ஊட்டச்சத்துக்களைப் பெறுவதும் விநியோகிப்பதும் பூச்சிகளின் உணவுத் தேடல் மற்றும் வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகளை ஒருங்கிணைக்கிறது. வாழ்க்கையின் வெவ்வேறு நிலைகளில் குறிப்பிட்ட ஊட்டச்சத்துக்களின் குறைபாடுகளை ஈடுசெய்ய, பூச்சிகள் துணை உணவு மூலம் இந்த ஊட்டச்சத்துக்களைப் பெறலாம்; உதாரணமாக, 'குளங்கள்' எனப்படும் ஒரு செயல்முறையில் முதுகெலும்பிகளின் சுரப்புகளை உண்பதன் மூலம். அனோபிலிஸ் அரேபியானி கொசு ஊட்டச்சத்துக் குறைபாடுடன் காணப்படுவதால், அதன் வளர்சிதை மாற்றம் மற்றும் இனப்பெருக்கம் ஆகிய இரண்டிற்கும் ஊட்டச்சத்துக்கள் தேவைப்படுகின்றன. ஊட்டச்சத்துக்களைப் பெறுவதற்காக பசுவின் சிறுநீரில் அனோபிலிஸ் அரேபியன்சிஸ் கொசு அசைவது, அதன் வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகளை மேம்படுத்துகிறதா என்பதை மதிப்பிடுவதே இந்த ஆய்வின் நோக்கமாக இருந்தது.
அது பாதுகாப்பானது என்பதை உறுதிப்படுத்திக் கொள்ளுங்கள். புதிய, 24 மணி நேரம், 72 மணி நேரம் மற்றும் 168 மணி நேரம் பழமையான பசுவின் சிறுநீரின் வாசனையால் அரபியென்சிஸ் கொசுக்கள் ஈர்க்கப்பட்டன. மேலும், விருந்தோம்பியைத் தேடும் மற்றும் இரத்தம் அருந்திய (இரத்தம் அருந்திய 48 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு) பெண் கொசுக்கள் Y-குழாய் வாசனைமானியில் அளவிடப்பட்டன, மற்றும் கர்ப்பிணிப் பெண் கொசுக்கள் முட்டையிடும் சோதனைக்காக மதிப்பிடப்பட்டன. பின்னர், நான்கு வயதுப் பிரிவுகளிலும் பசுவின் சிறுநீரில் உள்ள உயிரியல் செயல்பாட்டுக் கலவைகளைக் கண்டறிய, ஒரு ஒருங்கிணைந்த வேதியியல் மற்றும் மின் உடலியல் பகுப்பாய்வு பயன்படுத்தப்பட்டது. உயிரியல் செயல்பாட்டுக் கலவைகளின் செயற்கைக் கலவைகள் Y-குழாய் மற்றும் களச் சோதனைகளில் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டன. மலேரியா பரப்பிகளுக்கு சாத்தியமான துணை உணவுகளாக பசுவின் சிறுநீர் மற்றும் அதன் முக்கிய நைட்ரஜன் கொண்ட சேர்மமான யூரியாவை ஆராய்வதற்காக, உணவு அளவுருக்கள் மற்றும் வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகள் அளவிடப்பட்டன. பெண் கொசுக்களின் விகிதம் மற்றும் உறிஞ்சப்பட்ட பசுவின் சிறுநீர் மற்றும் யூரியாவின் அளவு ஆகியவை மதிப்பிடப்பட்டன. உணவளித்த பிறகு, பெண் கொசுக்கள் உயிர்வாழ்தல், கட்டுப்படுத்தப்பட்ட பறத்தல் மற்றும் இனப்பெருக்கம் ஆகியவற்றிற்காக மதிப்பிடப்பட்டன.
ஓம்புயிரின் இரத்தத்தையும் ஊட்டச்சத்தையும் நாடுகின்றன. ஆய்வக மற்றும் கள ஆய்வுகளில், அரேபிய ஆமைகள் புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீரின் இயற்கை மற்றும் செயற்கை வாசனையால் ஈர்க்கப்பட்டன. முட்டையிடும் இடங்களில், கர்ப்பிணிப் பெண் ஆமைகள் பசுவின் சிறுநீருக்கான எதிர்வினைகளைப் பொருட்படுத்தவில்லை. ஓம்புயிரைத் தேடும் மற்றும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் பெண் ஆமைகள், பசுவின் சிறுநீரையும் யூரியாவையும் தீவிரமாக உறிஞ்சி, பறத்தல், உயிர்வாழ்தல் அல்லது இனப்பெருக்கம் போன்றவற்றுக்காகத் தங்கள் உடலியல் நிலையைப் பொறுத்து, வாழ்க்கை வரலாற்று சமநிலைகளுக்கு ஏற்ப இந்த வளங்களைப் பயன்படுத்துகின்றன.
அனோபிலிஸ் அராபினிஸ், தனது மேம்பட்ட வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகளுக்காகப் பசுவின் சிறுநீரைப் பெற்று விநியோகிக்கிறது. பசுவின் சிறுநீரைத் துணை உணவாக அளிப்பது, தினசரி உயிர்வாழ்தலையும் நோய்க்கடத்தி அடர்த்தியையும் அதிகரிப்பதன் மூலம் நேரடியாகவும், பறக்கும் செயல்பாட்டை மாற்றுவதன் மூலம் மறைமுகமாகவும் நோய்க்கடத்தும் திறனைப் பாதிக்கிறது. எனவே, இது எதிர்கால மாதிரிகளில் கருத்தில் கொள்ளப்பட வேண்டும்.
ஊட்டச்சத்துக்களைப் பெறுவதும் விநியோகிப்பதும் பூச்சிகளின் உணவுத் தேடல் மற்றும் வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகளை ஒருங்கிணைக்கிறது [1,2,3]. பூச்சிகள் உணவு இருப்பு மற்றும் ஊட்டச்சத்துத் தேவைகளின் அடிப்படையில் உணவைத் தேர்ந்தெடுத்துப் பெறவும், ஈடுசெய்யும் வகையில் உணவளிக்கவும் திறன் கொண்டவை [1, 3]. ஊட்டச்சத்துக்களின் விநியோகம் வாழ்க்கை வரலாற்றுச் செயல்முறையைப் பொறுத்தது மற்றும் பூச்சிகளின் வெவ்வேறு வாழ்க்கை நிலைகளில் உணவின் தரம் மற்றும் அளவில் வெவ்வேறு தேவைகளுக்கு வழிவகுக்கும் [1, 2]. குறிப்பிட்ட ஊட்டச்சத்துக்களின் குறைபாடுகளை ஈடுசெய்ய, பூச்சிகள் இந்த ஊட்டச்சத்துக்களை சேறு, முதுகெலும்பிகளின் பல்வேறு கழிவுகள் மற்றும் சுரப்புகள், மற்றும் அழுகிய சடலங்கள் போன்ற துணை உணவுகள் மூலம் பெறலாம், இந்த செயல்முறை குட்டைகள் என்று அழைக்கப்படுகிறது [2]. முதன்மையாக பல்வேறு பட்டாம்பூச்சி மற்றும் அந்துப்பூச்சி இனங்கள் விவரிக்கப்பட்டிருந்தாலும், நீர்நிலைகள் மற்ற பூச்சி வரிசைகளிலும் காணப்படுகின்றன, மேலும் இந்த வகையான வளங்களைக் கண்டு ஈர்க்கப்பட்டு அவற்றை உண்பது ஆரோக்கியம் மற்றும் பிற வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகளில் குறிப்பிடத்தக்க விளைவுகளை ஏற்படுத்தும் [2, 4, 5, 6, 7]. மலேரியா கொசுவான அனோபிலிஸ் காம்பியாய் சென்சு லேட்டோ (sl) ஒரு 'ஊட்டச்சத்துக் குறைபாடுள்ள' முதிர்ந்த உயிரியாக வெளிவருகிறது [8], எனவே நீர்நிலைகள் அதன் வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகளில் இது ஒரு முக்கியப் பங்காற்றக்கூடும், ஆனால் இந்த நடத்தை இதுவரை புறக்கணிக்கப்பட்டுள்ளது. இந்த முக்கியமான ஊடகத்தில் ஊட்டச்சத்து உட்கொள்ளலை அதிகரிப்பதற்கான ஒரு வழியாகக் கிளர்ச்சியைப் பயன்படுத்துவது கவனத்திற்குரியது, ஏனெனில் இது முக்கியமான நோய்ப்பரவல் விளைவுகளை ஏற்படுத்தக்கூடும்.
முதிர்ந்த பெண் அனோபிலிஸ் கொசுக்களில், லார்வா நிலையில் இருந்து கொண்டு செல்லப்படும் குறைந்த கலோரி இருப்புக்கள் மற்றும் இரத்த உணவை திறனற்ற முறையில் பயன்படுத்துதல் [9] காரணமாக நைட்ரஜன் உட்கொள்ளல் குறைவாக உள்ளது. பெண் Ann.gambiae sl பொதுவாக கூடுதல் இரத்த உணவை உட்கொள்வதன் மூலம் இதை ஈடுசெய்கிறது [10, 11], இதன் மூலம் அதிகமான மக்கள் நோயால் பாதிக்கப்படும் அபாயத்தையும், கொசுக்கள் வேட்டையாடப்படும் அபாயத்தையும் அதிகரிக்கிறது. மாற்றாக, கொசுக்கள் முதுகெலும்புள்ள விலங்குகளின் கழிவுகளை கூடுதலாக உண்பதன் மூலம், தழுவல் மற்றும் பறக்கும் சூழ்ச்சித்திறனை மேம்படுத்தும் நைட்ரஜன் கலவைகளைப் பெறலாம், இது மற்ற பூச்சிகளால் நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது [2]. இந்த வகையில், An.Gambian sl இனக் குழுமத்திற்குள் உள்ள சகோதர இனங்களில் ஒன்றான அனோபிலிஸ் அராபினிஸ், புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீரை [12,13,14] வலுவாகவும் தனித்துவமாகவும் ஈர்ப்பது சுவாரஸ்யமானது. அனோபிலிஸ் அராபினிஸ் அதன் விருந்தோம்பி விருப்பங்களில் சந்தர்ப்பவாதமானது மற்றும் கால்நடைகளுடன் தொடர்பு கொண்டு அவற்றை உணவாகக் கொள்வதாக அறியப்படுகிறது. பசுவின் சிறுநீர் நைட்ரஜன் கலவைகள் நிறைந்த ஒரு வளமாகும், இதில் யூரியா மொத்த நைட்ரஜனில் 50-95% ஆகும். புதிய சிறுநீரில் [15, 16]. பசுவின் சிறுநீர் பழமையாகும் போது, ​​நுண்ணுயிரிகள் இந்த வளங்களைப் பயன்படுத்தி 24 மணி நேரத்திற்குள் நைட்ரஜன் கலவைகளின் சிக்கலான தன்மையைக் குறைக்கின்றன [15]. கரிம நைட்ரஜனின் சரிவுடன் தொடர்புடைய அம்மோனியாவின் விரைவான அதிகரிப்புடன், கார விரும்பும் நுண்ணுயிரிகள் (அவற்றில் பல கொசுக்களுக்கு நச்சுத்தன்மையுள்ள சேர்மங்களை உற்பத்தி செய்கின்றன) செழித்து வளர்கின்றன [15]. பெண் Ann.arabiensis கொசுக்கள் 24 மணி நேரம் அல்லது அதற்கும் குறைவான பழமையான சிறுநீரால் முன்னுரிமையுடன் ஈர்க்கப்படுகின்றன [13, 14].
இந்த ஆய்வில், ஓம்புயிரி மற்றும் இரத்தம் அருந்திய அரேபியன்சிஸ் கொசுக்கள் தேடப்பட்டன. அதன் முதல் கோனாடோட்ரோபின் சுழற்சியின் போது, ​​சிறுநீரைக் கலப்பதன் மூலம் யூரியா உள்ளிட்ட நைட்ரஜன் கலவைகளை அரேபியன்சிஸ் கொசுக்கள் பெறுகின்றனவா என்பது மதிப்பிடப்பட்டது. அடுத்து, பெண் கொசுக்கள் இந்த சாத்தியமான ஊட்டச்சத்து வளத்தை மேம்பட்ட உயிர்வாழ்வு, இனப்பெருக்கம் மற்றும் மேலும் உணவு தேடுதலுக்காக எவ்வாறு பயன்படுத்துகின்றன என்பதை மதிப்பிடுவதற்கு தொடர்ச்சியான சோதனைகள் நடத்தப்பட்டன. இறுதியாக, புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீரின் மணம், ஓம்புயிரி மற்றும் இரத்தம் அருந்திய அரேபியன்சிஸ் கொசுக்களுக்கு நம்பகமான தடயங்களை வழங்குகிறதா என்பதைத் தீர்மானிக்க மதிப்பிடப்பட்டது. இந்த சாத்தியமான ஊட்டச்சத்து வளத்தைத் தேடும்போது, ​​அரேபியன்சிஸ் கொசுக்கள், கவனிக்கப்பட்ட வேறுபட்ட கவர்ச்சிக்குப் பின்னால் உள்ள வேதியியல் தொடர்புகளைக் கண்டறிந்தன. 24 மணி நேரம் பழைய சிறுநீரில் அடையாளம் காணப்பட்ட ஆவியாகும் கரிம சேர்மங்களின் (VOCs) செயற்கை மணக் கலவைகள் கள நிலைமைகளின் கீழ் மேலும் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டன. இது ஆய்வக நிலைமைகளின் கீழ் பெறப்பட்ட முடிவுகளை விரிவுபடுத்தி, வெவ்வேறு உடலியல் நிலைகளில் பசுவின் சிறுநீர் மணத்தின் விளைவை நிரூபித்தது. கொசு கவர்ச்சி. பெறப்பட்ட முடிவுகள் அரேபியன்சிஸ் கொசுக்கள், அரேபியன்சிஸ், முதுகெலும்பிகளின் சிறுநீரில் காணப்படும் நைட்ரஜன் கலவைகளைப் பெற்று, அவற்றின் வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகளைப் பாதிக்கும் வகையில் விநியோகிக்கிறது. இந்த முடிவுகள், ஏற்படக்கூடிய நோய்ப்பரவல் விளைவுகள் மற்றும் நோய்க்கடத்தியைக் கண்காணிப்பதற்கும் கட்டுப்படுத்துவதற்கும் அவற்றை எவ்வாறு பயன்படுத்தலாம் என்ற பின்னணியில் விவாதிக்கப்படுகின்றன.
