고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 및 초고성능 액체 크로마토그래피(UHPLC) 시스템의 엄격한 요구 사항을 충족하도록 특별히 설계된 혁신적인 인라인 정적 믹서가 개발되었습니다. 두 가지 이상의 이동상이 제대로 혼합되지 않으면 신호 대 잡음비가 높아져 감도가 저하될 수 있습니다. 최소한의 내부 부피와 물리적 크기를 가진 정적 믹서에서 두 가지 이상의 유체를 균일하게 정적 혼합하는 것이 이상적인 정적 믹서의 최고 기준입니다. 이 새로운 정적 믹서는 새로운 3D 프린팅 기술을 사용하여 독특한 3D 구조를 구현함으로써 이를 달성합니다. 이 구조는 유체역학적 정적 혼합 성능을 향상시키고 혼합물의 단위 내부 부피당 기본 사인파를 최대로 감소시킵니다. 기존 믹서의 1/3 내부 부피를 사용하면서도 기본 사인파를 98%까지 감소시킵니다. 이 믹서는 유체가 복잡한 3D 형상을 통과함에 따라 단면적과 경로 길이가 달라지는 상호 연결된 3D 유로로 구성됩니다. 여러 개의 구불구불한 유동 경로를 따라 발생하는 혼합과 국부적인 난류 및 와류가 결합되어 미시적, 중간적, 거시적 규모에서 혼합이 이루어집니다. 이 독특한 혼합기는 전산 유체 역학(CFD) 시뮬레이션을 사용하여 설계되었습니다. 제시된 실험 데이터는 최소한의 내부 부피로 탁월한 혼합 성능을 달성함을 보여줍니다.
액체 크로마토그래피는 30년 이상 제약, 농약, 환경 보호, 법의학, 화학 분석 등 다양한 산업 분야에서 사용되어 왔습니다. 백만분율(ppm) 이하의 정밀도로 측정하는 능력은 모든 산업 분야의 기술 발전에 매우 중요합니다. 용매 혼합 효율이 낮으면 신호 대 잡음비가 떨어져 검출 한계와 감도 측면에서 크로마토그래피 분석에 어려움을 초래합니다. 두 가지 HPLC 용매를 혼합할 때, 일부 용매는 잘 섞이지 않기 때문에 외부적인 방법을 이용하여 균질화해야 하는 경우가 있습니다. 용매가 완전히 혼합되지 않으면 HPLC 크로마토그램이 저하되어 과도한 베이스라인 노이즈나 불량한 피크 모양이 나타날 수 있습니다. 혼합이 불량하면 베이스라인 노이즈는 시간에 따라 검출기 신호가 사인파(상승 및 하강) 형태로 나타납니다. 또한, 혼합 불량은 피크의 폭 증가 및 비대칭화를 초래하여 분석 성능, 피크 모양 및 분해능을 저하시킬 수 있습니다. 업계에서는 인라인 및 티형 정적 믹서가 이러한 한계를 개선하고 사용자가 더 낮은 검출 한계(감도)를 달성할 수 있도록 하는 수단임을 인식하고 있습니다. 이상적인 정적 믹서는 높은 혼합 효율, 낮은 데드 볼륨, 낮은 압력 강하의 이점을 최소 부피와 최대 시스템 처리량과 결합합니다. 또한 분석이 더욱 복잡해짐에 따라 분석가들은 더욱 극성이 강하고 혼합하기 어려운 용매를 일상적으로 사용해야 합니다. 이는 향후 테스트에서 더 나은 혼합이 필수적임을 의미하며, 우수한 믹서 설계 및 성능에 대한 필요성을 더욱 증가시킵니다.
