Ho fumana le ho aba dikotla ho kopanya ho batla dikokonyana le dibopeho tsa nalane ya bophelo. Ho lefella bofokodi ba dikotla tse itseng mehatong e fapaneng ya bophelo, dikokonyana di ka fumana dikotla tsena ka ho fepa ka tlatsetso, mohlala, ka ho fepa dikotla tse tswang ho diphoofolo tse nang le lesapo la mokokotlo tshebetsong e tsejwang ka hore ke matangoana. Ho bonahala monoang wa Anopheles arabiani o haellwa ke phepo mme, ka hona, o hloka dikotla bakeng sa metabolism le ho ikatisa. Sepheo sa phuputso ena e ne e le ho hlahloba hore na An. arabiensis e sisinyehang morotong wa kgomo bakeng sa ho fumana dikotla e ntlafatsa dibopeho tsa nalane ya bophelo.
Etsa bonnete ba hore e bolokehile. arabiensis e ile ea hoheloa ke monko oa moroto oa khomo o mocha, oa lihora tse 24, oa lihora tse 72, le oa lihora tse 168, le tse tšehali tse batlang moeti le tse fepuoang mali (lihora tse 48 kamora lijo tsa mali) li ile tsa lekanngoa ka olfactometer ea Y-tube, 'me tse tšehali tse immeng li ile tsa hlahlojoa bakeng sa teko ea ho tsoala. Tlhahlobo e kopaneng ea lik'hemik'hale le ea electrophysiological e ile ea sebelisoa ho khetholla metsoako e sebetsang ka har'a moroto oa khomo lihlopheng tsohle tse 'ne tsa lilemo. Metsoako ea maiketsetso ea metsoako e sebetsang e ile ea hlahlojoa litekong tsa Y-tube le tsa tšimo. Ho batlisisa moroto oa khomo le motsoako oa eona o ka sehloohong oa urea o nang le naetrojene e le lijo tse ka tlatsetsang bakeng sa li-vector tsa malaria, litekanyetso tsa phepo le litšobotsi tsa nalane ea bophelo li ile tsa lekanngoa. Karolo ea menoang e tšehali le bongata ba moroto oa khomo le urea e monngoang li ile tsa hlahlojoa. Kamora ho fepa, tse tšehali li ile tsa hlahlojoa bakeng sa ho phela, ho fofa ka khokahano, le ho ikatisa.
Batla mali le phepo ea moamoheli. Lithutong tsa laboratori le tsa tšimo, Maarabia a ile a hoheloa ke monko oa tlhaho le oa maiketsetso oa moroto oa khomo o mocha le o tsofetseng. Likhomo tse tšehali tse immeng li ne li sa tsotelle likarabelo tsa moroto oa khomo libakeng tsa ho tsoala. Likhomo tse tšehali tse batlang moamoheli le tse monyang mali li monya moroto oa khomo le urea ka mafolofolo 'me li aba mehloli ena ho latela nalane ea bophelo e le mosebetsi oa boemo ba 'mele bakeng sa ho fofa, ho phela, kapa ho ikatisa.
Ho fumana le ho aba moroto wa kgomo wa Anopheles arabinis bakeng sa dibopeho tse ntlafetseng tsa nalane ya bophelo. Ho fepa moroto wa kgomo ka tlatsetso ho ama bokgoni ba di-vector ka ho toba ka ho eketsa ho phela letsatsi le letsatsi le bongata ba di-vector, le ka tsela e sa tobang ka ho fetola mosebetsi wa ho fofa mme ka hona ho lokela ho nahanelwa mehlaleng ya nakong e tlang.
Ho fumana le ho aba phepo ho kopanya ho batla lijo tsa likokoanyana le litšobotsi tsa nalane ea bophelo [1,2,3].Likokonyana li khona ho khetha le ho fumana lijo le ho etsa phepo e lefelloang ho latela ho fumaneha ha lijo le litlhoko tsa phepo [1, 3].Kabo ea phepo e itšetlehile ka mokhoa oa nalane ea bophelo 'me e ka lebisa litlhokong tse fapaneng tsa boleng ba lijo le bongata mehatong e fapaneng ea bophelo ba likokoanyana [1, 2].Ho lefella khaello ea phepo e itseng, likokoanyana li ka fumana phepo ena ka ho fepa ka tlatsetso, joalo ka seretseng, mantle a fapaneng le mantle a liphoofolo tse nang le lesapo la mokokotlo, le setopo, ts'ebetso e tsejoang e le matangoana [2].Le hoja mefuta e fapaneng ea lirurubele le tšoele e hlalosoa haholo-holo, masoba a ho nosetsa le 'ona a hlaha ka tatellano e meng ea likokoanyana, 'me ho hoheloa le ho ja mefuta ena ea mehloli ho ka ba le litlamorao tse kholo bophelong le litšobotsing tse ling tsa nalane ea bophelo [2, 4, 5, 6] ,7].Monoang oa malaria Anopheles gambiae sensu lato (sl) o hlaha e le motho e moholo ea 'hlokang phepo e nepahetseng' [8], kahoo ho nosetsa ho ka bapala karolo ea bohlokoa litšobotsing tsa nalane ea bophelo ba oona, empa boitšoaro bona ho fihlela joale e hlokomolohuoe. Tšebeliso ea ho sisinyeha e le mokhoa oa ho eketsa phepo e kenang ka har'a sesebelisoa sena sa bohlokoa e hloka tlhokomelo kaha sena se ka ba le liphello tsa bohlokoa tsa mafu a seoa.
Ho ja naetrojene ho menoang e meholo e tšehali ea Anopheles ho lekanyelitsoe ka lebaka la polokelo e tlase ea lik'hilojule tse nkiloeng ho tloha sethaleng sa liboko le tšebeliso e sa sebetseng hantle ea lijo tsa mali [9]. Hangata Ann.gambiae sl e tšehali e lefella sena ka ho eketsa lijo tse ling tsa mali [10, 11], ka hona e beha batho ba bangata kotsing ea ho tšoaroa ke lefu lena le ho beha menoang kotsing e kholo ea ho hlaseloa. Ntle le moo, menoang e ka sebelisa phepo e eketsehileng ea mantle a liphoofolo tse nang le lesapo la mokokotlo ho fumana metsoako ea naetrojene e ntlafatsang ho ikamahanya le maemo le ho fofa habonolo, joalo ka ha ho bontšitsoe ke likokoanyana tse ling [2]. Ntlheng ena, ho hohela ho matla le ho ikhethang ha e 'ngoe ea mefuta ea bana ba motho ka har'a An. Motsoako oa mofuta oa Gambian sl, Anopheles arabinis, moroto oa khomo o mocha le o tsofetseng [12,13,14], hoa thahasellisa. Anopheles arabinis e na le monyetla oa ho khetha moamoheli 'me e tsejoa e amana le ho ja likhomo. Moroto oa khomo ke mohloli o ruileng metsoako ea naetrojene, 'me urea e etsa 50-95% ea naetrojene eohle morotong o mocha [15, 16].Ha moroto wa kgomo o ntse o tsofala, dikokwana-hloko di sebedisa mehlodi ena ho fokotsa ho rarahana ha metsoako ya naetrojene ka hare ho dihora tse 24 [15]. Ka keketseho e potlakileng ya ammonia, e amanang le ho fokotseha ha naetrojene ya tlhaho, dikokwana-hloko tse phelang ka alkalophilic (tseo bongata ba tsona di hlahisang metsoako e chefo ho menoang) di a atleha [15], e ka bang Ann.arabiensis e tshehadi e hohelwa ke moroto ka ho kgetheha ha e le dilemo tse 24 kapa ka tlase ho moo [13, 14].
Phuputsong ena, ho ile ha batloa Ans e amohelang le e fepuoang ka mali. Nakong ea potoloho ea eona ea pele ea gonadotropin, arabiensis e ile ea hlahlojoa bakeng sa ho fumana metsoako ea naetrojene, ho kenyeletsoa le urea, ka ho kopanya moroto. Ka mor'a moo, letoto la liteko le ile la etsoa ho hlahloba hore na menoang e tšehali e abela mohloli ona oa limatlafatsi joang bakeng sa ho phela hantle, ho ikatisa le ho batla lijo tse ling. Qetellong, monko oa moroto oa khomo o mocha le o tsofetseng o ile oa hlahlojoa ho fumana hore na tsena li fana ka lintlha tse tšepahalang bakeng sa An e amohelang le e fepuoang ka mali. Ha ba ntse ba batla mohloli ona o ka bang teng oa phepo, arabiensis e ile ea sibolla likamano tsa lik'hemik'hale ka morao ho ho hohela ho hoholo ho bonoang. Metsoako ea monko o entsoeng ka metsoako ea tlhaho e feto-fetohang (VOCs) e fumanoeng morotong oa lihora tse 24 e ile ea hlahlojoa hape tlas'a maemo a tšimo, ea atolosa liphetho tse fumanoeng tlas'a maemo a laboratori le ho bontša phello ea monko oa moroto oa khomo maemong a fapaneng a 'mele. Ho hohela menoang. Liphetho tse fumanoeng li tiisa hore An. arabiensis e fumana le ho aba metsoako ea naetrojene e fumanoang morotong oa liphoofolo tse nang le lesapo la mokokotlo ho susumetsa litšobotsi tsa nalane ea bophelo. Liphetho tsena li tšohloa moelelong oa liphello tse ka bang teng tsa epidemiological le kamoo li ka sebelisoang bakeng sa tlhokomelo ea vector le taolo.
