ບາງຫົວຂໍ້ແກ້ໄຂບັນຫາ LC ບໍ່ເຄີຍລ້າສະໄຫມ, ເພາະວ່າມີບັນຫາໃນການປະຕິບັດ LC, ເຖິງແມ່ນວ່າເຕັກໂນໂລຢີຂອງເຄື່ອງມືຈະປັບປຸງໃນໄລຍະເວລາ. ມີຫຼາຍວິທີທີ່ບັນຫາສາມາດເກີດຂື້ນໃນລະບົບ LC ແລະສິ້ນສຸດລົງໃນຮູບຮ່າງສູງສຸດທີ່ບໍ່ດີ. ເມື່ອບັນຫາທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບຮູບຮ່າງສູງສຸດເກີດຂື້ນ, ບັນຊີລາຍຊື່ສັ້ນຂອງສາເຫດທີ່ເປັນໄປໄດ້ສໍາລັບຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ຊ່ວຍໃຫ້ປະສົບການແກ້ໄຂບັນຫາຂອງພວກເຮົາງ່າຍຂຶ້ນ.
ມັນມ່ວນທີ່ຈະຂຽນຄໍລໍາ "LC Troubleshooting" ນີ້ແລະຄິດກ່ຽວກັບຫົວຂໍ້ໃນແຕ່ລະເດືອນ, ເພາະວ່າບາງຫົວຂໍ້ບໍ່ເຄີຍອອກແບບ. ໃນຂະນະທີ່ການຄົ້ນຄວ້າ chromatography ບາງຫົວຂໍ້ຫຼືແນວຄວາມຄິດໄດ້ກາຍເປັນລ້າສະໄຫມຍ້ອນວ່າພວກເຂົາຖືກປ່ຽນແທນໂດຍແນວຄວາມຄິດໃຫມ່ແລະດີກວ່າ, ໃນຂົງເຂດການແກ້ໄຂບັນຫາ, ນັບຕັ້ງແຕ່ບົດຄວາມແກ້ໄຂບັນຫາທໍາອິດທີ່ປາກົດຢູ່ໃນວາລະສານນີ້) ບາງຄັ້ງໃນວາລະສານ (ວາລະສານ) ຍັງມີຢູ່ໃນວາລະສານ. 1983(1).ໃນຊຸມປີມໍ່ໆມານີ້, ຂ້າພະເຈົ້າໄດ້ສຸມໃສ່ການແກ້ໄຂບັນຫາ LC ຫຼາຍພາກສ່ວນກ່ຽວກັບທ່າອ່ຽງຮ່ວມສະໄໝທີ່ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ໂຄໂມຕາພາບຂອງແຫຼວ (LC) (ຕົວຢ່າງ: ການປຽບທຽບຄວາມເຂົ້າໃຈຂອງພວກເຮົາກ່ຽວກັບຜົນກະທົບຂອງຄວາມກົດດັນຕໍ່ການຮັກສາໄວ້ [2] ຄວາມກ້າວຫນ້າໃຫມ່) ການຕີຄວາມໝາຍຂອງຜົນໄດ້ຮັບ LC ຂອງພວກເຮົາ ແລະວິທີການແກ້ໄຂບັນຫາດ້ວຍເຄື່ອງມື LC ທີ່ທັນສະໄຫມຂອງພວກເຮົາໄດ້ເລີ່ມດໍາເນີນຕໍ່ໄປ, ໃນເດືອນນີ້ (ຊຸດທີ 3). ເດືອນທັນວາ 2021, ເຊິ່ງໄດ້ສຸມໃສ່ບາງຫົວຂໍ້ "ຊີວິດແລະຄວາມຕາຍ" ຂອງການແກ້ໄຂບັນຫາ LC — ອົງປະກອບທີ່ດີສໍາລັບການແກ້ໄຂບັນຫາໃດໆແມ່ນມີຄວາມຈໍາເປັນ, ບໍ່ວ່າລະບົບທີ່ພວກເຮົາກໍາລັງໃຊ້ອາຍຸເທົ່າໃດ. ຫົວຂໍ້ຫຼັກຂອງຊຸດນີ້ແມ່ນມີຄວາມກ່ຽວຂ້ອງສູງກັບ "ຄູ່ມືການແກ້ໄຂບັນຫາ LC" ທີ່ມີຊື່ສຽງຂອງ LCGC ຕາຕະລາງກໍາແພງຫີນ (4) ທີ່ເນັ້ນໃສ່ໃນຫຼາຍໆພາກສ່ວນຂອງຫ້ອງທົດລອງນີ້. ຄຸນລັກສະນະຂອງຈຸດສູງສຸດ.