В вашем браузере в настоящее время отключен Javascript. Некоторые функции этого веб-сайта не будут работать, если JavaScript отключен.
Зарегистрируйтесь, указав свои точные данные и интересующий вас препарат, и мы сопоставим предоставленную вами информацию со статьями в нашей обширной базе данных и немедленно отправим вам копию в формате PDF по электронной почте.
Состав и характеристика наноэмульсии хлоргексидина гидрохлорида как перспективного антибактериального ирриганта корневых каналов: исследования in vitro и ex vivo
作者 Абдельмонем Р., Юнис М.К., Хасан Д.Х., Эль-Сайед Ахмед МАЭГ, Хасаниен Э., Эль-Батути К., Эльфахам А.
Рехаб Абдельмонем, 1 Мона К. Юнис, 1 Доаа Х. Хассан, 1 Мохамед Абд Эль-Гавад Эль-Сайед Ахмед, 2 Эхаб Хассанейн, 3 Карием Эль-Батути, 3 Алаа Эльфахам 31 Наука и технологии, Факультет фармацевтики и промышленной фармации, Университет Миср, Город 6 октября, Египет; 2 Кафедра микробиологии и иммунологии, Факультет фармацевтики, Университет науки и технологии Миср, 6 октября, Египет; 3 Кафедра эндодонтии, Университет Айн-Шамс, Каир, Египет Введение и цель: Хлоргексидина гидрохлорид [Chx.HCl] обладает широким спектром антибактериальной активности, пролонгированным действием и низкой токсичностью, поэтому он рекомендуется в качестве потенциального ирриганта корневых каналов. Целью данного исследования было использование нового состава наноэмульсии Chx.HCl для увеличения проникающей способности, очищающего и антибактериального действия Chx.HCl и использования его в качестве ирриганта корневых каналов. Методы: Наноэмульсии Chx.HCl были приготовлены с использованием двух различных масел: олеиновой кислоты и Labrafil M1944CS, двух поверхностно-активных веществ, Tween 20 и Tween 80, и со-сурфактанта, пропиленгликоля. Постройте псевдотройную фазовую диаграмму, чтобы указать оптимальную систему. Приготовленные составы наноэмульсий были оценены на содержание лекарственного средства, время эмульгирования, диспергируемость, размер капель, высвобождение лекарственного средства in vitro, термодинамическую стабильность, антибактериальную активность in vitro и исследования in vitro выбранных составов. Проникающее, очищающее и антибактериальное действие наноэмульсии Chx.HCl 0,75% и 1,6% было сравнено с обычным размером частиц в качестве ирриганта корневых каналов. Результаты. Выбранная формула — F6 с 2% Labrafil, 12% Tween 80 и 6% пропиленгликоля. Небольшой размер частиц (12,18 нм), короткое время эмульгирования (1,67 секунды) и быстрое растворение через 2 минуты. Было обнаружено, что это термодинамически/физически стабильная система. По сравнению с обычным размером частиц Chx.HCl, более высокая концентрация наноэмульсии Chx.HCl 1,6% показала лучшее проникновение из-за меньшего размера частиц. По сравнению с материалом с обычным размером частиц (2609,56 мкм2), наноэмульсия Chx.HCl 1,6% имеет наименьшую среднюю площадь поверхности остаточного мусора (2001,47 мкм2). Вывод: Наноэмульсионный состав Chx.HCl обладает лучшей очищающей способностью и антибактериальным действием. Он обладает высокоэффективным бактерицидным действием против Enterococcus faecalis, а скорость сокращения бактериальных клеток высокая или полностью уничтожается. Ключевые слова: хлоргексидина гидрохлорид, наноэмульсия, ирригант корневых каналов, проникновение, очищающий эффект, антибактериальный ирригант.
