உயர் செயல்திறன் திரவ நிறப்பிரிகை (HPLC) மற்றும் அதி உயர் செயல்திறன் திரவ நிறப்பிரிகை (HPLC மற்றும் UHPLC) அமைப்புகளின் கடுமையான தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்வதற்காக பிரத்யேகமாக வடிவமைக்கப்பட்ட ஒரு புரட்சிகரமான புதிய இன்லைன் ஸ்டேடிக் மிக்சர் உருவாக்கப்பட்டுள்ளது. இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட மொபைல் ஃபேஸ்களின் மோசமான கலவையானது, அதிக சிக்னல்-டு-நாய்ஸ் விகிதத்திற்கு வழிவகுக்கும், இது உணர்திறனைக் குறைக்கிறது. ஒரு ஸ்டேடிக் மிக்சரின் குறைந்தபட்ச உள் கொள்ளளவு மற்றும் பௌதீக பரிமாணங்களுடன் இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட திரவங்களின் ஒருபடித்தான நிலையான கலவையானது, ஒரு சிறந்த ஸ்டேடிக் மிக்சரின் மிக உயர்ந்த தரத்தைக் குறிக்கிறது. இந்த புதிய ஸ்டேடிக் மிக்சர், கலவையின் அலகு உள் கொள்ளளவிற்கு அடிப்படை சைன் அலையில் மிக உயர்ந்த சதவீதக் குறைப்புடன் மேம்பட்ட ஹைட்ரோடைனமிக் நிலையான கலவையை வழங்கும் ஒரு தனித்துவமான 3D கட்டமைப்பை உருவாக்க, புதிய 3D அச்சிடும் தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் இதை அடைகிறது. ஒரு வழக்கமான மிக்சரின் உள் கொள்ளளவில் 1/3 பங்கைப் பயன்படுத்துவது அடிப்படை சைன் அலையை 98% குறைக்கிறது. திரவமானது சிக்கலான 3D வடிவவியல்களைக் கடந்து செல்லும்போது, ​​மாறுபட்ட குறுக்குவெட்டுப் பரப்புகள் மற்றும் பாதை நீளங்களைக் கொண்ட ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்ட 3D பாய்வு சேனல்களை இந்த மிக்சர் கொண்டுள்ளது. பல வளைந்து நெளிந்த ஓட்டப் பாதைகளில் ஏற்படும் கலத்தல், உள்ளூர் கொந்தளிப்பு மற்றும் சுழல்களுடன் இணைந்து, நுண், இடைநிலை மற்றும் பேரளவு நிலைகளில் கலத்தலை விளைவிக்கிறது. இந்தத் தனித்துவமான கலனியானது, கணக்கீட்டுப் பாய்ம இயக்கவியல் (CFD) உருவகப்படுத்துதல்களைப் பயன்படுத்தி வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது. இங்கு வழங்கப்பட்டுள்ள சோதனைத் தரவுகள், குறைந்தபட்ச உள் கனஅளவிலேயே சிறப்பான கலத்தல் அடையப்படுவதைக் காட்டுகின்றன.
30 ஆண்டுகளுக்கும் மேலாக, மருந்துப் பொருட்கள், பூச்சிக்கொல்லிகள், சுற்றுச்சூழல் பாதுகாப்பு, தடயவியல் மற்றும் இரசாயனப் பகுப்பாய்வு உள்ளிட்ட பல தொழில்களில் திரவ நிறப்பகுப்பாய்வு பயன்படுத்தப்பட்டு வருகிறது. எந்தவொரு தொழில்துறையின் தொழில்நுட்ப வளர்ச்சிக்கும், ஒரு மில்லியனில் ஒரு பகுதி அல்லது அதற்கும் குறைவான துல்லியத்தில் அளவிடும் திறன் மிகவும் இன்றியமையாதது. மோசமான கலப்புத் திறன், சிக்னல்-டு-நாய்ஸ் விகிதம் குறைவதற்கு வழிவகுக்கிறது. இது, கண்டறிதல் வரம்புகள் மற்றும் உணர்திறன் ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் நிறப்பகுப்பாய்வு சமூகத்திற்கு ஒரு பெரும் தொந்தரவாக உள்ளது. இரண்டு HPLC கரைப்பான்களைக் கலக்கும்போது, ​​சில கரைப்பான்கள் நன்றாகக் கலக்காததால், அவற்றை ஒருபடித்தாக்க வெளிப்புற வழிகளில் வலுக்கட்டாயமாகக் கலக்க வேண்டியது சில நேரங்களில் அவசியமாகிறது. கரைப்பான்கள் முழுமையாகக் கலக்கப்படாவிட்டால், HPLC நிறப்பகுப்பாய்வு வரைபடத்தின் தரம் குறையக்கூடும். இது, அதிகப்படியான அடிமட்ட இரைச்சல் மற்றும்/அல்லது மோசமான சிகர வடிவமாக வெளிப்படும். மோசமான கலப்புடன், அடிமட்ட இரைச்சல் காலப்போக்கில் கண்டறிப்பான் சிக்னலின் சைன் அலையாக (ஏறி இறங்குவது போல) தோன்றும். அதே நேரத்தில், மோசமான கலப்பு, சிகரங்கள் விரிவடைவதற்கும் சமச்சீரற்றதாக மாறுவதற்கும் வழிவகுத்து, பகுப்பாய்வு செயல்திறன், சிகர வடிவம் மற்றும் சிகரத் தெளிவுத்திறன் ஆகியவற்றைக் குறைக்கும். இன்-லைன் மற்றும் டீ ஸ்டேடிக் மிக்சர்கள் இந்த வரம்புகளை மேம்படுத்துவதற்கும், பயனர்கள் குறைந்த கண்டறிதல் வரம்புகளை (உணர்திறன்களை) அடைய அனுமதிப்பதற்கும் ஒரு வழிமுறை என்பதைத் தொழில்துறை அங்கீகரித்துள்ளது. ஒரு சிறந்த ஸ்டேடிக் மிக்சர், அதிகக் கலப்புத் திறன், குறைந்த டெட் வால்யூம் மற்றும் குறைந்த அழுத்த வீழ்ச்சி ஆகியவற்றின் நன்மைகளை, குறைந்தபட்ச அளவு மற்றும் அதிகபட்ச சிஸ்டம் வெளியீட்டுத் திறனுடன் ஒருங்கிணைக்கிறது. மேலும், பகுப்பாய்வு மிகவும் சிக்கலானதாக மாறுவதால், பகுப்பாய்வாளர்கள் வழக்கமாக அதிக முனைவுள்ள மற்றும் கலப்பதற்குக் கடினமான கரைப்பான்களைப் பயன்படுத்த வேண்டும். இதன் பொருள், எதிர்கால சோதனைகளுக்குச் சிறந்த கலப்பு அவசியமாகிறது, இது மேம்பட்ட மிக்சர் வடிவமைப்பு மற்றும் செயல்திறனுக்கான தேவையை மேலும் அதிகரிக்கிறது.