ຢ່າງບໍ່ໜ້າເຊື່ອ, ແຜນຜັງຝາໄດ້ສະແດງ 44 ສາເຫດທີ່ອາດເຮັດໃຫ້ເກີດຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດທີ່ບໍ່ດີ! ພວກເຮົາບໍ່ສາມາດພິຈາລະນາບັນຫາທັງໝົດເຫຼົ່ານີ້ໄດ້ໂດຍລະອຽດໃນບົດຄວາມດຽວ, ດັ່ງນັ້ນໃນພາກທຳອິດນີ້ໃນຫົວຂໍ້, ຂ້ອຍຈະເນັ້ນໃສ່ບາງອັນທີ່ຂ້ອຍເຫັນເລື້ອຍໆ. ຂ້ອຍຫວັງວ່າຜູ້ໃຊ້ LC ໜຸ່ມ ແລະຜູ້ສູງອາຍຸຈະພົບເຫັນບາງຄຳແນະນຳທີ່ເປັນປະໂຫຍດ ແລະເຕືອນໃຈໃນຫົວຂໍ້ສຳຄັນນີ້.
ຂ້ອຍພົບວ່າຕົນເອງຕອບຄໍາຖາມແກ້ໄຂບັນຫາດ້ວຍ "ສິ່ງໃດກໍ່ເປັນໄປໄດ້". ຄໍາຕອບນີ້ອາດຈະເບິ່ງຄືວ່າງ່າຍເມື່ອພິຈາລະນາການສັງເກດການທີ່ຍາກທີ່ຈະຕີຄວາມຫມາຍ, ແຕ່ຂ້ອຍເຫັນວ່າມັນມັກຈະເຫມາະສົມ. ດ້ວຍຫຼາຍສາເຫດທີ່ເປັນໄປໄດ້ຂອງຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດທີ່ບໍ່ດີ, ມັນເປັນສິ່ງສໍາຄັນທີ່ຈະເປີດໃຈໃນເວລາທີ່ພິຈາລະນາບັນຫາທີ່ອາດຈະເກີດຂຶ້ນ, ແລະເພື່ອໃຫ້ສາມາດຈັດລໍາດັບຄວາມສໍາຄັນຂອງສາເຫດທີ່ອາດຈະເກີດຂຶ້ນເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນຄວາມພະຍາຍາມແກ້ໄຂບັນຫາຂອງພວກເຮົາ, ໂດຍເນັ້ນໃສ່ຫຼາຍທີ່ສຸດ. ສຳຄັນ.ເປັນໄປໄດ້.
ຂັ້ນຕອນສໍາຄັນໃນການປະຕິບັດການແກ້ໄຂບັນຫາໃດໆ - ແຕ່ຫນຶ່ງທີ່ຂ້ອຍຄິດວ່າຖືກປະເມີນຫນ້ອຍ - ແມ່ນການຮັບຮູ້ວ່າມີບັນຫາທີ່ຕ້ອງໄດ້ຮັບການແກ້ໄຂ. ການຮັບຮູ້ວ່າມີບັນຫາມັກຈະຫມາຍຄວາມວ່າການຮັບຮູ້ວ່າສິ່ງທີ່ເກີດຂື້ນກັບເຄື່ອງມືແມ່ນແຕກຕ່າງຈາກຄວາມຄາດຫວັງຂອງພວກເຮົາ, ເຊິ່ງຖືກສ້າງຂື້ນໂດຍທິດສະດີ, ຄວາມຮູ້ທາງປະຈັກພະຍານ, ແລະປະສົບການ (5). "ຮູບຮ່າງສູງສຸດ" ອ້າງອີງເຖິງຈຸດສູງສຸດ (ຕົວຈິງແລ້ວ, peakym). asymmetrical, smooth, fluffy, ນໍາຫນ້າ, tailing, ແລະອື່ນໆ), ແຕ່ຍັງ width. ຄວາມຄາດຫວັງຂອງພວກເຮົາສໍາລັບຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດທີ່ແທ້ຈິງແມ່ນງ່າຍດາຍ. Theory (6) ດີສະຫນັບສະຫນູນຄວາມຄາດຫວັງຂອງປື້ມຕໍາລາທີ່, ໃນກໍລະນີຫຼາຍທີ່ສຸດ, chromatographic peaks ຄວນຈະສົມມາດແລະສອດຄ່ອງກັບຮູບຮ່າງຂອງ Gaussian ການແຜ່ກະຈາຍ, ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ່ 