Li-anopheles arabicans (mofuta oa Dongola) li ile tsa bolokoa mochesong oa 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH le potoloho ea lefifi ea lihora tse 12:12. Liboko li ile tsa holisoa ka har'a literei tsa polasetiki (20 cm × 18 cm × 7 cm) tse tlatsitsoeng ka metsi a hloekisitsoeng 'me tsa feptjoa lijo tsa tlhapi tsa Tetramin® (Tetra Werke, Melle, DE). Li-pupae li ile tsa bokelloa ka likopi tse 30 ml (Nolato Hertila, Åstorp, SE) ebe li fetisetsoa likheong tsa Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) ho lumella hore batho ba baholo ba hlahe. Batho ba baholo ba ile ba fuoa tharollo ea sucrose ea 10% ad libitum ho fihlela matsatsi a 4 kamora ho hlaha (dpe), moo tse tšehali tse batlang moeti li ileng tsa fuoa lijo hang pele ho teko, kapa tsa bolaoa ke tlala bosiu ka metsi a hloekisitsoeng pele ho teko, joalo ka ha ho hlalositsoe ka tlase. Tse tšehali tse sebelisitsoeng bakeng sa liteko tsa flight tube li ile tsa bolaoa ke tlala feela. Lihora tse 4-6 ka metsi a sa reroang. Ho lokisa menoang e monyang mali bakeng sa liteko tsa bioassay tse latelang, tse tšehali tse 4 tsa dpe li ile tsa fuoa mali a nku a sa ruruheng (Håtunalab, Bro, SE) ho sebelisoa sistimi ea ho fepa ka lera (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK). Tse tšehali tse neng li tletse ka botlalo li ile tsa fetisetsoa ka har'a lihoko tse fapaneng 'me tsa fuoa lijo ka kotloloho, joalo ka ha ho hlalositsoe ka tlase, kapa 10% sucrose ad libitum matsatsi a 3 pele ho liteko tse hlalositsoeng ka tlase. Tse tšehali tsa ho qetela li ile tsa sebelisoa bakeng sa liteko tsa bioassays tsa flight tube 'me tsa fetisetsoa laboratoring, eaba li fuoa metsi a hloekisitsoeng ad libitum lihora tse 4-6 pele ho teko.
Liteko tsa ho fepa li sebelisitsoe ho lekanya tšebeliso ea moroto le urea ho basali ba baholo ba Maarabia. Basali ba batlang moamoheli le ba fepuoang mali ba fuoe lijo tse nang le moroto oa khomo o foreshe le o tsofetseng oa 1% o hlapolotsoeng, mahloriso a fapaneng a urea, le li-control tse peli (10% sucrose le metsi) ka lihora tse 48. Ho phaella moo, 'mala oa lijo (1 mg ml-1 xylene cyanide FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) o ile oa eketsoa lijong 'me oa fanoa ka matrix ea 4 × 4 ka har'a li-tubes tsa microcentrifuge tsa 250 µl (Aoxygen Scientific, Union City, CA, US; Setšoantšo sa 1A) Tlatsa ho fihlela moeling (~300 µl). Ho qoba tlholisano lipakeng tsa menoang le litlamorao tse ka bang teng tsa 'mala oa dae, beha menoang e 10 ka sejaneng se seholo sa Petri (bophara ba 12 cm le bolelele ba 6 cm; Semadeni, Ostermundigen, CH; Setšoantšo sa 1A) lefifing le felletseng ho 25 ± 2 cm °C le 65 ± 5% e amanang le eona. mongobo. Liteko tsena li phetiloe ka makhetlo a 5 ho isa ho a 10. Kamora ho pepesehela lijo, menoang e ile ea beoa ho -20 °C ho fihlela tlhahlobo e 'ngoe e etsoa.
Batla moroto wa dikgomo le urea tse monywang ke moamoheli le e tshehadi ya Anopheles arabianus e monyang madi. Tekong ya ho fepa (A), menoang e tshehadi e ne e fuwa dijo tse nang le moroto wa kgomo o motjha le o tsofetseng, maemo a fapaneng a urea, sucrose (10%), le metsi a hlwekisitsweng (H2O). Ditshehadi tse batlang moamoheli (B) le tse fepilweng ka madi (C) di monye sucrose e ngata ho feta dijo tse ding tse lekilweng. Hlokomela hore ditshehadi tse batlang moamoheli di monyetse moroto wa kgomo wa dihora tse 72 ka tlase ho moroto wa kgomo wa dihora tse 168 (B). Kakaretso ya naetrojene yohle (± ho fapoha ho tloaelehileng) ya moroto e emetswe ho inset. Ditshehadi tse batlang moamoheli (D, F) le tse anyang madi (E, G) di nka urea ka tsela e itshetlehileng ka tekanyo. Bongata ba modumo o hemetsweng (D, E) ka mabitso a fapaneng a ditlhaku di ne di fapane haholo (ANOVA ya tsela e le nngwe ho sebediswa tlhahlobo ya Tukey ya post hoc; p < 0.05). Meqolo ya diphoso e emela phoso e tloaelehileng ya karolelano (BE). Mola o otlolohileng o nang le di-dashed o emela mola wa ho kgutlela morao wa log-linear (F, G)
Ho lokolla dijo tse monyetsweng, menoang e ile ya kenngwa ka bonngoe ka hara diphaephe tsa 1.5 ml tsa microcentrifuge tse nang le 230 µl ya metsi a hlwekileng mme dinama tsa mmele tsa sitiswa ho sebediswa pestle e lahlwang le enjene e se nang thapo (VWR International, Lund, SE), mme ya latelwa ke centrifugation ka 10 krpm metsotso e 10. Supernatant (200 µl) e ile ya fetisetswa ho microplate ya 96-well (Sigma-Aldrich) mme absorbance (λ620) ya fumanwa ho sebediswa microplate reader e thehilweng ho spectrophotometer (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Ka tsela e nngwe, menoang e ile ya silwa ka hara 1 ml ya metsi a hlwekileng, 900 µl ya yona e fetiseditswe ho cuvette bakeng sa tlhahlobo ya spectrophotometric (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Ho lekanya tekanyo ya dijo tse jewang, ho ile ha lokiswa curve e tloaelehileng ka ho hlapolla ka serial ho hlahisa 0.2 µl ho isa ho 2.4. µl ea 1 mg ml-1 xylene cyanide. Eaba, ho sebelisoa tekanyo ea optical ea mahlo a tsejoang a dae ho fumana hore na ke lijo life tse jeoang ke monoang ka mong.
Lintlha tsa bophahamo ba modumo di ile tsa sekasekwa ho sebediswa tlhahlobo ya tsela e le nngwe ya phapang (ANOVA) e latelwang ke papiso ya Tukey ya post hoc pairwise (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). Ditshekatsheko tsa ho kgutlela morao tsa mola di hlalositse ho ja urea e itshetlehileng hodima mahloriso mme tsa bapisa dikarabo pakeng tsa menoang e batlang moeti le e monyang madi (GraphPad Prism v8.0.0 bakeng sa Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
Hoo e ka bang 20 µl ea disampole tsa moroto ho tsoa sehlopheng se seng le se seng sa lilemo li ile tsa tlangwa ho Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 letlooeng, Sigma Aldrich) 'me tsa kenngoa ka har'a li-capsule tsa tin (8 mm × 5 mm). Li-capsule li ile tsa kenngoa ka kamoreng ea ho chesa ea CHNS/O analyzer (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, US) ho fumana hore naetrojene e teng morotong o mocha le o tsofetseng ho latela mokhoa oa moetsi. Kakaretso ea naetrojene (g N l-1) e ile ea lekanngoa ho latela maemo a tsebahalang a urea a sebelisitsoeng e le tekanyetso.
