कालांतराने उपकरणाचे तंत्रज्ञान सुधारत असले तरी, एलसीच्या कार्यपद्धतीत नवनवीन समस्या येत असल्याने, एलसी समस्यानिवारणाचे काही विषय कधीही कालबाह्य होत नाहीत. एलसी प्रणालीमध्ये अनेक मार्गांनी समस्या उद्भवू शकतात आणि त्यामुळे पीकचा आकार खराब होऊ शकतो. जेव्हा पीकच्या आकाराशी संबंधित समस्या उद्भवतात, तेव्हा या परिणामांच्या संभाव्य कारणांची एक छोटी यादी आपले समस्यानिवारण सोपे करण्यास मदत करते.
हा “एलसी ट्रबलशूटिंग” स्तंभ लिहिताना आणि दर महिन्याला विषयांवर विचार करताना खूप मजा आली आहे, कारण काही विषय कधीही कालबाह्य होत नाहीत. क्रोमॅटोग्राफी संशोधनाच्या क्षेत्रात, काही विषय किंवा कल्पना नवीन आणि चांगल्या कल्पनांमुळे कालबाह्य होतात, तर ट्रबलशूटिंगच्या क्षेत्रात, १९८३ मध्ये या जर्नलमध्ये (त्यावेळचे एलसी जर्नल) पहिला ट्रबलशूटिंग लेख प्रकाशित झाल्यापासून (१), काही विषय आजही संबंधित आहेत. गेल्या काही वर्षांपासून, मी एलसी ट्रबलशूटिंगचे अनेक विभाग लिक्विड क्रोमॅटोग्राफीवर (एलसी) परिणाम करणाऱ्या समकालीन ट्रेंडवर केंद्रित केले आहेत (उदाहरणार्थ, रिटेंशनवर दाबाच्या परिणामाबद्दलच्या आपल्या समजाची सापेक्ष तुलना [२] नवीन प्रगती), एलसी परिणामांचा आपला अर्थ आणि आधुनिक एलसी उपकरणांसह ट्रबलशूटिंग कसे करावे. या महिन्याच्या भागात, मी माझी मालिका (३) सुरू ठेवत आहे, जी डिसेंबर २०२१ मध्ये सुरू झाली होती आणि एलसी ट्रबलशूटिंगच्या काही "जीवन-मरणाच्या" विषयांवर केंद्रित होती — असे घटक जे कोणत्याही ट्रबलशूटरसाठी उत्कृष्ट आणि आवश्यक आहेत, आपण वापरत असलेल्या प्रणालीचे वय काहीही असो. वापरत आहेत. या मालिकेचा मुख्य विषय अनेक प्रयोगशाळांमध्ये लावलेल्या LCGC च्या प्रसिद्ध “LC ट्रबलशूटिंग गाईड” वॉल चार्ट (4) शी अत्यंत संबंधित आहे. या मालिकेच्या तिसऱ्या भागासाठी, मी पीक शेप किंवा पीक कॅरॅक्टरिस्टिक्सशी संबंधित समस्यांवर लक्ष केंद्रित करण्याचे निवडले आहे. आश्चर्यकारकपणे, वॉल चार्टमध्ये खराब पीक शेपची 44 वेगवेगळी संभाव्य कारणे सूचीबद्ध आहेत! आपण एका लेखात या सर्व समस्यांचा तपशीलवार विचार करू शकत नाही, म्हणून या विषयावरील या पहिल्या भागात, मी मला सर्वात जास्त वेळा दिसणाऱ्या काही समस्यांवर लक्ष केंद्रित करेन. मला आशा आहे की तरुण आणि वृद्ध LC वापरकर्त्यांना या महत्त्वाच्या विषयावर काही उपयुक्त टिप्स आणि स्मरणपत्रे मिळतील.
समस्यानिवारणाच्या प्रश्नांची उत्तरे देताना मी अधिकाधिक वेळा “काहीही शक्य आहे” असे म्हणत असतो. ज्या निरीक्षणांचा अर्थ लावणे कठीण असते, त्यांचा विचार करता हे उत्तर सोपे वाटू शकते, पण मला ते अनेकदा योग्य वाटते. पीकचा आकार खराब होण्याची अनेक संभाव्य कारणे असल्यामुळे, समस्या नेमकी काय असू शकते याचा विचार करताना मन मोकळे ठेवणे महत्त्वाचे आहे. तसेच, समस्यानिवारणाचे प्रयत्न सुरू करण्यासाठी संभाव्य कारणांना प्राधान्य देणे आणि त्या सर्वात सामान्य शक्यतांवर लक्ष केंद्रित करणे महत्त्वाचे आहे.
