Nature.com দেখার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ। আপনি যে ব্রাউজার সংস্করণটি ব্যবহার করছেন তাতে সীমিত CSS সমর্থন রয়েছে। সর্বোত্তম অভিজ্ঞতার জন্য, আমরা আপনাকে একটি আপডেট করা ব্রাউজার ব্যবহার করার পরামর্শ দিচ্ছি (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে সামঞ্জস্যতা মোড অক্ষম করুন)। ইতিমধ্যে, অব্যাহত সমর্থন নিশ্চিত করার জন্য, আমরা সাইটটিকে স্টাইল এবং জাভাস্ক্রিপ্ট ছাড়াই রেন্ডার করব।
পাখির উর্বরতা নির্ভর করে শুক্রাণু সংরক্ষণকারী টিউবুলে (SST) দীর্ঘ সময়ের জন্য পর্যাপ্ত কার্যকর শুক্রাণু সংরক্ষণ করার ক্ষমতার উপর। শুক্রাণু SST-তে প্রবেশ করে, থাকে এবং ছেড়ে যায় তার সঠিক প্রক্রিয়া বিতর্কিত। শার্কসি মুরগির শুক্রাণুতে জমাট বাঁধার প্রবণতা বেশি ছিল, যা অনেক কোষ ধারণকারী মোবাইল ফিলামেন্টাস বান্ডিল তৈরি করে। একটি অস্বচ্ছ ফ্যালোপিয়ান টিউবে শুক্রাণুর গতিশীলতা এবং আচরণ পর্যবেক্ষণ করতে অসুবিধার কারণে, আমরা শুক্রাণুর জমাট বাঁধা এবং গতিশীলতা অধ্যয়নের জন্য শুক্রাণুর মতো একটি মাইক্রোচ্যানেল ক্রস-সেকশন সহ একটি মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইস ব্যবহার করেছি। এই গবেষণায় শুক্রাণুর বান্ডিল কীভাবে তৈরি হয়, কীভাবে তারা নড়াচড়া করে এবং SST-তে শুক্রাণুর অবস্থান বৃদ্ধিতে তাদের সম্ভাব্য ভূমিকা নিয়ে আলোচনা করা হয়েছে। হাইড্রোস্ট্যাটিক চাপ (প্রবাহ হার = 33 µm/s) দ্বারা একটি মাইক্রোফ্লুইডিক চ্যানেলের মধ্যে তরল প্রবাহ তৈরি হলে আমরা শুক্রাণুর বেগ এবং রিওলজিক্যাল আচরণ তদন্ত করেছি। শুক্রাণুগুলি স্রোতের বিপরীতে সাঁতার কাটতে থাকে (ধনাত্মক রিওলজি) এবং একক শুক্রাণুর তুলনায় শুক্রাণু বান্ডিলের বেগ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পায়। দেখা গেছে যে শুক্রাণু বান্ডিলগুলি একটি সর্পিল আকারে চলাচল করে এবং আরও একক শুক্রাণু নিয়োগের সাথে সাথে দৈর্ঘ্য এবং পুরুত্ব বৃদ্ধি পায়। শুক্রাণু বান্ডিলগুলিকে মাইক্রোফ্লুইডিক চ্যানেলের পাশের দেয়ালের কাছে আসতে এবং লেগে থাকতে দেখা গেছে যাতে তরল প্রবাহ বেগ 33 µm/s এর চেয়ে বেশি না হয়। শুক্রাণু বান্ডিলগুলিকে মাইক্রোফ্লুইডিক চ্যানেলের পাশের দেয়ালের কাছে আসতে এবং লেগে থাকতে দেখা গেছে যাতে তরল প্রবাহ বেগ 33 µm/s এর চেয়ে বেশি না হয়। Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрофлюидных каналов, чбостьмых каналов скоростью потока жидкости> 33 мкм / с. শুক্রাণু বান্ডিলগুলি মাইক্রোফ্লুইডিক চ্যানেলের পাশের দেয়ালের কাছে আসতে এবং লেগে থাকতে দেখা গেছে যাতে তরল প্রবাহ হার >33 µm/s এ ভেসে না যায়।观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁，以避免被流体流速> 33 µm/s 扫上。33 µm/s 扫过। Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрожидкостного канала, чбтожидкостного канала, чбтожидкостного канала жидкости со скоростью > 33 мкм/с. ৩৩ µm/s বেগে তরল প্রবাহের ফলে ভেসে যাওয়া এড়াতে শুক্রাণু বান্ডিলগুলি মাইক্রোফ্লুইডিক চ্যানেলের পাশের দেয়ালের কাছে আসতে এবং লেগে থাকতে দেখা গেছে।স্ক্যানিং এবং ট্রান্সমিশন ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি থেকে জানা গেছে যে শুক্রাণু বান্ডিলগুলি প্রচুর ঘন উপাদান দ্বারা সমর্থিত ছিল। প্রাপ্ত তথ্য শারকাজি মুরগির শুক্রাণুর অনন্য গতিশীলতা প্রদর্শন করে, সেইসাথে শুক্রাণুর একত্রিত হয়ে মোবাইল বান্ডিল গঠনের ক্ষমতা প্রদর্শন করে, যা SMT-তে শুক্রাণুর দীর্ঘমেয়াদী সঞ্চয় সম্পর্কে আরও ভালভাবে বুঝতে অবদান রাখে।
মানুষ এবং বেশিরভাগ প্রাণীর ক্ষেত্রে নিষেকের জন্য, শুক্রাণু এবং ডিম্বাণু সঠিক সময়ে নিষেকের স্থানে পৌঁছাতে হবে। অতএব, ডিম্বস্ফোটনের আগে বা সময়ে মিলন অবশ্যই ঘটতে হবে। অন্যদিকে, কিছু স্তন্যপায়ী প্রাণী, যেমন কুকুর, সেইসাথে অ-স্তন্যপায়ী প্রজাতি, যেমন পোকামাকড়, মাছ, সরীসৃপ এবং পাখি, তাদের প্রজনন অঙ্গে শুক্রাণু দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণ করে যতক্ষণ না তাদের ডিম নিষেকের জন্য প্রস্তুত হয় (অসিঙ্ক্রোনাস নিষেকের 1)। পাখিরা 2-10 সপ্তাহের জন্য ডিম নিষেকের জন্য সক্ষম শুক্রাণুর কার্যকারিতা বজায় রাখতে সক্ষম হয়।
এটি একটি অনন্য বৈশিষ্ট্য যা পাখিদের অন্যান্য প্রাণী থেকে আলাদা করে, কারণ এটি একাধিক সপ্তাহ ধরে একক গর্ভধারণের পরে একযোগে মিলন এবং ডিম্বস্ফোটন ছাড়াই নিষেকের উচ্চ সম্ভাবনা প্রদান করে। শুক্রাণু সঞ্চয়কারী টিউবুল (SST) নামে পরিচিত প্রধান শুক্রাণু সঞ্চয়কারী অঙ্গটি জরায়ুর যোনি সংযোগস্থলে অভ্যন্তরীণ মিউকোসাল ভাঁজে অবস্থিত। আজ অবধি, শুক্রাণু কীভাবে শুক্রাণু ব্যাংকে প্রবেশ করে, থাকে এবং বেরিয়ে যায় তা সম্পূর্ণরূপে বোঝা যায় না। পূর্ববর্তী গবেষণার উপর ভিত্তি করে, অনেক অনুমান সামনে রাখা হয়েছে, তবে তাদের কোনওটিই নিশ্চিত করা হয়নি।
Forman4 অনুমান করেছিল যে SST এপিথেলিয়াল কোষে অবস্থিত প্রোটিন চ্যানেলগুলির মাধ্যমে তরল প্রবাহের দিকের বিরুদ্ধে ক্রমাগত দোলনশীল চলাচলের মাধ্যমে শুক্রাণু SST গহ্বরে তাদের বাসস্থান বজায় রাখে (রিওলজি)। SST লুমেনে শুক্রাণু রাখার জন্য প্রয়োজনীয় ধ্রুবক ফ্ল্যাজেলার কার্যকলাপের কারণে ATP হ্রাস পায় এবং তরল প্রবাহের মাধ্যমে শুক্রাণু ব্যাংক থেকে বেরিয়ে আসা এবং শুক্রাণুকে নিষিক্ত করার জন্য ঊর্ধ্বমুখী ফ্যালোপিয়ান টিউবের নীচে একটি নতুন যাত্রা শুরু না করা পর্যন্ত গতিশীলতা অবশেষে হ্রাস পায়। ডিম (Forman4)। শুক্রাণু সংরক্ষণের এই মডেলটি SST এপিথেলিয়াল কোষে উপস্থিত অ্যাকোয়াপোরিন 2, 3 এবং 9 এর ইমিউনোসাইটোকেমিস্ট্রি দ্বারা সনাক্তকরণ দ্বারা সমর্থিত। আজ অবধি, মুরগির বীর্য রিওলজি এবং SST সংরক্ষণ, যোনি শুক্রাণু নির্বাচন এবং শুক্রাণু প্রতিযোগিতায় এর ভূমিকার উপর গবেষণার অভাব রয়েছে। মুরগির ক্ষেত্রে, প্রাকৃতিক মিলনের পরে শুক্রাণু যোনিতে প্রবেশ করে, তবে মিলনের কিছুক্ষণ পরেই 80% এরও বেশি শুক্রাণু যোনি থেকে বেরিয়ে যায়। এটি ইঙ্গিত দেয় যে যোনি পাখির শুক্রাণু নির্বাচনের প্রাথমিক স্থান। এছাড়াও, জানা গেছে যে যোনিপথে নিষিক্ত শুক্রাণুর ১% এরও কম অংশ SSTs2 তে পরিণত হয়। যোনিপথে ছানাদের কৃত্রিম গর্ভধারণের ক্ষেত্রে, গর্ভধারণের ২৪ ঘন্টা পরে SST-তে পৌঁছানো শুক্রাণুর সংখ্যা বৃদ্ধি পায়। এখনও পর্যন্ত, এই প্রক্রিয়ার সময় শুক্রাণু নির্বাচনের প্রক্রিয়াটি অস্পষ্ট, এবং শুক্রাণুর গতিশীলতা SST শুক্রাণু গ্রহণে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করতে পারে। ফ্যালোপিয়ান টিউবের পুরু এবং অস্বচ্ছ দেয়ালের কারণে, পাখির ফ্যালোপিয়ান টিউবে শুক্রাণুর গতিশীলতা সরাসরি পর্যবেক্ষণ করা কঠিন। অতএব, নিষেকের পরে শুক্রাণু কীভাবে SST-তে রূপান্তরিত হয় সে সম্পর্কে আমাদের প্রাথমিক জ্ঞানের অভাব রয়েছে।
