A ti ṣe agbekalẹ aladapọ inline static tuntun ti o ni iyipada ti a ṣe ni pataki lati pade awọn ibeere lile ti awọn eto chromatography omi iṣẹ giga (HPLC) ati ultra high performance liquid chromatography (HPLC ati UHPLC). Adapọ ti ko dara ti awọn ipele alagbeka meji tabi diẹ sii le ja si ipin ifihan-si-ariwo ti o ga julọ, eyiti o dinku ifamọ. Adapọpọ static ti awọn omi meji tabi diẹ sii pẹlu iwọn inu ti o kere ju ati awọn iwọn ti ara ti aladapọ static duro fun boṣewa ti o ga julọ ti aladapọ static ti o dara julọ. Aladapọ static tuntun ṣe aṣeyọri eyi nipa lilo imọ-ẹrọ titẹjade 3D tuntun lati ṣẹda eto 3D alailẹgbẹ kan ti o pese idapọ hydrodynamic static ti o dara julọ pẹlu idinku ogorun ti o ga julọ ninu igbi sine ipilẹ fun iwọn inu ti adalu naa. Lilo 1/3 ti iwọn inu ti aladapọ ibile dinku igbi sine ipilẹ nipasẹ 98%. Aladapọ naa ni awọn ikanni sisan 3D ti o sopọ mọ pẹlu awọn agbegbe agbelebu-apakan ati awọn gigun ipa ọna bi omi naa ṣe n kọja awọn geometries 3D ti o nipọn. Dapọ pọ ni ọpọlọpọ awọn ipa ọna sisan ti o nira, ni idapo pẹlu rudurudu agbegbe ati awọn eddies, yoo yorisi idapọ ni awọn iwọn micro, meso ati macro. A ṣe àdàpọ̀ aláìlẹ́gbẹ́ yìí nípa lílo àwọn àwòṣe ìṣàfihàn omi oníṣirò (CFD). Àwọn ìwádìí tí a gbé kalẹ̀ fihàn pé a ṣe àdàpọ̀ tó dára pẹ̀lú ìwọ̀n inú tó kéré jùlọ.
Fún ohun tó lé ní ọgbọ̀n ọdún, wọ́n ti ń lo chromatography omi ní ọ̀pọ̀lọpọ̀ ilé iṣẹ́, títí bí àwọn oògùn olóró, àwọn ohun tí ń pa kòkòrò, ààbò àyíká, ìwádìí nípa ìwádìí, àti ìwádìí kẹ́míkà. Agbára láti wọn àwọn ẹ̀yà fún mílíọ̀nù tàbí kí ó dín sí i ṣe pàtàkì fún ìdàgbàsókè ìmọ̀ ẹ̀rọ ní èyíkéyìí ilé iṣẹ́. Ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ tí kò dára máa ń yọrí sí ìpíndọ́gba àmì-sí-ariwo tí kò dára, èyí tí ó jẹ́ ìbínú fún àwùjọ chromatography ní ti àwọn ààlà ìwádìí àti ìmọ̀lára. Nígbà tí a bá ń da àwọn solvent HPLC méjì pọ̀, ó máa ń pọndandan láti fi agbára mú ìdàpọ̀ pẹ̀lú àwọn ọ̀nà ìta láti so àwọn solvent méjì pọ̀ nítorí pé àwọn solvent kan kò dapọ̀ dáadáa. Tí àwọn solvent kò bá dapọ̀ dáadáa, ìbàjẹ́ chromatography HPLC lè ṣẹlẹ̀, èyí tí yóò fi ara hàn gẹ́gẹ́ bí ariwo ìpìlẹ̀ tí ó pọ̀ jù àti/tàbí ìrísí òkè tí kò dára. Pẹ̀lú ìdàpọ̀ tí kò dára, ariwo ìpìlẹ̀ yóò farahàn gẹ́gẹ́ bí ìgbì omi sine (gíga àti sísubú) ti àmì ìwádìí lórí àkókò. Ní àkókò kan náà, ìdàpọ̀ tí kò dára lè yọrí sí àwọn òkè tí ó fẹ̀ síi àti àìdọ́gba, dín iṣẹ́ ìwádìí kù, ìrísí òkè, àti ìpinnu òkè. Ilé iṣẹ́ náà ti mọ̀ pé àwọn solvent in-line àti tee static jẹ́ ọ̀nà láti mú àwọn ààlà wọ̀nyí sunwọ̀n síi àti láti jẹ́ kí àwọn olùlò ní ààlà ìwádìí tí ó kéré síi (ìmọ̀lára). Adàpọ̀ àìdára tó dára jù yìí so àwọn àǹfààní ìdàpọ̀ tó ga, ìwọ̀n tó kú díẹ̀ àti ìdínkù ìfúnpá díẹ̀ pẹ̀lú ìwọ̀n tó kéré jù àti lílo ètò tó pọ̀ jù. Ní àfikún, bí ìṣàyẹ̀wò ṣe ń díjú sí i, àwọn atunnkanka gbọ́dọ̀ máa lo àwọn ohun tó ṣòro láti dapọ̀ mọ́ra nígbà gbogbo. Èyí túmọ̀ sí wípé ìdàpọ̀ tó dára jù jẹ́ dandan fún ìdánwò ọjọ́ iwájú, èyí sì tún ń mú kí àìní fún àdàpọ̀ tó dára jù àti iṣẹ́ rẹ̀ pọ̀ sí i.
