Javascript je trenutno onemogućen u vašem pregledniku. Neke značajke ove web stranice neće raditi ako je JavaScript onemogućen.
Registrirajte se sa svojim specifičnim podacima i specifičnim lijekom koji vas zanima, a mi ćemo podatke koje navedete usporediti s člancima u našoj opsežnoj bazi podataka i odmah vam poslati PDF kopiju e-poštom.
Sastav i karakterizacija nanoemulzije klorheksidin hidroklorida kao obećavajućeg antibakterijskog iriganta korijenskog kanala: in vitro i ex vivo studije
作者 Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1 Mona K. Younis, 1 Doaa H. Hassan, 1 Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2 Ehab Hassanein, 3 Kariem El-Batuti, 3 Alaa Elfaham 31 Znanost i tehnologija, Farmaceutski fakultet i industrijska farmacija, Sveučilište Misr, 6. listopada, Egipat; 2 Odjel za mikrobiologiju i imunologiju, Farmaceutski fakultet, Sveučilište za znanost i tehnologiju Misr, 6. listopada, Egipat; 3 Odjel za endodonciju, Sveučilište Ain Shams, Kairo, Egipat Uvod i svrha: Klorheksidin hidroklorid [Chx.HCl] ima širok spektar antibakterijskog djelovanja, produljeno djelovanje i nisku toksičnost, stoga se preporučuje kao potencijalno sredstvo za ispiranje korijenskog kanala. Cilj ove studije bio je koristiti novi sastav nanoemulzije Chx.HCl za povećanje penetracijske moći, čišćenja i antibakterijskog djelovanja Chx.HCl te ga koristiti kao sredstvo za ispiranje korijenskog kanala. Metode: Chx.HCl nanoemulzije pripremljene su korištenjem dva različita ulja: oleinske kiseline i Labrafila M1944CS, dva surfaktanta, Tween 20 i Tween 80, te ko-surfaktanta, propilen glikola. Nacrtajte pseudo-ternarni fazni dijagram kako biste označili optimalni sustav. Pripremljene formulacije nanoemulzija procijenjene su s obzirom na sadržaj lijeka, vrijeme emulgiranja, disperzibilnost, veličinu kapljica, oslobađanje lijeka in vitro, termodinamičku stabilnost, antibakterijsku aktivnost in vitro i in vitro studije odabranih formulacija. Penetrirajuće, čisteće i antibakterijsko djelovanje Chx.HCl nanoemulzije 0,75% i 1,6% uspoređeno je s normalnom veličinom čestica kao irigant korijenskog kanala. Rezultati. Odabrana formulacija bila je F6 s 2% Labrafila, 12% Tween 80 i 6% propilen glikola. Mala veličina čestica (12,18 nm), kratko vrijeme emulgiranja (1,67 sekundi) i brzo otapanje nakon 2 minute. Utvrđeno je da je riječ o termodinamički/fizički stabilnom sustavu. U usporedbi s konvencionalnom veličinom čestica Chx.HCl, nanoemulzija Chx.HCl 1,6% s većom koncentracijom pokazala je bolju penetraciju zbog manje veličine čestica. U usporedbi s materijalom normalne veličine čestica (2609,56 µm2), nanoemulzija Chx.HCl 1,6% ima najmanju prosječnu površinu zaostalog otpada (2001,47 µm2). Zaključak: Sastav nanoemulzije Chx.HCl ima bolju sposobnost čišćenja i antibakterijsko djelovanje. Ima vrlo učinkovito baktericidno djelovanje protiv Enterococcus faecalis, a stopa kontrakcije bakterijskih stanica je visoka ili potpuno uništena. Ključne riječi: klorheksidin hidroklorid, nanoemulzija, irigant korijenskog kanala, penetracija, učinak čišćenja, antibakterijski irigant.
Nanoemulzije, klasa emulzija s veličinom kapljica u rasponu od 50–500 nm, posljednjih su godina privukle mnogo pažnje zbog svojih jedinstvenih svojstava. Dobra svojstva čišćenja, ne utječu na tvrdoću vode, u većini slučajeva imaju nisku toksičnost i odsutnost elektrostatskih interakcija. 2 Nanotehnologija ima ultra malu veličinu čestica, veliki omjer površine i mase te jedinstvena fizikalna i kemijska svojstva u usporedbi sa sličnim rasutim proizvodima, a također otvara nove perspektive u liječenju i prevenciji zubnih infekcija. 3 Klorheksidin hidroklorid (Chx.HCl) je slabo topljiv u vodi, vrlo slabo topljiv u alkoholu i postupno se boji na svjetlu. 4,5 SH.HCl ima širok spektar antibakterijskog djelovanja, produljeno djelovanje i nisku toksičnost. Zbog tih svojstava preporučuje se i kao potencijalno sredstvo za ispiranje korijenskog kanala. Glavne prednosti Chx.HCl su niska citotoksičnost, bez mirisa i neugodnog okusa. 