அனோபிலிஸ் அராபிகன்ஸ் (டோங்கோலா வகை) கொசுக்கள் 25 ± 2 °C வெப்பநிலை, 65 ± 5% ஈரப்பதம் மற்றும் 12:12 மணி நேர ஒளி:இருள் சுழற்சியில் பராமரிக்கப்பட்டன. லார்வாக்கள், காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் நிரப்பப்பட்ட பிளாஸ்டிக் தட்டுகளில் (20 செ.மீ × 18 செ.மீ × 7 செ.மீ) வளர்க்கப்பட்டு, டெட்ராமின்® மீன் உணவு (டெட்ரா வெர்கே, மெல்லே, DE) அளிக்கப்பட்டது. கூட்டுப்புழுக்கள் 30 மில்லி கோப்பைகளில் (நோலாடோ ஹெர்டிலா, ஆஸ்டார்ப், SE) சேகரிக்கப்பட்டு, பின்னர் முதிர்ந்த கொசுக்கள் வெளிவருவதற்காக பக்டார்ம் கூண்டுகளுக்கு (30 செ.மீ × 30 செ.மீ × 30 செ.மீ; மெகாவியூ சயின்ஸ், தைச்சுங், தைவான்) மாற்றப்பட்டன. முதிர்ந்த கொசுக்கள் வெளிவந்த 4-வது நாள் வரை (dpe) அவற்றுக்கு 10% சுக்ரோஸ் கரைசல் தாராளமாக வழங்கப்பட்டது. அந்த நிலையில், விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் கொசுக்களுக்கு பரிசோதனைக்கு சற்று முன்பு உணவு வழங்கப்பட்டது, அல்லது பரிசோதனைக்கு முன்னர் இரவு முழுவதும் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் கொடுத்து பட்டினி போடப்பட்டது. கீழே விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி, பரிசோதனை மேற்கொள்ளப்பட்டது. பறக்கும் குழாய் பரிசோதனைகளுக்காகப் பயன்படுத்தப்பட்ட பெண் கொசுக்கள், 4-6 மணி நேரம் மட்டுமே தண்ணீர் தாராளமாகக் கொடுத்து பட்டினி வைக்கப்பட்டன. அடுத்தடுத்த உயிரியல் சோதனைகளுக்காக இரத்தத்தை உறிஞ்சும் கொசுக்களைத் தயார் செய்ய, 4 dpe பெண் கொசுக்களுக்கு சவ்வுவழி உணவு முறை (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK) மூலம் இரத்த உறைவு நீக்கப்பட்ட செம்மறி ஆட்டு இரத்தம் (Håtunalab, Bro, SE) வழங்கப்பட்டது. பின்னர், முழுமையாக இரத்தச் சிவப்பணுக்கள் நிரம்பிய பெண் கொசுக்கள் தனித்தனி கூண்டுகளுக்கு மாற்றப்பட்டு, கீழே விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி நேரடியாக உணவு வழங்கப்பட்டது, அல்லது கீழே விவரிக்கப்பட்டுள்ள பரிசோதனைகளுக்கு 3 நாட்களுக்கு முன்பு 10% சுக்ரோஸ் தாராளமாக வழங்கப்பட்டது. பிந்தைய பெண் கொசுக்கள் பறக்கும் குழாய் உயிரியல் சோதனைகளுக்காகப் பயன்படுத்தப்பட்டு ஆய்வகத்திற்கு மாற்றப்பட்டன, பின்னர் பரிசோதனைக்கு முன்பு 4-6 மணி நேரம் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் தாராளமாகக் கொடுக்கப்பட்டது.
முதிர்ந்த அனோபிலஸ் அரேபிய பெண் கொசுக்களில் சிறுநீர் மற்றும் யூரியா நுகர்வை அளவிட உணவூட்டச் சோதனைகள் பயன்படுத்தப்பட்டன. விருந்தோம்பியைத் தேடும் மற்றும் இரத்தம் அருந்திய பெண் கொசுக்களுக்கு, 1% நீர்த்த புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீர், பல்வேறு செறிவுகளில் யூரியா, மற்றும் இரண்டு கட்டுப்பாட்டு உணவுகள் (10% சுக்ரோஸ் மற்றும் நீர்) அடங்கிய உணவு 48 மணி நேரத்திற்கு வழங்கப்பட்டது. கூடுதலாக, உணவு நிறமி (1 mg ml-1 சைலீன் சயனைடு FF; CAS 2650-17-1; சிக்மா-ஆல்ட்ரிச், ஸ்டாக்ஹோம், SE) உணவில் சேர்க்கப்பட்டு, 250 µl மைக்ரோசென்ட்ரிஃபியூஜ் குழாய்களில் (ஆக்சிஜென் சயின்டிஃபிக், யூனியன் சிட்டி, CA, US; படம் 1A) 4 × 4 அமைப்பில் விளிம்பு வரை (~300 µl) நிரப்பப்பட்டது. கொசுக்களுக்கு இடையேயான போட்டியையும், சாய நிறத்தின் சாத்தியமான விளைவுகளையும் தவிர்க்க, 10 கொசுக்களை ஒரு பெரிய பெட்ரி தட்டில் (12 செ.மீ விட்டம் மற்றும் 6 செ.மீ உயரம்; செமடெனி, ஓஸ்டர்முண்டிகன், CH; படம் 1A) வைக்கவும். 25 ± 2 °C வெப்பநிலை மற்றும் 65 ± 5% ஒப்பு ஈரப்பதத்தில் முழுமையான இருள். இந்தச் சோதனைகள் 5 முதல் 10 முறை மீண்டும் செய்யப்பட்டன. உணவுக்குப் பிறகு, கொசுக்கள் மேலதிக பகுப்பாய்வுக்காக -20 °C வெப்பநிலையில் வைக்கப்பட்டன.
ஓம்புயிரி மற்றும் இரத்தம் உறிஞ்சும் பெண் அனோபிலிஸ் அரேபியனஸ் கொசுக்களால் உறிஞ்சப்பட்ட மாட்டுச் சிறுநீர் மற்றும் யூரியாவைக் கவனியுங்கள். உணவு சோதனை (A)-இல், பெண் கொசுக்களுக்கு புதிய மற்றும் பழைய மாட்டுச் சிறுநீர், பல்வேறு செறிவுகளில் யூரியா, சுக்ரோஸ் (10%), மற்றும் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் (H2O) ஆகியவற்றைக் கொண்ட உணவு வழங்கப்பட்டது. ஓம்புயிரியைத் தேடும் (B) மற்றும் இரத்தம் அருந்திய (C) பெண் கொசுக்கள், சோதிக்கப்பட்ட மற்ற எந்த உணவையும் விட அதிக சுக்ரோஸை உறிஞ்சின. ஓம்புயிரியைத் தேடும் பெண் கொசுக்கள் 168 மணி நேர மாட்டுச் சிறுநீரை (B) விட 72 மணி நேர மாட்டுச் சிறுநீரைக் குறைவாக உறிஞ்சின என்பதைக் கவனிக்கவும். சிறுநீரின் சராசரி மொத்த நைட்ரஜன் உள்ளடக்கம் (± திட்ட விலகல்) உட்படத்தில் குறிப்பிடப்பட்டுள்ளது. ஓம்புயிரியைத் தேடும் (D, F) மற்றும் இரத்தம் உறிஞ்சும் (E, G) பெண் கொசுக்கள், கொடுக்கப்படும் அளவைப் பொறுத்து யூரியாவை எடுத்துக்கொள்கின்றன. வெவ்வேறு எழுத்துப் பெயர்களைக் கொண்ட சராசரி உள்ளிழுக்கப்பட்ட அளவுகள் (D, E) ஒன்றுக்கொன்று குறிப்பிடத்தக்க அளவில் வேறுபட்டிருந்தன (டூக்கியின் பிந்தைய பகுப்பாய்வைப் பயன்படுத்தி ஒருவழி ANOVA; p < 0.05). பிழைப் பட்டைகள் சராசரியின் திட்டப் பிழையைக் குறிக்கின்றன. (BE). நேரான புள்ளிக் கோடு மடக்கை-நேரியல் பின்னடைவுக் கோட்டை (F, G) குறிக்கிறது.
உறிஞ்சப்பட்ட உணவை வெளியிட, கொசுக்கள் ஒவ்வொன்றாக 230 µl காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் கொண்ட 1.5 ml மைக்ரோசென்ட்ரிஃபியூஜ் குழாய்களில் இடப்பட்டன. பின்னர், ஒருமுறை பயன்படுத்தக்கூடிய உலக்கை மற்றும் கம்பியில்லா மோட்டார் (VWR International, Lund, SE) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி திசுக்கள் சிதைக்கப்பட்டன. அதனைத் தொடர்ந்து, 10 நிமிடங்களுக்கு 10 krpm வேகத்தில் மையவிலக்கு செய்யப்பட்டது. மேல்தேங்கிய திரவம் (200 µl) ஒரு 96-குழி மைக்ரோபிளேட்டிற்கு (Sigma-Aldrich) மாற்றப்பட்டது. மேலும், நிறமாலைமானி அடிப்படையிலான மைக்ரோபிளேட் ரீடரைப் (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) பயன்படுத்தி உறிஞ்சுதிறன் (λ620 nm) தீர்மானிக்கப்பட்டது. மாற்றாக, கொசுக்கள் 1 ml காய்ச்சி வடிகட்டிய நீரில் அரைக்கப்பட்டு, அதில் இருந்து 900 µl நிறமாலைமானி பகுப்பாய்விற்காக (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE) ஒரு குவெட்டிற்கு மாற்றப்பட்டது. உணவு உட்கொள்ளலை அளவிட, தொடர் நீர்த்தல் மூலம் ஒரு தரநிலை வளைவு தயாரிக்கப்பட்டது. 0.2 µl முதல் 2.4 µl வரையிலான 1 mg ml-1 சைலீன் சயனைடு. பின்னர், ஒவ்வொரு கொசுவும் உட்கொண்ட உணவின் அளவைத் தீர்மானிக்க, அறியப்பட்ட சாயச் செறிவுகளின் ஒளியியல் அடர்த்தி பயன்படுத்தப்பட்டது.
கன அளவுத் தரவுகள் ஒருவழி மாறுபாட்டுப் பகுப்பாய்வு (ANOVA) மற்றும் அதனைத் தொடர்ந்து டக்கிஸ் பிந்தைய ஜோடி ஒப்பீடுகளைப் பயன்படுத்திப் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). நேரியல் பின்னடைவுப் பகுப்பாய்வுகள், செறிவைச் சார்ந்த யூரியா உட்கொள்ளலை விவரித்து, விருந்தோம்பியை நாடும் மற்றும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் கொசுக்களுக்கு இடையேயான எதிர்வினைகளை ஒப்பிட்டன (GraphPad Prism v8.0.0 for Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
ஒவ்வொரு வயதுக் குழுவிலிருந்தும் சுமார் 20 µl சிறுநீர் மாதிரிகள், குரோமோசார்ப்® W/AW (10 mg 80/100 மெஷ், சிக்மா ஆல்ட்ரிச்) மீது பிணைக்கப்பட்டு, தகர உறைகளில் (8 மிமீ × 5 மிமீ) அடைக்கப்பட்டன. உற்பத்தியாளரின் நெறிமுறையின்படி, புதிய மற்றும் பழைய சிறுநீரில் உள்ள நைட்ரஜன் உள்ளடக்கத்தைக் கண்டறிய, அந்த உறைகள் ஒரு CHNS/O பகுப்பாய்வுக் கருவியின் (ஃப்ளாஷ் 2000, தெர்மோ ஃபிஷர் சயின்டிஃபிக், வால்டாம், MA, US) எரிப்பு அறைக்குள் செருகப்பட்டன. ஒரு தரநிலையாகப் பயன்படுத்தப்பட்ட அறியப்பட்ட யூரியா செறிவுகளின் அடிப்படையில் மொத்த நைட்ரஜன் (கி N லி-1) அளவிடப்பட்டது.