Mott ṣẹ̀ṣẹ̀ ṣe àgbékalẹ̀ onírúurú àwọn ohun èlò ìdàpọ̀ inline PerfectPeakTM tí a fọwọ́ sí pẹ̀lú àwọn ohun èlò inú mẹ́ta: 30 µl, 60 µl àti 90 µl. Àwọn ìwọ̀n wọ̀nyí bo gbogbo ìwọ̀n àti àwọn ànímọ́ ìdàpọ̀ tí a nílò fún ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn ìdánwò HPLC níbi tí a ti nílò ìdàpọ̀ tí ó dára àti ìtúká díẹ̀. Gbogbo àwọn àwòṣe mẹ́ta náà jẹ́ 0.5″ ní ìwọ̀n ìlà, wọ́n sì ń ṣe iṣẹ́ tó ga jùlọ ní ilé iṣẹ́ nínú àwòrán kékeré kan. Wọ́n jẹ́ ti irin alagbara 316L, tí a fi passivate ṣe fún àìlera, ṣùgbọ́n titanium àti àwọn irin irin mìíràn tí kò le koko àti tí kò le koko tún wà. Àwọn ohun èlò ìdàpọ̀ wọ̀nyí ní ìfúnpá iṣẹ́ tó pọ̀ jùlọ tó 20,000 psi. Ní orí àwòrán 1a ni fọ́tò ohun èlò ìdàpọ̀ 60 µl Mott tí a ṣe láti pèsè agbára ìdàpọ̀ tí ó pọ̀ jùlọ nígbà tí ó ń lo ìwọ̀n inú tí ó kéré ju àwọn ohun èlò ìdàpọ̀ tí ó jẹ́ irú èyí lọ. Apẹẹrẹ ohun èlò ìdàpọ̀ tuntun yìí lo ìmọ̀-ẹ̀rọ ìṣelọ́pọ́ afikún tuntun láti ṣẹ̀dá ìṣètò 3D àrà ọ̀tọ̀ kan tí ó ń lo ìṣàn inú tí kò pọ̀ ju èyíkéyìí ohun èlò ìdàpọ̀ tí a ń lò lọ́wọ́lọ́wọ́ nínú ilé iṣẹ́ chromatography láti ṣe àṣeyọrí ìdàpọ̀ static. Àwọn àdàpọ̀ bẹ́ẹ̀ ní àwọn ikanni ìṣàn onípele mẹ́ta tí ó sopọ̀ mọ́ ara wọn pẹ̀lú àwọn agbègbè ìṣàn onípele ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ àti àwọn gígùn ọ̀nà ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ bí omi ṣe ń kọjá àwọn ìdènà onípele onípele tó díjú nínú. Ní orí Àwòrán 1b, a fi àwòrán onípele ti àdàpọ̀ tuntun náà hàn, èyí tí ó ń lo àwọn ohun èlò ìfúnpọ̀ HPLC onípele 10-32 fún wíwọlé àti ìjáde, ó sì ní àwọn ààlà aláwọ̀ búlúù ti ibudo àdàpọ̀ onípele tí a fọwọ́ sí. Àwọn agbègbè ìṣàn onípele ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ ti àwọn ipa ọ̀nà ìṣàn inú àti àwọn ìyípadà nínú ìtọ́sọ́nà ìṣàn nínú iwọn didun ìṣàn inú ń ṣẹ̀dá àwọn agbègbè ìṣàn onírúkèrúdò àti laminar, èyí tí ó ń fa ìdàpọ̀ ní àwọn ìwọ̀n micro, meso àti macro. Apẹrẹ àdàpọ̀ aláìlẹ́gbẹ́ yìí lo àwọn ìṣesí ìṣirò omi oníṣirò (CFD) láti ṣe àtúpalẹ̀ àwọn ìlànà ìṣàn àti láti tún àwòrán náà ṣe kí ó tó di àpẹẹrẹ fún ìdánwò onínáwò inú ilé àti ìṣàyẹ̀wò pápá oníbàárà. Ìṣẹ̀dá afikún ni ìlànà títẹ̀ àwọn èròjà onípele 3D tààrà láti inú àwọn àwòrán CAD láìsí àìní fún iṣẹ́ ìṣẹ̀dá ìbílẹ̀ (àwọn ẹ̀rọ milling, lathes, àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ). Àwọn àdàpọ̀ onípele tuntun wọ̀nyí ni a ṣe láti ṣe nípa lílo ìlànà yìí, níbi tí a ti ṣẹ̀dá ara àdàpọ̀ láti inú àwọn àwòrán CAD àti pé àwọn ẹ̀yà náà ni a ṣe (tí a tẹ̀ jáde) fẹlẹfẹlẹ nípa lílo iṣẹ́ àdàpọ̀ afikún. Níbí, a ó fi ìpele irin kan tó nípọn tó 20 microns sílẹ̀, a ó sì fi lésà tí kọ̀ǹpútà ń darí yọ́, a ó sì fi lésà náà pò ó sì dà á pọ̀ mọ́ ara rẹ̀. Fi ìpele mìíràn sí orí