Наноэмульсии, класс эмульсий с размерами капель в диапазоне 50–500 нм, в последние годы привлекают большое внимание благодаря своим уникальным свойствам. Хорошие очищающие свойства, на них не влияет жесткость воды, в большинстве случаев они обладают низкой токсичностью и отсутствием электростатических взаимодействий. 2 Нанотехнология имеет сверхмалый размер частиц, большое отношение площади поверхности к массе и уникальные физико-химические свойства по сравнению с аналогичными объемными продуктами, а также открывает новые перспективы в лечении и профилактике стоматологических инфекций. 3 Хлоргексидина гидрохлорид (Chx.HCl) малорастворим в воде, очень малорастворим в спирте и постепенно окрашивается на свету. 4.5 SH. HCl обладает широким спектром антибактериального действия, пролонгированным действием и низкой токсичностью. Благодаря этим свойствам он также рекомендуется в качестве потенциального ирриганта корневых каналов. Основными преимуществами Chx.HCl являются низкая цитотоксичность, отсутствие запаха и неприятного вкуса. 6-9 Для улучшения дезинфекции корневых каналов использовались несколько типов лазеров. Бактерицидный эффект лазеров зависит от длины волны и энергии, а также от термического воздействия, которое вызывает изменения в клеточной стенке бактерий, что приводит к изменению осмотического градиента вплоть до гибели клеток. Взаимодействие лазеров и ирригаторов корневых каналов открывает новые горизонты в дезинфекции пульпы. 10 Ультразвуковая энергия производит высокие частоты, но низкие амплитуды. Файлы созданы для генерации ультразвуковых колебаний на частотах 25–30 кГц, которые находятся за пределами слухового восприятия человека (>20 кГц). Файлы созданы для генерации ультразвуковых колебаний на частотах 25–30 кГц, которые находятся за пределами слухового восприятия человека (>20 кГц). Файлы определяют динамику ультразвуковых частот 25–30 кГц, которые регулируются за счет дополнительного слухового восприятия человека (> 20 кГц). Файлы созданы для вибрации на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, которые находятся за пределами диапазона человеческого слуха (> 20 кГц).这些文件被设计成在25–30 кГц 的超声波频率下振荡，这超出了人类听觉感知的极限(>20 кГц)。这些文件被设计成在 25–30 кГц Файлы рассчитаны на колебания ультразвуковых частот 25–30 кГц, что создает помехи слуховому восприятию человека (>20 кГц). Файлы рассчитаны на вибрации на ультразвуковых частотах 25-30 кГц, что находится за пределами человеческого слуха (>20 кГц).Они работают в поперечном колебании, устанавливая характерные моды узлов и пучностей по своей длине. Термин «пассивное ультразвуковое орошение» (PUI) представляет собой протокол орошения, при котором никакие инструменты или стенки не соприкасаются с эндодонтическими файлами или инструментами. Во время PUI ультразвуковая энергия передается от вибрирующего файла к ирригационному раствору в корневом канале. Последний может вызывать звуковой поток и кавитацию промывочного агента. 11 На основании вышеприведенных данных считается целесообразным использовать нанотехнологии для оценки улучшенного проникающего и очищающего действия Chx.HCl.
Хлоргексидина гидрохлорид Chx.HCl любезно предоставлен Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Каир, Египет). Лабрафил M 1944 CS (олеоилполиокси-6-глицерид) любезно предоставлен Gattefosse (Сен-Прист, Франция). Твин 20 (полиоксиэтилен (20) сорбитан монолаурат), Твин 80 (полиоксиэтилен (80) сорбитан моноолеат), олеиновая кислота, пропиленгликоль от Gomhorya Company (Каир, Египет)). Удаление некариозных однокорневых зубов для пародонтологического или ортодонтического лечения, кафедра челюстно-лицевых наук, стоматологический факультет, Университет Айн-Шамс, Каир, Египет. Чистая культура Enterococcus faecalis (штамм ATCC 29212), выращенная в бульоне с экстрактом сердца и мозга (BHI) (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Сеул, Корея).
Была изучена растворимость Chx.HCl в различных средах (олеиновая кислота, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, пропиленгликоль и вода). Большой избыток Chx.HCl (50 мг) помещают в центрифужную пробирку и добавляют 5,0 г фазы среды. Смесь встряхивают в вихревом смесителе в течение 15 минут, а затем хранят при комнатной температуре. Через 24 часа нерастворимый осадок препарата в пробирке центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 минут для получения прозрачного супернатанта. Собирают достаточное количество раствора образца и разбавляют его н-бутанолом. Разбавленные образцы фильтруют через фильтровальную бумагу Whatman 102, а затем соответствующим образом разбавляют н-бутанолом для определения концентрации препарата в насыщенном растворе. Образцы анализируют с помощью УФ-спектрофотометра при 260 нм с н-бутанолом в качестве контроля. 12.13
Была построена псевдотройная фазовая диаграмма для определения точного соотношения каждого компонента, необходимого в рецептуре для получения оптимальных параметров идеальной наноэмульсии. 14 Рецептура была составлена ​​с использованием масел (т. е. олеиновой кислоты и Labrafil M1944CS), поверхностно-активных веществ (т. е. Tween 20 и Tween 80) и дополнительного поверхностно-активного вещества, т. е. пропиленгликоля. Сначала были приготовлены отдельные смеси поверхностно-активных веществ (без косурфактантов) и масел в различных объемных соотношениях (от 1:9 до 9:1). Когда смесь титруется водой (добавляя воду по каплям), внимательно следите за смесью от прозрачной до мутной в качестве конечной точки. Эти конечные точки затем отмечаются на псевдотройной фазовой диаграмме. Весь процесс был повторен для смесей поверхностно-активного вещества и вторичного поверхностно-активного вещества (Smix), приготовленных в соотношениях 2:1 и 3:1 и смешанных с выбранными маслами15,16.