6-9 Nekoliko vrsta lasera korišteno je za poboljšanje dezinfekcije korijenskog kanala. Baktericidni učinak lasera ovisi o valnoj duljini i energiji, kao i o toplinskoj izloženosti, koja uzrokuje promjene u staničnoj stijenci bakterija, što dovodi do promjene osmotskog gradijenta sve do stanične smrti. Interakcija između lasera i irigatora korijenskog kanala otvara nove horizonte u dezinfekciji pulpe. 10 Ultrazvučna energija proizvodi visoke frekvencije, ali niske amplitude. Turpije su dizajnirane da osciliraju na ultrazvučnim frekvencijama od 25–30 kHz, što je izvan granice ljudske slušne percepcije (>20 kHz). Turpije su dizajnirane da osciliraju na ultrazvučnim frekvencijama od 25–30 kHz, što je izvan granice ljudske slušne percepcije (>20 kHz). Datoteke su namijenjene za kolebanje ultrazvučnih frekvencija 25–30 kGc, koje se nalaze u granicama zvučnog zračenja čovjeka (> 20 kGc). Turpije su dizajnirane da vibriraju na ultrazvučnim frekvencijama od 25-30 kHz, koje su izvan raspona ljudskog sluha (> 20 kHz).这些文件被设计成在25–30 kHz 的超声波频率下振荡，这超出了人类听觉感知的极限 (>20 kHz)。这些文件被设计成在 25–30 kHz Datoteke raspoređene na kolebanjima na ultrazvučnim frekvencijama 25–30 kGc, koje izlaze za granice zvučnog zračenja čovjeka (>20 kGc). Turpije su dizajnirane za vibracije na ultrazvučnim frekvencijama od 25-30 kHz, što je izvan granica ljudskog sluha (>20 kHz).Djeluju u transverzalnom osciliranju, postavljajući karakteristične modove čvorova i antinoda duž svoje duljine. Pojam „pasivna ultrazvučna irigacija“ (PUI) je protokol irigacije u kojem nijedan instrument ili stijenka ne dolazi u kontakt s endodontskim turpijama ili instrumentima. Tijekom PUI, ultrazvučna energija se prenosi s vibrirajuće turpije na otopinu za irigaciju u korijenskom kanalu. Potonja može uzrokovati zvučni tok i kavitaciju sredstva za ispiranje. 11 Na temelju gore navedenih podataka, smatra se prikladnim koristiti nanotehnologiju za procjenu poboljšanog penetrirajućeg i čistećeg djelovanja Chx.HCl.
Klorheksidin hidroklorid Chx.HCl ljubazno je ustupio Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Kairo, Egipat). Labrafil M 1944 CS (oleoilpolioksi-6-glicerid) velikodušno je ustupio Gattefosse (Saint Priest, Francuska). Tween 20 (polioksietilen (20) sorbitan monolaurat), Tween 80 (polioksietilen (80) sorbitan monooleat), oleinska kiselina, propilen glikol od Gomhorya Company (Kairo, Egipat). Ekstrakcija nekarijesnih jednokorijenskih zuba za parodontalno ili ortodontsko liječenje, Odjel za maksilofacijalne znanosti, Stomatološki fakultet, Sveučilište Ain Shams, Kairo, Egipat. Čista kultura Enterococcus faecalis (soj ATCC 29212) uzgojena u bujonu ekstrakta moždanog srca (BHI) (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Seul, Koreja).
Proučavana je topljivost Chx.HCl u različitim medijima (oleinska kiselina, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, propilen glikol i voda). Veliki višak Chx.HCl (50 mg) stavljen je u centrifugalnu epruvetu i dodano je 5,0 g srednje faze. Smjesa je protresena u vrtložnoj miješalici 15 minuta, a zatim pohranjena na sobnoj temperaturi. Nakon 24 sata, netopljivi talog lijeka u epruveti centrifugiran je pri 3000 okretaja u minuti tijekom 5 minuta kako bi se dobio bistri supernatant. Prikupljeno je dovoljno otopine uzorka i razrijeđeno s n-butanolom. Razrijeđeni uzorci filtrirani su kroz Whatman 102 filter papir, a zatim odgovarajuće razrijeđeni s n-butanolom kako bi se odredila koncentracija lijeka u zasićenoj otopini. Uzorci su analizirani UV spektrofotometrom na 260 nm s n-butanolom kao kontrolom. 12.13
Izgrađen je pseudo-trostruki fazni dijagram kako bi se odredio točan omjer svake komponente potrebne u formulaciji za dobivanje optimalnih parametara idealne nanoemulzije. 14 Formulacija je formulirana korištenjem ulja (tj. oleinske kiseline i Labrafila M1944CS), surfaktanata (tj. Tween 20 i Tween 80) i dodatnog surfaktanta, tj. propilen glikola. Prvo su pripremljene odvojene smjese surfaktanata (bez ko-surfaktanata) i ulja u različitim volumskim omjerima (od 1:9 do 9:1). Kada se smjesa titrira s vodom (dodavanjem vode kap po kap), pažljivo se prati smjesa od bistre do mutne kao krajnje točke. Ove krajnje točke zatim su označene na pseudo-trostrukom faznom dijagramu. Cijeli postupak je ponovljen za smjese surfaktanta i sekundarnog surfaktanta (Smix) pripremljene u omjerima 2:1 i 3:1 te pomiješane s odabranim uljima 15,16.
