O nisi o mataupu e faʻatatau i le foia o faʻafitauli o le LC e le tuai lava, aua e iai faʻafitauli i le faʻatinoina o le LC, e tusa lava pe faʻaleleia atili le tekinolosi o meafaigaluega i le aluga o taimi. E tele auala e ono tulaʻi mai ai faʻafitauli i se faiga LC ma iʻu ai i se tulaga leaga o le tumutumu. A tulaʻi mai faʻafitauli e fesoʻotaʻi ma le foliga o le tumutumu, o se lisi puʻupuʻu o mafuaʻaga e ono tulaʻi mai ai nei taunuuga e fesoasoani e faʻafaigofie ai la matou poto masani i le foia o faʻafitauli.
Sa manaia le tusiaina o lenei koluma "LC Troubleshooting" ma mafaufau i autu i masina taitasi, aua o nisi autu e le uma lava. A o iai i le matata o suʻesuʻega chromatography, o nisi autu poʻo manatu e le toe aoga ona ua suia e ni manatu fou ma sili atu, i le matata o le foia o faafitauli, talu mai le uluaʻi tusiga o le foia o faafitauli na aliali mai i lenei mekasini (le LC Journal i le taimi lea) talu ai o nisi autu o loʻo talafeagai pea) i le 1983 (1). I nai tausaga ua tuanaʻi, sa ou taulaʻi atu i ni vaega o le LC Troubleshooting i aga masani o aso nei e aʻafia ai le liquid chromatography (LC) (mo se faʻataʻitaʻiga, le faʻatusatusaga faʻatatau o lo tatou malamalama i le aʻafiaga o le mamafa i le taofia [2] New Advances) O la tatou faʻamatalaga o taunuuga o le LC ma le auala e foia ai faafitauli i meafaigaluega LC faʻaonaponei. I le vaega o lenei masina, o loʻo ou faʻaauauina laʻu faasologa (3), lea na amata ia Tesema 2021, lea na taulaʻi atu i nisi o autu "ola ma le oti" o le foia o faafitauli LC - o elemene e sili ona lelei mo soʻo se tagata e foia faafitauli e taua, e tusa lava po o le a le matua o le faiga o loʻo tatou faʻaaogaina. O le autu autu o lenei faasologa e matua talafeagai lava i le LCGC lauiloa O le siata puipui "LC Troubleshooting Guide" (4) o loʻo tautau i le tele o fale suʻesuʻe. Mo le vaega lona tolu o lenei faasologa, na ou filifili ai e taulaʻi atu i mataupu e fesoʻotaʻi ma le foliga o le tumutumu poʻo uiga o le tumutumu. O le mea e ofo ai, o loʻo lisiina i le siata puipui ni mafuaʻaga eseese e 44 e ono mafua ai le le lelei o le foliga o le tumutumu! E le mafai ona tatou iloiloina auiliili nei mataupu uma i se tusiga e tasi, o lea i lenei vaega muamua i le autu, o le a ou taulaʻi atu i nisi o mea ou te vaʻaia soo. Ou te faʻamoemoe o le a maua e tagata faʻaoga LC talavou ma matutua ni fautuaga aoga ma ni faʻamanatuga i lenei autu taua.
Ua ou iloa ua ou taliina pea fesili e foia ai faafitauli i le faapea mai, “e mafai mea uma”. Atonu e foliga faigofie lenei tali pe a mafaufau i ni matauga e faigata ona faauigaina, ae ou te iloa e masani ona talafeagai. Faatasi ai ma le tele o mafuaaga e ono mafua ai le leaga o le foliga o le tumutumu, e taua le mafaufau matala pe a mafaufau po o le a le faafitauli, ma ia mafai ona faamuamua mafuaaga e ono mafua ai ina ia amata ai a tatou taumafaiga e foia ai faafitauli, ma taulai atu i na mea e sili ona taatele, e matua taua tele lenei manatu.