Ho lekola phello ea lijo ho pholohong ea basali ba batlang moeti le ba monyang mali, menoang e ile ea beoa ka bonngoe ka har'a lijana tse kholo tsa Petri (bophara ba 12 cm le bolelele ba 6 cm; Semadeni) ka lesoba le koahetsoeng ka letlooeng sekoahelong (bophara ba 3 cm) ka Bakeng sa ho kenya moea le phepelo ea lijo. Lijo li ile tsa fanoa ka kotloloho kamora 4 dpe 'me tsa kenyelletsa 1% ea moroto oa khomo o foreshe le o tsofetseng o qhibilihisitsoeng, likhakanyo tse 'ne tsa urea, le li-control tse peli, 10% sucrose le metsi. Lijo ka 'ngoe li ile tsa kenngoa ka pipe ho tampon ea meno (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) e kentsoe ka har'a syringe ea 5 ml (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), plunger ea tlosoa, 'me ea beoa holim'a sejana sa petri (setšoantšo sa 1).1A). Fetola lijo tsa hau letsatsi le leng le le leng. Boloka laboratori joalo ka ha ho hlalositsoe kaholimo. Menoang e pholohileng e ile ea baloa habeli ka letsatsi, ha menoang e shoeleng e ile ea lahloa ho fihlela menoang ea ho qetela e shoa (n = 40 ka kalafo). Ho pholoha ha menoang e fepuoang lijong tse fapaneng ho ile ha hlahlojoa ka lipalo-palo ho sebelisoa li-curve tsa ho pholoha tsa Kaplan-Meyer le liteko tsa maemo a log ho bapisa papiso ea kabo ea ho pholoha lipakeng tsa lijo (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Sefene se ikgethang sa ho fofa ha monoang se thehilweng ho Attisano et al.[17], se entsweng ka diphanele tsa acrylic tse hlakileng tse botenya ba 5 mm (bophara ba 10 cm x bolelele ba 10 cm x bophahamo ba 10 cm) ntle le diphanele tse ka pele le tse ka morao (Setshwantsho sa 3: hodimo). Kopano ya pivot e nang le phaephe e otlolohileng e entsweng ka kholomo ya chromatography ya kgase (0.25 mm id; 7.5 cm L) e nang le dipheletso tse kgomaretsweng ho nale ya dikokonyana e leketlileng pakeng tsa para ya makenete a neodymium a arohaneng ka 9 cm. Phaephe e otlolohileng e entsweng ka thepa e tshwanang (6.5 cm L) e ile ya arola phaephe e otlolohileng ka lehare ho etsa letsoho le tlamilweng le letsoho le neng le jere karolo e nyane ya foil ya aluminium e le letshwao le sitisang lesedi.
Tse tšehali tse lapileng lihora tse 24 li fuoe lijo tse boletsoeng ka holimo metsotso e 30 pele li thibeloa. Menoang e tšehali e fepuoang ka botlalo e ile ea kenngoa ka bo eona leqhoeng metsotso e 2-3 'me ea hokeloa lithapong tsa likokoanyana ka boka ba linotši (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) ebe e tlamelloa matsohong a lipeipi tse rapameng. Flying Mill. Liphetoho ka sefofane li ile tsa tlalehoa ke logger ea data e entsoeng ka mokhoa o ikhethileng, ebe li bolokoa le ho bontšoa ho sebelisoa software ea PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Feme ea sefofane e ile ea beoa ka phapusing e laoloang ke boemo ba leholimo (lihora tse 12:12, khanya: lefifi, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Ho bona mohlala oa ts'ebetso ea sefofane, sebaka sohle se fofang (m) le palo eohle ea mesebetsi ea sefofane e latellanang li baliloe ka hora nakong ea lihora tse 24. Ho phaella moo, sebaka se tloaelehileng se fofang ke basali ka bomong se bapisitsoe ho pholletsa le mekhoa ea phekolo 'me sa hlahlojoa ho sebelisoa tlhahlobo ea ANOVA ea tsela e le' ngoe le tlhahlobo ea posthoc ea Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.), moo sebaka se tloaelehileng se neng se nkoa e le phetoho e itšetlehileng ka eona, ha phekolo e le ntlha e ikemetseng. Ho phaella moo, palo e tloaelehileng ea lipotoloho e baloa ka keketseho ea metsotso e 10.
Ho lekola phello ea lijo ts'ebetsong ea ho ikatisa ea An.arabiensis, tse tšehali tse tšeletseng (4 dpe) li ile tsa fetisetsoa ka ho toba lihokong tsa Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) kamora ho bokelloa ha mali ebe li fana ka lijo tsa liteko ka lihora tse 48 joalo ka ha ho hlalositsoe kaholimo. Lijo li ile tsa tlosoa 'me likopi tsa ho behela (30 ml; Nolato Hertila) tse tletseng 20 ml ea metsi a hloekisitsoeng li ile tsa fanoa ka letsatsi la boraro ka lihora tse 48, li fetoloa lihora tse ling le tse ling tse 24. Pheta mokhoa o mong le o mong oa lijo ka makhetlo a 20-50. Mahe a ile a baloa 'me a tlalehoa bakeng sa ho behela ka 'ngoe ea liteko. Mehlala e menyenyane ea mahe e ile ea sebelisoa ho lekola phapang ea boholo le bolelele ba mahe ka bomong (n ≥ 200 ka lijo) ho sebelisoa microscope ea Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) e nang le Leica Camera (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd., DE). Mahe a setseng a ile a bolokoa ka phapusing e laoloang ke boemo ba leholimo tlas'a maemo a tloaelehileng a ho holisa lihora tse 24, 'me sampole e nyenyane ea li-larvae tsa pele tse sa tsoa hlaha (n ≥ 200 ka lijo) li ile tsa lekanngoa, joalo ka ha ho hlalositsoe kaholimo. Palo ea mahe le boholo ba mahe le li-larvae li ile tsa bapisoa lipakeng tsa mekhoa ea phekolo le ho sebelisa tlhahlobo ea post-hoc ea ANOVA le Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Li-volaete tsa Headspace tse tsoang ho foreshe (hora e le 1 kamora ho qotsoa), moroto o tsofetseng oa lihora tse 24, lihora tse 72 le lihora tse 168 li ile tsa bokelloa ho tsoa lisampoleng tse bokelletsoeng ho tsoa likhomong tsa Zebu, Arsi. Bakeng sa boiketlo, lisampole tsa moroto li ile tsa bokelloa hoseng haholo ha likhomo li ntse li le ka har'a selae. Lisampole tsa moroto li ile tsa bokelloa ho tsoa ho batho ba 10 'me 100-200 ml ea sampole ka' ngoe e ile ea fetisetsoa mekotleng ea ho baka ea polyamide ka 'ngoe (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH le Co., Minden, DE) ka har'a polyamide ea 3 l e nang le sekoahelo ka har'a meropa ea polasetiki ea vinyl chloride. Li-volaete tsa Headspace tse tsoang sampole ka 'ngoe ea moroto oa likhomo li ile tsa bokelloa ka ho toba (tse ncha) kapa ka mor'a ho butsoa mochesong oa kamore ka lihora tse 24, lihora tse 72 le lihora tse 168, ke hore sampole ka 'ngoe ea moroto e ne e emela sehlopha ka seng sa lilemo.
Bakeng sa pokello ea li-volatile tsa headspace, sistimi e koetsoeng e sebelisitsoe ho potoloha molapo oa khase o sefiloeng ka khabone (100 ml min-1) ka mokotleng oa polyamide ho ea kholomong ea adsorption ka lihora tse 2.5 ka ho sebelisa pompo ea vacuum ea diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE). E le taolo, pokello ea li-headspace e entsoe ho tsoa mokotleng o se nang letho oa polyamide. Kholomo ea adsorption e entsoe ka Teflon tube (5.5 cm x 3 mm id) e nang le 35 mg ea Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) lipakeng tsa li-plug tsa ulu ea khalase. Pele e sebelisoa, kholomo e ne e hloekisoa ka 1 ml ea n-hexane e hloekisitsoeng hape (Merck, Darmstadt, DE) le 1 ml ea pentane (99.0% solvent GC grade, Sigma Aldrich). Li-volatile tse adsorbed li ile tsa tlosoa ka 400 μl ea pentane. Lipokello tsa li-headspace li ile tsa kopanngoa ebe li bolokoa ho -20°C ho fihlela li sebelisoa bakeng sa tse ling. tlhahlobo.
