Daalụ maka ịga leta Nature.com. Ụdị ihe nchọgharị ị na-eji nwere nkwado CSS pere mpe. Maka ahụmịhe kachasị mma, anyị na-akwado ka ị jiri ihe nchọgharị emelitere (ma ọ bụ gbanyụọ Ọnọdụ Ndakọrịta na Internet Explorer). Ka ọ dị ugbu a, iji hụ na nkwado na-aga n'ihu, anyị ga-egosi saịtị ahụ na-enweghị ụdị na JavaScript.
Nnụnụ na-amụ nwa dabere n'ike ha nwere ịchekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa zuru oke ruo ogologo oge n'ime tubules nchekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa (SST). Usoro kpọmkwem nke mkpụrụ ndụ ihe nketa si abanye, bi na ya, ma hapụ SST ka na-arụ ụka. Mkpụrụ ndụ ihe nketa nke ọkụkọ sharkasi gosipụtara nnukwu ọchịchọ nke ịgbakọta mkpụrụ ndụ ihe nketa, na-emepụta ngwugwu filamentous na-agagharị agagharị nke nwere ọtụtụ mkpụrụ ndụ. N'ihi ihe isi ike nke ịhụ mmegharị na omume nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na tube fallopian na-adịghị ahụkebe, anyị jiri ngwaọrụ microfluidic nwere akụkụ microchannel yiri nke spermatozoa iji mụọ njikọta na mmegharị mkpụrụ ndụ ihe nketa spermatozoa. Ọmụmụ ihe a na-atụle otu mkpụrụ ndụ ihe nketa si etolite, otu ha si agagharị, na ọrụ ha nwere ike ịrụ n'ịgbatị ndụ mkpụrụ ndụ ihe nketa na SST. Anyị nyochachara ọsọ mkpụrụ ndụ ihe nketa na omume rheological mgbe e mepụtara mmiri mmiri n'ime ọwa microfluidic site na nrụgide hydrostatic (ọnụego mmiri = 33 µm/s). Mkpụrụ ndụ sperm na-agba ọsọ megide usoro ọbara dị ugbu a (positive rheology) ma ọsọ nke mkpụrụ ndụ sperm na-ebelata nke ukwuu ma e jiri ya tụnyere otu mkpụrụ ndụ sperm. A hụla na mkpụrụ ndụ sperm na-agagharị n'ọdịdị gburugburu ma na-amụba ogologo na ọkpụrụkpụ ka a na-enweta ọtụtụ mkpụrụ ndụ sperm otu. A hụrụ ka mkpụkọ mmiri ara na-abịaru nso ma na-arapara n'akụkụ akụkụ nke ọwa mmiri microfluidic iji zere ikpochapụ ya na ọsọ mmiri mmiri karịrị 33 µm/s. A hụrụ ka mkpụkọ mmiri ara na-abịaru nso ma na-arapara n'akụkụ akụkụ nke ọwa mmiri microfluidic iji zere ikpochapụ ya na ọsọ mmiri mmiri karịrị 33 µm/s. Было zamечено, что пучки сперматозоидов приближаются na ihe nkiri ahụ избежать сметания со скоростью потока жидкости> 33 мкм / с. A hụla na ngwugwu mkpụrụ ndụ ihe nketa na-abịaru nso ma na-arapara n'akụkụ mgbidi nke ọwa mmiri microfluidic iji zere ibupụ ha na oke mmiri mmiri karịrị 33 µm/s.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁上，以避免被流体流速> 33 µM/s.33 µm/s 扫过. Было zamечено, что пучки сперматозоидов приближаются? избежать сметания потоком жидкости со скоростью > 33 мкм/с. A hụla na ngwugwu mkpụrụ ndụ ọbara na-abịaru nso ma na-arapara n'akụkụ mgbidi nke ọwa mmiri microfluidic iji zere ka mmiri mmiri na-asọfe na >33 µm/s.Nnyocha na nnyefe eletrọn microscopy gosiri na ihe dị oke arọ na-akwado mkpokọta mkpụrụ ndụ sperm. Data enwetara na-egosi ngagharị pụrụ iche nke spermatozoa ọkụkọ Sharkazi, yana ikike spermatozoa nwere ịchịkọta ma mepụta ngwugwu mkpanaka, nke na-enye aka na nghọta ka mma nke nchekwa ogologo oge nke spermatozoa na SMT.
Iji nweta njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa n'ime ụmụ mmadụ na ọtụtụ anụmanụ, mkpụrụ ndụ ihe nketa na àkwá ga-erute ebe a na-etinye mkpụrụ ndụ ihe nketa n'oge kwesịrị ekwesị. Ya mere, njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa ga-eme tupu ma ọ bụ n'oge a na-etinye mkpụrụ ndụ ihe nketa. N'aka nke ọzọ, ụfọdụ anụmanụ na-azụ anụmanụ, dịka nkịta, yana ụdị anụmanụ na-abụghị anụmanụ, dịka ụmụ ahụhụ, azụ, anụ na-akpụ akpụ, na nnụnụ, na-echekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa n'ime akụkụ ahụ ha ruo ogologo oge ruo mgbe àkwá ha dị njikere maka njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa (njikọ mkpụrụ ndụ ihe nketa na-adịghị agbanwe agbanwe 1). Nnụnụ nwere ike ịnọgide na-enwe ike nke mkpụrụ ndụ ihe nketa nke nwere ike itinye mkpụrụ ndụ ihe nketa n'ime izu 2-102.
Nke a bụ ihe pụrụ iche nke na-eme ka nnụnụ dị iche na anụmanụ ndị ọzọ, ebe ọ na-enye ohere dị elu nke ịmụ nwa mgbe a mụsịrị nwa otu ugboro ruo ọtụtụ izu na-enweghị mmekọ na ovulation n'otu oge. Akụkụ nchekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa bụ isi, nke a na-akpọ tubule nchekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa (SST), dị na mpịachi mucosal dị n'ime njikọ uterovaginal. Ruo taa, a ghọtachaghị usoro nke mkpụrụ ndụ ihe nketa si abanye, bie, na apụ n'akụkụ mkpụrụ ndụ ihe nketa. Dabere na ọmụmụ ihe ndị gara aga, e tinyela ọtụtụ echiche, mana ekwenyebeghị na ọ dịghị nke ọ bụla n'ime ha.
Forman4 chepụtara na spermatozoa na-anọgide na-ebi n'ime oghere SST site na mmegharị oscillatory na-aga n'ihu megide ntụziaka nke mmiri mmiri na-asọfe site na ọwa protein dị na mkpụrụ ndụ SST epithelial (rheology). ATP na-ebelata n'ihi ọrụ flagellar mgbe niile dị mkpa iji mee ka sperm dị na lumen SST, mmegharị ahụ na-emesịa belata ruo mgbe a na-ebu sperm site na mmiri mmiri wee malite njem ọhụrụ site na tube fallopian na-arịgo iji mee ka sperm dị ọcha. Akwa (Forman4). A na-akwado ụdị nchekwa sperm a site na nchọpụta immunocytochemistry nke aquaporins 2, 3 na 9 dị na mkpụrụ ndụ SST epithelial. Ruo ugbu a, ọmụmụ ihe gbasara rheology nke sperm ọkụkọ na ọrụ ya na nchekwa SST, nhọrọ sperm ikpu, na asọmpi sperm. Na ọkụkọ, sperm na-abanye na ikpu mgbe ha nwesịrị mmekọ eke, mana ihe karịrị 80% nke spermatozoa na-apụta na ikpu obere oge mgbe ha nwesịrị mmekọ. Nke a na-egosi na ikpu bụ ebe bụ isi maka nhọrọ sperm na nnụnụ. Tinyere nke ahụ, a kọwo na ihe na-erughị 1% nke spermatozoa e tinyere n'ime ikpu na-emecha na SSTs2. N'ịkwalite ụmụ ọkụkọ n'ime ikpu, ọnụọgụ spermatozoa na-eru SST na-amụbakarị awa 24 mgbe a gbasịrị ha. Ruo ugbu a, usoro nhọrọ nke sperm n'oge usoro a edoghị anya, mmegharị nke sperm nwekwara ike ịrụ ọrụ dị mkpa na nnabata sperm SST. N'ihi mgbidi siri ike na nke na-adịghị ahụkebe nke tubes fallopian, ọ na-esiri ike inyocha mmegharị sperm ozugbo na tubes fallopian nke nnụnụ. Ya mere, anyị enweghị ihe ọmụma bụ isi banyere otu spermatozoa si agbanwe gaa na SST mgbe a gbasịrị ha.
