Javascript je trenutno onemogućen u vašem pregledniku. Neke funkcije ove web stranice neće raditi ako je JavaScript onemogućen.
Registrujte se sa svojim specifičnim podacima i specifičnim lijekom koji vas zanima, a mi ćemo upariti informacije koje navedete sa člancima u našoj opsežnoj bazi podataka i odmah vam poslati PDF kopiju e-poštom.
Sastav i karakterizacija nanoemulzije hlorheksidin hidrohlorida kao obećavajućeg antibakterijskog sredstva za ispiranje korijenskog kanala: in vitro i ex vivo studije
作者 Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1 Mona K. Younis, 1 Doaa H. Hassan, 1 Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2 Ehab Hassanein, 3 Kariem El-Batuti, 3 Alaa Elfaham 31 Nauka i tehnologija, Farmaceutski fakultet i industrijska farmacija, Univerzitet Misr, 6. oktobar, Egipat; 2 Odsjek za mikrobiologiju i imunologiju, Farmaceutski fakultet, Univerzitet nauke i tehnologije Misr, 6. oktobar, Egipat; 3 Odsjek za endodonciju, Univerzitet Ain Shams, Kairo, Egipat Uvod i svrha: Hlorheksidin hidrohlorid [Chx.HCl] ima širok spektar antibakterijskog djelovanja, produženo djelovanje i nisku toksičnost, stoga se preporučuje kao potencijalno sredstvo za ispiranje korijenskog kanala. Cilj ove studije bio je korištenje novog sastava Chx.HCl nanoemulzije za povećanje penetracijske moći, čišćenja i antibakterijskog djelovanja Chx.HCl i njegova upotreba kao sredstva za ispiranje korijenskog kanala. Metode: Chx.HCl nanoemulzije su pripremljene korištenjem dva različita ulja: oleinske kiseline i Labrafil M1944CS, dva surfaktanta, Tween 20 i Tween 80, i ko-surfaktanta, propilen glikola. Nacrtajte pseudo-ternarni fazni dijagram kako biste označili optimalni sistem. Pripremljene formulacije nanoemulzije su procijenjene s obzirom na sadržaj lijeka, vrijeme emulgiranja, disperzibilnost, veličinu kapljica, in vitro oslobađanje lijeka, termodinamičku stabilnost, in vitro antibakterijsku aktivnost i in vitro studije odabranih formulacija. Penetrirajuće, čisteće i antibakterijsko djelovanje Chx.HCl nanoemulzije od 0,75% i 1,6% upoređeno je s normalnom veličinom čestica kao irigant korijenskog kanala. Rezultati. Odabrana formulacija bila je F6 sa 2% Labrafila, 12% Tween 80 i 6% propilen glikola. Mala veličina čestica (12,18 nm), kratko vrijeme emulgiranja (1,67 sekundi) i brzo otapanje nakon 2 minute. Utvrđeno je da je termodinamički/fizički stabilan sistem. U poređenju sa konvencionalnom veličinom čestica Chx.HCl, veća koncentracija Chx.HCl 1,6% nanoemulzije pokazala je bolju penetraciju zbog manje veličine čestica. U poređenju sa materijalom normalne veličine čestica (2609,56 µm2), 1,6% Chx.HCl nanoemulzija ima najmanju prosječnu površinu zaostalog otpada (2001,47 µm2). Zaključak: Sastav nanoemulzije Chx.HCl ima bolju sposobnost čišćenja i antibakterijsko djelovanje. Ima visoko efikasno baktericidno djelovanje protiv Enterococcus faecalis, a stopa kontrakcije bakterijskih ćelija je visoka ili potpuno uništena. Ključne riječi: hlorheksidin hidrohlorid, nanoemulzija, irigant korijenskog kanala, penetracija, efekat čišćenja, antibakterijski irigant.
Nanoemulzije, klasa emulzija s veličinom kapljica u rasponu od 50-500 nm, posljednjih su godina privukle veliku pažnju zbog svojih jedinstvenih svojstava. Dobra svojstva čišćenja, ne utječu na tvrdoću vode, u većini slučajeva imaju nisku toksičnost i odsustvo elektrostatskih interakcija.2 Nanotehnologija ima ultra-malu veličinu čestica, veliki omjer površine i mase i jedinstvena fizička i hemijska svojstva u usporedbi sa sličnim rasutim proizvodima, a također otvara nove perspektive u liječenju i prevenciji zubnih infekcija.3 Hlorheksidin hidrohlorid (Chx.HCl) je slabo topljiv u vodi, vrlo slabo topljiv u alkoholu i postepeno se mrlji na svjetlu. 4,5 SH.HCl ima širok spektar antibakterijskog djelovanja, produženo djelovanje i nisku toksičnost. Zbog ovih svojstava, preporučuje se i kao potencijalno sredstvo za ispiranje korijenskog kanala. Glavne prednosti Chx.HCl su niska citotoksičnost, bez mirisa i bez neugodnog okusa.6-9 Nekoliko vrsta lasera korišteno je za poboljšanje dezinfekcije korijenskog kanala. Baktericidni učinak lasera zavisi od talasne dužine i energije, kao i od termičke izloženosti, koja uzrokuje promjene u ćelijskom zidu bakterija, što dovodi do promjene osmotskog gradijenta sve do ćelijske smrti. Interakcija između lasera i irigatora korijenskog kanala otvara nove horizonte u dezinfekciji pulpe. 10 Ultrazvučna energija proizvodi visoke frekvencije, ali niske amplitude. Turpije su dizajnirane da osciliraju na ultrazvučnim frekvencijama od 25–30 kHz, koje su izvan granica ljudske slušne percepcije (>20 kHz). Turpije su dizajnirane da osciliraju na ultrazvučnim frekvencijama od 25–30 kHz, koje su izvan granica ljudske slušne percepcije (>20 kHz). Fajlovi su predviđeni za kolebanje na ultrazvučnim frekvencijama od 25–30 kGc, koji su u predelima slušnog pokreta čoveka (> 20 kGc). Turpije su dizajnirane da vibriraju na ultrazvučnim frekvencijama od 25-30 kHz, koje su izvan dometa ljudskog sluha (> 20 kHz).这些文件被设计成在25–30 kHz 的超声波频率下振荡，这超出了人类听人类听觚感矁む(2 Hz) 觉感矀这些文件被设计成在 25–30 kHz Fajlovi rasčitani na kolebanju na ultrazvučnim frekvencijama 25–30 kGc, koji izlaze za područje slušnog pokreta ljudi (>20 kGc). Turpije su dizajnirane za vibracije na ultrazvučnim frekvencijama od 25-30 kHz, što je izvan granica ljudskog sluha (>20 kHz).Oni rade u transverzalnom osciliranju, postavljajući karakteristične modove čvorova i antinoda duž svoje dužine. Termin "pasivna ultrazvučna irigacija" (PUI) je protokol irigacije u kojem nijedan instrument ili zid ne dolazi u kontakt sa endodontskim turpijama ili instrumentima. Tokom PUI, ultrazvučna energija se prenosi sa vibrirajuće turpije na rastvor za irigaciju u korijenskom kanalu. Potonji može izazvati zvučni tok i kavitaciju sredstva za ispiranje. 11 Na osnovu gore navedenih podataka, smatra se prikladnim koristiti nanotehnologiju za procjenu poboljšanog penetrirajućeg i čistećeg djelovanja Chx.HCl.