ஓம்புயிரைத் தேடும் மற்றும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் பெண் கொசுக்களின் உயிர்வாழ்வில் உணவின் விளைவை மதிப்பிடுவதற்காக, கொசுக்கள் ஒவ்வொன்றும் பெரிய பெட்ரி தட்டுகளில் (12 செ.மீ விட்டம் மற்றும் 6 செ.மீ உயரம்; செமடெனி) வைக்கப்பட்டன. காற்றோட்டம் மற்றும் உணவு விநியோகத்திற்காக, மூடியில் வலைக்கண்ணியால் மூடப்பட்ட ஒரு துளை (3 செ.மீ விட்டம்) இருந்தது. 4 dpe-க்கு (உணவுத் தொற்றுக்குப் பிறகு 4 நாட்கள்) உடனடியாக உணவுகள் வழங்கப்பட்டன. அவற்றில் 1% நீர்த்த புதிய மற்றும் பதப்படுத்தப்பட்ட பசுவின் சிறுநீர், யூரியாவின் நான்கு செறிவுகள், மற்றும் இரண்டு கட்டுப்பாடுகள், 10% சுக்ரோஸ் மற்றும் நீர் ஆகியவை அடங்கும். ஒவ்வொரு உணவும் ஒரு பல் டம்பொனில் (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) பிப்பெட் செய்யப்பட்டது. அது 5 மில்லி சிரஞ்சில் (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) செருகப்பட்டு, பிளஞ்சர் அகற்றப்பட்டு, ஒரு பெட்ரி தட்டின் மேல் வைக்கப்பட்டது (படம் 1A). உங்கள் உணவை ஒவ்வொரு நாளும் மாற்றவும். மேலே விவரிக்கப்பட்டபடி ஆய்வகத்தைப் பராமரிக்கவும். உயிர் பிழைத்த கொசுக்கள் ஒரு நாளைக்கு இரண்டு முறை எண்ணப்பட்டன, அதே நேரத்தில் கடைசி கொசு இறக்கும் வரை இறந்த கொசுக்கள் அகற்றப்பட்டன (n = 40). பல்வேறு உணவுகளை உட்கொண்ட கொசுக்களின் உயிர்வாழ்வானது, உணவுகளுக்கு இடையேயான உயிர்வாழ்வுப் பரவல் ஒப்பீடுகளை ஒப்பிடுவதற்காக, காப்லான்-மேயர் உயிர்வாழ்வு வளைவுகள் மற்றும் லாக்-ரேங்க் சோதனைகளைப் பயன்படுத்தி புள்ளிவிவர ரீதியாகப் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
அட்டிசானோ மற்றும் குழுவினரின் [17] அடிப்படையில் உருவாக்கப்பட்ட ஒரு தனிப்பயன் கொசு பறக்கும் இயந்திரம், முன் மற்றும் பின் பலகைகள் இல்லாத 5 மிமீ தடிமன் கொண்ட தெளிவான அக்ரிலிக் பலகைகளால் (10 செமீ அகலம் x 10 செமீ நீளம் x 10 செமீ உயரம்) ஆனது (படம் 3: மேலே). 9 செமீ இடைவெளியில் உள்ள ஒரு ஜோடி நியோடைமியம் காந்தங்களுக்கு இடையில் தொங்கவிடப்பட்ட ஒரு பூச்சி ஊசியுடன் முனைகள் ஒட்டப்பட்ட, ஒரு வாயு நிறப்பிரிகை நெடுவரிசையால் (0.25 மிமீ உள்விட்டம்; 7.5 செமீ நீளம்) செய்யப்பட்ட ஒரு செங்குத்துக் குழாயுடன் கூடிய ஒரு சுழல் அமைப்பு. அதே பொருளால் செய்யப்பட்ட ஒரு கிடைமட்டக் குழாய் (6.5 செமீ நீளம்), செங்குத்துக் குழாயை இரண்டாகப் பிரித்து, ஒரு பிணைக்கப்பட்ட கரத்தையும், ஒளியைத் தடுக்கும் சமிக்ஞையாக ஒரு சிறிய அலுமினியத் தகடு துண்டைக் கொண்டு செல்லும் ஒரு கரத்தையும் உருவாக்கியது.
24 மணி நேரம் பட்டினி கிடந்த பெண் கொசுக்களுக்கு, கட்டுப்படுத்துவதற்கு 30 நிமிடங்களுக்கு முன்பு மேற்கண்ட உணவு வழங்கப்பட்டது. முழுமையாக உணவூட்டப்பட்ட பெண் கொசுக்கள் பின்னர் தனித்தனியாக 2-3 நிமிடங்களுக்கு பனிக்கட்டியில் மயக்கமடையச் செய்யப்பட்டு, தேன்மெழுகு (ஜோயல் ஸ்வென்சன்ஸ் வாக்ஸ்ஃபேப்ரிக் ஏபி, முன்கா லுங்பி, எஸ்இ) கொண்டு பூச்சி ஊசிகளில் இணைக்கப்பட்டு, பின்னர் கிடைமட்டக் குழாய்களின் கைகளில் கட்டப்பட்டன. பறக்கும் இயந்திரம். ஒவ்வொரு பறத்தலின் சுழற்சிகளும் பிரத்யேகமாக உருவாக்கப்பட்ட தரவுப் பதிவி மூலம் பதிவு செய்யப்பட்டு, பின்னர் PC-Lab 2000™ மென்பொருளைப் (v4.01; வெல்லேமன், காவெரே, பிஇ) பயன்படுத்தி சேமிக்கப்பட்டு காட்சிப்படுத்தப்பட்டன. பறக்கும் இயந்திரம், காலநிலை கட்டுப்படுத்தப்பட்ட அறையில் (12 மணிநேரம்:12 மணிநேரம், ஒளி: இருள், 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH) வைக்கப்பட்டது.
பறக்கும் செயல்பாட்டின் போக்கைக் காட்சிப்படுத்த, 24 மணி நேரக் காலப்பகுதியில், ஒரு மணி நேரத்திற்கு பறந்த மொத்த தூரமும் (மீ) மற்றும் தொடர்ச்சியான பறக்கும் செயல்பாடுகளின் மொத்த எண்ணிக்கையும் கணக்கிடப்பட்டன. கூடுதலாக, தனிப்பட்ட பெண் உயிரிகள் பறந்த சராசரி தூரங்கள், சிகிச்சைகளுக்கு இடையே ஒப்பிடப்பட்டு, ஒருவழி ANOVA மற்றும் டக்கிஸ் போஸ்ட் ஹாக் பகுப்பாய்வு (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன; இதில் சராசரி தூரம் ஒரு சார்பு மாறியாகவும், சிகிச்சை ஒரு சுயாதீன காரணியாகவும் கருதப்பட்டது. மேலும், சுற்றுகளின் சராசரி எண்ணிக்கை 10 நிமிட இடைவெளிகளில் கணக்கிடப்படுகிறது.
An.arabiensis-இன் இனப்பெருக்க செயல்திறன் மீது உணவின் விளைவை மதிப்பிடுவதற்காக, இரத்தம் சேகரிக்கப்பட்ட பிறகு ஆறு பெண் தவளைகள் (4 dpe) நேரடியாக பக்டார்ம் கூண்டுகளுக்கு (30 செ.மீ × 30 செ.மீ × 30 செ.மீ) மாற்றப்பட்டு, பின்னர் மேலே விவரிக்கப்பட்டபடி 48 மணி நேரத்திற்கு சோதனை உணவு வழங்கப்பட்டது. அதன் பிறகு உணவுகள் அகற்றப்பட்டு, மூன்றாவது நாளில் 20 மிலி காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் நிரப்பப்பட்ட முட்டையிடும் கோப்பைகள் (30 மிலி; நோலாடோ ஹெர்டிலா) 48 மணி நேரத்திற்கு வழங்கப்பட்டன, அவை ஒவ்வொரு 24 மணி நேரத்திற்கும் மாற்றப்பட்டன. ஒவ்வொரு உணவு முறையையும் 20-50 முறை மீண்டும் செய்யவும். ஒவ்வொரு சோதனைக் கூண்டிலும் முட்டைகள் எண்ணப்பட்டு பதிவு செய்யப்பட்டன. லெய்கா கேமரா (DFC) 320 R2 பொருத்தப்பட்ட டயலக்ஸ்-20 நுண்ணோக்கியைப் (DM1000; எர்ன்ஸ்ட் லீட்ஸ் வெட்ஸ்லர், வெட்ஸ்லர், DE) பயன்படுத்தி, தனிப்பட்ட முட்டைகளின் சராசரி அளவு மற்றும் நீள மாறுபாட்டை மதிப்பிடுவதற்கு முட்டைகளின் துணை மாதிரிகள் (ஒவ்வொரு உணவுக்கும் n ≥ 200) பயன்படுத்தப்பட்டன; லைக்கா மைக்ரோசிஸ்டம்ஸ் லிமிடெட், DE). மீதமுள்ள முட்டைகள், சீரான தட்பவெப்பநிலை கொண்ட அறையில், வழக்கமான வளர்ப்புச் சூழலில் 24 மணி நேரம் வைக்கப்பட்டன. மேலும், புதிதாக வெளிவந்த முதல் நிலை லார்வாக்களின் ஒரு துணை மாதிரியானது (ஒவ்வொரு உணவுக்கும் n ≥ 200), மேலே விவரிக்கப்பட்டபடி அளவிடப்பட்டது. முட்டைகளின் எண்ணிக்கை, முட்டைகள் மற்றும் லார்வாக்களின் அளவு ஆகியவை, ஒருவழி ANOVA மற்றும் டக்கிஸ் போஸ்ட் ஹாக் பகுப்பாய்வைப் (JMP Pro, v14.0.0, SAS இன்ஸ்டிடியூட் இன்க்.) பயன்படுத்தி, வெவ்வேறு சிகிச்சைகளுக்கு இடையே ஒப்பிடப்பட்டன.
ஜெபு மாடுகள் மற்றும் ஆர்சி இனத்தைச் சேர்ந்த மாடுகளிடமிருந்து சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரிகளிலிருந்து, புதிய (மாதிரி எடுத்த 1 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு), 24 மணி நேரம், 72 மணி நேரம் மற்றும் 168 மணி நேரம் பழக்கப்பட்ட சிறுநீரின் மேல்பரப்பு ஆவியாகும் சேர்மங்கள் சேகரிக்கப்பட்டன. வசதிக்காக, மாடுகள் கொட்டகையில் இருந்தபோதே அதிகாலையில் சிறுநீர் மாதிரிகள் சேகரிக்கப்பட்டன. 10 மாடுகளிடமிருந்து சிறுநீர் மாதிரிகள் சேகரிக்கப்பட்டு, ஒவ்வொரு மாதிரியிலிருந்தும் 100-200 மிலி, மூடியுடன் கூடிய 3 லிட்டர் பாலிஅமைடு கொள்ளளவுள்ள வினைல் குளோரைடு பிளாஸ்டிக் கொள்கலன்களில், தனித்தனி பாலிஅமைடு பேக்கிங் பைகளுக்கு (டாப்பிட்ஸ் கோஃப்ரெஸ்கோ, ஃபிரிஷ்ஹால்டெப்ரோடக்டே ஜிஎம்பிஹெச் அண்ட் கோ, மிண்டன், டிஇ) மாற்றப்பட்டன. ஒவ்வொரு மாட்டுச் சிறுநீர் மாதிரியிலிருந்தும் மேல்பரப்பு ஆவியாகும் சேர்மங்கள் நேரடியாகவோ (புதிதாக) அல்லது அறை வெப்பநிலையில் 24 மணி நேரம், 72 மணி நேரம் மற்றும் 168 மணி நேரம் பழக்கப்பட்ட பிறகோ சேகரிக்கப்பட்டன, அதாவது ஒவ்வொரு சிறுநீர் மாதிரியும் ஒவ்வொரு வயதுக் குழுவிற்கும் பிரதிநிதியாக இருந்தது.
ஹெட்ஸ்பேஸ் ஆவியாகும் பொருட்களைச் சேகரிப்பதற்காக, ஒரு டயாஃப்ரம் வெற்றிட பம்பைப் (KNF Neuberger, Freiburg, DE) பயன்படுத்தி, செயல்படுத்தப்பட்ட கார்பனால் வடிகட்டப்பட்ட வாயு ஓட்டத்தை (100 மிலி/நிமிடம்) ஒரு பாலிஅமைடு பை வழியாக உறிஞ்சுதல் பத்திக்கு 2.5 மணி நேரத்திற்கு ஒரு மூடிய-சுற்று அமைப்பு பயன்படுத்தப்பட்டது. ஒரு கட்டுப்பாடாக, ஒரு வெற்று பாலிஅமைடு பையிலிருந்து ஹெட்ஸ்பேஸ் சேகரிப்பு செய்யப்பட்டது. உறிஞ்சுதல் பத்தியானது, கண்ணாடி கம்பளி அடைப்பான்களுக்கு இடையில் 35 மி.கி போரபாக் Q (50/80 மெஷ்; Waters Associates, Milford, MA, US) கொண்ட டெஃப்ளான் குழாயால் (5.5 செ.மீ x 3 மி.மீ உள்விட்டம்) செய்யப்பட்டது. பயன்படுத்துவதற்கு முன்பு, பத்தியானது 1 மிலி மறுவடிகட்டப்பட்ட n-ஹெக்ஸேன் (Merck, Darmstadt, DE) மற்றும் 1 மிலி பென்டேன் (99.0% தூய கரைப்பான் GC தரம், சிக்மா ஆல்ட்ரிச்) கொண்டு சுத்தப்படுத்தப்பட்டது. உறிஞ்சப்பட்ட ஆவியாகும் பொருட்கள் 400 μl பென்டேன் கொண்டு வெளியேற்றப்பட்டன. ஹெட்ஸ்பேஸ் சேகரிப்புகள் ஒன்றாகச் சேர்க்கப்பட்டு பின்னர் மேலதிக பகுப்பாய்விற்காகப் பயன்படுத்தப்படும் வரை -20°C வெப்பநிலையில் சேமிக்கப்பட்டது.