மோட் நிறுவனம் சமீபத்தில் 30 µl, 60 µl மற்றும் 90 µl ஆகிய மூன்று உள் கொள்ளளவுகளில், காப்புரிமை பெற்ற பெர்ஃபெக்ட்பீக்™ (PerfectPeak™) இன்லைன் ஸ்டேடிக் மிக்சர்களின் ஒரு புதிய வரிசையை உருவாக்கியுள்ளது. மேம்பட்ட கலவை மற்றும் குறைந்த சிதறல் தேவைப்படும் பெரும்பாலான HPLC சோதனைகளுக்குத் தேவையான கொள்ளளவுகள் மற்றும் கலவைப் பண்புகளின் வரம்பை இந்த அளவுகள் உள்ளடக்கியுள்ளன. இந்த மூன்று மாடல்களும் 0.5″ விட்டத்தைக் கொண்டவை மற்றும் கச்சிதமான வடிவமைப்பில் தொழில்துறையில் முன்னணி செயல்திறனை வழங்குகின்றன. இவை 316L துருப்பிடிக்காத எஃகால் செய்யப்பட்டு, மந்தத்தன்மைக்காக பாசிவேட் செய்யப்பட்டுள்ளன, ஆனால் டைட்டானியம் மற்றும் பிற அரிப்பை எதிர்க்கும் மற்றும் வேதியியல் ரீதியாக மந்தமான உலோகக் கலவைகளும் கிடைக்கின்றன. இந்த மிக்சர்கள் 20,000 psi வரை அதிகபட்ச இயக்க அழுத்தத்தைக் கொண்டுள்ளன. படம் 1a-வில், இந்த வகை வழக்கமான மிக்சர்களை விட சிறிய உள் கொள்ளளவைப் பயன்படுத்தும் அதே வேளையில், அதிகபட்ச கலவைத் திறனை வழங்கும் வகையில் வடிவமைக்கப்பட்ட 60 µl மோட் ஸ்டேடிக் மிக்சரின் புகைப்படம் உள்ளது. இந்த புதிய ஸ்டேடிக் மிக்சர் வடிவமைப்பு, குரோமடோகிராபி துறையில் தற்போது பயன்படுத்தப்படும் எந்தவொரு மிக்சரையும் விட குறைவான உள் ஓட்டத்தைப் பயன்படுத்தி, ஒரு தனித்துவமான 3D கட்டமைப்பை உருவாக்க புதிய சேர்க்கை உற்பத்தி தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்துகிறது. இத்தகைய மிக்சர்கள், திரவமானது உள்ளே உள்ள சிக்கலான வடிவியல் தடைகளைக் கடக்கும்போது, ​​வெவ்வேறு குறுக்குவெட்டுப் பரப்புகள் மற்றும் வெவ்வேறு பாதை நீளங்களைக் கொண்ட, ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்ட முப்பரிமாண ஓட்டக் கால்வாய்களைக் கொண்டுள்ளன. படம் 1b-இல், புதிய மிக்சரின் ஒரு திட்ட வரைபடம் காட்டப்பட்டுள்ளது. இது உள்ளீடு மற்றும் வெளியீட்டிற்கு தொழில்துறை தரநிலை 10-32 திரிக்கப்பட்ட HPLC அமுக்கப் பொருத்துதல்களைப் பயன்படுத்துகிறது, மேலும் காப்புரிமை பெற்ற உள் மிக்சர் போர்ட்டின் நீல நிற நிழலிடப்பட்ட எல்லைகளைக் கொண்டுள்ளது. உள் ஓட்டப் பாதைகளின் வெவ்வேறு குறுக்குவெட்டுப் பரப்புகள் மற்றும் உள் ஓட்டப் பருமனுக்குள் ஓட்டத் திசையில் ஏற்படும் மாற்றங்கள், கொந்தளிப்பான மற்றும் சீரான ஓட்டப் பகுதிகளை உருவாக்குகின்றன, இது மைக்ரோ, மீசோ மற்றும் மேக்ரோ அளவுகளில் கலப்பை ஏற்படுத்துகிறது. இந்த தனித்துவமான மிக்சரின் வடிவமைப்பு, கணக்கீட்டு திரவ இயக்கவியல் (CFD) உருவகப்படுத்துதல்களைப் பயன்படுத்தி, ஓட்ட வடிவங்களைப் பகுப்பாய்வு செய்து, நிறுவனத்தின் பகுப்பாய்வு சோதனை மற்றும் வாடிக்கையாளர் கள மதிப்பீட்டிற்கான முன்மாதிரிக்கு முன் வடிவமைப்பைச் செம்மைப்படுத்தியது. கூட்டு உற்பத்தி என்பது, பாரம்பரிய இயந்திர வேலைப்பாடுகள் (அரைக்கும் இயந்திரங்கள், கடைசல் இயந்திரங்கள் போன்றவை) தேவையின்றி, CAD வரைபடங்களிலிருந்து நேரடியாக முப்பரிமாண வடிவியல் கூறுகளை அச்சிடும் ஒரு செயல்முறையாகும். இந்த புதிய நிலைக் கலப்பிகள், இந்த செயல்முறையைப் பயன்படுத்தி உற்பத்தி செய்ய வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன. இதில், கலப்பியின் உடற்பகுதி CAD வரைபடங்களிலிருந்து உருவாக்கப்பட்டு, அதன் பாகங்கள் கூட்டு உற்பத்தியைப் பயன்படுத்தி அடுக்கு அடுக்காகத் தயாரிக்கப்படுகின்றன (அச்சிடப்படுகின்றன). இங்கே, சுமார் 20 மைக்ரான் தடிமன் கொண்ட உலோகத் தூளின் ஒரு அடுக்கு படியவைக்கப்படுகிறது. பின்னர், கணினியால் கட்டுப்படுத்தப்படும் லேசர், அந்தத் தூளைத் தேர்ந்தெடுத்து உருக்கி, திட வடிவமாக இணைக்கிறது. இந்த அடுக்கின் மீது மற்றொரு