ìpele yìí kí o sì fi lésà síntering. Tún ìlànà yìí ṣe títí tí apá náà yóò fi parí pátápátá. A ó yọ lésà náà kúrò nínú apá tí kò ní lésà, a ó sì fi apá tí a tẹ̀ jáde ní 3D sílẹ̀ tí ó bá àwòrán CAD àkọ́kọ́ mu. Ọjà ìkẹyìn náà jọ ìlànà microfluidic díẹ̀, pẹ̀lú ìyàtọ̀ pàtàkì ni pé àwọn èròjà microfluidic sábà máa ń jẹ́ onípele méjì (pẹ̀lẹ́pẹ̀lẹ́), nígbà tí a bá ń lo iṣẹ́ àfikún, a lè ṣẹ̀dá àwọn àpẹẹrẹ ìṣàn onípele mẹ́ta. Àwọn páìpù wọ̀nyí wà lọ́wọ́lọ́wọ́ gẹ́gẹ́ bí àwọn ẹ̀yà tí a tẹ̀ jáde ní 3D nínú irin alagbara 316L àti titanium. Ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn irin alloy, polymers àti àwọn seramiki ni a lè lò láti ṣe àwọn èròjà nípa lílo ọ̀nà yìí, a ó sì gbé wọn yẹ̀ wò nínú àwọn àwòrán/ọjà ọjọ́ iwájú.
Irẹsi. 1. Fọ́tò (a) àti àwòrán (b) ti àdàpọ̀ 90 μl Mott tí ó dúró ṣinṣin tí ó ń fi apá kan ti ọ̀nà ìṣàn omi àdàpọ̀ tí a fi àwọ̀ búlúù ṣe hàn.
Ṣiṣe awọn iṣeṣiro iṣirò ti iṣẹ aladapọ aimi lakoko ipele apẹrẹ lati ṣe iranlọwọ lati dagbasoke awọn apẹrẹ ti o munadoko ati dinku awọn idanwo idanwo-ati-aṣiṣe ti o gba akoko ati gbowolori. Simulate CFD ti awọn aladapọ aimi ati pipe boṣewa (simulate ti ko ni aladapọ) nipa lilo package sọfitiwia COMSOL Multiphysics. Ṣiṣe awoṣe nipa lilo awọn ẹrọ omi laminar ti a dari titẹ lati loye iyara omi ati titẹ laarin apakan kan. Awọn agbara omi yii, ni idapo pẹlu gbigbe kemikali ti awọn agbo-ogun ipele alagbeka, ṣe iranlọwọ lati loye idapọ awọn omi meji ti o yatọ. A ṣe iwadi awoṣe naa gẹgẹbi iṣẹ ti akoko, dogba si awọn aaya 10, fun irọrun iṣiro lakoko wiwa awọn ojutu ti o jọra. A gba data ti imọ-jinlẹ ninu iwadi ti o ni ibatan akoko nipa lilo irinṣẹ projection point probe, nibiti a ti yan aaye kan ni aarin ijade fun gbigba data. Awoṣe CFD ati awọn idanwo idanwo lo awọn olomi oriṣiriṣi meji nipasẹ valve ayẹwo ti o yẹ ati eto fifa, ti o yorisi plug rirọpo fun olomi kọọkan ninu laini ayẹwo. Lẹhinna awọn olomi wọnyi ni a dapọ sinu aladapọ aimi. Àwòrán 2 àti 3 fi àwọn ìṣesí ìṣàn hàn nípasẹ̀ páìpù boṣewa (kò sí àdàpọ̀) àti nípasẹ̀ àdàpọ̀ static Mott, lẹ́sẹẹsẹ. A ṣe ìṣesí náà lórí páìpù gígùn 5 cm àti 0.25 mm ID láti fi èrò yíyí àwọn pọ́ọ̀gù omi àti acetonitrile mímọ́ sínú páìpù náà hàn láìsí àdàpọ̀ static, gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn ní Àwòrán 2. Ìṣesí náà lo àwọn ìwọ̀n gangan ti páìpù àti àdàpọ̀ àti ìwọ̀n ìṣàn ti 0 .3 ml/min.
Irẹsi. 2. Ṣíṣe àfarawé ìṣàn CFD nínú túbù 5 cm pẹ̀lú ìwọ̀n ìbú tí ó jẹ́ 0.25 mm láti fi ohun tí ó ṣẹlẹ̀ nínú túbù HPLC hàn, ìyẹn ni pé láìsí ẹ̀rọ adàpọ̀. Pupa pípé dúró fún ìpín ìwọ̀n omi. Àwọ̀ búlúù dúró fún àìsí omi, ìyẹn acetonitrile mímọ́. A lè rí àwọn agbègbè ìfọ́nká láàárín àwọn ìdìpọ̀ omi méjì tí ó yàtọ̀ síra.
