Belata mkpọtụ ntọala Sistemụ HPLC/UHPLC ma mee ka mmetụta dịkwuo mma site na iji igwekota igwe eji arụ ọrụ 3D nke e biri ebi ọhụrụ - Febụwarị 6, 2017 - James C. Steele, Christopher J. Martineau, Kenneth L. Rubow - Isiokwu na sayensị akụkọ bayoloji

Emepụtala igwekota inline static ọhụrụ nke e mere kpọmkwem iji mezuo ihe achọrọ siri ike nke sistemụ liquid chromatography dị elu (HPLC) na ultra high performance liquid chromatography (HPLC na UHPLC). Ngwakọta na-adịghị mma nke usoro abụọ ma ọ bụ karịa nke mkpanaka nwere ike ibute oke mgbaàmà-na-mkpọtụ dị elu, nke na-ebelata mmetụta uche. Ngwakọta static nke mmiri abụọ ma ọ bụ karịa nwere obere olu dị n'ime na akụkụ anụ ahụ nke igwekota static na-anọchite anya ọkọlọtọ kachasị elu nke igwekota static zuru oke. Igwekota static ọhụrụ na-emezu nke a site na iji teknụzụ mbipụta 3D ọhụrụ iji mepụta nhazi 3D pụrụ iche nke na-enye ngwakọta hydrodynamic static ka mma yana mbelata pasent kachasị elu na ebili mmiri sine isi kwa otu olu dị n'ime ngwakọta ahụ. Iji 1/3 nke olu dị n'ime nke igwekota ọdịnala belata ebili mmiri sine isi site na 98%. Igwekota ahụ nwere ọwa mmiri 3D jikọtara ọnụ yana mpaghara obe dị iche iche na ogologo ụzọ ka mmiri ahụ na-agafe geometries 3D dị mgbagwoju anya. Ịgwakọta ya na ọtụtụ ụzọ mmiri na-asọ asọ, yana ọgba aghara mpaghara na eddies, na-ebute ngwakọta na obere, meso na macro scales. E ji ihe eji agwakọta ihe pụrụ iche a mee ihe site na iji ihe eji agwakọta mmiri kọmputa (CFD). Data nnwale e gosiri na a na-enweta ngwakọta dị mma site na obere olu dị n'ime.
Ruo ihe karịrị afọ 30, ejirila chromatography mmiri mmiri mee ihe n'ọtụtụ ụlọ ọrụ, gụnyere ọgwụ, ọgwụ nje, nchedo gburugburu ebe obibi, nyocha nyocha, na nyocha kemịkalụ. Ike ịtụ akụkụ kwa nde ma ọ bụ ihe na-erughị ya dị oke mkpa maka mmepe teknụzụ na ụlọ ọrụ ọ bụla. Arụmọrụ ngwakọta na-adịghị mma na-eduga na oke mgbaàmà-na-mkpọtụ na-adịghị mma, nke bụ ihe na-akpasu obodo chromatography iwe n'ihe gbasara oke nchọpụta na mmetụta. Mgbe ị na-agwakọta ihe mgbaze HPLC abụọ, ọ dị mkpa mgbe ụfọdụ ịmanye ngwakọta site na ụzọ mpụga iji mee ka ihe mgbaze abụọ ahụ yie otu n'ihi na ụfọdụ ihe mgbaze anaghị agwakọta nke ọma. Ọ bụrụ na ihe mgbaze agwakọtaghị nke ọma, mmebi nke chromatography HPLC nwere ike ime, na-egosipụta onwe ya dị ka oke mkpọtụ ntọala na/ma ọ bụ ọdịdị elu adịghị mma. Site na ngwakọta na-adịghị mma, mkpọtụ ntọala ga-apụta dị ka ebili mmiri sine (ịrị elu na ọdịda) nke akara nchọpụta ka oge na-aga. N'otu oge ahụ, ngwakọta na-adịghị mma nwere ike ibute oke na-agbasa na nke na-adịghị mma, na-ebelata arụmọrụ nyocha, ọdịdị elu, na mkpebi elu. Ụlọ ọrụ ahụ aghọtala na ihe ngwakọta in-line na tee static bụ ụzọ isi melite oke ndị a ma na-enye ndị ọrụ ohere iru oke nchọpụta dị ala (nsogbu). Ngwakọta igwekota kacha mma na-ejikọta uru nke arụmọrụ ngwakọta dị elu, obere olu nwụrụ anwụ na mbelata nrụgide dị ala yana obere olu na oke mmepụta sistemụ kachasị. Na mgbakwunye, ka nyocha na-aghọ ihe mgbagwoju anya, ndị nyocha ga-eji ihe mgbaze polar na nke siri ike ịgwakọta mgbe niile. Nke a pụtara na ngwakọta ka mma bụ ihe dị mkpa maka nnwale n'ọdịnihu, na-eme ka mkpa maka nhazi na arụmọrụ igwekota dị elu dịkwuo elu.