Mott는 최근 특허받은 PerfectPeak™ 인라인 정적 믹서 제품군을 개발했으며, 30µl, 60µl, 90µl의 세 가지 내부 용량을 제공합니다. 이 용량 범위는 향상된 혼합과 낮은 분산이 요구되는 대부분의 HPLC 테스트에 필요한 다양한 용량과 혼합 특성을 충족합니다. 세 모델 모두 직경이 0.5인치이며, 컴팩트한 디자인으로 업계 최고 수준의 성능을 제공합니다. 316L 스테인리스강으로 제작되었으며, 불활성 처리를 위해 부동태화 처리되었습니다. 티타늄 및 기타 내식성 및 화학적으로 불활성인 금속 합금도 선택 가능합니다. 이 믹서는 최대 20,000psi의 작동 압력을 견딜 수 있습니다. 그림 1a는 표준형 믹서보다 작은 내부 용량을 사용하면서도 최대 혼합 효율을 제공하도록 설계된 60µl Mott 정적 믹서의 사진입니다. 이 새로운 정적 믹서 설계는 새로운 적층 제조 기술을 사용하여 독특한 3D 구조를 구현함으로써, 현재 크로마토그래피 업계에서 사용되는 어떤 믹서보다 적은 내부 유량으로 정적 혼합을 달성합니다. 이러한 믹서는 액체가 내부의 복잡한 기하학적 장벽을 통과하면서 단면적과 경로 길이가 서로 다른 상호 연결된 3차원 유동 채널로 구성됩니다. 그림 1b는 새로운 믹서의 개략도를 보여줍니다. 이 믹서는 입구와 출구에 산업 표준 10-32 나사산 HPLC 압축 피팅을 사용하고, 특허받은 내부 믹서 포트는 파란색 테두리로 표시되어 있습니다. 내부 유동 경로의 서로 다른 단면적과 내부 유동 부피 내에서의 유동 방향 변화는 난류 및 층류 영역을 생성하여 미시적, 중간적, 거시적 규모에서 혼합을 유발합니다. 이 독특한 믹서의 설계에는 전산 유체 역학(CFD) 시뮬레이션을 사용하여 유동 패턴을 분석하고 사내 분석 테스트 및 고객 현장 평가를 위한 프로토타입 제작 전에 설계를 개선했습니다. 적층 제조는 기존의 기계 가공(밀링 머신, 선반 등) 없이 CAD 도면에서 3D 기하학적 구성 요소를 직접 인쇄하는 공정입니다. 이 새로운 정적 믹서는 CAD 도면을 기반으로 믹서 본체를 제작하고 적층 제조 방식을 사용하여 부품을 층별로 제작(인쇄)하는 공정을 통해 제조되도록 설계되었습니다. 먼저 약 20미크론 두께의 금속 분말 층을 도포하고, 컴퓨터로 제어되는 레이저가 분말을 선택적으로 녹여 고체 형태로 접합합니다. 이 층 위에 또 다른 층을 도포하고 레이저 소결을 적용합니다. 부품이 완전히 완성될 때까지 이 과정을 반복합니다. 레이저 접합되지 않은 부분에서 분말을 제거하면 원래 CAD 도면과 일치하는 3D 프린팅 부품이 남게 됩니다. 최종 제품은 미세유체 공정과 다소 유사하지만, 미세유체 부품은 일반적으로 2차원(평면)인 반면 적층 제조를 사용하면 3차원 형상의 복잡한 유동 패턴을 구현할 수 있다는 점이 주요 차이점입니다. 현재 이 수도꼭지는 316L 스테인리스강과 티타늄 소재의 3D 프린팅 부품으로 제공됩니다. 대부분의 금속 합금, 고분자 및 일부 세라믹 소재도 이 방법을 사용하여 부품을 제작할 수 있으며, 향후 설계/제품에 적용될 예정입니다.
쌀. 1. 90μl Mott 정적 믹서의 사진(a) 및 도표(b)는 믹서 유체 흐름 경로의 단면을 파란색으로 음영 처리한 것을 보여줍니다.