Наноэмульсионные системы, содержащие Chx.HCl, были приготовлены с использованием Labrafil M 1944 CS в качестве масляной фазы и поверхностно-активного вещества Tween 80 или 20 и пропиленгликоля в качестве дополнительного поверхностно-активного вещества и, наконец, воды, Таблица 1. Лекарственное средство растворяли в Labrafil M 1944 CS, и смешанную воду поверхностно-активного вещества и вторичного поверхностно-активного вещества добавляли медленно с постепенным перемешиванием. Количество добавленного поверхностно-активного вещества и дополнительного поверхностно-активного вещества, а также процент масляной фазы, который может быть добавлен, определяется с помощью псевдотройной фазовой диаграммы. Ультразвуковой генератор (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Германия) использовался для достижения желаемого диапазона размеров для диспергирования гранул. Затем уравновешивали его. 17
Тестирование диспергируемости проводилось с использованием аппарата для растворения (Dr. Schleuniger Pharmaton, модель Diss 6000, Тун, Швейцария), в котором 1 мл каждого препарата добавляли к 500 мл воды при температуре 37±0,5°C. Мягкое перемешивание обеспечивалось стандартными лопастями для растворения из нержавеющей стали, вращающимися со скоростью 50 об/мин. Полученная эмульсия определялась визуально и классифицировалась как прозрачная, полупрозрачная с голубоватым оттенком, молочная или мутная. Выберите прозрачную формулу для дальнейшего исследования. 18.19
Экстракция Chx.HCl из оптимизированных наноэмульсионных композиций на основе псевдотройной фазовой диаграммы приводит к получению н-бутанола с использованием ультразвуковой технологии. После соответствующего разбавления экстракты анализировались спектрофотометрически при длине волны 260 нм на содержание Chx.HCl. двадцать
Для проверки времени самоэмульгирования 1 мл каждого состава добавляли в стакан, наполненный 250 мл дистиллированной воды и поддерживаемый при температуре 37 ± 1°C при постоянном перемешивании со скоростью 50 об/мин. Время самоэмульгирования принималось как время, в течение которого преконцентрат образует однородную смесь после разбавления. двадцать один
Для анализа размера капель разбавьте 50 мг оптимизированной формулы до 1000 мл водой в колбе и осторожно перемешайте вручную. Распределение размеров капель определялось с помощью прибора Malvern Zetasizer 2000 (Malvern Instruments Ltd., Malvern, UK) в условиях обнаружения обратного рассеяния 173º, температуры 25ºC и показателя преломления 1,330. двадцать два
Исследования растворения in vitro проводились с использованием аппарата USP Type II (лопастной) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) при 50 об/мин. В качестве среды растворения использовалась дистиллированная вода (500 мл), поддерживаемая при температуре 37±0,5°C, и 5 мл приготовленной композиции добавлялись по каплям в среду растворения. Затем через различные промежутки времени отбиралось 5 мл среды растворения и количество высвободившегося препарата определялось спектрофотометрически при 254 нм. Эксперименты проводились в трех повторностях. двадцать три
Затем были измерены кинетические параметры высвобождения Chx.HCl in vitro из наноэмульсий, приготовленных на его основе. Были протестированы кинетика нулевого, первого и второго порядка, а также модели диффузии Хигучи для выбора кинетической последовательности, которая наилучшим образом подходит для высвобождения Chx.HCl.
2 мл каждой формулы хранили при температуре окружающей среды в течение 48 часов, прежде чем наблюдалось разделение фаз. Образцы по 1 мл каждой формулы наноэмульсии Chx.HCl затем разбавляли до 10 мл и 100 мл дистиллированной водой при 25° C и хранили в течение 24 часов. Затем наблюдалось разделение фаз. двадцать один
Затем образцы по 2 мл каждого состава переносили отдельно в прозрачные флаконы с завинчивающейся крышкой и хранили в холодильнике при температуре 2°С в течение 24 часов. Затем их извлекали и хранили при температуре 25°С и 40°С. Проводили один цикл охлаждения-оттаивания. Затем образцы наблюдали на предмет разделения фаз и осаждения лекарственных препаратов. двадцать один
Образец 5 мл каждой наноэмульсии Chx.HCl переносили в стеклянную пробирку и помещали в лабораторную центрифугу (Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800, Шанхай, Китайская Народная Республика) и центрифугировали при 4000 об/мин в течение 5 минут. Затем образцы наблюдали на предмет разделения фаз и осаждения лекарственных средств. двадцать один
Все эксперименты были одобрены Институциональным этическим комитетом Университета Айн-Шамс, Египет. Было отобрано 50 некариозных однокорневых человеческих зубов со сформированной верхушкой. Удаленные зубы использовались после получения письменного информированного согласия, подписанного пациентом. Зубы включают резцы верхней и нижней челюсти и премоляры нижней челюсти. Внешние поверхности корней были обработаны кюреткой, и все зубы были подвергнуты поверхностной стерилизации в 0,5% NaOCl в течение 24 часов, а затем хранились в стерильном физиологическом растворе до использования. Коронку удалили алмазным диском с безопасной стороны, а длину зуба нормализовали до 16 мм от верхушки до коронкового края. 24,25 В зависимости от раствора для полоскания зубы делятся на следующие группы:
(A) Группа (n=24) образцов промывали наноэмульсией Chx.HCl. Подгруппа (I) (n=12) промывала образцы 5 мл наноэмульсии Chx.HCl 0,75% концентрации. Подгруппа (II) (n=12) промывала образцы 5 мл 1,6% наноэмульсии Chx.HCl. (B) Группа (n=24) образцов будет промываться 5 мл 2% Chx.HCl нормального размера частиц. Контрольная группа: (n=2) промывалась 5 мл физиологического раствора без активации.