O se laasaga autū i soʻo se faʻamalositino e foia ai faʻafitauli - ae o se tasi ou te manatu e le o faʻatauaina - o le iloaina lea o loʻo i ai se faʻafitauli e manaʻomia ona foia. O le iloaina o loʻo i ai se faʻafitauli e masani ona faʻauigaina o le iloaina o le mea e tupu i le meafaigaluega e ese mai o tatou faʻamoemoega, lea e faʻatulagaina e le aʻoaʻoga, malamalama faʻapitoa, ma le poto masani (5). O le "foliga o le tumutumu" o loʻo taʻua iinei e le gata ina faʻatatau i le foliga o le tumutumu (tutusa, le tutusa, lamolemole, fulufulua, pito i luma, tailing, ma isi), ae faʻapea foʻi i le lautele. O a tatou faʻamoemoega mo le foliga moni o le tumutumu e faigofie. O le aʻoaʻoga (6) e lagolagoina lelei le faʻamoemoega o le tusi aʻoga e faʻapea, i le tele o tulaga, o tumutumu chromatographic e tatau ona tutusa ma ogatasi ma le foliga o se tufatufaga Gaussian, e pei ona faʻaalia i le Ata 1a. O le mea tatou te faʻamoemoeina mai lautele o tumutumu o se mataupu e sili atu ona faigata, ma o le a tatou talanoaina lenei autu i se tusiga i le lumanaʻi. O isi foliga o tumutumu i le Ata 1 o loʻo faʻaalia ai nisi o isi mea e mafai ona matauina - i se isi faaupuga, o nisi o auala e ono sese ai mea. I le vaega o totoe o lenei vaega, o le a tatou faʻaaluina le taimi e talanoaina ai nisi o faʻataʻitaʻiga patino o tulaga e mafai ona oʻo atu ai i nei ituaiga o foliga.
O nisi taimi e le o vaaia ni tumutumuga i le chromatogram lea e faʻamoemoeina e aveese ai. O le siata o loʻo i luga o le puipui o loʻo faʻaalia ai o le leai o se tumutumuga (pe a faʻapea o loʻo i ai moni lava le faʻataʻitaʻiga o loʻo i ai le analyte faʻamoemoe i se tulaga e tatau ona lava ai le tali a le detector e vaʻai i ai i luga aʻe o le pisa) e masani ona fesoʻotaʻi ma nisi faʻafitauli o le meafaigaluega poʻo tulaga sese o le vaega feaveaʻi (pe afai e matauina). tumutumuga, e masani lava "vaivai"). O se lisi puʻupuʻu o faʻafitauli ma fofo e ono tulaʻi mai i lenei vaega e mafai ona maua i le Laulau I.
E pei ona taʻua i luga, o le fesili pe o le a le tele o le faalauteleina o le tumutumu e tatau ona onosaia aʻo leʻi gauai atu i ai ma taumafai e faaleleia o se autu faigata lea o le a ou talanoaina i se tusiga i le lumanai. O loʻu aafiaga o le faalauteleina tele o le tumutumu e masani ona o faatasi ma se suiga tele i le foliga o le tumutumu, ma o le tumutumu e sili atu ona taatele nai lo le muamua o le tumutumu po o le vaeluaina. Ae ui i lea, o tumutumu e tutusa lelei e faalauteleina foi, lea e mafai ona mafua mai i ni nai mafuaaga eseese:
Ua uma ona talanoaina auiliili nei mataupu taʻitasi i lomiga ua mavae o le Troubleshooting LC, ma o le au faitau e fiafia i nei autu e mafai ona latou faasino i nei tusiga ua mavae mo faamatalaga i mafuaaga autu ma fofo talafeagai mo nei faafitauli. Faʻamatalaga auiliili.
E mafai ona mafua uma mai mea fa'akemikolo po'o mea fa'aletino le peak tailing, peak fronting, ma le splitting, ma e eseese lava le lisi o fofo e ono tula'i mai i nei fa'afitauli, e fuafua i le pe o tatou feagai ma se fa'afitauli fa'akemikolo po'o se fa'aletino. E masani lava, i le fa'atusatusaina o peaks eseese i totonu o se chromatogram, e mafai ona e mauaina ni fa'ailoga taua e uiga i le po'o fea le mafua'aga. Afai o peaks uma i totonu o se chromatogram e tutusa foliga, e foliga mai e le fa'aletino le mafua'aga. Afai e na'o le tasi pe ni nai peaks e a'afia, ae foliga lelei isi mea uma, e foliga mai o le mafua'aga o le fa'akemikolo.