Hlorheksidin hidrohlorid Chx.HCl je ljubazno obezbijedila kompanija Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Kairo, Egipat). Labrafil M 1944 CS (oleoilpolioksi-6-glicerid) je velikodušno obezbijedila kompanija Gattefosse (Saint Priest, Francuska). Tween 20 (polioksietilen (20) sorbitan monolaurat), Tween 80 (polioksietilen (80) sorbitan monooleat), oleinska kiselina, propilen glikol od kompanije Gomhorya (Kairo, Egipat). Ekstrakcija nekarijesnih jednokorijenskih zuba za parodontalni ili ortodontski tretman, Odsjek za maksilofacijalne nauke, Stomatološki fakultet, Univerzitet Ain Shams, Kairo, Egipat. Čista kultura Enterococcus faecalis (soj ATCC 29212) uzgojena u bujonu ekstrakta mozga i srca (BHI) (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Seul, Koreja).
Ispitana je topljivost Chx.HCl u različitim medijima (oleinska kiselina, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, propilen glikol i voda). Veliki višak Chx.HCl (50 mg) stavljen je u centrifugalnu epruvetu i dodano je 5,0 g srednje faze. Smjesa je mućkana u vortex mikseru 15 minuta, a zatim pohranjena na sobnoj temperaturi. Nakon 24 sata, nerastvorljivi talog lijeka u epruveti centrifugiran je na 3000 rpm tokom 5 minuta da bi se dobio bistri supernatant. Sakupljeno je dovoljno rastvora uzorka i razrijeđeno je n-butanolom. Razrijeđeni uzorci su filtrirani kroz Whatman 102 filter papir, a zatim odgovarajuće razrijeđeni n-butanolom da bi se odredila koncentracija lijeka u zasićenom rastvoru. Uzorci su analizirani UV spektrofotometrom na 260 nm sa n-butanolom kao kontrolom. 12.13
Pseudo-trostruki fazni dijagram je izgrađen kako bi se odredio tačan odnos svake komponente potrebne u formulaciji za dobijanje optimalnih parametara idealne nanoemulzije. 14 Formulacija je formulisana korištenjem ulja (npr. oleinske kiseline i Labrafil M1944CS), surfaktanata (npr. Tween 20 i Tween 80) i dodatnog surfaktanta, tj. propilen glikola. Prvo, pripremljene su odvojene smjese surfaktanata (bez ko-surfaktanata) i ulja u različitim omjerima volumena (od 1:9 do 9:1). Kada se smjesa titrira vodom (dodajući vodu kap po kap), pažljivo se prati smjesa od bistre do mutne kao krajnje tačke. Ove krajnje tačke su zatim označene na pseudo-trostrukom faznom dijagramu. Cijeli proces je ponovljen za smjese surfaktanta i sekundarnog surfaktanta (Smix) pripremljene u omjerima 2:1 i 3:1 i pomiješane sa odabranim uljima 15,16.