புதிய, 24-மணிநேரம், 72-மணிநேரம் மற்றும் 168-மணிநேரம் பழமையான சிறுநீரிலிருந்து சேகரிக்கப்பட்ட ஹெட்ஸ்பேஸ் ஆவியாகும் சாறுகள், அரபிடோப்சிஸ் கொசுக்களின் ஆவியாகும் சாறுகளுக்காக ஒரு நேரான கண்ணாடி குழாய் ஓல்ஃபாக்டோமீட்டரைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன [18]. இந்த சோதனைகள் அரபிடோப்சிஸின் வீடு தேடும் செயல்பாட்டின் உச்ச காலமான ZT 13-15 இல் நடத்தப்பட்டன. அரப் [19]. ஒரு கண்ணாடி குழாய் ஓல்ஃபாக்டோமீட்டர் (80 செமீ × 9.5 செமீ உள் விட்டம்) மேலிருந்து 3 ± 1 lx சிவப்பு ஒளியால் ஒளிரூட்டப்பட்டது. கரி வடிகட்டப்பட்ட மற்றும் ஈரப்பதமாக்கப்பட்ட காற்று ஓட்டம் (25 ± 2 °C, 65 ± 2% ஒப்பு ஈரப்பதம்) 30 செமீ வி-1 வேகத்தில் உயிரியல் சோதனை வழியாகச் சென்றது. காற்று தொடர்ச்சியான துருப்பிடிக்காத எஃகு வலைத் திரைகள் வழியாகச் செலுத்தப்பட்டு, ஒரு லேமினார் ஓட்டம் மற்றும் ஒரு சீரான புகை அமைப்பை உருவாக்குகிறது. பல் டம்பன் விநியோகிப்பான் (4 செமீ × 1 செமீ; L:D; DAB டென்டல் AB), ஓல்ஃபாக்டோமீட்டரின் காற்று வீசும் திசையில் உள்ள முனையில் 5 செ.மீ சுருளில் தொங்கவிடப்பட்டு, ஒவ்வொரு 5 நிமிடங்களுக்கும் தூண்டிகள் மாற்றப்பட்டன. பகுப்பாய்விற்காக, 1:10 என்ற விகிதத்தில் நீர்க்கப்பட்ட ஒவ்வொரு ஹெட்ஸ்பேஸ் சாற்றிலிருந்தும் 10 μl தூண்டியாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. சம அளவு பென்டேன் கட்டுப்பாடாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. பரிசோதனை தொடங்குவதற்கு 2-3 மணி நேரத்திற்கு முன்பு, தனித்தனி ஓம்புயிரைத் தேடும் அல்லது இரத்தம் உறிஞ்சும் கொசுக்கள் தனித்தனி விடுவிப்புக் கூண்டுகளில் வைக்கப்பட்டன. விடுவிப்புக் கூண்டு ஓல்ஃபாக்டோமீட்டரின் காற்று வீசும் திசைக்கு எதிர்த்திசையில் வைக்கப்பட்டது, மேலும் கொசுக்கள் 1 நிமிடம் சூழலுக்குப் பழக அனுமதிக்கப்பட்டன, பின்னர் கூண்டின் பட்டாம்பூச்சி வால்வு விடுவிக்கப்பட்டது. விடுவிக்கப்பட்ட 5 நிமிடங்களுக்குள் மூலத்துடன் தொடர்பு கொண்ட கொசுக்களின் விகிதமாக, சிகிச்சை அல்லது கட்டுப்பாட்டின் மீதான ஈர்ப்பு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது. ஒவ்வொரு ஹெட்ஸ்பேஸ் ஆவியாகும் சாறும் கட்டுப்பாடும் குறைந்தது 30 முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்பட்டன, மேலும் எந்தவொரு நாளின் விளைவுகளையும் தவிர்ப்பதற்காக, ஒவ்வொரு பரிசோதனை நாளிலும் சம எண்ணிக்கையிலான சிகிச்சைகள் மற்றும் கட்டுப்பாடுகள் சோதிக்கப்பட்டன. ஓம்புயிரி மற்றும் பிறவற்றிலிருந்து பதில்களைத் தேடுங்கள். இரத்தத்தால் ஊட்டப்பட்ட அன்ஸ்.அரபிக் மற்றும் ஹெட்ஸ்பேஸ் தொகுப்புகள், பெயரளவு லாஜிஸ்டிக் பின்னடைவைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன, அதனைத் தொடர்ந்து ஒற்றை விகிதங்களுக்கான ஜோடிவாரியான ஒப்பீடுகள் செய்யப்பட்டன (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
ஆன்-இன் முட்டையிடும் எதிர்வினை. புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீரிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட ஹெட்ஸ்பேஸ் சாறுகள், பக்டார்ம் கூண்டுகளில் (30 செ.மீ × 30 செ.மீ × 30 செ.மீ; மெகா வியூ சயின்ஸ்) பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. 20 மிலி காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் நிரப்பப்பட்ட பிளாஸ்டிக் கோப்பைகள் (30 மிலி; நோலாடோ ஹெர்டிலா) முட்டையிடும் தளமாகச் செயல்பட்டு, கூண்டின் எதிர் மூலைகளில் 24 செ.மீ இடைவெளியில் வைக்கப்பட்டன. சிகிச்சை கோப்பைகள், ஒவ்வொரு ஹெட்ஸ்பேஸ் சாற்றிலிருந்தும் 10 மைக்ரோலிட்டர் எடுத்து, 1:10 என்ற நீர்த்தல் விகிதத்தில் சரிசெய்யப்பட்டன. கட்டுப்பாட்டுக் கோப்பையைச் சரிசெய்ய சம அளவு பென்டேன் பயன்படுத்தப்பட்டது. நிலை விளைவுகளைக் கட்டுப்படுத்த, ஒவ்வொரு சோதனைக்கும் இடையில் சிகிச்சை மற்றும் கட்டுப்பாட்டுக் கோப்பைகள் பரிமாறப்பட்டன. இரத்தம் அருந்திய பத்து பெண் பாம்புகள் ZT 9-11 நேரத்தில் சோதனைக் கூண்டுகளில் விடப்பட்டன, மேலும் 24 மணி நேரம் கழித்து கோப்பைகளில் உள்ள முட்டைகள் எண்ணப்பட்டன. முட்டையிடும் குறியீட்டைக் கணக்கிடுவதற்கான சூத்திரம்: (சிகிச்சைக் கோப்பையில் இடப்பட்ட முட்டைகளின் எண்ணிக்கை – கட்டுப்பாட்டுக் கோப்பையில் இடப்பட்ட முட்டைகளின் எண்ணிக்கை) / (இடப்பட்ட மொத்த முட்டைகளின் எண்ணிக்கை). ஒவ்வொரு சிகிச்சையும் மீண்டும் செய்யப்பட்டது. 8 முறை.
பெண் An.arabiensis இன் வாயு நிறமாலையியல் மற்றும் எலக்ட்ரான் ஆண்டெனா வடிவ கண்டறிதல் (GC-EAD) பகுப்பாய்வு முன்பு விவரிக்கப்பட்டபடி [20] செய்யப்பட்டது. சுருக்கமாக, புதிய ஹெட்ஸ்பேஸ் ஆவியாகும் சாறுகள், HP-5 நெடுவரிசை (30 மீ × 0.25 மிமீ உள் விட்டம், 0.25 μm படல தடிமன், Agilent Technologies) பொருத்தப்பட்ட Agilent Technologies 6890 GC (சாண்டா கிளாரா, CA, US) ஐப் பயன்படுத்தி பிரிக்கப்பட்டன. மற்றும் பழைய சிறுநீர். ஹைட்ரஜன், 45 செ.மீ/வி சராசரி நேரியல் பாய்வு விகிதத்துடன் நகரும் கட்டமாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. ஒவ்வொரு மாதிரியும் (2 μl), 225 °C உள்ளீட்டு வெப்பநிலையுடன், பிளவுபடாத முறையில் 30 வினாடிகளுக்கு உட்செலுத்தப்பட்டது. GC அடுப்பின் வெப்பநிலை, 10 °C/நிமிடம் என்ற விகிதத்தில் 35 °C (3 நிமிட நிறுத்தம்) முதல் 300 °C (10 நிமிட நிறுத்தம்) வரை நிரல்படுத்தப்பட்டது. GC வெளியேற்றப் பிரிப்பானில், 4 psi நைட்ரஜன் சேர்க்கப்பட்டு, சுடர் அயனியாக்கக் கண்டறிவானுக்கும் EAD-க்கும் இடையில் உள்ள Gerstel 3D/2 குறைந்த இறந்த கன அளவு குறுக்குவழியில் (Gerstel, Mülheim, DE) 1:1 என்ற விகிதத்தில் பிரிக்கப்பட்டது. EAD-க்கான GC வெளியேற்ற நுண்குழாய், GC அடுப்பு வெப்பநிலையுடன் கூடுதலாக 5 °C-ஐப் பின்தொடரும் Gerstel ODP-2 பரிமாற்றக் குழாய் வழியாக ஒரு கண்ணாடிக் குழாய்க்குள் (10 செ.மீ × 8 மி.மீ) செலுத்தப்பட்டது. அங்கு அது கார்பன் வடிகட்டப்பட்ட, ஈரப்பதமூட்டப்பட்ட காற்றுடன் (1.5 லி) கலக்கப்பட்டது. நிமிடம்−1). குழாயின் வெளியேறும் வாயிலிருந்து 0.5 செ.மீ தொலைவில் ஆன்டெனா வைக்கப்பட்டது. ஒவ்வொரு கொசுவும் ஒரு பிரதியாகக் கருதப்பட்டது, மேலும் விருந்தோம்பியைத் தேடும் கொசுக்களுக்கு, ஒவ்வொரு வயதுடைய சிறுநீர் மாதிரிகளிலும் குறைந்தது மூன்று பிரதிகள் செய்யப்பட்டன.
புதிய மற்றும் பழைய மாட்டு சிறுநீரின் ஹெட்ஸ்பேஸ் சேகரிப்புகளில் உள்ள உயிரியல் செயல்பாட்டுக் கலவைகளை அடையாளம் காண, GC-EAD பகுப்பாய்வில் ஆன்டென்னல் பதில்களைத் தூண்டுவதற்காக, 70 eV இல் எலக்ட்ரான் தாக்க அயனியாக்க முறையில் இயங்கும் ஒரு ஒருங்கிணைந்த GC மற்றும் நிறை நிறமாலைமானி (GC-MS; 6890 GC மற்றும் 5975 MS; Agilent Technologies) பயன்படுத்தப்பட்டது. அந்த GC கருவியானது, HP-5MS UI-பூசப்பட்ட இணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா நுண்குழாய் நிரலுடன் (60 மீ × 0.25 மிமீ உள் விட்டம், 0.25 μm படலத் தடிமன்) பொருத்தப்பட்டிருந்தது. இதில் ஹீலியம் நகரும் கட்டமாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது, மேலும் சராசரி நேரியல் பாய்வு விகிதம் 35 செமீ வி-1 ஆக இருந்தது. GC-EAD பகுப்பாய்விற்குப் பயன்படுத்தப்பட்ட அதே உட்செலுத்தி அமைப்புகள் மற்றும் அடுப்பு வெப்பநிலையைப் பயன்படுத்தி 2 μl மாதிரி உட்செலுத்தப்பட்டது. தனிப்பயன் நூலகம் மற்றும் NIST14 நூலகத்துடன் (Agilent) ஒப்பிட்டு, அவற்றின் தக்கவைப்பு நேரம் (கோவாட் குறியீடு) மற்றும் நிறை நிறமாலைகளின் அடிப்படையில் கலவைகள் அடையாளம் காணப்பட்டன. அடையாளம் காணப்பட்ட கலவைகள், உண்மையான தரநிலைகளை (கூடுதல் கோப்பு 1: அட்டவணை S2) உட்செலுத்துவதன் மூலம் உறுதிப்படுத்தப்பட்டன. அளவீட்டிற்காக, ஹெப்டைல் ​​அசிடேட் (10 ng, 99.8% வேதியியல் தூய்மை, ஆல்ட்ரிச்) ஒரு வெளிப்புறத் தரநிலையாகச் செலுத்தப்பட்டது.
