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Composition et caractérisation d'une nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhexidine en tant que solution d'irrigation canalaire antibactérienne prometteuse : études in vitro et ex vivo
作者 Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1 Mona K. Younis, 1 Doaa H. Hassan, 1 Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2 Ehab Hassanein, 3 Kariem El-Batuti, 3 Alaa Elfaham 31 Sciences et Technologies, Faculté de Pharmacie et de Pharmacie Industrielle, Université Misr, Cité du 6 Octobre, Égypte ; 2 Département de Microbiologie et d’Immunologie, Faculté de Pharmacie, Université Misr des Sciences et Technologies, Cité du 6 Octobre, Égypte ; 3 Département d’Endodontie, Université Ain Shams, Le Caire, Égypte. Introduction et Objectif : Le chlorhydrate de chlorhexidine [Chx.HCl] possède un large spectre d’activité antibactérienne, une action prolongée et une faible toxicité ; il est donc recommandé comme solution d’irrigation canalaire potentielle. L’objectif de cette étude était d’utiliser une nouvelle composition, une nanoémulsion de Chx.HCl, afin d’améliorer le pouvoir de pénétration, le pouvoir nettoyant et l’action antibactérienne du Chx.HCl et de l’utiliser comme solution d’irrigation canalaire. Méthodes : Des nanoémulsions de chlorhydrate ... La nanoémulsion de chlorhexidine à 1,6 % présente une taille de particules réduite (12,18 nm), un temps d'émulsification court (1,67 seconde) et une dissolution rapide après 2 minutes. Ce système s'est avéré thermodynamiquement et physiquement stable. Comparée à la granulométrie conventionnelle du chlorhydrate de chlorhexidine, la nanoémulsion à 1,6 % présente une meilleure pénétration grâce à la plus petite taille des particules. Comparée à un matériau de taille de particules normale (2609,56 µm²), la nanoémulsion à 1,6 % présente la plus petite surface moyenne de résidus (2001,47 µm²). Conclusion : La nanoémulsion de chlorhexidine possède un pouvoir nettoyant et une action antibactérienne supérieurs. Elle présente une action bactéricide très efficace contre Enterococcus faecalis, avec un taux de contraction cellulaire élevé, voire une destruction complète. Mots-clés : chlorhydrate de chlorhexidine, nanoémulsion, solution d'irrigation canalaire, pénétration, effet nettoyant, solution d'irrigation antibactérienne.
Les nanoémulsions, une classe d'émulsions dont la taille des gouttelettes se situe entre 50 et 500 nm, ont suscité un vif intérêt ces dernières années en raison de leurs propriétés uniques. Dotées de bonnes propriétés nettoyantes, elles ne sont pas affectées par la dureté de l'eau, présentent généralement une faible toxicité et sont dépourvues d'interactions électrostatiques. La nanotechnologie, grâce à sa taille de particules ultra-réduite, son rapport surface/masse élevé et ses propriétés physico-chimiques uniques comparées aux produits en vrac similaires, ouvre également de nouvelles perspectives dans le traitement et la prévention des infections dentaires. Le chlorhydrate de chlorhexidine (Chx.HCl) est légèrement soluble dans l'eau, très légèrement soluble dans l'alcool et se colore progressivement à la lumière. Le Chx.HCl possède une action antibactérienne à large spectre, une action prolongée et une faible toxicité. De ce fait, il est également recommandé comme solution d'irrigation canalaire potentielle. Les principaux avantages du Chx.HCl sont sa faible cytotoxicité, son absence d'odeur et de goût désagréable. Plusieurs types de lasers ont été utilisés pour améliorer la désinfection canalaire. L’effet bactéricide des lasers dépend de leur longueur d’onde et de leur énergie, ainsi que de l’exposition thermique, qui induit des modifications de la paroi cellulaire bactérienne et, par conséquent, une modification du gradient osmotique pouvant entraîner la mort cellulaire. L’interaction entre les lasers et les irrigateurs canalaires ouvre de nouvelles perspectives en matière de désinfection pulpaire. L’énergie ultrasonore produit des fréquences élevées mais des amplitudes faibles. Les fichiers sont conçus pour osciller à des fréquences ultrasoniques de 25 à 30 kHz, qui sont au-delà de la limite de la perception auditive humaine (>20 kHz). Les fichiers sont conçus pour osciller à des fréquences ultrasoniques de 25 à 30 kHz, qui sont au-delà de la limite de la perception auditive humaine (>20 kHz). Il y a des offres pour les enfants de 25 à 30 kilos, qui correspondent à la période précédant votre achat (> 20 kкГц). Les fichiers sont conçus pour vibrer à des fréquences ultrasoniques de 25 à 30 kHz, qui sont au-delà de la gamme de l'audition humaine (> 20 kHz).Les fréquences de 25 à 30 kHz sont supérieures à 20 kHz.25–30 kHz Il est préférable de choisir une chaudière à ultra-légers de 25 à 30 kilos, qui doit être utilisée avant une consommation d'alcool supérieure à 20 kilos. Les fichiers sont conçus pour des vibrations à des fréquences ultrasoniques de 25 à 30 kHz, ce qui dépasse les limites de l'audition humaine (>20 kHz).Ces instruments fonctionnent par oscillation transversale, générant des modes caractéristiques de nœuds et de ventres le long de leur axe. L’irrigation ultrasonique passive (IUP) est un protocole d’irrigation où aucun instrument ni paroi n’entre en contact avec les limes ou instruments endodontiques. Lors d’une IUP, l’énergie ultrasonore est transférée de la lime vibrante à la solution d’irrigation dans le canal radiculaire. Cette dernière peut induire un flux sonique et une cavitation de l’agent de rinçage.¹¹ Au vu de ces données, l’utilisation des nanotechnologies pour évaluer l’amélioration du pouvoir pénétrant et nettoyant du chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhexidine (Chx.HCl) est jugée pertinente.