Nanoemulzijski sistemi koji sadrže Chx.HCl pripremljeni su korištenjem Labrafil M 1944 CS kao uljne faze i Tween 80 ili 20 surfaktanta i propilen glikola kao dodatnog surfaktanta i na kraju vode, Tabela 1. Lijek je rastvoren u Labrafil M 1944 CS i kombinovana voda surfaktanta i sekundarnog surfaktanta je dodavana sporom brzinom uz postepeno miješanje. Količina dodanog surfaktanta i ko-surfaktanta, kao i procenat uljne faze koji se može dodati, određen je pomoću pseudo-ternarnog faznog dijagrama. Ultrazvučni generator (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Njemačka) korišten je za postizanje željenog raspona veličine za disperziju granula. Zatim je uravnoteženo. 17
Testiranje disperzibilnosti provedeno je korištenjem aparata za disoluciju (Dr. Schleuniger Pharmaton, Model Diss 6000, Thun, Švicarska) u kojem je 1 ml svakog preparata dodano u 500 ml vode na 37±0,5°C. Lagano miješanje osigurano je standardnim lopaticama za disoluciju od nehrđajućeg čelika koje se rotiraju pri 50 o/min. Dobivena emulzija određena je vizualno i klasificirana kao bistra, prozirna s plavičastom nijansom, mliječna ili mutna. Odaberite bistru formulu za daljnja istraživanja. 18.19
Ekstrakcija Chx.HCl iz optimiziranih nanoemulzijskih sastava na osnovu pseudo-trostrukog faznog dijagrama dovodi do proizvodnje n-butanola korištenjem ultrazvučne tehnologije. Nakon odgovarajućeg razrjeđivanja, ekstrakti su spektrofotometrijski analizirani na talasnoj dužini od 260 nm na sadržaj Chx.HCl. dvadeset
Za testiranje vremena samoemulgacije, 1 ml svakog sastava je dodat u čašu napunjenu sa 250 ml destilovane vode i održavan na 37 ± 1°C uz konstantno miješanje pri 50 o/min. Vrijeme samoemulgacije se uzima kao vrijeme tokom kojeg predkoncentrat formira homogenu smjesu nakon razrjeđivanja. dvadeset jedan
Za analizu veličine kapljica, razrijediti 50 mg optimizirane formulacije na 1000 ml vode u tikvici i lagano promiješati ručno. Raspodjela veličine kapljica određena je pomoću instrumenta Malvern Zetasizer 2000 (Malvern Instruments Ltd., Malvern, UK) pod uvjetima detekcije povratnog raspršenja od 173º, temperature od 25ºC i indeksa prelamanja od 1,330. dvadeset dva
Studije rastvaranja in vitro provedene su korištenjem USP aparata tipa II (lopatica) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) pri 50 rpm. Destilirana voda (500 ml) održavana na temperaturi od 37±0,5°C korištena je kao medij za rastvaranje, a 5 ml pripremljenog sastava dodavano je kap po kap u medij za rastvaranje. Zatim je, u različitim intervalima, uzeto 5 ml medija za rastvaranje i količina oslobođenog lijeka određena je spektrofotometrijski na 254 nm. Eksperimenti su provedeni u tri primjerka. dvadeset tri
Zatim su izmjereni kinetički parametri oslobađanja Chx.HCl in vitro iz nanoemulzija pripremljenih na njegovoj bazi. Testirani su kinetički modeli nultog, prvog i drugog reda i Higuchijev difuzijski modeli kako bi se odabrala kinetička sekvenca koja najbolje odgovara oslobađanju Chx.HCl.
2 ml svake formulacije je čuvano na sobnoj temperaturi 48 sati prije nego što je uočeno fazno razdvajanje. Uzorci od 1 ml svake formulacije Chx.HCl nanoemulzije su zatim razrijeđeni na 10 ml i 100 ml destilovanom vodom na 25°C i čuvani 24 sata. Nakon toga je uočeno fazno razdvajanje. dvadeset jedan
Zatim su uzorci od 2 ml svakog sastava odvojeno prebačeni u prozirne bočice sa navojnim čepom i pohranjeni u hladnjaku na 2°C tokom 24 sata. Nakon toga su izvađeni i pohranjeni na 25°C i 40°C. Izvršen je jedan ciklus hlađenja i odmrzavanja. Uzorci su zatim promatrani na razdvajanje faza i taloženje lijeka. dvadeset jedan
Uzorak od 5 ml svake formulacije Chx.HCl nanoemulzije prebačen je u staklenu epruvetu i stavljen u laboratorijsku centrifugu (Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800, Šangaj, Narodna Republika Kina) i centrifugiran na 4000 rpm tokom 5 minuta. Uzorci su zatim posmatrani na razdvajanje faza i taloženje lijeka. dvadeset jedan
Sve eksperimente odobrio je Institucionalni etički komitet Univerziteta Ain Shams u Egiptu. Odabrano je 50 nekarijesnih jednokorijenskih ljudskih zuba sa formiranim apeksom. Izvađeni zubi su korišteni nakon dobijanja pismenog informiranog pristanka potpisanog od strane pacijenta. Zubi uključuju maksilarne i mandibularne sjekutiće i mandibularne premolare. Vanjske površine korijena tretirane su kiretom, a svi zubi su površinski sterilizirani u 0,5% NaOCl tokom 24 sata, a zatim pohranjeni u sterilnom fiziološkom rastvoru do upotrebe. Krunica je uklonjena dijamantskim diskom sa sigurnom stranom, a dužina zuba je normalizovana na 16 mm od apeksa do koronalne ivice. 24,25 Prema rastvoru za ispiranje, zubi su podijeljeni u sljedeće grupe:
(A) Uzorci grupe (n=24) su oprani sa Chx.HCl nanoemulzijom. Podgrupa (I) (n = 12) je isprala uzorke sa 5 ml Chx.HCl nanoemulzije koncentracije 0,75%. Podgrupa (II) (n=12) je isprala uzorke sa 5 ml 1,6% Chx.HCl nanoemulzije. (B) Grupa (n=24) uzoraka će biti oprana sa 5 ml 2% Chx.HCl normalne veličine čestica. Kontrolna grupa: (n=2) je oprana sa 5 ml fiziološkog rastvora bez aktivacije.