স্তন্যপায়ী প্রাণীর যৌনাঙ্গে শুক্রাণু পরিবহন নিয়ন্ত্রণকারী একটি গুরুত্বপূর্ণ উপাদান হিসেবে রিওলজি সম্প্রতি স্বীকৃত হয়েছে। গতিশীল শুক্রাণুর বিপরীতমুখী স্থানান্তরের ক্ষমতার উপর ভিত্তি করে, জাফেরানি এবং অন্যান্যরা একটি কোরা মাইক্রোফ্লুইডিক সিস্টেম ব্যবহার করে পেনড সিমেন নমুনা থেকে গতিশীল শুক্রাণুকে নিষ্ক্রিয়ভাবে আলাদা করেছেন। চিকিৎসা বন্ধ্যাত্ব চিকিৎসা এবং ক্লিনিকাল গবেষণার জন্য এই ধরণের বীর্য বাছাই অপরিহার্য, এবং ঐতিহ্যবাহী পদ্ধতির তুলনায় এটি পছন্দনীয় যা সময় এবং শ্রমসাধ্য এবং শুক্রাণুর আকারবিদ্যা এবং কাঠামোগত অখণ্ডতার সাথে আপস করতে পারে। তবে, আজ পর্যন্ত, মুরগির যৌনাঙ্গ থেকে নিঃসৃত শুক্রাণুর গতিশীলতার উপর প্রভাব সম্পর্কে কোনও গবেষণা পরিচালিত হয়নি।
SST-তে শুক্রাণু সংরক্ষণের প্রক্রিয়া যাই হোক না কেন, অনেক তদন্তকারী লক্ষ্য করেছেন যে মুরগি 9, 10, কোয়েল 2 এবং টার্কির 11-এর SST-তে আবাসিক শুক্রাণু মাথার সাথে একত্রিত হয়ে একত্রিত শুক্রাণু বান্ডিল তৈরি করে। লেখকরা পরামর্শ দিয়েছেন যে SST-তে শুক্রাণুর দীর্ঘমেয়াদী সঞ্চয়ের সাথে এই জমাটবদ্ধকরণের একটি যোগসূত্র রয়েছে।
টিঙ্গারি এবং লেক১২ মুরগির শুক্রাণু গ্রহণকারী গ্রন্থিতে শুক্রাণুর মধ্যে একটি শক্তিশালী সম্পর্ক রিপোর্ট করেছেন এবং প্রশ্ন তুলেছেন যে পাখির শুক্রাণু স্তন্যপায়ী প্রাণীর শুক্রাণুর মতো একইভাবে একত্রিত হয় কিনা। তারা বিশ্বাস করেন যে ভাস ডিফারেন্সে শুক্রাণুর মধ্যে গভীর সংযোগ একটি ছোট জায়গায় প্রচুর পরিমাণে শুক্রাণুর উপস্থিতির কারণে সৃষ্ট চাপের কারণে হতে পারে।
তাজা ঝুলন্ত কাচের স্লাইডে শুক্রাণুর আচরণ মূল্যায়ন করার সময়, বিশেষ করে বীর্যের ফোঁটার প্রান্তে, সংশ্লেষণের ক্ষণস্থায়ী লক্ষণ দেখা যায়। যাইহোক, ক্রমাগত নড়াচড়ার সাথে যুক্ত ঘূর্ণন ক্রিয়া দ্বারা সংশ্লেষণ প্রায়শই ব্যাহত হত, যা এই ঘটনার ক্ষণস্থায়ী প্রকৃতি ব্যাখ্যা করে। গবেষকরা আরও লক্ষ্য করেছেন যে যখন বীর্যে দ্রাবক যোগ করা হয়েছিল, তখন দীর্ঘায়িত "সূতার মতো" কোষ সমষ্টি দেখা গিয়েছিল।
শুক্রাণুর অনুকরণের প্রাথমিক প্রচেষ্টাগুলি ঝুলন্ত ফোঁটা থেকে একটি পাতলা তার অপসারণ করে করা হয়েছিল, যার ফলে বীর্যের ফোঁটা থেকে একটি দীর্ঘায়িত শুক্রাণুর মতো ভেসিকল বেরিয়ে আসে। শুক্রাণুটি তাৎক্ষণিকভাবে ভেসিকলের মধ্যে সমান্তরালভাবে সারিবদ্ধ হয়ে যায়, কিন্তু 3D সীমাবদ্ধতার কারণে পুরো ইউনিটটি দ্রুত অদৃশ্য হয়ে যায়। অতএব, শুক্রাণু সংযোজন অধ্যয়ন করার জন্য, বিচ্ছিন্ন শুক্রাণু সঞ্চয় টিউবুলে সরাসরি শুক্রাণুর গতিশীলতা এবং আচরণ পর্যবেক্ষণ করা প্রয়োজন, যা অর্জন করা কঠিন। অতএব, শুক্রাণুর গতিশীলতা এবং সংযোজন আচরণের অধ্যয়নকে সমর্থন করার জন্য শুক্রাণুর অনুকরণকারী একটি যন্ত্র তৈরি করা প্রয়োজন। ব্রিলার্ড এট আল 13 রিপোর্ট করেছেন যে প্রাপ্তবয়স্ক ছানাগুলিতে শুক্রাণু সঞ্চয় টিউবুলের গড় দৈর্ঘ্য 400-600 µm, তবে কিছু SST 2000 µm পর্যন্ত দীর্ঘ হতে পারে। মেরো এবং ওগাসাওয়ারা১৪ সেমিনিফেরাস গ্রন্থিগুলিকে বর্ধিত এবং অ-বর্ধিত শুক্রাণু সঞ্চয়কারী টিউবুলে বিভক্ত করেছেন, উভয়ের দৈর্ঘ্য (~৫০০ µm) এবং ঘাড়ের প্রস্থ (~৩৮ µm), কিন্তু টিউবুলের গড় লুমেন ব্যাস ছিল যথাক্রমে ৫৬.৬ এবং ৫৬.৬ µm। ... যথাক্রমে ১১.২ µm। বর্তমান গবেষণায়, আমরা ২০০ µm × ২০ µm (W × H) চ্যানেল আকারের একটি মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইস ব্যবহার করেছি, যার ক্রস সেকশনটি অ্যামপ্লিফাইড SST-এর কিছুটা কাছাকাছি। এছাড়াও, আমরা প্রবাহিত তরলে শুক্রাণুর গতিশীলতা এবং সংশ্লেষণ আচরণ পরীক্ষা করেছি, যা ফোরম্যানের অনুমানের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ যে SST এপিথেলিয়াল কোষ দ্বারা উৎপাদিত তরল লুমেনে শুক্রাণুকে একটি বিপরীত প্রবাহ (রিওলজিক্যাল) দিকে রাখে।
এই গবেষণার লক্ষ্য ছিল ফ্যালোপিয়ান টিউবে শুক্রাণুর গতিশীলতা পর্যবেক্ষণের সমস্যাগুলি কাটিয়ে ওঠা এবং গতিশীল পরিবেশে শুক্রাণুর রিওলজি এবং আচরণ অধ্যয়নের অসুবিধা এড়ানো। একটি মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইস ব্যবহার করা হয়েছিল যা একটি মুরগির যৌনাঙ্গে শুক্রাণুর গতিশীলতা অনুকরণ করার জন্য হাইড্রোস্ট্যাটিক চাপ তৈরি করে।
যখন একটি মিশ্রিত শুক্রাণুর নমুনার একটি ফোঁটা (1:40) মাইক্রোচ্যানেল ডিভাইসে লোড করা হয়েছিল, তখন দুই ধরণের শুক্রাণুর গতিশীলতা সনাক্ত করা যেত (বিচ্ছিন্ন শুক্রাণু এবং আবদ্ধ শুক্রাণু)। এছাড়াও, শুক্রাণু স্রোতের বিপরীতে সাঁতার কাটতে থাকে (ধনাত্মক রিওলজি; ভিডিও 1, 2)। যদিও শুক্রাণুর বান্ডিলগুলির বেগ একাকী শুক্রাণুর তুলনায় কম ছিল (p < 0.001), তারা শুক্রাণুর ইতিবাচক রিওট্যাক্সিস প্রদর্শনের শতাংশ বৃদ্ধি করেছিল (p < 0.001; টেবিল 2)। যদিও শুক্রাণুর বান্ডিলগুলির বেগ একাকী শুক্রাণুর তুলনায় কম ছিল (p < 0.001), তারা শুক্রাণুর ইতিবাচক রিওট্যাক্সিস প্রদর্শনের শতাংশ বৃদ্ধি করেছিল (p < 0.001; টেবিল 2)। Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), они увеличева сперматозоидов сперматозоидов, демонстрирующих положительный реотаксис (p < 0,001; таблица 2)। যদিও শুক্রাণু বান্ডিলগুলির বেগ একক শুক্রাণুর তুলনায় কম ছিল (p < 0.001), তারা শুক্রাণুর শতাংশ বৃদ্ধি করেছিল যা ইতিবাচক রিওট্যাক্সিস দেখায় (p < 0.001; টেবিল 2)।尽管精子束的速度低于孤独精子的速度（p < 0.001）, 但它们增加了显示阳性流变性的精子百分比（p <0.001；表2）।尽管 精子束 的 速度 低于 孤独 的 速度 （p <0.001） ， 但 增加 了 显示 嵾史 怳性 怟度百分比 ） Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), положительной реологией (p < 0,001; таблица 2)। যদিও শুক্রাণু বান্ডিলের গতি একক শুক্রাণুর তুলনায় কম ছিল (p < 0.001), তারা ধনাত্মক রিওলজি সহ শুক্রাণুর শতাংশ বৃদ্ধি করেছে (p < 0.001; টেবিল 2)।একক শুক্রাণু এবং টাফ্টসের জন্য ইতিবাচক রিওলজি যথাক্রমে প্রায় 53% এবং 85% অনুমান করা হয়।
দেখা গেছে যে বীর্যপাতের পরপরই শার্কাসী মুরগির শুক্রাণু রৈখিক বান্ডিল তৈরি করে, যার মধ্যে কয়েক ডজন ব্যক্তি থাকে। এই টুফ্টগুলি সময়ের সাথে সাথে দৈর্ঘ্য এবং পুরুত্ব বৃদ্ধি পায় এবং বিলুপ্ত হওয়ার আগে কয়েক ঘন্টা ধরে ইন ভিট্রোতে থাকতে পারে (ভিডিও 3)। এই ফিলামেন্টাস বান্ডিলগুলি এপিডিডাইমিসের শেষে তৈরি হওয়া ইকিডনা স্পার্মাটোজোয়ার মতো আকৃতির। শার্কাসী মুরগির বীর্য সংগ্রহের এক মিনিটেরও কম সময়ের মধ্যে জমাট বাঁধার এবং জালিকাযুক্ত বান্ডিল তৈরির উচ্চ প্রবণতা দেখা গেছে। এই রশ্মিগুলি গতিশীল এবং কাছাকাছি যেকোনো দেয়াল বা স্থির বস্তুর সাথে লেগে থাকতে সক্ষম। যদিও শুক্রাণু বান্ডিল শুক্রাণু কোষের গতি কমিয়ে দেয়, তবে এটি স্পষ্ট যে ম্যাক্রোস্কোপিকভাবে তারা তাদের রৈখিকতা বৃদ্ধি করে। বান্ডিলের দৈর্ঘ্য বান্ডিলে সংগৃহীত শুক্রাণুর সংখ্যার উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হয়। বান্ডিলের দুটি অংশ বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল: প্রাথমিক অংশ, যার মধ্যে জমাটবদ্ধ শুক্রাণুর মুক্ত মাথা এবং শেষ অংশ, যার মধ্যে লেজ এবং শুক্রাণুর সম্পূর্ণ দূরবর্তী প্রান্ত অন্তর্ভুক্ত। একটি উচ্চ-গতির ক্যামেরা (৯৫০ fps) ব্যবহার করে, বান্ডিলের প্রাথমিক অংশে সংশ্লেষিত শুক্রাণুর মুক্ত মাথা পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল, যা তাদের দোলনশীল গতির কারণে বান্ডিলের চলাচলের জন্য দায়ী, বাকিগুলিকে একটি হেলিকাল গতির মাধ্যমে বান্ডিলের মধ্যে টেনে নিয়ে যায় (ভিডিও ৪)। তবে, লম্বা টাফ্টগুলিতে, এটি লক্ষ্য করা গেছে যে কিছু মুক্ত শুক্রাণুর মাথা শরীরের সাথে লেগে থাকে এবং টাফ্টের শেষ অংশটি টাফ্টকে এগিয়ে নিতে সাহায্য করার জন্য ভ্যান হিসাবে কাজ করে।