O mafuaʻaga faʻakemikolo o le peak tailing e matua faigata tele e talanoaina puupuu iinei. O le tagata faitau fiafia e faasino i le lomiga talu ai nei o le "LC Troubleshooting" mo se talanoaga loloto (10). Peitaʻi, o se mea faigofie e taumafai ai o le faʻaitiitia lea o le tele o le analyte ua tuiina ma vaʻai pe faʻaleleia le foliga o le tumutumu. Afai o lea, o se faʻailoga lelei lea o le faʻafitauli o le "mass overload". I lenei tulaga, e tatau ona faʻatapulaʻaina le metotia i le tuiina o ni vaega laiti o le analyte, pe tatau ona suia tulaga o le chromatographic ina ia mafai ona maua ni foliga lelei o tumutumu e tusa lava pe tele atu vaega ua tuiina.
E tele fo'i mafua'aga fa'aletino e ono mafua ai le tumutumu o le tailing. O le au faitau e fiafia i se talanoaga auiliili o mea e ono tutupu, e fa'asino i se isi lomiga talu ai nei o le "LC Troubleshooting" (11). O se tasi o mafua'aga fa'aletino masani o le tumutumu o le tailing o se feso'ota'iga le lelei i se tulaga i le va o le injector ma le detector (12). O se fa'ata'ita'iga ogaoga o lo'o fa'aalia i le Ata 1d, na maua i la'u fale su'esu'e i ni nai vaiaso talu ai. I lenei tulaga, na matou fausia ai se faiga ma se valve fou e tui ai lea matou te le'i fa'aaogaina muamua, ma fa'apipi'i se la'ititi o le voluma o le tui ma se ferrule lea na mamanuina i luga o se capillary u'amea e le gaoia. Ina ua mae'a ni fa'ata'ita'iga muamua o le foia o fa'afitauli, na matou iloa ai o le loloto o le port i le injection valve stator e sili atu le loloto nai lo le mea na matou masani ai, ma i'u ai i se voluma tele e mate i le pito i lalo o le port. O lenei fa'afitauli e faigofie ona foia e ala i le suia o le injection loop i se isi paipa, e mafai ona matou fetu'una'i le ferrule i le tulaga talafeagai e aveese ai le voluma e mate i le pito i lalo o le port.
O pito i luma e pei o loʻo faʻaalia i le Ata 1e e mafai foi ona mafua mai i faʻafitauli faaletino poʻo vailaʻau. O se mafuaʻaga masani faaletino o le pito i luma o le mea lea e le o lelei le faʻapipiʻiina o le moega o le koluma, pe ua toe faʻatulagaina vaega i le aluga o taimi. E pei o le pito i luma e mafua mai i lenei mea faʻaletino, o le auala sili e faʻaleleia ai lenei mea o le sui lea o le koluma ma faʻaauau pea. O le mea moni, o foliga o pito i luma e mafua mai i vailaʻau e masani ona tulaʻi mai i mea tatou te taʻua o tulaga taofia "lē laina". I lalo o tulaga lelei (laina), o le aofaʻi o le analyte e taofia e le vaega tumau (o le mea lea, o le mea e taofia ai) e fesoʻotaʻi faʻatasi ma le faʻaputuga o le analyte i le koluma. I le faʻaaogaina o le chromatographic, o lona uiga aʻo faʻateleina le tele o le analyte e tuiina i totonu o le koluma, e maualuga atu le tumutumu, ae le lautele. O lenei sootaga e motusia pe a le laina le amioga o le taofiga, ma e le gata ina maualuga atu tumutumu ae lautele foi pe a tele atu le mamafa e tuiina. E le gata i lea, o foliga e le laina e fuafua ai le foliga o tumutumu chromatographic, e mafua ai pito i luma poʻo pito i tua. E pei o le tele o le mamafa e mafua ai le pito i luma (10), E mafai fo'i ona iloa le tumutumuga o le ta'ita'iga e mafua mai i le taofia o le nonlinear e ala i le fa'aitiitia o le tele o le analyte ua tuiina. Afai e fa'aleleia le foliga o le tumutumuga, e tatau ona suia le metotia ina ia 'aua ne'i sili atu i le tulaga lelei o le tuiina lea e mafua ai le pito ta'ita'i, pe tatau fo'i ona suia tulaga o le chromatographic e fa'aitiitia ai lenei amioga.