Irẹsi. 3. Adàpọ̀ onípele pẹ̀lú ìwọ̀n 30 milimita, tí a ṣe àwòkọ rẹ̀ nínú àpò ìṣiṣẹ́ COMSOL CFD. Àlàyé náà dúró fún ìpín omi nínú adàpọ̀ náà. A fi omi mímọ́ hàn ní pupa àti acetonitrile mímọ́ ní àwọ̀ búlúù. Ìyípadà nínú ìpín omi onípele náà ni a fi àwọ̀ ìdàpọ̀ omi méjì ṣe àwòkọ rẹ̀.
Ní orí àwòrán 4, a fi ìwádìí ìfìdí múlẹ̀ nípa àwòṣe ìbáṣepọ̀ láàárín ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ àti ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ hàn. Bí ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ bá ṣe ń pọ̀ sí i, ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ yóò pọ̀ sí i. Gẹ́gẹ́ bí àwọn òǹkọ̀wé ti mọ̀, a kò le ṣàkíyèsí àwọn agbára ìṣiṣẹ́ mìíràn tó díjú nínú àdàpọ̀ nínú àwòṣe CFD yìí, èyí tó ń yọrí sí ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ tó ga jù nínú àwọn ìdánwò ìwádìí. A wọn ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ ìwádìí gẹ́gẹ́ bí ìdínkù ìpín nínú ipilẹ sinusoid. Ní àfikún, ìfúnpá ẹ̀yìn tó pọ̀ sí i sábà máa ń yọrí sí àwọn ìpele ìdàpọ̀ tó ga jù, èyí tí a kò kà sí nínú ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀.
Àwọn ipò HPLC àti ìṣètò ìdánwò wọ̀nyí ni a lò láti wọn àwọn ìgbì omi sine raw láti fi wé iṣẹ́ ìbáramu ti àwọn oníṣọ̀kan static tó yàtọ̀ síra. Àwòrán tó wà nínú Àwòrán 5 fi ìṣètò ètò HPLC/UHPLC tó wọ́pọ̀ hàn. A dán adàpọ̀ static náà wò nípa gbígbé adàpọ̀ náà tààrà lẹ́yìn fifa omi náà àti ṣáájú adàpọ̀ injector àti ìpínyà. Ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìwọ̀n sinusoidal lẹ́yìn ni a ṣe nípa yíyọ adàpọ̀ injector àti capillary column láàrín adàpọ̀ static àti UV detector. Nígbà tí a bá ń ṣe àyẹ̀wò ìpíndọ́gba àmì-sí-ariwo àti/tàbí ṣíṣàyẹ̀wò ìrísí òkè, a fi ìṣètò ètò náà hàn ní Àwòrán 5.
Àwòrán 4. Àlàyé ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ àti ìwọ̀n ìdàpọ̀ fún oríṣiríṣi àwọn ohun èlò ìdàpọ̀ aláìdúró. Ìwà àìmọ́ ti ìmọ̀-ẹ̀rọ tẹ̀lé àṣà kan náà gẹ́gẹ́ bí ìwádìí ìwádìí tí ó ń fìdí ìwúlò àwọn ìṣàpẹẹrẹ CFD múlẹ̀.
Ètò HPLC tí a lò fún ìdánwò yìí ni Agilent 1100 Series HPLC pẹ̀lú ohun tí a fi ń ṣe àwárí UV tí PC kan ń lò fún sọ́fítíwọ́ọ̀kì Chemstation ń ṣàkóso. Tábẹ́lì 1 fi àwọn ipò ìṣàtúnṣe tí ó wọ́pọ̀ hàn fún wíwọ̀n bí adàpọ̀ ṣe ń ṣiṣẹ́ nípa ṣíṣàyẹ̀wò àwọn sinusoids ìpìlẹ̀ nínú àwọn ìwádìí méjì. Àwọn ìdánwò ìdánwò ni a ṣe lórí àpẹẹrẹ méjì ti àwọn ohun tí a fi ń ṣe nǹkan. Àwọn ohun tí a fi ń ṣe nǹkan méjì tí a dàpọ̀ nínú ọ̀ràn 1 ni ohun tí a fi ń ṣe nǹkan A (20 mM ammonium acetate nínú omi tí a fi ń ṣe nǹkan) àti ohun tí a fi ń ṣe nǹkan B (80% acetonitrile (ACN)/20% omi tí a fi ń ṣe nǹkan). Nínú ọ̀ràn 2, ohun tí a fi ń ṣe nǹkan A jẹ́ omi tí a fi ń ṣe nǹkan 0.05% acetone (label) nínú omi tí a fi ń ṣe nǹkan. Ohun tí a fi ń ṣe nǹkan B jẹ́ àdàpọ̀ methanol 80/20% àti omi. Nínú ọ̀ràn 1, a ṣètò omi tí a fi ń ṣe nǹkan sí ìwọ̀n ìṣàn 0.25 ml/min sí 1.0 ml/min, àti nínú ọ̀ràn 2, a ṣètò omi tí a fi ń ṣe nǹkan sí ìwọ̀n ìṣàn 1 ml/min. Nínú àwọn ọ̀ràn méjèèjì, ìpíndọ́gba àdàpọ̀ àwọn ohun tí a fi ń yọ́ nǹkan A àti B jẹ́ 20% A/80% B. A ṣètò ẹ̀rọ ìwádìí náà sí 220 nm nínú ọ̀ràn 1, a sì ṣètò gbígbà acetone tó pọ̀ jùlọ nínú ọ̀ràn 2 sí ìwọ̀n ìgbì omi 265 nm.
Táblì 1. Àwọn Ìṣètò HPLC fún Àwọn Ọ̀ràn 1 àti 2 Ọ̀ràn 1 Ọ̀ràn 2 Ìyára Pọ́ọ̀pù 0.25 milimita/ìṣẹ́jú sí 1.0 milimita/ìṣẹ́jú 1.0 milimita/ìṣẹ́jú 1.0 milimita/ìṣẹ́jú 2 Ìyọnu A 20 mM ammonium acetate nínú omi tí a ti yọ ion 0.05% Acetone nínú omi tí a ti yọ ion 0.05% Acetone nínú omi tí a ti yọ ion 0.0% Acetonitrile (ACN) / 20% omi tí a ti yọ ion 0.0% methanol / 20% omi tí a ti yọ ion 0.20% A / 80% B 20% A / 80% B Awakọ̀ B 220 nm 265 nm
Irẹsi. 6. Àwọn ìgbì omi onídàpọ̀ tí a wọ̀n ṣáájú àti lẹ́yìn lílo àlẹ̀mọ́ onípele-ìlọ́sókè láti yọ àwọn ẹ̀yà ìṣàn omi ìpìlẹ̀ ti àmì náà kúrò.
Àwòrán 6 jẹ́ àpẹẹrẹ àwòràn ariwo ìpìlẹ̀ onírúru nínú Ọ̀ràn 1, tí a fihàn gẹ́gẹ́ bí àpẹẹrẹ sinusoidal tí a ń tún ṣe lórí ìṣíkiri ìpìlẹ̀. Ìṣíkiri ìpìlẹ̀ jẹ́ ìbísí díẹ̀díẹ̀ tàbí ìdínkù nínú àmì ìpìlẹ̀. Tí a kò bá gbà kí ètò náà dọ́gba tó, ó sábà máa ń ṣubú, ṣùgbọ́n yóò máa yípadà láìròtẹ́lẹ̀ kódà nígbà tí ètò náà bá dúró ṣinṣin pátápátá. Ìṣíkiri ìpìlẹ̀ yìí máa ń pọ̀ sí i nígbà tí ètò náà bá ń ṣiṣẹ́ ní ipò gíga tàbí ipò titẹ ẹ̀yìn gíga. Nígbà tí ìṣíkiri ìpìlẹ̀ yìí bá wà, ó lè ṣòro láti fi àwọn àbájáde wéra láti inú àpẹẹrẹ sí àpẹẹrẹ, èyí tí a lè borí nípa lílo àlẹ̀mọ́ ìpìlẹ̀ onírúru sí àwọn dátà tí a kò lè ṣàtúnṣe àwọn ìyàtọ̀ ìṣíkiri onírúru wọ̀nyí, nípa bẹ́ẹ̀ ó ń pèsè àwòrán ìṣíkiri pẹ̀lú ìpìlẹ̀ onípele. Ní àwòrán 6, Àwòrán náà tún fi àwòrán ariwo ìpìlẹ̀ onírúru hàn lẹ́yìn lílo àlẹ̀mọ́ ìpìlẹ̀ onírúru.