1, ພວກເຮົາຄາດຫວັງວ່າຄວາມກວ້າງຂອງຫົວຂໍ້ຈະມີຄວາມຊັບຊ້ອນຫຼາຍ. ໃນບົດຄວາມໃນອະນາຄົດ. ຮູບແບບຈຸດສູງສຸດໃນຮູບທີ 1 ສະແດງໃຫ້ເຫັນບາງຄວາມເປັນໄປໄດ້ອື່ນໆທີ່ສາມາດສັງເກດເຫັນໄດ້ - ໃນຄໍາສັບຕ່າງໆອື່ນໆ, ບາງວິທີທີ່ອາດຈະຜິດພາດ. ໃນສ່ວນທີ່ເຫຼືອຂອງການຕິດຕັ້ງນີ້, ພວກເຮົາຈະໃຊ້ເວລາປຶກສາຫາລືບາງຕົວຢ່າງສະເພາະຂອງສະຖານະການທີ່ສາມາດນໍາໄປສູ່ປະເພດຮູບຮ່າງເຫຼົ່ານີ້.
ບາງຄັ້ງຈຸດສູງສຸດບໍ່ໄດ້ສັງເກດເຫັນຢູ່ໃນ chromatogram ບ່ອນທີ່ພວກເຂົາຄາດວ່າຈະຖືກ eluted. ຕາຕະລາງກໍາແພງຂ້າງເທິງຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າບໍ່ມີຈຸດສູງສຸດ (ສົມມຸດວ່າຕົວຢ່າງຕົວຈິງມີການວິເຄາະເປົ້າຫມາຍທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ຄວນຈະເຮັດໃຫ້ການຕອບສະຫນອງຂອງເຄື່ອງກວດຈັບພຽງພໍເພື່ອເຂົ້າໄປເບິ່ງມັນຂ້າງເທິງສິ່ງລົບກວນ) ມັກຈະກ່ຽວຂ້ອງກັບບັນຫາເຄື່ອງມືບາງຢ່າງຫຼືເງື່ອນໄຂໄລຍະມືຖືທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ (ຖ້າສັງເກດເຫັນທັງຫມົດ). ສູງສຸດ, ປົກກະຕິແລ້ວ "ອ່ອນແອ"). ບັນຊີລາຍຊື່ສັ້ນຂອງບັນຫາທີ່ເປັນໄປໄດ້ແລະການແກ້ໄຂໃນປະເພດນີ້ສາມາດພົບໄດ້ຢູ່ໃນຕາຕະລາງ I.
ດັ່ງທີ່ໄດ້ກ່າວມາຂ້າງເທິງ, ຄໍາຖາມກ່ຽວກັບການຂະຫຍາຍສູງສຸດຂອງຈຸດສູງສຸດທີ່ຄວນຈະໄດ້ຮັບການຍອມຮັບກ່ອນທີ່ຈະເອົາໃຈໃສ່ແລະພະຍາຍາມແກ້ໄຂມັນເປັນຫົວຂໍ້ທີ່ສັບສົນທີ່ຂ້ອຍຈະສົນທະນາໃນບົດຄວາມໃນອະນາຄົດ. ປະສົບການຂອງຂ້ອຍແມ່ນວ່າການຂະຫຍາຍຈຸດສູງສຸດແມ່ນມັກຈະມາພ້ອມກັບການປ່ຽນແປງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດ, ແລະການຫາງສູງສຸດແມ່ນພົບເລື້ອຍກວ່າກ່ອນຈຸດສູງສຸດຫຼືການແບ່ງປັນ. ເຫດຜົນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຈໍານວນຫນ້ອຍ:
ແຕ່ລະບັນຫາເຫຼົ່ານີ້ໄດ້ຖືກປຶກສາຫາລືຢ່າງລະອຽດໃນບັນຫາທີ່ຜ່ານມາຂອງ Troubleshooting LC, ແລະຜູ້ອ່ານທີ່ສົນໃຈໃນຫົວຂໍ້ເຫຼົ່ານີ້ສາມາດອ້າງອີງເຖິງບົດຄວາມທີ່ຜ່ານມາເຫຼົ່ານີ້ສໍາລັບຂໍ້ມູນກ່ຽວກັບສາເຫດຂອງຮາກແລະວິທີການແກ້ໄຂບັນຫາເຫຼົ່ານີ້. ລາຍລະອຽດເພີ່ມເຕີມ.