Likarabo tsa boitšoaro tsa An-hosting-sensor le-jang mali-extracts An-Headspace volatile extracts tse bokelletsoeng ho tsoa morotong o mocha, oa lihora tse 24, oa lihora tse 72, le oa lihora tse 168 li ile tsa hlahlojoa bakeng sa li-extracts tse volatile tse tsoang ho menoang ea Arabidopsis ho sebelisoa olfactometer ea khalase e otlolohileng [18]. Liteko li entsoe nakong ea ZT 13-15, nako e phahameng ea mosebetsi oa An oa ho batla lapeng. Arab [19]. Olfactometer ea khalase (80 cm × 9.5 cm id) e ile ea bonesoa ka khanya e khubelu ea 3 ± 1 lx ho tsoa holimo. Phallo ea moea e sefiloeng le e mongobo ea mashala (25 ± 2 °C, 65 ± 2% mongobo o amanang) e fetile tlhahlobo ea bio-assay ho 30 cm s-1. Moea o fetisoa ka letoto la li-screen tsa tšepe e sa hloekang, o etsa phallo ea laminar le sebopeho se tšoanang sa mafome. Mochini oa tampon oa meno (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), o emisitsoeng ho tloha khoeleng ea 5 cm pheletsong e shebaneng le moea ea olfactometer, e nang le liphetoho tsa stimulator metsotso e meng le e meng e 5. Bakeng sa tlhahlobo, 10 μl ea khetla ka 'ngoe ea hlooho, e hlapolotsoeng ka 1:10, e ile ea sebelisoa e le khothatso. Palo e lekanang ea pentane e ile ea sebelisoa e le taolo. Menoang e batlang moamoheli ka mong kapa e monyang mali e ile ea beoa ka har'a likhetla tsa ho lokolla ka bonngoe lihora tse 2-3 pele ho qalo ea teko. Khetla ea ho lokolla e ile ea beoa lehlakoreng la moea o theohelang la olfactometer, 'me menoang e ile ea lumelloa ho tloaelana le moea ka motsotso o le mong, ebe valve ea serurubele ea khetla e buloa ho lokolla. Ho khahloa ke kalafo kapa taolo ho ile ha hlahlojoa e le karolo ea menoang e ileng ea kopana le mohloli nakong ea metsotso e 5 ea ho lokolloa. Khetla ka 'ngoe ea khetla e feto-fetohang le taolo li ile tsa phetoa bonyane makhetlo a 30, 'me ho qoba litlamorao tsa letsatsi le le leng, palo e tšoanang ea kalafo le taolo e ile ea lekoa letsatsing le leng le le leng la liteko. Batla likarabo ho moamoheli le ea fepuoang mali Ans. Lisete tsa khetla tsa Searabia khahlanong le li ile tsa hlahlojoa ho sebelisoa ho khutlisetsoa morao ha logistic ho latela papiso ea li-pairwise bakeng sa li-odd ratios (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Karabelo ea ho tsoala ha An. Li-extracts tsa hlooho tse tsoang morotong oa khomo o mocha le o tsofetseng li hlahlobiloe ka har'a lihoko tsa Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Likopi tsa polasetiki (30 mL; Nolato Hertila) tse tletseng 20 mL ea metsi a hloekisitsoeng li fane ka substrate ea ho tsoala 'me li behiloe likhutlong tse fapaneng tsa ho tsoala, tse arohaneng ka 24 cm. Likopi tsa kalafo li ile tsa fetoloa ka 10 μl ea extract ka 'ngoe ea hlooho ka ho hlapolloa ha 1:10. Palo e lekanang ea pentane e ile ea sebelisoa ho lokisa kopi ea taolo. Likopi tsa kalafo le taolo li ile tsa fapanyetsanoa pakeng tsa teko ka 'ngoe ho ea ho taolo bakeng sa liphello tsa boemo. Tse tšehali tse leshome tse fepuoang ka mali li ile tsa lokolloa ka har'a lihoko tsa liteko ho ZT 9-11 'me mahe ka har'a likopi a ile a baloa lihora tse 24 hamorao. Foromo ea ho bala index ea ho tsoala ke: (palo ea mahe a behiloeng ka har'a kopi ea kalafo - palo ea mahe a behiloeng ka har'a kopi ea taolo) / (palo eohle ea mahe a behiloeng). Kalafo ka 'ngoe e ile ea phetoa ka makhetlo a 8.
Tlhahlobo ea ho lemoha mohlala oa khase chromatographic le electron antenna (GC-EAD) ea An.arabiensis e tšehali e entsoe joalo ka ha ho hlalositsoe pele [20]. Ka bokhutšoanyane, li-extracts tse ncha tsa headspace volatile li ile tsa aroloa ho sebelisoa Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) e nang le kholomo ea HP-5 (30 m × 0.25 mm id, botenya ba filimi ea 0.25 μm, Agilent Technologies). le moroto o tsofalang. Haedrojene e sebedisitsoe e le mohato o tsamayang ka karolelano ya phallo ya mola wa 45 cm s-1. Sampole ka nngwe (2 μl) e ile ya entwa metsotswana e 30 ka mokgwa o sa arohaneng ka mocheso wa ho kena wa 225 °C. Mocheso wa onto ya GC o ile wa hlophiswa ho tloha ho 35 °C (ho tshwara metsotso e 3) ho isa ho 300 °C (ho tshwara metsotso e 10) ho 10 °C min-1. Ka hara karohano ya metsi a GC, ho ile ha eketswa 4 psi ya naetrojene mme ya arolwa 1:1 ka hara sefapano sa Gerstel 3D/2 low dead volume (Gerstel, Mülheim, DE) pakeng tsa sesebelisoa sa ho lemoha ionization ya malakabe le EAD. Capillary ya metsi a GC bakeng sa EAD e ile ya fetiswa ka mohala wa phetisetso wa Gerstel ODP-2, o latelang mocheso wa onto ya GC hammoho le 5 °C, ka hara tube ya khalase (10 cm × 8 mm), moo e neng e kopantswe le moya o sefilweng ka khabone, o nang le mongobo (1.5 l min−1). Antena e ile ya bewa 0.5 cm ho tloha moo ho ntshang pompo. Monoang o mong le o mong o ne o lekana le o le mong, 'me bakeng sa monoang o batlang moamoheli, bonyane ho ile ha etsoa likopi tse tharo lisampoleng tsa moroto tsa lilemo tsohle.
Ho tsebahatsa metsoako e sebetsang ka har'a li-headspace tsa moroto oa likhomo o mocha le o tsofetseng ho sebelisoa GC-MS e kopantsoeng le spectrometer ea boima (GC-MS; 6890 GC le 5975 MS; Agilent Technologies) ho hlahisa likarabo tsa antenna tlhahlobong ea GC-EAD, e sebetsang ka mokhoa oa ionization ea electron impact ho 70 eV. GC e ne e hlomelitsoe ka kholomo ea capillary ea silica e kopantsoeng le HP-5MS UI (60 m × 0.25 mm ka hare bophara, botenya ba filimi ea 0.25 μm) ho sebelisoa helium e le mohato o tsamaeang ka sekhahla se tloaelehileng sa phallo ea 35 cm s-1. Sampole ea 2 μl e ile ea kenngoa ho sebelisoa litlhophiso tse tšoanang tsa injector le mocheso oa ontong joalo ka tlhahlobo ea GC-EAD. Metsoako e ile ea khetholloa ho latela nako ea eona ea ho boloka (index ea Kovát) le spectra ea boima ha e bapisoa le laeborari e ikhethileng le laeborari ea NIST14 (Agilent). Metsoako e khethiloeng e tiisitsoe ka ho kenya maemo a 'nete (Faele e Eketsehileng 1: Tafole S2). Bakeng sa ho lekanya, heptyl acetate (10 ng, bohloeki ba lik'hemik'hale ba 99.8%, Aldrich) e ile ea entoa e le tekanyetso ea kantle.