A matala Rheology n'oge na-adịbeghị anya dị ka ihe dị mkpa na-achịkwa njem sperm na akụkụ ahụ anụmanụ. Dabere na ikike sperm motile nwere ịkwaga n'ụzọ megidere nke ahụ, Zaferani na ndị otu ya jiri usoro corra microfluidic kewapụ sperm motile site na ihe nlele semen e dere ede. Ụdị nhazi semen a dị mkpa maka ọgwụgwọ enweghị ike ịmụ nwa na nyocha ahụike, a na-ahọrọkwa ya karịa usoro ọdịnala nke na-ewe oge na mgbalị ma nwee ike imebi ọdịdị sperm na iguzosi ike n'ezi ihe nke usoro. Agbanyeghị, ruo taa, emebeghị ọmụmụ ihe ọ bụla gbasara mmetụta nke ihe si n'akụkụ akụkụ ahụ ọkụkọ pụta na mmegharị sperm.
N'agbanyeghị usoro e ji echekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa na SST, ọtụtụ ndị nyocha achọpụtala na mkpụrụ ndụ ihe nketa na-agbakọta isi na isi na SST nke ọkụkọ 9, 10, quails 2, na toki 11 iji mepụta mkpokọta mkpụrụ ndụ ihe nketa a gwakọtara agwakọta. Ndị dere akwụkwọ ahụ na-atụ aro na enwere njikọ dị n'etiti nchịkọta a na nchekwa ogologo oge nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na SST.
Tingari na Lake12 kọrọ njikọ siri ike dị n'etiti spermatozoa dị na gland nke na-anata sperm nke ọkụkọ ahụ ma jụọ ajụjụ ma spermatozoa avian na-agbakọta n'otu ụzọ ahụ dị ka spermatozoa anụmanụ. Ha kwenyere na njikọ miri emi dị n'etiti sperm dị na vas deferens nwere ike ịbụ n'ihi nrụgide nke ọnụnọ nke ọtụtụ sperm n'ime obere oghere kpatara.
Mgbe a na-enyocha omume nke spermatozoa na slide iko ọhụrụ a na-ekunye, a na-ahụ ihe ịrịba ama nke njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa, karịsịa n'akụkụ mmiri mmiri nke mkpụrụ ndụ ihe nketa. Agbanyeghị, a na-enwekarị nsogbu njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa site na mmegharị na-aga n'ihu, nke na-akọwa ọdịdị nke ihe a na-eme n'oge na-adịghị anya. Ndị nchọpụta ahụ chọpụtakwara na mgbe etinyere ihe na-agbaze na mkpụrụ ndụ ihe nketa, mkpokọta mkpụrụ ndụ "dị ka eriri" dị ogologo pụtara.
E mere mgbalị mbụ iji mee ka mkpụrụ ndụ ihe nketa dị ka mkpụrụ ndụ ihe nketa site n'iwepụ waya dị gịrịgịrị n'ime ntapụ mmiri, nke mere ka mkpụrụ ndụ ihe nketa dị ogologo pụta site na ntapụ mmiri nke mkpụrụ ndụ ihe nketa. Mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ gbanyere n'usoro ozugbo n'ime vesicle ahụ, mana nkeji ahụ dum furu efu ngwa ngwa n'ihi mmachi 3D. Ya mere, iji mụọ njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa, ọ dị mkpa ịhụ mmegharị na omume nke mkpụrụ ndụ ihe nketa dị kpọmkwem na tubules nchekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa, nke siri ike inweta. Ya mere, ọ dị mkpa ịmepụta ngwa nke na-eṅomi mkpụrụ ndụ ihe nketa iji kwado ọmụmụ ihe gbasara mmegharị mkpụrụ ndụ ihe nketa na omume njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa. Brillard et al13 kọrọ na nkezi ogologo nke mkpụrụ ndụ ihe nketa nchekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa dị na ụmụ ọkụkọ toro eto bụ 400–600 µm, mana ụfọdụ SST nwere ike ịdị ogologo ruo 2000 µm. Mero na Ogasawara14 kewara akụkụ seminiferous n'ime akụkụ nchekwa sperm buru ibu na nke na-abụghị nke buru ibu, ha abụọ bụ otu n'ogologo (~500 µm) na obosara olu (~38 µm), mana dayameta lumen nke tubules bụ 56.6 na 56.6 µm. . , n'otu n'otu 11.2 μm, n'otu n'otu. N'ọmụmụ ihe a ugbu a, anyị jiri ngwaọrụ microfluidic nwere nha ọwa nke 200 µm × 20 µm (W × H), nke akụkụ ya dị nso na nke SST a na-eme ka ọ dịkwuo mma. Na mgbakwunye, anyị lere anya na mmegharị sperm na omume agglutination na mmiri na-asọ asọ, nke kwekọrọ na echiche Foreman na mmiri mmiri nke mkpụrụ ndụ epithelial SST mepụtara na-eme ka sperm dị na lumen n'ụzọ megidere current (rheological).
Ebumnobi nke ọmụmụ ihe a bụ iji merie nsogbu nke ịhụ mmegharị nke spermatozoa na tube fallopian na izere ihe isi ike nke ịmụ banyere rheology na omume nke spermatozoa na gburugburu ebe obibi na-agbanwe agbanwe. E jiri ngwaọrụ microfluidic nke na-emepụta nrụgide hydrostatic iji mee ka mmegharị nke sperm dị n'akụkụ ahụ ọkụkọ.
Mgbe etinyere otu ntapụ nke ihe nlele mkpụrụ ndụ ihe nketa (1:40) n'ime ngwaọrụ microchannel, enwere ike ịchọpụta ụdị mmegharị mkpụrụ ndụ ihe nketa abụọ (spam dịpụrụ adịpụ na sperm ejikọtara). Na mgbakwunye, spermatozoa na-egwu mmiri megide ọkụ eletrik (positive rheology; vidiyo 1, 2). Ọ bụ ezie na mkpokọta mkpụrụ ndụ ihe nketa nwere obere ọsọ karịa nke mkpụrụ ndụ ihe nketa naanị (p < 0.001), ha mụbara pasentị nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na-egosi rheotaxis dị mma (p < 0.001; Tebụl 2). Ọ bụ ezie na mkpokọta mkpụrụ ndụ ihe nketa nwere obere ọsọ karịa nke mkpụrụ ndụ ihe nketa naanị (p < 0.001), ha mụbara pasentị nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na-egosi rheotaxis dị mma (p < 0.001; Tebụl 2). Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость. процент сперматозоидов, демонстрирующих положительный реотаксис (p <0,001; таблица 2). Ọ bụ ezie na ngwugwu spermatozoa nwere obere ọsọ karịa nke otu spermatozoa (p < 0.001), ha mụbara pasentị nke spermatozoa na-egosi rheotaxis dị mma (p < 0.001; Tebụl 2).尽管精子束的速度低于孤独精子的速度（p < 0.001），但它们增加了显示阳性流变性的精子百分比（p <0.001；表2）。尽管 精子束 的 速度 低于 孤独 的 速度 （p <0.001）百分比 （p <0.001 ： 2）））） Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже. сперматозоидов с положительной реологией (p <0,001; таблица 2). Ọ bụ ezie na ọsọ nke mkpokọta mkpụrụ ndụ ihe nketa dị ala karịa nke otu mkpụrụ ndụ ihe nketa (p < 0.001), ha mụbara pasentị nke mkpụrụ ndụ ihe nketa yana rheology dị mma (p < 0.001; Tebụl 2).A na-eme atụmatụ na rheology dị mma maka otu spermatozoa na tufts dị ihe dị ka 53% na 85%, n'otu n'otu.