Peak tailing, peak fronting, and splitting can be an chemical or physical phenomena , and the proposable solutions to these problems ມີຄວາມແຕກຕ່າງກັນຢ່າງກວ້າງຂວາງ, ຂຶ້ນກັບວ່າພວກເຮົາກໍາລັງຈັດການກັບບັນຫາທາງເຄມີຫຼືທາງດ້ານຮ່າງກາຍ. ເລື້ອຍໆ, ໂດຍການປຽບທຽບຈຸດສູງສຸດທີ່ແຕກຕ່າງກັນໃນ chromatogram, ທ່ານສາມາດຊອກຫາຂໍ້ຄຶດທີ່ສໍາຄັນກ່ຽວກັບສິ່ງທີ່ເປັນ culprit. ຖ້າຫາກວ່າ chrom ເກືອບທັງຫມົດຈະບໍ່ມີຮູບຮ່າງຄ້າຍຄືກັນ. ທາງກາຍະພາບ.ຖ້າມີພຽງຫນຶ່ງຫຼືສອງສາມຈຸດໄດ້ຮັບຜົນກະທົບ, ແຕ່ສ່ວນທີ່ເຫຼືອເບິ່ງດີ, ສາເຫດແມ່ນສ່ວນຫຼາຍແມ່ນສານເຄມີ.
ສາເຫດທາງເຄມີຂອງຈຸດສູງສຸດແມ່ນສັບສົນເກີນໄປທີ່ຈະສົນທະນາໂດຍຫຍໍ້ຢູ່ທີ່ນີ້. ຜູ້ອ່ານທີ່ສົນໃຈແມ່ນໄດ້ກ່າວເຖິງບັນຫາທີ່ຜ່ານມາຂອງ "LC Troubleshooting" ສໍາລັບການສົນທະນາທີ່ເລິກເຊິ່ງກວ່າ (10). ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ສິ່ງງ່າຍໆທີ່ຈະພະຍາຍາມແມ່ນການຫຼຸດຜ່ອນມະຫາຊົນຂອງການວິເຄາະທີ່ຖືກສັກແລະເບິ່ງວ່າຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດຈະປັບປຸງຫຼືບໍ່. ຖ້າເປັນດັ່ງນັ້ນ, ນີ້ແມ່ນ "ຂໍ້ຄຶດທີ່ດີສໍາລັບບັນຫານີ້." ການສັກຢາມະຫາຊົນການວິເຄາະຂະຫນາດນ້ອຍ, ຫຼືເງື່ອນໄຂ chromatographic ຕ້ອງໄດ້ຮັບການປ່ຽນແປງເພື່ອໃຫ້ຮູບຮ່າງສູງສຸດທີ່ດີສາມາດໄດ້ຮັບເຖິງແມ່ນວ່າມີມະຫາຊົນຂະຫນາດໃຫຍ່ທີ່ສັກຢາ.
