အချို့သော LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းအကြောင်းအရာများသည် LC လက်တွေ့တွင် ပြဿနာများရှိနေသဖြင့် အချိန်နှင့်အမျှ တိုးတက်လာသည်နှင့်အမျှ LC လက်တွေ့တွင် ပြဿနာများရှိနေပါသည်။ LC စနစ်တွင် ပြဿနာများဖြစ်ပေါ်လာနိုင်ပြီး အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်တွင် ညံ့ဖျင်းစွာအဆုံးသတ်နိုင်သော နည်းလမ်းများစွာရှိပါသည်။ peak shape နှင့်ပတ်သက်သော ပြဿနာများပေါ်ပေါက်လာသောအခါ၊ ဤရလဒ်များအတွက် ဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော အကြောင်းရင်းများစာရင်းတိုသည် ကျွန်ုပ်တို့၏ ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းအတွေ့အကြုံကို ရိုးရှင်းစေသည်။
ဤ “LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်း” ကော်လံကိုရေးပြီး လစဉ်အကြောင်းအရာများအကြောင်းတွေးရသည်မှာ ပျော်စရာကောင်းပါ၏ 1983(1)။လွန်ခဲ့သည့်နှစ်အနည်းငယ်အတွင်း၊ ကျွန်ုပ်သည် အရည် chromatography (LC) ကို ထိခိုက်စေသည့် ခေတ်ပြိုင်လမ်းကြောင်းများပေါ်တွင် LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းကဏ္ဍများကို အာရုံစိုက်ထားပါသည် (ဥပမာ၊ ထိန်းသိမ်းထားမှုအပေါ် ဖိအားသက်ရောက်မှုကို ကျွန်ုပ်တို့နားလည်မှု၏ နှိုင်းယှဉ်ချက် [2] New Advances) ကျွန်ုပ်တို့၏ LC ရလဒ်များ၏ အဓိပ္ပာယ်ဖွင့်ဆိုချက်နှင့် ခေတ်မီသော LC ကိရိယာများနှင့်အတူ ပြဿနာဖြေရှင်းနည်း (၃) ဤလတွင် စတင်ခဲ့ပါသည်။ LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်း၏ “ဘဝနှင့်သေခြင်း” ခေါင်းစဉ်အချို့ကို အာရုံစိုက်ထားသည့် ဒီဇင်ဘာ 2021 တွင် — ပြဿနာဖြေရှင်းသူတိုင်းအတွက် ကောင်းမွန်သည့်အရာများသည် ကျွန်ုပ်တို့အသုံးပြုနေသည့်စနစ်၏အသက်အရွယ်နှင့်မလိုက်ဘဲ မရှိမဖြစ်လိုအပ်ပါသည်။ ဤစီးရီး၏အဓိကအကြောင်းအရာသည် LCGC ၏ကျော်ကြားသော “LC Troubleshooting Guide” wall chart နှင့် အလွန်သက်ဆိုင်ပါသည်၊ ဤအတွဲ (4) အတွက် ဓါတ်ခွဲခန်းအများအပြားတွင် အာရုံစိုက်ထားသောပြဿနာများအတွက် ဤအတွဲ (4) ကို တွဲပေးထားသည်။ အထွတ်အထိပ် လက္ခဏာများ။မယုံနိုင်လောက်အောင်ပင်၊ နံရံဇယားတွင် အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန် ညံ့ဖျင်းခြင်း၏ အကြောင်းရင်း ၄၄ ခုကို ဖော်ပြထားပါသည်။ ဤပြဿနာများအားလုံးကို ဆောင်းပါးတစ်ပုဒ်တွင် အသေးစိတ် ထည့်သွင်းစဉ်းစား၍မရပါ၊ ထို့ကြောင့် ဤအကြောင်းအရာနှင့် ပတ်သက်၍ ဤပထမပိုင်း၌ ကျွန်တော် အများဆုံး တွေ့ရလေ့ရှိသည့် အကြောင်းအရာအချို့ကို အာရုံစိုက်ပါမည်။ လူငယ်နှင့် အသက်ကြီးသော LC အသုံးပြုသူများသည် ဤအရေးကြီးသော အကြောင်းအရာအတွက် အထောက်အကူဖြစ်စေမည့် အကြံပြုချက်များနှင့် သတိပေးချက်များကို တွေ့ရှိလိမ့်မည်ဟု မျှော်လင့်ပါသည်။