Были отобраны 44 некариозных однокорневых человеческих зуба со сформированным кончиком. Зубы включают резцы верхней и нижней челюсти и премоляры нижней челюсти. Внешние поверхности корней были обработаны кюреткой, и все зубы были подвергнуты поверхностной стерилизации в 0,5% NaOCl в течение 24 часов, а затем хранились в стерильном физиологическом растворе до использования. Коронки были удалены безопасным алмазным диском, и длина зуба была нормализована до 16 мм от верхушки до коронкового края. 24,25,29
Механическая подготовка основного апикального файла размером 50 с использованием стандартных методов. Используйте стерильный физиологический раствор в качестве ирриганта во время операции. Наконец, корневой канал промывали 2 мл 17% ЭДТА в течение 1 минуты для удаления смазанного слоя. Вся поверхность корня, включая апикальное отверстие каждого образца, была покрыта двумя слоями лака для ногтей (цианоакрилатный клей) для предотвращения утечки. Затем зубы устанавливали вертикально в блок винного камня для удобства обращения и идентификации. 29-33 Затем образцы автоклавировали при 121ºC и 15 фунтах на квадратный дюйм в течение 20 минут. После стерилизации все образцы транспортировали и обрабатывали в стерильных условиях с использованием стерильных инструментов. Корневые каналы были загрязнены чистой культурой Enterococcus faecalis (штамм ATCC 29212), выращенной в бульоне с экстрактом сердца и мозга (BHI) в течение 24 часов при 37°C. Используя стерильную микропипетку, введите прозрачную суспензию инокулята E. faecalis в подготовленные корневые каналы всех зубов. Затем блоки поместили в стерильные стаканы и инкубировали при температуре 37°C в течение 24 часов. 31, 34, 35
(A) Образцы группы (n=24) промывали наноэмульсией Chx.HCl. Образцы подгруппы (I) (n=12) промывали 5 мл наноэмульсии Chx.HCl концентрацией 0,75%. Подгруппа (II) (n = 12) промывала образцы 5 мл наноэмульсии Chx.HCl концентрацией 1,6%.
Контрольная группа: положительный контроль, (n=4) загрязненный корневой канал промывали 5 мл физиологического раствора и сохраняли в качестве положительного контроля. Отрицательный контроль: (n=4) Образцы не были инфицированы суспензией, т. е. корневой канал не был загрязнен E. faecalis и сохранялся стерильным в качестве отрицательного контроля для подтверждения стерилизации и надежности процедуры. Используйте 5 мл тестового промывочного раствора в каждом образце. Затем каждый образец подвергали окончательной промывке 1 мл стерильного физиологического раствора.
Для сбора образцов из корневых каналов используется стерильный бумажный наконечник размера 35. Бумажный наконечник вставлялся в пробирку на рабочую длину, оставлялся на 10 секунд, а затем переносился на агаровые пластины для определения количества колониеобразующих единиц (КОЕ) на пластину. Пластины инкубировались при температуре 37ºC в течение 24 часов, а затем визуально оценивался рост бактерий. Прозрачная пластина показывает полную стерилизацию. Размытые пластины считаются демонстрирующими положительный рост. Определялось среднее количество КОЕ в зоне роста бактерий на чашку и подсчитывалось количество КОЕ. Выжившие в первую очередь измерялись с помощью жизнеспособных подсчетов на капельных пластинах. Кроме того, для подсчета низких КОЕ использовалась проливная чашка, а для подсчета высоких КОЕ использовалось разбавление до 106. 36.37
Подготовьте пробирки, содержащие 15 мл размороженной агаризованной среды, предварительно стерилизованной в автоклаве в тот же день, что и для эксперимента. Enterococcus faecalis является факультативным грамположительным анаэробным кокком, который может выживать при очень высоком pH, кислотности и высоких температурах. 39 Бактериальных образцов (Enterococcus faecalis ATCC 29212) были приготовлены путем смешивания клеток из колоний со стерильным физиологическим раствором. Затем бактериальные образцы были разбавлены физиологическим раствором до соответствия McFarland 0,5, что эквивалентно 108 КОЕ/мл. Объем добавленного образца составил 10 мкл. 39 Стандарт мутности (McFarland 0,5)40 был приготовлен путем заливки 0,6 мл 1% (10 г/л) раствора дигидрата хлорида бария в 100 мл градуированный цилиндр и заполнения до 100 мл 1% (10 г/л) серной кислотой. Стандарты мутности были помещены в те же пробирки, что и образцы бульона, и хранились при комнатной температуре в течение 6 месяцев в темноте и запечатаны для предотвращения испарения. Откройте крышку пустой чашки Петри и вылейте образец в середину чашки. Если агар полностью затвердел, переверните чашку и инкубируйте при температуре 37°C в течение 24 часов.
Все данные были собраны, сведены в таблицу и подвергнуты статистическому анализу. Статистический анализ был выполнен с использованием IBM® SPSS® Statistical Version 17 for Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Армонк, Нью-Йорк, США).