அடுக்கைப் பூசி, லேசர் சின்டரிங் செய்யப்படுகிறது. பாகம் முழுமையாக முடியும் வரை இந்த செயல்முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்படுகிறது. பின்னர், லேசர் மூலம் பிணைக்கப்படாத பாகத்திலிருந்து தூள் அகற்றப்பட்டு, அசல் CAD வரைபடத்துடன் பொருந்தக்கூடிய ஒரு முப்பரிமாண அச்சிடப்பட்ட பாகம் கிடைக்கிறது. இறுதித் தயாரிப்பு, நுண் பாய்மச் செயல்முறையை ஓரளவு ஒத்திருக்கிறது. ஆனால், நுண் பாய்மக் கூறுகள் பொதுவாக இரு பரிமாணத்தில் (தட்டையாக) இருக்கும், ஆனால் கூட்டு உற்பத்தியைப் பயன்படுத்தும்போது, ​​சிக்கலான பாய்வு வடிவங்களை முப்பரிமாண வடிவியலில் உருவாக்க முடியும் என்பதே முக்கிய வேறுபாடு ஆகும். இந்தக் குழாய்கள் தற்போது 316L துருப்பிடிக்காத எஃகு மற்றும் டைட்டானியத்தில் 3D அச்சிடப்பட்ட பாகங்களாகக் கிடைக்கின்றன. இந்த முறையைப் பயன்படுத்தி பாகங்களைத் தயாரிக்க பெரும்பாலான உலோகக் கலவைகள், பாலிமர்கள் மற்றும் சில பீங்கான்களைப் பயன்படுத்தலாம், மேலும் அவை எதிர்கால வடிவமைப்புகள்/தயாரிப்புகளில் கருத்தில் கொள்ளப்படும்.
அரிசி. 1. 90 μl மோட் நிலையான கலக்கியின் புகைப்படம் (a) மற்றும் வரைபடம் (b), இதில் கலக்கியின் பாய்ம ஓட்டப் பாதையின் குறுக்குவெட்டுத் தோற்றம் நீல நிறத்தில் நிழலிடப்பட்டுள்ளது.
திறமையான வடிவமைப்புகளை உருவாக்கவும், அதிக நேரம் எடுக்கும் மற்றும் செலவுமிக்க முயன்று-பிழை திருத்தும் சோதனைகளைக் குறைக்கவும், வடிவமைப்பு கட்டத்தின் போது நிலையான கலக்கியின் செயல்திறனின் கணக்கீட்டு திரவ இயக்கவியல் (CFD) உருவகப்படுத்துதல்களை இயக்கவும். COMSOL மல்டிபிசிக்ஸ் மென்பொருள் தொகுப்பைப் பயன்படுத்தி நிலையான கலக்கிகள் மற்றும் நிலையான குழாய்களின் (கலக்கி இல்லாத உருவகப்படுத்துதல்) CFD உருவகப்படுத்துதல் செய்யப்படுகிறது. ஒரு பாகத்திற்குள் உள்ள திரவத்தின் வேகம் மற்றும் அழுத்தத்தைப் புரிந்துகொள்ள, அழுத்தத்தால் இயக்கப்படும் லேமினார் திரவ இயக்கவியலைப் பயன்படுத்தி மாதிரியாக்கம் செய்யப்படுகிறது. இந்த திரவ இயக்கவியல், நகரும் கட்டச் சேர்மங்களின் வேதியியல் கடத்தலுடன் இணைந்து, இரண்டு வெவ்வேறு செறிவூட்டப்பட்ட திரவங்களின் கலவையைப் புரிந்துகொள்ள உதவுகிறது. ஒப்பிடக்கூடிய தீர்வுகளைத் தேடும்போது கணக்கீட்டின் எளிமைக்காக, இந்த மாதிரி 10 வினாடிகளுக்குச் சமமான நேரத்தின் சார்பாக ஆய்வு செய்யப்படுகிறது. புள்ளி ஆய்வு வீச்சு கருவியைப் பயன்படுத்தி நேரத்துடன் தொடர்புடைய ஆய்வில் கோட்பாட்டுத் தரவுகள் பெறப்பட்டன, இதில் தரவு சேகரிப்பிற்காக வெளியேறும் வழியின் நடுவில் ஒரு புள்ளி தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டது. CFD மாதிரி மற்றும் சோதனைப் பரிசோதனைகளில், விகிதாசார மாதிரி வால்வு மற்றும் பம்பிங் அமைப்பு மூலம் இரண்டு வெவ்வேறு கரைப்பான்கள் பயன்படுத்தப்பட்டன, இதன் விளைவாக மாதிரி குழாயில் ஒவ்வொரு கரைப்பானுக்கும் ஒரு மாற்று அடைப்பான் கிடைத்தது. இந்தக் கரைப்பான்கள் பின்னர் ஒரு நிலையான கலக்கியில் கலக்கப்படுகின்றன. படம் 2 மற்றும் படம் 3 ஆகியவை முறையே ஒரு சாதாரணக் குழாய் (கலக்கி இல்லாதது) மற்றும் ஒரு மோட் நிலைக் கலக்கி வழியாக ஏற்படும் பாய்வு உருவகப்படுத்துதல்களைக் காட்டுகின்றன. படம் 2-இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, நிலைக் கலக்கி இல்லாத நிலையில், குழாயினுள் மாறி மாறி நீர் மற்றும் தூய அசிட்டோநைட்ரைல் செருகல்களைச் செலுத்தும் கருத்தை விளக்குவதற்காக, 5 செ.மீ நீளமும் 0.25 மி.மீ உள்விட்டமும் கொண்ட ஒரு நேரான குழாயில் இந்த உருவகப்படுத்துதல் இயக்கப்பட்டது. இந்த உருவகப்படுத்துதலில், குழாய் மற்றும் கலக்கியின் துல்லியமான பரிமாணங்களும், 0.3 மி.லி/நிமிடம் என்ற பாய்வு வீதமும் பயன்படுத்தப்பட்டன.