তরল পদার্থের ধীর প্রবাহে, শুক্রাণু বান্ডিলগুলি একে অপরের সমান্তরালভাবে চলাচল করে, তবে, তারা ওভারল্যাপ করতে শুরু করে এবং স্থির সবকিছুর সাথে লেগে থাকে, যাতে প্রবাহের গতি বৃদ্ধির সাথে সাথে স্রোতের প্রবাহে ভেসে না যায়। যখন মুষ্টিমেয় শুক্রাণু কোষ একে অপরের কাছে আসে তখন বান্ডিলগুলি তৈরি হয়, তারা সমলয়ভাবে চলাচল শুরু করে এবং একে অপরের চারপাশে মোড়ানো শুরু করে এবং তারপর একটি আঠালো পদার্থের সাথে লেগে থাকে। চিত্র 1 এবং 2 দেখায় যে শুক্রাণু কীভাবে একে অপরের কাছে আসে, লেজগুলি একে অপরের চারপাশে মোড়ানোর সাথে সাথে একটি সংযোগ তৈরি করে।
গবেষকরা শুক্রাণুর রিওলজি অধ্যয়নের জন্য একটি মাইক্রোচ্যানেলে তরল প্রবাহ তৈরি করতে হাইড্রোস্ট্যাটিক চাপ প্রয়োগ করেছিলেন। ২০০ µm × ২০ µm (W × H) আকার এবং ৩.৬ µm দৈর্ঘ্যের একটি মাইক্রোচ্যানেল ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রান্তে সিরিঞ্জ লাগানো পাত্রের মধ্যে মাইক্রোচ্যানেল ব্যবহার করুন। চ্যানেলগুলিকে আরও দৃশ্যমান করার জন্য খাবারের রঙ ব্যবহার করা হয়েছিল।
আন্তঃসংযোগ কেবল এবং আনুষাঙ্গিক জিনিসপত্র দেয়ালে বেঁধে দিন। ভিডিওটি একটি ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপ দিয়ে তোলা হয়েছে। প্রতিটি ছবির সাথে, ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপি এবং ম্যাপিং চিত্রগুলি উপস্থাপন করা হয়েছে। (A) দুটি স্রোতের মধ্যে সংযোগ হেলিকাল গতির কারণে প্রবাহকে প্রতিরোধ করে (লাল তীর)। (B) টিউব বান্ডেল এবং চ্যানেল প্রাচীরের মধ্যে সংযোগ (লাল তীর), একই সাথে তারা দুটি অন্য বান্ডেলের সাথে সংযুক্ত থাকে (হলুদ তীর)। (C) মাইক্রোফ্লুইডিক চ্যানেলে শুক্রাণু বান্ডেলগুলি একে অপরের সাথে সংযোগ স্থাপন শুরু করে (লাল তীর), শুক্রাণু বান্ডেলের একটি জাল তৈরি করে। (D) শুক্রাণু বান্ডেলের একটি নেটওয়ার্ক গঠন।
যখন মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইসে এক ফোঁটা মিশ্রিত শুক্রাণু লোড করা হয় এবং একটি প্রবাহ তৈরি করা হয়, তখন শুক্রাণু রশ্মি প্রবাহের দিকের বিপরীতে চলতে দেখা যায়। বান্ডিলগুলি মাইক্রোচ্যানেলের দেয়ালের সাথে শক্তভাবে ফিট করে এবং বান্ডিলের প্রাথমিক অংশের মুক্ত মাথাগুলি তাদের সাথে শক্তভাবে ফিট করে (ভিডিও 5)। স্রোতের দ্বারা ভেসে যাওয়া প্রতিরোধ করার জন্য তারা তাদের পথে যে কোনও স্থির কণা, যেমন ধ্বংসাবশেষের সাথেও লেগে থাকে। সময়ের সাথে সাথে, এই টুফ্টগুলি অন্যান্য একক শুক্রাণু এবং ছোট টুফ্টগুলিকে আটকে রেখে লম্বা ফিলামেন্টে পরিণত হয় (ভিডিও 6)। প্রবাহ ধীর হতে শুরু করার সাথে সাথে শুক্রাণুর লম্বা রেখাগুলি শুক্রাণু রেখার একটি নেটওয়ার্ক তৈরি করতে শুরু করে (ভিডিও 7; চিত্র 2)।
উচ্চ প্রবাহ বেগে (V > 33 µm/s), সুতার সর্পিল গতিবিধি বৃদ্ধি করা হয় যাতে অনেকগুলি পৃথক শুক্রাণু তৈরির বান্ডিল প্রবাহের প্রবাহমান শক্তিকে আরও ভালভাবে প্রতিরোধ করতে পারে। উচ্চ প্রবাহ বেগে (V > 33 µm/s), সুতার সর্পিল গতিবিধি বৃদ্ধি করা হয় যাতে অনেকগুলি পৃথক শুক্রাণু তৈরির বান্ডিল প্রবাহের প্রবাহমান শক্তিকে আরও ভালভাবে প্রতিরোধ করতে পারে। При высокой скорости потока (V > 33 мкм/с) спиралевидные движения нитей усиливаются, поскольку они пытаются поймавидные мкм/с сперматозоидов, образующих пучки, которые лучше противостоят дрейфующей силе потока. উচ্চ প্রবাহ হারে (V > 33 µm/s), সুতাগুলির হেলিকাল নড়াচড়া বৃদ্ধি পায় কারণ তারা অনেকগুলি পৃথক শুক্রাণু ধরার চেষ্টা করে এবং বান্ডিল তৈরি করে যা প্রবাহের প্রবাহমান শক্তিকে আরও ভালভাবে প্রতিরোধ করতে সক্ষম।高流速(V > 33 µm/s)时,螺纹的螺旋运动增加,以试图捕捉许多形成束的单个精子,从而更好地抵抗।在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时 ， 的 螺旋 运动 增加 ， 以 试图 许多 形成 束 单 个 精廾图抵抗 的 漂移力।।।।।।।।।। При высоких скоростях потока (V > 33 мкм/с) спиральное движение нитей увеличивается в попытке захватить множестево мкм/с сперматозоидов, образующих пучки, чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потока. উচ্চ প্রবাহ হারে (V > 33 µm/s), প্রবাহের প্রবাহ বলকে আরও ভালভাবে প্রতিরোধ করার জন্য অনেকগুলি পৃথক শুক্রাণুকে বান্ডিল তৈরি করে ধরার প্রয়াসে ফিলামেন্টগুলির হেলিকাল নড়াচড়া বৃদ্ধি পায়।তারা পাশের দেয়ালে মাইক্রোচ্যানেল সংযুক্ত করার চেষ্টাও করেছিল।
হালকা মাইক্রোস্কোপি (LM) ব্যবহার করে শুক্রাণু বান্ডিলগুলিকে শুক্রাণুর মাথা এবং কুঁচকানো লেজের গুচ্ছ হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল। বিভিন্ন সমষ্টি সহ শুক্রাণু বান্ডিলগুলিকে বাঁকানো মাথা এবং ফ্ল্যাজেলার সমষ্টি, একাধিক ফিউজড শুক্রাণুর লেজ, একটি লেজের সাথে সংযুক্ত শুক্রাণুর মাথা এবং বাঁকানো নিউক্লিয়াস সহ শুক্রাণুর মাথা হিসাবেও চিহ্নিত করা হয়েছে। ট্রান্সমিশন ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি (TEM)। স্ক্যানিং ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি (SEM) দেখিয়েছে যে শুক্রাণু বান্ডিলগুলি শুক্রাণুর মাথার আবরণযুক্ত সমষ্টি ছিল এবং শুক্রাণু সমষ্টিগুলি মোড়ানো লেজের একটি সংযুক্ত নেটওয়ার্ক দেখিয়েছিল।
হালকা মাইক্রোস্কোপি (অর্ধেক অংশ), স্ক্যানিং ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি (SEM) এবং ট্রান্সমিশন ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি (TEM) ব্যবহার করে শুক্রাণুর আকারবিদ্যা এবং অতি-গঠন, শুক্রাণুর বান্ডিল গঠন অধ্যয়ন করা হয়েছিল, শুক্রাণুর স্মিয়ারগুলিকে অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল এবং এপিফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে পরীক্ষা করা হয়েছিল।
অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে শুক্রাণুর স্মিয়ার স্টেনিং (চিত্র 3B) দেখায় যে শুক্রাণুর মাথাগুলো একসাথে আটকে ছিল এবং ক্ষরণকারী উপাদান দিয়ে আবৃত ছিল, যার ফলে বৃহৎ টুফ্ট তৈরি হয়েছিল (চিত্র 3D)। শুক্রাণুর বান্ডিলগুলো সংযুক্ত লেজের একটি নেটওয়ার্ক সহ শুক্রাণুর সমষ্টি দ্বারা গঠিত ছিল (চিত্র 4A-C)। শুক্রাণুর বান্ডিলগুলো একসাথে আটকে থাকা অনেক শুক্রাণুর লেজ দিয়ে গঠিত (চিত্র 4D)। গোপনীয়তা (চিত্র 4E,F) শুক্রাণুর বান্ডিলের মাথাগুলো আবৃত করেছিল।
শুক্রাণুর বান্ডিলের গঠন ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপি এবং অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগযুক্ত শুক্রাণুর স্মিয়ার ব্যবহার করে দেখা গেছে যে শুক্রাণুর মাথা একসাথে লেগে থাকে। (A) প্রাথমিক শুক্রাণুর টুফ্ট গঠন একটি শুক্রাণু (সাদা বৃত্ত) এবং তিনটি শুক্রাণু (হলুদ বৃত্ত) দিয়ে শুরু হয়, সর্পিলটি লেজ থেকে শুরু হয়ে মাথার দিকে শেষ হয়। (B) অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগযুক্ত একটি শুক্রাণুর স্মিয়ারের ফটোমাইক্রোগ্রাফে শুক্রাণুর মাথা (তীর) দেখা যাচ্ছে। স্রাব মাথা(গুলি) ঢেকে রাখে। ম্যাগনিফিকেশন × 1000। (C) একটি মাইক্রোফ্লুইডিক চ্যানেলে প্রবাহ দ্বারা পরিবহন করা একটি বৃহৎ রশ্মির বিকাশ (950 fps এ একটি উচ্চ গতির ক্যামেরা ব্যবহার করে)। (D) অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগযুক্ত একটি শুক্রাণুর স্মিয়ারের মাইক্রোগ্রাফে বড় টুফ্ট (তীর) দেখা যাচ্ছে। ম্যাগনিফিকেশন: ×200।
একটি শুক্রাণু রশ্মির স্ক্যানিং ইলেকট্রন মাইক্রোগ্রাফ এবং অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগযুক্ত একটি শুক্রাণু স্মিয়ার। (A, B, D, E) হল শুক্রাণুর ডিজিটাল রঙিন স্ক্যানিং ইলেকট্রন মাইক্রোগ্রাফ, এবং C এবং F হল অ্যাক্রিডিন কমলা রঙিন শুক্রাণু স্মিয়ারের মাইক্রোগ্রাফ যা পুচ্ছ জালে মোড়ানো একাধিক শুক্রাণুর সংযুক্তি দেখায়। (AC) শুক্রাণু সমষ্টিগুলিকে সংযুক্ত লেজের (তীর) একটি নেটওয়ার্ক হিসাবে দেখানো হয়েছে। (D) লেজের চারপাশে মোড়ানো বেশ কয়েকটি শুক্রাণুর (আঠালো পদার্থ, গোলাপী রূপরেখা, তীর সহ) আঠালো। (E এবং F) আঠালো উপাদান (পয়েন্টার) দিয়ে আবৃত শুক্রাণুর মাথা সমষ্টি (পয়েন্টার)। শুক্রাণুগুলি বেশ কয়েকটি ঘূর্ণি-সদৃশ কাঠামো (F) সহ বান্ডিল তৈরি করে (C) ×400 এবং (F) ×200 বিবর্ধন।
ট্রান্সমিশন ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে, আমরা দেখতে পেলাম যে শুক্রাণুর বান্ডিলগুলিতে লেজ সংযুক্ত ছিল (চিত্র 6A, C), লেজের সাথে মাথা সংযুক্ত ছিল (চিত্র 6B), অথবা লেজের সাথে মাথা সংযুক্ত ছিল (চিত্র 6D)। বান্ডিলের শুক্রাণুর মাথাগুলি বাঁকা, দুটি নিউক্লিয়ার অঞ্চলে উপস্থিত (চিত্র 6D)। ছেদ বান্ডিলে, শুক্রাণুর একটি বাঁকানো মাথা ছিল যার দুটি নিউক্লিয়ার অঞ্চল এবং একাধিক ফ্ল্যাজেলার অঞ্চল ছিল (চিত্র 5A)।
ডিজিটাল রঙের ইলেকট্রন মাইক্রোগ্রাফে শুক্রাণু বান্ডেলের সংযোগকারী লেজ এবং শুক্রাণুর মাথার সাথে সংযোগকারী আঠালো উপাদান দেখানো হয়েছে। (A) বিপুল সংখ্যক শুক্রাণুর সংযুক্ত লেজ। প্রতিকৃতি (তীর) এবং ভূদৃশ্য (তীর) উভয় অভিক্ষেপে লেজটি কেমন দেখাচ্ছে তা লক্ষ্য করুন। (B) শুক্রাণুর মাথা (তীর) লেজের (তীর) সাথে সংযুক্ত। (C) বেশ কয়েকটি শুক্রাণুর লেজ (তীর) সংযুক্ত। (D) আঠালো উপাদান (AS, নীল) চারটি শুক্রাণুর মাথা (বেগুনি) সংযুক্ত করে।
স্ক্যানিং ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে শুক্রাণুর মাথা সনাক্ত করা হয়েছিল, যেখানে স্রাব বা ঝিল্লি দ্বারা আবৃত শুক্রাণুর বান্ডিলগুলি (চিত্র 6B) ছিল, যা ইঙ্গিত করে যে শুক্রাণুর বান্ডিলগুলি বহির্কোষীয় উপাদান দ্বারা নোঙ্গর করা হয়েছিল। সংশ্লেষিত উপাদানটি শুক্রাণুর মাথায় (জেলিফিশের মাথার মতো সমাবেশ; চিত্র 5B) ঘনীভূত ছিল এবং দূরবর্তীভাবে প্রসারিত হয়েছিল, অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগ দিলে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির অধীনে একটি উজ্জ্বল হলুদ চেহারা দেয় (চিত্র 6C)। এই পদার্থটি স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপের নীচে স্পষ্টভাবে দৃশ্যমান এবং এটি একটি বাইন্ডার হিসাবে বিবেচিত হয়। আধা-পাতলা অংশ (চিত্র 5C) এবং অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগযুক্ত শুক্রাণুর দাগগুলিতে ঘন প্যাক করা মাথা এবং কুঁচকানো লেজযুক্ত শুক্রাণুর বান্ডিল দেখা গেছে (চিত্র 5D)।
বিভিন্ন পদ্ধতি ব্যবহার করে শুক্রাণুর মাথা এবং ভাঁজ করা লেজের সমষ্টি দেখানো বিভিন্ন ফটোমাইক্রোগ্রাফ। (A) একটি শুক্রাণুর বান্ডিলের ক্রস-সেকশনাল ডিজিটাল কালার ট্রান্সমিশন ইলেকট্রন মাইক্রোগ্রাফ যেখানে দুটি অংশের নিউক্লিয়াস (নীল) এবং বেশ কয়েকটি ফ্ল্যাজেলার অংশ (সবুজ) সহ একটি কুণ্ডলীকৃত শুক্রাণুর মাথা দেখানো হয়েছে। (B) ডিজিটাল কালার স্ক্যানিং ইলেকট্রন মাইক্রোগ্রাফ যেখানে জেলিফিশের মতো শুক্রাণুর মাথা (তীর) দেখা যাচ্ছে যা ঢাকা আছে। (C) আধা-পাতলা অংশ যেখানে সমষ্টিগত শুক্রাণুর মাথা (তীর) এবং কুঁচকানো লেজ (তীর) দেখা যাচ্ছে। (D) অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগযুক্ত একটি শুক্রাণুর দাগের মাইক্রোগ্রাফ যেখানে শুক্রাণুর মাথা (তীর) এবং কুঁচকানো লেজের (তীর) দেখা যাচ্ছে। লক্ষ্য করুন যে একটি আঠালো পদার্থ (S) শুক্রাণুর মাথা ঢেকে রেখেছে। (D) × 1000 বিবর্ধন।
ট্রান্সমিশন ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি (চিত্র 7A) ব্যবহার করে, এটিও লক্ষ্য করা গেছে যে শুক্রাণুর মাথাগুলি পেঁচানো ছিল এবং নিউক্লিয়াসের একটি সর্পিল আকৃতি ছিল, যা অ্যাক্রিডিন কমলা দিয়ে দাগযুক্ত শুক্রাণুর স্মিয়ার দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছে এবং ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি (চিত্র 7B) ব্যবহার করে পরীক্ষা করা হয়েছে।
(A) ডিজিটাল রঙিন ট্রান্সমিশন ইলেকট্রন মাইক্রোগ্রাফ এবং (B) অ্যাক্রিডিন কমলা রঙের শুক্রাণুর দাগ যা কুণ্ডলীকৃত মাথা এবং শুক্রাণুর মাথা এবং লেজের সংযুক্তি (তীর) দেখায়। (B) × 1000 বিবর্ধন।
একটি আকর্ষণীয় আবিষ্কার হল যে শারকাজির শুক্রাণু একত্রিত হয়ে মোবাইল ফিলামেন্টাস বান্ডিল তৈরি করে। এই বান্ডিলগুলির বৈশিষ্ট্যগুলি আমাদের SST-তে শুক্রাণু শোষণ এবং সংরক্ষণে তাদের সম্ভাব্য ভূমিকা বুঝতে সাহায্য করে।
মিলনের পর, শুক্রাণু যোনিতে প্রবেশ করে এবং একটি তীব্র নির্বাচন প্রক্রিয়ার মধ্য দিয়ে যায়, যার ফলে SST15,16 তে সীমিত সংখ্যক শুক্রাণু প্রবেশ করে। আজ পর্যন্ত, শুক্রাণু SST-তে প্রবেশ এবং প্রস্থান করার প্রক্রিয়াগুলি অস্পষ্ট। হাঁস-মুরগির ক্ষেত্রে, প্রজাতির উপর নির্ভর করে শুক্রাণু 2 থেকে 10 সপ্তাহের বর্ধিত সময়ের জন্য SST-তে সংরক্ষণ করা হয়। SST-তে সংরক্ষণের সময় বীর্যের অবস্থা নিয়ে বিতর্ক রয়ে গেছে। তারা কি গতিশীল নাকি বিশ্রামে? অন্য কথায়, শুক্রাণু কোষগুলি এতক্ষণ SST-তে তাদের অবস্থান কীভাবে বজায় রাখে?