Odabrano je 44 nekarijesna jednokorijenska ljudska zuba sa formiranim vrhom. Zubi uključuju maksilarne i mandibularne sjekutiće i mandibularne premolare. Vanjske površine korijena tretirane su kiretom, a svi zubi su površinski sterilizirani u 0,5% NaOCl tokom 24 sata, a zatim pohranjeni u sterilnom fiziološkom rastvoru do upotrebe. Krunice su uklonjene sigurnosnim dijamantskim diskom, a dužina zuba je normalizovana na 16 mm od vrha do koronalne ivice. 24,25,29
Mehanička priprema glavnog apikalnog instrumenta veličine 50 korištenjem standardnih metoda. Tokom operacije koristite sterilni fiziološki rastvor kao irigant. Na kraju, korijenski kanal je ispran sa 2 ml 17% EDTA tokom 1 minute kako bi se uklonio sloj razmaza. Cijela površina korijena, uključujući apikalni foramen svakog uzorka, prekrivena je s dva sloja laka za nokte (cijanoakrilatno ljepilo) kako bi se spriječilo curenje. Zubi se zatim postavljaju vertikalno u blok kamenca radi lakšeg rukovanja i identifikacije. 29-33 Uzorci su zatim autoklavirani na 121ºC i 15 psi tokom 20 minuta. Nakon sterilizacije, svi uzorci su transportovani i obrađeni u sterilnim uslovima korištenjem sterilnih instrumenata. Korijenski kanali su kontaminirani čistom kulturom Enterococcus faecalis (soj ATCC 29212) uzgojenom u bujonu ekstrakta mozga i srca (BHI) tokom 24 sata na 37°C. Koristeći sterilnu mikropipetu, ubrizgajte bistru suspenziju inokuluma E. faecalis u pripremljene korijenske kanale svih zuba. Blokovi su zatim stavljeni u sterilne čaše i inkubirani na 37°C tokom 24 sata. 31, 34, 35
(A) Uzorci grupe (n=24) su oprani sa Chx.HCl nanoemulzijom. Uzorci podgrupe (I) (n=12) su isprani sa 5 ml Chx.HCl nanoemulzije koncentracije 0,75%. Podgrupa (II) (n = 12) je isprala uzorke sa 5 ml Chx.HCl nanoemulzije koncentracije 1,6%.
Kontrolna grupa: pozitivna kontrola, (n=4) kontaminirani korijenski kanal je ispran sa 5 ml fiziološkog rastvora i čuvan kao pozitivna kontrola. Negativna kontrola: (n=4) Uzorci nisu injektirani suspenzijom, tj. korijenski kanal nije bio kontaminiran sa E. faecalis i čuvan je sterilno kao negativna kontrola kako bi se potvrdila sterilizacija i pouzdanost postupka. U svakom uzorku upotrijebite 5 ml testne otopine za pranje. Svaki uzorak je zatim podvrgnut završnom ispiranju sa 1 ml sterilnog fiziološkog rastvora.
Sterilni papirni vrh veličine 35 koristi se za prikupljanje uzoraka iz korijenskih kanala. Papirni vrh je umetnut u cijev do radne dužine, ostavljen 10 sekundi, a zatim prebačen na agar ploče kako bi se odredio broj jedinica koje formiraju kolonije (CFU) po ploči. Ploče su inkubirane na 37ºC tokom 24 sata, a zatim vizualno procijenjen na rast bakterija. Prozirna ploča pokazuje potpunu sterilizaciju. Zamućene ploče se smatraju pokazateljima pozitivnog rasta. Određen je prosječan broj CFU u zoni rasta bakterija po pločici i izračunat je broj CFU. Preživjeli se prvenstveno mjere brojem održivih jedinica na pločama za kapanje. Osim toga, čašica za prelijevanje korištena je za brojanje niskih CFU, a razrjeđenje do 106 korišteno je za brojanje visokih CFU. 36,37
Pripremite epruvete koje sadrže 15 ml odmrznutog agar-agar medija prethodno steriliziranog u autoklavu istog dana kao i za eksperiment. Enterococcus faecalis je fakultativni gram-pozitivni anaerobni kokus koji može preživjeti pri vrlo visokom pH, kiselosti i visokim temperaturama. 39 Bakterijski uzorci (Enterococcus faecalis ATCC 29212) pripremljeni su miješanjem ćelija iz kolonija sa sterilnim fiziološkim rastvorom. Bakterijski uzorci su zatim razrijeđeni fiziološkim rastvorom do McFarland 0,5, što je ekvivalentno 108 CFU/mL. Dodani volumen uzorka bio je 10 µl. 39 Standard mutnoće (McFarland 0,5)40 pripremljen je sipanjem 0,6 ml 1% (10 g/l) rastvora barijum hlorida dihidrata u graduisani cilindar od 100 ml i punjenjem do 100 ml sa 1% (10 g/l) sumporne kiseline. Standardi zamućenosti su stavljeni u iste epruvete kao i uzorci bujona i čuvani na sobnoj temperaturi 6 mjeseci u mraku i zatvoreni kako bi se spriječilo isparavanje. Otvorite poklopac prazne Petrijeve zdjelice i sipajte uzorak u sredinu zdjelice. Ako se agar potpuno stvrdne, okrenite ploču i inkubirajte na 37°C tokom 24 sata.
Svi podaci su prikupljeni, tabelarno prikazani i podvrgnuti statističkoj analizi. Statistička analiza je izvršena korištenjem IBM® SPSS® Statistical Version 17 for Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, SAD).
Ispitivana je topljivost Chx.HCl u različitim uljnim fazama, rastvorima surfaktanata, rastvorima ko-surfaktanta i vodi. Chx.HCl ima najveću topljivost u Labrafil M i najnižu topljivost u oleinskoj kiselini. Veća topljivost lijeka u uljnoj fazi važna je za nanoemulzije jer nanoemulzije mogu zadržati lijek u rastvorenom obliku, što znači da veća topljivost lijeka u ulju rezultira manjom količinom ulja u formulaciji, a samim tim i manjom količinom lijeka. Za emulgiranje kapljica ulja potrebna je određena količina surfaktanta i ko-surfaktanta.
Pseudo-trostruki fazni dijagram je konstruisan kako bi se definisale nanoemulzijske regije i optimizovale koncentracije odabranih ulja, surfaktanata i dodatnih surfaktanata (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 i propilen glikol, respektivno). Chx.HCl pokazuje vrlo nisku rastvorljivost u oleinskoj kiselini, što rezultira zamućenjem kada se oleinska kiselina titrira prvom kapljicom vode. Stoga je sistem oleinske kiseline isključen iz ove studije. Druge formulacije su pripremljene korištenjem smjese ulja i surfaktanata u omjeru 1:9. U ovom rasponu pH i jonske jačine, odabrani su ovi surfaktanti.