அரிசி. 2. ஒரு கலக்கி இல்லாத நிலையில், அதாவது ஒரு HPLC குழாயில் என்ன நடக்கிறது என்பதைப் பிரதிநிதித்துவப்படுத்தும் வகையில், 0.25 மிமீ உள்விட்டம் கொண்ட 5 செமீ குழாயில் CFD பாய்வின் உருவகப்படுத்துதல். முழு சிவப்பு நிறம் நீரின் நிறை பின்னத்தைக் குறிக்கிறது. நீல நிறம் நீரின் பற்றாக்குறையைக் குறிக்கிறது, அதாவது தூய அசிட்டோநைட்ரைல். இரண்டு வெவ்வேறு திரவங்களின் மாறி மாறி வரும் அடைப்புகளுக்கு இடையில் பரவல் பகுதிகளைக் காணலாம்.
அரிசி. 3. COMSOL CFD மென்பொருள் தொகுப்பில் மாதிரியாக்கப்பட்ட, 30 மிலி கொள்ளளவு கொண்ட நிலையான கலக்கி. விளக்கப்படம், கலக்கியில் உள்ள நீரின் நிறை பின்னத்தைக் குறிக்கிறது. தூய நீர் சிவப்பு நிறத்திலும், தூய அசிட்டோநைட்ரைல் நீல நிறத்திலும் காட்டப்பட்டுள்ளன. உருவகப்படுத்தப்பட்ட நீரின் நிறை பின்னத்தில் ஏற்படும் மாற்றம், இரண்டு திரவங்களின் கலவையின் நிறத்தில் ஏற்படும் மாற்றத்தால் குறிக்கப்படுகிறது.
படம் 4, கலத்தல் செயல்திறனுக்கும் கலத்தல் கனஅளவுக்கும் இடையேயான தொடர்பு மாதிரியின் சரிபார்ப்பு ஆய்வைக் காட்டுகிறது. கலத்தல் கனஅளவு அதிகரிக்கும்போது, ​​கலத்தல் செயல்திறனும் அதிகரிக்கும். ஆய்வாளர்களின் அறிவுக்கு எட்டியவரை, கலக்கிக்குள் செயல்படும் மற்ற சிக்கலான இயற்பியல் விசைகளை இந்த CFD மாதிரியில் கணக்கில் கொள்ள முடியாது, இதன் விளைவாக சோதனைப் பரிசோதனைகளில் அதிக கலத்தல் செயல்திறன் காணப்படுகிறது. சோதனை ரீதியான கலத்தல் செயல்திறன், அடிப்பக்க சைனசாய்டில் ஏற்படும் சதவீதக் குறைப்பாக அளவிடப்பட்டது. மேலும், அதிகரித்த பின் அழுத்தம் பொதுவாக அதிக கலத்தல் நிலைகளுக்கு வழிவகுக்கிறது, ஆனால் அவை உருவகப்படுத்துதலில் கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படவில்லை.
வெவ்வேறு ஸ்டேடிக் மிக்சர்களின் ஒப்பீட்டுச் செயல்திறனை ஒப்பிடுவதற்காக, மூல சைன் அலைகளை அளவிட பின்வரும் HPLC நிபந்தனைகளும் சோதனை அமைப்பும் பயன்படுத்தப்பட்டன. படம் 5-இல் உள்ள வரைபடம் ஒரு வழக்கமான HPLC/UHPLC அமைப்பின் தளவமைப்பைக் காட்டுகிறது. ஸ்டேடிக் மிக்சரை, பம்பிற்குப் பிறகும், இன்ஜெக்டர் மற்றும் பிரிப்பு நெடுவரிசைக்கு முன்பும் நேரடியாக வைத்துச் சோதிக்கப்பட்டது. பெரும்பாலான பின்னணி சைனசாய்டல் அளவீடுகள், ஸ்டேடிக் மிக்சருக்கும் UV டிடெக்டருக்கும் இடையில் உள்ள இன்ஜெக்டர் மற்றும் நுண்குழாய் நெடுவரிசையைத் தவிர்த்துச் செய்யப்படுகின்றன. சிக்னல்-டு-நாய்ஸ் விகிதத்தை மதிப்பிடும்போதும் மற்றும்/அல்லது சிகர வடிவத்தைப் பகுப்பாய்வு செய்யும்போதும், அமைப்பின் கட்டமைப்பு படம் 5-இல் காட்டப்பட்டுள்ளது.
படம் 4. பல்வேறு நிலையான கலவிகளுக்கான கலத்தல் செயல்திறனுக்கும் கலத்தல் கனஅளவுக்கும் இடையிலான வரைபடம். கோட்பாட்டு ரீதியான மாசானது, சோதனை ரீதியான மாசுத் தரவுகளின் போக்கையே பின்பற்றுகிறது, இது CFD உருவகப்படுத்துதல்களின் செல்லுபடியை உறுதிப்படுத்துகிறது.