ຍັງມີເຫດຜົນທາງກາຍະພາບຫຼາຍອັນທີ່ອາດຈະເຮັດໃຫ້ການຫາງສູງສຸດ.ຜູ້ອ່ານທີ່ສົນໃຈໃນການສົນທະນາລະອຽດກ່ຽວກັບຄວາມເປັນໄປໄດ້ແມ່ນໄດ້ອ້າງອີງເຖິງບັນຫາ “LC Troubleshooting” (11).ໜຶ່ງໃນສາເຫດທາງກາຍະພາບທີ່ພົບເລື້ອຍກວ່າຂອງ Peak tailing ແມ່ນການເຊື່ອມຕໍ່ທີ່ບໍ່ດີຢູ່ຈຸດລະຫວ່າງ injector ແລະເຄື່ອງກວດຈັບ (12).ຕົວຢ່າງທີ່ຮ້າຍກາດແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ່ 1d ທີ່ຜ່ານມາ, ລະບົບການສີດຂອງຂ້ອຍທີ່ໄດ້ສ້າງຂຶ້ນໃນສອງສາມອາທິດຜ່ານມານີ້. ວາວທີ່ພວກເຮົາບໍ່ໄດ້ໃຊ້ມາກ່ອນ, ແລະຕິດຕັ້ງວົງສີດປະລິມານຂະຫນາດນ້ອຍທີ່ມີ ferrule ທີ່ຖືກ molded ໃສ່ capillary ສະແຕນເລດ. ຫຼັງຈາກການທົດລອງແກ້ໄຂບັນຫາເບື້ອງຕົ້ນບາງຢ່າງ, ພວກເຮົາຮູ້ວ່າຄວາມເລິກຂອງພອດໃນປ່ຽງສະເຕີຣອຍແມ່ນເລິກກວ່າທີ່ພວກເຮົາເຄີຍໃຊ້, ສົ່ງຜົນໃຫ້ມີປະລິມານຕາຍຂະຫນາດໃຫຍ່ຢູ່ດ້ານລຸ່ມຂອງພອດ. ບັນຫານີ້ແມ່ນແກ້ໄຂໄດ້ງ່າຍໂດຍການປ່ຽນຕໍາແຫນ່ງທໍ່ສີດອື່ນ, ພວກເຮົາສາມາດແກ້ໄຂໄດ້ຢ່າງງ່າຍດາຍ. ປະລິມານທີ່ຕາຍແລ້ວຢູ່ດ້ານລຸ່ມຂອງທ່າເຮືອ.
ດ້ານໜ້າສູງສຸດຄືກັບທີ່ສະແດງໃນຮູບທີ 1e ຍັງສາມາດເກີດຈາກບັນຫາທາງກາຍະພາບ ຫຼືທາງເຄມີ. ສາເຫດທາງກາຍະພາບທົ່ວໄປຂອງຂອບຊັ້ນນຳກໍ່ຄືວ່າຊັ້ນອະນຸພາກຂອງຖັນບໍ່ໄດ້ຖືກບັນຈຸໄດ້ດີ, ຫຼືວ່າອະນຸພາກໄດ້ຖືກຈັດລະບຽບຄືນໃໝ່ຕາມເວລາ. ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການຫາງສູງສຸດທີ່ເກີດຈາກປະກົດການທາງກາຍະພາບນີ້, ວິທີທີ່ດີທີ່ສຸດໃນການແກ້ໄຂນີ້ແມ່ນການປ່ຽນແທນຖັນ ແລະສືບຕໍ່ເປັນຮູບຮ່າງທາງເຄມີ. ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ "ບໍ່ເປັນເສັ້ນ". ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ເຫມາະສົມ (ເສັ້ນ), ປະລິມານຂອງການວິເຄາະທີ່ເກັບຮັກສາໄວ້ໂດຍໄລຍະ stationary (ເພາະສະນັ້ນ, ປັດໄຈການເກັບຮັກສາ) ແມ່ນເປັນເສັ້ນກ່ຽວຂ້ອງກັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການວິເຄາະໃນຖັນ. Chromatographically, ນີ້ຫມາຍຄວາມວ່າຍ້ອນວ່າມະຫາຊົນຂອງການວິເຄາະໃສ່ໃນຖັນເພີ່ມຂຶ້ນ, ຈຸດສູງສຸດຈະກາຍເປັນຄວາມສູງ, ພຶດຕິກໍາການຄົງທີ່ແມ່ນບໍ່ກວ້າງ. ບໍ່ພຽງແຕ່ກາຍເປັນສູງແຕ່ຍັງກວ້າງຂຶ້ນຍ້ອນວ່າມວນຫຼາຍໄດ້ຖືກສີດ. ນອກຈາກນັ້ນ, ຮູບຮ່າງ nonlinear ກໍານົດຮູບຮ່າງຂອງ chromatographic peaks, ສົ່ງຜົນໃຫ້ແຂບຊັ້ນນໍາຫຼື trailing. ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການ overload ມະຫາຊົນທີ່ເຮັດໃຫ້ເກີດການ tailing ສູງສຸດ (10), ສູງສຸດທີ່ເກີດຈາກການເກັບຮັກສາ nonlinear ຍັງສາມາດຖືກວິນິດໄສໂດຍການຫຼຸດຜ່ອນການສີດນໍາ analyte ຮູບຮ່າງແມ່ນການປັບປຸງຄຸນນະພາບ, ຖ້າວິທີການ peak ໄດ້. ຂອບ, ຫຼືເງື່ອນໄຂຂອງ chromatographic ຕ້ອງໄດ້ຮັບການປ່ຽນແປງເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນພຶດຕິກໍານີ້.
ບາງຄັ້ງພວກເຮົາສັງເກດເຫັນສິ່ງທີ່ເບິ່ງຄືວ່າເປັນຈຸດສູງສຸດ "ແຍກ", ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 1f. ຂັ້ນຕອນທໍາອິດໃນການແກ້ໄຂບັນຫານີ້ແມ່ນການກໍານົດວ່າຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດແມ່ນຍ້ອນການລວມຕົວບາງສ່ວນ (ເຊັ່ນ, ການມີທາດປະສົມສອງຢ່າງທີ່ແຕກຕ່າງແຕ່ໃກ້ຊິດກັນຢ່າງໃກ້ຊິດ). ຖ້າຕົວຈິງແລ້ວມີສອງການວິເຄາະທີ່ແຕກຕ່າງກັນ eluting ໃກ້ຊິດກັນ, ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ມັນເປັນເລື່ອງຂອງການເລືອກໃຫມ່, ການແກ້ໄຂຫຼືການປັບປຸງ. count), ແລະຈຸດສູງສຸດ "ແຍກ" ທີ່ປາກົດຂື້ນແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບການປະຕິບັດທາງກາຍະພາບບໍ່ມີຫຍັງກ່ຽວຂ້ອງກັບຖັນຕົວມັນເອງ. ເລື້ອຍໆ, ຂໍ້ຄຶດທີ່ສໍາຄັນທີ່ສຸດຂອງການຕັດສິນໃຈນີ້ແມ່ນວ່າຈຸດສູງສຸດທັງຫມົດໃນ chromatogram ສະແດງໃຫ້ເຫັນຮູບຮ່າງທີ່ແຕກແຍກ, ຫຼືພຽງແຕ່ຫນຶ່ງຫຼືສອງ. ຖ້າມັນເປັນພຽງແຕ່ຫນຶ່ງຫຼືສອງ, ມັນອາດຈະເປັນບັນຫາຮ່ວມກັນ; ຖ້າຈຸດສູງສຸດທັງຫມົດຖືກແບ່ງອອກ, ມັນອາດຈະເປັນບັນຫາທາງດ້ານຮ່າງກາຍ, ສ່ວນຫຼາຍອາດຈະກ່ຽວຂ້ອງກັບຄໍລໍາຂອງມັນເອງ.
ການແຍກຈຸດສູງສຸດທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບຂອງຖັນຕົວມັນເອງປົກກະຕິແລ້ວແມ່ນເນື່ອງມາຈາກບາງສ່ວນຂອງ inlet ຫຼື outlet frits ຕັນ, ຫຼື reorganization ຂອງ particles ໃນຖັນ, ອະນຸຍາດໃຫ້ໄລຍະມືຖືສາມາດໄຫຼໄວກວ່າໄລຍະມືຖືໃນບາງພື້ນທີ່ຂອງການສ້າງຊ່ອງຄໍລໍາ .ໃນພາກພື້ນອື່ນໆ (11). frit ອຸດຕັນບາງສ່ວນບາງຄັ້ງສາມາດຖືກລ້າງໂດຍການກັບຄືນການໄຫຼຜ່ານຖັນ; ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ໃນປະສົບການຂອງຂ້ອຍ, ນີ້ມັກຈະເປັນໄລຍະສັ້ນແທນທີ່ຈະເປັນການແກ້ໄຂໃນໄລຍະຍາວ. ນີ້ມັກຈະເສຍຊີວິດກັບຄໍລໍາທີ່ທັນສະໄຫມຖ້າ particles recombine ພາຍໃນຖັນ. ໃນຈຸດນີ້, ມັນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະປ່ຽນຖັນແລະສືບຕໍ່.
