorg patrún cosúil leis an achar eitilte thar thréimhse 24-uair an chloig.Bhí tionchar suntasach ar mheánfhad eitilte ag aiste bia ionghabháil (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), agus óstaigh-iarraidh baineannaigh ionghabháil 72 uair an chloig fuail eitil gach achair bhfad níos faide i gcomparáid le gach achair i bhfad níos faide i gcomparáid le squit-00000000 aiste bia eile. es eitil níos faide ná úr (p = 0.022) agus fual 24-h-aois (p = 0.022)-chothaithe mosquitoes.I gcodarsnacht leis an patrún gníomhaíochta eitilte a thuairiscítear ag an aiste bia fual, úiré-chothaithe ósta-lorg baineannaigh taispeáint gníomhaíocht eitilte leanúnach thar thréimhse 24-h, buaic le linn an dara leath den óstach-3ú gníomhaíocht chothaithe). meánachar eitilte méadaithe go suntasach ag brath ar an tiúchan a shúitear (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001).Chothaigh baineannaigh ósta-chuardach aon tiúchan úiré níos faide ná mar a chothaíodh baineannaigh uisce nó siúcrós (p < 0.03).
Bhí gníomhaíocht eitilte foriomlán mosquitoes sucking fola cobhsaí agus marthanach thar 24 uair ar fud na n-aistí bia ar fad, le gníomhaíocht fual méadaithe le linn an dara leath den tréimhse dorcha do mhná a chothaítear ar uisce chomh maith le mná a chothaíodh úr agus 24 uair an chloig d'aois (íomhá 3). 138) = 1.36, p = 0.24).le fual eile agus aiste bia rialaithe (úr, p = 0.0091; 72 uair an chloig, p = 0.0022; 168 uair an chloig, p = 0.001; shiúcrós, p = 0.0017; dH2O, p = 0.).
Rinneadh measúnú ar éifeachtaí beathaithe fuail agus úiré ar pharaiméadair atáirgthe i mbiththástálacha breithe uibheacha (Fíor 4A) agus rinneadh imscrúdú orthu de réir líon na n-uibheacha a leag gach baineannach, méid na n-uibheacha, agus na chéad larbhaí instar nua-ghortaithe. Bhí éagsúlacht ag líon na n-uibheacha a leagadh.Bainínigh Arabacha a chothaítear le fual de réir an aiste bia (F(5,222) = 4.38, p F(5,222) = 4.38, p. Fual 4-uair an chloig, béile fola a leagan i bhfad níos mó uibheacha ná baineannaigh chothaithe aistí bia fuail eile agus bhí cosúil leo siúd a chothaithe siúcrós (Fig. 4B). Mar an gcéanna, an méid uibheacha a leagan ag baineannaigh fual-chothaithe éagsúil de réir aiste bia (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), le 24-huaire na mban agus uibheacha ur-chothaithe i bhfad níos mó ná baineann a leagan amach. s chothaithe le 168 h fual i bhfad níos lú (Fíor. 4C). Chomh maith leis sin, aiste bia fual difear suntasach méid larbha (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), le larbhaí i bhfad níos mó ag teacht chun cinn ó uibheacha a leagtar 24- agus 72-uair an chloig d'aois fual-chothaithe baineannaigh ná ó uibheacha a chothaítear fual-F 1860-bóna (F(5, 187) = 7.86, p <0.0001). 4D).
Feidhmíocht atáirgthe Anopheles arabinis baineann a bheathú ar fual bó agus úiré. Cothaíodh mosquitoes baineann a chothaítear le fuil ar aistí bia comhdhéanta d'fhuaal bó úr agus d'aois, tiúchain éagsúla úiré, siúcrós (10%), agus uisce driogtha (H2O) ar feadh 48 uair an chloig roimh a chur i mbithmheasúnú agus a fháil uimhriú uibheacha 4B, agus foshraith 4B (Egg-uimhriú), 8 uair an chloig agus méid uibheacha a leagan síos. Bhí tionchar suntasach ag an aiste bia ar mhéid larbhaí (D, G) ag an aiste bia a cuireadh ar fáil (fual bó: BD; úiré: EG). Bhí na modhanna do gach paraiméadar a tomhaiseadh ag baint úsáide as ainmneacha litreacha difriúla difriúil go mór óna chéile (ANOVA aon-bhealach ag baint úsáide as anailís post hoc Tukey; p <0.05). Is ionann barraí earráide agus earráid chaighdeánach an mheáin.
Mar an chomhpháirt nítrigineach mór fual, úiré, nuair a chuirtear ar fáil mar aiste bia do mhná a chothaítear fola, difear suntasach paraiméadair atáirgthe i ngach staidéar.Líon na n-uibheacha a leagtar ag baineannaigh chothaithe úiré, tar éis béile fola, ag brath ar tiúchan úiré (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), baineannaigh chothaithe úiré 1 µ 4 níos mó tiúchan (Figiúr 3 4 M) agus úiré idir 1 4. E). Leagann baineannaigh a chothaítear ar thiúchan úiré de 134 µM nó os a chionn uibheacha níos mó ná na mná a chothaítear ar uisce (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Fíor 4F), agus méid larbha, cé go raibh tionchar ag comhchruinnithe úiré i máithreacha (F(10, 330.0) níos mó); 4G).
Mealladh foriomlán chuig ósta-lorg fual buaibheach sleachta so-ghalaithe headspace.The arabiensis a measadh san olfactometer feadán gloine (Fíor 5A) go mór i bhfeidhm ag aois fuail (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fíor. 5B).Léirigh anailís post hoc go raibh gach leibhéal cóireála fuail stale4 = níos airde go suntasach: i gcomparáid le leibhéil 2 uair an chloig níos airde de chóireáil stale4 =: 2 uair an chloig stale4 níos airde. 0.0060, 168 uair an chloig: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Ach amháin i gcás boladh fual úr (p = 0.13; Fíor 5B). Cé nach raibh an mhealladh foriomlán mosquitoes fola-sucking chun boladh fuail difriúil go suntasach (χ2 = 8.74, dfig = 8.78, 7). a bheith i bhfad níos tarraingtí do eastóscáin so-ghalaithe ceannspáis i gcomparáid le fual d'aois 72 uair an chloig i gcomparáid le rialuithe (p = 0.0066; Fíor 5C).
Freagraí iompraíochta ar bholaithe fual bó nádúrtha agus sintéiseacha sa chuardach le haghaidh óstach agus fola-chothaithe Anopheles arabianus.Schematic an olfactometer feadán gloine (A).Mealladh sleachta so-ghalaithe headspace ó úr agus sean fual bó a óstáil (B) agus fola-sucking (C) mosquitoes.Faigh an imoibriú tentacled.Hespace-fresh (An Tiarnaí-2), sleachta an tentaclead. Taispeántar 72-uair an chloig (F), agus 168-uair an chloig (G) fual bó d'aois.Electron bhrath antenna (EAD) rianta a thaispeáint athruithe voltais mar fhreagra ar chomhdhúile bithghníomhacha sa headspace eluted as an crómatagraf gáis agus braite ag brathadóir ianúcháin lasair (FID). Is ionann an barra scála aimplitiúid freagartha (mV) versus rátaí coinneála h.A). Léiríonn réiltín aonair (*) freagra comhsheasmhach íseal-aimplitiúid. Léiríonn réiltíní dúbailte (**) freagraí neamh-atáirgthe.Faigh an t-óstach (H) agus an sucking fola (I) Tá achomhairc éagsúla ag An.arabiensis maidir le meascáin shintéiseacha de bholadh fual bó úr agus d'aois. Na comhréireanna meánacha de mosquitoes a mheall go mór le hainmneacha litreacha éagsúla ag baint úsáide as VA-ainmneacha eile;p < 0.05). Is ionann barraí earráide agus earráid chaighdeánach an scála
Mná Ann.arabiensis, 72 h agus 120 u tar éis béile fola, le linn sceathraí, níor léiríodh aon tosaíocht maidir le sleachta so-ghalaithe ceannspáis ó fhual bó úr agus sean i gcomparáid le rialuithe pentane (χ2 = 3.07, p > 0.05; Comhad breise 1: Fíor. S1).
D'aithin anailísí Ann.arabiensis baineann, GC-EAD agus GC-MS ocht, sé, trí agus trí chomhdhúil bithghníomhacha (Fíor 5D-G). Cé gur breathnaíodh difríochtaí i líon na gcomhdhúile a d'eascair freagairtí leictreifiseolaíocha, bhí an chuid is mó de na comhdhúile seo i láthair i ngach sliocht so-ghalaithe ceannspás a bailíodh ó fhual úr agus aosta.
Mhéadaigh ráta scaoilte iomlán na gcomhdhúile bithghníomhacha sa bhailiúchán headspace ó 29 µg h-1 i bhfual úr go 242 µg h-1 i bhfual 168 uair an chloig d'aois, go príomha mar gheall ar arduithe p-cresol agus m-formaildéad feanól chomh maith le feanól.I gcodarsnacht leis sin, laghdaigh rátaí scaoilte comhdhúile eile, mar shampla 2-cioclónán-coirnín agus rátaí scaoilte comhdhúile eile, mar shampla 2-cioclón-cioclón ag méadú. leis an laghdú faoi deara i déine comhartha (raidhse) sa chromatogram (Fig. 5D) -G painéal ar chlé) agus freagraí fiseolaíocha ar na comhdhúile (Fig. 5D-G painéal ceart).
Tríd is tríd, bhí cóimheas nádúrtha comhchosúil ag an meascán sintéiseach de chomhdhúile bithghníomhacha a aithníodh i sleachta so-ghalaithe de spásanna cinn fuail úra agus aosta (Fíor 5D–G) agus ní raibh an chuma air gur tharraing sé achomharc suntasach sa chuardach le haghaidh ósta (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Fíor. 5H), nó df. 30; Fíor 5I). Mar sin féin, léirigh comparáidí pairwise post hoc idir cóireálacha go raibh mosquitoes a bhí á lorg óstaigh go suntasach tarraingteach don mheascán sintéiseach d'fhual d'aois 24-h i gcomparáid le rialuithe pentane (p = 0.0086; Fíor 5H).
Chun measúnú a dhéanamh ar ról na gcomhpháirteanna aonair i meascáin shintéiseacha de fhual 24-h-aois, rinneadh sé mheascán dealaitheacha a mheas i gcoinne meascáin iomlána sa mheasúnacht Y-feadán, inar baineadh comhdhúile aonair.For mosquitoes óstach a lorg, bhí tionchar suntasach ag baint le comhdhúile aonair ón meascán iomlán ar fhreagraí iompraíochta (χ2 = 19.63, df = 0.63, df = comhad uile; I gcodarsnacht leis sin, ní raibh tionchar ag baint le comhdhúile aonair ón meascán iomlán sintéiseach ar fhreagraí iompraíochta mosquitoes sucking fola (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), cé is moite de dhíchanáil, a raibh leibhéil níos ísle mar thoradh air i gcomparáid leis an meascán iomlán Attraction (P.
I sráidbhaile maláire-eindéimeach san Aetóip, rinneadh meastóireacht ar éifeachtúlacht meascán sintéiseach d'fhual bó 24 uair an chloig chun mosquitoes a mhealladh faoi choinníollacha páirce ar feadh deich n-oíche (Fíor 6A). Gabhadh agus aithníodh 4,861 mosquitoes san iomlán, agus ba Anthropus.gambiae sl, 45.7% díobh sin Anthropus.gambiae sl, 18.5% sp. agus 18%. Comhad breise 1: Tábla S1).Is é Anopheles arabinis an t-aon bhall de choimpléasc speiceas An.Gambian a aithníodh trí anailís PCR.Ar an meán, gabhadh 320 mosquitoes in aghaidh na hoíche, agus le linn an ama ghlac gaistí le meascán sintéiseacha baits mosquitoes níos mó ná gaistí péireáilte gan mheascán (χ2(0, 3196) = 170.0, níor leagadh na cúig gaistí ar gach <-1 0 <-1) ar gach <-100. oícheanta rialaithe ag tús, lár, agus deireadh na trialach.Gabhadh líon comhchosúla mosquitoes i ngach péire gaistí, rud a léiríonn nach raibh aon chlaonadh idir tithe (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) agus níor tháinig aon laghdú ar an daonra le linn na tréimhse staidéir. 7) = 138.7, p < 0.0001), beathú fola le déanaí (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) agus toirchis (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123;Comhad breise 1: Tábla S1). Léirítear é seo freisin i líon iomlán na mosquitoes a gabhadh: ósta ag lorg > sú fola > ag iompar clainne > leath-toirchis > fireannach.
Measúnú allamuigh ar éifeachtúlacht meascán boladh fual bó sintéiseach 24 uair an chloig.Rinneadh trialacha réimse i ndeisceart-lárnach na hAetóipe (léarscáil), in aice le baile Maki (cuir isteach), ag baint úsáide as gaiste solais Ionaid um Rialú Galar (CDC) (ar dheis) i dtithe péireáilte, le dearadh cearnach Laidineach (íomhá ón aer) (A). Meallann boladh sintéiseacha agus CDC Anquepsele (capes Anquepsele) a bhfuil boladh orthu agus a bhfuil an-bhaoite orthu), Anquepsopheles ar a dtugtar CDC, Anquepsele, Anquepsele, CDC. oes (C), ar bhealach difriúil, éifeacht fiseolaíocha stát-spleách. Ina theannta sin, na gaistí a gabhadh méadú suntasach ar líon na mosquitoes Culex ósta.(D) I gcomparáid le control.The barraí ar chlé ionadaíocht a dhéanamh ar an meán-innéacs roghnú na mosquitoes gafa i mbeirteanna bhaoite odorant (glas) agus rialú (oscailte) gaistí (N = 10), agus na barraí rialaithe innéacs ar dheis ionadaíocht a dhéanamh ar N = 5;).Léiríonn réiltíní leibhéil shuntasacha staidrimh (*p = 0.01 agus ***p < 0.0001)
Gabhadh na trí speiceas go héagsúil i gaistí ina raibh meascáin shintéiseacha. Bhíothas ag lorg óstach (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), beathú fola (χ2(1, 517) = 16.7, p <0.0001) agus toirchis (χ2(1, 64.03). gafa sa gaiste scaoileadh an meascán sintéiseach (Fig. 6 B), cé nach raibh an méid An difríocht. Fuarthas amach go raibh Pharoensis i stáit fiseolaíocha éagsúla (Fíor. 6C). Maidir le Culex, níor aimsíodh ach méadú suntasach ar líon na mosquitoes a bhí ag lorg ina hóstach i gaistí a raibh baint acu leis an meascán sintéiseach (χ2(1,1,1319) = χ2(1,1,1319) = 12.6, gaistí i gcomparáid le gaistí = 12.6).
Baineadh úsáid as gaistí bhaoite ósta atá suite taobh amuigh de ina hóstach féideartha idir láithreáin pórúcháin agus pobail tuaithe san Aetóip chun measúnú a dhéanamh cibé an n-úsáideann mosquitoes maláire boladh fual bó mar chue gnáthóg óstach.In éagmais leideanna óstach, teas, agus le nó gan láithreacht boladh fual bó, níor gabhadh aon mosquitoes (Comhad breise 1: Fíor S3). Mar sin féin, mheall an teocht ard agus láithreacht moquitoes urw baineann i láthair na huaire agus na n-uachtair ard. , cé gur líon beag é, neamhspleách ar aois fuail (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Comhad breise 1: Fíor S3 ). I gcodarsnacht leis sin, níor ghlac rialuithe uisce mosquitoes maláire ag teochtaí arda (Comhad Breise 1: Fíor S3).
Faigheann agus dáileann mosquitoes maláire comhdhúile ina bhfuil nítrigin trí bheathú cúiteach ar fhual bó (.i. locháin) chun tréithe staire na beatha a fheabhsú, cosúil le feithidí eile [2, 4, 24, 25, 26]. Is acmhainn in-athnuaite atá ar fáil go héasca é fual bó a bhfuil dlúthbhaint aige le háiteanna scíthe do veicteora maláire, mar shampla áiteanna scíthe do veicteora maláire agus spásanna gar do veicteora maláire. aimsíonn quitoes an acmhainn seo trí bholadh agus tá siad in ann iontógáil na gcomhdhúile nítrigineacha sa fual a rialáil, lena n-áirítear úiré, an phríomh-chomhpháirt nítrigineach i bhfual [15, 16]. s ról cothaitheach tábhachtach do veicteoirí maláire atá dúnta cosúil le daoine fásta míchothaithe [8], mar a sholáthraíonn sé mosquitoes baineann leis an gcumas a fháil comhdhúile nítrigineach tábhachtach trí rannpháirtíocht i mbeathú riosca íseal.Tá iarmhairtí suntasacha eipidéimeolaíochta, mar baineannaigh méadú ar a n-ionchas saoil, gníomhaíocht agus aschur atáirgthe, a théann i bhfeidhm ar fad acmhainn veicteoir. Ina theannta sin, d'fhéadfadh sé seo a bheith mar sprioc de chláir bainistíochta veicteora sa todhchaí.