Forman4 পরামর্শ দিয়েছেন যে SST বাসস্থান এবং নির্গমনকে শুক্রাণুর গতিশীলতার পরিপ্রেক্ষিতে ব্যাখ্যা করা যেতে পারে। লেখকরা অনুমান করেছেন যে SST এপিথেলিয়াম দ্বারা সৃষ্ট তরল প্রবাহের বিরুদ্ধে সাঁতার কেটে শুক্রাণু তাদের অবস্থান বজায় রাখে এবং শক্তির অভাবের কারণে যখন শুক্রাণুগুলি পিছনের দিকে সরে যেতে শুরু করে তখন তাদের বেগ SST থেকে বেরিয়ে যায়। Zaniboni5 SST এপিথেলিয়াম কোষের শীর্ষ অংশে অ্যাকোয়াপোরিন 2, 3 এবং 9 এর উপস্থিতি নিশ্চিত করেছে, যা পরোক্ষভাবে ফোরম্যানের শুক্রাণু সঞ্চয় মডেলকে সমর্থন করতে পারে। বর্তমান গবেষণায়, আমরা দেখেছি যে শার্কশির শুক্রাণুর প্রায় অর্ধেক প্রবাহিত তরলে ইতিবাচক রিওলজি দেখায় এবং সমষ্টিগত শুক্রাণু বান্ডিলগুলি ইতিবাচক রিওলজি দেখানো শুক্রাণুর সংখ্যা বৃদ্ধি করে, যদিও সমষ্টিগতকরণ তাদের ধীর করে দেয়। শুক্রাণু কোষগুলি কীভাবে পাখির ফ্যালোপিয়ান টিউব থেকে নিষেকের স্থানে ভ্রমণ করে তা সম্পূর্ণরূপে বোঝা যায় না। স্তন্যপায়ী প্রাণীদের মধ্যে, ফলিকুলার তরল কেমো শুক্রাণুকে আকর্ষণ করে। তবে, কেমোঅ্যাট্র্যাক্ট্যান্ট শুক্রাণুকে দীর্ঘ দূরত্বে পৌঁছানোর জন্য নির্দেশ করে বলে বিশ্বাস করা হয়। অতএব, শুক্রাণু পরিবহনের জন্য অন্যান্য প্রক্রিয়া দায়ী। মিলনের পরে নির্গত ফ্যালোপিয়ান টিউব তরলের বিরুদ্ধে শুক্রাণুর অভিমুখ এবং প্রবাহিত হওয়ার ক্ষমতা ইঁদুরের শুক্রাণুকে লক্ষ্য করার ক্ষেত্রে একটি প্রধান কারণ বলে জানা গেছে। পার্কার 17 পরামর্শ দিয়েছিলেন যে পাখি এবং সরীসৃপের সিলিয়ারি স্রোতের বিরুদ্ধে সাঁতার কেটে শুক্রাণু ডিম্বাশয় অতিক্রম করে। যদিও পাখিদের ক্ষেত্রে এটি পরীক্ষামূলকভাবে প্রদর্শিত হয়নি, অ্যাডলফি 18 প্রথম আবিষ্কার করেছিলেন যে ফিল্টার পেপারের একটি স্ট্রিপ দিয়ে কভারস্লিপ এবং স্লাইডের মধ্যে তরলের একটি পাতলা স্তর তৈরি করা হলে এভিয়ান শুক্রাণু ইতিবাচক ফলাফল দেয়। রিওলজি। হিনো এবং ইয়ানাগিমাচি [19] একটি পারফিউশন রিংয়ে একটি ইঁদুরের ডিম্বাশয়-টিউবাল-জরায়ু জটিল স্থাপন করেছিলেন এবং ফ্যালোপিয়ান টিউবে তরল প্রবাহ কল্পনা করার জন্য ইস্থমাসে 1 µl কালি ইনজেকশন করেছিলেন। তারা ফ্যালোপিয়ান টিউবে সংকোচন এবং শিথিলতার একটি খুব সক্রিয় আন্দোলন লক্ষ্য করেছিলেন, যেখানে সমস্ত কালি বল ফ্যালোপিয়ান টিউবের অ্যাম্পুলার দিকে স্থিরভাবে এগিয়ে যাচ্ছিল। লেখকরা শুক্রাণু উত্থান এবং নিষেকের জন্য নীচের ফ্যালোপিয়ান টিউব থেকে উপরের ফ্যালোপিয়ান টিউবে টিউবাল তরল প্রবাহের গুরুত্বের উপর জোর দিয়েছেন। ব্রিলার্ড২০ রিপোর্ট করেছেন যে মুরগি এবং টার্কির ক্ষেত্রে, শুক্রাণুগুলি যোনি প্রবেশদ্বার থেকে সক্রিয় চলাচলের মাধ্যমে জরায়ু-যোনি সংযোগস্থলে স্থানান্তরিত হয়, যেখানে তারা সংরক্ষণ করা হয়। তবে, জরায়ু-যোনি সংযোগস্থল এবং ইনফান্ডিবুলামের মধ্যে এই চলাচলের প্রয়োজন হয় না কারণ শুক্রাণুগুলি নিষ্ক্রিয় স্থানচ্যুতি দ্বারা পরিবহন করা হয়। পূর্ববর্তী এই সুপারিশগুলি এবং বর্তমান গবেষণায় প্রাপ্ত ফলাফলগুলি জেনে, এটি ধরে নেওয়া যেতে পারে যে শুক্রাণুর উপরের দিকে যাওয়ার ক্ষমতা (রিওলজি) এমন একটি বৈশিষ্ট্য যার উপর ভিত্তি করে নির্বাচন প্রক্রিয়াটি তৈরি করা হয়। এটি যোনি দিয়ে শুক্রাণুর উত্তরণ এবং সংরক্ষণের জন্য সিসিটিতে তাদের প্রবেশ নির্ধারণ করে। যেমনটি Forman4 পরামর্শ দিয়েছেন, এটি শুক্রাণুর SST এবং তার আবাসস্থলে কিছু সময়ের জন্য প্রবেশ এবং তারপর যখন তাদের গতি ধীর হতে শুরু করে তখন বেরিয়ে যাওয়ার প্রক্রিয়াটিকেও সহজতর করতে পারে।
অন্যদিকে, মাতসুজাকি এবং সাসানামি ২১ পরামর্শ দিয়েছেন যে, পাখির শুক্রাণু পুরুষ ও মহিলাদের প্রজননতন্ত্রে সুপ্ত অবস্থা থেকে গতিশীলতায় পরিবর্তিত হয়। শুক্রাণুর দীর্ঘ সঞ্চয় সময় এবং তারপর SST ত্যাগ করার পর পুনরুজ্জীবিত হওয়ার ব্যাখ্যা দেওয়ার জন্য SST-তে আবাসিক শুক্রাণুর গতিশীলতার বাধা প্রস্তাব করা হয়েছে। হাইপোক্সিক পরিস্থিতিতে, মাতসুজাকি এবং অন্যান্যরা SST-তে ল্যাকটেটের উচ্চ উৎপাদন এবং মুক্তির কথা জানিয়েছেন, যা আবাসিক শুক্রাণুর গতিশীলতাকে বাধাগ্রস্ত করতে পারে। এই ক্ষেত্রে, শুক্রাণুর রিওলজির গুরুত্ব শুক্রাণু নির্বাচন এবং শোষণের মাধ্যমে প্রতিফলিত হয়, তাদের সংরক্ষণের মাধ্যমে নয়।
SST-তে শুক্রাণুর দীর্ঘ সঞ্চয়কাল ধরে রাখার জন্য শুক্রাণু সংযোজন প্যাটার্নকে একটি যুক্তিসঙ্গত ব্যাখ্যা হিসেবে বিবেচনা করা হয়, কারণ এটি মুরগির ক্ষেত্রে শুক্রাণু ধারণের একটি সাধারণ ধরণ। Bakst et al. 2 পর্যবেক্ষণ করেছেন যে বেশিরভাগ শুক্রাণু একে অপরের সাথে লেগে থাকে, ফ্যাসিকুলার সমষ্টি তৈরি করে এবং একক শুক্রাণু কোয়েল CCM-তে খুব কমই পাওয়া যায়। অন্যদিকে, Wen et al. 24 মুরগির SST লুমেনে আরও বিক্ষিপ্ত শুক্রাণু এবং কম শুক্রাণু টাফ্ট লক্ষ্য করেছেন। এই পর্যবেক্ষণের উপর ভিত্তি করে, এটি অনুমান করা যেতে পারে যে শুক্রাণু সংযোজনের প্রবণতা পাখির মধ্যে এবং একই বীর্যপাতের শুক্রাণুর মধ্যে ভিন্ন। উপরন্তু, ভ্যান ক্রে et al. 9 পরামর্শ দিয়েছেন যে সংযোজিত শুক্রাণুর এলোমেলো বিচ্ছিন্নতা ফ্যালোপিয়ান টিউবের লুমেনে শুক্রাণুর ধীরে ধীরে প্রবেশের জন্য দায়ী। এই অনুমান অনুসারে, কম সংযোজন ক্ষমতা সম্পন্ন শুক্রাণুকে প্রথমে SST থেকে বের করে দেওয়া উচিত। এই প্রেক্ষাপটে, শুক্রাণুর সংমিশ্রণ ক্ষমতা নোংরা পাখিদের মধ্যে শুক্রাণু প্রতিযোগিতার ফলাফলকে প্রভাবিত করার একটি কারণ হতে পারে। এছাড়াও, সংমিশ্রিত শুক্রাণু যত বেশি সময় ধরে বিচ্ছিন্ন হয়, তত বেশি সময় ধরে উর্বরতা বজায় থাকে।