설계 단계에서 정적 믹서의 성능에 대한 전산 유체 역학(CFD) 시뮬레이션을 수행하여 효율적인 설계를 개발하고 시간과 비용이 많이 드는 시행착오 실험을 줄일 수 있습니다. COMSOL Multiphysics 소프트웨어 패키지를 사용하여 정적 믹서와 표준 배관(믹서 미사용 시뮬레이션)에 대한 CFD 시뮬레이션을 수행했습니다. 압력 구동 층류 유체 역학을 사용하여 부품 내부의 유체 속도와 압력을 이해했습니다. 이러한 유체 역학은 이동상 화합물의 화학적 수송과 결합되어 서로 다른 농도의 액체 두 가지의 혼합을 이해하는 데 도움이 됩니다. 모델은 비교 가능한 솔루션을 찾는 동안 계산의 용이성을 위해 10초의 시간 함수로 연구되었습니다. 이론 데이터는 출구 중앙 지점을 데이터 수집 지점으로 선택한 점 프로브 투영 도구를 사용한 시간 상관 연구에서 얻었습니다. CFD 모델과 실험 테스트에서는 비례 샘플링 밸브와 펌핑 시스템을 통해 두 가지 다른 용매를 사용했으며, 샘플링 라인에는 각 용매에 대한 교체 플러그가 생성되었습니다. 그런 다음 이 용매들을 정적 믹서에서 혼합했습니다. 그림 2와 3은 각각 표준 파이프(믹서 없음)와 Mott 정적 믹서를 통한 유동 시뮬레이션 결과를 보여줍니다. 시뮬레이션은 그림 2에 나타낸 바와 같이 정적 믹서가 없는 상태에서 물과 순수 아세토니트릴이 번갈아 가며 튜브 안으로 유입되는 현상을 보여주기 위해 길이 5cm, 내경 0.25mm의 직선 튜브에서 수행되었습니다. 시뮬레이션에는 튜브와 믹서의 정확한 치수와 0.3ml/min의 유속이 사용되었습니다.
쌀. 2. 내경 0.25mm, 길이 5cm의 관에서 CFD 유동 시뮬레이션을 수행하여 믹서가 없는 HPLC 관 내부에서 발생하는 현상을 나타냈습니다. 붉은색은 물의 질량 분율을 나타내고, 파란색은 물이 없는 상태, 즉 순수한 아세토니트릴을 나타냅니다. 두 액체의 교대하는 덩어리 사이에서 확산 영역을 볼 수 있습니다.
쌀. 3. COMSOL CFD 소프트웨어 패키지로 모델링된 30ml 용량의 정적 믹서. 범례는 믹서 내 물의 질량 분율을 나타냅니다. 순수한 물은 빨간색으로, 순수한 아세토니트릴은 파란색으로 표시됩니다. 시뮬레이션된 물의 질량 분율 변화는 두 액체의 혼합 색상 변화로 나타납니다.
그림 4는 혼합 효율과 혼합 부피 간의 상관관계 모델 검증 연구 결과를 보여줍니다. 혼합 부피가 증가함에 따라 혼합 효율도 증가합니다. 저자들이 아는 바로는, 이 CFD 모델에서는 믹서 내부에서 작용하는 다른 복잡한 물리적 힘들을 고려할 수 없기 때문에 실험에서 혼합 효율이 더 높게 나타납니다. 실험에서 측정된 혼합 효율은 기준 사인파의 감소율로 나타냈습니다. 또한, 배압이 증가하면 일반적으로 혼합 수준이 높아지지만, 시뮬레이션에서는 이러한 점을 고려하지 않았습니다.
다양한 정적 믹서의 상대적인 성능을 비교하기 위해 다음과 같은 HPLC 조건 및 테스트 설정을 사용하여 원시 사인파를 측정했습니다. 그림 5는 일반적인 HPLC/UHPLC 시스템 레이아웃을 보여줍니다. 정적 믹서는 펌프 바로 뒤, 주입구와 분리 컬럼 바로 앞에 배치하여 테스트했습니다. 대부분의 배경 사인파 측정은 정적 믹서와 UV 검출기 사이에서 주입구와 모세관 컬럼을 우회하여 수행했습니다. 신호 대 잡음비를 평가하거나 피크 모양을 분석할 때 시스템 구성은 그림 5에 나와 있습니다.
그림 4. 다양한 정적 믹서에 대한 혼합 효율과 혼합 부피의 관계를 나타낸 그래프. 이론적인 불순물 함량은 실험적인 불순물 함량 데이터와 동일한 경향을 보이며, 이는 CFD 시뮬레이션의 타당성을 확인시켜 준다.
