A JavaScript jelenleg le van tiltva a böngészőjében. A weboldal egyes funkciói nem fognak működni, ha a JavaScript le van tiltva.
Regisztráljon a megadott adataival és az Önt érdeklő gyógyszerrel, és mi összepárosítjuk az Ön által megadott információkat a kiterjedt adatbázisunkban található cikkekkel, és azonnal elküldjük Önnek e-mailben a PDF-példányt.
A klórhexidin-hidroklorid nanoemulzió összetétele és jellemzése, mint ígéretes antibakteriális gyökércsatorna-öblítő: in vitro és ex vivo vizsgálatok
Szereplők: Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1 Mona K. Younis, 1 Doaa H. Hassan, 1 Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2 Ehab Hassanein, 3 Kariem El-Batuti, 3 Alaa Elfaham 31 Tudomány és Technológia, Gyógyszerészeti és Ipari Gyógyszerészeti Kar, Misr Egyetem, Oktober 6., Egyiptom; 2 Mikrobiológiai és Immunológiai Tanszék, Gyógyszerészeti Kar, Misr Tudományos és Technológiai Egyetem, Oktober 6., Egyiptom; 3 Endodonciai Tanszék, Ain Shams Egyetem, Kairó, Egyiptom Bevezetés és cél: A klórhexidin-hidroklorid [Chx.HCl] széles spektrumú antibakteriális aktivitással, hosszan tartó hatással és alacsony toxicitással rendelkezik, ezért potenciális gyökércsatorna-öblítőként ajánlott. A tanulmány célja egy új összetételű Chx.HCl nanoemulzió használata volt a Chx.HCl behatoló erejének, tisztító és antibakteriális hatásának fokozása, valamint gyökércsatorna-öblítőként való alkalmazása. Módszerek: A Chx.HCl nanoemulziókat két különböző olajjal, olajsavval és Labrafil M1944CS-sel, két felületaktív anyaggal, Tween 20-zal és Tween 80-nal, valamint propilénglikollal, társ-felületaktív anyaggal állították elő. Ábrázoljon egy pszeudo-terner fázisdiagramot az optimális rendszer jelzésére. Az elkészített nanoemulziós készítményeket értékelte a gyógyszertartalom, az emulgeálási idő, a diszpergálhatóság, a cseppméret, az in vitro gyógyszerfelszabadulás, a termodinamikai stabilitás, az in vitro antibakteriális aktivitás és a kiválasztott készítmények in vitro vizsgálata szempontjából. A Chx.HCl 0,75%-os és 1,6%-os nanoemulzió behatoló, tisztító és antibakteriális hatását összehasonlította a gyökércsatorna-öblítőként használt normál részecskemérettel. Eredmények. A kiválasztott készítmény az F6 volt 2% Labrafil, 12% Tween 80 és 6% propilénglikol tartalmú. Kis részecskeméret (12,18 nm), rövid emulgeálási idő (1,67 másodperc) és gyors oldódás 2 perc után. Termodinamikailag/fizikailag stabil rendszernek bizonyult. A hagyományos Chx.HCl részecskemérethez képest a nagyobb koncentrációjú Chx.HCl 1,6%-os nanoemulzió jobb penetrációt mutatott a kisebb részecskeméret miatt. Egy normál részecskeméretű anyaghoz (2609,56 µm2) képest az 1,6%-os Chx.HCl nanoemulzió rendelkezik a legkisebb átlagos maradék törmelék felülettel (2001,47 µm2). Következtetés: A Chx.HCl nanoemulziós összetétel jobb tisztítóképességgel és antibakteriális hatással rendelkezik. Rendkívül hatékony baktericid hatással rendelkezik az Enterococcus faecalis ellen, és a baktériumsejtek összehúzódási sebessége magas vagy teljesen elpusztul. Kulcsszavak: klórhexidin-hidroklorid, nanoemulzió, gyökércsatorna-öblítő, penetráció, tisztító hatás, antibakteriális öblítő.