Ho lekola katleho ea motsoako oa monko oa maiketsetso o nang le metsoako e sebetsang ea bioactive e fumanoeng morotong o mocha le o tsofetseng ho hohela Ans.arabiensis e batlang moamoheli le e monyang mali, ho sebelisoa olfactometer le protocol e tšoanang le e kaholimo. Metsoako ea maiketsetso e etsisitse sebopeho le boholo ba metsoako e metsoakong e tsoakiloeng ea hlooho e nang le moroto o mocha, oa lihora tse 24, oa lihora tse 48, oa lihora tse 72, le oa lihora tse 168 (Setšoantšo sa 5D-G; Faele e Eketsehileng ea 1: Tafole ea S2). Bakeng sa tlhahlobo, sebelisa 10 μl ea motsoako o entsoeng ka botlalo oa 1:100, ka sekhahla sa tokollo se tlohang ho hoo e ka bang 140-2400 ng h-1, bakeng sa ho lekola ho hohela menoang e amohelang le e monyang mali. Kamora moo, teko e etsoa metswakong e felletseng, moo metsoako e ntšang ea metsoako e le 'ngoe ea motsoako o felletseng e tlosoang. Batla likarabo ho Ans. Motsoako oa Maarabia khahlanong le oa maiketsetso le oa ho tlosa o ile oa hlahlojoa ho sebelisoa mokhoa oa ho khutlela morao o lateloang ke papiso ea bobeli bakeng sa odd. dikarolelano (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Ho lekola hore na moroto wa kgomo o ka sebetsa e le sesupo sa sebaka seo ho sona ho dulang menwang ya malaria, moroto wa kgomo o motjha le o tsofetseng, o bokelletsweng jwalo ka ha ho hlalositswe ka hodimo, mme metsi a kenngwa ka hara dibakete tse nang le letlowa tsa 3 l (100 ml) mme a kenngwa ka hara maraba a dinotshi. (Mofuta wa BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE). Maraba a leshome a behilwe ka thoko ho dimithara tse 50 makgulong, dimithara tse 400 ho tloha motseng (Silay, Ethiopia, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) mme ho se na dikgomo, dibakeng tsa ho ikatisa le metsaneng ya kamehla. Maraba a mahlano a ile a futhumatswa ho etsisa boteng ba moamoheli, ha maraba a mahlano a ile a siuwa a sa futhumatswa. Sebaka se seng le se seng sa kalafo se potoloha bosiu bo bong le bo bong ka masiu a mahlano kaofela. Dipalo tsa menoang tse tshwerweng ka maraba a nang le moroto wa dilemo tse fapaneng di ile tsa bapiswa ho sebediswa ho logistic regression ka kabo ya beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Motsaneng o atileng haholo oa malaria haufi le toropo ea Maki, sebakeng sa Oromia, Ethiopia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Setšoantšo sa 6A). Phuputso e entsoe pakeng tsa bohareng ba Phato le bohareng ba Loetse pele ho fafatsa ka tlung selemo le selemo, hammoho le sehla se selelele sa pula. Lipara tse hlano tsa matlo (tse arohaneng ka limithara tse 20-50) tse ka ntle ho motse li khethiloe bakeng sa thuto (Setšoantšo sa 6A). Mekhoa e sebelisitsoeng ho khetha matlo e ne e le: ha hoa lumelloa liphoofolo ka tlung, ha hoa lumelloa ho pheha ka tlung (ho hula patsi kapa mashala) (bonyane nakong ea teko), le matlo a nang le baahi ba babeli feela, ba robalang ka har'a meriana e bolaeang likokoanyana. tlas'a letlooa la menoang le phekotsoeng. Tumello ea boitšoaro e fanoe ke Boto ea Tlhahlobo ea Boitšoaro ba Lipatlisiso tsa Setsi (IRB/022/2016) ea Lefapha la Saense ea Tlhaho (CNS-IRB), Univesithi ea Addis Ababa, ho latela litataiso tse thehiloeng ke Phatlalatso ea Mokhatlo oa Lefatše oa Bongaka oa Helsinki. Tumello ho tsoa ho hlooho e 'ngoe le e 'ngoe ea lelapa e fumanoe ka thuso ea basebetsi ba katoloso ea bophelo bo botle. Ts'ebetso eohle e amohetsoe ke batsamaisi ba lehae boemong ba setereke le wadi ('kebele'). Moralo oa liteko o latetse moralo oa lisekoere tsa Latin tse 2 × 2, moo metsoako ea maiketsetso le taolo li ileng tsa abeloa matlo a kopantsoeng bosiung ba pele 'me tsa fapanyetsanoa lipakeng tsa matlo bosiung bo latelang ba liteko. Ts'ebetso ena e ile ea phetoa ka makhetlo a leshome. Ho feta moo, ho hakanya ts'ebetso ea menoang matlong a khethiloeng, maraba a CDC a ile a beoa ho matha masiu a mahlano a latellanang qalong, bohareng le qetellong ea teko ea tšimo ka nako e le 'ngoe ea letsatsi.
Motsoako oa maiketsetso o nang le metsoako e tšeletseng e sebetsang 'meleng o ile oa qhaloa ka har'a heptane (97.0% solvent GC grade, Sigma Aldrich) 'me oa lokolloa ka 140 ng h-1 ho sebelisoa sesebelisoa sa ho ntša wick ea k'hothone [20]. Sesebelisoa sa ho ntša wick se ile sa lumella metsoako eohle ho lokolloa ka tekanyo e sa fetoheng ho pholletsa le teko ea lihora tse 12. Heptane e ile ea sebelisoa e le taolo. Botlolo e ile ea emisoa haufi le moo ho kenoang leraba la leseli la Centers for Disease Control and Prevention (CDC) (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Setšoantšo sa 6A). Maraba a ile a fanyehoa 0.8 - 1 m ka holimo ho mobu, haufi le leoto la bethe, 'me moithaopi a robala tlas'a letlooa la menoang le sa phekoloang 'me a sebetsoa pakeng tsa 18:00 le 06:30. Menoang e tšoeroeng ke bong le boemo ba 'mele (e sa fepuoang, e fepuoang, e ima hanyane, le e immeng [21] hamorao e ile ea hlahlojoa ka ho sebelisa tlhahlobo ea polymerase chain reaction (PCR) ho khetholla mofuta o khetholloang ka sebopeho e le A. gambiae sl. Litho tsa setsi sena [23]. Thutong ea tšimo, ho tšoasa ka leraba la matlo a kopantsoeng ho ile ha hlahlojoa ho sebelisoa mohlala oa ho lekana ka lebitso la logistic, moo ho hohelang e neng e le phetoho e itšetlehileng ka eona 'me kalafo (motsoako oa maiketsetso khahlanong le taolo) e ne e le phello e tsitsitseng (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc.). Mona, re tlaleha boleng ba χ2 le p ho tsoa tekong ea karolelano ea monyetla.
Lekola hore na e bolokehile. arabiensis e khonne ho fumana moroto, mohloli oa eona o ka sehloohong oa naetrojene, urea, ka ho fepa ka kotloloho, nakong ea lihora tse 48 tsa ho fuoa lijo matsatsi a 4 kamora liteko tsa ho fepa tsa basali tse batlang moamoheli le tse fepuoang mali (Setšoantšo sa 1A). Basali ba batlang moamoheli le ba anyang mali ba monyetse sucrose e ngata haholo ho feta lijo kapa metsi afe kapa afe (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 le F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, ka ho latellana; Setšoantšo sa 1B,C). Ho feta moo, basali ba batlang moamoheli ba jele hanyane morotong ka lihora tse 72 ha ba bapisoa le moroto ka lihora tse 168 (Setšoantšo sa 1B). Ha ba fuoa lijo tse nang le urea, basali ba batlang moamoheli ba monyetse bongata bo boholo ba urea ka 2.69 mM ha ba bapisoa le mahloriso a mang kaofela le metsi, ha ba sa khethollehe ho 10% sucrose (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Setšoantšo sa 1D). Sena se ne se fapane le karabelo ea basali ba fepuoang ka mali, bao hangata ba neng ba monya lijo tse nang le urea haholo ho feta metsi, leha e le ka tlase ho 10% ea sucrose (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; Setšoantšo sa 1).1E). Ho feta moo, ha ho bapisoa lipakeng tsa maemo a mabeli a 'mele, basali ba nang le phlebotomized ba monyetse urea e ngata ho feta basali ba batlang moamoheli maemong a tlase ka ho fetisisa, 'me basali bana ba monyetse litekanyo tse tšoanang tsa urea maemong a holimo (F(1,953) = 78.82, p < 0.0001; Setšoantšo sa 1F, G). Leha ho nooa ho tsoa lijong tse nang le urea ho bonahala ho na le litekanyetso tse ntle (Setšoantšo sa 1D, E), basali maemong ka bobeli a 'mele ba ile ba khona ho fetola bongata ba urea bo monyetseng holim'a mefuta eohle ea mahloriso a urea ka mokhoa oa log-linear (Setšoantšo sa 1F, G). ).Ka ho tšoanang, ho bonahala menoang e laola ho monyela ha eona naetrojene ka ho laola bongata ba moroto o monyelang, kaha bongata ba naetrojene morotong bo bonahala bongata ba monyollo (Setšoantšo sa 1B, C le B).