"ဘာမဆိုဖြစ်နိုင်သည်" ဖြင့် ပြဿနာဖြေရှင်းသည့်မေးခွန်းများကို တိုး၍ဖြေနေခြင်းဖြစ်သည်။ ဤတုံ့ပြန်မှုသည် အနက်ပြန်ရခက်သော လေ့လာတွေ့ရှိချက်များကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားသည့်အခါ လွယ်ကူပုံပေါ်နိုင်သော်လည်း မကြာခဏဆိုသလို သင့်လျော်သည်ဟု ကျွန်ုပ်တွေ့မြင်ပါသည်။ အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်ညံ့ဖျင်းခြင်း၏ ဖြစ်နိုင်ခြေအကြောင်းရင်းများစွာဖြင့်၊ ပြဿနာဖြစ်နိုင်သည်ကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားသည့်အခါတွင် ပွင့်ပွင့်လင်းလင်းရှိရန် အရေးကြီးပြီး ကျွန်ုပ်တို့၏ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းကြိုးပမ်းအားထုတ်မှုများ စတင်ရန် ဖြစ်နိုင်ချေရှိသော အကြောင်းရင်းများကို ဦးစားပေးလုပ်ဆောင်နိုင်စေရန်၊ ထိုအချက်များကို အဓိကထားလုပ်ဆောင်ရန် အရေးကြီးပါသည်။ အရေးကြီးတယ်။ ဖြစ်နိုင်တယ်။
ပြဿနာဖြေရှင်းရေးလေ့ကျင့်ခန်းတိုင်းတွင် အဓိကခြေလှမ်းတစ်ခု—သို့သော်လည်း အဆင့်သတ်မှတ်မှုနည်းသည်ဟုထင်သည်—သည် ဖြေရှင်းရန်လိုသည့်ပြဿနာတစ်ခုရှိနေကြောင်း အသိအမှတ်ပြုခြင်းဖြစ်သည်။ ပြဿနာတစ်ခုရှိနေကြောင်း အသိအမှတ်ပြုခြင်းသည် သီအိုရီ၊ လက်တွေ့ကျကျအသိပညာနှင့် အတွေ့အကြုံတို့ဖြင့်ပုံဖော်ထားသည့် ကျွန်ုပ်တို့၏မျှော်လင့်ချက်များနှင့်မတူကြောင်း အသိအမှတ်ပြုခြင်းကိုဆိုလိုသည် (5) မက်ထရစ်ပုံသဏ္ဍာန်၏အထွတ်အထိပ်ကို ရည်ညွှန်းခြင်းမဟုတ်ပါ (အမှန်တကယ်အားဖြင့် ဤနေရာတွင်သာ ရည်ညွှန်းဖော်ပြသည် အချိုးမညီသော၊ ချောမွေ့သော၊ ပျော့ပျောင်းသော၊ ဦးဆောင်အစွန်း၊ အမြီးဆွဲခြင်း စသည်ဖြင့်)၊ ဒါပေမယ့်လည်း အကျယ်အတွက်ပါ။ ကျွန်ုပ်တို့၏မျှော်လင့်ချက်များသည် ရိုးရှင်းပါသည်။ သီအိုရီ (၆) သည် ကိစ္စအများစုတွင်၊ chromatographic peaks များသည် အချိုးကျပြီး Gaussian ဖြန့်ဖြူးပုံသဏ္ဍာန်နှင့် ကိုက်ညီသင့်သည် အနာဂတ်ဆောင်းပါးတစ်ခုတွင်၊ ပုံ 1 ရှိ အခြားသော အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်များသည် လေ့လာတွေ့ရှိနိုင်သည့် အခြားဖြစ်နိုင်ချေအချို့ကို ပြသသည်—တစ်နည်းအားဖြင့် အချို့အရာများသည် မှားယွင်းသွားနိုင်သည်။ ဤအရစ်ကျ၏လက်ကျန်တွင်၊ ဤပုံသဏ္ဍာန်အမျိုးအစားများဆီသို့ ဦးတည်နိုင်သည့် အခြေအနေအချို့ကို အချိန်ပေးဆွေးနွေးပါမည်။