A nanoemulziók, amelyek cseppmérete 50–500 nm, az utóbbi években nagy figyelmet kaptak egyedi tulajdonságaik miatt. Jó tisztító tulajdonságokkal rendelkeznek, nem befolyásolja őket a víz keménysége, a legtöbb esetben alacsony a toxicitásuk és nincsenek elektrosztatikus kölcsönhatásaik. 2 A nanotechnológia ultrakis részecskemérettel, nagy felület-tömeg aránnyal és egyedi fizikai és kémiai tulajdonságokkal rendelkezik a hasonló ömlesztett termékekhez képest, és új perspektívákat nyit a fogászati fertőzések kezelésében és megelőzésében is. 3 A klórhexidin-hidroklorid (Chx.HCl) vízben kis mértékben, alkoholban nagyon kis mértékben oldódik, és fényre fokozatosan foltosodik. 4.5 Az SH.HCl széles spektrumú antibakteriális hatással, hosszan tartó hatással és alacsony toxicitással rendelkezik. Ezen tulajdonságok miatt potenciális gyökércsatorna-öblítőként is ajánlott. A Chx.HCl fő előnyei az alacsony citotoxicitás, a szagtalanság és a kellemetlen íz hiánya. 6-9 Többféle lézert alkalmaztak a gyökércsatorna-fertőtlenítés javítására. A lézerek baktericid hatása a hullámhossztól és az energiától, valamint a hőhatástól függ, ami változásokat okoz a baktériumsejtfalban, ami az ozmotikus gradiens megváltozásához vezet, egészen a sejthalálig. A lézerek és a gyökércsatorna-öblítők közötti kölcsönhatás új horizontokat nyit a pulpafertőtlenítésben. 10 Az ultrahangos energia magas frekvenciákat, de alacsony amplitúdót hoz létre. A reszelők 25–30 kHz ultrahangos frekvencián rezegnek, ami meghaladja az emberi hallásérzékelés határát (>20 kHz). A reszelők 25–30 kHz ultrahangos frekvencián rezegnek, ami meghaladja az emberi hallásérzékelés határát (>20 kHz). Файлы предназначены для колебаний на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, которые находятся за пределухиововолухио восприятия человека (> 20 кГц). A reszelők 25-30 kHz ultrahangos frekvencián rezegnek, ami meghaladja az emberi hallástartományt (> 20 kHz).这些文件被设计成在25–30 kHz 的超声波频率下振荡，这超出了人类听觉感矺类听觉感矺类听觉感矺类听觉感矺类听觉感这些文件被设计成在 25–30 kHz Файлы рассчитаны на колебания на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, что выходит за пределы слутаны вовоприохо человека (>20 кГц). A reszelők 25-30 kHz ultrahangos frekvenciájú rezgésekre vannak tervezve, ami meghaladja az emberi hallás határait (>20 kHz).Keresztirányú oszcillációban működnek, a csomók és antinodák jellegzetes módjait hosszuk mentén állítják be. A „passzív ultrahangos öblítés” (PUI) kifejezés egy olyan öblítési protokoll, amelyben semmilyen műszer vagy fal nem érintkezik endodonciai reszelővel vagy műszerrel. A PUI során az ultrahangenergia a rezgő reszelőről a gyökércsatornában lévő öblítőoldatra kerül át. Ez utóbbi hangáramlást és az öblítőfolyadék kavitációját okozhatja. 11 A fenti adatok alapján helyénvalónak tekinthető a nanotechnológia alkalmazása a Chx.HCl fokozott behatoló és tisztító hatásának értékelésére.
A klórhexidin-hidroklorid Chx.HCl-t az Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Kairó, Egyiptom) bocsátotta rendelkezésünkre. A Labrafil M 1944 CS-t (oleoil-polioxi-6-glicerid) a Gattefosse (Saint Priest, Franciaország) biztosította nagylelkűen. Tween 20 (polioxietilén (20) szorbitán-monolaurát), Tween 80 (polioxietilén (80) szorbitán-monooleát), olajsav, propilénglikol a Gomhorya Company-tól (Kairó, Egyiptom)). Nem szuvas, egygyökerű fogak eltávolítása parodontológiai vagy fogszabályozási kezeléshez, Állcsontos Tudományok Tanszéke, Fogorvostudományi Kar, Ain Shams Egyetem, Kairó, Egyiptom. Enterococcus faecalis (ATCC 29212 törzs) tiszta kultúrája agy-szívkivonat (BHI) táptalajban tenyésztve (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Szöul, Korea).
A Chx.HCl oldhatóságát különböző közegekben (olajsav, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, propilénglikol és víz) vizsgálták. Nagy feleslegben vett Chx.HCl-t (50 mg) centrifugacsőbe helyeztek, és 5,0 g közegfázist adtak hozzá. Az elegyet 15 percig vortexkeverőben rázták, majd szobahőmérsékleten tárolták. 24 óra elteltével a csőben lévő oldhatatlan gyógyszerpelletet 3000 fordulat/perc sebességgel 5 percig centrifugálták, hogy tiszta felülúszót kapjanak. Elegendő mintaoldatot gyűjtsenek össze, és n-butanollal hígítsák. A hígított mintákat Whatman 102 szűrőpapíron szűrték, majd n-butanollal megfelelően hígították a telített oldat gyógyszerkoncentrációjának meghatározásához. A mintákat UV-spektrofotométerrel elemezték 260 nm-en, n-butanolt használva kontrollként. 12.13
Egy pszeudo-hármas fázisdiagramot készítettek, hogy meghatározzák az egyes komponensek pontos arányát, amely a készítményben szükséges az ideális nanoemulzió optimális paramétereinek eléréséhez.14 A készítményt olajok (azaz olajsav és Labrafil M1944CS), felületaktív anyagok (azaz Tween 20 és Tween 80) és egy további felületaktív anyag, azaz propilénglikol felhasználásával állították elő. Először különálló felületaktív anyagok (társfelületaktív anyagok nélkül) és olajok keverékeit készítették el különböző térfogatarányokban (1:9-től 9:1-ig). Amikor a keveréket vízzel titrálják (csepegtetve vizet adnak hozzá), szorosan figyeljék a keveréket a tisztától a zavarosig, mint végpontot. Ezeket a végpontokat ezután egy pszeudo-hármas fázisdiagramon jelölik. A teljes folyamatot megismételték a felületaktív anyag és a másodlagos felületaktív anyag (Smix) 2:1 és 3:1 arányú keverékeivel, és kiválasztott olajokkal keverték össze.
A Chx.HCl-t tartalmazó nanoemulziós rendszereket Labrafil M 1944 CS olajfázissal, Tween 80 vagy 20 felületaktív anyaggal és propilénglikollal további felületaktív anyagként, végül vízzel készítettük (1. táblázat). A gyógyszert Labrafil M 1944 CS-ben oldottuk, és a felületaktív anyag és a másodlagos felületaktív anyag kombinált vizes elegyét lassú ütemben, fokozatos keverés mellett adtuk hozzá. A hozzáadott felületaktív anyag és ko-felületaktív anyag mennyiségét, valamint a hozzáadható olajfázis százalékos arányát egy pszeudo-terner fázisdiagram segítségével határoztuk meg. A granulátumok diszpergálásához a kívánt mérettartomány eléréséhez ultrahangos generátort (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Németország) használtunk. Ezután kiegyensúlyoztuk. 17
A diszpergálhatósági vizsgálatot egy oldódási készülékkel (Dr. Schleuniger Pharmaton, Model Diss 6000, Thun, Svájc) végeztük, amelyben minden készítményből 1 ml-t 500 ml 37±0,5°C-os vízhez adtunk. A gyengéd keverést szabványos rozsdamentes acél oldólapátok biztosítják, amelyek 50 fordulat/perc sebességgel forognak. A kapott emulziót vizuálisan határoztuk meg, és tisztának, áttetszőnek, kékes árnyalatúnak, tejszerűnek vagy zavarosnak minősítettük. Válasszunk tiszta formulát a további kutatáshoz. 18.19
A Chx.HCl extrakciója optimalizált nanoemulziós készítményekből pszeudo-hármas fázisdiagram alapján ultrahangos technológiával n-butanol előállításához vezet. Megfelelő hígítás után a kivonatokat spektrofotometriásan, 260 nm hullámhosszon elemeztük a Chx.HCl tartalom meghatározására. húsz
Az önemulgeálási idő teszteléséhez minden készítményből 1 ml-t adtunk egy 250 ml desztillált vízzel töltött főzőpohárba, és 37 ± 1 °C-on tartottuk folyamatos keverés mellett 50 fordulat/perc sebességgel. Az önemulgeálási idő az az idő, amely alatt az előkoncentrátum hígítás után homogén keveréket képez. huszonegy
A cseppméret-elemzéshez 50 mg optimalizált készítményt hígítsunk 1000 ml vízzel egy lombikban, és óvatosan keverjük össze kézzel. A cseppméret-eloszlást Malvern Zetasizer 2000 műszerrel (Malvern Instruments Ltd., Malvern, Egyesült Királyság) határoztuk meg 173º-os visszaverődési detektálási körülmények között, 25ºC-os hőmérsékleten és 1,330-as törésmutató mellett. huszonkettő
Az in vitro oldódási vizsgálatokat USP II. típusú készülékkel (lapáttal) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) végeztük 50 fordulat/perc sebességgel. Oldódási közegként 37±0,5°C hőmérsékleten tartott desztillált vizet (500 ml) használtunk, és az elkészített készítmény 5 ml-ét cseppenként adtuk az oldódási közeghez. Ezután különböző időközönként 5 ml oldódási közeget vettünk, és a felszabadult gyógyszer mennyiségét spektrofotometriásan határoztuk meg 254 nm-en. A kísérleteket háromszor végeztük. huszonhárom
Ezután megmértük a Chx.HCl in vitro felszabadulásának kinetikai paramétereit az alapján készült nanoemulziókból. Nullarendű, első- és másodrendű kinetikát, valamint Higuchi diffúziós modelleket teszteltünk a Chx.HCl felszabadulásához legmegfelelőbb kinetikai szekvencia kiválasztásához.
Minden készítményből 2 ml-t szobahőmérsékleten tároltak 48 órán át, mielőtt a fázisszétválást megfigyelték volna. Minden Chx.HCl nanoemulziós készítmény 1 ml-es mintáját ezután 25°C-on desztillált vízzel 10 ml-re, illetve 100 ml-re hígították, és 24 órán át tárolták. Ezután megfigyelték a fázisszétválást. huszonegy
Ezután mindkét összetételből 2 ml-es mintákat vettünk át külön-külön átlátszó, csavaros kupakkal ellátott palackokba, és 24 órán át 2°C-on, hűtőszekrényben tároltuk. Ezután kivettük őket, és 25°C-on, illetve 40°C-on tároltuk. Egyetlen hűtési-felolvasztási ciklust végeztünk. A mintákat ezután fázisszétválás és gyógyszerkicsapódás szempontjából vizsgáltuk. huszonegy
Minden Chx.HCl nanoemulziós készítmény 5 ml-es mintáját üvegcsőbe vittük át, laboratóriumi centrifugába (Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800, Sanghaj, Kínai Népköztársaság) helyeztük, és 4000 fordulat/perc sebességgel 5 percig centrifugáltuk. A mintákat ezután fázisszétválás és gyógyszerkicsapódás szempontjából vizsgáltuk. huszonegy
Minden kísérletet az egyiptomi Ain Shams Egyetem Intézményi Etikai Bizottsága hagyott jóvá. 50 nem szuvas, egygyökerű, kifejlett csúccsal rendelkező emberi fogat választottak ki. A kihúzott fogakat a beteg írásos, tájékoztatáson alapuló beleegyezése után használták fel. A fogak közé tartoznak a maxilláris és mandibuláris metszőfogak, valamint az állkapocs kisőrlői. A gyökerek külső felszínét kürettel kezelték, és az összes fogat 24 órán át 0,5%-os NaOCl-oldatban felületi sterilizálásnak vetették alá, majd felhasználásig steril sóoldatban tárolták. A koronát egy biztonságos oldalsó gyémántkoronggal távolították el, és a fog hosszát a csúcstól a koronális szélig 16 mm-re normalizálták. 24,25 Az öblítőoldat alapján a fogakat a következő csoportokba sorolták:
(A) A csoport (n=24) mintáit Chx.HCl nanoemulzióval mostuk. Az (I) alcsoport (n = 12) 5 ml 0,75%-os koncentrációjú Chx.HCl nanoemulzióval öblítette a mintákat. A (II) alcsoport (n=12) 5 ml 1,6%-os Chx.HCl nanoemulzióval öblítette a mintákat. (B) A minták egy csoportja (n=24) 5 ml 2%-os, normál részecskeméretű Chx.HCl-lel mosta a mintákat. Kontrollcsoport: (n=2) 5 ml aktiválás nélküli sóoldattal mosta a mintákat.
44 nem szuvas, egygyökerű, formált hegyű emberi fogat választottak ki. A fogak között felső és alsó metszőfogak, valamint alsó kisőrlők szerepelnek. A gyökerek külső felszínét kürettel kezelték, és az összes fogat 24 órán át 0,5%-os NaOCl-ban felületi sterilizálásnak vetették alá, majd felhasználásig steril sóoldatban tárolták. A koronákat biztonsági gyémántkoronggal távolították el, és a fog hosszát a csúcstól a koronális szélig 16 mm-re normalizálták. 24,25,29
Az 50-es méretű fő apikális reszelő mechanikus előkészítése standard módszerekkel. Steril sóoldat használata öblítőként a műtét során. Végül a gyökércsatornát 2 ml 17%-os EDTA-val öblítettük 1 percig a kenetréteg eltávolítása érdekében. A teljes gyökérfelszínt, beleértve az egyes minták apikális nyílását is, két réteg körömlakkal (cianoakrilát ragasztóval) vontuk be a szivárgás megakadályozása érdekében. A fogakat ezután függőlegesen egy fogkőtömbbe helyeztük a könnyebb kezelhetőség és azonosítás érdekében. 29-33 A mintákat ezután autoklávba helyeztük 121°C-on és 15 psi nyomáson 20 percig. Sterilizálás után az összes mintát steril körülmények között, steril eszközökkel szállítottuk és dolgoztuk fel. A gyökércsatornákat Enterococcus faecalis (ATCC 29212 törzs) tiszta kultúrájával szennyeztük, amelyet agy-szívkivonat (BHI) táptalajban tenyésztettünk 24 órán át 37°C-on. Steril mikropipettával injektáljunk tiszta E. faecalis inokulum szuszpenziót az összes fog előkészített gyökércsatornájába. A blokkokat ezután steril főzőpoharakba helyeztük, és 37°C-on 24 órán át inkubáltuk. 31, 34, 35
(A) A csoport (n=24) mintáit Chx.HCl nanoemulzióval mostuk. Az (I) alcsoport mintáit (n=12) 5 ml 0,75%-os koncentrációjú Chx.HCl nanoemulzióval öblítettük. A (II) alcsoport (n = 12) a mintákat 5 ml 1,6%-os koncentrációjú Chx.HCl nanoemulzióval öblítettük.
Kontrollcsoport: pozitív kontroll (n=4) a szennyezett gyökércsatornát 5 ml sóoldattal átmostuk, és pozitív kontrollként használtuk. Negatív kontroll: (n=4) A mintákba nem injektáltunk szuszpenziót, azaz a gyökércsatorna nem volt szennyezett E. faecalis-szal, és negatív kontrollként sterilen tartottuk a sterilizálás és az eljárás megbízhatóságának megerősítése érdekében. Minden mintához 5 ml tesztmosóoldatot használtunk. Ezután minden mintát 1 ml steril sóoldattal végzett utolsó mosásnak vetettünk alá.
Egy 35-ös méretű steril papírtűt használnak a gyökércsatornákból vett mintákhoz. A papírtűt a csőbe munkahosszig behelyezték, 10 másodpercig hagyták, majd agarlemezekre helyezték, hogy meghatározzák a telepképző egységek (CFU) számát lemezenként. A lemezeket 24 órán át 37°C-on inkubálták, majd vizuálisan értékelték a baktériumok növekedését. Az átlátszó lemez teljes sterilizálást mutatott. Az elmosódott lemezeket pozitív növekedésnek tekintették. Meghatározták a baktériumnövekedési zónában lévő átlagos CFU-k számát edényenként, és kiszámították a CFU-k számát. A túlélőket elsősorban csepegtető lemezeken mérik az életképes sejtek számának meghatározásával. Ezenkívül egy öntőpoharat használtak az alacsony CFU-k számlálásához, és 106-os hígítást a magas CFU-k számlálásához. 36,37
Készítsen elő 15 ml felolvasztott, autoklávban elősterilizált agar táptalajt tartalmazó kémcsöveket a kísérlet napján. Az Enterococcus faecalis egy fakultatív Gram-pozitív anaerob kokkusz, amely képes túlélni nagyon magas pH-n, savasságon és magas hőmérsékleten.39 A baktériummintákat (Enterococcus faecalis ATCC 29212) úgy készítette el, hogy a telepekből származó sejteket steril sóoldattal keverte össze. A baktériummintákat ezután sóoldattal McFarland 0,5-ös hígításra hígította, ami 108 CFU/ml-nek felel meg. A hozzáadott minta térfogata 10 µl volt.39 A turbiditási standardot (McFarland 0,5)40 úgy készítette el, hogy 0,6 ml 1%-os (10 g/l) bárium-klorid-dihidrát oldatot öntött egy 100 ml-es mérőhengerbe, és 100 ml-re töltötte 1%-os (10 g/l) kénsavval. A turbiditási standardokat ugyanabba a kémcsőbe helyeztük, mint a levesmintákat, és szobahőmérsékleten, sötétben tároltuk 6 hónapig, lezárva a párolgás megakadályozása érdekében. Nyissuk ki az üres Petri-csésze fedelét, és öntsük a mintát a csészébe. Ha az agar-agar teljesen megszilárdult, fordítsuk fejjel lefelé a lemezt, és inkubáljuk 37°C-on 24 órán át.
Az összes adatot összegyűjtöttük, táblázatba foglaltuk és statisztikai elemzésnek vetettük alá. A statisztikai elemzést az IBM® SPSS® Statistical Version 17 for Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, USA) szoftverrel végeztük.
Vizsgálták a Chx.HCl oldhatóságát különböző olajfázisokban, felületaktív oldatokban, ko-felületaktív oldatokban és vízben. A Chx.HCl oldhatósága a legnagyobb a Labrafil M-ben, és a legalacsonyabb az olajsavban. A nagyobb gyógyszeroldhatóság az olajfázisban fontos a nanoemulziók esetében, mivel a nanoemulziók képesek a gyógyszert oldott formában tartani, ami azt jelenti, hogy a nagyobb gyógyszeroldhatóság az olajban kevesebb olajat eredményez a készítményben, és így kevesebb gyógyszert. Az olajcseppek emulgeálásához bizonyos mennyiségű felületaktív anyag és ko-felületaktív anyag szükséges.
Egy pszeudo-hármas fázisdiagramot készítettek a nanoemulziós régiók meghatározására és a kiválasztott olajok, felületaktív anyagok és további felületaktív anyagok (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 és propilénglikol) koncentrációjának optimalizálására. A Chx.HCl nagyon alacsony oldhatóságot mutat az olajsavban, ami zavarosságot eredményez, amikor az olajsavat az első csepp vízzel titrálják. Ezért az olajsav-rendszert kizárták ebből a vizsgálatból. Más készítményeket is készítettek olaj és felületaktív anyag 1:9 arányú keverékével. A pH és az ionerősség tartománya eltérő, ezért ezeket a felületaktív anyagokat választották.
Az elkészített összes készítmény tiszta volt, kivéve az F2 rendszert, amely zavarosnak tűnt, ezért kizárták a további értékelési vizsgálatokból.
Az ideális nanoemulziós készítménynek képesnek kell lennie teljesen és gyorsan diszpergálódni gyengéd keverés mellett hígítva. A Chx.HCl nanoemulziós készítmények rövid emulgeálási időt mutattak, 1,67-12,33 másodperc között. A Tween 80 rendelkezik a legrövidebb emulgeálási idővel. Ez a Tween 80 nagyobb oldódási kapacitásával magyarázható. Az önemulgeálási idő a felületaktív anyag koncentrációjának növekedésével nő, ami a rendszer viszkozitásának növekedésével magyarázható a felületaktív anyag hatására.
Az emulzió cseppmérete határozza meg a gyógyszerfelszabadulás sebességét és mértékét. A kisebb emulziócseppméret rövidebb emulgeálási időt és nagyobb gyógyszerfelszívódási felületet eredményez. A Chx.HCl nanoemulzió kiválasztott összetételeinek átlagos cseppméretei 711±0,44, 587±15,3, 10,97±0,11, 16,43±4,55 és 12,18±2,48 voltak, a PDI pedig 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 és 0,76 az F1, F2, F3, illetve 0,16 az F4, F5 és F6 esetében. A Tween 80-at felületaktív anyagként tartalmazó készítmények kisebb szferolitokat mutattak. Ez a nagyobb emulgeálóerőnek tudható be. Az alacsonyabb PDI érték szűkebb rendszerméret-eloszlást jelez. Ezek a készítmények tiszta megjelenésűek, mivel csepprádiuszuk kisebb, mint a látható fény optikai hullámhossza (390-750 nm), amelyen minimális a fényszórás.41
A 2. ábra a Chx.HCl felszabadulásának százalékos arányát mutatja a formulált készítményből. A gyógyszer teljes felszabadulása a Chx.HCl nanoemulzió elkészített készítményeiből 2-7 perc között változott. Megfigyelték, hogy a legnagyobb gyógyszerfelszabadulási sebességet a Chx.HCl F6 nanoemulziós készítmény esetében érték el (2 perc), ami a Tween 80 jelenlétének tudható be, amely nagyobb mértékű emulgeálódást mutatott, és a kapott nanoemulzió nagy felületet biztosít a gyógyszerfelszabaduláshoz, ami lehetővé teszi a megnövekedett gyógyszerfelszabadulási sebességet. Ugyanakkor a propilénglikol oldhatósági tulajdonságai lehetővé teszik, hogy nagy mennyiségű hidrofil felületaktív anyag oldódjon fel az olajban. 40
Az in vitro Chx.HCl felszabadulásról kimutatták, hogy eltérő kinetikai sorrendet követ, és nincs egyértelmű kinetikai sorrend, amely tükrözné a gyógyszerfelszabadulást a különbözőképpen elkészített nanoemulziós készítményekből. Az F4 gyógyszerek kinetikus felszabadulása elsőrendű kinetika, ami azt jelenti, hogy a bennük maradó gyógyszer mennyiségével arányosan szabadulnak fel.42 Más gyógyszerek kinetikus felszabadulása összhangban volt a Higuasha diffúziós modellel, amely azt jelezte, hogy a felszabaduló gyógyszer mennyisége arányos a teljes gyógyszermennyiség és a gyógyszer nanoemulzióban való oldhatóságának négyzetgyökével.42
A kiválasztott készítményeket változó termodinamikai stabilitásnak vetettük alá stresszteszttel, hő-hűtés ciklusok, centrifugálás és fagyasztás-olvadás ciklusok alkalmazásával. Megfigyelték, hogy az F3 és F4 készítmények a felolvasztási ciklusok után a gyógyszer kicsapódását mutatták, míg az F1 sűrűsödést (gélesedést) mutatott. Az F5 és F6 készítmények megfeleltek a folyamatos centrifugálási ciklus, a hő-hűtés és a fagyasztás-olvadás teszt követelményeinek. A nanoemulziók termodinamikailag stabil rendszerek, amelyek bizonyos olaj-, felületaktív anyag- és vízkoncentrációk mellett fázisszétválás, emulgeálódás vagy krakkolás nélkül képződnek. A termikus stabilitás különbözteti meg a nanoemulziókat az emulzióktól, amelyek kinetikailag stabilak és végül fázisokra válnak szét.19 Az F3 nagyobb részecskeméretet (587 nm) mutatott, mint más készítmények, ami magyarázhatja a fázisszétválást és a gyógyszer kicsapódását a termodinamikai stabilitási tesztekben. Az F4, amely Tween 80-at tartalmazott és nem tartalmazott társ-felületaktív anyagot, gyógyszer kicsapódást mutatott, ami jelezheti a propilénglikol és a Tween 80 használatának szükségességét a nanoemulziós készítmények stabilitásának javítása érdekében. A Tween 20-at tartalmazó, további felületaktív anyagot nem tartalmazó F1 gél sűrűsödést (gélesedést) mutatott, ami a gél viszkozitásának vagy szilárdságának növekedését jelenti a cseppek aggregációja miatt.
A stabilitási eredmények igazolják egy további propilénglikol felületaktív anyag jelenlétének fontosságát a részecskediszperzió fokozása és a gyógyszer kicsapódásának megelőzése érdekében. A 43 F6 volt a legjobb készítmény a kis részecskeméret (12,18 nm), a rövid emulgeálási idő (1,67 másodperc) és a 2 perc elteltével bekövetkező gyors oldódási sebesség miatt. Termodinamikailag/fizikailag stabil rendszernek bizonyult, ezért további vizsgálatokra választottuk.
A gyökérkezelés utáni kudarcok egyre gyakoribbak, ami azt jelenti, hogy a betegeknél fokozott a kockázata a bonyolultabb fertőzések kialakulásának.44,45 A biofilmet a gyökércsatornák fertőtlenítése és tömése során el kell távolítani.46,47 A gyökércsatorna-rendszer összetettsége miatt nehézzé válik a bakteriális gyökércsatornák teljes eltávolítása csak eszközökkel és irrigációval.48 A gyökércsatorna-öblítő oldatok hatékonysága az öblítőszer DT-be való behatolásától és a baktériumoknak való kitettség időtartamától függ.49 Ezért új módszereket próbáltak ki és teszteltek a gyökércsatorna alapos sterilizálására. A hagyományos öblítések nem pusztítják el teljesen az E. faecalis-t a DT kisebb behatolása miatt.50
A nanoemulziós öblítés átlagos tisztítóereje 2001,47 µm2, az öblítő átlagos részecskemérete pedig 2609,56 µm volt. A nanoemulziós mosás és a normál részecskeméret közötti átlagos különbség 608,09 µm2 volt. Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt megfigyelhető a nanoemulziós és a normál részecskeméretű öntözőfolyadékok között (P-érték 0,00052). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt megfigyelhető a nanoemulziós és a normál részecskeméretű öntözőfolyadékok között (P-érték 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным размером частисталтистистионными налблчестиц набластиюц высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbség (P-érték 0,00052) volt a nanoemulziós és a normál részecske alapú öntözőszerek között.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P0.001（P0.值0,00052).纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P0.001（P0.值0,00052). Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была статистистическе была статистическей разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). Statisztikailag nagyon szignifikáns különbség volt (P<0,0001) a nanoemulziós öblítés és a normál részecskeméretű öblítés között (P-érték 0,00052).A nanoemulzió statisztikailag nagyon szignifikáns különbséget mutatott a normál részecskeméretű anyaghoz képest, alacsonyabb átlagos maradék törmelékfelületet mutatva, azaz a nanoemulziós anyag rendelkezett a legjobb tisztítóképességgel, amint az a 3. ábrán is látható.
3. ábra. Az öblítőszerek tisztítóteljesítményének összehasonlítása: (A) Nano CHX lézerrel aktiválva, (B) CHX lézerrel aktiválva, (C) PUI Nano CHX-szel, (D) Nano CHX aktiválás nélkül, (E) CHX aktiválás nélkül és (F) CHX PUI aktiválás.
A megmaradt 1,6%-os Chx.HCl fragmensek átlagos felülete 2320,36 µm2, a 2%-os Chx.HCl fragmensek átlagos felülete pedig 2949,85 µm2 volt. Statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbség volt a magasabb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál részecskeméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000). Statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbség volt a magasabb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál részecskeméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница между более высокой концентрацией наноэнумая ирригационных растворов и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a magasabb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál részecskeméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P值0.00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学显着的差
A PUI statisztikailag nagyon szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) más aktivációs módszerekhez képest. A PUI statisztikailag nagyon szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) más aktivációs módszerekhez képest. PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. A PUI statisztikailag nagyon szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) más aktivációs módszerekhez képest.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001).与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001). По сравнению с другими методами активации PUI имел статистически очень значимую разницу (p<0,001). Más aktivációs módszerekhez képest a PUI statisztikailag nagyon szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001).Az ISP aktiválásával a törmelék maradék felületének átlagos területe 1695,31 µm2 volt. A PUI és a Laser közötti átlagos különbség 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutatott (p-érték 0,00000). A PUI és a Laser közötti átlagos különbség 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutatott (p-érték 0,00000). Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,0001) рачепна- 0,00000). A PUI és a Laser közötti átlagos különbség 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) eltérést mutat a (p-érték 0,00000)-hoz képest. PUI 和Laser 之间的平均差异为987.89929，显示出高度统计学显着性〧ののホテーーーーーージ 0,000 差异PUI és lézer Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистической значимостической значимоставила 987,89929 (p-значение 0,00000). A PUI és a Laser közötti átlagos különbség 987,89929 volt, ami magas statisztikai szignifikanciaszintet (P<0,001) jelez (p-érték 0,00000). A PUI és az aktiváció nélküli kezelés közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat, 0,00098 p-értékkel. A lézeres aktiváció és az aktiváció nélküli kezelés alkalmazása statisztikailag nem mutatott szignifikáns különbséget (P>0,05), 0,451211 p-értékkel. A PUI és az aktiváció nélküli csoport közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat, 0,00098 p-értékkel. (P-érték 0,451211) Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, демонстрируя высокостатистически<0,0знаючески<0,0знаючески разницу с p-значением 0,00098). A PUI és az aktiváció nélküli esetek közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat, p-értéke 0,00098.P-érték 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643，显示高度统计学显着性差异(P<0.001)！值为0,00098).PUI Средняя разница между PUI и инактивацией составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистистической высокой статистической (P<0,001, p-значение 0,00098). A PUI és az inaktiváció közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami a különbség magas statisztikai szignifikanciáját jelzi (P<0,001, p-érték 0,00098).使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0.05) P 值为0.451211.使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0.05) P 值为0.451211. Статистически значимой разницы (P>0,05) с лазерной активацией или без нее не было со значением P 0,4512111. Lézeraktivációval és anélkül sem volt statisztikailag szignifikáns különbség (P>0,05), P-értéke 0,451211 volt.A lézeres aktiválás után megmaradt töredékek átlagos felülete 2683,21 µm2 volt. Az aktiválás nélküli megmaradt töredékek átlagos felülete 2407,72 µm2 volt. A lézeres aktiválással vagy aktiválás nélkül végzett kísérletekhez képest a PUI statisztikailag kisebb átlagos chipfelülettel rendelkezett, azaz a legjobb tisztítóerővel.
A nanoemulziós öblítés átlagos tisztítóereje 2001,47 µm2, az öblítő átlagos részecskemérete pedig 2609,56 µm volt. A nanoemulziós mosás és a normál részecskeméret közötti átlagos különbség 608,09 µm2 volt. Statisztikailag magas szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nanoemulziós és a normál részecskeméretű öntözőfolyadékok között (P-érték 0,00052). Statisztikailag magas szignifikáns (P<0,001) különbség volt a nanoemulziós és a normál részecskeméretű öntözőfolyadékok között (P-érték 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным размером частичстасистлами высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbség (P-érték 0,00052) volt a nanoemulziós és a normál részecske alapú öntözőszerek között.纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异(P<0,001）（P值0,00052）). P<0,001 (P值0,00052). Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была статистистическе была статистическей разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). Statisztikailag nagyon szignifikáns különbség volt (P<0,0001) a nanoemulziós öblítés és a normál részecskeméretű öblítés között (P-érték 0,00052).Egy normál részecskeméretű anyaghoz képest a nanoemulzió statisztikailag nagyon szignifikáns különbséget mutat, alacsonyabb átlagos maradék törmelékfelületet mutat, azaz a nanoemulziós anyag jobb tisztítóképességgel rendelkezik, amint az a 3. ábrán látható.
A megmaradt 1,6%-os Chx.HCl fragmensek átlagos felülete 2320,36 µm2, a 2%-os Chx.HCl fragmensek átlagos felülete pedig 2949,85 µm2 volt. Statisztikailag igen szignifikáns (P<0,001) különbség volt a magasabb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál részecskeméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000). Statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbség volt a magasabb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál részecskeméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000). Имелась статистически высокодостоверная (P<0,001) средств и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Statisztikailag szignifikáns (P<0,001) különbség volt a magasabb koncentrációjú nanoemulziós irrigánsok és a normál részecskeméretű irrigánsok között (P-érték 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异(P<0,001）（P值0,00000）).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P000 Наблюдалась статистически высокозначимая разница (P <0,001) между более высокими концентрацими концентрацими опиваколесями наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Statisztikailag igen szignifikáns különbség volt (P < 0,001) a nanoemulziós öblítés magasabb koncentrációi és a normál részecskeméretű öblítés között (P-érték 0,00000).Bár a nanoemulziós öblítő koncentrációja alacsonyabb volt, mint a normál részecskeméretű öblítőé, ez az alacsonyabb koncentráció szignifikánsan hatékonyabb volt a törmelék eltávolításában és a gyökércsatornák tisztításában.
A PUI statisztikailag magas szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) más aktivációs módszerekhez képest. A PUI statisztikailag magas szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) más aktivációs módszerekhez képest. PUI имел статистически высокую значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. A PUI statisztikailag szignifikáns különbséget mutatott (p<0,001) más aktiválási módszerekhez képest.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0,001). Más aktivációs módszerekkel összehasonlítva a PUI statisztikailag szignifikáns különbséget mutat (p<0,001). PUI статистически значимо отличался (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. A PUI statisztikailag szignifikánsan eltért (p<0,001) más aktivációs módszerekhez képest.A PUI aktiválása során a felszíni törmelék átlagos területe 1695,31 μm2 volt. A PUI és a lézer közötti átlagos különbség 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00000). A PUI és az aktiváció nélküli kezelések közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00098). A lézeraktiváció és az aktiváció nélküli kezelés alkalmazása között nem volt statisztikailag szignifikáns (P>0,05) különbség (P-érték 0,451211). A PUI és a lézer közötti átlagos különbség 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00000). A PUI és az aktiváció nélküli kezelés közötti átlagos különbség 712,40643 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutat (p-érték 0,00098). A lézeraktiváció és az aktiváció nélküli kezelés alkalmazása között statisztikailag nem volt szignifikáns (P>0,05) különbség (P-érték 0,451211). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимуни1 (P<0,0чуц) (p-значение 0,00000). A PUI és a lézer közötti átlagos különbség 987,89929 volt, ami statisztikailag nagyon szignifikáns (P<0,001) különbséget mutatott (p-érték 0,00000). - значение 0,00098).Использование лазерной активации или отсутствие активации не имело стативации, 0,00098). с (P-значение 0,451211). - érték 0,00098). A lézeres aktiváció alkalmazása vagy annak hiánya statisztikailag szignifikáns különbséget mutatott (P>0,05) (P-érték 0,451211). PUI 和激光之间的平均差异为987.89929，与(p 值0.00000) 差异具有高度统计学(1
A nanoemulziós öblítés átlagos hatása a törmelék eltávolítására statisztikailag szignifikánsan magasabb volt, mint a normál részecskeméretű öblítésé. Chx.HCl 1,6%, PUI 1938,77 µm2, lézerrel 2510,96 µm2. Aktiválás nélkül az átlagos érték 2511,34 µm2. Amikor 2%-os Chx.HCl-t használtak és lézerrel aktiváltak, az eredmények voltak a legrosszabbak, és a törmelék mennyisége maximális volt. Ugyanezeket az eredményeket kaptuk, amikor 0,75%-os Chx.HCl-t nem aktiváltunk. Nyilvánvalóan a legjobb eredményeket a nanoemulzióban lévő öblítőszer magasabb koncentrációival kaptuk. A PUI volt a leghatékonyabb az öntözési aktiválásban és a törmelék lemosásában, amint azt a 3A-F) ábra mutatja.
Amint a 2. táblázatban látható, a Chx.HCl nanoemulzió jobban teljesített a normál méretű részecskéknél az életképes mikroorganizmusok száma tekintetében, és jó korrelációt mutatott a készítmény penetrációjával és tisztítóhatásával a következő paraméterek szerint: méret, öblítőszer koncentrációja és aktiválási módszer.
A baktériumok teljesen elpusztíthatók magasabb koncentrációjú öblítőszer használatával. Még PUI aktiválás mellett is a 0,75%-os Chx.HCl-nek volt a legrosszabb antibakteriális hatása. A lézeres aktiválás negatív hatással van a nanoemulziós öblítésekre. Amint az összes korábbi eredményből látható, a lézer használata csökkenti a 0,75%-os Chx.HCl nanoemulzió hatékonyságát, ahol a 0,75%-os nanoChx.HCl CFU-ja 195, ami nagyon magas érték, ami azt jelzi, hogy az ilyen koncentrációjú reagensek összehasonlíthatók a lézeres aktiválással. A dióda lézerek fototermikusak, így akár a fény, akár a hő miatt a nanoemulzió elveszítheti antibakteriális hatását. A magas koncentrációk eredménye a baktériumok teljes elpusztítása. A 1,6%-os Nano Chx.HCl negatív baktériumnövekedést mutatott lézeraktiválás jelenlétében, ami azt jelenti, hogy a lézer nem befolyásolta a 1,6%-os nano Chx.HCl antibakteriális képességét. Megállapítható, hogy a nagyobb koncentrációjú nanoemulziós anyag jobb antibakteriális hatással rendelkezik.
Ebben a munkában két különböző olaj, két felületaktív anyag és egy ko-felületaktív anyag felhasználásával készítettek Chx.HCl nanoemulziókat, melyek közül az optimális (F6) készítményt választották (kis részecskemérettel, rövid emulgeálási idővel és magas oldódási sebességgel). Ezenkívül az (F6) termodinamikai/fizikai stabilitását is tesztelték. Az 1,6%-os koncentrációjú Chx.HCl nanoemulzióban a Chx.HCl nanoemulzió mutatta a legjobb permeabilitást a dentintubulusokban a hagyományos Chx.HCl-hez képest, mint öblítőfolyadék, és a PUI, mint aktiválási módszer, tisztító képességgel is rendelkezett. Ezenkívül a Chx.HCl nanoemulzió antibakteriális vizsgálatai a baktériumok teljes elpusztítását mutatták. Az eredmények ezt megerősítették. A Chx.HCl nanoemulzió ígéretes mosófolyadéknak tekinthető.
Nagyon hálásak vagyunk a Misr Tudományos és Technológiai Egyetem kutatólaboratóriumának munkatársainak a nagyszerű támogatásukért.
Közzététel ideje: 2022. augusztus 8.