Lẹ́yìn tí a parí àwọn ìṣe àgbékalẹ̀ CFD àti ìdánwò àgbékalẹ̀ àkọ́kọ́, a ṣe àgbékalẹ̀ àwọn àdàpọ̀ onípele mẹ́ta ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ nípa lílo àwọn èrò inú tí a ṣàlàyé lókè pẹ̀lú àwọn ìwọ̀n inú mẹ́ta: 30 µl, 60 µl àti 90 µl. Ìwọ̀n yìí bo gbogbo ìwọ̀n àti iṣẹ́ àdàpọ̀ tí a nílò fún àwọn ohun èlò HPLC onípele kékeré níbi tí a ti nílò àdàpọ̀ tí ó dára àti ìtúká kékeré láti ṣe àwọn ìpìlẹ̀ ìpele kékeré. Ní orí Àwòrán 7, a fi àwọn ìwọ̀n ìgbì omi sine ipilẹ tí a rí lórí ètò ìdánwò ti Àpẹẹrẹ 1 (acetonitrile àti ammonium acetate gẹ́gẹ́ bí àwọn atọ́ka) pẹ̀lú àwọn ìwọ̀n mẹ́ta ti àwọn àdàpọ̀ onípele mẹ́ta àti pé a kò fi àwọn àdàpọ̀ onípele kan síbẹ̀. Àwọn ipò ìdánwò àgbékalẹ̀ fún àwọn àbájáde tí a fihàn ní Àwòrán 7 ni a mú dúró ṣinṣin jálẹ̀ gbogbo àwọn ìdánwò 4 gẹ́gẹ́ bí ìlànà tí a ṣàlàyé nínú Táblì 1 ní ìwọ̀n ìṣàn omi ti 0.5 milimita/min. Fi iye ìyípadà sí àwọn ìtòjọ náà kí a lè fi wọ́n hàn ní ẹ̀gbẹ́ kan láìsí ìdàpọ̀ àmì. Ìdàpọ̀ kò ní ipa lórí ìwọ̀n àmì tí a lò láti ṣe ìdájọ́ ipele iṣẹ́ ti àdàpọ̀ náà. Àròpọ̀ ìwọ̀n sinusoidal láìsí àdàpọ̀ náà jẹ́ 0.221 mAi, nígbàtí àwọn ìwọ̀n àwọn àdàpọ̀ Mott tí ó dúró ní 30 µl, 60 µl, àti 90 µl lọ sílẹ̀ sí 0.077, 0.017, àti 0.004 mAi, lẹ́sẹẹsẹ.
Àwòrán 7. Àtúnṣe Ìṣàfihàn Ìdápadà Ìmọ́lẹ̀ Agbára Afẹ́fẹ́ HPLC vs. Àkókò fún Ọ̀ràn 1 (acetonitrile pẹ̀lú àmì ammonium acetate) tí ó ń fi ìdàpọ̀ omi tí kò ní àdàpọ̀ hàn, àwọn àdàpọ̀ Mott 30 µl, 60 µl àti 90 µl tí ó ń fi ìdàpọ̀ tí ó dára hàn (ìwọ̀n àmì tí ó dínkù) bí iwọ̀n àdàpọ̀ aláìdúró ṣe ń pọ̀ sí i. (àwọn ìyípadà dátà gidi: 0.13 (kò sí àdàpọ̀), 0.32, 0.4, 0.45mA fún ìfihàn tí ó dára jù).
Dátà tí a fihàn ní Àwòrán 8 jọra gẹ́gẹ́ bí ó ti wà nínú Àwòrán 7, ṣùgbọ́n ní àkókò yìí wọ́n ní àwọn àbájáde àwọn àdàpọ̀ HPLC mẹ́ta tí a sábà máa ń lò pẹ̀lú ìwọ̀n inú ti 50 µl, 150 µl àti 250 µl. Irẹsi. Àwòrán 8. Àtúnṣe Àmì Ìdámọ̀ràn HPLC UV sí Àkókò Pólá fún Ọ̀ràn 1 (Acetonitrile àti Ammonium Acetate gẹ́gẹ́ bí àwọn àmì) tí ó ń fi ìdàpọ̀ solvent láìsí àdàpọ̀ static, àwọn ìlà tuntun ti àwọn àdàpọ̀ static Mott, àti àwọn àdàpọ̀ ìbílẹ̀ mẹ́ta (ìyípadà data gidi jẹ́ 0.1 (láìsí àdàpọ̀), 0.32, 0.48, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 mA lẹ́sẹẹsẹ fún ipa ìfihàn tí ó dára jù). Ìdínkù ìpín ogorun ti ìgbì omi sine base ni a ṣírò nípa ìpíndọ́gba ti ìgbì omi sine sí ìpìlẹ̀ láìsí àdàpọ̀ tí a fi sori ẹ̀rọ náà. Àwọn ìpíndọ́gba ìdínkù ìgbì omi sine tí a wọ̀n fún Àwọn Ọ̀ràn 1 àti 2 ni a kọ sí inú Táblì 2, pẹ̀lú àwọn ìwọ̀n inú ti àdàpọ̀ onípele tuntun àti àwọn àdàpọ̀ onípele méje tí a sábà máa ń lò nínú iṣẹ́ náà. Àwọn dátà nínú Àwòrán 8 àti 9, àti àwọn ìṣirò tí a gbé kalẹ̀ nínú Táblì 2, fihàn pé Àdàpọ̀ onípele Mott Static le pèsè ìdínkù ìgbì omi sine tó tó 98.1%, tí ó ju iṣẹ́ àdàpọ̀ HPLC onípele lọ lábẹ́ àwọn ipò ìdánwò wọ̀nyí. Àwòrán 9. Àtúnṣe àmì ẹ̀rọ HPLC UV lòdì sí àkókò ìpìlẹ̀ fún ọ̀ràn 2 (methanol àti acetone gẹ́gẹ́ bí àwọn tracers) tí kò fi àdàpọ̀ onípele static hàn (tí a ṣepọ), ìlà tuntun ti àwọn àdàpọ̀ onípele Mott àti àwọn àdàpọ̀ onípele méjì (àwọn ìdínkù ìwífún gidi jẹ́ 0, 11 (láìsí àdàpọ̀), 0.22, 0.3, 0.35 mA àti fún ìfihàn tí ó dára jù). A tún ṣe àyẹ̀wò àwọn àdàpọ̀ méje tí a sábà máa ń lò nínú iṣẹ́ náà. Àwọn wọ̀nyí ní àwọn ẹ̀rọ amúlétutù pẹ̀lú ìwọ̀n inú mẹ́ta tó yàtọ̀ síra láti ọ̀dọ̀ ilé-iṣẹ́ A (tí a yàn sí Mixer A1, A2 àti A3) àti ilé-iṣẹ́ B (tí a yàn sí Mixer B1, B2 àti B3). Ilé-iṣẹ́ C kàn ṣe àyẹ̀wò ìwọ̀n kan ṣoṣo.