တခါတရံတွင် အထွတ်အထိပ်များကို ထုတ်ပစ်မည်ဟု မျှော်လင့်ရသည့် chromatogram တွင် လုံးဝမတွေ့ရပါ။ အပေါ်က နံရံဇယားက အထွတ်အထိပ်မရှိခြင်းကို ညွှန်ပြသည် (နမူနာတွင် ပစ်မှတ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အမှန်တကယ်ပါဝင်နေပါက ဆူညံသံအထက်တွင် မြင်နိုင်စေရန် ထောက်လှမ်းတုံ့ပြန်မှု လုံလောက်စေမည့် အာရုံစူးစိုက်မှုတွင် ပါဝင်သည်) သည် များသောအားဖြင့် တူရိယာပြဿနာအချို့ သို့မဟုတ် မှားယွင်းနေသော မိုဘိုင်းအဆင့်အခြေအနေများနှင့် ဆက်စပ်နေပါသည်။ အထွတ်အထိပ်များ၊ အများအားဖြင့် အလွန် "အားနည်း")) ဤအမျိုးအစားရှိ ဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော ပြဿနာများနှင့် ဖြေရှင်းနည်းများစာရင်းတိုကို ဇယား I တွင် တွေ့ရှိနိုင်ပါသည်။
အထက်တွင်ဖော်ပြခဲ့သည့်အတိုင်း၊ အထွတ်အထိပ်ချဲ့ထွင်ခြင်းအား မည်မျှသည်းခံသင့်သည်ဟူသောမေးခွန်းသည် အနာဂတ်ဆောင်းပါးတွင် ကျွန်ုပ်ဆွေးနွေးမည့် ရှုပ်ထွေးသောအကြောင်းအရာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ကျွန်ုပ်၏အတွေ့အကြုံမှာ သိသိသာသာအထွတ်အထိပ်ချဲ့ထွင်ခြင်းကို မကြာခဏဆိုသလို သိသိသာသာပြောင်းလဲသွားခြင်းနှင့်အတူ အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်ပြောင်းလဲလာကာ peak tailing သည် pre-peak သို့မဟုတ် splitting ထက် ပို၍အဖြစ်များပါသည်။ သို့သော်လည်း၊ peak ဖြစ်နိုင်သည်မှာ အမည်ခံအားဖြင့် ဖြစ်နိုင်သည်။ မတူညီသော အကြောင်းပြချက် အနည်းငယ်
အဆိုပါပြဿနာများအားလုံးကို Troubleshooting LC ၏ယခင်ကိစ္စရပ်များတွင်အသေးစိတ်ဆွေးနွေးထားပြီးဖြစ်သည်၊ ဤအကြောင်းအရာများကိုစိတ်ဝင်စားသောစာဖတ်သူများသည်ဤပြဿနာများ၏ရင်းမြစ်နှင့်ဖြစ်နိုင်ချေရှိသောဖြေရှင်းနည်းများအတွက်အချက်အလက်များအတွက်ယခင်ဆောင်းပါးများကိုကိုးကားနိုင်ပါသည်။ အသေးစိတ်အချက်များ။
Peak tailing၊ peak fronting, and splitting အားလုံးသည် ဓာတု သို့မဟုတ် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ ဖြစ်စဉ်များကြောင့် ဖြစ်ပေါ်လာနိုင်ပြီး ဤပြဿနာများအတွက် ဖြစ်နိုင်ချေရှိသော ဖြေရှင်းနည်းများစာရင်းသည် ကျွန်ုပ်တို့သည် ဓာတု သို့မဟုတ် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာပြဿနာကို ကိုင်တွယ်ဖြေရှင်းခြင်းရှိမရှိအပေါ် မူတည်၍ ကျယ်ပြန့်စွာကွဲပြားပါသည်။ မကြာခဏဆိုသလို၊ chromatogram တစ်ခုတွင် မတူညီသော တောင်ထွတ်များကို နှိုင်းယှဉ်ခြင်းဖြင့်၊ တရားခံသည် အဘယ်အရာဖြစ်သည်ဟူသော အရေးကြီးသော သဲလွန်စများကို သင်ရှာတွေ့နိုင်ပါသည်။ အနည်းငယ်သာတူညီသောအချက်များ အများစုမှာ chromato ဖြစ်ပါက၊ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ။အထွတ်အထိပ်တစ်ခု သို့မဟုတ် အနည်းငယ်မျှသာ ထိခိုက်သော်လည်း ကျန်အရာများမှာ ကောင်းမွန်ပါက၊ အကြောင်းရင်းမှာ ဓာတုပစ္စည်း ဖြစ်နိုင်ခြေများပါသည်။