যদিও বেশ কয়েকটি গবেষণায় শুক্রাণু জড়োকরণ এবং বান্ডিলে একত্রিতকরণ লক্ষ্য করা গেছে2,22,24, তবুও SST-এর মধ্যে তাদের গতিগত পর্যবেক্ষণের জটিলতার কারণে তাদের বিস্তারিতভাবে বর্ণনা করা হয়নি। ভিট্রোতে শুক্রাণু জড়োকরণ অধ্যয়নের জন্য বেশ কয়েকটি প্রচেষ্টা করা হয়েছে। ঝুলন্ত বীজের ফোঁটা থেকে পাতলা তারটি সরানোর সময় ব্যাপক কিন্তু ক্ষণস্থায়ী জড়োকরণ লক্ষ্য করা গেছে। এর ফলে ফোঁটা থেকে একটি দীর্ঘায়িত বুদবুদ বেরিয়ে আসে, যা সেমিনাল গ্রন্থির অনুকরণ করে। 3D সীমাবদ্ধতা এবং সংক্ষিপ্ত ড্রিপ শুকানোর সময়ের কারণে, পুরো ব্লকটি দ্রুত নষ্ট হয়ে যায়9। বর্তমান গবেষণায়, শার্কশি মুরগি এবং মাইক্রোফ্লুইডিক চিপ ব্যবহার করে, আমরা এই টাফ্টগুলি কীভাবে তৈরি হয় এবং কীভাবে তারা চলাচল করে তা বর্ণনা করতে সক্ষম হয়েছি। বীর্য সংগ্রহের পরপরই শুক্রাণু বান্ডিল তৈরি হয় এবং একটি সর্পিল আকারে চলাচল করতে দেখা যায়, প্রবাহে উপস্থিত থাকাকালীন ইতিবাচক রিওলজি দেখায়। তদুপরি, ম্যাক্রোস্কোপিকভাবে দেখা গেলে, বিচ্ছিন্ন শুক্রাণুর তুলনায় শুক্রাণু বান্ডিলগুলি গতিশীলতার রৈখিকতা বৃদ্ধি করতে দেখা গেছে। এটি ইঙ্গিত দেয় যে SST অনুপ্রবেশের আগে শুক্রাণু সংযোজন ঘটতে পারে এবং পূর্বে যেমন পরামর্শ দেওয়া হয়েছিল (টিঙ্গারি এবং লেক 12) চাপের কারণে শুক্রাণু উৎপাদন একটি ছোট অঞ্চলে সীমাবদ্ধ নয়। টাফ্ট গঠনের সময়, শুক্রাণুগুলি সমলয়ভাবে সাঁতার কাটে যতক্ষণ না তারা একটি সংযোগস্থল তৈরি করে, তারপর তাদের লেজ একে অপরের চারপাশে জড়িয়ে যায় এবং শুক্রাণুর মাথা মুক্ত থাকে, তবে শুক্রাণুর লেজ এবং দূরবর্তী অংশ একটি আঠালো পদার্থের সাথে একসাথে লেগে থাকে। অতএব, লিগামেন্টের মুক্ত মাথাটি চলাচলের জন্য দায়ী, লিগামেন্টের বাকি অংশটিকে টেনে নিয়ে যায়। শুক্রাণু বান্ডিলগুলির ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি স্ক্যান করার সময় সংযুক্ত শুক্রাণুর মাথাগুলি প্রচুর আঠালো পদার্থ দিয়ে আবৃত দেখা যায়, যা ইঙ্গিত করে যে শুক্রাণুর মাথাগুলি বিশ্রামের বান্ডিলে সংযুক্ত ছিল, যা স্টোরেজ সাইটে (SST) পৌঁছানোর পরে ঘটে থাকতে পারে।
যখন শুক্রাণুর স্মিয়ারে অ্যাক্রিডিন কমলা রঙ দেওয়া হয়, তখন শুক্রাণু কোষের চারপাশের বহির্কোষীয় আঠালো উপাদান ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপের নীচে দেখা যায়। এই পদার্থ শুক্রাণুর বান্ডিলগুলিকে আশেপাশের যেকোনো পৃষ্ঠ বা কণার সাথে লেগে থাকতে এবং আটকে থাকতে সাহায্য করে যাতে তারা আশেপাশের প্রবাহের সাথে ভেসে না যায়। সুতরাং, আমাদের পর্যবেক্ষণগুলি স্পার্মাটোজোয়া আনুগত্যের ভূমিকা মোবাইল বান্ডিলের আকারে দেখায়। স্রোতের বিপরীতে সাঁতার কাটা এবং কাছাকাছি পৃষ্ঠের সাথে লেগে থাকার ক্ষমতা শুক্রাণুকে SST-তে বেশিক্ষণ থাকতে সাহায্য করে।
Rothschild25 একটি হিমোসাইটোমেট্রি ক্যামেরা ব্যবহার করে সাসপেনশনের ফোঁটায় গরুর বীর্যের ভাসমান বন্টন অধ্যয়ন করে, মাইক্রোস্কোপের উল্লম্ব এবং অনুভূমিক উভয় অপটিক্যাল অক্ষের ক্যামেরার মাধ্যমে ফটোমাইক্রোগ্রাফ গ্রহণ করে। ফলাফলগুলি দেখায় যে শুক্রাণুগুলি চেম্বারের পৃষ্ঠের দিকে আকৃষ্ট হয়েছিল। লেখকরা পরামর্শ দিয়েছেন যে শুক্রাণু এবং পৃষ্ঠের মধ্যে হাইড্রোডাইনামিক মিথস্ক্রিয়া থাকতে পারে। এটি বিবেচনায় নিয়ে, শার্কশি মুরগির বীর্যের আঠালো টুফ্ট তৈরির ক্ষমতার সাথে সাথে, এটি SST প্রাচীরের সাথে বীর্য লেগে থাকার এবং দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণের সম্ভাবনা বাড়িয়ে তুলতে পারে।
Bccetti এবং Afzeliu26 রিপোর্ট করেছেন যে গ্যামেট স্বীকৃতি এবং সংযোজনের জন্য শুক্রাণু গ্লাইকোক্যালিক্স প্রয়োজন। Forman10 পর্যবেক্ষণ করেছেন যে নিউরামিনিডেস দিয়ে পাখির বীর্যকে চিকিত্সা করে গ্লাইকোপ্রোটিন-গ্লাইকোলিপিড আবরণে α-গ্লাইকোসিডিক বন্ধনের হাইড্রোলাইসিসের ফলে শুক্রাণুর গতিশীলতা প্রভাবিত না করেই উর্বরতা হ্রাস পেয়েছে। লেখকরা পরামর্শ দিয়েছেন যে গ্লাইকোক্যালিক্সের উপর নিউরামিনিডেসের প্রভাব জরায়ু-যোনি সংযোগস্থলে শুক্রাণু সংরক্ষণকে ব্যাহত করে, যার ফলে উর্বরতা হ্রাস পায়। তাদের পর্যবেক্ষণগুলি এই সম্ভাবনাকে উপেক্ষা করতে পারে না যে নিউরামিনিডেস চিকিত্সা শুক্রাণু এবং oocyte স্বীকৃতি হ্রাস করতে পারে। Forman এবং Engel10 দেখেছেন যে নিউরামিনিডেস দিয়ে চিকিত্সা করা বীর্য দিয়ে মুরগিকে যোনিপথে গর্ভধারণ করা হলে উর্বরতা হ্রাস পায়। তবে, নিউরামিনিডেস দিয়ে চিকিত্সা করা শুক্রাণু সহ IVF নিয়ন্ত্রণ মুরগির তুলনায় উর্বরতা প্রভাবিত করে না। লেখকরা উপসংহারে পৌঁছেছেন যে শুক্রাণু পর্দার চারপাশে গ্লাইকোপ্রোটিন-গ্লাইকোলিপিড আবরণের পরিবর্তন শুক্রাণুর নিষিক্তকরণ ক্ষমতা হ্রাস করে, যার ফলে জরায়ু-যোনি সংযোগস্থলে শুক্রাণুর সংকোচন ব্যাহত হয়, যার ফলে জরায়ু-যোনি সংযোগের গতির কারণে শুক্রাণু ক্ষয় বৃদ্ধি পায়, কিন্তু শুক্রাণু এবং ডিম্বাণু সনাক্তকরণকে প্রভাবিত করে না।
টার্কির ক্ষেত্রে বাকস্ট এবং বাউচান ১১ জন SST-এর লুমেনে ছোট ছোট ভেসিকেল এবং ঝিল্লির টুকরো খুঁজে পেয়েছেন এবং পর্যবেক্ষণ করেছেন যে এই কণিকাগুলির কিছু শুক্রাণু ঝিল্লির সাথে মিশে গেছে। লেখকরা পরামর্শ দিয়েছেন যে এই সম্পর্কগুলি SST-তে শুক্রাণুর দীর্ঘমেয়াদী সঞ্চয়ে অবদান রাখতে পারে। তবে, গবেষকরা এই কণাগুলির উৎস নির্দিষ্ট করেননি, এগুলি CCT এপিথেলিয়াল কোষ দ্বারা নিঃসৃত হয় কিনা, পুরুষ প্রজনন ব্যবস্থা দ্বারা উৎপাদিত এবং নিঃসৃত হয় কিনা, নাকি শুক্রাণু নিজেই উৎপাদিত হয়। এছাড়াও, এই কণাগুলি সংশ্লেষণের জন্য দায়ী। গ্রুটজনার এবং অন্যান্য ২৭ রিপোর্ট করেছেন যে এপিডিডাইমাল এপিথেলিয়াল কোষগুলি একটি নির্দিষ্ট প্রোটিন তৈরি এবং নিঃসরণ করে যা একক-ছিদ্র সেমিনাল ট্র্যাক্ট গঠনের জন্য প্রয়োজনীয়। লেখকরা আরও রিপোর্ট করেছেন যে এই বান্ডিলগুলির বিচ্ছুরণ এপিডিডাইমাল প্রোটিনের মিথস্ক্রিয়ার উপর নির্ভর করে। নিক্সন এবং অন্যান্য ২৮ আবিষ্কার করেছেন যে অ্যাডনেক্সা একটি প্রোটিন, অ্যাসিডিক সিস্টাইন-সমৃদ্ধ অস্টিওনেকটিন নিঃসরণ করে; SPARC ছোট ঠোঁটযুক্ত ইকিডনা এবং প্লাটিপাসে শুক্রাণুর টাফ্ট গঠনে জড়িত। এই রশ্মির বিচ্ছুরণ এই প্রোটিনের ক্ষতির সাথে সম্পর্কিত।