본 실험에 사용된 HPLC 시스템은 Chemstation 소프트웨어가 설치된 PC로 제어되는 UV 검출기가 장착된 Agilent 1100 시리즈 HPLC였습니다. 표 1은 두 가지 사례 연구에서 기본 사인파를 모니터링하여 믹서 효율을 측정하기 위한 일반적인 튜닝 조건을 보여줍니다. 실험은 서로 다른 두 가지 용매를 사용하여 수행되었습니다. 사례 1에서 혼합된 두 용매는 용매 A(탈이온수에 20mM 아세트산암모늄)와 용매 B(80% 아세토니트릴(ACN)/20% 탈이온수)였습니다. 사례 2에서 용매 A는 탈이온수에 0.05% 아세톤(표시) 용액이었고, 용매 B는 80/20% 메탄올과 물의 혼합물이었습니다. 사례 1에서는 펌프 유속을 0.25ml/min에서 1.0ml/min 사이로 설정했고, 사례 2에서는 펌프 유속을 1ml/min으로 일정하게 유지했습니다. 두 경우 모두 용매 A와 B의 혼합 비율은 20% A/80% B였다. 검출기는 1번 실험에서는 220 nm로 설정되었고, 2번 실험에서는 아세톤의 최대 흡수 파장인 265 nm로 설정되었다.
표 1. 사례 1 및 2에 대한 HPLC 구성 사례 1 사례 2 펌프 속도 0.25 ml/min ~ 1.0 ml/min 1.0 ml/min 용매 A 탈이온수에 20 mM 아세트산암모늄 탈이온수에 0.05% 아세톤 용매 B 80% 아세토니트릴(ACN) / 20% 탈이온수 80% 메탄올 / 20% 탈이온수 용매 비율 20% A / 80% B 20% A / 80% B 검출기 220 nm 265 nm
라이스. 6. 신호의 기준선 변동 성분을 제거하기 위해 저역 통과 필터를 적용하기 전후에 측정한 혼합 사인파의 그래프.
그림 6은 사례 1에서 나타나는 혼합된 기준선 잡음의 전형적인 예로, 기준선 드리프트에 중첩된 반복적인 정현파 패턴으로 표시됩니다. 기준선 드리프트는 배경 신호의 느린 증가 또는 감소를 의미합니다. 시스템이 충분한 평형 상태에 도달하지 못하면 일반적으로 기준선 드리프트는 감소하지만, 시스템이 완전히 안정된 상태에서도 불규칙적으로 드리프트될 수 있습니다. 이러한 기준선 드리프트는 시스템이 급격한 기울기 또는 높은 배압 조건에서 작동할 때 증가하는 경향이 있습니다. 기준선 드리프트가 발생하면 샘플 간 결과를 비교하기 어려울 수 있는데, 이는 원시 데이터에 저역 통과 필터를 적용하여 저주파 변동을 제거함으로써 해결할 수 있으며, 이를 통해 기준선이 평평한 진동 그래프를 얻을 수 있습니다. 그림 6은 또한 저역 통과 필터를 적용한 후의 믹서 기준선 잡음 그래프를 보여줍니다.
CFD 시뮬레이션 및 초기 실험 테스트를 완료한 후, 앞서 설명한 내부 구성 요소를 사용하여 30µl, 60µl, 90µl의 세 가지 내부 용량을 가진 세 개의 정적 믹서를 개발했습니다. 이 용량 범위는 저농도 분석물질 HPLC 응용 분야에서 요구되는 용량 및 혼합 성능 범위를 포함하며, 이러한 응용 분야에서는 향상된 혼합과 낮은 분산으로 낮은 진폭의 기준선을 생성해야 합니다. 그림 7은 실시예 1의 테스트 시스템(추적자로 아세토니트릴과 아세트산암모늄 사용)에서 세 가지 용량의 정적 믹서를 설치했을 때와 설치하지 않았을 때 얻은 기본 사인파 측정값을 보여줍니다. 그림 7에 나타낸 결과에 대한 실험 테스트 조건은 표 1에 설명된 절차에 따라 용매 유속 0.5ml/min에서 4번의 테스트 동안 일정하게 유지되었습니다. 데이터 세트에 오프셋 값을 적용하여 신호 중첩 없이 나란히 표시할 수 있도록 합니다. 오프셋은 믹서의 성능 수준을 판단하는 데 사용되는 신호의 진폭에 영향을 미치지 않습니다. 믹서가 없을 때 평균 정현파 진폭은 0.221 mAi였지만, 30 µl, 60 µl, 90 µl의 정적 Mott 믹서를 사용했을 때 진폭은 각각 0.077, 0.017, 0.004 mAi로 감소했습니다.