ຈຸດສູງສຸດໃນຮູບ 1g, ຍັງຈາກຕົວຢ່າງທີ່ຜ່ານມາຢູ່ໃນຫ້ອງທົດລອງຂອງຂ້ອຍເອງ, ປົກກະຕິແລ້ວຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າສັນຍານສູງຫຼາຍຈົນໄດ້ເຖິງຈຸດສູງສຸດຂອງລະດັບການຕອບໂຕ້. ສໍາລັບເຄື່ອງກວດຈັບ optical absorbance (UV-vis ໃນກໍລະນີນີ້), ເມື່ອຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການວິເຄາະແມ່ນສູງຫຼາຍ, ການວິເຄາະຈະດູດເອົາແສງສ່ວນໃຫຍ່ທີ່ຜ່ານຈຸລັງການໄຫຼຂອງເຄື່ອງກວດຈັບ, ເຮັດໃຫ້ມີແສງສະຫວ່າງຫນ້ອຍຫຼາຍທີ່ຈະກວດພົບ, ເຄື່ອງມືກວດຫາທາງໄຟຟ້າ. ແຫຼ່ງຂອງສິ່ງລົບກວນ, ເຊັ່ນ: ແສງສະຫວ່າງ stray ແລະ "ປະຈຸບັນຊ້ໍາ", ເຮັດໃຫ້ສັນຍານຫຼາຍ "fuzzy" ໃນລັກສະນະແລະເປັນເອກະລາດຂອງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການວິເຄາະ. ເມື່ອສິ່ງດັ່ງກ່າວເກີດຂຶ້ນ, ບັນຫາສາມາດແກ້ໄຂໄດ້ງ່າຍໂດຍການຫຼຸດຜ່ອນປະລິມານການສີດຂອງການວິເຄາະ - ການຫຼຸດຜ່ອນປະລິມານການສີດ, ການເຈືອຈາງຕົວຢ່າງ, ຫຼືທັງສອງ.
ໃນໂຮງຮຽນ chromatography, ພວກເຮົາໃຊ້ສັນຍານເຄື່ອງກວດຈັບ (ie, ແກນ y ໃນ chromatogram) ເປັນຕົວຊີ້ວັດຂອງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການວິເຄາະໃນຕົວຢ່າງ. ສະນັ້ນມັນເບິ່ງຄືວ່າແປກທີ່ຈະເຫັນ chromatogram ທີ່ມີສັນຍານຕ່ໍາກວ່າສູນ, ຍ້ອນວ່າການຕີຄວາມງ່າຍດາຍແມ່ນວ່ານີ້ຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການວິເຄາະທາງລົບ - ເຊິ່ງແນ່ນອນວ່າເປັນໄປບໍ່ໄດ້ທາງດ້ານຮ່າງກາຍ. ໃນປະສົບການຂອງຂ້ອຍ, ຕົວຊີ້ວັດການດູດຊືມທາງລົບມັກຈະຖືກກວດພົບ.
ໃນກໍລະນີນີ້, ຈຸດສູງສຸດທາງລົບພຽງແຕ່ຫມາຍຄວາມວ່າໂມເລກຸນ eluting ຈາກຖັນດູດເອົາແສງສະຫວ່າງຫນ້ອຍກ່ວາໄລຍະມືຖືຕົວມັນເອງທັນທີກ່ອນແລະຫຼັງຈາກຈຸດສູງສຸດ. ນີ້ສາມາດເກີດຂຶ້ນໄດ້, ສໍາລັບການຍົກຕົວຢ່າງ, ໃນເວລາທີ່ນໍາໃຊ້ wavelengths ກວດພົບຂ້ອນຂ້າງຕ່ໍາ (<230 nm) ແລະໄລຍະມືຖືທີ່ດູດຊຶມແສງສະຫວ່າງສ່ວນໃຫຍ່ໃນໄລຍະ wavelengths ເຫຼົ່ານີ້. ອົງປະກອບດັ່ງກ່າວສາມາດເປັນຕົວລະລາຍໃນມືຖືເຊັ່ນ: ທາດລະລາຍໄລຍະຫຼືທາດລະລາຍຂອງໂມເລກຸນ. ຫຼື formate.One ຕົວຈິງແລ້ວສາມາດນໍາໃຊ້ຈຸດສູງສຸດທາງລົບເພື່ອກະກຽມເສັ້ນໂຄ້ງການປັບຕົວແລະໄດ້ຮັບຂໍ້ມູນປະລິມານທີ່ຖືກຕ້ອງ, ດັ່ງນັ້ນບໍ່ມີເຫດຜົນພື້ນຖານທີ່ຈະຫຼີກເວັ້ນພວກມັນຕໍ່ se (ວິທີການນີ້ບາງຄັ້ງເອີ້ນວ່າ "ການກວດສອບ UV ທາງອ້ອມ") (13). ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຖ້າພວກເຮົາຕ້ອງການຫຼີກລ້ຽງຈຸດສູງສຸດທາງລົບທັງຫມົດ, ໃນກໍລະນີຂອງການກວດສອບການດູດຊຶມແມ່ນໃຊ້ວິທີການດູດຊຶມທີ່ດີທີ່ສຸດ. ຫຼາຍ​ກ​່​ວາ​ໄລ​ຍະ​ໂທລະ​ສັບ​ມື​ຖື​, ຫຼື​ການ​ປ່ຽນ​ແປງ​ອົງ​ປະ​ກອບ​ຂອງ​ໄລ​ຍະ​ໂທລະ​ສັບ​ມື​ຖື​ເພື່ອ​ໃຫ້​ພວກ​ເຂົາ​ເຈົ້າ​ດູດ​ແສງ​ຫນ້ອຍ​ກ​່​ວາ​ການ​ວິ​ເຄາະ​.