कोणत्याही समस्यानिवारण प्रक्रियेतील एक महत्त्वाची पायरी — पण मला वाटते की जिचे महत्त्व कमी लेखले जाते — ती म्हणजे सोडवण्याची गरज असलेली समस्या आहे हे ओळखणे. समस्या आहे हे ओळखण्याचा अर्थ अनेकदा असा होतो की, साधनासोबत जे घडते ते आपल्या अपेक्षांपेक्षा वेगळे आहे हे ओळखणे, ज्या अपेक्षा सिद्धांत, अनुभवजन्य ज्ञान आणि अनुभवाने (5) तयार झालेल्या असतात. येथे उल्लेखलेला “शिखराचा आकार” (peak shape) प्रत्यक्षात केवळ शिखराच्या आकारालाच (सममित, असममित, गुळगुळीत, मऊ, अग्रभाग, शेपटीसारखा भाग, इत्यादी) नव्हे, तर त्याच्या रुंदीलाही सूचित करतो. प्रत्यक्ष शिखराच्या आकाराबद्दलच्या आपल्या अपेक्षा सोप्या आहेत. सिद्धांत (6) पाठ्यपुस्तकातील अपेक्षेला चांगला आधार देतो की, बहुतेक प्रकरणांमध्ये, क्रोमॅटोग्राफिक शिखरे सममित असावीत आणि आकृती 1a मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे गॉसियन वितरणाच्या आकाराशी जुळणारी असावीत. शिखराच्या रुंदीकडून आपल्या काय अपेक्षा आहेत हा एक अधिक गुंतागुंतीचा मुद्दा आहे आणि आपण या विषयावर भविष्यातील लेखात चर्चा करू. आकृती 1 मधील इतर शिखरांचे आकार काही इतर शक्यता दर्शवतात ज्यांचे निरीक्षण केले जाऊ शकते — दुसऱ्या शब्दांत, काही गोष्टी चुकीच्या होण्याचे मार्ग. या भागाच्या उर्वरित भागात, आपण वेळ घालवू. या आकार प्रकारांना कारणीभूत ठरू शकणाऱ्या परिस्थितींच्या काही विशिष्ट उदाहरणांवर चर्चा करणे.
काहीवेळा क्रोमॅटोग्राममध्ये, जिथे शिखरे अपेक्षित असतात, तिथे ती अजिबात दिसत नाहीत. वरील वॉल चार्ट दर्शवितो की शिखराची अनुपस्थिती (असे गृहीत धरून की नमुन्यामध्ये लक्ष्यित विश्लेषक अशा एकाग्रतेत आहे की ज्यामुळे डिटेक्टरचा प्रतिसाद नॉईजच्या वर ते पाहण्यासाठी पुरेसा असेल) ही सहसा उपकरणातील काही समस्येशी किंवा चुकीच्या मोबाइल फेजच्या स्थितीशी संबंधित असते (जर शिखरे दिसलीच तर). या श्रेणीतील संभाव्य समस्या आणि उपायांची एक संक्षिप्त सूची तक्ता I मध्ये आढळू शकते.
वर नमूद केल्याप्रमाणे, पीक ब्रॉडनिंगकडे लक्ष देण्यापूर्वी आणि ते दुरुस्त करण्याचा प्रयत्न करण्यापूर्वी ते किती प्रमाणात सहन केले पाहिजे हा एक गुंतागुंतीचा विषय आहे, ज्यावर मी भविष्यातील लेखात चर्चा करेन. माझा अनुभव असा आहे की, लक्षणीय पीक ब्रॉडनिंगसोबत अनेकदा पीकच्या आकारातही लक्षणीय बदल होतो आणि प्री-पीक किंवा स्प्लिटिंगपेक्षा पीक टेलिंग अधिक सामान्य आहे. तथापि, नाममात्र सममित पीक्स देखील रुंद होतात, ज्याची काही भिन्न कारणे असू शकतात:
यापैकी प्रत्येक समस्येवर 'ट्रबलशूटिंग एलसी'च्या मागील अंकांत सविस्तर चर्चा करण्यात आली आहे, आणि या विषयांमध्ये रस असलेले वाचक या समस्यांची मूळ कारणे व संभाव्य उपायांबद्दल माहितीसाठी हे मागील लेख पाहू शकतात. अधिक तपशील.