இந்தச் சோதனைக்கு பயன்படுத்தப்பட்ட HPLC அமைப்பு, கெம்ஸ்டேஷன் மென்பொருளை இயக்கும் ஒரு கணினியால் கட்டுப்படுத்தப்படும் UV டிடெக்டருடன் கூடிய அஜிலென்ட் 1100 சீரிஸ் HPLC ஆகும். இரண்டு நேர்வு ஆய்வுகளில் அடிப்படை சைனசாய்டுகளைக் கண்காணிப்பதன் மூலம் கலக்கியின் செயல்திறனை அளவிடுவதற்கான வழக்கமான சரிசெய்தல் நிலைமைகளை அட்டவணை 1 காட்டுகிறது. இரண்டு வெவ்வேறு கரைப்பான் மாதிரிகளில் சோதனைப் பரிசோதனைகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன. நேர்வு 1-இல் கலக்கப்பட்ட இரண்டு கரைப்பான்கள், கரைப்பான் A (அயனியாக்கப்பட்ட நீரில் 20 mM அம்மோனியம் அசிட்டேட்) மற்றும் கரைப்பான் B (80% அசிட்டோநைட்ரைல் (ACN)/20% அயனியாக்கப்பட்ட நீர்) ஆகும். நேர்வு 2-இல், கரைப்பான் A என்பது அயனியாக்கப்பட்ட நீரில் 0.05% அசிட்டோன் (லேபிள்) கொண்ட ஒரு கரைசலாகும். கரைப்பான் B என்பது 80/20% மெத்தனால் மற்றும் நீரின் கலவையாகும். நேர்வு 1-இல், பம்ப் 0.25 மிலி/நிமிடம் முதல் 1.0 மிலி/நிமிடம் வரையிலான பாய்வு விகிதத்திற்கு அமைக்கப்பட்டது, மற்றும் நேர்வு 2-இல், பம்ப் 1 மிலி/நிமிடம் என்ற நிலையான பாய்வு விகிதத்திற்கு அமைக்கப்பட்டது. இரு நிகழ்வுகளிலும், கரைப்பான்கள் A மற்றும் B ஆகியவற்றின் கலவையின் விகிதம் 20% A/80% B ஆக இருந்தது. நிகழ்வு 1-இல் கண்டறியும் கருவி 220 nm-க்கு அமைக்கப்பட்டது, மற்றும் நிகழ்வு 2-இல் அசிட்டோனின் அதிகபட்ச உறிஞ்சலானது 265 nm அலைநீளத்திற்கு அமைக்கப்பட்டது.
அட்டவணை 1. நிகழ்வுகள் 1 மற்றும் 2-க்கான HPLC உள்ளமைவுகள் நிகழ்வு 1 நிகழ்வு 2 பம்ப் வேகம் 0.25 மி.லி/நிமிடம் முதல் 1.0 மி.லி/நிமிடம் வரை 1.0 மி.லி/நிமிடம் கரைப்பான் A அயனியகற்றப்பட்ட நீரில் 20 mM அம்மோனியம் அசிட்டேட் அயனியகற்றப்பட்ட நீரில் 0.05% அசிட்டோன் கரைப்பான் B 80% அசிட்டோநைட்ரைல் (ACN) / 20% அயனியகற்றப்பட்ட நீர் 80% மெத்தனால் / 20% அயனியகற்றப்பட்ட நீர் கரைப்பான் விகிதம் 20% A / 80% B 20% A / 80% B கண்டறிவான் 220 nm 265 nm
அரிசி. 6. சிக்னலின் பேஸ்லைன் ட்ரிஃப்ட் கூறுகளை அகற்ற லோ-பாஸ் ஃபில்டரைப் பயன்படுத்துவதற்கு முன்னும் பின்னும் அளவிடப்பட்ட கலப்பு சைன் அலைகளின் வரைபடங்கள்.
படம் 6 என்பது நிலை 1-இல் உள்ள கலப்பு அடிப்படை இரைச்சலின் ஒரு பொதுவான எடுத்துக்காட்டாகும், இது அடிப்படை சறுக்கலின் மீது படியும் ஒரு மீண்டும் மீண்டும் வரும் சைனசாய்டல் வடிவமாகக் காட்டப்பட்டுள்ளது. அடிப்படை சறுக்கல் என்பது பின்னணி சமிக்ஞையில் ஏற்படும் ஒரு மெதுவான அதிகரிப்பு அல்லது குறைவு ஆகும். அமைப்பு போதுமான நேரம் சமநிலை அடைய அனுமதிக்கப்படாவிட்டால், அது பொதுவாகக் குறையும், ஆனால் அமைப்பு முற்றிலும் நிலையாக இருக்கும்போதும் ஒழுங்கற்ற முறையில் சறுக்கும். அமைப்பு செங்குத்தான சரிவு அல்லது அதிக பின் அழுத்த நிலைகளில் இயங்கும்போது இந்த அடிப்படை சறுக்கல் அதிகரிக்க முனைகிறது. இந்த அடிப்படை சறுக்கல் இருக்கும்போது, ​​மாதிரிக்கு மாதிரி முடிவுகளை ஒப்பிடுவது கடினமாக இருக்கும். மூலத் தரவில் ஒரு தாழ்-அதிர்வெண் வடிகட்டியைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் இந்த குறைந்த அதிர்வெண் மாறுபாடுகளை வடிகட்டி, அதன் மூலம் ஒரு தட்டையான அடிப்படையுடன் கூடிய அலைவு வரைபடத்தை வழங்குவதன் மூலம் இதைச் சரிசெய்யலாம். படம் 6-இல், ஒரு தாழ்-அதிர்வெண் வடிகட்டியைப் பயன்படுத்திய பிறகு கலப்பியின் அடிப்படை இரைச்சலின் வரைபடமும் காட்டப்பட்டுள்ளது.