O nisi taimi tatou te matauina ai se mea e foliga mai o se tumutumu "vaevae", e pei ona faaalia i le Ata 1f. O le laasaga muamua i le foiaina o lenei faafitauli o le fuafuaina lea pe o le foliga o le tumutumu e mafua mai i le co-elution fa'aitiitiga (e pei o le i ai o ni mea e lua eseese ae e vavalalata le eluting). Afai e iai moni ni analytes se lua eseese e eluting vavalalata, o lona uiga o se mataupu o le faaleleia atili o lo latou iugafono (mo se faataitaiga, e ala i le faateleina o le selectivity, retention, po o le numera o le plate), ma o tumutumu "vaevae" manino e feso'ota'i ma le faaletino. O le Faatinoga e leai se mea e fai ma le koluma lava ia. E masani lava, o le faailo sili ona taua i lenei faaiuga pe o tumutumu uma i le chromatogram e faaalia ai foliga vaeluaina, pe na o le tasi pe lua. Afai e na o le tasi pe lua, atonu o se faafitauli o le co-elution; afai e vaeluaina tumutumu uma, atonu o se faafitauli faaletino, e foliga mai e feso'ota'i ma le koluma lava ia.
O tumutumu vaeluaina e fesoʻotaʻi ma meatotino faaletino o le koluma lava ia e masani ona mafua mai i le poloka faʻaputuga o le ulufale mai poʻo le alu ese mai o le vai, poʻo le toe faʻatulagaina o vaega i totonu o le koluma, ma mafai ai e le vaega feaveaʻi ona tafe vave atu nai lo le vaega feaveaʻi i nisi o vaega o le fausiaina o le auala o le koluma. i isi itulagi (11). O le frit ua poloka faʻaputuga e mafai ona faʻamamāina i nisi taimi e ala i le faʻaliliuina o le tafe i totonu o le koluma; peitaʻi, i loʻu poto masani, e masani lava o se fofo puʻupuʻu nai lo se fofo umi. E masani ona afaina ai koluma faʻaonaponei pe afai e toe faʻapipiʻi vaega i totonu o le koluma. I le taimi nei, e sili ona sui le koluma ma faʻaauau.
O le tumutumuga i le Ata 1g, mai se faʻataʻitaʻiga talu ai nei i laʻu lava fale suʻesuʻe, e masani ona faʻaalia ai o le faʻailoga ua matua maualuga lava ma ua oʻo atu i le pito maualuga o le vaega tali. Mo masini e iloa ai le absorbance optical (UV-vis i lenei tulaga), pe a matua maualuga le maualuga o le analyte, e mitiia e le analyte le tele o le malamalama e ui atu i le detector flow cell, ma e na o sina malamalama itiiti e mafai ona iloa. I lalo o nei tulaga, o le faʻailoga eletise mai le photodetector e matua aʻafia lava e le tele o puna o pisa, e pei o le malamalama sese ma le "tafe pogisa", ma avea ai le faʻailoga ma foliga "le mautonu" ma e tutoʻatasi mai le maualuga o le analyte. A tupu lenei mea, e masani ona faigofie ona foia le faʻafitauli e ala i le faʻaitiitia o le tele o le tui o le analyte—faʻaitiitia le tele o le tui, faʻavaivaia le faʻataʻitaʻiga, poʻo mea uma e lua.