ຈຸດສູງສຸດທາງລົບຍັງສາມາດປາກົດຂຶ້ນເມື່ອນໍາໃຊ້ການກວດສອບດັດຊະນີ refractive (RI) ເມື່ອດັດຊະນີ refractive ຂອງອົງປະກອບອື່ນໆທີ່ບໍ່ແມ່ນການວິເຄາະໃນຕົວຢ່າງເຊັ່ນ: matrix ທາດລະລາຍ, ແຕກຕ່າງຈາກດັດຊະນີ refractive ຂອງໄລຍະມືຖື. ນີ້ຍັງເກີດຂຶ້ນກັບການກວດຫາ UV-vis, ແຕ່ຜົນກະທົບນີ້ມັກຈະຖືກຫຼຸດຫນ້ອຍລົງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການກວດຫາ RI. ໃນທັງສອງກໍລະນີ, ອົງປະກອບໃກ້ຄຽງສາມາດຈັບຄູ່ກັນຫຼາຍ. matrix ກັບໄລຍະມືຖື.
ໃນສ່ວນສາມໃນຫົວຂໍ້ພື້ນຖານຂອງການແກ້ໄຂບັນຫາ LC, ຂ້າພະເຈົ້າໄດ້ປຶກສາຫາລືສະຖານະການທີ່ຮູບຮ່າງສູງສຸດທີ່ສັງເກດເຫັນແຕກຕ່າງຈາກຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດທີ່ຄາດໄວ້ຫຼືປົກກະຕິ. ການແກ້ໄຂບັນຫາດັ່ງກ່າວທີ່ມີປະສິດທິພາບເລີ່ມຕົ້ນດ້ວຍຄວາມຮູ້ກ່ຽວກັບຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດທີ່ຄາດໄວ້ (ອີງໃສ່ທິດສະດີຫຼືປະສົບການທີ່ຜ່ານມາກັບວິທີການທີ່ມີຢູ່), ດັ່ງນັ້ນຄວາມແຕກແຍກຈາກຄວາມຄາດຫວັງເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນເຫັນໄດ້ຊັດເຈນ. ບັນຫາຮູບຮ່າງຂອງຈຸດສູງສຸດແມ່ນໄດ້ປຶກສາຫາລືກັນຫຼາຍ, ໃນຫົວຂໍ້ທີ່ອາດຈະແຕກຕ່າງກັນ, ແລະອື່ນໆ). ລາຍລະອຽດບາງເຫດຜົນທີ່ຂ້ອຍເຫັນເລື້ອຍໆ. ການຮູ້ລາຍລະອຽດເຫຼົ່ານີ້ເປັນບ່ອນທີ່ດີທີ່ຈະເລີ່ມຕົ້ນການແກ້ໄຂບັນຫາ, ແຕ່ບໍ່ໄດ້ບັນທຶກຄວາມເປັນໄປໄດ້ທັງຫມົດ. ຜູ້ອ່ານທີ່ສົນໃຈໃນບັນຊີລາຍຊື່ທີ່ເລິກເຊິ່ງກວ່າຂອງສາເຫດແລະວິທີແກ້ໄຂສາມາດອ້າງອີງໃສ່ຕາຕະລາງກໍາແພງ LCGC “LC Troubleshooting Guide”.
(4) LCGC “ຄູ່ມືແກ້ໄຂບັນຫາ LC” wall chart.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, ການວິເຄາະຂໍ້ມູນແລະການປະມວນຜົນສັນຍານໃນ Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), pp. 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF ແລະ Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.