အထွတ်အထိပ်အမြီးဆွဲခြင်း၏ ဓာတုအကြောင်းရင်းများသည် ဤနေရာတွင် အကျဉ်းချုံးဆွေးနွေးရန် ရှုပ်ထွေးလွန်းပါသည်။ စိတ်ပါဝင်စားသူသည် ပိုမိုနက်ရှိုင်းသောဆွေးနွေးမှုတစ်ခုအတွက် “LC Troubleshooting” ၏ လတ်တလောစာစောင်ကို ရည်ညွှန်းထားပါသည်။သို့သော် ကြိုးစားရန်လွယ်ကူသောအချက်မှာ ထိုးသွင်းထားသော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၏ထုထည်ကို လျှော့ချရန်နှင့် အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်တိုးတက်ကောင်းမွန်ခြင်းရှိမရှိကို ကြည့်ရှုပါ။ သို့ဆိုလျှင် ဤပြဿနာကို ကန့်သတ်ရန် နည်းလမ်းကောင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ သေးငယ်သော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အစုလိုက် အပြုံလိုက် ထိုးသွင်းခြင်း သို့မဟုတ် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ် အခြေအနေများကို ပြောင်းလဲပစ်ရမည်ဖြစ်ပြီး ကြီးမားသော အစုလိုက်အပြုံလိုက် ထိုးသွင်းခြင်းဖြင့်ပင် ကောင်းသော အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်များကို ရရှိနိုင်သည်။
Peak tailing အတွက် ဖြစ်နိုင်ချေရှိသော ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ အကြောင်းရင်းများစွာလည်း ရှိပါသည်။ ဖြစ်နိုင်ခြေအသေးစိတ် ဆွေးနွေးချက်ကို စိတ်ဝင်စားသောစာဖတ်သူများသည် "LC Troubleshooting" (11) ၏ မကြာသေးမီက ပြဿနာကို ရည်ညွှန်းပါသည်။ Peak tailing ၏ အဖြစ်များသည့် အကြောင်းရင်းတစ်ခုမှာ injector နှင့် detector အကြား ချိတ်ဆက်မှု ညံ့ဖျင်းခြင်း (12)။ လွန်ခဲ့သည့် အပတ်က ရရှိထားသော ဆေးထိုးစနစ်အသစ်ဖြင့် ဤပုံ 1d ​​တွင် လွန်ခဲ့သည့် သာဓကကို ကျွန်ုပ်တို့ စမ်းသပ်တည်ဆောက်ထားပါသည်။ ယခင်က ကျွန်ုပ်တို့အသုံးမပြုခဲ့သော အဆို့ရှင်ကို သံမဏိသွေးကြောမျှင်ပေါ်သို့ ပုံသွင်းထားသည့် ferrule နှင့် ထုထည်အသေးစား ဆေးထိုးစက်ကွင်းကို တပ်ဆင်ခဲ့သည်။ ကနဦးပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းအချို့ပြီးနောက်၊ ဆေးထိုးအဆို့ရှင် stator ရှိ port ၏အတိမ်အနက်သည် ကျွန်ုပ်တို့အသုံးပြုခဲ့ဖူးသည်ထက် များစွာပိုမိုနက်ရှိုင်းသည်ကို သိရှိခဲ့ရပြီး port အောက်ခြေရှိ သေနေသော volume ကို ဖြစ်ပေါ်စေပါသည်။ ဤပြဿနာကို အခြားသော tubfer နေရာတွင် အစားထိုးခြင်းဖြင့် ကျွန်ုပ်တို့ အလွယ်တကူဖြေရှင်းနိုင်သည် ဆိပ်ကမ်း၏အောက်ခြေရှိ dead volume ။
ပုံ 1e တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ်မျက်နှာစာများသည် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ သို့မဟုတ် ဓာတုပြဿနာများကြောင့်လည်း ဖြစ်နိုင်သည်။ ဦးဆောင်အစွန်း၏အဖြစ်များသော ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာအကြောင်းရင်းမှာ ကော်လံ၏အမှုန်အမွှားများကို ကောင်းစွာမထုပ်ပိုးနိုင်ခြင်းကြောင့် သို့မဟုတ် အမှုန်များသည် အချိန်ကြာလာသည်နှင့်အမျှ ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းထားခြင်းဖြစ်သည်။ ဤရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာဖြစ်စဉ်ကြောင့်ဖြစ်ရသည့် အထွတ်အထိပ်အမြီးများကဲ့သို့ပင်၊ ၎င်းကို ပြင်ဆင်ရန် အကောင်းဆုံးနည်းလမ်းမှာ ကော်လံကို အစားထိုးပြီး ပုံသဏ္ဍာန်အတိုင်း ဆက်သွားခြင်းဖြစ်သည်။ Funda ဟုခေါ်သော ဓာတုမူလအစမှ တက်လာခြင်းဖြစ်သည်။ "လိုင်းမဟုတ်သော" ထိန်းထားမှုအခြေအနေများ။ စံပြ (တစ်လိုင်းနား) အခြေအနေအောက်တွင်၊ stationary အဆင့်မှ ထိန်းသိမ်းထားသော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုပမာဏ (ထို့ကြောင့် ထိန်းထားနိုင်သည့်အချက်) သည် ကော်လံရှိ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၏အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့် အညီအညွတ် ဆက်စပ်နေသည်။ Chromatographically၊ ဆိုလိုသည်မှာ ကော်လံအတွင်းသို့ ထိုးသွင်းလိုက်သော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုပမာဏ တိုးလာသည်နှင့်အမျှ အထွတ်အထိပ်သည် ပိုရှည်လာသည်၊ သို့သော် peak သည် ပိုကျယ်လာသောအခါတွင် ဆက်ဆံရေးသည် ပိုကျယ်လာသည်မဟုတ်ပေ။ ထိုးသွင်းလိုက်သည်နှင့်အမျှ ဒြပ်ထုပိုကြီးလာသည်သာမက ပိုကျယ်လာသည်။ ထို့အပြင်၊ nonlinear ပုံသဏ္ဍာန်များသည် chromatographic peaks များ၏ ပုံသဏ္ဍာန်ကို အဆုံးအဖြတ်ပေးကာ ထိပ် သို့မဟုတ် နောက်လိုက်အစွန်းများကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်။ peak tailing ကိုဖြစ်စေသော mass overload (10) ကဲ့သို့ peak ကို nonlinear retention ကြောင့်ဖြစ်ရသည့် peak သည် injected analytes ထုထည်ကို လျှော့ချခြင်းဖြင့် စစ်ဆေးနိုင်သည်၊ peak ကိုဖြစ်စေသော အကြောင်းရင်းများထက် မွမ်းမံထားသောနည်းလမ်းထက် အရည်အသွေးမကျော်လွန်ပါက ပြုပြင်နိုင်သည် ဤအပြုအမူကို လျှော့ချရန် အစွန်း သို့မဟုတ် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်အခြေအနေများကို ပြောင်းလဲရပါမည်။
တစ်ခါတစ်ရံတွင် ပုံ 1f တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း "ခွဲခြမ်း" အထွတ်အထိပ်ဖြစ်ပုံပေါ်သည်ကို ကျွန်ုပ်တို့သတိပြုမိပါသည်။ ဤပြဿနာကိုဖြေရှင်းရာတွင် ပထမအဆင့်မှာ တစ်စိတ်တစ်ပိုင်းပေါင်းစပ်လိုက်ခြင်းကြောင့်ဟုတ်မဟုတ် ဆုံးဖြတ်ရန်ဖြစ်သည် (ဆိုလိုသည်မှာ ကွဲပြားသော်လည်း နီးနီးကပ်ကပ် eluting ဒြပ်ပေါင်းနှစ်ခုရှိနေခြင်း)။ အမှန်တကယ်တွင် မတူညီသောခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာချက်နှစ်ခုရှိနေပါက၊ အတူတကွအနီးကပ် eluting ပြုလုပ်ခြင်း သို့မဟုတ် ၎င်းတို့၏ ကြည်လင်ပြတ်သားမှုကို တိုးမြှင့်ခြင်းဖြစ်သည် (ဥပမာ၊ ပြန်လည်ပြင်ဆင်ခြင်းအတွက်၊ ၎င်းသည် ပြန်လည်ပြင်ဆင်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ count) နှင့် သိသာထင်ရှားသော "ခွဲခြမ်း" အထွတ်အထိပ်များသည် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာစွမ်းဆောင်ရည်နှင့် သက်ဆိုင်သည် ကော်လံကိုယ်တိုင်နှင့် ဘာမှမဆိုင်ပါ။ မကြာခဏဆိုသလို၊ ဤဆုံးဖြတ်ချက်အတွက် အရေးကြီးဆုံးသဲလွန်စမှာ chromatogram ရှိ အထွတ်အထိပ်များအားလုံးသည် ကွဲပြားသောပုံသဏ္ဍာန်များပြသခြင်းရှိမရှိ သို့မဟုတ် တစ်ခု သို့မဟုတ် နှစ်ခုမျှသာဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် တစ်ခု သို့မဟုတ် နှစ်ခုသာဖြစ်ပါက၊ ၎င်းသည် ပူးပေါင်းရွေးချယ်မှုပြဿနာဖြစ်နိုင်သည်။ အထွတ်အထိပ်များအားလုံးကို ပိုင်းခြားထားလျှင် ၎င်းသည် ကော်လံကိုယ်တိုင်နှင့် ဆက်စပ်နိုင်ခြေများသော ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာပြဿနာတစ်ခု ဖြစ်နိုင်သည်။
ကော်လံကိုယ်နှိုက်၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ ဂုဏ်သတ္တိများနှင့် ဆက်စပ်သော ခွဲခြမ်းများသည် များသောအားဖြင့် တစ်စိတ်တစ်ပိုင်း ပိတ်ဆို့ထားသော ဝင်ပေါက် သို့မဟုတ် ထွက်ပေါက်အစွန်းကွက်များ သို့မဟုတ် ကော်လံရှိ အမှုန်များကို ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းခြင်းကြောင့်ဖြစ်ပြီး၊ ကော်လံချန်နယ်ဖွဲ့စည်းခြင်း၏ အချို့နေရာများတွင် မိုဘိုင်းအဆင့်ထက် မိုဘိုင်းအဆင့်ကို ပိုမိုမြန်ဆန်စွာ စီးဆင်းစေပါသည်။ အခြားဒေသများတွင် (11) အချို့သော ပိတ်ဆို့နေသော ဖရစ်များကို တစ်ခါတစ်ရံ ကော်လံကိုပြောင်းပြန်လှန်ခြင်းဖြင့် ရှင်းလင်းနိုင်သည်။ သို့သော်လည်း၊ ကျွန်ုပ်၏ အတွေ့အကြုံအရ၊ ၎င်းသည် ရေရှည်ဖြေရှင်းချက်ထက် ရေတိုရေတိုဖြစ်သည်။ အမှုန်များသည် ကော်လံအတွင်း ပြန်လည်ပေါင်းစည်းပါက ခေတ်မီကော်လံများနှင့် မကြာခဏ သေဆုံးတတ်သည်။ ဤအခြေအနေတွင်၊ ကော်လံကို အစားထိုးပြီး ရှေ့ဆက်ရန် အကောင်းဆုံးဖြစ်သည်။
ပုံ 1g ရှိ၊ ကျွန်ုပ်၏ကိုယ်ပိုင်ဓာတ်ခွဲခန်းရှိ မကြာသေးမီကဖြစ်ရပ်တစ်ခုမှလည်း အထွတ်အထိပ်သည် တုံ့ပြန်မှုအကွာအဝေး၏ အမြင့်ဆုံးသို့ရောက်ရှိသွားသည့်အတွက် အချက်ပြမှုသည် အလွန်မြင့်မားကြောင်း ညွှန်ပြပါသည်။ optical absorbance detectors (ဤအခြေအနေတွင် UV-vis) အတွက် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုပြင်းအားသည် အလွန်မြင့်မားသောအခါ၊ ပိုင်းခြားစိတ်ဖြာချက်သည် ဆဲလ်များဖြတ်သန်းသွားသည့် အလင်းအများစုကို စုပ်ယူသွားပြီး၊ အလင်းအနည်းငယ်သာကျန်တော့သော အခြေအနေများကို ဓာတ်ပုံဖမ်းရန် လျှပ်စစ်အချက်ပြကိရိယာမှ ရှာဖွေတွေ့ရှိနိုင်ပါသည်။ မီးခိုးရောင်နှင့် "မှောင်သောလျှပ်စီးကြောင်း" ကဲ့သို့သော ဆူညံသံများ၏ရင်းမြစ်များသည် အချက်ပြမှုကို ပုံပန်းသဏ္ဌာန်နှင့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာအာရုံစူးစိုက်မှုမရှိဘဲ အလွန် "မှုန်ဝါးဝါး" ဖြစ်စေသည်။ ဒီလိုဖြစ်လာတဲ့အခါ၊ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုပမာဏကို လျှော့ချခြင်း- ဆေးထိုးပမာဏကို လျှော့ချခြင်း၊ နမူနာကို ဖျော့ခြင်း သို့မဟုတ် နှစ်မျိုးလုံးဖြင့် အလွယ်တကူ ဖြေရှင်းနိုင်သည် ။