Ho lekola litlamorao tsa moroto le urea ho pholoheng ha menoang e batlang moeti le e monyang mali, tse tšehali li ile tsa fepuoa moroto oa lilemo tsohle tse 'ne (lihora tse 24, lihora tse 72, le lihora tse 168 kamora ho tlosoa) le mefuta e fapaneng ea mahloriso a urea, hammoho le metsi a hloekisitsoeng le 10% ea sucrose e sebelelitsoeng e le taolo (Setšoantšo sa 2A). Tlhahlobo ena ea ho pholoha e bontšitse hore lijo li bile le tšusumetso e kholo ho pholoheng ka kakaretso ho basali ba batlang moeti (moroto: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Setšoantšo sa 2B, C) le tse tšehali tse fepuoang mali (moroto: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Setšoantšo sa 2D,E).Litekong tsohle, basali ba fepiloeng lijo tsa moroto, urea le metsi ba bile le sekhahla se tlase haholo sa ho phela ha ba bapisoa le basali ba fepiloeng lijo tsa sucrose (Setšoantšo sa 2B-E). Basali ba batlang moamoheli ba fepiloeng moroto o mocha le o tsofetseng ba bontšitse sekhahla se fapaneng sa ho phela, moo ba fepiloeng moroto o tsofetseng oa lihora tse 72 (p = 0.016) ba nang le monyetla o tlase ka ho fetisisa oa ho phela (Setšoantšo sa 2B). Ho feta moo, basali ba batlang moamoheli ba fepiloeng 135 mM urea ba phetse nako e telele ho feta taolo ea metsi (p < 0.04) (Setšoantšo sa 2C). Ha ho bapisoa le metsi, basali ba fepiloeng ka moroto o mocha le moroto oa lihora tse 24 ba phetse nako e telele (p = 0.001 le p = 0.012, ka ho latellana; Setšoantšo sa 2D), ha basali ba fepiloeng ka moroto oa lihora tse 72 ba phetse nako e telele ho feta ba fepiloeng moroto o mokhutšoanyane o mocha oa basali le moroto oa lilemo tse 24 (p < 0.0001 le p = 0.013, ka ho latellana; Setšoantšo sa 2D). Ha ba fepiloeng 135 mM urea, basali ba fepiloeng mali ba phetse nako e telele ho feta bohle mahloriso a mang a urea le metsi (p < 0.013; Setšoantšo sa 2E).
Ho pholoha ha moamoheli le monya mali oa Anopheles arabinis e tšehali e jang moroto oa khomo le urea. Tlhahlobong ea bioassay (A), menoang e tšehali e ne e fuoa lijo tse nang le moroto oa khomo o mocha le o tsofetseng, maemo a fapaneng a urea, sucrose (10%) le metsi a hloekisitsoeng (H2O). Ho pholoha ha menoang e batlang moamoheli (B, C) le e anyang mali (D, E) ho ile ha tlalehoa lihora tse ling le tse ling tse 12 ho fihlela menoang eohle e tšehali e fepuoang ka moroto (B, D) le urea (C, E), le e laolang, Sucrose le metsi, li shoele.
Sebaka le palo ea lipotoloho tse fumanoeng tekong ea sefofane nakong ea lihora tse 24 li fapane pakeng tsa menoang e batlang moeti le e monyang mali, e bontšitseng ts'ebetso e fokolang ea ho fofa ka kakaretso (Setšoantšo sa 3). Menoang e batlang moeti e fanang ka moroto o mocha le o tsofetseng kapa sucrose le metsi e bontšitse mekhoa e fapaneng ea ho fofa (Setšoantšo sa 3), moo tse tšehali tse jang moroto o mocha li sebetsang haholoanyane mafube, ha tse fepuoang tse lilemo li 24 le tse 168 Menoang e fepuoang moroto e bontšitse mekhoa e fapaneng ea ho fofa 'me haholo-holo e ne e le ea letsatsi le letsatsi. Menoang e tšehali e fanang ka sucrose kapa moroto oa lihora tse 72 e bontšitse ts'ebetso ho pholletsa le nako ea lihora tse 24, ha tse tšehali tse fanang ka metsi li ne li sebetsa haholo nakong ea bohareng ba nako. Menoang e fepuoang ka sucrose e bontšitse maemo a holimo a ts'ebetso bosiu le hoseng haholo, ha tse jele moroto oa lilemo li 72 li bile le phokotseho e tsitsitseng ea ts'ebetso ho feta lihora tse 24 (Setšoantšo sa 3).
Tshebetso ya ho fofa ya ditsumi tse tshehadi tse anyang madi tsa Anopheles arabinis tse jang moroto wa kgomo le urea. Tekong ya sefofane sa ho fofa, menoang e tshehadi e fepuwang moroto wa kgomo o motjha le o tsofetseng, mahloriso a fapaneng a urea, sucrose (10%), le metsi a hlwekisitsweng (H2O) a ile a hokelwa matsohong a bataletseng, a potolohang ka bolokolohi (ka hodimo). Bakeng sa ditsumi tse tshehadi tse batlang moeti (ka letsohong le letshehadi) le tse anyang madi (ka letsohong le letona), sebaka sohle le palo ya difofane ka hora bakeng sa dijo ka nngwe nakong ya dihora tse 24 di ile tsa tlalehwa (lefifi: bohlooho; lesedi: bosweu). Sebaka se tloaelehileng le palo e tloaelehileng ya di-bout di bontshwa ka letsohong le letona la kerafo ya mesebetsi ya circadian. Mehala ya diphoso e emela phoso e tloaelehileng ya karolelano. Tlhahlobo ya dipalopalo bona mongolo
Ka kakaretso, mosebetsi oa ho fofa oa basali ba batlang moamoheli o latela mohlala o tšoanang le oa sebaka sa ho fofa ka nako ea lihora tse 24. Sebaka se tloaelehileng sa ho fofa se ile sa angoa haholo ke lijo tse jeoang (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), 'me basali ba batlang moamoheli ba jeoang lihora tse 72 tsa moroto ba ile ba fofa sebaka se selelele haholo ha ba bapisoa le lijo tse ling tsohle (p < 0.0001), 'me menoang e fepuoang ka sucrose e ile ea fofa nako e telele ho feta menoang e mecha (p = 0.022) le ea moroto oa lihora tse 24 (p = 0.022). Ho fapana le mokhoa oa ho fofa o hlalositsoeng ke lijo tsa moroto, basali ba batlang moamoheli ba fepuoang ka urea ba bontšitse mosebetsi oa ho fofa o sa khaotseng ka nako ea lihora tse 24, ba fihla sehlohlolong nakong ea halofo ea bobeli ea karolo e lefifi (Setšoantšo sa 3). Le hoja mekhoa ea mesebetsi e ne e tšoana, basali ba batlang moamoheli ba fepuoang urea ba ekelitse haholo sebaka se tloaelehileng sa ho fofa ho latela mahloriso a monyelitsoeng (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). Ho batla moamoheli Tse tšehali tse fepiloeng ka bongata bofe kapa bofe ba urea li fofa nako e telele ho feta tse tšehali tse fepiloeng ka metsi kapa sucrose (p < 0.03).
Ka kakaretso ts'ebetso ea ho fofa ea menoang e monyang mali e ne e tsitsitse 'me e tšoarella lihora tse 24 lijong tsohle, ka ts'ebetso e eketsehileng ea moroto nakong ea halofo ea bobeli ea nako e lefifi bakeng sa basali ba fepuoang ka metsi hammoho le ho basali ba fepuoang ba sa tsoa fepuoa le ba lilemo li 24 (setšoantšo sa 3). Leha lijo tsa moroto li amme haholo sebaka se tloaelehileng sa ho fofa ho basali ba fepuoang mali (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), lijo tsa urea ha lia ka tsa etsa joalo (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24). ka moroto o mong le lijo tse laoloang (tse ncha, p = 0.0091; lihora tse 72, p = 0.0022; lihora tse 168, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
Litlamorao tsa moroto le phepo ea urea ho liparamente tsa ho ikatisa li ile tsa hlahlojoa litekong tsa ho behela mahe (Setšoantšo sa 4A) 'me tsa hlahlojoa ho latela palo ea mahe a behetsoeng ke e tšehali ka 'ngoe, boholo ba lehe, le li-larvae tse sa tsoa qhotsoa tsa pele. Palo ea mahe a behetsoeng. Li-Arabia tse tšehali tse fepuoang ka moroto li ile tsa fapana ho latela lijo (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; Setšoantšo sa 4B). Li-Abraha tse tšehali li ile tsa fepuoa ka moroto oa lihora tse 24, lijo tsa mali li ile tsa beha mahe a mangata haholo ho feta tse tšehali tse fepuoang lijo tse ling tsa moroto 'me li ne li tšoana le tse fepuoang ka sucrose (Setšoantšo sa 4B). Ka ho tšoanang, boholo ba mahe a behetsoeng ke li-abraha tse tšehali tse fepuoang ka moroto bo ile ba fapana ho latela lijo (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), ka moroto oa lihora tse 24 le li-abraha tse fepuoang ka sucrose li ile tsa beha mahe a maholo haholo ho feta li-abraha tse fepuoang ka metsi, ha mahe a li-abraha tse tšehali tse fepuoang ka moroto oa lihora tse 168 a ne a le manyane haholo (Setšoantšo sa 4C). Ho phaella moo, lijo tsa moroto li ile tsa ama boholo ba li-larval haholo (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), ka diboko tse kgolo haholo tse tswang maheng a behetsweng ke tse tshehadi tse fepilweng ka moroto tse dilemo di 24 le 72 ho feta maheng a behetsweng mahe diboko. Diboko tse tshehadi tse fepilweng ka metsi le tse fepilweng ka moroto dihora tse 168 (Setshwantsho sa 4D).
Tshebetso ya ho ikatisa ya Anopheles arabinis e tshehadi e jang moroto wa kgomo le urea. Menoang e tshehadi e fepilweng ka madi e fepilwe dijo tse nang le moroto wa kgomo o motjha le o tsofetseng, maemo a fapaneng a urea, sucrose (10%), le metsi a hlwekisitsweng (H2O) ka dihora tse 48 pele e bewa ka hara di-bioassay le ho fumana di-substrate tse behelang mahe dihora tse 48 (A). Nomoro ya lehe (B, E), boholo ba lehe (C, F) le boholo ba diboko (D, G) di amme haholo ke dijo tse fanweng (moroto wa kgomo: BD; urea: EG). Mekgwa ya paramethara ka nngwe e lekantsweng ka ho sebedisa mabitso a ditlhaku tse fapaneng e ne e fapane haholo ho e mong le e mong (ANOVA ya tsela e le nngwe e sebedisa tlhahlobo ya post hoc ya Tukey; p < 0.05). Di-error bar di emela phoso e tloaelehileng ya karolelano
Jwalo ka karolo e kgolo ya naetrojene ya moroto, urea, ha e fanwa e le dijo ho basadi ba fepuwang ka madi, e amme haholo dipalopalo tsa ho ikatisa dithutong tsohle. Palo ya mahe a behetsweng ke basadi ba fepuwang urea, kamora dijo tsa madi, ho itshetlehile ka bongata ba urea (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), basadi ba fepuwang bongata ba urea pakeng tsa 134 µM le 1.34 mM ba behile mahe a mangata (Setshwantsho sa 4E). Basadi ba fepuwang ka bongata ba urea ba 134 µM kapa ho feta ba behela mahe a maholo ho feta basadi ba fepuwang ka metsi (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Setshwantsho sa 4F), le boholo ba diboko, le hoja ba amilwe ke bongata bo tshwanang ba urea ho bo-mme (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) e ne e fetoha haholo (Setshwantsho sa 4G).
Ho hohela ka kakaretso ho di-extract tsa moroto tse batlang moamoheli tse nang le hlooho e tetemang. Arabiensis e hlahlobilweng ka hara olfactometer ya khalase (Setshwantsho sa 5A) e amme haholo ke dilemo tsa moroto (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Setshwantsho sa 5B). Tlhahlobo ya kamora hoc e bontshitse hore monko o tetemang wa moroto ka dihora tse 24 o baka maemo a ho hohela a hodimo haholo ha o bapiswa le diphekolo tse ding tsohle (dihora tse 72: p = 0.0060, dihora tse 168: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Ntle le monko wa moroto o motjha (p = 0.13; Setshwantsho sa 5B). Le hoja ho hohela ka kakaretso menoang e monyang madi monkong wa moroto ho ne ho sa fapane haholo (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Setshwantsho sa 5C), basadi bana ba fumanwe ba hohela haholo di-extract tsa moroto tse tetemang tsa headspace ha ho bapiswa le moroto o tsofetseng wa dihora tse 72 ha ho bapiswa ho laola (p = 0.0066; Setšoantšo sa 5C).
Likarabo tsa boitšoaro ho monko oa tlhaho le oa maiketsetso oa moroto oa khomo ha ho batloa moamoheli le ea fepuoang ka mali Anopheles arabianus. Sekema sa khalase ea olfactometer (A). Ho hohela li-extracts tse feto-fetohang tsa headspace ho tsoa morotong oa khomo o mocha le o tsofetseng ho ea ho moamoheli (B) le menoang e monyang mali (C). Fumana karabelo ea tentecle ea Lord An. Li-extracts tsa Headspace tse arotsoeng ho moroto oa khomo o mocha (D), oa lihora tse 24 (E), oa lihora tse 72 (F), le oa lihora tse 168 (G) lia bontšoa. Metsotso ea ho lemoha antenna ea elektrone (EAD) e bontša liphetoho tsa motlakase karabelong ea metsoako e sebetsang sebakeng sa hlooho e nkiloeng ho chromatograph ea khase 'me e lemohuoa ke sesebelisoa sa ho lemoha ionization ea malakabe (FID). Bar ea sekala e emela amplitude ea karabelo (mV) khahlanong le nako ea ho boloka (s). Thepa le sekhahla sa ho lokolloa (µg h-1) ea metsoako e sebetsang ka baeloji lia bontšoa. Asterisk e le 'ngoe (*) e bontša karabelo e tsitsitseng ea amplitude e tlase. Li-asterisk tse peli (**) li bontša likarabo tse ke keng tsa ikatisa hape. Fumana moamoheli (H) le e monyang mali (I) An.arabiensis e na le litšusumetso tse fapaneng metswakong ea maiketsetso ea monko oa moroto oa khomo o mocha le o tsofetseng. Litekanyo tse tloaelehileng tsa menoang e hoheloang ke mabitso a litlhaku tse fapaneng li ne li fapane haholo (ANOVA ea tsela e le 'ngoe e sebelisa tlhahlobo ea Tukey ea post hoc; p < 0.05). Li-bar tsa liphoso li emela phoso e tloaelehileng ea sekala.
Ann.arabiensis e tšehali, lihora tse 72 le lihora tse 120 kamora lijo tsa mali, nakong ea ho tsoala, ha ho khetho e bontšitsoeng bakeng sa li-extracts tse nang le headspace volatile tse tsoang morotong oa khomo o mocha le o tsofetseng ha li bapisoa le li-control tsa pentane (χ2 = 3.07, p > 0.05; Faele e eketsehileng 1: Setšoantšo sa S1).
Bakeng sa Ann.arabiensis ea basali, litlhahlobo tsa GC-EAD le GC-MS li fumane metsoako e robeli, e tšeletseng, e meraro le e meraro e sebetsang ka lintho tse phelang (Setšoantšo sa 5D-G). Leha ho bonoe liphapang palong ea metsoako e hlahisitseng likarabo tsa electrophysiological, boholo ba metsoako ena e ne e le teng ho headspace volatile extract e 'ngoe le e 'ngoe e bokelletsoeng ho tsoa morotong o mocha le o tsofetseng. Ka hona, bakeng sa qotso e 'ngoe le e 'ngoe, ke metsoako feela e hlahisitseng karabelo ea 'mele ho tsoa ho li-antennae tsa basali tse kaholimo ho moeli e kenyellelitsoeng litlhahlobong tse ling.
Sekhahla sa ho lokolloa ha metsoako e sebetsang hantle ka har'a pokello ea sebaka sa hlooho se eketsehile ho tloha ho 29 µg h-1 morotong o mocha ho isa ho 242 µg h-1 morotong o tsofetseng oa lihora tse 168, haholo-holo ka lebaka la keketseho ea p-cresol le m-formaldehyde Phenol hammoho le phenol. Ka lehlakoreng le leng, sekhahla sa ho lokolloa ha metsoako e meng, joalo ka 2-cyclohexen-1-one le decanal, se fokotsehile ka lilemo tse ntseng li eketseha tsa moroto, tse amanang le phokotseho e bonoang ea matla a lets'oao (bongata) ho chromatogram (Setšoantšo sa 5D)-G ka lehlakoreng le letšehali) le likarabo tsa 'mele ho metsoako ena (Setšoantšo sa 5D-G ka lehlakoreng le letona).
Ka kakaretso, motsoako oa maiketsetso o ne o e-na le karolelano e tšoanang ea tlhaho ea metsoako e sebetsang e fumanoeng li-extracts tse feto-fetohang tsa lihlooho tsa moroto tse ncha le tse tsofetseng (Setšoantšo sa 5D–G) 'me ha ho bonahale eka li hlahisa khahleho e kholo ho batleng moamoheli (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Setšoantšo sa 5H) kapa menoang e monyang mali (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; Setšoantšo sa 5I). Leha ho le joalo, papiso ea kamora hoc ka bobeli lipakeng tsa mekhoa ea phekolo e bontšitse hore menoang e batlang moamoheli e ne e hohela haholo motsoako oa maiketsetso oa moroto oa lilemo tse 24 ha o bapisoa le taolo ea pentane (p = 0.0086; Setšoantšo sa 5H).