Изучалась растворимость Chx.HCl в различных масляных фазах, растворах поверхностно-активных веществ, растворах со-ПАВ и воде. Chx.Hcl имеет самую высокую растворимость в лабрафиле М и самую низкую растворимость в олеиновой кислоте. Более высокая растворимость лекарственного средства в масляной фазе важна для наноэмульсий, поскольку наноэмульсии способны удерживать лекарственное средство в растворенной форме, что означает, что более высокая растворимость лекарственного средства в масле приводит к меньшему количеству масла в составе и, следовательно, к меньшему количеству лекарственного средства. загрузка Для эмульгирования капель масла требуется определенное количество поверхностно-активного вещества и со-ПАВ.
Была построена псевдотройная фазовая диаграмма для определения областей наноэмульсии и оптимизации концентраций выбранных масел, поверхностно-активных веществ и дополнительных поверхностно-активных веществ (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 и пропиленгликоль соответственно). Chx.Hcl показывает очень низкую растворимость в олеиновой кислоте, что приводит к помутнению при титровании олеиновой кислоты первой каплей воды. Поэтому система олеиновой кислоты была исключена из этого исследования. Другие составы были приготовлены с использованием смеси масла и поверхностно-активного вещества 1:9. диапазон pH и ионной силы, поэтому были выбраны эти поверхностно-активные вещества.
Все приготовленные составы были прозрачными, за исключением Системы F2, которая оказалась мутной и поэтому была исключена из дальнейших оценочных исследований.
Идеальная формула наноэмульсии должна быть способна полностью и быстро диспергироваться при разбавлении с легким перемешиванием. Формулы наноэмульсии Chx.HCl показали короткое время эмульгирования, от 1,67 до 12,33 секунд. Tween 80 имеет самое короткое время эмульгирования. Это можно объяснить более высокой солюбилизирующей способностью Tween 80. Время самоэмульгирования увеличивается с увеличением концентрации поверхностно-активного вещества, что может быть связано с увеличением вязкости системы под действием поверхностно-активного вещества.
Размер капель эмульсии определяет скорость и степень высвобождения лекарственного средства. Меньший размер капель эмульсии приводит к более короткому времени эмульгирования и большей площади поверхности для абсорбции лекарственного средства. Средние размеры капель выбранных составов наноэмульсии Chx.HCl составили 711±0,44, 587±15,3, 10,97±0,11, 16,43±4,55 и 12,18±2,48, а PDI составил 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 и 0,76 для F1, F2. , F3 и 0,16 соответственно для F4, F5 и F6. Составы, содержащие Tween 80 в качестве поверхностно-активного вещества, показали более мелкие сферолиты. Это может быть связано с его более высокой эмульгирующей способностью. Более низкое значение PDI указывает на более узкое распределение размеров системы. Эти составы имеют чистый внешний вид, поскольку радиусы их капель меньше оптической длины волны видимого света (390–750 нм), при которой происходит минимальное рассеяние света. 41
На рис. 2 показан процент высвобождения Chx.HCl из сформулированной рецептуры. Полное высвобождение препарата из приготовленных рецептур наноэмульсии Chx.HCl составило от 2 до 7 минут. Было отмечено, что самая высокая скорость высвобождения препарата была получена в случае рецептуры наноэмульсии Chx.HCl F6 (2 мин), что может быть связано с присутствием Tween 80, который показал более высокую степень эмульгирования, и полученной наноэмульсии. обеспечивает большую площадь поверхности для высвобождения препарата, что позволяет увеличить скорость высвобождения препарата. В то же время свойства растворимости пропиленгликоля позволяют растворять большое количество гидрофильных поверхностно-активных веществ в масле. 40
Было обнаружено, что высвобождение Chx.HCl in vitro следует другому кинетическому порядку, и никакой четкий кинетический порядок не может отражать высвобождение препарата из по-разному приготовленных наноэмульсионных составов. Кинетическое высвобождение препаратов F4 является кинетикой первого порядка, что означает, что они высвобождаются пропорционально количеству препарата, оставшегося внутри них. 42 Кинетическое высвобождение других препаратов соответствовало диффузионной модели Хигуаши, которая показала, что количество высвобождаемого препарата было пропорционально квадратному корню из общего количества препарата и растворимости препарата в наноэмульсии. 42
Выбранные составы подвергались различной термодинамической стабильности путем стресс-тестирования с использованием циклов нагрева-охлаждения, центрифугирования и циклов замораживания-оттаивания. Было отмечено, что составы F3 и F4 показали осаждение препарата после циклов оттаивания, в то время как F1 показал загустевание (гелеобразование). F5 и F6 прошли непрерывный цикл центрифугирования, тест нагрева-охлаждения и тест замораживания-оттаивания. Наноэмульсии представляют собой термодинамически стабильные системы, образующиеся при определенных концентрациях масла, поверхностно-активного вещества и воды без разделения фаз, эмульгирования или растрескивания. Именно термическая стабильность отличает наноэмульсии от эмульсий, которые кинетически стабильны и в конечном итоге разделяются на фазы. 19 F3 показал больший размер частиц (587 нм), чем другие составы, что может объяснить разделение фаз и осаждение препарата в тестах на термодинамическую стабильность. F4, содержащий Tween 80 и не содержащий дополнительного поверхностно-активного вещества, показал осаждение лекарственных средств, что может указывать на необходимость использования пропиленгликоля и Tween 80 для повышения стабильности наноэмульсионных составов. F1, содержащий Tween 20 без дополнительного поверхностно-активного вещества, показал загустевание (гелеобразование), что представляет собой увеличение вязкости или прочности геля из-за агрегации капель.