A hụla na spermatozoa nke ọkụkọ sharkasi ozugbo ha gbasịrị mmiri na-etolite ngwugwu ahịrị, nke nwere ọtụtụ mmadụ. Tufts ndị a na-abawanye n'ogologo na ọkpụrụkpụ ka oge na-aga ma nwee ike ịnọ na vitro ruo ọtụtụ awa tupu ha apụọ (vidiyo nke 3). Ngwugwu filamentous ndị a dị ka echidna spermatozoa nke na-etolite na njedebe nke epididymis. Achọpụtala na mkpụrụ Sharkashi hen nwere nnukwu ọchịchọ nke ịchịkọta ma mepụta ngwugwu reticulate n'ime ihe na-erughị otu nkeji mgbe a chịkọtachara ya. Osisi ndị a na-agbanwe agbanwe ma nwee ike ịrapara na mgbidi ọ bụla dị nso ma ọ bụ ihe ndị na-anaghị agbanwe agbanwe. Ọ bụ ezie na ngwugwu sperm na-ebelata ọsọ nke mkpụrụ ndụ sperm, o doro anya na ha na-eme ka linearity ha dịkwuo elu n'ụzọ macroscopic. Ogologo nke ngwugwu dị iche iche dabere na ọnụọgụgụ spam a chịkọtara na ngwugwu. E kewapụrụ akụkụ abụọ nke ngwugwu ahụ: akụkụ mbụ, gụnyere isi efu nke sperm agglutinated, na akụkụ njedebe, gụnyere ọdụ na njedebe dum nke sperm. Site na iji igwefoto dị elu (950 fps), a hụrụ isi spermatozoa agglutinated n'akụkụ mbụ nke ngwugwu ahụ, bụ ndị kpatara mmegharị nke ngwugwu ahụ n'ihi mmegharị ha na-agagharị, na-adọkpụ ndị fọdụrụ n'ime ngwugwu ahụ site na mmegharị helical (Vidiyo 4). Agbanyeghị, n'ime tufts ndị dị ogologo, a hụla na ụfọdụ isi sperm efu rapaara n'ahụ ahụ na akụkụ njedebe nke tuft na-arụ ọrụ dị ka vanes iji nyere aka kwalite tuft ahụ.
Mgbe ha na-agba mmiri nwayọ nwayọ, mkpokọta mkpụrụ ndụ ihe nketa na-agagharị n'otu akụkụ, Otú ọ dị, ha na-amalite ịrapara ma rapara n'ihe niile dị jụụ, ka mmiri dị ugbu a ghara ịsachapụ ha ka ọsọ mmiri na-arị elu. Mkpokọta ndị ahụ na-etolite mgbe obere mkpụrụ ndụ ihe nketa na-abịaru ibe ha nso, ha na-amalite ịkwaga n'otu aka ahụ ma na-agbakọta onwe ha gburugburu, wee rapara n'ihe na-arapara arapara. Foto nke 1 na nke 2 na-egosi otu mkpụrụ ndụ ihe nketa si abịaru ibe ha nso, na-etolite njikọ ka ọdụ na-agbakọta onwe ha gburugburu.
Ndị nchọpụta ahụ tinyere nrụgide hydrostatic iji mepụta mmiri mmiri na-asọpụta n'ime obere ọwa iji mụọ usoro mkpụrụ ndụ ihe nketa sperm. E jiri obere ọwa nwere nha 200 µm × 20 µm (W × H) na ogologo 3.6 µm. Jiri obere ọwa dị n'etiti akpa nwere sirinji etinyere na nsọtụ ya. Ejiri agba nri mee ka ọwa ndị ahụ pụta ìhè nke ọma.
Kechie eriri na ihe ndị ọzọ dị na mgbidi ahụ. E sere vidiyo ahụ site na iji igwe onyonyo nkewa dị iche iche. Site na onyonyo ọ bụla, a na-egosi igwe onyonyo nkewa dị iche iche na onyonyo eserese. (A) Njikọ dị n'etiti iyi abụọ na-eguzogide mmiri ahụ n'ihi mmegharị helical (akụ uhie). (B) Njikọ dị n'etiti ngwugwu ọkpọkọ na mgbidi ọwa (akụ uhie), n'otu oge ahụ a na-ejikọ ha na ngwugwu abụọ ndị ọzọ (akụ odo odo). (C) Ngwugwu mkpụrụ ndụ ọbara ọbara dị na ọwa microfluidic na-amalite ijikọ onwe ha (akụ uhie uhie), na-emepụta eriri nke ngwugwu mkpụrụ ndụ. (D) Nhazi nke netwọk nke ngwugwu mkpụrụ ndụ.
Mgbe e tinyere otu ntapụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa a gwakọtara agwakọta n'ime ngwaọrụ microfluidic ma mepụta mmiri, a hụrụ ka mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ na-aga n'ihu n'akụkụ mmiri ahụ. Ngwugwu ndị ahụ na-adaba nke ọma n'akụkụ mgbidi nke obere ọwa mmiri ahụ, isi ndị ahụ na-adịkwa n'akụkụ mbụ nke ngwugwu ahụ na-adabakwa n'elu ha (vidiyo 5). Ha na-araparakwa na ihe ọ bụla na-anaghị apụ apụ n'ụzọ ha, dị ka ihe mkpofu, iji gbochie ka mmiri ozuzo na-ebuga ha. Ka oge na-aga, mkpụrụ ndụ ihe nketa ndị a na-aghọ eriri ogologo na-ejide otu mkpụrụ ndụ ihe nketa na obere mkpụrụ ndụ ihe nketa (vidiyo 6). Ka mmiri ahụ na-amalite ịda, ogologo ahịrị mkpụrụ ndụ ihe nketa na-amalite ịmepụta netwọk nke mkpụrụ ndụ ihe nketa (vidiyo 7; Foto 2).
N'ọsọ ọsọ dị elu (V > 33 µm/s), mmegharị eriri na-amụba ka a na-anwa ijide ọtụtụ ngwugwu nke mkpụrụ ndụ ihe nketa nke ọma, na-eguzogide ike na-agagharị nke mmiri ahụ. N'ọsọ ọsọ dị elu (V > 33 µm/s), mmegharị eriri na-amụba ka a na-anwa ijide ọtụtụ ngwugwu nke mkpụrụ ndụ ihe nketa nke ọma, na-eguzogide ike na-agagharị nke mmiri ahụ. При высокой скорости потока (V > 33 мкм/с) спиралевидные множество отдельных сперматозоидов, образующих пучки, которые лучше противостоят дрейфующей. N'ọkwa mmiri dị elu (V > 33 µm/s), mmegharị helical nke eriri ndị ahụ na-abawanye ka ha na-agbalị ijide ọtụtụ ngwugwu nke spermatozoa nke nwere ike iguzogide ike na-agagharị nke mmiri ahụ.在高流速(V> 33 µm/s)时，螺纹的螺旋运动增加，以试图捕捉许多形成束的单个精子。在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时 ， 的 螺旋 运动 增加 ，地 抵抗 的 漂移力…………………………. При высоких скоростях потока (V > 33 мкм/с) сперматозоидов, образующих пучки, чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потока. N'ọkwa mmiri dị elu (V > 33 µm/s), mmegharị helical nke eriri ahụ na-abawanye na mgbalị ijide ọtụtụ ngwugwu spermatozoa nke ọ bụla iji guzogide ike ndọda nke mmiri ahụ nke ọma.Ha gbalịkwara itinye obere ọwa n'akụkụ mgbidi.