বর্তমান গবেষণায়, ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে অতি-কাঠামোগত বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে শুক্রাণু প্রচুর পরিমাণে ঘন পদার্থের সাথে লেগে থাকে। এই পদার্থগুলিকে আঠালো মাথার মধ্যে এবং চারপাশে ঘনীভূত হওয়ার জন্য দায়ী বলে মনে করা হয়, কিন্তু লেজ অঞ্চলে কম ঘনত্বে। আমরা ধরে নিই যে এই আঠালো পদার্থটি বীর্যের সাথে পুরুষ প্রজনন ব্যবস্থা (এপিডিডাইমিস বা ভাস ডিফারেন্স) থেকে নির্গত হয়, কারণ আমরা প্রায়শই বীর্যপাতের সময় লিম্ফ এবং সেমিনাল প্লাজমা থেকে পৃথক হতে দেখি। জানা গেছে যে এভিয়ান স্পার্মাটোজোয়া এপিডিডাইমিস এবং ভাস ডিফারেন্সের মধ্য দিয়ে যাওয়ার সময়, তারা পরিপক্কতা-সম্পর্কিত পরিবর্তনের মধ্য দিয়ে যায় যা প্রোটিনকে আবদ্ধ করার এবং প্লাজমা লেমা-সম্পর্কিত গ্লাইকোপ্রোটিন অর্জনের ক্ষমতাকে সমর্থন করে। SST-তে আবাসিক শুক্রাণু ঝিল্লিতে এই প্রোটিনগুলির স্থায়িত্ব ইঙ্গিত দেয় যে এই প্রোটিনগুলি শুক্রাণু ঝিল্লির স্থিতিশীলতা 30 অর্জনকে প্রভাবিত করতে পারে এবং তাদের উর্বরতা 31 নির্ধারণ করতে পারে। আহম্মদ ও অন্যান্যরা রিপোর্ট করেছেন যে পুরুষ প্রজনন ব্যবস্থার বিভিন্ন অংশ (অণ্ডকোষ থেকে দূরবর্তী ভাস ডিফারেন্স পর্যন্ত) থেকে প্রাপ্ত শুক্রাণু তরল সংরক্ষণের পরিস্থিতিতে, সংরক্ষণের তাপমাত্রা নির্বিশেষে, কার্যক্ষমতার ক্রমবর্ধমান বৃদ্ধি দেখিয়েছে এবং কৃত্রিম গর্ভধারণের পরে ফ্যালোপিয়ান টিউবেও মুরগির কার্যক্ষমতা বৃদ্ধি পায়।
শার্কশি মুরগির শুক্রাণু টুফটের বৈশিষ্ট্য এবং কার্যকারিতা অন্যান্য প্রজাতির যেমন ইকিডনা, প্লাটিপাস, কাঠের ইঁদুর, হরিণ ইঁদুর এবং গিনিপিগের তুলনায় ভিন্ন। শার্কশি মুরগির ক্ষেত্রে, শুক্রাণু বান্ডিল গঠন একক শুক্রাণুর তুলনায় তাদের সাঁতারের গতি কমিয়ে দেয়। তবে, এই বান্ডিলগুলি রিওলজিক্যালি পজিটিভ শুক্রাণুর শতাংশ বৃদ্ধি করে এবং গতিশীল পরিবেশে শুক্রাণুর নিজেদের স্থিতিশীল করার ক্ষমতা বৃদ্ধি করে। এইভাবে, আমাদের ফলাফল পূর্ববর্তী পরামর্শকে নিশ্চিত করে যে SST-তে শুক্রাণু সংযোজন দীর্ঘমেয়াদী শুক্রাণু সঞ্চয়ের সাথে সম্পর্কিত। আমরা আরও অনুমান করি যে শুক্রাণুর টাফ্ট গঠনের প্রবণতা SST-তে শুক্রাণু হ্রাসের হার নিয়ন্ত্রণ করতে পারে, যা শুক্রাণু প্রতিযোগিতার ফলাফলকে পরিবর্তন করতে পারে। এই অনুমান অনুসারে, কম সংযোজন ক্ষমতা সম্পন্ন শুক্রাণু প্রথমে SST ছেড়ে দেয়, যখন উচ্চ সংযোজন ক্ষমতা সম্পন্ন শুক্রাণু বেশিরভাগ সন্তান উৎপাদন করে। একক-ছিদ্রযুক্ত শুক্রাণু বান্ডিল গঠন উপকারী এবং পিতামাতা-সন্তানের অনুপাতকে প্রভাবিত করে, তবে একটি ভিন্ন প্রক্রিয়া ব্যবহার করে। ইকিডনা এবং প্লাটিপাসে, শুক্রাণুগুলি একে অপরের সমান্তরালভাবে সাজানো থাকে যাতে রশ্মির সামনের গতি বৃদ্ধি পায়। ইকিডনার গুচ্ছগুলি একক শুক্রাণুর চেয়ে প্রায় তিনগুণ দ্রুত গতিতে চলে। এটা বিশ্বাস করা হয় যে ইকিডনাগুলিতে এই ধরণের শুক্রাণুর গুচ্ছ গঠন আধিপত্য বজায় রাখার জন্য একটি বিবর্তনীয় অভিযোজন, কারণ স্ত্রীরা অশ্লীল এবং সাধারণত একাধিক পুরুষের সাথে সঙ্গম করে। অতএব, বিভিন্ন বীর্যপাতের শুক্রাণু ডিম্বাণুর নিষেকের জন্য তীব্র প্রতিযোগিতা করে।
শারকাসি মুরগির অ্যাগ্লুটিনেটেড স্পার্মাটোজোয়া ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে সহজেই কল্পনা করা যায়, যা সুবিধাজনক বলে মনে করা হয় কারণ এটি ইন ভিট্রোতে শুক্রাণুর আচরণের সহজ অধ্যয়নের সুযোগ দেয়। শারকাসি মুরগিতে শুক্রাণুর টুফ্ট গঠনের প্রক্রিয়াটি কিছু প্লাসেন্টাল স্তন্যপায়ী প্রাণীর মধ্যে দেখা যায় যা কাঠের ইঁদুরের মতো সহযোগিতামূলক শুক্রাণু আচরণের প্রতিনিধিত্ব করে, যেখানে কিছু শুক্রাণু ডিমে পৌঁছায়, অন্যান্য সম্পর্কিত ব্যক্তিদের তাদের ডিমে পৌঁছাতে এবং ক্ষতি করতে সাহায্য করে। নিজেকে প্রমাণ করার জন্য। পরোপকারী আচরণ। স্ব-নিষেক 34. শুক্রাণুতে সহযোগিতামূলক আচরণের আরেকটি উদাহরণ হরিণ ইঁদুরের মধ্যে পাওয়া গেছে, যেখানে শুক্রাণু সবচেয়ে জিনগতভাবে সম্পর্কিত শুক্রাণু সনাক্ত করতে এবং তাদের সাথে একত্রিত হতে সক্ষম হয়েছিল এবং সম্পর্কহীন শুক্রাণুর তুলনায় তাদের গতি বাড়ানোর জন্য সমবায় গোষ্ঠী গঠন করতে সক্ষম হয়েছিল35।
এই গবেষণায় প্রাপ্ত ফলাফলগুলি SWS-তে শুক্রাণুর দীর্ঘমেয়াদী সঞ্চয়ের ফোম্যানের তত্ত্বের বিরোধিতা করে না। গবেষকরা জানিয়েছেন যে শুক্রাণু কোষগুলি দীর্ঘ সময়ের জন্য SST-এর আস্তরণে থাকা এপিথেলিয়াল কোষগুলির প্রবাহে চলতে থাকে এবং একটি নির্দিষ্ট সময়ের পরে, শুক্রাণু কোষগুলির শক্তি সঞ্চয় হ্রাস পায়, যার ফলে গতি হ্রাস পায়, যা ছোট আণবিক ওজনের পদার্থগুলিকে বহিষ্কার করতে দেয়। SST-এর লুমেন থেকে তরল প্রবাহের সাথে শুক্রাণুর শক্তি ফ্যালোপিয়ান টিউবের গহ্বর। বর্তমান গবেষণায়, আমরা লক্ষ্য করেছি যে একক শুক্রাণুর অর্ধেক প্রবাহিত তরলের বিরুদ্ধে সাঁতার কাটার ক্ষমতা দেখিয়েছে এবং বান্ডিলে তাদের আনুগত্য ইতিবাচক রিওলজি দেখানোর ক্ষমতা বৃদ্ধি করেছে। তদুপরি, আমাদের তথ্য মাতসুজাকি এবং অন্যান্যদের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। 1 যারা রিপোর্ট করেছেন যে SST-তে ল্যাকটেট নিঃসরণ বৃদ্ধি আবাসিক শুক্রাণুর গতিশীলতাকে বাধা দিতে পারে। যাইহোক, আমাদের ফলাফলগুলি SST-তে তাদের আচরণ ব্যাখ্যা করার প্রয়াসে একটি মাইক্রোচ্যানেলের মধ্যে একটি গতিশীল পরিবেশের উপস্থিতিতে শুক্রাণুর গতিশীল লিগামেন্ট গঠন এবং তাদের রিওলজিকাল আচরণ বর্ণনা করে। ভবিষ্যতের গবেষণা হয়তো অ্যাগ্লুটিনেটিং এজেন্টের রাসায়নিক গঠন এবং উৎপত্তি নির্ধারণের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করতে পারে, যা নিঃসন্দেহে গবেষকদের তরল বীর্য সংরক্ষণ এবং উর্বরতার সময়কাল বৃদ্ধির নতুন উপায় বিকাশে সহায়তা করবে।
গবেষণায় ১৫টি খালি গলার ৩০ সপ্তাহ বয়সী পুরুষ শার্কসি (হোমোজাইগাস ডমিন্যান্ট; না না) কে শুক্রাণু দাতা হিসেবে নির্বাচিত করা হয়েছিল। পাখিগুলিকে মিশরের আশিত গভর্নরেটের আশিত বিশ্ববিদ্যালয়ের কৃষি অনুষদের গবেষণা পোল্ট্রি ফার্মে লালন-পালন করা হয়েছিল। পাখিদের পৃথক খাঁচায় (৩০ x ৪০ x ৪০ সেমি) রাখা হয়েছিল, একটি আলোক প্রোগ্রামের অধীনে রাখা হয়েছিল (১৬ ঘন্টা আলো এবং ৮ ঘন্টা অন্ধকার) এবং ১৬০ গ্রাম অপরিশোধিত প্রোটিন, ২৮০০ কিলোক্যালরি বিপাকীয় শক্তি, ৩৫ গ্রাম ক্যালসিয়ামযুক্ত খাবার খাওয়ানো হয়েছিল। প্রতি কেজি খাবারে ৫ গ্রাম উপলব্ধ ফসফরাস।