Результаты стабильности демонстрируют важность присутствия дополнительного поверхностно-активного вещества пропиленгликоля для увеличения дисперсии частиц и предотвращения осаждения лекарственных средств. 43 F6 оказалась лучшей формулой из-за малого размера частиц (12,18 нм), короткого времени эмульгирования (1,67 секунды) и высокой скорости растворения через 2 минуты. Было обнаружено, что она является термодинамически/физически стабильной системой, и поэтому была выбрана для дальнейшего изучения.
Неудачи после лечения корневых каналов становятся все более частыми, что означает, что у пациентов повышается риск развития более сложных инфекций. 44,45 Биопленку необходимо удалять во время дезинфекции и пломбирования корневых каналов. 46,47 Из-за сложности системы корневых каналов становится трудно полностью удалить бактериальные корневые каналы, используя только инструменты и орошение. 48 Эффективность растворов для промывания корневых каналов зависит от проникновения ирриганта в DT и продолжительности воздействия бактерий. 49 Поэтому были опробованы и протестированы новые методы тщательной стерилизации корневых каналов. Обычные промывания не полностью устраняют E. faecalis из-за меньшего проникновения DT.50.
Средняя очищающая способность наноэмульсионного ополаскивателя составила 2001,47 мкм2, а средний размер частиц ополаскивателя составил 2609,56 мкм. Средняя разница между мытьем наноэмульсией и мытьем с нормальным размером частиц составила 608,09 мкм2. Была обнаружена статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между наноэмульсионными ирригационными растворами и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (P-значение 0,00052). Была обнаружена статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между наноэмульсионными ирригационными растворами и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (P-значение 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным размером частиц наблюдалась статистически высокозначимая (Р<0,001) разница (значение Р 0,00052). Между наноэмульсионными ирригантами и обычными ирригантами наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница (P=0,00052).(P<0,001) (P)值0,00052）。(P<0,001) (P)值0,00052）。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была очень значимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). Наблюдалась статистически очень значимая разница (P < 0,0001) между ополаскиванием наноэмульсией и ополаскиванием с обычным размером частиц (значение P 0,00052).Наноэмульсия показала статистически очень значимую разницу по сравнению с материалом с обычным размером частиц, показав меньшую среднюю площадь поверхности остаточного мусора, т.е. материал наноэмульсии обладал лучшей очищающей способностью, как показано на рисунке 3.
Рисунок 3. Сравнение очищающей эффективности ополаскивателей: (A) с активацией лазером Nano CHX, (B) с активацией лазером CHX, (C) с PUI Nano CHX, (D) без активации Nano CHX, (E) без активации CHX и (F) активация CHX PUI.
Средняя площадь поверхности оставшихся фрагментов Chx.HCl 1,6% составила 2320,36 мкм2, а средняя площадь поверхности Chx.HCl 2% составила 2949,85 мкм2. Наблюдалась статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирригантов и ирригантами с нормальным размером частиц (P-значение 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирригантов и ирригантами с нормальным размером частиц (P-значение 0,00000). Наблюдалась характеристика высокозначимая (Р<0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирригационных растворов и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение Р 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирригантов и ирригантами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P值0,00000）。(P<0,001) (P 0) 0,0 Наблюдалась очень значимая разница (P<0,001) между более постоянными концентрациями ополаскивателя с наноэмульсией и ополаскивателя с нормальным размером частицы (значение P 0,00000). Наблюдалась статистически очень значимая разница (P < 0,001) между более высокими концентрациями ополаскивателя наноэмульсии и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000).Хотя концентрация наноэмульсионного ирриганта была ниже, чем у ирриганта с обычным размером частиц, эта более низкая концентрация оказалась значительно более эффективной для удаления остатков и более эффективной для очистки корневых каналов.
PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI имел статистическую высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации.与其他激活方法相比, PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001)。与其他激活方法相比, PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001)。 По сравнению с другими методами применения PUI имела очень значимую разницу (p<0,001). По сравнению с другими методами активации PUI имел статистически очень значимую разницу (p<0,001).При активации ИСП средняя площадь остаточной поверхности детрита составила 1695,31 мкм2. Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистически значимой (P < 0,001) разнице (p-значение 0,00000). Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистически значимой (P < 0,001) разнице (p-значение 0,00000). Средняя разница между PUI и Laser-группой 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) разницу с (p-значение 0,00000). Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистически значимой (P < 0,001) разнице (p-значение 0,00000). PUI 和Laser 之间的平均差异为987,89929, 显示出高度统计学显着性(P<0,001) 差异(p 值0,00000).PUI и лазер Средняя разница между PUI и Laser-игрой 987,89929, что свидетельствует о высокой статистической различия (P<0,001) разницы (p-значение 0,00000). Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что указывает на высокую статистическую значимость (P < 0,001) разницы (p-значение 0,00000). Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистической значимости (P < 0,001) разницы при значении p 0,00098. Использование лазерной активации или отсутствие активации статистически значимо (P > 0,05) не различалось при значении p 0,451211. Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистически значимой (P < 0,001) разнице со значением p 0,00098). Значение P 0,451211. Средняя разница между PUI и отсутствием активации эффективности 712,40643, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) разницу с p-значением 0,00098). Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистически значимой (P < 0,001) разнице со значением p 0,00098).P-значение 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643, 显示高度统计学显着性差异(P<0,001),p值为0,00098)。ПУИ Средняя разница между PUI и инактивационной формой 712,40643, что свидетельствует о высокой статистической значимости разницы (P<0,001, p-значение 0,00098). Средняя разница между PUI и инактивацией составила 712,40643, что указывает на высокую статистическую значимость разницы (P<0,001, p-значение 0,00098).P>0,05) P составляет 0,451211.P>0,05) P составляет 0,451211. Статистическая разница (P>0,05) с лазерной активацией или без нее не была со значением P 0,451211. Не было никакой статистически значимой разницы (P>0,05) с лазерной активацией или без нее со значением P 0,451211.Средняя площадь поверхности оставшихся фрагментов при лазерной активации составила 2683,21 мкм2. Средняя площадь поверхности оставшихся фрагментов без активации составила 2407,72 мкм2. По сравнению с лазерной активацией или без активации, PUI имел статистически меньшую среднюю площадь поверхности чипа, т.е. лучшую очищающую способность.
Средняя очищающая способность наноэмульсионного ополаскивателя составила 2001,47 мкм2, а средний размер частиц ополаскивателя составил 2609,56 мкм. Средняя разница между мытьем наноэмульсией и мытьем с нормальным размером частиц составила 608,09 мкм2. Была обнаружена статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между наноэмульсионными ирригационными растворами и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (P-значение 0,00052). Была обнаружена статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между наноэмульсионными ирригационными растворами и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (P-значение 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным размером частиц была статистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Между наноэмульсионными ирригантами и обычными ирригантами наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница (P=0,00052).纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异 (P<0,001) (P值0,00052). P<0,001）(P值0,00052）). Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была очень значимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). Наблюдалась статистически очень значимая разница (P < 0,0001) между ополаскиванием наноэмульсией и ополаскиванием с обычным размером частиц (значение P 0,00052).По сравнению с материалом с обычным размером частиц наноэмульсия имеет статистически очень значимую разницу, показывая меньшую среднюю площадь поверхности остаточного мусора, т.е. материал наноэмульсии обладает лучшей очищающей способностью, как показано на рисунке 3.
Средняя площадь поверхности оставшихся фрагментов Chx.HCl 1,6% составила 2320,36 мкм2, а средняя площадь поверхности Chx.HCl 2% составила 2949,85 мкм2. Была обнаружена статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирригантов и ирригантами с нормальным размером частиц (P-значение 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая (P < 0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирригантов и ирригантами с нормальным размером частиц (P-значение 0,00000). Имелась характеристика высокодостоверная (Р<0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирригационных средств и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение Р 0,00000). Наблюдалась статистически значимая (P < 0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионных ирригантов и ирригантами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异 (P<0,001) (P值0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P000 Наблюдалась статистически высокозначимая разница (P<0,001) между более постоянными концентрациями ополаскивателя с наноэмульсией и ополаскивателя с нормальным размером частицы (значение P 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая разница (P < 0,001) между более высокими концентрациями ополаскивателя наноэмульсии и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000).Хотя концентрация наноэмульсионного ирриганта была ниже, чем у ирриганта с обычным размером частиц, эта более низкая концентрация оказалась значительно более эффективной для удаления остатков и более эффективной для очистки корневых каналов.