Táblì 2. Àwọn Àbùdá Ìdàpọ̀ Adàpọ̀ Àìdúró àti Ìwọ̀n Inú Adàpọ̀ Àìdúró Àpótí 1 Ìgbàpadà Sinusoidal: Ìdánwò Acetonitrile (Ìṣiṣẹ́) Ọ̀ràn 2 Ìgbàpadà Sinusoidal: Ìdánwò Omi Methanol (Ìṣiṣẹ́) Ìwọ̀n Inú (µl) Kò sí Adàpọ̀ – - 0 Mott 30 65% 67.2% 30 Mott 60 92.2% 91.3% 60 Mott 90 98.1% 97.5% 90 Adàpọ̀ A1 66.4% 73.7% 50 Adàpọ̀ A2 89.8% 91.6% 150 Adàpọ̀ A3 92.2% 94.5% 250 Adàpọ̀ B1 44.8% 45.7% 9 35 Adàpọ̀ B2 845.% 96.2% 370 Adàpọ̀ C 97.2% 97.4% 250
Àgbéyẹ̀wò àwọn èsì tó wà nínú Àwòrán 8 àti Táblì 2 fihàn pé àdàpọ̀ 30 µl Mott static ní agbára ìdàpọ̀ kan náà gẹ́gẹ́ bí àdàpọ̀ A1, ìyẹn 50 µl, síbẹ̀síbẹ̀, Mott 30 µl ní ìwọ̀n inú tí ó dín ní 30%. Nígbà tí a bá fi àdàpọ̀ 60 µl Mott wé àdàpọ̀ 150 µl ti inú A2, ìdàgbàsókè díẹ̀ wà nínú agbára ìdàpọ̀ 92% ní ìfiwéra pẹ̀lú 89%, ṣùgbọ́n èyí tó ṣe pàtàkì jùlọ ni pé, a ṣe àṣeyọrí ìpele gíga yìí ní 1/3 ti ìwọ̀n àdàpọ̀. irú àdàpọ̀ 90 µl Mott náà tẹ̀lé àṣà kan náà gẹ́gẹ́ bí àdàpọ̀ A3 pẹ̀lú ìwọ̀n inú ti 250 µl. A tún rí ìdàgbàsókè nínú iṣẹ́ ìdàpọ̀ 98% àti 92% pẹ̀lú ìdínkù ìpele inú ní ìlọ́po mẹ́ta. Àwọn àbájáde àti ìfiwéra tó jọra ni a rí fún àwọn àdàpọ̀ B àti C. Nítorí náà, àwọn àdàpọ̀ tuntun ti Mott PerfectPeakTM fúnni ní ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ tó ga ju àwọn àdàpọ̀ ìdíje tó jọra lọ, ṣùgbọ́n pẹ̀lú ìwọ̀n inú tó kéré síi, ó fúnni ní ariwo ìpìlẹ̀ tó dára jù àti ìpíndọ́gba àmì-sí-ariwo tó dára jù, Analyte tó dára jù, ìrísí òkè àti ìpinnu òkè. Àwọn ìtẹ̀síwájú kan náà nínú ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ ni a rí nínú àwọn ìkẹ́kọ̀ọ́ Ọ̀ràn 1 àti Ọ̀ràn 2. Fún Ọ̀ràn 2, a ṣe àwọn ìdánwò nípa lílo (methanol àti acetone gẹ́gẹ́ bí àmì) láti fi wé ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ ti 60 milimita Mott, àdàpọ̀ A1 tó jọra (ìwọ̀n inú 50 µl) àti àdàpọ̀ B1 tó jọra (ìwọ̀n inú 35 µl). , iṣẹ́ rẹ̀ kò dára láìsí àdàpọ̀ tí a fi sori ẹ̀rọ, ṣùgbọ́n a lò ó fún ìwádìí ìpìlẹ̀. Àdàpọ̀ Mott 60 milimita náà fi hàn pé ó jẹ́ àdàpọ̀ tó dára jùlọ nínú ẹgbẹ́ ìdánwò náà, ó sì fúnni ní ìlọsíwájú 90% nínú ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀. Àdàpọ̀ A1 tó jọra rí ìlọsíwájú 75% nínú ìṣiṣẹ́ ìdàpọ̀ lẹ́yìn náà ìlọsíwájú 45% nínú àdàpọ̀ B1 tó jọra. A ṣe ìdánwò ìdínkù ìgbì omi sine pẹ̀lú ìwọ̀n ìṣàn omi lórí àwọn ẹ̀rọ amúlétutù lábẹ́ àwọn ipò kan náà gẹ́gẹ́ bí ìdánwò ìlà síne nínú Ọ̀ràn 1, pẹ̀lú ìwọ̀n ìṣàn omi nìkan tí ó