그림 7. 사례 1(아세트산암모늄 지시약을 포함한 아세토니트릴)에 대한 HPLC UV 검출기 신호 오프셋 대 시간 그래프. 믹서 없이 용매를 혼합한 경우, 30µl, 60µl 및 90µl Mott 믹서를 사용한 경우를 보여준다. 정적 믹서의 용량이 증가함에 따라 혼합이 개선됨(신호 진폭 감소)을 확인할 수 있다. (실제 데이터 오프셋: 0.13mA(믹서 없음), 0.32mA, 0.4mA, 0.45mA(더 나은 표시를 위해 조정됨)).
그림 8에 나타낸 데이터는 그림 7과 동일하지만, 이번에는 내부 용량이 각각 50µl, 150µl, 250µl인 세 가지 일반적인 HPLC 정적 믹서의 결과를 포함합니다. 그림 8. 사례 1(지시약으로 아세토니트릴과 아세트산암모늄 사용)에 대한 HPLC UV 검출기 신호 오프셋 대 시간 그래프. 정적 믹서 없이 용매를 혼합한 경우, 새로운 Mott 정적 믹서 시리즈를 사용한 경우, 그리고 세 가지 기존 믹서를 사용한 경우의 혼합 결과를 보여줍니다. (실제 데이터 오프셋은 표시 효과를 높이기 위해 믹서 미사용 시 0.1mA, 0.32mA, 0.48mA, 0.6mA, 0.7mA, 0.8mA, 0.9mA로 설정했습니다.) 기준 사인파의 감소율은 믹서를 설치하지 않았을 때의 진폭에 대한 사인파 진폭의 비율로 계산했습니다. 사례 1과 2에 대한 측정된 사인파 감쇠율은 표 2에 새로운 정적 믹서와 업계에서 일반적으로 사용되는 7가지 표준 믹서의 내부 부피와 함께 나열되어 있습니다. 그림 8과 9의 데이터 및 표 2에 제시된 계산 결과는 Mott 정적 믹서가 최대 98.1%의 사인파 감쇠율을 제공할 수 있으며, 이러한 시험 조건에서 기존 HPLC 믹서의 성능을 훨씬 능가함을 보여줍니다. 그림 9는 사례 2(추적자로 메탄올과 아세톤 사용)에 대한 HPLC UV 검출기 신호 오프셋 대 시간 그래프로, 정적 믹서가 없는 경우(복합), 새로운 Mott 정적 믹서 시리즈, 그리고 두 가지 기존 믹서를 보여줍니다(실제 데이터 오프셋은 0, 11(믹서 없음), 0.22, 0.3, 0.35mA이며, 더 나은 표시를 위해 조정되었습니다). 업계에서 일반적으로 사용되는 7가지 믹서도 평가되었습니다. 여기에는 A사(믹서 A1, A2, A3으로 지정)와 B사(믹서 B1, B2, B3으로 지정)에서 제조한 내부 용량이 각각 다른 세 가지 믹서가 포함됩니다. C사는 한 가지 크기만 제공했습니다.
표 2. 정적 믹서 교반 특성 및 내부 용적 정적 믹서 사례 1 정현파 회수율: 아세토니트릴 테스트(효율) 사례 2 정현파 회수율: 메탄올-물 테스트(효율) 내부 용적(µl) 믹서 없음 – - 0 Mott 30 65% 67.2% 30 Mott 60 92.2% 91.3% 60 Mott 90 98.1% 97.5% 90 믹서 A1 66.4% 73.7% 50 믹서 A2 89.8% 91.6% 150 믹서 A3 92.2% 94.5% 250 믹서 B1 44.8% 45.7% 9 35 믹서 B2 845% 96.2% 370 믹서 C 97.2% 97.4% 250