Le chlorhydrate de chlorhexidine (Chx.HCl) a été aimablement fourni par Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Le Caire, Égypte). Le Labrafil M 1944 CS (oléoylpolyoxy-6-glycéride) a été généreusement fourni par Gattefossé (Saint-Priest, France). Le Tween 20 (monolaurate de sorbitan polyoxyéthyléné (20)), le Tween 80 (monooléate de sorbitan polyoxyéthyléné (80)), l'acide oléique et le propylène glycol proviennent de la société Gomhorya (Le Caire, Égypte). Extraction de dents monoradiculées non cariées pour traitement parodontal ou orthodontique, Département des sciences maxillo-faciales, Faculté de médecine dentaire, Université Ain Shams, Le Caire, Égypte. Culture pure d'Enterococcus faecalis (souche ATCC 29212) cultivée dans un bouillon BHI (RC CLEANER, Ilchung Dental Ltd., Séoul, Corée).
La solubilité du chlorhydrate de ...
Un diagramme de phase pseudo-triple a été établi afin de déterminer le rapport exact de chaque composant nécessaire à la formulation pour obtenir les paramètres optimaux d'une nanoémulsion idéale.¹⁴ La formulation a été élaborée à partir d'huiles (acide oléique et Labrafil M1944CS), de tensioactifs (Tween 20 et Tween 80) et d'un tensioactif supplémentaire, le propylène glycol. Dans un premier temps, des mélanges séparés de tensioactifs (sans co-tensioactifs) et d'huiles ont été préparés selon différents rapports volumiques (de 1:9 à 9:1). Lors du titrage du mélange par l'eau (ajout goutte à goutte), la transition de la solution limpide à la solution trouble a été suivie de près, correspondant au point d'équivalence. Ces points d'équivalence ont ensuite été reportés sur le diagramme de phase pseudo-triple. L'ensemble du processus a été répété pour des mélanges de tensioactif et de tensioactif secondaire (Smix) préparés selon des rapports 2:1 et 3:1 et mélangés avec les huiles sélectionnées.^15,16
Des nanoémulsions contenant du chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate ont été préparées en utilisant du Labrafil M 1944 CS comme phase huileuse, du Tween 80 ou 20 comme tensioactif, du propylène glycol comme tensioactif secondaire et de l'eau (tableau 1). Le principe actif a été dissous dans le Labrafil M 1944 CS, puis l'eau contenant le tensioactif et le co-tensioactif a été ajoutée lentement sous agitation progressive. La quantité de tensioactif et de co-tensioactif ajoutée, ainsi que le pourcentage de phase huileuse pouvant être ajouté, ont été déterminés à l'aide d'un diagramme de phase pseudo-ternaire. Un générateur d'ultrasons (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Allemagne) a été utilisé pour obtenir la granulométrie souhaitée. L'équilibre a ensuite été rétabli.
Des tests de dispersibilité ont été réalisés à l'aide d'un appareil de dissolution (Dr. Schleuniger Pharmaton, modèle Diss 6000, Thoune, Suisse) dans lequel 1 ml de chaque préparation a été ajouté à 500 ml d'eau à 37 ± 0,5 °C. Une agitation douce est assurée par des palettes de dissolution standard en acier inoxydable tournant à 50 tr/min. L'émulsion obtenue a été observée visuellement et classée comme limpide, translucide avec une teinte bleutée, laiteuse ou trouble. Choisir une formule limpide pour les recherches ultérieures. 18.19
L'extraction de Chx.HCl à partir de compositions de nanoémulsions optimisées, basées sur un diagramme pseudo-triple, conduit à la production de n-butanol par ultrasons. Après dilution appropriée, les extraits ont été analysés par spectrophotométrie à une longueur d'onde de 260 nm pour déterminer leur teneur en Chx.HCl.
Pour déterminer le temps d'auto-émulsification, 1 ml de chaque composition a été ajouté à un bécher contenant 250 ml d'eau distillée et maintenu à 37 ± 1 °C sous agitation constante à 50 tr/min. Le temps d'auto-émulsification correspond au temps nécessaire pour que le préconcentré forme un mélange homogène après dilution.
Pour l'analyse de la taille des gouttelettes, diluer 50 mg de la formulation optimisée dans 1000 ml d'eau dans un flacon et mélanger délicatement à la main. La distribution granulométrique a été déterminée à l'aide d'un Zetasizer 2000 (Malvern Instruments Ltd., Malvern, Royaume-Uni) en mode rétrodiffusion (173°), à une température de 25 °C et un indice de réfraction de 1,330.