CFD உருவகப்படுத்துதல்கள் மற்றும் ஆரம்ப சோதனைப் பரிசோதனைகளை முடித்த பிறகு, மேலே விவரிக்கப்பட்ட உள் கூறுகளைப் பயன்படுத்தி, 30 µl, 60 µl மற்றும் 90 µl ஆகிய மூன்று உள் கொள்ளளவுகளில் மூன்று தனித்தனி நிலையான கலப்பிகள் உருவாக்கப்பட்டன. இந்த வரம்பு, குறைந்த வீச்சு அடிப்படைக்கோடுகளை உருவாக்க மேம்பட்ட கலவை மற்றும் குறைந்த சிதறல் தேவைப்படும் குறைந்த பகுப்பாய்வுப் பொருள் HPLC பயன்பாடுகளுக்குத் தேவையான கொள்ளளவுகள் மற்றும் கலவைச் செயல்திறன் வரம்பை உள்ளடக்கியது. படம் 7, எடுத்துக்காட்டு 1-இன் சோதனை அமைப்பில் (தடயங்களாக அசிட்டோநைட்ரைல் மற்றும் அம்மோனியம் அசிடேட்) மூன்று கொள்ளளவு நிலையான கலப்பிகள் மற்றும் கலப்பிகள் நிறுவப்படாத நிலையில் பெறப்பட்ட அடிப்படை சைன் அலை அளவீடுகளைக் காட்டுகிறது. படம் 7-இல் காட்டப்பட்டுள்ள முடிவுகளுக்கான சோதனை நிலைமைகள், அட்டவணை 1-இல் கோடிட்டுக் காட்டப்பட்டுள்ள நடைமுறையின்படி, 0.5 ml/min கரைப்பான் பாய்வு விகிதத்தில், அனைத்து 4 சோதனைகளிலும் நிலையானதாக வைக்கப்பட்டன. தரவுத் தொகுப்புகளுக்கு ஒரு ஆஃப்செட் மதிப்பைப் பயன்படுத்துங்கள், அதனால் அவை சிக்னல் ஒன்றுடன் ஒன்று சேராமல் அருகருகே காட்டப்படும். கலப்பியின் செயல்திறன் அளவை மதிப்பிடுவதற்குப் பயன்படுத்தப்படும் சிக்னலின் வீச்சை ஆஃப்செட் பாதிக்காது. கலப்பி இல்லாத நிலையில் சராசரி சைனசாய்டல் வீச்சு 0.221 mAi ஆக இருந்தது, அதேசமயம் 30 µl, 60 µl, மற்றும் 90 µl அளவுகளில் உள்ள நிலையான மோட் கலப்பிகளின் வீச்சுகள் முறையே 0.077, 0.017, மற்றும் 0.004 mAi ஆகக் குறைந்தன.
படம் 7. நிலை 1-க்கான (அமோனியம் அசிடேட் குறிகாட்டியுடன் கூடிய அசிட்டோநைட்ரைல்) HPLC UV கண்டறிவான் சமிக்ஞை விலகல் மற்றும் நேரத்திற்கு இடையேயான வரைபடம். இதில், கலக்கி இல்லாத நிலையிலும், 30 µl, 60 µl மற்றும் 90 µl மோட் கலக்கிகளைப் பயன்படுத்தும்போதும் கரைப்பான் கலப்பது காட்டப்பட்டுள்ளது. நிலையான கலக்கியின் கன அளவு அதிகரிக்கும்போது, ​​கலப்பது மேம்படுகிறது (சமிக்ஞை வீச்சு குறைகிறது). (சிறந்த காட்சிப்படுத்தலுக்காக உண்மையான தரவு விலகல்கள்: 0.13 (கலக்கி இல்லை), 0.32, 0.4, 0.45mA).
படம் 8-இல் காட்டப்பட்டுள்ள தரவுகள், படம் 7-இல் உள்ளதைப் போன்றவையே. ஆனால் இம்முறை, அவை 50 µl, 150 µl மற்றும் 250 µl உள் கொள்ளளவுகளைக் கொண்ட, பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் மூன்று HPLC ஸ்டேடிக் மிக்சர்களின் முடிவுகளை உள்ளடக்கியுள்ளன. படம் 8. நிலை 1-க்கான (அசிட்டோநைட்ரைல் மற்றும் அம்மோனியம் அசிடேட் குறிகாட்டிகளாக) HPLC UV டிடெக்டர் சிக்னல் ஆஃப்செட் எதிர் நேர வரைபடம். இது ஸ்டேடிக் மிக்சர் இல்லாமல் கரைப்பான் கலத்தல், மோட் ஸ்டேடிக் மிக்சர்களின் புதிய தொடர் மற்றும் மூன்று வழக்கமான மிக்சர்களைக் காட்டுகிறது (சிறந்த காட்சி விளைவுக்காக உண்மையான தரவு ஆஃப்செட் முறையே 0.1 (மிக்சர் இல்லாமல்), 0.32, 0.48, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 mA ஆகும்). அடிப்படை சைன் அலையின் சதவீதக் குறைப்பு, மிக்சர் நிறுவப்படாத நிலையில் உள்ள சைன் அலையின் வீச்சிற்கும், மிக்சர் நிறுவப்படாத நிலையில் உள்ள வீச்சிற்கும் உள்ள விகிதத்தால் கணக்கிடப்படுகிறது. நிகழ்வுகள் 1 மற்றும் 2-க்கான அளவிடப்பட்ட சைன் அலைத் தணிப்பு சதவீதங்கள், ஒரு புதிய நிலைக்கலக்கி மற்றும் தொழில்துறையில் பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் ஏழு தரநிலைக்கலக்கிகளின் உள் கொள்ளளவுகளுடன் அட்டவணை 2-இல் பட்டியலிடப்பட்டுள்ளன. படங்கள் 8 மற்றும் 9-இல் உள்ள தரவுகளும், அட்டவணை 2-இல் வழங்கப்பட்டுள்ள கணக்கீடுகளும், மோட் நிலைக்கலக்கியானது 98.1% வரை சைன் அலைத் தணிப்பை வழங்க முடியும் என்பதைக் காட்டுகின்றன; இது இந்தச் சோதனை நிலைமைகளின் கீழ் ஒரு வழக்கமான HPLC கலக்கியின் செயல்திறனை விடப் பன்மடங்கு அதிகமாகும். படம் 9. நிகழ்வு 2-க்கான (தடயங்களாக மெத்தனால் மற்றும் அசிட்டோன்) HPLC UV உணரி சமிக்ஞை ஆஃப்செட் மற்றும் நேர வரைபடம்; இதில் நிலைக்கலக்கி இல்லாதது (இணைக்கப்பட்டது), மோட் நிலைக்கலக்கிகளின் ஒரு புதிய தொடர் மற்றும் இரண்டு வழக்கமான கலக்கிகள் காட்டப்பட்டுள்ளன (சிறந்த காட்சிப்படுத்தலுக்காக உண்மையான தரவு ஆஃப்செட்டுகள் 0, 11 (கலக்கி இல்லாமல்), 0.22, 0.3, 0.35 mA மற்றும் 0.35 mA ஆகும்). தொழில்துறையில் பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் ஏழு கலக்கிகளும் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டன. இவற்றில், நிறுவனம் A-இன் மூன்று வெவ்வேறு உள் கொள்ளளவுகள் கொண்ட கலப்பிகள் (கலக்கி A1, A2 மற்றும் A3 எனப் பெயரிடப்பட்டவை) மற்றும் நிறுவனம் B-இன் கலப்பிகள் (கலக்கி B1, B2 மற்றும் B3 எனப் பெயரிடப்பட்டவை) அடங்கும். நிறுவனம் C ஒரே ஒரு அளவை மட்டுமே மதிப்பிட்டது.