yípadà. Àwọn ìwádìí náà fihàn pé nínú ìwọ̀n ìṣàn omi láti 0.25 sí 1 milimita/ìṣẹ́jú, ìdínkù àkọ́kọ́ nínú ìgbì omi sine dúró ní ìbámu pẹ̀lú gbogbo ìwọ̀n amúlétutù mẹ́ta. Fún àwọn amúlétutù ìwọ̀n méjì kéékèèké, ìbísí díẹ̀ wà nínú ìfàsẹ́yìn sinusoidal bí ìwọ̀n ìṣàn omi ṣe ń dínkù, èyí tí a retí nítorí àkókò gbígbé tí solvent nínú amúlétutù náà ń pọ̀ sí i, èyí tí ó fún àdàpọ̀ ìtànkálẹ̀ pọ̀ sí i. A retí pé yíyọ ìgbì omi sine kúrò yóò pọ̀ sí i bí ìṣàn omi náà ṣe ń dínkù sí i. Síbẹ̀síbẹ̀, fún ìwọ̀n amúlétutù tí ó tóbi jùlọ pẹ̀lú ìdínkù ìpìlẹ̀ sine tí ó ga jùlọ, ìdínkù ìpìlẹ̀ sine náà kò yí padà rárá (láàrín ìwọ̀n àìdánilójú ìwádìí), pẹ̀lú àwọn ìwọ̀n láti 95% sí 98%. Irẹsì. 10. Ìdínkù ìgbì omi síìnì ní ìpele 1. A ṣe ìdánwò náà lábẹ́ àwọn ipò tí ó jọ ìdánwò síìnì pẹ̀lú ìwọ̀n ìṣàn tí ó yàtọ̀, a fi 80% ti àdàpọ̀ acetonitrile àti omi 80/20 àti 20% ti 20 mM ammonium acetate sínú abẹ́rẹ́.
Àwọn àdàpọ̀ onípele PerfectPeakTM tí a ṣẹ̀ṣẹ̀ ṣe àgbékalẹ̀ tuntun pẹ̀lú àwọn ìpele inú mẹ́ta: 30 µl, 60 µl àti 90 µl bo ìwọ̀n iṣẹ́ ìpele àti ìdàpọ̀ tí a nílò fún ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn àyẹ̀wò HPLC tí ó nílò ìdàpọ̀ tí ó dára síi àti àwọn ilẹ̀ ìtúpalẹ̀ díẹ̀. Àdàpọ̀ onípele tuntun náà ṣàṣeyọrí èyí nípa lílo ìmọ̀-ẹ̀rọ ìtẹ̀wé 3D tuntun láti ṣẹ̀dá ìṣètò 3D àrà ọ̀tọ̀ kan tí ó pèsè ìdàpọ̀ onípele hydrodynamic tí ó dára síi pẹ̀lú ìdínkù ìpín ogorun tí ó ga jùlọ nínú ariwo ìpìlẹ̀ fún ìwọ̀n ẹyọ kan ti àdàpọ̀ inú. Lílo 1/3 ti ìwọ̀n inú ti àdàpọ̀ onípele déédéé dín ariwo ìpìlẹ̀ kù ní 98%. Irú àwọn àdàpọ̀ bẹ́ẹ̀ ní àwọn ikanni ìṣàn onípele mẹ́ta tí a so pọ̀ mọ́ra pẹ̀lú àwọn agbègbè ìkọjá-apákan àti àwọn gígùn ọ̀nà ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ bí omi ṣe ń kọjá àwọn ìdènà onípele onípele nínú. Ìdílé tuntun ti àwọn àdàpọ̀ onípele pèsè iṣẹ́ tí ó dára síi lórí àwọn àdàpọ̀ onípele tí ó díje, ṣùgbọ́n pẹ̀lú ìwọ̀n inú tí ó dínkù, tí ó ń yọrí sí ìpíndọ́gba àmì-sí-ariwo tí ó dára àti àwọn ààlà ìwọ̀n tí ó dínkù, àti àwọ̀ òkè tí ó dára síi, ìṣe àti ìpinnu fún ìmọ̀lára gíga.
Nínú àtẹ̀jáde yìí Chromatography – RP-HPLC tó bá àyíká mu – Lílo chromatography core-shell láti fi isopropanol rọ́pò acetonitrile nínú ìṣàyẹ̀wò àti ìwẹ̀nùmọ́ – Gáàsì chromatography tuntun fún…
Ile-iṣẹ Iṣowo International Labmate Limited Oak Court Sandridge Park, Porters Wood St Albans Hertfordshire AL3 6PH United Kingdom