Sve pripremljene formulacije bile su bistre osim Sistema F2, koji je izgledao mutno i stoga je isključen iz daljih studija evaluacije.
Idealna formulacija nanoemulzije trebala bi biti u stanju da se potpuno i brzo disperguje kada se razrijedi laganim miješanjem. Formulacije nanoemulzije Chx.HCl pokazale su kratko vrijeme emulgiranja, od 1,67 do 12,33 sekundi. Tween 80 ima najkraće vrijeme emulgiranja. To se može objasniti većim kapacitetom solubilizacije Tween 80. Vrijeme samoemulgiranja se povećava sa povećanjem koncentracije surfaktanta, što može biti posljedica povećanja viskoznosti sistema pod djelovanjem surfaktanta.
Veličina kapljica emulzije određuje brzinu i obim oslobađanja lijeka. Manja veličina kapljica emulzije rezultira kraćim vremenom emulgiranja i većom površinom za apsorpciju lijeka. Prosječne veličine kapljica odabranih sastava Chx.HCl nanoemulzije bile su 711±0,44, 587±15,3, 10,97±0,11, 16,43±4,55 i 12,18±2,48, a PDI je bio 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 i 0,76 za F1, F2, F3 i 0,16 za F4, F5 i F6, respektivno. Formulacije koje sadrže Tween 80 kao surfaktant pokazale su manje sferulite. To može biti zbog njegove veće emulgirajuće moći. Niža PDI vrijednost ukazuje na užu distribuciju veličine sistema. Ove formulacije imaju čist izgled jer su im radijusi kapljica manji od optičke talasne dužine vidljive svjetlosti (390-750 nm) pri kojoj dolazi do minimalnog raspršenja svjetlosti. 41
Na sl. 2 prikazan je postotak Chx.HCl oslobođenog iz formulirane formulacije. Potpuno oslobađanje lijeka iz pripremljenih formulacija Chx.HCl nanoemulzije kretalo se od 2 do 7 minuta. Uočeno je da je najveća brzina oslobađanja lijeka postignuta u slučaju formulacije Chx.HCl F6 nanoemulzije (2 min), što može biti posljedica prisustva Tween 80, koji je pokazao veći stepen emulgiranja, a rezultirajuća nanoemulzija pruža veliku površinu za oslobađanje lijeka, omogućavajući povećanu brzinu oslobađanja lijeka. Istovremeno, svojstva topljivosti propilen glikola omogućavaju otapanje velike količine hidrofilnih surfaktanata u ulju. 40
Utvrđeno je da oslobađanje Chx.HCl in vitro slijedi drugačiji kinetički redoslijed i ne postoji jasan kinetički redoslijed koji može odražavati oslobađanje lijeka iz različito pripremljenih formulacija nanoemulzije. Kinetičko oslobađanje F4 lijekova je kinetika prvog reda, što znači da se oslobađaju proporcionalno količini lijeka koja je ostala u njima.42 Kinetičko oslobađanje drugih lijekova bilo je u skladu s Higuasha difuzijskim modelom, koji je pokazao da je količina oslobođenog lijeka proporcionalna kvadratnom korijenu ukupnog lijeka i topljivosti lijeka u nanoemulziji.42
Odabrane formulacije su podvrgnute različitoj termodinamičkoj stabilnosti stresnim testovima korištenjem ciklusa zagrijavanja i hlađenja, centrifugiranja i ciklusa smrzavanja i odmrzavanja. Uočeno je da su formulacije F3 i F4 pokazale taloženje lijeka nakon ciklusa odmrzavanja, dok je F1 pokazala zgušnjavanje (geliranje). F5 i F6 su prošle ciklus kontinuiranog centrifugiranja, test zagrijavanja i hlađenja i test smrzavanja i odmrzavanja. Nanoemulzije su termodinamički stabilni sistemi formirani pri određenim koncentracijama ulja, surfaktanta i vode bez faznog razdvajanja, emulgiranja ili pucanja. Termička stabilnost razlikuje nanoemulzije od emulzija, koje su kinetički stabilne i na kraju će se razdvojiti u faze. 19 F3 je pokazala veću veličinu čestica (587 nm) od drugih formulacija, što može objasniti fazno razdvajanje i taloženje lijeka u testovima termodinamičke stabilnosti. F4 koja sadrži Tween 80 i bez ko-surfaktanta pokazala je taloženje lijeka, što može ukazivati ​​na potrebu upotrebe propilen glikola i Tween 80 za poboljšanje stabilnosti formulacija nanoemulzije. F1 koji sadrži Tween 20 bez dodatnog surfaktanta pokazao je zgušnjavanje (geliranje), što je povećanje viskoznosti ili čvrstoće gela zbog agregacije kapljica.
Rezultati stabilnosti pokazuju važnost prisustva dodatnog surfaktanta propilen glikola za povećanje disperzije čestica i sprječavanje taloženja lijeka. 43 F6 je bio najbolja formulacija zbog male veličine čestica (12,18 nm), kratkog vremena emulgiranja (1,67 sekundi) i brze brzine rastvaranja nakon 2 minute. Utvrđeno je da je termodinamički/fizički stabilan sistem i stoga je odabran za daljnja istraživanja.