Des études de dissolution in vitro ont été réalisées à l'aide d'un appareil USP de type II (à palettes) (Dr. Schleuniger Pharmaton, modèle Diss 6000) à 50 tr/min. De l'eau distillée (500 ml) maintenue à une température de 37 ± 0,5 °C a été utilisée comme milieu de dissolution, et 5 ml de la composition préparée ont été ajoutés goutte à goutte à ce milieu. Ensuite, à intervalles réguliers, 5 ml du milieu de dissolution ont été prélevés et la quantité de médicament libérée a été déterminée par spectrophotométrie à 254 nm. Les expériences ont été réalisées en trois exemplaires.
Ensuite, les paramètres cinétiques de la libération in vitro de Chx.HCl à partir de nanoémulsions préparées à partir de ce composé ont été mesurés. Les modèles cinétiques d'ordre zéro, un et deux, ainsi que le modèle de diffusion de Higuchi, ont été testés afin de sélectionner la séquence cinétique la plus adaptée à la libération de Chx.HCl.
Deux millilitres de chaque formulation ont été conservés à température ambiante pendant 48 heures avant l'observation d'une séparation de phases. Des échantillons de 1 ml de chaque formulation de nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate ont ensuite été dilués à 10 ml et 100 ml avec de l'eau distillée à 25 °C et conservés pendant 24 heures. Une séparation de phases a alors été observée.
Des échantillons de 2 ml de chaque composition ont ensuite été transférés séparément dans des flacons transparents à bouchon à vis et conservés au réfrigérateur à 2 °C pendant 24 heures. Ils ont ensuite été conservés à 25 °C et 40 °C. Un seul cycle de refroidissement-décongélation a été effectué. Les échantillons ont ensuite été observés afin de détecter une éventuelle séparation de phases et une éventuelle précipitation du principe actif.
Un échantillon de 5 ml de chaque formulation de nanoémulsion de Chx.HCl a été transféré dans un tube en verre et placé dans une centrifugeuse de laboratoire (microcentrifugeuse modèle 800 de la Shanghai Surgical Instrument Factory, Shanghai, République populaire de Chine) et centrifugé à 4 000 tr/min pendant 5 minutes. Les échantillons ont ensuite été observés afin de détecter une éventuelle séparation de phases et une précipitation du médicament.
Toutes les expériences ont été approuvées par le Comité d'éthique institutionnel de l'Université Ain Shams, en Égypte. Cinquante dents humaines monoradiculées non cariées, à apex formé, ont été sélectionnées. Les dents extraites ont été utilisées après obtention du consentement éclairé écrit et signé du patient. Il s'agissait d'incisives maxillaires et mandibulaires et de prémolaires mandibulaires. Les surfaces externes des racines ont été traitées à la curette et toutes les dents ont été stérilisées en surface dans une solution de NaOCl à 0,5 % pendant 24 heures, puis conservées dans une solution saline stérile jusqu'à leur utilisation. La couronne a été éliminée à l'aide d'un disque diamanté à profil neutre et la longueur de la dent a été normalisée à 16 mm de l'apex à la limite coronaire.^24,25 Selon la solution de rinçage, les dents ont été réparties dans les groupes suivants :
(A) Les échantillons du groupe (n=24) ont été lavés avec une nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate. Le sous-groupe (I) (n=12) a rincé les échantillons avec 5 ml de nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhydrate à 0,75 %. Le sous-groupe (II) (n=12) a rincé les échantillons avec 5 ml de nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhydrate à 1,6 %. (B) Un groupe d'échantillons (n=24) sera lavé avec 5 ml de chlorhydrate de chlorhydrate à 2 % (granulométrie normale). Groupe témoin (n=2) : les échantillons ont été lavés avec 5 ml de solution saline sans activation.
Quarante-quatre dents humaines monoradiculées non cariées, à apex formé, ont été sélectionnées. Il s'agissait d'incisives maxillaires et mandibulaires et de prémolaires mandibulaires. Les surfaces externes des racines ont été traitées à la curette et toutes les dents ont été stérilisées en surface dans une solution de NaOCl à 0,5 % pendant 24 heures, puis conservées dans une solution saline stérile jusqu'à leur utilisation. Les couronnes ont été éliminées à l'aide d'un disque diamanté de sécurité et la longueur de la dent a été normalisée à 16 mm de l'apex à la marge coronaire.^24,25,29
Préparation mécanique de la lime apicale principale de taille 50 selon les méthodes standard. Utilisation d'une solution saline stérile comme solution d'irrigation pendant l'intervention. Le canal radiculaire a ensuite été rincé avec 2 ml d'EDTA à 17 % pendant 1 minute afin d'éliminer la boue dentinaire. La surface radiculaire entière, y compris le foramen apical de chaque échantillon, a été recouverte de deux couches de vernis à ongles (colle cyanoacrylate) pour prévenir les infiltrations. Les dents ont ensuite été fixées verticalement dans un bloc de tartre pour faciliter leur manipulation et leur identification. Les échantillons (29-33) ont ensuite été autoclavés à 121 °C et 15 psi pendant 20 minutes. Après stérilisation, tous les échantillons ont été transportés et traités dans des conditions stériles à l'aide d'instruments stériles. Les canaux radiculaires ont été contaminés par une culture pure d'Enterococcus faecalis (souche ATCC 29212) cultivée dans un bouillon BHI (extrait de cerveau et de cœur) pendant 24 heures à 37 °C. À l'aide d'une micropipette stérile, injecter une suspension limpide d'inoculum d'E. faecalis dans les canaux radiculaires préparés de toutes les dents. Les blocs ont ensuite été placés dans des béchers stériles et incubés à 37 °C pendant 24 heures. 31, 34, 35
Les échantillons du groupe A (n=24) ont été lavés avec une nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate. Les échantillons du sous-groupe I (n=12) ont été rincés avec 5 ml de nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate à une concentration de 0,75 %. Les échantillons du sous-groupe II (n=12) ont été rincés avec 5 ml de nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate à une concentration de 1,6 %.