पीक टेलिंग, पीक फ्रंटिंग आणि स्प्लिटिंग हे सर्व रासायनिक किंवा भौतिक घटनांमुळे होऊ शकतात आणि आपण रासायनिक समस्येशी सामना करत आहोत की भौतिक, यावर अवलंबून या समस्यांवरील संभाव्य उपायांची यादी मोठ्या प्रमाणात बदलते. बऱ्याचदा, क्रोमॅटोग्राममधील वेगवेगळ्या पीक्सची तुलना करून, दोष नेमका कशाचा आहे याबद्दल महत्त्वाचे संकेत मिळू शकतात. जर क्रोमॅटोग्राममधील सर्व पीक्स समान आकार दर्शवत असतील, तर त्याचे कारण बहुधा भौतिक नसते. जर फक्त एक किंवा काही पीक्स प्रभावित झाले असतील, परंतु बाकीचे ठीक दिसत असतील, तर त्याचे कारण बहुधा रासायनिक असते.
पीक टेलिंगची रासायनिक कारणे इतकी गुंतागुंतीची आहेत की त्यांची येथे थोडक्यात चर्चा करणे शक्य नाही. अधिक सखोल चर्चेसाठी, इच्छुक वाचकांना “एलसी ट्रबलशूटिंग” च्या अलीकडील अंकाचा संदर्भ दिला जातो (10). तथापि, एक सोपी गोष्ट म्हणजे इंजेक्ट केलेल्या ॲनालाइटचे वस्तुमान कमी करून पाहणे आणि पीकचा आकार सुधारतो का हे तपासणे. तसे झाल्यास, ही एक चांगली सूचना आहे की समस्या “मास ओव्हरलोड” आहे. या प्रकरणात, पद्धत कमी ॲनालाइट वस्तुमान इंजेक्ट करण्यापुरती मर्यादित केली पाहिजे, किंवा क्रोमॅटोग्राफिक परिस्थिती बदलली पाहिजे जेणेकरून जास्त वस्तुमान इंजेक्ट करूनही चांगले पीक आकार मिळवता येतील.
पीक टेलिंगची अनेक संभाव्य भौतिक कारणे देखील आहेत. शक्यतांच्या सविस्तर चर्चेत रस असलेल्या वाचकांना “एलसी ट्रबलशूटिंग” (11) च्या दुसऱ्या अलीकडील अंकाचा संदर्भ दिला जातो. पीक टेलिंगच्या अधिक सामान्य भौतिक कारणांपैकी एक म्हणजे इंजेक्टर आणि डिटेक्टरमधील एका बिंदूवर खराब कनेक्शन (12). एक टोकाचे उदाहरण आकृती 1d मध्ये दाखवले आहे, जे काही आठवड्यांपूर्वी माझ्या लॅबमध्ये मिळाले. या प्रकरणात, आम्ही एक नवीन इंजेक्शन व्हॉल्व्ह असलेली प्रणाली तयार केली जी आम्ही यापूर्वी वापरली नव्हती, आणि स्टेनलेस स्टीलच्या कॅपिलरीवर मोल्ड केलेल्या फेरूलसह एक लहान व्हॉल्यूम इंजेक्शन लूप स्थापित केला. काही सुरुवातीच्या ट्रबलशूटिंग प्रयोगांनंतर, आमच्या लक्षात आले की इंजेक्शन व्हॉल्व्ह स्टेटरमधील पोर्टची खोली आमच्या सवयीपेक्षा खूप जास्त होती, ज्यामुळे पोर्टच्या तळाशी मोठा डेड व्हॉल्यूम तयार झाला होता. इंजेक्शन लूपला दुसऱ्या ट्यूबने बदलून ही समस्या सहज सोडवता येते, आपण पोर्टच्या तळाशी असलेला डेड व्हॉल्यूम काढून टाकण्यासाठी फेरूलला योग्य स्थितीत समायोजित करू शकतो.