chromatography ကျောင်းတွင်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် detector signal (ဆိုလိုသည်မှာ chromatogram ရှိ y-axis) ကို နမူနာရှိ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အာရုံစူးစိုက်မှု၏ ညွှန်ပြချက်တစ်ခုအဖြစ် အသုံးပြုပါသည်။ ထို့ကြောင့် သုညအောက်ရှိ chromatogram တစ်ခုအား တွေ့ရခြင်းမှာ ထူးဆန်းပုံရသည်၊ ရိုးရှင်းသော အဓိပ္ပာယ်ဖွင့်ဆိုချက်မှာ ၎င်းသည် အနုတ်လက္ခဏာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အာရုံစူးစိုက်မှုအား ညွှန်ပြနေသောကြောင့်ဖြစ်သည်၊ ၎င်းသည် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာအရ မဖြစ်နိုင်ပေ။ ကျွန်ုပ်၏ အတွေ့အကြုံအရ၊ မကြာခဏဆိုသလို UV စုပ်ယူနိုင်မှု အမြင့်ဆုံးကို အသုံးပြုနေသည်)။
ဤကိစ္စတွင်၊ အနုတ်လက္ခဏာဆောင်သည့် အထွတ်အထိပ်သည် ရိုးရိုးရှင်းရှင်းပင်ဆိုလိုသည်မှာ ကော်လံမှ ထုတ်လွှတ်သော မော်လီကျူးများသည် အထွတ်အထိပ်မရောက်မီနှင့် အပြီးတွင် မိုဘိုင်းအဆင့်ထက် အလင်းနည်းနည်းကို စုပ်ယူနိုင်ခဲ့သည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊ လှိုင်းအလျားအတော်လေးနိမ့်သော ထောက်လှမ်းမှုလှိုင်းအလျား (<230 nm) နှင့် မိုဘိုင်းအဆင့် ပေါင်းထည့်ပစ္စည်းများကို အသုံးပြုသည့်အခါ ဤလှိုင်းအလျားအလျားတွင် အလင်းအများစုကို စုပ်ယူနိုင်သော မိုဘိုင်းအဆင့် ပေါင်းထည့်သည့်အရာများဖြစ်သည်။ ဤကဲ့သို့သော အပိုပစ္စည်းများသည် မိုဘိုင်ဖဆွန်းသွန်းနစ် အစိတ်အပိုင်းများကဲ့သို့ ဖြစ်နိုင်သည်။ သို့မဟုတ် formate။ တစ်ဦးသည် ချိန်ညှိမျဉ်းကွေးကို ပြင်ဆင်ရန်နှင့် တိကျသော အရေအတွက်အချက်အလက်များကို ရယူရန် အနုတ်အထွတ်အထိပ်များကို အမှန်တကယ် အသုံးပြုနိုင်ပြီး၊ ထို့ကြောင့် ၎င်းတို့ကို ရှောင်ရှားရန် အခြေခံအကြောင်းရင်းများ မရှိပါ (ဤနည်းလမ်းကို တစ်ခါတစ်ရံ “သွယ်ဝိုက်ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်ထောက်လှမ်းခြင်း” ဟုရည်ညွှန်းသည်) (13)။သို့သော် ကျွန်ုပ်တို့ အမှန်တကယ် အနုတ်လက္ခဏာဆောင်သည့် အထွတ်အထိပ်များကို ရှောင်ရှားလိုပါက၊ စုပ်ယူမှုဆိုင်ရာ လှိုင်းများကို ဖမ်းယူနိုင်စေရန်အတွက် အကောင်းဆုံးဖြေရှင်းချက်တစ်ခုဖြစ်သည့် စုပ်ယူမှုဆိုင်ရာ အဖြေကို လုံး၀ အသုံးပြုနိုင်မည်ဖြစ်သည်။ မိုဘိုင်းအဆင့်ထက် ပိုများသော သို့မဟုတ် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုထက် အလင်းကို စုပ်ယူနိုင်စေရန် မိုဘိုင်းအဆင့်၏ ဖွဲ့စည်းမှုကို ပြောင်းလဲပါ။