A chọpụtara mkpokọta mkpụrụ ndụ ihe nketa dị ka ụyọkọ isi mkpụrụ ndụ ihe nketa na ọdụ na-agbagharị agbagharị site na iji obere microscopy (LM). A chọpụtakwara ngwugwu mkpụrụ ndụ ihe nketa nwere ọtụtụ mkpokọta dị ka isi gbagọrọ agbagọ na mkpokọta flagellar, ọdụ mkpụrụ ndụ ihe nketa dị iche iche, isi mkpụrụ ndụ ihe nketa ejikọtara na ọdụ, na isi mkpụrụ ndụ ihe nketa nwere nuclei gbagọrọ agbagọ dị ka nuclei dị iche iche. transmission electron microscopy (TEM). Nyocha electron microscopy (SEM) gosiri na ngwugwu mkpụrụ ndụ ihe nketa bụ mkpokọta isi mkpụrụ ndụ ihe nketa na mkpokọta mkpụrụ ndụ ihe nketa gosipụtara netwọk nke ọdụ e kechiri emechi.
A mụrụ ọdịdị na usoro nke spermatozoa, nhazi nke ngwugwu spermatozoa site na iji obere microscopy (ọkara ngalaba), nyocha electron microscopy (SEM) na transmission electron microscopy (TEM), e ji acridine orange tee smears ma jiri epifluorescence microscopy nyochaa sperm.
Nchacha mkpụrụ ndụ ihe nketa nke e ji acridine oroma mee (Foto 3B) gosiri na isi mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ rapara ọnụ ma kpuchie ya na ihe nzuzo, nke mere ka e nwee nnukwu mkpụrụ ndụ ihe nketa (Foto 3D). Nchacha mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ nwere njikọ nke ọdụdụ ndị ejikọtara ọnụ (Foto 4A-C). Nchacha mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ nwere ọdụdụ nke ọtụtụ mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ rapara ọnụ (Foto 4D). Ihe nzuzo (Foto 4E,F) kpuchiri isi mkpụrụ ndụ ihe nketa spermatozoa.
Nhazi nke ngwugwu spermatozoa Site na iji microscopy nkewa na smears sperm nke ejiri acridine oroma tee, gosiri na isi spermatozoa na-arapara ọnụ. (A) Nhazi nke sperm tuft mbụ na-amalite site na sperm (gburugburu ọcha) na sperm atọ (gburugburu odo odo), ebe spiral na-amalite site na ọdụ wee kwụsị na isi. (B) Foto mikrograph nke sperm smear nke ejiri acridine oroma tee na-egosi isi sperm na-arapara (akụ). Mwepụ ahụ na-ekpuchi isi(ndị) ahụ. Mbuli elu × 1000. (C) Mmepe nke nnukwu ogwe mmiri na-ebuga site na mmiri na ọwa microfluidic (iji igwefoto ọsọ dị elu na 950 fps). (D) Micrograph nke sperm smear nke ejiri acridine oroma tee na-egosi nnukwu tufts (akụ). Mbuli elu: ×200.
Nnyocha elektrọn nke osisi sperm na ihe e ji acridine oroma mee. (A, B, D, E) bụ ihe e ji elektrọn agba dijitalụ mee ihe e ji spermatozoa mee, C na F bụkwa ihe e ji acridine oroma mee ihe e ji spermatozoa mee, nke na-egosi njikọ nke ọtụtụ spermatozoa e ji kechie caudal webụ. (AC) A na-egosi ihe e ji spermatozoa mee dị ka netwọk nke ọdụ ndị e jikọtara ọnụ (akụ). (D) Nrapado nke ọtụtụ spermatozoa (nwere ihe na-arapara, ihe na-acha pink, akụ) na-ekpuchi ọdụ ahụ. (E na F) Ihe e ji tee isi spermatozoa (ihe e ji tee isi) kpuchie na ihe e ji tee isi. Ihe e ji tee isi spermatozoa mee nwere ọtụtụ ihe dị ka vortex (F). (C) ×400 na (F) ×200 ibu.
Site na iji igwe onyonyo eletrọn transmission, anyị chọpụtara na ngwugwu sperm nwere ọdụ ejikọtara (Fig. 6A, C), isi ejikọtara na ọdụ (Fig. 6B), ma ọ bụ isi ejikọtara na ọdụ (Fig. 6D). Isi spermatozoa dị na ngwugwu ahụ gbagọrọ agbagọ, na-egosi na mpaghara nuklia nke abụọ (Fig. 6D). N'ime ngwugwu mbepụ ahụ, spermatozoa nwere isi gbagọrọ agbagọ nwere mpaghara nuklia abụọ na mpaghara flagellar dị iche iche (Fig. 5A).
Igwe onyonyo elektrọn agba dijitalụ nke na-egosi ọdụ ndị na-ejikọ na ngwugwu mkpụrụ ndụ ihe nketa na ihe na-agwakọta na-ejikọ isi mkpụrụ ndụ ihe nketa. (A) Ọdụ ejikọtara nke ọtụtụ mkpụrụ ndụ ihe nketa. Rịba ama otú ọdụ ahụ si dị ma n'ihe osise (akụ) na ihe osise ala (akụ). (B) Isi (akụ) nke mkpụrụ ndụ ihe nketa jikọtara na ọdụ (akụ). (C) E jikọtara ọtụtụ ọdụ mkpụrụ ndụ ihe nketa (akụ). (D) Ihe e ji eme ka mkpụrụ ndụ ihe nketa (AS, acha anụnụ anụnụ) na-ejikọ isi mkpụrụ ndụ ihe nketa anọ (acha odo odo).
E jiri igwe nyocha elektrọn iji chọpụta isi mkpụrụ ndụ ihe nketa n'ime ngwugwu mkpụrụ ndụ ihe nketa kpuchiri ihe ndị na-apụta ma ọ bụ akpụkpọ ahụ (Foto 6B), na-egosi na ihe ndị dị n'èzí na-ejide ngwugwu mkpụrụ ndụ ihe nketa. Ihe e tinyere na ya gbakọtara n'isi mkpụrụ ndụ ihe nketa (njikọta isi jellyfish dị ka isi; Fig. 5B) ma gbasaa ya n'ebe dị anya, na-enye ọdịdị odo odo na-egbuke egbuke n'okpuru igwe nyocha fluorescence mgbe e ji oroma acridine tee ya (Foto 6C). A na-ahụ ihe a nke ọma n'okpuru igwe nyocha ma a na-ewere ya dị ka ihe na-ejikọ ya. Akụkụ ọkara dị gịrịgịrị (Foto 5C) na ihe ndị e ji oroma acridine tee ya gosiri ngwugwu mkpụrụ ndụ ihe nketa nwere isi ndị juru eju na ọdụ ndị gbagọrọ agbagọ (Foto 5D).
Ọtụtụ fotomicrograph na-egosi nchịkọta nke isi spam na ọdụ a gbagọrọ agbagọ site na iji ụzọ dị iche iche. (A) Micrograph elektrọn agba dijitalụ nke otu mkpụrụ ndụ ihe nketa nke na-egosi isi spam a gbagọrọ agbagọ nwere akụkụ abụọ (acha anụnụ anụnụ) na ọtụtụ akụkụ flagellar (akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ). (B) Micrograph elektrọn agba dijitalụ nke na-egosi otu mkpụrụ ndụ ihe nketa dị ka jellyfish (akụ) nke yiri ka ekpuchiri. (C) Akụkụ ọkara dị gịrịgịrị na-egosi isi spam a gbagọrọ agbagọ (akụ) na ọdụ a gbagọrọ agbagọ (akụ). (D) Micrograph nke mkpụrụ ndụ ihe nketa a gbagọrọ agbagọ nke nwere acridine oroma nke na-egosi mkpokọta isi spam (akụ) na ọdụ a gbagọrọ agbagọ (akụ). Rịba ama na ihe na-arapara arapara (S) na-ekpuchi isi nke mkpụrụ ndụ ihe nketa. (D) × 1000 ibu.
Site na iji igwe onyonyo eletrọn nnyefe (Foto 7A), a chọpụtakwara na isi mkpụrụ ndụ ahụ gbagọrọ agbagọ, nuclei ahụ nwekwara ọdịdị gburugburu, dịka e siri gosi site na ihe ndị e ji acridine oroma tee ma jiri fluorescence microscopy nyochaa ya (Foto 7B).
(A) Igwe onyonyo elektrọn agba dijitalụ na (B) Mkpọmkpọ mkpụrụ ndụ ọbara ọbara nke Acridine oroma nke na-egosi isi gbagọrọ agbagọ na njikọta nke isi na ọdụ mkpụrụ ndụ ọbara ọbara (akụ). (B) × 1000 ibuli elu.
Ihe na-adọrọ mmasị bụ na njikọta mkpụrụ ndụ Sharkazi na-etolite ngwugwu eriri na-agagharị agagharị. Àgwà nke ngwugwu ndị a na-enye anyị ohere ịghọta ọrụ ha nwere ike ịrụ na mmịpụta na nchekwa nke spermatozoa na SST.
Mgbe ha gbasịrị nwoke na nwanyị, mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ na-abanye n'ime ikpu ma na-eme usoro nhọrọ siri ike, nke na-eme ka naanị ọnụọgụgụ mkpụrụ ndụ ihe nketa dị ole na ole na-abanye na SST15,16. Ruo taa, usoro mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ si abanye ma na-apụ na SST edoghị anya. N'ime ọkụkọ, a na-echekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ na SST ruo ogologo oge nke izu 2 ruo 10, dabere na ụdị ahụ6. A ka na-arụrịta ụka gbasara ọnọdụ mkpụrụ ndụ ihe nketa ahụ n'oge nchekwa na SST. Ha na-agagharị ma ọ bụ na-ezu ike? N'ikwu ya n'ụzọ ọzọ, kedu ka mkpụrụ ndụ mkpụrụ ndụ ihe nketa si anọgide na-anọ n'ọnọdụ ha na SST ruo ogologo oge?
Forman4 tụrụ aro na enwere ike ịkọwa ebe obibi SST na mwepụta mkpụrụ ndụ ihe nketa site na iji usoro mmegharị mkpụrụ ndụ ihe nketa. Ndị dere akwụkwọ ahụ chere na mkpụrụ ndụ ihe nketa na-anọgide n'ọnọdụ ha site n'igwu mmiri megide mmiri mmiri nke epithelium SST mepụtara nakwa na a na-ewepụ mkpụrụ ndụ ihe nketa site na SST mgbe ọsọ ha dara n'okpuru ebe ha malitere ịkwaga azụ n'ihi enweghị ike. Zaniboni5 kwadoro ọnụnọ nke aquaporins 2, 3, na 9 na akụkụ apical nke mkpụrụ ndụ epithelial SST, nke nwere ike ịkwado ụdị nchekwa mkpụrụ ndụ ihe nketa Foreman n'ụzọ na-apụtaghị ìhè. N'ọmụmụ ihe a ugbu a, anyị chọpụtara na ihe fọrọ nke nta ka ọ bụrụ ọkara nke mkpụrụ ndụ ihe nketa Sharkashi na-egosi rheology dị mma na mmiri mmiri na-asọ asọ, nakwa na mkpokọta mkpụrụ ndụ ihe nketa agglutinated na-eme ka ọnụọgụgụ mkpụrụ ndụ ihe nketa nke na-egosi rheology dị mma dịkwuo elu, ọ bụ ezie na agglutination na-eme ka ha daa nwayọ. Otu mkpụrụ ndụ ihe nketa si aga n'elu tube fallopian nnụnụ ahụ ruo ebe a na-amụ nwa abụghị nke a ghọtara nke ọma. Na anụmanụ anụmanụ, chemo mmiri follicular na-adọta spermatozoa. Agbanyeghị, a kwenyere na ndị na-anya chemo na-eduzi spermatozoa ka ha bịaruo ebe dị anya7. Ya mere, usoro ndị ọzọ na-ahụ maka mbufe sperm. Akọpụtala na ikike nke sperm ịhazigharị ma na-asọfe megide mmiri fallopian tube nke a tọhapụrụ mgbe ha gbasịrị na-abụ isi ihe na-akpata nleba anya na sperm n'ime òké. Parker 17 tụrụ aro na spermatozoa na-agafe oviducts site na igwu mmiri megide ciliary current na nnụnụ na anụ na-akpụ akpụ. Ọ bụ ezie na egosighi ya na nnwale na nnụnụ, Adolphi18 bụ onye mbụ chọpụtara na sperm avian na-enye nsonaazụ dị mma mgbe ejiri mpempe akwụkwọ nzacha mepụta obere oyi akwa mmiri dị n'etiti mkpuchi na slide. Rheology. Hino na Yanagimachi [19] tinyere oke ovary-tubal-uterine complex na mgbanaka perfusion ma gbanye 1 µl nke ink n'ime isthmus iji hụ otú mmiri si aga na tube fallopian. Ha hụrụ mmegharị siri ike nke mkpụkọ na izu ike na tube fallopian, nke bọọlụ ink niile na-aga n'ihu na ampulla nke tube fallopian. Ndị dere akwụkwọ a na-emesi ike mkpa ọ dị ka mmiri mmiri si n'ime ala ruo na elu fallopian tubes na-asọpụta maka ịkwalite sperm na ịgbakọ mkpụrụ ndụ. Brillard20 kọrọ na n'ime ọkụkọ na toki, spermatozoa na-agagharị site na mmegharị ahụ site na ọnụ ụzọ ikpu, ebe a na-echekwa ha, ruo na njikọ utero-vaginal, ebe a na-echekwa ha. Agbanyeghị, ọ dịghị mkpa ka mmegharị a dịrị n'etiti njikọ uterovaginal na infundibulum n'ihi na a na-ebufe spermatozoa site na mbugharị na-adịghị arụ ọrụ. N'ịmara ndụmọdụ ndị a gara aga na nsonaazụ enwetara na ọmụmụ ihe a, enwere ike iche na ikike nke spermatozoa ịkwaga n'elu mmiri (rheology) bụ otu n'ime ihe ndị usoro nhọrọ dabere na ya. Nke a na-ekpebi ngafe spermatozoa site na ikpu na ntinye ha na CCT maka nchekwa. Dịka Forman4 tụrụ aro, nke a nwekwara ike ime ka usoro nke sperm banye na SST na ebe obibi ya dị mfe ruo oge ụfọdụ wee pụọ mgbe ọsọ ha malitere ibelata.
N'aka nke ọzọ, Matsuzaki na Sasanami 21 tụrụ aro na spermatozoa avian na-agbanwe mmegharị ahụ site na ihi ụra gaa na mmegharị ahụ na akụkụ ọmụmụ nwoke na nwanyị. A tụrụ aro igbochi mmegharị nke sperm bi na SST iji kọwaa oge nchekwa ogologo oge nke sperm wee maliteghachi ọzọ mgbe ha hapụrụ SST. N'okpuru ọnọdụ hypoxic, Matsuzaki et al. 1 kọrọ nnukwu mmepụta na ntọhapụ nke lactate na SST, nke nwere ike ibute mgbochi nke mmegharị nke sperm bi na ya. N'okwu a, mkpa nke rheology sperm na-egosipụta na nhọrọ na ịmịkọrọ spermatozoa, ọ bụghị na nchekwa ha.