அட்டவணை 2. நிலையான கலக்கியின் கலக்கும் பண்புகள் மற்றும் உள் கொள்ளளவு நிலையான கலக்கி நிலை 1 சைனசாய்டல் மீட்பு: அசிட்டோநைட்ரைல் சோதனை (செயல்திறன்) நிலை 2 சைனசாய்டல் மீட்பு: மெத்தனால் நீர் சோதனை (செயல்திறன்) உள் கொள்ளளவு (µl) கலக்கி எண் – - 0 மோட் 30 65% 67.2% 30 மோட் 60 92.2% 91.3% 60 மோட் 90 98.1% 97.5% 90 கலக்கி A1 66.4% 73.7% 50 கலக்கி A2 89.8% 91.6% 150 கலக்கி A3 92.2% 94.5% 250 கலக்கி B1 44.8% 45.7% 935 கலக்கி B2 84.5% 96.2% 370 கலக்கி C 97.2% 97.4% 250
படம் 8 மற்றும் அட்டவணை 2-இல் உள்ள முடிவுகளின் பகுப்பாய்வின்படி, 30 µl மோட் ஸ்டேடிக் மிக்சர், A1 மிக்சரின் (அதாவது 50 µl) அதே கலக்கும் திறனைக் கொண்டுள்ளது; இருப்பினும், 30 µl மோட் மிக்சரின் உள் கொள்ளளவு 30% குறைவாக உள்ளது. 60 µl மோட் மிக்சரை, 150 µl உள் கொள்ளளவு கொண்ட A2 மிக்சருடன் ஒப்பிடும்போது, ​​கலக்கும் திறனில் 89%-க்கு எதிராக 92% என்ற ஒரு சிறிய முன்னேற்றம் காணப்பட்டது. ஆனால், மிக முக்கியமாக, இந்த உயர் மட்டக் கலப்பானது, மிக்சரின் கொள்ளளவில் மூன்றில் ஒரு பங்கிலேயே அடையப்பட்டது. 90 µl மோட் மிக்சரின் செயல்திறன், 250 µl உள் கொள்ளளவு கொண்ட A3 மிக்சரின் அதே போக்கைப் பின்பற்றியது. உள் கொள்ளளவில் 3 மடங்கு குறைப்புடன், கலக்கும் செயல்திறனில் 98% மற்றும் 92% முன்னேற்றங்களும் காணப்பட்டன. கலப்பிகள் B மற்றும் C-க்கும் இதே போன்ற முடிவுகளும் ஒப்பீடுகளும் பெறப்பட்டன. இதன் விளைவாக, Mott PerfectPeakTM என்ற புதிய நிலையான கலப்பித் தொடரானது, ஒப்பிடக்கூடிய போட்டியாளர் கலப்பிகளை விட அதிகக் கலப்புத் திறனை வழங்குகிறது, ஆனால் குறைந்த உள் கொள்ளளவைக் கொண்டு, சிறந்த பின்னணி இரைச்சல், சிறந்த சிக்னல்-டு-நாய்ஸ் விகிதம், சிறந்த பகுப்பாய்வு உணர்திறன், சிகர வடிவம் மற்றும் சிகரத் தெளிவுத்திறன் ஆகியவற்றை வழங்குகிறது. கலப்புத் திறனில் இதே போன்ற போக்குகள் Case 1 மற்றும் Case 2 ஆகிய இரண்டு ஆய்வுகளிலும் காணப்பட்டன. Case 2-க்கு, 60 மிலி Mott, ஒப்பிடக்கூடிய கலப்பி A1 (உள் கொள்ளளவு 50 µl) மற்றும் ஒப்பிடக்கூடிய கலப்பி B1 (உள் கொள்ளளவு 35 µl) ஆகியவற்றின் கலப்புத் திறனை ஒப்பிடுவதற்கு, (மெத்தனால் மற்றும் அசிட்டோனை குறிகாட்டிகளாகப் பயன்படுத்தி) சோதனைகள் செய்யப்பட்டன. கலப்பி நிறுவப்படாத நிலையில் செயல்திறன் மோசமாக இருந்தது, ஆனால் அது அடிப்படைப் பகுப்பாய்வுக்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது. 60 மிலி Mott கலப்பியானது சோதனைக் குழுவில் சிறந்த கலப்பியாக நிரூபிக்கப்பட்டது, இது கலப்புத் திறனில் 90% அதிகரிப்பை வழங்கியது. ஒப்பிடக்கூடிய கலக்கி A1-இல் கலக்கும் திறனில் 75% முன்னேற்றமும், அதைத் தொடர்ந்து ஒப்பிடக்கூடிய B1 கலக்கியில் 45% முன்னேற்றமும் காணப்பட்டது. நிலை 1-இல் உள்ள சைன் வளைவு சோதனையின் அதே நிபந்தனைகளின் கீழ், பாய்வு விகிதத்தை மட்டும் மாற்றி, தொடர்ச்சியான கலக்கிகளில் பாய்வு விகிதத்துடன் கூடிய ஒரு அடிப்படை சைன் அலை குறைப்பு சோதனை மேற்கொள்ளப்பட்டது. 