그림 8과 표 2의 결과를 분석해 보면, 30µl Mott 정적 믹서는 A1 믹서(즉, 50µl)와 동일한 혼합 효율을 보이지만, 내부 부피는 30% 더 작습니다. 60µl Mott 믹서를 내부 부피가 150µl인 A2 믹서와 비교했을 때, 혼합 효율이 92% 대 89%로 약간 향상되었는데, 더 중요한 것은 이러한 높은 혼합 효율이 믹서 부피의 1/3 수준에서 달성되었다는 점입니다. 90µl Mott 믹서의 성능은 내부 부피가 250µl인 A3 믹서와 동일한 경향을 보였습니다. 내부 부피를 3배 줄였음에도 불구하고 혼합 성능이 98%와 92%로 향상되었습니다. 믹서 B와 C에서도 유사한 결과와 비교가 이루어졌습니다. 결과적으로, 새로운 Mott PerfectPeak™ 정적 믹서 시리즈는 유사한 경쟁사 믹서보다 더 높은 혼합 효율을 제공하면서도 내부 용량은 더 작아 배경 잡음이 적고 신호 대 잡음비가 우수하며 분석물질 감도, 피크 모양 및 피크 분해능이 향상되었습니다. 혼합 효율의 유사한 경향은 사례 1과 사례 2 연구 모두에서 관찰되었습니다. 사례 2에서는 메탄올과 아세톤을 지시약으로 사용하여 60ml Mott 믹서, 유사한 믹서 A1(내부 용량 50µl), 그리고 유사한 믹서 B1(내부 용량 35µl)의 혼합 효율을 비교하는 테스트를 수행했습니다. 믹서가 설치되지 않은 상태에서는 성능이 저조했지만, 기준선 분석에는 사용되었습니다. 60ml Mott 믹서는 테스트 그룹에서 가장 우수한 성능을 보였으며, 혼합 효율이 90% 향상되었습니다. 유사한 믹서 A1은 혼합 효율이 75% 향상되었고, 유사한 믹서 B1은 45% 향상되었습니다. 사례 1의 사인 곡선 테스트와 동일한 조건에서 유속만 변화시켜 일련의 믹서에 대해 유속에 따른 기본 사인파 감소 테스트를 수행했습니다. 데이터에 따르면 0.25~1 ml/min의 유속 범위에서 사인파의 초기 감소는 세 가지 믹서 용량 모두에서 비교적 일정하게 유지되었습니다. 용량이 작은 두 믹서의 경우, 유속이 감소함에 따라 사인파 수축이 약간 증가했는데, 이는 믹서 내 용매 체류 시간이 증가하여 확산 혼합이 증가하기 때문으로 예상됩니다. 유속이 더욱 감소함에 따라 사인파 감소량은 증가할 것으로 예상됩니다. 그러나 사인파 기저 감쇠가 가장 큰 가장 큰 용량의 믹서에서는 사인파 기저 감쇠가 실험 오차 범위 내에서 95%~98%로 거의 변화가 없었습니다. 10. 사례 1에서 유속에 따른 사인파의 기본 감쇠. 이 시험은 가변 유속을 사용한 사인파 시험과 유사한 조건에서 수행되었으며, 아세토니트릴과 물의 80/20 혼합물 80%와 20 mM 아세트산암모늄 20%를 주입하였다.
새롭게 개발된 특허받은 PerfectPeak™ 인라인 정적 믹서는 30µl, 60µl, 90µl의 세 가지 내부 용량으로 제공되어, 향상된 혼합과 낮은 분산도를 요구하는 대부분의 HPLC 분석에 필요한 용량 및 혼합 성능 범위를 충족합니다. 이 새로운 정적 믹서는 새로운 3D 프린팅 기술을 사용하여 독특한 3D 구조를 구현함으로써 유체역학적 정적 혼합 성능을 향상시키고, 내부 혼합물의 단위 부피당 기본 노이즈를 최대로 감소시킵니다. 기존 믹서의 1/3 용량으로 기본 노이즈를 98%까지 줄였습니다. 이러한 믹서는 액체가 내부의 복잡한 기하학적 장벽을 통과하면서 서로 다른 단면적과 경로 길이를 가진 상호 연결된 3차원 유로로 구성됩니다. 이 새로운 정적 믹서 제품군은 경쟁 제품 대비 향상된 성능을 제공하면서도 내부 용량은 더 작아 신호 대 잡음비 향상, 정량 한계 저하, 피크 모양 개선, 효율성 및 분해능 향상을 통해 더 높은 감도를 제공합니다.
이번 호 내용: 크로마토그래피 – 환경 친화적인 RP-HPLC – 분석 및 정제에서 아세토니트릴을 이소프로판올로 대체하는 코어-쉘 크로마토그래피의 활용 – 새로운 가스 크로마토그래프…
비즈니스 센터 인터내셔널 랩메이트 리미티드, 오크 코트, 샌드리지 파크, 포터스 우드, 세인트 올번스, 하트퍼드셔 AL3 6PH, 영국
게시 시간: 2022년 11월 15일