Neuspjesi nakon liječenja korijenskog kanala postaju sve češći, što znači da pacijenti imaju povećan rizik od razvoja složenijih infekcija. 44,45 Biofilm se mora ukloniti tokom dezinfekcije i punjenja korijenskih kanala. 46,47 Zbog složenosti sistema korijenskog kanala, postaje teško potpuno ukloniti bakterije iz korijenskih kanala koristeći samo instrumente i irigaciju. 48 Učinkovitost otopina za ispiranje korijenskog kanala ovisi o prodiranju iriganta u DT i trajanju izlaganja bakterijama. 49 Stoga su isprobane i testirane nove metode temeljite sterilizacije korijenskog kanala. Konvencionalna ispiranja ne eliminiraju u potpunosti E. faecalis zbog manjeg prodiranja DT.50
Prosječna moć čišćenja nanoemulzijom za ispiranje bila je 2001,47 µm2, a prosječna veličina čestica sredstva za ispiranje bila je 2609,56 µm. Prosječna razlika između pranja nanoemulzijom i pranja s normalnom veličinom čestica bila je 608,09 µm2. Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između nanoemulzijskih iriganata i iriganata normalne veličine čestica sa (P-vrijednost 0,00052). Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između nanoemulzijskih iriganata i iriganata normalne veličine čestica sa (P-vrijednost 0,00052). Između irigacionih rastvora nanoemulzija i irigacionih rastvora sa normalnom veličinom čestica posmatrala su statističke visoko značajne (P<0,001) razlike (značenje P 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika (P vrijednost 0,00052) između nanoemulzijskih iriganata i iriganata s normalnim česticama.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异.（1P<0值0,00052).纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异.（1P<0值0,00052). Između opolaskivača nanoemulzije i opolaskivača s normalnom veličinom čestica bila je statistički vrlo značajna razlika (P<0,0001) (značenje P 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna razlika (P<0,0001) između ispiranja nanoemulzijom i ispiranja normalnom veličinom čestica (P-vrijednost 0,00052).Nanoemulzija je pokazala statistički vrlo značajnu razliku u poređenju s materijalom normalne veličine čestica, pokazujući nižu prosječnu površinu zaostalog otpada, tj. nanoemulzijski materijal je imao najbolju sposobnost čišćenja, kao što je prikazano na slici 3.
Slika 3. Poređenje performansi čišćenja sredstava za ispiranje: (A) sa aktiviranim Nano CHX laserom, (B) sa aktiviranim CHX laserom, (C) sa PUI Nano CHX, (D) bez Nano CHX aktivacije, (E) bez CHX aktivacije i (F) CHX PUI aktivacija.
Prosječna površina preostalih fragmenata Chx.HCl 1,6% iznosila je 2320,36 µm2, a prosječna površina Chx.HCl 2% iznosila je 2949,85 µm2. Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata s normalnom veličinom čestica (P-vrijednost 0,00000). Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata s normalnom veličinom čestica (P-vrijednost 0,00000). Nastala je statistički visokoznačajna (P<0,001) razlika između više visoke koncentracije nanoemulzionih rastvora za navodnjavanje i rastvora za irigaciju sa normalnom veličinom čestica (značenje P 0,00000). Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异 (P<0,001) (P值0.00000）.较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学显着的剂）00 P<0. 0.0 Nastala je statistički vrlo značajna raznica (P<0,001) između više visoke koncentracije opolaskivatelja sa nanoemulzijijom i opolaskivatorom s normalnom veličinom čestica (značenje P 0,00000). Postojala je statistički vrlo značajna razlika (P<0,001) između ispiranja s višim koncentracijama nanoemulzije i ispiranja s normalnom veličinom čestica (P-vrijednost 0,00000).Iako je koncentracija nanoemulzijskog iriganta bila niža od koncentracije iriganta normalne veličine čestica, ova niža koncentracija bila je značajno efikasnija u uklanjanju ostataka i efikasnije u čišćenju korijenskih kanala.
PUI je imao statistički visoko značajnu razliku (p<0,001) u poređenju s drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički visoko značajnu razliku (p<0,001) u poređenju s drugim metodama aktivacije. PUI ima statističke podatke o visokom značenju (p<0,001) po sravnjenju s drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički visoko značajnu razliku (p<0,001) u poređenju s drugim metodama aktivacije.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001)。与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001)。 Po usporedbi s drugim metodama aktivacije PUI-a, ima statistički vrlo značajnu razliku (p<0,001). U poređenju s drugim metodama aktivacije, PUI je imao statistički vrlo značajnu razliku (p<0,001).Aktivacijom ISP-a, prosječna površina preostale površine krhotina iznosila je 1695,31 µm2. Srednja razlika između PUI i Lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa (p-vrijednost 0,00000). Srednja razlika između PUI i Lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa (p-vrijednost 0,00000). Srednja razlika između PUI i Lasera iznosila je 987,89929, demonstrirajući visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-značenje 0,00000). Srednja razlika između PUI i Lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku od (p-vrijednost 0,00000). PUI 和 Laser 之间的平均差异为987.89929, 显示出高度统计学显着性(P<0,001) 差0异0.0p.PUI 和 Laser Srednja razlika između PUI-a i Lasera iznosila je 987,89929, što je svedočanstvo o visokoj statističkoj značajnosti (P<0,001) različitosti (p-značenje 0,00000). Srednja razlika između PUI i Lasera bila je 987,89929, što ukazuje na visoku statistički značajnu (P<0,001) razliku (p-vrijednost 0,00000). Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s p-vrijednošću od 0,00098. Upotreba laserske aktivacije ili bez aktivacije nije se statistički značajno razlikovala (P>0,05), s P-vrijednošću od 0,451211. Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa p-vrijednošću od 0,00098 (p-vrijednost od 0,451211). Srednja razlika između PUI i odsustva aktivnosti iznosila je 712,40643, demonstrirajući visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa p-značenjem 0,00098). Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa p-vrijednošću od 0,00098).P-vrijednost 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643,显示高度统计学显着性差异(P<0,001)，值为0,00098).PUI Srednja razlika između PUI-a i inaktivacije iznosila je 712,40643, što pokazuje visoku statističku značajnost razlike (P<0,001, p-značenje 0,00098). Srednja razlika između PUI i inaktivacije bila je 712,40643, što ukazuje na visoku statističku značajnost razlike (P<0,001, p-vrijednost 0,00098).使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0,05) P 值为0,451211.使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0,05) P 值为0,451211. Statistički značajnoj raznici (P>0,05) s lazernom aktivacijom ili bez da nije bilo sa vrijednostima P 0,451211. Nije bilo statistički značajne razlike (P>0,05) sa ili bez laserske aktivacije, sa P vrijednošću od 0,451211.Prosječna površina preostalih fragmenata nakon laserske aktivacije iznosila je 2683,21 µm2. Prosječna površina preostalih fragmenata bez aktivacije iznosila je 2407,72 µm2. U poređenju sa laserskom aktivacijom ili bez aktivacije, PUI je imao statistički manju prosječnu površinu čipa, tj. najbolju moć čišćenja.