0.25 முதல் 1 மிலி/நிமிடம் வரையிலான பாய்வு விகித வரம்பில், மூன்று கலக்கி கொள்ளளவுகளிலும் சைன் அலையின் ஆரம்பக் குறைவு ஒப்பீட்டளவில் நிலையானதாகவே இருந்தது என்பதைத் தரவுகள் காட்டின. இரண்டு சிறிய கொள்ளளவு கலக்கிகளில், பாய்வு விகிதம் குறையும்போது சைனசாய்டல் சுருக்கத்தில் ஒரு சிறிய அதிகரிப்பு காணப்படுகிறது. இது, கலக்கியில் கரைப்பானின் தங்கும் நேரம் அதிகரிப்பதால், பரவல் கலவை அதிகரிப்பதற்கு வழிவகுத்து, எதிர்பார்க்கப்படுகிறது. பாய்வு மேலும் குறையும்போது சைன் அலையின் கழித்தல் அதிகரிக்கும் என்று எதிர்பார்க்கப்படுகிறது. இருப்பினும், மிக உயர்ந்த சைன் அலை அடிப்படைத் தணிப்புடன் கூடிய மிகப்பெரிய கலக்கி கனஅளவிற்கு, சைன் அலை அடிப்படைத் தணிப்பு (சோதனை நிச்சயமற்ற தன்மையின் வரம்பிற்குள்) கிட்டத்தட்ட மாறாமல் இருந்தது, அதன் மதிப்புகள் 95% முதல் 98% வரை இருந்தன. ரைஸ். 10. நிலை 1-இல் பாய்வு விகிதத்திற்கு எதிரான சைன் அலையின் அடிப்படைத் தணிப்பு. இந்தச் சோதனையானது, மாறும் பாய்வு விகிதத்துடன் கூடிய சைன் சோதனையைப் போன்ற சூழ்நிலைகளில் மேற்கொள்ளப்பட்டது; இதில் 80% அசிட்டோநைட்ரைல் மற்றும் நீரின் 80/20 கலவையும், 20% 20 mM அம்மோனியம் அசிட்டேட்டும் உட்செலுத்தப்பட்டன.
புதிதாக உருவாக்கப்பட்ட, காப்புரிமை பெற்ற PerfectPeakTM இன்லைன் ஸ்டேடிக் மிக்சர்களின் வரிசையானது, 30 µl, 60 µl மற்றும் 90 µl ஆகிய மூன்று உள் கொள்ளளவுகளைக் கொண்டுள்ளது. இது, மேம்பட்ட கலவை மற்றும் குறைந்த சிதறல் தளங்கள் தேவைப்படும் பெரும்பாலான HPLC பகுப்பாய்வுகளுக்குத் தேவையான கொள்ளளவு மற்றும் கலவை செயல்திறன் வரம்பை உள்ளடக்கியுள்ளது. இந்த புதிய ஸ்டேடிக் மிக்சர், புதிய 3D அச்சிடும் தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி ஒரு தனித்துவமான 3D கட்டமைப்பை உருவாக்குவதன் மூலம் இதைச் சாதிக்கிறது. இது, உள் கலவையின் அலகு கொள்ளளவுக்கு, அடிப்படை இரைச்சலில் மிக உயர்ந்த சதவீதக் குறைப்புடன் மேம்பட்ட ஹைட்ரோடைனமிக் ஸ்டேடிக் கலவையை வழங்குகிறது. ஒரு வழக்கமான மிக்சரின் உள் கொள்ளளவில் 1/3 பங்கைப் பயன்படுத்துவது, அடிப்படை இரைச்சலை 98% குறைக்கிறது. இத்தகைய மிக்சர்கள், ஒன்றோடொன்று இணைக்கப்பட்ட முப்பரிமாண பாய்வு வழிகளைக் கொண்டுள்ளன. திரவம் உள்ளே உள்ள சிக்கலான வடிவியல் தடைகளைக் கடக்கும்போது, ​​வெவ்வேறு குறுக்குவெட்டுப் பரப்புகளையும் வெவ்வேறு பாதை நீளங்களையும் கொண்டிருக்கின்றன. இந்த புதிய வகை ஸ்டேடிக் மிக்சர்கள், போட்டியிடும் மிக்சர்களை விட மேம்பட்ட செயல்திறனை வழங்குகின்றன, ஆனால் குறைந்த உள் கொள்ளளவைக் கொண்டுள்ளன. இதன் விளைவாக, சிறந்த சிக்னல்-டு-நாய்ஸ் விகிதம் மற்றும் குறைந்த அளவு நிர்ணய வரம்புகள், அத்துடன் மேம்பட்ட சிகர வடிவம், செயல்திறன் மற்றும் உயர் உணர்திறனுக்கான பிரிதிறன் ஆகியவை கிடைக்கின்றன.
இந்த இதழில்: நிறப்பிரிகை – சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்த RP-HPLC – பகுப்பாய்வு மற்றும் தூய்மையாக்கத்தில் அசிட்டோநைட்ரைலுக்குப் பதிலாக ஐசோபுரோப்பனாலைப் பயன்படுத்த கோர்-ஷெல் நிறப்பிரிகை – புதிய வாயு நிறப்பிரிகை வரைவி…
பிசினஸ் சென்டர் இன்டர்நேஷனல் லேப்மேட் லிமிடெட் ஓக் கோர்ட் சாண்ட்ரிட்ஜ் பார்க், போர்ட்டர்ஸ் வுட் செயின்ட் ஆல்பன்ஸ் ஹெர்ட்ஃபோர்ட்ஷயர் AL3 6PH யுனைடெட் கிங்டம்