Nanoemulzijski sustavi koji sadrže Chx.HCl pripremljeni su korištenjem Labrafil M 1944 CS kao uljne faze i Tween 80 ili 20 surfaktanta te propilen glikola kao dodatnog surfaktanta i na kraju vode, Tablica 1. Lijek je otopljen u Labrafil M 1944 CS, a kombinirana voda surfaktanta i sekundarnog surfaktanta dodavana je polako uz postupno miješanje. Količina dodanog surfaktanta i ko-surfaktanta, kao i postotak uljne faze koji se može dodati, određen je pomoću pseudo-ternarnog faznog dijagrama. Ultrazvučni generator (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Njemačka) korišten je za postizanje željenog raspona veličine za disperziju granula. Zatim se uravnotežuje. 17
Ispitivanje disperzibilnosti provedeno je pomoću aparata za otapanje (Dr. Schleuniger Pharmaton, Model Diss 6000, Thun, Švicarska) u kojem je 1 ml svakog pripravka dodan u 500 ml vode na 37±0,5°C. Lagano miješanje osigurano je standardnim lopaticama za otapanje od nehrđajućeg čelika koje se okreću pri 50 okretaja u minuti. Dobivena emulzija određena je vizualno i klasificirana kao bistra, prozirna s plavkastim odsjajem, mliječna ili mutna. Odaberite bistru formulu za daljnja istraživanja. 18.19
Ekstrakcija Chx.HCl iz optimiziranih nanoemulzijskih sastava na temelju pseudo-trostrukog faznog dijagrama dovodi do proizvodnje n-butanola ultrazvučnom tehnologijom. Nakon odgovarajućeg razrjeđivanja, ekstrakti su spektrofotometrijski analizirani na valnoj duljini od 260 nm na sadržaj Chx.HCl. dvadeset
Za testiranje vremena samoemulgiranja, 1 ml svakog sastava dodan je u čašu napunjenu s 250 ml destilirane vode i održavan na 37 ± 1 °C uz stalno miješanje pri 50 okretaja u minuti. Vrijeme samoemulgiranja uzima se kao vrijeme tijekom kojeg predkoncentrat tvori homogenu smjesu nakon razrjeđivanja. dvadeset jedan
Za analizu veličine kapljica, razrijedite 50 mg optimizirane formulacije na 1000 ml s vodom u tikvici i lagano promiješajte ručno. Raspodjela veličine kapljica određena je pomoću instrumenta Malvern Zetasizer 2000 (Malvern Instruments Ltd., Malvern, UK) pod uvjetima detekcije povratnog raspršenja od 173º, temperature od 25ºC i indeksa loma od 1,330. dvadeset dva
Studije otapanja in vitro provedene su korištenjem USP uređaja tipa II (lopatica) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) pri 50 okretaja u minuti. Kao medij za otapanje korištena je destilirana voda (500 ml) održavana na temperaturi od 37±0,5°C, a 5 ml pripremljenog sastava dodano je kap po kap u medij za otapanje. Zatim je, u različitim intervalima, uzeto 5 ml medija za otapanje i količina oslobođenog lijeka određena je spektrofotometrijski na 254 nm. Pokusi su provedeni u tri ponavljanja. dvadeset tri
Zatim su izmjereni kinetički parametri oslobađanja Chx.HCl in vitro iz nanoemulzija pripremljenih na njegovoj osnovi. Testirani su kinetički modeli nultog, prvog i drugog reda te Higuchijevi difuzijski modeli kako bi se odabrala kinetička sekvenca koja je najprikladnija za oslobađanje Chx.HCl.
2 ml svake formulacije pohranjeno je na sobnoj temperaturi 48 sati prije nego što je uočeno odvajanje faza. Uzorci od 1 ml svake formulacije Chx.HCl nanoemulzije zatim su razrijeđeni na 10 ml i 100 ml destiliranom vodom na 25°C i pohranjeni 24 sata. Nakon toga je uočeno odvajanje faza. dvadeset i jedan
Zatim su uzorci od 2 ml svakog sastava odvojeno prebačeni u prozirne bočice s navojnim čepom i pohranjeni u hladnjaku na 2°C tijekom 24 sata. Nakon toga su izvađeni i pohranjeni na 25°C i 40°C. Proveden je jedan ciklus hlađenja i odmrzavanja. Uzorci su zatim promatrani na odvajanje faza i taloženje lijeka. dvadeset jedan
Uzorak od 5 ml svake formulacije Chx.HCl nanoemulzije prenesen je u staklenu epruvetu i stavljen u laboratorijsku centrifugu (Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800, Šangaj, Narodna Republika Kina) te centrifugiran pri 4000 okretaja u minuti tijekom 5 minuta. Uzorci su zatim promatrani na odvajanje faza i taloženje lijeka. dvadeset jedan
Sve eksperimente odobrio je Institucionalni etički odbor Sveučilišta Ain Shams u Egiptu. Odabrano je 50 nekarijesnih jednokorijenskih ljudskih zuba s formiranim vrhom. Izvađeni zubi korišteni su nakon dobivanja pisanog informiranog pristanka potpisanog od strane pacijenta. Zubi uključuju maksilarne i mandibularne sjekutiće i mandibularne premolare. Vanjske površine korijena tretirane su kiretom, a svi zubi su površinski sterilizirani u 0,5% NaOCl tijekom 24 sata, a zatim pohranjeni u sterilnoj fiziološkoj otopini do upotrebe. Krunica je uklonjena dijamantnim diskom sa sigurnom stranom, a duljina zuba normalizirana je na 16 mm od vrha do koronalnog ruba.24,25 Prema otopini za ispiranje, zubi su podijeljeni u sljedeće skupine:
(A) Uzorci skupine (n=24) oprani su s nanoemulzijom Chx.HCl. Podskupina (I) (n = 12) isprala je uzorke s 5 ml nanoemulzije Chx.HCl koncentracije 0,75%. Podskupina (II) (n=12) isprala je uzorke s 5 ml nanoemulzije Chx.HCl koncentracije 1,6%. (B) Skupina (n=24) uzoraka bit će oprana s 5 ml 2%-tnog Chx.HCl normalne veličine čestica. Kontrolna skupina: (n=2) oprana s 5 ml fiziološke otopine bez aktivacije.
Odabrano je 44 nekarijesna jednokorijenska ljudska zuba s formiranim vrhom. Zubi uključuju maksilarne i mandibularne sjekutiće i mandibularne premolare. Vanjske površine korijena tretirane su kiretom, a svi zubi su površinski sterilizirani u 0,5% NaOCl tijekom 24 sata, a zatim pohranjeni u sterilnoj fiziološkoj otopini do upotrebe. Krunice su uklonjene sigurnosnim dijamantnim diskom, a duljina zuba normalizirana je na 16 mm od vrha do koronalnog ruba. 24,25,29
Mehanička priprema glavnog apikalnog instrumenta veličine 50 korištenjem standardnih metoda. Tijekom operacije koristite sterilnu fiziološku otopinu kao irigant. Na kraju, korijenski kanal je ispran s 2 ml 17%-tne EDTA-e tijekom 1 minute kako bi se uklonio sloj razmaza. Cijela površina korijena, uključujući apikalni foramen svakog uzorka, prekrivena je s dva sloja laka za nokte (cijanoakrilatno ljepilo) kako bi se spriječilo curenje. Zubi se zatim postavljaju okomito u blok kamenca radi lakšeg rukovanja i identifikacije. 29-33 Uzorci su zatim autoklavirani na 121ºC i 15 psi tijekom 20 minuta. Nakon sterilizacije, svi uzorci su transportirani i obrađeni u sterilnim uvjetima korištenjem sterilnih instrumenata. Korijenski kanali su kontaminirani čistom kulturom Enterococcus faecalis (soj ATCC 29212) uzgojenom u bujonu ekstrakta moždanog srca (BHI) tijekom 24 sata na 37°C. Sterilnom mikropipetom ubrizgajte bistru suspenziju inokuluma E. faecalis u pripremljene korijenske kanale svih zuba. Blokovi su zatim stavljeni u sterilne čaše i inkubirani na 37°C tijekom 24 sata. 31, 34, 35
(A) Uzorci skupine (n=24) oprani su s nanoemulzijom Chx.HCl. Uzorci podskupine (I) (n=12) isprani su s 5 ml nanoemulzije Chx.HCl koncentracije 0,75%. Podskupina (II) (n = 12) isprala je uzorke s 5 ml nanoemulzije Chx.HCl koncentracije 1,6%.
Kontrolna skupina: pozitivna kontrola, (n=4) kontaminirani korijenski kanal ispran je s 5 ml fiziološke otopine i držan kao pozitivna kontrola. Negativna kontrola: (n=4) Uzorci nisu injektirani suspenzijom, tj. korijenski kanal nije bio kontaminiran s E. faecalis i držan je sterilno kao negativna kontrola kako bi se potvrdila sterilizacija i pouzdanost postupka. U svakom uzorku upotrijebite 5 ml testne otopine za ispiranje. Svaki uzorak je zatim podvrgnut završnom ispiranju s 1 ml sterilne fiziološke otopine.
Sterilni papirnati vrh veličine 35 koristi se za prikupljanje uzoraka iz korijenskih kanala. Papirnati vrh je umetnut u cijev do radne duljine, ostavljen 10 sekundi, a zatim prenesen na agar ploče kako bi se odredio broj jedinica koje stvaraju kolonije (CFU) po pločici. Ploče su inkubirane na 37ºC tijekom 24 sata, a zatim vizualno procijenjen rast bakterija. Prozirna ploča pokazuje potpunu sterilizaciju. Zamućene ploče smatraju se pozitivnim rastom. Određen je prosječan broj CFU-a u zoni rasta bakterija po pločici i izračunat je broj CFU-a. Preživjeli se prvenstveno mjere brojem održivih jedinica na pločama za kapanje. Osim toga, za brojanje niskih CFU-a korištena je čašica za izlijevanje, a za brojanje visokih CFU-a korišteno je razrjeđenje na 106. 36,37
Pripremite epruvete koje sadrže 15 ml odmrznutog agar medija prethodno steriliziranog u autoklavu istog dana kao i za pokus. Enterococcus faecalis je fakultativni gram-pozitivni anaerobni kokus koji može preživjeti pri vrlo visokom pH, kiselosti i visokim temperaturama. 39 Bakterijski uzorci (Enterococcus faecalis ATCC 29212) pripremljeni su miješanjem stanica iz kolonija sa sterilnom fiziološkom otopinom. Bakterijski uzorci su zatim razrijeđeni fiziološkom otopinom do McFarlandove 0,5, što je ekvivalentno 108 CFU/mL. Dodani volumen uzorka bio je 10 µl. 39 Standard mutnoće (McFarland 0,5)40 pripremljen je ulijevanjem 0,6 ml 1%-tne (10 g/l) otopine barijevog klorida dihidrata u graduirani cilindar od 100 ml i punjenjem do 100 ml s 1%-tnom (10 g/l) sumpornom kiselinom. Standardi mutnoće stavljeni su u iste epruvete kao i uzorci juhe i pohranjeni na sobnoj temperaturi 6 mjeseci u mraku i zatvoreni kako bi se spriječilo isparavanje. Otvorite poklopac prazne Petrijeve zdjelice i ulijte uzorak u sredinu zdjelice. Ako se agar potpuno stvrdne, okrenite ploču i inkubirajte na 37°C tijekom 24 sata.
Svi podaci su prikupljeni, tabelarno prikazani i podvrgnuti statističkoj analizi. Statistička analiza provedena je korištenjem IBM® SPSS® Statistical Version 17 for Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, SAD).
Proučavana je topljivost Chx.HCl u različitim uljnim fazama, otopinama surfaktanata, otopinama ko-surfaktanta i vodi. Chx.HCl ima najveću topljivost u Labrafilu M i najnižu topljivost u oleinskoj kiselini. Veća topljivost lijeka u uljnoj fazi važna je za nanoemulzije jer nanoemulzije mogu održati lijek u otopljenom obliku, što znači da veća topljivost lijeka u ulju rezultira manjom količinom ulja u formulaciji i stoga manjom količinom lijeka. Za emulgiranje kapljica ulja potrebna je određena količina surfaktanta i ko-surfaktanta.
Pseudo-trostruki fazni dijagram konstruiran je za definiranje nanoemulzijskih područja i optimizaciju koncentracija odabranih ulja, surfaktanata i dodatnih surfaktanata (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 i propilen glikol). Chx.HCl pokazuje vrlo nisku topljivost u oleinskoj kiselini, što rezultira zamućenjem kada se oleinska kiselina titrira s prvom kapljicom vode. Stoga je sustav oleinske kiseline isključen iz ove studije. Druge formulacije pripremljene su korištenjem smjese ulja i surfaktanata u omjeru 1:9. U ovom rasponu pH i ionske jakosti odabrani su ovi surfaktanti.
Sve pripremljene formulacije bile su bistre osim Sustava F2, koji je izgledao mutno te je stoga isključen iz daljnjih studija evaluacije.
Idealna formulacija nanoemulzije trebala bi se moći potpuno i brzo dispergirati kada se razrijedi laganim miješanjem. Formulacije nanoemulzije Chx.HCl pokazale su kratka vremena emulgiranja, od 1,67 do 12,33 sekundi. Tween 80 ima najkraće vrijeme emulgiranja. To se može objasniti većim kapacitetom solubilizacije Tween 80. Vrijeme samoemulgiranja povećava se s povećanjem koncentracije surfaktanta, što može biti posljedica povećanja viskoznosti sustava pod djelovanjem surfaktanta.
Veličina kapljica emulzije određuje brzinu i opseg oslobađanja lijeka. Manja veličina kapljica emulzije rezultira kraćim vremenom emulgiranja i većom površinom za apsorpciju lijeka. Prosječne veličine kapljica odabranih sastava Chx.HCl nanoemulzije bile su 711±0,44, 587±15,3, 10,97±0,11, 16,43±4,55 i 12,18±2,48, a PDI je bio 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 i 0,76 za F1, F2, F3 te 0,16 za F4, F5 i F6. Formulacije koje sadrže Tween 80 kao surfaktant pokazale su manje sferulite. To može biti zbog njegove veće emulgirajuće moći. Niža vrijednost PDI ukazuje na užu raspodjelu veličine sustava. Ove formulacije imaju čist izgled jer su im radijusi kapljica manji od optičke valne duljine vidljive svjetlosti (390-750 nm) pri kojoj dolazi do minimalnog raspršenja svjetlosti. 41
Na sl. 2 prikazan je postotak Chx.HCl oslobođenog iz formulirane formulacije. Potpuno oslobađanje lijeka iz pripremljenih formulacija Chx.HCl nanoemulzije kretalo se od 2 do 7 minuta. Uočeno je da je najveća brzina oslobađanja lijeka postignuta u slučaju formulacije Chx.HCl F6 nanoemulzije (2 min), što može biti posljedica prisutnosti Tween 80, koji je pokazao veći stupanj emulgiranja, a rezultirajuća nanoemulzija pruža veliku površinu za oslobađanje lijeka, što omogućuje povećanu brzinu oslobađanja lijeka. Istovremeno, svojstva topljivosti propilen glikola omogućuju otapanje velike količine hidrofilnih surfaktanata u ulju. 40
Utvrđeno je da oslobađanje Chx.HCl in vitro slijedi drugačiji kinetički redoslijed, a ne postoji jasan kinetički redoslijed koji može odražavati oslobađanje lijeka iz drugačije pripremljenih formulacija nanoemulzije. Kinetičko oslobađanje F4 lijekova je kinetika prvog reda, što znači da se oslobađaju proporcionalno količini lijeka koji je ostao u njima.42 Kinetičko oslobađanje drugih lijekova bilo je u skladu s Higuasha difuzijskim modelom, koji je pokazao da je količina oslobođenog lijeka proporcionalna kvadratnom korijenu ukupnog lijeka i topljivosti lijeka u nanoemulziji.42
Odabrane formulacije podvrgnute su različitoj termodinamičkoj stabilnosti stresnim testovima korištenjem ciklusa zagrijavanja i hlađenja, centrifugiranja i ciklusa smrzavanja i odmrzavanja. Uočeno je da su formulacije F3 i F4 pokazale taloženje lijeka nakon ciklusa odmrzavanja, dok je F1 pokazao zgušnjavanje (geliranje). F5 i F6 prošli su ciklus kontinuiranog centrifugiranja, test zagrijavanja i hlađenja te test smrzavanja i odmrzavanja. Nanoemulzije su termodinamički stabilni sustavi nastali pri određenim koncentracijama ulja, surfaktanta i vode bez odvajanja faza, emulgiranja ili pucanja. Termička stabilnost razlikuje nanoemulzije od emulzija, koje su kinetički stabilne i na kraju će se odvojiti u faze. 19 F3 pokazao je veću veličinu čestica (587 nm) od drugih formulacija, što može objasniti odvajanje faza i taloženje lijeka u testovima termodinamičke stabilnosti. F4 koji sadrži Tween 80 i bez ko-surfaktanta pokazao je taloženje lijeka, što može ukazivati ​​na potrebu korištenja propilen glikola i Tween 80 za poboljšanje stabilnosti formulacija nanoemulzije. F1 koji sadrži Tween 20 bez dodatnog surfaktanta pokazao je zgušnjavanje (geliranje), što je povećanje viskoznosti ili čvrstoće gela zbog agregacije kapljica.
Rezultati stabilnosti pokazuju važnost prisutnosti dodatnog surfaktanta propilen glikola za povećanje disperzije čestica i sprječavanje taloženja lijeka. 43 F6 bio je najbolja formulacija zbog male veličine čestica (12,18 nm), kratkog vremena emulgiranja (1,67 sekundi) i brze brzine otapanja nakon 2 minute. Utvrđeno je da je termodinamički/fizički stabilan sustav te je stoga odabran za daljnje proučavanje.
Neuspjesi nakon liječenja korijenskog kanala postaju sve češći, što znači da pacijenti imaju povećan rizik od razvoja složenijih infekcija. 44,45 Biofilm se mora ukloniti tijekom dezinfekcije i punjenja korijenskih kanala. 46,47 Zbog složenosti sustava korijenskog kanala, postaje teško potpuno ukloniti bakterije iz korijenskih kanala samo instrumentima i irigacijom. 48 Učinkovitost otopina za ispiranje korijenskog kanala ovisi o prodiranju iriganta u DT i trajanju izloženosti bakterijama. 49 Stoga su isprobane i testirane nove metode temeljite sterilizacije korijenskog kanala. Konvencionalna ispiranja ne uklanjaju u potpunosti E. faecalis zbog manjeg prodiranja DT-a.50
Prosječna snaga čišćenja nanoemulzijom za ispiranje bila je 2001,47 µm2, a prosječna veličina čestica sredstva za ispiranje bila je 2609,56 µm. Prosječna razlika između pranja nanoemulzijom i pranja s normalnom veličinom čestica bila je 608,09 µm2. Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između nanoemulzijskih iriganata i iriganata normalne veličine čestica s (P-vrijednost 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između nanoemulzijskih iriganata i iriganata normalne veličine čestica s (P-vrijednost 0,00052). Među otopinama za navodnjavanje nanoemulzijama i otopinama za navodnjavanje s normalnom veličinom čestica zabilježena je statistički visoka (P<0,001) razlika (značenje P 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika (P-vrijednost 0,00052) između nanoemulzijskih iriganata i iriganata s normalnim česticama.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异＂ (P<0,001)（P 0,00052).纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异＂ (P<0,001)（P 0,00052). Između opolaskivatelja s nanoemulzijama i opolaskivatelja s česticama normalne veličine bila je statistički vrlo značajna razlika (P<0,0001) (značenje P 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna razlika (P<0,0001) između ispiranja nanoemulzijom i ispiranja normalnom veličinom čestica (P-vrijednost 0,00052).Nanoemulzija je pokazala statistički vrlo značajnu razliku u usporedbi s materijalom normalne veličine čestica, pokazujući nižu prosječnu površinu zaostalog otpada, tj. nanoemulzijski materijal imao je najbolju sposobnost čišćenja, kao što je prikazano na slici 3.
Slika 3. Usporedba učinkovitosti čišćenja sredstava za ispiranje: (A) s aktiviranim Nano CHX laserom, (B) s aktiviranim CHX laserom, (C) s PUI Nano CHX, (D) bez Nano CHX aktivacije, (E) bez CHX aktivacije i (F) CHX PUI aktivacija.
Prosječna površina preostalih fragmenata Chx.HCl 1,6% bila je 2320,36 µm2, a prosječna površina Chx.HCl 2% bila je 2949,85 µm2. Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000). Uočena je statistički visokoznačajna (P<0,001) razlika između više visoke koncentracije nanoemulzijskih otopina za navodnjavanje i otopina za navodnjavanje s normalnom veličinom čestica (značenje P 0,00000). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异＂ (P<0,001)（P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学显着的差异（P<0,001）（P 0 0,0 Uočena je statistički vrlo značajna razlika (P<0,001) između više visoke koncentracije opolaskivatelja s nanoemulzijama i opolagaziva s normalnom veličinom čestica (značenje P 0,00000). Postojala je statistički vrlo značajna razlika (P<0,001) između ispiranja višim koncentracijama nanoemulzije i ispiranja normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000).Iako je koncentracija nanoemulzijskog iriganta bila niža od koncentracije iriganta normalne veličine čestica, ta niža koncentracija bila je značajno učinkovitija u uklanjanju ostataka i učinkovitija u čišćenju korijenskih kanala.
PUI je imao statistički vrlo značajnu razliku (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički vrlo značajnu razliku (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički visokoznačajnu razliku (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički vrlo značajnu razliku (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异 (p<0,001).。与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异 (p<0,001).。 U usporedbi s drugim metodama aktivacije PUI-a, statistički je vrlo značajna razlika (p<0,001). U usporedbi s drugim metodama aktivacije, PUI je imao statistički vrlo značajnu razliku (p<0,001).Aktivacijom ISP-a, prosječna površina preostale površine krhotina iznosila je 1695,31 µm2. Srednja razlika između PUI i Lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-vrijednost 0,00000). Srednja razlika između PUI i Lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-vrijednost 0,00000). Srednja razlika između PUI i Lasera iznosila je 987,89929, pokazujući visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-značenje 0,00000). Srednja razlika između PUI i Lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku od (p-vrijednost 0,00000). PUI 和Laser 之间的平均差异为987,89929，显示出高度统计学显着性(P<0,001) 差异(p 值0,00000)。PUI 和Laser Srednja razlika između PUI i lasera iznosila je 987,89929, što svjedoči o visokoj statističkoj značajnosti (P<0,001) vrijednosti (p-značenje 0,00000). Srednja razlika između PUI i Lasera bila je 987,89929, što ukazuje na visoku statistički značajnu (P<0,001) razliku (p-vrijednost 0,00000). Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s p-vrijednošću od 0,00098. Korištenje laserske aktivacije ili bez aktivacije nije se statistički značajno razlikovalo (P>0,05) s P-vrijednošću od 0,451211. Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s p-vrijednošću od 0,00098 (p-vrijednost od 0,451211). Srednja razlika između PUI i nedostatka aktivacije iznosila je 712,40643, pokazujući visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s p-značenjem 0,00098). Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s p-vrijednošću od 0,00098).P-vrijednost 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643，显示高度统计学显着性差异(P<0,001)，p值为0,00098).PUI Srednja razlika između PUI i neaktivacije iznosila je 712,40643, što svjedoči o visokoj statističkoj značajnosti razlike (P<0,001, p-značenje 0,00098). Srednja razlika između PUI i inaktivacije bila je 712,40643, što ukazuje na visoku statističku značajnost razlike (P<0,001, p-vrijednost 0,00098).使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异 (P>0,05) P 值为0,451211.使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异 (P>0,05) P 值为0,451211. Statistički značajna razlika (P>0,05) s laserskom aktivacijom ili bez da nije bilo sa značenjem P 0,451211. Nije bilo statistički značajne razlike (P>0,05) sa ili bez laserske aktivacije, s P vrijednošću od 0,451211.Prosječna površina preostalih fragmenata nakon laserske aktivacije iznosila je 2683,21 µm2. Prosječna površina preostalih fragmenata bez aktivacije iznosila je 2407,72 µm2. U usporedbi s laserskom aktivacijom ili bez aktivacije, PUI je imao statistički manju prosječnu površinu čipa, tj. najbolju moć čišćenja.
Prosječna snaga čišćenja nanoemulzijom za ispiranje bila je 2001,47 µm2, a prosječna veličina čestica sredstva za ispiranje bila je 2609,56 µm. Prosječna razlika između pranja nanoemulzijom i pranja s normalnom veličinom čestica bila je 608,09 µm2. Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između nanoemulzijskih iriganata i iriganata normalne veličine čestica s (P-vrijednost 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između nanoemulzijskih iriganata i iriganata normalne veličine čestica s (P-vrijednost 0,00052). Među otopinama za navodnjavanje nanoemulzijama i otopinama za navodnjavanje s normalnom veličinom čestica bila je statistički visokoznačajna (P<0,001) razlika (značenje P 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika (P-vrijednost 0,00052) između nanoemulzijskih iriganata i iriganata s normalnim česticama.纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异＂ (P<0,001)（P值0,00052）. P<0,001）(P值0,00052）). Između opolaskivatelja s nanoemulzijama i opolaskivatelja s česticama normalne veličine bila je statistički vrlo značajna razlika (P<0,0001) (značenje P 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna razlika (P<0,0001) između ispiranja nanoemulzijom i ispiranja normalnom veličinom čestica (P-vrijednost 0,00052).U usporedbi s materijalom normalne veličine čestica, nanoemulzija ima statistički vrlo značajnu razliku, pokazujući nižu prosječnu površinu zaostalog otpada, tj. nanoemulzijski materijal ima bolju sposobnost čišćenja kao što je prikazano na slici 3.
Prosječna površina preostalih fragmenata Chx.HCl 1,6% bila je 2320,36 µm2, a prosječna površina Chx.HCl 2% bila je 2949,85 µm2. Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000). Imala je statistički visoko dostojnu (P<0,001) razliku između više koncentracije nanoemulsionih sredstava za navodnjavanje i otopina za navodnjavanje s normalnom veličinom čestica (značenje P 0,00000). Postojala je statistički značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异 (P<0,001)（P值0,00000）.较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异＂ (P<0,001)（P000 Uočena je statistički visokoznačajna razlika (P <0,001) između visoke koncentracije opolaskivača s nanoemulzijama i opozicionara normalne veličine čestica (značenje P 0,00000). Postojala je statistički vrlo značajna razlika (P < 0,001) između ispiranja višim koncentracijama nanoemulzije i ispiranja normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000).Iako je koncentracija nanoemulzijskog iriganta bila niža od koncentracije iriganta normalne veličine čestica, ta niža koncentracija bila je značajno učinkovitija u uklanjanju ostataka i učinkovitija u čišćenju korijenskih kanala.
PUI je imao statistički visoko značajnu razliku (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički visoko značajnu razliku (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički visoko značajnu razliku (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički značajnu razliku (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0,001)。 U usporedbi s drugim metodama aktivacije, PUI ima statistički značajnu razliku (p<0,001). PUI se statistički značajno razlikovao (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije. PUI se statistički značajno razlikovao (p<0,001) u usporedbi s drugim metodama aktivacije.Tijekom aktivacije PUI-a, prosječna površina preostalih površinskih ostataka iznosila je 1695,31 μm2. Srednja razlika između PUI i lasera bila je 987,89929, što pokazuje vrlo statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-vrijednost 0,00000). Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje vrlo statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-vrijednost 0,00098). Korištenje laserske aktivacije ili bez aktivacije nije se statistički značajno razlikovalo (P>0,05) s (P-vrijednost 0,451211). Srednja razlika između PUI i lasera bila je 987,89929, što pokazuje vrlo statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-vrijednošću 0,00000). Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje vrlo statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-vrijednošću 0,00098). Korištenje laserske aktivacije ili bez aktivacije nije se statistički značajno razlikovalo (P>0,05) s (P-vrijednošću 0,451211). Srednja razlika između PUI i lasera iznosila je 987,89929, pokazujući visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-značenje 0,00000). Srednja razlika između PUI i lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-vrijednost 0,00000). - vrijednost 0,00098). Iskorištenje laserske aktivacije ili odsutnost aktivacije nije imalo statistički značajne razlike (P>0,05) s (P-značenje 0,451211). - vrijednost 0,00098). Korištenje laserske aktivacije ili bez aktivacije imalo je statistički značajnu razliku (P>0,05) s (P-vrijednost 0,451211). PUI 和激光之间的平均差异为987,89929，(p 值0,00000) 差异具有高度统计学意义(P<0,001)。 Prosječna razlika između PUI i lasera iznosi 987,89929, a razlika (p < 0,00000) ima visoku statističku značajnost (P < 0,001). Srednja razlika između PUI i lasera iznosila je 987,89929, što je bilo visoko statistički značajno (P<0,001) s (značenje p 0,00000). Srednja razlika između PUI i lasera bila je 987,89929, što je bilo vrlo statistički značajno (P<0,001) s (p-vrijednošću 0,00000). PUI 与未激活之间的平均差异为712.40643，与(p) 差异具有高度统计学意义(P<0,001) -值0,00098)。 Prosječna razlika između PUI i neaktivnih iznosi 712,40643, a razlika (p) ima visoku statističku značajnost (P<0,001) – vrijednost 0,00098. Srednja razlika između PUI i neaktivacije iznosila je 712,40643, što je bilo visoko statistički značajno s raznicom (p) (P<0,001 — vrijednost 0,00098). Srednja razlika između PUI i inaktivacije bila je 712,40643, što je bilo statistički visoko značajno s razlikom (p) (P<0,001 – vrijednost 0,00098).使用激光激活或不激活没有显着统计学差异(P>0,05) 与(P 值0,451211)。 Nije bilo značajne statističke razlike između aktivacije i neaktivacije laserom (P>0,05) i (P值0,451211). Nije bilo statistički značajne razlike (P>0,05) u usporedbi s (značenje P 0,451211) s laserskom aktivacijom ili bez nje. Nije bilo statistički značajne razlike (P>0,05) u usporedbi s (P vrijednost 0,451211) sa ili bez laserske aktivacije.Prosječna površina preostalih fragmenata tijekom laserske aktivacije iznosila je 2683,21 μm2. Prosječna površina preostalih fragmenata bez aktivacije iznosila je 2407,72 μm2. U usporedbi s laserskom aktivacijom ili bez aktivacije, PUI ima statistički manju prosječnu površinu čipa, tj. bolju sposobnost čišćenja.
Prosječni učinak ispiranja nanoemulzijom na uklanjanje ostataka bio je statistički značajno veći od učinka ispiranja s česticama normalne veličine. Chx.HCl 1,6%, PUI 1938,77 µm2, 2510,96 µm2 s laserom. Bez aktivacije, prosječna vrijednost je 2511,34 µm2. Kada je korišteno 2% Chx.HCl i aktivirano laserom, rezultati su bili najgori, a količina ostataka maksimalna. Isti rezultati dobiveni su kada 0,75% Chx.HCl nije aktivirano. Očito je da su najbolji rezultati dobiveni korištenjem većih koncentracija sredstva za ispiranje u nanoemulziji. PUI je bio najučinkovitiji u aktivaciji iriganta i ispiranju ostataka, kao što je prikazano na slici 3A-F).
Kao što je prikazano u Tablici 2, nanoemulzija Chx.HCl pokazala je bolje rezultate od čestica normalne veličine u smislu broja održivih mikroorganizama te je imala dobru korelaciju s prodiranjem formulacije i učinkom čišćenja prema sljedećim parametrima: veličina, koncentracija sredstva za ispiranje i metoda aktivacije.
Bakterije se mogu potpuno uništiti korištenjem veće koncentracije sredstva za ispiranje. Čak i uz PUI aktivaciju, 0,75% Chx.HCl imalo je najgori antibakterijski učinak. Laserska aktivacija negativno utječe na ispiranje nano-emulzijom. Kao što se može vidjeti iz svih prethodnih rezultata, upotreba lasera smanjuje učinkovitost nanoemulzije Chx.HCl 0,75%, gdje je CFU nanoChx.HCl 0,75% 195, što je vrlo visoka vrijednost, što ukazuje na to da su reagensi pri ovoj koncentraciji usporedivi s laserskom aktivacijom. Diodni laseri su fototermalni, tako da svjetlost ili toplina mogu uzrokovati gubitak antibakterijskog učinka nanoemulzije. Rezultat visokih koncentracija je potpuno uništenje bakterija. Nano Chx.HCl 1,6% pokazao je negativan rast bakterija u prisutnosti laserske aktivacije, što znači da laser nije utjecao na antibakterijsku sposobnost nano Chx.HCl 1,6%. Može se zaključiti da nanoemulzijski materijal s većom koncentracijom ima bolji antibakterijski učinak.
U ovom radu, Chx.HCl nanoemulzije su pripremljene korištenjem dva različita ulja, dva surfaktanta i ko-surfaktanta, odabrana je optimalna formulacija (F6) s malom veličinom čestica, kratkim vremenom emulgiranja i visokom brzinom otapanja. Osim toga, (F6) je testiran na termodinamičku/fizičku stabilnost. U Chx.HCl nanoemulziji pri koncentraciji od 1,6%, Chx.HCl nanoemulzija pokazala je najbolju propusnost u dentinskim tubulima u usporedbi s tradicionalnim Chx.HCl kao tekućinom za ispiranje, a PUI kao metoda aktivacije imala je sposobnost čišćenja. Osim toga, antibakterijske studije Chx.HCl nanoemulzije pokazale su potpuno uklanjanje bakterija. Rezultati su to potvrdili. Chx.HCl nanoemulzija može se smatrati obećavajućom tekućinom za pranje.
Vrlo smo zahvalni osoblju istraživačkog laboratorija Sveučilišta znanosti i tehnologije Misr na njihovoj velikoj podršci.