তথ্য ৩৬, ৩৭ অনুসারে, পেটের ম্যাসাজের মাধ্যমে পুরুষদের কাছ থেকে বীর্য সংগ্রহ করা হয়েছিল। ৩ দিনে ১৫ জন পুরুষের কাছ থেকে মোট ৪৫টি বীর্য নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। বীর্য (n = ১৫/দিন) তাৎক্ষণিকভাবে ১:১ (v:v) অনুপাতে বেলসভিল পোল্ট্রি বীর্য ডিলুয়েন্ট দিয়ে মিশ্রিত করা হয়েছিল, যার মধ্যে রয়েছে পটাসিয়াম ডাইফসফেট (১.২৭ গ্রাম), মনোসোডিয়াম গ্লুটামেট মনোহাইড্রেট (০.৮৬৭ গ্রাম), ফ্রুক্টোজ (০.৫ ডি) অ্যানহাইড্রাস সোডিয়াম। অ্যাসিটেট (০.৪৩ গ্রাম), ট্রিস (হাইড্রোক্সিমিথাইল) অ্যামিনোমিথেন (০.১৯৫ গ্রাম), পটাসিয়াম সাইট্রেট মনোহাইড্রেট (০.০৬৪ গ্রাম), পটাসিয়াম মনোফসফেট (০.০৬৫ গ্রাম), ম্যাগনেসিয়াম ক্লোরাইড (০.০৩৪ গ্রাম) এবং H2O (১০০ মিলি), pH = ৭, ৫, অসমোলারিটি ৩৩৩ mOsm/kg৩৮। পাতলা বীর্যের নমুনাগুলি প্রথমে হালকা মাইক্রোস্কোপের নীচে পরীক্ষা করা হয়েছিল যাতে বীর্যের গুণমান (আর্দ্রতা) ভালো থাকে এবং তারপর সংগ্রহের আধ ঘন্টার মধ্যে ব্যবহার না করা পর্যন্ত 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে জলের স্নানে সংরক্ষণ করা হয়।
শুক্রাণুর গতিবিদ্যা এবং রিওলজি মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইসের একটি সিস্টেম ব্যবহার করে বর্ণনা করা হয়েছে। বীর্য নমুনাগুলিকে বেল্টসভিল এভিয়ান বীর্য ডিলুয়েন্টে 1:40 এ আরও পাতলা করা হয়েছিল, একটি মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইসে লোড করা হয়েছিল (নীচে দেখুন), এবং তরল মাধ্যমে শুক্রাণুর গতিশীলতার উপর মাইক্রোফ্লুইডিক্স বৈশিষ্ট্য নির্ধারণের জন্য পূর্বে তৈরি একটি কম্পিউটারাইজড বীর্য বিশ্লেষণ (CASA) সিস্টেম ব্যবহার করে গতিবিদ্যা পরামিতি নির্ধারণ করা হয়েছিল (যান্ত্রিক প্রকৌশল বিভাগ, প্রকৌশল অনুষদ, অ্যাসিউট বিশ্ববিদ্যালয়, মিশর)। প্লাগইনটি ডাউনলোড করা যেতে পারে: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39। বক্ররেখা বেগ (VCL, μm/s), রৈখিক বেগ (VSL, μm/s) এবং গড় ট্র্যাজেক্টোরি বেগ (VAP, μm/s) পরিমাপ করা হয়েছিল। শুক্রাণুর ভিডিওগুলি একটি উল্টানো অপটিকা XDS-3 ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপ (40x অবজেক্টিভ সহ) ব্যবহার করে তোলা হয়েছিল যা একটি Tucson ISH1000 ক্যামেরার সাথে 3 সেকেন্ডের জন্য 30 fps গতিতে সংযুক্ত ছিল। CASA সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে কমপক্ষে তিনটি অঞ্চল এবং প্রতি নমুনায় 500 শুক্রাণুর ট্র্যাজেক্টোরি অধ্যয়ন করুন। রেকর্ড করা ভিডিওটি একটি বাড়িতে তৈরি CASA ব্যবহার করে প্রক্রিয়া করা হয়েছিল। CASA প্লাগ-ইন-এ গতিশীলতার সংজ্ঞা প্রবাহ হারের তুলনায় শুক্রাণুর সাঁতারের গতির উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয় এবং এতে পার্শ্ব-থেকে-পার্শ্ব চলাচলের মতো অন্যান্য পরামিতি অন্তর্ভুক্ত করা হয় না, কারণ এটি তরল প্রবাহে আরও নির্ভরযোগ্য বলে প্রমাণিত হয়েছে। রিওলজিক্যাল গতিকে তরল প্রবাহের দিকের বিপরীতে শুক্রাণু কোষের চলাচল হিসাবে বর্ণনা করা হয়। রিওলজিক্যাল বৈশিষ্ট্যযুক্ত শুক্রাণুগুলিকে গতিশীল শুক্রাণুর সংখ্যা দ্বারা ভাগ করা হয়েছিল; বিশ্রামে থাকা এবং পরিবাহীভাবে চলমান শুক্রাণুগুলিকে গণনা থেকে বাদ দেওয়া হয়েছিল।
ব্যবহৃত সমস্ত রাসায়নিক এলগোমোরিয়া ফার্মাসিউটিক্যালস (কায়রো, মিশর) থেকে প্রাপ্ত, যদি না অন্যথায় উল্লেখ করা হয়। ডিভাইসটি এল-শেরি এট আল 40 দ্বারা বর্ণিত কিছু পরিবর্তন সহ তৈরি করা হয়েছিল। মাইক্রোচ্যানেল তৈরিতে ব্যবহৃত উপকরণগুলির মধ্যে ছিল কাচের প্লেট (হাওয়ার্ড গ্লাস, ওরচেস্টার, এমএ), SU-8-25 নেগেটিভ রেজিস্ট (মাইক্রোকেম, নিউটন, সিএ), ডায়াসিটোন অ্যালকোহল (সিগমা অ্যালড্রিচ, স্টেইনহাইম, জার্মানি), এবং পলিএসিটোন। -184, ডাউ কর্নিং, মিডল্যান্ড, মিশিগান)। নরম লিথোগ্রাফি ব্যবহার করে মাইক্রোচ্যানেল তৈরি করা হয়। প্রথমে, উচ্চ রেজোলিউশনের প্রিন্টারে (প্রিজম্যাটিক, কায়রো, মিশর এবং প্যাসিফিক আর্টস অ্যান্ড ডিজাইন, মার্কহ্যাম, ওএন) কাচের প্লেটগুলিকে সাবস্ট্রেট হিসাবে ব্যবহার করে মাস্টারগুলি তৈরি করা হয়েছিল। প্লেটগুলি অ্যাসিটোন, আইসোপ্রোপ্যানল এবং ডিওনাইজড জলে পরিষ্কার করা হয়েছিল এবং তারপরে স্পিন আবরণ (3000 rpm, 1 মিনিট) দ্বারা SU8-25 এর 20 µm স্তর দিয়ে প্রলেপ দেওয়া হয়েছিল। এরপর SU-8 স্তরগুলিকে আলতো করে শুকানো হয় (65°C, 2 মিনিট এবং 95°C, 10 মিনিট) এবং 50 সেকেন্ডের জন্য UV বিকিরণের সংস্পর্শে আনা হয়। এক্সপোজারের পরে 65°C এবং 95°C তাপমাত্রায় 1 মিনিট এবং 4 মিনিট বেক করুন যাতে উন্মুক্ত SU-8 স্তরগুলিকে ক্রসলিঙ্ক করা যায়, তারপরে 6.5 মিনিটের জন্য ডায়াসিটোন অ্যালকোহলে তৈরি করা হয়। SU-8 স্তরটিকে আরও শক্ত করার জন্য ওয়াফেলগুলিকে (200°C তাপমাত্রায় 15 মিনিট) শক্ত করে বেক করুন।
১০:১ ওজন অনুপাতে মনোমার এবং হার্ডেনার মিশিয়ে PDMS তৈরি করা হয়েছিল, তারপর ভ্যাকুয়াম ডেসিকেটরে গ্যাসমুক্ত করে SU-8 প্রধান ফ্রেমে ঢেলে দেওয়া হয়েছিল। PDMS একটি ওভেনে (১২০°C, ৩০ মিনিট) কিউর করা হয়েছিল, তারপর চ্যানেলগুলি কেটে মাস্টার থেকে আলাদা করা হয়েছিল এবং মাইক্রোচ্যানেলের ইনলেট এবং আউটলেটে টিউবগুলিকে সংযুক্ত করার জন্য ছিদ্র করা হয়েছিল। অবশেষে, অন্যত্র বর্ণিত পোর্টেবল করোনা প্রসেসর (ইলেক্ট্রো-টেকনিক প্রোডাক্টস, শিকাগো, IL) ব্যবহার করে PDMS মাইক্রোচ্যানেলগুলিকে স্থায়ীভাবে মাইক্রোস্কোপ স্লাইডের সাথে সংযুক্ত করা হয়েছিল। এই গবেষণায় ব্যবহৃত মাইক্রোচ্যানেলটির পরিমাপ ২০০ µm × ২০ µm (W × H) এবং লম্বা ৩.৬ সেমি।
মাইক্রোচ্যানেলের অভ্যন্তরে হাইড্রোস্ট্যাটিক চাপ দ্বারা সৃষ্ট তরল প্রবাহ, ইনলেট জলাধারে তরল স্তরকে আউটলেট জলাধারের উচ্চতার পার্থক্য Δh39 এর উপরে বজায় রেখে অর্জন করা হয় (চিত্র 1)।
যেখানে f হল ঘর্ষণ সহগ, যা একটি আয়তক্ষেত্রাকার চ্যানেলে ল্যামিনার প্রবাহের জন্য f = C/Re হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছে, যেখানে C হল চ্যানেলের আকৃতির অনুপাতের উপর নির্ভর করে একটি ধ্রুবক, L হল মাইক্রোচ্যানেলের দৈর্ঘ্য, Vav হল মাইক্রোচ্যানেলের ভিতরের গড় বেগ, Dh হল চ্যানেলের জলবাহী ব্যাস, g হল মাধ্যাকর্ষণ ত্বরণ। এই সমীকরণ ব্যবহার করে, নিম্নলিখিত সমীকরণ ব্যবহার করে গড় চ্যানেল বেগ গণনা করা যেতে পারে: