Wasu batutuwa na warware matsaloli na LC ba sa taɓa zama na zamani, domin akwai matsaloli a cikin aikin LC, duk da cewa fasahar kayan aiki ta inganta akan lokaci. Akwai hanyoyi da yawa da matsaloli za su iya tasowa a cikin tsarin LC kuma su ƙare cikin mummunan yanayin kololuwa. Lokacin da matsaloli da suka shafi siffar kololuwa suka taso, taƙaitaccen jerin abubuwan da za su iya haifar da waɗannan sakamakon yana taimakawa wajen sauƙaƙa mana ƙwarewar warware matsaloli.
Yana da daɗi rubuta wannan shafi na "Maganin Matsalolin LC" da kuma tunanin batutuwa kowane wata, saboda wasu batutuwa ba sa fita daga salon. Yayin da ake binciken chromatography, wasu batutuwa ko ra'ayoyi sun tsufa yayin da sabbin ra'ayoyi da mafi kyau suka maye gurbinsu, a fannin magance matsaloli, tun lokacin da labarin farko na magance matsaloli ya bayyana a cikin wannan mujallar (Jaridar LC a lokacin) tunda wasu batutuwa har yanzu suna da mahimmanci) a cikin 1983(1). A cikin 'yan shekarun nan, na mayar da hankali kan sassan magance matsaloli na LC da yawa kan yanayin zamani da ke shafar chromatography na ruwa (LC) (misali, kwatancen fahimtarmu game da tasirin matsin lamba akan riƙewa [2] Sabbin Ci gaba) Fassararmu game da sakamakon LC da yadda ake magance matsaloli tare da kayan aikin LC na zamani. A cikin kashi na wannan watan, ina ci gaba da jerina (3), wanda ya fara a watan Disamba 2021, wanda ya mayar da hankali kan wasu batutuwa na "rayuwa da mutuwa" na magance matsaloli na LC - abubuwan da suka dace ga kowane mai warware matsaloli suna da mahimmanci, komai shekarun tsarin da muke amfani da su. Babban batun wannan jerin yana da matukar dacewa da shahararrun LCGC Jadawalin bango na "Jagorar Magance Matsalolin LC" (4) yana rataye a dakunan gwaje-gwaje da yawa. A kashi na uku na wannan jerin, na zaɓi mayar da hankali kan batutuwan da suka shafi siffar kololuwa ko halayen kololuwa. Abin mamaki, jadawalin bango ya lissafa dalilai 44 daban-daban na rashin kyawun siffar kololuwa! Ba za mu iya yin la'akari da duk waɗannan batutuwa dalla-dalla a cikin wani kasida ba, don haka a cikin wannan kashi na farko kan batun, zan mayar da hankali kan wasu daga cikin waɗanda na fi gani akai-akai. Ina fatan matasa da tsofaffi masu amfani da LC za su sami wasu shawarwari masu taimako da tunatarwa kan wannan muhimmin batu.
Ina samun kaina ina ƙara amsa tambayoyin warware matsaloli da "komai yana yiwuwa". Wannan amsar na iya zama da sauƙi idan aka yi la'akari da abubuwan da aka lura waɗanda ke da wahalar fassara, amma sau da yawa ina ganin ya dace. Tare da dalilai da yawa da ke haifar da mummunan yanayin kololuwa, yana da mahimmanci a kasance a buɗe yayin la'akari da abin da matsalar za ta iya kasancewa, da kuma iya fifita abubuwan da za su iya haifarwa don fara ƙoƙarin magance matsaloli, tare da mai da hankali kan waɗannan abubuwan da suka fi yawa, wannan batu yana da matuƙar muhimmanci.
Babban mataki a cikin kowace aikin gyara matsala - amma wanda nake ganin ba a kimanta shi sosai ba - shine fahimtar cewa akwai matsala da ke buƙatar a warware ta. Fahimtar cewa akwai matsala sau da yawa yana nufin fahimtar cewa abin da ke faruwa da kayan aikin ya bambanta da tsammaninmu, wanda ka'ida, ilimin gwaji, da gogewa suka tsara (5). "Siffar kololuwa" da aka ambata a nan a zahiri ba wai kawai tana nufin siffar kololuwa ba (daidaitacce, rashin daidaituwa, santsi, laushi, gefen jagora, wutsiya, da sauransu), har ma da faɗin. Tsammaninmu na ainihin siffar kololuwa abu ne mai sauƙi. Ka'ida (6) tana goyon bayan tsammanin littafin karatu cewa, a mafi yawan lokuta, kololuwa na chromatographic ya kamata su kasance masu daidaito kuma su dace da siffar rarrabawar Gaussian, kamar yadda aka nuna a Hoto na 1a. Abin da muke tsammani daga faɗin kololuwa batu ne mai rikitarwa, kuma za mu tattauna wannan batu a cikin wani labarin gaba. Sauran siffofi na kololuwa a Hoto na 1 suna nuna wasu daga cikin sauran damar da za a iya lura da su - a wata ma'anar, wasu hanyoyin da abubuwa za su iya yin kuskure. A cikin sauran wannan kashi, za mu ɗauki lokaci muna tattauna wasu takamaiman misalai na yanayi waɗanda zai iya haifar da waɗannan nau'ikan siffofi.
Wani lokaci ba a lura da kololuwa kwata-kwata a cikin chromatogram inda ake sa ran za a cire su. Jadawalin bango da ke sama yana nuna cewa rashin kololuwa (idan samfurin ya ƙunshi mai nazarin manufa a wani taro wanda ya kamata ya sa amsawar na'urar ganowa ta isa ta ganta sama da hayaniyar) yawanci yana da alaƙa da wasu matsalolin kayan aiki ko yanayin yanayin motsi mara daidai (idan an lura da shi kwata-kwata). kololuwa, yawanci ma "marasa ƙarfi"). Ana iya samun ɗan gajeren jerin matsaloli da mafita a cikin wannan rukuni a cikin Tebur na I.
Kamar yadda aka ambata a sama, tambayar yawan faɗaɗa kololuwar da ya kamata a yi la'akari da ita kafin a mai da hankali da kuma ƙoƙarin gyara ta batu ne mai sarkakiya da zan tattauna a cikin wani kasidar da za ta gaba. Kwarewata ita ce, faɗaɗa kololuwar da ta fi girma sau da yawa tana tare da babban canji a siffar kololuwar, kuma faɗaɗa kololuwar ta fi yawa fiye da kafin kololuwar ko rabuwa. Duk da haka, ana faɗaɗa kololuwar da ta fi kama da juna, wanda wasu dalilai daban-daban na iya haifarwa:
An tattauna kowanne daga cikin waɗannan batutuwa dalla-dalla a cikin fitowar da ta gabata ta LC ta Magance Matsaloli, kuma masu karatu masu sha'awar waɗannan batutuwa za su iya komawa zuwa waɗannan labaran da suka gabata don samun bayanai kan tushen abubuwan da ke haifar da su da kuma hanyoyin magance su. Ƙarin bayani.
Fitowar kololuwa, gaban kololuwa, da rabuwar dukkansu na iya faruwa ne sakamakon sinadarai ko na zahiri, kuma jerin hanyoyin magance waɗannan matsalolin sun bambanta sosai, ya danganta da ko muna fama da matsalar sinadarai ko ta zahiri. Sau da yawa, ta hanyar kwatanta kololuwa daban-daban a cikin chromatogram, zaku iya samun muhimman alamu game da wanne ne ya jawo hakan. Idan duk kololuwa a cikin chromatogram sun nuna siffofi iri ɗaya, wataƙila dalilin ba na zahiri bane. Idan ɗaya ko kaɗan ko kaɗan kololuwa suka shafa, amma sauran sun yi kyau, wataƙila sanadin shine sinadarai.
Abubuwan da ke haifar da sinadarin kololuwar kololuwar kololuwar kololuwar sun yi tsauri sosai don a tattauna a nan a taƙaice. Mai karatu mai sha'awar an tura shi zuwa ga fitowar "Maganin Magance Matsalolin LC" ta kwanan nan don tattaunawa mai zurfi (10). Duk da haka, abu mai sauƙi da za a gwada shi ne rage nauyin mai nazarin allurar a ga ko siffar kololuwar ta inganta. Idan haka ne, to wannan kyakkyawan alama ce cewa matsalar ita ce "yawan nauyi". A wannan yanayin, dole ne a iyakance hanyar zuwa allurar ƙananan taro na analyte, ko kuma a canza yanayin chromatographic don a sami kyawawan siffofi ko da tare da manyan taro da aka allura.
Akwai kuma dalilai da yawa na zahiri da ke haifar da kololuwar ...
Gaban kololuwa kamar waɗanda aka nuna a Hoto na 1e suma ana iya haifar su ta hanyar matsalolin jiki ko sinadarai. Wani dalili na zahiri na gefen gaba shine rashin cikar barbashi na ginshiƙin, ko kuma ƙwayoyin sun sake tsara su akan lokaci. Kamar yadda yake da taurin kololuwa da wannan abin da ya faru na zahiri ya haifar, hanya mafi kyau don gyara wannan shine a maye gurbin ginshiƙin kuma a ci gaba da tafiya. Ainihin, siffofi na gefen gaba masu asali tare da asalin sinadarai sau da yawa suna tasowa daga abin da muke kira yanayin riƙewa "marasa layi". A ƙarƙashin yanayi mai kyau (layi), adadin analyte da aka riƙe ta hanyar matakin tsayawa (saboda haka, abin riƙewa) yana da alaƙa da daidaituwar analyte a cikin ginshiƙin. A fannin Chromatographic, wannan yana nufin cewa yayin da nauyin analyte da aka allura a cikin ginshiƙin ke ƙaruwa, ƙololuwa yana ƙaruwa, amma ba faɗi ba. Wannan dangantaka tana karyewa lokacin da ɗabi'ar riƙewa ba ta layi ba ce, kuma ƙololuwa ba wai kawai suna zama tsayi ba har ma suna faɗaɗa yayin da ake allurar ƙarin nauyi. Bugu da ƙari, siffofi marasa layi suna ƙayyade siffar ƙololuwa masu layi, wanda ke haifar da gefuna masu jagora ko masu bi. Kamar yadda yake da yawan taro wanda ke haifar da taurin kololuwa (10), ƙololuwa Ana iya gano cutar da ke haifar da riƙewa mara layi ta hanyar rage yawan sinadarin da aka yi wa allurar. Idan siffar kololuwar ta inganta, dole ne a gyara hanyar don kada ta wuce ingancin allurar da ke haifar da gefen gaba, ko kuma a canza yanayin chromatographic don rage wannan halayyar.
Wani lokaci muna lura da abin da ya bayyana a matsayin kololuwar "raba", kamar yadda aka nuna a Hoto na 1f. Mataki na farko wajen magance wannan matsalar shine a tantance ko siffar kololuwar ta samo asali ne daga wani ɓangare na haɗin gwiwa (watau, kasancewar mahaɗan guda biyu daban-daban amma masu fitar da hankali). Idan akwai masu nazarin abubuwa guda biyu daban-daban da ke fitowa kusa da juna, to batun inganta ƙudurinsu ne (misali, ta hanyar ƙara zaɓin abubuwa, riƙewa, ko ƙidayar faranti), kuma kololuwar "raba" da ke bayyana suna da alaƙa da Aiki na zahiri ba shi da alaƙa da ginshiƙin kanta. Sau da yawa, mafi mahimmancin alamar wannan shawara ita ce ko duk kololuwar da ke cikin chromatogram suna nuna siffofi masu raba, ko ɗaya ko biyu kawai. Idan ɗaya ko biyu ne kawai, wataƙila batun haɗin gwiwa ne; idan duk kololuwar sun rabu, wataƙila matsala ce ta zahiri, wataƙila tana da alaƙa da ginshiƙin kanta.
Kololuwar da suka rabu da halayen zahiri na ginshiƙin kanta yawanci suna faruwa ne sakamakon toshewar wani ɓangare na shigarwa ko fitarwa, ko sake tsara barbashi a cikin ginshiƙin, yana barin matakin motsi ya gudana da sauri fiye da matakin motsi a wasu yankuna na samuwar tashar ginshiƙin. A wasu yankuna (11). frit ɗin da ya toshe wani ɓangare ana iya share shi ta hanyar juya kwararar ta cikin ginshiƙin; duk da haka, a cikin gogewata, wannan yawanci mafita ce ta ɗan gajeren lokaci maimakon mafita ta dogon lokaci. Wannan sau da yawa yana kashe mutane da ginshiƙan zamani idan ƙwayoyin suka sake haɗuwa a cikin ginshiƙin. A wannan lokacin, ya fi kyau a maye gurbin ginshiƙin kuma a ci gaba.
Kololuwar da ke cikin Hoto na 1g, wanda kuma aka samo daga wani bincike na kwanan nan a dakin gwaje-gwaje na, yawanci yana nuna cewa siginar tana da girma sosai har ta kai ga ƙarshen kewayon amsawa. Ga na'urorin gano shaye-shaye na gani (UV-vis a wannan yanayin), lokacin da yawan na'urar tantancewa ya yi yawa, na'urar tantancewa tana shan yawancin hasken da ke ratsa ta cikin ƙwayar kwararar na'urar ganowa, tana barin ƙaramin haske da za a gano. A ƙarƙashin waɗannan yanayi, siginar lantarki daga na'urar gano hoto tana da tasiri sosai ta hanyar hanyoyin hayaniya daban-daban, kamar hasken da ya ɓace da "ƙarshen wutan lantarki", wanda ke sa siginar ta yi "haushi" a bayyanar kuma ba tare da la'akari da yawan na'urar tantancewa ba. Lokacin da wannan ya faru, sau da yawa ana iya magance matsalar cikin sauƙi ta hanyar rage girman allurar na'urar tantancewa - rage girman allurar, rage samfurin, ko duka biyun.
A makarantar chromatography, muna amfani da siginar ganowa (watau, axis y a cikin chromatogram) a matsayin alamar yawan nazarin analyte a cikin samfurin. Don haka yana da ban mamaki a ga chromatogram mai sigina ƙasa da sifili, domin fassarar mai sauƙi ita ce wannan yana nuna yawan nazarin analyte mara kyau - wanda ba shakka ba zai yiwu a zahiri ba. A cikin kwarewata, galibi ana lura da kololuwar korau lokacin amfani da na'urorin gano shaye-shaye na gani (misali, UV-vis).
A wannan yanayin, kololuwar kololuwar mara kyau kawai yana nufin cewa ƙwayoyin da ke fitowa daga ginshiƙi suna shan ƙarancin haske fiye da matakin wayar hannu nan da nan kafin da kuma bayan kololuwar. Wannan na iya faruwa, misali, lokacin amfani da ƙarancin tsawon ganowa (<230 nm) da ƙarin matakan motsi waɗanda ke shan yawancin hasken a waɗannan tsawon. Irin waɗannan ƙarin na iya zama abubuwan narkewa na lokaci-lokaci na hannu kamar methanol ko abubuwan buffer kamar acetate ko formate. Mutum zai iya amfani da kololuwar mara kyau don shirya lanƙwasa daidaitawa da samun ingantaccen bayanai na adadi, don haka babu wani dalili na asali don guje musu (wannan hanyar wani lokacin ana kiranta da "gano UV kai tsaye") (13). Duk da haka, idan da gaske muna son guje wa kololuwar mara kyau gaba ɗaya, idan ana maganar gano sha, mafi kyawun mafita shine a yi amfani da wani tsawon ganowa daban don mai nazarin ya sha fiye da matakin wayar hannu, ko kuma canza abun da ke cikin matakin wayar hannu don su sha ƙasa da haske fiye da masu nazarin.
Kololuwar da ba su da kyau kuma na iya bayyana yayin amfani da gano ma'aunin refractive (RI) lokacin da ma'aunin refractive na abubuwan da ba na analyte a cikin samfurin ba, kamar ma'aunin solvent, ya bambanta da ma'aunin refractive na matakin wayar hannu. Wannan kuma yana faruwa ne da gano UV-vis, amma wannan tasirin yana raguwa idan aka kwatanta da gano RI. A duka halayen biyu, ana iya rage kololuwar da ba su da kyau ta hanyar daidaita abun da ke cikin ma'aunin samfurin da na matakin wayar hannu.
A kashi na uku kan batun magance matsalar LC, na tattauna yanayin da siffar kololuwar da aka lura ta bambanta da siffar kololuwar da ake tsammani ko ta al'ada. Ingantaccen gyara irin waɗannan matsalolin yana farawa ne da sanin siffofin kololuwar da ake tsammani (bisa ga ka'ida ko ƙwarewar da ta gabata tare da hanyoyin da ake da su), don haka karkacewa daga waɗannan tsammanin a bayyane yake. Matsalolin siffar kololuwar suna da dalilai daban-daban masu yuwuwar (faɗi sosai, wutsiya, gefen gaba, da sauransu). A cikin wannan kashi, na tattauna dalla-dalla wasu daga cikin dalilan da na fi gani akai-akai. Sanin waɗannan cikakkun bayanai yana ba da kyakkyawan wuri don fara magance matsala, amma bai kama duk yiwuwar ba. Masu karatu da ke sha'awar jerin dalilai da mafita masu zurfi za su iya komawa zuwa jadawalin bango na LCGC "Jagorar Magance Matsalolin LC".
(4) Jadawalin bango na LCGC "Jagorar Magance Matsalolin LC". https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Nazarin Bayanai da Sarrafa Sigina a Tsarin Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), shafi na 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF da Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.