Groupe témoin : témoin positif (n=4), le canal radiculaire contaminé a été rincé avec 5 ml de solution saline et conservé comme témoin positif. Témoin négatif (n=4) : les échantillons n’ont pas été injectés avec la suspension, c’est-à-dire que le canal radiculaire n’a pas été contaminé par E. faecalis, et ont été maintenus stériles comme témoin négatif afin de confirmer la stérilisation et la fiabilité de la procédure. Utiliser 5 ml de solution de lavage pour chaque échantillon. Chaque échantillon a ensuite subi un rinçage final avec 1 ml de solution saline stérile.
Un embout de papier stérile de taille 35 est utilisé pour prélever des échantillons des canaux radiculaires. L'embout est inséré dans le tube jusqu'à la longueur de travail, laissé en place pendant 10 secondes, puis transféré sur des plaques de gélose pour déterminer le nombre d'unités formant colonies (UFC) par plaque. Les plaques sont incubées à 37 °C pendant 24 heures, puis la croissance bactérienne est évaluée visuellement. Une plaque transparente indique une stérilisation complète. Les plaques présentant une coloration trouble sont considérées comme positives pour la croissance bactérienne. Le nombre moyen d'UFC dans la zone de croissance bactérienne par boîte est déterminé et le nombre total d'UFC est calculé. La survie des bactéries est principalement évaluée par comptage des cellules viables sur des plaques à goutte. De plus, un godet de prélèvement est utilisé pour le comptage des faibles concentrations d'UFC, et une dilution à 10⁶ est utilisée pour le comptage des concentrations élevées.
Préparer des tubes contenant 15 ml de milieu gélosé décongelé et stérilisé à l'autoclave le jour même de l'expérience. Enterococcus faecalis est un coccus anaérobie facultatif Gram positif capable de survivre à des pH et à une acidité très élevés, ainsi qu'à des températures élevées. 39 échantillons bactériens (Enterococcus faecalis ATCC 29212) ont été préparés en mélangeant des cellules de colonies avec une solution saline stérile. Les échantillons bactériens ont ensuite été dilués avec cette solution saline pour obtenir une turbidité de 0,5 McFarland, équivalente à 10⁸ UFC/ml. Le volume d'échantillon ajouté était de 10 µl. 39 Une solution étalon de turbidité (McFarland 0,5)⁴⁰ a été préparée en versant 0,6 ml d'une solution de chlorure de baryum dihydraté à 1 % (10 g/l) dans une éprouvette graduée de 100 ml et en complétant à 100 ml avec une solution d'acide sulfurique à 1 % (10 g/l). Les solutions étalons de turbidité ont été placées dans les mêmes tubes que les échantillons de bouillon et conservées à température ambiante pendant 6 mois à l'abri de la lumière et dans des tubes hermétiques pour éviter l'évaporation. Ouvrez le couvercle de la boîte de Petri vide et versez l'échantillon au centre. Si la gélose est complètement solidifiée, retournez la boîte et incubez-la à 37 °C pendant 24 heures.
Toutes les données ont été collectées, tabulées et soumises à une analyse statistique. Cette analyse a été réalisée à l'aide du logiciel IBM® SPSS® Statistical Version 17 pour Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, États-Unis).
La solubilité du chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate (Chx.HCl) a été étudiée dans différentes phases huileuses, solutions de tensioactifs, solutions de co-tensioactifs et dans l'eau. Le Chx.HCl présente la solubilité la plus élevée dans le Labrafil M et la plus faible dans l'acide oléique. Une solubilité élevée du principe actif dans la phase huileuse est importante pour les nanoémulsions, car celles-ci permettent de maintenir le principe actif dissous. Ainsi, une solubilité plus élevée dans l'huile se traduit par une quantité d'huile réduite dans la formulation et donc par une quantité de principe actif moindre. Une certaine quantité de tensioactif et de co-tensioactif est nécessaire pour émulsifier les gouttelettes d'huile.
Un diagramme de phase pseudo-triple a été construit pour définir les régions de nanoémulsion et optimiser les concentrations des huiles, tensioactifs et tensioactifs additionnels sélectionnés (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 et propylène glycol, respectivement). Le chlorhydrate de chlorhydrate (Chx.HCl) présente une très faible solubilité dans l'acide oléique, ce qui entraîne un trouble lors du titrage de l'acide oléique par la première goutte d'eau. Par conséquent, le système à base d'acide oléique a été exclu de cette étude. D'autres formulations ont été préparées à partir d'un mélange huile/tensioactif dans un rapport 1:9. Compte tenu de la gamme de pH et de force ionique, ces tensioactifs ont été sélectionnés.
Toutes les formulations préparées étaient claires, à l'exception du système F2, qui est apparu trouble et a donc été exclu des études d'évaluation ultérieures.