மேலே உள்ள அதே வாசனைமானி மற்றும் நெறிமுறையைப் பயன்படுத்தி, புதிய மற்றும் பழைய சிறுநீரில் அடையாளம் காணப்பட்ட உயிரியல் செயல்பாட்டுக் கூறுகளைக் கொண்ட ஒரு செயற்கை வாசனைக் கலவையின் செயல்திறனை மதிப்பீடு செய்தல். இந்த வாசனைக் கலவையானது, விருந்தோம்பியைத் தேடும் மற்றும் இரத்தம் உறிஞ்சும் அனோசெரஸ் அரேபியன்சிஸ் (Ans. arabiensis) கொசுக்களை ஈர்க்கிறது. செயற்கைக் கலவைகள், புதிய, 24-மணிநேரம், 48-மணிநேரம், 72-மணிநேரம் மற்றும் 168-மணிநேரம் பழமையான சிறுநீரின் கலப்பு ஹெட்ஸ்பேஸ் ஆவியாகும் சாறுகளில் உள்ள சேர்மங்களின் கலவை மற்றும் விகிதாச்சாரங்களைப் பிரதிபலித்தன (படம் 5D-G; கூடுதல் கோப்பு 1: அட்டவணை S2). பகுப்பாய்விற்காக, விருந்தோம்பி மற்றும் இரத்தம் உறிஞ்சும் கொசுக்களுக்கான ஈர்ப்புத்தன்மையை மதிப்பிடுவதற்கு, தோராயமாக 140-2400 ng h-1 வரையிலான ஒட்டுமொத்த வெளியீட்டு விகிதத்தைக் கொண்ட முழுமையான செயற்கைக் கலவையின் 1:100 நீர்த்தலில் இருந்து 10 μl பயன்படுத்தவும். அதன்பிறகு, முழுமையான கலவைகளில் சோதனை செய்யப்படுகிறது, இதில் முழுமையான கலவையிலிருந்து தனிப்பட்ட சேர்மங்களின் கழித்தல் கலவைகள் அகற்றப்படுகின்றன. விருந்தோம்பி மற்றும் இரத்தம் அருந்திய அனோசெரஸ் அரேபியன்சிஸ் (Ans. Arab) கொசுக்களிடமிருந்து பெறப்பட்ட தேடல் எதிர்வினைகள், செயற்கை மற்றும் கழித்தல் கலவைகளுக்கு எதிராக ஆராயப்பட்டன. பெயரளவு லாஜிஸ்டிக் பின்னடைவைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது, அதனைத் தொடர்ந்து ஒற்றை விகிதங்களுக்கான ஜோடிவாரியான ஒப்பீடுகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
மலேரியா கொசுக்களுக்கு மாட்டுச் சிறுநீர் ஒரு விருந்தோம்பி வாழ்விடக் குறிப்பாகச் செயல்படுமா என்பதை மதிப்பிடுவதற்காக, மேலே விவரிக்கப்பட்டபடி சேகரிக்கப்பட்ட புதிய மற்றும் பழைய மாட்டுச் சிறுநீரும், தண்ணீரும் வலை பொருத்தப்பட்ட 3 லிட்டர் வாளிகளில் (100 மிலி) வைக்கப்பட்டு, விருந்தோம்பி இரைப் பொறிகளில் வைக்கப்பட்டன. (BG-HDT பதிப்பு; பயோஜென்ட்ஸ், ரெஜென்ஸ்பர்க், DE). கால்நடைகள் இல்லாத, நிரந்தர இனப்பெருக்க நிலங்கள் மற்றும் கிராமங்களில், கிராம சமூகத்திலிருந்து (சிலே, எத்தியோப்பியா, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) 400 மீ தொலைவில் உள்ள மேய்ச்சல் நிலத்தில், பத்து பொறிகள் 50 மீ இடைவெளியில் வைக்கப்பட்டன. ஒரு விருந்தோம்பியின் இருப்பை உருவகப்படுத்த ஐந்து பொறிகள் சூடுபடுத்தப்பட்டன, அதே நேரத்தில் ஐந்து பொறிகள் சூடுபடுத்தப்படாமல் விடப்பட்டன. ஒவ்வொரு பரிசோதனை இடமும் மொத்தம் ஐந்து இரவுகளுக்கு, இரவில் சுழற்சி முறையில் மாற்றப்பட்டது. வெவ்வேறு வயதுடைய சிறுநீர் இரையிடப்பட்ட பொறிகளில் பிடிபட்ட கொசுக்களின் எண்ணிக்கை, பீட்டா ஈருறுப்புப் பரவலுடன் கூடிய லாஜிஸ்டிக் ரிகிரஷன் (JMP Pro, v14.0.0, SAS இன்ஸ்டிடியூட் இன்க்.) பயன்படுத்தி ஒப்பிடப்பட்டது.
எத்தியோப்பியாவின் ஓரோமியா பிராந்தியத்தில் உள்ள மாக்கி நகருக்கு அருகிலுள்ள, மலேரியா பரவலாக உள்ள ஒரு கிராமத்தில் (8° 11′ 08″ வ, 38° 81′ 70″ கி; படம் 6A). ஆண்டுதோறும் வீடுகளுக்குள் பூச்சிக்கொல்லி தெளிக்கும் பணிக்கு முன்பும், நீண்ட மழைக்காலத்திற்கு மத்தியிலும், ஆகஸ்ட் நடுப்பகுதிக்கும் செப்டம்பர் நடுப்பகுதிக்கும் இடையில் இந்த ஆய்வு நடத்தப்பட்டது. கிராமத்தின் புறநகர்ப் பகுதிகளில் அமைந்துள்ள ஐந்து ஜோடி வீடுகள் (20–50 மீ இடைவெளியில்) இந்த ஆய்விற்காகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன (படம் 6A). வீடுகளைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கான அளவுகோல்கள்: வீட்டிற்குள் விலங்குகள் அனுமதிக்கப்படக்கூடாது; வீட்டிற்குள் சமைக்க (விறகு அல்லது கரி எடுப்பது) அனுமதிக்கப்படக்கூடாது (குறைந்தபட்சம் சோதனைக் காலத்திலாவது); மற்றும் வீடுகளில் அதிகபட்சம் இரண்டு குடியிருப்பாளர்கள் மட்டுமே இருக்க வேண்டும், அவர்கள் பூச்சிக்கொல்லி இல்லாத சூழலில் உறங்க வேண்டும். பதப்படுத்தப்பட்ட கொசுவலையின் கீழ். உலக மருத்துவ சங்கத்தின் ஹெல்சிங்கி பிரகடனத்தால் நிறுவப்பட்ட வழிகாட்டுதல்களுக்கு இணங்க, அடிஸ் அபாபா பல்கலைக்கழகத்தின் இயற்கை அறிவியல் பீடத்தின் (CNS-IRB) நிறுவன ஆராய்ச்சி நெறிமுறைகள் மறுஆய்வு வாரியத்தால் (IRB/022/2016) நெறிமுறை ஒப்புதல் வழங்கப்பட்டுள்ளது. சுகாதார விரிவாக்கப் பணியாளர்களின் உதவியுடன் ஒவ்வொரு குடும்பத் தலைவரிடமிருந்தும் ஒப்புதல் பெறப்பட்டது. இந்த முழு செயல்முறையும் மாவட்ட மற்றும் வார்டு ('கெபெலே') மட்டத்திலான உள்ளூர் நிர்வாகங்களால் அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது. இந்த சோதனை வடிவமைப்பு 2 × 2 லத்தீன் சதுர வடிவமைப்பைப் பின்பற்றியது, இதில் செயற்கைக் கலவைகள் மற்றும் கட்டுப்பாடுகள் முதல் இரவில் ஜோடி வீடுகளுக்கு ஒதுக்கப்பட்டன, மேலும் அடுத்த சோதனை இரவில் வீடுகளுக்கு இடையில் மாற்றப்பட்டன. இந்த செயல்முறை பத்து முறை மீண்டும் செய்யப்பட்டது. கூடுதலாக, தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட வீடுகளில் கொசுக்களின் செயல்பாட்டைக் கண்டறிய, கள சோதனையின் தொடக்கம், நடு மற்றும் முடிவில், ஒரே நேரத்தில் ஐந்து தொடர்ச்சியான இரவுகளுக்கு CDC பொறிகள் இயக்கப்பட்டன.
ஆறு உயிரியல் செயல்பாட்டுக் கலவைகளைக் கொண்ட ஒரு செயற்கைக் கலவையானது ஹெப்டேனில் (97.0% கரைப்பான் GC தரம், சிக்மா ஆல்ட்ரிச்) கரைக்கப்பட்டு, ஒரு பருத்தி திரி விநியோகிப்பானைப் பயன்படுத்தி 140 ng h-1 என்ற அளவில் வெளியிடப்பட்டது [20]. இந்த திரி விநியோகிப்பான், 12 மணி நேர பரிசோதனை முழுவதும் அனைத்துக் கலவைகளையும் நிலையான விகிதங்களில் வெளியிட அனுமதித்தது. ஹெப்டேன் ஒரு கட்டுப்பாட்டு மாதிரியாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. அந்தக் குப்பியானது, நோய் கட்டுப்பாடு மற்றும் தடுப்பு மையங்களின் (CDC) ஒளிப் பொறியின் (ஜான் டபிள்யூ. ஹாக் கம்பெனி, கெய்ன்ஸ்வில், FL, US; படம் 6A) நுழைவாயிலுக்கு அருகில் தொங்கவிடப்பட்டது. பொறிகள் தரையிலிருந்து 0.8 – 1 மீ உயரத்தில், படுக்கையின் கால் பகுதிக்கு அருகில் தொங்கவிடப்பட்டன. ஒரு தன்னார்வலர் பதப்படுத்தப்படாத கொசுவலையின் கீழ் உறங்கினார், மேலும் அவை 18:00 மணி முதல் 06:30 மணி வரை இயக்கப்பட்டன. பாலினம் மற்றும் உடலியல் நிலை (உணவளிக்கப்படாத, உணவளித்த, பகுதி கர்ப்பிணி மற்றும் கர்ப்பிணி [21]) ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் பிடிக்கப்பட்ட கொசுக்கள், பின்னர் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (PCR) பகுப்பாய்வைப் பயன்படுத்தி, உருவவியல் ரீதியாக A. gambiae என அடையாளம் காணப்பட்ட இனத்தை அடையாளம் காண பரிசோதிக்கப்பட்டன. sl. வளாகத்தின் உறுப்பினர்கள் [23]. கள ஆய்வில், இணைக்கப்பட்ட வீடுகளின் பொறி பொறித்தல் ஒரு பெயரளவு லாஜிஸ்டிக் பொருத்த மாதிரியைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது, அங்கு ஈர்ப்பு சார்பு மாறியாகவும், சிகிச்சை (செயற்கை கலவை எதிராக கட்டுப்பாடு) நிலையான விளைவாகவும் இருந்தது (JMP® 14.0. 0. SAS இன்ஸ்டிடியூட் இன்க்.). இங்கே, நிகழ்தகவு விகித சோதனையிலிருந்து χ2 மற்றும் p-மதிப்புகளை நாங்கள் தெரிவிக்கிறோம்.
இது பாதுகாப்பானதா என்பதை மதிப்பிடுக. ஓம்புயிரைத் தேடும் மற்றும் இரத்தம் குடிக்கும் பெண் பூச்சிகளின் உணவுப் பரிசோதனைகளில், மருந்து கொடுக்கப்பட்ட 4 நாட்களுக்குப் பிறகு (dpe), அராபியென்சிஸ் பூச்சியால், அதன் முக்கிய நைட்ரஜன் மூலமான யூரியாவை, நேரடியாக உண்பதன் மூலம் சிறுநீரில் பெற முடிந்தது (படம் 1A). ஓம்புயிரைத் தேடும் மற்றும் இரத்தம் உறிஞ்சும் பெண் பூச்சிகள் இரண்டும், மற்ற எந்த உணவு அல்லது தண்ணீரை விடவும் கணிசமாக அதிக சுக்ரோஸை உறிஞ்சின (முறையே F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 மற்றும் F(5,299) = 56.00, p < 0.0001; படம் 1B,C). மேலும், ஓம்புயிரைத் தேடும் பெண் பூச்சிகள் 168 மணி நேர சிறுநீருடன் ஒப்பிடும்போது 72 மணி நேரத்தில் குறைவாகவே சாப்பிட்டன (படம் 1B). யூரியா அடங்கிய உணவு வழங்கப்பட்டபோது, ​​ஓம்புயிரைத் தேடும் பெண் பூச்சிகள் மற்ற அனைத்து செறிவுகள் மற்றும் தண்ணீருடன் ஒப்பிடும்போது 2.69 mM அளவில் கணிசமாக அதிக அளவு யூரியாவை உறிஞ்சின, அதே சமயம் 10% செறிவிலிருந்து வேறுபடுத்த முடியாத அளவுக்கு குறைவாக இருந்தன. சுக்ரோஸ் (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; படம் 1D). இது இரத்தம் அருந்திய பெண் பூச்சிகளின் எதிர்வினைக்கு முரணாக இருந்தது. அவை பொதுவாக தண்ணீரை விட யூரியா அடங்கிய உணவுகளை கணிசமாக அதிகமாக உறிஞ்சின, இருப்பினும் 10% சுக்ரோஸை விட கணிசமாக குறைவாகவே உறிஞ்சின (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; படம் 1E). மேலும், இரண்டு உடலியல் நிலைகளுக்கு இடையில் ஒப்பிடும்போது, ​​இரத்தம் எடுக்கப்பட்ட பெண் பூச்சிகள், விருந்தோம்பியை நாடும் பெண் பூச்சிகளை விட மிகக் குறைந்த செறிவுகளில் அதிக யூரியாவை உறிஞ்சின, மேலும் இந்தப் பெண் பூச்சிகள் அதிக செறிவுகளில் ஏறக்குறைய சமமான அளவு யூரியாவை உறிஞ்சின (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; படம் 1F, G). யூரியா அடங்கிய உணவில் இருந்து உட்கொள்ளுதல் உகந்த மதிப்புகளைக் கொண்டிருப்பதாகத் தோன்றினாலும் (படம் 1D,E), இரண்டு உடலியல் நிலைகளிலும் உள்ள பெண் பூச்சிகள்... யூரியாவின் செறிவுகளின் முழு வரம்பிலும், மாநிலங்களால் உறிஞ்சப்படும் யூரியாவின் அளவை ஒரு மடக்கை-நேரியல் முறையில் மாற்றியமைக்க முடிந்தது (படம் 1F,G). இதேபோல், கொசுக்கள் உறிஞ்சப்படும் சிறுநீரின் அளவை ஒழுங்குபடுத்துவதன் மூலம் தங்கள் நைட்ரஜன் உட்கொள்ளலைக் கட்டுப்படுத்துவதாகத் தெரிகிறது, ஏனெனில் சிறுநீரில் உள்ள நைட்ரஜனின் அளவு உறிஞ்சப்படும் அளவில் பிரதிபலிக்கிறது (படம் 1B, C மற்றும் B இன்செட்கள்).