आकृती 1e मध्ये दाखवल्याप्रमाणे शिखराचे पुढचे भाग (पीक फ्रंट्स) भौतिक किंवा रासायनिक समस्यांमुळे देखील होऊ शकतात. पुढच्या कडेचे एक सामान्य भौतिक कारण म्हणजे कॉलममधील कणांचा थर व्यवस्थित भरलेला नसणे, किंवा कालांतराने कणांची पुनर्रचना होणे. या भौतिक घटनेमुळे होणाऱ्या शिखराच्या शेपटीप्रमाणेच, हे दुरुस्त करण्याचा सर्वोत्तम मार्ग म्हणजे कॉलम बदलून काम चालू ठेवणे. मुळात, रासायनिक मूळ असलेले पुढच्या कडेचे शिखराचे आकार अनेकदा ज्याला आपण "नॉन-लिनियर" रिटेन्शन कंडिशन्स म्हणतो त्यातून उद्भवतात. आदर्श (लिनियर) परिस्थितीत, स्थिर अवस्थेद्वारे (स्टेशनरी फेज) रोखून धरलेल्या विश्लेषकाचे (ॲनालाइटचे) प्रमाण (म्हणजेच, रिटेन्शन फॅक्टर) हे कॉलममधील विश्लेषकाच्या एकाग्रतेशी रेषीय (लिनियर) संबंधित असते. क्रोमॅटोग्राफिकदृष्ट्या, याचा अर्थ असा की कॉलममध्ये इंजेक्ट केलेल्या विश्लेषकाचे वस्तुमान वाढल्यास, शिखर उंच होते, परंतु रुंद होत नाही. जेव्हा रिटेन्शनची वर्तणूक नॉन-लिनियर असते, तेव्हा हे संबंध तुटतात आणि अधिक वस्तुमान इंजेक्ट केल्यावर शिखरे केवळ उंचच नाही तर रुंदही होतात. याव्यतिरिक्त, नॉन-लिनियर आकार क्रोमॅटोग्राफिक शिखरांचा आकार निश्चित करतात, ज्यामुळे पुढचे किंवा मागचे भाग (लीडिंग किंवा ट्रेलिंग एजेस) तयार होतात. वस्तुमानाप्रमाणेच इंजेक्ट केलेल्या ॲनालाइटचे वस्तुमान कमी करून, पीक टेलिंग (10) ला कारणीभूत ठरणारा ओव्हरलोड आणि नॉन-लिनियर रिटेंशनमुळे होणारे पीक लीडिंग यांचे निदान देखील केले जाऊ शकते. जर पीकचा आकार सुधारला, तर लीडिंग एजला कारणीभूत ठरणारी इंजेक्शन गुणवत्ता ओलांडली जाऊ नये यासाठी पद्धतीत बदल करणे आवश्यक आहे, किंवा हे वर्तन कमी करण्यासाठी क्रोमॅटोग्राफिक परिस्थितीत बदल करणे आवश्यक आहे.
कधीकधी आपल्याला आकृती 1f मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, एक "विभाजित" शिखर (peak) असल्याचे दिसते. ही समस्या सोडवण्यातील पहिली पायरी म्हणजे शिखराचा आकार आंशिक सह-इल्यूशनमुळे (म्हणजे, दोन भिन्न परंतु जवळून इल्यूट होणाऱ्या संयुगांच्या उपस्थितीमुळे) आहे की नाही हे ठरवणे. जर प्रत्यक्षात दोन भिन्न विश्लेषक (analytes) जवळजवळ इल्यूट होत असतील, तर त्यांचे रिझोल्यूशन सुधारणे (उदाहरणार्थ, सिलेक्टिव्हिटी, रिटेंशन किंवा प्लेट काउंट वाढवून) महत्त्वाचे ठरते, आणि दिसणारी "विभाजित" शिखरे ही भौतिक समस्येशी संबंधित असतात. कामगिरीचा स्तंभाशी (column) स्वतःचा काहीही संबंध नसतो. अनेकदा, हा निर्णय घेण्यासाठी सर्वात महत्त्वाचा संकेत हा असतो की क्रोमॅटोग्राममधील सर्व शिखरे विभाजित आकार दर्शवतात की फक्त एक किंवा दोन. जर फक्त एक किंवा दोन शिखरे विभाजित असतील, तर ती बहुधा सह-इल्यूशनची समस्या आहे; जर सर्व शिखरे विभाजित असतील, तर ती बहुधा भौतिक समस्या आहे, जी बहुधा स्तंभाशीच संबंधित असते.