A na-ewere usoro njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa dị ka ihe a pụrụ ịtụkwasị obi maka ogologo oge nchekwa nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na SST, ebe ọ bụ na nke a bụ usoro a na-ahụkarị maka njigide mkpụrụ ndụ ihe nketa na ọkụkọ2,22,23. Bakst et al. 2 hụrụ na ọtụtụ mkpụrụ ndụ ihe nketa na-arapara n'ahụ ibe ha, na-emepụta mkpokọta fascicular, a naghịkwa ahụ otu mkpụrụ ndụ ihe nketa na otu quail CCM. N'aka nke ọzọ, Wen et al. 24 hụrụ ọtụtụ mkpụrụ ndụ ihe nketa gbasaara agbasa na obere mkpụrụ ndụ ihe nketa spermatozoa na lumen SST n'ime ọkụkọ. Dabere na ihe ndị a hụrụ, enwere ike iche na ọchịchọ maka njikọta mkpụrụ ndụ ihe nketa dị iche n'etiti nnụnụ na n'etiti mkpụrụ ndụ ihe nketa spermatozoa n'otu mmiri ahụ. Na mgbakwunye, Van Krey et al. 9 tụrụ aro na nkewa na-enweghị usoro nke mkpụrụ ndụ ihe nketa spermatozoa agglutinated bụ ihe kpatara spermatozoa ji nwayọọ nwayọọ banye na lumen nke tube fallopian. Dịka echiche a si dị, a ga-ebu ụzọ chụpụ mkpụrụ ndụ ihe nketa spermatozoa nwere obere ikike njikọta na SST. N'ọnọdụ a, ikike nke spermatozoa nwere ike ịkpalite mmụba mkpụrụ ndụ nwere ike ịbụ ihe na-emetụta ihe ga-esi na asọmpi mkpụrụ ndụ pụta n'ime nnụnụ ruru unyi. Na mgbakwunye, ka mkpụrụ ndụ ihe nketa na-ekewapụ ogologo oge, otú ahụ ka a na-anọgide na-amụ nwa ogologo oge.
Ọ bụ ezie na a hụla nchịkọta na nchịkọta spermatozoa n'ọtụtụ ọmụmụ 2,22,24, akọwabeghị ha nke ọma n'ihi mgbagwoju anya nke nlele kinematic ha n'ime SST. Emeela ọtụtụ mgbalị iji mụọ nchịkọta spam n'ime vitro. A hụrụ nchịkọta sara mbara mana nke na-adịru nwa oge mgbe ewepụrụ waya dị gịrịgịrị na ntapụ mkpụrụ na-ada ada. Nke a na-eduga n'eziokwu ahụ na afụ ogologo na-apụta site na ntapụ ahụ, na-eṅomi gland seminal. N'ihi oke 3D na obere oge nkụchi mmiri, ngọngọ ahụ dum dara ngwa ngwa n'enweghị mmezi9. N'ọmụmụ ihe a ugbu a, site na iji ọkụkọ Sharkashi na obere chips, anyị nwere ike ịkọwa otu tufts ndị a si etolite na otu ha si agagharị. Ngwugwu spam na-etolite ozugbo anakọtachara mkpụrụ ma hụ na ha na-agagharị n'ọgba, na-egosi rheology dị mma mgbe ha nọ na mmiri ahụ. Ọzọkwa, mgbe a lere anya n'ụzọ macroscopic, a hụla ngwugwu spam iji mee ka linearity nke motility dịkwuo elu ma e jiri ya tụnyere spermatozoa dịpụrụ adịpụ. Nke a na-egosi na mmịpụta mkpụrụ nwere ike ime tupu SST abanye na mmiri nakwa na mmepụta mkpụrụ anaghị ejedebe na obere ebe n'ihi nrụgide dịka e kwuru na mbụ (Tingari na Lake12). N'oge nhazi tuft, mkpụrụ spermatozoa na-egwu mmiri n'otu oge ruo mgbe ha ga-etolite njikọ, wee kechie onwe ha, isi mkpụrụ spermatozoon ahụ na-anọgide na-enweghị onwe ya, mana ọdụ na akụkụ dị n'akụkụ nke mkpụrụ spermatozoon na-arapara ọnụ na ihe na-arapara. Ya mere, isi nke ligament ahụ bụ ihe na-akpata mmegharị ahụ, na-adọkpụ ihe ndị ọzọ dị n'ime ligament ahụ. Nnyocha elektrọn microscopy nke ngwugwu mkpụrụ spermatozo ahụ gosiri isi mkpụrụ spermatozoon ejikọtara na ọtụtụ ihe na-arapara ekpuchi, na-egosi na isi mkpụrụ spermatozoo jikọtara na ngwugwu ezumike, nke nwere ike ime mgbe ọ rutere ebe nchekwa (SST).
Mgbe e ji acridine oroma mee ka mkpụrụ ndụ sperm tee agba, a pụrụ ịhụ ihe na-arapara n'èzí mkpụrụ ndụ sperm n'okpuru igwe na-enyocha ihe na-eme ka mmiri dị n'ime ha. Ihe a na-enye ohere ka mkpụrụ ndụ sperm rapara ma rapara n'elu ma ọ bụ ihe ndị gbara ya gburugburu ka ha ghara ịgafe na mmiri gbara ya gburugburu. Ya mere, ihe anyị hụrụ na-egosi ọrụ nke njikọta spermatozoa n'ụdị ngwugwu ndị na-agagharị agagharị. Ike ha nwere igwu mmiri megide mmiri na-asọ asọ ma rapara n'elu ihe ndị dị nso na-eme ka mkpụrụ ndụ sperm nọrọ ogologo oge na SST.
Rothschild25 jiri igwefoto hemocytometry mụọ nkesa nke semen ehi n'ime otu ntapụ nke nkwusioru, na-ese fotomicrographs site na igwefoto nwere ma axis anya kwụ ọtọ na nke kwụ ọtọ nke microscope ahụ. Nsonaazụ gosiri na spermatozoa dọtara n'elu ụlọ ahụ. Ndị dere akwụkwọ ahụ na-atụ aro na enwere ike inwe mmekọrịta hydrodynamic n'etiti semen na elu. N'iburu nke a n'uche, yana ikike nke semen ọkụkọ Sharkashi ịmepụta tufts na-arapara arapara, ọ nwere ike ime ka ohere nke semen ga-arapara na mgbidi SST ma chekwaa ya ruo ogologo oge.
Bccetti na Afzeliu26 kọrọ na ọ dị mkpa ka a mata ma mee ka mkpụrụ ndụ nwoke na nwanyị nwee ike ịmata gamete ma mee ka ha nwee ike ịmịkọta. Forman10 hụrụ na njikọta α-glycosidic na mkpuchi glycoprotein-glycolipid site na iji neuraminidase gwọọ mkpụrụ nwanyị avian butere mbelata ọmụmụ nwa na-enweghị mmetụta nke mmegharị mkpụrụ nwoke. Ndị dere akwụkwọ ahụ na-atụ aro na mmetụta nke neuraminidase na glycocalyx na-emebi mwepụta mkpụrụ nwoke na njikọ utero-vaginal, si otú a na-ebelata ọmụmụ nwa. Ihe ha chọpụtara enweghị ike ileghara ohere nke ọgwụgwọ neuraminidase nwere ike ibelata nnabata mkpụrụ nwoke na uterocyte. Forman na Engel10 chọpụtara na ọmụmụ nwa belatara mgbe e tinyere mkpụrụ nwoke na neuraminidase gwọọ ọkụkọ. Agbanyeghị, IVF na mkpụrụ nwoke e nyere neuraminidase emetụtaghị ọmụmụ nwa ma e jiri ya tụnyere ọkụkọ e nyere njikwa. Ndị dere akwụkwọ ahụ kwubiri na mgbanwe dị na mkpuchi glycoprotein-glycolipid gburugburu akpụkpọ ahụ sperm belatara ikike nke sperm ime fatịlaịza site na imebi nhazi nke sperm na njikọ utero-vaginal, nke na-eme ka sperm mfu dịkwuo elu n'ihi ọsọ nke njikọ utero-vaginal, mana ọ naghị emetụta sperm na nchọpụta àkwá.