Prosječna moć čišćenja nanoemulzijom za ispiranje bila je 2001,47 µm2, a prosječna veličina čestica sredstva za ispiranje bila je 2609,56 µm. Prosječna razlika između pranja nanoemulzijom i pranja s normalnom veličinom čestica bila je 608,09 µm2. Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između nanoemulzijskih iriganata i iriganata normalne veličine čestica sa (P-vrijednost 0,00052). Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između nanoemulzijskih iriganata i iriganata normalne veličine čestica sa (P-vrijednost 0,00052). Između irigacionih rastvora nanoemulzija i irigacionih rastvora sa normalnom veličinom čestica bila je statistički visokoznačajna (P<0,001) razlika (značenje P 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna (P<0,001) razlika (P vrijednost 0,00052) između nanoemulzijskih iriganata i iriganata s normalnim česticama.纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异 (P<0,001) (P值0,00052)）. P<0,001） (P值0,00052)）. Između opolaskivača nanoemulzije i opolaskivača s normalnom veličinom čestica bila je statistički vrlo značajna razlika (P<0,0001) (značenje P 0,00052). Postojala je statistički vrlo značajna razlika (P<0,0001) između ispiranja nanoemulzijom i ispiranja normalnom veličinom čestica (P-vrijednost 0,00052).U poređenju sa materijalom normalne veličine čestica, nanoemulzija ima statistički vrlo značajnu razliku, pokazujući nižu prosječnu površinu zaostalog otpada, tj. nanoemulzijski materijal ima bolju sposobnost čišćenja kao što je prikazano na slici 3.
Prosječna površina preostalih fragmenata Chx.HCl 1,6% iznosila je 2320,36 µm2, a prosječna površina Chx.HCl 2% iznosila je 2949,85 µm2. Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000). Postojala je statistički visoko značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata s normalnom veličinom čestica (P-vrijednost 0,00000). Imala se statistički visokodostotvorna (P<0,001) razlika između više visoke koncentracije nanoemulzionih sredstava za navodnjavanje i rastvora za navodnjavanje sa normalnom veličinom čestica (značenje P 0,00000). Postojala je statistički značajna (P<0,001) razlika između iriganata s većom koncentracijom nanoemulzije i iriganata normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异 (P<0,001) (P值0,00000)较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异 (P<0,001) (P000 Nastala je statistički visokoznačajna raznica (P <0,001) između viših koncentracija opolaskivača sa nanoemulziji i opolaskivačem s normalnom veličinom čestica (značenje P 0,00000). Postojala je statistički vrlo značajna razlika (P < 0,001) između ispiranja višim koncentracijama nanoemulzije i ispiranja normalne veličine čestica (P-vrijednost 0,00000).Iako je koncentracija nanoemulzijskog iriganta bila niža od koncentracije iriganta normalne veličine čestica, ova niža koncentracija bila je značajno efikasnija u uklanjanju ostataka i efikasnije u čišćenju korijenskih kanala.
PUI je pokazao statistički visoko značajnu razliku (p<0,001) u poređenju s drugim metodama aktivacije. PUI je pokazao statistički visoko značajnu razliku (p<0,001) u poređenju s drugim metodama aktivacije. PUI ima statistički visoku značajnu razliku (p<0,001) prema drugim metodama aktivacije. PUI je imao statistički značajnu razliku (p<0,001) u poređenju s drugim metodama aktivacije.与其他激活方法相比,PUI 具有统计学上的显着差异(p<0,001). U poređenju s drugim metodama aktivacije, PUI ima statistički značajnu razliku (p<0,001). PUI statistički značajno odlikovao se (p<0,001) prema sravnjenju s drugim metodama aktivacije. PUI se statistički značajno razlikovao (p<0,001) u poređenju s drugim metodama aktivacije.Tokom aktivacije PUI-a, prosječna površina preostalih površinskih ostataka iznosila je 1695,31 μm2. Srednja razlika između PUI i lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa (p-vrijednost 0,00000). Srednja razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa (p-vrijednost 0,00098). Upotreba laserske aktivacije ili bez aktivacije nije se statistički značajno razlikovala (P>0,05) sa (P-vrijednost 0,451211). Prosječna razlika između PUI i lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa (p-vrijednost 0,00000). Prosječna razlika između PUI i bez aktivacije bila je 712,40643, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa (p-vrijednost 0,00098). Upotreba laserske aktivacije ili bez aktivacije nije se statistički značajno razlikovala (P>0,05) sa (P-vrijednost 0,451211). Srednja razlika između PUI i laserom iznosila je 987,89929, demonstrirajući visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku s (p-značenje 0,00000). Prosječna razlika između PUI i lasera bila je 987,89929, što pokazuje visoko statistički značajnu (P<0,001) razliku sa (p-vrijednost 0,00000). - vrijednost 0,00098). Iskorištenje lazerne