N'oge na-adịbeghị anya, Mott emepụtala ụdị igwekota PerfectPeakTM inline static ọhụrụ nwere ikike nwere olu atọ dị n'ime: 30 µl, 60 µl na 90 µl. Nha ndị a na-ekpuchi oke olu na njirimara ngwakọta dị mkpa maka ọtụtụ ule HPLC ebe achọrọ ngwakọta ka mma na obere mgbasa. Ụdị atọ niile dị 0.5″ na dayameta ma na-enye arụmọrụ kachasị elu n'ime imewe dị obere. Ejiri ígwè anaghị agba nchara 316L mee ha, nke a na-eme ka ọ ghara ịdị ike, mana enwere titanium na ihe ndị ọzọ na-eguzogide nchara na kemịkalụ ígwè. Ngwakọta ndị a nwere nrụgide ọrụ kachasị elu nke ruru 20,000 psi. Na fig. 1a bụ foto nke igwekota Mott static static 60 µl nke e mere iji nye arụmọrụ ngwakọta kachasị elu ebe ọ na-eji obere olu dị n'ime karịa igwekota ọkọlọtọ nke ụdị a. Nhazi igwekota static ọhụrụ a na-eji teknụzụ mmepụta mgbakwunye ọhụrụ iji mepụta usoro 3D pụrụ iche nke na-eji obere mmiri dị n'ime karịa igwekota ọ bụla eji ugbu a na ụlọ ọrụ chromatography iji nweta ngwakọta static. Ngwakọta ndị dị otú ahụ nwere ọwa mmiri atọ jikọtara ọnụ nke nwere mpaghara dị iche iche na ogologo ụzọ dị iche iche ka mmiri mmiri na-agafe ihe mgbochi geometric dị mgbagwoju anya n'ime. Na eserese 1b na-egosi eserese atụmatụ nke igwekota ọhụrụ ahụ, nke na-eji ihe eji arụ ọrụ HPLC nke e ji eriri 10-32 mee maka ntinye na mpụta, ma nwee ókèala acha anụnụ anụnụ nke ọdụ ụgbọ mmiri igwekota dị n'ime nke nwere patented patented. Ebe dị iche iche nke ụzọ mmiri dị n'ime na mgbanwe na ntụziaka mmiri n'ime olu mmiri dị n'ime na-emepụta mpaghara nke mmiri mmiri na-agbagharị agbagharị na laminar, na-eme ka ngwakọta na obere, meso na macro scales. Nhazi nke igwekota pụrụ iche a jiri ihe atụ kọmputa (CFD) iji nyochaa ụkpụrụ mmiri na imeziwanye imewe tupu e mee ihe ngosi maka nnwale nyocha n'ime ụlọ na nyocha ubi ndị ahịa. Mmepụta mgbakwunye bụ usoro nke ibipụta ihe mejupụtara geometric 3D ozugbo site na eserese CAD na-enweghị mkpa maka igwe eji eme ihe ọdịnala (igwe igwe, lathes, wdg). Emebere igwekota ọhụrụ ndị a ka e jiri usoro a mepụta ahụ igwekota site na eserese CAD ma mepụta akụkụ ndị ahụ (ebipụtara) oyi akwa site na oyi akwa site na iji mmepụta mgbakwunye. N'ebe a, a na-etinye akwa ntụ ntụ ígwè dị ihe dị ka micron 20 n'ọkpụrụkpụ, laser kọmputa na-achịkwa na-agbaze ma gwakọta ntụ ntụ ahụ ka ọ bụrụ ụdị siri ike. Tinye akwa ọzọ n'elu oyi akwa a ma tinye laser sintering. Megharịa usoro a ruo mgbe akụkụ ahụ gwụchara kpamkpam. A na-ewepụ ntụ ntụ ahụ na akụkụ na-abụghị laser ejikọtara, na-ahapụ akụkụ ebipụtara 3D nke dabara na eserese CAD mbụ. Ngwaahịa ikpeazụ yiri usoro microfluidic, isi ihe dị iche bụ na ihe mejupụtara microfluidic na-abụkarị akụkụ abụọ (dị larịị), ebe a na-eji mmepụta mgbakwunye, enwere ike ịmepụta ụkpụrụ mmiri mgbagwoju anya na geometry akụkụ atọ. Faịpụ ndị a dị ugbu a dị ka akụkụ ebipụtara 3D na ígwè anaghị agba nchara 316L na titanium. Enwere ike iji ọtụtụ alloy metal, polymers na ụfọdụ seramiiki mee ihe site na iji usoro a, a ga-atụlekwa ha na imewe/ngwaahịa n'ọdịnihu.
Osikapa. 1. Foto (a) na eserese (b) nke igwekota Mott static nke 90 μl nke na-egosi akụkụ nke ụzọ mmiri mmiri igwekota nke nwere agba anụnụ anụnụ.
Gbaa ihe nlereanya kọmputa nke arụmọrụ ihe ngwakọta static (CFD) n'oge nhazi iji nyere aka mepụta atụmatụ dị irè ma belata nnwale nnwale na njehie na-ewe oge na nke dị oke ọnụ. Ihe nlereanya CFD nke ihe ngwakọta static na ọkpọkọ ọkọlọtọ (ihe nlereanya na-abụghị ihe ngwakọta) site na iji ngwugwu ngwanrọ COMSOL Multiphysics. Ịme ihe nlereanya site na iji usoro mmiri laminar nke nrụgide na-achịkwa iji ghọta ọsọ mmiri na nrụgide n'ime otu akụkụ. Ọnọdụ mmiri a, yana njem kemịkalụ nke ihe mejupụtara usoro mkpanaka, na-enyere aka ịghọta ngwakọta nke mmiri mmiri abụọ dị iche iche a chịkọtara. A na-amụ ihe nlereanya ahụ dị ka ọrụ nke oge, hà nhata sekọnd 10, maka mfe nke ngụkọ mgbe ị na-achọ azịza ndị yiri ya. E nwetara data echiche na ọmụmụ ihe metụtara oge site na iji ngwaọrụ nyocha isi ihe, ebe a họọrọ isi ihe dị n'etiti ọpụpụ maka nchịkọta data. Ihe nlereanya CFD na ule nnwale jiri ihe mgbaze abụọ dị iche iche site na valvụ nlele nha nha na sistemụ mgbapụta, na-ebute nkwụnye nnọchi maka ihe mgbaze ọ bụla na ahịrị nlele. A na-agwakọta ihe mgbaze ndị a na igwekota static. Foto nke 2 na nke 3 na-egosi ihe ngosi mmiri site na paịpụ ọkọlọtọ (enweghị igwekota) na site na igwekota Mott static, n'otu n'otu. E mere ihe ngosi mmiri ahụ na tube kwụ ọtọ nke dị sentimita 5 n'ogologo na 0.25 mm ID iji gosipụta echiche nke ịgbanwe plọg mmiri na acetonitrile dị ọcha n'ime tube ahụ na-enweghị igwekota mmiri kwụ ọtọ, dịka egosiri na Foto nke 2. Ihe ngosi ahụ jiri nha kpọmkwem nke tube na igwekota na ọnụego mmiri nke 0.3 ml/min.
Osikapa. 2. Ntụle nke CFD na-asọba n'ime tube 5 cm nwere dayameta dị n'ime nke 0.25 mm iji gosipụta ihe na-eme na tube HPLC, ya bụ, na enweghị igwekota. Uhie zuru oke na-anọchite anya oke nke mmiri. Anụ anụnụ na-anọchite anya enweghị mmiri, ya bụ, acetonitrile dị ọcha. Enwere ike ịhụ mpaghara mgbasa ozi n'etiti plọg ndị na-agbanwe agbanwe nke mmiri abụọ dị iche iche.
Osikapa. 3. Ngwakọta na-anaghị agbanwe agbanwe nke nwere olu nke 30 ml, nke e mere na ngwugwu ngwanrọ COMSOL CFD. Akụkọ ihe mere eme ahụ na-anọchite anya oke mmiri dị na igwekota. A na-egosi mmiri dị ọcha na uhie na acetonitrile dị ọcha na acha anụnụ anụnụ. Mgbanwe na oke ibu nke mmiri e mere ka ọ dị ka ihe e ji mee ...
Na eserese nke 4, a na-egosi ọmụmụ ihe gbasara njikọ dị n'etiti arụmọrụ ngwakọta na olu ngwakọta. Ka olu ngwakọta na-abawanye, arụmọrụ ngwakọta ga-abawanye. Dịka ndị dere ya si mara, ike anụ ahụ ndị ọzọ dị mgbagwoju anya na-arụ ọrụ n'ime igwekota enweghị ike ịgụta na ụdị CFD a, nke na-ebute arụmọrụ ngwakọta dị elu na ule nnwale. A tụrụ arụmọrụ ngwakọta nnwale dị ka mbelata pasent na isi sinusoid. Na mgbakwunye, mmụba nrụgide azụ na-ebutekarị ọkwa ngwakọta dị elu, nke a na-anaghị atụle na ihe nlereanya ahụ.
E jiri ọnọdụ HPLC na nhazi ule ndị a tụọ ebili mmiri sine raw iji tụnyere arụmọrụ nke igwekota dị iche iche na-agbanwe agbanwe. Ihe osise dị na Foto 5 na-egosi nhazi sistemụ HPLC/UHPLC nkịtị. A nwalere igwekota static site n'itinye igwekota ozugbo mgbe ọkpọkọ ahụ gasịrị na tupu igwekota na kọlụm nkewa. A na-eme ọtụtụ nha sinusoidal ndabere site na ịgafe injector na kọlụm capillary n'etiti igwekota static na ihe nchọpụta UV. Mgbe a na-enyocha oke mgbaàmà-na-mkpọtụ na/ma ọ bụ nyochaa ọdịdị elu, a na-egosi nhazi sistemụ na Foto 5.
Foto nke 4. Atụmatụ nke arụmọrụ ngwakọta na olu ngwakọta maka ọtụtụ igwekota na-agbanwe agbanwe. Ihe adịghị ọcha nke echiche na-agbaso otu usoro ahụ dị ka data adịghị ọcha nnwale nke na-akwado izi ezi nke ihe nlereanya CFD.
Sistemụ HPLC ejiri mee nnwale a bụ Agilent 1100 Series HPLC nwere ihe nchọpụta UV nke PC na-achịkwa nke ọma na ngwanrọ Chemstation. Tebụl 1 na-egosi ọnọdụ nhazi nkịtị maka ịtụ arụmọrụ igwekota site na inyocha sinusoids bụ isi na ọmụmụ ihe abụọ. Emere ule nnwale na ihe atụ abụọ dị iche iche nke ihe mgbaze. Ihe mgbaze abụọ a gwakọtara na ikpe 1 bụ ihe mgbaze A (20 mM ammonium acetate na mmiri gbazere agbaze) na ihe mgbaze B (80% acetonitrile (ACN)/20% mmiri gbazere agbaze). Na Ikpe 2, ihe mgbaze A bụ ihe ngwọta nke 0.05% acetone (label) na mmiri gbazere agbaze. Ihe mgbaze B bụ ngwakọta nke 80/20% methanol na mmiri. Na ikpe 1, a na-edozi mgbapụta ahụ ka ọ bụrụ ọnụego mmiri nke 0.25 ml/min ruo 1.0 ml/min, na ikpe 2, a na-edozi mgbapụta ahụ ka ọ bụrụ ọnụego mmiri mgbe niile nke 1 ml/min. N'ọnọdụ abụọ a, oke nke ngwakọta nke ihe mgbaze A na B bụ 20% A/80% B. Edobere ihe nchọpụta ahụ na 220 nm na ikpe 1, e dokwara oke mmịpụta acetone na ikpe 2 ka ọ bụrụ ogologo ebili mmiri nke 265 nm.
Tebụl 1. Nhazi HPLC maka Ikpe 1 na 2 Ikpe 1 Ikpe 2 Ọsọ mgbapụta 0.25 ml/min ruo 1.0 ml/min 1.0 ml/min Ihe mgbaze A 20 mM ammonium acetate na mmiri gbazere agbaze 0.05% Acetone na mmiri gbazere agbaze B 80% Acetonitrile (ACN) / 20% mmiri gbazere agbaze 80% methanol / 20% mmiri gbazere agbaze 20% A / 80% B 20% A / 80% B Nchọpụta B 220 nm 265 nm
Osikapa. 6. A tụrụ atụmatụ nke ebili mmiri sine agwakọtara tupu na mgbe ejiri nzacha dị ala iji wepụ ihe ndị na-amị amị nke akara ahụ.
Foto nke 6 bụ ihe atụ nkịtị nke mkpọtụ ntọala agwakọtara na Ikpe nke 1, nke egosiri dị ka usoro sinusoidal ugboro ugboro nke a na-etinye na mmalite drift. Ntọala drift bụ mmụba nwayọ ma ọ bụ mbelata na mgbaàmà ndabere. Ọ bụrụ na anaghị ekwe ka sistemụ ahụ nhata ogologo oge, ọ na-adakarị, mana ọ ga-ada n'ụzọ na-adịghị mma ọbụlagodi mgbe sistemụ ahụ kwụsiri ike kpamkpam. Ntọala drift a na-abawanye mgbe sistemụ ahụ na-arụ ọrụ na ọnọdụ steepụ ma ọ bụ nrụgide azụ dị elu. Mgbe mgbanwe ntọala a dị, ọ nwere ike isi ike iji ihe si na sample gaa na sample tụnyere nsonaazụ, nke enwere ike imeri site na itinye nzacha dị ala na data raw iji kpochapụ mgbanwe ugboro ole ndị a, si otú a na-enye atụmatụ oscillation nwere ntọala dị larịị. Na fig. Foto nke 6 na-egosikwa atụmatụ nke mkpọtụ ntọala nke igwekota mgbe etinyere nzacha dị ala.
Mgbe emechara ihe ngosi CFD na nnwale nnwale mbụ, e mechara mepụta igwekota atọ dị iche iche na-agbanwe agbanwe site na iji ihe ndị dị n'ime akọwara n'elu na olu atọ dị n'ime: 30 µl, 60 µl na 90 µl. Oke a na-ekpuchi oke olu na arụmọrụ ngwakọta achọrọ maka ngwa HPLC nyocha dị ala ebe achọrọ ngwakọta ka mma na mgbasa dị ala iji mepụta ntọala olu dị ala. Na fig. 7 na-egosi nha ebili mmiri sine bụ isi enwetara na sistemụ nnwale nke Ihe atụ 1 (acetonitrile na ammonium acetate dị ka tracers) yana olu atọ nke igwekota static na enweghị igwekota arụnyere. Ọnọdụ nnwale nnwale maka nsonaazụ egosiri na Foto 7 ka ejirigide n'oge ule anọ niile dịka usoro akọwapụtara na Tebụl 1 na ọnụego mmiri mmiri nke 0.5 ml/min. Tinye uru nkwụsị na datasets ka e wee gosipụta ha n'akụkụ na-enweghị mgbakwụnye mgbaàmà. Mbelata anaghị emetụta oke nke mgbaàmà ejiri kpee ọkwa arụmọrụ nke igwekota. Oke njupụta sinusoidal nke na-enweghị igwekota bụ 0.221 mAi, ebe oke nke igwekota Mott static na 30 µl, 60 µl, na 90 µl dara ruo 0.077, 0.017, na 0.004 mAi, n'otu n'otu.
Foto nke 7. Mmechi Mgbaàmà HPLC UV Detector vs. Oge maka Ikpe nke 1 (acetonitrile nwere ihe ngosi ammonium acetate) na-egosi ngwakọta ihe mgbaze na-enweghị igwekota, 30 µl, 60 µl na 90 µl igwekota Mott na-egosi ngwakọta ka mma (ọnụọgụ mgbaàmà dị ala) ka olu nke igwekota static na-abawanye. (nkwụsị data n'ezie: 0.13 (enweghị igwekota), 0.32, 0.4, 0.45mA maka ngosipụta ka mma).
Data egosiri na fig. 8 bụ otu ihe ahụ dị na Fig. 7, mana n'oge a ha gụnyere nsonaazụ nke igwekota atọ HPLC static a na-ejikarị eme ihe nwere olu dị n'ime nke 50 µl, 150 µl na 250 µl. Osikapa. Foto nke 8. Mmechi mgbaàmà HPLC UV Detector megide oge nhazi maka ikpe nke 1 (Acetonitrile na Ammonium Acetate dị ka ihe ngosi) na-egosi ngwakọta nke ihe mgbaze na-enweghị igwekota static, usoro ọhụrụ nke igwekota Mott static, na igwekota atọ a na-ahụkarị (nkwụsị data n'ezie bụ 0.1 (na-enweghị igwekota), 0.32, 0.48, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 mA n'otu n'otu maka mmetụta ngosi ka mma). A na-agbakọ mbelata pasent nke ebili mmiri sine isi site na oke nke ebili mmiri sine na oke na-enweghị igwekota arụnyere. A na-edepụta pasentị mbelata ebili mmiri sine nke a tụrụ maka Ikpe 1 na 2 na Tebụl 2, yana olu dị n'ime nke igwekota ọhụrụ na igwekota ọkọlọtọ asaa a na-ejikarị eme ihe n'ụlọ ọrụ ahụ. Data dị na Foto 8 na 9, yana mgbakọta egosiri na Tebụl 2, na-egosi na igwekota Mott Static nwere ike inye mbelata ebili mmiri sine ruo 98.1%, nke karịrị arụmọrụ nke igwekota HPLC nkịtị n'okpuru ọnọdụ nnwale ndị a. Foto 9. Mgbakwụnye mgbaàmà HPLC UV na nhazi oge maka ikpe 2 (methanol na acetone dị ka tracers) na-egosi enweghị igwekota static (ejikọtara), usoro ọhụrụ nke igwekota Mott static na igwekota abụọ nkịtị (nkwụsị data n'ezie bụ 0, 11 (na-enweghị igwekota.), 0.22, 0.3, 0.35 mA na maka ngosipụta ka mma). A tụlekwara igwekota asaa a na-ejikarị eme ihe n'ụlọ ọrụ ahụ. Ndị a gụnyere igwekota nwere mpịakọta atọ dị iche iche dị n'ime ụlọ ọrụ A (nke akpọrọ Mixer A1, A2 na A3) na ụlọ ọrụ B (nke akpọrọ Mixer B1, B2 na B3). Ụlọ ọrụ C nyere naanị otu nha.
Tebụl 2. Àgwà nke Ngwakọta Na-agbanwe Agbanwe na Olu dị n'ime Ngwakọta Na-agbanwe Agbanwe nke 1 Mgbake Sinusoidal: Nnwale Acetonitrile (Arụmọrụ) Ikpe 2 Mgbake Sinusoidal: Nnwale Mmiri Methanol (Arụmọrụ) Olu dị n'ime (µl) Enweghị Ngwakọta – - 0 Mott 30 65% 67.2% 30 Mott 60 92.2% 91.3% 60 Mott 90 98.1% 97.5% 90 Ngwakọta A1 66.4% 73.7% 50 Ngwakọta A2 89.8% 91.6% 150 Ngwakọta A3 92.2% 94.5% 250 Ngwakọta B1 44.8% 45.7% 9 35 Ngwakọta B2 845.% 96.2% 370 Ngwakọta C 97.2% 97.4% 250
Nnyocha nke nsonaazụ dị na Foto 8 na Tebụl 2 na-egosi na igwekota Mott static 30 µl nwere otu arụmọrụ ngwakọta ahụ dịka igwekota A1, ya bụ, 50 µl, agbanyeghị, Mott 30 µl nwere obere olu dị n'ime 30%. Mgbe a na-atụnyere igwekota Mott 60 µl na igwekota A2 150 µl, enwere obere mmụba na arụmọrụ ngwakọta nke 92% megide 89%, mana nke kachasị mkpa, e nwetara ọkwa dị elu nke ngwakọta a na 1/3 nke olu igwekota. yiri igwekota A2. Arụmọrụ nke igwekota Mott 90 µl sochiri otu usoro ahụ dị ka igwekota A3 na olu dị n'ime nke 250 µl. A hụkwara mmezi na arụmọrụ ngwakọta nke 98% na 92% na mbelata okpukpu atọ na olu dị n'ime. E nwetara nsonaazụ na ntụnyere ndị yiri ya maka igwekota B na C. N'ihi ya, usoro igwekota ọhụrụ Mott PerfectPeakTM na-enye arụmọrụ ngwakọta dị elu karịa igwekota ndị asọmpi yiri ya, mana na obere olu dị n'ime, na-enye mkpọtụ ndabere ka mma na oke mgbaàmà-na-mkpọtụ ka mma, Analyte ka mma, ọdịdị elu na mkpebi elu. A hụrụ usoro ndị yiri ya na arụmọrụ ngwakọta na ọmụmụ Ikpe nke 1 na Ikpe nke 2. Maka Ikpe nke 2, emere ule site na iji (methanol na acetone dị ka ihe ngosi) iji tụnyere arụmọrụ ngwakọta nke 60 ml Mott, igwekota yiri A1 (olu dị n'ime 50 µl) na igwekota yiri B1 (olu dị n'ime 35 µl). , arụmọrụ adịghị mma na-enweghị igwekota arụnyere, mana ejiri ya maka nyocha ntọala. Igwekota Mott 60 ml gosipụtara na ọ bụ igwekota kachasị mma na otu nnwale ahụ, na-enye mmụba 90% na arụmọrụ ngwakọta. Igwekota A1 yiri ya hụrụ mmụba 75% na arụmọrụ ngwakọta wee nweta mmụba 45% na igwekota B1 yiri ya. E mere nnwale mbelata ebili mmiri sine nke ọma site na ọnụego mmiri na usoro igwekota n'okpuru otu ọnọdụ ahụ dị ka ule sine curve na Ikpe nke 1, naanị mgbanwe ọnụego mmiri ahụ. Data ahụ gosiri na n'ime oke ọnụego mmiri site na 0.25 