N'ime toki, Bakst na Bauchan 11 chọtara obere vesicles na iberibe akpụkpọ ahụ n'ime lumen nke SST ma hụ na ụfọdụ n'ime granules ndị a agwakọtala na akpụkpọ ahụ sperm. Ndị dere akwụkwọ ahụ na-atụ aro na mmekọrịta ndị a nwere ike itinye aka na nchekwa ogologo oge nke spermatozoa na SST. Agbanyeghị, ndị nchọpụta akọwapụtaghị ebe mkpụrụ ndụ ndị a si, ma ha bụ site na mkpụrụ ndụ epithelial CCT, nke sistemụ ọmụmụ nwoke mepụtara ma wepụta, ma ọ bụ nke sperm n'onwe ya mepụtara. Ọzọkwa, mkpụrụ ndụ ndị a bụ ihe kpatara njikọta. Grützner et al27 kọrọ na mkpụrụ ndụ epithelial epididymal na-emepụta ma na-ewepụta protein kpọmkwem nke dị mkpa maka ịmepụta traktị seminal otu-pore. Ndị dere akwụkwọ ahụ na-akọkwa na mgbasa nke ngwugwu ndị a dabere na mmekọrịta nke protein epididymal. Nixon et al28 chọpụtara na adnexa na-ewepụta protein, osteonectin acidic nke bara ụba na cysteine; SPARC na-etinye aka na ịmepụta sperm tufts na echidnas na platypuses dị mkpụmkpụ. Mgbasa nke osisi ndị a na-ejikọta ya na mfu nke protein a.
N'ọmụmụ ihe a, nyocha ultrastructural site na iji electron microscopy gosiri na spermatozoa rapaara n'ọtụtụ ihe dị oke arọ. A na-eche na ihe ndị a bụ ihe kpatara njikọta nke na-agbakọta n'etiti na gburugburu isi ndị na-arapara, mana na obere mkpokọta na mpaghara ọdụ. Anyị chere na ihe a na-agbakọta na-esi na sistemụ ọmụmụ nwoke (epididymis ma ọ bụ vas deferens) apụta yana mkpụrụ, ebe anyị na-ahụkarị mkpụrụ nwoke na-ekewapụ na mkpụrụ nwanyị na plasma lymph na seminal n'oge mmịpụta. Akọpụtala na ka spermatozoa avian na-agafe na epididymis na vas deferens, ha na-enweta mgbanwe ndị metụtara ntozu okè nke na-akwado ikike ha ijikọta protein na inweta glycoproteins nke plasma lemma jikọtara. Nnọgidesi ike nke protein ndị a na akpụkpọ ahụ sperm bi na SST na-egosi na protein ndị a nwere ike imetụta nnweta nke nkwụsi ike nke akpụkpọ ahụ sperm 30 ma chọpụta ọmụmụ ha 31. Ahammad na ndị otu ya kwuru na spermatozoa e si n'akụkụ dị iche iche nke usoro ọmụmụ nwoke nweta (site na testes ruo na distal vas deferens) gosipụtara mmụba na-aga n'ihu na ndụ n'okpuru ọnọdụ nchekwa mmiri mmiri, n'agbanyeghị okpomọkụ nchekwa, ndụ ọkụkọ na-abawanyekwa na tubes fallopian mgbe a mịchara ha.
Nkịta ọkụkọ Sharkashi nwere njirimara na ọrụ dị iche iche karịa ụdị ndị ọzọ dịka echidnas, platypuses, òké osisi, òké mgbada, na ezi Guinea. N'ime ọkụkọ sharkasi, mmepụta nke ngwugwu spermatozoa belatara ọsọ igwu mmiri ha ma e jiri ya tụnyere otu spermatozoa. Agbanyeghị, ngwugwu ndị a mụbara pasent nke spermatozoa dị mma n'ihe gbasara rheologically ma mụbaa ikike spermatozoa iji kwụsie ike n'ebe dị iche iche. Ya mere, nsonaazụ anyị na-akwado aro gara aga na njikọta spam na SST na-ejikọta ya na nchekwa spam ogologo oge. Anyị na-echekwa na ọchịchọ nke spam ịmepụta tufts nwere ike ijikwa ọnụego mfu spam na SST, nke nwere ike ịgbanwe nsonaazụ nke asọmpi spam. Dịka echiche a si dị, spermatozoa nwere obere ikike agglutination na-ewepụta SST mbụ, ebe spermatozoa nwere nnukwu ikike agglutination na-emepụta ọtụtụ n'ime ụmụ. Nhazi nke ngwugwu sperm otu-pore bara uru ma na-emetụta oke nne na nna na nwa, mana ọ na-eji usoro dị iche. Na echidnas na platypuses, a na-ahazi spermatozoa n'otu akụkụ iji mee ka ọsọ nke ìhè ahụ dịkwuo elu. Ngwugwu echidnas na-agagharị ihe dị ka okpukpu atọ karịa otu spermatozoa. A kwenyere na nhazi nke sperm tufts dị otú ahụ na echidnas bụ mgbanwe evolushọn iji nọgide na-achịkwa, ebe ọ bụ na ụmụ nwanyị na-enwe mmekọahụ ma na-ejikọkarị ọtụtụ ụmụ nwoke. Ya mere, spermatozoa sitere na ejaculates dị iche iche na-asọ mpi nke ukwuu maka ịmụpụta àkwá.
Ọ dị mfe iji igwe onyonyo nke ọkụkọ sharksi mee ka ha dị nro, nke a na-ewere dị ka ihe bara uru n'ihi na ọ na-enye ohere ka e jiri ya mee ihe n'ụzọ dị mfe iji chọpụta omume nke spermatozoa n'ime vitro. Usoro nke mkpụrụ ndụ sperm tuft na-akwalite ịmụ nwa n'ime ọkụkọ sharksi dịkwa iche na nke a na-ahụ n'ụfọdụ anụmanụ na-enwe nwa ebu n'afọ nke na-anọchite anya àgwà mkpụrụ ndụ sperm dịka òké osisi, ebe ụfọdụ spermatozoa na-eru àkwá ahụ, na-enyere ndị ọzọ metụtara ya aka iru ma mebie àkwá ha. iji gosi onwe ha. omume obiọma. Ịzụ nwa onwe onye 34. Ihe atụ ọzọ nke omume mmekorita na spermatozoa bụ n'ime òké ele, ebe spermatozoa nwere ike ịchọpụta ma jikọta ya na spermatozoa kacha nwee njikọ mkpụrụ ndụ ihe nketa ma mepụta otu mmekorita iji mee ka ọsọ ha dịkwuo elu ma e jiri ya tụnyere spermatozoa na-enweghị njikọ35.
Nsonaazụ e nwetara n'ọmụmụ ihe a emegideghị ozizi Foman banyere nchekwa ogologo oge nke spermatozoa na SWS. Ndị nchọpụta ahụ kọrọ na mkpụrụ ndụ sperm na-aga n'ihu na-agagharị na mmiri nke mkpụrụ ndụ epithelial nke na-ekpuchi SST ruo ogologo oge, mgbe oge ụfọdụ gasịrị, nchekwa ike nke mkpụrụ ndụ sperm na-ebelata, na-ebute mbelata ọsọ, nke na-enye ohere ịchụpụ obere ihe dị arọ nke molekul. ike nke spermatozoa na mmiri mmiri site na lumen nke SST Oghere nke tube fallopian. N'ọmụmụ ihe a ugbu a, anyị hụrụ na ọkara nke otu sperm gosipụtara ikike igwu mmiri megide mmiri mmiri na-asọ asọ, njikọ ha na ngwugwu ahụ mụbara ikike ha igosi rheology dị mma. Ọzọkwa, data anyị kwekọrọ na nke Matsuzaki et al. 1 bụ ndị kọrọ na mmụba nke lactate na SST nwere ike igbochi mmegharị sperm bi. Agbanyeghị, nsonaazụ anyị na-akọwa nhazi nke ligaments motile sperm na omume rheological ha n'ihu gburugburu ebe obibi na-agbanwe agbanwe n'ime microchannel iji mee ka omume ha doo anya na SST. Nnyocha ndị ga-eme n'ọdịnihu nwere ike ilekwasị anya n'ịchọpụta ihe mejupụtara kemịkalụ na ebe ihe na-eme ka ihe na-amịkọrọ mmiri si malite, nke ga-enyere ndị nchọpụta aka ịmepụta ụzọ ọhụrụ isi chekwaa mmiri mmiri ma mee ka oge ọmụmụ dịkwuo elu.
A họpụtara ụmụ nwoke sharkasi dị izu iri atọ na ise, ndị nwere olu gba ọtọ (homozygous dominant; Na Na) dịka ndị na-enye sperm n'ọmụmụ ihe a. A zụlitere nnụnụ ndị a n'Ugbo Anụ Ehihie Research nke Faculty of Agriculture, Mahadum Ashit, Ashit Governorate, Egypt. A na-etinye nnụnụ n'ime ụlọ ntu nke ọ bụla (30 x 40 x 40 cm), a na-enye ha ohere ka ha nwee ìhè (awa 16 nke ìhè na awa 8 nke ọchịchịrị) ma nye ha nri nwere 160 g nke protein a na-anaghị eri anụ, 2800 kcal nke ike a na-agbanwe agbanwe, 35 g nke calcium nke ọ bụla. 5 g nke phosphorus dị maka kilogram nke nri.
Dịka data 36, ​​​​37 si kwuo, e si n'aka ụmụ nwoke chịkọta mkpụrụ site na ịhịa aka n'afọ. E si n'aka ụmụ nwoke iri na ise chịkọta mkpụrụ 45 n'ime ụbọchị atọ. E jiri mmiri Belsville Poultry Semen Diluent gwakọta mkpụrụ 1:1 (v:v) ozugbo agwakọta mkpụrụ 1:1 (v:v) na mmiri Belsville Poultry Semen Diluent, nke nwere potassium diphosphate (1.27 g), monosodium glutamate monohydrate (0.867 g), fructose (0.5 d) anhydrous sodium. acetate (0.43 g), tris(hydroxymethyl)aminomethane (0.195 g), potassium citrate monohydrate (0.064 g), potassium monophosphate (0.065 g), magnesium chloride (0.034 g) na H2O (100 ml), pH = 7, 5, osmolarity 333 mOsm/kg38. E buru ụzọ lelee ihe nlele mkpụrụ nwoke e tinyere mmiri mmiri nke ọma site na iji obere microscope iji hụ na mkpụrụ nwoke dị mma (mmiri) wee debe ya n'ime mmiri ịsa ahụ na okpomọkụ 37°C ruo mgbe e jiri ya mee ihe n'ime ọkara awa mgbe e chịkọtachara ya.
A kọwara kinematics na rheology nke spermatozoa site na iji usoro ngwaọrụ microfluidic. E tinyere ihe nlele semen ọzọ na Beltsville Avian Semen Diluent, nke etinyere n'ime ngwaọrụ microfluidic (lee n'okpuru), a chọpụtakwara paramita kinetic site na iji sistemụ Kọmputa nke emepụtara na mbụ maka njirimara microfluidics. na ngagharị nke spermatozoa na mmiri mmiri (Ngalaba nke Injinịa Mechanical, Faculty of Engineering, Mahadum Assiut, Egypt). Enwere ike ibudata ngwa mgbakwunye ahụ na: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39. A tụrụ ọsọ curve (VCL, μm/s), ọsọ linear (VSL, μm/s) na ọsọ trajectory nkezi (VAP, μm/s). E jiri igwe microscope Optika XDS-3 nke a tụgharịrị agbanwe (nwere ihe mgbaru ọsọ 40x) nke ejikọtara na igwefoto Tucson ISH1000 na 30 fps maka sekọnd 3. Jiri ngwanrọ CASA mụọ ma ọ dịkarịa ala mpaghara atọ na ụzọ mkpụrụ ndụ 500 kwa ihe nlele. E ji CASA e ji aka mee hazie vidiyo e dekọrọ. Nkọwa nke mmegharị na plọg CASA dabere na ọsọ igwu mmiri nke mkpụrụ ndụ ma e jiri ya tụnyere ọnụego mmiri, ọ gụnyekwara paramita ndị ọzọ dị ka mmegharị n'akụkụ na n'akụkụ, ebe a chọpụtala na nke a bụ ihe a pụrụ ịtụkwasị obi na mmiri mmiri. A kọwara mmegharị rheological dị ka mmegharị nke mkpụrụ ndụ mkpụrụ ndụ megide ntụziaka nke mmiri mmiri. E kewara Spermatozoa nwere ihe onwunwe rheological site na ọnụọgụ nke spermatozoa motile; ewepụrụ spermatozoa ndị nọ n'udo ma na-agagharị n'ụzọ convectively na ọnụọgụgụ.
E si n'ụlọ ọrụ Elgomhoria Pharmaceuticals (Cairo, Egypt) nweta kemịkalụ niile e ji mee ihe ọ gwụla ma e kwuru ihe ọzọ. E mepụtara ngwaọrụ ahụ dịka El-sherry et al. 40 si kọwaa ya, ma gbanwee ya. Ihe ndị e ji emepụta obere ọwa ndị ahụ gụnyere efere iko (Howard Glass, Worcester, MA), SU-8-25 negative resist (MicroChem, Newton, CA), diacetone alcohol (Sigma Aldrich, Steinheim, Germany), na polyacetone. -184, Dow Corning, Midland, Michigan). A na-eji lithography dị nro emepụta obere ọwa ndị ahụ. Nke mbụ, e bipụta ihe mkpuchi ihu doro anya nke nwere nhazi obere ọwa achọrọ na igwe nbipute dị elu (Prismatic, Cairo, Egypt and Pacific Arts and Design, Markham, ON). E ji efere iko mee ndị isi ahụ dị ka ihe ndị e ji dochie efere ndị ahụ. E ji acetone, isopropanol na mmiri deionized hichaa efere ndị ahụ, wee jiri mkpuchi ntụgharị (3000 rpm, 1 nkeji) kpuchie ha. E mesịa, a kpọrọ oyi akwa SU-8 ahụ nke ọma (65°C, nkeji 2 na 95°C, nkeji 10) ma tinye ya na radieshon UV maka sekọnd 50. Mgbe e mechachara ya, sie ya na 65°C na 95°C maka nkeji 1 na nkeji 4 iji jikọta oyi akwa SU-8 ndị a kpughepụrụ ekpughe, wee mepụta mmanya diacetone maka nkeji 6.5. A na-eme waffles ndị ahụ nke ọma (200°C maka nkeji 15) iji mee ka oyi akwa SU-8 sie ike.
A kwadebere PDMS site n'ịgwakọta monomer na hardener n'ogo ibu nke 10:1, wee wepụ gas na ihe na-ekpo ọkụ ma wụsa ya n'elu isi ihe SU-8. A gwọrọ PDMS ahụ n'ime oven (120°C, nkeji 30), wee bepụ ọwa ndị ahụ, kewapụ ha na master, ma gbaa ha oghere iji kwe ka a jikọọ tubes na ntinye na ebe a na-esi na microchannel. N'ikpeazụ, ejiri ihe nhazi corona dị mfe (Electro-Technic Products, Chicago, IL) jikọọ microchannels PDMS na slide microscope mgbe niile dịka akọwara n'ebe ọzọ. Microchannel ejiri mee ihe n'ọmụmụ ihe a dị 200 µm × 20 µm (W × H) ma dị 3.6 cm n'ogologo.
A na-enweta mmiri mmiri nke nrụgide hydrostatic na-akpata n'ime microchannel site n'ịnọgide na-enwe ọkwa mmiri mmiri na ebe a na-abanye n'ime ya karịa ọdịiche dị elu Δh39 na ebe a na-esi ewepụta mmiri (Foto 1).
ebe f bụ ọnụọgụgụ esemokwu, nke a kọwara dị ka f = C/Re maka mmiri laminar na ọwa akụkụ anọ, ebe C bụ ihe na-agbanwe agbanwe dabere na oke akụkụ nke ọwa ahụ, L bụ ogologo nke ọwa micro, Vav bụ ọsọ nkezi n'ime ọwa micro, Dh bụ dayameta hydraulic nke ọwa ahụ, g - ọsọ nke ike ndọda. Site na iji usoro a, enwere ike ịgbakọ ọsọ ọwa nkezi site na iji usoro ndị a: