Javascript este dezactivat în browserul dvs. Unele funcții ale acestui site web nu vor funcționa dacă Javascript este dezactivat.
Înregistrează-te cu datele tale specifice și medicamentul specific care te interesează, iar noi vom potrivi informațiile pe care le furnizezi cu articolele din baza noastră de date extinsă și îți vom trimite imediat o copie în format PDF prin e-mail.
Compoziția și caracterizarea nanoemulsiei de clorhidrat de clorhexidină ca irigant antibacterian promițător pentru canalul radicular: studii in vitro și ex vivo
作者 Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1 Mona K. Younis, 1 Doaa H. Hassan, 1 Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2 Ehab Hassanein, 3 Kariem El-Batuti, 3 Alaa Elfaham 31 Știință și Tehnologie, Facultatea de Farmacie și Farmacie Industrială, Universitatea Misr, 6 Octombrie, Egipt; 2 Departamentul de Microbiologie și Imunologie, Facultatea de Farmacie, Universitatea de Știință și Tehnologie Misr, 6 Octombrie, Egipt; 3 Departamentul de Endodonție, Universitatea Ain Shams, Cairo, Egipt Introducere și scop: Clorhidratul de clorhexidină [Chx.HCl] are o activitate antibacteriană cu spectru larg, acțiune prelungită și toxicitate scăzută, prin urmare este recomandat ca potențial irigant al canalului radicular. Scopul acestui studiu a fost de a utiliza o nanoemulsie Chx.HCl cu o nouă compoziție pentru a crește puterea de penetrare, curățarea și acțiunea antibacteriană a Chx.HCl și de a o utiliza ca irigant al canalului radicular. Metode: Nanoemulsiile de Chx.HCl au fost preparate folosind două uleiuri diferite: acid oleic și Labrafil M1944CS, doi surfactanți, Tween 20 și Tween 80, și co-surfactant, propilen glicol. Reprezentați o diagramă de fază pseudo-ternară pentru a indica sistemul optim. Formulările de nanoemulsie preparate au fost evaluate pentru conținutul de medicament, timpul de emulsionare, dispersabilitatea, dimensiunea picăturilor, eliberarea in vitro a medicamentului, stabilitatea termodinamică, activitatea antibacteriană in vitro și studiile in vitro ale formulărilor selectate. Acțiunea de penetrare, curățare și antibacteriană a nanoemulsiei de Chx.HCl 0,75% și 1,6% a fost comparată cu dimensiunea normală a particulelor ca irigant al canalului radicular. Rezultate. Formularea aleasă a fost F6 cu 2% Labrafil, 12% Tween 80 și 6% propilen glicol. Dimensiune mică a particulelor (12,18 nm), timp scurt de emulsionare (1,67 secunde) și dizolvare rapidă după 2 minute. S-a constatat că este un sistem stabil termodinamic/fizic. Comparativ cu dimensiunea convențională a particulelor de Chx.HCl, nanoemulsia de Chx.HCl 1,6% cu concentrație mai mare a demonstrat o penetrare mai bună datorită dimensiunii mai mici a particulelor. Comparativ cu un material cu dimensiune normală a particulelor (2609,56 µm2), nanoemulsia de Chx.HCl 1,6% are cea mai mică suprafață medie de resturi reziduale (2001,47 µm2). Concluzie: Compoziția nanoemulsiei Chx.HCl are o capacitate de curățare și o acțiune antibacteriană mai bune. Are o acțiune bactericidă extrem de eficientă împotriva Enterococcus faecalis, iar rata de contracție a celulelor bacteriene este mare sau complet distrusă. Cuvinte cheie: clorhidrat de clorhexidină, nanoemulsie, irigant de canal, penetrare, efect de curățare, irigant antibacterian.
Nanoemulsiile, o clasă de emulsii cu dimensiuni ale picăturilor în intervalul 50–500 nm, au primit multă atenție în ultimii ani datorită proprietăților lor unice. Proprietăți bune de curățare, nu sunt afectate de duritatea apei, în majoritatea cazurilor au o toxicitate scăzută și absența interacțiunilor electrostatice. 2 Nanotehnologia are o dimensiune ultra-mică a particulelor, un raport mare suprafață-masă și proprietăți fizice și chimice unice în comparație cu produse similare în vrac și, de asemenea, deschide noi perspective în tratamentul și prevenirea infecțiilor dentare. 3 Clorhidratul de clorhexidină (Chx.HCl) este ușor solubil în apă, foarte puțin solubil în alcool și se pătează treptat la lumină. 4,5 SH.HCl are o acțiune antibacteriană cu spectru larg, acțiune prelungită și toxicitate scăzută. Datorită acestor proprietăți, este recomandat și ca potențial irigant al canalului radicular. Principalele avantaje ale Chx.HCl sunt citotoxicitatea scăzută, lipsa mirosului și lipsa gustului neplăcut. 6-9 Mai multe tipuri de lasere au fost utilizate pentru a îmbunătăți dezinfecția canalului radicular. Efectul bactericid al laserelor depinde de lungimea de undă și energie, precum și de expunerea termică, care provoacă modificări ale peretelui celular bacterian, ceea ce duce la o modificare a gradientului osmotic până la moartea celulară. Interacțiunea dintre lasere și irigatoarele de canal radicular deschide noi orizonturi în dezinfecția pulpei. 10 Energia ultrasonică produce frecvențe înalte, dar amplitudini scăzute. Fișierele sunt concepute să oscileze la frecvențe ultrasonice de 25–30 kHz, care depășesc limita percepției auditive umane (>20 kHz). Fișierele sunt concepute să oscileze la frecvențe ultrasonice de 25–30 kHz, care depășesc limita percepției auditive umane (>20 kHz). Файлы предназначены для колебаний на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, которые нахдозе нахдозе нахродены слухового восприятия человека (> 20 кГц). Pilele sunt concepute să vibreze la frecvențe ultrasonice de 25-30 kHz, care sunt dincolo de raza auzului uman (> 20 kHz).这些文件被设计成在25–30 kHz 的超声波频率下振荡，这超出了人类听觉感类听觉感枚频率下振荡，这超出了人类听觉感搬觉感柞 kHz)这些文件被设计成在 25–30 kHz Файлы рассчитаны на колебания на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, что выходит зугелодит залпорсе восприятия человека (>20 кГц). Pilele sunt concepute pentru vibrații la frecvențe ultrasonice de 25-30 kHz, ceea ce depășește limitele auzului uman (>20 kHz).Acestea funcționează în oscilație transversală, setând modurile caracteristice ale nodurilor și antinodurilor de-a lungul lungimii lor. Termenul „irigare ultrasonică pasivă” (PUI) este un protocol de irigare în care niciun instrument sau pereți nu intră în contact cu ace sau instrumentele endodontice. În timpul PUI, energia ultrasonică este transferată de la acul vibrator la soluția de irigare din canalul radicular. Aceasta din urmă poate provoca flux sonic și cavitație a agentului de spălare. 11 Pe baza datelor de mai sus, se consideră oportună utilizarea nanotehnologiei pentru a evalua acțiunea îmbunătățită de penetrare și curățare a Chx.HCl.
Clorhidratul de clorhexidină Chx.HCl a fost furnizat cu generozitate de Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Cairo, Egipt). Labrafil M 1944 CS (oleoilpolioxi-6-gliceridă) a fost furnizat cu generozitate de Gattefosse (Saint Priest, Franța). Tween 20 (monolaurat de polioxietilenă (20) sorbitan), Tween 80 (monooleat de polioxietilenă (80) sorbitan), acid oleic, propilen glicol de la Gomhorya Company (Cairo, Egipt)). Extracția dinților monoradiculari necari pentru tratament parodontal sau ortodontic, Departamentul de Științe Maxilo-faciale, Facultatea de Medicină Dentară, Universitatea Ain Shams, Cairo, Egipt. Cultură pură de Enterococcus faecalis (tulpina ATCC 29212) crescut în bulion de extract de inimă-creier (BHI) (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Seul, Coreea).
A fost studiată solubilitatea Chx.HCl în diverse medii (acid oleic, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, propilen glicol și apă). Un exces mare de Chx.HCl (50 mg) este plasat într-un tub de centrifugă și se adaugă 5,0 g din faza mediului. Amestecul a fost agitat într-un mixer vortex timp de 15 minute și apoi depozitat la temperatura camerei. După 24 de ore, peleta de medicament insolubilă din tub a fost centrifugată la 3000 rpm timp de 5 minute pentru a obține un supernatant limpede. Se colectează suficientă soluție de probă și se diluează cu n-butanol. Probele diluate au fost filtrate prin hârtie de filtru Whatman 102 și apoi diluate corespunzător cu n-butanol pentru a determina concentrația de medicament în soluția saturată. Probele au fost analizate cu un spectrofotometru UV la 260 nm cu n-butanol ca martor. 12.13
O diagramă pseudo-triplă de fază a fost construită pentru a determina raportul exact al fiecărei componente necesare în formulare pentru a obține parametrii optimi ai unei nanoemulsii ideale.14 Formularea a fost realizată folosind uleiuri (de exemplu, acid oleic și Labrafil M1944CS), surfactanți (de exemplu, Tween 20 și Tween 80) și un surfactant suplimentar, și anume propilen glicol. Mai întâi, s-au preparat amestecuri separate de surfactanți (fără cosurfactanți) și uleiuri în diferite raporturi de volum (de la 1:9 la 9:1). Când amestecul este titrat cu apă (adăugând apă picătură cu picătură), se monitorizează îndeaproape amestecul de la limpede la tulbure ca punct final. Aceste puncte finale sunt apoi marcate pe o diagramă pseudo-triplă de fază. Întregul proces a fost repetat pentru amestecuri de surfactant și surfactant secundar (Smix) preparate în raporturi 2:1 și 3:1 și amestecate cu uleiuri selectate15,16.
Sistemele de nanoemulsie conținând Chx.HCl au fost preparate folosind Labrafil M 1944 CS ca fază uleioasă și surfactant Tween 80 sau 20 și propilen glicol ca surfactant suplimentar și în final apă, Tabelul 1. Medicamentul a fost dizolvat în Labrafil M 1944 CS, iar apa combinată de surfactant și surfactant secundar a fost adăugată la o viteză lentă, cu amestecare treptată. Cantitatea de surfactant și co-surfactant adăugată, precum și procentul de fază uleioasă care poate fi adăugat, sunt determinate folosind o diagramă de fază pseudo-ternară. Un generator de ultrasunete (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Germania) a fost utilizat pentru a obține intervalul de dimensiuni dorit pentru dispersarea granulelor. Apoi, s-a echilibrat. 17
Testarea dispersibilității a fost efectuată utilizând un aparat de dizolvare (Dr. Schleuniger Pharmaton, Model Diss 6000, Thun, Elveția) în care s-a adăugat 1 ml din fiecare preparat la 500 ml de apă la 37±0,5°C. Agitarea ușoară este asigurată de palete de dizolvare standard din oțel inoxidabil care se rotesc la 50 rpm. Emulsia rezultată a fost determinată vizual și clasificată ca fiind limpede, translucidă cu o tentă albăstruie, lăptoasă sau tulbure. Alegeți o formulă limpede pentru cercetări ulterioare. 18.19
Extracția Chx.HCl din compoziții optimizate de nanoemulsie bazată pe diagrama pseudo-triplă de fază duce la producerea de n-butanol folosind tehnologia cu ultrasunete. După diluarea corespunzătoare, extractele au fost analizate spectrofotometric la o lungime de undă de 260 nm pentru conținutul de Chx.HCl. douăzeci
Pentru a testa timpul de autoemulsificare, 1 ml din fiecare compoziție a fost adăugat într-un pahar umplut cu 250 ml de apă distilată și menținut la 37 ± 1°C cu agitare constantă la 50 rpm. Timpul de autoemulsificare este considerat timpul în care preconcentratul formează un amestec omogen după diluare. douăzeci și unu
Pentru analiza dimensiunii picăturilor, diluați 50 mg din formula optimizată la 1000 ml cu apă într-un balon și amestecați ușor manual. Distribuția dimensiunii picăturilor a fost determinată utilizând un instrument Malvern Zetasizer 2000 (Malvern Instruments Ltd., Malvern, Marea Britanie) în condiții de detectare prin retrodifuzie de 173º, temperatură de 25ºC și indice de refracție de 1,330. douăzeci și doi
Studiile de dizolvare in vitro au fost efectuate utilizând un aparat USP tip II (cu palete) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) la 50 rpm. Ca mediu de dizolvare s-a folosit apă distilată (500 ml) menținută la o temperatură de 37±0,5°C, iar 5 ml din compoziția preparată au fost adăugați picătură cu picătură în mediul de dizolvare. Apoi, la diferite intervale, s-au prelevat 5 ml din mediul de dizolvare și cantitatea de medicament eliberată a fost determinată spectrofotometric la 254 nm. Experimentele au fost efectuate în triplicat. douăzeci și trei
Apoi, au fost măsurați parametrii cinetici ai eliberării Chx.HCl in vitro din nanoemulsiile preparate pe baza acestuia. Au fost testate modele cinetice de ordin zero, de ordinul întâi și doi și de difuzie Higuchi pentru a selecta secvența cinetică cea mai potrivită pentru eliberarea Chx.HCl.
2 ml din fiecare formulare au fost depozitați la temperatura ambiantă timp de 48 de ore înainte de a se observa separarea fazelor. Probe de 1 ml din fiecare formulare de nanoemulsie Chx.HCl au fost apoi diluate la 10 ml și 100 ml cu apă distilată la 25°C și depozitate timp de 24 de ore. Apoi s-a observat separarea fazelor. douăzeci și unu
Apoi, probe de 2 ml din fiecare compoziție au fost transferate separat în sticle transparente cu capac cu filet și depozitate la frigider la 2°C timp de 24 de ore. Apoi au fost scoase și depozitate la 25°C și 40°C. S-a efectuat un singur ciclu de răcire-decongelare. Probele au fost apoi observate pentru separarea fazelor și precipitarea medicamentului. douăzeci și unu
O probă de 5 ml din fiecare formulare de nanoemulsie Chx.HCl a fost transferată într-un tub de sticlă și plasată într-o centrifugă de laborator (Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800, Shanghai, Republica Populară Chineză) și centrifugată la 4000 rpm timp de 5 minute. Probele au fost apoi observate pentru separarea fazelor și precipitarea medicamentului. douăzeci și unu
Toate experimentele au fost aprobate de Comitetul de Etică Instituțională al Universității Ain Shams, Egipt. Au fost selectați 50 de dinți umani monoradiculari necari, cu apex format. Dinții extrași au fost utilizați după obținerea consimțământului informat scris și semnat de pacient. Dinții includ incisivii maxilari și mandibulari și premolarii mandibulari. Suprafețele exterioare ale rădăcinilor au fost tratate cu o chiuretă, iar toți dinții au fost supuși sterilizării superficiale în NaOCl 0,5% timp de 24 de ore și apoi depozitați în soluție salină sterilă până la utilizare. Coroana a fost îndepărtată cu un disc diamantat Safe Side, iar lungimea dintelui a fost normalizată la 16 mm de la apex la marginea coronală.24,25 Conform soluției de clătire, dinții sunt împărțiți în următoarele grupe:
(A) Probele din grupul (n=24) au fost spălate cu nanoemulsie Chx.HCl. Subgrupul (I) (n=12) a clătit probele cu 5 ml de nanoemulsie Chx.HCl cu concentrație de 0,75%. Subgrupul (II) (n=12) a clătit probele cu 5 ml de nanoemulsie Chx.HCl 1,6%. (B) Un grup (n=24) de probe va fi spălat cu 5 ml de Chx.HCl 2% cu dimensiuni normale ale particulelor. Grupul de control: (n=2) spălate cu 5 ml de soluție salină fără activare.
Au fost selectați 44 de dinți umani monoradiculari, necari, cu vârf format. Dinții includ incisivii maxilari și mandibulari și premolarii mandibulari. Suprafețele exterioare ale rădăcinilor au fost tratate cu o chiuretă, iar toți dinții au fost supuși sterilizării superficiale în NaOCl 0,5% timp de 24 de ore și apoi depozitați în soluție salină sterilă până la utilizare. Coroanele au fost îndepărtate cu un disc diamantat de siguranță, iar lungimea dintelui a fost normalizată la 16 mm de la vârf la marginea coronală. 24,25,29
Prepararea mecanică a acului apical principal de dimensiunea 50 folosind metode standard. Se utilizează soluție salină sterilă ca irigant în timpul intervenției chirurgicale. În final, canalul radicular a fost clătit cu 2 ml de EDTA 17% timp de 1 minut pentru a îndepărta stratul de frotiu. Întreaga suprafață radiculară, inclusiv foramenul apical al fiecărei specimene, a fost acoperită cu două straturi de lac de unghii (adeziv cianoacrilat) pentru a preveni scurgerile. Dinții sunt apoi fixați vertical într-un bloc de tartru pentru a facilita manipularea și identificarea. 29-33 Probele au fost apoi autoclavizate la 121ºC și 15 psi timp de 20 de minute. După sterilizare, toate probele au fost transportate și procesate în condiții sterile folosind instrumente sterile. Canalele radiculare au fost contaminate cu o cultură pură de Enterococcus faecalis (tulpina ATCC 29212) crescută în bulion de extract de creier-cord (BHI) timp de 24 de ore la 37°C. Folosind o micropipetă sterilă, se injectează o suspensie limpede de inocul de E. faecalis în canalele radiculare preparate ale tuturor dinților. Blocurile au fost apoi plasate în pahare sterile și incubate la 37°C timp de 24 de ore. 31, 34, 35
(A) Probele din grupul (n=24) au fost spălate cu nanoemulsie Chx.HCl. Probele din subgrupul (I) (n=12) au fost clătite cu 5 ml de nanoemulsie Chx.HCl cu concentrație de 0,75%. Subgrupul (II) (n = 12) a clătit probele cu 5 ml de nanoemulsie Chx.HCl cu concentrație de 1,6%.
Grup de control: control pozitiv, (n=4) canalul radicular contaminat a fost clătit cu 5 ml de soluție salină și păstrat ca și control pozitiv. Control negativ: (n=4) Probele nu au fost injectate cu suspensie, adică canalul radicular nu a fost contaminat cu E. faecalis și a fost păstrat steril ca și control negativ pentru a confirma sterilizarea și fiabilitatea procedurii. Se utilizează 5 ml de soluție de spălare de testare în fiecare probă. Fiecare probă a fost apoi supusă unei spălări finale cu 1 ml de soluție salină sterilă.
Un vârf de hârtie steril de mărimea 35 este utilizat pentru a colecta probe din canalele radiculare. Vârful de hârtie a fost introdus în tub până la lungimea de lucru, lăsat timp de 10 secunde, apoi transferat pe plăci de agar pentru a determina numărul de unități formatoare de colonii (UFC) per placă. Plăcile au fost incubate la 37ºC timp de 24 de ore și apoi evaluate vizual pentru creșterea bacteriană. Placa transparentă prezintă o sterilizare completă. Plăcile neclare sunt considerate a prezenta o creștere pozitivă. A fost determinat numărul mediu de UFC din zona de creștere bacteriană per placă și a fost calculat numărul de UFC. Supraviețuitorii sunt măsurați în principal cu numărătoare viabilă pe plăci de picurare. În plus, s-a utilizat o cană de turnare pentru a număra UFC scăzute, iar o diluție la 106 a fost utilizată pentru a număra UFC ridicate. 36,37
Se prepară tuburi conținând 15 ml de mediu de agar decongelat, pre-sterilizat în autoclavă, în aceeași zi ca și pentru experiment. Enterococcus faecalis este un coc anaerob facultativ Gram-pozitiv care poate supraviețui la pH foarte ridicat, aciditate și temperaturi ridicate.39 Probele bacteriene (Enterococcus faecalis ATCC 29212) au fost preparate prin amestecarea celulelor din colonii cu soluție salină sterilă. Probele bacteriene au fost apoi diluate cu soluție salină pentru a se potrivi cu McFarland 0,5, echivalent cu 108 UFC/mL. Volumul probei adăugat a fost de 10 µl.39 Un standard de turbiditate (McFarland 0,5)40 a fost preparat prin turnarea a 0,6 ml de soluție de clorură de bariu dihidrat 1% (10 g/l) într-un cilindru gradat de 100 ml și umplerea până la 100 ml cu acid sulfuric 1% (10 g/l). Standardele de turbiditate au fost plasate în aceleași tuburi ca și probele de bulion și depozitate la temperatura camerei timp de 6 luni, la întuneric, sigilate pentru a preveni evaporarea. Deschideți capacul plăcii Petri goale și turnați proba în mijlocul plăcii. Dacă agarul este complet solidificat, inversați placa și incubați la 37°C timp de 24 de ore.
Toate datele au fost colectate, tabelate și supuse analizei statistice. Analiza statistică a fost efectuată utilizând IBM® SPSS® Statistical Version 17 pentru Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, SUA).
A fost studiată solubilitatea Chx.HCl în diverse faze uleioase, soluții de surfactanți, soluții de co-surfactanți și apă. Chx.Hcl are cea mai mare solubilitate în Labrafil M și cea mai mică solubilitate în acid oleic. O solubilitate mai mare a medicamentului în faza uleioasă este importantă pentru nanoemulsii, deoarece nanoemulsiile sunt capabile să mențină medicamentul în formă dizolvată, ceea ce înseamnă că o solubilitate mai mare a medicamentului în ulei are ca rezultat mai puțin ulei în formulare și, prin urmare, mai puțin medicament. O anumită cantitate de surfactant și co-surfactant este necesară pentru emulsionarea picăturilor de ulei.
O diagramă de fază pseudo-triplă a fost construită pentru a defini regiunile de nanoemulsie și a optimiza concentrațiile uleiurilor selectate, ale agenților tensioactivi și ale agenților tensioactivi suplimentari (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 și, respectiv, propilen glicol). Chx.Hcl prezintă o solubilitate foarte scăzută în acid oleic, rezultând o tulbureală atunci când acidul oleic este titrat cu prima picătură de apă. Prin urmare, sistemul cu acid oleic a fost exclus din acest studiu. Alte formulări au fost preparate folosind un amestec 1:9 de ulei și surfactant. interval de pH și tărie ionică, așa că au fost aleși acești surfactanți.
Toate formulările preparate au fost transparente, cu excepția Sistemului F2, care a apărut tulbure și, prin urmare, a fost exclusă din studiile de evaluare ulterioare.
Formula ideală de nanoemulsie ar trebui să se poată dispersa complet și rapid atunci când este diluată cu agitare ușoară. Formulările de nanoemulsie Chx.HCl au prezentat timpi de emulsionare scurți, de la 1,67 la 12,33 secunde. Tween 80 are cel mai scurt timp de emulsionare. Acest lucru poate fi explicat prin capacitatea de solubilizare mai mare a Tween 80. Timpul de autoemulsionare crește odată cu creșterea concentrației de surfactant, ceea ce se poate datora creșterii vâscozității sistemului sub acțiunea surfactantului.
Dimensiunea picăturilor din emulsie determină rata și gradul de eliberare a medicamentului. O dimensiune mai mică a picăturilor din emulsie are ca rezultat un timp de emulsionare mai scurt și o suprafață mai mare pentru absorbția medicamentului. Dimensiunile medii ale picăturilor din compozițiile selectate ale nanoemulsiei Chx.HCl au fost 711±0,44, 587±15,3, 10,97±0,11, 16,43±4,55 și 12,18±2,48, iar PDI a fost 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 și 0,76 pentru F1, F2, F3 și respectiv 0,16 pentru F4, F5 și F6. Formulările care conțin Tween 80 ca surfactant au prezentat sferulite mai mici. Acest lucru se poate datora puterii sale de emulsionare mai mari. O valoare PDI mai mică indică o distribuție a dimensiunii sistemului mai restrânsă. Aceste formulări au un aspect curat deoarece razele picăturilor lor sunt mai mici decât lungimea de undă optică a luminii vizibile (390-750 nm), la care are loc o împrăștiere minimă a luminii. 41
În figura 2 se prezintă procentul de Chx.HCl eliberat din formularea formulată. Eliberarea completă a medicamentului din formulările preparate cu nanoemulsie Chx.HCl a variat între 2 și 7 minute. S-a observat că cea mai mare rată de eliberare a medicamentului a fost obținută în cazul formulării de nanoemulsie Chx.HCl F6 (2 min), ceea ce se poate datora prezenței Tween 80, care a prezentat un grad mai mare de emulsionare, iar nanoemulsia rezultată oferă o suprafață mare pentru eliberarea medicamentului, permițând rate crescute de eliberare a medicamentului. În același timp, proprietățile de solubilitate ale propilen glicolului permit dizolvarea unei cantități mari de surfactanți hidrofili în ulei. 40
S-a constatat că eliberarea de Chx.HCl in vitro urmează o ordine cinetică diferită și nicio ordine cinetică clară nu poate reflecta eliberarea medicamentului din formulări de nanoemulsie preparate diferit. Eliberarea cinetică a medicamentelor F4 este o cinetică de ordinul întâi, ceea ce înseamnă că acestea sunt eliberate proporțional cu cantitatea de medicament rămasă în interiorul lor.42 Eliberarea cinetică a altor medicamente a fost în concordanță cu modelul de difuzie Higuasha, care a indicat că cantitatea de medicament eliberată a fost proporțională cu rădăcina pătrată a medicamentului total și cu solubilitatea medicamentului în nanoemulsie.42
Formulările selectate au fost supuse unei stabilități termodinamice variabile prin teste de stres utilizând cicluri de încălzire-răcire, centrifugare și cicluri de congelare-dezghețare. S-a observat că formulările F3 și F4 au prezentat precipitarea medicamentului după ciclurile de decongelare, în timp ce F1 a prezentat îngroșare (gelificare). F5 și F6 au trecut ciclul de centrifugare continuă, testul de încălzire-răcire și testul de congelare-dezghețare. Nanoemulsiile sunt sisteme termodinamic stabile, formate la anumite concentrații de ulei, surfactant și apă, fără separare de faze, emulsificare sau cracare. Stabilitatea termică este cea care distinge nanoemulsiile de emulsii, care sunt stabile cinetic și se vor separa în cele din urmă în faze. 19 F3 a prezentat o dimensiune a particulelor mai mare (587 nm) decât alte formulări, ceea ce poate explica separarea de faze și precipitarea medicamentului în testele de stabilitate termodinamică. F4 care conține Tween 80 și nu conține co-surfactant a prezentat precipitarea medicamentului, acest lucru putând indica necesitatea utilizării propilen glicolului și Tween 80 pentru a îmbunătăți stabilitatea formulărilor de nanoemulsie. F1 care conține Tween 20 fără surfactant suplimentar a prezentat îngroșare (gelificare), care este o creștere a vâscozității sau rezistenței gelului datorită agregării picăturilor.
Rezultatele privind stabilitatea demonstrează importanța prezenței unui surfactant suplimentar pe bază de propilen glicol pentru a crește dispersia particulelor și a preveni precipitarea medicamentului. 43 F6 a fost cea mai bună formulare datorită dimensiunii mici a particulelor (12,18 nm), timpului scurt de emulsionare (1,67 secunde) și ratei rapide de dizolvare după 2 minute. S-a constatat că este un sistem stabil termodinamic/fizic și, prin urmare, a fost selectat pentru studii suplimentare.
Eșecurile după tratamentul canalului radicular sunt din ce în ce mai frecvente, ceea ce înseamnă că pacienții prezintă un risc crescut de a dezvolta infecții mai complexe. 44,45 Biofilmul trebuie îndepărtat în timpul dezinfecției și umplerii canalelor radiculare. 46,47 Din cauza complexității sistemului de canale radiculare, devine dificilă îndepărtarea completă a canalelor radiculare bacteriene folosind doar instrumente și irigare. 48 Eficacitatea soluțiilor de clătire a canalului radicular depinde de penetrarea irigantului în canalul radicular și de durata expunerii la bacterii. 49 Prin urmare, au fost încercate și testate noi metode de sterilizare completă a canalului radicular. Clătirile convenționale nu elimină complet E. faecalis din cauza penetrării reduse a canalului radicular.50.
Puterea medie de curățare a soluției de clătire cu nanoemulsie a fost de 2001,47 µm2, iar dimensiunea medie a particulelor agentului de clătire a fost de 2609,56 µm. Diferența medie dintre soluția de clătire cu nanoemulsie și soluția de clătire cu dimensiune normală a particulelor a fost de 608,09 µm2. A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții pe bază de nanoemulsie și iriganții cu dimensiuni normale ale particulelor, cu (valoare P 0,00052). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții pe bază de nanoemulsie și iriganții cu dimensiuni normale ale particulelor, cu (valoare P 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным росмальным растворами наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) (valoarea P 0,00052) între iriganții cu nanoemulsie și iriganții cu particule normale.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.000.值0,00052）。纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0.000.值0,00052）。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частитиц бастистц сиель очень значимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,0001) între clătirea cu nanoemulsie și clătirea cu particule de dimensiuni normale (valoarea P 0,00052).Nanoemulsia a prezentat o diferență statistic foarte semnificativă în comparație cu materialul cu dimensiuni normale ale particulelor, indicând o suprafață medie mai mică a resturilor reziduale, adică materialul nanoemulsie a avut cea mai bună capacitate de curățare, așa cum se arată în figura 3.
Figura 3. Comparație a performanței de curățare a agenților de clătire: (A) cu laser Nano CHX activat, (B) cu laser CHX activat, (C) cu PUI Nano CHX, (D) fără activarea Nano CHX, (E) fără activarea CHX și (F) activarea CHX PUI.
Suprafața medie a fragmentelor rămase de Chx.HCl 1,6% a fost de 2320,36 µm2, iar suprafața medie a fragmentelor de Chx.HCl 2% a fost de 2949,85 µm2. A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții cu concentrație mai mare de nanoemulsie și iriganții cu dimensiune normală a particulelor (valoarea P 0,00000). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții cu concentrație mai mare de nanoemulsie și iriganții cu dimensiune normală a particulelor (valoarea P 0,00000). Наблюдалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница между более высокой концеиней концеица между наноэмульсионных ирригационных растворов и ирригационными растворами с нормальным растворов и ирригационными растворами с нормальным растворов растворов (значение P 0,00000). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții cu concentrație mai mare de nanoemulsie și iriganții cu dimensiuni normale ale particulelor (valoarea P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P值0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学显着的学显着的剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学显着的学显着的常粒径冲洗剂之间存在统计学显着的学显着的剂与正常粒径冲洗剂0,0 Наблюдалась статистически очень значимая разница (P<0,001) между более высокими концими конца ополаскивателя с наноэмульсией и ополаскивателя с нормальным размером частиц (значение P 000). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între concentrațiile mai mari de clătire cu nanoemulsie și clătirea cu particule de dimensiuni normale (valoarea P 0,00000).Deși concentrația irigantului nanoemulsie a fost mai mică decât cea a irigantului cu dimensiuni normale ale particulelor, această concentrație mai mică a fost semnificativ mai eficientă în îndepărtarea resturilor și mai eficientă în curățarea canalelor radiculare.
PUI a avut o diferență statistic foarte semnificativă (p<0,001) în comparație cu alte metode de activare. PUI a avut o diferență statistic foarte semnificativă (p<0,001) în comparație cu alte metode de activare. PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активами. PUI a avut o diferență statistic foarte semnificativă (p<0,001) comparativ cu alte metode de activare.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001)。与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001)。 По сравнению с другими методами активации PUI имел статистически очень значимую разниц00 (разниц00). Comparativ cu alte metode de activare, PUI a prezentat o diferență statistic foarte semnificativă (p<0,001).Odată cu activarea ISP, suprafața medie a reziduurilor de resturi a fost de 1695,31 µm2. Diferența medie dintre PUI și Laser a fost de 987,89929, demonstrând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001) cu (valoarea p 0,00000). Diferența medie dintre PUI și Laser a fost de 987,89929, demonstrând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001) cu (valoarea p 0,00000). Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значески значPим0, демонстрируя разницу с (p-значение 0,00000). Diferența medie dintre PUI și Laser a fost de 987,89929, demonstrând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001) față de (valoarea p 0,00000). PUI 和Laser 之间的平均差异为987.89929，显示出高度统计学显着性(P<0,001) 差异)(p 000000)(p 000000)PUI 和Laser Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистистичзостистой статетельствует (P<0,001) разницы (p-значение 0,00000). Diferența medie dintre PUI și Laser a fost de 987,89929, indicând o diferență cu semnificație statistică ridicată (P<0,001) (valoarea p 0,00000). Diferența medie dintre PUI și nicio activare a fost de 712,40643, demonstrând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001), cu o valoare p de 0,00098). Utilizarea fie a activării cu laser, fie a niciunei activări nu a fost semnificativ diferită statistic (P>0,05), cu o valoare P de 0,451211. Diferența medie dintre PUI și nicio activare a fost de 712,40643, demonstrând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001), cu o valoare p de 0,00098. O valoare P de 0,451211. Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, демонстрируя выстесткостации составила значимую (P<0,001) разницу с p-значением 0,00098). Diferența medie dintre PUI și nicio activare a fost de 712,40643, demonstrând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001), cu o valoare p de 0,00098.Valoarea P 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643，显示高度统计学显着性差异(P<0,001)，p值为0,00098).PUI Средняя разница между PUI и инактивацией составила 712,40643, что свидетельствует о выставила выставила 712,40643 значимости разницы (P<0,001, p-значение 0,00098). Diferența medie dintre PUI și inactivare a fost de 712,40643, indicând o semnificație statistică ridicată a diferenței (P<0,001, valoarea p 0,00098).使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0,05) P 值为0,451211。使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0,05) P 值为0,451211。 Статистически значимой разницы (P>0,05) с лазерной активацией или без нее не быницы со бынием со P 0,451211. Nu a existat nicio diferență semnificativă statistic (P>0,05) cu sau fără activare cu laser, cu o valoare P de 0,451211.Suprafața medie a fragmentelor rămase după activarea cu laser a fost de 2683,21 µm2. Suprafața medie a fragmentelor rămase fără activare a fost de 2407,72 µm2. Comparativ cu activarea cu laser sau fără activare, PUI a avut o suprafață medie a cipului statistic mai mică, adică cea mai bună putere de curățare.
Puterea medie de curățare a soluției de clătire cu nanoemulsie a fost de 2001,47 µm2, iar dimensiunea medie a particulelor agentului de clătire a fost de 2609,56 µm. Diferența medie dintre soluția de clătire cu nanoemulsie și soluția de clătire cu dimensiune normală a particulelor a fost de 608,09 µm2. A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții cu nanoemulsie și iriganții cu dimensiuni normale ale particulelor, cu (valoare P 0,00052). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții cu nanoemulsie și iriganții cu dimensiuni normale ale particulelor, cu (valoare P 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным росмальным растворами была статистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) (valoarea P 0,00052) între iriganții cu nanoemulsie și iriganții cu particule normale.纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P值0,00052）。 P<0,001）（P值0,00052）。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частитиц бастистц сиель очень значимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,0001) între clătirea cu nanoemulsie și clătirea cu particule de dimensiuni normale (valoarea P 0,00052).Comparativ cu un material cu dimensiuni normale ale particulelor, nanoemulsia prezintă o diferență statistic foarte semnificativă, indicând o suprafață medie mai mică a resturilor reziduale, adică materialul nanoemulsie are o capacitate de curățare mai bună, așa cum se arată în Figura 3.
Suprafața medie a fragmentelor rămase de Chx.HCl 1,6% a fost de 2320,36 µm2, iar suprafața medie a fragmentelor de Chx.HCl 2% a fost de 2949,85 µm2. A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții cu concentrație mai mare de nanoemulsie și iriganții cu dimensiune normală a particulelor (valoarea P 0,00000). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P<0,001) între iriganții cu concentrație mai mare de nanoemulsie și iriganții cu dimensiune normală a particulelor (valoarea P 0,00000). Имелась статистически высокодостоверная (P<0,001) разница между более высокой концентрациентрац наноэмульсионных ирригационных средств и ирригационными растворами с нормальным разнча Сроминционными 0,00000). A existat o diferență semnificativă statistic (P<0,001) între iriganții cu concentrație mai mare de nanoemulsie și iriganții cu dimensiuni normale ale particulelor (valoarea P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P值0,00000）。较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P000 Наблюдалась статистически высокозначимая разница (P <0,001) между более высокими концеинтраце ополаскивателя с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение0000,0000). A existat o diferență statistic foarte semnificativă (P < 0,001) între concentrațiile mai mari de clătire cu nanoemulsie și clătirea cu particule de dimensiuni normale (valoarea P 0,00000).Deși concentrația irigantului nanoemulsie a fost mai mică decât cea a irigantului cu dimensiuni normale ale particulelor, această concentrație mai mică a fost semnificativ mai eficientă în îndepărtarea resturilor și mai eficientă în curățarea canalelor radiculare.
PUI a avut o diferență semnificativă statistic ridicată (p<0,001) în comparație cu alte metode de activare. PUI a avut o diferență semnificativă statistic ridicată (p<0,001) în comparație cu alte metode de activare. PUI имел статистически высокую значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методимваца. PUI a prezentat o diferență semnificativă statistic (p<0,001) comparativ cu alte metode de activare.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0,001)。 Comparativ cu alte metode de activare, PUI prezintă o diferență semnificativă statistic (p<0,001). PUI статистически значимо отличался (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. Punctul de activare (PUI) a fost semnificativ statistic diferit (p<0,001) comparativ cu alte metode de activare.În timpul activării PUI, suprafața medie a resturilor reziduale de suprafață a fost de 1695,31 μm2. Diferența medie dintre PUI și Laser a fost de 987,89929, indicând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001) cu (valoarea p 0,00000). Diferența medie dintre PUI și nicio activare a fost de 712,40643, indicând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001) cu (valoarea p 0,00098). Utilizarea fie a activării cu laser, fie a niciunei activări nu a prezentat o diferență semnificativă statistic (P>0,05) cu (valoarea P 0,451211). Diferența medie dintre PUI și Laser a fost de 987,89929, indicând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001) cu (valoarea p 0,00000). Diferența medie dintre PUI și nicio activare a fost de 712,40643, indicând o diferență extrem de semnificativă statistic (P<0,001) cu (valoarea p 0,00098). Utilizarea fie a activării cu laser, fie a niciunei activări nu a prezentat o diferență semnificativă statistic (P>0,05), cu (valoarea P 0,451211). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, демонстрируя высокостатистичестатистичестачи Составила (1) разницу с (p-значение 0,00000). Diferența medie dintre PUI și laser a fost de 987,89929, demonstrând o diferență extrem de semnificativă statistic (P <0,001) cu (valoarea p 0,00000). - значение 0,00098).Использование лазерной активации или отсутствие активации не иметело стчации значимой разницы (P>0,05) с (P-значение 0,451211). - valoare 0,00098). Utilizarea activării cu laser sau nicio activare a avut o diferență statistic semnificativă (P>0,05) cu (valoarea P 0,451211). PUI 和激光之间的平均差异为987.89929，与(p 值0.00000) 差异具有高度统计学(P)<0.00000) Diferența medie dintre PUI și laser este de 987,89929, iar diferența (p ≤ 0,00000) are o semnificație statistică ridicată (P < 0,001). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, что было высоко статистически Составила 987,89929, что было высоко статистически Составила (значение p 0,00000). Diferența medie dintre PUI și laser a fost de 987,89929, ceea ce a fost extrem de semnificativ statistic (P <0,001) cu (valoare p 0,00000). PUI 与未激活之间的平均差异为712.40643，与(p) 差异具有高度统计均差异为712.40643，与(p) 差异具有高度统计均差异为712.40643.)。 -0,0901.)。00901. Diferența medie dintre PUI și inactiv este de 712,40643, iar diferența (p) are o semnificație statistică ridicată (P<0,001) – valoare 0,00098. Средняя разница между PUI и инактивацией составила 712,40643, что было высоко статистичесы стистическо разницей (p) (P<0,001 — значение 0,00098). Diferența medie dintre PUI și inactivare a fost de 712,40643, ceea ce a fost extrem de semnificativ statistic, cu diferență (p) (P<0,001 – valoare 0,00098).使用激光激活或不激活没有显着统计学差异(P>0,05) 与(P 值0,451211)。 Nu a existat o diferență statistică semnificativă între activarea cu laser și neactivare (P>0,05) și (P ≤0,451211). Не было статистически значимой разницы (P>0,05) по сравнению с (значение P 0,451211) с сравнению с (значение P 0,451211) с нлайзекравнению с или без нее. Nu a existat nicio diferență semnificativă statistic (P>0,05) comparativ cu (valoarea P 0,451211) cu sau fără activare cu laser.Suprafața medie a fragmentelor rămase în timpul activării cu laser a fost de 2683,21 μm2. Suprafața medie a fragmentelor rămase fără activare a fost de 2407,72 μm2. Comparativ cu activarea cu laser sau fără activare, PUI are o suprafață medie a cipului statistic mai mică, adică o capacitate de curățare mai bună.
Efectul mediu al clătirii cu nanoemulsie asupra îndepărtării resturilor a fost semnificativ statistic mai mare decât cel al clătirii cu particule de dimensiune normală. Chx.HCl 1,6%, PUI 1938,77 µm2, 2510,96 µm2 cu laser. Fără activare, valoarea medie este de 2511,34 µm2. Când s-a utilizat Chx.HCl 2% și s-a activat cu laser, rezultatele au fost cele mai slabe, iar cantitatea de resturi a fost maximă. Aceleași rezultate s-au obținut atunci când nu s-a activat Chx.HCl 0,75%. Evident, cele mai bune rezultate s-au obținut utilizând concentrații mai mari de agent de clătire în nanoemulsie. PUI a fost cel mai eficient în activarea iritantului și în eliminarea resturilor, așa cum se arată în Figura 3A-F).
După cum se arată în Tabelul 2, nanoemulsia Chx.HCl a avut performanțe mai bune decât particulele de dimensiuni normale în ceea ce privește numărul de microorganisme viabile și a avut o bună corelație cu penetrarea formulării și efectul de curățare în funcție de următorii parametri: dimensiunea, concentrația agentului de spălare și metoda de activare.
Bacteriile pot fi complet distruse prin utilizarea unei concentrații mai mari de agent de clătire. Chiar și cu activarea PUI, Chx.HCl 0,75% a avut cel mai slab efect antibacterian. Activarea cu laser are un efect negativ asupra clătirilor cu nano-emulsie. După cum se poate observa din toate rezultatele anterioare, utilizarea unui laser reduce eficiența nanoemulsiei Chx.HCl 0,75%, unde CFU-ul nanoChx.HCl 0,75% este 195, ceea ce reprezintă o valoare foarte mare, indicând faptul că reactivii la această concentrație sunt comparabili cu activarea cu laser. Laserele cu diodă sunt fototermale, deci fie lumina, fie căldura pot determina nanoemulsia să-și piardă efectul antibacterian. Rezultatul concentrațiilor mari este distrugerea completă a bacteriilor. Nano Chx.HCl 1,6% a prezentat o creștere bacteriană negativă în prezența activării cu laser, ceea ce înseamnă că laserul nu a afectat capacitatea antibacteriană a nano Chx.HCl 1,6%. Se poate concluziona că materialul nanoemulsie cu o concentrație mai mare are un efect antibacterian mai bun.
În această lucrare, nanoemulsiile de Chx.HCl au fost preparate folosind două uleiuri diferite, doi surfactanți și un co-surfactant, fiind aleasă formularea optimă (F6) cu dimensiuni mici ale particulelor, timp scurt de emulsionare și rată mare de dizolvare. În plus, (F6) a fost testată pentru stabilitatea termodinamică/fizică. În nanoemulsia de Chx.HCl, la o concentrație de 1,6%, nanoemulsia de Chx.HCl a prezentat cea mai bună permeabilitate în tubulii dentinali în comparație cu Chx.HCl tradițional, ca fluid de clătire, iar PUI, ca metodă de activare, a avut o capacitate de curățare. În plus, studiile antibacteriene ale nanoemulsiei de Chx.HCl au arătat eliminarea completă a bacteriilor. Rezultatele au confirmat acest lucru. Nanoemulsia de Chx.HCl poate fi considerată un lichid de spălare promițător.
Suntem foarte recunoscători personalului laboratorului de cercetare al Universității de Știință și Tehnologie Misr pentru sprijinul deosebit acordat.