aktivacije ili odsustvo aktivacije nije statistički značajna razlika (P>0,05) s (P-značenje 0,451211). - vrijednost 0,00098). Upotreba laserske aktivacije ili bez aktivacije imala je statistički značajnu razliku (P>0,05) sa (P-vrijednost 0,451211). PUI 和激光之间的平均差异为987,89929, 与 (p 值0,00000) 差异具有高度统计学统计学统计学统计学与(p 值0,00000) 差异具有高度统计学统计学统计学意 Prosječna razlika između PUI i lasera je 987,89929, a razlika (p < 0,00000) ima visoku statističku značajnost (P < 0,001). Srednja razlika između PUI i laserom iznosila je 987,89929, što je bilo visoko statistički značajno (P<0,001) s (značenje p 0,00000). Srednja razlika između PUI i lasera bila je 987,89929, što je bilo statistički visoko značajno (P<0,001) sa (p-vrijednost 0,00000). PUI 与未激活之间的平均差异为712.40643, 与(p) 差异具有高度统计学意计学意计学意义〉 (P<0.09) (P<0.09) (P<0.09). Prosječna razlika između PUI i neaktivnih iznosi 712,40643, a razlika (p) ima visoku statističku značajnost (P<0,001) – vrijednost 0,00098. Srednja razlika između PUI-a i inaktivacije iznosila je 712,40643, što je bilo visoko statistički značajno s razlikom (p) (P<0,001 — vrijednost 0,00098). Srednja razlika između PUI i inaktivacije bila je 712,40643, što je bilo statistički visoko značajno sa razlikom (p) (P<0,001 – vrijednost 0,00098).使用激光激活或不激活没有显着统计学差异(P>0,05) 与(P 值0,451211)。 Nije bilo značajne statističke razlike između aktivacije i neaktivacije laserom (P>0,05) i (P值0,451211). Nije bilo statistički značajne razlike (P>0,05) prema sravnjenju s (značenje P 0,451211) s lazernom aktivacijom ili bez nee. Nije bilo statistički značajne razlike (P>0,05) u poređenju sa (P vrijednost 0,451211) sa ili bez aktivacije laserom.Prosječna površina preostalih fragmenata tokom laserske aktivacije iznosila je 2683,21 μm2. Prosječna površina preostalih fragmenata bez aktivacije iznosila je 2407,72 μm2. U poređenju sa laserskom aktivacijom ili bez aktivacije, PUI ima statistički manju prosječnu površinu čipa, tj. bolju sposobnost čišćenja.
Prosječni učinak ispiranja nanoemulzijom na uklanjanje ostataka bio je statistički značajno veći od učinka ispiranja česticama normalne veličine. Chx.HCl 1,6%, PUI 1938,77 µm2, 2510,96 µm2 s laserom. Bez aktivacije, prosječna vrijednost je 2511,34 µm2. Kada je korišteno 2% Chx.HCl i aktivirano laserom, rezultati su bili najgori, a količina ostataka maksimalna. Isti rezultati su dobiveni kada 0,75% Chx.HCl nije aktivirano. Očigledno je da su najbolji rezultati dobiveni korištenjem većih koncentracija sredstva za ispiranje u nanoemulziji. PUI je bio najefikasniji u aktivaciji iriganta i ispiranju ostataka, kao što je prikazano na slici 3A-F).
Kao što je prikazano u Tabeli 2, Chx.HCl nanoemulzija je pokazala bolje rezultate od čestica normalne veličine u smislu broja održivih mikroorganizama i imala je dobru korelaciju s prodiranjem formulacije i efektom čišćenja prema sljedećim parametrima: veličina, koncentracija sredstva za ispiranje i metoda aktivacije.
Bakterije se mogu potpuno uništiti korištenjem veće koncentracije sredstva za ispiranje. Čak i uz PUI aktivaciju, 0,75% Chx.HCl imalo je najgori antibakterijski učinak. Laserska aktivacija negativno utječe na ispiranje nano-emulzijom. Kao što se može vidjeti iz svih prethodnih rezultata, upotreba lasera smanjuje efikasnost nanoemulzije Chx.HCl 0,75%, gdje je CFU nanoChx.HCl 0,75% 195, što je vrlo visoka vrijednost, što ukazuje na to da su reagensi pri ovoj koncentraciji usporedivi s laserskom aktivacijom. Diodni laseri su fototermalni, tako da ili svjetlost ili toplina mogu uzrokovati da nanoemulzija izgubi svoj antibakterijski učinak. Rezultat visokih koncentracija je potpuno uništenje bakterija. Nano Chx.HCl 1,6% pokazao je negativan rast bakterija u prisustvu laserske aktivacije, što znači da laser nije utjecao na antibakterijsku sposobnost nano Chx.HCl 1,6%. Može se zaključiti da nanoemulzijski materijal s većom koncentracijom ima bolji antibakterijski učinak.
U ovom radu, Chx.HCl nanoemulzije su pripremljene korištenjem dva različita ulja, dva surfaktanta i ko-surfaktanta, a odabrana je optimalna formulacija (F6) sa malom veličinom čestica, kratkim vremenom emulgiranja i visokom brzinom rastvaranja. Pored toga, (F6) je testirana na termodinamičku/fizičku stabilnost. U Chx.HCl nanoemulziji pri koncentraciji od 1,6%, Chx.HCl nanoemulzija je pokazala najbolju propusnost u dentinskim tubulima u poređenju sa tradicionalnim Chx.HCl kao tečnošću za ispiranje, a PUI kao metoda aktivacije imala je sposobnost čišćenja. Pored toga, antibakterijske studije Chx.HCl nanoemulzije pokazale su potpuno uklanjanje bakterija. Rezultati su to potvrdili. Chx.HCl nanoemulzija se može smatrati obećavajućom tečnošću za pranje.
Veoma smo zahvalni osoblju istraživačke laboratorije Univerziteta nauke i tehnologije Misr na njihovoj velikoj podršci.