ஓம்புயிரைத் தேடும் மற்றும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் கொசுக்களின் உயிர்வாழ்வில் சிறுநீர் மற்றும் யூரியாவின் விளைவுகளை மதிப்பிடுவதற்காக, பெண் கொசுக்களுக்கு நான்கு வெவ்வேறு வயதுடைய (புதிய, இட்ட 24 மணி நேரம், 72 மணி நேரம் மற்றும் 168 மணி நேரத்திற்குப் பிறகான) சிறுநீரும், பல்வேறு யூரியா செறிவுகளும் உணவாகக் கொடுக்கப்பட்டன. மேலும், காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் மற்றும் 10% சுக்ரோஸ் ஆகியவை கட்டுப்பாட்டுக் குழுவாகப் பயன்படுத்தப்பட்டன (படம் 2A). இந்த உயிர்வாழ்வுப் பகுப்பாய்வு, ஓம்புயிரைத் தேடும் பெண் கொசுக்களின் (சிறுநீர்: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; யூரியா: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; படம் 2B, C) மற்றும் இரத்தம் அருந்திய பெண் கொசுக்களின் (சிறுநீர்: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; யூரியா: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001) ஒட்டுமொத்த உயிர்வாழ்வில் உணவுமுறை ஒரு குறிப்பிடத்தக்க விளைவைக் கொண்டிருந்தது என்பதைக் காட்டியது. 0.0001; படம் 2D,E). அனைத்து சோதனைகளிலும், சுக்ரோஸ் உணவை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​சிறுநீர், யூரியா மற்றும் நீர் கலந்த உணவை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகள் கணிசமாகக் குறைந்த உயிர்வாழும் விகிதங்களைக் கொண்டிருந்தன (படம் 2B-E). புதிய மற்றும் பழைய சிறுநீரை உட்கொண்ட விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் பூச்சிகள் வெவ்வேறு உயிர்வாழும் விகிதங்களைக் காட்டின, அவற்றில் 72 மணி நேர பழைய சிறுநீரை உட்கொண்டவை (p = 0.016) மிகக் குறைந்த உயிர்வாழும் நிகழ்தகவைக் கொண்டிருந்தன (படம் 2B). மேலும், 135 mM யூரியாவை உட்கொண்ட விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் பூச்சிகள், நீர் உட்கொண்ட கட்டுப்பாட்டுக் குழுவை விட நீண்ட காலம் உயிர் வாழ்ந்தன (p < 0.04) (படம் 2C). நீருடன் ஒப்பிடும்போது, ​​புதிய சிறுநீர் மற்றும் 24 மணி நேர சிறுநீரை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகள் நீண்ட காலம் உயிர் வாழ்ந்தன (முறையே p = 0.001 மற்றும் p = 0.012; படம் 2D), அதே சமயம் 72 மணி நேர சிறுநீரை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகள், புதிய சிறுநீர் மற்றும் 24 மணி நேர பழைய சிறுநீரை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகளை விட நீண்ட காலம் உயிர் வாழ்ந்தன (முறையே p < 0.0001 மற்றும் p = 0.013; படம் 2D). 135 mM யூரியா கொடுக்கப்பட்டபோது, ​​இரத்தம் அருந்திய பெண் உயிரிகள், யூரியா மற்றும் நீரின் மற்ற அனைத்து செறிவுகளை விடவும் நீண்ட காலம் உயிர் பிழைத்தன (p < 0.013; படம் 2E).
பசுவின் சிறுநீர் மற்றும் யூரியாவை உணவாகக் கொள்ளும் ஓம்புயிரி மற்றும் இரத்த உறிஞ்சும் பெண் அனோபிலிஸ் அராபினிஸ் கொசுக்களின் உயிர்வாழ்தல். உயிரியல் சோதனையில் (A), பெண் கொசுக்களுக்கு புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீர், பல்வேறு செறிவுகளில் உள்ள யூரியா, சுக்ரோஸ் (10%) மற்றும் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் (H2O) ஆகியவை அடங்கிய உணவு வழங்கப்பட்டது. சிறுநீர் (B, D) மற்றும் யூரியா (C, E) ஆகியவற்றை உணவாகக் கொண்ட அனைத்துப் பெண் கொசுக்களும், கட்டுப்பாட்டுக் குழுவான சுக்ரோஸ் மற்றும் நீரையும் உட்கொண்ட கொசுக்களும் இறக்கும் வரை, ஓம்புயிரியைத் தேடும் (B, C) மற்றும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் (D, E) கொசுக்களின் உயிர்வாழ்தல் ஒவ்வொரு 12 மணி நேரத்திற்கும் பதிவு செய்யப்பட்டது.
24 மணி நேர காலப்பகுதியில் பறத்தல் சோதனை மூலம் தீர்மானிக்கப்பட்ட மொத்த தூரம் மற்றும் சுற்றுகளின் எண்ணிக்கை, விருந்தோம்பியைத் தேடும் மற்றும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் கொசுக்களுக்கு இடையில் வேறுபட்டது, அவை ஒட்டுமொத்தமாக குறைந்த பறத்தல் செயல்பாட்டைக் காட்டின (படம் 3). புதிய மற்றும் பழைய சிறுநீர் அல்லது சுக்ரோஸ் மற்றும் தண்ணீரை வழங்கிய விருந்தோம்பியைத் தேடும் கொசுக்கள் தனித்துவமான பறத்தல் முறைகளைக் காட்டின (படம் 3), புதிய சிறுநீரை உட்கொண்ட பெண் கொசுக்கள் விடியற்காலையில் அதிக சுறுசுறுப்பாக இருந்தன, அதேசமயம் 24 மற்றும் 168 மணிநேரம் பழைய சிறுநீரை உட்கொண்டவை வேறுபட்ட பறத்தல் முறைகளைக் காட்டின மற்றும் முதன்மையாக பகல் நேரங்களில் சுறுசுறுப்பாக இருந்தன. சுக்ரோஸ் அல்லது 72 மணிநேர சிறுநீரை வழங்கிய பெண் கொசுக்கள் 24 மணி நேர காலப்பகுதி முழுவதும் செயல்பாட்டைக் காட்டின, அதேசமயம் தண்ணீரை வழங்கிய பெண் கொசுக்கள் இடைப்பட்ட காலத்தில் அதிக சுறுசுறுப்பாக இருந்தன. சுக்ரோஸை உட்கொண்ட கொசுக்கள் நள்ளிரவிலும் அதிகாலையிலும் அதிகபட்ச செயல்பாட்டைக் காட்டின, அதேசமயம் 72 மணிநேரம் பழைய சிறுநீரை உட்கொண்டவை 24 மணி நேரத்தில் செயல்பாட்டில் சீரான சரிவைக் கண்டன (படம் 3).
பசுவின் சிறுநீர் மற்றும் யூரியாவை உணவாகக் கொள்ளும், இரையைத் தேடும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் பெண் அனோபிலிஸ் அராபினிஸ் கொசுக்களின் பறக்கும் செயல்திறன். பறக்கும் ஆலை சோதனையில், புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீர், பல்வேறு செறிவுகளில் உள்ள யூரியா, சுக்ரோஸ் (10%), மற்றும் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் (H2O) ஆகியவற்றை உணவாகக் கொண்ட பெண் கொசுக்கள், கிடைமட்டமாக, தடையின்றி சுழலும் கைகளில் (மேலே) கட்டப்பட்டன. விருந்தோம்பியைத் தேடும் (இடது) மற்றும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் (வலது) பெண் கொசுக்களுக்கு, 24 மணி நேர காலப்பகுதியில் ஒவ்வொரு உணவுக்கும் ஆன மொத்த தூரம் மற்றும் ஒரு மணி நேரத்திற்கு ஆன பறத்தல்களின் எண்ணிக்கை பதிவு செய்யப்பட்டன (அடர்: சாம்பல்; வெளிர்: வெள்ளை). சராசரி தூரம் மற்றும் சராசரி பறத்தல்களின் எண்ணிக்கை ஆகியவை சர்க்காடியன் செயல்பாட்டு வரைபடத்தின் வலதுபுறத்தில் காட்டப்பட்டுள்ளன. பிழைக் கோடுகள் சராசரியின் திட்டப் பிழையைக் குறிக்கின்றன. புள்ளிவிவரப் பகுப்பாய்வுக்கு உரையைப் பார்க்கவும்.
பொதுவாக, விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் கொசுக்களின் ஒட்டுமொத்த பறக்கும் செயல்பாடு, 24 மணி நேர காலப்பகுதியில் பறந்த தூரத்தைப் போன்ற ஒரு வடிவத்தைப் பின்பற்றியது. சராசரி பறக்கும் தூரம் உட்கொண்ட உணவால் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் பாதிக்கப்பட்டது (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), மேலும் 72 மணிநேர சிறுநீரை உட்கொண்ட விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் கொசுக்கள் மற்ற எல்லா உணவுகளையும் விட குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிக தூரம் பறந்தன (p < 0.0001), மற்றும் சுக்ரோஸ் ஊட்டப்பட்ட கொசுக்கள் புதிய (p = 0.022) மற்றும் 24 மணிநேரம் பழமையான சிறுநீரை (p = 0.022) உட்கொண்ட கொசுக்களை விட அதிக தூரம் பறந்தன. சிறுநீர் உணவால் விவரிக்கப்பட்ட பறக்கும் செயல்பாட்டு வடிவத்திற்கு மாறாக, யூரியா ஊட்டப்பட்ட விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் கொசுக்கள் 24 மணி நேர காலப்பகுதியில் தொடர்ச்சியான பறக்கும் செயல்பாட்டைக் காட்டின, இது இருண்ட கட்டத்தின் இரண்டாம் பாதியில் உச்சத்தை அடைந்தது (படம் 3). செயல்பாட்டு வடிவங்கள் ஒரே மாதிரியாக இருந்தபோதிலும், யூரியா ஊட்டப்பட்ட விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் கொசுக்கள் உறிஞ்சப்பட்ட செறிவைப் பொறுத்து சராசரி பறக்கும் தூரத்தை குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகரித்தன (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001). 138) = 1310.91, p < 0.0001). தண்ணீர் அல்லது சுக்ரோஸ் கொடுக்கப்பட்ட பெண் பூச்சிகளை விட, எந்தச் செறிவில் யூரியா கொடுக்கப்பட்டாலும், விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் பூச்சிகள் அதிக நேரம் பறந்தன (p < 0.03).
அனைத்து உணவுகளிலும், இரத்தம் உறிஞ்சும் கொசுக்களின் ஒட்டுமொத்த பறக்கும் செயல்பாடு 24 மணி நேரத்திற்கு நிலையானதாகவும் நீடித்ததாகவும் இருந்தது. தண்ணீர் அருந்திய பெண் கொசுக்களிலும், புதிய மற்றும் 24 மணி நேரம் பழமையான உணவை உட்கொண்ட பெண் கொசுக்களிலும், இருண்ட காலத்தின் இரண்டாம் பாதியில் சிறுநீர் செயல்பாடு அதிகரித்தது (படம் 3). இரத்தம் அருந்திய பெண் கொசுக்களில் சிறுநீர் உணவு சராசரி பறக்கும் தூரத்தை கணிசமாக பாதித்தாலும் (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), யூரியா உணவு அவ்வாறு செய்யவில்லை (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24). மற்ற சிறுநீர் மற்றும் கட்டுப்பாட்டு உணவுகளுடன் (புதியது, p = 0.0091; 72 மணி நேரம், p = 0.0022; 168 மணி நேரம், p = 0.001; சுக்ரோஸ், p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
இனப்பெருக்க அளவுருக்களின் மீது சிறுநீர் மற்றும் யூரியா ஊட்டத்தின் விளைவுகள், முட்டையிடும் உயிரியல் சோதனைகளில் (படம் 4A) மதிப்பிடப்பட்டன. மேலும், ஒவ்வொரு பெண் பூச்சியும் இட்ட முட்டைகளின் எண்ணிக்கை, முட்டையின் அளவு மற்றும் புதிதாகப் பொரித்த முதல் நிலை லார்வாக்கள் ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் அவை ஆராயப்பட்டன. சிறுநீர் ஊட்டப்பட்ட அரேபியப் பெண் பூச்சிகள் இட்ட முட்டைகளின் எண்ணிக்கை, அவை உண்ணும் உணவைப் பொறுத்து மாறுபட்டது (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; படம் 4B). 24 மணி நேர சிறுநீர் மற்றும் இரத்த உணவை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகள், மற்ற சிறுநீர் உணவுகளை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகளை விட கணிசமாக அதிக முட்டைகளை இட்டன. மேலும், சுக்ரோஸ் ஊட்டப்பட்ட பூச்சிகளைப் போலவே அவை இருந்தன (படம் 4B). அதேபோல், சிறுநீர் ஊட்டப்பட்ட பெண் பூச்சிகள் இட்ட முட்டைகளின் அளவு, அவை உண்ணும் உணவைப் பொறுத்து மாறுபட்டது (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001). 24 மணி நேர சிறுநீர் மற்றும் சுக்ரோஸ் ஊட்டப்பட்ட பெண் பூச்சிகள், நீர் ஊட்டப்பட்ட பெண் பூச்சிகளை விட கணிசமாகப் பெரிய முட்டைகளை இட்டன. அதே சமயம், 168 மணி நேர சிறுநீர் ஊட்டப்பட்ட பெண் பூச்சிகளின் முட்டைகள் கணிசமாகச் சிறியதாக இருந்தன. (படம் 4C). கூடுதலாக, சிறுநீர் உணவு லார்வாவின் அளவை கணிசமாக பாதித்தது (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), 24 மற்றும் 72 மணிநேரம் சிறுநீர் அருந்திய பெண் பூச்சிகள் இட்ட முட்டைகளிலிருந்து வெளிவந்த லார்வாக்கள், தண்ணீர் அருந்திய மற்றும் 168 மணிநேரம் சிறுநீர் அருந்திய பெண் பூச்சிகள் இட்ட முட்டைகளிலிருந்து வெளிவந்த லார்வாக்களை விட கணிசமாக பெரியதாக இருந்தன (படம் 4D).