I le aʻoga chromatography, matou te faʻaaogaina le faʻailo o le masini suʻesuʻe (e pei o le y-axis i le chromatogram) o se faʻailoga o le maualuga o le analyte i le faʻataʻitaʻiga. O lea e foliga ese ai le vaʻaia o se chromatogram ma se faʻailo i lalo ifo o le zero, aua o le faʻamatalaga faigofie o lenei mea e faʻaalia ai se maualuga leaga o le analyte - lea e le mafai ona faia faaletino. I loʻu poto masani, o tumutumu leaga e masani ona matauina pe a faʻaaogaina masini suʻesuʻe absorbance optical (e pei o le UV-vis).
I lenei tulaga, o le tumutumu leaga o lona uiga o molelaʻau e alu ese mai le koluma e mitiia sina malamalama itiiti nai lo le vaega feaveaʻi lava ia i le taimi lava lea aʻo leʻi oʻo i le tumutumu ma ina ua maeʻa. E mafai ona tupu lenei mea, mo se faʻataʻitaʻiga, pe a faʻaaogaina ni galu maualalo o le iloa (<230 nm) ma ni faʻaopoopoga o le vaega feaveaʻi e mitiia le tele o le malamalama i nei galu. O ia faʻaopoopoga e mafai ona avea ma vaega o le solvent o le vaega feaveaʻi e pei o le methanol poʻo vaega o le buffer e pei o le acetate poʻo le formate. E mafai moni lava ona faʻaaogaina tumutumu leaga e saunia ai se piʻo faʻatulagaina ma maua ai faʻamatalaga saʻo, o lea e leai se mafuaʻaga autu e aloese ai mai ia i latou lava (o lenei metotia e taʻua i nisi taimi o le "iloiloina o le UV lē tuusaʻo") (13). Peitaʻi, afai tatou te mananaʻo moni e aloese atoa mai tumutumu leaga, i le tulaga o le iloa o le absorbance, o le fofo sili ona lelei o le faʻaaogaina lea o se galu eseese o le iloa ina ia sili atu le mitiia e le analyte nai lo le vaega feaveaʻi, pe suia le tuufaatasiga o le vaega feaveaʻi ina ia itiiti le malamalama latou te mitiia nai lo le analytes.
E mafai fo'i ona aliali mai ni tumutumuga leaga pe a fa'aogaina le iloa o le refractive index (RI) pe a ese le refractive index o vaega e ese mai le analyte i le fa'ata'ita'iga, e pei o le solvent matrix, mai le refractive index o le mobile phase. E tupu fo'i lenei mea i le iloa o le UV-vis, ae o lenei aafiaga e masani ona fa'aitiitia pe a fa'atusatusa i le iloa o le RI. I tulaga uma e lua, e mafai ona fa'aitiitia tumutumuga leaga e ala i le fa'afetaui lelei o le tu'ufa'atasiga o le sample matrix i le mobile phase.
I le vaega tolu i le autu autū o le foia o faafitauli o le LC, sa ou talanoaina ai tulaga e ese ai le foliga o le tumutumu ua matauina mai le foliga o le tumutumu e faamoemoeina pe masani. O le foia lelei o faafitauli faapena e amata i le malamalama i foliga o tumutumu e faamoemoeina (e faavae i luga o le teore po o le poto masani muamua i metotia o loo iai nei), o lea e manino ai le eseesega mai nei faamoemoega. O faafitauli o foliga o tumutumu e tele mafuaaga eseese e ono mafua ai (lautele tele, siiling, leading edge, ma isi mea faapena). I lenei vaega, ou te talanoaina auiliili nisi o mafuaaga ou te vaaia soo. O le iloaina o nei auiliiliga e maua ai se nofoaga lelei e amata ai le foia o faafitauli, ae le o pu'eina uma ai avanoa. O le au faitau e fiafia i se lisi loloto o mafuaaga ma fofo e mafai ona faasino i le siata puipui o le LCGC "LC Troubleshooting Guide".
(4) Siata puipui o le LCGC “Taiala mo le Faʻafitauli o le LC”. https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Su'esu'ega o Fa'amaumauga ma le Fa'agasologa o Fa'ailoilo i le Chromatography (Elsevier, Niu Ioka, NY, 1998), itulau 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF ma Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.