နမူနာရှိ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုမှလွဲ၍ အခြားအစိတ်အပိုင်းများ၏ အလင်းယိုင်အညွှန်းကိန်း (RI) ထောက်လှမ်းမှုကို အသုံးပြုသည့်အခါတွင်လည်း အနုတ်လက္ခဏာပြသည့် အထွတ်အထိပ်များသည် မိုဘိုင်းအဆင့်၏ အလင်းယိုင်ညွှန်းကိန်းနှင့် ကွဲပြားပါသည်။ ၎င်းသည် UV-vis detection နှင့်လည်း ဖြစ်တတ်သော်လည်း၊ ဤအကျိုးသက်ရောက်မှုသည် RI ထောက်လှမ်းမှုနမူနာနှင့် နှိုင်းယှဉ်လျှင် အနည်းငယ်ပို၍ သေးငယ်သောဖွဲ့စည်းမှုကို နှိုင်းယှဥ်နိုင်သည် ။ မိုဘိုင်းအဆင့်၏ မက်ထရစ်။
LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်း၏ အခြေခံအကြောင်းအရာ အပိုင်းသုံးတွင်၊ လေ့လာတွေ့ရှိထားသော အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်သည် မျှော်လင့်ထားသည့် သို့မဟုတ် ပုံမှန်အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်နှင့် ကွာခြားသည့် အခြေအနေများကို ဆွေးနွေးခဲ့သည်။ ထိုပြဿနာများကို ထိရောက်စွာဖြေရှင်းခြင်းမှာ မျှော်လင့်ထားသည့် peak ပုံသဏ္ဍာန်များ (သီအိုရီ သို့မဟုတ် ယခင်အတွေ့အကြုံအရ ရှိပြီးသားနည်းလမ်းများကို အခြေခံ၍) အသိပညာဖြင့် စတင်သည်၊ ထို့ကြောင့် အဆိုပါမျှော်လင့်ချက်များမှ သွေဖည်သွားသည်မှာ သိသာထင်ရှားပါသည်။ Peak ပုံသဏ္ဍာန်ပြဿနာများသည် ကွဲပြားခြားနားသော ဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော အမြီးပိုင်းကို ဆွေးနွေးပါ။ ကျွန်တော်အများဆုံးတွေ့ရတဲ့ အကြောင်းရင်းအချို့ကို အသေးစိတ်အသေးစိတ်ပါ။ ဒီအသေးစိတ်အချက်အလက်တွေကိုသိခြင်းက ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းစတင်ဖို့ နေရာကောင်းတစ်ခုပေးစွမ်းပေမယ့် ဖြစ်နိုင်ခြေအားလုံးကို ဖမ်းဆုပ်မထားပါဘူး။ ပိုမိုနက်ရှိုင်းတဲ့အကြောင်းရင်းစာရင်းနဲ့ ဖြေရှင်းနည်းတွေကို စိတ်ဝင်စားတဲ့စာဖတ်သူတွေက LCGC “LC Troubleshooting Guide” နံရံကပ်ဇယားကို ကိုးကားနိုင်ပါတယ်။
(၄) LCGC “LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းလမ်းညွှန်” နံရံကပ်ဇယား။https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021)။
(၆) A. Felinger၊ Chromatography တွင် ဒေတာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းနှင့် အချက်ပြလုပ်ဆောင်ခြင်း (Elsevier, New York, NY, 1998), စစ. ၄၃-၉၆။
(၈) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF နှင့် Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907၊ 31–44 (2016)။https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043။