பசுவின் சிறுநீர் மற்றும் யூரியாவை உணவாகக் கொள்ளும் பெண் அனோபிலிஸ் அரபினிஸ் கொசுக்களின் இனப்பெருக்கச் செயல்பாடு. இரத்தம் அருந்திய பெண் கொசுக்களுக்கு, உயிரியல் சோதனைகளில் வைப்பதற்கும் முட்டையிடும் தளங்களைப் பெறுவதற்கும் 48 மணி நேரத்திற்கு முன்பு, புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீர், பல்வேறு செறிவுகளில் யூரியா, சுக்ரோஸ் (10%), மற்றும் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் (H2O) ஆகியவற்றைக் கொண்ட உணவுகள் வழங்கப்பட்டன. 48 மணி நேரம் (A). முட்டைகளின் எண்ணிக்கை (B, E), முட்டையின் அளவு (C, F) மற்றும் லார்வாக்களின் அளவு (D, G) ஆகியவை வழங்கப்பட்ட உணவால் (பசுவின் சிறுநீர்: BD; யூரியா: EG) குறிப்பிடத்தக்க அளவில் பாதிக்கப்பட்டன. வெவ்வேறு எழுத்துப் பெயர்களைப் பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்ட ஒவ்வொரு அளவுருவின் சராசரிகளும் ஒன்றுக்கொன்று குறிப்பிடத்தக்க அளவில் வேறுபட்டிருந்தன (டூக்கியின் பிந்தைய பகுப்பாய்வைப் பயன்படுத்தி ஒருவழி ANOVA; p < 0.05). பிழைப் பட்டைகள் சராசரியின் திட்டப் பிழையைக் குறிக்கின்றன.
சிறுநீரின் முக்கிய நைட்ரஜன் கூறான யூரியா, இரத்தம் அருந்திய பெண் பூச்சிகளுக்கு உணவாகக் கொடுக்கப்பட்டபோது, ​​அனைத்து ஆய்வுகளிலும் இனப்பெருக்க அளவுருக்களைக் கணிசமாகப் பாதித்தது. இரத்தம் அருந்திய பிறகு, யூரியா ஊட்டப்பட்ட பெண் பூச்சிகள் இட்ட முட்டைகளின் எண்ணிக்கை, யூரியாவின் செறிவைப் பொறுத்து (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001) இருந்தது; 134 µM மற்றும் 1.34 mM-க்கு இடைப்பட்ட யூரியா செறிவுகளை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகள் அதிக முட்டைகளை இட்டன (படம் 4E). 134 µM அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட யூரியா செறிவுகளை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகள், தண்ணீரை உட்கொண்ட பெண் பூச்சிகளை விடப் பெரிய முட்டைகளை இட்டன (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; படம் 4F), மேலும், தாய் பூச்சிகளில் உள்ள யூரியாவின் ஒத்த செறிவுகளால் பாதிக்கப்பட்டபோதிலும் (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001), லார்வாவின் அளவு அதிக மாறுபாட்டைக் கொண்டிருந்தது (படம் 4G).
விருந்தோம்பியை நாடும் மாட்டு சிறுநீரின் மேல்வெளி ஆவியாகும் சாறுகளுக்கு ஒட்டுமொத்த ஈர்ப்பு. கண்ணாடி குழாய் வாசனைமானியில் (படம் 5A) மதிப்பிடப்பட்ட அரேபியன்சிஸ் கொசுக்கள், சிறுநீரின் வயதால் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் பாதிக்கப்பட்டன (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; படம் 5B). பிந்தைய பகுப்பாய்வில், புதிய சிறுநீரின் வாசனையைத் தவிர (p = 0.13; படம் 5B), மற்ற அனைத்து சோதனைகளுடன் (72 மணிநேரம்: p = 0.0060, 168 மணிநேரம்: p = 0.012, பென்டேன்: p = 0.00070) ஒப்பிடும்போது, ​​24 மணிநேரத்தில் இருந்த பழைய சிறுநீரின் வாசனை குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிக ஈர்ப்பை ஏற்படுத்தியது தெரியவந்தது. இரத்தத்தை உறிஞ்சும் கொசுக்களின் சிறுநீர் வாசனைக்கான ஒட்டுமொத்த ஈர்ப்பு குறிப்பிடத்தக்க அளவில் வேறுபடவில்லை என்றாலும் (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; படம் 5C), இந்த பெண் கொசுக்கள் மற்றவற்றுடன் ஒப்பிடும்போது மேல்வெளி ஆவியாகும் சாறுகளுக்கு குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிக ஈர்ப்பைக் கொண்டிருப்பது கண்டறியப்பட்டது. கட்டுப்பாடுகளுடன் ஒப்பிடும்போது 72 மணி நேரம் பழமையான சிறுநீர் (p = 0.0066; படம் 5C).
ஓம்புயிரி மற்றும் இரத்தம் குடிக்கும் அனோபிலிஸ் அரேபியனஸ் கொசுக்களைத் தேடும்போது, ​​இயற்கை மற்றும் செயற்கை மாட்டு சிறுநீர் வாசனைகளுக்கு ஏற்படும் நடத்தை சார்ந்த எதிர்வினைகள். கண்ணாடிக் குழாய் வாசனைமானியின் வரைபடம் (A). புதிய மற்றும் பழமையான மாட்டு சிறுநீரிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட மேல்வெளி ஆவியாகும் சாறுகள், ஓம்புயிரி (B) மற்றும் இரத்தம் உறிஞ்சும் (C) கொசுக்களைக் கவர்வது. அனோபிலிஸ் பிரபுவின் உணர்கொம்பு எதிர்வினையைக் கண்டறியவும். புதிய (D), 24-மணிநேர (E), 72-மணிநேர (F), மற்றும் 168-மணிநேர (G) பழமையான மாட்டு சிறுநீரிலிருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்ட மேல்வெளி சாறுகள் காட்டப்பட்டுள்ளன. வாயு நிறமாலைமானியிலிருந்து வெளியேற்றப்பட்டு, சுடர் அயனியாக்கக் கண்டறிவியால் (FID) கண்டறியப்பட்ட மேல்வெளியில் உள்ள உயிரியல் செயல்பாடுள்ள சேர்மங்களுக்கு ஏற்படும் மின்னழுத்த மாற்றங்களை எலக்ட்ரான் ஆன்டெனா கண்டறிதல் (EAD) தடங்கள் காட்டுகின்றன. அளவுகோல் பட்டை, எதிர்வினை வீச்சு (mV) மற்றும் தக்கவைப்பு நேரம் (s) ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான தொடர்பைக் குறிக்கிறது. உயிரியல் செயல்பாடுள்ள சேர்மங்களின் பண்புகள் மற்றும் வெளியீட்டு விகிதங்கள் (µg h-1) காட்டப்பட்டுள்ளன. ஒற்றை நட்சத்திரக்குறி (*) ஒரு சீரான குறைந்த-வீச்சு எதிர்வினையைக் குறிக்கிறது. இரட்டை நட்சத்திரக்குறிகள் (**) குறிக்கின்றன. மீண்டும் உருவாக்க முடியாத பதில்கள். ஓம்புயிரி (H) மற்றும் இரத்தத்தை உறிஞ்சும் (I) கொசுக்களைக் கண்டறியவும். அனோபிலிஸ் அரேபியன்சிஸ், புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீர் வாசனைகளின் செயற்கைக் கலவைகளுக்கு வெவ்வேறு விதமான ஈர்ப்புகளைக் கொண்டுள்ளது. வெவ்வேறு எழுத்துப் பெயர்களால் ஈர்க்கப்பட்ட கொசுக்களின் சராசரி விகிதங்கள் ஒன்றுக்கொன்று குறிப்பிடத்தக்க அளவில் வேறுபட்டிருந்தன (டூக்கியின் பிந்தைய பகுப்பாய்வைப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்ட ஒருவழி ANOVA; p < 0.05). பிழைப் பட்டைகள் அளவுகோலின் திட்டப் பிழையைக் குறிக்கின்றன.
இனப்பெருக்கத்தின் போது, ​​இரத்த உணவு உண்ட 72 மணி நேரம் மற்றும் 120 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு, பெண் Ann.arabiensis மீன்களில், பென்டேன் கட்டுப்பாடுகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​புதிய மற்றும் பழைய பசுவின் சிறுநீரிலிருந்து பெறப்பட்ட ஹெட்ஸ்பேஸ் ஆவியாகும் சாறுகளுக்கு எந்த விருப்பமும் காட்டப்படவில்லை (χ2 = 3.07, p > 0.05; கூடுதல் கோப்பு 1: படம் S1).
பெண் Ann.arabiensis-க்கு, GC-EAD மற்றும் GC-MS பகுப்பாய்வுகள் முறையே எட்டு, ஆறு, மூன்று மற்றும் மூன்று உயிரியல் செயல்பாடுள்ள சேர்மங்களைக் கண்டறிந்தன (படம் 5D-G). மின் உடலியல் துலங்கல்களைத் தூண்டிய சேர்மங்களின் எண்ணிக்கையில் வேறுபாடுகள் காணப்பட்டாலும், இந்தச் சேர்மங்களில் பெரும்பாலானவை புதிய மற்றும் பழைய சிறுநீரிலிருந்து சேகரிக்கப்பட்ட ஒவ்வொரு ஹெட்ஸ்பேஸ் ஆவியாகும் சாற்றிலும் இருந்தன. எனவே, ஒவ்வொரு சாற்றிலிருந்தும், பெண் உணர்கொம்புகளில் வரம்பிற்கு மேல் உடலியல் துலங்கலை உருவாக்கிய சேர்மங்கள் மட்டுமே மேலதிகப் பகுப்பாய்வுகளில் சேர்க்கப்பட்டன.
ஹெட்ஸ்பேஸ் சேகரிப்பில் உள்ள உயிரியல் ரீதியாகச் செயல்படும் சேர்மங்களின் மொத்த ஆவியாகும் வெளியீட்டு விகிதமானது, புதிய சிறுநீரில் 29 µg h-1 ஆக இருந்து, 168 மணிநேரம் பழமையான சிறுநீரில் 242 µg h-1 ஆக அதிகரித்தது. இதற்கு முக்கியக் காரணம் p-கிரெசோல், m-ஃபார்மால்டிஹைட் மற்றும் ஃபீனால் ஆகியவற்றின் அதிகரிப்புகளாகும். இதற்கு மாறாக, 2-சைக்ளோஹெக்சன்-1-ஓன் மற்றும் டெக்கானல் போன்ற பிற சேர்மங்களின் வெளியீட்டு விகிதங்கள், சிறுநீரின் வயது அதிகரிக்க அதிகரிக்கக் குறைந்தன. இது குரோமட்டோகிராமில் (படம் 5D-G இடதுபுறப் பகுதி) காணப்பட்ட சிக்னல் அடர்த்தி (அளவு) குறைவு மற்றும் இந்த சேர்மங்களுக்கான உடலியல் எதிர்வினைகள் (படம் 5D-G வலதுபுறப் பகுதி) ஆகியவற்றுடன் தொடர்புடையதாக இருந்தது.
ஒட்டுமொத்தமாக, இந்த செயற்கைக் கலவையானது, புதிய மற்றும் பழமையான சிறுநீர்க் கரைசல்களின் ஆவியாகும் சாறுகளில் கண்டறியப்பட்ட உயிரியல் செயல்பாட்டுக் கலவைகளின் இயற்கையான விகிதத்தை ஒத்திருந்தது (படம் 5D–G). மேலும், இது ஒரு விருந்தோம்பியைத் தேடுவதில் (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; படம் 5H) அல்லது இரத்தம் உறிஞ்சும் கொசுக்களிடம் (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; படம் 5I) குறிப்பிடத்தக்க ஈர்ப்பைத் தூண்டுவதாகத் தெரியவில்லை. இருப்பினும், சிகிச்சைகளுக்கு இடையேயான பிற்கால ஜோடி ஒப்பீடுகள், பென்டேன் கட்டுப்பாடுகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​விருந்தோம்பியைத் தேடும் கொசுக்கள் 24 மணி நேரம் பழமையான சிறுநீரின் செயற்கைக் கலவையால் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் ஈர்க்கப்பட்டதைக் காட்டின (p = 0.0086; படம் 5H).