La formulation idéale de nanoémulsion doit se disperser complètement et rapidement sous agitation douce après dilution. Les nanoémulsions de chlorhydrate ...
La taille des gouttelettes de l'émulsion détermine la vitesse et l'étendue de la libération du médicament. Des gouttelettes plus petites entraînent un temps d'émulsification plus court et une surface d'absorption du médicament plus importante. Les tailles moyennes des gouttelettes des compositions sélectionnées de la nanoémulsion de chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate étaient de 711 ± 0,44 µm, 587 ± 15,3 µm, 10,97 ± 0,11 µm, 16,43 ± 4,55 µm et 12,18 ± 2,48 µm, et les indices de polydispersité (PDI) étaient respectivement de 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 et 0,76 pour F1, F2 et F3, et de 0,16 pour F4, F5 et F6. Les formulations contenant du Tween 80 comme tensioactif présentaient des sphérulites plus petites, probablement en raison de son pouvoir émulsifiant supérieur. Un PDI plus faible indique une distribution granulométrique plus étroite. Ces formulations présentent un aspect net car le rayon de leurs gouttelettes est inférieur à la longueur d'onde optique de la lumière visible (390-750 nm), pour laquelle la diffusion de la lumière est minimale. 41
La figure 2 illustre le pourcentage de Chx.HCl libéré à partir de la formulation. La libération complète du principe actif à partir des nanoémulsions de Chx.HCl préparées s'est effectuée en 2 à 7 minutes. Le taux de libération le plus élevé a été observé avec la nanoémulsion F6 (2 min), ce qui pourrait être dû à la présence de Tween 80. Ce dernier, grâce à son fort pouvoir émulsifiant, confère à la nanoémulsion une grande surface spécifique, favorisant ainsi une libération plus rapide du principe actif. Par ailleurs, la solubilité du propylène glycol permet la dissolution d'une grande quantité de tensioactifs hydrophiles dans l'huile.⁴⁰
La libération de Chx.HCl in vitro suit un ordre cinétique différent, et aucun ordre cinétique clair ne permet de décrire la libération du médicament à partir de différentes formulations de nanoémulsions. La libération des médicaments F4 suit une cinétique de premier ordre, ce qui signifie qu'ils sont libérés proportionnellement à la quantité de médicament restante dans la nanoémulsion.⁴² La libération des autres médicaments est conforme au modèle de diffusion de Higuasha, indiquant que la quantité de médicament libérée est proportionnelle à la racine carrée de la concentration totale de médicament et de sa solubilité dans la nanoémulsion.⁴²
Des formulations sélectionnées ont été soumises à des tests de stabilité thermodynamique variables, notamment des cycles de chauffage-refroidissement, de centrifugation et de congélation-décongélation. Les formulations F3 et F4 ont présenté une précipitation du principe actif après les cycles de décongélation, tandis que la formulation F1 a montré un épaississement (gélification). Les formulations F5 et F6 ont passé avec succès le cycle de centrifugation continue, le test de chauffage-refroidissement et le test de congélation-décongélation. Les nanoémulsions sont des systèmes thermodynamiquement stables, formés à certaines concentrations d'huile, de tensioactif et d'eau, sans séparation de phases, émulsification ni craquage. C'est la stabilité thermique qui distingue les nanoémulsions des émulsions, lesquelles sont cinétiquement stables et finissent par se séparer en phases. La formulation F3 présentait une taille de particules plus importante (587 nm) que les autres formulations, ce qui pourrait expliquer la séparation de phases et la précipitation du principe actif observées lors des tests de stabilité thermodynamique. La formulation F4, contenant du Tween 80 et sans co-tensioactif, a également présenté une précipitation du principe actif, ce qui pourrait indiquer la nécessité d'utiliser du propylène glycol et du Tween 80 pour améliorer la stabilité des nanoémulsions. Le F1 contenant du Tween 20 sans tensioactif supplémentaire a présenté un épaississement (gélification), qui est une augmentation de la viscosité ou de la force du gel due à l'agrégation des gouttelettes.
Les résultats de stabilité démontrent l'importance de la présence d'un tensioactif supplémentaire, le propylène glycol, pour améliorer la dispersion des particules et prévenir la précipitation du principe actif. La formulation 43 F6 s'est avérée la plus performante grâce à la petite taille de ses particules (12,18 nm), son temps d'émulsification court (1,67 seconde) et sa vitesse de dissolution rapide après 2 minutes. Ce système, stable sur les plans thermodynamique et physique, a été sélectionné pour une étude plus approfondie.
Les échecs après traitement endodontique sont de plus en plus fréquents, ce qui expose les patients à un risque accru d'infections plus complexes.^44,45 Le biofilm doit être éliminé lors de la désinfection et de l'obturation canalaire.^46,47 Compte tenu de la complexité du système canalaire, il est difficile d'éliminer complètement les bactéries par la seule irrigation.⁴⁸ L'efficacité des solutions de rinçage canalaire dépend de la pénétration de l'irrigant dans le canal radiculaire et de la durée d'exposition aux bactéries.⁴⁹ C'est pourquoi de nouvelles méthodes de stérilisation canalaire approfondie ont été testées. Les rinçages conventionnels n'éliminent pas complètement Enterococcus faecalis en raison d'une pénétration insuffisante dans le canal radiculaire.⁵⁰
Le pouvoir nettoyant moyen du rinçage à la nanoémulsion était de 2001,47 µm², et la taille moyenne des particules du produit de rinçage était de 2609,56 µm. La différence moyenne entre le lavage à la nanoémulsion et le lavage avec des particules de taille normale était de 608,09 µm². Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les solutions d’irrigation nanoémulsionnées et les solutions d’irrigation de taille de particules normale (valeur P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les solutions d’irrigation nanoémulsionnées et les solutions d’irrigation de taille de particules normale (valeur P 0,00052). Les méthodes d'irrigation et les installations d'irrigation à des niveaux normaux permettent de définir des statistiques высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) (valeur P 0,00052) entre les solutions d’irrigation à base de nanoémulsion et les solutions d’irrigation à base de particules normales.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P 0,00052）。纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P 0,00052）。 Les entreprises de taille normale et les entreprises de taille normale ont des statistiques sur la situation actuelle (P<0,0001) (значение P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,0001) entre le rinçage à la nanoémulsion et le rinçage à la taille de particules normale (valeur P 0,00052).La nanoémulsion a montré une différence statistiquement très significative par rapport au matériau de taille de particules normale, montrant une surface moyenne de débris résiduels plus faible, c'est-à-dire que le matériau nanoémulsion avait la meilleure capacité de nettoyage, comme le montre la figure 3.
Figure 3. Comparaison des performances de nettoyage des agents de rinçage : (A) avec activation laser Nano CHX, (B) avec activation laser CHX, (C) avec PUI Nano CHX, (D) sans activation Nano CHX, (E) sans activation CHX et (F) avec activation CHX PUI.
La surface moyenne des fragments restants de Chx.HCl 1,6 % était de 2320,36 µm2 et la surface moyenne de Chx.HCl 2 % était de 2949,85 µm2. Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale (valeur P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale (valeur P 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница между высокой концентрацией наноэмульсионных ирригационных растворов и ирригационными растворами с NORмальным размером частиц (значение P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale (valeur P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P 0,00000）。较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学显着的差异（P<0.001）（P 0 0,0 Les statistiques sur la taille de la zone (P<0,001) peuvent également vous intéresser de manière concentrée sur le plan personnel et ополаскивателя с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les concentrations plus élevées de rinçage de nanoémulsion et le rinçage de taille de particules normale (valeur P 0,00000).Bien que la concentration de la solution d'irrigation à base de nanoémulsion soit inférieure à celle de la solution d'irrigation à particules de taille normale, cette concentration plus faible s'est avérée nettement plus efficace pour éliminer les débris et pour nettoyer les canaux radiculaires.
PUI a montré une différence statistiquement très significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d’activation. PUI a montré une différence statistiquement très significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d’activation. PUI présente des statistiques sur la taille (p<0,001) en fonction des méthodes d'action. PUI a montré une différence statistiquement très significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d’activation.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0.001)。与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0.001)。 Lors de l'activation des méthodes PUI, les statistiques indiquent la valeur (p<0,001). Comparé aux autres méthodes d’activation, le PUI a montré une différence statistiquement très significative (p<0,001).Avec l'activation de l'ISP, la surface moyenne de la surface résiduelle des débris était de 1695,31 µm2. La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929, montrant une différence hautement significative sur le plan statistique (P<0,001) avec (valeur p 0,00000). La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929, montrant une différence hautement significative sur le plan statistique (P<0,001) avec (valeur p 0,00000). La taille de la méthode PUI et Laser correspond à 987,89929, démontrant que la valeur (P<0,001) est de (p-значение 0,00000). La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929, montrant une différence hautement significative sur le plan statistique (P<0,001) par rapport à (valeur p 0,00000). PUI et Laser 之间的平均差异为987.89929，显示出高度统计学显着性(P<0.001) 差异(p 值0.00000)。PUI et Laser La taille de la méthode PUI et Laser correspond à 987,89929, ce qui correspond à vos valeurs statistiques (P<0,001) (p-значение 0,00000). La différence moyenne entre PUI et Laser était de 987,89929, indiquant une différence statistiquement significative (P<0,001) (valeur p 0,00000). La différence moyenne entre l'activation du laser et l'absence d'activation était de 712,40643, ce qui représente une différence statistiquement très significative (P < 0,001) avec une valeur p de 0,00098. L'utilisation de l'activation laser ou l'absence d'activation n'a pas montré de différence statistiquement significative (P > 0,05) avec une valeur p de 0,451211. La différence moyenne entre PUI et absence d'activation était de 712,40643, ce qui représente une différence hautement significative sur le plan statistique (P < 0,001) avec une valeur p de 0,00098 (valeur p = 0,451211). La taille de la méthode PUI et celle de l'activité d'exploitation du 712,40643 ont été démontrées par la tranche (P<0,001) с p-значением 0,00098). La différence moyenne entre PUI et absence d'activation était de 712,40643, montrant une différence hautement significative sur le plan statistique (P<0,001) avec une valeur p de 0,00098).Valeur P 0,451211. PUI indique 712.40643, et indique 712.40643, p = 0.00098).PUI La taille de la méthode PUI et celle de l'inactivité 712,40643 correspondent à vos valeurs statistiques (P<0,001, p-значение 0,00098). La différence moyenne entre PUI et inactivation était de 712,40643, indiquant une signification statistique élevée de la différence (P<0,001, valeur p 0,00098).La valeur de référence est de 0,451211 (P>0,05) P = 0,451211.La valeur de référence est de 0,451211 (P>0,05) P = 0,451211. Les valeurs statistiques (P>0,05) avec l'activité laser ou sans que cela corresponde à P 0,451211. Il n'y avait pas de différence statistiquement significative (P>0,05) avec ou sans activation laser avec une valeur P de 0,451211.La surface moyenne des fragments restants après activation laser était de 2683,21 µm². La surface moyenne des fragments restants sans activation était de 2407,72 µm². Comparé à l'activation laser ou à l'absence d'activation, le traitement PUI a permis d'obtenir une surface moyenne de puce statistiquement plus petite, soit le meilleur pouvoir de nettoyage.
Le pouvoir nettoyant moyen du rinçage à la nanoémulsion était de 2001,47 µm², et la taille moyenne des particules du produit de rinçage était de 2609,56 µm. La différence moyenne entre le lavage à la nanoémulsion et le lavage avec des particules de taille normale était de 608,09 µm². Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les solutions d’irrigation nanoémulsionnées et les solutions d’irrigation de taille de particules normale (valeur P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre les solutions d’irrigation nanoémulsionnées et les solutions d’irrigation de taille de particules normale (valeur P 0,00052). Les paramètres d'irrigation et les paramètres d'irrigation à des niveaux normaux sont basés sur les statistiques высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) (valeur P 0,00052) entre les solutions d’irrigation à base de nanoémulsion et les solutions d’irrigation à base de particules normales.纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P值0.00052）。 P < 0,001) (P et 0,00052). Les entreprises de taille normale et les entreprises de taille normale ont des statistiques sur la situation actuelle (P<0,0001) (значение P 0,00052). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,0001) entre le rinçage à la nanoémulsion et le rinçage à la taille de particules normale (valeur P 0,00052).Comparée à un matériau de taille de particules normale, la nanoémulsion présente une différence statistiquement très significative, montrant une surface moyenne de débris résiduels plus faible, c'est-à-dire que le matériau nanoémulsion a une meilleure capacité de nettoyage comme le montre la figure 3.
La surface moyenne des fragments restants de Chx.HCl 1,6 % était de 2320,36 µm2 et la surface moyenne de Chx.HCl 2 % était de 2949,85 µm2. Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale (valeur P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P<0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale (valeur P 0,00000). Les statistiques de votre bassin d'irrigation (P<0,001) correspondent à votre mode d'irrigation et à sa concentration ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement significative (P<0,001) entre la concentration plus élevée d'irrigants de nanoémulsion et les irrigants de taille de particules normale (valeur P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.001）（P值0.00000）。较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P000 Les statistiques sur votre taille (P <0,001) peuvent également vous permettre de concentrer vos efforts sur votre vie privée et ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Il y avait une différence statistiquement très significative (P < 0,001) entre les concentrations plus élevées de rinçage de nanoémulsion et le rinçage de taille de particules normale (valeur P 0,00000).Bien que la concentration de la solution d'irrigation à base de nanoémulsion soit inférieure à celle de la solution d'irrigation à particules de taille normale, cette concentration plus faible s'est avérée nettement plus efficace pour éliminer les débris et pour nettoyer les canaux radiculaires.
Le PUI présentait une différence statistiquement très significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d’activation. Le PUI présentait une différence statistiquement très significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d’activation. PUI présente des statistiques sur la taille (p<0,001) en fonction des méthodes d'action. Le PUI présentait une différence statistiquement significative (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d’activation.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0.001)。 Comparée à d’autres méthodes d’activation, la PUI présente une différence statistiquement significative (p<0,001). Les statistiques PUI s'affichent (p<0,001) en fonction des méthodes d'activation. Le PUI était statistiquement significativement différent (p<0,001) par rapport aux autres méthodes d’activation.Lors de l'activation du PUI, la surface moyenne des débris résiduels en surface était de 1695,31 μm2. La différence moyenne entre l'UIP et le laser était de 987,89929, ce qui représente une différence hautement significative (p < 0,001 ; p = 0,00000). La différence moyenne entre l'UIP et l'absence d'activation était de 712,40643, ce qui représente également une différence hautement significative (p < 0,001 ; p = 0,00098). L'utilisation ou non de l'activation laser n'a pas montré de différence statistiquement significative (p > 0,05 ; p = 0,451211). La différence moyenne entre l'utilisation de l'UIP et le laser était de 987,89929, ce qui représente une différence hautement significative (p < 0,001 ; p = 0,00000). La différence moyenne entre l'UIP et l'absence d'activation était de 712,40643, ce qui représente également une différence hautement significative (p < 0,001 ; p = 0,00098). L'utilisation ou non de l'activation laser n'a montré aucune différence statistiquement significative (p > 0,05 ; p = 0,451211). La taille de la méthode PUI et du laser est de 987,89929, démontrant la valeur de votre PUI (P<0,001) avec (p-значение 0,00000). La différence moyenne entre PUI et laser était de 987,89929, démontrant une différence hautement statistiquement significative (P<0,001) avec (valeur p 0,00000). - valeur 0,00098).L'activation laser ou l'activation laser n'a pas de valeurs statistiques (P>0,05) avec (P-définition 0,451211). - valeur 0,00098). L'utilisation de l'activation laser ou l'absence d'activation a montré une différence statistiquement significative (P>0,05) avec (valeur P 0,451211). PUI indique 987,89929, 与(p = 0,00000) et indique PUI (P<0,001)。 La différence moyenne entre PUI et laser est de 987,89929, et la différence (p 值0,00000) a une signification statistique élevée (P<0,001). La taille de la méthode PUI et du laser est de 987,89929, ce qui correspond à une valeur statistique (P<0,001) avec (p 0,00000). La différence moyenne entre PUI et laser était de 987,89929, ce qui était hautement significatif sur le plan statistique (P<0,001) avec (valeur p 0,00000). PUI indique 712.40643, 与(p) indique 0,00098)。 La différence moyenne entre PUI et inactif est de 712,40643, et la différence (p) a une signification statistique élevée (P<0,001) – valeur 0,00098. La valeur de la méthode PUI et celle de l'inactivité 712,40643, qui correspond à vos statistiques de résolution (p) (P<0,001 — значение 0,00098). La différence moyenne entre PUI et inactivation était de 712,40643, ce qui était hautement statistiquement significatif avec une différence (p) (P<0,001 – valeur 0,00098).La valeur de référence est de 0,05 à 0,451211 (P = 0,451211). Il n’y avait pas de différence statistique significative entre l’activation laser et la non-activation (P>0,05) et (P 值0,451211). Il n'y a pas de valeurs statistiques (P>0,05) pour une valeur (P 0,451211) avec une activité laser ou pas. Il n'y avait pas de différence statistiquement significative (P>0,05) par rapport à (valeur P 0,451211) avec ou sans activation laser.La surface moyenne des fragments restants après activation laser était de 2 683,21 µm². Sans activation, elle était de 2 407,72 µm². Comparé à l’activation laser ou à l’absence d’activation, le traitement PUI présente une surface moyenne de la puce statistiquement plus faible, ce qui indique une meilleure capacité de nettoyage.
L'effet moyen du rinçage à la nanoémulsion sur l'élimination des débris était statistiquement significativement supérieur à celui du rinçage avec des particules de taille normale. Avec 1,6 % de Chx.HCl et une PUI de 1938,77 µm², la valeur moyenne était de 2510,96 µm² avec laser. Sans activation, la valeur moyenne était de 2511,34 µm². L'utilisation de 2 % de Chx.HCl activée par laser a donné les résultats les moins bons, avec une quantité maximale de débris. Des résultats similaires ont été obtenus avec 0,75 % de Chx.HCl non activée. Il est clair que les meilleurs résultats ont été obtenus avec des concentrations plus élevées d'agent de rinçage dans la nanoémulsion. La PUI s'est avérée la plus efficace pour l'activation de l'irrigant et l'élimination des débris (voir figures 3A à 3F).
Comme le montre le tableau 2, la nanoémulsion Chx.HCl a obtenu de meilleurs résultats que les particules de taille normale en termes de nombre de micro-organismes viables et a présenté une bonne corrélation avec la pénétration de la formulation et l'effet nettoyant selon les paramètres suivants : taille, concentration de l'agent de rinçage et méthode d'activation.
L'utilisation d'une concentration plus élevée de produit de rinçage permet d'éliminer complètement les bactéries. Même avec une activation par PUI, la solution de Chx.HCl à 0,75 % a présenté l'effet antibactérien le plus faible. L'activation laser a un effet négatif sur les solutions de rinçage à base de nano-émulsion. Comme le montrent les résultats précédents, l'utilisation d'un laser réduit l'efficacité de la nano-émulsion de Chx.HCl à 0,75 %, dont le nombre d'UFC atteint 195, une valeur très élevée indiquant que les réactifs à cette concentration sont comparables à l'activation laser. Les lasers à diodes étant photothermiques, la lumière ou la chaleur peuvent entraîner la perte de l'effet antibactérien de la nano-émulsion. Les concentrations élevées entraînent la destruction complète des bactéries. La nano-émulsion de Chx.HCl à 1,6 % a montré une croissance bactérienne négative en présence d'une activation laser, ce qui signifie que le laser n'a pas affecté son activité antibactérienne. On peut en conclure qu'une nano-émulsion plus concentrée possède un meilleur effet antibactérien.
Dans cette étude, des nanoémulsions de chlorhydrate de chlorhydrate de chlorhydrate (Chx.HCl) ont été préparées à partir de deux huiles différentes, de deux tensioactifs et d'un co-tensioactif. La formulation optimale (F6), caractérisée par une petite taille de particules, un temps d'émulsification court et une vitesse de dissolution élevée, a été sélectionnée. La stabilité thermodynamique et physique de (F6) a également été évaluée. À une concentration de 1,6 %, la nanoémulsion de Chx.HCl a présenté la meilleure perméabilité aux tubules dentinaires, comparée à la solution de Chx.HCl traditionnelle utilisée comme solution de rinçage. L'activation par PUI a démontré une efficacité nettoyante. De plus, les études antibactériennes ont montré une élimination complète des bactéries. Ces résultats confirment l'efficacité de la nanoémulsion de Chx.HCl comme solution de lavage prometteuse.
Nous sommes très reconnaissants envers le personnel du laboratoire de recherche de l'Université des sciences et technologies de Misr pour leur précieux soutien.