ruo 1 ml/min, mbelata mbụ na ebili mmiri sine nọgidere na-agbanwe agbanwe maka olu igwekota atọ niile. Maka obere igwekota olu abụọ ahụ, enwere obere mmụba na nrụgide sinusoidal ka ọnụego mmiri na-ebelata, nke a na-atụ anya ya n'ihi mmụba oge obibi nke ihe mgbaze na igwekota ahụ, na-enye ohere maka mmụba nke ngwakọta mgbasa. A na-atụ anya na mwepụ nke ebili mmiri sine ga-abawanye ka mmiri na-ebelata ọzọ. Agbanyeghị, maka olu igwekota kachasị ukwuu nwere mbelata ntọala sine kachasị elu, mbelata ntọala sine ebili ka fọrọ nke nta ka ọ ghara ịgbanwe agbanwe (n'ime oke ejighị n'aka nnwale), yana ụkpụrụ sitere na 95% ruo 98%. Osikapa. 10. Mbelata nke ebili mmiri sine ma e jiri ya tụnyere ọnụego mmiri na ikpe 1. E mere ule ahụ n'okpuru ọnọdụ yiri ule sine yana ọnụego mmiri na-agbanwe agbanwe, na-etinye 80% nke ngwakọta acetonitrile na mmiri 80/20 na 20% nke 20 mM ammonium acetate.
Ngwakọta igwekota PerfectPeakTM nke e mepụtara ọhụrụ nwere ikike nwere olu atọ dị n'ime: 30 µl, 60 µl na 90 µl na-ekpuchi oke arụmọrụ olu na ngwakọta achọrọ maka ọtụtụ nyocha HPLC chọrọ ngwakọta ka mma na ala mgbasa dị ala. Ngwakọta igwekota ọhụrụ ahụ na-emezu nke a site na iji teknụzụ mbipụta 3D ọhụrụ iji mepụta nhazi 3D pụrụ iche nke na-enye ngwakọta hydrodynamic static ka mma yana mbelata pasent kachasị elu na mkpọtụ ntọala kwa olu otu nke ngwakọta dị n'ime. Iji 1/3 nke olu dị n'ime nke igwekota nkịtị na-ebelata mkpọtụ ntọala site na 98%. Ngwakọta ndị dị otú ahụ nwere ọwa mmiri atọ jikọtara ọnụ nwere mpaghara obe dị iche iche na ogologo ụzọ dị iche iche ka mmiri mmiri na-agafe ihe mgbochi geometric dị mgbagwoju anya n'ime. Ezinụlọ ọhụrụ nke igwekota igwekota igwekota na-enye arụmọrụ ka mma karịa igwekota asọmpi, mana na-enwe obere olu dị n'ime, na-ebute oke mgbaàmà ka mma na oke nha dị ala, yana ọdịdị elu, arụmọrụ na mkpebi ka mma maka mmetụta dị elu.
N'akwụkwọ a Chromatography - RP-HPLC nke na-anaghị emerụ gburugburu ebe obibi - Ojiji nke chromatography isi-shell iji dochie acetonitrile na isopropanol na nyocha na nhicha - chromatography gas ọhụrụ maka…
Ụlọ Ọrụ Azụmaahịa Mba Nile Labmate Limited Ụlọikpe Oak Sandridge Park, Porters Wood St Albans Hertfordshire AL3 6PH United Kingdom


Oge ozi: Nọvemba-15-2022