कॉलमच्या भौतिक गुणधर्मांशी संबंधित स्प्लिट पीक्स सहसा अंशतः ब्लॉक झालेल्या इनलेट किंवा आउटलेट फ्रिट्समुळे, किंवा कॉलममधील कणांच्या पुनर्रचनेमुळे होतात, ज्यामुळे कॉलम चॅनल फॉर्मेशनच्या काही भागांमध्ये मोबाइल फेज इतर भागांपेक्षा अधिक वेगाने वाहतो (11). अंशतः अडकलेले फ्रिट कधीकधी कॉलममधून प्रवाह उलट करून साफ ​​केले जाऊ शकते; तथापि, माझ्या अनुभवानुसार, हा सहसा दीर्घकालीन उपायाऐवजी अल्पकालीन उपाय असतो. जर कण कॉलममध्येच पुन्हा एकत्र आले तर आधुनिक कॉलम्समध्ये हे अनेकदा घातक ठरते. या टप्प्यावर, कॉलम बदलून काम सुरू ठेवणे सर्वोत्तम आहे.
आकृती 1g मधील शिखर, जे माझ्या स्वतःच्या प्रयोगशाळेतील एका अलीकडील उदाहरणावरून घेतले आहे, सामान्यतः हे दर्शवते की सिग्नल इतका जास्त आहे की तो प्रतिसाद श्रेणीच्या उच्च मर्यादेपर्यंत पोहोचला आहे. ऑप्टिकल ॲबसॉर्बन्स डिटेक्टरसाठी (या प्रकरणात UV-vis), जेव्हा ॲनालाइटची (विश्लेष्याची) सांद्रता खूप जास्त असते, तेव्हा तो ॲनालाइट डिटेक्टर फ्लो सेलमधून जाणाऱ्या बहुतेक प्रकाशाला शोषून घेतो, ज्यामुळे शोधण्यासाठी खूप कमी प्रकाश शिल्लक राहतो. या परिस्थितीत, फोटोडिटेक्टरमधून येणाऱ्या विद्युत सिग्नलवर स्ट्रे लाइट (भटक्या प्रकाशा) आणि "डार्क करंट" सारख्या विविध नॉईजच्या (अनावश्यक आवाजाच्या) स्रोतांचा खूप प्रभाव पडतो, ज्यामुळे सिग्नल दिसण्यास खूप "अस्पष्ट" होतो आणि ॲनालाइटच्या सांद्रतेवर अवलंबून राहत नाही. जेव्हा असे घडते, तेव्हा ॲनालाइटचे इंजेक्शन व्हॉल्यूम कमी करून—म्हणजेच इंजेक्शन व्हॉल्यूम कमी करून, नमुना पातळ करून, किंवा दोन्ही करून—ही समस्या अनेकदा सहजपणे सोडवली जाऊ शकते.
क्रोमॅटोग्राफीच्या शाळेत, आम्ही नमुन्यातील विश्लेष्याच्या (ॲनलाइटच्या) सांद्रतेचा निर्देशक म्हणून डिटेक्टर सिग्नलचा (म्हणजेच, क्रोमॅटोग्राममधील y-अक्ष) वापर करतो. त्यामुळे शून्यापेक्षा कमी सिग्नल असलेला क्रोमॅटोग्राम पाहणे विचित्र वाटते, कारण याचा सरळ अर्थ असा होतो की हे विश्लेष्याची सांद्रता नकारात्मक असल्याचे दर्शवते – जे अर्थातच भौतिकदृष्ट्या शक्य नाही. माझ्या अनुभवानुसार, ऑप्टिकल ॲबसॉर्बन्स डिटेक्टर (उदा., UV-vis) वापरताना नकारात्मक शिखरे (पीक्स) बहुतेकदा दिसून येतात.