24 மணி நேரம் பதப்படுத்தப்பட்ட சிறுநீரின் செயற்கைக் கலவைகளில் உள்ள தனித்தனி கூறுகளின் பங்கை மதிப்பிடுவதற்காக, ஆறு கழித்தல் கலவைகள் Y-குழாய் சோதனையில் முழுமையான கலவைகளுடன் ஒப்பிட்டு மதிப்பிடப்பட்டன; இதில் தனித்தனி சேர்மங்கள் நீக்கப்பட்டிருந்தன. விருந்தோம்பியைத் தேடும் கொசுக்களைப் பொறுத்தவரை, முழுமையான கலவையிலிருந்து தனித்தனி சேர்மங்களைக் கழித்தது அவற்றின் நடத்தை சார்ந்த எதிர்வினைகளில் குறிப்பிடத்தக்க தாக்கத்தை ஏற்படுத்தியது (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; கூடுதல் கோப்பு 1: படம் S2A). மேலும், முழுமையாகக் கலக்கப்பட்ட கலவையை விட அனைத்து கழித்தல் கலவைகளும் அதிக ஈர்ப்பைக் கொண்டிருந்தன. இதற்கு மாறாக, முழுமையான செயற்கைக் கலவையிலிருந்து தனித்தனி சேர்மங்களை நீக்கியது, இரத்தம் உறிஞ்சும் கொசுக்களின் நடத்தை சார்ந்த எதிர்வினைகளில் எந்தத் தாக்கத்தையும் ஏற்படுத்தவில்லை (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077). இதற்கு விதிவிலக்காக, டெக்கானல் மட்டும் முழுமையான கலவையுடன் ஒப்பிடும்போது குறைந்த அளவிலான ஈர்ப்பையே ஏற்படுத்தியது (p = 0.022; கூடுதல் கோப்பு 1: படம் S2B).
எத்தியோப்பியாவில் மலேரியா பரவலாக உள்ள ஒரு கிராமத்தில், களச் சூழலில் கொசுக்களை ஈர்ப்பதில் 24 மணி நேர மாட்டு சிறுநீரின் செயற்கைக் கலவையின் செயல்திறன் பத்து இரவுகளுக்கு மதிப்பிடப்பட்டது (படம் 6A). மொத்தம் 4,861 கொசுக்கள் பிடிக்கப்பட்டு அடையாளம் காணப்பட்டன, அவற்றில் 45.7% ஆந்த்ரோபஸ் காம்பியாய் எஸ்எல், 18.9% அனோபிலிஸ் ஃபாரோயென்சிஸ் மற்றும் 35.4% கியூலெக்ஸ் இனங்கள் ஆகும் (கூடுதல் கோப்பு 1: அட்டவணை S1). பிசிஆர் பகுப்பாய்வு மூலம் அடையாளம் காணப்பட்ட அனோபிலிஸ் காம்பியன் இனக் குழுமத்தின் ஒரே உறுப்பினர் அனோபிலிஸ் அராபினிஸ் ஆகும். சராசரியாக, ஒரு இரவுக்கு 320 கொசுக்கள் பிடிக்கப்பட்டன, அந்த நேரத்தில் செயற்கைக் கலவை இரைகளைக் கொண்ட பொறிகள், கலவை இல்லாத இணைப் பொறிகளை விட அதிக கொசுக்களைப் பிடித்தன (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). ஐந்து கட்டுப்பாட்டு இரவுகளில் ஒவ்வொன்றிலும், தொடக்கத்திலும், நடுவிலும், முடிவிலும் இரையில்லாத பொறிகள் வைக்கப்பட்டன. சோதனை. ஒவ்வொரு ஜோடி பொறிகளிலும் ஏறக்குறைய சம எண்ணிக்கையிலான கொசுக்கள் பிடிக்கப்பட்டன, இது வீடுகளுக்கு இடையில் எந்தப் பாரபட்சமும் இல்லை என்பதையும் (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) மற்றும் ஆய்வு காலத்தில் கொசுக்களின் எண்ணிக்கையில் சரிவு ஏற்படவில்லை என்பதையும் குறிக்கிறது. கட்டுப்பாட்டுப் பொறிகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​செயற்கைக் கலவையைக் கொண்ட பொறிகளில் பிடிபட்ட கொசுக்களின் எண்ணிக்கை குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகரித்தது: விருந்தோம்பியைத் தேடுதல் (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), சமீபத்தில் இரத்தம் குடித்தல் (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) மற்றும் கர்ப்பம் (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; கூடுதல் கோப்பு 1: அட்டவணை S1). இது பிடிக்கப்பட்ட மொத்த கொசுக்களின் எண்ணிக்கையிலும் பிரதிபலிக்கிறது: விருந்தோம்பியைத் தேடுதல் > இரத்தம் உறிஞ்சுதல் > கர்ப்பம் > பகுதி கர்ப்பம் > ஆண்.
24 மணி நேர செயற்கை மாட்டுச் சிறுநீர் வாசனைக் கலவையின் செயல்திறன் குறித்த கள மதிப்பீடு. தெற்கு-மத்திய எத்தியோப்பியாவில் (வரைபடம்), மாக்கி நகருக்கு (உள்ளீடு) அருகில், நோய் கட்டுப்பாட்டு மையங்களின் (CDC) ஒளிப் பொறியை (வலதுபுறம்) பயன்படுத்தி, லத்தீன் சதுர வடிவமைப்புடன் (வான்வழிப் படம்) (A) இணைக்கப்பட்ட வீடுகளில் களச் சோதனைகள் நடத்தப்பட்டன. செயற்கை வாசனைத் தூண்டில் கொண்ட CDC ஒளிப் பொறிகள், பெண் அனோபிலிஸ் அரபெஸ்குகளை (B) ஈர்த்துப் பிடிக்கின்றன, ஆனால் அனோபிலிஸ் ஃபாரோக்களை (C) வேறு விதமாகப் பிடிப்பதில்லை; இது ஒரு உடலியல் நிலையைச் சார்ந்த விளைவாகும். கூடுதலாக, இந்தப் பொறிகள், விருந்தோம்பியான கியூலெக்ஸ் கொசுக்களின் எண்ணிக்கையை கணிசமாக அதிகரித்தன. (D) கட்டுப்பாட்டுடன் ஒப்பிடும்போது. இடதுபுறத்தில் உள்ள பட்டைகள், வாசனைத் தூண்டில் (பச்சை) மற்றும் கட்டுப்பாட்டு (திறந்த) பொறிகளின் ஜோடிகளில் (N = 10) பிடிபட்ட கொசுக்களின் சராசரி தேர்வு குறியீட்டைக் குறிக்கின்றன, அதே நேரத்தில் வலதுபுறத்தில் உள்ள பட்டைகள் கட்டுப்பாட்டுப் பொறிகளின் (திறந்த; N = 5) ஜோடிகளில் உள்ள சராசரி தேர்வு குறியீட்டைக் குறிக்கின்றன. நட்சத்திரக் குறிகள் புள்ளிவிவர முக்கியத்துவ நிலைகளைக் குறிக்கின்றன (*p = 0.01 மற்றும் ***p < 0.0001).
செயற்கைக் கலவைகளைக் கொண்ட பொறிகளில் மூன்று இனங்களும் வெவ்வேறு விதமாகப் பிடிக்கப்பட்டன. விருந்தோம்பியைத் தேடுதல் (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), இரத்தத்தை உறிஞ்சுதல் (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) மற்றும் கர்ப்பம் (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) ஆகியவற்றில், செயற்கைக் கலவையை வெளியிடும் பொறியில் a.arabiensis சிக்கியது (படம் 6B), அதேசமயம் An-இன் அளவில் வேறுபாடு இல்லை. Pharoensis வெவ்வேறு உடலியல் நிலைகளில் காணப்பட்டன (படம் 6C). Culex-ஐப் பொறுத்தவரை, கட்டுப்பாட்டுப் பொறிகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​செயற்கைக் கலவையைக் கொண்டு தூண்டப்பட்ட பொறிகளில் மட்டுமே விருந்தோம்பிகளைத் தேடும் கொசுக்களின் எண்ணிக்கையில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு காணப்பட்டது (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; படம் 6D).
எத்தியோப்பியாவில், இனப்பெருக்கத் தளங்களுக்கும் கிராமப்புற சமூகங்களுக்கும் இடையில், சாத்தியமான விருந்தோம்பிகளுக்கு வெளியே வைக்கப்பட்ட விருந்தோம்பி இரைப் பொறிகள், மலேரியா கொசுக்கள் பசுவின் சிறுநீர் வாசனையை ஒரு விருந்தோம்பி வாழ்விடக் குறிப்பாகப் பயன்படுத்துகின்றனவா என்பதை மதிப்பிடுவதற்குப் பயன்படுத்தப்பட்டன. விருந்தோம்பிக் குறிப்புகள், வெப்பம் இல்லாத நிலையில், பசுவின் சிறுநீர் வாசனை இருந்தாலும் இல்லாவிட்டாலும், எந்தக் கொசுக்களும் பிடிபடவில்லை (கூடுதல் கோப்பு 1: படம் S3). இருப்பினும், அதிக வெப்பநிலை மற்றும் பசுவின் சிறுநீர் வாசனை இருக்கும்போது, ​​பெண் மலேரியா கொசுக்கள் ஈர்க்கப்பட்டுப் பிடிக்கப்பட்டன, இருப்பினும் அவை சிறிய எண்ணிக்கையில் இருந்தன, இது சிறுநீரின் வயதைப் பொருட்படுத்தவில்லை (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; கூடுதல் கோப்பு 1: படம் S3). இதற்கு மாறாக, அதிக வெப்பநிலையில் நீர் கட்டுப்பாடுகள் மலேரியா கொசுக்களைப் பிடிக்கவில்லை (கூடுதல் கோப்பு 1: படம் S3).
மலேரியா கொசுக்கள், மற்ற பூச்சிகளைப் போலவே [2, 4, 24, 25, 26], தங்கள் வாழ்க்கை வரலாற்றுப் பண்புகளை மேம்படுத்துவதற்காக, பசுவின் சிறுநீரை (அதாவது, குட்டைகளை) ஈடுசெய்யும் வகையில் உண்பதன் மூலம் நைட்ரஜன் கொண்ட சேர்மங்களைப் பெற்று விநியோகிக்கின்றன. பசுவின் சிறுநீர் என்பது எளிதில் கிடைக்கக்கூடிய ஒரு புதுப்பிக்கத்தக்க வளமாகும். இது கிராமப்புற வீடுகள் மற்றும் முட்டையிடும் இடங்களுக்கு அருகிலுள்ள மாட்டுத் தொழுவங்கள், உயரமான தாவரங்கள் போன்ற மலேரியா பரப்பிகள் ஓய்வெடுக்கும் இடங்களுடன் நெருக்கமாக தொடர்புடையது. பெண் கொசுக்கள் இந்த வளத்தை வாசனையின் மூலம் கண்டறிந்து, சிறுநீரில் உள்ள முக்கிய நைட்ரஜன் கூறான யூரியா உட்பட, நைட்ரஜன் சேர்மங்களை உட்கொள்வதை ஒழுங்குபடுத்தும் திறன் கொண்டவை [15, 16]. பெண் கொசுவின் உடலியல் நிலையைப் பொறுத்து, சிறுநீரில் உள்ள ஊட்டச்சத்துக்கள், விருந்தோம்பியைத் தேடும் பெண் கொசுக்களின் பறக்கும் செயல்பாடு மற்றும் உயிர்வாழ்வை மேம்படுத்துவதற்கும், முதல் கோனாடோட்ரோபிக் சுழற்சியின் போது இரத்தம் அருந்திய உயிரினங்களின் உயிர்வாழ்வு மற்றும் இனப்பெருக்கப் பண்புகளை மேம்படுத்துவதற்கும் ஒதுக்கப்படுகின்றன. எனவே, ஊட்டச்சத்துக் குறைபாடுள்ள பெரியவர்களைப் போல மூடியிருக்கும் மலேரியா பரப்பிகளுக்கு சிறுநீர் கலத்தல் ஒரு முக்கியமான ஊட்டச்சத்துப் பங்கை வகிக்கிறது [8], ஏனெனில் இது பெண் கொசுக்களுக்கு முக்கியமான நைட்ரஜன் சேர்மங்களைப் பெறுவதற்கான திறனை வழங்குகிறது. குறைந்த அபாயமுள்ள உணவுப் பழக்கம். இந்தக் கண்டுபிடிப்பு குறிப்பிடத்தக்க நோய்ப்பரவலியல் விளைவுகளைக் கொண்டுள்ளது, ஏனெனில் பெண் உயிரிகள் தங்கள் ஆயுட்காலம், செயல்பாடு மற்றும் இனப்பெருக்க வெளியீட்டை அதிகரிக்கின்றன, இவை அனைத்தும் நோய்க்கடத்தியின் திறனைப் பாதிக்கின்றன. மேலும், இந்த நடத்தை எதிர்கால நோய்க்கடத்தி மேலாண்மைத் திட்டங்களின் இலக்காக அமையலாம்.