PUI показал статистически высокую значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI показал статистически высокую значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI имел статистически значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. ПУИ имел статистически значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0,001)。 По сравнению с другими методами активации PUI имеет статистически значимую разницу (p<0,001). Определение характеристики PUI отличалось (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. Метод PUI статистически значимо отличался (p<0,001) по сравнению с другими методами активации.При активации ПУИ средняя площадь остаточного поверхностного мусора составила 1695,31 мкм2. Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистической значимости (P < 0,001) разницы при значении p = 0,00000. Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистической значимости (P < 0,001) разницы при значении p = 0,00098. Использование активации лазером или отсутствие активации не показало статистически значимой разницы (P > 0,05) при значении p = 0,451211. Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистической значимости (P < 0,001) разницы при (p-значение 0,00000). Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистической значимости (P < 0,001) разницы при (p -значение 0,00098). Использование активации Laser или отсутствие активации не показало статистически значимой (P > 0,05) разницы при (p-значение 0,451211). Средняя разница между PUI и лазерной генерацией 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) разницу с (p-значение 0,00000). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистически значимой (P < 0,001) разнице (p-значение 0,00000). - значение 0,00098).Использование лазерной активации или отсутствие активации не имело характеристики характерной разницы (P>0,05) с (P-значение 0,451211). - значение 0,00098). Использование лазерной активации или отсутствие активации имели статистически значимую разницу (P>0,05) со значением P 0,451211. PUI 和激光之间的平均差异为987,89929，与(p 值0,00000) 差异具有高度统计学意义(P<0,001). Средняя разница между PUI и лазером составляет 987,89929, и эта разница (p 值0,00000) имеет высокую статистическую значимость (P < 0,001). Средняя разница между PUI и лазерной энергией 987,89929, что было высокостатистически значимым (P<0,001) с (значение p 0,00000). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, что является высоко статистически значимым (P < 0,001) при (p значение 0,00000). PUI 与未激活之间的平均差异为712.40643，与(p) 差异具有高度统计学意义(P<0,001) -值0,00098). Средняя разница между PUI и неактивным составляет 712,40643, а разница (p) имеет высокую статистическую значимость (P<0,001) – значение 0,00098. Средняя разница между PUI и инактивацией группы 712,40643, что было высокостатистично значимым с разницей (p) (P<0,001 — значение 0,00098). Средняя разница между PUI и инактивацией составила 712,40643, что было статистически высокозначимым с разницей (p) (P<0,001 – значение 0,00098).P>0,05) 与(P 0,451211).。 Не было выявлено существенной статистической разницы между активацией лазера и его отсутствием (P>0,05) и (P<0,451211). Не было характерной разницы (P>0,05) по сравнению с (значение P 0,451211) с лазерной активацией или без нее. Не было никакой статистически значимой разницы (P>0,05) по сравнению с (P-значение 0,451211) с лазерной активацией или без нее.Средняя площадь поверхности оставшихся фрагментов при лазерной активации составила 2683,21 мкм2. Средняя площадь поверхности оставшихся фрагментов без активации составила 2407,72 мкм2. По сравнению с лазерной активацией или без активации, ПУИ имеет статистически меньшую среднюю площадь поверхности чипа, т.е. лучшую очищающую способность.
Средний эффект ополаскивания наноэмульсией на удаление остатков был статистически значимо выше, чем у ополаскивания с обычным размером частиц. Chx.HCl 1,6%, PUI 1938,77 мкм2, 2510,96 мкм2 с лазером. Без активации среднее значение составляет 2511,34 мкм2. При использовании 2% Chx.HCl и активации лазером результаты были наихудшими, а количество остатков было максимальным. Те же результаты были получены при отсутствии активации 0,75% Chx.HCl. Очевидно, что наилучшие результаты были получены при использовании более высоких концентраций ополаскивателя в наноэмульсии. PUI был наиболее эффективен при активации ирриганта и вымывании остатков, как показано на рисунке 3A-F)).
Как показано в таблице 2, наноэмульсия Chx.HCl показала лучшие результаты, чем частицы обычного размера, с точки зрения количества жизнеспособных микроорганизмов и имела хорошую корреляцию с проникновением состава и очищающим эффектом в соответствии со следующими параметрами: размер, концентрация промывочного агента и метод активации.
Бактерии могут быть полностью уничтожены при использовании более высокой концентрации ополаскивателя. Даже при активации PUI 0,75% Chx.HCl имел наихудший антибактериальный эффект. Лазерная активация оказывает отрицательное влияние на ополаскиватели наноэмульсии. Как видно из всех предыдущих результатов, использование лазера снижает эффективность наноэмульсии Chx.HCl 0,75%, где КОЕ nanoChx.HCl 0,75% составляет 195, что является очень высоким значением, указывающим на то, что реагенты при этой концентрации сопоставимы с лазерной активацией. Диодные лазеры являются фототермическими, поэтому как свет, так и тепло могут привести к потере наноэмульсией своего антибактериального эффекта. Результатом высоких концентраций является полное уничтожение бактерий. Nano Chx.HCl 1,6% показал отрицательный рост бактерий в присутствии лазерной активации, что означает, что лазер не повлиял на антибактериальную способность nano Chx.HCl 1,6%. Можно сделать вывод, что наноэмульсионный материал с более высокой концентрацией обладает лучшим антибактериальным эффектом.
В данной работе наноэмульсии Chx.HCl были приготовлены с использованием двух различных масел, двух поверхностно-активных веществ и со-сурфактанта, была выбрана оптимальная формула (F6) с малым размером частиц, коротким временем эмульгирования и высокой скоростью растворения. Кроме того, (F6) была протестирована на термодинамическую/физическую стабильность. В наноэмульсии Chx.HCl при концентрации 1,6% наноэмульсия Chx.HCl показала лучшую проницаемость в дентинных канальцах по сравнению с традиционным Chx.HCl в качестве промывочной жидкости, а ПУИ в качестве метода активации обладала очищающей способностью. Кроме того, антибактериальные исследования наноэмульсии Chx.HCl показали полное устранение бактерий. Результаты это подтвердили. Наноэмульсию Chx.HCl можно рассматривать как перспективную промывочную жидкость.
Мы очень благодарны сотрудникам научно-исследовательской лаборатории Университета науки и технологий Миср за их огромную поддержку.