Ho lekola karolo ea likarolo ka bonngoe metswakong ea maiketsetso ea moroto oa lihora tse 24, metsoako e tšeletseng ea ho tlosa e ile ea hlahlojoa khahlanong le metsoako e felletseng tekong ea Y-tube, moo metsoako ka bonngoe e ileng ea tlosoa. Bakeng sa menoang e batlang moamoheli, ho ntša metsoako ka bonngoe motswakong o felletseng ho bile le phello e kholo likarabong tsa boitšoaro (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; Faele e eketsehileng 1: Setšoantšo S2A), metsoako eohle ea ho tlosa e ne e khahla ho feta E nyane ho feta e tsoakiloeng ka botlalo. Ka lehlakoreng le leng, ho tlosoa ha metsoako ka bonngoe motswakong o entsoeng ka botlalo ha hoa ka ha ama likarabo tsa boitšoaro tsa menoang e monyang mali (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), ntle le decanal, e ileng ea fella ka maemo a tlase ha ho bapisoa le motsoako o felletseng. Ho hohela (p = 0.022; Faele e Eketsehileng 1: Setšoantšo S2B).
Motsaneng o atileng haholo oa malaria Ethiopia, katleho ea motsoako oa maiketsetso oa moroto oa khomo oa lihora tse 24 ho hoheleng menoang tlas'a maemo a masimo e ile ea hlahlojoa ka masiu a leshome (Setšoantšo sa 6A). Ho ile ha tšoaroa menoang e 4,861 'me ea fumanoa, eo 45.7% ea eona e neng e le Anthropus.gambiae sl, 18.9% e ne e le Anopheles pharoensis 'me 35.4% e ne e le Culex spp. (Faele e Eketsehileng 1: Tafole ea S1). Anopheles arabinis ke setho se le seng feela sa mofuta oa An.Gambian specific complex se khetholloang ka tlhahlobo ea PCR. Ka karolelano, menoang e 320 e ile ea tšoaroa bosiu ka bong, 'me ka nako eo maraba a nang le lithapo tsa motsoako oa maiketsetso a ile a tšoara menoang e mengata ho feta maraba a kopantsoeng ntle le motsoako (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). Maraba a sa tšoasoang a ile a beoa bosiung bo bong le bo bong ba taolo qalong, bohareng le qetellong ea teko. Palo e tšoanang ea menoang e ile ea tšoaroa para ka 'ngoe. ea maraba, e bontšang hore ha ho na leeme pakeng tsa matlo (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) le hore ha ho na phokotseho ea baahi nakong ea thuto. Ha ho bapisoa le maraba a taolo, palo ea menoang e tšoasitsoeng marabeng a nang le motsoako oa maiketsetso e eketsehile haholo: ho batla moamoheli (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), ho fepuoa mali ha morao tjena (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) le boimana (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; Faele e eketsehileng ea 1: Tafole ea S1). Sena se boetse se bontšoa palong eohle ea menoang e tšoasitsoeng: ho batla moamoheli > ho monya mali > moimana > moimana ea seng a le moimana > e motona.
Tlhahlobo ea tšimo ea katleho ea motsoako oa moroto oa khomo oa maiketsetso oa lihora tse 24. Liteko tsa tšimo li entsoe ka boroa-bohareng ba Ethiopia ('mapa), haufi le toropo ea Maki (kenya), ho sebelisoa leraba le bobebe la Centers for Disease Control (CDC) (ka ho le letona) matlong a kopantsoeng, ka moralo oa sekwere sa Latin (setšoantšo sa moeeng) (A). Li-phototrap tsa CDC tse entsoeng ka monko o monate li hohela le ho tšoara Anopheles arabesques tse tšehali (B), empa eseng Anopheles farroes (C), ka tsela e fapaneng, phello e itšetlehileng ka boemo ba 'mele. Ho phaella moo, maraba ana a tšoere palo e eketsehileng haholo ea menoang ea Culex e amohelang. (D) Ha e bapisoa le taolo. Li-barrel tse ka letsohong le letšehali li emela index e tloaelehileng ea khetho ea menoang e tšoasitsoeng ka lipara tsa leraba le nkhang hamonate (e tala) le maraba a taolo (a bulehileng) (N = 10), ha li-barrel tse ka letsohong le letona li emela index e tloaelehileng ea khetho ka lipara tsa maraba a taolo (a bulehileng; N = 5). ). Li-asterisk li bontša maemo a bohlokoa ba lipalo-palo (*p = 0.01 le ***p < 0.0001)
Mefuta ena e meraro e ile ea tšoaroa ka tsela e fapaneng marabeng a nang le metsoako ea maiketsetso. Ho batla moamoheli (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), ho fepa mali (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) le boimana (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) a .arabiensis o ne a tšoasitsoe lerabeng a lokolla motsoako oa maiketsetso (Setšoantšo sa 6B), ha bongata ba An bo ne bo sa fapane. Pharoensis maemong a fapaneng a 'mele bo fumanoe (Setšoantšo sa 6C). Bakeng sa Culex, ke keketseho e kholo feela palong ea menoang e batlang beng ba eona e fumanoeng marabeng a tšoasitsoeng ka motsoako oa maiketsetso (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; Setšoantšo sa 6D), ha se bapisoa le marabeng a taolo.
Maraba a ho tšoasa litlhapi a fumanehang ka ntle ho libaka tse ka bang teng pakeng tsa libaka tsa ho ikatisa le metse ea mahaeng Ethiopia a ile a sebelisoa ho lekola hore na menoang ea malaria e sebelisa monko oa moroto oa khomo e le letšoao la sebaka seo motho a lulang ho sona. Ha ho se na matšoao a moamoheli, mocheso, le haeba ho na le monko oa moroto oa khomo kapa che, ha ho menoang e ileng ea tšoaroa (Faele e eketsehileng ea 1: Setšoantšo sa S3). Leha ho le joalo, ha ho na le mocheso o phahameng le monko oa moroto oa khomo, menoang ea malaria e tšehali e ile ea hoheloa le ho tšoaroa, leha e le ka bongata bo bonyenyane, ho sa tsotelehe lilemo tsa moroto (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Faele e eketsehileng ea 1: Setšoantšo sa S3). Ka lehlakoreng le leng, taolo ea metsi ha ea ka ea tšoara menoang ea malaria mochesong o phahameng (Faele e Eketsehileng ea 1: Setšoantšo sa S3).
Menoang ea malaria e fumana le ho aba metsoako e nang le naetrojene ka ho fepa moroto oa khomo ka mokhoa o lefelloang (ke hore, matangoana) ho ntlafatsa litšobotsi tsa nalane ea bophelo, tse tšoanang le likokoanyana tse ling [2, 4, 24, 25, 26]. Moroto oa khomo ke mohloli o fumanehang habonolo o ka nchafatsoang o amanang haufi-ufi le libaka tsa phomolo bakeng sa li-vector tsa malaria, joalo ka likhomo le limela tse telele haufi le matlo a mahaeng le libaka tsa ho tsoala. Menoang e tšehali e fumana mohloli ona ka monko 'me e khona ho laola ho monngoa ha metsoako ea naetrojene morotong, ho kenyeletsoa urea, karolo e kholo ea naetrojene morotong [15, 16]. Ho latela boemo ba 'mele ba monoang oa mosali, limatlafatsi morotong li abetsoe ho ntlafatsa ts'ebetso ea ho fofa le ho phela ha menoang e tšehali e batlang moamoheli, hammoho le litšobotsi tsa ho phela le tsa ho ikatisa tsa batho ba fepuoang mali nakong ea potoloho ea pele ea gonadotropic. Ka hona, ho kopanya moroto ho bapala karolo ea bohlokoa ea phepo bakeng sa li-vector tsa malaria tse koetsoeng joalo ka batho ba baholo ba sa fepehang hantle [8], kaha ho fa menoang e tšehali bokhoni ba ho fumana metsoako ea bohlokoa ea naetrojene ka ho kopanela ho fepeng ka kotsi e tlase. Phuputso ena e na le litlamorao tse kholo tsa seoa, ha basali ba eketsa tsa bona tebello ea bophelo, mosebetsi le tlhahiso ea ho ikatisa, tseo kaofela li amang bokhoni ba vector. Ho feta moo, boitšoaro bona e ka ba sepheo sa mananeo a tsamaiso ea vector nakong e tlang.