या प्रकरणात, नकारात्मक शिखराचा साधा अर्थ असा आहे की स्तंभातून बाहेर पडणारे रेणू शिखराच्या आधी आणि नंतर मोबाइल फेजपेक्षा कमी प्रकाश शोषून घेतात. हे, उदाहरणार्थ, तुलनेने कमी शोध तरंगलांबी (<230 nm) आणि या तरंगलांबीवर बहुतेक प्रकाश शोषून घेणारे मोबाइल फेज अॅडिटिव्ह्ज वापरताना घडू शकते. असे अॅडिटिव्ह्ज मोबाइल फेज सॉल्व्हेंटचे घटक जसे की मिथेनॉल किंवा बफरचे घटक जसे की ॲसिटेट किंवा फॉर्मेट असू शकतात. प्रत्यक्षात, कॅलिब्रेशन वक्र तयार करण्यासाठी आणि अचूक परिमाणात्मक माहिती मिळवण्यासाठी नकारात्मक शिखरांचा वापर केला जाऊ शकतो, त्यामुळे ते टाळण्याचे कोणतेही मूलभूत कारण नाही (या पद्धतीला कधीकधी "अप्रत्यक्ष UV शोध" असे म्हटले जाते) (13). तथापि, जर आपल्याला नकारात्मक शिखरे पूर्णपणे टाळायची असतील, तर शोषण शोधण्याच्या बाबतीत, सर्वोत्तम उपाय म्हणजे वेगळी शोध तरंगलांबी वापरणे जेणेकरून विश्लेषक मोबाइल फेजपेक्षा जास्त प्रकाश शोषून घेईल, किंवा मोबाइल फेजची रचना बदलणे जेणेकरून ते विश्लेषकांपेक्षा कमी प्रकाश शोषून घेतील.
जेव्हा नमुन्यातील विश्लेष्य घटकाव्यतिरिक्त इतर घटकांचा, जसे की सॉल्व्हेंट मॅट्रिक्सचा, अपवर्तनांक मोबाइल फेजच्या अपवर्तनांकापेक्षा वेगळा असतो, तेव्हा अपवर्तनांक (RI) डिटेक्शन वापरताना नकारात्मक शिखरे दिसू शकतात. हे UV-vis डिटेक्शनमध्ये देखील घडते, परंतु RI डिटेक्शनच्या तुलनेत हा परिणाम कमी होण्याची प्रवृत्ती असते. दोन्ही बाबतीत, नमुना मॅट्रिक्सची रचना मोबाइल फेजच्या रचनेशी अधिक जवळून जुळवून नकारात्मक शिखरे कमी केली जाऊ शकतात.
एलसी ट्रबलशूटिंगच्या मूलभूत विषयावरील तिसऱ्या भागात, मी अशा परिस्थितींवर चर्चा केली आहे ज्यात दिसणारा पीक आकार अपेक्षित किंवा सामान्य पीक आकारापेक्षा वेगळा असतो. अशा समस्यांचे प्रभावी ट्रबलशूटिंग अपेक्षित पीक आकारांच्या ज्ञानाने सुरू होते (सिद्धांत किंवा विद्यमान पद्धतींच्या पूर्वीच्या अनुभवावर आधारित), त्यामुळे या अपेक्षांपासून होणारे विचलन स्पष्ट दिसतात. पीक आकाराच्या समस्यांची अनेक वेगवेगळी संभाव्य कारणे आहेत (खूप रुंद, टेलिंग, लीडिंग एज, इत्यादी). या भागात, मला सर्वात जास्त वेळा दिसणाऱ्या काही कारणांवर मी तपशीलवार चर्चा करणार आहे. हे तपशील जाणून घेणे ट्रबलशूटिंग सुरू करण्यासाठी एक चांगली सुरुवात देते, परंतु त्यात सर्व शक्यतांचा समावेश होत नाही. कारणे आणि उपायांच्या अधिक सखोल सूचीमध्ये स्वारस्य असलेले वाचक एलसीजीसीच्या “एलसी ट्रबलशूटिंग गाईड” वॉल चार्टचा संदर्भ घेऊ शकतात.
(4) LCGC “LC ट्रबलशूटिंग गाईड” वॉल चार्ट.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) ए. फेलिंगर, डेटा विश्लेषण आणि सिग्नल प्रोसेसिंग इन क्रोमॅटोग्राफी (एल्सेव्हियर, न्यूयॉर्क, एनवाय, 1998), पृष्ठ 43-96.
(8) वहाब एमएफ, दासगुप्ता पीके, काडजो एएफ आणि आर्मस्ट्राँग डीडब्ल्यू, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.